CN1185800A - 含有突变体淀粉酶和氧漂白剂的洗涤剂组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了浸泡组合物,其包括漂白剂、助洗剂、阴离子表面活性剂、蛋白酶和稳定性提高的淀粉酶。也公开了一种浸泡织物的方法,其中所说的织物被浸在含有水和有效量的上述组合物的浸泡液中。
Description
技术领域
本发明涉及在浸泡条件下，即织物被浸泡在含有水和洗涤剂组分的浸泡液中的条件下织物的清洗，该过程作为一般洗涤操作的第一步骤，或者作为一个单独步骤。
发明背景
织物浸泡操作已描述于本领域中。在这样的浸泡操作中，将织物与浸泡液接触几小时到过夜的一段长时间。此洗衣方法具有的优点是使得织物与浸泡液中主要活性组分间的接触时间最大化。它还具有的优点是减少或免除了包括机械搅拌在内的一般洗衣操作的需要，或者它提高了后续一般洗衣操作的效率。
这样的浸泡操作对除去包括蛋白物质和淀粉混合物的粘着污渍，如血迹和食物污渍，特别有效。因此，浸泡组合物中应包括一种蛋白酶和一种淀粉酶是期望的。但是，与这样的浸泡组合物一起使用，当浸泡组合物溶解形成浸泡液时，淀粉酶本身会受到解蛋白进攻。在浸泡过程中这是一个特别严重的问题，因为通常各组分之间，特别是淀粉酶和蛋白酶之间的接触时间一般要比典型洗衣操作中长得多。因此，本发明组合物的一个目的就是提供包括一种淀粉酶和一种蛋白酶的浸泡组合物，其中淀粉酶在一段相当长的时间内将抗击解蛋白进攻。
对浸泡组合物的另一要求是它们应该包括一种氧漂白剂，优选高含量的这种漂白剂。实际上，氧漂白剂可在组合物的活性物与带污垢的织物之间的接触时间最大的浸泡操作中找到合适的高效条件，但是，漂白剂的存在也会在整个的浸泡操作过程中不利于酶的稳定性。实际上，漂白剂，特别是在高含量时，易于使酶的四级结构变性，将淀粉酶暴露于甚至更具有威胁性的解蛋白进攻中。
对浸泡组合物还有另一个要求是它们应该包括大量的助洗剂。实际上，助洗剂的存在对于有效地控制水的硬度是必需的。与通常的洗涤相比，在织物与洗涤溶液接触时间更长的浸泡条件下，助洗剂甚至是更加必需的，因此必须在更长的时间内控制水的硬度。为了适应浸泡方法的特殊性，浸泡组合物必须含有高含量的助洗剂。然而，高含量助洗剂的存在也会不利于酶的活性。确实是这样，这些助洗剂易于结合存在于浸泡溶液中的所有的钙，而有些钙是保证适当的酶活性所需要的。
最后，对浸泡组合物的另一要求是它们应该包括一种大量的阴离子表面活性剂。考虑到成本和效果的原因，一类优选的阴离子表面活性剂为烷基苯磺酸盐，特别是直链烷基苯磺酸盐。但是，某些阴离子表面活性剂，特别是直链烷基苯磺酸盐(LAS)似乎不利于酶的稳定性。
因此本发明的一个目的是提供适合于浸泡操作的浸泡组合物，其包括一种与一种蛋白酶、一种漂白体系、一种高含量的助洗剂和一种优选LAS的阴离子表面活性剂组合的淀粉酶，其中所说的淀粉酶在一段长时间内保持其活性，与浸泡操作的特征相符合。
发明概述
在一种实施方案中，本发明包括含有下列的组合物：
——一种氧漂白剂；
——占总组合物重量5％(50％的助洗剂；
——占总组合物重量0.5％(20％的一种阴离子表面活性剂，优选直链烷基苯磺酸盐；
——一种蛋白酶；和
——一种稳定性提高的淀粉酶，所说的稳定性的提高相对于所说淀粉酶的母体/非突变体形式。
在另一种实施方案中，本发明包括一种浸泡织物的方法，其中所说的织物被浸泡于含有水和有效量的上述组合物的浸泡液中。
发明详述
本发明包括一种组合物和一种浸泡织物的方法。此组合物，此后称之为浸泡组合物，用于浸泡方法中。
A-组合物
在其第一实施方案中，本发明包括一种组合物，其含有一种漂白剂、一种助洗剂、一种阴离子表面活性剂、一种蛋白酶和一种淀粉酶。
1-氧漂白剂
作为第一必要的组分，本发明的组合物含有一种氧漂白剂。组合物中合适的氧漂白剂可来自于多种来源，如过氧化氢或过氧化氢的任何加合物，或有机过氧酸，或其混合物。过氧化氢的加合物是指将过氧化氢加入到第二种化合物中以提供加合物而形成的化合物，第二种化合物可以是，例如一种无机盐、尿素或有机羧酸盐。过氧化氢的加合物的实例包括无机过水合物盐、过氧化氢与有机羧酸盐、尿素形成的化合物、和包合了过氧化氢的化合物。
无机过水合物盐的实例包括过硼酸盐、过碳酸盐、过磷酸盐和过硅酸盐。无机过水合物盐一般为碱金属盐。过碳酸、过硼酸的碱金属盐或其混合物是优选用于本发明的无机过水合物盐。优选的碱金属过碳酸盐为过碳酸钠。
其它合适的氧漂白剂包括过硫酸盐，特别是过硫酸钾K2S2O8和过硫酸钠Na2S2O8。
本发明中的浸泡组合物可含有以组合物的重量计1％～60％的过氧化氢源，优选为2％～40％，更优选为15％～40％。
2-助洗剂
作为第二必要的组分，本发明组合物含有一种助洗剂或其混合物，其量为总组合物重量的5％～50％，优选10％～40％，最优选15％～30％。用于本发明的合适的助洗剂包括无机和有机助洗剂。
无机或含磷洗涤剂助洗剂包括，但并不限于，聚磷酸盐(以三聚磷酸盐、焦磷酸盐和玻璃态聚合偏磷酸盐为例)、膦酸盐、肌醇六磷酸、硅酸盐、碳酸盐(包括碳酸氢盐和倍半碳酸盐)、硫酸盐和硅铝酸盐的碱金属盐、铵盐和链烷醇铵盐。但是，在某些地区要求非磷酸盐助洗剂。重要的是，本发明的组合物即使在所谓的弱助洗剂(与磷酸盐相比而言)例如柠檬酸盐的存在下，或者在使用沸石或层状硅酸盐助洗剂时会发生的所谓的欠复配(underbuilt)条件下也会发挥好得令人惊奇的功能。
硅酸盐助洗剂的实例为碱金属硅酸盐，特别是SiO2∶NaO2比率在1∶6∶1(3∶2∶1范围内的那些碱金属硅酸盐和层状硅酸盐，如描述于1987年5月12日授权于H.P.Rieck的美国专利4,664,839中的层状硅酸钠。NaSKS-6(一般此处缩写为“SKS-6”)是Hoechst出售的结晶层状硅酸盐的商标。与沸石助洗剂不同，NaSKS-6硅酸盐助洗剂不含铝。NaSKS-6具有层状硅酸盐的δ-Na2SiO5无定形的形式。它可以通过如描述于德国DE-A-3417649和DE-A-3742043中的那些方法制备。SKS-6是用于本发明的非常优选的层状硅酸盐，但是其它这样的层状硅酸盐也可用于本发明，如具有通式NaMSixO2x+1yH2O的那些，其中M为钠或氢，x为1.9～4的数字，优选2，且y为0～20的数字，优选0。可从Hoechst购得的各种其它层状硅酸盐包括α、β和γ形式的NaSKS-5、NaSKS-7和NaSKS-11。如上所述，δ-Na2SiO5(NaSKS-6形式)最优选用于本发明。其它的硅酸盐也是有用的，例如硅酸镁，它在粒状制剂中可用作松脆剂、用作氧漂白剂的稳定剂和用作泡沫控制体系的一种组分。
碳酸盐助洗剂的实例为碱土金属和碱金属碳酸盐，如描述于1973年11月15日公开的德国专利申请No.2321001中的那些。
硅铝酸盐助洗剂在本发明中是有用的。硅铝酸盐助洗剂在现今出售的大多数重垢粒状洗涤剂组合物中是非常重要的，并且也是液体洗涤剂制剂中的重要助洗剂组分。硅铝酸盐助洗剂包括具有下列经验式的那些：
Mz[(zAlO2)y]xH2O
其中z和y为至少是6的整数，z与y的摩尔比在1.0～约0.5范围内，x为约15～约264的整数。
有用的硅铝酸盐在结构上可以是结晶的或无定形的，可以是天然存在的硅铝酸盐或通过合成得到。一种生产硅铝酸盐离子交换材料的方法描述于1976年10月12日颁布的Krummel等人的美国专利3985669中。优选的用于本发明的合成结晶硅铝酸盐离子交换材料可在名称沸石A、沸石P(B)、沸石MAP和沸石X下购得。在一个特别优选的实施方案中，结晶硅铝酸盐离子交换材料具有式：
Na12[(AlO2)12(SiO2)12]xH2O
其中x为约20～约30，特别是约27。这种材料称为沸石A。脱水沸石(x＝0～10)也可用于本发明。优选地，硅铝酸盐具有直径为约0.1～10微米的粒子尺寸。
适用于本发明目的的有机洗涤剂助洗剂包括，但并不限于，多种聚羧酸盐化合物。本发明所用的聚羧酸盐指的是具有多个羧基基团的化合物，优选至少3个羧基基团。聚羧酸盐助洗剂一般以酸的形式加到组合物中，但也可以以中和的盐的形式加入。当以盐的形式使用时，碱金属盐，如钠盐、钾盐和锂盐或链烷醇铵盐是优选的。
聚羧酸盐助洗剂中包括多种有用的材料。一类重要的聚羧酸盐助洗剂包括醚聚羧酸盐，包括氧联琥珀酸盐，如1964年4月7日授权的Berg的美国专利3128287和1972年1月18日授权的Lamberti等人的美国专利3635830中所公开。还参见1987年5月5日授权给Bush等人的美国专利4663071中的“TMS/TDS”助洗剂。合适的醚聚羧酸盐也包括环状化合物，特别是脂环化合物，如描述于美国专利3923679、3835163、4120874和4102903中的那些。
其它有用的脱垢助洗剂包括醚羟基聚羧酸盐，如1，3，5-三羟基苯基-2，4，6-三磺酸和羧甲氧基琥珀酸，聚乙酸如乙二胺四乙酸和次氮基三乙酸的各种碱金属盐、铵盐和取代铵盐，还有聚羧酸盐如苯六甲酸、琥珀酸、氧联琥珀酸、聚马来酸、苯1，3，5-三羧酸、羧甲氧基琥珀酸及其可溶盐。
用于本发明的其它有用的聚羧酸盐助洗剂包括式I的助洗剂或其混合物：
其中Y为共聚用单体或共聚用单体混合物；R1和R2为漂白剂和碱稳定的聚合物末端基团；R3为H、OH或C1-4烷基；M为H、碱金属、碱土金属、铵或取代铵；p为0～2；n至少为10。
优选用于本发明的聚合物分为两类。第一类属于共聚物类型，其由不饱和聚羧酸如马采酸、柠康酸、衣康酸、中康酸及其盐作为第一单体，不饱和一元羧酸如丙烯酸或α-Cl-4烷基丙烯酸作为第二单体形成。参考上式I，属于所说的第一类的聚合物为p不为0且Y选自以上所列举的酸的那些。优选的这类聚合物为根据上式I，其中Y为马来酸的那些。还有，在优选的实施方案中，R3和M为H，且n的值使得聚合物具有1000～400000原子质量单位的分子量。
第二类优选用于本发明的聚合物属于参考上式I，p为0且R3为H或C1-4烷基的一类聚合物。在优选实施方案中，n的值使得聚合物具有1000～400000原子质量单位的分子量。在非常优选的实施方案中，R3和M为H。
上式I中的碱稳定聚合物末端基团R1和R2适当地包括烷基、氧烷基和烷基羧酸基及其盐和酯。
上述n值-聚合物的聚合度-可通过重均聚合物分子量除以平均单体分子量而测定。因此，对于重均分子量为15500、包含摩尔百分数为30％的马来酸衍生单元的马来酸-丙烯酸共聚物来说，n为182(即15500/(116×0.3+72×0.7))。
相对于聚苯乙烯磺酸钠聚合物标准，该标准得自英国Shropshire的聚合物实验室有限公司，温度控制塔在40℃下，该聚合物标准为在pH7.0、80/20的水/乙腈中，0.15M磷酸二氢钠和0.02M四甲基氢氧化铵。
在以上所有的聚合物中，非常优选用于本发明的是n平均为100～800，优选为120～400的第一类聚合物。
柠檬酸盐助洗剂，例如柠檬酸及其可溶性盐(特别是钠盐)，是特别重要的聚羧酸盐助洗剂，因其可从可再生的来源中得到及其生物降解能力。柠檬酸盐还能与沸石和/或层状硅酸盐助洗剂结合使用。氧联琥珀酸盐也是在该组合物和结合中特别有用的。
还适用于本发明洗涤剂组合物中的是1986年1月28日授权的Bush的美国专利4566984中公开的3，3-二羧基-4-氧杂-1，6-己二酸盐和相关化合物。有用的琥珀酸助洗剂包括C5-C20烷基和链烯基琥珀酸及其盐。一种特别优选的该类化合物为十二碳烯基琥珀酸。琥珀酸盐助洗剂的具体实例包括：十二烷基琥珀酸盐、十四烷基琥珀酸盐、十六烷基琥珀酸盐、2-十二碳烯基琥珀酸盐(优选)、2-十五碳烯基琥珀酸盐等。十二烷基琥珀酸盐是该组中优选的助洗剂，并且描述于1986年11月5日公开的欧洲专利申请86200690.5/0200263中。
其它合适的聚羧酸盐公开于1979年3月13日授权的Crutchfield等人的美国专利4144226和1967年3月7日授权的Diehl的美国专利3308067中。还参见Diehl的美国专利3723322。
脂肪酸，例如C12-C18一元羧酸，也可单独掺入到组合物中，或者与以前所说的助洗剂，特别是柠檬酸盐和/或琥珀酸盐助洗剂，结合使用以提供附加的助洗剂活性。
在可使用磷基助洗剂的情况下，并且尤其是在用于手洗操作的制剂中，可使用各种碱金属磷酸盐，如众所周知的三聚磷酸钠、焦磷酸钠和正磷酸钠。也可使用如乙烷-1-羟基-1，1-二膦酸盐和其它已知的膦酸盐(例如，参见美国专利3159581；3213030；3422021；3400148和3422137)的膦酸盐助洗剂。
3-阴离子表面活性剂
作为第三种必要的元素，本发明的组合物含有一种阴离子表面活性剂或其混合物，其含量为总组合物重量的0.5％～20％，优选3％～15％，最优选5％～10％。
用于本发明的合适的阴离子表面活性剂包括式ROSO3M的水溶性盐或酸，其中R优选地为C10～C24的烃基，优选具有C10～C20烷基组分的烷基或羟烷基，更优选C12～C18的烷基或羟烷基，且M为H或阳离子，如碱金属阳离子(如钠、钾、锂)或铵或取代铵(例如，甲基、二甲基、三甲基铵阳离子和季铵阳离子，如四甲基铵和二甲基基啶鎓阳离子和得自烷基胺如乙胺、二乙胺、三乙胺及其混合物等的季铵阳离子)。一般说来，C12-16的烷基链对较低的洗涤温度(例如低于约50℃)是优选的，C16-18烷基链对较高的洗涤温度(例如约50℃以上)是优选的。
其它适用于本发明的阴离子表面活性剂为式RO(A)mSO3M的水溶性盐或酸，其中R为未取代C10～C24烷基或含有C10～C24烷基组分的羟烷基，优选C12～C20烷基或羟烷基，更优选C12～C18烷基或羟烷基，A为乙氧基或丙氧基单元；m大于0，一般在约0.5～约6之间，更优选在约0.5～约3之间，且M为H或阳离子，例如金属阳离子(如钠、钾、锂、钙、镁等)、铵或取代铵阳离子。乙氧化的烷基硫酸盐和丙氧化的烷基硫酸盐在本发明中是期望的。取代铵阳离子的具体实例包括甲基、二甲基、三甲基铵和季铵阳离子，如四甲基铵和二甲基基啶鎓和得自链烷醇胺如乙胺、二乙胺、三乙胺及其混合物等的季铵阳离子。表面活性剂的实例为C12～C18烷基聚乙氧基(1.0)硫酸盐(C12～C18E(1.0)M)，C12～C18烷基聚乙氧基(2.25)硫酸盐(C12～C18E(2.25)M)，C12～C18烷基聚乙氧基(3.0)硫酸盐(C12～C18(3.0)M)和C12～C18烷基聚乙氧基(4.0)硫酸盐(C12～C18E(4.0)M)，其中M方便地选自钠和钾。
其它用于洗涤用途的阴离子表面活性剂也可用于本发明。它们包括皂盐(例如，包括钠盐、钾盐、铵盐和取代铵盐如单、二和三乙醇胺盐)、C9～C20直链烷基苯磺酸盐、C8～C22伯或仲烷基磺酸盐、C8～C24油基磺酸盐、通过如描述于英国专利说明书No.1082179中的磺化碱土金属柠檬酸盐的热解产物而制备的磺化聚羧酸、C8～C24烷基聚乙二醇醚硫酸盐(含有高达10摩尔的环氧乙烷)、烷基酯磺酸盐如C14-16甲基酯磺酸盐、酰基乙二醇磺酸盐、脂肪油基乙二醇硫酸盐、烷基酚环氧乙烷醚硫酸盐、石蜡磺酸盐、烷基磷酸盐、羟乙磺酸盐如酰基羟乙磺酸盐、N-酰基牛磺酸盐、烷基琥珀酰胺酸盐和磺基琥珀酸盐、磺基琥珀酸单酯(特别是饱和和不饱和的C12～C18单酯)、磺基琥珀酸二酯(特别是饱和和不饱和的C6～C14二酯)、酰基肌氨酸盐、烷基多糖硫酸盐如烷基聚葡糖苷硫酸盐(以下描述的非离子非硫酸化化合物)、支化伯烷基硫酸盐、烷基聚乙氧基羧酸盐如式RO(CH2CH2O)kCH2COO-M+的那些，其中R为Cx～C22烷基，k为0～10的整数，M为形成可溶盐的阳离子。树脂酸和氢化树脂酸也是合适的，如松香、氢化松香和存在于或得自于妥尔油的树脂酸和氢化树脂酸。进一步的实例在“表面活性剂和洗涤剂”(第I卷和第II卷，Schwartz、Perry和Berch)中给出。各种这样的表面活性剂也一般地公开于1975年12月30日授权给Laughlin等人的美国专利3929678中的23栏58行到29栏23行中(引入本文作为参考)。
用于本发明组合物中的非常优选的表面活性剂为烷基苯磺酸盐，特别是直链烷基苯磺酸盐。
4-蛋白酶
作为第四种必要的元素，本发明的组合物含有一种蛋白酶或其混合物。在本发明的优选实施方案中，蛋白酶通常以足以提供每克组合物具有0.005～0.2Anson单位(AU)活性的量存在。蛋白酶可来源于动物、植物或优选地微生物。更优选的是细菌来源的色氨酸蛋白酶。可使用纯化的或未纯化形式的酶。根据定义，包括由化学或基因改性突变体生产的蛋白酶，如封闭结构的酶变体。特别优选的蛋白酶是得自芽孢杆菌、枯草芽胞杆菌和/或地衣形芽孢杆菌的细菌丝氨酸蛋白酶。适用的商业蛋白酶包括Alcalase、Esperase、Durazym、Savinase、Maxatase、Maxacal和Maxapem15(蛋白质工程Maxacal)；Purafect和枯草溶菌素BPN和BPN′也是商业上可以购得的。优选的蛋白酶还包括改性的细菌丝氨酸蛋白酶，如描述于1987年4月28日申请的欧洲专利申请系列号87303761.8中的那些(特别是第17、24和98页)，其在此处被称为“蛋白酶B”，和描述于1986年10月29日公开的Venegas的欧洲专利申请199404中的那些，其指的是改性的细菌丝氨酸蛋白酶，在此处被称为“蛋白酶A”。更优选的是在此处被称为“蛋白酶C”的蛋白酶，它是得自芽胞杆菌的碱性丝氨酸蛋白酶的三重变体，其中在104位上酪氨酸替代缬氨酸，在123位上丝氨酸替代天冬氨酸，在274位上丙氨酸替代苏氨酸。蛋白酶C描述于EP 9091 5958.4中，对应于1991年5月16日公开的WO9l/06637，其在此处引入作为参考。基因改性变体，特别是蛋白酶C的变体，也包括在本发明中。
还适用于本发明的是在此处被称为“蛋白酶D”的蛋白酶，它是具有自然界中没有发现的氨基酸序列的羰基水解酶变体，其得自一种前体羰基水解酶，所述蛋白酶是通过将该羰基水解酶中等同于+76位的多种氨基酸残基以及等同于选自解淀粉芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶中+99、+101、+103、+107和+123位的一种或多种氨基酸残基用一不同的氨基酸取代而得到的，其描述于A.Baeck、C.K.Ghosh、P.P.Greycar、R.R.Bott和L.J.Wilson的共同申请的题为“含有蛋白酶的洗涤组合物”且具有美国系列号08/136797(P&G案号5040)和题为“含有蛋白酶的漂白组合物”且具有美国系列号08/136626的专利申请中，其在本文被引入作为参考。
一些优选的蛋白酶选自Savinase、Esperase、Maxacal、Purafect、BPN′、蛋白酶A和蛋白酶B及其混合物。得自枯草芽孢杆菌和/或地衣形芽孢杆菌的细菌丝氨酸蛋白酶是优选的。特别优选的是Savinase、Alcalase、蛋白酶A和蛋白酶B。
5-淀粉酶
作为第五种必要的元素，本发明的组合物含有一种淀粉酶。提高酶稳定性，如氧化稳定性的酶工程是已知的。例如，参见1985年6月的生物化学杂志(J.Biological Chem.)260卷11期第6518～6521页。
此后的“参比淀粉酶”指的是在本发明淀粉酶组分范围之外的淀粉酶，通过与它对比，可测得本发明内的任何淀粉酶的稳定性。
因此，本发明使用在洗涤剂中稳定性提高，特别是氧化稳定性提高的淀粉酶。相对于本发明中所用的淀粉酶显示可测量的改进的一个方便的绝对稳定性参比点为1993年商业上使用的从Novo Nordisk A/S购得的TERMAMYL(R)的稳定性。该TERMAMYL(R)淀粉酶为“参比淀粉酶”。在本发明精神和范围内的淀粉酶享有“稳定性提高”的淀粉酶的特征，其特征在于具有至少一种或多种可测量的以下性能的提高：氧化稳定性，例如对pH9～10的缓冲溶液中过氧化氢/四乙酰基乙二胺的氧化稳定性；热稳定性，例如，在通常的洗涤温度如约60℃下；或碱稳定性，例如在pH约8～约11，相对于以上指出的参比淀粉酶进行所有的测量。本发明优选的淀粉酶相对于更富于挑战性的参比淀粉酶表现出更大的提高，后一参比淀粉酶通过任何淀粉酶的前体淀粉酶来说明，其中本发明内的淀粉酶为这一前体淀粉酶的变体。这样的前体淀粉酶可本身是天然的或基因工程的产品。稳定性可采用任何本技术中公开的技术试验来测量。参见公开在WO94/02597中的参考文献，在此引入作为参考。
一般说来，本发明中稳定性提高的淀粉酶可从Novo Nordisk A/S或Genencor Intertional得到。
本发明优选的淀粉酶具有共性：不管是一种、两种或多种淀粉酶菌种作为直接前体，淀粉酶通过使用定点诱变从一种或多种芽孢杆菌淀粉酶，特别是从芽孢杆菌α-淀粉酶得到。
象已经指出的那样，“氧化稳定性提高的”淀粉酶优选用于本发明。这样的淀粉酶非限定性地解释如下：
(a)根据上文提到的Novo Nordisk A/S的1994年2月3日公开的WO/94/02597中的一种淀粉酶，由通过取代后的突变体进一步说明，其中用丙氨酸或苏氨酸(优选苏氨酸)取代已知为TERMAMYL(R)的地衣形芽孢杆菌α-淀粉酶上位于197位的蛋氨酸残基，或者用一种类似的母体淀粉酶的同源位置变种，如解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌进一步说明。
(b)由Genencor International描述的C.Mitchinson于1994年3月13-17日在第207届美国化学会国家会议上提出的题为“耐氧化的α-淀粉酶”中稳定性提高的淀粉酶。其中指出自动餐具洗涤剂中的漂白剂使α-淀粉酶失活，但氧化稳定性提高的淀粉酶已由Genencor从地衣形芽孢杆菌NCIB8061制得。蛋氨酸(Met)被识别为最有可能被改性的残基。蛋氨酸在8、15、197、256、304、366和438位置上每次一个被取代产生特定的突变体，特别重要的是M197L和M197T，M197T变体是最稳定表达的变体。稳定性在CASCADE(R)和SUNLIGHT(R)中测定；这样的酶商业上可在商品名Plurafact Oxam下从Genencor购得。
(c)此处特别优选的是从Novo Nordisk A/S购得的具有直接母体附加改性的淀粉酶变体。这些淀粉酶没有商品名，而是指被出售者称为QL37+M197T的那些。这样的酶在商业上以商品名SP 703从Novo购得。
可使用任何其它的氧化稳定性提高的淀粉酶，例如，从已知的可购得的淀粉酶的嵌合体、杂种或简单的母体突变体形式通过定点诱变得到的淀粉酶。
6-任选组分
本发明的浸泡组合物可进一步包括各种其它组分。
任选的却是优选用于本发明的组分是漂白活化剂。该类合适的化合物的实例公开于英国专利GB1586769和GB2143231中。这类化合物优选的实例为描述于如US4818425中的四乙酰乙二胺(TAED)、3，5，5-三甲基己酰氧基苯磺酸钠、双过氧十二酸和描述于如US4259201中的过氧己二酸的壬酰胺和描述于欧洲专利申请91870207.7中的正壬酰氧基苯磺酸盐(NOBS)和乙酰三乙基柠檬酸盐(ATC)。特别优选的还有选自取代或非取代苯甲酰己内酰胺、辛酰己内酰胺、壬酰己内酰胺、己酰己内酰胺、癸酰己内酰胺、十一碳烯酰己内酰胺、甲酰己内酰胺、乙酰己内酰胺、丙酰己内酰胺、丁酰己内酰胺、戊酰己内酰胺的N-酰基己内酰胺。此处的浸泡组合物可包括所说的漂白活化剂的混合物。
本发明优选的漂白活化剂混合物包括正壬酰氧基苯磺酸盐(NOBS)和具有低的产生二酰基过氧化物倾向却主要放出过酸的第二种漂白活化剂。所说的第二种漂白活化剂可包括四乙酰乙二胺(TAED)、乙酰基三乙基柠檬酸盐(ATC)、乙酰己内酰胺、苯甲酰己内酰胺等或其混合物。所说的漂白活化剂的混合物优选用于浸泡液的pH值控制在低于9.5的本发明的实施方案中。实际上，已发现包括正壬酰氧基苯磺酸盐和所说的第二种漂白活化剂的漂白活化剂混合物可提高粒状污垢的清洗效果，并同时显示了对二酰基过氧化物敏感的污垢(如β-胡萝卜素)和对过酸敏感的污垢(如身体污垢)的好的效果。
因此，本发明的浸泡组合物可含有总组合物重量0％～15％，优选1％～10％且更优选3％～7％的正壬酰氧基苯磺酸盐和总组合物重量0％～15％，优选1％～10％且更优选3％～7％的所说的第二种漂白活化剂。
组合物进一步含有螯合剂是期望的，螯合剂有助于控制浸泡液中游离重金属离子的量，因此避免了从所说的有效氧源中释放出氧的快速分解。可用于本发明的合适的氨基羧酸盐螯合剂包括二亚乙基三氨基五乙酸、乙二胺四乙酸盐(EDTA)、N-羟乙基乙二胺三乙酸盐、次氮基三乙酸盐、乙二胺四丙酸盐、三亚乙基四胺六乙酸盐和乙醇二甘氨酸，其碱金属盐、铵盐和取代铵盐或其混合物。进一步的合适螯合剂包括乙二胺-N，N＇-双琥珀酸(EDDS)或其碱金属、碱土金属、铵或取代铵盐。特别合适的EDDS化合物为游离酸形式和钠盐或镁盐或其配合物。其它合适的螯合剂还可为有机膦酸盐，包括氨基亚烷基聚(亚烷基膦酸盐)、碱金属乙烷1-羟基双膦酸盐、次氮基三亚甲基膦酸盐、乙二胺四亚甲基膦酸盐和二亚乙基三胺五亚甲基膦酸盐。膦酸盐化合物可以以其酸的形式或以其碱金属盐的形式存在。优选地，有机膦酸盐化合物以其镁盐的形式存在。
因此本发明浸泡组合物可含有总组合物重量0％～5％的所说的螯合剂，优选0％～3％，更优选0.05％～2％。
本发明的浸泡组合物可进一步包括其它的任选组分，如其他的不是阴离子的表面活性剂、填料、荧光增白剂、附加酶、去污剂、光活化漂白剂如酞菁磺酸锌、染料、染料转移抑制剂、颜料和香料的表面活性剂。所说的任选组分可在所需的不同量下加入。
此处的组合物以固态，优选以颗粒状，或液态形式生产。
B-方法
在第二实施方案中，本发明包括一种浸泡织物的方法。正如此处所用的，术语“浸泡织物的方法”指的是将织物浸泡于含有水和以上所描述的组合物的浸泡液中至一段足够的时间以清洗所说的织物的行为。浸泡方法可不与任何其它方法，如一般的洗衣操作一起而独立操作，或者作为第二一般洗衣步骤之前的第一步骤。在本发明优选的浸泡方法中，将织物浸泡10分钟～24小时的一段时间，优选30分钟～24小时，最优选4小时～24小时。在织物浸泡于所说的浸泡液中至一段足够的时间后，将它们取出用水漂洗。在浸泡后，可按通常的洗衣操作洗涤织物，在浸泡操作和后续的洗衣操作之间可漂洗或不漂洗织物。
在此处的浸泡操作中，以上所描述的浸泡组合物可用适量的水进行稀释以制备浸泡液。合适的剂量可为在3.5～5升水中含45～50克浸泡组合物至在20～45升水中含90～100克浸泡组合物。通常浓缩浸泡(桶/槽)的剂量为3.5～5升水中含45～50克。对洗衣机浸泡而言，剂量为约20升(欧洲)～45升(美国)水中含90～100克。然后，将待浸泡的织物浸泡于浸泡液中一段合适的时间。
有些因素会影响粒状污物/污垢洗涤方法的综合效果。这些因素包括延长的浸泡时间。确实是这样，织物的浸泡时间越长，最终效果越好。理想的浸泡时间为浸泡过夜，即12小时到24小时。另一个因素是初始温热温度或微热温度。实际上，较高的浸泡液初始温度保证了大益处的效果
实施例
以下的组合物是通过将所列举的组分在列举的比例下混合而制得的。通过每一次将45克所说的组合物稀释到3.5升～5.0升水中形成浸泡液。然后，每一次将0.5～2千克织物在所说的浸泡液中浸泡10分钟～24小时一段时间。最后，将织物从浸泡液中取出，用水漂洗且用通常的洗涤方法，如手洗或洗衣机，用通常的洗涤剂，重新使用或不重新使用浸泡液进行洗涤，然后将所说的织物放置干燥。组分 1 2 3
(％w/w) (％w/w) (％w/w)Plurafact Oxam(或SP 703 0.29 0.29 0.29(@4％活性蛋白质)蛋白酶B；@4％活性蛋白质 0.26 0.52 0.52过硼酸钠单水合物 29 29 29过碳酸钠 0 0 0柠檬酸 11 11 11沸石A 12 12 12聚丙烯酸盐(Acusol445ND) 10 10 10硅酸钠(无定形；1.6r) 0.3 0.3 0.3阴离子表面活性剂(LAS) 7 7 7NOBS 10 10 5TAED 0 0 5DTPA 0.2 0.2 0.2其它，惰性和微量组分 直到100 直到10 直到100组分 4 5 6
(％w/w) (％w/w) (％w/w)Plurafact Oxam(或SP 703 0.26 0.26 0.26(@4％活性蛋白质)蛋白酶B；@4％活性蛋白质 1.00 0.50 0.50过硼酸钠单水合物 0 0 0过碳酸钠 31 31 31柠檬酸 10 10 10沸石A 0 0 0聚丙烯酸盐(Acusol 445ND) 11 11 11硅酸钠(无定形； 16r) 0.4 0.4 0.4阴离子表面活性剂(LAS) 4 4 4NOBS 6 6 0TAED 6 6 12DTPA 0.2 0.2 0.2其它，惰性和微量组分 直到100 直到100 直到100
Claims (12)
1.一种组合物，其含有：
-一种氧漂白剂；
-总组合物重量5％(50％的助洗剂；
-总组合物重量0.5％(20％的阴离子表面活性剂；
-一种蛋白酶；和
-一种稳定性提高的淀粉酶，所说的稳定性提高相对于所说淀粉酶的母体/非突变体形式。
2.一种根据权利要求1的组合物，其中所说的阴离子表面活性剂为直链烷基苯磺酸盐。
3.一种根据上述权利要求中任何一项的组合物，其含有3％～15％，优选5％～10％的所说的阴离子表面活性剂。
4.一种根据上述权利要求的清洗组合物，其中所说的稳定性提高的淀粉酶是氧化稳定性的提高。
5.一种根据权利要求4的清洗组合物，其中所说的氧化稳定性是通过用苏氨酸取代地衣形芽孢杆菌上位于197位的蛋氨酸残基，或通过相似母体淀粉酶的同源位置变种而提高。
6.一种根据上述权利要求中任何一项的组合物，其含有10％～40％，优选15％～30％的所说的助洗剂。
7.一种根据上述权利要求中任何一项的组合物，其含有1％～60％，优选15％～40％的所说的氧漂白剂。
8.一种根据上述权利要求中任何一项的组合物，其中所说的氧漂白剂为过硼酸或过碳酸碱金属盐。
9.一种根据上述权利要求中任何一项的组合物，其还含有一种漂白活化剂。
10.一种根据上述权利要求中任何一项的组合物，其中所说的蛋白酶为Savinase、Alcalase、蛋白酶A和蛋白酶B。
11.一种浸泡织物的方法，其中所说的织物浸泡于含有根据上述权利要求中任何一项的有效量组合物的浸泡液中一段有效的时间，然后从所说的浸泡液中取出。
12.一种根据权利要求11的一种方法，其中所说的时间在10分钟～24小时的范围内。
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