CN1301722C - 苦荬菜提取物在制药中的应用 - Google Patents
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Abstract
一种苦荬菜提取物，其是将苦荬菜粉碎，加入5至10倍重量的30～95%乙醇，在40～80℃浸提2～4小时后提取制得。该苦荬菜提取物可应用在抑制甲型流感病毒活性方面，特别是应用于制备治疗甲型流感病毒的药物。
Description
技术领域
本发明涉及的是一种植物提取物，特别是一种苦荬菜提取物及其制备方法和其在抑制甲型流感病毒活性方面的应用。
背景技术
苦荬菜(Sonchus arvensis L.)又名荬菜、野苦菜、野苦荬、苣荬菜，属菊科，苦苣菜属多年生草本植物。我国约有8种以上，大部分地区都有分布，主产于山东、河北等省。
苦荬菜有食药两用价值，我国最早的医药专著《神农本草经》和《本草纲目》均有记载：苦荬菜，其性味苦寒，具有清热解毒，凉血利湿，消肿排脓之功效。近些年来有资料介绍苦荬菜水煎剂有抗癌、降血压、降胆固醇、抗心律失常、还能降低CCL4对肝脏的损伤及对白血病也有一定的疗效等作用。
苦荬菜的药食同用虽然已引起不少人的兴趣与重视，但是对其提取物用于抑制甲型流感病毒，迄今尚未见报道。
另一方面，流行性感冒是由于流感病毒引起的急性呼吸道传染病，具有很强的传染性，其发病率占传染病之首。流感主要由甲型(即A型)流感病毒引起，该病毒为核糖核酸型粘液病毒。甲型流感病毒属于A型流感病毒，可对人、猪、马和禽致病。目前国内外正在流行的禽流感即为A型禽流感。甲型流感病毒不仅具有高致病性，且引起的疾病具有较高病死率。但是目前尚无理想的特效药物。由于合成药在体内易产生抗药性，且对人体有很大的副作用，因此开发高效的抗甲型流感病毒的天然植物药已迫在眉睫。
发明内容
本发明人即致力于开发上述天然植物药物，经过反复研究试验，终于找到了能抑制甲型流感病毒的植物提取物，完成了本发明。
本发明的目的就是提供一种苦荬菜的提取物。
本发明的另一目的是提供了该提取物的制备方法。
本发明的再一目的是提供该提取物在抑制甲型流感病毒活性方面的应用。
本发明的目的是这样实现的：一种苦荬菜提取物的制备方法，其特征在于该方法为：将苦荬菜粉碎，加入5至10倍重量的30～95％乙醇，在40～80℃浸提2～4小时后提取制得。
其中，最好在该提取液浓缩后去沉淀，再取清液干燥制得本提取物。
更优选的方式是在该清液进行干燥前先进行柱层析，再用乙醇洗脱，洗脱液浓缩后干燥制得本提取物。
在上述步骤中，最好选用D101大孔树脂进行柱层析，选用30～80％乙醇进行洗脱。
由上述制备方法制得的提取物含有槲皮素鼠李糖甙、山奈酚和芸香甙。
本发明的苦荬菜提取物具有抑制甲型流感病毒活性的功能，可预防甲型流感病毒感染，且具有治疗作用。
具体实施方式
实施例1
将苦荬菜全草(根、茎、叶)1000克粉碎至粗粉状，加入6倍重量的70～80％乙醇，加热至60～70℃，每2小时提取一次，共二次，合并2次酒精提取液，并浓缩；
将上述浓缩液离心或过滤，去沉淀后收集清液；
将该清液选用D101大孔树脂进行柱层析，并选用50～80％乙醇进行洗脱，并进行分段收集；
浓缩上述收集液，对浓缩液进行喷雾干燥，所得产品即为本发明的苦荬菜提取物。
实施例2
将苦荬菜全草(根、茎、叶)粉碎至粗粉状，加入5倍重量的80～95％乙醇，加热至40～50℃，每2小时提取一次，共二次，合并2次酒精提取液，并浓缩；
将上述浓缩液离心或过滤，弃渣后收集清液；将上述清夜喷雾干燥后即得本发明的苦荬菜提取物。
实施例3
将苦荬菜全草(根、茎、叶)粉碎至粗粉状，加入10倍重量的30～40％乙醇，加热至70～80℃，4小时后提取制得本发明的苦荬菜提取物。
实施例4
将苦荬菜全草(根、茎、叶)粉碎至粗粉状，加入8倍重量的40～50％乙醇，加热至50～60℃，每2小时提取一次，共二次，合并2次酒精提取液，并浓缩；
将上述浓缩液充分沉淀后，去沉淀收集清液喷雾干燥后即得本发明的苦荬菜提取物。
实施例5
将苦荬菜全草(根、茎、叶)粉碎至粗粉状，加入7倍重量的50～70％乙醇，加热至60～70℃，每2小时提取一次，共二次，合并2次酒精提取液，并浓缩；
将上述浓缩液离心或过滤，弃渣后收集清液；
将该清液选用D201大孔树脂进行柱层析，并选用30～50％乙醇进行洗脱，并进行分段收集；
浓缩上述收集液，对浓缩液进行喷雾干燥，所得产品即为本发明的苦荬菜提取物。
上述实施例中原料及试剂来源于：
苦荬菜原料：山东种植采收；
试剂来源：无特殊试剂，由上海试剂公司出品。
试验实施例1 本发明的苦荬菜提取物波谱检测
实施例1-5所得的苦荬菜提取物经波谱分析可看到质荷比等特征峰。经检测提取物是由几个化合物组成，该化合物至少含有
1、黄酮类：山奈酚、槲皮素鼠李糖甙和芸香甙
槲皮素鼠李糖甙 山奈酚
芸香甙
2、齐墩果酸为母核型的甙类
齐墩果酸型母核
以上组合物的分子量均＜1000，该组合物在醇和稀醇中具有较好的溶解性，在水中溶解性较差，其活性物质为山奈酚、槲皮素鼠李糖甙及三萜皂甙类。
试验实施例2 本发明的苦荬菜提取物抑制甲型流感病毒活性的体外细胞检测
(1)测试原理：以MDCK(狗肾)细胞(山东济南疾病预防中心提供)为病毒宿主，测定本发明的苦荬菜提取物样品抑制病毒引起细胞病变程度(CPE)。
(2)测试材料和方法：
A、病毒株：甲型流感病毒(山东济南疾病预防中心购得，菌株为190-15)在鸡胚尿囊腔内培养传代(2002.10)，-80℃保存。
B、样品处理：样品溶于DMSO(二甲亚砜)，再用培养液MEM(GIBCO公司出品)配成适宜初始浓度250μg/ml，作为开始检测的第一个浓度(高浓度)，将前一个浓度用上述培养液稀释3倍得到后一个浓度，依次类推，按浓度高低顺序得到8个浓度的样品溶液。
C、测试方法：MDCK细胞接种96孔培养板(Costar公司生产)，置5％CO2，37℃培养24小时；
MDCK细胞分别加入甲型流感病毒10-4(100倍TCID50)，37℃吸附2小时后倾去病毒液，分别加入不同稀释度药物。设病毒对照和细胞对照，37℃培养36小时，观察结果，记录CPE，用Reed-Muench法分别计算各样品抗流感病毒半数抑制浓度(IC50)。
(3)测试结果：
体外细胞实验证明：本发明的苦荬菜提取物有抗流感甲型病毒活性，半数抑制浓度IC50为21.11～43.00ug/ml。
Claims (5)
1、一种苦荬菜提取物在制备抑制甲型流感病毒活性方面的药物中的应用，其中，该苦荬菜提取物由以下方法制得：将苦荬菜粉碎，加入5至10倍重量的30～95％乙醇，在40～80℃浸提2～4小时后将该提取液浓缩后去沉淀，取清液干燥即得本提取物。
2、根据权利要求1所述的应用，其特征在于该应用是指制备治疗甲型流感病毒的药物。
3、根据权利要求2所述的应用，其特征在于该清液进行干燥前先进行柱层析，再用乙醇洗脱，洗脱液浓缩后干燥即得本提取物。
4、根据权利要求3所述的应用，其特征在于选用D101大孔树脂进行柱层析，选用30～80％乙醇进行洗脱。
5、根据权利要求4所述的应用，其特征在于该提取物含有槲皮素鼠李糖甙、山奈酚和芸香甙。
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| CN1331978A (zh) * | 2000-06-22 | 2002-01-23 | 中国科学院植物研究所 | 苦苣菜属植物在制备抗烟毒药物中的应用 |
| CN1473837A (zh) * | 2003-07-02 | 2004-02-11 | 沈阳药科大学 | 抱茎苦荬菜内酯及其衍生物组合物和它的制备方法及其应用 |
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2004
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| CN1331978A (zh) * | 2000-06-22 | 2002-01-23 | 中国科学院植物研究所 | 苦苣菜属植物在制备抗烟毒药物中的应用 |
| CN1473837A (zh) * | 2003-07-02 | 2004-02-11 | 沈阳药科大学 | 抱茎苦荬菜内酯及其衍生物组合物和它的制备方法及其应用 |
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