CN1249295A - 具有心血管药理活性的合成化合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有心血管药理活性的合成化合物,其特征在于该化合物名称为N－(2－羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯,经过药理实验,证明该化合物可用于治疗心血管疾病,具有毒性低,副作用小,对肝、肺、脾、肾基本无影响,有明显抗心律失常,抗动脉粥样硬化,抗血小板聚集作用等优点及效果。

Description

具有心血管药理活性的合成化合物及制备方法

本发明涉及一种具有心血管药理活性的合成化合物及制备方法。

心血管疾病是发病率高，难以治愈的疾病之一，临床多采用硝酸酯类心血管药物治疗以硝酸甘油为代表，在心血管疾病的治疗中起着重要的临床作用，此类药物主要以扩张冠脉血管，增加心肌营养性血流量和减少心肌耗氧量而发挥心血管效应，临床上主要用于急慢性心绞痛的治疗。但是，由于它们的生物半衰期(t1/2)相对较短，因此，现有的硝酸酯类药物均有其不足之处，长期应用不良反应多，其代谢物的堆积还降低疗效。

本发明的目的正是为了克服上述已有技术的缺点与不足，而提供一种可以提供一氧化氮的硝基供体化合物，即N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯拟用于治疗心血管疾病。

本发明还提供了该化合物的制备方法。

本发明的目的是通过下列技术方案实现的：

具有心血管药理活性的合成化合物，其特征在于该化合物名称为N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯，分子式为：C₁₂H₁₅N₂O₆，结构式为：其物理性质：m.p.132-134℃¹H-NMR：δ_H(CDCL₃)3.9(S，OMe)，6.2(d，J15.5Hz，H²)，7.0(m，3×7.5(d1H/15.5Hz，)，5.8(S，1H)，3.7(t，-2H，4.6(t，-2H)p.p.m元素分析：理论值C：51.11，H：4.97，N：9.92.实测值C：51.00，H：4.92 N：9.93.IR：V_max(KBr)cm^-1 3435，3257，1708，1649，1230，987，763；MSm/e 282(M+)，218，203，46。

具有心血管药理活性的合成化合物的中间体，其特征在于该中间体名称为N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯，分子式为C₁₄H₁₇N₂O₇，结构式：

其物理性质：

¹H-NMR：δH(DMSO)：2.3(s，3H)，3.9(s，3H)，6.6(d，1H，J 15，8)，7.1(m.3H)，7.4(d，1H，J 15.8Hz)3.5(t，2H)，4.5(t，2H)，8.3(b s，1H)p.p.m

元素分析：理论值：C：51.85，H：4.94，N：34.57

          实测值：C：51.92，H：4.91，N：34.62

MS(FAB)m/e：325.1(M⁺+1)，280.1，237.1，219.0，177.0，137.0，43.1。

m.p：114-115℃

IR：V_max(KBr)3260，3080，1767，1654，1625，1506，1277，1201，883，730，691，604。

化合物的制备方法，其特征在于它按下述步骤进行：

a)将4-5g乙酰阿魏酸加入二氯甲烷500-1000ml和1-10滴N，N-二甲基甲酰胺，在-15℃～-5℃冰浴进行搅拌，并缓缓滴入2-10ml草酰氯或氯化亚砜，时间为0.5-1.5小时，滴完后加热至15-80℃，继续搅拌1-5小时后减压蒸干溶剂，得到乙酰阿魏酰氯淡黄色固体；

b)将1-5g氨基乙醇硝酸酯粉末，3-10g碳酸氢钠或氢氧化钠溶于500-1000ml水中制成水溶液加入三颈瓶中，再加入甲苯20-150ml，然后再将(a)项制备的2-8g乙酰阿魏酰氯用甲苯溶解，缓缓滴入瓶中，在30-60℃搅拌3-5小时后减压抽滤，用丙酮重结晶，得到中间体N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯白色粉末；。

c)最后将0.6-0.7g(1.85mol)(b)项生成的N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯加入1.5-2.0ml浓度为25-28％氨水，甲醇6-8ml，水70-100ml，加热至60℃回流30-80min，减压蒸馏析出N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯黄色固体，用乙酸乙酯重结晶，得到淡黄色本发明的合成化合物粉末。

本发明的化合物采用的乙酰阿魏酸，化学名为3-(3-甲氧基-4-乙酰基)苯基-2-丙烯酸，结构式为乙酰阿魏酸经过酰氯化生成乙酰阿魏酰氯，学名为3-(3-甲氧基-4-乙酰基)苯基-2-丙烯酰氯，其反应式及结构式为：

然后乙酰阿魏酰氯再经过氨基乙醇硝酸酯进行酯化反应，其反应式及结构式如下：生成物为N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯即为中间体，中间体再经过脱乙酰基即得到本发明产品，其反应式及结构式如下：

N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯是一种可以提供一氧化氮(NO)的硝基供体化合物，该化合物经过北京军区总医院临床药理研究，经药理实验观察发现，其具有治疗心血管疾病，抗血小板聚集的作用。

硝基扩血管药物在临床应用治疗心血管疾病已达百余年，直到80年代才逐步认识到其作用机理与一氧化氮的关系，随着血管内皮因子的化学本质的揭示，发现了NO兼有第二信使和神经递质的作用，因此它是一种新的细胞间信息交换的重要载体，在治疗心血管系统疾病而言，NO通过其松弛血管平滑肌而调节血管扩张力并调节局部组织血流分布，该药物除能扩张冠脉外，尚具有不依赖于血流动力学改变的直接发保护缺血心肌的作用，并能对抗多种实验性心律失常，具有明显的对抗心肌缺血再灌注损伤，包括心肌缺血再灌注心律常的发生，通过NO途径升高血浆及血小板内的环鸟苷酸浓度，发挥环鸟苷酸第二信使的作用，抑制肌浆网对钙离子的释放，降低血浆及血小板中的钙离子浓度，对ADP引起的血小板聚集有明显的抑制作用，在抗冠状动脉粥样硬化方面有广阔的应用前景。

下面就药理作用实验结果分叙如下：

药理实验结果：

本实验由北京军区总医院临床药物研究所完成，并提供报告。

1、最大耐受性试验

取体重20±2g的小鼠20只，雌雄各半，按0.8mg/20g灌胃N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯，(浓度为125mg/ml的混悬液)，连续观察14天内动物的死亡情况，结果，14天内，所有动物进食活动正常，没有死亡，认定其口服N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯的LD₅₀＞5g/kg，属于实际无毒。

2、NO₂代谢产物的测定结果：

取体重180-220g健康的Wistar大鼠30只，雌雄各半，随机分成为实验组和对照组，实验组按体重500μg/kg给药，药配成1mg/ml溶液，对照组给等体积生理盐水，腹腔连续注射七天，七天后两组均取血1ml，按照亚硝酸盐试剂盒的操作测定代谢产物的含量。

按公式样品含量(μmol/L)＝样品吸收度/标准品吸收度×12.5计算。见表1。表1 NO₂代谢产物的结果组别     动物数(n)      吸收度      NO2含量(μmol/L)给药组    15         0.646±0.057     17.94±1.58^*对照组    15         0.514±0.044     14.28±1.09标准品                   0.45             12.5

由于NO化学本质极不稳定且易与O₂生成No_2-，后者在体液中迅速转变为NO₂和NO₃而失活，故本实验采用检测NO₂盐的方法来反应体内NO的含量。N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组检测发现，No₂含量明显增加。对照组与N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组比较：NO₂盐含量相差显著(P＜0.05)。提示N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯的作用机理与NO的途径有密切关系。

3、cGMP的放射免疫测定：

取体重为180-220g健康的Wistar大白鼠20只，雌雄各半，随机分两组，对照组给予生理盐水，实验组按体重500μg/kg给药，腹腔连续注射七天，七天后两组取血，检测大鼠cGMP的正常值及心肌组织的CGMP，其结果如下：见表2。

表2  N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯对血浆及心肌cGMP的影响组别     动物数  血浆cGMP(μmol/L)     心肌cGMP(μmol/L100mg)对照组    10     102.6193±25.1726      19.7630±6.4838给药组    10     157.5960±35.2279***   32.1056±6.1290***

与对照组比较，** P＜0.001

4、急性降压结果：

本实验在麻醉与非麻醉两个状态下观察N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯的急性降压作用。

4.1、N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯对大量清醒状态下的急性降压作用

取健康Wistar大鼠45只，雌雄兼用，体重180-220g，随机分三组(15只/组)。第一组：腹腔注射生下盐水。第二组：腹腔注射N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯。第三组：腹腔注射硝酸甘油作阳性对照之用。各组均采用500μg/kg，试验药均配成1mg/ml的药液)。分别将三组大鼠装入鼠用尾动脉血压仪，待其血压稳定后，按上述剂量给药，测定给药后60分钟血压及心率。结果见表3：

表3清醒状态下N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯急性降压结果(500μg/kg)项目                     血压平均值mmHg     心率平均值次/分正常值                    130.93±8.87          401±36N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯118.98±8.34          390±52硝酸甘油                  119.47±8.90          388±45

4.2、麻醉状成下N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯的急性降压作用。

取健康Wistar大鼠70只，雌雄各半，体重180-220g，随机分三组，对照组给生理盐水(10只)，其余二组均采用(500μg/kg，800μg/kg，1000μg/kg)三个剂量组(试药均配成1mg/ml的药液)。分别将三组大鼠用25％的乌拉坦按0.6ml/100g麻醉，仰位固定，暴露气管T形切开，接动物用呼吸机，分离颈动脉。用肝素冲洗塑料管并将其插入分离颈动脉，接四道生理记录仪，记录血压及心率，分离股静脉待用。大鼠血压及心率稳定后，分别按上述剂量股静脉给药。连续测定给药后60分钟的血压及心率，其结果见表4。

表6、麻醉状态下N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯的急性降压结果：(血压：mmHg，心率次/分)生理盐水组       注射N-(2-羟乙基)       注射硝酸甘油

              阿魏酰胺硝酸酯

            小剂   中剂   大剂    小剂   中剂   大剂

            量组   量组   量组    量组   量组   量组动物数10(只)  10(只) 10(只) 10(只)  10(只) 10(只) 10(只)

1    124    120    95     85      119    90     80血  2    120    119    99     76      115    95     70压  3    125    112    90     80      113    81     66测  4    125    109    82     72      118    76     56定  5    128    110    85     66      119    80     45时  10   128    115    88     66      120    81     50间  15   126    115    89     63      123    97     56

30   131    120    91     72      121    100    55min 45   124    120    93     70      124    105    90

60   125    124    99     74      123    119    100心  1    400    395    388    360     405    400    296率  2    411    380    377    328     411    409    267测  3    360    377    369    300     415    390    264定  4    366    362    336    299     398    366    260时  5    355    344    321    251     326    379    268间  10   389    356    334    299     366    388    299

15   399    399    370    265     377    395    310min 30   402    411    409    296     399    411    353

45   420    419    423    322     402    412    360

60   409    369    365    303     405    399    375

注：大剂量组(1000μg/kg)，中剂量组(800μg/kg)，小剂量组(500μg/kg)

清醒大鼠实验组表明，注射N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯后60分钟，有一定的降压作用，但心率似有上升之趋势，由于大鼠均清醒状态，血压下降时，正常功能的心脏由于Starting调节，心率加快来补偿。

麻醉大鼠实验组结果表明，注射N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯后2-35分钟，有一定的降压作用。给药后心率下降，大剂量(1000μg.kg)，心率下降可达24.6％。这一点对心血管系统疾病有特殊意义。

两种状态下，注射硝酸甘油后血压都下降，程度较大，但维持时间相对较短且心率都似有上升趋势。

5、该N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯对垂体后叶素引发心肌缺血的保护作用

取健康大鼠36只，雌雄各半，体重180-220g，随机分三组，分别给三组大鼠用25％的乌拉坦麻醉，仰位固定，分离股静脉，连接心电图机，记录II导联心电图，异常则弃去不用。第一组静脉注射N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯1mg/kg，第二组静脉注射生理盐水1mg/kg，注射后2分钟，股静脉注射垂体后叶素75μ/kg，8秒注射完，注射后0-30秒，60秒，90秒，120秒，180秒，240秒，300秒，420秒，600秒和900秒各记录心电图一次。

给予垂体后叶素后心电图变化分二期：

第一期：注射后5-30秒，T波增高，ST段抬高＞0.1mV。

第二期：注射后30秒至数分，T波低平、双相、倒置、心率变慢，P-R、Q-T间期延长。

效果判定：以未出现上述第一期或第二期缺血性变化者为阴性。

心肌缺血阴性率＝不出现心肌缺血的动物数/总动物数。

实验组与对照组进行卡方检验求P值：见表5

表5  实验组与对照组阴性率比较表组别    剂量     心肌缺血阴性率

     (mg/kg)N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯1      7/12*硝酸甘油      1      9/12**生理盐水      1ml    1/12与生理盐水比较  P＜0.05  **P＜0.01

N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯对大鼠急性心肌缺血有保护作用，作用强度与硝酸甘油无显著性差别。

6、N-(2-羟乙基)N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

取健康Wistar大鼠45只，雌雄兼用，体重180-220g，分别将三组大鼠用25％的乌拉坦按0.6ml/100g麻醉，仰位固定，暴露气管T形切开，接动物用呼吸机，分离颈动脉。用肝素冲洗塑料管并将其插入分离的颈动脉，接四道生理记录仪，记录血压及心率，分离股静脉待用。在大鼠左侧第4-5肋问切开，剪断4、5肋骨，暴露心包，撕开心包膜，用手指从对侧轻压，将心脏推出。分离冠状动脉(LCA)起始部附近结扎5分钟(结扎即刻起分别按上述剂量静脉给药)，然后放开再灌注60分钟。出现任何异常不作处理，以观察其自然演变。试验前、开胸、结扎LCA即刻、2、5、15、30、60分钟，同步记录心电图、动脉收缩压、平均压和舒张压。实验全程监测。各组均采取左室肌标本，作心肌电镜形态学检查。

对照组心律失常占100％，其中6只死亡，仅一只自动复律，N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组心律失常占40％，无死亡，均自动复律，硝酸甘油组心律失常占60％，死亡3只，其余自动复律。N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯能降低再灌注室颤发生率，两组与对照组比较，具有显著性差异。

比较心肌左室压，N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组与硝酸甘油组相比，后者无论在左室压及维持时间上都明显低于N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组，提示二组在心肌缺血再灌注时尚可维持心功能，且心肌缺血再灌注组优于硝酸甘油组。

7、N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯抗血小板聚集作用

从大体功能变化，单个血小板功能、形态、离子含量为研究对象，进行血小板聚集试验。

7.1抑制血小板聚集试验

健康Wistar大鼠70只，雌雄各半，体重180-220g，随机取10只大鼠作生理盐水阴性对照组，其余60只大鼠随机分成两组。

实验组：静脉注射N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯，阳性对照组：静脉注射阿司匹林。各组均采用(300μg/kg，500μg/kg，800μg/kg)三个剂量组，(均配成1mg/ml的液)，连续给药六天。在第三天，第六天各采血2ml，其中0.8ml血加0.2ml枸橼酸钠(3.8％)抗凝，另取0.8ml血加0.2ml EDTA抗凝，将血标本放入血小板聚集仪用ADP诱导，检测其聚集力的变化。

发现对照组血小板凝聚力明显高于N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组和阿司匹林(ASA)组，而血小板抑制力则明显低于N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组和阿司匹林(ASA)组，都有显著差异(P＜0.05)，N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组与同剂量的阿司匹林(ASA)组比较，两组也有显著差异，其中N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯的血小板抑制力明显高于阿司匹林(ASA)，而其血小板凝聚力则明显低于阿司匹林(ASA)，且与剂量、持续给药时间呈正相关。

7.2 N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯对血小板内钙与环鸟苷酸含量的影响

将7.1各组的第三天，第六天采集的血2ml，按1∶9的比例加入3.8％的枸橼酸钠抗凝，800转/分钟离心5分钟。制备出富血小板血浆(PRP)。用贫血小板血浆PPP)，将PRP中的血小板浓度调节至200×10⁹个/L后加入终浓度为10μmol/L的Floμ3-AM。另取一份实验组的PRP，加入终浓度为0.5mmol/L的精氨酸甲酯(L-NAME)，37℃孵育30分钟，加入50 IU/ml的Apyrase后，2000转/分钟离心10分钟得到血小板沉淀，用无钙HEPES缓冲液洗涤一次后配成200×10⁹/L的血小板悬液，在流式细胞仪上分别测得加入10μmol/L的ADP和10μmol/L的A23187的两个荧光强度值A、B及A/B值，衡量ADP诱导的血小板钙离子升高的程度。发现注射N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯前后单个血小板的聚集度和Ca²⁺的浓度有很大变化，给药后单个血小板的聚集度和Ca²⁺的浓度有很大变化，给药后单个血小板的聚集度和Ca²⁺的浓度都下降，且与给药剂量呈正相关。另一组给药后，同时给精氨酸甲酯(NO合成酶的抑制剂)，发现单个血小板的聚集度和Ca²⁺的浓度含量变化不大，且与只给N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组有显著性差异。

7.3血小板胞浆cGMP浓度检测

样品采集如上。将EDTA抗凝血制备的PRP作血小板计数后，取200μl PRP加入10μmol/L的ADP诱导血小板聚集。3000转/分钟，离心15分钟，弃去上清，沉淀以PH4.75的醋酸缓冲液悬浮后放入-20℃冰箱冻融一次，离心取上清液用125I-cGMP试剂盒检测血小板的cGmp的浓度。结果N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯组cGMP含量上升且与给药剂量呈正相关，而加入精氨酸甲酯(NO合成酶的抑制剂)，cGMP含量与生理盐水组比较含量变化不大，与只给N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯比较有显著性差异，进一步证实了N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯先在介质里形成NO，然后激活环氧化酶，使组织中cGMP含量增加的途径。

本发明技术与已有技术相比具有如下优点及效果：

1、N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯是一种新型硝基供体化合物，较安全可以长期使用。其毒性较低，副作用较少。对肝、肺、脾、肾基本无影响，而且不会引起心率加快，抑制心脏兴奋的传导，适用于低剂量长期使用。

2、N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯的作用机理，虽不十分清楚，但其通过一氧化氮(NO)途径产生药理作用，现已证实NO是cGMP环化酶的激动剂，而cGMP激活相应的蛋白激酶，从而使平滑肌松驰。

3、N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯在心血管系统中有其独特之处。它在降压的同时，可增加主动脉的血流量，由于外周动脉阻力下降，肾动脉及股动脉血流量是增加的。因此血压虽下降，但主动脉血流量增加，冠脉的灌注并不下降，其血流量也不减少。

4、近代，临床治疗冠状动脉阻塞性疾病采用溶血栓疗法，冠状动脉成型术、冠状动脉搭桥术、心内手术及心脏移植均可因心脏再灌注引起心率失常。室颤(VF)是造成死亡的主要原因，因此研究再灌注心肌损伤的防治药物意义十分重大，而N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯降压的同时，冠脉的灌注并不下降的独特性可以有效的保护心肌，免受缺血再灌注的损伤，有效的防治了临床医生十分头疼的心肌“窃血”

5、在心血管系统疾病中，心律失常极为重要。房早、房速、房颤、室早(VPC)、室速(VT)及室颤(VF)等，常导致严重后果。因此对一个心血管系统用药来说，抗心律失常作用是一个重要方面，而N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯正具有明显的抗心律失常作用。

6、N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯应用前景范围较广，特别是心血管系统中，更具有其特殊性。临床常用阿司匹林(ASA)与钙拮抗剂-维拉帕米(Verapamil，Ver)或用肝素钠与硝酸甘油并用，利用两药的特性以期收到联合用药的效果.但效果并不理想，且长期应用不良反应较多，其代谢物的堆积还降低疗效。N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯具有降压，保护缺血心肌作用，同时动物实验也发现，N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯具有抗血小板聚集的作用。这一结果提示，阿魏硝胺似在抗动脉粥样硬化中有一定的应用前景。

实施例1：

将乙酰阿魏酸4g加入二氯甲烷500ml，加入N，N-二甲基甲酰1滴在-15℃冰浴进行搅拌，缓缓加入草酰氯2ml，时间0.5小时，滴完后加热15℃，搅拌5小时，减压蒸干溶剂，得到3g乙酰阿魏酰氯，再将氨基乙醇硝酸酯粉末1g，碳酸氢钠10g溶于500ml水中，加入三颈瓶中，再加入甲苯20ml，再将前述的乙酰阿魏酰氯2g的甲苯溶解缓缓滴入瓶中，在30℃搅拌5小时，减压抽滤，用丙酮重结晶，得到白色粉末0.35g的N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯，最后将0.6g(1.85ml)的N-(2-羟乙基)乙酰魏酰胺硝酸酯，加入25％氨水1.5ml，甲醇6ml，水7.5ml，加热回流30min，减压蒸馏，析出N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯黄色固体，用乙酸乙酯重结晶，得到淡黄色粉末0.4g为本发明产品。

实施例2：

将乙酰阿魏酸5g加入二氯甲烷1000ml，加入N，N-二甲基甲酰10滴在-5℃冰浴进行搅拌，缓缓加入氯化亚砜10ml，时间1.5小时，滴完后加热80℃，搅拌5小时，减压蒸干溶剂，得到4g乙酰阿魏酰氯，再将氨基乙醇硝酸酯粉末5g，氢氧化钠3g溶于1000ml水中，加入三颈瓶中，再加入甲苯150ml，再将前述的乙酰阿魏酰氯2g的甲苯溶解缓缓滴入瓶中，在60℃搅拌3小时，减压抽滤，用丙酮重结晶，得到白色粉末1.6g的N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯，最后将0.7g(1.85ml)的N-(2-羟乙基)乙酰魏酰胺硝酸酯，加入25％氨水2.0ml，甲醇8ml，水100ml，加热回流80min，减压蒸馏，析出N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯黄色固体，用乙酸乙酯重结晶，得到淡黄色粉末0.46g为本发明产品。

Claims (3)

1、具有心血管药理活性的合成化合物，其特征在于该化合物名称为N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯，分子式为：C₁₂H₁₅N₂O₆，结构式为：

其物理性质：

m.p.132-134℃

¹H-NMR：δ_H(CDCL₃)3.9(S，OMe)，6.2(d，J 15.5Hz，H²)，7.0(m，3×7.5(d1H/15.5Hz，)，5.8(S，1H)，3.7(t，-2H，4.6(t，-2H)p.p.m元素分析：理论值C：51.11，H：4.97，N：9.92.实测值C：51.00，H：4.92 N：9.93.IR：V_max(KBr)cm^-1 3435，3257，1708，1649，1230，987，763；MSm/e  282(M⁺)，218，203，46。

2、具有心血管药理活性的合成化合物的中间体，其特征在于该中间体名称为N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯，分子式为C₁₄H₁₇N₂O₇，结构式：

其物理性质：¹H-NMR：δH(DMSO)：2.3(s，3H)，3.9(s，3H)，6.6(d，1H，J 15，8)，7.1(m.3H)，7.4(d，1H，J 15.8Hz)  3.5(t，2H)，4，5(t，2H)，8.3(bs，1H)p.p.m元素分析：理论值：C：51.85，H：4.94，N：34.57

       实测值：C：51.92，H：4.91，N：34.62

MS(FAB)m/e：325.1(M⁺+1)，280.1，237.1，219.0，177.0，137.0，43.1。

m.p：114-115℃

IR：V_max(KBr)3260，3080，1767，1654，1625，1506，1277，1201，883，730，691，604。

3、如权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于它按下述步骤进行：

a)将4-5g乙酰阿魏酸加入二氯甲烷500-1000ml和1-10滴N，N-二甲基甲酰胺，在-15℃～-5℃冰浴进行搅拌，并缓缓滴入2-10ml草酰氯或氯化亚砜，时间为0.5-1.5小时，滴完后加热至15-80℃，继续搅拌1-5小时后减压蒸干溶剂，得到乙酰阿魏酰氯淡黄色固体；

b)将1-5g氨基乙醇硝酸酯粉末，3-10g碳酸氢钠或氢氧化钠溶于500-1000ml水中制成水溶液加入三颈瓶中，再加入甲苯20-150ml，然后再将(a)项制备的2-8g乙酰阿魏酰氯用甲苯溶解，缓缓滴入瓶中，在30-60℃搅拌3-5小时后减压抽滤，用丙酮重结晶，得到中间体N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯白色粉末；。

c)最后将0.6-0.7g(1.85mol)(b)项生成的N-(2-羟乙基)乙酰阿魏酰胺硝酸酯加入1.5-2.0ml浓度为25-28％氨水，甲醇6-8ml，水70-100ml，加热至60℃回流30-80min，减压蒸馏析出N-(2-羟乙基)阿魏酰胺硝酸酯黄色固体，用乙酸乙酯重结晶，得到淡黄色本发明的合成化合物粉末。