CN1195861C

CN1195861C - 将多肽被囊化于淀粉基质中

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Publication number: CN1195861C
Application number: CNB971802327A
Authority: CN
Inventors: P·基林; H·P·关
Original assignee: ExSeed Genetics LLC
Current assignee: ExSeed Genetics LLC
Priority date: 1996-09-30
Filing date: 1997-09-30
Publication date: 2005-04-06
Anticipated expiration: 2017-09-30
Also published as: CN1239514A; DE69738587T2; IL129158A0; BR9713242A; AU4803097A; WO1998014601A1; JP2001505412A; EP0935665B1; KR20000048782A; RU2268301C9; EP0935665A1; US7141659B2; RU2268301C2; US20040185114A1; DE69738587D1; AU730427B2; US6107060A; NZ334637A; CA2265514A1; ATE389725T1

Abstract

提供了杂合多肽，该多肽是与源于编码合成代谢蛋白的基因的被囊化部分一起生成的。更具体地讲，本发明涉及编码将结合的蛋白被囊化于一种基质的基因的重组核酸分子；优选地，所述基因把一种(“有效负荷”)多肽被囊化于淀粉中，更具体地讲，被囊化于淀粉粒基质中。还提供了含有所述重组核酸分子的表达载体及其宿主，尤其是由所述载体转化的所述宿主的含有淀粉的部分。优选地，提供了含有被囊化于淀粉中的外源蛋白的谷物，所述谷物可用于生产哺乳类、鱼类、禽类食品。本发明还涉及从淀粉中，尤其是从淀粉中纯化蛋白的方法以及这种蛋白的工业用途。

Description

将多肽被囊化于淀粉基质中

相关申请的交叉参考文献

本申请要求申请日为1996年9月30目的临时专利申请流水号为60/026,855的优先权。所述临时申请以与本申请不一致的程度收作本文的参考文献。

本发明背景

多糖酶

原核和真核细胞均用多糖酶作为储存物质。在原核细胞中，原始储存多糖是糖原。尽管糖原与存在于大部分维管植物中的淀粉类似，但它们在链长和聚合度方面存在差异。在许多植物中，淀粉被用作初始的储存多糖。淀粉被储存在含有淀粉的植物的各种组织中。在大多数情况下，淀粉是由两种成分组成：一种是直链淀粉，另一种是支链淀粉。直链淀粉形成线性葡聚糖，而支链淀粉形成葡聚糖的支链。典型的淀粉具有比例为25％的直链淀粉和75％的支链淀粉。植物中直链淀粉与支链淀粉的比率变化会影响其淀粉的性质。此外，来自不同植物的淀粉通常具有不同的性质。玉米淀粉和马铃薯淀粉由于磷酸基团的有或无而有所不同。某些植物的淀粉性质因为引入该植物基因组中的突变而不同。玉米、稻和豌豆等里的突变型淀粉是众所周知的。

淀粉分支或淀粉成分比例的改变会产生不同的淀粉特性。淀粉的一种特性是生成淀粉粒，淀粉粒特别生成于叶、根、块茎和种子中。这些淀粉粒是在淀粉合成过程中形成的。某些淀粉合成酶特别是结合在颗粒中的淀粉合成酶、可溶性淀粉合成酶和分支酶是在淀粉粒形成时“被囊化”于淀粉粒中的蛋白。

在国际专利申请公开号GB92/01881中披露了动物和细菌糖原合成酶cDNA克隆的用途。从该文献中可以了解糖原合成酶的核苷酸序列和氨基酸序列。例如，可以从存储号为J02616(Kumar等，1986，生物化学杂志，261：16256-16259)的GenBank/EMBL(SWISSPROT)数据库中获取编码糖原合成酶的大肠杆菌(E.Coli)glgA基因的核苷酸序列。Okita等(1981，生物化学杂志，256(13)：6944-6952)还克隆了大肠杆菌糖原生物合成酶结构基因。所述糖原合成酶glgA结构基因是由Leung等(1987，细菌学杂志169(9)4349-4354)从鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)LT2中克隆的。源于兔骨骼肌(Zhang等，1989，FASEB杂志，3：2532-2536)和人肌肉(Browner等，1989，Proc.Natl.Acad.sci.，86：1443-1447)的糖原合成酶序列也是已知的。

业已报导过植物可溶性淀粉合成酶cDNA克隆的用途。Dry等(1991，植物杂志，2：193-202)披露了豌豆可溶性淀粉合成酶的同种型I和II氨基酸序列。稻可溶性淀粉合成酶的氨基酸序列由Baba等披露(1993，植物生理学)。所述后一种序列(稻SSTS)错误地引用了其N-末端序列，因此是误导。推测这是因为与蛋白酶降解或所提取酶其他固有的不稳定性相关的某些提取失误所致。正确的N-末端序列(始于AESLR)存在于被他们称为稻SSTS转运肽序列中。

Baba等(1991，BBRC，181：8794)研究了玉米分支酶I的序列。Fisher和Shrable(1993，植物生理学，102：1045-1046)研究了源于玉米胚乳的淀粉分支酶II。业已报导了植物、细菌和动物分支酶cDNA克隆的用途。也可从文献中了解细菌分支酶(BE)的核苷酸和氨基酸序列。例如，Kiel等克隆了源于Cyanobacterium synechococusspPPC7942(1989，基因(Amst)，78(1)918)和源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)(Kiel等，1991，分子基因遗传学，230(12)136-144)的分支酶基因glgB。酿酒酵母(S.cerevisiae)的glc3和gha1基因是等位的并编码所述糖原分支酶(Rowen等，1992，分子细胞生物学12(1)22-29)。Matsumomoto等研究了源于粗糙脉孢酶(Neurospora crassa)的糖原分支酶(1990，生物化学杂志，107：118-122)。所述GenBank/EMBL数据库还含有编码分支酶的大肠杆菌glgB基因的序列。

淀粉合成酶(EC2.4.1.11)能延长淀粉分子，并被认为可作用于直链淀粉和支链淀粉。可以证实淀粉合成酶(STS)活性与质体基质中的颗粒相关。与结合淀粉合成酶有关的淀粉生成能力也是公知的。正如Mu-Forster等所披露的(1996，植物生理学111：821-829)现已了解与淀粉生物合成有关的各种酶具有不同的结合能力。颗粒结合淀粉合成酶(GBSTS)活性与waxy基因产物密切相关(Shure等，1983，细胞35：225-233)。业已证实在诸如玉米、稻和马铃薯的多种物种中直链淀粉的合成取决于该基因的表达(Tsai，1974，生化遗传学11：83-96；Hovenkamp-Hermelink等，1987，理论应用遗传学75：217-221)。Visser等披露了源于马铃薯的编码颗粒-结合淀粉合成酶基因的分子克隆和部分鉴定(1989，植物科学64(2)：185-192)。Visser等还披露了通过反义构建体抑制马铃薯中编码颗粒-结合淀粉合成酶基因的表达(1991，分子基因遗传学225(2)：289-296)。

通过Frydman和Cardini(Frydman和Cardini，1964，生物化学生物物理学研究通讯17：407-411)的开拓性工作，已了解到其他STS酶是可溶性淀粉合成酶。最近，由于发现了所述酶与所述颗粒相关并存在于可溶相中，所述“可溶性”一词的合理性已值得怀疑(Denyer等，1993，植物杂志4：191-198；Denyer等，1995，植物97：57-62；Mu-Forster等，植物生理学111：821-829)。一般的看法是，支链淀粉的生物合成与可溶性淀粉合成酶和淀粉分支酶的相互作用相关。业已在豌豆(Denyer和Smith，1992，植物186：609-617；Dry等，植物杂志，2：193-202)、马铃薯(Edwards等，1995，植物生理学112：89-97；Marshall等，1996，植物细胞8：1121-1135)和稻(Baba等，1993，植物生理学103：565-573)中鉴定和克隆到了可溶性淀粉合成酶的不同同种型，而大麦似乎含有多种同种型，其中的有些与淀粉分支酶有关(Tyynela和Schulman，1994，植物生理学103：565-573)。STS克隆的共同特征是存在着KXGGLGDV共有序列，该序列被认为是所述酶的ADP-Glc结合位点(FURUKAWA等，1990，生物化学杂志265：2086-2090；Furukawa等，1993，生物化学杂志268：23837-23842)。

在玉米中，业已鉴定了被称为同种型I和II的STS的两种可溶性形式(Macdonald和Preiss，1983，植物生理学73：175-178；Boyer和Preiss，1978，糖类研究61：321-334；Pollock和Preiss，1980，生物化学生物物理学204：578-588；Macdonald和Preiss，1985，植物生理学78：849-852；Dang和Boyer，1988，植物化学27：1255-1259；Mu等，1994，植物杂志6：151-159)，但这两种形式均未被克隆。最近，已将玉米胚乳STSI活性与存在于可溶性和颗粒相关的部分中的76-kDa多肽关联起来(Mu等，1994，植物杂志6：151-159)。STSII的多肽特征尚属未知。STSI和II具有不同的酶学特性。STSI具有独立于引物的活性，而STSII需要糖原引物来催化葡糖基转移。业已报导过可溶性淀粉合成酶对淀粉沉积具有高的流量控制系数(Jenner等，1993，奥地利植物生理学杂志22：703-709；Keeling等1993，植物191：342-348)并在高温下具有异常的动力学特性(Keeling等1995，奥地利植物生理学杂志21：807-827)。玉米中相应的同种型在最佳温度和稳定性方面具有显著差异。

植物淀粉合成酶(和大肠杆菌糖原合成酶)序列包括序列KTGGL，该序列已知为ADPG结合域。编码任何上述淀粉合成酶蛋白的基因均可用于本发明结构中。

分支酶[α1，4D葡聚糖：α1，4D葡聚糖6D(α1，4D葡聚糖)转移酶(E.C.2.4.1.18)]，有时又被称为Q-酶，它能将淀粉酶转化成支链淀粉酶。α1，4D葡聚糖链的一个片段被转移到一个类似葡聚糖链的伯位羟基上。

业已报导过细菌和植物分支酶基因序列(稻胚乳：Nakamura等，1992，植物生理学84：329-335；Nakamura和Yamanouchi，1992，植物生理学99：1256-1266；豌豆：Smith，1988，植物，175：270-279；Bhattcharyya，1989，细胞生物化学杂志，增刊13D：331；玉米胚乳：Singh和Priess，1985，植物生理学79：34-40；VosScherperkeuter等，1989，植物生理学90：75-84；马铃薯：Kossmann等，1991，分子基因遗传学，230(12)：39-44；木薯：Salehuzzaman和Visser，1992，植物分子生物学20：809-819)。

在多糖酶领域，存在着利用各种植物物种中的多种淀粉合成酶基因对植物淀粉支路进行工程修饰的载体的报导。其中，与纤维素或淀粉或糖原结合的上述多糖酶中的一些是众所周知的。利用多糖酶的一个具体的专利实例证明了糖原生物合成酶在修饰植物淀粉方面的用途。在授予Shewmaker的美国专利US5,349,123中披露了一种可在植物细胞中生成糖原生物合成酶的含有DNA的载体。具体地讲，该专利涉及因引入上述酶而对马铃薯淀粉造成的改变。还报导过其它淀粉合成基因及其用途。

杂合(融合)多肽

杂合蛋白(也被称为“融合蛋白”)是由融合成单一多肽的两种或两种以上蛋白组成的多肽链。通常，所述蛋白之一是能与特定受体细胞结合的配体。编码融合肽的载体主要被用于通过微生物发酵生产外源蛋白。然后可通过亲和层析纯化所产生的融合蛋白。所述多肽之一的结合部分用于把所述杂合多肽连接在一种亲和基质上。例如，能与β-半乳糖苷酶形成融合蛋白，β-半乳糖苷酶可结合于一种柱上。该方法已被用于生产病毒抗原。

另一种用途是回收所述杂合多肽的多肽之一。裂解所述融合肽的化学和生物学方法是众所周知的。如果在所述肽与肽之间采用的是酸不稳定性天冬氨酰-脯氨酸连键，可以用低PH裂解所述肽，而这些肽不受酸的影响。业已用溴化氰裂解过激素。另外，业已报导过通过位点专一性蛋白水解作用进行的裂解。业已用聚精氨酸尾加强了诸如离子层析其它蛋白纯化方法，所述聚精氨酸尾可提高所述蛋白的总的碱性，从而加强与离子交换柱的结合力。

有很多专利已对制备杂合肽或用于特殊目的的特殊杂合肽的方法的改进作过介绍。授予Pastan等的美国专利US5,635,599披露了对杂合蛋白的一种改进。该专利披露了一种作为所述杂合蛋白部分的循环配体。该配体具有专一性和良好的结合力。在授予Kuliopulos的美国专利US5,648,244中披露了对杂合蛋白的另一种改进。该专利披露了一种用一种载体肽生产杂合肽的方法。当该核酸被一种限制性内切酶识别后可产生非回文3-碱基突出端。这样使得所述载体能被裂解。

在美国专利US5,643,756中报道了具有特殊针对性的杂合蛋白的例子。该专利披露了一种用于在细胞中表达糖基化蛋白的载体。该杂合蛋白适用于HIVgp120的正确免疫反应。用所报导的载体可以加强被高度糖基化的gp120结合域的提取。

美国专利US5,202,247和5,137,819讨论了具有多糖结合域的杂合蛋白，以及用于制备能与一种多糖基质结合的杂合蛋白的方法和组合物。美国专利US5,202,247特别介绍了一种将纤维素结合区与感兴趣的肽连接的杂合蛋白。该专利披露所述杂合蛋白可以在细菌宿主中表达以后通过与纤维素的亲和层析而被纯化。

遗传工程技术的发展使得将来自各种生物和植物的基因转移到其它生物和植物中成为可能。尽管过去业已通过转化和诱变对淀粉作过修饰，仍有必要对淀粉作进一步的修饰。为此，需要下列载体，该载体可将希望的氨基酸或肽被囊化于淀粉中，尤其是淀粉粒中。所得到的淀粉是修饰过的，而且源于带有所述载体的植物的组织也是修饰过的。

本发明概述

本发明提供了一种杂合多肽，该多肽包括一个源于一种淀粉结合酶淀粉被囊化区(SER)，该区与一种有效负荷(payload)多肽融合，该有效负荷多肽对于所述淀粉被囊化区来说不是内源性的，即并非是天然与所述淀粉被囊化区连接的。可将这种杂合多肽用于制备含有所述有效负荷多肽的改性淀粉。可将这种改性淀粉用于生产富积了某些氨基酸的谷类饲料。这种改性淀粉还可用于生产淀粉被囊化形式的诸如激素和其它药物，如胰岛素的多肽，以便抵抗胃酸的降解作用。还可将所述杂合多肽用于生产易纯化形式的所述有效负荷多肽。例如，通过细菌发酵生产的或由谷类或动物生产的所述杂合多肽可以从所述改性淀粉中提取和纯化，所述杂合多肽是通过已知方法与所述改性淀粉结合的。

在本文中，“多肽”一词是指多个相同或不同的氨基酸，而且，还包括蛋白。

“杂合多肽”一词是指由源于至少两种不同来源的肽或多肽组成的多肽，例如，由一种淀粉结合酶的淀粉被囊化区与诸如激素的另一种多肽融合，其中，该杂合多肽的至少两个组成部分并非是天然融合在一起的。

“有效负荷多肽”一词是指一种对于所述淀粉被囊化区来说不是内源性的多肽，其表达必须与该区相结合，以便表达一种含有所述有效负荷多肽的改性淀粉。

当所述有效负荷多肽被用于提高所述改性淀粉中特定氨基酸的氨基酸含量时，该多肽优选由不超过3种以上的不同类型的氨基酸组成，这些氨基酸选自下列一组：Ala，Arg，Asn，Asp，Cys，Gln，Glu，Gly，His，Ile，Leu，Lys，Met，Phe，Pro，Ser，Thr，Trp，Tyr，和Val。

正如本领域中所公知的，当所述有效负荷多肽被用于向宿主生物或其它生物提供生物活性多肽时，所述有效负荷多肽可以是诸如激素的生物活性多肽，例如，胰岛素、生长因子，如促生长素、抗体、酶、免疫球蛋白或染料，或者是其生物活性片段。只要所述多肽具有生物学活性，它就不必是天然存在的多肽，而且可以是突变的、截短的、或其它修饰形式。所述生物活性多肽可以是仅含有生物活性多肽的生物活性部分的修饰肽。它们还可以是与天然存在的生物活性氨基酸序列同源的氨基酸序列(优选至少约有75％的同源性)，该序列仍具有生物学活性。

所述杂合多肽的淀粉被囊化区可以是本领域已知任何淀粉结合酶的被囊化区，例如，选自下列一组的酶：可溶性淀粉酶I、可溶性淀粉酶II、可溶性淀粉酶III、颗粒结合淀粉合成酶、分支酶I、分支酶IIa、分支酶IIBb和葡糖淀粉酶多肽。

当把所述杂合多肽用于生产纯化或部分纯化形式的有效负荷多肽时，所述杂合多肽优选包括一个位于所述淀粉被囊化区和所述有效负荷多肽之间的裂解位点。因此，分离纯化有效负荷多肽的方法包括让所述杂合多肽与一种对所述裂解位点专一的裂解剂结合的步骤。

本发明还提供了编码所述杂合多肽的重组核酸分子(RNA或DNA)。所述重组核酸分子优选包括适于在所选的宿主中表达所述杂合多肽的控制序列。所述“控制序列”一词包括启动子、内含子、所述特定宿主生物的优选密码子序列，以及本领域已知的能影响DNA或RNA在特定宿主中表达的其它序列。编码所述淀粉被囊化区和有效负荷多肽的核酸序列可以是天然存在的核酸序列，或其生物学活性片段，或者是与所述序列同源的生物活性序列，优选与所述序列有大约75％的同源性。

宿主生物包括细菌、植物和动物。优选的宿主是植物。单子叶植物和双子叶植物均为适用于表达本发明杂合多肽的宿主。

本发明还提供了含有编码本发明杂合蛋白的核酸的表达载体。该表达载体可被用于将所述核酸转化入宿主生物内，并且，还可以含有辅助所述核酸在宿主生物中表达的序列。所述表达载体可以是本领域已知的可用于转化系统的质粒，修饰过的病毒，或DNA或RNA分子，或其他载体。

通过本发明方法，可以生产出含有能够表达本发明杂合多肽的重组核酸分子的转化细胞。所述细胞可以是源于单细胞生物、植物或动物的原核或真核细胞。它们可以是细菌细胞，从该细胞中可收获所述杂合多肽。或者，它们可以是能够再生成植株的植物细胞，从所再生的植株中可以收获所述杂合多肽，或者所述植物细胞可以再生成可育的植株，其所结种子含有编码所述杂合多肽的核酸。在一种优选实施方案中，所述种子含有包括所述有效负荷多肽的改性淀粉。所述“改性淀粉”一词是指已被修饰成含有所述有效负荷多肽的天然存在的淀粉。

还提供了一种对有效负荷多肽进行定向消化以生成该消化过程的特定相，例如，防止有效负荷多肽在动物的胃中被降解的方法，该方法包括给所述动物喂饲本发明的含有所述有效负荷多肽的改性淀粉，以便将所述多肽保护起来，防止其在动物的胃中降解。另外，所述淀粉可以是一种已知能在所述胃中被降解的淀粉，以便在那里释放出所述有效负荷多肽。

本发明的优选重组核酸分子包括编码淀粉被囊化区的DNA，该DNA选自在本发明的表中所列出的淀粉合成基因序列。

本发明的优选质粒适用于特定的宿主。本发明提供了含有一个启动子、一个质体定向序列、一个编码一种淀粉被囊化区的核酸序列、和一个中止子序列的质粒。所述质粒适于插入编码有效负荷多肽和淀粉被囊化区的DNA序列，以便在特定宿主中表达。

本发明的质粒可选择性地包括一个间隔单位或一个连接单位，该单位接近编码SER的核酸与编码所述有效负荷多肽的核酸之间的融合位点。本发明包括含有适于原核或真核宿主的启动子的质粒。所述启动子也可以特别适于在单子叶植物或双子叶植物中表达。

一种制备本发明肽改性淀粉的方法包括以下步骤：提供一种质粒，该质粒具有与编码一种淀粉被囊化区的核酸序列结合的启动子，所述编码淀粉被囊化区的核酸序列与编码一种有效负荷多肽的核酸片段结合，并用所述质粒转化宿主，以使该宿主表达肽改性的淀粉。

本发明还包括含有淀粉的谷物，该谷物包括：胚，营养组织；和将一种蛋白被囊化在其中的改性淀粉粒，该蛋白对于未被改性的所述谷物的淀粉粒来说是非内源性的。所述含有淀粉的谷物可以是这样的谷物：其中所述胚是玉米胚、稻胚或小麦胚。

本文所提到的所有参考文献均被以不同程度地收作本文的参考文献。

附图的简要说明

图1a表示质粒pEXS114，该质粒含有被亚克隆到Stratagene出售的pBSK中的合成GFP(绿色荧光蛋白)。

图1b表示质粒pEXS115。

图2a表示具有被亚克隆到一种市售质粒中的限制位点的waxy基因。

图2b表示由Novagen出售的pET-21A质粒，该质粒具有亚克隆在其上面的源于pEXS115的GFP片段。

图3a表示被亚克隆到pEXSWX上的pEXS114，以及GFP-FLWX图谱。

图3b表示GFP-BamHIWX质粒。

图4表示被亚克隆到pEXSWX上的pEXS115的SGFP片段，以及GFP-NcoWX图谱。

图5表示一种适用于单子叶植物的质粒的线性示意图。

图6表示质粒pEXS52。

图7表示用于制备pEXS51和pEXS60的6个引入质粒。图7a表示pEXS adh1。图7b表示pEXS adh1-nos3’。图7c表示pEXS33。图7d表示pEXS10zp。图7e表示pEXS10zp-adh1。图7f表示pEXS10zp-adh1-nos3’。

图8a和8b分别表示质粒pEXS50和pEXS51，这些质粒含有MS-SIII基因，该基因是可溶性淀粉合成酶基因。

图9a表示排除了pEXS50中所示内含子的质粒pEXS60，而图9b表示排除了pEXS60中的内含子的质粒pEXS61。

详细说明

广义地讲，本发明提供了一种杂合多肽，一种生产杂合多肽，以及编码所述杂合多肽的核酸的方法。杂合多肽包括被融合成一个单一肽链的两个或两个以上亚单位。所述亚单位可以是氨基酸或肽或多肽。所述亚单位之一是一个淀粉被囊化区。因此，杂合多肽可以被引导至由表达该杂合多肽的生物所产生的淀粉粒中。

一种在细胞中生产杂合多肽的方法包括制备一种DNA构建体，该构建体包括至少一个编码一种起着将所述结合的DNA的表达产物结合到淀粉粒中的作用的序列的片段，并与编码所述感兴趣的多肽(有效负荷多肽)的DNA序列连接。该构建体在真核或原核细胞中表达。可以用所述杂合多肽生产纯化的蛋白或将一种感兴趣的蛋白固定在淀粉粒中使其受到保护，或用于生产含有外源氨基酸或肽的谷物。

本发明的杂合多肽具有三个部分。

有效负荷肽(X)

中央位点(CS)*

淀粉被囊化区(SER)

X是任何感兴趣的氨基酸或肽。

*是可选部分。

编码X的基因可被置于下述DNA构建体中的5’或3’位置。

CS是一个中央位点，该位点可以是本领域已知的离去位点、裂解位点或间隔子。裂解位点可以由一种裂解酶识别。裂解酶是能在特定位点裂解肽的酶。被用于裂解多肽的化合物或酶的例子包括凝血酶、胰蛋白酶、溴化氰、甲酸、羟胺、胶原酶、和alasubtilisin。间隔子是一种肽，由它连接构成所述杂合多肽的肽。通常，除了连接所述肽或保持某种最低间距或影响该蛋白的折叠、电荷或水可及性外它不具备任何特定活性。间隔子可以是不影响所述杂合多肽的生物学活性的任何肽序列。

所述淀粉被囊化区(SER)是目标多肽的对淀粉具有结合亲和力的部分。通常，SER选自下列一组肽：包括植物淀粉合成酶和分支酶的淀粉结合区，但可以包括源于诸如葡糖淀粉酶等的其它来源的淀粉结合域。在本发明的优选实施方案中，所述SER包括天然存在于淀粉合成途径上的基因的肽产物。这一小类优选SERs被称为成淀粉被囊化区(SFER)。本发明优选的SERs的另一小类是源于含有淀粉的植物的特殊酶——淀粉合成酶(STS)、颗粒结合淀粉合成酶(GBSTS)和分支酶(BE)的特定淀粉被囊化区(SSER)。这一小类的最优选的基因产物的是GBSTS，另外，淀粉合成酶I和分支酶II是有用的基因产物。优选地，所述SER(即上面所述的所有小类)是全长淀粉合成酶基因的截短形式，使其截短的部分包括所述淀粉被囊化区。

广义地讲，用于在所述宿主中表达所述杂合多肽的DNA构建体如下：

启动子

内含子*

转运肽编码区*

X

SER

终止子

*可选部分。还可以使用其它可选部分。

正如本领域所公知的，启动子是控制转录的DNA区域。为不同的宿主选择不同类型的启动子。Lac启动子和T7启动子适用于原核生物，35ScaMV启动子适用于双子叶植物，而许多聚遍在蛋白启动子适用于许多单子叶植物。本领域已知的多种不同启动子的任一种均可用于本发明范围内。

另外，正如本领域技术人员所公知的，内含子是基因中不编码基因产物的核苷酸序列。通常能提高在单子叶植物中的表达的内含子的质体中形成淀粉粒，但对转运肽编码区是编码蛋白向诸如质体的细胞器中转运的核苷酸序列。优选选用能被在其中使用该转运多肽的宿主识别并与其相容的转运多肽。在本发明中，所选择的质体是造粉体。

优选的是，所述杂合多肽位于诸如植物细胞的细胞中的造粉体中，所述细胞合成淀粉并将其储存在造粉体中。如果所述宿主是不含造粉体的细菌或其它细胞，则无须转运肽编码区。

终止子是终止所述转录的DNA序列。

X是所述有效负荷多肽的编码区，该多肽可以是感兴趣的任何多肽或氨基酸链。它可以具有一种已知多肽的完整序列或含有其有用的片段。所述有效负荷多肽可以是多肽、或其片段、或生物活性蛋白，它是酶、激素、生长因子、免疫球蛋白、染料等。可用于本发明中的所述有效负荷多肽的某些例子包括，但不限于促乳素(PRL)、血清白蛋白、生长因子和生长激素，即促生长素。血清白蛋白包括牛、绵羊、马、禽和人血清白蛋白。生长因子包括表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子I(IGFF-I)、胰岛素样生长因子II(IGFF-II)、成纤维细胞生长因子(FGF)、转化生长因子α(TGF-α)、转化生长因子β(TGF-β)、神经生长因子(NGF)、血小板衍生的生长因子(PDGF)、和重组人胰岛素样生长因子I(rHuIGFF-I)和II(rHuIGFF-II)。可用于实施本发明的促生长素包括，但不限于牛、猪、绵羊、马、禽和人促生长素。猪促生长素包括δ-7重组猪促生长素，正如在欧洲专利申请公开号104,920(Biogen)中所披露并要求保护的。优选的有效负荷多肽是促生长素、胰岛素A链和B链、降钙素、β内啡肽、尿抑胃素、β珠蛋白、肌红蛋白、人生长激素、血管紧张肽、脯氨酸、蛋白酶、β-半乳糖苷酶、和纤维素酶。

所述杂合多肽、SER区和有效负荷多肽还可以本领域已知的翻译后修饰，如糖基化、乙酰化和不会影响所述多肽的期望活性的其它修饰。

开发一种杂合多肽

所述SER区存在于与淀粉合成有关的基因中。分离这种基因的方法包括从基因组DNA文库和从cDNA文库中筛选。可以通过连接、诱变剂、消化、限制和其它诸如此类的方法对基因进行裂解和改变，例如由Maniatis在分子克隆一书(冷泉港实验室，冷泉港，纽约)中所披露的。用于获取所述SER区的优良原材料的例子包括，但不限于以下诸种：淀粉合成酶I、II、III、IV，分支酶I、IIA和B，以及颗粒结合淀粉合成酶(GBSTS)。所述基因存在于诸如稻、玉米、豌豆、马铃薯和小麦等的含有淀粉的植物中。利用由基因组DNA或cDNA或mRNA制备的SER探针或抗SER的抗体可以分离并鉴定到可用于克隆的基因。可以对淀粉酶编码序列进行修饰，只要这种修饰不影响所述SER区对相关多肽进行被囊化的能力即可。

一旦对编码被被囊化到淀粉粒中的蛋白进行定位，然后就可以用本领域已知的几种方法分离所述SER。一种方法是用限制酶在各种位点裂解所述基因，使其N-末端缺失，并让所得到的蛋白表达。然后让所表达的截短了的蛋白在淀粉凝胶上运动，以评价残留蛋白的结合和解离常数。可以将诸如绿色荧光蛋白的本领域已知的标记基因连接在截短了的蛋白上，并用于确定该标记基因在淀粉粒中的存在。

一旦分离到SER基因序列片段，即可将其用于制备能够表达被被囊化于淀粉中的有效负荷多肽的基因片段序列。可将SER基因序列和编码所述有效负荷多肽的基因序列连接在一起。然后，就可以将融合的DNA置于多种载体结构中，以便在多种宿主中表达。优选的宿主在质体中形成淀粉粒但SER的试验可以在诸如大肠杆菌的细菌性宿主中方便地进行。

编码所述有效负荷多肽的核酸序列可由DNA、RNA、基因组DNA、cDNA、mRNA衍生而来，或者也可以是全面或部分合成。可以操作所述有效负荷多肽，使其含有突变，使所产生的蛋白是一种新的突变蛋白，只要保留了生物学功能即可。

当所述有效负荷多肽编码核酸序列被连接到SER编码序列上后，编码有效负荷多肽的基因序列优选结合在编码其N-末端的SER序列的末端。尽管所述N-末端是优选的，但对于本发明来说，所述有效负荷多肽是连接于SERN-末端或是C-末端似乎并不重要。很明显，制备本发明重组核酸分子的方法，无论是合成或是通过克隆和连接进行的，对于本发明来说并不重要。

所述杂合多肽的中央部分是选择性的。对于本发明的某些应用来说，将位于该部分的编码一种常见蛋白酶裂解位点的DNA引入用于表达所述杂合多肽的重组核酸分子中可能是十分有用的。另外，将编码对pH敏感的氨基酸序列的DNA引入以形成所述中央部分也是很有用的。如果将本发明用于开发一种能够用淀粉酶等提取并从淀粉粒中释出的纯化蛋白，则可以利用淀粉酶裂解位点。另外，如果是在动物体内消化所述蛋白，则蛋白酶裂解位点有助于动物消化道内的酶从淀粉中释放出该蛋白。在其它用途中，而且在很多消化用途中，所述裂解位点是多余的。

所述中央部分位点可以包括一个间隔子。间隔子是指连接构成杂合多肽的蛋白的肽。一般，除了连接所述蛋白、保持某种最低间距、影响该杂合多肽的折叠、电荷或疏水或亲水性质外，该间隔子不具有任何特殊功能。

构建体形成

一旦生成编码所述杂合多肽的连接DNA，即可制备出克隆载体或质粒，这种载体或质粒能将所述DNA转入一种宿主，以表达所述杂合多肽。将本发明的重组核酸序列插入常见克隆载体或质粒中。对于本发明来说，优选宿主是产淀粉粒宿主。不过，也可以使用细菌宿主。尤其有用的是被转化成含有一种植物的部分或全部淀粉合成基因的细菌宿主。本领域普通技术人员了解，所述质粒适用于所述宿主。例如，在细菌宿主中，转录调节启动子包括lac、TAC、和trp等。另外，最好不使用编码转运肽的DNA，并且可以用位于结构基因上游的分泌前导序列将所述多肽分泌入培养基中。或者，所述产物任留在宿主中，裂解该宿主，并通过淀粉提取方法分离和纯化该产物，或通过让该材料与淀粉基质(或诸如直链淀粉或支链淀粉糖原等的淀粉样基质)结合，以提取所述产物。

优选的宿主是植物，因此，优选的质粒适用于植物中。该质粒应含有一个启动子，优选为适于在该植物的含淀粉组织中表达的启动子。该启动子可以对诸如种子、根、和块茎之类的各种组织有专一性；或者，也可以是在植物组织中进行基因表达的组成型启动子。众所周知的启动子包括10kD玉米醇溶蛋白(玉米)启动子、CAB启动子、patastin、35S和19S花椰菜花叶病毒启动子(在双子叶植物中十分有用)、聚遍在蛋白启动子(可用于单子叶植物)、以及本领域已知的其增强或改进形式。

所述克隆载体可以含有编码一种转运肽的序列，由该转运肽引导质粒进入正确位置。可以使用其它转运肽的编码序列。优选使用天然存在于宿主中的转运肽。玉米的优选转运肽编码区示于本文的表和图中。该转运肽的用途是引导载体进入正确的胞内区。

编码所述有效负荷多肽的N-末端的DNA序列与所述转运肽编码序列结合。编码有效负荷多肽的序列的方向，根据是否需要正义或反义转录而变化。本文所披露的本发明的DNA构建体，其编码所述有效负荷多肽的序列位于N-末端，不过，SER编码区也可以位于其N-末端，而所述有效负荷多肽位于其后。在该DNA构建体末端是终止子序列。该序列是本领域中公知的。

将所述克隆载体转入一种宿主。可以用本领域已知的多种转化技术将所述克隆载体(优选为质粒)导入宿主中。所述技术可以因宿主而改变，不过，这类技术包括微粒子轰击、微量注射、农杆菌转化、“whiskers”技术(US专利5,302,523和5,464,765)、和电击法等。如果所述宿主是植物，可将其细胞再生成植株。再生植株的方法为本领域所公知。所述宿主一旦被转化，所述蛋白在其中得到表达，即可证实编码所述有效负荷多肽的DNA的存在。可以通过Western印迹或EKISA或根据植株或细胞中改变的结果证实表达蛋白的存在。

被囊化蛋白的用途

本发明具有多种用途。可以纯化形式从所述淀粉上裂解所述杂合多肽(可以包括裂解位点)，并可以回收纯化蛋白。另外，还可以原始形式使用存在于淀粉中的所述被囊化有效负荷多肽，将蛋白输送到食用动物消化道的各个部分(“动物”包括哺乳动物、禽类和鱼)例如，如果将所述材料被囊化在其中的淀粉能承受消化，则蛋白会缓慢释入动物的肠中，从而避免有价值的蛋白在其胃中降解。可将诸如甲硫氨酸和赖氨酸的氨基酸被囊化，直接掺入饲养动物的谷物中，从而消除了以其它形式向其饲料中添加这些氨基酸的必要性。

发明还可以把激素、酶、蛋白、蛋白类养分、和蛋白类药物输送到动物消化道的特定消化区。蛋白通常是在上消化道被消化，将其被囊化在淀粉中能使其以非消化形式通过胃，并由其肠道完全或部分吸收。如果能通过其肠壁，即可将所述有效负荷多肽用于治疗动物，或提供诸如生长因子的激素，如促生长素，以便对动物进行免疫接种，或加强给动物的营养。

如果所述淀粉在胃中不能承受消化作用(例如，含糖的2型淀粉是高度可消化的)，则可以让所添加的蛋白由所述动物的上消化道定向吸收。这就需要对产生所述改性淀粉的宿主进行突变或转化，使其能产生含糖的2型淀粉。本发明包括将能产生改性淀粉的突变型生物用作宿主。此类突变型宿主的某些例子包括具有含糖的l型、含糖的2型、脆型、皱缩型、蜡质型、直链淀粉延长型、暗色型、不透明型、和粉质型突变等的稻和玉米等。所述突变型淀粉和源于不同植物的淀粉具有不同程度的可消化性。因此，通过选择用于表达所述DNA的宿主和喂饲所述改性淀粉的动物，可以在指定部位消化所述杂合多肽。不同的蛋白能被身体的不同部位最有效的吸收。通过将所述蛋白被囊化于具有特定可消化性的淀粉中，可以在消化过程的特定时间，将所述蛋白输送到其消化道的任何部位。

本发明的另一个优点是，抑制或表达不同水平所期望的多肽的糖基化作用的能力。所述被囊化过程能使所述蛋白在淀粉粒中表达时的糖基化状态不同于由其它DNA分子表达时的糖基化状态。所述糖基化作用取决于被囊化量、所采用的宿主以及所述多肽的序列。

通过对已知其具有其它有利性状点的植物进行遗传操作，可以产生具有上述特征的改进作物。通过操作一种淀粉合成酶基因的核苷酸序列，可以改变在一种植物中所产生的重要氨基酸、蛋白或肽的量。可以通过有性杂交或转化将一个或几个遗传工程基因构建体整合到植物基因组中，所述基因构建体可源于植物、真菌、细菌或动物。工程基因可以含有额外拷贝的野生型基因，或者，可以编码具有新的特性的修饰的或等位的或改型的酶。所述基因结构的整合，根据所引入(沿有义或反义方向)基因的数量和类型而具有不同作用。它可以加强植物产生特殊蛋白、肽的能力或改善氨基酸平衡。

克隆参与淀粉生物合成的酶

可以用已知的克隆技术提供本发明的DNA结构。特定形式SSTS、GBSTS、BE、糖原合成酶(GS)、支链淀粉、或本发明所采用的其它基因的来源可以是能产生淀粉或糖原的任何生物。要对潜在的供体生物进行筛选和鉴定。然后可以采用以下两种方法：(a)在本文所披露的方法之后采用酶纯化和抗体/序列生成方法；(b)用SSTS、GBSTS、BE、糖原合成酶(GS)、支链淀粉、或其它cDNAs作为异源探针，在源于相关生物的文库中鉴定编码SSTS、GBSTS、BE、糖原合成酶(GS)、支链淀粉、或其它淀粉被囊化酶的基因组DNAs。基因转化、植株再生和检测方法是本领域公知的。在这种场合，有必要使用于转化的基因结构含有调控序列，以确保其在淀粉生成期间表达。这种调控序列存在于小型谷物和块茎及根中。例如，这种调控序列常见于玉米胚乳的编码颗粒结合淀粉合成酶(GBSTS)、可溶性淀粉合成酶(SSTS)或分支酶(BE)或其它玉米胚乳淀粉合成途径酶的DNA上。这些源于所述胚乳的调控序列可确保蛋白在正确的发育时间表达(例如，ADPG焦磷酸酶)。

在该方法中，我们在有适当浓度的诸如糖原或支链淀粉的糖类的存在下，用天然蛋白电泳的方法测定淀粉结合蛋白的淀粉结合常数。用本领域技术人员熟知的定点突变和其他遗传工程方法，能说明淀粉囊化区。可以用本文所披露的方法评价带有新的肽或氨基酸组合的新型遗传工程蛋白。

实施例

例1：

鉴定淀粉被囊化蛋白的方法

淀粉-颗粒蛋白分离：

在Waring搅拌器中用25ml提取缓冲液(50mMTris乙酸，pH7.5，1mMEDTA，1mMDTT)对12.5g谷物进行3×20秒的匀浆，每次匀浆间隔1分钟。将样品保持在冰上。通过纱布过滤，并在6,000rpm下离心30分钟。弃上清液，并刮去覆盖白色淀粉沉淀的脱色固体。将沉淀再悬浮于25ml缓冲液中，并再次离心。再重复洗涤两次。将洗涤过的沉淀再悬浮于-20℃丙酮中，让沉淀在-20℃下沉降。重复。在空气流下干燥淀粉。在-20℃下贮存。

蛋白提取

将50mg淀粉与1ml2％SDS混合于微量离心管中。涡旋混合，在4℃下以18,000rpm的速度离心5分钟。倒掉上清夜。重复2次。加入1ml样品缓冲液(4ml蒸馏水，1ml 0.5MTris-HCL，pH6.8，0.8ml甘油，1.6ml 10％SDS，0.4mlB-巯基乙醇，0.2ml0.5％溴酚蓝)。将微量离心管煮沸10分钟，在盖上开孔。冷却，10,000rpm下离心10分钟。将上清液倾入新的微量离心管中。用标准方法煮沸4分钟。冷却。

SDS-PAGE凝胶：(未变性)

10％分离胶 4％堆积胶

Acry1/Bis40％母液 2.5ml 1.0ml

1.5M Tris pH8.8 2.5ml -

0.5M Tris pH8.8 2.5ml

10％SDS 100μl 100μl

水 4.845ml 6.34ml

脱气15分钟，加入

新的10％过硫酸铵 50μl 50μl

TEMED 5μl 10μl

Mini-ProteanII Dual Slab小室；每块凝胶用3.5ml分离缓冲液。将4％的堆积胶倾在上部。在200V的恒定电压下对所述凝胶进行电泳。电泳是在10x电泳缓冲液(250mMTris，1.92M甘油，1％SDS，pH8.3)中进行的。

测定淀粉被囊化区的方法：

溶液：

提取缓冲液： 50mMTris乙酸，pH7.5，10mMEDTA，10％蔗

糖，2.5mM新配制的DTT。

堆积缓冲液： 0.5MTris-HCL，pH6.8

分离缓冲液： 1.5MTris-HCL，pH6.8

10X下电极缓冲液： 30.3gTris+144g甘氨酸，将体积调至1L(pH

为大约8.3，不作调整)。稀释后使用。

上电极缓冲液：同下电极缓冲液

蔗糖溶液： 18.66g蔗糖+100ml蒸馏水

30％Acryl/Bis母液 146g丙烯酰胺+4gbis+350ml蒸馏水

(2.67％C)：调至500ml。过滤，并在4℃下于黑暗中保

存达1个月。

15％Acryl/Bis母液 6g丙烯酰胺+1.5gbis+25ml蒸馏水

(20％C)：调至50ml。过滤，并在4℃下于黑暗中保存

达1个月。

核黄素溶液： 1.4g核黄素+100ml蒸馏水。于黑暗中保

存达1个月。

SS测定混合物： 25mM柠檬酸钠，25mMBicine-NaOH(pH8.0)，

2mMEDTA，1mM新配制的DTT，1mM新配制

的腺苷5’二磷酸葡萄糖，10mg/ml新配制

的III型兔肝糖原。

碘溶液： 2g碘+20gKI，加0.1N HCl至1L。

提取：

.4ml提取缓冲液+12g胚乳。匀浆。

.通过米拉布或4层纱布过滤，20,000g(14,500rpm，SM-24

转子)离心，

20分钟，4℃。

.用玻璃移液管除去上清液。

.0.85ml提取液+0.1ml甘油+0.05ml0.5％溴酚蓝。

.涡旋并全速离心5分钟。直接使用或冷冻于液氮中并在-80

℃下保存长达2周。

浇灌凝胶：

用透明胶带将Gel Bond PAG膜(FMC Industries，Rockland，ME)连接在外玻板(的内侧)上，使亲水一侧向上。调节所述胶带和膜，使其尽可能紧密和均匀地接触所述玻板的底部。所述膜略小于玻板。将水注入所述膜和玻板之间，以吸附该膜。用织物挤出多余的水。用常用方法组装玻板，然后用粘性粘合剂密封所述玻板的底部。如果已将格雷氏橡胶(gray rubber)从所述浇灌架上取出，即可将所述组装件放入该浇灌架中。所述凝胶与所述膜聚合，并在随后的所有操作中保持接触。

浇灌4.5％T分离小凝胶(0.75mm)：

2.25ml蒸馏水

+3.75ml蔗糖溶液

+2.5ml分离缓冲液

+1.5ml30％ Acryl/Bis母液

+每种凝胶加不同量的糖原(即：0-1.0％)

脱气15分钟

+50μl l0％APS

+5μl TEMED

聚合30分钟或过夜

浇灌3.125％T母液：

1.59ml蒸馏水

+3.75ml蔗糖溶液

+2.5ml堆积缓冲液

+2.083ml 15％ Acryl/Bis母液

不进行脱气

15μl 10％APS

+35μl核黄素溶液

+30μl TEMED

靠近一盏灯泡聚合2.5小时

在拔出梳子之前于4℃下冷却。也可以不用梳子，仅浇灌1厘米厚的堆积胶。

上述方法：

.可以在不同温度下进行；预温育凝胶和溶液。

.在200V电压下预电泳15分钟。

.凝胶加样：每孔7μl，如果无梳子的话每孔115μl。

.在140V电压下电泳，直到染料前部接近底部。通过将整个凝胶装

置放在水浴中可以达到各种电泳温度。可以偶尔终止电泳以便将

温度探测头插入凝胶。

.酶测定：切除染料前部的凝胶。在SS中温育。在室温下轻摇测定

混合物过夜。用水漂洗凝胶。用I2/KI溶液冲洗。

.在灯箱上给所述凝胶照相，并测定照片。Rm＝从凝胶上部到活性带

处的距离mm/从凝胶上部到其被切割部位(染料前部所在处)底

部的距离。用％糖原量对1/Rm作图。其曲线与x轴的交点是-K(此

时y＝0)。

SER片段长度的测定和评价方法：

在上述方法之后，为了选择SER片段需要4个基本步骤。首先，必须选择编码一种具有淀粉被囊化区的蛋白的DNA。例如，可以从诸如淀粉酶基因的已知淀粉合成基因或淀粉结合基因中选择所述DNA。必须提取所述蛋白。有多种蛋白提取技术为本领域所熟知。可以用蛋白酶处理所述蛋白，以生成不同长度的蛋白片段。优选的片段主要是缺失了该蛋白的N-末端片段。与N-末端相比，SER区更靠近C-末端。

让所述蛋白在上述凝胶上电泳，并评价对该凝胶基质的亲和力。更高的亲和力表示上述蛋白的所述区域对该基质有优先选择性。该方法可以对不同蛋白进行比较，以鉴定天然或合成蛋白中的淀粉被囊化区。

实施例2：

SER融合载体：

以下的融合载体适用于大肠杆菌中。与该载体上的可检测SER结合的融合基因编码绿色荧光蛋白(GFP)。可将任意数量的编码蛋白和多肽的不同基因连接到该载体上。所构建的一种融合载体具有与第二个基因或基因片段融合的蜡质玉米的SER，在这里，所述第二个基因是GFP。

pEXS114(见图1a)：用引物EXS73(5’-GACTAGTCATATG GTG AGCAAG GGC GAG GAG-3’)[序列1]和EXS74(5’-CTAGATCTTCATATG CTTGTA CAG CTC GTC CAT GCC-3’)[序列2]，由质粒HBT-SGFP(由分子生物学系的Jen Sheen提供；Wellman 11，MGH；波斯登，MA02114)PCR扩增合成的GFP(SGFP)。用T DNA聚合酶将PCR产物末端补齐，以产生平端；然后用SpeI消化该PCR产物。将该SGFP片段亚克隆到pBSK(Stratagene，11011North Torrey Pines路，La Jolla，加拿大)的EcoRV-Spe I位点，以产生pEXS114。

pEXS115(见图1b)：用引物EXS73(同上)和EXS75(5’-CTAGATCTTGGCCATGGC CTT GTA CAG CTC GTC CAT GCC-3’)[序列3]，由质粒HBT-SGFP(由Jen Sheen提供)PCR扩增合成的GFP(SGFP)。用T DNA聚合酶将PCR产物末端补齐，以产生平端；然后用SpeI消化该PCR产物。将该SGFP片段亚克隆到pBSK(Stratagene)的EcoRV-Spe I位点，以产生pEXS115。

pEXSWX(见图2a)：将玉米WX的NdeI-NotI片段亚克隆到pET-21a上(见图2b)。基因组DNA序列及可由其产生mRNA序列的有关氨基酸示于下面的表1a和1b中，另外，还可以使用列于下表中所列的DNA。

表1a

玉米waxy基因的DNA序列和推定的氨基酸序列

[序列4和序列5]

基因座 ZMWAXY 4800bp DNA PLN

定义 Zea mays waxy(wx+)locus for UDP-glucose starch glycosyl

transferase.

编号 X03935 M24258

关键词葡糖基转移酶转运肽 UDP葡糖淀粉糖基转移酶

waxy基因座

来源玉米

生物体 Zea mays

Eukaryota；Plantae；Embryobionta；Magnoliophyta；Liliopsida；

Commelinidae；Cyperales；Poaceae.

参考文献 1(bases 1 to 4800)

作者 Kloesgen，R.B.，Gierl，A.，Schwarz-Sommer，Z.and Saedler，H.

题目 Molecular analysis of the waxy locus of Zea mays

杂志 Mol.Gen.Genet.203，237-244(1986)

标准 full automatic

注释 NCBI gi：22509

特征 Location/Qualifiers

来源 1..4800

/organism＝″Zea mays″

重复区 283..287

/note＝″direct repeat 1″

重复区 288..292

/note＝″direct repeat 1″

重复区 293..297

/note＝″direct repeat 1″

重复区 _ 298..302

/note＝″direct repeat 1″

misc_feature 372..385

/note＝″GC stretch(pot.regulatory factor bindingsite)″

misc_feature 442..468

/note＝″GC stretch(pot.regulatory factor bindingsite)″

misc_feature 768..782

/note＝″GC stretch(pot.regulatory factor bindingsite)″

misc_feature 810..822

/note＝″GC stretch(pot.regulatory factor bindingsite)″

misc_feature 821..828

/note＝″target duplication site (Ac7)″

CAAT_signal 821..828

TATA_signal 867..873

misc_feature 887..900

/note＝″GC stretch(pot.regulatory factor bindingsite)″

misc_feature 901

/note＝″transcriptional start site″

exon 901..1080

/number＝1

内含子 1081..1219

/number＝1

外显子 1220..1553

/number＝2

transit_peptide 1233..1448

CDS join(1449..1553，1685..1765，1860..1958，2055..2144，2226..2289，2413..2513，2651..2760，2858..3101，3212..3394，

3490..3681，3793..3879，3977..4105，4227..4343)

/note＝″NCBI gi：22510″

/codon_start＝1

/product＝″glucosyl transferase″/translation＝″ASAGMNVVFVGAEMAPWSKTGGLGDVLGGLPPAMAANGHRVMVVSPRYDQYKDAWDTSVVSEIKMGDGYETVRFFHCYKRGVDRVFVDHPLFLERVWGKTEEKIYGPVAGTDYRDNQLRFSLLCQAALEAPRILSLNNNPYFSGPYGEDVVFVCNDWHTGPLSCYLKSNYQSHGIYRDAKTAFCIHNISYQGRFAFSDYPELNLPERFKSSFDFIDGYEKPVEGRKINWMKAGILEADRVLTVSPYYAEELISGIARGCELDNIMRLTGITGIVNGMDVSEWDPSRDKYIAVKYDVSTAVEAKALNKEALQAEVGLPVDRNIPLVAFIGRLEEQKGPDVMAAAIPQLMEMVEDVQIVLLGTGKKKFERMLMSAEEKFPGKVRAVVKFNAALAHHIMAGADVLAVTSRFEPCGLIQLQGMRYGTPCACASTGGLVDTIIEGKTGFHMGRLSVDCNVVEPADVKKVATTLQRAIKVVGTPAYEEMVRNCMIQDLSWKGPAKNWENVLLSL

GVAGGEPGVEGEEIAPLAKENVAAP″

内含子

1554..1684

/number＝2

外显子

1685..1765

/number＝3

内含子

1766..1859

/number＝3

外显子

1860..1958

/number＝4

内含子 1959..2054

/number＝4

外显子 2055..2144

/number＝5

内含子 2145..2225

/number＝5

外显子 2226..2289

/number＝6

内含子 2290..2412

/number＝6

外显子 2413..2513

/number＝7

内含子 2514..2650

/number＝7

外显子 2651..2760

/number＝8

内含子 2761..2857

/number＝8

外显子 2858..3101

/number＝9

内含子 3102..3211

/number＝9

外显子 3212..3394

/humber＝10

misc_feature 3358..3365

/note＝″target duplication site (Ac9)″

内含子 3395..3489

/number＝10

外显子 349Q..3681

/number＝11

misc_feature 3570..3572

/note＝″target duplication site(Spm 18)″

内含子 3682..3792

/number＝11

外显子 3793..3879

/number＝12

内含子 3880..3976

/number＝12

外显子 3977..4105

/number＝13

内含子 4106..4226

/number＝13

外显子 4227..4595

/number＝14

polyA_signal 4570..4575

polyA_signal 4593..4598

polyA_site 4595

polyA_signal 4597..4602

polyA_site 4618

polyA_site 4625BASE COUNT 935 A 1413 C 1447 G 1005 TCRIGIN

1 CAGCGACCTA TTACACAGCC CGCTCGGGCC CGCGACGTCG GGACACATCT TCTTCCCCCT

61 TTTGGTGAAG CTCTGCTCGC AGCTGTCCGG CTCCTTGGAC GTTCGTGTGG CAGATTCATC

121 TGTTGTCTCG TCTCCTGTGC TTCCTGGGTA GCTTGTGTAG TGGAGCTGAC ATGGTCTGAG

181 CAGGCTTAAA ATTTGCTCGT AGACGAGGAG TACCAGCACA GCACGTTGCG GATTTCTCTG

241 CCTGTGAAGT GCAACGTCTA GGATTGTCAC ACGCCTTGGT CGCGTCGCGT CGCGTCGCGT

301 CGATGCGGTG GTGAGCAGAG CAGCAACAGC TGGGCGGCCC AACGTTGGCT TCCGTGTCTT

361 CGTCGTACGT ACGCGCGCGC CGGGGACACG CAGCAGAGAG CGGAGAGCGA GCCGTGCACG

421 GGGAGGTGGT GTGGAAGTGG AGCCGCGCGC CCGGCCGCCC GCGCCCGGTG GGCAACCCAA

481 AAGTACCCAC GACAAGCGAA GGCGCCAAAG CGATCCAAGC TCCGGAACGC AACAGCATGC

541 GTCGCGTCGG AGAGCCAGCC ACAAGCAGCC GAGAACCGAA CCGGTGGGCG ACGCGTCATG

601 GGACGGACGC GGGCGACGCT TCCAAACGGG CCACGTACGC CGGCGTGTGC GTGCGTGCAG

661 ACGACAAGCC AAGGCGAGGC AGCCCCCGAT CGGGAAAGCG TTTTGGGCGC GAGCGCTGGC

721 GTGCGGGTCA GTCGCTGGTG CGCAGTGCCG GGGGGAACGG GTATCGTGGG GGGCGCGGGC

781 GGAGGAGAGC GTGGCGAGGG CCGAGAGCAG CGCGCGGCCG GGTCACGCAA CGCGCCCCAC

841 GTACTGCCCT CCCCCTCCGC GCGCGCTAGA AATACCGAGG CCTGGACCGG GGGGGGGCCC

901 CGTCACATCC ATCCATCGAC CGATCGATCG CCACAGCCAA CACCACCCGC CGAGGCGACG

961 CGACAGCCGC CAGGAGGAAG GAATAAACTC ACTGCCAGCC AGTGAAGGGG GAGAAGTGTA

1021 CTGCTCCGTC GACCAGTGCG CGCACCGCCC GGCAGGGCTG CTCATCTCGT CGACGACCAG

1081 GTTCTGTTCC GTTCCGATCC GATCCGATCC TGTCCTTGAG TTTCGTCCAG ATCCTGGCGC

1141 GTATCTGCGT GTTTGATGAT CCAGGTTCTT CGAACCTAAA TCTGTCCGTG CACACGTCTT

1201 TTCTCTCTCT CCTACGCAGT GGATTAATCG GCATGGCGGC TCTGGCCACG TCGCAGCTCG

1261 TCGCAACGCG CGCCGGCCTG GGCGTCCCGG ACGCGTCCAC GTTCCCCCCC GGCCCCGCGC

1321 AGGGCCTGAG GGGGGCCCGG GCGTCGGCGG CGGCGGACAC GCTCAGCATG CGGACCAGCG

1381 CGCGCGCGGC GCCCAGGCAC CAGCAGCAGG CGCGCCGCGG GGGCAGGTTC CCGTCGCTCG

1441 TCGTGTGCGC CAGCGCCGGC ATGAACGTCG TCTTCGTCGG CGCCGAGATG GCGCCGTGGA

1501 GCAAGACCGG CGGCCTCGGC GACGTCCTCG GCGGCCTGCC GCCGGCCATG GCCGTAAGCG

1561 CGCGCACCGA GACATGCATC CGTTGGATCG CGTCTTCTTC GTGCTCTTGC CGCGTGcATG

1621 ATGCATGTGT TTCCTCCTGG CTTGTGTTCG TGTATGTGAC GTGTTTGTTC GGGCATGCAT

1681 GCAGGCGAAC GGGCACCGTG TCATGGTCGT CTCTCCCCGC TACGACCAGT ACAAGGACGC

1741 CTGGGACACC AGCGTCGTGT CCGAGGTACG GCCACCGAGA CCAGATTCAG ATCACAGTCA

1801 CACACACCGT CATATGAACC TTTCTCTGCT CTGATGCCTG CAACTGCAAA TGCATGCAGA

1861 TCAAGATGGG AGACGGGTAC GAGACGGTCA GGTTCTTCCA CTGCTACAAG CGCGGAGTGG

1921 ACCGCGTGTT CGTTGACCAC CCACTGTTCC TGGAGAGGGT GAGACGAGAT CTGATCACTC

1981 GATACGCAAT TACCACCCCA TTGTAAGCAG TTACAGTGAG CTTTTTTTCC CCCCGGCCTG

2041 GTCGCTGGTT TCAGGTTTGG GGAAAGACCG AGGAGAAGAT CTACGGGCCT GTCGCTGGAA

2101 CGGACTACAG GGACAACCAG CTGCGGTTCA GCCTGCTATG CCAGGTCAGG ATGGCTTGGT

2161 ACTACAACTT CATATCATCT GTATGCAGCA GTATACACTG ATGAGAAATG CATGCTGTTC

2221 TGCAGGCAGC ACTTGAAGCT CCAAGGATCC TGAGCCTCAA CAACAACCCA TACTTCTCCG

2281 GACCATACGG TAAGAGTTGC AGTCTTCGTA TATATATCTG TTGAGCTCGA GAATCTTCAC

2341 AGGAAGCGGC CCATCAGACG GACTGTCATT TTACACTGAC TACTGCTGCT GCTCTTCGTC

2401 CATCCATACA AGGGGAGGAC GTCGTGTTCG TCTGCAACGA CTGGCACACC GGCCCTCTCT

2461 CGTGCTACCT CAAGAGCAAC TACCAGTCCC ACGGCATCTA CAGGGACGCA AAGGTTGCCT

2521 TCTCTGAACT GAACAACGCC GTTTTCGTTC TCCATGCTCG TATATACCTC GTCTGGTAGT

2581 GGTGGTGCTT CTCTGAGAAA CTAACTGAAA CTGACTGCAT GTCTGTCTGA CCATCTTCAC

2641 GTACTACCAG ACCGCTTTCT GCATCCACAA CATCTCCTAC CAGGGCCGGT TCGCCTTCTC

2701 CGACTACCCG GAGCTGAACC TCCCGGAGAG ATTCAAGTCG TCCTTCGATT TCATCGACGG

2761 GTCTGTTTTC CTGCGTGCAT GTGAACATTC ATGAATGGTA ACCCACAACT GTTCGCGTCC

2821 TGCTGGTTCA TTATCTGACC TGATTGCATT ATTGCAGCTA CGAGAAGCCC GTGGAAGGCC

2881 GGAAGATCAA CTGGATGAAG GCCGGGATCC TCGAGGCCGA CAGGGTCCTC ACCGTCAGCC

2941 CCTACTACGC CGAGGAGCTC ATCTCCGGCA TCGCCAGGGG CTGCGAGCTC GACAACATCA

3001 TGCGCCTCAC CGGCATCACC GGCATCGTCA ACGGCATGGA CGTCAGCGAG TGGGACCCCA

3061 GCAGGGACAA GTACATCGCC GTGAAGTACG ACGTGTCGAC GGTGAGCTGG CTAGCTCTGA

3121 TTCTGCTGCC TGGTCCTCCT GCTCATCATG CTGGTTCGGT ACTGACGCGG CAAGTGTACG

3181 TACGTGCGTG CGACGGTGGT GTCCGGTTCA GGCCGTGGAG GCCAAGGCGC TGAACAAGGA

3241 GGCGCTGCAG GCGGAGGTCG GGCTCCCGGT GGACCGGAAC ATCCCGCTGG TGGCGTTCAT

3301 CGGCAGGCTG GAAGAGCAGA AGGGCCCCGA CGTCATGGCG GCCGCCATCC CGCAGCTCAT

3361 GGAGATGGTG GAGGACGTGC AGATCGTTCT GCTGGTACGT GTGCGCCGGC CGCCACCCGG

3421 CTACTACATG CGTGTATCGT TCGTTCTACT GGAACATGCG TGTGAGCAAC GCGATGGATA

3481 ATGCTGCAGG GCACGGGCAA GAAGAAGTTC GAGCGCATGC TCATGAGCGC CGAGGAGAAG

3541 TTCCCAGGCA AGGTGCGCGC CGTGGTCAAG TTCAACGCGG CGCTGGCGCA CCACATCATG

3601 GCCGGCGCCG ACGTGCTCGC CGTCACCAGC CGCTTCGAGC CCTGCGGCCT CATCCAGCTG

3661 CAGGGGATGC GATACGGAAC GGTACGAGAG AAAAAAAAAA TCCTGAATCC TGACGAGAGG

3721 GACAGAGACA GATTATGAAT GCTTCATCGA TTTGAATTGA TTGATCGATG TCTCCCGCTG

3781 CGACTCTTGC AGCCCTGCGC CTGCGCGTCC ACCGGTGGAC TCGTCGACAC CATCATCGAA

3841 GGCAAGACCG GGTTCCACAT GGGCCGCCTC AGCGTCGACG TAAGCCTAGC TCTGCCATGT

3901 TCTTTCTTCT TTCTTTCTGT ATGTATGTAT GAATCAGCAC CGCCGTTCTT GTTTCGTCGT

3961 CGTCCTCTCT TCCCAGTGTA ACGTCGTGGA GCCGGCGGAC GTCAAGAAGG TGGCCACCAC

4021 ATTGCAGCGC GCCATCAAGG TGGTCGGCAC GCCGGCGTAC GAGGAGATGG TGAGGAACTG

4081 CATGATCCAG GATCTCTCCT GGAAGGTACG TACGCCCGCC CCGCCCCGCC CCGCCAGAGC

4141 AGAGCGCCAA GATCGACCGA TCGACCGACC ACACGTACGC GCCTCGCTCC TGTCGCTGAC

4201 CGTGGTTTAA TTTGCGAAAT GCGCAGGGCC CTGCCAAGAA CTGGGAGAAC GTGCTGCTCA

4261 GCCTCGGGGT CGCCGGCGGC GAGCCAGGGG TCGAAGGCGA GGAGATCGCG CCGCTCGCCA

4321 AGGAGAACGT GGCCGCGCCC TGAAGAGTTC GGCCTGCAGG GCCCCTGATC TCGCGCGTGG

4381 TGCAAAGATG TTGGGACATC TTCTTATATA TGCTGTTTCG TTTATGTGAT ATGGACAAGT

4441 ATGTGTAGCT GCTTGCTTGT GCTAGTGTAA TGTAGTGTAG TGGTGGCCAG TGGCACAACC

4501 TAATAAGCGC ATGAACTAAT TGCTTGCGTG TGTAGTTAAG TACCGATCGG TAATTTTATA

4561 TTGCGAGTAA ATAAATGGAC CTGTAGTGGT GGAGTAAATA ATCCCTGCTG TTCGGTGTTC

4621 TTATCGCTCC TCGTATAGAT ATTATATAGA GTACATTTTT CTCTCTCTGA ATCCTACGTT

4681 TGTGAAATTT CTATATCATT ACTGTAAAAT TTCTGCGTTC CAAAAGAGAC CATAGCCTAT

4741 CTTTGGCCCT GTTTGTTTCG GCTTCTGGCA GCTTCTGGCC ACCAAAAGCT GCTGCGGACT

表1b

稻waxy基因的DNA序列和推定的氨基酸序列

[序列6和序列7]

基因座 OSWX 2542bp RNA PLN

定义 O.satiVa Waxy mRNA.

编号 X62134 S39554

关健词葡糖基转移酶；淀粉生物合成；蜡质基因

来源稻

生物体 Eukaryota；Plantae；Embryobionta；Magnoliophyta；Liliopsida；

Commelinidae；Cyperales；Poaceae.

参考文献 1(basas 1 to 2542)

作者 Okayaki，R.J.

题目 Direct Submission

杂志 Submittsd(12-SEP-1991) to the EMBL/GenBank/DDBJ databases.

R.J.

Okayaki，University of Florida，Dep of Vegetable Crops，1255

Fifield Hall，514 IFAS，Gainesville，Florida 32611-0514，USA

STANDARD full automatic

参考文献 2(bases 1 to 2542)

作者 Okagaki，R.J.

题目 Nucleotide sequence of a long cDNA from the rice waxy gene

杂志 Plant Mol.Biol.19，513-516(1992)

标准 full automatic

注释 NCBI gi：20402

特征 Location/Qualifiers

来源 1..2542

/organism＝″Oryza sativa″

/dev_stage＝″immature seed″

/tissue_type＝″seed″

CDS 453..2282

/gene＝″Wx″

/standard_name＝″waxy gene″

/EC_number＝″2.4.1.21″

/note＝″NCBI gi：20403″

/codon_start＝1

/function＝″starch biosynthesis″

/product＝″starch (bacterial glycogen) synthase″/translation＝″MSALTTSQLATSATGFGIADRSAPSSLLRHGFQGLKPRSPAGGDATSLSVTTSARATPKQQRSVQRGSRRFPSVVVYATGAGMNVVFVGAEMAPWSKTGGLGDVLGGLPPAMAANGHRVMVISPRYDQYKDAWDTSVVAEIKVADRYERVRFFHCYKRGVDRVFIDHPSFLEKVWGXTGEKIYGPDTGVDYKDNQMRFSLLCQAALEAPRILNLNNNPYFKGTYGEDVVFVCNDWHTGPLASYLKNNYQPNGIYRNAKVAFCIHNISYQGRFAFEDYPELNLSERFRSSFDFIDGYDTPVEGRKINWMKAGILEADRVLTVSPYYAEELISGIARGCELDNIMRLTGITGIVNGMDVSEWDPSKDKYITAKYDATTAIEAKALNKEALQAEAGLPVDRKIPLIAFIGRLEEQKGPDVMAAAIPELMQEDVQIVLLGTGKKKFEKLLKSMEEKYPGKVRAVVKFNAPLAHLIMAGADVLAVPSRFEPCGLIQLQGMRYGTPCACASTGGLVDTVIEGKTGFHMGRLSVDCKVVEPSDVKKVAATLKRAIKVVGTPAYEEMVRNCMNQ

DLSWKGPAKNWENVLLGLGVAGSAPGIEGDEIAPLAKENVAAP″

3′UTR 2283..2535

polyA_site 2535BASE COUNT 610 A 665 C 693 G 574 TORIGIN

1 GAATTCAGTG TGAAGGAATA GATTCTCTTC AAAACAATTT AATCATTCAT CTGATCTGCT

61 CAAAGCTCTG TGCATCTCCG GGTGCAACGG CCAGGATATT TATTGTGCAG TAAAAAAATG

121 TCATATCCCC TAGCCACCCA AGAAACTGCT CCTTAAGTCC TTATAAGCAC ATATGGCATT

181 GTAATATATA TGTTTGAGTT TTAGCGACAA TTTTTTTAAA AACTTTTGGT CCTTTTTATG

241 AACGTTTTAA GTTTCACTGT CTTTTTTTTT CGAATTTTAA ATGTAGCTTC AAATTCTAAT

301 CCCCAATCCA AATTGTAATA AACTTCAATT CTCCTAATTA ACATCTTAAT TCATTTATTT

361 GAAAACCAGT TCAAATTCTT TTTAGGCTCA CCAAACCTTA AACAATTCAA TTCAGTGCAG

421 AGATCTTCCA CAGCAACAGC TAGACAACCA CCATGTCGGC TCTCACCACG TCCCAGCTCG

481 CCACCTCGGC CACCGGCTTC GGCATCGCCG ACAGGTCGGC GCCGTCGTCG CTGCTCCGCC

541 ACGGGTTCCA GGGCCTCAAG CCCCGCAGCC CCGCCGGCGG CGACGCGACG TCGCTCAGCG

601 TGACGACCAG CGCGCGCGCG ACGCCCAAGC AGCAGCGGTC GGTGCAGCGT GGCAGCCGGA

661 GGTTCCCCTC CGTCGTCGTG TACGCCACCG GCGCCGGCAT GAACGTCGTG TTCGTCGGCG

721 CCGAGATGGC CCCCTGGAGC AAGACCGGCG GCCTCGGTGA CGTCCTCGGT GGCCTCCCCC

781 CTGCCATGGC TGCGAATGGC CACAGGGTCA TGGTGATCTC TCCTCGGTAC GACCAGTACA

841 AGGACGCTTG GGATACCAGC GTTGTGGCTG AGATCAAGGT TGCAGACAGG TACGAGAGGG

901 TGAGGTTTTT CCATTGCTAC AAGCGTGGAG TCGACCGTGT GTTCATCGAC CATCCGTCAT

961 TCCTGGAGAA GGTTTGGGGA AAGACCGGTG AGAAGATCTA CGGACCTGAC ACTGGAGTTG

1021 ATTACAAAGA CAACCAGATG CGTTTCAGCC TTCTTTGCCA GGCAGCACTC GAGGCTCCTA

1081 GGATCCTAAA CCTCAACAAC AACCCATACT TCAAAGGAAC TTATGGTGAG GATGTTGTGT

1141 TCGTCTGCAA CGACTGGCAC ACTGGCCCAC TGGCGAGCTA CCTGAAGAAC AACTACCAGC

1201 CCAATGGCAT CTACAGGAAT GCAAAGGTTG CTTTCTGCAT CCACAACATC TCCTACCAGG

1261 GCCGTTTCGC TTTCGAGGAT TACCCTGAGC TGAACCTCTC CGAGAGGTTC AGGTCATCCT

1321 TCGATTTCAT CGACGGGTAT GACACGCCGG TGGAGGGCAG GAAGATCAAC TGGATGAAGG

1381 CCGGAATCCT GGAAGCCGAC AGGGTGCTCA CCGTGAGCCC GTACTACGCC GAGGAGCTCA

1441 TCTCCGGCAT CGCCAGGGGA TGCGAGCTCG ACAACATCAT GCGGCTCACC GGCATCACCG

1501 GCATCGTCAA CGGCATGGAC GTCAGCGAGT GGGATCCTAG CAAGGACAAG TACATCACCG

1561 CCAAGTACGA CGCAACCACG GCAATCGAGG CGAAGGCGCT GAACAAGGAG GCGTTGCAGG

1621 CGGAGGCGGG TCTTCCGGTC GACAGGAAAA TCCCACTGAT CGCGTTCATC GGCAGGCTGG

1681 AGGAACAGAA GGGCCCTGAC GTCATGGCCG CCGCCATCCC GGAGCTCATG CAGGAGGACG

1741 TCCAGATCGT TCTTCTGGGT ACTGGAAAGA AGAAGTTCGA GAAGCTGCTC AAGAGCATGG

1801 AGGAGAAGTA TCCGGGCAAG GTGAGGGCGG TGGTGAAGTT CAACGCGCCG CTTGCTCATC

1861 TCATCATGGC CGGAGCCGAC GTGCTCGCCG TCCCCAGCCG CTTCGAGCCC TGTGGACTCA

1921 TCCAGCTGCA GGGGATGAGA TACGGAACGC CCTGTGCTTG CGCGTCCACC GGTGGGCTCG

1981 TGGACACGGT CATCGAAGGC AAGACTGGTT TCCACATGGG CCGTCTCAGC GTCGACTGCA

2041 AGGTGGTGGA GCCAAGCGAC GTGAAGAAGG TGGCGGCCAC CCTGAAGCGC GCCATCAAGG

2101 TCGTCGGCAC GCCGGCGTAC GAGGAGATGG TCAGGAACTG CATGAACCAG GACCTCTCCT

2161 GGAAGGGGCC TGCGAAGAAC TGGGAGAATG TGCTCCTGGG CCTGGGCGTC GCCGGCAGCG

2221 CGCCGGGGAT CGAAGGCGAC GAGATCGCGC CGCTCGCCAA GGAGAACGTG GCTGCTCCTT

2281 GAAGAGCCTG AGATCTACAT ATGGAGTGAT TAATTAATAT AGCAGTATAT GGATGAGAGA

2341 CGAATGAACC AGTGGTTTGT TTGTTGTAGT GAATTTGTAG CTATAGCCAA TTATATAGGC

2401 TAATAAGTTT GATGTTGTAC TCTTCTGCGT GTGCTTAAGT ATCTTATCGG ACCCTGAATT

2461 TATGTGTGTG GCTTATTGCC AATAATATTA AGTAATAAAG GGTTTATTAT ATTATTATAT

2521 ATGTTATATT ATACTAAAAA AA

表2

玉米可溶性淀粉合成酶IIa基因的DNA序列和推定的氨基酸序列

[序列8和序列9]

文件名：MSS2C.SEQ 序列：正常2007BP

密码子表：UNIV.TCN

序列范围：1-2007

翻译范围：1-2007

★★★DNA翻译★★★

1 GCT GAG GCT GAG GCC GGG GGC AAG GAC GCG CCG CCG GAG AGG AGC GGC 48

1 A E A E A G G K D A P P E R S G 16

49 GAC GCC GCC AGG TTG CCC CGC GCT CGG CGC AAT GCG GTC TCC AAA CGG 96

17 D A A R L P R A R R N A V S K R 32

97 AGG GAT CCT CTT CAG CCG GTC GGC CGG TAC GGC TCC GCG ACG GGA AAC 144

33 R D P L Q P V G R Y G S A T G N 48

145 ACG GCC AGG ACC GGC GCC GCG TCC TGC CAG AAC GCC GCA TTG GCG GAC 192

49 T A R T G A A S C Q N A A L A D 64

193 GTT GAG ATC GTT GAG ATC AAG TCC ATC GTC GCC GCG CCG CCG ACG AGC 240

65 V E I V E I K S I V A A P P T S 80

241 ATA GTG AAG TTC CCA GGG CGC GGG CTA CAG GAT GAT CCT TCC CTC TGG 288

81 I V K F P G R G L Q D D P S L W 96

289 GAC ATA GCA CCG GAG ACT GTC CTC CCA GCC CCG AAG CCA CTG CAT GAA 336

97 D I A P E T V L P A P K P L H E 112

337 TCG CCT GCG GTT GAC GGA GAT TCA AAT GGA ATT GCA CCT CCT ACA GTT 384

113 S P A V D G D S N G I A P P T V 128

385 GAG CCA TTA GTA CAG GAG GCC ACT TGG GAT TTC AAG AAA TAC ATC GGT 432

129 E P L V Q E A T W D F K K Y I G 144

433 TTT GAC GAG CCT GAC GAA GCG AAG GAT GAT TCC AGG GTT GGT GCA GAT 480

145 F D E P D E A K D D S R V G A D 160

481 GAT GCT GGT TCT TTT GAA CAT TAT GGG ACA ATG ATT CTG GGC CTT TGT 528

161 D A G S F E H Y G T M I L G L C 176

529 GGG GAG AAT GTT ATG AAC GTG ATC GTG GTG GCT GCT GAA TGT TCT CCA 576

177 G E N V M N V I V V A A E C S P 192

577 TGG TGC AAA ACA GGT GGT CTT GGA GAT GTT GTG GGA GCT TTA CCC AAG 624

193 W C K T G G L G D V V G A L P K 208

625 GCT TTA GCG AGA AGA GGA CAT CGT GTT ATG GTT GTG GTA CCA AGG TAT 672

209 A L A R R G H R V M V V V P R Y 224

673 GGG GAC TAT GTG GAA GCC TTT GAT ATG GGA ATC CGG AAA TAC TAC AAA 720

225 G D Y V E A F D M G I R K Y Y K 240

721 GCT GCA GGA CAG GAC CTA GAA GTG AAC TAT TTC CAT GCA TTT ATT GAT 768

241 A A G Q D L E V N Y F H A F I D 256

769 GGA GTC GAC TTT GTG TTC ATT GAT GCC TCT TTC CGG CAC CGT CAA GAT 816

257 G V D F V F I D A S F R H R Q D 272

817 GAC ATA TAT GGG GGA AGT AGG CAG GAA ATC ATG AAG CGC ATG ATT TTG 864

273 D I Y G G S R Q E I M K R M I L 288

865 TTT TGC AAG GTT GCT GTT GAG GTT CCT TGG CAC GTT CCA TGC GGT GGT 912

289 F C K V A V E V P W H V P C G G 304

913 GTG TGC TAC GGA GAT GGA AAT TTG GTG TTC ATT GCC ATG AAT TGG CAC 960

305 V C Y G D G N L V F I A M N W H 320

961 ACT GCA CTC CTG CCT GTT TAT CTG AAG GCA TAT TAC AGA GAC CAT GGG 1008

321 T A L L P V Y L K A Y Y R D H G 336

1009 TTA ATG CAG TAC ACT CGC TCC GTC CTC GTC ATA CAT AAC ATC GGC CAC 1056

337 L M Q Y T R S V L V I H N I G H 352

1057 CAG GGC CGT GGT CCT GTA CAT GAA TTC CCG TAC ATG GAC TTG CTG AAC 1104

353 Q G R G P V H E F P Y M D L L N 368

1105 ACT AAC CTT CAA CAT TTC GAG CTG TAC GAT CCC GTC GGT GGC GAG CAC 1152

369 T N L Q H F E L Y D P V G G E H 384

1153 GCC AAC ATC TTT GCC GCG TGT GTT CTG AAG ATG GCA GAC CGG GTG GTG 1200

385 A N I F A A C V L K M A D R V V 400

1201 ACT GTC AGC CGC GGC TAC CTG TGG GAG CTG AAG ACA GTG GAA GGC GGC 1248

401 T V S R G Y L W E L K T V E G G 416

1249 TGG GGC CTC CAC GAC ATC ATC CGT TCT AAC GAC TGG AAG ATC AAT GGC 1296

417 W G L H D I I R S N D W K I N G 432

1297 ATT CGT GAA CGC ATC GAC CAC CAG GAG TGG AAC CCC AAG GTG GAC GTG 1344

433 I R E R I D H Q E W N P K V D V 448

1345 CAC CTG CGG TCG GAC GGC TAC ACC AAC TAC TCC CTC GAG ACA CTC GAC 1392

449 H L R S D G Y T N Y S L E T L D 464

1393 GCT GGA AAG CGG CAG TGC AAG GCG GCC CTG CAG CGG GAC GTG GGC CTG 1440

465 A G K R Q C K A A L Q R D V G L 480

1441 GAA GTG CGC GAC GAC GTG CCG CTG CTC GGC TTC ATC GGG CGT CTG GAT 1488

481 E V R D D V P L L G F I G R L D 496

1489 GGA CAG AAG GGC GTG GAC ATC ATC GGG GAC GCG ATG CCG TGG ATC GCG 1536

497 G Q K G V D I I G D A M P W I A 512

1537 GGG CAG GAC GTG CAG CTG GTG ATG CTG GGC ACC GGC CCA CCT GAC CTG 1584

513 G Q D V Q L V M L G T G P P D L 528

1585 GAA CGA ATG CTG CAG CAC TTG GAG CGG GAG CAT CCC AAC AAG GTG CGC 1632

529 E R M L Q H L E R E H P N K V R 544

1633 GGG TGG GTC GGG TTC TCG GTC CTA ATG GTG CAT CGC ATC ACG CCG GGC 1680

545 G W V G F S V L M V H R I T P G 560

1681 GCC AGC GTG CTG GTG ATG CCC TCC CGC TTC GCC GGC GGG CTG AAC CAG 1728

561 A S V L V M P S R F A G G L N Q 576

1729 CTC TAC GCG ATG GCA TAC GGC ACC GTC CCT GTG GTG CAC GCC GTG GGC 1776

577 L Y A M A Y G T V P V V H A V G 592

1777 GGG CTC AGG GAC ACC GTG GCG CCG TTC GAC CCG TTC GGC GAC GCC GGG 1824

593 G L R D T V A P F D P F G D A G 608

1825 CTC GGG TGG ACT TTT GAC CGC GCC GAG GCC AAC AAG CTG ATC GAG GTG 1872

609 L G W T F D R A E A N K L I E V 624

1873 CTC AGC CAC TGC CTC GAC ACG TAC CGA AAC TAC GAG GAG AGC TGG AAG 1920

625 L S H C L D T Y R N Y E E S W K 640

1921 AGT CTC CAG GCG CGC GGC ATG TCG CAG AAC CTC AGC TGG GAC CAC GCG 1968

641 S L Q A R G M S Q N L S W D H A 656

1969 GCT GAG CTC TAC GAG GAC GTC CTT GTC AAG TAC CAG TGG 2007

657 A E L Y E D V L V K Y Q W 669

表3

玉米可溶性淀粉合成酶IIb基因的DNA序列和推定的氨基酸序列

[序列10和序列11]

文件名：MSS3FULL.DNA 序列：正常2097BP

密码子表：UNIV.TCN

序列范围：1-2097

翻译范围：1-2097

★★★DNA翻译★★★

1 ATG CCG GGG GCA ATC TCT TCC TCG TCG TCG GCT TTT CTC CTC CCC GTC 48

1 M P G A I S S S S S A F L L P V 16

49 GCG TCC TCC TCG CCG CGG CGC AGG CGG GGC AGT GTG GGT GCT GCT CTG 96

17 A S S S P R R R R G S V G A A L 32

97 CGC TCG TAC GGC TAC AGC GGC GCG GAG CTG CGG TTG CAT TGG GCG CGG 144

33 R S Y G Y S G A E L R L H W A R 48

145 CGG GGC CCG CCT CAG GAT GGA GCG GCG TCG GTA CGC GCC GCA GCG GCA 192

49 R G P P Q D G A A S V R A A A A 64

193 CCG GCC GGG GGC GAA AGC GAG GAG GCA GCG AAG AGC TCC TCC TCG TCC 240

65 P A G G E S E E A A K S S S S S 80

241 CAG GCG GGC GCT GTT CAG GGC AGC ACG GCC AAG GCT GTG GAT TCT GCT 288

81 Q A G A V Q G S T A K A V D S A 96

289 TCA CCT CCC AAT CCT TTG ACA TCT GCT CCG AAG CAA AGT CAG AGC GCT 336

97 S P P N P L T S A P K Q S Q S A 112

337 GCA ATG CAA AAC GGA ACG AGT GGG GGC AGC AGC GCG AGC ACC GCC GCG 384

113 A M Q N G T S G G S S A S T A A 128

385 CCG GTG TCC GGA CCC AAA GCT GAT CAT CCA TCA GCT CCT GTC ACC AAG 432

129 P V S G P K A D H P S A P V T K 144

433 AGA GAA ATC GAT GCC AGT GCG GTG AAG CCA GAG CCC GCA GGT GAT GAT 480

145 R E I D A S A V K P E P A G D D 160

481 GCT AGA CCG GTG GAA AGC ATA GGC ATC GCT GAA CCG GTG GAT GCT AAG 528

161 A R P V E S I G I A E P V D A K 176

529 GCT GAT GCA GCT CCG GCT ACA GAT GCG GCG GCG AGT GCT CCT TAT GAC 576

177 A D A A P A T D A A A S A P Y D 192

577 AGG GAG GAT AAT GAA CCT GGC CCT TTG GCT GGG CCT AAT GTG ATG AAC 624

193 R E D N E P G P L A G P N V M N 208

625 GTC GTC GTG GTG GCT TCT GAA TGT GCT CCT TTC TGC AAG ACA GGT GGC 672

209 V V V V A S E C A P F C K T G G 224

673 CTT GGA GAT GTC GTG GGT GCT TTG CCT AAG GCT CTG GCG AGG AGA GGA 720

225 L G D V V G A L P K A L A R R G 240

721 CAC CGT GTT ATG GTC GTG ATA CCA AGA TAT GGA GAG TAT GCC GAA GCC 768

241 H R V M V V I P R Y G E Y A E A 255

769 CGG GAT TTA GGT GTA AGG AGA CGT TAC AAG GTA GCT GGA CAG GAT TCA 815

257 R D L G V R R R Y K V A G Q D S 272

817 GAA GTT ACT TAT TTT CAC TCT TAC ATT GAT GGA GTT GAT TTT GTA TTC 864

273 E V T Y F H S Y I D G V D F V F 288

865 GTA GAA GCC CCT CCC TTC CGG CAC CGG CAC AAT AAT ATT TAT GGG GGA 912

289 V E A P P F R H R H N N I Y G G 304

913 GAA AGA TTG GAT ATT TTG AAG CGC ATG ATT TTG TTC TGC AAG GCC GCT 960

305 E R L D I L K R M I L F C K A A 320

961 GTT GAG GTT CCA TGG TAT GCT CCA TGT GGC GGT ACT GTC TAT GGT GAT 1008

321 V E V P W Y A P C G G T V Y G D 336

1009 GGC AAC TTA GTT TTC ATT GCT AAT GAT TGG CAT ACC GCA CTT CTG CCT 1056

337 G N L V F I A N D W H T A L L P 352

1057 GTC TAT CTA AAG GCC TAT TAC CGG GAC AAT GGT TTG ATG CAG TAT GCT 1104

353 V Y L K A Y Y R D N G L M Q Y A 368

1105 CGC TCT GTG CTT GTG ATA CAC AAC ATT GCT CAT CAG GGT CGT GGC CCT 1152

369 R S V L V I H N I A H Q G R G P 384

1153 GTA GAC GAC TTC GTC AAT TTT GAC TTG CCT GAA CAC TAC ATC GAC CAC 1200

385 V D D F V N F D L P E H Y I D H 400

1201 TTC AAA CTG TAT GAC AAC ATT GGT GGG GAT CAC AGC AAC GTT TTT GCT 1248

401 F K L Y D N I G G D H S N V F A 416

1249 GCG GGG CTG AAG ACG GCA GAC CGG GTG GTG ACC GTT AGC AAT GGC TAC 1296

417 A G L K T A D R V V T V S N G Y 432

1297 ATG TGG GAG CTG AAG ACT TCG GAA GGC GGG TGG GGC CTC CAC GAC ATC 1344

433 M W E L K T S E G G W G L H D I 448

1345 ATA AAC CAG AAC GAC TGG AAG CTG CAG GGC ATC GTG AAC GGC ATC GAC 1392

449 I N Q N D W K L Q G I V N G I D 464

1393 ATG AGC GAG TGG AAC CCC GCT GTG GAC GTG CAC CTC CAC TCC GAC GAC 1440

465 M S E W N P A V D V H L H S D D 480

1441 TAC ACC AAC TAC ACG TTC GAG ACG CTG GAC ACC GGC AAG CGG CAG TGC 1488

481 Y T N Y T F E T L D T G K R Q C 496

1489 AAG GCC GCC CTG CAG CGG CAG CTG GGC CTG CAG GTC CGC GAC GAC GTG 1536

497 K A A L Q R Q L G L Q V R D D V 512

1537 CCA CTG ATC GGG TTC ATC GGG CGG CTG GAC CAC CAG AAG GGC GTG GAC 1584

513 P L I G F I G R L D H Q K G V D 528

1585 ATC ATC GCC GAC GCG ATC CAC TGG ATC GCG GGG CAG GAC GTG CAG CTC 632

529 I I A D A I H W I A G Q D V Q L 544

1633 GTG ATG CTG GGC ACC GGG CGG GCC GAC CTG GAG GAC ATG CTG CGG CGG 1680

545 V M L G T G R A D L E D M L R R 560

1681 TTC GAG TCG GAG CAC AGC GAC AAG GTG CGC GCG TGG GTG GGG TTC TCG 1728

561 F E S E H S D K V R A W V G F S 576

1729 GTG CCC CTG GCG CAC CGC ATC ACG GCG GGC GCG GAC ATC CTG CTG ATG 1776

577 V P L A H R I T A G A D I L L M 592

1777 CCG TCG CGG TTC GAG CCG TGC GGG CTG AAC CAG CTC TAC GCC ATG GCG 1824

593 P S R F E P C G L N Q L Y A M A 608

1825 TAC GGG ACC GTG CCC GTG GTG CAC GCC GTG GGG GGG CTC CGG GAC ACG 1872

609 Y G T V P V V H A V G G L R D T 624

1873 GTG GCG CCG TTC GAC CCG TTC AAC GAC ACC GGG CTC GGG TGG ACG TTC 1920

625 V A P F D P F N D T G L G W T F 640

1921 GAC CGC GCG GAG GCG AAC CGG ATG ATC GAC GCG CTC TCG CAC TGC CTC 1968

641 D R A E A N R M I D A L S H C L 656

1969 ACC ACG TAC CGG AAC TAC AAG GAG AGC TGG CGC GCC TGC AGG GCG CGC 2016

657 T T Y R N Y K E S W R A C R A R 672

2017 GGC ATG GCC GAG GAC CTC AGC TGG GAC CAC GCC GCC GTG CTG TAT GAG 2064

673 G M A E D L S W D H A A V L Y E 688

2065 GAC GTG CTC GTC AAG GCG AAG TAC CAG TGG TGA 2097

689 D V L V K A K Y Q W * 699

表4

玉米可溶性淀粉合成酶I基因的DNA序列和推定的氨基酸序列

[序列12和序列13]

文件名：MSS3FULL.DNA 序列：正常1752BP

密码子表：UNIV.TCN

序列范围：1-1752

翻译范围：1-1752

★★★DNA翻译★★★

TGC GTC GCG GAG CTG AGC AGG GAG GGG CCC GCG CCG CGC CCG CTG CCA 48

Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Gly Pro Ala Pro Arg Pro Leu Pro

700 705 710 715

CCC GCG CTG CTG GCG CCC CCG CTC GTG CCC GGC TTC CTC GCG CCG CCG 96

Pro Ala Leu Leu Ala Pro Pro Leu Val Pro Gly Phe Leu Ala Pro Pro

720 725 730

GCC GAG CCC ACG GGT GAG CCG GCA TCG ACG CCG CCG CCC GTG CCC GAC 144

Ala Glu Pro Thr Gly Glu Pro Ala Ser Thr Pro Pro Pro Val Pro Asp

735 740 745

GCC GGC CTG GGG GAC CTC GGT CTC GAA CCT GAA GGG ATT GCT GAA GGT 192

Ala Gly Leu Gly Asp Leu Gly Leu Glu Pro Glu Gly Ile Ala Glu Gly

750 755 760

TCC ATC GAT AAC ACA GTA GTT GTG GCA AGT GAG CAA GAT TCT GAG ATT 240

Ser Ile Asp Asn Thr Val Val Val Ala Ser Glu Gln Asp Ser Glu Ile

765 770 775

GTG GTT GGA AAG GAG CAA GCT CGA GCT AAA GTA ACA CAA AGC ATT GTC 288

Val Val Gly Lys Glu Gln Ala Arg Ala Lys Val Thr Gln Ser Ile Val

780 785 790 795

TTT GTA ACC GGC GAA GCT TCT CCT TAT GCA AAG TCT GGG GGT CTA GGA 336

Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro Tyr Ala Lys Ser Gly Gly Leu Gly

800 805 810

GAT GTT TGT GGT TCA TTG CCA GTT GCT CTT GCT GCT CGT GGT CAC CGT 384

Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Val Ala Leu Ala Ala Arg Gly His Arg

815 820 825

GTG ATG GTT GTA ATG CCC AGA TAT TTA AAT GGT ACC TCC GAT AAG AAT 432

Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr Leu Asn Gly Thr Ser Asp Lys Asn

830 835 840

TAT GCA AAT GCA TTT TAC ACA GAA AAA CAC ATT CGG ATT CCA TGC TTT 480

Tyr Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu Lys His Ile Arg Ile Pro Cys Phe

845 850 855

GGC GGT GAA CAT GAA GTT ACC TTC TTC CAT GAG TAT AGA GAT TCA GTT 528

Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe Phe His Glu Tyr Arg Asp Ser Val

860 865 870 875

GAC TGG GTG TTT GTT GAT CAT CCC TCA TAT CAC AGA CCT GGA AAT TTA 576

Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro Ser Tyr His Arg Pro Gly Asn Leu

880 885 890

TAT GGA GAT AAG TTT GGT GCT TTT GGT GAT AAT CAG TTC AGA TAC ACA 624

Tyr Gly Asp Lys Phe Gly Ala Phe Gly Asp Asn Gln Phe Arg Tyr Thr

895 900 905

CTC CTT TGC TAT GCT GCA TGT GAG GCT CCT TTG ATC CTT GAA TTG GGA 672

Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu Ala Pro Leu Ile Leu Glu Leu Gly

910 915 920

GGA TAT ATT TAT GGA CAG AAT TGC ATG TTT GTT GTC AAT GAT TGG CAT 720

Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Asn Cys Met Phe Val Val Asn Asp Trp His

925 930 935

GCC AGT CTA GTG CCA GTC CTT CTT GCT GCA AAA TAT AGA CCA TAT GGT 768

Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu Ala Ala Lys Tyr Arg Pro Tyr Gly

940 945 950 955

GTT TAT AAA GAC TCC CGC AGC ATT CTT GTA ATA CAT AAT TTA GCA CAT 816

Val Tyr Lys Asp Ser Arg Ser Ile Leu Val Ile His Asn Leu Ala His

960 965 970

GAG GGT GTA GAG CCT GCA AGC ACA TAT CCT GAC CTT GGG TTG CCA CCT 864

Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr Tyr Pro Asp Leu Gly Leu Pro Pro

975 980 985

GAA TGG TAT GGA GCT CTG GAG TGG GTA TTC CCT GAA TGG GCG AGG AGG 912

Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp Val Phe Pro Glu Trp Ala Arg Arg

990 995 1000

CAT GCC CTT GAC AAG GGT GAG GCA GTT AAT TTT TTG AAA GGT GCA GTT 960

His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala Val Asn Phe Leu Lys Gly Ala Val

1005 1010 1015

GTG ACA GCA GAT CGA ATC GTG ACT GTC AGT AAG GGT TAT TCG TGG GAG 1008

Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr Val Ser Lys Gly Tyr Ser Trp Glu

1020 1025 1030 1035

GTC ACA ACT GCT GAA GGT GGA CAG GGC CTC AAT GAG CTC TTA AGC TCC 1056

Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln Gly Leu Asn Glu Leu Leu Ser Ser

1040 1045 1050

AGA AAG AGT GTA TTA AAC GGA ATT GTA AAT GGA ATT GAC ATT AAT GAT 1104

Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile Val Asn Gly Ile Asp Ile Asn Asp

1055 1060 1065

TGG AAC CCT GCC ACA GAC AAA TGT ATC CCC TGT CAT TAT TCT GTT GAT 1152

Trp Asn Pro Ala Thr Asp Lys Cys Ile Pro Cys His Tyr Ser Val Asp

1070 1075 1080

GAC CTC TCT GGA AAG GCC AAA TGT AAA GGT GCA TTG CAG AAG GAG CTG 1200

Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys Lys Gly Ala Leu Gln Lys Glu Leu

1085 1090 1095

GGT TTA CCT ATA AGG CCT GAT GTT CCT CTG ATT GGC TTT ATT GGA AGG 1248

Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val Pro Leu Ile Gly Phe Ile Gly Arg

1100 1105 1110 1115

TTG GAT TAT CAG AAA GGC ATT GAT CTC ATT CAA CTT ATC ATA CCA GAT 1296

Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp Leu Ile Gln Leu Ile Ile Pro Asp

1120 1125 1130

CTC ATG CGG GAA GAT GTT CAA TTT GTC ATG CTT GGA TCT GGT GAC CCA 1344

Leu Met Arg Glu Asp Val Gln Phe Val Met Leu Gly Ser Gly Asp Pro

1135 1140 1145

GAG CTT GAA GAT TGG ATG AGA TCT ACA GAG TCG ATC TTC AAG GAT AAA 1392

Glu Leu Glu Asp Trp Met Arg Ser Thr Glu Ser Ile Phe Lys Asp Lys

1150 1155 1160

TTT GGT GGA TGG GTT GGA TTT AGT GTT CCA GTT TCC CAC CGA ATA ACT 1440

Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Pro Val Ser His Arg Ile Thr

1165 1170 1175

GCC GGC TGC GAT ATA TTG TTA ATG CCA TCC AGA TTC GAA CCT TGT GGT 1488

Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly

1180 1185 1190 1195

GTC AAT CAG CTA TAT GCT ATG GAG TAT GGC ACA GTT CCT GTT GTC CAT 1536

Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His

1200 1205 1210

GCA ACT GGG GGC CTT AGA GAT ACC GTG GAG AAC TTC AAC CCT TTC GGT 1584

Ala Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr Val Glu Asn Phe Asn Pro Phe Gly

1215 1220 1225

GAG AAT GGA GAG CAG GGT ACA GGG TGG GCA TTC GCA CCC CTA ACC ACA 1632

Glu Asn Gly Glu Gln Gly Thr Gly Trp Ala Phe Ala Pro Leu Thr Thr

1230 1235 1240

GAA AAC ATG TTT GTG GAC ATT GCG AAC TGC AAT ATC TAC ATA CAG GGA 1680

Glu Asn Met Phe Val Asp Ile Ala Asn Cys Asn Ile Tyr Ile Gln Gly

1245 1250 1255

ACA CAA GTC CTC CTG GGA AGG GCT AAT GAA GCG AGG CAT GTC AAA AGA 1728

Thr Gln Val Leu Leu Gly Arg Ala Asn Glu Ala Arg His Val Lys Arg

1260 1265 1270 1275

CTT CAC GTG GGA CCA TGC CGC TGA 1752

Leu His Val Gly Pro Cys Arg *

1280

(2)序列13资料：

(i)序列特征

(A)长度：584个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列13

Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Gly Pro Ala Pro Arg Pro Leu Pro

1 5 10 15

Pro Ala Leu Leu Ala Pro Pro Leu Val Pro Gly Phe Leu Ala Pro Pro

20 25 30

Ala Glu Pro Thr Gly Glu Pro Ala Ser Thr Pro Pro Pro Val Pro Asp

35 40 45

Ala Gly Leu Gly Asp Leu Gly Leu Glu Pro Glu Gly Ile Ala Glu Gly

50 55 60

Ser Ile Asp Asn Thr Val Val Val Ala Ser Glu Gln Asp Ser Glu Ile

65 70 75 80

Val Val Gly Lys Glu Gln Ala Arg Ala Lys Val Thr Gln Ser Ile Val

85 90 95

Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro Tyr Ala Lys Ser Gly Gly Leu Gly

100 105 110

Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Val Ala Leu Ala Ala Arg Gly His Arg

115 120 125

Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr Leu Asn Gly Thr Ser Asp Lys Asn

130 135 140

Tyr Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu Lys His Ile Arg Ile Pro Cys Phe

145 150 155 160

Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe Phe His Glu Tyr Arg Asp Ser Val

165 170 175

Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro Ser Tyr His Arg Pro Gly Asn Leu

180 185 190

Tyr Gly Asp Lys Phe Gly Ala Phe Gly Asp Asn Gln Phe Arg Tyr Thr

195 200 205

Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu Ala Pro Leu Ile Leu Glu Leu Gly

210 215 220

Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Asn Cys Met Phe Val Val Asn Asp Trp His

225 230 235 240

Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu Ala Ala Lys Tyr Arg Pro Tyr Gly

245 250 255

Val Tyr Lys Asp Ser Arg Ser Ile Leu Val Ile His Asn Leu Ala His

260 265 270

Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr Tyr Pro Asp Leu Gly Leu Pro Pro

275 280 285

Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp Val Phe Pro Glu Trp Ala Arg Arg

290 295 300

His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala Val Asn Phe Leu Lys Gly Ala Val

305 310 315 320

Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr Val Ser Lys Gly Tyr Ser Trp Glu

325 330 335

Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln Gly Leu Asn Glu Leu Leu Ser Ser

340 345 350

Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile Val Asn Gly Ile Asp Ile Asn Asp

355 360 365

Trp Asn Pro Ala Thr Asp Lys Cys Ile Pro Cys His Tyr Ser Val Asp

370 375 380

Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys Lys Gly Ala Leu Gln Lys Glu Leu

385 390 395 400

Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val Pro Leu Ile Gly Phe Ile Gly Arg

405 410 415

Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp Leu Ile Gln Leu Ile Ile Pro Asp

420 425 430

Leu Met Arg Glu Asp Val Gln Phe Val Met Leu Gly Set Gly Asp Pro

435 440 445

Glu Leu Glu Asp Trp Met Arg Ser Thr Glu Ser Ile Phe Lys Asp Lys

450 455 460

Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Pro Val Ser His Arg Ile Thr

465 470 475 480

Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly

485 490 495

Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His

500 505 510

Ala Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr Val Glu Asn Phe Asn Pro Phe Gly

515 520 525

Glu Asn Gly Glu Gln Gly Thr Gly Trp Ala Phe Ala Pro Leu Thr Thr

530 535 540

Glu Asn Met Phe Val Asp Ile Ala Asn Cys Asn Ile Tyr Ile Gln Gly

545 550 555 560

Thr Gln Val Leu Leu Gly Arg Ala Asn Glu Ala Arg His Val Lys Arg

565 570 575

Leu His Val Gly Pro Cys Arg *

580

表5

玉米分支酶II基因和转运肽的mRNA序列和推定的氨基酸序列

[序列14和序列15]

LOCUS HZEGLUCTRN 2725bp ss-mRNA PLN

定义 Corn starch branching enzyme II mRNA，complete cds.

编号 L08065

关键词 1，4-alpha-glucan branching enzyme；amylo-transglycosylase；

glucanotranaferase；starch branching enzyme II.

来源 Zea mays cDNA to mRNA.

生物体 Zea mays

Eukaryota；Plantae；Embryobionta；Magnoliophyta；Liliopsida；

Commelinidae；Cyperales；Poaceae.

参考文献 1(bases 1 to 2725)

作者 Fisher，D.K.，Boyer，C.D.and Hannah，L.C.

题目 Starch branching enzYme II from maize endosperm

杂志 Plant Physiol.102，1045-1046(1993)

标准 full automatic

注释 NCBI gi：168482

特征 Location/Qualifiers

来源 1..2725

/cultivar＝″W64Ax182E″

/dev_stage＝″29 days post pollenation″

/tissue_type＝″endosperm″

/organism＝″Zea mays″

sig_peptide 91..264

/codon_start＝1

CDS 91..2490

/EC_number＝″2.4.1.18″

/note＝″NCBI gi：168483″

/codon_start＝1

/product＝″starch branching enzyme II″/translation＝″MAFRVSGAVLGGAVRAPRLTGGGEGSLVFRHTGLFLTRGARVGCSGTHGAMRAAAAARKAVMVPEGENDGLASRADSAQFQSDELEVPDISEETTCGAGVADAQALNRVRVVPPPSDGQKIFQIDPMLQGYKYHLEYRYSLYRRIRSDIDEHEGGLEAFSRSYEKFGFNASAEGITYREWAPGAFSAALVGDVNNWDPNADRMSKNEFGVWEIFLPNNADGTSPIPHGSRVKVRMDTPSGIKDSIPAWIKYSVQAPGEIPYDGIYYDFPEEVKYVFRHAQPKRPKSLRIYETHVGMSSPEPKINTYVNFRDEVLPRIKKLGYNAVQIMAIQEHSYYGSFGYHVTNFFAPSSRFGTPEDLKSLIDRAHELGLLVLMDVVHSHASSNTLDGLNGFDGTDTHYFHSGPRGHHWMWDSRLFNYGNWEVLRFLLSNARWWLEEYKFDGFRFDGVTSMMYTHHGLQVTFTGNFNEYFGFATDVDAVVYLMLVNDLIHGLYPEAVTIGEDVSGMPTFALPVHDGGVGFDYRMHMAVADKWIDLLKQSDETWKMGDIVHTLTNRRWLEKCVTYAESHDQALVGDKTIAFWLMDKDMYDFMALDRPSTPTIDRGIALHKMIRLITMGLGGEGYLNFMGNEFGHPEWIDFPRGPQRLPSGKFIPGNNNSYDKCRRRFDLGDADYLRYHGMQEFDQAMQHLEQKYEFMTSDHQYISRKHEEDKVIVFEKGDLVFVFNFHCNNSYFDYRIGCRKPGVYKVVLDSDAGLFGGFSRIHHAAEHFTADCSHDNRPYSFSVYTPSRTCVVYAPV

E″

mat_peptide 265..2487

/codon_start＝1

/product＝″starch branching enzyme II″

BASE COUNT 727 A 534 C 715 G 749 T

ORIGIN

1 GGCCCAGAGC AGACCCGGAT TTCGCTCTTG CGGTCGCTGG GGTTTTAGCA TTGGCTGATC

61 AGTTCGATCC GATCCGGCTG CGAAGGCGAG ATGGCGTTCC GGGTTTCTGG GGCGGTGCTC

121 GGTGGGGCCG TAAGGGCTCC CCGACTCACC GGCGGCGGGG AGGGTAGTCT AGTCTTCCGG

181 CACACCGGCC TCTTCTTAAC TCGGGGTGCT CGAGTTGGAT GTTCGGGGAC GCACGGGGCC

241 ATGCGCGCGG CGGCCGCGGC CAGGAAGGCG GTCATGGTTC CTGAGGGCGA GAATGATGGC

301 CTCGCATCAA GGGCTGACTC GGCTCAATTC CAGTCGGATG AACTGGAGGT ACCAGACATT

361 TCTGAAGAGA CAACGTGCGG TGCTGGTGTG GCTGATGCTC AAGCCTTGAA CAGAGTTCGA

421 GTGGTCCCCC CACCAAGCGA TGGACAAAAA ATATTCCAGA TTGACCCCAT GTTGCAAGGC

481 TATAAGTACC ATCTTGAGTA TCGGTACAGC CTCTATAGAA GAATCCGTTC AGACATTGAT

541 GAACATGAAG GAGGCTTGGA AGCCTTCTCC CGTAGTTATG AGAAGTTTGG ATTTAATGCC

601 AGCGCGGAAG GTATCACATA TCGAGAATGG GCTCCTGGAG CATTTTCTGC AGCATTGGTG

661 GGTGACGTCA ACAACTGGGA TCCAAATGCA GATCGTATGA GCAAAAATGA GTTTGGTGTT

721 TGGGAAATTT TTCTGCCTAA CAATGCAGAT GGTACATCAC CTATTCCTCA TGGATCTCGT

781 GTAAAGGTGA GAATGGATAC TCCATCAGGG ATAAAGGATT CAATTCCAGC CTGGATCAAG

841 TACTCAGTGC AGGCCCCAGG AGAAATACCA TATGATGGGA TTTATTATGA TCCTCCTGAA

901 GAGGTAAAGT ATGTGTTCAG GCATGCGCAA CCTAAACGAC CAAAATCATT GCGGATATAT

961 GAAACACATG TCGGAATGAG TAGCCCGGAA CCGAAGATAA ACACATATGT AAACTTTAGG

1021 GATGAAGTCC TCCCAAGAAT AAAAAAACTT GGATACAATG CAGTGCAAAT AATGGCAATC

1081 CAAGAGCACT CATATTATGG AAGCTTTGGA TACCATGTAA CTAATTTTTT TGCGCCAAGT

1141 AGTCGTTTTG GTACCCCAGA AGATTTGAAG TCTTTGATTG ATAGAGCACA TGAGCTTGGT

1201 TTGCTAGTTC TCATGGATGT GGTTCATAGT CATGCGTCAA GTAATACTCT GGATGGGTTG

1261 AATGGTTTTG ATGGTACAGA TACACATTAC TTTCACAGTG GTCCACGTGG CCATCACTGG

1321 ATGTGGGATT CTCGCCTATT TAACTATGGG AACTGGGAAG TTTTAAGATT TCTTCTCTCC

1381 AATGCTAGAT GGTGGCTCGA GGAATATAAG TTTGATGGTT TCCGTTTTGA TGGTGTGACC

1441 TCCATGATGT ACACTCACCA CGGATTACAA GTAACATTTA CGGGGAACTT CAATGAGTAT

1501 TTTGGCTTTG CCACCGATGT AGATGCAGTG GTTTACTTGA TGCTGGTAAA TGATCTAATT

1561 CATGGACTTT ATCCTGAGGC TGTAACCATT GGTGAAGATG TTAGTGGAAT GCCTACATTT

1621 GCCCTTCCTG TTCACGATGG TGGGGTAGGT TTTGACTATC GGATGCATAT GGCTGTGGCT

1681 GACAAATGGA TTGACCTTCT CAAGCAAAGT GATGAAACTT GGAAGATGGG TGATATTGTG

1741 CACACACTGA CAAATAGGAG GTGGTTAGAG AAGTGTGTAA CTTATGCTGA AAGTCATGAT

1801 CAAGCATTAG TCGGCGACAA GACTATTGCG TTTTGGTTGA TGGACAAGGA TATGTATGAT

1861 TTCATGGCCC TCGATAGACC TTCAACTCCT ACCATTGATC GTGGGATAGC ATTACATAAG

1921 ATGATTAGAC TTATCACAAT GGGTTTAGGA GGAGAGGGCT ATCTTAATTT CATGGGAAAT

1981 GAGTTTGGAC ATCCTGAATG GATAGATTTT CCAAGAGGTC CGCAAAGACT TCCAAGTGGT

2041 AAGTTTATTC CAGGGAATAA CAACAGTTAT GACAAATGTC GTCGAAGATT TGACCTGGGT

2101 GATGCAGACT ATCTTAGGTA TCATGGTATG CAAGAGTTTG ATCAGGCAAT GCAACATCTT

2161 GAGCAAAAAT ATGAATTCAT GACATCTGAT CACCAGTATA TTTCCCGGAA ACATGAGGAG

2221 GATAAGGTGA TTGTGTTCGA AAAGGGAGAT TTGGTATTTG TGTTCAACTT CCACTGCAAC

2281 AACAGCTATT TTGACTACCG TATTGGTTGT CGAAAGCCTG GGGTGTATAA GGTGGTCTTG

2341 GACTCCGACG CTGGACTATT TGGTGGATTT AGCAGGATCC ATCACGCAGC CGAGCACTTC

2401 ACCGCCGACT GTTCGCATGA TAATAGGCCA TATTCATTCT CGGTTTATAC ACCAAGCAGA

2461 ACATGTGTCG TCTATGCTCC AGTGGAGTGA TAGCGGGGTA CTCGTTGCTG CGCGGCATGT

2521 GTGGGGCTGT CGATGTGAGG AAAAACCTTC TTCCAAAACC GGCAGATGCA TGCATGCATG

2581 CTACAATAAG GTTCTGATAC TTTAATCGAT GCTGGAAAGC CCATGCATCT CGCTGCGTTG

2641 TCCTCTCTAT ATATATAAGA CCTTCAAGGT GTCAATTAAA CATAGAGTTT TCGTTTTTCG

2701 CTTTCCTAAA AAAAAAAAAA AAAAA

表6

玉米分支酶I和转运肽的mRNA序列和推定的氨基酸序列

[序列16和序列17]

LOCUS MZEBEI 2763bp ss-mRNA PLN

DEFINITION Maize mRNA for branching enzyme-I (BE-I).

ACCESSION D11081

KEYWORDS branching enzyme-I.

SOURCE Zea mays L.(inbred Oh43)，cDNA to mRNA.

ORGANISM Zea mays

Eukaryota；Plantae；Embryobionta；Magnoliophyta；Liliopsida；

Commelinidae；Liliopsida.

参考文献 1(bases 1 to 2763)

作者 Baba，T.，Kimura，K.，Mizuno，K.，Etoh，H.，Ishida，Y.，Shida，O.and

Arai，Y.

题目 Seguence conservation of the catalytic regions of Amylolytic

enzymes in maize branching enzyme-I

杂志 Biochem.Biophys.Res.Commun.181，87-94(1991)

标准 full automatic

注释 Submitted(30-APR-1992)to DDBJ by：Tadashi Baba

Institute of Applied Biochemistry

University of Tsukuba

Tsukuba，Ibaraki 305

Japan

Phone：0298-53-6632

Fax： 0298-53-6632.

NCBI gi：217959

特征 Location/Qualifiers

来源 1..2763

/organism＝″Zea mays″

CDS <1..2470

/note＝″NCBI gi：217960″

/codon_start＝2

/product＝″branching enzyme-I precursor″/translation＝″LCLVSPSSSPTPLPPPRRSRSHADRAAPPGIAGGGNVRLSVLSVQCKARRSGVRKVKSKFATAATVQEDKTMATAKGDVDHLPIYDLDPKLEIFKDHFRYRMKRFLEQKGSIEENEGSLESFSKGYLKFGINTNEDGTVYREWAPAAQEAELIGDFNDWNGANHKMEKDKFGVWSIKIDHVKGKPAIPHNSKVKFRFLHGGVWVDRIPALIRYATVDASKFGAPYDGVHWDPPASERYTFKHPRPSKPAAPRIYEAHVGMSGEKPAVSTYREFADNVLPRIRANNYNTVQLMAVMEHSYYASFGYHVTNFFAVSSRSGTPEDLKYLVDKAHSLGLRVLMDVVHSHASNNVTDGLNGYDVGQSTQESYFHAGDRGYHKLWDSRLFNYANWEVLRFLLSNLRYWLDEFMFDGFRFDGVTSMLYHHHGINVGFTGNYQEYFSLDTAVDAVVYMMLANHLMHKLLPEATVVAEDVSGMPVLCRPVDEGGVGFDYRLAMAIPDRWIDYLKNKDDSEWSMGEIAHTLTNRRYTEKCIAYAESHDQSIVGDKTIAFLLMDKEMYTGMSDLQPASPTIDRGIALQKMIHFITMALGGDGYLNFMGNEFGHPEWIDFPREGNNWSYDKCRRQWSLVDTDHLRYKYMNAFDQAMNALDERFSFLSSSKQIVSDMNDEEKVIVFERGDLVFVFNFHPKKTYEGYKVGCDLPGKYRVALDSDALVFGGHGRVGHDVDHFTSPEGVPGVPETNFNNRPNSFKVLSPPRTCVAYYRVDEAGAGRRLHAKAETGKTSPAESIDVKASRASSKE

DKEATAGGKKGWKFARQPSDQDTK″

transit_peptide 2..190

mat_peptide 191.. 2467

/EC_number＝″2.4.1.18″

/codon_start＝1

/product＝″branching enzyme-I precursor″

polyA_signal 2734..2739BASE COUNT 719 A 585 C 737 G 722 TORIGIN

1 GCTGTGCCTC GTGTCGCCCT CTTCCTCGCC GACTCCGCTT CCGCCGCCGC GGCGCTCTCG

61 CTCGCATGCT GATCGGGCGG CACCGCCGGG GATCGCGGGT GGCGGCAATG TGCGCCTGAG

121 TGTGTTGTCT GTCCAGTGCA AGGCTCGCCG GTCAGGGGTG CGGAAGGTCA AGAGCAAATT

181 CGCCACTGCA GCTACTGTGC AAGAAGATAA AACTATGGCA ACTGCCAAAG GCGATGTCGA

241 CCATCTCCCC ATATACGACC TGGACCCCAA GCTGGAGATA TTCAAGGACC ATTTCAGGTA

301 CCGGATGAAA AGATTCCTAG AGCAGAAAGG ATCAATTGAA GAAAATGAGG GAAGTCTTGA

361 ATCTTTTTCT AAAGGCTATT TGAAATTTGG GATTAATACA AATGAGGATG GAACTGTATA

421 TCGTGAATGG GCACCTGCTG CGCAGGAGGC AGAGCTTATT GGTGACTTCA ATGACTGGAA

481 TGGTGCAAAC CATAAGATGG AGAAGGATAA ATTTGGTGTT TGGTCGATCA AAATTGACCA

541 TGTCAAAGGG AAACCTGCCA TCCCTCACAA TTCCAAGGTT AAATTTCGCT TTCTACATGG

601 TGGAGTATGG GTTGATCGTA TTCCAGCATT GATTCGTTAT GCGACTGTTG ATGCCTCTAA

661 ATTTGGAGCT CCCTATGATG GTGTTCATTG GGATCCTCCT GCTTCTGAAA GGTACACATT

721 TAAGCATCCT CGGCCTTCAA AGCCTGCTGC TCCACGTATC TATGAAGCCC ATGTAGGTAT

781 GAGTGGTGAA AAGCCAGCAG TAAGCACATA TAGGGAATTT GCAGACAATG TGTTGCCACG

841 CATACGAGCA AATAACTACA ACACAGTTCA GTTGATGGCA GTTATGGAGC ATTCGTACTA

901 TGCTTCTTTC GGGTACCATG TGACAAATTT CTTTGCGGTT AGCAGCAGAT CAGGCACACC

961 AGAGGACCTC AAATATCTTG TTGATAAGGC ACACAGTTTG GGTTTGCGAG TTCTGATGGA

1021 TGTTGTCCAT AGCCATGCAA GTAATAATGT CACAGATGGT TTAAATGGCT ATGATGTTGG

1081 ACAAAGCACC CAAGAGTCCT ATTTTCATGC GGGAGATAGA GGTTATCATA AACTTTGGGA

1141 TAGTCGGCTG TTCAACTATG CTAACTGGGA GGTATTAAGG TTTCTTCTTT CTAACCTGAG

1201 ATATTGGTTG GATGAATTCA TGTTTGATGG CTTCCGATTT GATGGAGTTA CATCAATGCT

1261 GTATCATCAC CATGGTATCA ATGTGGGGTT TACTGGAAAC TACCAGGAAT ATTTCAGTTT

1321 GGACACAGCT GTGGATGCAG TTGTTTACAT GATGCTTGCA AACCATTTAA TGCACAAACT

1381 CTTGCCAGAA GCAACTGTTG TTGCTGAAGA TGTTTCAGGC ATGCCGGTCC TTTGCCGGCC

1441 AGTTGATGAA GGTGGGGTTG GGTTTGACTA TCGCCTGGCA ATGGCTATCC CTGATAGATG

1501 GATTGACTAC CTGAAGAATA AAGATGACTC TGAGTGGTCG ATGGGTGAAA TAGCGCATAC

1561 TTTGACTAAC AGGAGATATA CTGAAAAATG CATCGCATAT GCTGAGAGCC ATGATCAGTC

1621 TATTGTTGGC GACAAAACTA TTGCATTTCT CCTGATGGAC AAGGAAATGT ACACTGGCAT

1681 GTCAGACTTG CAGCCTGCTT CACCTACAAT TGATCGAGGG ATTGCACTCC AAAAGATGAT

1741 TCACTTCATC ACAATGGCCC TTGGAGGTGA TGGCTACTTG AATTTTATGG GAAATGAGTT

1801 TGGTCACCCA GAATGGATTG ACTTTCCAAG AGAAGGGAAC AACTGGAGCT ATGATAAATG

1861 CAGACGACAG TGGAGCCTTG TGGACACTGA TCACTTGCGG TACAAGTACA TGAATGCGTT

1921 TGACCAAGCG ATGAATGCGC TCGATGAGAG ATTTTCCTTC CTTTCGTCGT CAAAGCAGAT

1981 CGTCAGCGAC ATGAACGATG AGGAAAAGGT TATTGTCTTT GAACGTGGAG ATTTAGTTTT

2041 TGTTTTCAAT TTCCATCCCA AGAAAACTTA CGAGGGCTAC AAAGTGGGAT GCGATTTGCC

2101 TGGGAAATAC AGAGTAGCCC TGGACTCTGA TGCTCTGGTC TTCGGTGGAC ATGGAAGAGT

2161 TGGCCACGAC GTGGATCACT TCACGTCGCC TGAAGGGGTG CCAGGGGTGC CCGAAACGAA

2221 CTTCAACAAC CGGCCGAACT CGTTCAAAGT CCTTTCTCCG CCCCGCACCT GTGTGGCTTA

2281 TTACCGTGTA GACGAAGCAG GGGCTGGACG ACGTCTTCAC GCGAAAGCAG AGACAGGAAA

2341 GACGTCTCCA GCAGAGAGCA TCGACGTCAA AGCTTCCAGA GCTAGTAGCA AAGAAGACAA

2401 GGAGGCAACG GCTGGTGGCA AGAAGGGATG GAAGTTTGCG CGGCAGCCAT CCGATCAAGA

2461 TACCAAATGA AGCCACGAGT CCTTGGTGAG GACTGGACTG GCTGCCGGCG CCCTGTTAGT

2521 AGTCCTGCTC TACTGGACTA GCCGCCGCTG GCGCCCTTGG AACGGTCCTT TCCTGTAGCT

2581 TGCAGGCGAC TGGTGTCTCA TCACCGAGCA GGCAGGCACT GCTTGTATAG CTTTTCTAGA

2641 ATAATAATCA GGGATGGATG GATGGTGTGT ATTGGCTATC TGGCTAGACG TGCATGTGCC

2701 CAGTTTGTAT GTACAGGAGC AGTTCCCGTC CAGAATAAAA AAAAACTTGT TGGGGGGTTT

2761 TTC

表7

玉米可溶性淀粉合成酶I基因(153bp)的转运肽

片段的编码序列和推定的氨基酸序列

[序列18和序列19]

文件名：MSSlTRPT.DNA 序列：正常153BP

密码子表：UNIV.TCN

序列范围：1-153

翻译范围：1-153

★★★DNA翻译★★★

1 ATG GCG ACG CCC TCG GCC GTG GGC GCC GCG TGC CTC CTC CTC GCG CGG 48

1 M A T P S A V G A A C L L L A R 16

49 GCC GCC TGG CCG GCC GCC GTC GGC GAC CGG GCG CGC CCG CGG AGG CTC 96

17 A A W P A A V G D R A R P R R L 32

97 CAG CGC GTG CTG CGC CGC CGG TGC GTC GCG GAG CTG AGC AGG GAG GGG 144

33 Q R V L R R R C V A E L S R E G 48

145 CCC CAT ATG 153

49 P H M 51

GFP构建体：

1.GFP仅存在于pET-21a上：

用NdeI和XhoI消化pEXS115，并将含有SGFP编码序列的740bp的片段亚克隆到pET-(Novagen601 Science Dr.Madison WI)21a的NdeI和XhoI位点上。(见图2b，GFP-21a图谱)

2.将GFP亚克隆到读框内的全长成熟WX的5’-末端：

将源于pEXS114的含有SGFP的740bp NdeI片段亚克隆到pEXSWX的NdeI位点。(见图3a GFP-FLWX图谱)

3.将GFP亚克隆到读框内的N-末端截短了的WX的5’-末端：

将WX的N-末端截去700bp。

将源于pEXSWX的编码WX的C-末端的1kbBamHI片段亚克隆到pEXS115的Bgl II位点。然后将整个SGFP-截短的WX片段以NdeI-HindIII片段形式亚克隆到pET21a上。(见图3b，GFP-Bam HI WX图谱)

4.将GFP亚克隆到读框内的截短了的WX的5’-末端：将WX的N-末端截去100bp。

将源于pEXS115的含有SGFP的740bp NdeI-NcoI片段亚克隆到pEXSWX的NdeI-NcoI位点。(见图4 GFP-NcoWX图谱)

实施例3：

将质粒转化到细菌中：

制备大肠杆菌感受态细胞：

1.接种所需的大肠杆菌菌株的单菌落的2.5mlLB培养基：所选择的菌株是获自Stratagene的XLIBLUE DL21DE3；含有合适的抗生素。在37℃下，以250rpm的速度摇动，生长过夜。

2.用所述过夜培养物的1∶50的稀释液接种100ml含有合适的抗生素的LB培养基。在37℃下，以250rpm的速度摇动，生长到OD₆₀₀＝0.3-0.5。

3.将培养物转移到无菌离心管中，并放在冰上冷却15分钟。

4.3,000xg(4℃)离心5分钟。

5.将沉淀重新悬浮于8ml冰冷过的转化缓冲液中。在冰上温育15分钟。

6.3,000xg(4℃)离心5分钟。

7.将沉淀重新悬浮于8ml冰冷过的转化缓冲液2中。等分试样，在液氮中快速冷冻，并于-70℃下保存。

转化缓冲液 1 转化缓冲液 2

RbCl 1.2g MOPS(10mM) 0.209g

Mncl₂4H₂O 0.99g RbCl 0.12g

乙酸钾 0.294g Cacl₂2H₂O 1.1g

Cacl₂2H₂O 0.15g 甘油 15g

甘油 15g 蒸馏水 100ml

蒸馏水 100ml 用NaOH调pH至6.8

用0.2M乙酸调pH至5.8 过滤消毒

过滤消毒

通过RbCl热休克法转化大肠杆菌：Hanahan，D.(1985)见DNA克隆：操作指南(Glover，D.M.著)，pp.109-135，IRL出版社。

1.在冰上将1-5μlDNA与150μl大肠杆菌感受态细胞一起温育30分钟。

2.在42℃下热休克45秒。

3.紧接着在冰上放置2分钟。

4.加入600μlLB，并在37℃下温育1小时。

5.铺平板于含有合适抗生素的LB琼脂上。

该质粒将在所述细菌中表达含有绿色荧光蛋白的所述杂合多肽。

实施例4：

在大肠杆菌中表达构建体：

1.用含有感兴趣的质粒的大肠杆菌接种3mlLB。含有合适的抗生素。在37℃下，以250rpm的速度摇动，生长过夜。

2.用2ml过夜培养物接种100mlLB。含有合适的抗生素。在37℃下，以250rpm的速度摇动，生长。

3.在OD₆₀₀大约为0.4-0.5的条件下于室温下放置，以200rpm的速度摇动。

4.在OD₆₀₀大约为0.6-0.8的条件下用100μl 1M IPTG诱导。IPTG的终浓度为1mM。

5.在室温下，以200rpm的速度摇动，生长4-5小时。

6.通过离心收集细胞。

7.在液氮中快速冷冻，并于-70℃下保存待用。

可将细胞重新悬浮于蒸馏水中，并在UV光下(λmax＝395nm)观察内源荧光。另外，可以对细胞进行超声处理，通过SDS-PAGE分离细胞提取物的等分试样，并在UV光下观察，检测GFP荧光。如果所采用的蛋白是绿色荧光蛋白，则可以在灯箱中在395nm的UV光下检测该蛋白在所述裂解材料中的存在，并可以见到标记性绿色光泽。

实施例5：

从细菌中提取质粒：

以下是可用于实施本发明的多种常用的碱性裂解质粒纯化方法之一。

1.用由所述质粒之一转化过的大肠杆菌单菌落接种100-200mlLB培养

基。含有合适的抗生素。在37℃下，以250rpm的速度摇动，生长过夜。

2.5,000xg(4℃)离心10分钟。

3.将细胞重新悬浮于10ml水中，转移到15ml离心管中，并重复离心。

4.将沉淀重新悬浮于5ml0.1MNaOH，0.5％SDS中。在冰上温育10分钟。

5.加入2.5ml 3M乙酸钠(pH5.2)，温和颠倒，并在冰上温育10分钟。

6.15,000-20,000xg(4℃)离心5分钟。

7.用等体积的苯酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)提取上清液。

8.6,000-10,000xg(4℃)离心10分钟。

9.将水相转移到干净的离心管中，并用1倍体积的异丙醇沉淀。

10.12,000xg(4℃)离心15分钟。

11.将沉淀溶解于0.5mlTE中，加入20μl 10mg/mlRnase，并在37℃下温育1小时。

12.用苯酚∶氯仿∶异戊醇(25∶24∶1)提取2次。

13.用氯仿提取1次。

14.用1倍体积的异丙醇和0.1倍体积的3M乙酸钠沉淀水相。

15.用75％的乙醇洗涤沉淀1次。

16.在Speed Vac中干燥沉淀，并将沉淀重新悬浮于TE中。

然后可将该质粒插入其它宿主中。

表8

源于pEXS52淀粉合成酶编码区的DNA序列和推定的氨基酸序列

[序列20和序列21]

文件名：MSSlDELN.DNA 序列：正常1626BP

密码子表：UNIV.TCN

序列范围：1-1626

翻译范围：1-1626

(xi)序列描述：序列20：

TGC GTC GCG GAG CTG AGC AGG GAG GAC CTC GGT CTC GAA CCT GAA GGG 48

Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Asp Leu Gly Leu Glu Pro Glu Gly

55 60 65

ATT GCT GAA GGT TCC ATC GAT AAC ACA GTA GTT GTG GCA AGT GAG CAA 96

Ile Ala Glu Gly Ser Ile Asp Asn Thr Val Val Val Ala Ser Glu Gln

70 75 80

GAT TCT GAG ATT GTG GTT GGA AAG GAG CAA GCT CGA GCT AAA GTA ACA 144

Asp Ser Glu Ile Val Val Gly Lys Glu Gln Ala Arg Ala Lys Val Thr

85 90 95

CAA AGC ATT GTC TTT GTA ACC GGC GAA GCT TCT CCT TAT GCA AAG TCT 192

Gln Ser Ile Val Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro Tyr Ala Lys Ser

100 105 110 115

GGG GGT CTA GGA GAT GTT TGT GGT TCA TTG CCA GTT GCT CTT GCT GCT 240

Gly Gly Leu Gly Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Val Ala Leu Ala Ala

120 125 130

CGT GGT CAC CGT GTG ATG GTT GTA ATG CCC AGA TAT TTA AAT GGT ACC 288

Arg Gly His Arg Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr Leu Asn Gly Thr

135 140 145

TCC GAT AAG AAT TAT GCA AAT GCA TTT TAC ACA GAA AAA CAC ATT CGG 336

Ser Asp Lye Asn Tyr Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu Lys Hie Ile Arg

150 155 160

ATT CCA TGC TTT GGC GGT GAA CAT GAA GTT ACC TTC TTC CAT GAG TAT 384

Ile Pro Cys Phe Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe Phe His Glu Tyr

165 170 175

AGA GAT TCA GTT GAC TGG GTG TTT GTT GAT CAT CCC TCA TAT CAC AGA 432

Arg Asp Ser Val Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro Ser Tyr His Arg

180 185 190 195

CCT GGA AAT TTA TAT GGA GAT AAG TTT GGT GCT TTT GGT GAT AAT CAG 480

Pro Gly Asn Leu Tyr Gly Asp Lys Phe Gly Ala Phe Gly Asp Asn Gln

200 205 210

TTC AGA TAC ACA CTC CTT TGC TAT GCT GCA TGT GAG GCT CCT TTG ATC 528

Phe Arg Tyr Thr Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu Ala Pro Leu Ile

215 220 225

CTT GAA TTG GGA GGA TAT ATT TAT GGA CAG AAT TGC ATG TTT GTT GTC 576

Leu Glu Leu Gly Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Asn Cys Met Phe Val Val

230 235 240

AAT GAT TGG CAT GCC AGT CTA GTG CCA GTC CTT CTT GCT GCA AAA TAT 624

Asn Asp Trp His Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu Ala Ala Lys Tyr

245 250 255

AGA CCA TAT GGT GTT TAT AAA GAC TCC CGC AGC ATT CTT GTA ATA CAT 672

Arg Pro Tyr Gly Val Tyr Lys Asp Ser Arg Ser Ile Leu Val Ile His

260 265 270 275

AAT TTA GCA CAT CAG GGT GTA GAG CCT GCA AGC ACA TAT CCT GAC CTT 720

Asn Leu Ala His Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr Tyr Pro Asp Leu

280 285 290

GGG TTG CCA CCT GAA TGG TAT GGA GCT CTG GAG TGG GTA TTC CCT GAA 768

Gly Leu Pro Pro Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp Val Phe Pro Glu

295 300 305

TGG GCG AGG AGG CAT GCC CTT GAC AAG GGT GAG GCA GTT AAT TTT TTG 816

Trp Ala Arg Arg His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala Val Asn Phe Leu

310 315 320

AAA GGT GCA GTT GTG ACA GCA GAT CGA ATC GTG ACT GTC AGT AAG GGT 864

Lys Gly Ala Val Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr Val Ser Lys Gly

325 330 335

TAT TCG TGG GAG GTC ACA ACT GCT GAA GGT GGA CAG GGC CTC AAT GAG 912

Tyr Ser Trp Glu Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln Gly Leu Asn Glu

340 345 350 355

CTC TTA AGC TCC AGA AAG AGT GTA TTA AAC GGA ATT GTA AAT GGA ATT 960

Leu Leu Ser Ser Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile Val Asn Gly Ile

360 365 370

GAC ATT AAT GAT TGG AAC CCT GCC ACA GAC AAA TGT ATC CCC TGT CAT 1008

Asp Ile Asn Asp Trp Asn Pro Ala Thr Asp Lys Cys Ile Pro Cys His

375 380 385

TAT TCT GTT GAT GAC CTC TCT GGA AAG GCC AAA TGT AAA GGT GCA TTG 1056

Tyr Ser Val Asp Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys Lys Gly Ala Leu

390 395 400

CAG AAG GAG CTG GGT TTA CCT ATA AGG CCT GAT GTT CCT CTG ATT GGC 1104

Gln Lys Glu Leu Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val Pro Leu Ile Gly

405 410 415

TTT ATT GGA AGG TTG GAT TAT CAG AAA GGC ATT GAT CTC ATT CAA CTT 1152

Phe Ile Gly Arg Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp Leu Ile Gln Leu

420 425 430 435

ATC ATA CCA GAT CTC ATG CGG GAA GAT GTT CAA TTT GTC ATG CTT GGA 1200

Ile Ile Pro Asp Leu Met Arg Glu Asp Val Gln Phe Val Met Leu Gly

440 445 450

TCT GGT GAC CCA GAG CTT GAA GAT TGG ATG AGA TCT ACA GAG TCG ATC 1248

Ser Gly Asp Pro Glu Leu Glu Asp Trp Met Arg Ser Thr Glu Ser Ile

455 460 465

TTC AAG GAT AAA TTT CGT GGA TGG GTT GGA TTT AGT GTT CCA GTT TCC 1296

Phe Lys Asp Lys Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Pro Val Ser

470 475 480

CAC CGA ATA ACT GCC GGC TGC GAT ATA TTG TTA ATG CCA TCC AGA TTC 1344

His Arg Ile Thr Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe

485 490 495

GAA CCT TGT GGT CTC AAT CAG CTA TAT GCT ATG CAG TAT GGC ACA GTT 1392

Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln Tyr Gly Thr Val

500 505 510 515

CCT GTT GTC CAT GCA ACT GGG GGC CTT AGA GAT ACC GTG GAG AAC TTC 1440

Pro Val Val His Ala Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr Val Glu Asn Phe

520 525 530

AAC CCT TTC GGT GAG AAT GGA GAG CAG GGT ACA GGG TGG GCA TTC GCA 1488

Asn Pro Phe Gly Glu Asn Gly Glu Gln Gly Thr Gly Trp Ala Phe Ala

535 540 545

CCC CTA ACC ACA GAA AAC ATG TTT GTG GAC ATT GCG AAC TGC AAT ATC 1536

Pro Leu Thr Thr Glu Asn Met Phe Val Asp Ile Ala Asn Cys Asn Ile

550 555 560

TAC ATA CAG GGA ACA CAA GTC CTC CTG GGA AGG GCT AAT GAA GCG AGG 1584

Tyr Ile Gln Gly Thr Gln Val Leu Leu Gly Arg Ala Asn Glu Ala Arg

565 570 575

CAT GTC AAA AGA CTT CAC GTG GGA CCA TGC CGC TGA 1620

His Val Lys Arg Leu His Val Gly Pro Cys Arg *

580 585 590

(2)序列21资料：

(i)序列特征：

(A)长度：540个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线性

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列21：

Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Asp Leu Gly Leu Glu Pro Glu Gly

1 5 10 15

Ile Ala Glu Gly Ser Ile Asp Asn Thr Val Val Val Ala Ser Glu Gln

20 25 30

Asp Ser Glu Ile Val Val Gly Lys Glu Gln Ala Arg Ala Lys Val Thr

35 40 45

Gln Ser Ile Val Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro Tyr Ala Lys Ser

50 55 60

Gly Gly Leu Gly Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Val Ala Leu Ala Ala

65 70 75 80

Arg Gly His Arg Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr Leu Asn Gly Thr

85 90 95

Ser Asp Lys Asn Tyr Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu Lys His Ile Arg

100 105 110

Ile Pro Cys Phe Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe Phe His Glu Tyr

115 120 125

Arg Asp Ser Val Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro Ser Tyr His Arg

130 135 140

Pro Gly Asn Leu Tyr Gly Asp Lys Phe Gly Ala Phe Gly Asp Asn Gln

145 150 155 160

Phe Arg Tyr Thr Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu Ala Pro Leu Ile

165 170 175

Leu Glu Leu Gly Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Asn Cys Met Phe Val Val

180 185 190

Asn Asp Trp His Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu Ala Ala Lys Tyr

195 200 205

Arg Pro Tyr Gly Val Tyr Lys Asp Ser Arg Ser Ile Leu Val Ile His

210 215 220

Asn Leu Ala His Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr Tyr Pro Asp Leu

225 230 235 240

Gly Leu Pro Pro Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp Val Phe Pro Glu

245 250 255

Trp Ala Arg Arg His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala Val Asn Phe Leu

260 265 270

Lys Gly Ala Val Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr Val Ser Lys Gly

275 280 285

Tyr Ser Trp Glu Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln Gly Leu Asn Glu

290 295 300

Leu Leu Ser Ser Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile Val Asn Gly Ile

305 310 315 320

Asp Ile Asn Asp Trp Asn Pro Ala Thr Asp Lys Cys Ile Pro Cys His

325 330 335

Tyr Ser Val Asp Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys Lys Gly Ala Leu

340 345 350

Gln Lys Glu Leu Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val Pro Leu Ile Gly

355 360 365

Phe Ile Gly Arg Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp Leu Ile Gln Leu

370 375 380

Ile Ile Pro Asp Leu Met Arg Glu Asp Val Gln Phe Val Met Leu Gly

385 390 395 400

Ser Gly Asp Pro Glu Leu Glu Asp Trp Met Arg Ser Thr Glu Ser Ile

405 410 415

Phe Lys Asp Lys Phe Arg Gly TrP Val Gly Phe Ser Val Pro Val Ser

420 425 430

His Arg Ile Thr Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe

435 440 445

Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln Tyr Gly Thr Val

450 455 460

Pro Val Val His Ala Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr Val Glu Asn Phe

465 470 475 480

Asn Pro Phe Gly Glu Asn Gly Glu Gln Gly Thr Gly Trp Ala Phe Ala

485 490 495

Pro Leu Thr Thr Glu Asn Met Phe Val Asp Ile Ala Asn Cys Asn Ile

500 505 510

Tyr Ile Gln Gly Thr Gln Val Leu Leu Gly Arg Ala Asn Glu Ala Arg

515 520 525

His Val Lys Arg Leu His Val Gly Pro Cys Arg *

530 535 540

实施例6：

该实施例采用了一种质粒，该质粒具有一个玉米启动子、一种玉米转运肽、一种源于淀粉合成酶基因的淀粉被囊化区、以及一个与之结合的基因片段。在图6中所示的该质粒含有表8中所示的DNA序列。

按照以下方法构建质粒pEXS52：

用于构建转基因质粒的材料如下：

质粒pBluescriptSK-

质粒pMF6(含有nos3’终止子)

质粒pHKH1(含有玉米adh1内含子)。

质粒MstsI(6-4)(含有玉米stsI转运肽，用作PCTstsI转运肽产生的模板)

存在于pBluescriptSK-中的质粒MstsIII

引物EXS29(GTGGATCCATGGCGACGCCCTCGGCCGTGG)[序列22]

EXS35(CTGAATTCCATATGGGGCCCCTCCCTGCTCAGCTC)[序列23]

以上两种引物均被用于PCTstsI转运肽

引物EXS31(CTCTGAGCTCAAGCTTGCTACTTTCTTTCCTTAATG)[序列24]

EXS32(GTCTCCGCGGTGGTGTCCTTGCTTCCTAG)[序列25]

两种引物均可用于PCR玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子(杂志：基因71(359-370[1988])玉米A632基因组DNA(用作PCR玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子的模板)。

步骤1：将玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子克隆在pBluescriptSK-中(命名为pEXS10zp)。

1.PCR1.1Kb玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子

引物：EXS31，EXS32

模板：玉米A632基因组DNA

2.克隆：将1.1Kb玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子PCR产物克隆在pBluescriptSK-质粒的SacI和SacII位点上(见图7)。

步骤2：缺失pEXS10zp上的NdeI位点(被命名为pEXS10zp-Ndel)。

通过填乎和平端连接pBluescriptSK中的玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子除去NdeI。

步骤3：将玉米adh1内含子克隆到pBluescriptSK-(命名为pEXSadh1)。

玉米adh1内含子是从质粒pHKH1上的XbaI和BamHI位点上释出的。将玉米adh1内含子(XbaI/BamHI片段)克隆到pBluescriptSK-上的XbaI和BamHI位点上(见图7)。

步骤4：将玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子和玉米adh1内含子克隆到pBluescriptSK-上(命名为pEXS10zp-adh1)。

玉米10KD醇溶蛋白启动子是从质粒pEXS10zp-NdeI上SacI和SacII位点上释出的。将玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子(SacI/SacII片段)克隆到质粒pEXSadh1(含有玉米adh1内含子)的SacI和SacII位点上(见图7)。

步骤5：将玉米nos3’终止子克隆到质粒pEXSadh1上(命名为pEXSadh1-nos3’) 。

玉米nos3’终止子是从质粒pMF6上的EcoRI和HindIII位点上释出的。将玉米nos3’终止子(EcoRI/HindIII片段)克隆到质粒pEXSadh1上的EcoRI和HindIII上(见图7)。

步骤6：将玉米nos3’终止子克隆到质粒pEXS10zp-adh1上(命名为pEXS10zp-adh1-nos3’)。

玉米nos3’终止子是从质粒pEXSadh1-nos3’上的EcoRI和ApeI位点上释出的。将玉米nos3’终止子(EcoRI/ApaI片段)克隆到质粒pEXS10zp-adh1上的EcoRI和ApaI位点上(见图7)。

步骤7：将玉米STSI转运肽克隆到质粒pEXS10zp-adh1-nos3’上(命名为pEXS33)。

1.PCR150bp玉米STSI转运肽

引物：EXS29，EXS35]

模板：MSTSI(6-4)质粒

2.将150bp玉米STSI转运肽PCR产物克隆到质粒pEXS10zp-adh1-nos3’上的EcoRI和BamHI位点上(见图7)。

步骤8：对pEXS33上的玉米STSI转运肽进行定点诱变(命名为pEXS33(m))。

在质粒pEXS33上的玉米STSI转运肽上存在一个突变(终止密码子)。进行定点诱变是为了将终止密码子改变成非终止密码子。新的质粒(含有玉米10KD玉米醇溶蛋白启动子、玉米STSI转运肽、玉米adh1内含子、玉米nos3’终止子)被命名为pEXS33(m)。

步骤9：使pEXS33(m)上的NotI位点缺失(命名为pEXS50)。

通过NotI补平和平端连接除去pEXS33上的NotI位点，以形成pEXS50(见图8)。

步骤10：使pEXS33(m)上的玉米adh1内含子缺失(命名为pEXS60上)。

通过NotI/BamHI消化，用Klenow片段补平和平端连接除去玉米adh1内含子，以生成pEXS60(见图9)。

步骤11：将玉米STSIII克隆到pEXS50、pEXS60上。

玉米STSIII是从质粒pBluescriptSK-上的NdeI和EcoRI位点上释出的。将玉米STSIII(NdeI-EcoRI片段分别克隆到pEXS50、pEXS60上，命名为pEXS51、pEXS61(分别参见图8和图9)。

步骤12：将表8所示基因克隆到pEXS51的NdeI/NotI位点上，以生成pEXS52。可以通过将其它基因(STSI、II、WX、glgA、glgB、glgC、BEI、BEII等)克隆到质粒pEXS51、pEXS61的NdeI/NotI位点上制备其它类似的质粒。

将质粒pEXS52转入稻中。对用pEXS52转化过的再生稻植株进行标记，并将其放入品红箱中。

从所述品红箱中选择每个系的两个姊妹株，并将其转入装有土壤混合物(表土与泥炭-蛭石50/50混合物)的2.5英寸的盆中。将所述盆放在装有半英寸高水的水族箱中(鱼箱)。盖住该箱的上部以保持高湿度(在其上面设置一些孔，以便散热)。用一个温度计监测其温度。将该鱼箱放在荧光灯下。在第一周不对所述植株施肥。光照周期为上午6点-下午8点，最少有14小时的光照。夜间温度最低为68°F，日间温度为80-90°F。在所述鱼箱下面使用一个加热垫，以便在需要时帮助根系生长。让所述植物在上述条件下保持一周。(注：所述姊妹株应为低光照强度而长高)。

在上述第一周之后，打开所述水族箱的顶部，并将稻转化体转移到生长箱中，在高湿度和高光照强度下生长三周。

另外，可以在温室中用水混合物保持高湿度，让植株生长三周。然后将该植株转移到装有土壤混合物(表土与泥炭-蛭石50/50混合物)的6英寸的盆中(最小为5英寸盆)。将所述盆放入装有半英寸水的托盘中。用15-16-17(N-K-P)对所述植株施肥(250ppm)，每周一次，或根据植株的需要通过观察其外观进行施肥。让所述植株保持14小时光照(最低)，上午6点-下午8点的高光照强度，温度为85-90°F/70°F日间/夜间。

让所述植株产生稻粒，并收获这些稻粒。从所收获的种子中提取淀粉，并分析这些种子的淀粉中连接氨基酸C，V，A，E，L，S，R[序列27]的存在。

实施例7：

用于植物的SER载体：

图6所示质粒适用于单子叶植物，即玉米。质粒pEXS52(图6)具有一个启动子，一个转运肽(源于玉米)，和一个编码氨基酸序列CVAELSRE[序列27]的连接基因片段(TGC GTC GCG GAGCTG AGC AGG GAG)[序列26]。

该基因片段天然存在于接近玉米可溶性淀粉合成酶(MSTSI)基因的N-末端处。如表8所示，源于淀粉合成酶的SER始于氨基酸292位左右。优选将该载体转入玉米宿主中。该转运多肽适用于玉米，因此玉米是优选的宿主。很显然，如果必要的话，所述转运肽和启动子可加以改变，以适应所希望的宿主植物。在通过“whiskers”技术(美国专利US5,302,523和US5,464,765)转化以后，通过本领域已知方法再生转化的宿主细胞，对转化株进行授粉，并收集所得到的种子，分析所述肽在淀粉和淀粉粒中的存在。

可将以下优选的基因用于玉米中以改善其种子：肌醇六磷酸酶基因，促生长素基因，以下链状氨基酸：AUG AUG AUG AUG AUG AUGAUG AUG[序列28]，和/或AAG AAG AAG AAG AAG AAG AAG AAG AAGAAG AAG AAG[序列29]；和/或AAA AAA AAA AAA AAA AAA[序列30]；或编码一种链状赖氨酸的密码子的组合或编码赖氨酸密码子和甲硫氨酸密码子的组合或任意两种或三种此类氨基酸的组合。所述链的长度不宜过长，不过，链的长度似乎并不重要。这样，所述氨基酸就被被囊化于淀粉粒中或结合于淀粉粒中，形成所述植物宿主的含有淀粉的部分。

该质粒可以被转入诸如稻、小麦、大麦、燕麦、高粱、或粟的其它禾本科植物中，只需对该质粒作很小的改进或不作改进。所述启动子可以是waxy基因启动子，其序列已被公开，或本领域已知的其它玉米醇溶蛋白启动子。

另外，不用做太多的试验即可将上述质粒转入诸如马铃薯、甘薯、芋、大薯、荷、木薯、花生、豌豆、大豆、菜豆、或鹰嘴豆的双子叶植物中。可以对启动子进行选择，以便将特定双子叶植物或块茎的淀粉储存部位定位，例如可将patatin启动子用于马铃薯块茎。

转化单子叶植物和双子叶植物的各种方法在本领域中是公知的，而且转化基因的方法对本发明来说并不重要。可以用An等的冻-融法将所述质粒导入根癌农杆菌中(Agrobacteriumtumefaciens)(1988，二元载体，见植物分子生物学手册A3，S.D.Gelvin R.A.Schilperoot著，Dordrecht，荷兰：Kluwer学术出版社，pp.1-19)。在Edwards等的著述中披露了制备含有所述构建体的农杆菌接种物的方法，并接种植物材料，再生芽，以及使芽长根(“源于马铃薯的新型淀粉合成酶的生物化学和分子鉴定”，植物杂志8，283-294(1995))。

在多种不同的基因中存在着多种被囊化区。尽管优选将所述蛋白被囊化于淀粉粒中(粒状被囊化作用)，但本发明所述的“被囊化”一词的含义还包括被囊化于非粒状淀粉中。以下类型的基因可用于这一目的。

糖原合成酶的淀粉被囊化区的用途：

大肠杆菌糖原合成酶不是一种大的蛋白：其结构基因的长度为1431bp，编码一种具有477个氨基酸的蛋白，其估计分子量为49,000。众所周知的是，在将细菌基因插入植物基因组时会出现密码子使用问题，但是，这一问题对于大肠杆菌基因来说不像源于诸如芽孢杆菌的其它细菌的基因那么严重。源于大肠杆菌的糖原合成酶的密码子使用特征与玉米基因具有更多的不同之处，不过，优选用已知方法对位于其翻译起始点的序列加以改变，以便与植物共有序列更加一致：

glgA G A T A A T G C A G[序列31]

共有序列A A C A A T G G C T[序列32]

可溶性淀粉合成酶的淀粉被囊化区的用途：

在上文的背景技术部分披露了植物可溶性淀粉合成酶的cDNA克隆，可将这些克隆用于本发明中。根据本发明，编码上述任何SSTS蛋白的基因均可用于构建体中。

分支酶的淀粉被囊化区的用途：

可将在上文的背景技术部分所披露的植物、细菌和动物分支酶的cDAN克隆用于本发明中。能将直链淀粉转化成支链淀粉(将一段1，4D葡聚糖链转移到一个类似的葡聚糖链的伯位羟基上)的分支酶[1，4D葡聚糖：1，4D葡聚糖6D(1，4D葡聚糖)转移酶(E.C.2.4.1.18)]有时被称为Q-酶。

Baba等研究了玉米分支酶I的序列，(1991，BBRC，181：87-94)。Fisher等研究了源于玉米胚乳的淀粉分支酶II(1993，植物生理学，102：1045-1046)。所述BE基因构建体可能需要由一种造粉体转运肽来确保其在造粉体中的正确定位。根据本发明，编码上述GBSTS蛋白的分支酶的任一种的基因均可用构建体中。

颗粒结合淀粉合成酶的淀粉结合域的用途：植物颗粒结合淀粉合成酶的cDNA的用途披露于下列文献中：Shure等(1983)细胞35：225-233，Visser等(1989)植物科学64(2)：185-192。Visser等还披露了用反义构建体在马铃薯中抑制编码颗粒结合淀粉合成酶的基因的表达(1991，分子基因遗传学225(2)：289-296；1994，植物细胞6：43-52)。Shimada等在稻中证实了反义现象(1993，理论应用遗传学86：665-672)。Van der Leij等证实，在用野生型waxy马铃薯基因转化以后可在低支链淀粉马铃薯中恢复直链淀粉的合成(1991，理论应用遗传学82：289-295)。

源于诸如玉米、稻、小麦、马铃薯、木薯、豌豆、或大麦的颗粒淀粉合成酶的氨基酸序列和核苷酸序列是众所周知的。根据本发明，编码上述任一种GBSTS蛋白的基因均可用于构建体中。

构建植物转化载体：

用于本发明方法中的植物转化载体可以用标准技术构建。

转运肽序列的用途：

某些基因构建体需要由造粉体转运肽来确保在造粉体中的正确定位。据信，叶绿体转运肽具有相似的序列(Heijne等披露了叶绿体转运肽的数据，见：1991植物分子生物学报导，9(2：104-126)。可用于本发明的其它转运肽为ADPG焦磷酸化酶(1991植物分子生物学报导，9：104-126)，小亚基RUBISCO，乙酰乳酸合成酶、甘油醛三磷酸脱氢酶和亚硝酸还原酶。

源于许多基因型的小亚基RUBISCO转运肽的共有序列的序列如下：

MASSMLSSAAVATRTNPAQASMVAPFTGLKSAAFPVSRKQNLDITSIASNGGRVQC

[序列33]

玉米小亚基RUBISCO具有以下序列：

MAPTVMMASSATATRTNPAQASAVAPFQGLKSTASLPVARRSSRSLGNVASNGGRIRC

[序列34]

源于玉米叶片的三磷酸甘油醛脱氢酶的转动肽具有如下序列：

MAQILAPSTQWQMRITKTSPCATPITSKMWSSLVMKQTKKVAHSAKFRVMAVNSENG

T[序列35]。

玉米胚乳结合淀粉合成酶的转运肽序列具有以下序列：

MAALATSQLVATRAGHGVPDASTFRRGAAQGLRGARASAAADTLSMRTSARAAPRHQ

QQARRGGRFPFPSLVVC[序列36]

玉米胚乳可溶性淀粉合成酶的转运肽序列具有以下序列：

MATPSAVGAACLLLARXAWPAAVGDRARPRRLQRVLRRR[序列37]

通过工程方法将新的氨基酸或肽插入淀粉被囊化蛋白：

可以用本领域技术人员公知的方法插入新的氨基酸组合用于本发明所述的淀粉结合蛋白的修饰。例如，可以对淀粉结合蛋白的序列进行修饰，以表达高于正常水平的赖氨酸、甲硫氨酸或色氨酸。这种水平高于天然水平是有用的，而且这种蛋白可使诸如禾本科植物的作物的营养得到加强。

除了改变氨基酸的平衡以外，还可以对淀粉结合蛋白进行工程操作，以便将有价值的肽插入所述淀粉结合蛋白中。将所述有效负荷多肽结合在淀粉结合蛋白的N-末端，这是一种将肽片段添加上去但仍能维持其淀粉结合能力的公知方法。还可以通过将特定的蛋白酶裂解位点插入所述有效负荷多肽与所述淀粉被囊化区的结合位点对其作进一步的改进。本领域技术人员熟知的是，蛋白酶对于不同的氨基酸键具有优选的专一性。这种专一性可被用于提供一种载体，以便将有价值的肽输送到动物和人的消化道的不同部位。

在本发明的另一种实施方案中，在对所述淀粉粒进行纯化和加工以后，可以释放出所述有效负荷多肽。众所周知，通过解淀粉和/或凝胶化方法可以释放出与淀粉粒结合的蛋白或使其变得可用于蛋白水解作用。因此，有可能从淀粉粒中回收到有商业价值量的蛋白和肽。

在本发明的又一种实施方案中，可以用多种不同方法处理所述淀粉粒，以提供改变该淀粉的可消化性的方法。采用这种方法，有可能改变结合在淀粉粒中的蛋白、肽或氨基酸的生物可利用性。虽然为清楚和理解起见已通过说明和举例的方式对上述发明作了详细说明，但对本领域普通技术人员来说，显而易见的是，通过阅读本发明可以在不超出所附权利要求的构思或范围的前提下对本发明作出某些改变和改进。

序列表

(1)一般资料：

(i)申请人：Keeling，Peter

Guan，Hanping

(ii)发明名称：淀粉被囊化

(iii)序列数：37

(iv)通信地址：

(A)收件人：Greenlee，Winner和Sullivan，P.C.

(B)街道：5370 Manhattan Circle

(C)城市：Boulder

(D)州：CO

(E)国家：美国

(F)邮编：80303

(v)计算机可读形式：

(A)媒体类型：软盘

(B)计算机：IBM PC兼容

(C)操作系统：C-DOS/MS-DOS

(D)软件：PatentIn Release#1.0，Version#1.30

(vi)当前申请数据：

(A)申请号：US

(B)申请日：30-9-1997

(C)分类号：

(vii)在先申请数据：

(A)申请号：US 60/026,855

(B)申请日：30-9-1996

(viii)律师/代理人资料：

(A)姓名：Winner，Ellen P

(B)注册号：28，547

(C)资料/文件号：89-97

(ix)通信资料：

(A)电话：(303)499-8080

(B)传真：(303)499-8089

(2)序列1资料：

(i)序列特征：

(A)长度：31个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列1：

GACTAGTCAT ATGGTGAGCA AGGGCGAGGA G

(2)序列2资料：

(i)序列特征：

(A)长度：36个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列2：

CTAGATCTTC ATATGCTTGT ACAGCTCGTC CATGCC

(2)序列3资料：

(i)序列特征：

(A)长度：39个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列3：

CTAGATCTTG GCCATGGCCT GGTACAGCTC GTCCATGCC

(2)序列4资料：

(i)序列特征：

(A)长度：4800个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：DNA(基因组)

(iii)假说：无

(vi)来源：

(A)生物：玉米

(iv)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：结合

(1449..1553，1685..1765，1860..1958，2055..2144，2226..2289，2413..2513，2651..2760，2858..3101，3212..3394，3490..3681，3793..3879，3977..4105，4227..4343)

(xi)序列描述：序列4：

CAGCGACCTA TTACACAGCC CGCTCGGGCC CGCGACGTCG GGACACATCT TCTTCCCCCT 60

TTTGGTGAAG CTCTGCGCGC AGCTGTCCGG CTCCTTGGAC GTTCGTGTGG CAGATTCATC 120

TGTTGTCTCG TCTCCTGTGC TTCCTGGGTA GCTTGTGTAG TGGAGCTGAC ATGGTCTGAG 180

CAGGCTTAAA ATTTGCTCGT AGACGAGGAG TACCAGCACA GCACGTTGCG GATTTCTCTG 240

CCTGTGAAGT GCAACGTCTA GGATTGTCAC ACGCCTTGGT CGCGTCGCGT CGCGTCGCGT 300

CGATGCGGTG GTGAGCAGAG CAGCAACAGC TGGGCGGCCC AACGTTGGCT TCCGTGTCTT 360

CGTCGTACGT ACGCGCGCGC CGGGGACACG CAGCAGAGAG CGGAGAGCGA GCCGTGCACG 420

GGGAGGTGGT GTGGAAGTGG AGCCGCGCGC CCGGCCGCCC GCGCCCGGTG GGCAACCCAA 480

AAGTACCCAC GACAAGCGAA GGCGCCAAAG CGATCCAAGC TCCGGAACGC AACAGCATGC 540

GTCGCGTCGG AGAGCCAGCC ACAAGCAGCC GAGAACCGAA CCGGTGGGCG ACGCGTCATG 600

GGACGGACGC GGGCGACGCT TCCAAACGGG CCACGTACGC CGGCGTGTGC GTGCGTGCAG 660

ACGACAAGCC AAGGCGAGGC AGCCCCCGAT CGGGAAAGCG TTTTGGGCGC GAGCGCTGGC 720

GTGCGGGTCA GTCGCTGGTG CGCAGTGCCG GGGGGAACGG GTATCGTGGG GGGCGCGGGC 780

GGAGGAGAGC GTGGCGAGGG CCGAGAGCAG CGCGCGGCCG GGTCACGCAA CGCGCCCCAC 840

GTACTGCCCT CCCCCTCCGC GCGCGCTAGA AATACCGAGG CCTGGACCGG GGGGGGGCCC 900

CGTCACATCC ATCCATCGAC CGATCGATCG CCACAGCCAA CACCACCCGC CGAGGCGACG 960

CGACAGCCGC CAGGAGGAAG GAATAAACTC ACTGCCAGCC AGTGAAGGGG GAGAAGTGTA 1020

CTGCTCCGTC GACCAGTGCG CGCACCGCCC GGCAGGGCTG CTCATCTCGT CGACGACCAG 1080

GTTCTGTTCC GTTCCGATCC GATCCGATCC TGTCCTTGAG TTTCGTCCAG ATCCTGGCGC 1140

GTATCTGCGT GTTTGATGAT CCAGGTTCTT CGAACCTAAA TCTGTCCGTG CACACGTCTT 1200

TTCTCTCTCT CCTACGCAGT GGATTAATCG GCATGGCGGC TCTGGCCACG TCGCAGCTCG 1260

TCGCAACGCG CGCCGGCCTG GGCGTCCCGG ACGCGTCCAC GTTCCGCCGC GGCGCCGCGC 1320

AGGGCCTGAG GGGGGCCCGG GCGTCGGCGG CGGCGGACAC GCTCAGCATG CGGACCAGCG 1380

CGCGCGCGGC GCCCAGGCAC CAGCAGCAGG CGCGCCGCGG GGGCAGGTTC CCGTCGCTCG 1440

TCGTGTGC GCC AGC GCC GGC ATG AAC GTC GTC TTC GTC GGC GCC GAG ATG 1490

Ala Ser Ala Gly Met Asn Val Val Phe Val Gly Ala Glu Met

1 5 10

GCG CCG TGG AGC AAG ACC GGC GGC CTC GGC GAC GTC CTC GGC GGC CTG 1538

Ala Pro Trp Ser Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp Val Leu Gly Gly Leu

15 20 25 30

CCG CCG GCC ATG GCC GTAAGCGCGC GCACCGAGAC ATGCATCCGT TGGATCGCGT 1593

Pro Pro Ala Met Ala

35

CTTCTTCGTG CTCTTGCCGC GTGCATGATG CATGTGTTTC CTCCTGGCTT GTGTTCGTGT 1653

ATGTGACGTG TTTGTTCGGG CATGCATGCA G GCG AAC GGG CAC CGT GTC ATG 1705

Ala Asn Gly His Arg Val Met

40

GTC GTC TCT CCC CGC TAC GAC CAG TAC AAG GAC GCC TGG GAC ACC AGC 1753

Val Val Ser Pro Arg Tyr Asp Gln Tyr Lys Asp Ala Trp Asp Thr Ser

45 50 55

GTC GTG TCC GAG GTACGGCCAC CGAGACCAGA TTCAGATCAC AGTCACACAC 1805

Val Val Ser Glu

60

ACCGTCATAT GAACCTTTCT CTGCTCTGAT GCCTGCAACT GCAAATGCAT GCAG ATC 1862

Ile

AAG ATG GGA GAC GGG TAC GAG ACG GTC AGG TTC TTC CAC TGC TAC AAG 1910

Lys Met Gly Asp Gly Tyr Glu Thr Val Arg Phe Phe His Cys Tyr Lys

65 70 75

CGC GGA GTG GAC CGC GTG TTC GTT GAC CAC CCA CTG TTC CTG GAG AGG 1958

Arg Gly Val Asp Arg Val Phe Val Asp His Pro Leu Phe Leu Glu Arg

80 85 90 95

GTGAGACGAG ATCTGATCAC TCGATACGCA ATTACCACCC CATTGTAAGC AGTTACAGTG 2018

AGCTTTTTTT CCCCCCGGCC TGGTCGCTGG TTTCAG GTT TGG GGA AAG ACC GAG 2072

Val Trp Gly Lys Thr Glu

100

GAG AAG ATC TAC GGG CCT GTC GCT GGA ACG GAC TAC AGG GAC AAC CAG 2120

Glu Lys Ile Tyr Gly Pro Val Ala Gly Thr Asp Tyr Arg Asp Asn Gln

105 110 115

CTG CGG TTC AGC CTG CTA TGC CAG GTCAGGATGG CTTGGTACTA CAACTTCATA 2174

Leu Arg Phe Ser Leu Leu Cys Gln

120 125

TCATCTGTAT GCAGCAGTAT ACACTGATGA GAAATGCATG CTGTTCTGCA G GCA GCA 2231

Ala Ala

CTT GAA GCT CCA AGG ATC CTG AGC CTC AAC AAC AAC CCA TAC TTC TCC 2279

Leu Glu Ala Pro Arg Ile Leu SeT Leu Asn Asn Asn Pro Tyr Phe Ser

130 135 140

GGA CCA TAC G GTAAGAGTTG CAGTCTTCGT ATATATATCT GTTGAGCTCG 2329

Gly Pro Tyr

145

AGAATCTTCA CAGGAAGCGG CCCATCAGAC GGACTGTCAT TTTACACTGA CTACTGCTGC 2389

TGCTCTTCGT CCATCCATAC AAG GG GAG GAC GTC GTG TTC GTC TGC AAC 2438

Gly Glu Asp Val Val Phe Val Cys Asn

150 155

GAC TGG CAC ACC GGC CCT CTC TCG TGC TAC CTC AAG AGC AAC TAC CAG 2486

Asp Trp His Thr Gly Pro Leu Ser Cys Tyr Leu Lys Ser Asn Tyr Gln

160 165 170

TCC CAC GGC ATC TAC AGG GAC GCA AAG GTTGCCTTCT CTGAACTGAA 2533

Ser His Gly Ile Tyr Arg Asp Ala Lys

175 180

CAACGCCGTT TTCGTTCTCC ATGCTCGTAT ATACCTCGTC TGGTAGTGGT GGTGCTTCTC 2593

TGAGAAACTA ACTGAAACTG ACTGCATGTC TGTCTGACCA TCTTCACGTA CTACCAG 2650

ACC GCT TTC TGC ATC CAC AAC ATC TCC TAC CAG GGC CGG TTC GCC TTC 2698

Thr Ala Phe Cys Ile His Asn Ile Ser Tyr Gln Gly Arg Phe Ala Phe

185 190 195

TCC GAC TAC CCG GAG CTG AAC CTC CCG GAG AGA TTC AAG TCG TCC TTC 2746

Ser Asp Tyr Pro Glu Leu Asn Leu Pro Glu Arg Phe Lys Ser Ser Phe

200 205 210

GAT TTC ATC GAC GG GTCTGTTTTC CTGCGTGCAT GTGAACATTC ATGAATGGTA 2800

Asp Phe Ile Asp Gly

215

ACCCACAACT GTTCGCGTCC TGCTGGTTCA TTATCTGACC TGATTGCATT ATTGCAG C 2858

Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val Pro Leu Ile Gly Phe Ile Gly Arg

405 410 415

Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp Leu Ile Gln Leu Ile Ile Pro Asp

420 425 430

Leu Met Arg Glu Asp Val Gln Phe Val Met Leu Gly Ser Gly Asp Pro

435 440 445

Glu Leu Glu Asp Trp Met Arg Ser Thr Glu Ser Ile Phe Lys Asp Lys

450 455 460

Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Pro Val Ser His Arg Ile Thr

465 470 475 480

Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly

485 490 495

Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His

500 505 510

Ala Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr Val Glu Asn Phe Asn Pro Phe Gly

515 520 525

Glu Asn Gly Glu Gln Gly Thr Gly Trp Ala Phe Ala Pro Leu Thr Thr

530 535 540

Glu Asn Met Phe Val Asp Ile Ala Asn Cys Asn Ile Tyr Ile Gln Gly

545 550 555 560

Thr Gln Val Leu Leu Gly Arg Ala Asn Glu Ala Ar9 His Val Lys Arg

565 570 575

Leu His Val Gly Pro Cys Arg *

580

(2)序列14资料：

(i)序列特征：

(A)长度：2725个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：mRNA

TAC GAG AAG CCC GTG GAA GGC CGG AAG ATC AAC TGG ATG AAG GCC GGG 2906

Tyr Glu Lys Pro Val Glu Gly Arg Lys Ile Asn Trp Met Lys Ala Gly

220 225 230

ATC CTC GAG GCC GAC AGG GTC CTC ACC GTC AGC CCC TAC TAC GCC GAG 2954

Ile Leu Glu Ala Asp Arg Val Leu Thr Val Ser Pro Tyr Tyr Ala Glu

235 240 245

GAG CTC ATC TCC GGC ATC GCC AGG GGC TGC GAG CTC GAC AAC ATC ATG 3002

Glu Leu Ile Ser Gly Ile Ala Arg Gly Cys Glu Leu Asp Asn Ile Met

250 255 260 265

CGC CTC ACC GGC ATC ACC GGC ATC GTC AAC GGC ATG GAC GTC AGC GAG 3050

Arg Leu Thr Gly Ile Thr Gly Ile Val Asn Gly Met Asp Val Ser Glu

270 275 280

TGG GAC CCC AGC AGG GAC AAG TAC ATC GCC GTG AAG TAC GAC GTG TCG 3098

Trp Asp Pro Ser Arg Asp Lys Tyr Ile Ala Val Lys Tyr Asp Val Ser

285 290 295

ACG GTGAGCTGGC TAGCTCTGAT TCTGCTGCCT GGTCCTCCTG CTCATCATGC 3151

Thr

TGGTTCGGTA CTGACGCGGC AAGTGTACGT ACGTGCGTGC GACGGTGGTG TCCGGTTCAG 3211

GCC GTG GAG GCC AAG GCG CTG AAC AAG GAG GCG CTG CAG GCG GAG GTC 3259

Ala Val Glu Ala Lys Ala Leu Asn Lys Glu Ala Leu Gln Ala Glu Val

300 305 310

GGG CTC CCG GTG GAC CGG AAC ATC CCG CTG GTG GCG TTC ATC GGC AGG 3307

Gly Leu Pro Val Asp Arg Asn Ile Pro Leu Val Ala Phe Ile Gly Arg

315 320 325 330

CTG GAA GAG CAG AAG GGC CCC GAC GTC ATG GCG GCC GCC ATC CCG CAG 3355

Leu Glu Glu Gln Lys Gly Pro Asp Val Met Ala Ala Ala Ile Pro Gln

335 340 345

CTC ATG GAG ATG GTG GAG GAC GTG CAG ATC GTT CTG CTG GTACGTGTGC 3404

Leu Met Glu Met Val Glu Asp Val Gln Ile Val Leu Leu

350 355

GCCGGCCGCC ACCCGGCTAC TACATGCGTG TATCGTTCGT TCTACTGGAA CATGCGTGTG 3464

AGCAACGCGA TGGATAATGC TGCAG GGC ACG GGC AAG AAG AAG TTC GAG CGC 3516

Gly Thr Gly Lys Lys Lys Phe Glu Arg

360 365

ATG CTC ATG AGC GCC GAG GAG AAG TTC CCA GGC AAG GTG CGC GCC GTG 3564

Met Leu Met Ser Ala Glu Glu Lys Phe Pro Gly Lys Val Arg Ala Val

370 375 380

GTC AAG TTC AAC GCG GCG CTG GCG CAC CAC ATC ATG GCC GGC GCC GAC 3612

Val Lys Phe Asn Ala Ala Leu Ala His His Ile Met Ala Gly Ala Asp

385 390 395 400

GTG CTC GCC GTC ACC AGC CGC TTC GAG CCC TGC GGC CTC ATC CAG CTG 3660

Val Leu Ala Val Thr Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Ile Gln Leu

405 410 415

CAG GGG ATG CGA TAC GGA ACG GTACGAGAGA AAAAAAAAAT CCTGAATCCT 3711

Gln Gly Met Arg Tyr Gly Thr

420

GACGAGAGGG ACAGAGACAG ATTATGAATG CTTCATCGAT TTGAATTGAT TGATCGATGT 3771

CTCCCGCTGC GACTCTTGCA G CCC TGC GCC TGC GCG TCC ACC GGT GGA CTC 3822

Pro Cys Ala Cys Ala Ser Thr Gly Gly Leu

425 430

GTC GAC ACC ATC ATC GAA GGC AAG ACC GGG TTC CAC ATG GGC CGC CTC 3870

Val Asp Thr Ile Ile Glu Gly Lys Thr Gly Phe His Met Gly Arg Leu

435 440 445

AGC GTC GAC GTAAGCCTAG CTCTGCCATG TTCTTTCTTC TTTCTTTCTG 3919

Ser Val Asp

450

TATGTATGTA TGAATCAGCA CCGCCGTTCT TGTTTCGTCG TCGTCCTCTC TTCCCAG 3976

TGT AAC GTC GTG GAG CCG GCG GAC GTC AAG AAG GTG GCC ACC ACA TTG 4024

Cys Asn Val Val Glu Pro Ala Asp Val Lys Lys Val Ala Thr Thr Leu

455 460 465

CAG CGC GCC ATC AAG GTG GTC GGC ACG CCG GCG TAC GAG GAG ATG GTG 4072

Gln Arg Ala Ile Lys Val Val Gly Thr Pro Ala Tyr Glu Glu Met Val

470 475 480

AGG AAC TGC ATG ATC CAG GAT CTC TCC TGG AAG GTACGTACGC CCGCCCCGCC 4125

Arg Asn Cys Met Ile Gln Asp Leu Ser Trp Lys

485 490 495

CCGCCCCGCC AGAGCAGAGC GCCAAGATCG ACCGATCGAC CGACCACACG TACGCGCCTC 4185

GCTCCTGTCG CTGACCGTGG TTTAATTTGC GAAATGCGCA G GGC CCT GCC AAG 4238

Gly Pro Ala Lys

AAC TGG GAG AAC GTG CTG CTC AGC CTC GGG GTC GCC GGC GGC GAG CCA 4286

Asn Trp Glu Asn Val Leu Leu Ser Leu Gly Val Ala Gly Gly Glu Pro

500 505 510 515

GGG GTC GAA GGC GAG GAG ATC GCG CCG CTC GCC AAG GAG AAC GTG GCC 4334

Gly Val Glu Gly Glu Glu Ile Ala Pro Leu Ala Lys Glu Asn Val Ala

520 525 530

GCG CCC TGA AGAGTTCGGC CTGCAGGGCC CCTGATCTCG CGCGTGGTGC 4383

Ala Pro *

AAAGATGTTG GGACATCTTC TTATATATGC TGTTTCGTTT ATGTGATATG GACAAGTATG 4443

TGTAGCTGCT TGCTTGTGCT AGTGTAATGT AGTGTAGTGG TGGCCAGTGG CACAACCTAA 4503

TAAGCGCATG AACTAATTGC TTGCGTGTGT AGTTAAGTAC CGATCGGTAA TTTTATATTG 4563

CGAGTAAATA AATGGACCTG TAGTGGTGGA GTAAATAATC CCTGCTGTTC GGTGTTCTTA 4623

TCGCTCCTCG TATAGATATT ATATAGAGTA CATTTTTCTC TCTCTGAATC CTACGTTTGT 4683

GAAATTTCTA TATCATTACT GTAAAATTTC TGCGTTCCAA AAGAGACCAT AGCCTATCTT 4743

TGGCCCTGTT TGTTTCGGCT TCTGGCAGCT TCTGGCCACC AAAAGCTGCT GCGGACT 4800

(2)序列5资料：

(i)序列特征：

(A)长度：534氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列5：

Ala Ser Ala Gly Met Asn Val Val Phe Val Gly Ala Glu Met Ala Pro

1 5 10 15

Trp Ser Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp Val Leu Gly Gly Leu Pro Pro

20 25 30

Ala Met Ala Ala Asn Gly His Arg Val Met Val Val Ser Pro Arg Tyr

35 40 45

Asp Gln Tyr Lys Asp Ala Trp Asp Thr Ser Val Val Ser Glu Ile Lys

50 55 60

Met Gly Asp Gly Tyr Glu Thr Val Arg Phe Phe His Cys Tyr Lys Arg

65 70 75 80

Gly Val Asp Arg Val Phe Val Asp His Pro Leu Phe Leu Glu Arg Val

85 90 95

Trp Gly Lys Thr Glu Glu Lys Ile Tyr Gly Pro Val Ala Gly Thr Asp

100 105 110

Tyr Arg Asp Asn Gln Leu Arg Phe Ser Leu Leu Cys Gln Ala Ala Leu

115 120 125

Glu Ala Pro Arg Ile Leu Ser Leu Asn Asn Asn Pro Tyr Phe Ser Gly

130 135 140

Pro Tyr Gly Glu Asp Val Val Phe Val Cys Asn Asp Trp His Thr Gly

145 150 155 160

Pro Leu Ser Cys Tyr Leu Lys Ser Asn Tyr Gln Ser His Gly Ile Tyr

165 170 175

Arg Asp Ala Lys Thr Ala Phe Cys Ile His Asn Ile Ser Tyr Gln Gly

180 185 190

Arg Phe Ala Phe Ser Asp Tyr Pro Glu Leu Asn Leu Pro Glu Arg Phe

195 200 205

Lys Ser Ser Phe Asp Phe Ile Asp Gly Tyr Glu Lys Pro Val Glu Gly

210 215 220

Arg Lys Ile Asn Trp Met Lys Ala Gly Ile Leu Glu Ala Asp Arg Val

225 230 235 240

Leu Thr Val Ser Pro Tyr Tyr Ala Glu Glu Leu Ile Ser Gly Ile Ala

245 250 255

Arg Gly Cys Glu Leu Asp Asn Ile Met Arg Leu Thr Gly Ile Thr Gly

260 265 270

Ile Val Asn Gly Met Asp Val Ser Glu Trp Asp Pro Ser Arg Asp Lys

275 280 285

Tyr Ile Ala Val Lys Tyr Asp Val Ser Thr Ala Val Glu Ala Lys Ala

290 295 300

Leu Asn Lys Glu Ala Leu Gln Ala Glu Val Gly Leu Pro Val Asp Arg

305 310 315 320

Asn Ile Pro Leu Val Ala Phe Ile Gly Arg Leu Glu Glu Gln Lys Gly

325 330 335

Pro Asp Val Met Ala Ala Ala Ile Pro Gln Leu Met Glu Met Val Glu

340 345 350

Asp Val Gln Ile Val Leu Leu Gly Thr Gly Lys Lys Lys Phe Glu Arg

355 360 365

Met Leu Met Ser Ala Glu Glu Lys Phe Pro Gly Lys Val Arg Ala Val

370 375 380

Val Lys Phe Asn Ala Ala Leu Ala His His Ile Met Ala Gly Ala Asp

385 390 395 400

Val Leu Ala Val Thr Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Ile Gln Leu

405 410 415

Gln Gly Met Arg Tyr Gly Thr Pro Cys Ala Cys Ala Ser Thr Gly Gly

420 425 430

Leu Val Asp Thr Ile Ile Glu Gly Lys Thr Gly Phe His Met Gly Arg

435 440 445

Leu Ser Val Asp Cys Asn Val Val Glu Pro Ala Asp Val Lys Lys Val

450 455 460

Ala Thr Thr Leu Gln Arg Ala Ile Lys Val Val Gly Thr Pro Ala Tyr

465 470 475 480

Glu Glu Met Val Arg Asn Cys Met Ile Gln Asp Leu Ser Trp Lys Gly

485 490 495

Pro Ala Lys Asn Trp Glu Asn Val Leu Leu Ser Leu Gly Val Ala Gly

500 505 510

Gly Glu Pro Gly Val Glu Gly Glu Glu Ile Ala Pro Leu Ala Lys Glu

515 520 525

Asn Val Ala Ala Pro *

530

(2)序列6资料：

(i)序列特征：

(A)长度：2542个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(vi)来源：

(A)生物：稻

(ix)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：453..2282

(xi)序列描述：序列6：

GAATTCAGTG TGAAGGAATA GATTCTCTTC AAAACAATTT AATCATTCAT CTGATCTGCT 60

CAAAGCTCTG TGCATCTCCG GGTGCAACGG CCAGGATATT TATTGTGCAG TAAAAAAATG 120

TCATATCCCC TAGCCACCCA AGAAACTGCT CCTTAAGTCC TTATAAGCAC ATATGGCATT 180

GTAATATATA TGTTTGAGTT TTAGCGACAA TTTTTTTAAA AACTTTTGGT CCTTTTTATG 240

AACGTTTTAA GTTTCACTGT CTTTTTTTTT CGAATTTTAA ATGTAGCTTC AAATTCTAAT 300

CCCCAATCCA AATTGTAATA AACTTCAATT CTCCTAATTA ACATCTTAAT TCATTTATTT 360

GAAAACCAGT TCAAATTCTT TTTAGGCTCA CCAAACCTTA AACAATTCAA TTCAGTGCAG 420

AGATCTTCCA CAGCAACAGC TAGACAACCA CC ATG TCG GCT CTC ACC ACG TCC 473

Met Ser Ala Leu Thr Thr Ser

535 540

CAG CTC GCC ACC TCG GCC ACC GGC TTC GGC ATC GCC GAC AGG TCG GCG 521

Gln Leu Ala Thr Ser Ala Thr Gly Phe Gly Ile Ala Asp Arg Ser Ala

545 550 555

CCG TCG TCG CTG CTC CGC CAC GGG TTC CAG GGC CTC AAG CCC CGC AGC 569

Pro Ser Ser Leu Leu Arg His Gly Phe Gln Gly Leu Lys Pro Arg Ser

560 565 570

CCC GCC GGC GGC GAC GCG ACG TCG CTC AGC GTG ACG ACC AGC GCG CGC 617

Pro Ala Gly Gly Asp Ala Thr Ser Leu Ser Val Thr Thr Ser Ala Arg

575 580 585

GCG ACG CCC AAG CAG CAG CGG TCG GTG CAG CGT GGC AGC CGG AGG TTC 665

Ala Thr Pro Lys Gln Gln Arg Ser Val Gln Arg Gly Ser Arg Arg Phe

590 595 600 605

CCC TCC GTC GTC GTG TAC GCC ACC GGC GCC GGC ATG AAC GTC GTG TTC 713

Pro Ser Val Val Val Tyr Ala Thr Gly Ala Gly Met Asn Val Val Phe

610 615 620

GTC GGC GCC GAG ATG GCC CCC TGG AGC AAG ACC GGC GGC CTC GGT GAC 761

Val Gly Ala Glu Met Ala Pro Trp Ser Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp

625 630 635

GTC CTC GGT GGC CTC CCC CCT GCC ATG GCT GCG AAT GGC CAC AGG GTC 809

Val Leu Gly Gly Leu Pro Pro Ala Met Ala Ala Asn Gly His Arg Val

640 645 650

ATG GTG ATC TCT CCT CGG TAC GAC CAG TAC AAG GAC GCT TGG GAT ACC 857

Met Val Ile Ser Pro Arg Tyr Asp Gln Tyr Lys Asp Ala Trp Asp Thr

655 660 665

AGC GTT GTG GCT GAG ATC AAG GTT GCA GAC AGG TAC GAG AGG GTG AGG 905

Ser Val Val Ala Glu Ile Lys Val Ala Asp Arg Tyr Glu Arg Val Arg

670 675 680 685

TTT TTC CAT TGC TAC AAG CGT GGA GTC GAC CGT GTG TTC ATC GAC CAT 953

Phe Phe His Cys Tyr Lys Arg Gly Val Asp Arg Val Phe Ile Asp His

690 695 700

CCG TCA TTC CTG GAG AAG GTT TGG GGA AAG ACC GGT GAG AAG ATC TAC 1001

Pro Ser Phe Leu Glu Lys Val Trp Gly Lys Thr Gly Glu Lys Ile Tyr

705 710 715

GGA CCT GAC ACT GGA GTT GAT TAC AAA GAC AAC CAG ATG CGT TTC AGC 1049

Gly Pro Asp Thr Gly Val Asp Tyr Lys Asp Asn Gln Met Arg Phe Ser

720 725 730

CTT CTT TGC CAG GCA GCA CTC GAG GCT CCT AGG ATC CTA AAC CTC AAC 1097

Leu Leu Cys Gln Ala Ala Leu Glu Ala Pro Arg Ile Leu Asn Leu Asn

735 740 745

AAC AAC CCA TAC TTC AAA GGA ACT TAT GGT GAG GAT GTT GTG TTC GTC 1145

Asn Asn Pro Tyr Phe Lys Gly Thr Tyr Gly Glu Asp Val Val Phe Val

750 755 760 765

TGC AAC GAC TGG CAC ACT GGC CCA CTG GCG AGC TAC CTG AAG AAC AAC 1193

Cys Asn Asp Trp His Thr Gly Pro Leu Ala Ser Tyr Leu Lys Asn Asn

770 775 780

TAC CAG CCC AAT GGC ATC TAC AGG AAT GCA AAG GTT GCT TTC TGC ATC 1241

Tyr Gln Pro Asn Gly Ile Tyr Arg Asn Ala Lys Val Ala Phe Cys Ile

785 790 795

CAC AAC ATC TCC TAC CAG GGC CGT TTC GCT TTC GAG GAT TAC CCT GAG 1289

His Asn Ile Ser Tyr Gln Gly Arg Phe Ala Phe Glu Asp Tyr Pro Glu

800 805 810

CTG AAC CTC TCC GAG AGG TTC AGG TCA TCC TTC GAT TTC ATC GAC GGG 1337

Leu Asn Leu Ser Glu Arg Phe Arg Ser Ser Phe Asp Phe Ile Asp Gly

815 820 825

TAT GAC ACG CCG GTG GAG GGC AGG AAG ATC AAC TGG ATG AAG GCC GGA 1385

Tyr Asp Thr Pro Val Glu Gly Arg Lys Ile Asn Trp Met Lys Ala Gly

830 835 840 845

ATC CTG GAA GCC GAC AGG GTG CTC ACC GTG AGC CCG TAC TAC GCC GAG 1433

Ile Leu Glu Ala Asp Arg Val Leu Thr Val Ser Pro Tyr Tyr Ala Glu

850 855 860

GAG CTC ATC TCC GGC ATC GCC AGG GGA TGC GAG CTC GAC AAC ATC ATG 1481

Glu Leu Ile Ser Gly Ile Ala Arg Gly Cys Glu Leu Asp Asn Ile Met

865 870 875

CGG CTC ACC GGC ATC ACC GGC ATC GTC AAC GGC ATG GAC GTC AGC GAG 1529

Arg Leu Thr Gly Ile Thr Gly Ile Val Asn Gly Met Asp Val Ser Glu

880 885 890

TGG GAT CCT AGC AAG GAC AAG TAC ATC ACC GCC AAG TAC GAC GCA ACC 1577

Trp Asp Pro Ser Lys Asp Lys Tyr Ile Thr Ala Lys Tyr Asp Ala Thr

895 900 905

ACG GCA ATC GAG GCG AAG GCG CTG AAC AAG GAG GCG TTG CAG GCG GAG 1625

Thr Ala Ile Glu Ala Lys Ala Leu Asn Lys Glu Ala Leu Gln Ala Glu

910 915 920 925

GCG GGT CTT CCG GTC GAC AGG AAA ATC CCA CTG ATC GCG TTC ATC GGC 1673

Ala Gly Leu Pro Val Asp Arg Lys Ile Pro Leu Ile Ala Phe Ile Gly

930 935 940

AGG CTG GAG GAA CAG AAG GGC CCT GAC GTC ATG GCC GCC GCC ATC CCG 1721

Arg Leu Glu Glu Gln Lys Gly Pro Asp Val Met Ala Ala Ala Ile Pro

945 950 955

GAG CTC ATG CAG GAG GAC GTC CAG ATC GTT CTT CTG GGT ACT GGA AAG 1769

Glu Leu Met Gln Glu Asp Val Gln Ile Val Leu Leu Gly Thr Gly Lys

960 965 970

AAG AAG TTC GAG AAG CTG CTC AAG AGC ATG GAG GAG AAG TAT CCG GGC 1817

Lys Lys Phe Glu Lys Leu Leu Lys Ser Met Glu Glu Lys Tyr Pro Gly

975 980 985

AAG GTG AGG GCG GTG GTG AAG TTC AAC GCG CCG CTT GCT CAT CTC ATC 1865

Lys Val Arg Ala Val Val Lys Phe Asn Ala Pro Leu Ala His Leu Ile

990 995 1000 1005

ATG GCC GGA GCC GAC GTG CTC GCC GTC CCC AGC CGC TTC GAG CCC TGT 1913

Met Ala Gly Ala Asp Val Leu Ala Val Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys

1010 1015 1020

GGA CTC ATC CAG CTG CAG GGG ATG AGA TAC GGA ACG CCC TGT GCT TGC 196l

Gly Leu Ile Gln Leu Gln Gly Met Arg Tyr Gly Thr Pro Cys Ala Cys

1025 1030 1035

GCG TCC ACC GGT GGG CTC GTG GAC ACG GTC ATC GAA GGC AAG ACT GGT 2009

Ala Ser Thr Gly Gly Leu Val Asp Thr Val Ile Glu Gly Lys Thr Gly

1040 1045 1050

TTC CAC ATG GGC CGT CTC AGC GTC GAC TGC AAG GTG GTG GAG CCA AGC 2057

Phe His Met Gly Arg Leu Ser Val Asp Cys Lys Val Val Glu Pro Ser

1055 1060 1065

GAC GTG AAG AAG GTG GCG GCC ACC CTG AAG CGC GCC ATC AAG GTC GTC 2105

Asp Val Lys Lys Val Ala Ala Thr Leu Lys Arg Ala Ile Lys Va1 Val

1070 1075 1080 1085

GGC ACG CCG GCG TAC GAG GAG ATG GTC AGG AAC TGC ATG AAC CAG GAC 2153

Gly Thr Pro Ala Tyr Glu Glu Met Val Arg Asn Cys Met Asn Gln Asp

1090 1095 1100

CTC TCC TGG AAG GGG CCT GCG AAG AAC TGG GAG AAT GTG CTC CTG GGC 2201

Leu Ser Trp Lys Gly Pro Ala Lys Asn Trp Glu Asn Val Leu Leu Gly

1105 1110 1115

CTG GGC GTC GCC GGC AGC GCG CCG GGG ATC GAA GGC GAC GAG ATC GCG 2249

Leu Gly Val Ala Gly Ser Ala Pro Gly Ile Glu Gly Asp Glu Ile Ala

1120 1125 1130

CCG CTC GCC AAG GAG AAC GTG GCT GCT CCT TGA AGAGCCTGAG ATCTACATAT 2302

Pro Leu Ala Lys Glu Asn Val Ala Ala Pro

1135 1140

GGAGTGATTA ATTAATATAG CAGTATATGG ATGAGAGACG AATGAACCAG TGGTTTGTTT 2362

GTTGTAGTGA ATTTGTAGCT ATAGCCAATT ATATAGGCTA ATAAGTTTGA TGTTGTACTC 2422

TTCTGGGTGT GCTTAAGTAT CTTATCGGAC CCTGAATTTA TGTGTGTGGC TTATTGCCAA 2482

TAATATTAAG TAATAAAGGG TTTATTATAT TATTATATAT GTTATATTAT ACTAAAAAAA 2542

(2)序列7资料：

(i)序列特征：

(A)长度：610氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列7：

Met Ser Ala Leu Thr Thr Ser Gln Leu Ala Thr Ser Ala Thr Gly Phe

1 5 10 15

Gly Ile Ala Asp Arg Ser Ala Pro Ser Ser Leu Leu Arg His Gly Phe

20 25 30

Gln Gly Leu Lys Pro Arg Ser Pro Ala Gly Gly Asp Ala Thr Ser Leu

35 40 45

Ser Val Thr Thr Ser Ala Arg Ala Thr Pro Lys Gln Gln Arg Ser Val

50 55 60

Gln Arg Gly Ser Arg Arg Phe Pro Ser Val Val Val Tyr Ala Thr Gly

65 70 75 80

Ala Gly Met Asn Val Val Phe Val Gly Ala Glu Met Ala Pro Trp Ser

85 90 95

Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp Val Leu Gly Gly Leu Pro Pro Ala Met

100 105 110

Ala Ala Asn Gly His Arg Val Met Val Ile Ser Pro Arg Tyr Asp Gln

115 120 125

Tyr Lys Asp Ala Trp Asp Thr Ser Val Val Ala Glu Ile Lys Val Ala

130 135 140

Asp Arg Tyr Glu Arg Val Arg Phe Phe His Cys Tyr Lys Arg Gly Val

145 150 155 160

Asp Arg Val Phe Ile Asp His Pro Ser Phe Leu Glu Lys Val Trp Gly

165 170 175

Lys Thr Gly Glu Lys Ile Tyr Gly Pro Asp Thr Gly Val Asp Tyr Lys

180 185 190

Asp Asn Gln Met Arg Phe Ser Leu Leu Cys Gln Ala Ala Leu Glu Ala

195 200 205

Pro Arg Ile Leu Asn Leu Asn Asn Asn Pro Tyr Phe Lys Gly Thr Tyr

210 215 220

Gly Glu Asp Val Val Phe Val Cys Asn Asp Trp His Thr Gly Pro Leu

225 230 235 240

Ala Ser Tyr Leu Lys Asn Aen Tyr Gln Pro Asn Gly Ile Tyr Arg Asn

245 250 255

Ala Lys Val Ala Phe Cys Ile His Asn Ile Ser Tyr Gln Gly Arg Phe

260 265 270

Ala Phe Glu Asp Tyr Pro Glu Leu Asn Leu Ser Glu Arg Phe Arg Ser

275 280 285

Ser Phe Asp Phe Ile Asp Gly Tyr Asp Thr Pro Val Glu Gly Arg Lys

290 295 300

Ile Asn Trp Met Lys Ala Gly Ile Leu Glu Ala Asp Arg Val Leu Thr

305 310 315 320

Val Ser Pro Tyr Tyr Ala Glu Glu Leu Ile Ser Gly Ile Ala Arg Gly

325 330 335

Cys Glu Leu Asp Asn Ile Met Arg Leu Thr Gly Ile Thr Gly Ile Val

340 345 350

Asn Gly Met Asp Val Ser Glu Trp Asp Pro Ser Lys Asp Lys Tyr Ile

355 360 365

Thr Ala Lys Tyr Asp Ala Thr Thr Ala Ile Glu Ala Lys Ala Leu Asn

370 375 380

Lys Glu Ala Leu Gln Ala Glu Ala Gly Leu Pro Val Asp Arg Lys Ile

385 390 395 400

Pro Leu Ile Ala Phe Ile Gly Arg Leu Glu Glu Gln Lys Gly Pro Asp

405 410 415

Val Met Ala Ala Ala Ile Pro Glu Leu Met Gln Glu Asp Val Gln Ile

420 425 430

Val Leu Leu Gly Thr Gly Lys Lys Lys Phe Glu Lys Leu Leu Lys Ser

435 440 445

Met Glu Glu Lys Tyr Pro Gly Lys Val Arg Ala Val Val Lys Phe Asn

450 455 460

Ala Pro Leu Ala His Leu Ile Met Ala Gly Ala Asp Val Leu Ala Val

465 470 475 480

Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Ile Gln Leu Gln Gly Met Arg

485 490 495

Tyr Gly Thr Pro Cys Ala Cys Ala Ser Thr Gly Gly Leu Val Asp Thr

500 505 510

Val Ile Glu Gly Lys Thr Gly Phe His Met Gly Arg Leu Ser Val Asp

515 520 525

Cys Lys Val Val Glu Pro Ser Asp Val Lys Lys Val Ala Ala Thr Leu

530 535 540

Lys Arg Ala Ile Lys Val Val Gly Thr Pro Ala Tyr Glu Glu Met Val

545 550 555 560

Arg Asn Cys Met Asn Gln Asp Leu Ser Trp Lys Gly Pro Ala Lys Asn

565 570 575

Trp Glu Asn Val Leu Leu Gly Leu Gly Val Ala Gly Ser Ala Pro Gly

580 585 590

Ile Glu Gly Asp Glu Ile Ala Pro Leu Ala Lys Glu Asn Val Ala Ala

595 600 605

Pro *

610

(2)序列8资料：

(i)序列特征：

(A)长度：2007个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(vi)来源：

(A)生物：玉米

(ix)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：1..2007

(xi)序列描述：序列8：

GCT GAG GCT GAG GCC GGG GGC AAG GAC GCG CCG CCG GAG AGG AGC GGC 48

Ala Glu Ala Glu Ala Gly Gly Lys Asp Ala Pro Pro Glu Arg Ser Gly

615 620 625

GAC GCC GCC AGG TTG CCC CGC GCT CGG CGC AAT GCG GTC TCC AAA CGG 96

Asp Ala Ala Arg Leu Pro Arg Ala Arg Arg Asn Ala Val Ser Lys Arg

630 635 640

AGG GAT CCT CTT CAG CCG GTC GGC CGG TAC GGC TCC GCG ACG GGA AAC 144

Arg Asp Pro Leu Gln Pro Val Gly Arg Tyr Gly Ser Ala Thr Gly Asn

645 650 655

ACG GCC AGG ACC GGC GCC GCG TCC TGC CAG AAC GCC GCA TTG GCG GAC 192

Thr Ala Arg Thr Gly Ala Ala Ser Cyg Gln Asn Ala Ala Leu Ala Asp

660 665 670

GTT GAG ATC GTT GAG ATC AAG TCC ATC GTC GCC GCG CCG CCG ACG AGC 240

Val Glu Ile Val Glu Ile Lys Ser Ile Val Ala Ala Pro pro Thr Ser

675 680 685 690

ATA GTG AAG TTC CCA GGG CGC GGG CTA CAG GAT GAT CCT TCC CTC TGG 288

Ile Val Lys Phe Pro Gly Arg Gly Leu Gln Asp Asp Pro Ser Leu Trp

695 700 705

GAC ATA GCA CCG GAG ACT GTC CTC CCA GCC CCG AAG CCA CTG CAT GAA 336

Asp Ile Ala Pro Glu Thr Val Leu Pro Ala Pro Lys Pro Leu His Glu

710 715 720

TCG CCT GCG GTT GAC GGA GAT TCA AAT GGA ATT GCA CCT CCT ACA GTT 384

Ser Pro Ala Val Asp Gly Asp Ser Asn Gly Ile Ala Pro Pro Thr Val

725 730 735

GAG CCA TTA GTA CAG GAG GCC ACT TGG GAT TTC AAG AAA TAC ATC GGT 432

Glu Pro Leu Val Gln Glu Ala Thr Trp Asp Phe Lys Lys Tyr Ile Gly

740 745 750

TTT GAC GAG CCT GAC GAA GCG AAG GAT GAT TCC AGG GTT GGT GCA GAT 480

Phe Asp Glu Pro Asp Glu Ala Lys Asp Asp Ser Arg Val Gly Ala Asp

755 760 765 770

GAT GCT GGT TCT TTT GAA CAT TAT GGG ACA ATG ATT CTG GGC CTT TGT 528

Asp Ala Gly Ser Phe Glu His Tyr Gly Thr Met Ile Leu Gly Leu Cys

775 780 785

GGG GAG AAT GTT ATG AAC GTG ATC GTG GTG GCT GCT GAA TGT TCT CCA 576

Gly Glu Asn Val Met Asn Val Ile Val Val Ala Ala Glu Cys Ser Pro

790 795 800

TGG TGC AAA ACA GGT GGT CTT GGA GAT GTT GTG GGA GCT TTA CCC AAG 624

Trp Cys Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp Val Val Gly Ala Leu Pro Lys

805 810 815

GCT TTA GCG AGA AGA GGA CAT CGT GTT ATG GTT GTG GTA CCA AGG TAT 672

Ala Leu Ala Arg Arg Gly His Arg Val Met Val Val Val Pro Arg Tyr

820 825 830

GGG GAC TAT GTG GAA GCC TTT GAT ATG GGA ATC CGG AAA TAC TAC AAA 720

Gly Asp Tyr Val Glu Ala Phe Asp Met Gly Ile Arg Lys Tyr Tyr Lys

835 840 845 850

GCT GCA GGA CAG GAC CTA GAA GTG AAC TAT TTC CAT GCA TTT ATT GAT 768

Ala Ala Gly Gln Asp Leu Glu Val Asn Tyr Phe His Ala Phe Ile Asp

855 860 865

GGA GTC GAC TTT GTG TTC ATT GAT GCC TCT TTC CGG CAC CGT CAA GAT 816

Gly Val Asp Phe Val Phe Ile Asp Ala Ser Phe Arg His Arg Gln Asp

870 875 880

GAC ATA TAT GGG GGA AGT AGG CAG GAA ATC ATG AAG CGC ATG ATT TTG 864

Asp Ile Tyr Gly Gly Ser Arg Gln Glu Ile Met Lys Arg Met Ile Leu

885 890 895

TTT TGC AAG GTT GCT GTT GAG GTT CCT TGG CAC GTT CCA TGC GGT GGT 912

Phe Cys Lys Val Ala Val Glu Val Pro Trp His Val Pro Cys Gly Gly

900 905 910

GTG TGC TAC GGA GAT GGA AAT TTG GTG TTC ATT GCC ATG AAT TGG CAC 960

Val Cys Tyr Gly Asp Gly Asn Leu Val Phe Ile Ala Met Asn Trp His

915 920 925 930

ACT GCA CTC CTG CCT GTT TAT CTG AAG GCA TAT TAC AGA GAC CAT GGG 1008

Thr Ala Leu Leu Pro Val Tyr Leu Lys Ala Tyr Tyr Arg Asp His Gly

935 940 945

TTA ATG CAG TAC ACT CGC TCC GTC CTC GTC ATA CAT AAC ATC GGC CAC 1056

Leu Met Gln Tyr Thr Arg Ser Val Leu Val Ile His Asn Ile Gly His

950 955 960

CAG GGC CGT GGT CCT GTA CAT GAA TTC CCG TAC ATG GAC TTG CTG AAC 1104

Gln Gly Arg Gly Pro Val His Glu Phe Pro Tyr Met Asp Leu Leu Asn

965 970 975

ACT AAC CTT CAA CAT TTC GAG CTG TAC GAT CCC GTC GGT GGC GAG CAC 1152

Thr Asn Leu Gln His Phe Glu Leu Tyr Asp Pro Val Gly Gly Glu His

980 985 990

GCC AAC ATC TTT GCC GCG TGT GTT CTG AAG ATG GCA GAC CGG GTG GTG 1200

Ala Asn Ile Phe Ala Ala Cys Val Leu Lys Met Ala Asp Arg Val Val

995 1000 1005 1010

ACT GTC AGC CGC GGC TAC CTG TGG GAG CTG AAG ACA GTG GAA GGC GGC 1248

Thr Val Ser Arg Gly Tyr Leu Trp Glu Leu Lys Thr Val Glu Gly Gly

1015 1020 1025

TGG GGC CTC CAC GAC ATC ATC CGT TCT AAC GAC TGG AAG ATC AAT GGC 1296

Trp Gly Leu His Asp Ile Ile Arg Ser Asn Asp Trp Lys Ile Asn Gly

1030 1035 1040

ATT CGT GAA CGC ATC GAC CAC CAG GAG TGG AAC CCC AAG GTG GAC GTG 1344

Ile Arg Glu Arg Ile Asp His Gln Glu Trp Asn Pro Lys Val Asp Val

1045 1050 1055

CAC CTG CGG TCG GAC GGC TAC ACC AAC TAC TCC CTC GAG ACA CTC GAC 1392

His Leu Arg Ser Asp Gly Tyr Thr Asn Tyr Ser Leu Glu Thr Leu Asp

1060 1065 1070

GCT GGA AAG CGG CAG TGC AAG GCG GCC CTG CAG CGG GAC GTG GGC CTG 1440

Ala Gly Lys Arg Gln Cys Lys Ala Ala Leu Gln Arg Asp Val Gly Leu

1075 1080 1085 1090

GAA GTG CGC GAC GAC GTG CCG CTG CTC GGC TTC ATC GGG CGT CTG GAT 1488

Glu Val Arg Asp Asp Val Pro Leu Leu Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp

1095 1100 1105

GGA CAG AAG GGC GTG GAC ATC ATC GGG GAC GCG ATG CCG TGG ATC GCG 1536

Gly Gln Lys Gly Val Asp Ile Ile Gly Asp Ala Met Pro Trp Ile Ala

1110 1115 1120

GGG CAG GAC GTG CAG CTG GTG ATG CTG GGC ACC GGC CCA CCT GAC CTG 1584

Gly Gln Asp Val Gln Leu Val Met Leu Gly Thr Gly Pro Pro Asp Leu

1125 1130 1135

GAA CGA ATG CTG CAG CAC TTG GAG CGG GAG CAT CCC AAC AAG GTG CGC 1632

Glu Arg Met Leu Gln His Leu Glu Arg Glu His Pro Asn Lys Val Arg

1140 1145 1150

GGG TGG GTC GGG TTC TCG GTC CTA ATG GTG CAT CGC ATC ACG CCG GGC 1680

Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Leu Met Val His Arg Ile Thr Pro Gly

1155 1160 1165 1170

GCC AGC GTG CTG GTG ATG CCC TCC CGC TTC GCC GGC GGG CTG AAC CAG 1728

Ala Ser Val Leu Val Met Pro Ser Arg Phe Ala Gly Gly Leu Asn Gln

1175 1180 1185

CTC TAC GCG ATG GCA TAC GGC ACC GTC CCT GTG GTG CAC GCC GTG GGC 1776

Leu Tyr Ala Met Ala Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Ala Val Gly

1190 1195 1200

GGG CTC AGG GAC ACC GTG GCG CCG TTC GAC CCG TTC GGC GAC GCC GGG 1824

Gly Leu Arg Asp Thr Val Ala Pro Phe Asp Pro Phe Gly Asp Ala Gly

1205 1210 1215

CTC GGG TGG ACT TTT GAC CGC GCC GAG GCC AAC AAG CTG ATC GAG GTG 1872

Leu Gly TrP Thr Phe Asp Arg Ala Glu Ala Asn Lys Leu Ile Glu Val

1220 1225 1230

CTC AGC CAC TGC CTC GAC ACG TAC CGA AAC TAC GAG GAG AGC TGG AAG 1920

Leu Ser His Cys Leu Asp Thr Tyr Arg Asn Tyr Glu Glu Ser Trp Lys

1235 1240 1245 1250

AGT CTC CAG GCG CGC GGC ATG TCG CAG AAC CTC AGC TGG GAC CAC GCG 1968

Ser Leu Gln Ala Arg Gly Met Ser Gln Asn Leu Ser Trp Asp His Ala

1255 1260 1265

GCT GAG CTC TAC GAG GAC GTC CTT GTC AAG TAC CAG TGG 2007

Ala Glu Leu Tyr Glu Asp Val Leu Val Lys Tyr Gln Trp

1270 1275

(2)序列9资料：

(i)序列特征：

(A)长度：669氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列9：

Ala Glu Ala Glu Ala Gly Gly Lys Asp Ala Pro Pro Glu Arg Ser Gly

1 5 10 15

Asp Ala Ala Arg Leu Pro Arg Ala Arg Arg Asn Ala Val Ser Lys Arg

20 25 30

Arg Asp Pro Leu Gln Pro Val Gly Arg Tyr Gly Ser Ala Thr Gly Asn

35 40 45

Thr Ala Arg Thr Gly Ala Ala Ser Cys Gln Asn Ala Ala Leu Ala Asp

50 55 60

Val Glu Ile Val Glu Ile Lys Ser Ile Val Ala Ala Pro Pro Thr Ser

65 70 75 80

Ile Val Lys Phe Pro Gly Arg Gly Leu Gln Asp Asp Pro Ser Leu Trp

85 90 95

Asp Ile Ala Pro Glu Thr Val Leu Pro Ala Pro Lys Pro Leu His Glu

100 105 110

Ser Pro Ala Val Asp Gly Asp Ser Asn Gly Ile Ala Pro Pro Thr Val

115 120 125

Glu Pro Leu Val Gln Glu Ala Thr Trp Asp Phe Lys Lys Tyr Ile Gly

130 135 140

Phe Asp Glu Pro Asp Glu Ala Lys Asp Asp Ser Arg Val Gly Ala Asp

145 150 155 160

Asp Ala Gly Ser Phe Glu His Tyr Gly Thr Met Ile Leu Gly Leu Cys

165 170 175

Gly Glu Asn Val Met Asn Val Ile Val Val Ala Ala Glu Cys Ser Pro

180 185 190

Trp Cys Lys Thr Gly Gly Leu Gly Asp Val Val Gly Ala Leu Pro Lys

195 200 205

Ala Leu Ala Arg Arg Gly His Arg Val Met Val Val Val Pro Arg Tyr

210 215 220

Gly Asp Tyr Val Glu Ala Phe Asp Met Gly Ile Arg Lys Tyr Tyr Lys

225 230 235 240

Ala Ala Gly Gln Asp Leu Glu Val Asn Tyr Phe His Ala Phe Ile Asp

245 250 255

Gly Val Asp Phe Val Phe Ile Asp Ala Ser Phe Arg His Arg Gln Asp

260 265 270

Asp Ile Tyr Gly Gly Ser Arg Gln Glu Ile Met Lys Arg Met Ile Leu

275 280 285

Phe Cys Lys Val Ala Val Glu Val Pro Trp His Val Pro Cys Gly Gly

290 295 300

Val Cys Tyr Gly Asp Gly Asn Leu Val Phe Ile Ala Met Asn Trp His

305 310 315 320

Thr Ala Leu Leu Pro Val Tyr Leu Lys Ala Tyr Tyr Arg Asp His Gly

325 330 335

Leu Met Gln Tyr Thr Arg Ser Val Leu Val Ile His Asn Ile Gly His

340 345 350

Gln Gly Arg Gly Pro Val His Glu Phe Pro Tyr Met Asp Leu Leu Asn

355 360 365

Thr Asn Leu Gln His Phe Glu Leu Tyr Asp Pro Val Gly Gly Glu His

370 375 380

Ala Asn Ile Phe Ala Ala Cys Val Leu Lys Met Ala Asp Arg Val Val

385 390 395 400

Thr Val Ser Arg Gly Tyr Leu Trp Glu Leu Lys Thr Val Glu Gly Gly

405 410 415

Trp Gly Leu His Asp Ile Ile Arg Ser Asn Asp Trp Lys Ile Asn Gly

420 425 430

Ile Arg Glu Arg Ile Asp His Gln Glu Trp Asn Pro Lys Val Asp Val

435 440 445

His Leu Arg Ser Asp Gly Tyr Thr Asn Tyr Ser Leu Glu Thr Leu Asp

450 455 460

Ala Gly Lys Arg Gln Cys Lys Ala Ala Leu Gln Arg Asp Val Gly Leu

465 470 475 480

Glu Val Arg Asp Asp Val Pro Leu Leu Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp

485 490 495

Gly Gln Lys Gly Val Asp Ile Ile Gly Asp Ala Met Pro Trp Ile Ala

500 505 510

Gly Gln Asp Val Gln Leu Val Met Leu Gly Thr Gly Pro Pro Asp Leu

515 520 525

Glu Arg Met Leu Gln His Leu Glu Arg Glu His Pro Asn Lys Val Arg

530 535 540

Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Leu Met Val His Arg Ile Thr Pro Gly

545 550 555 560

Ala Ser Val Leu Val Met Pro Ser Arg Phe Ala Gly Gly Leu Asn Gln

565 570 575

Leu Tyr Ala Met Ala Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Ala Val Gly

580 585 590

Gly Leu Arg Asp Thr Val Ala Pro Phe Asp Pro Phe Gly Asp Ala Gly

595 600 605

Leu Gly Trp Thr Phe Asp Arg Ala Glu Ala Asn Lys Leu Ile Glu Val

610 615 620

Leu Ser His Cys Leu Asp Thr Tyr Arg Asn Tyr Glu Glu Ser Trp Lys

625 630 635 640

Ser Leu Gln Ala Arg Gly Met Ser Gln Asn Leu Ser Trp Asp His Ala

645 650 655

Ala Glu Leu Tyr Glu Asp Val Leu Val Lys Tyr Gln Trp

660 665

(2)序列10资料：

(i)序列特征：

(A)长度：2097个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(vi)来源：

(A)生物：玉米

(ix)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：1..2097

(xi)序列描述：序列10：

ATG CCG GGG GCA ATC TCT TCC TCG TCG TCG GCT TTT CTC CTC CCC GTC 48

Met Pro Gly Ala Ile Ser Ser Ser Ser Ser Ala Phe Leu Leu Pro Val

670 675 680 685

GCG TCC TCC TCG CCG CGG CGC AGG CGG GGC AGT GTG GGT GCT GCT CTG 96

Ala Ser Ser Ser Pro Arg Arg Arg Arg Gly Ser Val Gly Ala Ala Leu

690 695 700

CGC TCG TAC GGC TAC AGC GGC GCG GAG CTG CGG TTG CAT TGG GCG CGG 144

Arg Ser Tyr Gly Tyr Ser Gly Ala Glu Leu Arg Leu His Trp Ala Arg

705 710 715

CGG GGC CCG CCT CAG GAT GGA GCG GCG TCG GTA CGC GCC GCA GCG GCA 192

Arg Gly Pro Pro Gln Asp Gly Ala Ala Ser Val Arg Ala Ala Ala Ala

720 725 730

CCG GCC GGG GGC GAA AGC GAG GAG GCA GCG AAG AGC TCC TCC TCG TCC 240

Pro Ala Gly Gly Glu Ser Glu Glu Ala Ala Lys Ser Ser Ser Ser Ser

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CAG GCG GGC GCT GTT CAG GGC AGC ACG GCC AAG GCT GTG GAT TCT GCT 288

Gln Ala Gly Ala Val Gln Gly Ser Thr Ala Lys Ala Val Asp Ser Ala

750 755 760 765

TCA CCT CCC AAT CCT TTG ACA TCT GCT CCG AAG CAA AGT CAG AGC GCT 336

Ser Pro Pro Asn Pro Leu Thr Ser Ala Pro Lys Gln Ser Gln Ser Ala

770 775 780

GCA ATG CAA AAC GGA ACG AGT GGG GGC AGC AGC GCG AGC ACC GCC GCG 384

Ala Met Gln Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Ser Ala Ser Thr Ala Ala

785 790 795

CCG GTG TCC GGA CCC AAA GCT GAT CAT CCA TCA GCT CCT GTC ACC AAG 432

Pro Val Ser Gly Pro Lys Ala Asp His Pro Ser Ala Pro Val Thr Lys

800 805 810

AGA GAA ATC GAT GCC AGT GCG GTG AAG CCA GAG CCC GCA GGT GAT GAT 480

Arg Glu Ile Asp Ala Ser Ala Val Lys Pro Glu Pro Ala Gly Asp Asp

815 820 825

GCT AGA CCG GTG GAA AGC ATA GGC ATC GCT GAA CCG GTG GAT GCT AAG 528

Ala Arg Pro Val Glu Ser Ile Gly Ile Ala Glu Pro Val Asp Ala Lys

830 835 840 845

GCT GAT GCA GCT CCG GCT ACA GAT GCG GCG GCG AGT GCT CCT TAT GAC 576

Ala Asp Ala Ala Pro Ala Thr Asp Ala Ala Ala Ser Ala Pro Tyr Asp

850 855 860

AGG GAG GAT AAT GAA CCT GGC CCT TTG GCT GGG CCT AAT GTG ATG AAC 624

Arg Glu Asp Asn Glu Pro Gly Pro Leu Ala Gly Pro Asn Val Met Asn

865 870 875

GTC GTC GTG GTG GCT TCT GAA TGT GCT CCT TTC TGC AAG ACA GGT GGC 672

Val Val Val Val Ala Ser Glu Cys Ala Pro Phe Cys Lys Thr Gly Gly

880 885 890

CTT GGA GAT GTC GTG GGT GCT TTG CCT AAG GCT CTG GCG AGG AGA GGA 720

Leu Gly Asp Val Val Gly Ala Leu Pro Lys Ala Leu Ala Arg Arg Gly

895 900 905

CAC CGT GTT ATG GTC GTG ATA CCA AGA TAT GGA GAG TAT GCC GAA GCC 768

His Arg Val Met Val Val Ile Pro Arg Tyr Gly Glu Tyr Ala Glu Ala

910 915 920 925

CGG GAT TTA GGT GTA AGG AGA CGT TAC AAG GTA GCT GGA CAG GAT TCA 816

Arg Asp Leu Gly Val Arg Arg Arg Tyr Lys Val Ala Gly Gln Asp Ser

930 935 940

GAA GTT ACT TAT TTT CAC TCT TAC ATT GAT GGA GTT GAT TTT GTA TTC 864

Glu Val Thr Tyr Phe His Ser Tyr Ile Asp Gly Val Asp Phe Val Phe

945 950 955

GTA GAA GCC CCT CCC TTC CGG CAC CGG CAC AAT AAT ATT TAT GGG GGA 912

Val Glu Ala Pro Pro Phe Arg His Arg His Asn Asn Ile Tyr Gly Gly

960 965 970

GAA AGA TTG GAT ATT TTG AAG CGC ATG ATT TTG TTC TGC AAG GCC GCT 960

Glu Arg Leu Asp Ile Leu Lys Arg Met Ile Leu Phe Cys Lys Ala Ala

975 980 985

GTT GAG GTT CCA TGG TAT GCT CCA TGT GGC GGT ACT GTC TAT GGT GAT 1008

Val Glu Val Pro Trp Tyr Ala Pro Cys Gly Gly Thr Val Tyr Gly Asp

990 995 1000 1005

GGC AAC TTA GTT TTC ATT GCT AAT GAT TGG CAT ACC GCA CTT CTG CCT 1056

Gly Asn Leu Val Phe Ile Ala Asn Asp Trp His Thr Ala Leu Leu Pro

1010 1015 1020

GTC TAT CTA AAG GCC TAT TAC CGG GAC AAT GGT TTG ATG CAG TAT GCT 1104

Val Tyr Leu Lys Ala Tyr Tyr Arg Asp Asn Gly Leu Met Gln Tyr Ala

1025 1030 1035

CGC TCT GTG CTT GTG ATA CAC AAC ATT GCT CAT CAG GGT CGT GGC CCT 1152

Arg Ser Val Leu Val Ile His Asn Ile Ala His Gln Gly Arg Gly Pro

1040 1045 1050

GTA GAC GAC TTC GTC AAT TTT GAC TTG CCT GAA CAC TAC ATC GAC CAC 1200

Val Asp Asp Phe Val Asn Phe Asp Leu Pro Glu His Tyr Ile Asp His

1055 1060 1065

TTC AAA CTG TAT GAC AAC ATT GGT GGG GAT CAC AGC AAC GTT TTT GCT 1248

Phe Lys Leu Tyr Asp Asn Ile Gly Gly Asp His Ser Asn Val Phe Ala

1070 1075 1080 1085

GCG GGG CTG AAG ACG GCA GAC CGG GTG GTG ACC GTT AGC AAT GGC TAC 1296

Ala Gly Leu Lys Thr Ala Asp Arg Val Val Thr Val Ser Asn Gly Tyr

1090 1095 1100

ATG TGG GAG CTG AAG ACT TCG GAA GGC GGG TGG GGC CTC CAC GAC ATC 1344

Met Trp Glu Leu Lys Thr Ser Glu Gly Gly Trp Gly Leu His Asp Ile

1105 1110 1115

ATA AAC CAG AAC GAC TGG AAG CTG CAG GGC ATC GTG AAC GGC ATC GAC 1392

Ile Asn Gln Asn Asp Trp Lys Leu Gln Gly Ile Val Asn Gly Ile Asp

1120 1125 1130

ATG AGC GAG TGG AAC CCC GCT GTG GAC GTG CAC CTC CAC TCC GAC GAC 1440

Met Ser Glu Trp Asn Pro Ala Val Asp Val His Leu His Ser Asp Asp

1135 1140 1145

TAC ACC AAC TAC ACG TTC GAG ACG CTG GAC ACC GGC AAG CGG CAG TGC 1488

Tyr Thr Asn Tyr Thr Phe Glu Thr Leu Asp Thr Gly Lys Arg Gln Cys

1150 1155 1160 1165

AAG GCC GCC CTG CAG CGG CAG CTG GGC CTG CAG GTC CGC GAC GAC GTG 1536

Lys Ala Ala Leu Gln Arg Gln Leu Gly Leu Gln Val Arg Asp Asp Val

1170 1175 1180

CCA CTG ATC GGG TTC ATC GGG CGG CTG GAC CAC CAG AAG GGC GTG GAC 1584

Pro Leu Ile Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp His Gln Lys Gly Val Asp

1185 1190 1195

ATC ATC GCC GAC GCG ATC CAC TGG ATC GCG GGG CAG GAC GTG CAG CTC 1632

Ile Ile Ala Asp Ala Ile His Trp Ile Ala Gly Gln Asp Val Gln Leu

1200 1205 1210

GTG ATG CTG GGC ACC GGG CGG GCC GAC CTG GAG GAC ATG CTG CGG CGG 1680

Val Met Leu Gly Thr Gly Arg Ala Asp Leu Glu Asp Met Leu Arg Arg

1215 1220 1225

TTC GAG TCG GAG CAC AGC GAC AAG GTG CGC GCG TGG GTG GGG TTC TCG 1728

Phe Glu Ser Glu His Ser Asp Lys Val Arg Ala Trp Val Gly Phe Ser

1230 1235 1240 1245

GTG CCC CTG GCG CAC CGC ATC ACG GCG GGC GCG GAC ATC CTG CTG ATG 1776

Val Pro Leu Ala His Arg Ile Thr Ala Gly Ala Asp Ile Leu Leu Met

1250 1255 1260

CCG TCG CGG TTC GAG CCG TGC GGG CTG AAC CAG CTC TAC GCC ATG GCG 1824

Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Ala

1265 1270 1275

TAC GGG ACC GTG CCC GTG GTG CAC GCC GTG GGG GGG CTC CGG GAC ACG 1872

Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Ala Val Gly Gly Leu Arg Asp Thr

1280 1285 1290

GTG GCG CCG TTC GAC CCG TTC AAC GAC ACC GGG CTC GGG TGG ACG TTC 1920

Val Ala Pro Phe Asp Pro Phe Asn Asp Thr Gly Leu Gly Trp Thr Phe

1295 1300 1305

GAC CGC GCG GAG GCG AAC CGG ATG ATC GAC GCG CTC TCG CAC TGC CTC 1968

Asp Arg Ala Glu Ala Asn Arg Met Ile Asp Ala Leu Ser His Cys Leu

1310 1315 1320 1325

ACC ACG TAC CGG AAC TAC AAG GAG AGC TGG CGC GCC TGC AGG GCG CGC 2016

Thr Thr Tyr Arg Asn Tyr Lys Glu Ser Trp Arg Ala Cys Arg Ala Arg

1330 1335 1340

GGC ATG GCC GAG GAC CTC AGC TGG GAC CAC GCC GCC GTG CTG TAT GAG 2064

Gly Met Ala Glu Asp Leu Ser Trp Asp His Ala Ala Val Leu Tyr Glu

1345 1350 1355

GAC GTG CTC GTC AAG GCG AAG TAC CAG TGG TGA 2097

Asp Val Leu Val Lys Ala Lys Tyr Gln Trp *

1360 1365

(2)序列11资料：

(i)序列特征：

(A)长度：699氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列11：

Met Pro Gly Ala Ile Ser Ser Ser Ser Ser Ala Phe Leu Leu Pro Val

1 5 10 15

Ala Ser Ser Ser Pro Arg Arg Arg Arg Gly Ser Val Gly Ala Ala Leu

20 25 30

Arg Ser Tyr Gly Tyr Ser Gly Ala Glu Leu Arg Leu His Trp Ala Arg

35 40 45

Arg Gly Pro Pro Gln Asp Gly Ala Ala Ser Val Arg Ala Ala Ala Ala

50 55 60

Pro Ala Gly Gly Glu Ser Glu Glu Ala Ala Lys Ser Ser Ser Ser Ser

65 70 75 80

Gln Ala Gly Ala Val Gln Gly Ser Thr Ala Lys Ala Val Asp Ser Ala

85 90 95

Ser Pro Pro Asn Pro Leu Thr Ser Ala Pro Lys Gln Ser Gln Ser Ala

100 105 110

Ala Met Gln Asn Gly Thr Ser Gly Gly Ser Ser Ala Ser Thr Ala Ala

115 120 125

Pro Val Ser Gly Pro Lys Ala Asp His Pro ser Ala Pro Val Thr Lys

130 135 140

Arg Glu Ile Asp Ala Ser Ala Val Lys Pro Glu Pro Ala Gly Asp Asp

145 150 155 160

Ala Arg Pro Val Glu Ser Ile Gly Ile Ala Glu Pro Val Asp Ala Lys

165 170 175

Ala Asp Ala Ala Pro Ala Thr Asp Ala Ala Ala Ser Ala Pro Tyr Asp

180 185 190

Arg Glu Asp Asn Glu Pro Gly Pro Leu Ala Gly Pro Asn Val Met Asn

195 200 205

Val Val Val Val Ala Ser Glu Cys Ala Pro Phe Cys Lys Thr Gly Gly

210 215 220

Leu Gly Asp Val Val Gly Ala Leu Pro Lys Ala Leu Ala Arg Arg Gly

225 230 235 240

His Arg Val Met Val Val Ile Pro Arg Tyr Gly Glu Tyr Ala Glu Ala

245 250 255

Arg Asp Leu Gly Val Arg Arg Arg Tyr Lys Val Ala Gly Gln Asp Ser

260 265 270

Glu Val Thr Tyr Phe His Ser Tyr Ile Asp Gly Val Asp Phe Val Phe

275 280 285

Val Glu Ala Pro Pro Phe Arg His Arg His Asn Asn Ile Tyr Gly Gly

290 295 300

Glu Arg Leu Asp Ile Leu Lys Arg Met Ile Leu Phe Cys Lys Ala Ala

305 310 315 320

Val Glu Val Pro Trp Tyr Ala Pro Cys Gly Gly Thr Val Tyr Gly Asp

325 330 335

Gly Asn Leu Val Phe Ile Ala Asn Asp Trp His Thr Ala Leu Leu Pro

340 345 350

Val Tyr Leu Lys Ala Tyr Tyr Arg Asp Asn Gly Leu Met Gln Tyr Ala

355 360 365

Arg Ser Val Leu Val Ile His Asn Ile Ala His Gln Gly Arg Gly Pro

370 375 380

Val Asp Asp Phe Val Asn Phe Asp Leu Pro Glu His Tyr Ile Asp His

385 390 395 400

Phe Lys Leu Tyr Asp Asn Ile Gly Gly Asp His Ser Asn Val Phe Ala

405 410 415

Ala Gly Leu Lys Thr Ala Asp Arg Val Val Thr Val Ser Asn Gly Tyr

420 425 430

Met Trp Glu Leu Lys Thr Ser Glu Gly Gly Trp Gly Leu His Asp Ile

435 440 445

Ile Asn Gln Asn Asp Trp Lys Lau Gln Gly Ile Val Asn Gly Ile Asp

450 455 460

Met Ser Glu Trp Asn Pro Ala Val Asp Val His Leu His Ser Asp Asp

465 470 475 480

Tyr Thr Asn Tyr Thr Phe Glu Thr Leu Asp Thr Gly Lys Arg Gln Cys

485 490 495

Lys Ala Ala Leu Gln Arg Gln Leu Gly Leu Gln Val Arg Asp Asp Val

500 505 510

Pro Leu Ile Gly Phe Ile Gly Arg Leu Asp His Gln Lys Gly Val Asp

515 520 525

Ile Ile Ala Asp Ala Ile His Trp Ile Ala Gly Gln Asp Val Gln Leu

530 535 540

Val Met Leu Gly Thr Gly Arg Ala Asp Leu Glu Asp Met Leu Arg Arg

545 550 555 560

Phe Glu Ser Glu His Ser Asp Lys Val Arg Ala Trp Val Gly Phe Ser

565 570 575

Val Pro Leu Ala His Arg Ile Thr Ala Gly Ala Asp Ile Leu Leu Met

580 585 590

Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Ala

595 600 605

Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His Ala Val Gly Gly Leu Arg Asp Thr

610 615 620

Val Ala Pro Phe Asp Pro Pne Asn Asp Thr Gly Leu Gly Trp Thr Phe

625 630 635 640

Asp Arg Ala Glu Ala Asn Arg Met Ile Asp Ala Leu Ser His Cys Leu

645 650 655

Thr Thr Tyr Arg Asn Tyr Lys Glu Ser Trp Arg Ala Cys Arg Ala Arg

660 665 670

Gly Met Ala Glu Asp Leu Ser Trp Asp His Ala Ala Val Leu Tyr Glu

675 680 685

Asp Val Leu Val Lys Ala Lys Tyr Gln Trp *

690 695

(2)序列12资料：

(i)序列特征：

(A)长度：1752个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(vi)来源：

(A)生物：玉米

(ix)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：1..1752

(xi)序列描述：序列12：

TGC GTC GCG GAG CTG AGC AGG GAG GGG CCC GCG CCG CGC CCG CTG CCA 48

Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Gly Pro Ala Pro Arg Pro Leu Pro

700 705 710 715

CCC GCG CTG CTG GCG CCC CCG CTC GTG CCC GGC TTC CTC GCG CCG CCG 96

Pro Ala Leu Leu Ala Pro Pro Leu Val Pro Gly Phe Leu Ala Pro Pro

720 725 730

GCC GAG CCC ACG GGT GAG CCG GCA TCG ACG CCG CCG CCC GTG CCC GAC 144

Ala Glu Pro Thr Gly Glu Pro Ala Ser Thr Pro Pro Pro Val Pro Asp

735 740 745

GCC GGC CTG GGG GAC CTC GGT CTC GAA CCT GAA GGG ATT GCT GAA GGT 192

Ala Gly Leu Gly Asp Leu Gly Leu Glu Pro Glu Gly Ile Ala Glu Gly

750 755 760

TCC ATC GAT AAC ACA GTA GTT GTG GCA AGT GAG CAA GAT TCT GAG ATT 240

Ser Ile Asp Asn Thr Val Val Val Ala Ser Glu Gln Asp Ser Glu Ile

765 770 775

GTG GTT GGA AAG GAG CAA GCT CGA GCT AAA GTA ACA CAA AGC ATT GTC 288

Val Val Gly Lys Glu Gln Ala Arg Ala Lys Val Thr Gln Ser Ile Val

780 785 790 795

TTT GTA ACC GGC GAA GCT TCT CCT TAT GCA AAG TCT GGG GGT CTA GGA 336

Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro Tyr Ala Lys Ser Gly Gly Leu Gly

800 805 810

GAT GTT TGT GGT TCA TTG CCA GTT GCT CTT GCT GCT CGT GGT CAC CGT 384

Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Val Ala Leu Ala Ala Arg Gly His Arg

815 820 825

GTG ATG GTT GTA ATG CCC AGA TAT TTA AAT GGT ACC TCC GAT AAG AAT 432

Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr Leu Asn Gly Thr Ser Asp Lys Asn

830 835 840

TAT GCA AAT GCA TTT TAC ACA GAA AAA CAC ATT CGG ATT CCA TGC TTT 480

Tyr Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu Lys His Ile Arg Ile Pro Cys Phe

845 850 855

GGC GGT GAA CAT GAA GTT ACC TTC TTC CAT GAG TAT AGA GAT TCA GTT 528

Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe Phe His Glu Tyr Arg Asp Ser Val

860 865 870 875

GAC TGG GTG TTT GTT GAT CAT CCC TCA TAT CAC AGA CCT GGA AAT TTA 576

Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro Ser Tyr His Arg Pro Gly Asn Leu

880 885 890

TAT GGA GAT AAG TTT GGT GCT TTT GGT GAT AAT CAG TTC AGA TAC ACA 624

Tyr Gly Asp Lys Phe Gly Ala Phe Gly Asp Asn Gln Phe Arg Tyr Thr

895 900 905

CTC CTT TGC TAT GCT GCA TGT GAG GCT CCT TTG ATC CTT GAA TTG GGA 672

Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu Ala Pro Leu Ile Leu Glu Leu Gly

910 915 920

GGA TAT ATT TAT GGA CAG AAT TGC ATG TTT GTT GTC AAT GAT TGG CAT 720

Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Asn Cys Met Phe Val Val Asn Asp Trp His

925 930 935

GCC AGT CTA GTG CCA GTC CTT CTT GCT GCA AAA TAT AGA CCA TAT GGT 768

Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu Ala Ala Lys Tyr Arg Pro Tyr Gly

940 945 950 955

GTT TAT AAA GAC TCC CGC AGC ATT CTT GTA ATA CAT AAT TTA GCA CAT 816

Val Tyr Lys Asp Ser Arg Ser Ile Leu Val Ile His Asn Leu Ala His

960 965 970

CAG GGT GTA GAG CCT GCA AGC ACA TAT CCT GAC CTT GGG TTG CCA CCT 864

Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr Tyr Pro Asp Leu Gly Leu Pro Pro

975 980 985

GAA TGG TAT GGA GCT CTG GAG TGG GTA TTC CCT GAA TGG GCG AGG AGG 912

Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp Val Phe Pro Glu Trp Ala Arg Arg

990 995 1000

CAT GCC CTT GAC AAG GGT GAG GCA GTT AAT TTT TTG AAA GGT GCA GTT 960

His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala Val Asn Phe Leu Lys Gly Ala Val

1005 1010 1015

GTG ACA GCA GAT CGA ATC GTG ACT GTC AGT AAG GGT TAT TCG TGG GAG 1008

Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr Val Ser Lys Gly Tyr Ser Trp Glu

1020 1025 1030 1035

GTC ACA ACT GCT GAA GGT GGA CAG GGC CTC AAT GAG CTC TTA AGC TCC 1056

Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln Gly Leu Asn Glu Leu Leu Ser Ser

1040 1045 1050

AGA AAG AGT GTA TTA AAC GGA ATT GTA AAT GGA ATT GAC ATT AAT GAT 1104

Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile Val Asn Gly Ile Asp Ile Asn Asp

1055 1060 1065

TGG AAC CCT GCC ACA GAC AAA TGT ATC CCC TGT CAT TAT TCT GTT GAT 1152

Trp Asn Pro Ala Thr Asp Lys Cys Ile Pro Cys His Tyr Ser Val Asp

1070 1075 1080

GAC CTC TCT GGA AAG GCC AAA TGT AAA GGT GCA TTG CAG AAG GAG CTG 1200

Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys Lys Gly Ala Leu Gln Lys Glu Leu

1085 1090 1095

GGT TTA CCT ATA AGG CCT GAT GTT CCT CTG ATT GGC TTT ATT GGA AGG 1248

Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val Pro Leu Ile Gly Phe Ile Gly Arg

1100 1105 1110 1115

TTG GAT TAT CAG AAA GGC ATT GAT CTC ATT CAA CTT ATC ATA CCA GAT 1296

Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp Leu Ile Gln Leu Ile Ile Pro Asp

1120 1125 1130

CTC ATG CGG GAA GAT GTT CAA TTT GTC ATG CTT GGA TCT GGT GAC CCA 1344

Leu Met Arg Glu Asp Val Gln Phe Val Met Leu Gly Ser Gly Asp Pro

1135 1140 1145

GAG CTT GAA GAT TGG ATG AGA TCT ACA GAG TCG ATC TTC AAG GAT AAA 1392

Glu Leu Glu Asp Trp Met Arg Ser Thr Glu Ser Ile Phe Lys Asp Lys

1150 1155 1160

TTT CGT GGA TGG GTT GGA TTT AGT GTT CCA GTT TCC CAC CGA ATA ACT 1440

Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Pro Val Ser His Arg Ile Thr

1165 1170 1175

GCC GGC TGC GAT ATA TTG TTA ATG CCA TCC AGA TTC GAA CCT TGT GGT 1488

Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe Glu Pro Cys Gly

1180 1185 1190 1195

CTC AAT CAG CTA TAT GCT ATG CAG TAT GGC ACA GTT CCT GTT GTC CAT 1536

Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln Tyr Gly Thr Val Pro Val Val His

1200 1205 1210

GCA ACT GGG GGC CTT AGA GAT ACC GTG GAG AAC TTC AAC CCT TTC GGT 1584

Ala Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr Val Glu Asn Phe Asn Pro Phe Gly

1215 1220 1225

GAG AAT GGA GAG CAG GGT ACA GGG TGG GCA TTC GCA CCC CTA ACC ACA 1632

Glu Asn Gly Glu Gln Gly Thr Gly Trp Ala Phe Ala Pro Leu Thr Thr

1230 1235 1240

GAA AAC ATG TTT GTG GAC ATT GCG AAC TGC AAT ATC TAC ATA CAG GGA 1680

Glu Asn Met Phe Val Asp Ile Ala Asn Cys Asn Ile Tyr Ile Gln Gly

1245 1250 1255

ACA CAA GTC CTC CTG GGA AGG GCT AAT GAA GCG AGG CAT GTC AAA AGA 1728

Thr Gln Val Leu Leu Gly Arg Ala Asn Glu Ala Arg His Val Lys Arg

1260 1265 1270 1275

CTT CAC GTG GGA CCA TGC CGC TGA 1752

Leu His Val Gly Pro Cys Arg *

1280

(2)序列13资料：

(i)序列特征：

(A)长度：584氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列13：

Cys Val Ala Glu Leu ser Arg Glu Gly Pro Ala Pro Arg Pro Leu Pro

1 5 10 15

Pro Ala Leu Leu Ala Pro Pro Leu Val Pro Gly Phe Leu Ala Pro Pro

20 25 30

Ala Glu Pro Thr Gly Glu Pro Ala Ser Thr Pro Pro Pro Val Pro Asp

35 40 45

Ala Gly Leu Gly Asp Leu Gly Leu Glu Pro Glu Gly Ile Ala Glu Gly

50 55 60

Ser Ile Asp Asn Thr Val Val Val Ala Ser Glu Gln Asp Ser Glu Ile

65 70 75 80

Val Val Gly Lys Glu Gln Ala Arg Ala Lys Val Thr Gln Ser Ile Val

85 90 95

Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro Tyr Ala Lys Ser Gly Gly Leu Gly

100 105 110

Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Val Ala Leu Ala Ala Arg Gly His Arg

115 120 125

Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr Leu Asn Gly Thr Ser Asp Lys Asn

130 135 140

Tyr Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu Lys His Ile Arg Ile Pro Cys Phe

145 150 155 160

Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe Phe His Glu Tyr Arg Asp Ser Val

165 170 175

Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro Ser Tyr His Arg Pro Gly Asn Leu

180 185 190

Tyr Gly Asp Lys Phe Gly Ala Phe Gly Asp Asn Gln Phe Arg Tyr Thr

195 200 205

Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu Ala Pro Leu Ile Leu Glu Leu Gly

210 215 220

Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Asn Cys Met Phe Val Val Asn Asp Trp His

225 230 235 240

Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu Ala Ala Lys Tyr Arg Pro Tyr Gly

245 250 255

Val Tyr Lys Asp Ser Arg Ser Ile Leu Val Ile His Asn Leu Ala His

260 265 270

Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr Tyr Pro Asp Leu Gly Leu Pro Pro

275 280 285

Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp Val Phe Pro Glu Trp Ala Arg Arg

290 295 300

His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala Val Asn Phe Leu Lys Gly Ala Val

305 310 315 320

Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr Val Ser Lys Gly Tyr Ser Trp Glu

325 330 335

Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln Gly Leu Asn Glu Leu Leu Ser Ser

340 345 350

Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile Val Asn Gly Ile Asp Ile Asn Asp

355 360 365

Trp Asn Pro Ala Thr Asp Lys Cys Ile Pro Cys His Tyr Ser Val Asp

370 375 380

Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys Lys Gly Ala Leu Gln Lys Glu Leu

385 390 395 400

(iii)假说：无

(vi)来源：

(A)生物：玉米

(ix)特征：

(A)名称/键：sig-peptide

(B)位置：91..264

(ix)特征：

(A)名称/键：mat-peptide

(B)位置：265..2487

(ix)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：91..2490

(xi)序列描述：序列14：

GGCCCAGAGC AGACCCGGAT TTCGCTCTTG CGGTCGCTGG GGTTTTAGCA TTGGCTGATC 60

AGTTCGATCC GATCCGGCTG CGAAGGCGAG ATG GCG TTC CGG GTT TCT GGG GCG 114

Met Ala Phe Arg Val Ser Gly Ala

-58 -55

GTG CTC GGT GGG GCC GTA AGG GCT CCC CGA CTC ACC GGC GGC GGG GAG 162

Val Leu Gly Gly Ala Val Arg Ala Pro Arg Leu Thr Gly Gly Gly Glu

-50 -45 -40 -35

GGT AGT CTA GTC TTC CGG CAC ACC GGC CTC TTC TTA ACT CGG GGT GCT 210

Gly Ser Leu Val Phe Arg His Thr Gly Leu Phe Leu Thr Arg Gly Ala

-30 -25 -20

CGA GTT GGA TGT TCG GGG ACG CAC GGG GCC ATG CGC GCG GCG GCC GCG 258

Arg Val Gly Cys Ser Gly Thr His Gly Ala Met Arg Ala Ala Ala Ala

-15 -10 -5

GCC AGG AAG GCG GTC ATG GTT CCT GAG GGC GAG AAT GAT GGC CTC GCA 306

Ala Arg Lys Ala Val Met Val Pro Glu Gly Glu Asn Asp Gly Leu Ala

1 5 10

TCA AGG GCT GAC TCG GCT CAA TTC CAG TCG GAT GAA CTG GAG GTA CCA 354

Ser Arg Ala Asp Ser Ala Gln Phe Gln Ser Asp Glu Leu Glu Val Pro

15 20 25 30

GAC ATT TCT GAA GAG ACA ACG TGC GGT GCT GGT GTG GCT GAT GCT CAA 402

Asp Ile Ser Glu Glu Thr Thr Cys Gly Ala Gly Val Ala Asp Ala Gln

35 40 45

GCC TTG AAC AGA GTT CGA GTG GTC CCC CCA CCA AGC GAT GGA CAA AAA 450

Ala Leu Asn Arg Val Arg Val Val Pro Pro Pro Ser Asp Gly Gln Lys

50 55 60

ATA TTC CAG ATT GAC CCC ATG TTG CAA GGC TAT AAG TAC CAT CTT GAG 498

Ile Phe Gln Ile Asp Pro Met Leu Gln Gly Tyr Lys Tyr His Leu Glu

65 70 75

TAT CGG TAC AGC CTC TAT AGA AGA ATC CGT TCA GAC ATT GAT GAA CAT 546

Tyr Arg Tyr Ser Leu Tyr Arg Arg Ile Arg Ser Asp Ile Asp Glu His

80 85 90

GAA GGA GGC TTG GAA GCC TTC TCC CGT AGT TAT GAG AAG TTT GGA TTT 594

Glu Gly Gly Leu Glu Ala Phe Ser Arg Ser Tyr Glu Lys Phe Gly Phe

95 100 105 110

AAT GCC AGC GCG GAA GGT ATC ACA TAT CGA GAA TGG GCT CCT GGA GCA 642

Asn Ala Ser Ala Glu Gly Ile Thr Tyr Arg Glu Trp Ala Pro Gly Ala

115 120 125

TTT TCT GCA GCA TTG GTG GGT GAC GTC AAC AAC TGG GAT CCA AAT GCA 690

Phe Ser Ala Ala Leu Val Gly Asp Val Asn Asn Trp Asp Pro Asn Ala

130 135 140

GAT CGT ATG AGC AAA AAT GAG TTT GGT GTT TGG GAA ATT TTT CTG CCT 738

Asp Arg Met Ser Lys Asn Glu Phe Gly Val Trp Glu Ile Phe Leu Pro

145 150 155

AAC AAT GCA GAT GGT ACA TCA CCT ATT CCT CAT GGA TCT CGT GTA AAG 786

Asn Asn Ala Asp Gly Thr Ser Pro Ile Pro His Gly Ser Arg Val Lys

160 165 170

GTG AGA ATG GAT ACT CCA TCA GGG ATA AAG GAT TCA ATT CCA GCC TGG 834

Val Arg Met AsP Thr Pro Ser Gly Ile Lys Asp Ser Ile Pro Ala Trp

175 180 185 190

ATC AAG TAC TCA GTG CAG GCC CCA GGA GAA ATA CCA TAT GAT GGG ATT 882

Ile Lys Tyr Ser Val Gln Ala Pro Gly Glu Ile Pro Tyr Asp Gly Ile

195 200 205

TAT TAT GAT CCT CCT GAA GAG GTA AAG TAT GTG TTC AGG CAT GCG CAA 930

Tyr Tyr Asp Pro Pro Glu Glu Val Lys Tyr Val Phe Arg His Ala Gln

210 215 220

CCT AAA CGA CCA AAA TCA TTG CGG ATA TAT GAA ACA CAT GTC GGA ATG 978

Pro Lys Arg Pro Lys Ser Leu Arg Ile Tyr Glu Thr His Val Gly Met

225 230 235

AGT AGC CCG GAA CCG AAG ATA AAC ACA TAT GTA AAC TTT AGG GAT GAA 1026

Ser Ser Pro Glu Pro Lys Ile Asn Thr Tyr Val Asn Phe Arg Asp Glu

240 245 250

GTC CTC CCA AGA ATA AAA AAA CTT GGA TAC AAT GCA GTG CAA ATA ATG 1074

Val Leu Pro Arg Ile Lys Lys Leu Gly Tyr Asn Ala Val Gln Ile Met

255 260 265 270

CCA ATC CAA GAG CAC TCA TAT TAT GGA AGC TTT GGA TAC CAT GTA ACT 1122

Ala Ile Gln Glu His Ser Tyr Tyr Gly Ser Phe Gly Tyr His Val Thr

275 280 285

AAT TTT TTT GCG CCA AGT AGT CGT TTT GGT ACC CCA GAA GAT TTG AAG 1170

Asn Phe Phe Ala Pro Ser Ser Arg Phe Gly Thr Pro Glu Asp Leu Lys

290 295 300

TCT TTG ATT GAT AGA GCA CAT GAG CTT GGT TTG CTA GTT CTC ATG GAT 1218

Ser Leu Ile Asp Arg Ala His Glu Leu Gly Leu Leu Val Leu Met Asp

305 310 315

GTG GTT CAT AGT CAT GCG TCA AGT AAT ACT CTG GAT GGG TTG AAT GGT 1266

Val Val His Ser His Ala Ser Ser Asn Thr Leu Asp Gly Leu Asn Gly

320 325 330

TTT GAT GGT ACA GAT ACA CAT TAC TTT CAC AGT GGT CCA CGT GGC CAT 1314

Phe Asp Gly Thr Asp Thr His Tyr Phe His Ser Gly Pro Arg Gly His

335 340 345 350

CAC TGG ATG TGG GAT TCT CGC CTA TTT AAC TAT GGG AAC TGG GAA GTT 1362

His Trp Met Trp Asp Ser Arg Leu Phe Asn Tyr Gly Asn Trp Glu Val

355 360 365

TTA AGA TTT CTT CTC TCC AAT GCT AGA TGG TGG CTC GAG GAA TAT AAG 1410

Leu Arg Phe Leu Leu Ser Asn Ala Arg Trp Trp Leu Glu Glu Tyr Lys

370 375 380

TTT GAT GGT TTC CGT TTT GAT GGT GTG ACC TCC ATG ATG TAC ACT CAC 1458

Phe Asp Gly Phe Arg Phe Asp Gly Val Thr Ser Het Met Tyr Thr His

385 390 395

CAC GGA TTA CAA GTA ACA TTT ACG GGG AAC TTC AAT GAG TAT TTT GGC 1506

His Gly Leu Gln Val Thr Phe Thr Gly Asn Phe Asn Glu Tyr Phe Gly

400 405 410

TTT GCC ACC GAT GTA GAT GCA GTG GTT TAC TTG ATG CTG GTA AAT GAT 1554

Phe Ala Thr Asp Val Asp Ala Val Val Tyr Leu Met Leu Val Asn Asp

415 420 425 430

CTA ATT CAT GGA CTT TAT CCT GAG GCT GTA ACC ATT GGT GAA GAT GTT 1602

Leu Ile His Gly Leu Tyr Pro Glu Ala Val Thr Ile Gly Glu Asp Val

435 440 445

AGT GGA ATG CCT ACA TTT GCC CTT CCT GTT CAC GAT GGT GGG GTA GGT 1650

Ser Gly Met Pro Thr Phe Ala Leu Pro Val His Asp Gly Gly Val Gly

450 455 460

TTT GAC TAT CGG ATG CAT ATG GCT GTG GCT GAC AAA TGG ATT GAC CTT 1698

Phe Asp Tyr Arg Met His Met Ala Val Ala Asp Lys Trp Ile Asp Leu

465 470 475

CTC AAG CAA AGT GAT GAA ACT TGG AAG ATG GGT GAT ATT GTG CAC ACA 1746

Leu Lys Gln Ser Asp Glu Thr Trp Lys Met Gly Asp Ile Val His Thr

480 485 490

CTG ACA AAT AGG AGG TGG TTA GAG AAG TGT GTA ACT TAT GCT GAA AGT 1794

Leu Thr Asn Arg Arg Trp Leu Glu Lys Cys Val Thr Tyr Ala Glu Ser

495 500 505 510

CAT GAT CAA GCA TTA GTC GGC GAC AAG ACT ATT GCG TTT TGG TTG ATG 1842

His Asp Gln Ala Leu Val Gly Asp Lys Thr Ile Ala Phe Trp Leu Met

515 520 525

GAC AAG GAT ATG TAT GAT TTC ATG GCC CTC GAT AGA CCT TCA ACT CCT 1890

Asp Lys Asp Met Tyr Asp Phe Met Ala Leu Asp Arg Pro Ser Thr Pro

530 535 540

ACC ATT GAT CGT GGG ATA GCA TTA CAT AAG ATG ATT AGA CTT ATC ACA 1938

Thr Ile Asp Arg Gly Ile Ala Leu His Lys Met Ile Arg Leu Ile Thr

545 550 555

ATG GGT TTA GGA GGA GAG GGC TAT CTT AAT TTC ATG GGA AAT GAG TTT 1986

Met Gly Leu Gly Gly Glu Gly Tyr Leu Asn Phe Met Gly Asn Glu Phe

560 565 570

GGA CAT CCT GAA TGG ATA GAT TTT CCA AGA GGT CCG CAA AGA CTT CCA 2034

Gly His Pro Glu Trp Ile Asp Phe Pro Arg Gly Pro Gln Arg Leu Pro

575 580 585 590

AGT GGT AAG TTT ATT CCA GGG AAT AAC AAC AGT TAT GAC AAA TGT CGT 2082

Ser Gly Lys Phe Ile Pro Gly Asn Asn Asn Ser Tyr Asp Lys Cys Arg

595 600 605

CGA AGA TTT GAC CTG GGT GAT GCA GAC TAT CTT AGG TAT CAT GGT ATG 2130

Arg Arg Phe Asp Leu Gly Asp Ala Asp Tyr Leu Arg Tyr His Gly Met

610 515 620

CAA GAG TTT GAT CAG GCA ATG CAA CAT CTT GAG CAA AAA TAT GAA TTC 2178

Gln Glu Phe Asp Gln Ala Met Gln His Leu Glu Gln Lys Tyr Glu Phe

625 630 635

ATG ACA TCT GAT CAC CAG TAT ATT TCC CGG AAA CAT GAG GAG GAT AAG 2226

Met Thr Ser Asp His Gln Tyr Ile Ser Arg Lys His Glu Glu Asp Lys

640 645 650

GTG ATT GTG TTC GAA AAG GGA GAT TTG GTA TTT GTG TTC AAC TTC CAC 2274

Val Ile Val Phe Glu Lys Gly Asp Leu Val Phe Val Phe Asn Phe His

655 660 665 670

TGC AAC AAC AGC TAT TTT GAC TAC CGT ATT GGT TGT CGA AAG CCT GGG 2322

Cys Asn Asn Ser Tyr Phe Asp Tyr Arg Ile Gly Cys Arg Lys Pro Gly

675 680 585

GTG TAT AAG GTG GTC TTG GAC TCC GAC GCT GGA CTA TTT GGT GGA TTT 2370

Val Tyr Lys Val Val Leu Asp Ser Asp Ala Gly Leu Phe Gly Gly Phe

690 695 700

AGC AGG ATC CAT CAC GCA GCC GAG CAC TTC ACC GCC GAC TGT TCG CAT 2418

Ser Arg Ile His His Ala Ala Glu His Phe Thr Ala Asp Cys Ser His

705 710 715

GAT AAT AGG CCA TAT TCA TTC TCG GTT TAT ACA CCA AGC AGA ACA TGT 2466

Asp Asn Arg Pro Tyr Ser Phe Ser Val Tyr Thr Pro Ser Arg Thr Cys

720 725 730

GTC GTC TAT GCT CCA GTG GAG TGA TAGCGGGGTA CTCGTTGCTG CGCGGCATGT 2520

Val Val Tyr Ala Pro Val Glu *

735 740

GTGGGGCTGT CGATGTGAGG AAAAACCTTC TTCCAAACC GGCAGATGCA TGCATGCATG 2580

CTACAATAAG GTTCTGATAC TTTAATCGAT GCTGGAAAGC CCATGCATCT CGCTGCGTTG 2640

TCCTCTCTAT ATATATAAGA CCTTCAAGGT GTCAATTAAA CATAGAGTTT TCGTTTTTCG 2700

CTTTCCTAAA AAAAAAAAAA AAAAA 2725

(2)序列15资料：

(i)序列特征：

(A)长度：800氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列15：

Met Ala Phe Arg Val Ser Gly Ala Val Leu Gly Gly Ala Val Arg Ala

-58 -55 -50 -45

Pro Arg Leu Thr Gly Gly Gly Glu Gly Ser Leu Val Phe Arg His Thr

-40 -35 -30

Gly Leu Phe Leu Thr Arg Gly Ala Arg Val Gly Cys Ser Gly Thr His

-25 -20 -15

Gly Ala Met Arg Ala Ala Ala Ala Ala Arg Lys Ala Val Met Val Pro

-10 -5 1 5

Glu Gly Glu Asn Asp Gly Leu Ala Ser Arg Ala Asp Ser Ala Gln Phe

10 15 20

Gln Ser Asp Glu Leu Glu Val Pro Asp Ile Ser Glu Glu Thr Thr Cys

25 30 35

Gly Ala Gly Val Ala Asp Ala Gln Ala Leu Asn Arg Val Arg Val Val

40 45 50

Pro Pro Pro Ser Asp Gly Gln Lys Ile Phe Gln Ile Asp Pro Met Leu

55 60 65 70

Gln Gly Tyr Lys Tyr His Leu Glu Tyr Arg Tyr Ser Leu Tyr Arg Arg

75 80 85

Ile Arg Ser Asp Ile Asp Glu His Glu Gly Gly Leu Glu Ala Phe Ser

90 95 100

Arg Ser Tyr Glu Lys Phe Gly Phe Asn Ala Ser Ala Glu Gly Ile Thr

105 110 115

Tyr Arg Glu Trp Ala Pro Gly Ala Phe Ser Ala Ala Leu Val Gly Asp

120 125 130

Val Asn Asn Trp Asp Pro Asn Ala Asp Arg Met Ser Lys Asn Glu Phe

135 140 145 150

Gly Val Trp Glu Ile Phe Leu Pro Asn Asn Ala Asp Gly Thr Ser Pro

155 160 165

Ile Pro His Gly Ser Arg Val Lys Val Arg Met Asp Thr Pro Ser Gly

170 175 180

Ile Lys Asp Ser Ile Pro Ala Trp Ile Lys Tyr Ser Val Gln Ala Pro

185 190 195

Gly Glu Ile Pro Tyr Asp Gly Ile Tyr Tyr Asp Pro Pro Glu Glu Val

200 205 210

Lys Tyr Val Phe Arg His Ala Gln Pro Lys Arg Pro Lys Ser Leu Arg

215 220 225 230

Ile Tyr Glu Thr His Val Gly Met Ser Ser Pro Glu Pro Lys Ile Asn

235 240 245

Thr Tyr Val Asn Phe Arg Asp Glu Val Leu Pro Arg Ile Lys Lys Leu

250 255 260

Gly Tyr Asn Ala Val Gln Ile Met Ala Ile Gln Glu His Ser Tyr Tyr

265 270 275

Gly Ser Phe Gly Tyr His Val Thr Asn Phe Phe Ala Pro Ser Ser Arg

280 285 290

Phe Gly Thr Pro Glu Asp Leu Lys Ser Leu Ile Asp Arg Ala His Glu

295 300 305 310

Leu Gly Leu Leu Val Leu Met Asp Val Val His Ser His Ala Ser Ser

315 320 325

Asn Thr Leu Asp Gly Leu Asn Gly Phe Asp Gly Thr Asp Thr His Tyr

330 335 340

Phe His Ser Gly Pro Arg Gly His His Trp Met Trp Asp Ser Arg Leu

345 350 355

Phe Asn Tyr Gly Aan Trp Glu Val Leu Arg Phe Leu Leu Ser Asn Ala

360 365 370

Arg Trp Trp Leu Glu Glu Tyr Lys Phe Asp Gly Phe Arg Phe Asp Gly

375 380 385 390

Val Thr Ser Met Met Tyr Thr His His Gly Leu Gln Val Thr Phe Thr

395 400 405

Gly Asn Phe Asn Glu Tyr Phe Gly Phe Ala Thr Asp Val Asp Ala Val

410 415 420

Val Tyr Leu Met Leu Val Asn Asp Leu Ile His Gly Leu Tyr Pro Glu

425 430 435

Ala Val Thr Ile Gly Glu Asp Val Ser Gly Met Pro Thr Phe Ala Leu

440 445 450

Pro Val His Asp Gly Gly Val Gly Phe Asp Tyr Arg Met His Met Ala

455 460 465 470

Val Ala Asp Lys Trp Ile Asp Leu Leu Lys Gln Ser Asp Glu Thr Trp

475 480 485

Lys Met Gly Asp Ile Val His Thr Leu Thr Asn Arg Arg Trp Leu Glu

490 495 500

Lys Cys Val Thr Tyr Ala Glu Ser His Asp Gln Ala Leu Val Gly Asp

505 510 515

Lys Thr Ile Ala Phe Trp Leu Met Asp Lys Asp Met Tyr Asp Phe Met

520 525 530

Ala Leu Asp Arg Pro Ser Thr Pro Thr Ile Asp Arg Gly Ile Ala Leu

535 540 545 550

His Lys Met Ile Arg Leu Ile Thr Met Gly Leu Gly Gly Glu Gly Tyr

555 560 565

Leu Asn Phe Mer Gly Asn Glu Phe Gly His Pro Glu Trp Ile Asp Phe

570 575 580

Pro Arg Gly Pro Gln Arg Leu Pro Ser Gly Lys Phe Ile Pro Gly Asn

585 590 595

Ash Asn Ser Tyr Asp Lys Cys Arg Arg Arg Phe Asp Leu Gly Asp Ala

600 605 610

Asp Tyr Leu Arg Tyr His Gly Met Gln Glu Phe Asp Gln Ala Met Gln

615 620 625 630

His Leu Glu Gln Lys Tyr Glu Phe Met Thr Ser Asp His Gln Tyr Ile

635 640 645

Ser Arg Lys His Glu Glu Asp Lys Val Ile Val Phe Glu Lys Gly Asp

650 655 660

Leu Val Phe Val Phe Asn Phe His Cys Asn Asn Ser Tyr Phe Asp Tyr

665 670 675

Arg Ile Gly Cys Arg Lys Pro Gly Val Tyr Lys Val Val Leu Asp Ser

680 685 690

Asp Ala Gly Leu Phe Gly Gly Phe Ser Arg Ile His His Ala Ala Glu

695 700 705 710

His Phe Thr Ala Asp Cys Ser His Asp Asn Arg Pro Tyr Ser Phe Ser

715 720 725

Val Tyr Thr Pro Ser Arg Thr Cys Val Val Tyr Ala Pro Val Glu *

730 735 740

(2)序列16资料：

(i)序列特征：

(A)长度：2763个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：mRNA

(iii)假说：无

(vi)来源：

(A)生物：玉米

(ix)特征：

(A)名称/键：transit-peptide

(B)位置：2..190

(ix)特征：

(A)名称/键：mat-peptide

(B)位置：191..2467

(ix)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：2..2470

(xi)序列描述：序列16：

G CTG TGC CTC GTG TCG CCC TCT TCC TCG CCG ACT CCG CTT CCG CCG 46

Leu Cys Leu Val Ser Pro Ser Ser Ser Pro Thr Pro Leu Pro Pro

-63 -60 -55 -50

CCG CGG CGC TCT CGC TCG CAT GCT GAT CGG GCG GCA CCG CCG GGG ATC 94

Pro Arg Arg Ser Arg Ser His Ala Asp Arg Ala Ala Pro Pro Gly Ile

-45 -40 -35

GCG GGT GGC GGC AAT GTG CGC CTG AGT GTG TTG TCT GTC CAG TGC AAG 142

Ala Gly Gly Gly Asn Val Arg Leu 5er Val Leu Ser Val Gln Cys Lys

-30 -25 -20

GCT CGC CGG TCA GGG GTG CGG AAG GTC AAG AGC AAA TTC GCC ACT GCA 190

Ala Arg Arg Ser Gly Val Arg Lys Val Lys Ser Lys Phe Ala Thr Ala

-15 -10 -5

GCT ACT GTG CAA GAA GAT AAA ACT ATG GCA ACT GCC AAA GGC GAT GTC 238

Ala Thr Val Gln Glu Asp Lys Thr Met Ala Thr Ala Lys Gly Asp Val

1 5 10 15

GAC CAT CTC CCC ATA TAC GAC CTG GAC CCC AAG CTG GAG ATA TTC AAG 286

Asp His Leu Pro Ile Tyr Asp Leu Asp Pro Lys Leu Glu Ile Phe Lys

20 25 30

GAC CAT TTC AGG TAC CGG ATG AAA AGA TTC CTA GAG CAG AAA GGA TCA 334

Asp His Phe Arg Tyr Arg Met Lys Arg Phe Leu Glu Gln Lys Gly Ser

35 40 45

ATT GAA GAA AAT GAG GGA AGT CTT GAA TCT TTT TCT AAA GGC TAT TTG 382

Ile Glu Glu Asn Glu Gly Ser Leu Glu Ser Phe Ser Lys Gly Tyr Leu

50 55 60

AAA TTT GGG ATT AAT ACA AAT GAG GAT GGA ACT GTA TAT CGT GAA TGG 430

Lys Phe Gly Ile Asn Thr Asn Glu Asp Gly Thr Val Tyr Arg Glu Trp

65 70 75 80

GCA CCT GCT GCG CAG GAG GCA GAG CTT ATT GGT GAC TTC AAT GAC TGG 478

Ala Pro Ala Ala Gln Glu Ala Glu Leu Ile Gly Asp Phe Asn Asp Trp

85 90 95

AAT GGT GCA AAC CAT AAG ATG GAG AAG GAT AAA TTT GGT GTT TGG TCG 526

Asn Gly Ala Asn His Lys Met Glu Lys Asp Lys Phe Gly Val Trp Ser

100 105 110

ATC AAA ATT GAC CAT GTC AAA GGG AAA CCT GCC ATC CCT CAC AAT TCC 574

Ile Lys Ile Asp His Val Lys Gly Lys Pro Ala Ile Pro His Asn Ser

115 120 125

AAG GTT AAA TTT CGC TTT CTA CAT GGT GGA GTA TGG GTT GAT CGT ATT 622

Lys Val Lys Phe Arg Phe Leu His Gly Gly Val Trp Val Asp Arg Ile

130 135 140

CCA GCA TTG ATT CGT TAT GCG ACT GTT GAT GCC TCT AAA TTT GGA GCT 670

Pro Ala Leu Ile Arg Tyr Ala Thr Val Asp Ala Ser Lys Phe Gly Ala

145 150 155 160

CCC TAT GAT GGT GTT CAT TGG GAT CCT CCT GCT TCT GAA AGG TAC ACA 718

Pro Tyr Asp Gly Val His Trp Asp Pro Pro Ala Ser Glu Arg Tyr Thr

165 170 175

TTT AAG CAT CCT CGG CCT TCA AAG CCT GCT GCT CCA CGT ATC TAT GAA 766

Phe Lys His Pro Arg Pro Ser Lys Pro Ala Ala Pro Arg Ile Tyr Glu

180 185 190

GCC CAT GTA GGT ATG AGT GGT GAA AAG CCA GCA GTA AGC ACA TAT AGG 814

Ala His Val Gly Met Ser Gly Glu Lys Pro Ala Val Ser Thr Tyr Arg

195 200 205

GAA TTT GCA GAC AAT GTG TTG CCA CGC ATA CGA GCA AAT AAC TAC AAC 862

Glu Phe Ala Asp Asn Val Leu Pro Arg Ile Arg Ala Asn Asn Tyr Asn

210 215 220

ACA GTT CAG TTG ATG GCA GTT ATG GAG CAT TCG TAC TAT GCT TCT TTC 910

116

Thr Val Gln Leu Met Ala Val Met Glu His Ser Tyr Tyr Ala Ser Phe

225 230 235 240

GGG TAC CAT GTG ACA AAT TTC TTT GCG GTT AGC AGC AGA TCA GGC ACA 958

Gly Tyr His Val Thr Asn Phe Phe Ala Val Ser Ser Arg Ser Gly Thr

245 250 255

CCA GAG GAC CTC AAA TAT CTT GTT GAT AAG GCA CAC AGT TTG GGT TTG 1006

Pro Glu Asp Leu Lys Tyr Leu Val Asp Lys Ala His Ser Leu Gly Leu

260 265 270

CGA GTT CTG ATG GAT GTT GTC CAT AGC CAT GCA AGT AAT AAT GTC ACA 1054

Arg Val Leu Met Asp Val Val His Ser His Ala Ser Asn Asn Val Thr

275 280 285

GAT GGT TTA AAT GGC TAT GAT GTT GGA CAA AGC ACC CAA GAG TCC TAT 1102

Asp Gly Leu Asn Gly Tyr Asp Val Gly Gln Ser Thr Gln Glu Ser Tyr

290 295 300

TTT CAT GCG GGA GAT AGA GGT TAT CAT AAA CTT TGG GAT AGT CGG CTG 1150

Phe His Ala Gly Asp Arg Gly Tyr His Lys Leu Trp Asp Ser Arg Leu

305 310 315 320

TTC AAC TAT GCT AAC TGG GAG GTA TTA AGG TTT CTT CTT TCT AAC CTG 1198

Phe Asn Tyr Ala Asn Trp Glu Val Leu Arg Phe Leu Leu Ser Asn Leu

325 330 335

AGA TAT TGG TTG GAT GAA TTC ATG TTT GAT GGC TTC CGA TTT GAT GGA 1246

Arg Tyr TrP Leu Asp Glu Phe Met Phe Asp Gly Phe Arg Phe Asp Gly

340 345 350

GTT ACA TCA ATG CTG TAT CAT CAC CAT GGT ATC AAT GTG GGG TTT ACT 1294

Val Thr Ser Met Leu Tyr His His His Gly Ile Asn Val Gly Phe Thr

355 360 365

GGA AAC TAC CAG GAA TAT TTC AGT TTG GAC ACA GCT GTG GAT GCA GTT 1342

Gly Asn Tyr Gln Glu Tyr Phe Ser Leu Asp Thr Ala Val Asp Ala Val

370 375 380

GTT TAC ATG ATG CTT GCA AAC CAT TTA ATG CAC AAA CTC TTG CCA GAA 1390

Val Tyr Met Met Leu Ala Asn His Leu Met His Lys Leu Leu Pro Glu

385 390 395 400

GCA ACT GTT GTT GCT GAA GAT GTT TCA GGC ATG CCG GTC CTT TGC CGG 1438

Ala Thr Val Val Ala Glu Asp Val Ser Gly Met Pro Val Leu Cys Arg

405 410 415

CCA GTT GAT GAA GGT GGG GTT GGG TTT GAC TAT CGC CTG GCA ATG GCT 1486

Pro Val Asp Glu Gly Gly Val Gly Phe Asp Tyr Arg Leu Ala Met Ala

420 425 430

ATC CCT GAT AGA TGG ATT GAC TAC CTG AAG AAT AAA GAT GAC TCT GAG 1534

Ile Pro Asp Arg Trp Ile Asp Tyr Leu Lys Asn Lys Asp Asp Ser Glu

435 440 445

TGG TCG ATG GGT GAA ATA GCG CAT ACT TTG ACT AAC AGG AGA TAT ACT 1582

Trp Ser Met Gly Glu Ile Ala His Thr Leu Thr Asn Arg Arg Tyr Thr

450 455 460

GAA AAA TGC ATC GCA TAT GCT GAG AGC CAT GAT CAG TCT ATT GTT GGC 1630

Glu Lys Cys Ile Ala Tyr Ala Glu Ser His Asp Gln Ser Ile Val Gly

465 470 475 480

GAC AAA ACT ATT GCA TTT CTC CTG ATG GAC AAG GAA ATG TAC ACT GGC 1678

Asp Lys Thr Ile Ala Phe Leu Leu Met Asp Lys Glu Met Tyr Thr Gly

485 490 495

ATG TCA GAC TTG CAG CCT GCT TCA CCT ACA ATT GAT CGA GGG ATT GCA 1726

Met Ser Asp Leu Gln Pro Ala Ser Pro Thr Ile Asp Arg Gly Ile Ala

500 505 510

CTC CAA AAG ATG ATT CAC TTC ATC ACA ATG GCC CTT GGA GGT GAT GGC 1774

Leu Gln Lys Met Ile His Phe Ile Thr Met Ala Leu Gly Gly Asp Gly

515 520 525

TAC TTG AAT TTT ATG GGA AAT GAG TTT GGT CAC CCA GAA TGG ATT GAC 1822

Tyr Leu Asn Phe Met Gly Asn Glu Phe Gly His Pro Glu Trp Ile Asp

530 535 540

TTT CCA AGA GAA GGG AAC AAC TGG AGC TAT GAT AAA TGC AGA CGA CAG 1870

Phe Pro Arg Glu Gly Asn Asn Trp Ser Tyr Asp Lys Cys Arg Arg Gln

545 550 555 560

TGG AGC CTT GTG GAC ACT GAT CAC TTG CGG TAC AAG TAC ATG AAT GCG 1918

Trp Ser Leu Val Asp Thr Asp His Leu Arg Tyr Lys Tyr Met Asn Ala

565 570 575

TTT GAC CAA GCG ATG AAT GCG CTC GAT GAG AGA TTT TCC TTC CTT TCG 1966

Phe Asp Gln Ala Met Asn Ala Leu Asp Glu Arg Phe Ser Phe Leu Ser

580 585 590

TCG TCA AAG CAG ATC GTC AGC GAC ATG AAC GAT GAG GAA AAG GTT ATT 2014

Ser Ser Lys Gln Ile Val Ser Asp Met Asn Asp Glu Glu Lys Val Ile

595 600 605

GTC TTT GAA CGT GGA GAT TTA GTT TTT GTT TTC AAT TTC CAT CCC AAG 2062

Val Phe Glu Arg Gly Asp Leu Val Phe Val Phe Asn Phe His Pro Lys

610 615 620

AAA ACT TAC GAG GGC TAC AAA GTG GGA TGC GAT TTG CCT GGG AAA TAC 2110

Lys Thr Tyr Glu Gly Tyr Lys Val Gly Cys Asp Leu Pro Gly Lys Tyr

625 630 635 640

AGA GTA GCC CTG GAC TCT GAT GCT CTG GTC TTC GGT GGA CAT GGA AGA 2158

Arg Val Ala Leu Asp Ser Asp Ala Leu Val Phe Gly Gly His Gly Arg

645 650 655

GTT GGC CAC GAC GTG GAT CAC TTC ACG TCG CCT GAA GGG GTG CCA GGG 2206

Val Gly His Asp Val Asp His Phe Thr Ser Pro Glu Gly Val Prc Gly

660 665 670

GTG CCC GAA ACG AAC TTC AAC AAC CGG CCG AAC TCG TTC AAA GTC CTT 2254

Val Pro Glu Thr Asn Phe Asn Asn Arg Pro Asn Ser Phe Lys Val Leu

675 680 685

TCT CCG CCC CGC ACC TGT GTG GCT TAT TAC CGT GTA GAC GAA GCA GGG 2302

Ser Pro Pro Arg Thr Cys Val Ala Tyr Tyr Arg Val Asp Glu Ala Gly

690 695 700

GCT GGA CGA CGT CTT CAC GCG AAA GCA GAG ACA GGA AAG ACG TCT CCA 2350

Ala Gly Arg Arg Leu His Ala Lys Ala Glu Thr Gly Lys Thr Ser Pro

705 710 715 720

GCA GAG AGC ATC GAC GTC AAA GCT TCC AGA GCT AGT AGC AAA GAA GAC 2398

Ala Glu Ser Ile Asp Val Lys Ala Ser Arg Ala Ser Ser Lys Glu Asp

725 730 735

AAG GAG GCA ACG GCT GGT GGC AAG AAG GGA TGG AAG TTT GCG CGG CAG 2446

Lys Glu Ala Thr Ala Gly Gly Lys Lys Gly Trp Lys Phe Ala Arg Gln

740 745 750

CCA TCC GAT CAA GAT ACC AAA TGA AGCCACGAGT CCTTGGTGAG GACTGGACTG 2500

Pro Ser Asp Gln Asp Thr Lys *

755 760

GCTGCCGGCG CCCTGTTAGT AGTCCTGCTC TACTGGACTA GCCGCCGCTG GCGCCCTTGG 2560

AACGGTCCTT TCCTGTAGCT TGCAGGCGAC TGGTGTCTCA TCACCGAGCA GGCAGGCACT 2620

GCTTGTATAG CTTTTCTAGA ATAATAATCA GGGATGGATG GATGGTGTGT ATTGGCTATC 2680

TGGCTAGACG TGCATGTGCC CAGTTTGTAT GTACAGGAGC AGTTCCCGTC CAGAATAAAA 2740

AAAAACTTGT TGGGGGGTTT TTC 2763

(2)序列17资料：

(i)序列特征：

(A)长度：823个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列17：

Leu Cys Leu Val Ser Pro Ser Ser Ser Pro Thr Pro Leu Pro Pro Pro

-63 -60 -55 -50

Arg Arg Ser Arg Ser His Ala Asp Arg Ala Ala Pro Pro Gly Ile Ala

-45 -40 -35

Gly Gly Gly Asn Val Arg Leu Ser Val Leu Ser Val Gln Cys Lys Ala

-30 -25 -20

Arg Arg Ser Gly Val Arg Lys Val Lys Ser Lys Phe Ala Thr Ala Ala

-15 -l0 -5 1

Thr Val Gln Glu Asp Lys Thr Met Ala Thr Ala Lys Gly Asp Val Asp

5 10 15

His Leu Pro Ile Tyr Asp Leu Asp Pro Lys Leu Glu Ile Phe Lys Asp

20 25 30

His Phe Arg Tyr Arg Met Lys Arg Phe Leu Glu Gln Lys Gly Ser Ile

35 40 45

Glu Glu Asn Glu Gly Ser Leu Glu Ser Phe Ser Lys Gly Tyr Leu Lys

50 55 60 65

Phe Gly Ile Asn Thr Asn Glu Asp Gly Thr Val Tyr Arg Glu Trp Ala

70 75 80

Pro Ala Ala Gln Glu Ala Glu Leu Ile Gly Asp Phe Asn Asp Trp Asn

85 90 95

Gly Ala Asn His Lys Met Glu Lys Asp Lys Phe Gly Val Trp Ser Ile

100 105 110

Lys Ile Asp His Val Lys Gly Lys Pro Ala Ile Pro His Asn Ser Lys

115 120 125

Val Lys Phe Arg Phe Leu His Gly Gly Val Trp Val Asp Arg Ile Pro

130 135 140 145

Ala Leu Ile Arg Tyr Ala Thr Val Asp Ala Ser Lys Phe Gly Ala Pro

150 155 160

Tyr Asp Gly Val His Trp Asp Pro Pro Ala Ser Glu Arg Tyr Thr Phe

165 170 175

Lys His Pro Arg Pro Ser Lys Pro Ala Ala Pro Arg Ile Tyr Glu Ala

180 185 190

His Val Gly Met Ser Gly Glu Lys Pro Ala Val Ser Thr Tyr Arg Glu

195 200 205

Phe Ala Asp Asn Val Leu Pro Arg Ile Arg Ala Asn Asn Tyr Asn Thr

210 215 220 225

Val Gln Leu Met Ala Val Met Glu His Ser Tyr Tyr Ala Ser Phe Gly

230 235 240

Tyr His Val Thr Asn Phe Phe Ala Val Ser Ser Arg Ser Gly Thr Pro

245 250 255

Glu Asp Leu Lys Tyr Leu Val Asp Lys Ala His Ser Leu Gly Leu Arg

260 265 270

Val Leu Met Asp Val Val His Ser His Ala Ser Asn Asn Val Thr Asp

275 280 285

Gly Leu Asn Gly Tyr Asp Val Gly Gln Ser Thr Gln Glu Ser Tyr Phe

290 295 300 305

His Ala Gly Asp Arg Gly Tyr His Lys Leu Trp Asp Ser Arg Leu Phe

310 315 320

Asn Tyr Ala Asn Trp Glu Val Leu Arg Phe Leu Leu Ser Asn Leu Arg

325 330 335

Tyr Trp Leu Asp Glu Phe Met Phe Asp Gly Phe Arg Phe Asp Gly Val

340 345 350

Thr Ser Met Leu Tyr His His His Gly Ile Asn Val Gly Phe Thr Gly

355 360 365

Asn Tyr Gln Glu Tyr Phe Ser Leu Asp Thr Ala Val Asp Ala Val Val

370 375 380 385

Tyr Met Met Leu Ala Asn His Leu Met His Lys Leu Leu Pro Glu Ala

390 395 400

Thr Val Val Ala Glu Asp Val Ser Gly Met Pro Val Leu Cys Arg Pro

405 410 415

Val Asp Glu Gly Gly Val Gly Phe Asp Tyr Arg Leu Ala Met Ala Ile

420 425 430

Pro Asp Arg Trp Ile Asp Tyr Leu Lys Asn Lys Asp Asp Ser Glu Trp

435 440 445

Ser Met Gly Glu Ile Ala His Thr Leu Thr Asn Arg Arg Tyr Thr Glu

450 455 460 465

Lys Cys Ile Ala Tyr Ala Glu Ser His Asp Gln Ser Ile Val Gly Asp

470 475 480

Lys Thr Ile Ala Phe Leu Leu Met Asp Lys Glu Met Tyr Thr Gly Met

485 490 495

Ser Asp Leu Gln Pro Ala Ser Pro Thr Ile Asp Arg Gly Ile Ala Leu

500 505 510

Gln Lys Met Ile His Phe Ile Thr Met Ala Leu Gly Gly Asp Gly Tyr

515 520 525

Leu Asn Phe Met Gly Asn Glu Phe Gly His Pro Glu Trp Ile Asp Phe

530 535 540 545

Pro Arg Glu Gly Asn Asn Trp Ser Tyr Asp Lys Cys Arg Arg Gln Trp

550 555 560

Ser Leu Val Asp Thr Asp His Leu Arg Tyr Lys Tyr Met Asn Ala Phe

565 570 575

Asp Gln Ala Met Asn Ala Leu Asp Glu Arg Phe Ser Phe Leu Ser Ser

580 585 590

Ser Lys Gln Ile Val Ser Asp Met Asn Asp Glu Glu Lys Val Ile Val

595 600 605

Phe Glu Arg Gly Asp Leu Val Phe Val Phe Asn Phe His Pro Lys Lys

610 615 620 625

Thr Tyr Glu Gly Tyr Lys Val Gly Cys Asp Leu Pro Gly Lys Tyr Arg

630 635 640

Val Ala Leu Asp Ser Asp Ala Leu Val Phe Gly Gly His Gly Arg Val

645 650 655

Gly His Asp Val Asp His Phe Thr Ser Pro Glu Gly Val Pro Gly Val

660 665 670

Pro Glu Thr Asn Phe Asn Asn Arg Pro Asn Ser Phe Lys Val Leu Ser

675 680 685

Pro Pro Arg Thr Cys Val Ala Tyr Tyr Arg Val Asp Glu Ala Gly Ala

690 695 700 705

Gly Arg Arg Leu His Ala Lys Ala Glu Thr Gly Lys Thr Ser Pro Ala

710 715 720

Glu Ser Ile Asp Val Lys Ala Ser Arg Ala Ser Ser Lys Glu Asp Lys

725 730 735

Glu Ala Thr Ala Gly Gly Lys Lys Gly Trp Lys Phe Ala Arg Gln Pro

740 745 750

Ser Asp Gln Asp Thr Lys *

755 760

(2)序列18资料：

(i)序列特征：

(A)长度：153个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(vi)来源：

(A)生物：玉米

(ix)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：1..153

(xi)序列描述：序列18：

ATG GCG ACG CCC TCG GCC GTG GGC GCC GCG TGC CTC CTC CTC GCG CGG 48

Met Ala Thr Pro Ser Ala Val Gly Ala Ala Cys Leu Leu Leu Ala Arg

765 770 775

GCC GCC TGG CCG GCC GCC GTC GGC GAC CGG GCG CGC CCG CGG AGG CTC 96

Ala Ala Trp Pro Ala Ala Val Gly Asp Arg Ala Arg Pro Arg Arg Leu

780 785 790

CAG CGC GTG CTG CGC CGC CGG TGC GTC GCG GAG CTG AGC AGG GAG GGG 144

Gln Arg Val Leu Arg Arg Arg Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Gly

795 800 805

CCC CAT ATG 153

Pro His Met

810

(2)序列19资料：

(i)序列特征：

(A)长度：51个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列19：

Met Ala Thr Pro Ser Ala Val Gly Ala Ala Cys Leu Leu Leu Ala Arg

1 5 10 15

Ala Ala Trp Pro Ala Ala Val Gly Asp Arg Ala Arg Pro Arg Arg Leu

20 25 30

Gln Arg Val Leu Arg Arg Arg Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Gly

35 40 45

Pro His Met

50

(2)序列20资料：

(i)序列特征：

(A)长度：1620个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(ix)特征：

(A)名称/键：CDS

(B)位置：1..1620

(xi)序列描述：序列20：

TGC GTC GCG GAG CTG AGC AGG GAG GAC CTC GGT CTC GAA CCT GAA GGG 48

Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Asp Leu Gly Leu Glu Pro Glu Gly

55 60 65

ATT GCT GAA GGT TCC ATC GAT AAC ACA GTA GTT GTG GCA AGT GAG CAA 96

Ile Ala Glu Gly Ser Ile Asp Asn Thr Val Val Val Ala Ser Glu Gln

70 75 80

GAT TCT GAG ATT GTG GTT GGA AAG GAG CAA GCT CGA GCT AAA GTA ACA 144

Asp Ser Glu Ile Val Val Gly Lys Glu Gln Ala Arg Ala Lys Val Thr

85 90 95

CAA AGC ATT GTC TTT GTA ACC GGC GAA GCT TCT CCT TAT GCA AAG TCT 192

Gln Ser Ile Val Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro Tyr Ala Lys Ser

100 105 110 115

GGG GGT CTA GGA GAT GTT TGT GGT TCA TTG CCA GTT GCT CTT GCT GCT 240

Gly Gly Leu Gly Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Val Ala Leu Ala Ala

120 125 130

CGT GGT CAC CGT GTG ATG GTT GTA ATG CCC AGA TAT TTA AAT GGT ACC 288

Arg Gly His Arg Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr Leu Asn Gly Thr

135 140 145

TCC GAT AAG AAT TAT GCA AAT GCA TTT TAC ACA GAA AAA CAC ATT CGG 336

Ser Asp Lys Asn Tyr Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu Lys His Ile Arg

150 155 160

ATT CCA TGC TTT GGC GGT GAA CAT GAA GTT ACC TTC TTC CAT GAG TAT 384

Ile Pro Cys Phe Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe Phe His Glu Tyr

165 170 175

AGA GAT TCA GTT GAC TGG GTG TTT GTT GAT CAT CCC TCA TAT CAC AGA 432

Arg Asp Ser Val Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro Ser Tyr His Arg

180 185 190 195

CCT GGA AAT TTA TAT GGA GAT AAG TTT GGT GCT TTT GGT GAT AAT CAG 480

Pro Gly Asn Leu Tyr Gly Asp Lys Phe Gly Ala Phe Gly Asp Asn Gln

200 205 210

TTC AGA TAC ACA CTC CTT TGC TAT GCT GCA TGT GAG GCT CCT TTG ATC 528

Phe Arg Tyr Thr Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu Ala Pro Leu Ile

215 220 225

CTT GAA TTG GGA GGA TAT ATT TAT GGA CAG AAT TGC ATG TTT GTT GTC 576

Leu Glu Leu Gly Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Asn Cys Met Phe Val Val

230 235 240

AAT GAT TGG CAT GCC AGT CTA GTG CCA GTC CTT CTT GCT GCA AAA TAT 624

Asn Asp Trp His Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu Ala Ala Lys Tyr

245 250 255

AGA CCA TAT GGT GTT TAT AAA GAC TCC CGC AGC ATT CTT GTA ATA CAT 672

Arg Pro Tyr Gly Val Tyr Lys Asp Ser Arg Ser Ile Leu Val Ile His

260 265 270 275

AAT TTA GCA CAT CAG GGT GTA GAG CCT GCA AGC ACA TAT CCT GAC CTT 720

Asn Leu Ala His Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr Tyr Pro Asp Leu

280 285 290

GGG TTG CCA CCT GAA TGG TAT GGA GCT CTG GAG TGG GTA TTC CCT GAA 768

Gly Leu Pro Pro Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp Val Phe Pro Glu

295 300 305

TGG GCG AGG AGG CAT GCC CTT GAC AAG GGT GAG GCA GTT AAT TTT TTG 816

Trp Ala Arg Arg His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala Val Asn Phe Leu

310 315 320

AAA GGT GCA GTT GTG ACA GCA GAT CGA ATC GTG ACT GTC AGT AAG GGT 864

Lys Gly Ala Val Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr Val Ser Lys Gly

325 330 335

TAT TCG TGG GAG GTC ACA ACT GCT GAA GGT GGA CAG GGC CTC AAT GAG 912

Tyr Ser Trp Glu Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln Gly Leu Asn Glu

340 345 350 355

CTC TTA AGC TCC AGA AAG AGT GTA TTA AAC GGA ATT GTA AAT GGA ATT 960

Leu Leu Ser Ser Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile Val Asn Gly Ile

360 365 370

GAC ATT AAT GAT TGG AAC CCT GCC ACA GAC AAA TGT ATC CCC TGT CAT 1008

Asp Ile Asn Asp Trp Asn Pro Ala Thr Asp Lys Cys Ile Pro Cys His

375 380 385

TAT TCT GTT GAT GAC CTC TCT GGA AAG GCC AAA TGT AAA GGT GCA TTG 1056

Tyr Ser Val Asp Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys Lys Gly Ala Leu

390 395 400

CAG AAG GAG CTG GGT TTA CCT ATA AGG CCT GAT GTT CCT CTG ATT GGC 1104

Gln Lys Glu Leu Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val Pro Leu Ile Gly

405 410 415

TTT ATT GGA AGG TTG GAT TAT CAG AAA GGC ATT GAT CTC ATT CAA CTT 1152

Phe Ile Gly Arg Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp Leu Ile Gln Leu

420 425 430 435

ATC ATA CCA GAT CTC ATG CGG GAA GAT GTT CAA TTT GTC ATG CTT GGA 1200

Ile Ile Pro Asp Leu Met Arg Glu Asp Val Gln Phe Val Met Leu Gly

440 445 450

TCT GGT GAC CCA GAG CTT GAA GAT TGG ATG AGA TCT ACA GAG TCG ATC 1248

Ser Gly Asp Pro Glu Leu Glu Asp Trp Met Arg Ser Thr Glu Ser Ile

455 460 465

TTC AAG GAT AAA TTT CGT GGA TGG GTT GGA TTT AGT GTT CCA GTT TCC 1296

Phe Lys Asp Lys Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Pro Val Ser

470 475 480

CAC CGA ATA ACT GCC GGC TGC GAT ATA TTG TTA ATG CCA TCC AGA TTC 1344

His Arg Ile Thr Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe

485 490 495

GAA CCT TGT GGT CTC AAT CAG CTA TAT GCT ATG CAG TAT GGC ACA GTT 1392

Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln Tyr Gly Thr Val

500 505 510 515

CCT GTT GTC CAT GCA ACT GGG GGC CTT AGA GAT ACC GTG GAG AAC TTC 1440

Pro Val Val His Ala Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr Val Glu Asn Phe

520 525 530

AAC CCT TTC GGT GAG AAT GGA GAG CAG GGT ACA GGG TGG GCA TTC GCA 1488

Asn Pro Phe Gly Glu Asn Gly Glu Gln Gly Thr Gly Trp Ala Phe Ala

535 540 545

CCC CTA ACC ACA GAA AAC ATG TTT GTG GAC ATT GCG AAC TGC AAT ATC 1536

Pro Leu Thr Thr Glu Asn Met Phe Val Asp Ile Ala Asn Cys Asn Ile

550 555 560

TAC ATA CAG GGA ACA CAA GTC CTC CTG GGA AGG GCT AAT GAA GCG AGG 1584

Tyr Ile Gln Gly Thr Gln Val Leu Leu Gly Arg Ala Asn Glu Ala Arg

565 570 575

CAT GTC AAA AGA CTT CAC GTG GGA CCA TGC CGC TGA 1620

His Val Lys Arg Leu His Val Gly Pro Cys Arg *

580 585 590

(2)序列21资料：

(i)序列特征：

(A)长度：540个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：蛋白

(xi)序列描述：序列21：

Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu Asp Leu Gly Leu Glu Pro Glu Gly

1 5 10 15

Ile Ala Glu Gly Ser Ile Asp Asn Thr Val Val Val Ala Ser Glu Gln

20 25 30

Asp Ser Glu Ile Val Val Gly Lys Glu Gln Ala Arg Ala Lys Val Thr

35 40 45

Gln Ser Ile Val Phe Val Thr Gly Glu Ala Ser Pro Tyr Ala Lys Ser

50 55 60

Gly Gly Leu Gly Asp Val Cys Gly Ser Leu Pro Val Ala Leu Ala Ala

65 70 75 80

Arg Gly His Arg Val Met Val Val Met Pro Arg Tyr Leu Asn Gly Thr

85 90 95

Ser Asp Lys Asn Tyr Ala Asn Ala Phe Tyr Thr Glu Lys His Ile Arg

100 105 110

Ile Pro Cys Phe Gly Gly Glu His Glu Val Thr Phe Phe His Glu Tyr

115 120 125

Arg Asp Ser Val Asp Trp Val Phe Val Asp His Pro Ser Tyr His Arg

130 135 140

Pro Gly Asn Leu Tyr Gly Asp Lys Phe Gly Ala Phe Gly Asp Asn Gln

145 150 155 160

Phe Arg Tyr Thr Leu Leu Cys Tyr Ala Ala Cys Glu Ala Pro Leu Ile

165 170 175

Leu Glu Leu Gly Gly Tyr Ile Tyr Gly Gln Asn Cys Met Phe Val Val

180 185 190

Asn Asp Trp His Ala Ser Leu Val Pro Val Leu Leu Ala Ala Lys Tyr

195 200 205

Arg Pro Tyr Gly Val Tyr Lys Asp Ser Arg Ser Ile Leu Val Ile His

210 215 220

Asn Leu Ala His Gln Gly Val Glu Pro Ala Ser Thr Tyr Pro Asp Leu

225 230 235 240

Gly Leu Pro Pro Glu Trp Tyr Gly Ala Leu Glu Trp Val Phe Pro Glu

245 250 255

Trp Ala Arg Arg His Ala Leu Asp Lys Gly Glu Ala Val Asn Phe Leu

260 265 270

Lys Gly Ala Val Val Thr Ala Asp Arg Ile Val Thr Val Ser Lys Gly

275 280 285

Tyr Ser Trp Glu Val Thr Thr Ala Glu Gly Gly Gln Gly Leu Asn Glu

290 295 300

Leu Leu Ser Ser Arg Lys Ser Val Leu Asn Gly Ile Val Asn Gly Ile

305 310 315 320

Asp Ile Asn Asp Trp Asn Pro Ala Thr Asp Lys Cys Ile Pro Cys His

325 330 335

Tyr Ser Val Asp Asp Leu Ser Gly Lys Ala Lys Cys Lys Gly Ala Leu

340 345 350

Gln Lys Glu Leu Gly Leu Pro Ile Arg Pro Asp Val Pro Leu Ile Gly

355 360 365

Phe Ile Gly Arg Leu Asp Tyr Gln Lys Gly Ile Asp Leu Ile Gln Leu

370 375 380

Ile Ile Pro Asp Leu Met Arg Glu Asp Val Gln Phe Val Met Leu Gly

385 390 395 400

Ser Gly Asp Pro Glu Leu Glu Asp Trp Met Arg Ser Thr Glu Ser Ile

405 410 415

Phe Lys Asp Lys Phe Arg Gly Trp Val Gly Phe Ser Val Pro Val Ser

420 425 430

His Arg Ile Thr Ala Gly Cys Asp Ile Leu Leu Met Pro Ser Arg Phe

435 440 445

Glu Pro Cys Gly Leu Asn Gln Leu Tyr Ala Met Gln Tyr Gly Thr Val

450 455 460

Pro Val Val His Ala Thr Gly Gly Leu Arg Asp Thr Val Glu Asn Phe

465 470 475 480

Asn Pro Phe Gly Glu Asn Gly Glu Gln Gly Thr Gly Trp Ala Phe Ala

485 490 495

Pro Leu Thr Thr Glu Asn Met Phe Val Asp Ile Ala Asn Cys Asn Ile

500 505 510

Tyr Ile Gln Gly Thr Gln Val Leu Leu Gly Arg Ala Asn Glu Ala Arg

515 520 525

His Val Lys Arg Leu His Val Gly Pro Cys Arg *

530 535 540

(2)序列22资料：

(i)序列特征：

(A)长度：30个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列22：

GTGGATCCAT GGCGACGCCC TCGGCCGTGG

(2)序列23资料：

(i)序列特征：

(A)长度：35个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列23：

CTGAATTCCA TATGGGGCCC CTCCCTGCTC AGCTC

(2)序列24资料：

(i)序列特征：

(A)长度：36个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列24：

CTCTGAGCTC AAGCTTGCTA CTTTCTTTCC TTAATG

(2)序列25资料：

(i)序列特征：

(A)长度：29个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：线形

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列25：

GTCTCCGCGG TGGTGTCCTT GCTTCCTAG

(2)序列26资料：

(i)序列特征：

(A)长度：53个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列26：

TGCGTCGCGG AGCTGAGCAG GGAGGTCTCC GCGGTGGTGT CCTTGCTTCCTAG

(2)序列27资料：

(i)序列特征：

(A)长度：8个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：肽

(xi)序列描述：序列27：

Cys Val Ala Glu Leu Ser Arg Glu

1 5

(2)序列28资料：

(i)序列特征：

(A)长度：16个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(xi)序列描述：序列28：

AGAGAGAGAG AGAGAG

(2)序列29资料：

(i)序列特征：

(A)长度：36个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列29：

AAGAAGAAGA AGAAGAAGAA GAAGAAGAAG AAGAAG

(2)序列30资料：

(i)序列特征：

(A)长度：18个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：双

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：cDNA到mRNA

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列30：

AAAAAAAAAA AAAAAAAA

(2)序列31资料：

(i)序列特征：

(A)长度：11个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列31：

AGATAATGCA G

(2)序列32资料：

(i)序列特征：

(A)长度：10个碱基对

(B)类型：核酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：其它核酸

(A)说明：/desc＝“寡核苷酸”

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列32：

AACAATGGCT

(2)序列33资料：

(i)序列特征：

(A)长度：56个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：肽

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列33：

Met Ala Ser Ser Met Leu Ser Ser Ala Ala Val Ala Thr Arg Thr Asn

1 5 10 15

Pro Ala Gln Ala Ser Met Val Ala Pro Phe Thr Gly Leu Lys Ser Ala

20 25 30

Ala Phe Pro Val Ser Arg Lys Gln Asn Leu Asp Ile Thr Ser Ile Ala

35 40 45

Ser Asn Gly Gly Arg Val Gln Cys

50 55

(2)序列34资料：

(i)序列特征：

(A)长度：58个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：肽

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列34：

Met Ala Pro Thr Val Met Met Ala Ser Ser Ala Thr Ala Thr Arg Thr

1 5 10 15

Asn Pro Ala Gln Ala Ser Ala Val Ala Pro Phe Gln Gly Leu Lys Ser

20 25 30

Thr Ala Ser Leu Pro Val Ala Arg Arg Ser Ser Arg Ser Leu Gly Asn

35 40 45

Val Ala Ser Asn Gly Gly Arg Ile Arg Cys

50 55

(2)序列35资料：

(i)序列特征：

(A)长度：58个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：肽

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列35：

Met Ala Gln Ile Leu Ala Pro Ser Thr Gln Trp Gln Met Arg Ile Thr

1 5 10 15

Lys Thr Ser Pro Cys Ala Thr Pro Ile Thr Ser Lys Met Trp Ser Ser

20 25 30

Leu Val Met Lys Gln Thr Lys Lys Val Ala His Ser Ala Lys Phe Arg

35 40 45

Val Met Ala Val Asn Ser Glu Asn Gly Thr

50 55

(2)序列36资料：

(i)序列特征：

(A)长度：74个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：肽

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列36：

Met Ala Ala Leu Ala Thr Ser Gln Leu Val Ala Thr Arg Ala Gly His

1 5 10 15

Gly Val Pro Asp Ala Ser Thr Phe Arg Arg Gly Ala Ala Gln Gly Leu

20 25 30

Arg Gly Ala Arg Ala Ser Ala Ala Ala Asp Thr Leu Ser Met Arg Thr

35 40 45

Ser Ala Arg Ala Ala Pro Arg His Gln Gln Gln Ala Arg Arg Gly Gly

50 55 60

Arg Phe Pro Phe Pro Ser Leu Val Val Cys

65 70

(2)序列37资料：

(i)序列特征：

(A)长度：39个氨基酸

(B)类型：氨基酸

(C)链型：单

(D)拓扑结构：不相关

(ii)分子类型：肽

(iii)假说：无

(xi)序列描述：序列37：

Met Ala Thr Pro Ser Ala Val Gly Ala Ala Cys Leu Leu Leu Ala Arg

l 5 10 15

Xaa Ala Trp Pro Ala Ala Val Gly Asp Arg Ala Arg Pro Arg Arg Leu

20 25 30

Gln Arg Val Leu Arg Arg Arg

35

Claims

1.一种杂合多肽，它包括：

(a)一个淀粉被囊化区；

(b)一个与所述淀粉被囊化区融合的有效负荷多肽。

2.如权利要求1所述的杂合多肽，其中，所述有效负荷多肽是一种生物活性多肽。

3.如权利要求2所述的杂合多肽，其中，所述有效负荷多肽选自下列一组：激素，生长因子，抗体，酶免疫球蛋白，染料及其生物活性片段。

4.如权利要求1所述的杂合多肽，其中，所述淀粉被囊化区是一种酶的淀粉被囊化区，所述酶选自下列一组：可溶性淀粉合成酶I、可溶性淀粉合成酶II、可溶性淀粉合成酶III、颗粒结合淀粉合成酶、分支酶I、分支酶IIa、分支酶IIBb和葡糖淀粉酶多肽。

5.如权利要求1所述的杂合多肽，它包括一个位于所述淀粉被囊化区和有效负荷多肽之间的裂解位点。

6.一种编码权利要求1所述杂合多肽的重组核酸分子。

7.如权利要求6的重组核酸分子，它是一种DNA分子，该分子包括适于在细菌宿主中表达所述淀粉被囊化区和所述有效负荷多肽的控制序列。

8.如权利要求6的重组核酸分子，它是一种DNA分子，该分子包括适于在植物宿主中表达所述淀粉被囊化区和所述有效负荷多肽的控制序列。

9.如权利要求8的重组核酸分子，其中，所述控制序列适于在单子叶植物中表达所述淀粉被囊化区和所述有效负荷多肽。

10.如权利要求8的重组核酸分子，其中，所述控制序列适于在双子叶植物中表达所述淀粉被囊化区和所述有效负荷多肽。

11.如权利要求6的重组核酸分子，它是一种DNA分子，该分子包括适于在动物宿主中表达所述淀粉被囊化区和所述有效负荷多肽的控制序列。

12.一种含有权利要求6所述重组核酸分子的表达载体。

13.一种被转化成含有权利要求6所述重组核酸分子的细胞，该细胞能表达所述核酸分子。

14.如权利要求13的细胞，它是一种植物细胞。

15.一种由权利要求13所述细胞产生的改性淀粉，它包括所述有效负荷多肽。

16.一种用权利要求1所述杂合多肽生产一种纯的有效负荷多肽的方法，该方法包括：

(a)用编码所述杂合多肽的DNA转化一种宿主生物；

(b)让所述杂合多肽在所述宿主中表达；

(c)从所述宿主中分离所述杂合多肽；

(d)从所述杂合多肽中纯化所述有效负荷多肽。