CN1245207C - 制备莪术油葡萄糖注射液的改进的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及制备一种制备莪术油葡萄糖注射液的改进的方法。本发明的技术方案包括：取莪术油适量，加入合适量的吐温-80加热，充分乳化；取合适量的葡萄糖配成一定浓度的溶液，加入适量的活性炭，搅拌，煮沸一定的时间，过滤；将合并前面所取得的两种液体，加入注射用水至近全量及以体积百分比万分之三-万分之十的柠檬酸钠或柠檬酸、以体积百分比计万分之一-万分之二的EDTA-2Na溶解并将pH值调节为至一定的值3.5-5.0，然后按大容量注射液的生产操作进行生产。本发明还涉及由上述的方法制备的莪术油注射液。由本发明方法获得的莪术油注射液稳定性较现有技术更好。
Description
技术领域
本发明涉及一种制备莪术油葡萄糖注射液的改进的方法。
背景技术
莪术油是从中药莪术中提取的成分，它含有20多种化学成分，具行气活血化瘀，清热消积止痛，去腐生肌的作用。经现代药理学研究，发现莪术油具有如下作用：1)广谱抗病原微生物、抗炎作用；2)促进机体免疫反应：增加末梢血白细胞数，增强吞噬细胞的吞噬能力；和3)抗癌作用：直接抑制和破坏癌细胞，但对正常组织无影响。可防治宫颈癌的发生，抑制组织异常增生，促进增生组织萎缩。
现有的莪术油有多种剂型，如栓剂、胶囊、冻干粉针、片剂及注射液等等，但其中以注射液的使用最为方便，而且效果最明显。现有的莪术油注射液的制备方法大致如下：将莪术油充分乳化以后，与葡萄糖浓配液混合，在稀配以后进行粗滤，将获得的粗滤液经过精滤，再经过通氮、灌装、轧盖、灭菌、检查、包装后即获得最终产品(见图1)。然而，经此常规方法所得的莪术油注射液稳定性较差，不容易保存，其中的5-羟甲基糠醛变化较大。因此，存在能获得稳定的、在储存后不容易发生化学或物理变化的莪术油注射液的方法的需要。
发明内容
为了解决现有技术的不足，本发明人发明了一种方法，所述的方法能有效地改善莪术油注射液的稳定性，从而完成了本发明。
因此，本发明的目的是提供一种改进的制备莪术油的方法，由所述的方法制得的莪术油注射液具有良好的稳定性，在储存不同的时间以后，莪术醇的含量、pH值、色泽、均比较稳定，5-羟甲基糠醛变化小。
本发明的技术方案包括：(1)取莪术油适量，加入合适量的吐温-80加热，充分乳化；(2)取合适量的葡萄糖配成一定浓度的溶液，加入适量的活性炭，搅拌，煮沸一定的时间，过滤；(3)将上述取得的两液合并后，加入注射用水至近全量及体积比为万分之一至万分之十的柠檬酸钠或体积比为万分之一至万分之十的柠檬酸或体积比为万分之一至万分之二的EDTA-2Na或其结合，充分溶解并将pH值调至3.5-5.0，然后按大容量注射液的生产操作进行生产。然后按大容量注射液的生产操作进行生产。
优选地，所述的柠檬酸钠或柠檬酸的浓度为万分之三。
本发明也涉及由所述的方法生产的莪术油注射液。
附图简述
图1显示现有技术中关于莪术油注射液的生产流程图。
图2显示本发明的具有更好稳定性的莪术油注射液的方法的生产流程图。
具体实施方式
为了具体描述本发明，以下以实施例的方式对本发明具有更好稳定性的莪术油的生产方法进行了描述。
实施例1
取莪术油相当于莪术醇1.6g(以莪术醇含量为100％投料)加入17.6g吐温-80温热充分乳化得混合液；
取180g无水葡萄糖配成60％的溶液，加入0.5ml的1％盐酸及活性炭2g搅拌，煮沸30分钟，取出，冷却至50～60℃，过滤去炭得混合液；
将上述乳化混合液和去炭混合液合并，加水至近4000ml等分为两份。
将上述获得的混合液中的一份的pH值，用5％NACL或HCL调节为4.0～4.5，加水至2000ml，粗滤，再过0.45μm及0.22um的滤膜精滤，然后灌装于100ml的输液瓶中，通氮气，压盖，在105℃经30分钟灭菌，得注射液批号1中的注射液A。
将上述获得的混合液中的另一份中加入1g柠檬酸钠和0.2gEDTA-2Na，溶解，将pH值，用5％NACL或HCL调节至4.0～4.5，加水至2000ml，粗滤，过0.45μm的滤膜精滤，灌装于100ml的输液瓶中，通氮气，压盖，105℃——30分钟灭菌，得注射液批号1中的注射液B。
实施例2-5
根据实施例1的生产工艺，按照表1中所用的莪术油和所用的吐温的不同，分别生产批号为2-5的A、B两液。
实施例6
本实施例比较了A和B两样品多种稳定性指标的变化。
A、B样品同时测定灭菌前后的含量，pH值，5-羟甲基糠醛计算灭菌后含量下降的百分数，余下部分一部分在37～40℃恒温箱中加速，另一部分留样室中保存，1个月，2个月，3个月，6个月，12个月及18个月同时测定A、B室温贮存及加速试验(1个月，2个月，3个月)的样品的含量，pH值，5-羟甲基糠醛，计算含量下降的百分数。(同时用同一对照品，相同试剂，同时操作可以消除对照品，试剂及操作人员引起的误差，增加A、B样品的可比性。)
1、灭菌前后变化
A、B产品灭菌前后莪术醇含量变化
A、B莪术油葡萄糖注射液灭菌后莪术醇含量下降比较，结果见(表1)。所用莪术油为浙江瑞安市制药厂生产，所用吐温为江苏晨牌药业有限公司生产，所用柠檬酸钠为台山市新宁制药厂生产，所用EDTA-2Na汕头光华制药厂生产。
表1不同处方的莪术油葡萄糖注射液灭菌后含量变化
| 批号 | 所用莪术油 | 所用吐温 | A | B | ||||
| 灭菌前％ | 灭菌后％ | 下降率％ | 灭菌前％ | 灭菌后％ | 下降率％ | |||
| 1 | 000801 | 010301 | 90.82 | 82.06 | 9.65 | 89.81 | 85.50 | 4.80 |
| 2 | 000804 | 010301 | 96.80 | 91.12 | 5.87 | 96.20 | 93.31 | 3.00 |
| 3 | 010702 | 010301 | 91.04 | 85.79 | 5.77 | 92.24 | 88.94 | 3.58 |
| 4 | 010701 | 010301 | 94.05 | 89.58 | 4.75 | 93.70 | 92.46 | 1.32 |
| 5 | 001202 | 010301 | 97.10 | 92.63 | 4.60 | 98.07 | 96.16 | 1.90 |
从表1可以看出：A产品比B产品灭菌后莪术醇含量下降幅度大得多，说明B比A稳定。
A、B产品灭菌前后pH值变化
A、B莪术油葡萄糖注射液灭菌后溶液的pH值变化，结果见(表2)
表2不同处方莪术油葡萄糖注射液灭菌后溶液的pH值变化
| 批号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
| A | B | A | B | A | B | A | B | A | B | |
| 灭菌前pH值 | 4.40 | 4.30 | 4.30 | 4.30 | 4.35 | 4.40 | 4.32. | 4.30 | 4.52 | 4.52 |
| 灭菌后pH值 | 4.25 | 4.30 | 4.20 | 4.30 | 4.35 | 4.40 | 4.20 | 4.30 | 4.30 | 4.55 |
从表2可以看出：B产品灭菌前后pH值几乎无变化，A的产品灭菌后pH值稍微下降。
A、B产品灭菌前后5-羟甲基糠醛的变化
A、B的莪术油葡萄糖注射液灭菌前后5-羟甲基糠醛的变化，结果见(表3)
表3不同处方莪术油葡萄糖注射液灭菌前后5-羟甲基糠醛值变化
| 批号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
| A | B | A | B | A | B | A | B | A | B | |
| 灭菌前 | 0.158 | 0.169 | 0.164 | 0.166 | 0.151 | 0.158 | 0.204 | 0.204 | 0.178 | 0.178 |
| 灭菌后 | 0.196 | 0.188 | 0.193 | 0.182 | 0.186 | 0.169 | 0.267 | 0.247 | 0.207 | 0.201 |
| 升高％ | 24.0 | 11.2 | 17.7 | 9.64 | 23.2 | 6.96 | 30.9 | 21.1 | 16.3 | 12.9 |
从表3可以看出：A的产品灭菌后5-羟甲基糠醛比B产品灭菌后5-羟甲基糠醛升高幅度大。
灭菌前后溶液的色泽
灭菌前A、B的产品色泽均为无色，但是A产品灭菌后从无色变为极淡黄色，而B的产品仍为无色。
2、40℃加速的稳定性考察
A、B产品40℃加速后含量变化情况
见表4。
表4不同处方的莪术油葡萄糖注射液40℃加速后含量变化
| 批号 | 一个月 | 二个月 | 三个月 | |||||||||||||||
| A | B | A | B | A | B | |||||||||||||
| 原含量％ | 现含量％ | 下降％ | 原含量％ | 现含量％ | 下降％ | 原含量％ | 现含量％ | 下降％ | 原含量％ | 现含量％ | 下降％ | 原含量％ | 现含量％ | 下降％ | 原含量％ | 现含量％ | 下降％ | |
| 1 | 82.06 | 67.99 | 17.14 | 85.50 | 82.67 | 3.31 | 82.06 | 57.13 | 30.38 | 85.50 | 77.80 | 9.00 | 82.06 | 54.62 | 33.44 | 85.50 | 70.50 | 17.5 |
| 2 | 91.12 | 68.26 | 25.10 | 93.31 | 88.66 | 4.98 | 91.12 | 58.47 | 35.83 | 93.31 | 88.90 | 4.72 | 91.12 | 63.36 | 30.46 | 93.31 | 85.73 | 8.12 |
| 3 | 85.79 | 61.09 | 28.79 | 88.94 | 83.50 | 6.12 | 85.79 | 68.86 | 19.7 | 88.94 | 86.92 | 2.27 | 85.79 | 60.36 | 29.64 | 88.94 | 84.60 | 4.88 |
| 4 | 89.58 | 75.70 | 15.50 | 92.46 | 92.39 | 0 | 89.58 | 67.20 | 24..98 | 92.46 | 84.15 | 8.99 | 89.58 | 59.90 | 33.13 | 92.46 | 76.42 | 17.35 |
| 5 | 92.63 | 77.93 | 15.87 | 96.16 | 96.90 | -0.77 | 92.63 | 68.02 | 26.57 | 96.16 | 97.50 | -1.29 | 92.63 | 62.88 | 32.11 | 96.16 | 83.46 | 13.02 |
从表4可以看出：40℃加速三个月A的产品含量下降在30％左右；B产品含量下降在17％。可以得出：B的产品远比A的产品稳定。
A、B产品40℃加速后pH值变化
A、B莪术油葡萄糖注射液40℃加速后溶液的pH值变化，结果见(表5)
表5不同处方莪术油葡萄糖注射液40℃加速后溶液的pH值变化
| 批号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
| A | B | A | B | A | B | A | B | A | B | |
| 灭菌后pH值 | 4.25 | 4.30 | 4.20 | 4.30 | 4.35 | 4.40 | 4.20 | 4.30 | 4.30 | 4.55 |
| 1月后pH值 | 3.92 | 4.28 | 3.80 | 4.20 | 3.90 | 4.30 | 4.10 | 4.50 | 4.20 | 4.75 |
| 2月后pH值 | 3.75 | 4.12 | 3.75 | 4.24 | 3.87 | 4.25 | 3.75 | 4.24 | 3.95 | 4.64 |
| 3月后pH值 | 3.80 | 4.20 | 3.75 | 4.15 | 3.85 | 4.28 | 3.76 | 4.25 | 3.86 | 4.50 |
从上表可以看出：A、B产品40℃加速后pH值均下降，但是B产品pH值变化很小，仍在4以上，并趋于稳定，而A产品pH值变化较大，2个月后均在4以下。
A、B产品40℃加速后5-羟甲基糠醛的变化
A、B的莪术油葡萄糖注射液40℃加速前后5-羟甲基糠醛的变化，结果见表6。
表6不同处方莪术油葡萄糖注射液40℃加速前后5-羟甲基糠醛值变化
| 批号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
| A | B | A | B | A | B | A | B | A | B | |
| 灭菌后 | 0.196 | 0.188 | 0.193 | 0.182 | 0.187 | 0.169 | 0.257 | 0.247 | 0.207 | 0.201 |
| 1月后 | 0.290 | 0.221 | 0.315 | 0.220 | 0.298 | 0.203 | 0.304 | 0.280 | 0.288 | 0.219 |
| 2月后 | 0.390 | 0.254 | 0.390 | 0.236 | 0.327 | 0.224 | 0.375 | 0.298 | 0.358 | 0.238 |
| 3月后 | 0.397 | 0.291 | 0.394 | 0.275 | 0.376 | 0.243 | 0.529 | 0.381 | 0.428 | 0.313 |
从上表可以看出：A、B产品40℃加速后5-羟甲基糠醛都升高，但A的产品升高得多，加速2个月后A产品的5-羟甲基糠醛已经超过0.3。
3室温贮藏的稳定性考察
A、B的产品室温贮藏后莪术醇含量的变化
A、B的莪术油葡萄糖注射液室温贮藏后含量变化比较，结果见(表7)。
A、B的产品室温贮藏后5-羟甲基糠醛的变化
A、B的莪术油葡萄糖注射液室温贮藏后5-羟甲基糠醛的变化，(结果见表8)
不同处方的莪术油葡萄糖注射液室贮藏后含量变化(表7)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ||||||||||||||||
| A | B | A | B | A | B | A | B | A | B | |||||||||||
| 含量％ | 下降％ | 含量％ | 下％ | 含量％ | 下降％ | 含量％ | 下降％ | 含量降％ | 下％ | 含量％ | 下降％ | 含量％ | 下降％ | 含量降％ | 下％ | 含量降％ | 下％ | 含量％ | 下降％ | |
| 0 | 82.06 | 0 | 85.50 | 0 | 91.12 | 0 | 93.31 | 0 | 85.79 | 0 | 88.94 | 0 | 89.58 | 0 | 92.46 | 0 | 92.63 | 0 | 96.16 | 0 |
| 1 | 78.71 | 4.81 | 87.86 | -2.76 | 85.06 | 6.65 | 94.97 | -1.78 | 68.13 | 20.6 | 88.62 | 0.36 | 87.89 | 1.88 | 97.04 | -4.95 | 87.92 | 5.08 | 99.68 | -3.66 |
| 2 | 76.18 | 7.16 | 88.23 | -3.19 | 82.41 | 9.56 | 98.08 | -5.11 | 79.02 | 7.89 | 97.14 | 9.22 | 83.68 | 6.59 | 92.98 | -0.56 | 89.67 | 3.19 | 103.48 | -7.61 |
| 3 | 79.18 | 3.51 | 89.98 | -5.24 | 79.70 | 12.5 | 98.43 | -5.49 | 77.59 | 9.56 | 97.38 | 9.49 | 83.33 | 6.98 | 93.24 | -0.84 | 78.01 | 15.8 | 100.94 | -4.97 |
| 6 | 62.66 | 23.64 | 82.51 | 3.50 | 68.11 | 25.2 | 89.58 | 4.00 | 59.63 | 30.5 | 87.60 | 1.51 | 77.18 | 13.8 | 99.40 | -7.50 | 63.02 | 32.0 | 91.01 | 5.35 |
| 12 | 50.60 | 38.34 | 76.06 | 11.0 | 55.86 | 38.7 | 88.99 | 4.64 | 52.89 | 38.3 | 85.98 | 3.33 | 68.11 | 24.0 | 88.22 | 4.59 | 57.73 | 37.7 | 94.55 | 1.67 |
| 18 | 47.11 | 42.59 | 65.46 | 23.4 | 52.60 | 42.3 | 74.94 | 19.7 | 46.62 | 45.6 | 76.62 | 13.1 | 58.27 | 34.9 | 76.38 | 17.4 | 50.10 | 45.9 | 79.64 | 17.2 |
从表7可以看出：1、A产品放置后含量都下降，而B的产品放置的前3个月含量反而升高，上至一定后才开始下降，但下降的速度远比A的慢。可以看出：B的产品比A的产品稳定。
不同处方的莪术油葡萄糖注射液贮藏后5-羟甲基糠醛的变化，结果见(表8)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ||||||
| A | B | A | B | A | B | A | B | A | B | |
| 0 | 0.196 | 0.188 | 0.193 | 0.182 | 0.187 | 0.169 | 0.257 | 0.247 | 0.207 | 0.201 |
| 1 | 0.221 | 0.200 | 0.216 | 0.190 | 0.225 | 0.180 | 0.275 | 0.260 | 0.233 | 0.208 |
| 2 | 0.230 | 0.201 | 0.236 | 0.198 | 0.229 | 0.184 | 0.278 | 0.260 | 0.237 | 0.207 |
| 3 | 0.240 | 0.204 | 0.241 | 0.196 | 0.231 | 0.181 | 0.326 | 0.302 | 0.299 | 0.249 |
| 6 | 0.325 | 0.248 | 0.287 | 0.195 | 0.296 | 0.185 | 0.376 | 0.304 | 0.356 | 0.256 |
| 12 | 0.386 | 0.254 | 0.400 | 0.243 | 0.380 | 0.221 | 0.430 | 0.315 | 0.405 | 0.266 |
| 18 | 0.405 | 0.275 | 0.400 | 0.260 | 0.382 | 0.244 | 0.434 | 0.324 | 0.456 | 0.266 |
从表8可以看出：A、B的产品贮藏后5-羟甲基糠醛值都有升高，但A产品比B产品升高得多得多。
A、B的产品室温贮藏期pH值变化
不同莪术油葡萄糖注射液室温贮藏期间溶液的pH值变化，结果见(表9)
表9不同处方莪术油葡萄糖注射液室温贮藏后溶液的pH值变化
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | ||||||
| A | B | A | B | A | B | A | B | A | B | |
| 0 | 4.25 | 4.30 | 4.20 | 4.30 | 4.35 | 4.40 | 4.20 | 4.30 | 4.30 | 4.55 |
| 1 | 4.08 | 4.28 | 4.00 | 4.20 | 4.00 | 4.30 | 4.10 | 4.40 | 4.30 | 4.75 |
| 2 | 3.97 | 4.18 | 3.95 | 4.26 | 3.97 | 4.28 | 3.95 | 4.26 | 4.24 | 4.65 |
| 3 | 4.05 | 4.29 | 3.88 | 4.20 | 4.00 | 4.32 | 4.05 | 4.32 | 4.00 | 4.56 |
| 6 | 3.90 | 4.20 | 3.90 | 4.20 | 3.90 | 4.30 | 4.00 | 4.30 | 3.90 | 4.50 |
| 12 | 3.62 | 4.12 | 3.69 | 4.14 | 3.73 | 4.27 | 3.71 | 4.25 | 3.71 | 4.50 |
| 18 | 3.82 | 4.20 | 3.76 | 4.21 | 3.79 | 4.33 | 3.78 | 4.31 | 3.76 | 4.55 |
从表9可以看出：A产品贮藏后pH值均下降较太，但是B产品pH值几乎无下降。
A、B产品贮藏前后溶液的色泽变化
A、B的产品随着贮藏时间的加长产品的色泽加深。灭菌后A的产品色泽极淡黄色，贮藏一年半后变为4--5号色；而B的产品灭菌后几乎无色，贮藏一年半后不大于1号色。
溶血实验
我们对1、2、3、4、5，共5个批号A、B的产品(包含了所用的5个批号的油)进行溶血试验，结果均为阴性。
小鼠的毒性试验
申请人检测了1、2、3、共3批的毒性，结果均合格。
辅料对莪术油含量测定的影响
按常规方法和本发明方法配置的二种莪术油葡萄糖注射液对照液A、B。
1)按本发明方法配成不含莪术油及葡萄糖的空白溶液。
2)按中国药典2000年版二部莪术油葡萄糖注射液含量测定项下的方法对A、B及空白溶液进行含量测定。
3)测定A、B样品含量一致，而空白溶液在520mn处没有紫外吸收。说明辅料对莪术油葡萄糖含量测定没有影响。
从上面的结果可以看出：A、B两产品溶血、毒性无差异，从产品灭菌后，室温贮存及40℃加速试验结果都可以看出：B比A优越；同时，从稳定性考察看出：B的样品存放一年之内含量变化不大，一年后含量下降比较大，不同的莪术油产品下降的速度也不一样，有些莪术油产品下降得快，有些莪术油产品下降得慢，就我们试的5种莪术油产品按最不稳定的000801油只要灭菌后含量能达90％，放置一年半后仍在合格范围。
应该理解本发明方法可以在一定范围内有变化和修改。因此要指出前述的附图和说明不是要限制本发明，而是起说明作用，限定本发明的是本发明的权利要求。
Claims (3)
1.一种生产莪术油的改进的生产方法，所述的方法包括以下步骤：
(1)取莪术油，加入吐温-80加热，充分乳化；
(2)取葡萄糖配成一定浓度的溶液，加入活性炭，搅拌，煮沸一定的时间，过滤；
其特征在于在将上述取得的两液合并后，加入注射用水及体积比为万分之一至万分之十的柠檬酸钠或体积比为万分之一至万分之十的柠檬酸或体积比为万分之一-万分之二的EDTA-2Na或其结合，充分溶解并将pH值调至3.5-5.0，然后按大容量注射液的生产操作进行生产。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的柠檬酸钠或柠檬酸的浓度为以体积百分比计万分之三。
3.根据权利要求1或2所述的方法生产的莪术油注射液。
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