CN1276966C - 用氧化剂基配方对被朊病毒感染材料污染的表面的去污 - Google Patents
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Abstract
用碱性清洁液对携带被朊病毒感染的材料的表面进行清洗,以从该表面尽量清除蛋白质性质的材料。该清洁剂是攻击残留在表面的朊病毒和在清洗步骤中攻击从表面清除的朊病毒的碱性清洁剂。在排出清洁液后,在50-60℃下,在表面上循环表面活性剂、缓冲剂、和不含重金属的腐蚀抑制剂的溶液。表面活性剂分散且不凝集被朊病毒污染的材料。强氧化剂,优选过乙酸,加入到溶液中以使过乙酸的浓度达到1,000-2,500ppm。过乙酸或其它强氧化剂攻击朊病毒,特别是未凝集的朊病毒链,灭活朊病毒。在漂洗和干燥之后,可以用微生物不渗透的阻挡层覆盖该表面,并进行诸如蒸汽高压灭菌这样的最后消毒。
Description
技术领域
本申请涉及朊病毒的灭活。本申请还涉及来源于医疗和外科器械的被朊病毒感染材料的灭活,并特别参照其进行描述。然而,本发明进一步涉及被朊病毒感染材料污染的其它表面的去污,诸如药物制备装置、食物加工装置、实验室动物研究装置,其包括地面、工作台面、设备、笼子、发酵罐、流体管道等等。
背景技术
朊病毒是蛋白质性质的传染源,其引起类似的致命脑病,称作传染性海绵状脑病(TSEs)。这些疾病包括人类的克-雅病(CJD),家畜的牛海绵状脑病(BSE),又被称为人类的“疯牛”病,羊的瘙痒病,以及麋和鹿的消耗性疾病。这些病的特征是起初潜伏期很长。一旦出现神经系统病症,诸如痴呆或协调丧失,发生明显、相对迅速的神经系统退化,接着导致死亡。朊病毒被认为是通常在宿主体内发现的异常型蛋白质。然而,不像正常蛋白质型,宿主不能分解该异常型蛋白质。这些异常型蛋白质积累,特别是在神经组织中,最终导致神经细胞的死亡。
虽然朊病毒疾病的传染性不高,但可以通过某些高危险组织传染,这些组织包括脑、脊髓、大脑脊髓液、以及眼。对被朊病毒感染的患者进行外科手术之后,包含朊病毒的残余物可能残留在手术器械上,特别是神经外科和眼科器械。在长的潜伏期期间,非常难以确定接受手术者(surgical candidate)是否为朊病毒携带者。
朊病毒具有很强的抗灭活性。不像微生物,朊病毒没有DNA或RNA可破坏或分裂。朊病毒由于它们的疏水性,倾向于聚集在一起形成不溶的凝块。在多种能有效地对微生物进行灭菌的条件下,朊病毒形成更致密的凝块,保护自身和其下面的朊病毒免受灭菌处理的影响。世界卫生组织(1997)朊病毒灭活协议要求,在浓的氢氧化钠或次氯酸盐中将器械浸泡两个小时,接着置于高压灭菌器中一个小时。当然,这种处理损坏多数医疗器械并造成其它方面的损害。
本申请提供一种新型和改进的朊病毒灭活技术,该技术克服了上述及其它问题。
发明内容
根据本发明,提供了一种灭活朊病毒的方法。该方法包括以下步骤:用攻击朊病毒的清洁剂预处理携带感染朊病毒的材料的表面,以及用液态或气态氧化剂处理这些表面。
根据本发明的更多有限制的方面,氧化剂在溶液中是液态,溶液中还包括表面活性剂,其打开朊病毒分子并允许氧化剂更加有效地分解蛋白质。
根据本发明的更多有限制的方面,液态氧化剂溶液包括过乙酸并且温度保持在大约53-57℃。
根据本发明的更多有限制的方面,氧化剂被缓冲为接近中性pH值。
根据本发明的更多有限制的方面,氧化剂包括过乙酸。
根据本发明另外的更多有限制的方面,用液态氧化剂处理器械的时间少于12分钟。
本发明的一个优点在于,其对器械作用缓和。
本发明的另一个优点在于,其可迅速且有效地灭活朊病毒。
本发明的另一个优点在于,其适合于很多种类的材料和装置。
根据本发明的朊病毒灭活方法,所述表面活性剂、缓冲剂、和腐蚀抑制剂的溶液在所述表面上循环至少1分钟,之后向所述溶液中加入所述氧化剂,并在所述表面上再循环所述溶液至少6分钟。液体溶液是至少1,000ppm过乙酸。
根据本发明的朊病毒灭活方法,漂洗携带感染朊病毒的材料的表面之后,干燥所述表面;用微生物不渗透的阻挡层覆盖所述表面;以及对被覆盖的表面进行最后灭菌处理以杀死微生物。
根据本发明的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述清洁剂是碱性清洁剂,包括:
重量百分比为20.0-41%的氢氧化钾;
重量百分比为0.4-8%的乙二胺四乙酸或其盐;
重量百分比为0.0-7%的葡萄糖酸盐;
重量百分比为0.3-6%的2-丙烯酸均聚物;
重量百分比为0.0-5%的C8两性羧酸酯;
重量百分比为0.0-10%的六偏磷酸钠;
重量百分比为0.0-4%的硅酸盐;
重量百分比为0.4-10%的丙烯酸均聚物;以及
重量百分比为0.0-10%的二甲基二烯丙基氯化铵和丙烯酰胺共聚物。
根据本发明的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述碱性清洁剂包括:重量百分比为20.0-32%的氢氧化钾;重量百分比为4.0-8%的乙二胺四乙酸;重量百分比为1.0-5%的葡萄糖酸钠;重量百分比为0.3-1%的2-丙烯酸均聚物;重量百分比为0.0-2%的混合的C8两性羧酸酯;重量百分比为0.0-10%的六偏磷酸钠;以及水。
根据本发明的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述清洁剂具有至少500ppm的碱度。
根据本发明的朊病毒灭活方法,其中所述氧化剂包括浓度至少为1000ppm的过酸。
对于本领域的技术人员来说,通过阅读和理解下面具体描述的优选具体实施例,本发明的更进一步的优点将是显而易见的。
附图说明
本发明可以采用不同成分及不同成分排列的方式,也可以采用不同步骤及不同步骤排列的方式。附图只是用于描述本发明的优选具体实施例,而不是限定本发明。
图1说明用各种清洁组合物清除的蛋白质性质的材料;
图2表示蛋白质性质的材料与碱度的关系曲线;
图3比较在清洁配方中单独KOH浓度(上端的曲线)和总碱度(下端的曲线)对清除蛋白质性质的材料的影响;
图4比较各种清洁组合物对减少朊病毒(IFDO)模型的效果;
图5比较过乙酸浓度对减少朊病毒(IFDO)模型的效果;以及
图6比较过乙酸温度对减少朊病毒(IFDO)模型的效果。
具体实施方式
用碱性清洁剂对携带可能被朊病毒污染的材料的器械或其它物品进行清洗操作。该清洁剂优选通过稀释浓缩物而形成,该浓缩物包括碱性清洁剂,并且可选择地包括下列一种或多种物质:表面活性剂、阳离子聚合物、螯合剂、抗-再沉淀剂、阳离子聚合物、以及腐蚀抑制剂(防腐剂)。
优选地,该碱性清洁剂是碱金属或碱土金属的氢氧化物。典型的清洁剂是氢氧化钾和氢氧化钠。氢氧化物的优选浓度按浓缩物重量计算为20-60%。
螯合剂用于螯合沉积在待清洗器械上的诸如钙盐和镁盐这样的水硬盐类。适宜的螯合剂包括但不限于,羧酸基聚合物,如聚丙烯酸、和乙二胺四乙酸(EDTA)或其盐类。在下面论述中,六偏磷酸钠,在某种程度上也可以作为螯合剂。优选地,螯合剂浓度按浓缩物重量计算为约1-15%。优选的组合物包括按重量计算2-10%的Na-EDTA,以及按重量计算为0.1-3%的聚丙烯酸。
表面活性剂选自由阴离子、阳离子、非离子、以及两性离子表面活性剂组成的组,用于增强清洁性能。这种表面活性剂的实例包括但不限于,水溶性盐类或高级脂肪酸单酸甘油酯单硫酸盐,如氢化椰子油脂肪酸的单硫酸化单酸甘油酯的钠盐;高级烷基硫酸盐,如十二烷基硫酸钠;烷芳基磺酸盐,如十二烷基苯磺酸钠;高级烷基磺基乙酸盐;1,2二羟基丙烷磺酸酯的高级脂肪酸酯;以及低级脂族氨基羧酸化合物的基本饱和的高级脂族酰胺,如那些在脂肪酸、烷基或酰基、及其类似物中含有12-16个碳的高级脂族酰胺。最后提及的酰胺的实例是,N-月桂酰肌氨酸,和N-月桂酰、N-肉豆蔻酰、或N-棕榈酰肌氨酸的钠盐、钾盐、和乙醇胺盐类。
另外的实例是,环氧乙烷和各种与其反应的具有长疏水链(例如,大约12-20个碳原子的脂族链)的活性含氢化合物的缩合产物,其中缩合产物(“ethoxamers”)含有亲水聚氧乙烯部分,如聚(环氧乙烷)与脂肪酸的缩合产物、脂肪醇、脂肪酰胺、多元醇(例如,单硬脂山梨坦)、以及聚环氧丙烷(例如,普卢兰尼克材料)。
适宜的两性表面活性剂是烷基两性羧酸酯,如混合的C-8两性羧酸酯表面活性剂。优选的浓缩物包括重量浓度为0-5%的混合的C8两性羧酸酯。
抗-再沉淀剂抑制污物再沉积在器械上。适宜的抗-再沉淀剂包括,诸如葡萄糖酸钠这样的葡萄糖酸盐、以及柠檬酸盐。聚丙烯酸也可以作为抗-再沉淀剂。抗-再沉淀剂的浓度按浓缩组合物的重量计算优选为1-10%。优选的组合物包括按组合物的重量计算浓度为0.1-3%、更好为约0.3%的聚丙烯酸,以及按组合物的重量计算浓度为1-10%、更好为约1-5%的葡萄糖酸钠。
阳离子聚合物有助于镁、硅酸盐、和锌化合物保持在溶液中,使腐蚀抑制剂保持在溶液中,并且在硬水中使用本发明的清洁组合物时,帮助防止在清洁器械表面上的水硬沉淀作用和结垢。这种阳离子聚合物典型的实例是一般被分类为水溶性羧酸聚合物的羧基聚合物,如聚丙烯或聚甲基丙烯酸或乙烯基加聚物。在所考虑的乙烯基加聚物中,实例有马来酐如与乙烯基乙酸酯、苯乙烯、乙烯、异丁烯、丙烯酸、以及乙烯基醚的共聚物。
典型的阳离子聚合物是二烷基二烯丙基铵盐(例如,卤化物)均聚物或共聚物,如二甲基二烯丙基氯化铵均聚物、二甲基二烯丙基氯化铵/丙烯酰胺共聚物、二甲基二烯丙基氯化铵/丙烯酸共聚物、以及乙烯基咪唑乙烯基吡咯烷酮共聚物。其它适宜的非纤维素阳离子聚合物是披露在CTFA Cosmetic Ingredient Dictionary(化妆品成分词典)中的名称“聚季铵盐”(“Polyquaternium”)下,后面是整数。所有上面描述的聚合物是水溶性或至少可以胶态分散在水中。这种低分子量羧基聚合物,分子量大约在1,000至小于100,000的范围,作为抗成核剂以防止碳酸盐在清洗罐中形成不需要的结垢。典型的实例是聚季铵盐7、二甲基二烯丙基氯化铵/丙烯酰胺共聚物。阳离子聚合物的浓度按浓缩物的重量计算优选为0-10%。
典型的金属腐蚀抑制剂是硅酸盐和磷酸盐,其总量为浓缩物重量的大约0-10%。
清洁浓缩物可选择地包括少量的抗菌剂,如苯酚、季铵化合物,或氧化剂,例如,次氯酸钠、过氧化氢、或过乙酸。
在表1中列出了优选的碱性清洁剂浓缩物。
表1
成分 | 推荐范围,在浓缩物中的重量百分比(wt.%) |
45%氢氧化钾 | 45-90 |
40%乙二胺四乙酸(EDTA),四钠盐 | 1-20 |
葡萄糖酸钠 | 0-7 |
30% 2-丙烯酸均聚物(聚丙烯酸) | 1-20 |
混合的C8两性羧酸酯 | 0-5 |
六偏磷酸钠 | 0-10 |
40%硅酸,钠盐 | 0-10 |
48%丙烯酸均聚物 | 1-20 |
二甲基二烯丙基氯化铵和丙烯酰胺的共聚物(聚季铵盐7) | 0-10 |
特别地,在表2中将下列配方(剂型,formulations)进行具体说明。
表2
组分 | 配方A在清洁剂浓缩物中的含量(%) | 配方B在清洁剂浓缩物中的含量(%) |
45%氢氧化钾 | 69 | 46 |
40%乙二胺四乙酸,四钠盐 | 20 | 10 |
葡萄糖酸钠 | 1 | 5 |
30% 2-丙烯酸均聚物(聚丙烯酸) | 3 | 1 |
混合的C8两性羧酸酯 | 0 | 2 |
六偏磷酸钠 | 0 | 10 |
软化水 | 7 | 26 |
为了实施清洗操作,产物在30-65℃下用水稀释2-30分钟至8-16毫升/升(cc/liter)。典型的自动清洗仪的全循环可以包括以下步骤:在30-65℃下用水进行2分钟的预洗,用8-16毫升/升的碱性清洁剂进行2-30次洗涤,在水中漂洗15秒,在30-65℃下进行1分钟热漂洗,以及最后的干燥步骤(如果需要的话)。进一步的循环可以简单地包括如上所述的预漂洗、碱清洗、以及后漂洗。
清洗浓缩物可选择地包括少量的抗菌剂,如苯酚、季铵化合物、或氧化剂,例如,次氯酸钠、过氧化氢、或过乙酸。
也可以考虑用其它清洁剂。清洁剂分成不同的种类。酶清洁剂包括活性蛋白酶、脂肪酶、以及其它酶,以辅助组织或污物在表面分解。这些产物有助于清除朊病毒和其它蛋白质性质的材料,但是一般对朊病毒缺乏效力,即朊病毒具有抗蛋白酶的特性。非酶清洁剂可以被分解为中性、酸性、和碱性产物。这些清洁剂包括各类赋形剂,如湿润剂和表面活性剂,其有助于清除表面的污物。
用一定范围pH值的清洁剂对朊病毒模型进行朊病毒清除效力测试。更具体地讲,制备5%牛血清白蛋白(BSA)溶液,分别吸取2ml移到每个相同的不锈钢试样上。这些试样在43℃的烘箱里干燥1小时,冷却至室温,并称重。在这些干燥状态下,牛血清白蛋白采取与传染性朊病毒蛋白相似的高β-片层构象(β-sheet构象)。试样在STERIS 444TM清洗仪/消毒器中利用其器械循环进行清洗,但采用的是不同的清洁组合物。器械循环包括2分钟的预洗,在65℃下的2分钟清洗,漂洗,热漂洗,以及干燥循环。循环之后,从清洗仪中取出试样,冷却,并称重。图1表示在清洗循环中清除的材料量,其中组合物A、B、C、和D是碱性清洁剂,从A至D的碱度递减,组合物E是中性清洁剂(Renu-KlenzTM,可购自STERISCorp.,Mentor,Ohio),组合物F是酸性清洁剂(CIP220TM,可购自STERIS Corp.),而组合物G是普通水对照(plain water control)。图2是表示被清除的材料对总碱度(百万分之一)的曲线图。如图2所示,被清除的材料量与碱度之间有很强的相关性,清除量随着清洁组合物的总碱度的增加而增加。
如上述使用的清洁组合物清除包括蛋白凝块的固定蛋白质性质的物质。任何残留的蛋白质性质的物质都以薄膜形态存在,其在随后的灭活步骤中更易于被灭活剂穿透。而且,优选的碱性清洁剂破坏在清洁步骤中未被清除的残留薄膜中的约50%朊病毒。
如上所述,开发了基于表1的最佳碱性清洁剂配方并进行了分析,得到以下结果:
表3
配方 | 平均被清除的蛋白质(mg/cm2) | 标准偏差 | [KOH]当量,M,在清洗仪中 |
水对照 | 0.5 | 0.04 | 0 |
碱性1 | 2.36 | 0.57 | 0.020 |
碱性2(A) | 4.18 | 0.52 | 0.033 |
碱性3 | 2.97 | 0.75 | 0.031 |
碱性4 | 2.52 | 0.29 | 0.029 |
碱性5 | 3.56 | 0.18 | 0.035 |
碱性6 | 2.44 | 0.49 | 0.020 |
碱性7 | 2.32 | 0.30 | 0.020 |
碱性8 | 3.11 | 0.17 | 0.033 |
碱性9 | 2.85 | 0.74 | 0.034 |
碱性10 | 3.46 | 0.55 | 0.034 |
碱性11 | 3.53 | 0.52 | 未确定 |
碱性12(B) | 4.06 | 0.40 | 未确定 |
碱性13 | 3.34 | 0.42 | 未确定 |
碱性14 | 3.49 | 0.20 | 未确定 |
碱性15 | 3.28 | 0.75 | 未确定 |
在以上的表2中具体说明了最有效配方的组合物(用A和B标记)。
在这些优选的配方中,蛋白质清除效力不仅是碱度的函数,而且是组合物的其它组分的函数。这显示在图3中。配方主要由三个组成部分组成:碱性成分、水控制成分、以及表面活性剂。碱性成分也可以作为水控制剂。例如,EDTA对配方贡献碱性和水控制特性。优选地,包括水控制剂,这是因为用于清洗表面的水质相当不同并且可在不同情况下影响给定配方的效力。水硬度就是一个实例,其显示逆溶解度(inverse solubility),即,温度越高水硬盐类的溶解度越低。水硬盐类在较高pH值下也较难溶。因此,优选使用EDTA或其它螯合剂以将水硬盐类保持在溶液中。上述的所有三种组成成分被认为是协同地起作用,以使配方能清洁表面。这说明在图3中,其比较了九个配方的碱性当量与单独KOH作为碱性来源的碱性当量。
将相应比例的氢氧化钾(KOH)添加到清洗仪中,并且按如上所述的方法进行测试,从而对单独碱度的效果进行评价。尽管碱度(用KOH的摩尔浓度表示)的效果是显著的(如在底部曲线所示),证实了被测配方(表3中的实例1-9)增强的蛋白质清除效力。
本发明的发明人发现,适当选择清洁组合物不仅清除朊病毒和其它蛋白质性质的材料,而且至少部分地灭活朊病毒。特别地,碱性清洁剂与酶、中性、或酸性清洁剂相比能更有效地灭活朊病毒。
相对于朊病毒模型测试了各种清洁剂,其中回肠液依赖生物(IFDOs)人工培养在改性的支原体基液体培养基中,通过连续稀释量化,并且平皿接种于相同的琼脂上。在水中制备配方,IFDO的等分试样直接悬浮在每个配方中。试液在40℃下孵育30分钟,取等分试样并通过连续稀释量化,之后平板接种在改性的支原体琼脂中。在37℃下进行48小时的孵育后,对平板进行计数,并且得到IFDO中的对数下降。这些测试结果说明在图4中,其中,清洁剂A是普通水对照,清洁剂B是碱性清洁剂(CIP 150TM),清洁剂C是碱性稍弱的第二碱性清洁剂(CIP 100TM),清洁剂D(KlenzymeTM)以及E(Enzycare 2TM)是酶清洁剂,清洁剂F(Renu-KlenzTM)和G(NpH-KlenzTM)是中性清洁剂,而清洁剂H(CIP 220TM)是酸性清洁剂。(每个被测试的清洁剂均从STERISCorp.购得)
因此,碱性清洁剂不仅更有效地清除朊病毒材料,还更有效地灭活可能残留的朊病毒材料和仍在溶液中的被清除的朊病毒材料。
在清洗步骤之后,对器械或其它物品进行朊病毒灭活步骤。在朊病毒灭活步骤中,物品与液体或气体氧化剂接触。优选地,物品浸泡在液体氧化剂中,其在全部表面上循环并通过所有内部通道或腔。可选择地,将液体氧化剂喷洒在待进行朊病毒灭活的物品的全部表面。作为又一个可替换方法,可以气体或蒸汽形式提供氧化剂。在优选的具体实施例中,氧化剂包括过酸,如过乙酸。然而,也可以考虑用其它强氧化剂,如次氯酸盐或过氧化氢。
在优选具体实施例中,在物品的全部表面上循环水基溶液,该水基溶液包括不含重金属(其倾向于降解过乙酸和其它氧化剂)的防腐剂、螯合剂、可有效拆开缠绕的朊病毒链的表面活性剂、以及pH值缓冲剂。然后,以液体形式或反应生成过乙酸的试剂形式,将过乙酸加入到溶液中。加入足量的过乙酸,以使其在溶液中的浓度达到1,000-3,000ppm,优选为2,000-2,500ppm。
更具体地注意优选的配方,腐蚀抑制剂不含重金属,如钼、铬、钴、钒、和铁,其是极好的腐蚀抑制剂,但倾向于降解过乙酸。优选的腐蚀抑制剂包括硫酸盐和硼酸盐,用于保护铝和钢(包括不锈钢)不被腐蚀。8-羟基喹啉和邻苯基苯酚也是优选的铝腐蚀抑制剂。有机腐蚀抑制剂,如吡咯、苯甲酸酯、甲苯基三唑、和巯基苯并噻唑是优选的铜和黄铜的腐蚀抑制剂。沸石和磷酸盐,其在下面结合缓冲系统详细讨论,也抑制腐蚀,特别是在黑色(铁类)金属中。
缓冲系统缓冲溶液的pH值接近中性,优选pH值为6.5-8,更好为6.5-6.6。
在优选的具体实施例中,缓冲系统包括磷酸盐,特别是磷酸一钠、磷酸二钠、六偏磷酸钠、以及其钾的等效物。最优选地,缓冲系统包括两种或多种磷酸盐的混合物,如相对酸性的磷酸一钠,和较高pH值的磷酸二钠。确定混合比例以达到选定的pH值。
在另一具体实施例中,缓冲系统包括一种或多种硅酸钠或沸石,代替一种或全部磷酸盐。沸石还用来缓冲溶液到选定的pH值。沸石还有附加的优点,还作为表面活性剂,其减少去污溶液的表面张力,从而提高污物清除效力并有助于解开朊病毒分子。沸石还有另外的优点,抑制碱侵蚀表面。沸石具有通式Na2O.(SiO2)X,其中X为二氧化硅与碱的比例且该比例在0.4∶1-4.0∶1的范围内,优选地在1.60∶1-3.25∶1的范围内。适宜的沸石包括商标名称为AD40NX和METSO的沸石,可从宾夕法尼亚州Valley Forge的PQ公司购得。优选的组合物包括按重量计算10-90%的沸石,更优选为约20-50%。
另一优选的缓冲液包括柠檬酸或其盐类。
当稀释剂水较硬时,它包括钙和镁盐,其倾向于沉积并在器械和系统的部件上留下沉淀物。为了防止这种沉淀作用,可包括一种或多种螯合剂以螯合在这些盐中的金属。适宜的螯合剂包括乙二胺四乙酸(EDTA)和其盐类、氨三乙酸及其盐类、聚丙烯酸钠、以及其组合。优选的螯合剂还有,如六偏磷酸钠。当然,如果溶液由去离子水形成,则可以不用螯合剂。为了适应不同的自来水系统(city water systems),组合物优选地包括总共约1-30%(按重量计算)的螯合剂,更优选为10-15%。
将表面张力降低剂,即,湿润剂或表面活性剂,加入到组合物中,以增加进入缝隙的渗透力并解开和打开朊病毒丝。也考虑了各种表面能量降低剂,包括阴离子、阳离子、非离子、两性、和/或两性离子表面活性剂。优选的非离子湿润剂包括表面活性剂,如脂肪族醇聚乙二醇酯、壬基苯氧基聚(乙烯氧基)乙醇、和乙氧基聚氧化丙烯(ethoxylated polyoxypropylene),以及其它非离子表面活性剂。具体的实例包括Genapol、UD-50TM、IGEPALTM、FLUOWETTM、ANTAROXTM、以及PEGOLTM。
按重量计算表面活性剂的优选浓度为0.01%至约8%。
将上述的10-20克/升的腐蚀抑制剂、缓冲剂、螯合剂、和表面活性剂的混合物与水(优选去离子水或软化水)混合在一起,以形成预处理溶液,将其加热到45-60℃,更优选为53-57℃,然后在器械上循环1-2分钟,以对表面上的蛋白质性质的物质进行预处理。然后,将液态过乙酸或反应形成过乙酸的试剂加入到溶液中。例如,加入5-8克/升的35%过乙酸使溶液达到适当的浓度2,000-2,500ppm。可供选择地,可以加入乙酰水杨酸和过硼酸盐,并在溶液中反应以生成该浓度的过乙酸。
过乙酸溶液在器械上面循环8-20分钟,优选为10-12分钟。
用过乙酸溶液处理之后,排出过乙酸溶液,漂洗器械,优选用无菌的或无微生物的漂洗水。漂洗之后,干燥器械。
因此,优选的处理方法包括以下步骤:用碱性清洁液处理被朊病毒污染的(或怀疑被朊病毒污染的)材料或装置,接着用水漂洗。然后用包括一种或多种螯合剂、表面活性剂、缓冲系统、以及腐蚀抑制剂的预处理溶液处理材料或装置。然后用液态氧化剂对材料或装置进行处理,液态氧化剂可通过在预处理溶液中加入氧化剂(在优选实施例中是过乙酸)而迅速生成。然后进行一次或多次漂洗步骤。优选地,用清洁剂溶液、漂洗水、预处理溶液、和液态氧化剂浸泡被污染的材料或装置,或喷洒在装置或材料的表面,或两者结合。
不锈钢器械,如手术器械,可以用微生物不能穿透的包裹物覆盖,进行最后的灭菌步骤,以杀死表面上的所有微生物。用于不锈钢器械的适当的最后灭菌步骤包括,蒸汽高压灭菌和蒸汽过氧化氢处理。不适于蒸汽灭菌的器械可进行包裹并最后用蒸汽过氧化氢进行灭菌。
下面的实施例说明组合物及条件对灭活和/或清除朊病毒的影响,但这并不限制本发明的范围。
实施例1
通过用朊病毒模型(BSA变性蛋白质)对其进行处理而制得试样。然后,用含有1,000mg/L浓度的过乙酸的组合物在40-60℃下处理试样。该组合物还包括表面活性剂系统、磷酸盐缓冲系统、有机腐蚀抑制剂、以及螯合剂。该组合物不含重金属。
表4总结了在组合物中暴露12分钟期间被分解的BSA量。
表4
温度(℃) | 在1000mg/L过乙酸条件下蛋白质分解的百分比 |
0 | 0 |
30 | 1 |
40 | 1 |
45 | 1 |
50 | 90 |
55 | 99 |
60 | 80 |
结果显示,在40℃和45℃下,只发生很少(如果有的话)的蛋白质分解。而在50℃和55℃下,蛋白质有效地被分解。在60℃下,残留一些蛋白质残余物,这暗示了蛋白质发生了凝集(clumping)。即,当温度在60℃左右和超过60℃时,蛋白质发生聚集,并具有更高抵抗力来保护自身免受过乙酸或其它强氧化剂的攻击。
还研究了过乙酸浓度对相同BSA模型的影响。将用BSA模型处理的试样再用各种浓度的过乙酸在50℃下处理12分钟。结果总结在表5中:
表5
过乙酸的浓度 | 在1000mg/L过乙酸条件下蛋白质分解的百分比 |
0 | 0 |
500 | 0 |
1000 | 10 |
1500 | 50 |
2000 | 95 |
2500 | 99 |
表5的结果显示,提高过乙酸的浓度,会增加模型的破坏(分解,breakdown),而且认为与实际的朊病毒的破坏有相似的相关性。因此,想要迅速破坏朊病毒,过乙酸的浓度至少要保持在2000ppm。
实施例2
在50℃下用如实施例1中所述的过乙酸配方处理回肠液依赖生物(IFDO)形态的朊病毒模型试样,其中过乙酸浓度为0-2,000mg/升,然后在改性的支原体基液体培养基中进行培养。在50℃下将IFDO悬浮液的等分试样直接加入到1,000mg/升、1,500mg/升、2,000mg/升、以及2,500mg/升的过乙酸溶液中。然后,在37℃下于改性的支原体液体培养基中对模型孵育48小时。图5显示在0、1,000、1,500、2,000、和2,500mg/升的溶液中,朊病毒模型的对数与时间的关系曲线。因为实际器械上高浓度的材料可以分解过乙酸,所以优选初始浓度为2,500mg/升的过乙酸。
实施例3
用1,500mg/升的过乙酸配方在25-60℃之间的不同温度下处理回肠液依赖生物(IFDO)形态的朊病毒模型的试样,然后在改性的支原体基琼脂中进行培养,如在实施例2中所述。图6说明温度分别为25、30、40、45、50、55、以及60℃时,朊病毒模型的对数下降与时间的关系曲线。在温度高于50℃时配方是最佳的。但是,由于温度高于约60℃时蛋白质可能会凝结(如在表4中所说明的),所以朊病毒变性的最佳温度为50-60℃,更明确地为53-57℃。
实施例4
为了测试整个去污过程,每试样106单位的回肠液依赖生物(IFDO)形态的朊病毒模型试样,直接暴露于在水中制备的碱性清洁剂(配方A和配方B)并轻轻地搅拌30分钟。取出试样,在55℃和2500mg/升过乙酸的条件下直接暴露于过乙酸配方(如实施例1中所述),然后在改性的支原体基琼脂中进行培养,如在实施例2中所述。
其结果总结在表6中:
表6
处理 | 在试样表面上的平均IFDO浓度(Log10) |
未处理的对照 | 6.5 |
清洁剂配方A | 2.9 |
清洁剂配方B | 3.2 |
清洁剂配方A,接着是过乙酸配方 | <1 |
清洁剂配方B,接着是过乙酸配方 | <1 |
Claims (24)
1.一种朊病毒灭活方法,其特征在于:
用攻击所述朊病毒的清洁剂预处理携带被所述朊病毒感染的材料的表面,所述清洁剂为碱性清洁剂和酶清洁剂中的至少一种;以及
用液态和气态中的一种氧化剂处理所述表面。
2.根据权利要求1所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述氧化剂是在液体溶液中。
3.根据权利要求1或2所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述氧化剂包括过乙酸。
4.根据权利要求3所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述过乙酸是在水溶液中,浓度为2,000-2,500ppm。
5.根据权利要求2所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述液体溶液进一步包括表面活性剂和缓冲剂,所述缓冲剂将所述溶液的pH值缓冲为接近中性pH值。
6.根据权利要求4所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述氧化剂处理步骤是在50-60℃温度下进行。
7.根据权利要求5所述的朊病毒灭活方法,其特征在于:
在用液体溶液中的氧化剂处理所述表面前,用表面活性剂、腐蚀抑制剂、和缓冲剂的水基溶液处理所述表面,所述缓冲剂将所述溶液缓冲为接近中性pH值;以及
在用水基溶液处理所述表面后,向所述水基溶液中加入所述氧化剂以形成所述液体溶液。
8.根据权利要求7所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述表面活性剂、缓冲剂、和腐蚀抑制剂的溶液在所述表面上循环至少1分钟,之后向所述溶液中加入所述氧化剂,并在所述表面上再循环所述溶液至少6分钟。
9.根据权利要求7或8权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述腐蚀抑制剂不含重金属。
10.根据上述权利要求1-2、4-8中任一权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述清洁剂是碱性清洁剂。
11.根据上述权利要求1-2、4-8中任一权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述用清洁剂预处理的步骤是在50-60℃之间进行。
12.根据上述权利要求1-2、4-8中任一权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述氧化剂包括在溶液中的过乙酸,而所述处理步骤是在53-57℃的温度范围内进行。
13.根据权利要求12所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述腐蚀抑制剂和所述缓冲剂不含重金属。
14.根据上述权利要求2、4-8中任一权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述液体溶液是至少1,000ppm过乙酸。
15.根据权利要求10所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,在所述过乙酸处理步骤之前,从所述表面漂洗所述碱性清洁剂。
16.根据权利要求15所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,包括:
用碱性清洁剂预处理所述表面并用包括过乙酸的氧化剂处理所述表面的步骤,所述步骤是在53-57℃之间的温度范围内进行;
用表面活性剂、腐蚀抑制剂、和缓冲剂的水基溶液处理所述表面的步骤,所述缓冲剂将所述溶液缓冲为接近中性pH值;以及
向所述水基溶液中加入所述氧化剂以形成液体溶液的步骤。
17.根据上述权利要求2、4-8、15-16中任一权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于:
用表面活性剂使朊病毒链不凝集。
18.根据上述权利要求2、4-8、15-16中任一权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于:
缓冲所述过乙酸至接近中性pH值。
19.根据上述权利要求2、4-8、15-16中任一权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于:
在所述过乙酸处理步骤之后,漂洗所述表面。
20.根据权利要求19所述的朊病毒灭活方法,其特征在于:
漂洗所述表面之后,干燥所述表面;
用微生物不渗透的阻挡层覆盖所述表面;以及
对被覆盖的表面进行最后灭菌处理以杀死微生物。
21.根据上述权利要求1-2、4-8、15-16、20中任一权利要求
所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述清洁剂是碱性清洁剂,包括:
重量百分比为20.0-41%的氢氧化钾;
重量百分比为0.4-8%的乙二胺四乙酸或其盐;
重量百分比为0.0-7%的葡萄糖酸盐;
重量百分比为0.3-6%的2-丙烯酸均聚物;
重量百分比为0.0-5%的C8两性羧酸酯;
重量百分比为0.0-10%的六偏磷酸钠;
重量百分比为0.0-4%的硅酸盐;
重量百分比为0.4-10%的丙烯酸均聚物;以及
重量百分比为0.0-10%的二甲基二烯丙基氯化铵和丙烯酰胺共聚物。
22.根据权利要求1-2、4-8、15-16、20所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述碱性清洁剂包括:
重量百分比为20.0-32%的氢氧化钾;
重量百分比为4.0-8%的乙二胺四乙酸;
重量百分比为1.0-5%的葡萄糖酸钠;
重量百分比为0.3-1%的2-丙烯酸均聚物;
重量百分比为0.0-2%的混合的C8两性羧酸酯;
重量百分比为0.0-10%的六偏磷酸钠;以及
水。
23.根据上述权利要求1-2、4-8、15-16、20中任一权利要求所述的朊病毒灭活方法,其特征在于,所述清洁剂具有至少500ppm的碱度。
24.根据权利要求1所述的朊病毒灭活方法,其中所述氧化剂包括浓度至少为1000ppm的过酸。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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