CN1304490A - 色谱定量测定装置、色谱定量测定方法及其使用的色谱试验片 - Google Patents

Abstract

可以定量地准确测定液体试样中含有的分析对象物的浓度。包括色谱试验片(10)和显色程度测定手段(11),色谱试验片具有多个反应区域(6A,6B),该反应区域上保持有能够与上述分析对象物发生特异性反应并显色的捕集试剂,显色程度测定手段能够对上述多个反应区域中至少2个以上反应区域的显色程度进行定量的数值化测定。上述显色程度测定手段具有对通过上述捕集试剂与上述分析对象物发生反应显色的上述显色程度进行光学测定和图象测定中至少一种测定的功能。用演算处理装置(12)对该测定结果进行演算处理,可以计算出分析对象物的数值化浓度。

Description

色谱定量测定装置、色谱定量测定方法及其使用的色谱试验片

技术区域

本发明涉及利用抗原抗体反应定量测定被测物质的色谱定量测定装置、其测定方法及其使用的色谱试验片。

背景技术

以前，作为对被测物质的液体试样进行化学实验或临床实验的装置，一直广泛使用利用抗原抗体反应的免疫色谱法进行测定。而且，以前使用免疫色谱试验片进行的测定是半定量方法。以下对以前的这种测定方法的一个实例进行说明。以前的免疫色谱试验片的结构的平面图如图6所示。在图6中，以前的免疫色谱试验片包括试样添加层43、标识试剂保持层44、反应层42和吸水层45。液体试样添加到试样添加层43中。液体试样可以在这些层中移动。标识试剂保持层保持有标识试剂，标识试剂被液体试样浸透后可以移动。反应层42固定有捕集试剂，捕集试剂具有与流过的分析对象物特异性结合的功能。该反应层42具有多条反应区域46C，捕集试剂固定部位排列成一定数量的条状。吸水层45具有吸收流过的试样的功能。

该免疫色谱试验片称为反应层载体。液体试样添加到反应层载体上，放置一定时间。通过考察一定时间后出现的显色反应，判断有无被测物质。也就是说，将液体试样添加到试样添加层43中，液体试样浸透试样添加层43，到达标识试剂保持层44。标识试剂在标识试剂保持层44中被液体试样浸透溶解，同时向反应层42浸透。在这一过程中，液体试样中的分析对象物与标识试剂结合，生成结合体。该结合体在反应层42的条状反应区域46C与捕集试剂固定部位的捕集试剂发生特异性反应，引起显色反应。

液体试样中含有的分析对象物少时，标识试剂结合体的量也少，结果反应层42中的显色部分仅限于多条反应区域46C中的上游部分，显色条数少。另一方面，分析对象物多时，标识试剂结合体的量也多，显色部分达到多条反应区域46C的下游部分。

以前，利用这种原理，通过考察反应区域46C的显色条数，可以将液体试样中含有的分析对象物的浓度半定量地评价为“多”-“少”的3个等级、5个等级、10个等级等。

例如，采用上述方法进行免疫色谱分析，对其结果进行定量的手段在特开平5-5743号公报中已经公开。在这一现有技术中，独立固定的捕集试剂分散在色谱试验片反应区域的多个部位，其浓度按照从色谱试验片上游到下游的顺序逐步增加。而且，通过目测这种分散的多个部位中显色的反应区域的数目，可以对分析对象物进行半定量化测定。

另外，其他的现有技术在特开平-341989号公报中已经公开。在这一现有技术中，通过以一定量固定存在的分析对象物的抗体，捕集与固定的抗体量相应的试样中一定量的分析对象物，使分析物减少。采用这种方法可以简便地对分析对象物进行半定量。

另外，其他的现有技术在特开平-240591号公报中也有公开。在这一现有技术中，试样添加到免疫色谱试验片上，进行反应。之后，测定规定检测区域中的显色程度。也就是说，使用检测仪器测定显色部位的吸收或反射等信号，使测定结果定量化。

免疫色谱法的测定原理是利用抗原抗体反应的特异性，可以有效检测各种分析对象物。但是，上述现有的免疫色谱法测定，只能依赖于分析对象物的种类进行半定量地测定，而定量测定则是不可能的。这样，就会产生根据分析对象物的种类仅能得出半定量结果的限度。因此，期望出现一种使用免疫色谱试验片可以得到正确分析结果的定量测定装置。

使用免疫色谱试验片进行定量测定的场合，可以认为是基于其显色程度的强弱或浓淡，测定分析对象物浓度的方法。使用现有的免疫色谱试验片时，色谱的展开是在没有机械控制的状态下进行的，不能人为地控制反应速度。因此，分析对象物的浸透速度依赖于试验片自身的浸透性。因此，依赖于测定时间、试验片的种类、同一试验片上的部位、试样量以及标识试剂的量等，试验片上的显色程度会有很大的不同。另外，反应区域限定于特定的场所，测量这种限定的特定反应区域的显色程度时，受标识试剂的浸透性的影响，测定误差较大。因此，难以对分析对象物的浓度进行数值化的定量测定。因此，采用免疫色谱法的定量测定的性能只是接近于半定量。

本发明的目的在于提供一种可以提高免疫色谱法的定量测定性能的色谱定量测定装置、定量测定方法以及色谱试验片。

发明公开

本发明的测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱定量测定装置包括色谱试验片和显色程度测定手段，色谱试验片具有多个反应区域，该反应区域上保持有能够与上述分析对象物特异性结合并显色的捕集试剂，显色程度测定手段能够对上述多个反应区域中至少2个以上反应区域的显色程度进行定量的数值化测定，上述显色程度测定手段具有对通过上述捕集试剂与上述分析对象物特异性结合显色的上述显色程度进行光学测定和图象测定中至少一种测定的功能。

特别优选色谱定量测定装置还具备对上述显色程度的测定结果进行演算处理，计算出分析对象物的浓度数值的演算处理装置。

本发明的测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱定量测定方法包括下述步骤：

(a)提供具有多个反应区域的色谱试验片，该反应区域上固定有能够与含有上述分析对象物的物质结合的捕集试剂，

(b)用含有上述分析对象物的上述液体试样润湿上述色谱试验片，使含有上述分析对象物的物质与上述捕集试剂接触，

(c)通过光学测定和图象测定中至少一种，测定上述反应区域中至少2个区域的上述捕集试剂与上述分析对象物特异性结合产生的显色状况，然后对该测定结果进行演算处理，计算出数值化的浓度。

本发明用于通过光学测定和图象测定中至少一种方法测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱试验片包括上述液体试样可以润湿的润湿部件、上述润湿部件中设置的捕集试剂，上述捕集试剂具有能够与含有上述分析对象物的物质反应并显色的性质，上述捕集试剂以均匀的状态含在上述润湿部件中。

特别优选上述色谱试验片具有片状的支持体和设置在上述支持体上的润湿部件，上述润湿部件可以被上述液体试样润湿，上述润湿部件具有在与上述支持体面平行的方向上形成的试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层，上述反应层具有上述反应区域，上述液体试样依次从上述试样添加层、上述标识试剂保持层、上述反应层、上述吸收层中通过。

采用这种结构，可以提高免疫色谱法中的定量测定性能。

图面的简单说明

图1表示本发明实施方式中色谱定量测定装置的侧视图。

图2表示本发明实施方式中色谱定量测定方法的步骤。

图3是表示本发明实施方式中色谱定量测定装置的色谱试验片结构的侧视图。

图4是表示本发明的实施方式中反应层的反应区域模式的色谱试验片平面图。

图5是表示本发明的实施方式中反应层的反应区域其他模式的色谱试验片平面图。

图6是表示现有的色谱试验片结构的平面图。

发明的最佳实施方式

本发明的一个实施例的色谱定量测定装置是通过分析色谱试验片的显色反应结果，测定液体试样中分析对象物的浓度。该色谱试验片包括片状的支持体以及在上述支持体上层叠的可以润湿的多个润湿部件。上述多个润湿部件设置在与上述支持体面平行的方向上。上述多个润湿部件具有试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层。上述反应层具有反应区域，该反应区域上固定有能够与上述液体试样中的分析对象物特异性结合的捕集试剂。分析上述反应层中的显色反应结果。该色谱定量测定装置包括上述色谱试验片、通过光学测定或图象测定定量测定上述反应区域中显色反应程度的显色程度测定手段以及演算处理其测定结果计算出分析对象物的数值化浓度的演算处理装置。

采用这种结构，通过测定色谱试验片的反应层上固定有能够与分析对象物特异性结合的捕集试剂的反应区域上的多个部位，不用控制液体试样的浸透状况，就可以正确地测定试验片上的显色反应。结果提高了定量测定性能。

特别优选上述色谱定量测定装置中，上述反应区域是在上述反应层上形成的多个斑点形态的部位。上述固定有捕集试剂的反应区域的形状有点状或球状的斑点，多数个点或斑点在反应层上不规则地存在。通过在反应层上设置斑点形态的多个反应区域，根据反应区域与非反应区域的颜色对比可以测定全部反应层上的显色程度。而且，由于反应区域不规则、均匀地存在于反应层上，即使显色反应受液体试样的浸透状况影响时，也可以进行更准确地定量测定。而且，由于以斑点形态固定捕集试剂，可以减少必要的试剂量，降低成本。这样，就可以不受液体试样的浸透状况影响，进行显色反应。

特别优选上述反应区域在上述反应层的整个区域内形成。上述固定有捕集试剂的反应区域的形状为面状，在反应层上广泛存在。采用这种结构，反应层的整个区域均为反应区域，可以测定整个反应层上的显色反应。而且，由于在整个反应层上均匀地存在反应区域，即使显色反应受液体试样的浸透状况影响时，也可以更准确地定量测定。可以不受液体试样的浸透状况的影响进行显色反应。

特别优选上述反应层上固定的捕集试剂的浓度在所有反应区域是一定的。采用这种结构，显色反应可以达到均匀。由于反应层上固定的捕集试剂的浓度在所有区域均是一定的，即使显色反应受液体试样的浸透状况影响时，也可以把握全部反应层的反应状况，更准确地定量测定。可以不受液体试样的浸透状况的影响进行显色反应。

特别优选上述反应区域以均匀分散的状态设置在上述反应层上。采用这种结构，显色均匀。结果，提高了定量测定的精度。

本发明的另一实施例的色谱定量测定方法包括下述步骤：在具有由一个至任意多个部件构成的可以润湿的层的色谱试验片上，通过光学测定或图象测定测量固定有能够与液体试样中含有分析对象物的物质特异性结合的捕集试剂的反应区域上多个部位的显色状况；对该测定结果进行演算处理，从而计算出分析对象物的数值化浓度。采用这种方法，可以不控制液体试样的浸透状况，正确测定试验片上的显色反应，结果提高了定量性能。

特别优选上述反应区域是在上述反应层上形成的多个斑点形态的部位。固定有捕集试剂的反应区域的形状由点状或球状的斑点构成，一个以上的多个斑点在反应层上均匀、不规则地存在。采用这种结构，就可以不受液体试样的浸透状况影响，进行显色反应。

特别优选上述反应层上固定的捕集试剂在所有反应部位固定有同样的捕集试剂。同样的捕集试剂呈点状或球状的斑点形态，均匀、不规则地存在于反应层上。这样，可以不受液体试样的浸透状况的影响，进行显色反应。

特别优选上述反应区域在上述反应层的整个区域内形成。固定有捕集试剂的反应区域的形状为面状，该反应区域在反应层上广泛存在。采用这种结构，可以不受液体试样的浸透状况的影响进行显色反应。

特别优选上述反应层上固定的捕集试剂的浓度在所有反应区域是一定的。采用这种结构，显色反应可以达到均匀。

以下，详细说明本发明实施例的色谱定量测定装置和测定方法。本发明的一个实施例的色谱定量测定装置在改良免疫色谱试验片结构的同时，采用光学测定或图象测定测量分析对象物与色谱试验片上含有的捕集试剂反应的结果，即显色程度，通过演算处理装置将该测定结果数值化，可以定量地读取液体试样中含有的分析对象物的浓度。在免疫色谱定量测定中，为了提供不用控制液体试样的流量和浸透性，并具有更高灵敏度和高性能的定量精度的免疫色谱试验片，免疫色谱试验片的特征在于由色谱材料构成的反应层载体的表面上具有多个反应区域。

本实施例的色谱定量分析装置以及定量测定方法具有使用测定仪器测量上述免疫色谱试验片的多个部位的显色程度，之后演算处理该测定结果，计算出分析对象物的浓度的功能。采用这种结构，可以不受色谱试验片上试样的流量和浸透性的影响，得到高灵敏度和高性能的色谱定量分析装置和测定方法。

免疫色谱试验片的反应区域固定有能够与分析对象物特异性结合的捕集试剂。该捕集试剂在所有反应区域具有一定的浓度。使用这种结构的免疫色谱试验片，反应区域或测量部位并不局限于特定部位。因此，在反应层载体的任意部位均可见显色反应。因此，反映随液体试剂浸透展开的标识试剂溶出状况的显色反应作为结果在所有反应层载体均有所体现。采用显色程度测定手段测量其显色程度，并对该结果进行演算处理，可以实现更高灵敏度和高性能的色谱定量测定。

另外，在本实施例中，使用由硝酸纤维素或玻璃纤维滤纸等任意多孔性载体构成的色谱材料形成的试验片作为反应层载体。该试验片通过采用抗原抗体反应等测定原理，可以分析检测特定物质，具有定量化功能。液体试样可以使用例如水、水溶液、尿、血液、体液、溶解有固体和粉体或气体的溶液等试样。作为试验项目，例如可以进行尿检查、妊娠检查、水质检查、便检查、土壤分析、食品分析等。这样，可以简单而且准确地定量测定任意被测溶液中存在的分析对象物。典型实施例

参照图1、图2、图3、图4、图5说明本发明的色谱定量测定装置、测定方法以及色谱试验片的典型实施方式。图1是本发明一个实施例的色谱定量测定装置的侧视图。图2表示本发明一个实施例的色谱定量测定方法的步骤。图3是表示本发明一个实施例进行免疫测定的免疫色谱试验片结构的侧视图。这里，免疫色谱试验片总称为反应层载体。

如图2所示，本发明的典型实施例的测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱定量测定方法包括下述步骤：

(a)提供具有多个反应区域的色谱试验片，该反应区域上固定有能够与含有上述分析对象物的物质结合的捕集试剂，

(b)用含有上述分析对象物的上述液体试样润湿上述色谱试验片，使含有上述分析对象物的物质与上述捕集试剂接触，

(c)通过光学测定和图象测定中至少一种，测定上述反应区域中至少2个区域的上述捕集试剂与上述分析对象物特异性结合产生的显色状况，而且对该测定结果进行演算处理，计算出数值化的浓度。

如图3所示，反应层载体10包括支持体1、反应层2、试样添加层3、标识试剂保持层4和吸水层5。在形成的反应层载体10上，液体试样按照试样添加层3、标识试剂保持层4、反应层2以及吸水层5的顺序流过。

支持体1具有支持色谱材料的功能，由塑料材料等制成。试样添加层3设置在支持体1上，该试样添加层3具有容易被液体试样润湿的性质。这种具有润湿部件的试样添加层3例如由无纺布等制成。含有被测物质的液体试样添加或涂敷在试样添加层3上。标识试剂保持层4具有润湿部件、该润湿部件上保持的标识试剂。标识试剂被液体试样浸透后可以移动。该润湿部件例如由无纺布制成。反应层2是抗体和抗原反应的区域。反应层2由硝酸纤维素等制成。反应层2具有多个反应区域，在各个反应区域固定有能够与分析对象物(被测物质)特异性结合的捕集试剂。多个反应区域以均匀地或不规则地或均匀分散的状态或斑点状分散的状态或点状分布的状态等设置在反应层2上。吸水层5上最终吸收液体试样的区域。

作为这种反应层载体的试验片中，将含有分析对象物的液体试样添加到试样添加层3上。液体试样从试样添加层3到达标识试剂保持层4时，该标识试剂保持层4中所保持的标识试剂通过液体试样的浸透而被溶解。在这一过程中，分析对象物与标识试剂结合。含有该分析对象物的结合物流到反应层2时，反应区域所含的捕集试剂与流过的分析对象物发生特异性化学反应，出现显色反应，产生显色状态。另外，捕集试剂与分析对象物和标识试剂中的至少一种反应并显色。最终液体试样流动，被吸水层5吸收。液体试样添加到反应层载体上，放置一定时间。通过定量测定一定时间后的显色，可以测定被测物质的定量数值。

也就是说，将液体试样添加到试样添加层3时，液体试样浸透试样添加层3，到达标识试剂保持层4。标识试剂在标识试剂保持层4上被液体试样浸透，溶解的同时向反应层2浸透。在这一过程中，液体试样中的分析对象物与标识试剂结合，生成结合体。该结合体在反应层2与捕集试剂发生特异性反应，引起显色反应。液体试样最终被吸水层5吸收，反应结束。

液体试样中存在分析对象物时，在反应层2的反应区域可见任何显色反应。使用光学测定或图象测定等显色程度测定手段11测量该显色反应。而且，用演算处理装置12对该测定结果进行演算处理，计算出分析对象物的数值化浓度。这样，就可以定量地测定分析对象物。

另外，在上述实施例中，支持体1由塑料制成，反应层2、试样添加层3、标识试剂保持层4、吸水层5由无纺布和硝酸纤维素制成，但这些材料都只是一个例子，并不仅限于上述材料。例如，支持体1可以由任意的非液体透过性材料制成。反应层2、试样添加层3、标识试剂保持层4、吸水层5等润湿部件可以由任意的具有多孔性的载体制成。

其次，采用图4和图5说明反应层2的反应区域的方式。图4和图5是表示具有不同反应区域的反应层载体10的实例的平面图。图4中，反应层2A上设置以多个点状或斑点状固定有捕集试剂的反应区域6A。图5中，反应层2B上设置全部反应层都固定有捕集试剂的反应区域6B。采用这种反应层2A和反应层2B的结构，流过反应层载体的分析对象物不论浸透状况如何都可以确实被捕获。结果，可以防止每个试验片显色程度的差异、不均匀等，正确地显色。

使用具有以上结构的免疫色谱试验片，为了测量反应层2的显色程度，随机选取多个区域进行测定。

如图1所示，显色程度测定手段11可以利用读取显色状态吸收信号的仪器、读取显色状态反射信号的仪器或使用CCD的图象解析仪器。

另外，演算处理装置12使用通常的演算处理装置。该演算处理装置基于上述测定结果，计算出分析对象的数值化浓度。这样，计算出显色程度的平均值。通过增多取样数可以正确地定量测定。

这样，可以实现能高灵敏度和高性能定量测定的色谱定量测定装置。

如上所述，本发明的测定装置中具备光学或图象读取反应区域显色程度的手段，可以更正确地测定显色程度。因此，可以使用色谱试验片，正确地定量测定。

通过在反应层上设置斑点状的多个部位的反应区域，通过反应区域与非反应区域的颜色对比可以正确地测定全部反应层上的显色程度。而且，由于反应层上不规则地存在反应区域，即使显色反应受液体试样的浸透状态影响时，也可以更准确地定量测定。而且，由于以斑点形态固定捕集试剂，可以使试剂量达到最小，成本降低。由于反应层上全部为反应区域，可以测定全部反应层上的显色反应。同时，由于全部反应层上均匀地存在反应区域，即使显色反应受液体试样的浸透状况影响时，也可以更准确地定量测定。

本发明的测定方法中，测定反应区域上多个部位的显色反应状况，并对该测定结果进行演算处理。因此，可以把握全部反应层的显色反应状况，不受液体试样浸透状况的影响，可以更准确地定量测定。

反应层上形成了斑点形态的多个部位的反应区域。因此，可以测定反应区域和不含捕集试剂的区域之间的显色程度对比。另外，由于反应层上不规则地存在反应区域，即使受液体试样的浸透状况影响，反应层上的显色状况出现差异时，通过测定多个部位后进行演算处理，可以缓和这种差异，结果可以更准确地定量测定。

反应层上以斑点形态设置的多个部位的反应区域上的捕集试剂种类相同。因此，可以测定全部反应层上的显色反应。同时，通过对比反应区域和不含捕集试剂的区域的显色程度，可以更准确地定量测定。另外，由于在反应层上不规则地存在反应区域，即使受液体试样的浸透状况影响，反应层上的显色状况出现差异时，通过测定多个部位后进行演算处理，可以缓和这种差异，结果可以更准确地定量测定。而且，由于以斑点形态固定捕集试剂，可以使试剂量达到最小，成本降低。由于反应层上全部为反应区域，可以测定全部反应层上的显色反应。另外，由于全部反应层上均匀地存在反应区域，即使反应层上的显色状况出现差异时，通过测定多个部位后进行演算处理，可以缓和这种差异，结果可以更准确地定量测定。

由于反应层上固定的捕集试剂的浓度在所有区域是一定的，液体试样浸透状况影响显色反应时，也能够把握全部反应层的反应状况。另外，即使受液体试样浸透状况的影响，反应层上的显色状况出现差异时，通过测定多个部位后进行演算处理，可以缓和这种差异，结果可以更准确地定量测定。

工业实用性

采用本发明的结构，不需要控制液体试样的浸透和标识试剂的展开，可以更高灵敏度和高性能地进行色谱定量测定。

Claims (28)

1、测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱定量测定装置，包括色谱试验片和显色程度测定手段，

色谱试验片具有多个反应区域，该反应区域上保持有能够与上述分析对象物发生特异性反应并显色的捕集试剂，

显色程度测定手段能够对上述多个反应区域中至少2个以上反应区域的显色程度进行定量数值化测定，

上述显色程度测定手段具有对通过上述捕集试剂与上述分析对象物发生特异性反应显色的上述显色程度进行光学测定和图象测定中至少一种测定的功能。

2、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，还具备对上述显色程度的测定结果进行演算处理，计算出分析对象物的数值化浓度的演算处理装置。

3、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，

上述色谱试验片包括片状的支持体以及在上述支持体上层叠的反应层，

上述反应层具有均匀设置的上述多个反应区域，

上述反应层具有可以被上述液体试样润湿的润湿部件，

上述润湿部件中含有上述捕集试剂，

上述捕集试剂与含有上述分析对象物的物质发生显色反应，

上述显色反应程度测定手段可以测定均匀设置的上述多个反应区域中的显色状态。

4、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，

上述色谱试验片包括片状的支持体、试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层，

标识试剂保持层、反应层和吸收层分别设置在上述支持体上，

上述反应层具有上述多个反应区域，

上述液体试样依次通过上述试样添加层、上述标识试剂保持层、上述反应层、上述吸收层。

5、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，

上述多个反应区域具有多个点和多个斑点中的至少一个区域，

上述显色程度测定手段测定上述至少一个区域的显色程度。

6、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，

上述色谱试验片具有反应层，

上述多个反应区域设置在上述反应层的整个区域。

7、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，

上述色谱试验片具有反应层，

上述反应层具有可以被上述液体试样润湿的润湿部件，

上述润湿部件中含有上述捕集试剂，

上述多个反应区域设置在上述反应层的整个区域，

上述润湿部件中上述捕集试剂的浓度在上述多个反应区域的所有区域均是相同的。

8、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，上述显色程度测定手段具有选自读取上述显色吸收信号的仪器、读取上述显色反射信号的仪器以及具有CCD的图象解析仪器中的至少一种仪器。

9、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，上述色谱试验片还具有标识试剂保持层，上述标识试剂保持层具有能够与上述分析对象物和上述捕集试剂中至少一种结合的标识试剂，通过上述捕集试剂与上述标识试剂的结合反应，发生上述显色。

10、如权利要求1所述的色谱定量测定装置，上述色谱试验片具有片状的支持体以及设置在上述支持体上的多个润湿部件，

上述多个润湿部件可以被上述液体试样润湿，

上述多个润湿部件具有在与上述支持体面平行的方向上形成的试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层，

上述反应层具有上述多个反应区域，

上述液体试样依次从上述试样添加层、上述标识试剂保持层、上述反应层、上述吸收层中通过。

11、如权利要求10所述的色谱定量测定装置，上述多个反应区域具有多个斑点，

上述显色程度测定手段定量测定上述多个斑点的显色程度。

12、如权利要求10所述的色谱定量测定装置，上述多个反应区域在上述反应层的整个面上形成，

上述显色程度测定手段定量测定上述反应层的显色程度。

13、如权利要求10所述的色谱定量测定装置，上述多个反应区域在上述反应层的整个区域形成，

上述捕集试剂的浓度在反应层的整个区域上是一定的，

上述显色程度测定手段定量测定上述反应层的显色程度。

14、如权利要求10所述的色谱定量测定装置，上述标识试剂保持层具有能够与上述分析对象物和上述捕集试剂中至少一种结合的标识试剂，

通过上述捕集试剂与上述标识试剂的结合反应发生上述显色。

15、测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱定量测定方法，包括下述步骤：

(a)提供具有多个反应区域的色谱试验片，该反应区域上固定有能够与上述分析对象物特异性结合的捕集试剂，

(b)用含有上述分析对象物的上述液体试样润湿上述色谱试验片，使含有上述分析对象物的物质与上述捕集试剂接触，

(c)通过光学测定和图象测定中至少一种，测定上述多个反应区域中至少2个区域的上述捕集试剂与上述分析对象物特异性结合产生的显色状况，然后对该测定结果进行演算处理，计算出数值化的浓度。

16、如权利要求15所述的色谱定量测定方法，

上述色谱试验片具有润湿部件，

上述捕集试剂固定在上述润湿部件中，

在上述步骤(b)中，上述液体试样从上述润湿部件中通过时，上述含有分析对象物的物质与上述捕集试剂反应并显色。

17、如权利要求15所述的色谱定量测定方法，

上述多个反应区域在上述反应层上形成斑点形态，

上述步骤(c)对上述斑点形态的显色状况进行数值化测定。

18、如权利要求15所述的色谱定量测定方法，上述多个反应区域分别含有的上述捕集试剂为同样的捕集试剂。

19、如权利要求15所述的色谱定量测定方法，上述色谱试验片具有反应层，上述多个反应区域在上述反应层的整个区域形成。

20、如权利要求15所述的色谱定量测定方法，

上述色谱试验片具有润湿部件，

上述润湿部件中固定有上述捕集试剂，

上述捕集试剂相对于上述润湿部件的浓度在所有多个反应区域中均是相同的。

21、如权利要求15所述的色谱定量测定方法，

上述色谱试验片具有片状的支持体以及设置在上述支持体上的多个润湿部件，

上述多个润湿部件可以被上述液体试样润湿，

上述多个润湿部件具有在与上述支持体面平行的方向上形成的试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层，

上述反应层具有上述多个反应区域，

上述液体试样依次从上述试样添加层、上述标识试剂保持层、上述反应层、上述吸收层中通过，

上述标识试剂保持层具有能够与上述分析对象物和上述捕集试剂中的至少一种结合的标识试剂，

通过上述捕集试剂与标识试剂的结合反应发生上述显色。

22、色谱试验片，用于通过光学测定和图象测定中至少一种方法测定液体试样中所含分析对象物浓度，

包括上述液体试样可以润湿的润湿部件、上述润湿部件中设置的捕集试剂，上述捕集试剂具有能够与含有上述分析对象物的物质特异性反应并显色的性质，上述捕集试剂以均匀的状态含在上述润湿部件中。

23、如权利要求22所述的色谱试验片，

上述润湿部件具有试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层，

上述反应层具有含上述捕集试剂的多个反应区域，

上述液体试样可以依次从上述试样添加层、上述标识试剂保持层、上述反应层、上述吸收层中通过。

24、如权利要求23所述的色谱试验片，

上述多个反应区域具有多个斑点，

上述多个斑点的显色程度可以通过上述光学测定和上述图象测定中的至少一种测定进行定量测定。

25、如权利要求23所述的色谱试验片，

上述润湿部件具有反应层，

上述多个反应区域在上述反应层的整个区域形成。

26、如权利要求23所述的色谱试验片，上述捕集试剂相对于上述润湿部件的浓度在上述多个反应区域的所有区域均是一定的。

27、如权利要求22所述的色谱试验片，

上述多个润湿部件可以被上述液体试样润湿，

上述多个润湿部件具有在与上述支持体面平行的方向上形成的试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层，

上述反应层具有上述多个反应区域，

上述液体试样依次从上述液体试样添加层、上述标识试剂保持层、上述反应层、上述吸收层中通过，

上述标识试剂保持层具有能够与上述分析对象物和上述捕集试剂中的至少一种结合的标识试剂，通过上述捕集试剂与标识试剂的结合反应发生上述显色。

28、如权利要求23所述的色谱试验片，上述多个反应区域以均匀分散的状态设置在上述反应层上。

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