CN1209458C - 一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法 - Google Patents
一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法 Download PDFInfo
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Abstract
一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法，其特征是它包括以下步序：(1)备料，(2)脱胶，(3)搅匀，(4)分离除杂，(5)微滤，(6)超滤，(7)分解提取，(8)预冻结，(9)真空低温冷冻干燥，(10)粉碎、包装。本发明方法生产的蛋白酶、凝乳酶是植物性的酶，是一种新品种的酶，避免了动物性的酶受母体基因的影响，其制作成本大为降低，可代替进口产品，适于医药、食品、化工、美容、皮革、纺织、饲料等行业应用。
Description
技术领域
本发明涉及一种酶的制作方法，特别是一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法。
背景技术
医药工业上需用精制的凝乳酶产品，目前世界上仅美国希格玛公司，英国苯茨公司等生产动物凝乳酶。该动物凝乳酶是通过屠宰刚出生不足15天的小牛，从小牛的肝脏中提取的，其不足之处是①生产成本高昂。②由于动物凝乳酶受母体血液病毒基因影响，使提取的酶的质量也受到影响。中国目前对于生产医药用凝乳酶的信息尚未见诸报导。目前中国医药界使用的该种酶均依赖于进口。
本发明的内容
本发明的目的是提供一种番木瓜蛋白酶、凝乳酶，它能避免动物性酶受母体基因的影响，保持天然的绿色安全，且大大地降低了生产成本。
本发明的目的是按如下技术方案实现的。本发明为一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法，其特征是它包括以下步序：
(1)备料，采集番木瓜乳汁并调节PH值为5-6.5，
(2)脱胶，将上述番木瓜乳汁脱去果胶，
(3)搅匀，将上述番木瓜乳汁搅拌均匀，
(4)分离除杂，将上述番木瓜乳汁中的杂质去除，
(5)微滤，用膜微滤器将分离除杂后的番木瓜乳汁加以微滤，将细小乳汁渣及部分水份去除，以对上述乳汁所含的酶初步浓缩。
(6)超滤，用膜超滤器将微滤后的番木瓜乳汁加以超滤，进一步将细小乳汁渣和大部分水份进行区分，纯化上述乳汁所含酶的成分，得木瓜蛋白精制酶浓缩液。
(7)分解提取，用阳离子交换柱层析方法将上述浓缩液中的蛋白酶、凝乳酶、溶菌酶分解提取。
(8)预冻结，将凝乳酶、蛋白酶分别预冻结，
(9)真空低温冷冻干燥，提升所述凝乳酶蛋白酶的活力，
(10)粉碎、包装。
在所述步序(1)中，所述的番木瓜乳汁是从未成熟的番木瓜果皮层中提取。
在所述步序(2)中，是采用胶体磨进行脱掉果胶的。
在所述步序(4)中，是采用叠片分离机进行分离除杂的。
所述步序(9)是在真空冷冻干燥机中进行的，保持-30℃到-40℃的低温温度。
本发明中所述的番木瓜乳汁是从番木瓜的皮层中采集的，在番木瓜乳汁中含有统称为番木瓜蛋白酶的物质，该统称为番木瓜蛋白酶的物质中含有蛋白酶、凝乳酶和溶菌酶。本发明是从统称为番木瓜蛋白酶的物质中，加工提炼出高质量的蛋白酶和凝乳酶。番木瓜是一种亚热带作物，适于在不低于9℃气温和小于6-8级台风条件下种植。在南亚和中国南部特别是广西桂南地区具有传统性种植番木瓜的悠久历史，在收获季节，番木瓜上市，大量的番木瓜青果积压，由于无法保存及处理，只得用于制做一般的木瓜酱菜，腌酸或做为牲畜的饲料。不能很好地发挥其高效的附加值。目前广西有少量的个体生产木瓜蛋白粗酶作坊，其生产方法是将从农民手上收购的番木瓜乳汁直接进行热风干燥，而高温使番木瓜乳汁中的蛋白酶大幅损失其活力，一般采用的番木瓜乳汁的酶，活力仅为15-20万单位/克，其最高酶活力也只能为60-80万单位/克，且没能将乳汁中的果胶及杂质去除，其水溶性差，杂质多，不符合国家卫生标准。其次，也有个别农民在没有脱胶的情况下采用吊布或未能掌握番木瓜蛋白酶的分子结构时进行滤汁干燥，其产品的纯度及酶活力最高达到80-120万单位/克，远远达不到食品、医药界的要求。
本发明利用中国南方盛产的番木瓜果实的乳汁为原料，经脱胶、除杂、微滤、超滤将番木瓜乳汁过滤、浓缩成精制的统称为木瓜蛋白酶浓缩液，并经阳离子交换柱层析方法，将上述浓缩液进行区分，提取番木瓜凝乳酶，蛋白酶，其分子量结构为：2.1万为木瓜蛋白酶，3.6万为木瓜凝乳酶，2.5万为溶菌酶。因此，在近中性的条件下，进行阳离子交换柱层析，很容易区分出不同分子量的酶成份，以获得不同作用的纯化酶，通过低温处理以提高凝乳酶蛋白酶的活力。本发明方法中，步序(2)脱胶的作用是，由于番木瓜的乳汁是从番木瓜果实的皮层中提取，在乳汁中含有大量的果胶，而果胶的水溶性差，影响制品的质量和医药用途，必须予以脱除。步序(4)叠片分离的作用是除去杂物，由于上述木瓜乳汁是从果实的皮层提取，在采集乳汁过程中带有尘埃，果叶碎片等杂质，通过叠片分离以纯化该乳汁。步序(5)微滤的作用是按不同酶的分子量选用不同的膜分离管以栏截微小杂质，限制其透过，以进一步纯化。步序(6)超滤是使用不同单位分子量膜分离组管以分离得出蛋白酶、凝乳酶及其它酶。步序(9)用于提升该酶的性能，通过低温真空干燥处理以提高其活力。根据本发明方法，经纯化后的精酶，在3公斤中可提取1公斤的凝乳酶。采用本发明方法生产出精制凝乳酶、蛋白酶，其成本仅为进口制品成本的百分之一，经济效益巨大。
综上所述，本发明方法制作的酶，具有以下优点：
(1)本发明方法制作的蛋白酶，凝乳酶为植物性的酶，避免了现有的动物性凝乳酶受动物母体基因的影响，在本行业中填补了品种空白。本项目已被中国国家科技部列为星火计划项目。
(2)本发明方法生产的植物性蛋白酶、凝乳酶为高活力酶，可满足医药业需要，其生产成本大大低于进口的动物性凝乳酶，可代替进口产品。
(3)解决了番木瓜收获季节，果食难以存放处理的困难，使果农增加收益，促进经济作物番木瓜的种植扩大。
本发明方法的产品应用范围广泛，适于医药、食品、化工、美容、皮革、纺织、饲料等行业应用。
实施例
本发明番木瓜蛋白酶、凝乳酶的制作方法包括以下步序：
(1)备料，采集番木瓜果食，从未成熟(70-80％成熟度)番木瓜果食的皮层上取得乳汁，调节PH值为5-6.5，用柠檬酸调节，
(2)脱胶，用胶体磨进行脱除果胶，
(3)搅匀，将脱除果胶的番木瓜乳汁放在容器中，搅拌均匀，
(4)分离除杂，将脱胶后的上述番木瓜乳汁用叠片分离机进行分离除杂，除去乳汁中的杂质，例如在采集乳汁过程中混杂的尘埃、果叶、果蒂等，以进一步纯化，
(5)微滤，用膜微滤器将分离除尘后的番木瓜乳汁经0.1μm膜分离管微滤，滤去细的乳汁渣及部分水份，将番木瓜乳汁中的酶初步浓缩，
(6)超滤，用膜超滤器将微滤后的番木瓜乳汁经0.2μm膜分离管超滤，将细小的乳汁渣及大部分水份去除，得到含番木瓜蛋白精制酶的浓缩液，该浓缩液中包含蛋白酶、凝乳酶、溶菌酶。
(7)分解提取，用阳离子交换柱层析方法，根据分子量的不同来区分提取凝乳酶(3.6万)，溶菌酶(2.5万)和蛋白酶(2.1万)，
(8)将上述蛋白酶、凝乳酶预冻结，在预冷箱中进行，
(9)真空低温冷冻干燥，采用真空低温冷冻干燥机，保持温度为-30℃至-40℃，以提升该蛋白酶、凝乳酶的活力，保护其不受高温带来的损失。本实施例中，可提高活力为≥230万单位/克，其水溶性可达99.93％，达到医药级用酶的水平。其它如溶菌酶另行处理。
Claims (5)
1、一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法，其特征是它包括以下步序：
(1)备料，采集番木瓜乳汁并调节PH值为5-6.5，
(2)脱胶，将上述番木瓜乳汁脱去果胶，
(3)搅匀，将上述番木瓜乳汁搅拌均匀，
(4)分离除杂，将上述番木瓜乳汁中的杂质去除，
(5)微滤，用膜微滤器将分离除杂后的番木瓜乳汁加以微滤，将细小乳汁渣及部分水分去除，以对上述乳汁所含的酶初步浓缩，
(6)超滤，用膜超滤器将微滤后的番木瓜乳汁加以超滤，进一步将细小乳汁渣和大部分水分进行区分，纯化上述乳汁所含酶的成分，得木瓜蛋白精制酶浓缩液，
(7)分解提取，用阳离子交换柱层析方法将上述浓缩液中的蛋白酶、凝乳酶、溶菌酶分解提取，
(8)预冻结，将凝乳酶、蛋白酶分别预冻结，
(9)真空低温冷冻干燥，提升所述凝乳酶蛋白酶的活力，
(10)粉碎、包装。
2、根据权利要求1所述的一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法，其特征是：在所述步序(1)中，所述的番木瓜乳汁是从未成熟的番木瓜果皮层中提取。
3、根据权利要求1所述的一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法，其特征是：在所述步序(2)中，是采用胶体磨进行脱掉果胶的。
4、根据权利要求1所述的一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法，其特征是：在所述步序(4)中，是采用叠片分离机进行分离除杂的。
5、根据权利要求1所述的一种番木瓜蛋白、凝乳酶的制作方法，其特征是：所述步序(9)是在真空冷冻干燥机中进行的，保持-30℃到-40℃的低温温度。
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