CN118541162A - 用于处置肝功能障碍的组合物 - Google Patents

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CN118541162A CN202380016401.3A CN202380016401A CN118541162A CN 118541162 A CN118541162 A CN 118541162A CN 202380016401 A CN202380016401 A CN 202380016401A CN 118541162 A CN118541162 A CN 118541162A
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江口英利
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宫川繁
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Abstract

本发明的目的在于提供用于处置肝功能障碍的手段。本发明通过提供包含骨骼肌成肌细胞的组合物及处置肝功能障碍的方法等，从而实现上述课题，所述组合物用于处置肝功能障碍或用于改善肝功能，其中，肝功能障碍可以为肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、或肝衰竭，所述组合物可以用于促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及/或血管生成，所述处置肝功能障碍的方法包括将所述组合物适用于显示肝功能障碍的部位的步骤。

Description

用于处置肝功能障碍的组合物
技术领域
本发明涉及用于处置肝功能障碍的组合物等。
背景技术
近年来，为了修复损伤的组织等，进行了移植各种细胞的尝试。例如，为了修复因心绞痛、心肌梗塞等缺血性心脏病而损伤的心肌组织，尝试了利用胎儿心肌细胞、骨骼肌成肌细胞、间充质干细胞、心脏干细胞、ES细胞、iPS细胞等(非专利文献1)。
作为这样的尝试的一环，开发了：利用支架而形成的细胞结构物、将细胞形成为片状而得到的片状细胞培养物(专利文献1、非专利文献2)。
关于片状细胞培养物在治疗中的应用，进行了下述研究：培养表皮片在由烧伤等引起的皮肤损伤中的利用、角膜上皮片状细胞培养物在角膜损伤中的利用、口腔黏膜片状细胞培养物在食道癌的内窥镜下的切除中的利用等，其中一部分已进入临床应用的阶段。
作为这样的应用之一，提出了在消化道等器官的损伤的治愈中利用片状细胞培养物的方案。例如专利文献2中记载了，为了治愈或预防因吻合口瘘等发生的自消化道损伤部的漏出，利用包含间充质干细胞的片状细胞培养物。
另外，专利文献3中，记载了在器官表面的植活性良好、在临床应用中的操作性良好的植活片状物。具体而言，关于在一面具有胞外基质层、在另一面具有生物降解性凝胶层的成肌细胞片，验证了通过将胞外基质层的面移植于器官，从而能够在肝脏、大肠的表面良好地植活。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特表2007-528755号公报
专利文献2：国际公开第2017/130802号
专利文献3：国际公开第2021/149830号
非专利文献
非专利文献1：Haraguchi Y.等人,Stem CellsTransl.Med.,1(2),136-141(2012)
非专利文献2：Sawa Y.等人,Surg.Today,42(2),181-184(2012)
发明内容
发明所要解决的课题
本发明的目的在于提供用于处置肝功能障碍的手段。
用于解决课题的手段
本申请的发明人在研究用于处置肝功能障碍的方法的期间，着眼于通过产生来源于细胞的细胞因子来处置肝功能障碍的可能性。并且，为了验证该可能性而进行了深入研究，结果发现，可通过产生来源于骨骼肌成肌细胞的细胞因子来促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及血管生成，基于该见解进一步继续研究，结果完成了本发明。
即本发明涉及以下方案。
[1]组合物，其包含骨骼肌成肌细胞，前述组合物用于处置肝功能障碍或用于改善肝功能。
[2]如[1]所述的组合物，其中，肝功能障碍为肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、或肝衰竭。
[3]如[1]或[2]所述的组合物，其中，肝功能障碍为肝硬化。
[4]如[1]或[2]所述的组合物，其中，肝功能障碍为肝癌。
[5]如[4]所述的组合物，其适用于切除肝癌后的肝脏。
[6]如[1]～[5]中任一项所述的组合物，其用于促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及/或血管生成。
[7]如[1]～[6]中任一项所述的组合物，其用于通过产生细胞因子来处置肝功能障碍。
[8]处置肝功能障碍的方法，其包括将[1]～[7]中任一项所述的组合物适用于显示肝功能障碍的部位的步骤。
[9]如[8]所述的方法，其中，将组合物适用于显示肝功能障碍的部位的步骤通过移植设备进行。
[10]如[9]所述的方法，其中，移植设备为导管。
发明效果
根据本发明，能够处置肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、或肝衰竭等肝功能障碍。特别地，根据本发明，能够对凭现有的内科治疗改善无望的末期的失代偿性肝硬化进行处置，另外，能够处置切除肝癌后残留的肝脏的肝衰竭。另外，根据本发明，能够促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及/或血管生成。另外，根据本发明，能够通过产生细胞因子来处置肝功能障碍。
附图说明
[图1]图1示出来源于人骨骼肌成肌细胞的生长因子的产生。各值为平均值(n＝3)，误差条表示标准偏差。
[图2]图2示出由来源于人骨骼肌成肌细胞(HSMM)的因子诱导永生化人肝内皮细胞(TMNK-1)的管形成的步骤。将使含有HSMM(1.0×105个)的培养基浸渍于含有TMNK-1的培养基(图2的A)的组作为处理组1(n＝3)(图2的B)，将使含有HSMM(5.0×105个)的培养基浸渍于含有TMNK-1的培养基(图2的A)的组作为处理组2(n＝3)(图2的B)，将没有进行所述浸渍的组作为对照组(n＝3)(图2的C)。
[图3]图3示出由来源于人骨骼肌成肌细胞的因子诱导的TMNK-1的管形成的光学显微镜图像(从培养开始起1小时后及5小时后)。在由圆包围的部分发生由来源于人骨骼肌成肌细胞的因子诱导的TMNK-1的管形成。
[图4]图4示出由来源于人骨骼肌成肌细胞的因子诱导的TMNK-1的管形成的光学显微镜图像(从培养开始起24小时后)(图4的A)、在由来源于人骨骼肌成肌细胞的因子诱导的TMNK-1的管形成中观察到的管的总长(图4的B)、及管的分支数(图4的C)。各值为处理组1(n＝3)、处理组2(n＝3)、及对照组(n＝3)各自的平均值，误差条表示标准偏差。
本说明书中，除非另行定义，则本说明书中使用的全部技术术语及科学术语具有与本领域技术人员通常所理解的意思相同的含义。本说明书中所参照的全部专利、申请及其它出版物、信息的整体通过参照而援引至本说明书中。
具体实施方式
[用于处置肝功能障碍的组合物]
本发明的一方面涉及组合物(有时记载为“本发明的组合物”)，其包含骨骼肌成肌细胞，前述组合物用于处置肝功能障碍或用于改善肝功能。
一个方式中，肝功能障碍为肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、或肝衰竭。
一个方式中，肝功能障碍为肝硬化。
一个方式中，肝功能障碍为肝癌。
一个方式中，本发明的组合物适用于切除肝癌后的肝脏。
一个方式中，本发明的组合物用于促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及/或血管生成。
一个方式中，本发明的组合物用于通过产生细胞因子来处置肝功能障碍。
肝脏是具有代谢、体液稳态的维持、消化等广泛功能、且具有再生能力的器官。在肝脏中，血液从肝动脉及门静脉流入，经由中央静脉而从肝静脉流出。肝脏的组织通过肝小叶积聚而构成，肝小叶的中轴部贯穿着中央静脉。肝细胞在中央静脉的周围呈放射状排列而形成肝板，占据肝脏中的全部细胞的大半。本说明书中，“肝细胞”可与“肝实质细胞”互换使用。肝脏中的肝细胞以外的细胞被称为“肝非实质细胞”，可举出窦内皮细胞、库普弗细胞、树突状细胞、自然杀伤(NK)细胞、肝星状细胞、及源自单核细胞的巨噬细胞等。
本发明中，肝脏可以为任意生物的肝脏，没有限定，例如，为人、非人灵长类、啮齿类(小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠等)、兔、犬、猫、猪、马、牛、山羊、绵羊等哺乳动物的肝脏。
本发明中，所谓“肝功能”，是指代谢、体液稳态的维持、消化等正常的肝脏所具有的功能。
本发明中，所谓“肝功能障碍”，是指：肝脏因任何原因而阻碍、抑制、及/或损害肝功能。例如，肝功能障碍为肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、或肝衰竭。
本发明中，“正常的肝脏”是指未受到由疾病、障碍、及/或处置等带来的任何影响的无伤(完整)肝脏。
本发明中，“骨骼肌成肌细胞”是指骨骼肌中存在的成肌细胞。骨骼肌成肌细胞在该技术领域中广为人知，可以由骨骼肌利用任意已知的方法(例如，日本特开2007-89442号公报中记载的方法等)来制备，也可以通过商业获得(例如，Lonza，Cat#CC-2580)。骨骼肌成肌细胞可以没有限定地通过例如CD56、α7整合素、肌球蛋白重链IIa、肌球蛋白重链IIb、肌球蛋白重链IId(IIx)、MyoD、Myf5、Myf6、肌细胞生成素(myogenin)、结蛋白、PAX3等标志物进行鉴定。特定的方式中，骨骼肌成肌细胞为CD56阳性。进一步地，特定的方式中，骨骼肌成肌细胞为CD56阳性及结蛋白阳性。骨骼肌成肌细胞可以来源于具有骨骼肌的任意生物而并无限定，可以来源于例如人、非人灵长类、啮齿类(小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠等)、兔、犬、猫、猪、马、牛、山羊、绵羊等哺乳动物。一个方式中，骨骼肌成肌细胞为哺乳动物的骨骼肌成肌细胞。特定的方式中，骨骼肌成肌细胞为人骨骼肌成肌细胞。另外，骨骼肌成肌细胞能够从任意的骨骼肌采集。一个方式中，骨骼肌成肌细胞为源自大腿部、颈部、腹部的骨骼肌成肌细胞。
本发明中，所谓“包含骨骼肌成肌细胞的组合物”，是指至少包含骨骼肌成肌细胞、在此基础上还包含具有生物相容性的任选追加成分的组合物。此处，具有生物相容性的任选追加成分是指对生物体组织、细胞不引起炎症反应、免疫反应、中毒反应等不期望的作用、或者至少所述作用小的成分，没有特别限定，例如，为药学上可容许的载体、赋形剂、骨骼肌成肌细胞以外的其它细胞、提高本发明的组合物的存活性、植活性及/或功能性等的成分、对于生物体组织的再生及/或治愈或其促进等有用的成分、及/或移植片等。本领域技术人员精通所述追加成分，可以适当选择已知的任选追加成分而使用。另外，也可以在本发明的组合物的基础上并用上述的追加成分。
包含骨骼肌成肌细胞的组合物没有特别限定，例如，显示水溶液、悬浮液、乳液等具有流动性的液体形状、或者片状细胞培养物等具有柔软性的固体形状。尤其从适用于肝脏的表面的观点考虑，包含骨骼肌成肌细胞的组合物优选为片状细胞培养物。一个方式中，包含骨骼肌成肌细胞的组合物为药物组合物。
本发明中，“片状细胞培养物”是指细胞相互连接成为片状的培养物。细胞彼此可以直接(包括经由粘附分子等细胞要素的方式)及/或经由中间物而相互连接。作为中间物，只要是至少能够将细胞彼此物理性(机械性)地连接的物质即可，没有特别限定，例如，可举出胞外基质等。中间物优选为源自细胞的物质，特别优选为来源于构成细胞培养物的细胞的物质。细胞至少被物理性(机械地)地连接，也可以进一步被功能性地连接，例如化学性连接、电连接。片状细胞培养物可以是由1个细胞层构成的培养物(单层)，也可以是由2个以上的细胞层构成的培养物(层叠(多层)体，例如2层、3层、4层、5层、6层等)。另外，片状细胞培养物可以具有：细胞不呈现明确的层结构而厚度超出单个细胞厚度的三维结构。例如，在片状细胞培养物的垂直截面中，细胞也可以不在水平方向上均匀地排列而以不均匀(例如镶嵌状)地配置的状态存在。
某方式中，片状细胞培养物有时非常脆弱，难以操作。因此，出于使操作简便、降低破损风险的目的，片状细胞培养物可以还具有增强层。作为增强层，只要能够在不损害片状细胞培养物的功能的情况下增强结构，则可以为任意的层，例如可以为包含凝胶及/或聚合物的增强层，由于要移植于生物体内，因此优选为例如包含生物相容性凝胶、聚合物等的生物相容性的增强层。
作为能够在增强层中使用的凝胶(优选生物相容性凝胶)，只要是在导入至生物体内时不对生物体造成不良影响的凝胶，则可以为任意凝胶，例如可举出纤维蛋白凝胶、纤维蛋白原凝胶、明胶凝胶、胶原蛋白凝胶等，但不限于此。
作为能够在增强层中使用的聚合物(优选生物相容性聚合物)，只要是在导入至生物体内时不对生物体造成不良影响的聚合物，则可以为任意聚合物，例如可举出聚乳酸、聚二氧六环酮、聚糖乙内酰胺、胶原蛋白等，但不限于此。
适用具有增强层的片状细胞培养物的情况下，优选以增强层不与适用部位直接接触的方式进行适用。即，优选以使片状细胞培养物位于适用部位与增强层之间的方式进行适用。
本发明的组合物通过适用于肝脏，从而处置肝功能障碍或改善肝功能。一个方式中，本发明的组合物通过适用于肝脏的表面，从而处置肝功能障碍或改善肝功能。一个方式中，本发明的组合物通过利用移植设备而适用于肝脏，从而处置肝功能障碍或改善肝功能。一个方式中，本发明的组合物通过利用移植设备而适用于肝脏的表面，从而处置肝功能障碍或改善肝功能。
本发明中，“肝脏的表面”是指正常的肝脏的任意表面、或者受到由疾病、障碍、及/或处置等带来的任意影响的肝脏的任意表面。一个方式中，肝脏的表面为肝部分切除(例如，切除肝癌)后残留的肝脏的表面。一个方式中，肝脏的表面为显示肝纤维化(具有纤维化区域)的肝脏的表面。
本发明中，所谓“适用”，是指在对象部位使用本发明的组合物，例如，是指将本发明的组合物添加、施予、注射、递送、涂布、贴附、植活、及/或移植于对象部位。
本发明中，“移植设备”是指能够将本发明的组合物适用于肝脏的任意医疗设备。一个方式中，移植设备为能够将本发明的组合物适用于肝脏的表面的任意医疗设备。本发明的组合物为片状细胞培养物的情况下，移植设备例如为能够支承、剥离片状细胞培养物的、具备平面结构的医疗设备，从在腹腔内进行操作的观点考虑，优选为能够插通于在内窥镜手术中经腹腔地插入体腔内的筒状体的形态。
本发明中，“肝炎”是指肝脏中的任意炎症。作为肝炎，可举出病毒性肝炎(A型肝炎、B型肝炎、C型肝炎等)、酒精性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、药物性肝炎、自身免疫性肝炎等。肝炎大致分类为急性肝炎及慢性肝炎。急性肝炎可能一过性地引起肝炎，但慢性肝炎由于长期内维持肝炎而可能引起肝脏的纤维化及肝细胞的变性、坏死等。慢性肝炎经过肝脏的纤维化及肝细胞的变性、坏死等而可能发展为肝纤维化、肝硬化，进而发展为肝癌。
本发明中，所谓“肝纤维化”，是指：由于因反复的损伤、慢性肝炎而引起的肝脏的纤维化及肝细胞的变性、坏死等，导致正常的肝脏的实质组织被结缔组织替代，并且胶原蛋白等胞外基质成分蓄积，由此在肝脏中形成瘢痕组织。
本发明中，所谓“肝硬化”，是指由于因反复的损伤、慢性肝炎而引起的肝脏的纤维化及肝细胞的变性、坏死等，导致正常的肝脏的实质组织大量被结缔组织替代，并且胶原蛋白等胞外基质成分大量地蓄积，由此在肝脏中形成大量的瘢痕组织。肝硬化在没有症状的初期阶段被称为代偿性肝硬化(肝脏的一部分中产生的障碍可由肝脏的剩余部分代偿)。另一方面，肝硬化在随着病情的进展而产生黄疸、蜘蛛状血管瘤、掌红斑等症状的末期阶段被称为失代偿性肝硬化。代偿性肝硬化及初期的失代偿性肝硬化能够通过现有的内科治疗(干扰素、甘草甜素制剂、利尿药、白蛋白制剂、饮食疗法等)来处置。另一方面，末期的失代偿性肝硬化处于下述状况：凭现有的内科治疗改善无望，病情进展而成为肝癌、肝衰竭后，不得不进行外科治疗。
一个方式中，本发明的组合物用于处置代偿性肝硬化或失代偿性肝硬化。一个方式中，本发明的组合物用于处置初期或末期的失代偿性肝硬化。
本发明中，“肝癌”是指肝脏中产生的恶性肿瘤。肝癌大致分类为原发性肝癌及转移性肝癌。原发性肝癌的大部分为肝细胞癌(来源于肝细胞的恶性肿瘤)。肝细胞癌大多情况下可经过慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化进展为肝癌而产生。
本发明中，所谓“肝衰竭”，是指肝脏的大半受到损伤，由此代谢、体液稳态的维持、消化等正常的肝脏所具有的功能大幅降低。作为肝衰竭的原因，可举出病毒性肝炎、肝硬化、由酒精引起的肝损伤、由药引起的肝损伤等。另外，肝部分切除(例如，切除肝癌)后残留的肝脏有时也显示肝衰竭。肝衰竭大致分类为急性肝衰竭及慢性肝衰竭。急性肝衰竭在短时间内急速进展，但慢性肝衰竭经历长时间而缓慢进展。
本发明中，所谓“适用于切除肝癌后的肝脏”，是指：在将肝癌部分地或完全地切除后残留的肝脏中适用本发明的组合物。一个方式中，在将肝癌部分地或完全地切除后残留的肝脏的表面适用本发明的组合物。一个方式中，在将肝癌部分地或完全地切除后残留的肝脏的表面，利用移植设备适用本发明的组合物。一个方式中，切除肝癌后的肝脏显示肝衰竭。
本发明中，所谓“肝细胞”，是指在肝脏中的肝小叶的中央静脉的周围呈放射状排列而形成肝板、并占据肝脏中的全部细胞的大半的细胞。本说明书中，“肝细胞”可与“肝实质细胞”互换使用。
本发明中，所谓“肝组织”，是指通过肝小叶积聚而构成的组织。
本发明中，所谓“血管生成”，是指由肝脏等中已存在的血管产生新的血管、并分支而构筑血管网的现象。
本发明中，所谓“产生细胞因子”，是指产生担负血管生成、细胞的保护、修复等作用的血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)等细胞因子。例如，在适用了本发明的组合物的肝脏中产生担负血管生成、细胞的保护、修复等作用的VEGF、HGF等细胞因子。
本发明的组合物除了包含骨骼肌成肌细胞以外，还可以包含任意的其它细胞。所述细胞没有特别限定，例如，包括贴壁细胞(贴附性细胞)。贴壁细胞包含例如贴壁性的体细胞(例如，心肌细胞、成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞、肝细胞、胰细胞、肾细胞、肾上腺细胞、牙周韧带细胞、牙龈细胞、骨膜细胞、皮肤细胞、滑膜细胞、软骨细胞等)及干细胞(例如，心脏干细胞等组织干细胞、胚胎干细胞、iPS(induced pluripotent stem，诱导性多能干)细胞等多能性干细胞、间充质干细胞等)等。体细胞可以是由干细胞、尤其是iPS细胞分化而来的细胞(源自iPS细胞的贴壁细胞)。作为细胞的非限定例，例如，可举出成肌细胞、间充质干细胞(例如，源于骨髓、脂肪组织、外周血、皮肤、发根、肌肉组织、子宫内膜、胎盘、脐带血的细胞等)、心肌细胞、成纤维细胞、心脏干细胞、胚胎干细胞、iPS细胞、滑膜细胞、软骨细胞、上皮细胞(例如，口腔黏膜上皮细胞、视网膜色素上皮细胞、鼻黏膜上皮细胞等)、内皮细胞(例如，血管内皮细胞等)、肝细胞(例如，肝实质细胞等)、胰细胞(例如，胰岛细胞等)、肾细胞、肾上腺细胞、牙周韧带细胞、牙龈细胞、骨膜细胞、皮肤细胞等。作为源自iPS细胞的贴壁细胞的非限定例，可举出源自iPS细胞的心肌细胞、成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞、肝细胞、胰细胞、肾细胞、肾上腺细胞、牙周韧带细胞、牙龈细胞、骨膜细胞、皮肤细胞、滑膜细胞、软骨细胞等。
本发明的组合物中的细胞可以来源于能够由本发明的组合物治疗的任意生物。所述生物没有限定，例如，包括人、非人灵长类、犬、猫、猪、马、山羊、绵羊、啮齿目动物(例如，小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠等)、兔等。另外，本发明的组合物中的细胞的种类数没有特别限定，可以仅由一种细胞构成，也可以使用两种以上的细胞。组合物中的细胞有两种以上的情况下，最多的细胞的含有比率(纯度)在本发明的组合物的形成结束时为50％以上，优选为60％以上，更优选为70％以上，进一步优选为75％以上。
一个方式中，细胞为自源细胞。此处，所谓“自源细胞”，在本发明的组合物被用于移植的情况下，是指来源于其受体的细胞。
一个方式中，细胞为源自同种同基因的细胞。此处，所谓“源自同种同基因的细胞”，是指源自与受体同种的生物、且在遗传亲缘度上为同基因(即，移植至受体后不发生排斥反应)的细胞。例如，受体为人的情况下，在遗传亲缘度上为同基因的人细胞属于源自同种同基因的细胞。
一个方式中，细胞为源自同种异基因的细胞。此处，所谓“源自同种异基因的细胞”，是指源自与受体同种的生物、且在遗传亲缘度上为异基因(即，移植至受体后发生排斥反应)的细胞。例如，受体为人的情况下，在遗传亲缘度上为异基因的人细胞属于源自同种异基因的细胞。
本说明书中，“自源细胞”可与“自体细胞”互换使用，“源自同种同基因的细胞”及“源自同种异基因的细胞”可与“异体细胞”互换使用。
一个方式中，细胞为源自异种的细胞。此处，所谓“源自异种的细胞”，在本发明的组合物被用于移植的情况下，是指来源于与其受体为不同种的生物的细胞。例如，受体为人的情况下，来源于猴、猪的细胞等属于源自异种的细胞。
自源细胞及源自同种同基因的细胞即使移植也不发生排斥反应，因此在本发明中是优选的，但是，也可以利用源自同种异基因的细胞及源自异种的细胞。利用源自同种异基因的细胞及源自异种的细胞的情况下，为了抑制排斥反应，有时需要进行免疫抑制处置。
在由横纹肌组织制备骨骼肌成肌细胞的情况下，制备的细胞群中包含成纤维细胞。在制造本发明的组合物时使用包含由横纹肌组织制备的骨骼肌成肌细胞的细胞群的情况下，该细胞群中会包含一定量的成纤维细胞。成纤维细胞是本技术领域广为人知的，可通过TE-7(例如，参见Rosendaal等人,J Cell Sci.1994；107(Pt 1)：29-37、Goodpaster等人,J Histochem Cytochem.2008；56(4)：347-58等)等标志物进行鉴定。
一个方式中，本发明的组合物中的细胞包含由横纹肌组织制备的骨骼肌成肌细胞。因此，本发明的组合物的制造中使用的细胞群中，可包含骨骼肌成肌细胞及成纤维细胞。一个方式中，本发明的组合物的制造中使用的细胞群的CD56阳性率可以为50％以上、60％以上、65％以上、70％以上、75％以上、80％以上、85％以上、90％以上，优选为60％以上。
本发明的组合物的制造中使用的细胞群可包含成纤维细胞，但在成纤维细胞的含有率过高的情况下，骨骼肌成肌细胞的含有率降低，不优选。因此，一个方式中，本发明的组合物的制造中使用的细胞群的TE7阳性率可以为50％以下、40％以下、35％以下、30％以下、25％以下、20％以下、15％以下、10％以下，优选为40％以下。
本发明的组合物的制造中使用的细胞群也可包含骨骼肌成肌细胞及成纤维细胞以外的细胞，但优选所述细胞尽可能少。因此，CD56阳性率及TE7阳性率的合计值优选较高，例如可以为80％以上、85％以上、90％以上、95％以上、96％以上、97％以上、98％以上、99％以上等，优选为90％以上。
一个方式中，在将本发明的组合物适用于组织时，可以与促进治愈的其它组合物及/或移植片等一并适用。作为促进治愈的其它组合物及/或移植片，例如，可举出带蒂大网膜片等包含带蒂血管的移植片、纤维蛋白凝胶、Adspray(注册商标)等，但不限于此。一个优选方式中，本发明的组合物与包含带蒂血管的移植片一起适用。作为包含带蒂血管的移植片的典型例，例如可举出带蒂大网膜片等。
所述促进治愈的其它组合物及/或移植片可以为独立于本发明的组合物之外的其它组合物或移植片，也可以组装入本发明的组合物中。
在本发明的组合物与独立的促进治愈的其它组合物及/或移植片一起适用的情况下，所述组合物及/或移植片可以在本发明的组合物的适用之前进行适用，也可以在本发明的组合物的适用后进行适用。在本发明的组合物的适用之前适用其它组合物及/或移植片的情况下，可以以位于适用部位与本发明的组合物之间的方式进行适用。即，可以首先将其它组合物及/或移植片适用于适用部位，然后在其上适用本发明的组合物。在本发明的组合物的适用之后适用其它组合物及/或移植片的情况下，可以针对适用部位从本发明的组合物之上进行适用。即，可以首先将本发明的组合物适用于适用部位，然后从其上适用其它组合物及/或移植片。
作为组织再生的机制，认为是例如：本发明的组合物在障碍部位持续地释放担负血管生成、细胞的保护、修复等作用的VEGF、HGF等细胞因子、胶原蛋白等的旁分泌效果引起的；及/或所适用的周围组织的组细胞、干细胞激活而得到促进胶原蛋白产生等的自分泌效果；等等。
本发明的组合物为片状细胞培养物的情况下，就片状细胞培养物的大小而言，只要能够将生物体组织的规定部位覆盖即可，没有特别限定，例如，片状细胞培养物的形状为圆形的情况下，其直径为10～55mm、15～50mm、20～45mm、25～40mm、或30～35mm。
[处置肝功能障碍的方法]
本发明的另一方面涉及处置肝功能障碍的方法(有时记载为“本发明的处置方法”)，其包括将本发明的组合物适用于显示肝功能障碍的部位的步骤。
本发明中，“显示肝功能障碍的部位”是指肝功能被阻碍、被抑制、及/或损失的肝脏的任意部位。一个方式中，显示肝功能障碍的部位为肝功能被阻碍、被抑制、及/或损失的肝脏的表面的任意部位。一个方式中，显示肝功能障碍的部位为显示肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、或肝衰竭的肝脏的表面的任意部位。一个方式中，显示肝功能障碍的部位为显示代偿性肝硬化或失代偿性肝硬化的肝脏的表面的任意部位。一个方式中，显示肝功能障碍的部位为显示初期或末期的失代偿性肝硬化的肝脏的表面的任意部位。一个方式中，显示肝功能障碍的部位为切除肝癌后显示肝衰竭的、残留的肝脏的表面的任意部位。
一个方式中，本发明的处置方法中，将本发明的组合物适用于显示肝功能障碍的部位的步骤通过移植设备进行。一个方式中，移植设备为能够将本发明的组合物适用于肝脏的表面的任意医疗设备。本发明的组合物为片状细胞培养物的情况下，移植设备例如为能够支承、剥离片状细胞培养物的、具备平面结构的医疗设备，从在腹腔内操作的观点考虑，优选为能够插通于在内窥镜手术中经腹腔地插入体腔内的筒状体的形态。一个方式中，移植设备为导管。
本发明中，“导管”是指医疗用的具有柔软性的管。通过将导管插入腹腔、血管等中，从而能够将本发明的组合物适用于显示肝功能障碍的部位。例如，通过将导管插入腹腔、血管等中，从而能够将本发明的组合物添加、施予、注射、递送、涂布、贴附、植活、及/或移植于显示肝功能障碍的部位。
一个方式中，本发明的处置方法中，将本发明的组合物适用于显示肝功能障碍的部位的步骤是将本发明的组合物添加、施予、注射、递送、涂布、贴附、植活、及/或移植于显示肝功能障碍的部位的步骤。
[在用于处置肝功能障碍的药物的制造中的用途]
本发明的另一方面涉及本发明的组合物在用于处置肝功能障碍或用于改善肝功能的药物的制造中的用途(有时记载为“本发明在药物的制造中的用途”)。
[处置肝功能障碍的用途]
本发明的另一方面涉及本发明的组合物的处置肝功能障碍或改善肝功能的用途(有时记载为“本发明的用途”)。
[促进肝细胞的增殖等的方法]
本发明的另一方面涉及促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及/或血管生成的方法(有时记载为“本发明的肝细胞的增殖等的促进方法”)，其包括对本发明的组合物与肝细胞、肝组织、及/或内皮细胞进行共培养的步骤。本发明的肝细胞的增殖等的促进方法通过产生细胞因子来促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及/或血管生成。
本发明中，“内皮细胞”是指构成可通过来源于骨骼肌成肌细胞的因子而诱导管形成的内皮的细胞。一个方式中，内皮细胞为构成动脉、静脉、及/或毛细血管的血管内皮细胞。一个方式中，内皮细胞为肝内皮细胞。一个方式中，内皮细胞为窦内皮细胞。一个方式中，内皮细胞为肝窦内皮细胞。
本发明中，所谓“共培养”，是指将多个细胞及/或多种细胞在同一环境下进行培养。
一个方式中，本发明的肝细胞的增殖等的促进方法在体外(in vitro)进行。
一个方式中，本发明的肝细胞的增殖等的促进方法在体内(in vivo)进行。
参照以下的例子更详细地说明本发明，但其表示本发明的特定的具体例，本发明并不限于这些。
实施例
例1.来源于人骨骼肌成肌细胞的生长因子的产生
在培养容器(IWAKI组织培养用培养皿(完成贴附性细胞用表面处理)(3020-100)，AGC Techno Glass株式会社)中，加入Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)培养基(NacalaiTesque Inc.)，接着接种1.0×106个人骨骼肌成肌细胞(HSMM)(Normal HSMM，Lonza株式会社)，在37℃、5％CO2的条件下培养。将从培养开始起3天后的培养基以2,000×g离心分离10分钟，将上清液回收(n＝3)。针对上清液，使用市售的ELISA试剂盒(Human VEGF ELISA Kit(ab222510)及Human HGF ELISA Kit(ab100534)、Abcam株式会社)，利用ELISA对血管内皮生长因子(VEGF)及肝细胞生长因子(HGF)各自进行定量。另外，与上述同样地，培养HSMM，将从培养开始起7天后的培养基的上清液回收(n＝3)，针对上清液，利用ELISA对VEGF及HGF各自进行定量。对于ELISA中的显色反应，使用酶标仪(680XR，Bio-Rad Laboratories株式会社)来测定450nm的光学密度(OD)。
结果确认了，在从培养开始起3天后至7天后，VEGF及HGF各自的表达量增加(图1)。已知VEGF在肝脏中介由窦内皮细胞内的VEGFR2-ID1的信号转导系统由窦内皮细胞产生HGF。并且已知，HGF促进肝细胞的增殖及肝组织的再生。因此可知，HSMM通过产生VEGF及HGF等细胞因子来促进肝细胞的增殖及肝组织的再生。
例2.基于来源于人骨骼肌成肌细胞的因子的管形成的诱导
(1)含有永生化人肝内皮细胞(TMNK-1)的培养基的制备
在Transwell(注册商标)(6.5mm，附带有0.4um Pore Polyester MembraneInsert，Corning株式会社)多孔板中，加入Dulbecco改良Eagle培养基(DMEM)(NacalaiTesque Inc.)，接着接种1.0×105个永生化人肝内皮细胞(TMNK-1)(由JCRB细胞库出售，细胞编号(JCRB)：JCRB1564)(含有TMNK-1的培养基)(图2的A)。
(2)含有人骨骼肌成肌细胞(HSMM)的培养基的制备
在Transwell(注册商标)插入式培养皿(insert)中加入DMEM，接着接种1.0×105个人骨骼肌成肌细胞(HSMM)(Normal HSMM，Lonza株式会社)(含有HSMM(1.0×105个)的培养基)。另外，另行地，在Transwell(注册商标)插入式培养皿中加入DMEM，接着接种5.0×105个HSMM(含有HSMM(5.0×105个)的培养基)。
(3)含有HSMM的培养基向含有TMNK-1的培养基中的浸渍
将上述(2)中制备的包含含有HSMM(1.0×105个)的培养基的Transwell(注册商标)插入式培养皿插入上述(1)中制备的包含含有TMNK-1的培养基的Transwell(注册商标)多孔板中，由此使含有HSMM的培养基浸渍于含有TMNK-1的培养基中，将其作为处理组1(n＝3)(图2的B)。另外，同样地，将上述(2)中制备的包含含有HSMM(5.0×105个)的培养基的Transwell(注册商标)插入式培养皿插入上述(1)中制备的包含含有TMNK-1的培养基的Transwell(注册商标)多孔板中，由此使含有HSMM的培养基浸渍于含有TMNK-1的培养基中，将其作为处理组2(n＝3)(图2的B)。通过所述浸渍，含有HSMM的培养基与含有TMNK-1的培养基之间的各种因子的交换能够经由Transwell(注册商标)插入式培养皿的膜而实现。另外，将不进行所述浸渍的、上述(1)中制备的包含含有TMNK-1的培养基的Transwell(注册商标)多孔板作为对照组(n＝3)(图2的C)。
(4)管形成的诱导
将上述(3)的处理组1、处理组2、及对照组各自在37℃、5％CO2的条件下进行培养。在从培养开始起1小时后、5小时后、及24小时后，将处理组1及处理组2各自的Transwell(注册商标)插入式培养皿取出，利用光学显微镜以200倍的倍率对处理组1、处理组2、及对照组各自的Transwell(注册商标)多孔板中包含的TMNK-1进行观察。
结果确认了，在从培养开始起5小时后，与对照组相比，在处理组2中由HSMM诱导了TMNK-1的管形成(图3)。另外确认了，在从培养开始起24小时后，与对照组相比，在处理组1及2中由HSMM诱导了TMNK-1的管形成(图4的A)。另外确认了，在从培养开始24小时后，处理组2与处理组1相比，管的总长更长，并且管的分支数更多(图4的B及C)。即确认了，含有HSMM的培养基中的HSMM的细胞数越多，则HSMM越活跃地诱导TMNK-1的管形成。因此可知，通过来源于HSMM的因子来诱导TMNK-1的管形成、即促进血管生成。
从以上的结果来看，根据本发明，能够处置肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌、或肝衰竭等肝功能障碍。特别地，根据本发明，能够对通过现有的内科治疗改善无望的末期的失代偿性肝硬化进行处置，另外，能够处置切除肝癌后残留的肝脏的肝衰竭。另外，根据本发明，能够促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及/或血管生成。另外，根据本发明，能够介由细胞因子产生来处置肝功能障碍。

Claims (10)

1.组合物，其包含骨骼肌成肌细胞，所述组合物用于处置肝功能障碍或用于改善肝功能。
2.如权利要求1所述的组合物，其中，肝功能障碍为肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝癌或肝衰竭。
3.如权利要求1或2所述的组合物，其中，肝功能障碍为肝硬化。
4.如权利要求1或2所述的组合物，其中，肝功能障碍为肝癌。
5.如权利要求4所述的组合物，其适用于切除肝癌后的肝脏。
6.如权利要求1～5中任一项所述的组合物，其用于促进肝细胞的增殖、肝组织的再生、及/或血管生成。
7.如权利要求1～6中任一项所述的组合物，其用于通过产生细胞因子来处置肝功能障碍。
8.处置肝功能障碍的方法，其包括将权利要求1～7中任一项所述的组合物适用于显示肝功能障碍的部位的步骤。
9.如权利要求8所述的方法，其中，将组合物适用于显示肝功能障碍的部位的步骤通过移植设备进行。
10.如权利要求9所述的方法，其中，移植设备为导管。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030095954A1 (en) * 2001-11-21 2003-05-22 Hiroyuki Koyama Novel method for promotion of angiogenesis
JP4943844B2 (ja) 2003-08-01 2012-05-30 株式会社セルシード 三次元組織構造体
US20070059288A1 (en) * 2005-03-31 2007-03-15 Dinsmore Jonathan H Treatment for heart disease
JP2007089442A (ja) 2005-09-28 2007-04-12 Terumo Corp 骨格筋芽細胞の分離方法
EP2998389B1 (en) * 2013-05-17 2018-07-18 Terumo Kabushiki Kaisha Production method for sheet-shaped cell culture
US20190054123A1 (en) 2016-01-29 2019-02-21 Tokyo Women's Medical University Cell sheet composition including mesenchymal stem cells, and method for healing luminal organ using same
JP2020050641A (ja) * 2018-09-28 2020-04-02 テルモ株式会社 心疾患治療用組成物
WO2021090945A1 (ja) * 2019-11-08 2021-05-14 国立大学法人大阪大学 下肢の疾患を処置するための細胞培養物
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