CN1216651C - 一种用于生物源性人工骨去抗原的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于生物源性人工骨去抗原的制备方法,将待处理的生物源性人工骨骨组织放入由阴离子表面活性剂制备的溶液中,经充分湿润、渗透,使溶液进入骨组织内部,脂肪组织随之脱落,分散于表面活性剂溶液中,经三蒸水漂洗脱去。采用的表面活性剂符合卫生安全标准,可在体内生物降解,无毒无害;并具有更好脱脂的效果,能有效的降低骨的抗原性;处理过的异体异种骨机械性能更强,生产过程无污染、产品无毒性物质残留且储存运输方便。
Description
所属技术领域:
本发明涉及医学骨外科中骨移植用活性生物源性人工骨材料技术领域,具体的说是涉及到一种用于生物源性人工骨去抗原的制备方法。
背景技术:
众所周知,骨移植是骨科中治疗骨缺损及创伤后骨关节因缺失而重建等最常用的治疗方法之一,而用于骨移植的材料的种类也很多。在这其中,活性生物源性人工骨由于其理化性质、空间结构及功能适应等各方面的优越性是骨移植临床使用最多的材料。而移植成功与否的关键在于移植后活性生物源性人工骨的免疫反应,造成免疫反应的是生物源性人工骨中所具有的抗原,如何去掉抗原降低移植后的免疫反应保障骨移植的成功,是近年来骨移植学术界的重要课题。
临床上降低免疫反应常用的技术有以下几种:
1.温冷冻法或冷冻干燥法:是目前应用的最广的异体骨处理和贮存方法,可有效降低异种、异体骨免疫原性,其中以冻干法的作用更明显。但此法降解骨基质的酶以及与迟发性过敏反应有关的细胞内外蛋白质同时也被保存了下来,从而导致骨基质内骨诱导物质的降解,损害了骨的诱导成骨活性,同时仍可诱发不同程度的免疫反应。
2.脱钙法:脱钙骨具有较强的骨诱导力,可以诱导血管周围未分化的间充质细胞及骨髓基质细胞向成软骨细胞及成骨细胞分化,但此法降低骨的机械强度。
3.抗原提取法:即氯仿甲醇液等有机溶剂脱脂,盐酸脱钙,H2O2脱蛋白,冻干和灭菌处理,如Urist所创的AAA骨。此法既除去了抗原性又保留了诱导成骨的能力,但由于人们担心氯仿/甲醇的毒性,临床应用受到限制。
4.辐照法、放射线法处理:可较好的降低异体(种)骨的抗原性,但过强的辐射剂量对异体(种)的机械强度有损害。
5.煮沸法、高压、煅烧及甲醛、硫柳汞法处理:以上方法虽可降低骨的免疫原性,但严重破坏了骨的生物学性能,或残余毒性较大,或影响骨的诱导成骨活性,目前均已少用。
例如中国专利CN11880115A就公开了一种脱脂去抗原制备骨移植材料的方法,采用的是化学处理和脱钙法去抗原,就存在着上述的缺点。
发明内容:
为了克服上述方法中各自存在的缺陷,本发明提供一种用于生物源性人工骨去抗原的制备方法,该方法既有利于弥补几种方法的缺点,又有利于更好的降低同种异体骨的免疫原性。本方法所采用的表面活性剂,符合国家卫生食品安全标准,并可在体内生物降解,因此对人体安全,无毒无害;系列的表面活性剂具有较有机溶剂脱脂更好的效果,能有效的降低骨的抗原性;用本方法处理的异体异种骨机械性能好于现有技术方法处理的异体(种)骨;生产过程无污染,产品无毒性物质残留且储存运输方便。
本发明的具体方案是利用表面活性剂脱脂的原理,将待处理的生物源性人工骨骨组织放入表面活性剂溶液中,经充分湿润、渗透,使溶液进入骨组织内部,脂肪组织随之脱落,表面活性剂把脱落下来的脂肪及有机物质乳化分散于溶液中,经三蒸水漂洗脱去。其特点是包括下列步骤:
1、将生物源性人工骨骨块制成所需大小;
2、用系列表面活性剂制成总浓度为20%--60%的脱脂液,其配制方法如下:
用阴离子表面活性剂:1%--70%烷基苯磺酸钠(ABS)和1%--80%脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)配比;
3、将待处理的骨块浸泡于所配置的脱脂液中;
4、在温度为20-60℃,功率为60%--100%条件下超声振荡洗涤或搅拌24-240小时;
5、用三蒸水振荡洗涤10-20次;
6、冻干2-200小时;
7、真空包装,核素辐射或环氧乙烷消毒灭菌。
具体实施方式:
实施例1:
1.将生物源性人工骨骨块制成所需大小;
2、用阴离子表面活性剂:1%--70%烷基苯磺酸钠(ABS)和1%--80%脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)配比制成总浓度为50%的脱脂液;
3、将待处理的骨块浸泡于所配置的脱脂液中;
4、在温度为20-60℃,功率为60%--100%条件下超声振荡洗涤或搅拌24-240小时;
5、用三蒸水振荡洗涤10-20次;
6、冻干2-200小时;
7、真空包装,核素辐射或环氧乙烷消毒灭菌。
Claims (1)
1.一种用于生物源性人工骨去抗原的制备方法,将待处理的生物源性人工骨骨组织放入表面活性剂溶液中,经充分湿润、渗透,使溶液进入骨组织内部,脂肪组织随之脱落,表面活性剂把脱落下来的脂肪及有机物质乳化分散于溶液中,经三蒸水漂洗脱去其特点是包括下列步骤:
(1)将生物源性人工骨骨块制成所需大小;
(2)用表面活性剂制成总浓度为20%--60%的脱脂液,其配制方法如下:
用阴离子表面活性剂:1%--70%烷基苯磺酸钠(ABS)和1%--80%脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)配比;
(3)将待处理的骨块浸泡于所配置的脱脂液中;
(4)在温度为20--60℃,功率为60%--100%条件下超声振荡洗涤或搅拌24--240小时;
(5)用三蒸水振荡洗涤10--20次;
(6)冻干2--200小时;
(7)真空包装,核素辐射或环氧乙烷消毒灭菌。
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