CN1304988A - 贻贝油及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种贻贝油,它具有预防和治疗关节炎的活性;本发明还公开了该贻贝油的制备方法及该贻贝油作为活性成分在制备预防和治疗关节炎药物方面的用途。
Description
本发明涉及一种具有预防和治疗关节炎活性的贻贝油、贻贝油的制备方法以及贻贝油在制备预防、治疗关节炎保健食品或药品方面的用途。
贻贝是贻贝属Mytilidae的贝类动物，俗称海红、淡菜，它包括紫贻贝、翡翠贻贝、灰凹贻贝、厚壳贻贝等多种贻贝动物。贻贝除含有烟酸、维生素B2等成分。祖国医学记载，贻贝有滋阴、补肾、调经、益经血等功能。用于治疗高血压、眩晕等。也有治疗老年头晕、阴虚、去胸中烦闷、降丹石毒等记载。现代研究对贻贝的研究报道也很多。如余振良等研究发现紫贻贝的水提物对大鼠离体子宫有收缩作用，对平滑肌有疏松作用(见《中国海洋药物》1994 13(3)P15-19)；刘赛等研究发现贻贝乙醇提物对麻醉大鼠具有降压和抗心律失常效果(见《海洋药物》1985 4(2)P22-25；1983 3(2)P95)，此外，还有报道从贻贝中获得富硒提取物(见《营养学报》1998 20(1)P68-71)；文献对贻贝多活素的活性有许多报道，如改善微循环、抑制主动脉内膜粥样斑块和对心肌缺血有保护作用，(《青岛医学学院报》1997 33(2)P125-126)，尽管如此，但却没有发现有关贻贝油的报道。本发明人在对贻贝属动物的研究中发现，从贻贝中提取的油状物具有预防和治疗关节炎的活性，从而完成了本发明。
本发明的目的之一是提供一种具有治疗和预防关节炎活性的贻贝油。
本发明的目的之二是提供贻贝油的制备方法。
本发明的目的之三是提供贻贝油在制备预防、治疗关节炎保健食品或药品方面的用途。
贻贝油是从贻贝属海洋动物中提取的一种天然提取物，为棕红色的油状液体，易溶于有机溶剂如氯仿、丙酮，但不溶于水；其中不饱和脂肪酸含量为20％-80％(重量)；碘价范围为100/100g油-300/100g油；不皂化合物含量0-1％(重量)。
贻贝油可以采用不同提取方法从贻贝属动物肉中提取获得。其中提取贻贝油的方法包括水提法、有机溶剂提取法、二氧化碳超临界提取法，优选二氧化碳超临界提取法。当用水提法时，按照下列步骤进行：用碱水煎煮贻贝肉0.5-1小时，加5％的氯化钠溶液，继续加热10-20min，静置1小时，使油层分离，真空抽取油层，通氮8000rpm离心，取油层即得。
当选用有机溶剂提取法时，可以选用氯仿、丙酮或二者混合物，优选丙酮，加热回流、提取2-5次，优选3次，每次0.5-1.5小时，用有机溶剂回流提取后，取上清液脱色、过滤、回收有机溶剂，即得贻贝油。
当选用二氧化碳超临界提取法时，条件一般为：压力15-35MP，温度30-55℃，提取时间2-20小时，二氧化碳的流量为1-10L/Kg贻贝·小时。优选为压力20-30MP，温度35-50℃，提取时间5-8小时，二氧化碳的流量为2-6L/Kg贻贝·小时，萃取物通氮，8000rpm离心。取油层即得。
本发明提取物从贻贝属海洋动物肉中提取获得，主要从紫贻贝、翡翠贻贝、灰凹贻贝、厚壳贻贝的贝肉中提取得到。
本发明贻贝油具有预防、治疗关节炎及其它炎症的作用；与治疗关节炎的深海鱼油对相比，本发明贻贝油治疗关节炎的效果更加显著，且对人体没有毒副作用。
本发明贻贝油具有预防、治疗关节炎的活性，可将其单独或与其它药物共同作为活性成分制成预防、治疗关节炎的保健食品或药品。
这些保健食品或药物可以选择性的含有常用赋形剂，并采用常规的制剂制备方法将其制成各种制剂，优选胶囊、片剂或滴丸。
以下通过实施例和实验例更加详细的说明本发明贻贝油。
实施例1
水提法制备贻贝油
称量厚壳贻贝肉10公斤，将其加入盛有15公斤，PH=8.5-9.5，温度在95-100℃水煮罐中，迅速打开排气阀排空气，并通氮。保持水微沸，提取30min后，加入5％的氯化钠溶液，继续加热10min，静置1小时，使油层分离，真空抽取油层，通氮，8000rpm离心，取油层得到贻贝油625克
实施例2
有机溶剂法制备贻贝油
称取紫贻贝肉1公斤，粉碎，加入3L丙酮，回流1小时，取上清夜过滤，共3次，合并滤液，加入1％的活性炭，过滤，脱色、浓缩脱水，得贻贝油72克。
实施例3
二氧化碳超临界萃取法制备贻贝油
取翡翠贻贝肉7公斤，粉碎、加入到10L二氧化碳超临界萃取釜中，萃取压力30MP，温度50℃，提取时间8小时，二氧化碳流量5L/Kg贻贝·小时，萃取物通氮8000rpm离心，取油层，得贻贝油342克。
实施例4
贻贝油胶丸的制备
明胶液的制备
明胶100g，甘油30g和水130g。取明胶加入适量的水使其吸水膨胀。另将甘油及余下的水置煮胶锅中加热至70～80℃，混合均匀，加入膨胀的明胶搅拌，熔融，保温1-2小时，静置，使泡沫上浮，刮去上浮的泡沫，以洁净白布过滤，混匀，保温待用；配成胶液的粘度一般为2.8～3.2度；
药液油的制备
称取贻贝油1000g与维生素E10g充分搅均，备用；
压制软胶囊
将已制好的明胶甘油和贻贝油装入自动旋转扎囊机中，温度控制在40-50℃，压制出每胶囊中含有100mg药液油的软胶囊。
实验例
贻贝油对大鼠佐剂性关节炎的预防和治疗作用。
实验样品：
A组：实施例2所制备的贻贝油，山东绿叶制药股份有限公司提供。
B组：实施例3所制备的贻贝油，山东绿叶制药股份有限公司提供。
C组：深海鱼油，批号：980511，山东鸿洋神集团总公司生产。
D组：吲哚美辛；批号：980511，芜湖长江药业有限公司生产。
E组：空白对照组。
实验动物：Wistar雄性大鼠，体重150克左右
给药方式：灌胃给药，贻贝油和深海鱼油每日的剂量为：400mg/Kg，吲哚美辛的每日剂量为3mg/Kg。
(一)、贻贝油对大鼠佐剂性关节炎的预防作用：
健康雄性大鼠50只，体重150克左右，随几均分为5组。适应性饲养3天后用于试验。每动物应用游标卡尺测定左右后肢踝关节处固定部位的厚度(mm)作为正常值，而后每动物左后肢足跖部位皮下注射佐剂0.1ml/只，其后每2天重复以上测定一次，共观察18天。试验期间每周记录动物体重一次。实验第8天始，5组动物分别灌胃A组、B组、C组、D组以及空白对照组，每天1次，连续7天。试验结果见表1,2,3,4,5,6。
表1 大鼠佐剂性关节炎左后肢(注射侧)踝关节炎症情况
| 组别 | 左后肢踝关节肿胀度(mm,X±SD) | ||||||||
| 正常 | 致 炎2d | 4d | 6d | 8d | 10d | 12d | 14d | 16d | |
| A | 4.08±0.26 | 6.56±0.36 | 6.80±0.18 | 6.90±0.71 | 5.75±1.09* | 5.60※±0.35* | 5.58±0.33* | 5.77±0.26* | 5.30±0.31* |
| B | 4.12±0.44 | 6.28±0.33 | 6.60±0.42 | 6.42±0.21 | 5.05±0.29* | 5.94±0.64* | 5.63±0.67* | 5.62±0.48* | 4.83±0.19* |
| C | 3.88±0.16 | 6.24±0.64 | 6.13±0.63 | 6.07±0.36 | 5.33±0.60* | 5.31±0.19* | 5.40±0.51* | 5.60±0.71* | 5.42±0.37* |
| D | 3.94±0.32 | 6.78±0.76 | 7.08±0.29 | 6.80±0.24 | 4.90±0.41* | 5.10±0.16* | 5.08±0.61* | 4.37±0.90* | 4.21±0.30* |
| E | 3.98±0.11 | 6.61±0.66 | 6.85±0.34 | 7.00±0.16 | 6.96±0.46 | 7.03±0.71 | 7.40±0.44 | 6.90±0.91 | 6.10±0.42 |
与组E(对照组)比较*P＜0.01
表2：大鼠左后肢肿胀增加程度(服药后)
| 组别 | 左后肢肿胀增加度(％) | 平均度 | 肿胀抑制(％) | |||
| 药后1d | 3d | 5d | 7d | |||
| A | 41％ | 37％ | 37％ | 41％ | 39％ | 50％ |
| B | 22％ | 44％ | 37％ | 36％ | 35％ | 55％ |
| C | 37％ | 32％ | 39％ | 44％ | 38％ | 51％ |
| D | 24％ | 29％ | 29％ | 11％ | 23％ | 71％ |
| E | 75％ | 77％ | 86％ | 73％ | 78％ | - |
表3：大鼠佐剂性关节炎左后肢(未注射侧)踝关节炎症情况
| 组别 | 左后肢踝关节肿胀度(mm,-x±sd) | ||||||||
| 正常 | 2d | 4d | 6d | 8d | 10d | 12d | 14d | 16d | |
| A | 4.0±0.26 | 4.0±0.22 | 4.18±0.26 | 4.32±0.14 | 4.07±0.15 | 3.92±0.18* | 4.75±0.15* | 4.60±0.35* | 4.60±0.21* |
| B | 4.12±0.44 | 4.12±0.36 | 4.08±0.12 | 4.00±0.23 | 3.98±0.18* | 4.40±0.86* | 5.06±0.65* | 5.36±0.53* | 5.13±0.62* |
| C | 3.88±0.16 | 3.91±0.17 | 4.1±0.15 | 4.07±0.12 | 4.30±0.18 | 3.67±0.12 | 4.90±0.17* | 4.60±0.24* | 4.51±0.37* |
| D | 3.94±0.32 | 3.96±0.11 | 3.95±0.13 | 4.06±0.16 | 4.13±0.20 | 3.97±0.29* | 4.04±0.32* | 3.99±0.17* | 4.00±0.31* |
| E | 3.98±0.11 | 3.96±0.17 | 4.05±0.13 | 4.03±0.17 | 4.20±0.16 | 4.33±0.25 | 5.1±0.18 | 5.10±0.31 | 4.85±0.35 |
与E组(对照组)比较P＜0.01
表4：大鼠服药后右后肢肿胀情况
| 组别 | 左后肢肿胀增加率(％) | 平均数 | 肿胀抑制(％) | |||
| 药后1d | 3d | 5d | 7d | |||
| A | ---- | ---- | 16％ | 1.3％ | 7.2％ | 60％ |
| B | ---- | 7％ | 23％ | 30％ | 15.0％ | 17％ |
| C | 11％ | 20％ | 28％ | 18％ | 18.8％ | 0 |
| D | 5％ | 1％ | 2％ | 1％ | 2.2％ | 88％ |
| E | 6％ | 9％ | 29％ | 28％ | 18.0％ | ---- |
表5：对佐剂性关节炎大鼠体重的影响
| 组别 | 体重(克，-x±sd) | ||
| 正常 | 实验第8d | 第15d | |
| A | 154±21 | 165±21 | 180±36 |
| B | 152±15 | 159±18 | 174±17 |
| C | 156±17 | 163±19 | 172±23 |
| D | 156±18 | 176±12 | 189±25 |
| E | 154±15 | 163±29 | 170±29 |
组间比较无显著性差异(p＞0.05)
表6：实验第14天佐剂性关节炎大鼠双前肢炎症发生率
| 组别 | 动物数 | 双前肢出现炎症反应动物数 |
| A | 10 | 6 (60％) |
| B | 10 | 6 (60％) |
| C | 10 | 8 (80％) |
| D | 10 | 2 (20％) |
| E | 10 | 9 (90％) |
(二)ETA对大鼠佐剂性多发性关节炎的治疗作用
健康雄性大鼠50只，体重150克左右，动物分组、左后足注射佐剂、实验中观测动物肢体肿胀情况以及体重变化等均同上述实验。为观测药物对多发性关节炎的治疗作用，自实验第19天开始分别给5组动物灌胃A组、B组、C组、D组以及空白对照组，每日一次，连续七天。实验过程中，动物左后足(注佐剂侧)以及右后足、双前肢均有程度不同的炎性反应，但耳廓及尾巴未见有结节性炎症反应。结果见表7、8、9、10。
表7：关节炎大鼠左足在药后肿胀情况
| 组别 | 肿胀增加率(％) | 平均肿胀率(％) | 肿胀抑制率 | |||
| 药后2d | 4d | 6d | 8d | |||
| A | 19.1 | 19.6 | 24.2 | 25.0 | 22.0 | 51.0 |
| B | 27.1 | 26.2 | 24.6 | 31.0 | 27.0 | 39.4 |
| C | 27.5 | 31.7 | 35.0 | 42.5 | 34.2 | 23.8 |
| D | 28.2 | 20.6 | 19.1 | 20.1 | 22.0 | 51.0 |
| E | 37.7 | 45.6 | 50.8 | 45.6 | 44.9 | ---- |
表8：关节炎大鼠右足在药后肿胀情况
| 组别 | 肿胀增加率(％) | 平均肿胀率(％) | 肿胀抑制率(％) | |||
| 药后2d | 4d | 6d | 8d | |||
| A | 14.7 | 8.3 | 6.6 | 1.5 | 7.8 | 69.9 |
| B | 19.3 | 18.3 | 13.0 | 10.5 | 15.3 | 40.9 |
| C | 22.5 | 20.0 | 17.5 | 19.2 | 19.8 | 23.6 |
| D | 17.2 | 2.3 | 2.0 | 5.1 | 6.6 | 74.5 |
| E | 27.0 | 26.5 | 24.5 | 25.6 | 25.9 | ---- |
表9关节炎大鼠双前足继发性炎症结果
| 组别 | 双前足炎症(x-±sd) | ||
| 药前(实验19d) | 药后(实验23d) | 药后(实验8d) | |
| A | 1.2±0.4 | 1.4±0.4 | 0.9±0.3* |
| B | 1.3±0.5 | 1.6±0.5 | 1.1±0.5* |
| C | 1.3±0.5 | 1.5±0.3 | 1.5±0.5 |
| D | 1.1±0.3 | 0.8±0.5* | 0.4±0.4* |
| E | 1.3±0.4 | 1.8±0.6 | 1.8±0.4 |
*与E组(对照组)比较P＜0.01
表10：ETA对关节炎大鼠体重的影响
组间比较无显著性差并(P＞0.05)
| 组别 | 体重(克，xs±d) | ||||
| 实验前 | 实验第8d | 15d | 22d | 29d | |
| A | 153±24 | 164±21 | 184±30 | 192±23 | 209±31 |
| B | 156±17 | 166±15 | 178±10 | 186±17 | 196±26 |
| C | 156±12 | 169±19 | 177±18 | 189±31 | 193±17 |
| D | 158±18 | 163±23 | 184±21 | 199±25 | 206±37 |
| E | 154±15 | 161±29 | 171±18 | 183±17 | 191±19 |
结论：
在预防大鼠佐剂性关节炎实验中我们观察到，连续用药7d，贻贝油组对大鼠左后肢(注佐剂侧)踝关节肿胀的抑制作用；对右后肢炎症有抑制作用，而C组对右后肢炎症无明显作用，综上所述，贻贝油具有明显的预防大鼠佐剂性关节炎作用。
通过治疗大鼠佐剂性关节炎实验观察到，贻贝油对大鼠左后肢(注佐剂侧)踝关节肿胀抑制作用；对大鼠右后肢炎症及双前肢继发行炎症也具有抑制作用；综上所述，贻贝油对大鼠佐剂性关节炎呈现一定程度上的预防作用以及治疗作。
Claims (9)
1、本发明涉及贻贝属海洋动物提取物，其特征为它是一种含有不饱和脂肪酸的贻贝油。
2、根据权利要求1所述的贻贝油，其中该贻贝油中不饱和脂肪酸含量为20％-80％(重量)，不皂化合物的含量为0-1％(重量)，碘价范围为100/100g油-300/100g油。
3、根据权利要求1或2所述的贻贝油，其中贻贝属动物为紫贻贝、翡翠贻贝、灰凹贻贝、厚壳贻贝。
4、根据权利要求1、2或3所述贻贝油的制备方法，它包括下列步骤：用碱水煎煮贻贝肉0.5-1小时，加入5％的氯化钠溶液，继续加热10-20min，静置1-3小时，使油层分离，真空抽取油层，通氮，8000rpm离心，取油层即得。
5、根据权利要求1、2或3所述贻贝油的制备方法，它包括下列步骤：用丙酮回流提取贻贝油3次，每次1-2小时，取上清夜，过滤、合并滤液，脱色过滤，回收有机溶剂，即得贻贝油。
6、根据权利要求1、2或3所述贻贝油的制备方法，它包括下列步骤：把贻贝肉用二氧化碳超临界萃取法提取，提取条件为：压力15-35MP，温度30-55℃，提取时间2-20小时，二氧化碳的流量为1-10L/Kg贻贝·小时，把萃取物通氮，8000rpm离心，取油层即得。
7、根据权利要求6所述的方法，其中提取条件为：压力20-30MP，温度35-50℃，提取时间5-8小时，二氧化碳的流量为2-6L/Kg贻贝·小时。
8、根据上述任一权利要求所述贻贝油其特征为该贻贝油在制备预防、治疗关节炎保健食品或药品方面的用途。
9、根据权利要求8所述的用途，其中保健食品或药品剂型为片剂、胶囊、滴丸。
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|---|---|---|---|
| CN00108060A CN1304988A (zh) | 2000-06-09 | 2000-06-09 | 贻贝油及其制备方法和用途 |
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Cited By (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN101641089B (zh) * | 2006-12-20 | 2013-06-12 | 新西兰适华利营养有限公司 | 提取物 |
| CN108477539A (zh) * | 2018-01-25 | 2018-09-04 | 山东维尼莱生物科技股份有限公司 | 一种贻贝续断褐藻保健品及其制备方法 |
| US10376550B2 (en) * | 2007-12-12 | 2019-08-13 | Dacy Tech Pty Ltd. | Nutraceutical composition and methods of use |
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2000
- 2000-06-09 CN CN00108060A patent/CN1304988A/zh active Pending
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| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |