CN118019541A - 在酸性pH下具有增强的效力的N-甲基-D-天冬氨酸受体的GLUN2B-亚基选择性拮抗剂 - Google Patents

Abstract

公开了选择性抑制含有GluN2B的N‑甲基‑D‑天冬氨酸受体(NMDAR)的化合物。在一些情况下，这些化合物选择性地靶向GluN2B而不是GluN2A、GluN2C和/或GluN2D。一般来说，这些化合物在比生理pH更酸性的pH下对GluN2B具有增强的效力。还公开了含有所述化合物中的一种或多种的药物制剂。另外，公开了使用所述化合物或其药物制剂治疗病症、障碍或疾病的方法。与本公开相关的示例性病症、障碍或疾病包括中风、蛛网膜下腔出血、脑缺血、脑血管痉挛、缺氧、急性CNS损伤、脊髓损伤、创伤性脑损伤、冠状动脉搭桥、持续性或慢性咳嗽、药物滥用障碍、阿片类药物戒断、阿片类药物耐受、双相型障碍、有自杀意念、疼痛、纤维肌痛、抑郁、产后抑郁、静止性震颤、痴呆、癫痫、癫痫发作、运动障碍和神经退行性疾病。

Description

在酸性pH下具有增强的效力的N-甲基-D-天冬氨酸受体的 GLUN2B-亚基选择性拮抗剂

相关申请的交叉引用

本申请要求2021年9月2日提交的美国临时申请No.63/240,125的优先权，其全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本公开涉及N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)调节剂，并且具体地涉及NMDAR的GluN2B亚基选择性变构调节剂，其在比生理pH更酸性的pH下对GluN2B具有增强的效力。还涉及含有此类NMDAR调节剂的药物制剂以及使用此类NMDAR调节剂治疗病症、病症和疾病的方法。

背景

脑缺血、中风、蛛网膜下腔出血(SAH)和创伤性脑损伤(TBI)都会导致大量神经元死亡，即使不是致命的，也会造成持久的残疾，并产生重大的社会影响。目前，除了溶解部分患者的血管凝块或在大动脉发生阻塞时取出凝块之外，对于中风几乎没有可用的治疗选择。SAH可以用钙通道阻滞剂治疗；然而，由于很大一部分患者会发展至随后的缺血发作和死亡，因此仍有相当大的机会改进治疗。TBI神经保护的药理学策略尚未获得批准。

在具有急性损伤的动物模型和人类患者中，受伤的CNS组织中的细胞外谷氨酸浓度增加(参见，Yuan等人的Supplemental Table S1，Neuron,2015,85(6):1305-1318)。细胞外谷氨酸增加的后果之一是NMDAR的过度激活，这可能具有神经毒性(Choi等人，JNeurosci,1988,8:185-196)。从逻辑上讲，在谷氨酸水平升高的损伤过程中抑制NMDAR应该具有神经保护作用，并且几种NMDAR拮抗剂的功效已在动物损伤模型中得到证实。然而，有希望的临床前结果尚未转化为临床成功，因为使用NMDAR拮抗剂治疗中风或TBI的多项临床试验要么未能改善患者预后，要么与不可接受的副作用相关(Yuan等人，Neuron,2015,85(6):1305-1318)。自从GluN2B选择性拮抗剂被发现以来，高选择性的GluN2B选择性拮抗剂的各种支架已被报道并在临床前和临床研究中进行测试，用于以下疾病：中风(Yuan等人，Neuron,2015,85(6):1305-1318),TBI(Yurkewicz等人，J Neurotrauma,2005,22:1428-1443)、帕金森病(Michel等人，PLoS One,2014,9(12):e114086；Michel等人，PLoS One,2015,10(8):e0135949)、抑郁(Bristow等人，J Pharmacol Exp Ther,2017,363(3):377-93)和疼痛(Swartjes等人，Anesthesiology,2011 115(1):165-74；Labas等人，Eur J MedChem,2011,46(6):2295-309)。尽管临床前疗效取得了明显的成果，但尚未有任何GluN2B选择性抑制剂被批准用于临床。

在一些CNS病症、障碍或疾病中，pH在生理学中起着重要作用。由于使用离子梯度，神经元的动作电位放电会消耗能量，并且这与多种有机和无机离子穿过细胞膜的运动有关。众所周知，高神经元放电速率会改变细胞外pH(Kraig等人，J Neurophysiol,1983,49(3):831-50；Sykova等人，Ciba Found Symp,1988,139:220-35；Tong和Chesler,BrainRes.,1999,815(2):373-81)，并且高频放电会释放大量质子负荷(Theparambil等人，NatCommun,2020,11(1):5073)。这些质子由细胞外碳酸氢盐缓冲，但当放电速率高或伴随细胞外钾增加(Kraig et al.,J Neurophysiol,1983,49(3):831-50)时，提高缓冲能力的补偿机制就会失效，导致大量酸化(Theparambil等人，Nat Commun,2020,11(1):5073)，如癫痫、缺血、缺氧和TBI期间发生的情况(例如，Mutch和Hansen,J Cereb Blood Flow Metab,1984,4(1):17-27)。反复刺激小直径初级传入痛纤维可导致动作电位放电逐渐增加(通常称为饱和)(Woolf和Thompson,Pain,1991,44(3):293-299)，并导致脊髓神经元兴奋性的长期增加。诸如此类的情况会沿着疼痛通路产生高水平的动作电位放电，预计会导致质子易位到细胞外空间，如上所述。在某些病理情况下，例如慢性疼痛，放电速率可能很高，并可能产生局部酸化，这使得NMDAR对在低pH下具有增强的效力的抑制剂敏感。

总之，迫切需要具有改善的临床前和/或临床结果的GluN2B选择性NMDAR拮抗剂，特别是对于CNS病症、障碍或疾病。此外，迫切需要在比生理pH更酸性的pH下对GluN2B具有增强的效力的GluN2B选择性NMDAR拮抗剂。

概述

本公开描述了选择性抑制含有GluN2B亚基的NMDAR的负变构调节剂。在一些情况下，负变构调节剂选择性地靶向GluN2B而不是GluN2A、GluN2C和/或GluN2D。一般来说，负变构调节剂在比生理pH更酸性的pH下对GluN2B具有增强的效力。

在一些实施方案中，本文中公开的化合物具有式I或式I的药学上可接受的盐、水合物或水合盐的结构，

其中R¹选自：

其中R^A、R^B、R^C和R^D独立地选自氢、甲基和卤甲基，并且

其中R²和R³独立地选自氢、甲基和卤甲基。

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R²和R³都是氢。

示例性化合物包括：

以及它们的对应的药学上可接受的盐、水合物和水合盐。

在一些实施方案中，本文中公开的化合物具有式II或式II的药学上可接受的盐、水合物或水合盐的结构，

其中R⁴选自氢、甲基、卤甲基、乙基、卤乙基、异丙基和卤异丙基，并且

其中R⁵和R⁶独立地选自氢、甲基和卤甲基。

在一些实施方案中，R⁴选自甲基和卤甲基。

在一些实施方案中，R⁵和R⁶都是氢。

还公开的是含有本文中所述的化合物的组合物，其中相对于本文中公开的对应式中的由“*”符号标记的立构中心，所述化合物对映体过量大于80％、85％、90％或95％。在一些实施方案中，相对于本文中公开的对应式中的由“*”符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物对映体过量大于95％。

在一些实施方案中，所述组合物含有具有根据式I的结构的化合物或式I的药学上可接受的盐、水合物或水合盐，其中相对于如式I中所示的由*符号标记的立构中心，所述化合物的R构型对映体过量大于80％、85％、90％或95％。

在一些实施方案中，所述组合物含有具有根据式II的结构的化合物或式II的药学上可接受的盐、水合物或水合盐，其中相对于如式II中所示的由*符号标记的立构中心，所述化合物的R构型对映体过量大于80％、85％、90％或95％。

还公开了所公开的化合物或组合物的药物制剂。一般而言，药物制剂还含有药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，所述药物制剂处于选自下列各项的形式：片剂、胶囊、囊片、丸剂、珠剂、颗粒剂、颗粒、粉末、凝胶、乳膏、溶液、混悬剂、乳液和纳米颗粒制剂。在一些实施方案中，药物制剂是口服制剂。在一些实施方案中，药物制剂是静脉内制剂。在一些实施方案中，药物制剂处于冻干粉末的形式。在一些实施方案中，药物制剂处于无菌水溶液的形式。

本公开还涉及：(1)本文公开的化合物、组合物和药物制剂用于治疗本文公开的病症、障碍或疾病或用作药物，(2)本文公开的化合物、组合物和药物制剂用于治疗本文公开的病症、病症或疾病，或者(3)本文公开的化合物、组合物和药物制剂用于制造用于治疗本文公开的病症、障碍或疾病的药物。

本公开还提供了治疗有需要的受试者的病症、障碍或疾病的方法。该方法包括向受试者施用有效量的本文公开的化合物、组合物或药物制剂。在一些实施方案中，所述化合物、组合物或药物制剂经口服或静脉内施用。

与本公开相关的示例性病症、障碍或疾病包括但不限于中风、蛛网膜下腔出血、脑缺血、脑血管痉挛、缺氧、急性CNS损伤、脊髓损伤、创伤性脑损伤、冠状动脉搭桥、持续性或慢性咳嗽、药物滥用障碍、阿片类药物戒断、阿片类药物耐受、双相型障碍、有自杀意念、疼痛、纤维肌痛、抑郁、产后抑郁、静止性震颤、痴呆、癫痫、癫痫发作、运动障碍和神经退行性疾病。

在一些实施方案中，所述病症、障碍或疾病是疼痛、抑郁、中风或蛛网膜下腔出血。

附图简述

图1是显示在小鼠短暂性缺血的MCAO模型中相对于示例性化合物(NP10679)的IP剂量(mg/kg)绘制的梗塞体积(mm ³)的图。该图是三个独立实验的汇总数据。数据以平均值±SEM形式显示，n＝9(0.2mg/kg)、13(0.5mg/kg)、21(1mg/kg)、12(2mg/kg)、12(5mg/kg)、24(10mg/kg)和34(Veh(空白))小鼠。**来自空白对照的p<0.01(ANOVA，Dunnett)。

图2A是显示在小鼠中10mg/kg口服剂量(黑色符号)或3mg/kg IV剂量(空心符号)之后的示例性化合物(NP10679)的总血浆水平(ng/mL)相对于时间(小时)绘制的图。数据以平均值±SEM表示(每个数据点n＝3)。

图2B是显示小鼠中2mg/kg(空心符号)或5mg/kg(黑色符号)IP剂量以后的示例性化合物(NP10679)的游离血浆水平(nM)相对于时间(小时)绘制的图。数据以平均值±SEM表示(每个数据点n＝3)。NP10679在pH 6.9下针对GluN2B的IC₅₀、针对H1组胺受体的功能性IC₅₀以及针对hERG的功能性IC₅₀在图中以虚线表示。

图3是显示小鼠在旋转棒上跌倒的潜伏期(秒)与时间(天)的关系图。连续两天(第1天和第2天)对小鼠进行旋转棒训练，每天进行4次试验，试验间间隔为25分钟。在第3天，将小鼠随机分组，并给予空白对照(空心圆圈)、30mg/kg艾芬地尔(空心向下三角形)，或2mg/kg(空心向上三角形)、5mg/kg(实心向下三角形)或10mg/kg(十字标记)的示例性化合物(NP10679)。计算每组的跌倒潜伏期并以平均值±SEM(n＝8)显示。*第3天个别试验的空白对照p<0.01(ANOVA，Dunnett)。

图4是显示三个治疗组(即，空白对照、MK-801和示例性化合物(NP10679))中小鼠的水平活动(两小时内)的条形图。小鼠在封闭的运动活动盒中习惯1小时，然后取出并通过IP注入给予空白(Veh，n＝6)、MK-801(0.3mg/kg，n＝4)或NP10679(20mg/kg，n＝6)，然后放回盒子中。测量水平运动活动2小时。*p<0.01来自空白对照(ANOVA，Dunnett)。横坐标报告了采样时间内光束中断的总数，它代表水平移动。

图5和6是显示示例性化合物(NP10679)在人受试者中单次静脉内剂量后的血浆暴露(plasma exposure)的图。如本文所述进行血浆收集和定量。以ng/mL表示的数据代表每个剂量6名受试者的平均值，150mg组除外，该组是5名受试者的平均值。

详细说明

本公开描述了选择性抑制含有GluN2B亚基的NMDAR的负变构调节剂。在一些实施方案中，负变构调节剂选择性地靶向GluN2B而不是GluN2A、GluN2C和/或GluN2D。一般来说，负变构调节剂在比生理pH更酸性的pH下对GluN2B具有增强的效力。

在更详细地描述本公开之前，应当理解，本公开不限于本文描述的特定实施方案，并且因此当然可以根据本公开的范围而改变。除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。

本说明书中引用的所有出版物和专利均通过引用并入本文，如同每个单独的出版物和专利被具体且单独地表明通过引用并入一样。它们通过引用并入以公开和描述与所引用的出版物和专利相关的方法和/或材料。

如本领域普通技术人员在阅读本公开后将显而易见的，本文描述和示出的每个特定实施方案具有离散的组件和/或特征，其可以容易地与本文描述的任何其他实施方案的一个或多个组件和/或特征分离或组合，而不脱离本公开的范围或精神。任何列举的方法可以按照本文列举的事件的顺序或者按照逻辑上可能的任何其他顺序来执行。

除非另有说明，本公开的实施方案将采用本领域技术范围内的医学、有机化学、药物化学、生物化学、分子生物学、药理学、神经学等技术。这些技术在文献中得到了充分的解释，例如本文引用的文献。

I.定义

如本文所用，单数形式“一(a)”、“一(an)”和“所述(the)”包括复数指示物，除非上下文另有明确说明。

如本文所用，术语“受试者”是指动物，包括人类和非人类动物。非人类动物可以包括家养宠物、牲畜和农场动物以及动物园动物。在一些情况下，非人类动物可以是非人类灵长类动物。

如本文所用，术语“预防(prevent)”和“预防(preventing)”包括预防发生、发作、传播和/或复发。本公开并不旨在限于完全预防。例如，当发生延迟、发作严重程度降低或两者兼而有之时，就认为已实现预防。

如本文所使用的，术语“治疗(treat)”和“治疗(treating)”包括如本领域普通技术人员所理解的对受试者的病症、障碍或疾病的医学管理(参见例如Stedman’s MedicalDictionary)。一般而言，治疗不限于受试者被治愈并且病症、障碍或疾病被根除的情况。相反，治疗还考虑其中包含本公开的化合物、组合物或药物制剂之一的治疗方案提供改善的临床结果的情况。改善的临床结果可能包括以下一项或多项：减轻、减小和/或缓解由待治疗的病症、障碍或疾病引起的或与之相关的一种或多种症状；减少一种或多种症状的发生；提高生活质量；病症、障碍或疾病的程度减轻；病症、障碍或疾病达到或建立稳定状态(即不恶化)；延迟或减缓病症、障碍或疾病的发展；改善或减轻病症、障碍或疾病的状态；部分或全部缓解(无论可检测还是不可检测)；和生存率提高(与受试者未接受治疗的预期生存相比，是否总体生存率增加或生存延长)。例如，本公开涵盖减少与本文所述的神经病学病症、障碍或疾病相关的一种或多种症状和/或认知缺陷的治疗。

如本文所用，术语“生理pH”是指在不存在病理状态的情况下人体中通常存在的pH。通常，其范围在7.35到7.45之间，平均值为7.40。

如本文所用，术语“卤素”和“卤”是指氟、氯、溴和碘。

如本文所用，术语“药学上可接受的”是指化合物、材料、组合物和/或制剂，它们在合理的医学判断范围内适合与人类和非人类动物的组织接触，不会产生过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，且具有合理的效益/风险比，符合某个国家监管机构的指导方针，例如美国食品药品监督管理局(FDA)或其在美国以外国家的相应机构(例如欧洲药品管理局(EMA))。

如本文所用，术语“盐”是指原始化合物的酸式盐或碱式盐。在一些情况下，盐是在原始化合物的制备过程中原位形成的，即，指定的合成化学程序产生盐而不是原始化合物。在某些情况下，盐是通过对原始化合物进行修饰而获得的。在一些情况下，盐是通过与原始化合物的现有盐进行离子交换获得的。盐的实例包括但不限于碱性残基例如胺的无机酸盐或有机酸盐，以及酸性残基例如羧酸和磷酸的碱金属盐或有机盐。对于含有碱性残基的原始化合物，可以用适量无毒的无机或有机酸处理该化合物来制备盐；或者，可以在原始化合物的制备过程中原位形成盐。碱性残基的示例性盐包括与选自盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸的无机酸形成的盐，或与选自乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、萘磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸和羟乙基磺酸的有机酸形成的盐。对于含有酸性残基的原始化合物，可以通过用适量的无毒碱处理所述化合物来制备盐；或者，可以在原始化合物的制备过程中原位形成盐。酸性残基的示例性盐包括与碱形成的盐，所述碱选自氢氧化铵、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钙、氢氧化镁、氢氧化亚铁、氢氧化锌、氢氧化铜、氢氧化铝、氢氧化铁、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙氨基乙醇、赖氨酸、精氨酸和组氨酸。任选地，所述盐可以通过下列方法制备：使原始化合物的游离酸或碱形式分别与化学计量量的或更多的适当的碱或酸在水(包括水溶液)、有机溶剂(包括有机溶液)或其混合物中反应。示例性的药学上可接受的盐的列表可以在下列中找到：Remington’sPharmaceutical Sciences(雷明顿制药科学),第20版,Lippincott Williams&Wilkins,Baltimore,MD,2000，以及Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use(药用盐手册：特性、选择和使用)，Stahl和Wermuth编辑，Wiley-VCH,Weinheim,2002。

如本文所用，术语“赋形剂”是指本文公开的药物制剂中存在的除活性成分(即，本公开的化合物或组合物)之外的所有组分。

如本文所用，术语材料的“有效量的”是指无毒但足以提供期望结果的材料的量。所需的确切量可能因受试者而异，取决于受试者的物种、年龄和一般状况、正在治疗的病症、障碍或疾病的严重性、所使用的活性成分或疗法等。

II.化合物

本公开描述了选择性抑制含有GluN2B的NMDAR的负变构调节剂。在一些实施方案中，所述负变构调节剂选择性靶向NMDAR的GluN2B亚基而不是一个或多个GluN2A、GluN2C和/或GluN2D亚基。

在一些实施方案中，负变构调节剂针对GluN2B的效力随着环境pH降低而增加，在5.0至9.0、6.0至8.0、6.5至8.0或6.9至7.6的pH范围内。例如，负变构调节剂在比生理pH更酸性的pH下对GluN2B具有增强的效力。针对GluN2B的效力可以通过负变构调节剂针对GluN2B的IC₅₀值来评估，其可以通过实施例中描述的方法容易地测定。IC₅₀值越低，效力越高。

就本文所述的化学式包含一个或多个未指定的手性中心而言，该化学式旨在涵盖所有稳定的立体异构体、对映异构体和非对映异构体。此类化合物可以作为单一对映异构体、外消旋混合物、非对映异构体的混合物或其组合存在。还应当理解，如果可能发生互变异构，则化学式涵盖所有互变异构形式。

制备示例性化合物的方法公开于实施例中。该方法与多种官能团和化合物相容，因此可以从所公开的方法获得多种衍生物。

A.一般结构

式I

在一些实施方案中，化合物具有式I或式I的药学上可接受的盐、水合物或水合盐的结构，

其中R¹选自：

其中R^A、R^B、R^C和R^D独立地选自氢、甲基和卤甲基(例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基)，并且

其中R²和R³独立地选自氢、甲基和卤甲基(例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基)。

在一些实施方案中，化合物处于如式I所示的游离碱形式。在一些实施方案中，化合物是式I的药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R¹为：

在一些实施方案中，R^A为氢。在一些实施方案中，R^B为氢。在一些实施方案中，R^A和R^B各自为氢。

在一些实施方案中，R^C为氢。在一些实施方案中，R^D为氢。在一些实施方案中，R^C和R^D各自为氢。

在一些实施方案中，R²为氢。在一些实施方案中，R²为甲基。在一些实施方案中，R²为卤甲基、例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基。

在一些实施方案中，R³为氢。在一些实施方案中，R³为甲基。在一些实施方案中，R³为卤甲基、例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基。

在一些实施方案中，R²和R³各自为氢。在一些实施方案中，R²为氢并且R³为甲基或卤甲基。在一些实施方案中，R²为甲基或卤甲基并且R³为氢。在一些实施方案中，R²和R³独立地是甲基或卤甲基。

在一些实施方案中，化合物具有式IA或式IA的药学上可接受的盐、水合物或水合盐的结构，

其中R¹与上述式I中的相同。

示例性化合物包括：

以及它们的对应的药学上可接受的盐、水合物和水合盐。

式II

在一些实施方案中，化合物具有式II或式II的药学上可接受的盐、水合物或水合盐的结构，

其中R⁴选自氢、甲基、卤甲基(例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基)、乙基、卤乙基(例如，氟乙基，如单氟乙基、二氟乙基和三氟乙基)、异丙基和卤异丙基(例如，氟异丙基，如单异丙基、二氟异丙基和三氟异丙基)，并且

其中R⁵和R⁶独立地选自氢、甲基和卤甲基(例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基)。

在一些实施方案中，化合物处于如式II所示的游离碱形式。在一些实施方案中，化合物是式II的药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，R⁴为氢。在一些实施方案中，R⁴为甲基。在一些实施方案中，R⁴为卤甲基，例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基。在一些实施方案中，R⁴为乙基。在一些实施方案中，R⁴为卤乙基，例如，氟乙基，如单氟乙基、二氟乙基和三氟乙基。在一些实施方案中，R⁴为异丙基。在一些实施方案中，R⁴为卤异丙基例如，氟异丙基，如单异丙基、二氟异丙基和三氟异丙基。

在一些实施方案中，R⁴选自甲基和卤甲基(例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基)。

在一些实施方案中，R⁵为氢。在一些实施方案中，R⁵为甲基。在一些实施方案中，R⁵为卤甲基，例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基。

在一些实施方案中，R⁶为氢。在一些实施方案中，R⁶为甲基。在一些实施方案中，R⁶为卤甲基，例如，氟甲基，如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基。

在一些实施方案中，R⁵和R⁶各自为氢。在一些实施方案中，R⁵为氢并且R⁶为甲基或卤甲基。在一些实施方案中，R⁵为甲基或卤甲基并且R⁶为氢。在一些实施方案中，R⁵和R⁶独立地是甲基或卤甲基。

在一些实施方案中，化合物具有式IIA或式IIA的药学上可接受的盐、水合物或水合盐的结构，

其中R⁴与上述式II中的相同。

B.立体化学和pH敏感性

上述公开的化合物相对于式中由“*”符号标记的手性中心呈R构型。

在某些实施方案中，所述化合物比其相应的S对映异构体具有更高的针对GluN2B的效力。针对GluN2B的效力可以通过化合物针对GluN2B的IC50值来评估，其可以通过实施例中描述的方法容易地测定。IC50值越低，效力越高。

在一些实施方案中，化合物针对GluN2B的效力随着环境pH降低而增加，在5.0至9.0、6.0至8.0、6.5至8.0或6.9至7.6的pH范围内。例如，这些化合物在比生理pH值更酸性的pH值下对GluN2B具有增强的效力。这里，对于特定化合物，在pH 7.6下测定的IC50值与在pH6.9下测定的IC50值的比率被定义为该化合物的“pH提升(pH boost)”。

在一些实施方案中，与它们相应的S对映异构体相比，化合物具有可比较的或更高的pH提升。如本文所用，“可比较的”是指与比较值相差25％以内的值。在一些实施方案中，化合物的pH提升等于其相应S对映异构体的pH提升的大于75％。在一些实施方案中，化合物的pH提升等于其相应S对映异构体的pH提升的大于80％。在一些实施方案中，化合物的pH提升等于其相应S对映异构体的pH提升的大于85％。在一些实施方案中，化合物的pH提升等于其相应S对映异构体的pH提升的大于90％。在一些实施方案中，化合物的pH提升等于其相应S对映异构体的pH提升的大于95％。

III.组合物

公开了含有本文公开的化合物的组合物。在一些实施方案中，相对于式I、IA、II和IIA中的任一项中的由“*”符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的对映体过量大于80％、85％、90％或95％。在一些实施方案中，相对于式I、IA、II和IIA中的任一项中的由“*”符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的对映体过量大于95％。

在一些实施方案中，所述组合物含有具有式I的结构的化合物或式I的药学上可接受的盐、水合物或水合盐，其中相对于由*符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的由式I表示的R构型对映体过量大于80％、85％、90％或95％。在一些实施方案中，相对于由*符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的由式I表示的R构型对映体过量大于95％。

在一些实施方案中，所述组合物含有具有式IA的结构的化合物或式IA的药学上可接受的盐、水合物或水合盐，其中相对于由*符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的由式IA表示的R构型对映体过量大于80％、85％、90％或95％。在一些实施方案中，相对于由*符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的由式IA表示的R构型对映体过量大于95％。

在一些实施方案中，所述组合物含有具有式II的结构的化合物或式II的药学上可接受的盐、水合物或水合盐，其中相对于由*符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的由式II表示的R构型对映体过量大于80％、85％、90％或95％。在一些实施方案中，相对于由*符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的由式II表示的R构型对映体过量大于95％。

在一些实施方案中，所述组合物含有具有式IIA的结构的化合物或式IIA的药学上可接受的盐、水合物或水合盐，其中相对于由*符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的由式IIA表示的R构型对映体过量大于80％、85％、90％或95％。在一些实施方案中，相对于由*符号标记的立构中心，所述组合物中的所述化合物的由式IIA表示的R构型对映体过量大于95％。

所公开的化合物可以以盐形式和非盐形式的混合物存在。在一些实施方案中，混合物中大于50％、60％、70％、80％、90％、95％或98％的化合物可以是非盐形式，其被计算为非盐形式与盐形式和非盐形式的总重量之比。在一些实施方案中，混合物中超过90％的化合物可以是非盐形式。在一些实施方案中，混合物中大于50％、60％、70％、80％、90％、95％或98％的化合物可以是盐形式，其被计算为盐形式的重量与盐形式和非盐形式的总重量之比。在一些实施方案中，混合物中大于90％的化合物可以是盐形式。

V.制剂

公开了含有本文所述的化合物或组合物的药物制剂。一般而言，药物制剂还含有一种或多种药学上可接受的赋形剂。

药物制剂可以是选自片剂、胶囊、囊片、丸剂、粉末、珠剂、颗粒剂、颗粒、乳膏、凝胶剂、溶液(例如水溶液，例如盐水和缓冲盐水)、乳液、混悬剂(包括纳米和微米混悬剂)、纳米颗粒制剂等。在一些实施方案中，药物制剂是口服制剂。在一些实施方案中，药物制剂是静脉内制剂。在一些实施方案中，药物制剂是局部制剂。

在一些实施方案中，药物制剂是冻干粉末的形式。在一些实施方案中，冻干粉末通过将活性成分(即，本文公开的化合物或组合物)溶解在水溶液中，然后冻干来制造。例如，可以通过将活性成分溶解在磷酸盐缓冲的羟基β环糊精溶液中，然后冻干来制备冻干粉末。

在一些实施方案中，药物制剂是无菌水溶液的形式。在一些实施方案中，无菌水溶液是无菌PBS。在一些实施方案中，通过将含有活性成分(即，本文公开的化合物或组合物)的冻干粉末溶解在水溶液中来制备无菌水溶液。例如，可以通过将含有活性成分的冻干粉末溶解在剂量适当体积的无菌PBS中来制备无菌水溶液。在一些实施方案中，含有活性成分的冻干粉末与上段中描述的那些相同。

如本文所用，“乳液”是指均匀共混在一起的不混溶组分的混合物。在一些形式中，不混溶组分包括亲脂性组分和水性组分。例如，乳液可以是一种液体以小球分布在第二种液体的整个主体中的制剂。分散液体为不连续相，分散介质为连续相。当油或油质物质为分散液体并且水或水溶液为连续相时，称为水包油乳液；而当水或水溶液为分散相并且油或油质物质为连续相时，称为油包水乳液。

如本文所用，“生物相容的”是指材料本身既不对宿主(例如，非人类动物或人类)有毒，也不以产生单体或寡聚亚基或其他副产物的速率降解(如果材料降解)而在宿主体内达到有毒浓度。

如本文所用，“可生物降解的”是指聚合材料降解或分解成更小的(例如，非聚合的)亚基，或将材料消化成更小的亚基。

如本文所用，“肠溶聚合物”是指在下胃肠道的较高pH环境中变得可溶或当剂型通过胃肠道时缓慢侵蚀的聚合物。

如本文所用，“纳米颗粒制剂”通常是指“纳米颗粒”，其是直径为约1nm至1000nm、约10nm至1000nm、约100nm至1000nm或约250nm至1000nm的颗粒。在一些实施方案中，“纳米颗粒制剂”还可以指“微粒”，其是直径为约1微米至约100微米、约1微米至约50微米、约1微米至约30微米、约1微米至约10微米的颗粒。在一些实施方案中，纳米颗粒制剂可以是如上定义的纳米颗粒和如上定义的微粒的混合物。

如本文所用，“表面活性剂”是指这样的任何试剂，其优先吸收至两个不混溶相之间的界面，例如水(或水溶液)与有机溶剂(或有机溶液)之间的界面、水/空气界面和有机溶剂/空气界面。表面活性剂通常具有亲水部分和亲脂部分。

如本文所用，“凝胶”是含有活性成分(即根据本公开的化合物或组合物)在液体载体中的分散体的半固体体系，其通过溶解或悬浮在液体载体中的增稠剂或聚合材料的作用而变成半固体。液体载体可包括亲脂性组分、水性组分或两者。

如本文所用，“水凝胶”是指不溶于水的精细分散的聚合物链的溶胀的含水网络，其中聚合物分子处于外相或分散相，而水(或水溶液)形成内相或分散相。聚合物链可以是化学交联的(化学凝胶)或物理交联的(物理凝胶)。化学凝胶具有通过共价键连接的聚合物链，而物理凝胶具有通过非共价相互作用连接的聚合物链，例如范德华相互作用、离子相互作用、氢键相互作用和疏水相互作用。

如本文所用，“珠剂”是指用活性成分(即，根据本公开的化合物或组合物)和一种或多种药学上可接受的赋形剂制成的珠剂。可以通过将活性成分施加到惰性载体上来生产珠剂，例如可以通过将活性成分施加到惰性载体上来生产珠剂，例如涂覆有活性成分的惰性糖核。备选地，可通过产生包含活性成分和一种或多种药学上可接受的赋形剂中的至少一种的“核心”来生产珠剂。如本文所用，“颗粒剂”是指通过加工活性成分(即，根据本公开的化合物或组合物)的颗粒而制成的产品，其可以包含或可以不包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。通常，颗粒不包含惰性载体，并且与用于生产它们的颗粒相比尺寸更大。虽然珠剂、颗粒剂和微粒可以配制为提供立即释放，但珠剂和颗粒剂通常用于提供延迟释放。

如本文所用，“酶可降解聚合物”是指被存在于肠和/或下胃肠道中的细菌酶降解的聚合物。

A.物理形式和单位剂量

取决于引入方式，本文描述的化合物或组合物可以以多种方式配制。药物制剂可以制备成各种形式，例如片剂、胶囊、囊片、丸剂、颗粒剂、粉末、纳米颗粒制剂、溶液(例如水溶液，例如盐水和缓冲盐水)、混悬剂(包括纳米混悬剂和微米混悬剂)、乳液、乳膏、凝胶等。

在一些实施方案中，药物制剂是适合于简单且优选口服施用精确剂量的固体剂型。用于口服施用的固体剂型包括但不限于片剂、软或硬明胶或非明胶胶囊和囊片。然而，也可以使用液体剂型，例如溶液、混悬剂(包括纳米混悬剂和微米混悬剂)和乳液。静脉制剂通常为液体剂型，包括溶液、乳剂和混悬剂。合适的局部制剂包括但不限于乳膏和凝胶。

在一些实施方案中，药物制剂是单位剂型，并且可以适当地包装在例如盒子、泡罩、小瓶、瓶子、小袋、安瓿中或任何其他合适的单剂量或多剂量保持器或容器中，其可选地带有一张或多张包含产品信息和/或使用说明的传单。

在某些实施方案中，以单位剂量的本文公开的化合物的量是适合每日一次给药的量。在某些实施方案中，需要多个单位剂量来达到所需的每日总剂量。

在某些实施方案中，单位剂量可含有5至300mg本文公开的化合物。在某些实施方案中，以单位剂量的本文公开的化合物的量在约5至约300、约15至约300、约25至约300、约50至约300、约75至约300、约5至约250、约15至约250、约25至约250、约50约250、约75至约250、约5至约200、约15至约200、约25至约200、约50至约200、约75至约200、约5至约175、约15至约175、约25至约175、约50至约175、约75至约175、约5至约150、约15至约150、约25至约150、约50至约150、约75至约150、或约100至约150mg的范围内。

在一些实施方案中，单位剂量含有5至200mg本文公开的化合物。

在一些实施方案中，单位剂量含有25至200mg本文公开的化合物。

在一些实施方案中，单位剂量含有25至175mg本文公开的化合物。在一些实施方案中，单位剂量含有25至150mg本文公开的化合物。在一些实施方案中，单位剂量含有50至200mg本文公开的化合物。在一些实施方案中，单位剂量含有75至200mg本文公开的化合物。在一些实施方案中，单位剂量含有50至175mg本文公开的化合物。在一些实施方案中，单位剂量含有75至150mg本文公开的化合物。

在某些实施方案中，以单位剂量的本文公开的化合物的量为约25mg、约50mg、约75mg、约100mg、约125mg、约150mg、约175mg、约200mg、约225mg、约250mg、约275mg、或约300mg。在一个具体实施方案中，以单位剂量的本文公开的化合物的量为约100mg。在一个具体实施方案中，以单位剂量的本文公开的化合物的量为约150mg。

一般而言，以一次或多次剂量给予有需要的人类受试者的本文公开的化合物的每日总剂量为5至300mg。在某些实施方案中，本文公开的化合物的每日总剂量在约5至约300、约15至约300、约25至约300、约50至约300、约75至约300、约5至约250、约15至约250、约25至约250、约50约250、约75至约250、约5至约200、约15至约200、约25至约200、约50至约200、约75至约200、约5至约175、约15至约175、约25至约175、约50至约175、约75至约175、约5至约150、约15至约150、约25至约150、约50至约150、约75至约150或约100至约150mg的范围内。

一般而言，以一次或多次剂量给予人类受试者的本文公开的化合物的每日总剂量为约11mmol至约667mmol。在某些实施方案中，本文公开的化合物的每日总剂量在约11至约667，约33至约667，约56至约667，约111至约667，约167至约667，约11至约556，约33至约556，约56至约556、约111约556、约167至约556、约11至约445、约33至约445、约56至约445、约111至约445、约167至约445、约11至约389、约33至约389、约56至约389、约111至约389、约167至约389、约11至约334、约33至约334、约56至约334、约111至约334、约167至约334或约222至约334mmol的范围内。

在某些实施方案中，治疗过程包括每天的负荷剂量持续一天或多天，随后是每天的减少或正常剂量持续一天或多天。例如，治疗过程可以包括第一天的负荷剂量，随后在疗程的剩余时间内每天减少或正常剂量。合适的负荷剂量可以选自上述示例性的每日总剂量。合适的减少的或正常的剂量也可以选自上述示例性的每日总剂量。在某些实施方案中，负荷剂量为约150mg，减少剂量或正常剂量为100mg。例如，一个疗程可以包括第一天150mg的负荷剂量，随后在疗程的剩余时间内每天100mg的减少剂量或正常剂量。

B.药学上可接受的赋形剂

示例性的药学上可接受的赋形剂包括但不限于稀释剂(填充剂)、粘合剂、润滑剂、崩解剂、pH调节剂或缓冲剂、防腐剂、抗氧化剂、增溶剂、润湿剂或乳化剂、增塑剂、着色剂(如颜料和染料)、调味剂或甜味剂、增稠剂、软化剂、保湿剂、稳定剂、助流剂、溶剂或分散介质、表面活性剂、成孔剂以及包衣或基质材料。

在一些实施方案中，如本文所述的片剂、珠剂、颗粒剂和颗粒含有以下药学上可接受的赋形剂中的一种或多种：稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、颜料、稳定剂和表面活性剂。如果需要，片剂、珠剂、颗粒剂和颗粒还可以含有少量无毒辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、染料、pH缓冲剂和防腐剂。

包衣或基质材料的实例包括但不限于：纤维素聚合物(例如，甲基纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、醋酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、醋酸偏苯三酸纤维素和羧甲基纤维素钠)、乙烯基聚合物和共聚物(例如，聚乙烯吡咯烷酮、聚乙酸乙烯酯、聚乙酸乙烯酯邻苯二甲酸酯、乙酸乙烯酯-巴豆酸共聚物以及乙烯-乙酸乙烯酯共聚物)、丙烯酸聚合物和共聚物(例如，由丙烯酸、甲基丙烯酸、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯和可以商品名商购获得的其他甲基丙烯酸树脂形成的那些)、可酶降解的聚合物(例如，偶氮聚合物、果胶、壳聚糖、直链淀粉和瓜尔胶)、玉米醇溶蛋白、虫胶和多糖。在一些实施方案中，包衣或基质材料可含有一种或多种赋形剂，例如增塑剂、着色剂、助流剂、稳定剂、成孔剂和表面活性剂。

在一些实施方案中，包衣或基质材料是pH敏感性或pH响应性聚合物，例如以商品名商购的肠溶聚合物。例如，/>L30D-55和L100-55在pH 5.5及以上时可溶；/>L100在pH 6.0及以上时可溶；由于酯化程度较高，在pH 7.0及以上时可溶。

在一些实施方案中，包衣或基质材料是具有不同程度的渗透性和可膨胀性的水不溶性聚合物，例如NE、RL和RS。

根据包衣或基质材料，药物制剂的分解/降解或结构变化可能发生在胃肠道的不同位置。在一些实施方案中，选择包衣或基质材料使得药物制剂可以在暴露于胃酸后保留并在口服施用后在肠中释放活性成分。

稀释剂，也称为“填充剂”，可以增加固体剂量制剂的体积，从而提供用于片剂或形成珠剂、颗粒剂或颗粒的实际尺寸。合适的稀释剂包括但不限于：二水合磷酸二钙、硫酸钙、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素、微晶纤维素、高岭土、氯化钠、干淀粉、水解淀粉、预胶化淀粉、二氧化硅、氧化钛、硅酸镁铝、糖粉及其组合。

粘合剂用于赋予固体剂型制剂粘合性，从而确保片剂、珠剂、颗粒剂或颗粒在固体剂型制剂形成后保持完整。合适的粘合剂材料包括但不限于：淀粉、预胶化淀粉、明胶、糖(如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、乳糖和山梨糖醇)、聚乙二醇、蜡、天然和合成树胶(如阿拉伯树胶、黄芪胶和海藻酸钠)、纤维素(例如羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素和乙基纤维素)、veegum(硅酸铝镁)和合成聚合物(例如丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸和聚乙烯吡咯烷酮)及其组合。

润滑剂用于促进片剂的制造。合适的润滑剂包括但不限于硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸、山嵛酸甘油酯、聚乙二醇、滑石和矿物油。

崩解剂用于促进固体剂型制剂在给药后崩解或“分解”，通常包括但不限于：淀粉、羟基乙酸淀粉钠、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、预胶化淀粉、粘土、纤维素、树胶和交联聚合物，例如交联聚乙烯吡咯烷酮(例如，来自GAF Chemical Corp.的XL)。

增塑剂通常用于产生或促进可塑性和柔韧性并降低脆性。增塑剂的实例包括聚乙二醇、丙二醇、三醋精、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、癸二酸二丁酯、柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、乙酰基柠檬酸三乙酯、蓖麻油和乙酰化单甘油酯。

稳定剂用于抑制或延迟药物制剂中活性成分的分解反应或稳定分散体中的颗粒。例如，当分解反应涉及药物制剂中活性成分的氧化反应时，稳定剂可以是抗氧化剂或还原剂。稳定剂还包括非离子乳化剂，例如脱水山梨醇酯、聚山梨醇酯和聚乙烯吡咯烷酮。

助流剂用于减少成膜和干燥过程中的粘附效应。示例性助流剂包括但不限于滑石、硬脂酸镁和单硬脂酸甘油酯。

防腐剂可以抑制药物制剂的变质和/或分解。微生物生长、真菌生长和不希望的化学或物理变化中的一种或多种可能导致变质或分解。合适的防腐剂包括苯甲酸盐(例如苯甲酸钠)、抗坏血酸、羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸正丙酯、对羟基苯甲酸正丁酯、山梨酸钾、山梨酸、丙酸盐(例如丙酸钠)、氯丁醇、苯甲醇及其组合。

表面活性剂可以是阴离子、阳离子、两性或非离子表面活性剂。示例性阴离子表面活性剂包括但不限于含有羧酸根、磺酸根或硫酸根离子的那些。阴离子表面活性剂的实例包括长链(例如13-21)烷基磺酸钠、钾、铵(例如十二烷基硫酸钠)、烷基芳基磺酸盐(例如十二烷基苯磺酸钠)和二烷基磺基琥珀酸钠(例如双-(2-乙基硫氧基)-磺基琥珀酸钠)。阳离子表面活性剂包括但不限于季铵化合物，例如苯扎氯铵、苄索氯铵、西曲溴铵、硬脂基二甲基苄基氯化铵、聚氧乙烯和椰油胺。非离子表面活性剂的实例包括乙二醇单硬脂酸酯、丙二醇肉豆蔻酸酯、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、聚甘油-4-油酸酯、脱水山梨糖醇酰化物、蔗糖酰化物、PEG-150月桂酸酯、PEG-400单月桂酸酯、聚氧乙烯单月桂酸酯、聚山梨酯、聚氧乙烯辛基苯基醚、PEG-1000鲸蜡基醚、聚氧乙烯十三烷基醚、聚丙二醇丁醚、泊洛沙姆(例如泊洛沙姆401)、硬脂酰单异丙醇酰胺和聚氧乙烯氢化牛脂酰胺。两性表面活性剂的实例包括但不限于N-十二烷基-β-丙氨酸钠、N-月桂基-β-亚氨基二丙酸钠、肉豆蔻酰两性乙酸盐、月桂基甜菜碱和月桂基磺基甜菜碱。

液体形式的药物制剂通常含有溶剂或分散介质，例如水、水溶液(例如盐水、缓冲盐水等)、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、油(例如植物油，例如花生油、玉米油、芝麻油等)及其组合。在一些实施方案中，液体形式的药物制剂是水性制剂。用于静脉内制剂的合适的溶剂或分散介质包括但不限于水、盐水、缓冲盐水(例如磷酸盐缓冲盐水)和林格氏溶液(Ringer’ssolution)。

C.药学上可接受的载体

在一些实施方案中，使用药学上可接受的载体制备药物制剂，所述载体封装、包埋、截留、溶解、分散、吸收和/或结合本文公开的化合物或组合物。药学上可接受的载体由被认为安全的材料组成，并且可以施用于受试者而不会引起不希望的生物副作用或不希望的相互作用。优选地，药学上可接受的载体不干扰化合物或组合物发挥其功能的有效性。药学上可接受的载体可以由可生物降解的材料、不可生物降解的材料或其组合形成。上述药学上可接受的赋形剂可以部分或全部存在于药学上可接受的载体中。

在一些实施方案中，药学上可接受的载体是控释载体，例如延迟释放载体、持续释放(延长释放)载体和脉冲释放载体。

在一些实施方案中，药学上可接受的载体是pH敏感的或pH响应性的。在一些形式中，药学上可接受的载体可以在一定的pH范围内分解或降解。在一些形式中，药学上可接受的载体在经历pH变化时可以经历结构变化。

示例性的药学上可接受的载体包括但不限于：纳米颗粒、微粒及其组合；脂质体；水凝胶；聚合物基质；和溶剂系统。

在一些实施方案中，药学上可接受的载体是纳米颗粒、微粒或其组合。在一些实施例中，化合物或组合物嵌入由纳米颗粒、微粒或其组合的材料形成的基质中。

纳米颗粒、微粒或其组合可以是可生物降解的，并且任选地能够以受控速率生物降解以递送化合物或组合物。纳米颗粒、微粒或其组合可由多种材料制成。无机和有机材料都可以使用。可以使用聚合物材料和非聚合物材料。

例如，纳米颗粒、微粒或其组合由一种或多种生物相容性聚合物形成。在一些形式中，生物相容性聚合物是可生物降解的。在一些形式中，生物相容性聚合物是不可生物降解的。在一些形式中，纳米颗粒、微粒或其组合由生物可降解聚合物和不可生物降解聚合物的混合物形成。用于形成纳米颗粒、微粒或其组合的聚合物可被定制以优化纳米颗粒、微粒或其组合的不同特性，包括：(i)化合物和聚合物之间的相互作用以提供化合物的稳定性并在递送时保留活性；(ii)聚合物降解速率以及由此的释放速率；(iii)通过化学改性的表面特性和靶向能力；和(iv)颗粒孔隙率。

示例性聚合物包括但不限于：由内酯制备的聚合物，例如聚己内酯(PCL)，聚羟基酸及其共聚物例如聚(乳酸)(PLA)，聚(乙醇酸)(PGA)，聚(乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)及其共混物，聚氰基丙烯酸烷基酯，聚氨酯，聚氨基酸例如聚-L-赖氨酸(PLL)，聚(戊酸)和聚-L-谷氨酸，甲基丙烯酸羟丙酯(HPMA)，聚酐，聚原酸酯，聚(酯酰胺)，聚酰胺，聚(酯醚)、聚碳酸酯，乙烯醋酸乙烯酯聚合物(EVA)，聚乙烯醇(PVA)，聚乙烯醚，聚乙烯酯例如聚(乙酸乙烯酯)，聚卤乙烯例如聚氯乙烯(PVC)，聚乙烯吡咯烷酮，聚硅氧烷，聚苯乙烯(PS)，纤维素，包括衍生纤维素，例如烷基纤维素，羟烷基纤维素，纤维素醚，纤维素酯，硝基纤维素，羟丙基纤维素和羧甲基纤维素，丙烯酸的聚合物，例如聚(甲基)丙烯酸甲酯(PMMA)，聚(甲基)丙烯酸乙酯，聚(甲基)丙烯酸丁酯，聚(甲基)丙烯酸异丁酯，聚(甲基)丙烯酸己酯，聚(甲基)丙烯酸异癸酯，聚(甲基)丙烯酸月桂酯，聚(甲基)丙烯酸苯酯，聚(丙烯酸甲酯)，聚(丙烯酸异丙酯)，聚(丙烯酸异丁酯)和聚(丙烯酸十八烷基酯)(本文统称为“聚丙烯酸”)，聚二恶烷酮及其共聚物，聚羟基链烷酸酯，聚富马酸丙烯酸酯，聚甲醛，泊洛沙姆，聚(丁酸)，三亚甲基碳酸酯，聚磷腈，多糖，肽或蛋白质，以及它们的共混物。

在一些实施方案中，形成纳米颗粒、微粒或其组合的一种或多种生物相容性聚合物包括FDA批准的生物可降解聚合物，例如聚羟基酸(例如，PLA、PLGA和PGA)、聚酐和聚羟基链烷酸酯，例如聚(3-丁酸酯)和聚(4-丁酸酯)。

除聚合物之外的材料可用于形成纳米颗粒、微粒或其组合。合适的材料包括表面活性剂。在纳米粒子、微粒或其组合中使用表面活性剂可以通过例如减少粒子-粒子相互作用来改善表面性质，并且使粒子表面的粘合性降低。天然存在的表面活性剂和合成表面活性剂均可掺入纳米颗粒、微粒或其组合中。示例性的表面活性剂包括但不限于磷酸甘油酯例如磷脂酰胆碱(例如，L-α-磷脂酰胆碱二棕榈酰)、二磷脂酰甘油、十六烷醇、脂肪醇、聚氧乙烯-9-月桂基醚、脂肪酸例如棕榈酸和油酸、脱水山梨醇三油酸酯、甘胆酸酯、表面活性素、泊洛昔姆、脱水山梨醇脂肪酸酯类例如脱水山梨糖醇三油酸酯、泰洛沙泊和磷脂。

纳米颗粒、微粒或其组合可包含多个层。这些层可以具有相似或不同的活性成分释放动力学曲线。例如，纳米颗粒、微粒或其组合可具有被一层或多层附加层包围的控释核心。一层或多层附加层可包括即时释放层，优选位于纳米颗粒、微粒或其组合的表面上。即时释放层可以在给药后不久提供活性成分的丸剂。

可选择纳米颗粒、微粒或其组合的组成和结构，使得纳米颗粒、微粒或其组合是pH敏感的或pH响应性的。在一些实施例中，纳米颗粒、微粒或其组合由pH敏感或pH响应性聚合物形成，例如如上所述以商品名商购的肠溶聚合物。根据颗粒材料，纳米颗粒、微粒或其组合的分解/降解或结构变化可以发生在胃肠道的不同位置。在一些实施方案中，选择颗粒材料使得纳米颗粒、微粒或其组合能够在暴露于胃酸中存活并在口服施用后在肠中释放活性成分。/>

D.控制释放

在一些实施方案中，药物制剂可以是控释制剂。控释制剂的实例包括延长释放制剂、延迟释放制剂和脉冲释放制剂。

1.延长释放

在一些实施方案中，将延长释放制剂制备为扩散或渗透体系，例如，如“Remington-The science and practice of pharmacy”(第20版，Lippincott Williams&Wilkins，2000)中所述。

扩散体系通常呈基质形式，通常通过将活性成分与缓慢溶解的载体混合来制备，任选地制成片剂形式。用于制备基质的合适类型的材料包括塑料、亲水性聚合物和脂肪化合物。合适的塑料包括但不限于丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物、聚氯乙烯和聚乙烯。合适的亲水性聚合物包括但不限于纤维素聚合物，例如甲基乙基纤维素、羟烷基纤维素(例如羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素)、羧甲基纤维素钠、934、聚环氧乙烷及其组合。合适的脂肪化合物包括但不限于各种蜡例如巴西棕榈蜡和三硬脂酸甘油酯、蜡型物质例如氢化蓖麻油和氢化植物油、以及它们的组合。

在一些实施例中，塑料是药学上可接受的丙烯酸聚合物。在一些实施方案中，药学上可接受的丙烯酸类聚合物选自丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸乙氧基乙酯共聚物、甲基丙烯酸氰基乙酯共聚物、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物、聚(丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸)、甲基丙烯酸烷基胺共聚物、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸)、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚(甲基丙烯酸酐)和甲基丙烯酸缩水甘油酯共聚物。

在一些实施方案中，药学上可接受的丙烯酸类聚合物可以是铵基甲基丙烯酸酯共聚物。铵基甲基丙烯酸酯共聚物是本领域众所周知的，并且被描述为具有低含量季铵基团的丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的完全聚合的共聚物。

在一些实施方案中，药学上可接受的丙烯酸聚合物是丙烯酸类树脂漆，例如以商品名商购的那些。在一些实施方案中，药学上可接受的丙烯酸聚合物包含两种丙烯酸类树脂漆/>RL(例如/>RL30D)和/>RS(/>RS30D)的混合物。/>RL30D和/>RS30D是丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的共聚物，季铵基团含量低，铵基与剩余中性甲基丙烯酸酯的摩尔比在/>RL30D中为1:20，在/>RS30D中为1:40。代码名称RL(高渗透性)和RS(低渗透性)是指这些聚合物的渗透性特性。/>RL/RS混合物不溶于水和消化液。然而，形成的包含其的多颗粒体系在水溶液和消化液中是可膨胀和可渗透的。RL/RS混合物可以以任何所需比例制备，以便最终获得具有所需释放曲线的延长释放制剂。合适的延长释放多颗粒体系可以例如从90％/>RL+10％RS、到50％/>RL+50％/>RS、以及到10％RL+90％/>RS获得。在一些实施方案中，药学上可接受的丙烯酸聚合物还可以是或包括其他丙烯酸类树脂漆，例如/>S-100、L-100及其混合物。

具有不同释放机制或曲线的基质可以组合成包含单个或多个单元的最终剂型。多个单元的实例包括但不限于含有活性成分的珠剂、颗粒剂和/或颗粒的多层片剂和胶囊。可以通过下列方法将立即释放部分添加到延长释放体系中：使用包衣或压缩工艺在延长释放核的顶部施加立即释放层，或者在多单元体系中，例如包含延长释放和立即释放珠粒的胶囊。

含有一种或多种亲水性聚合物的延长释放片剂可以通过本领域公知的技术例如直接压片、湿法制粒和干法制粒来制备。

含有一种或多种脂肪化合物的延长释放片剂可以使用本领域已知的方法例如直接共混法、凝结法和水分散法来制备。在凝结法中，将活性成分与一种或多种脂肪化合物混合并喷雾凝结或凝结并筛选和加工。

备选地，可以使用渗透体系或通过将半渗透包衣施加到固体剂型来制备延长释放制剂。在后一种情况下，可以通过以合适的比例组合低渗透性和高渗透性包衣材料来实现所需的释放曲线。

2.延迟释放

延迟释放制剂可以通过用包衣包覆固体剂型来制备。在一些实施方案中，包衣在胃的酸性环境中是不溶的和不可渗透的，并且在肠和/或下胃肠道的酸性较低的环境中变得可溶或可渗透。在一些实施方案中，固体剂型是用于掺入胶囊中的片剂、用作“包衣核”剂型中的内核的片剂、或含有活性成分的多个珠剂、颗粒剂和/或颗粒，其用于掺入片剂或胶囊中。

合适的包衣材料包括生物可蚀解的、可逐渐水解的、逐渐水溶性的和可酶促降解的聚合物，例如上述的那些。在一些实施方案中，包衣材料是肠溶聚合物或包含肠溶聚合物。也可以使用不同包衣材料的组合。还可以应用使用不同包衣材料的多层包衣。

本领域技术人员可以通过评估用不同量的包衣材料制备的制剂的单独的释放曲线来容易地确定包衣或包衣材料的合适重量。

包衣材料还可以含有一种或多种常规添加剂，例如增塑剂(任选地代表相对于包衣材料的干重的约10重量％至50重量％)、着色剂、稳定剂、助流剂等，例如如上所述的那些。

3.脉冲释放

脉冲释放制剂以间隔的时间间隔释放多个剂量的活性成分。一般而言，在施用(例如口服施用)脉冲释放制剂时，初始剂量的释放基本上是立即的，例如第一次释放“脉冲”发生在施用的约三小时、两小时或一小时内。该初始脉冲之后可以是第一时间间隔(滞后时间)，在此期间从制剂中释放很少活性成分或没有活性成分释放，之后可以释放第二剂量。类似地，可以设计第二和第三释放脉冲之间的第二滞后时间(几乎无释放的间隔)。滞后时间的持续时间将根据制剂设计而变化，尤其是给药间隔的长度，例如每日两次给药曲线、每日三次给药曲线等。

对于提供每日两次剂量曲线的脉冲释放制剂，它们提供活性成分的两个释放脉冲。在一些实施方案中，第一和第二释放脉冲之间的几乎无释放的间隔可具有3小时至14小时之间的持续时间。

对于提供每日三次剂量曲线的脉冲释放制剂，它们提供活性成分的三个释放脉冲。在一些实施方案中，两个相邻脉冲之间的几乎无释放的间隔可以具有2小时至8小时之间的持续时间。

在一些实施方案中，脉冲释放制剂含有多种具有不同释放动力学的药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，脉冲释放制剂含有药学上可接受的载体，其具有负载有活性成分的多个层。在一些实施方案中，各层可具有不同的释放动力学。在一些实施方案中，各层可以通过延迟释放包衣分开。例如，脉冲释放制剂可以具有用于第一释放脉冲的在表面上负载有活性成分的第一层和用于第二释放脉冲的第二层，例如负载有活性成分的核；第二层可以被延迟释放包衣包围，这在两个释放脉冲之间产生了滞后时间。

在一些实施方案中，脉冲释放曲线通过封闭的制剂和任选密封的容纳至少两个“剂量单位”的胶囊来实现，其中胶囊内的每个剂量单位提供不同的释放曲线。在一些实施方案中，至少一个剂量单位是延迟释放剂量单位。一个或多个延迟释放剂量单位的控制可以通过一个或多个剂量单位上的控制释放聚合物包衣或通过将活性成分掺入控制释放聚合物基质中来实现。在一些实施方案中，每个剂量单位可以包含压缩或模制的片剂，其中胶囊内的每个片剂提供不同的释放曲线。

E.不同给药途径的示例性制剂

患有本文所述的病症、障碍或疾病的受试者可以通过靶向或全身施用，经由口服、吸入、局部、经粘膜或粘膜下、皮下、肠胃外、肌内、静脉内或透皮施用含有本文所述的化合物或组合物的制剂来治疗。在一些实施方案中，药物制剂适合口服施用。在一些实施方案中，药物制剂适合吸入或鼻内施用。在一些实施方案中，药物制剂适合透皮或局部施用。在一些实施方案中，药物制剂适合于皮下、静脉内、腹膜内、肌内、肠胃外或粘膜下施用。

在一些实施方案中，药物制剂是口服药物制剂。在一些实施方案中，活性成分可以与如上所述的一种或多种药学上可接受的赋形剂混合并以片剂、丸剂、囊片或胶囊的形式使用。例如，相应的口服药物制剂可以含有一种或多种以下药学上可接受的赋形剂或类似性质的赋形剂：如上所述的粘合剂、如上所述的崩解剂、如上所述的润滑剂、如上所述的助流剂、甜味剂(例如蔗糖和糖精)和调味剂(例如水杨酸甲酯和水果调味剂)。在一些实施方案中，当口服药物制剂是胶囊形式时，除了上面列出的一种或多种材料之外，它还可以含有液体载体(例如脂肪油)。在一些实施方案中，当口服药物制剂为胶囊形式时，每个胶囊可含有活性成分的多个珠剂、颗粒剂和/或颗粒。在一些实施方案中，口服药物制剂可以含有一种或多种改变剂量单位的物理形式或一种或多种药物性质的其他材料，例如，如前面部分中描述的多糖、虫胶或肠溶聚合物的包衣。

在一些实施方案中，口服药物制剂可以是酏剂、混悬剂、糖浆、糯米纸囊剂、口香糖等形式。除了活性成分之外，糖浆还可含有一种或多种甜味剂(例如蔗糖和糖精)、一种或多种调味剂、一种或多种防腐剂和/或一种或多种染料或着色剂。

在一些实施方案中，药物制剂是肠胃外药物制剂。在一些实施方案中，肠胃外药物制剂可以封装在由玻璃或塑料制成的安瓿、注射器或单剂量或多剂量小瓶中。在一些实施方案中，肠胃外药物制剂是静脉内药物制剂。在一些实施方案中，静脉内药物制剂含有活性成分的液体的药学上可接受的载体。合适的液体的、药学上可接受的载体包括但不限于生理盐水、抑菌水、Cremophor EL^TM(BASF，Parsippany，NJ)、磷酸盐缓冲盐水(PBS)及其组合。

在一些实施方案中，药物制剂是局部药物制剂。局部药物制剂的合适形式包括用于施用至直肠、阴道、鼻或口腔粘膜的洗剂、混悬剂、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、酊剂、喷雾剂、粉剂、糊剂、缓释透皮贴剂和栓剂。在一些实施方案中，增稠剂、软化剂(例如矿物油、羊毛脂及其衍生物和角鲨烯)、湿润剂(例如山梨糖醇)和/或稳定剂可用于制备局部药物制剂。增稠剂的实例包括凡士林、蜂蜡、黄原胶和聚乙烯。

在一些实施方案中，药物制剂是鼻内药物制剂。在一些实施方案中，鼻内药物制剂是水悬浮液的形式，其可以任选地放置在泵喷雾瓶中。除水之外，水悬浮液可含有一种或多种药学上可接受的赋形剂，例如悬浮剂(例如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素)、湿润剂(例如甘油和丙二醇)、酸、碱和/或用于调节pH的pH缓冲剂(例如柠檬酸、柠檬酸钠、磷酸、磷酸钠及其组合)、表面活性剂(例如Polysorbate 80)和防腐剂(例如苯扎氯铵、苯乙醇和山梨酸钾)。

在一些实施方案中，药物制剂是吸入药物制剂。在一些实施方案中，吸入药物制剂可以是气凝胶悬浮液、干粉或液体悬浮液的形式。吸入药物制剂可以制备用于作为鼻喷雾剂或吸入器例如定量吸入器(MDI)递送。在一些实施方案中，MDI可以递送悬浮在氯氟烃推进剂例如CFC-11和CFC-12或非氯氟烃或替代推进剂例如碳氟化合物(例如，HFC-134A、HFC-227等)中的气雾化颗粒，其具有或没有表面活性剂或合适的架桥剂。也可以使用干粉吸入器，通过呼吸激活或通过压力输送。

在一些实施方案中，活性成分与药学上可接受的载体一起制备，所述载体将保护其在施用后免于快速降解或从受试者体内消除，例如前面章节中描述的控释制剂。

V.使用方法

公开了治疗有需要的受试者的病症、障碍或疾病的方法。该方法包括向受试者施用有效量的本文公开的化合物、组合物或药物制剂。

化合物、组合物或药物制剂可以以多种方式施用，取决于是否需要局部施用或全身施用。在一些实施方案中，将化合物、组合物或药物制剂直接施用至受试者的特定身体位置，例如局部施用和鼻内施用。在一些实施方案中，将化合物、组合物或药物制剂以全身方式施用，例如肠内施用(例如，口服施用)和肠胃外施用(例如，注射、输注和植入)。示例性施用途径包括口服施用、静脉内施用如静脉内注射或输注、鼻内施用和局部施用。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂经口服施用。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂经静脉内施用。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂经鼻内施用。

在一些实施方案中，受试者是人类。在一些实施方案中，受试者是18岁以下的人。在一些实施方案中，受试者是非人类动物，例如家养宠物、家畜和农场动物以及动物园动物。在一些实施例中，非人类动物可以是非人类灵长类动物。

A.适应症

正常的突触传递不会产生可检测到的酸化。相反，兴奋性突触传递通常会产生短暂的碱化(Tong等人，J Neurophysiol,2006,95:3686-97；Makani和Chesler,J Neurosci,2007,27:7438-7446)。因此，在正常的兴奋性突触传递下，本文公开的化合物不会明显影响它们的pH敏感性。此外，正常大脑的突触外NMDAR通常不会出现细胞外pH值降低的情况。因此，本文公开的化合物在正常条件下抑制含GluN2B的NMDAR的效果较差。

本文公开的化合物的pH敏感性和高效力适合于伴随含GluN2B的NMDAR的细胞外环境酸化的病症、障碍和疾病。值得注意的是，这些化合物的pH敏感性可以有效治疗一系列可能导致大脑局部酸化的适应症，例如中风和蛛网膜下腔出血。

在酸化的细胞外环境下，化合物针对含有GluN2B的NMDAR的效力增强，这可以促进其在急性损伤(例如缺血)后的神经保护作用。缺血是由产生HCO₃ ^-和H⁺的CO₂升高以及产生乳酸的无氧代谢转变所驱动，通常会降低整个细胞外空间的pH值。这些机制是缺血期间梗死和半影酸化的强大驱动因素，其可以影响突触和非突触含GluN2B的NMDAR。

本公开的化合物的效用还可以应用于具有高频神经元放电的病症、障碍或疾病，所述高频神经元放电产生pH代谢变化和局部酸化，例如炎性疼痛。

可以通过所公开的化合物、组合物和制剂治疗的示例性病症、障碍或疾病包括但不限于中风、蛛网膜下腔出血、脑缺血、脑血管痉挛、缺氧、急性CNS损伤、脊髓损伤、创伤性脑损伤、冠状动脉搭桥、持续性或慢性咳嗽、药物滥用障碍、阿片类药物戒断、阿片类药物耐受、双相型障碍、有自杀意念、疼痛、纤维肌痛、抑郁、产后抑郁、静止性震颤、痴呆、癫痫、癫痫发作、运动障碍和神经退行性疾病。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病选自疼痛、抑郁、中风和蛛网膜下腔出血。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是中风。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂用于治疗或预防中风相关损伤。在一些实施方案中，在中风的紧急护理下施用化合物、组合物或药物制剂，用于中风的维持治疗和/或用于中风的康复。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是蛛网膜下腔出血(SAH)，例如动脉瘤性SAH。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂用于治疗或预防SAH相关损伤。在一些实施方案中，在SAH的紧急护理下施用化合物、组合物或药物制剂，用于SAH的维持治疗和/或用于SAH的康复。

SAH是指血液聚集在蛛网膜(覆盖大脑的一层膜)下方的异常情况。该区域称为蛛网膜下腔，通常含有脑脊液。血液在蛛网膜下腔积聚，以及由此引起的血管痉挛，可导致中风、癫痫发作和其他并发症。SAH可能是自发的，也可能是由头部受伤引起的。该化合物、组合物或药物制剂可用于治疗经历SAH的受试者。例如，化合物、组合物或药物制剂可用于预防或限制SAH的一种或多种毒性作用，包括例如可由SAH引起的中风和缺血。备选地，化合物、组合物或药物制剂可用于治疗患有由头部损伤引起的创伤性蛛网膜下腔出血的受试者。

在某些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂可用于改善由SAH例如动脉瘤性SAH引起的神经学缺陷。在某些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂在病症治疗早期施用，例如在止颅出血手术时施用。～30％的动脉瘤SAH后会发生迟发性脑缺血(DCI)。在某些实施方案中，施用化合物、组合物或药物制剂用于预防与SAH相关的DCI。在某些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂在DCI风险最高的时间期间施用，例如初次出血后3-14天。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是疼痛。在一些实施方案中，疼痛是慢性疼痛。在一些实施方案中，疼痛是癌性疼痛。在一些实施方案中，疼痛是神经性疼痛。神经性疼痛的实例包括周围糖尿病性神经病、带状疱疹后神经痛、复杂区域疼痛综合征、周围神经病、类风湿性关节炎、化疗引起的神经性疼痛、癌症神经性疼痛、神经性腰痛、HIV神经性疼痛、三叉神经痛和中枢性中风后疼痛。

在一些实施方案中，神经性疼痛由外周或CNS病理事件引起，包括但不限于，创伤，缺血，感染(如HIV感染，带状疱疹和带状疱疹后神经痛)，代谢性疾病和内分泌疾病(例如糖尿病，糖尿病神经病变，淀粉样变性和淀粉样多发性神经病(原发性和家族性))，血管炎性神经病，与吉兰-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome)相关的神经病，与法布里病(Fabry’s disease)相关的神经病，解剖异常引起的卡压，三叉神经痛和其他CNS疼痛，恶性肿瘤，隐原性疼痛(如特发性远端小纤维神经病)，炎症或自身免疫性疾病(如脱髓鞘炎症性疾病，类风湿性关节炎，系统性红斑狼疮和干燥综合征)，神经纤维受压(例如神经根病和腕管综合症)，接触毒素或药物，饮食或吸收异常，免疫球蛋白血症，遗传性异常和切断术(包括乳房切除术)。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是抑郁或产后抑郁。在一些实施方案中，抑郁是难治性抑郁。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是神经退行性疾病。在一些实施方案中，神经退行性疾病是亨廷顿病、阿尔茨海默病或帕金森病。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂用于减轻神经退行性疾病的一种或多种症状。示例性症状包括痴呆(阿尔茨海默病)和肌张力障碍和相关运动障碍(帕金森病)。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂用于向患有神经退行性疾病的受试者提供认知增强。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是癫痫或癫痫发作。在一些实施方案中，需要治疗的受试者的癫痫或癫痫发作可以包括：现有药物不能充分控制的癫痫(即难治性癫痫)、婴儿痉挛症以及由罕见疾病或遗传性疾病(例如基因突变)引起的癫痫或癫痫发作，这些疾病或遗传病会产生癫痫、癫痫发作、痉挛、大脑异常同步活动和/或与增强的神经元同步相关的其他状况。在一些实施方案中，受试者可以是患有癫痫或癫痫发作的儿科患者。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂用于降低受试者的癫痫或癫痫发作的严重性和/或强度。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂用于降低受试者的癫痫或癫痫发作的频率。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是痴呆。在一些实施方案中，痴呆是AIDS诱发的痴呆。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是缺氧。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂用于治疗或预防缺氧相关的损伤。在一些实施方案中，在针对缺氧事件的紧急护理下施用化合物、组合物或药物制剂，用于缺氧的维持治疗和/或用于缺氧的康复。在一些实施方案中，缺氧是由呼吸功能不全、长时间使用呼吸机或两者引起的。在一些实施方案中，呼吸功能不全、长时间使用呼吸机或两者与COVID-19相关，包括由COVID-19引起的住院治疗。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是脑缺血。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂用于治疗或预防脑缺血相关损伤。在一些实施方案中，在针对脑缺血事件的紧急护理下施用化合物、组合物或药物制剂，用于脑缺血的维持治疗和/或用于脑缺血的康复。在一些实施方案中，脑缺血是由创伤性脑损伤、冠状动脉搭桥、颈动脉血管成形术或低温停循环后的新生儿缺血引起。

在一些实施方案中，病症、障碍或疾病是脑血管痉挛。在一些实施方案中，脑血管痉挛由SAH引起或诱导。

B.剂量和给药

在一些实施方案中，施用化合物、组合物或药物制剂足够的时间段以减轻与所治疗的病症、障碍或疾病相关的一种或多种不期望的症状和/或一种或多种临床体征。在一些实施方案中，每天施用化合物、组合物或药物制剂少于三次。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂每天施用一次或两次。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂每天施用一次。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂以单一口服剂量每天一次施用。在一些实施方案中，化合物、组合物或药物制剂以单次静脉内剂量每天施用一次。

对于每次施用，化合物的剂量可以在5至300mg之间，或如上所述。在一些实施方案中，每次施用的化合物的剂量在25至200mg之间。在一些实施方案中，每次施用的化合物的剂量在25至175mg之间。在一些实施方案中，每次施用的化合物的剂量在25至150mg之间。在一些实施方案中，每次施用的化合物的剂量在50至200mg之间。在一些实施方案中，每次施用的化合物的剂量在75至200mg之间。在一些实施方案中，每次施用的化合物的剂量在50至175mg之间。在一些实施方案中，每次施用的化合物的剂量在75至150mg之间。

在某些实施方案中，以每天化合物的负荷剂量施用化合物、组合物或药物制剂持续一天或多天，然后每天以减少的或正常剂量的化合物施用持续一天或多天以完成疗程。例如，第一天以化合物的负荷剂量施用化合物、组合物或药物制剂，然后在剩余疗程中每天以减少的或正常的剂量施用。化合物的合适的负荷剂量可以选自上述示例性的每日总剂量。化合物的合适的降低或正常剂量也可以选自上述示例性的每日总剂量。在某些实施方案中，化合物的负荷剂量为约150mg，并且化合物的减少剂量或正常剂量为100mg。例如，第一天以150mg的化合物负荷剂量施用化合物、组合物或药物制剂，然后在剩余的疗程中每天以100mg的减少剂量或正常剂量的化合物施用。

实施例

下面的实施例描述了生成和评估GluN2B选择性负变构NMDAR调节剂的研究，与pH7.6相比，该调节剂在pH 6.9下对GluN2B的效力增强。

实施例1.示例性化合物的合成和表征

A.合成程序

将(R)-6-(环氧乙烷-2-基甲氧基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(100g,0.456mol)和1-(4-(三氟甲基)苯基)哌嗪(105克，0.456摩尔)在乙醇(1L)中的悬浮液在75℃下搅拌21小时，并通过HPLC监测。反应在75℃下15分钟内变成澄清溶液。将反应混合物冷却至50℃，过滤沉淀的固体并用乙醇(200mL)洗涤。将收集的固体真空干燥，得到粗产物(175g，85.3％)。

将粗制NP10679(来自多个批次的260克)置于5L圆底烧瓶中，在持续搅拌下向其中添加甲醇:丙酮(1:1)的预混合溶液。将悬浮液在搅拌下加热至50℃，直至其变得澄清(约30分钟)，然后通过2μM过滤器过滤。在15分钟内将澄清溶液冷却至30℃，并在剧烈搅拌下在10分钟内添加到水(13L)中。将沉淀的固体在30℃下搅拌30分钟，过滤，用水(7.8L)洗涤，并在真空盘式干燥器中在70℃下干燥48小时。该重结晶产生255g白色固体(产率98％)。重结晶产物的纯度和手性纯度经测定分别为>99％(通过HPLC)和>98％(通过手性HPLC)。

以(S)-6-(环氧乙烷-2-基甲氧基)-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮和1-(4-(三氟甲基)苯基)哌嗪为起始材料，采用类似的方法合成了NP10309。

表1和表2中的其他化合物使用与上述类似的方法以及美国专利号8,420,680和Wang等人，Neurocrit Care,2014,20:119-131中描述的方法合成。一般来说，化合物中的手性中心是通过相应环氧化物的开环反应产生的。

例如，Wang等人，Neurocrit Care,2014,20:119-131中描述了含苄基脲化合物10075的合成。以相同的方式合成其他的含苄基脲的化合物，包括10131、10165、10166、10189、10214、10215、10222、10224、10225、10272和10294。

含酚化合物10045的合成描述于美国专利号8,420,680中。以相同的方式合成了其他含酚化合物，包括NP10030、10039、10040、10052、10082、10171、10235、10243、10244、10245、10247和10249。

含苯并咪唑啉酮的化合物10146的合成描述于美国专利号8,420,680中。以相同的方式合成其他的稠环(双环)化合物，例如10228。

B.化学表征

NP10679:¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ9.90(brs,1H),δ7.50(d,J＝16Hz,1H),7.05(d,J＝16Hz,1H),6.85-6.70(m,3H),4.90(brd,1H),4.00-3.80(m,3H),3.30-3.20(m,4H),2.90-2.75(m,2H),2.70-2.30(m,8H).¹³CNMR(75MHz,CDCl₃):δ171.82,154.63,153.09,131.21,130.04,126.36,124.94,122.87,121.22,120.79,120.36,119.92,116.30,114.52,113.95,113.24,70.70,65.80,60.48,53.02,47.98,30.51,25.58.C₂₃H₂₆F₃N₃O₃的m/z计算值为500.47；测试值500.30[M+H].

实施例2.GluN2B效力和pH依赖性的测量

A.材料和方法

通过分别测量pH 6.9和7.6下的IC₅₀值，针对非洲爪蟾(Xenopus laevis)卵母细胞中表达的人GluN1-1a/GluN2B受体(以下简称GluN1/GluN2B)评估了表1和表2中的NP10679、NP10309和其他化合物的GluN2B效力和pH依赖性。

来自非洲爪蟾卵母细胞的双电极电压钳记录

V-VI期非洲爪蟾未受精卵母细胞购自Ecillary(德克萨斯州奥斯汀)，并注射5ngGluN1和10ng GluN2B cRNA。将分别编码NCBI参考序列NM_007327.3和NM_000834.3的人GluN1和GluN2B的cDNA进行线性化，并如前所述制备cRNA(Traynelis等人，J Neurosci,1998,18(16):6163-75)。注射后，将卵母细胞在18℃在巴斯培养液(88mM NaCl,1mM KCl,2.4mM NaHCO₃,10mM HEPES,0.82mM MgSO₄,0.33mM Ca(NO₃)₂,0.41mM CaCl₂,10U/mLPenStrep,and 0.1mg/mL庆大霉素,pH 7.4)中孵育。注射后2-7天，使用Warner OC725C放大器(V_HOLD＝-40mV)在22-23℃下进行双电极电压钳(TEVC)记录。简而言之，将卵母细胞灌注在通过添加NaOH或HCl分别调节至pH 7.6或6.9的记录溶液(90mM NaCl,1mM KCl,10mMHEPES,0.01mM EDTA,和0.5mM BaCl₂)中(通过向pH 7.6溶液中添加HCl来制备pH 6.9溶液，以保持两种溶液中Na⁺离子的浓度相等)。在饱和激动剂浓度(即，100μM谷氨酸和30μM甘氨酸)存在下，通过增加每种化合物的浓度直至获得稳态条件来获得化合物的浓度-响应曲线。一般来说，在来自≥2个实验的每个实验(即卵母细胞注射周期)使用4-10个卵母细胞进行卵母细胞记录。每个卵母细胞的浓度-响应关系由方程(1)拟合，

响应百分比＝(100-最小值)/(1+([浓度]/IC₅₀)^nH)+最小值 (1)

其中最小值是每种化合物的饱和浓度的残余响应(限制为≥0)，并且IC₅₀是引起半-最大抑制的化合物的浓度，并且nH是坡面(Hill slope)。

对于NP10679，还以与GluN2B类似的方式测试了GluN2A(NM_000833)、GluN2C(NM_000835)和GluN2D(NM_000836)NMDAR的活性，不同之处在于NP10679在3μM的单一浓度下进行测试。

B.结果

在pH 6.9和7.6下测量的化合物针对GluN2B的IC₅₀值显示在表1和2中。

表1显示了九对对映体针对GluN2B的IC₅₀值。在这些化合物中，R对映体与其相应的S对映异构体相比表现出更低的pH提升。此处，特定化合物的pH提升定义为其在pH 7.6下测定的IC₅₀值与其在pH 6.9下测定的IC₅₀值的比率。

在表1中，一些R对映异构体，例如10233、10249和10228，与其相应的S对映异构体相比，表现出较低的针对GluN2B的效力(即较高的IC₅₀)，而其他的R对映异构体与它们相应的S对映异构体相比对GluN2B表现出相当或更高的效力。

表1.九对对映异构体针对GluN2B的活性

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表2显示了六对对映异构体针对GluN2B的IC₅₀值。在这些化合物中，结构-活性关系与表1中获得的非常不同。值得注意的是，与它们相应的S对映异构体相比，R对映异构体表现出相当的甚至更高的pH提升。此外，每种R对映异构体都表现出与其相应的S对映异构体相当的或更高的针对GluN2B的效力。

例如，NP10679在pH 6.9时表现出23nM的IC₅₀值，在pH 7.6时表现出142nM的IC₅₀值，对应于6.2的pH提升。相比之下，其S对映异构体NP10309在pH 6.9时的IC₅₀值为111nM，在pH 7.6时的IC₅₀值为717nM，对应于6.5的pH提升。

表2.六对对映异构体针对GluN2B的活性

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此外，在pH 6.9下测量了NP10679针对GluN2A、GluN2C和GluN2D的活性。NP10679对GluN2B亚基的选择性高于GluN2A、GluN2C和GluN2D。在3μM对GluN2A、GluN2C和GluN2D没有明显的脱靶抑制(表3)。

表3.NP10679针对GluN2A、GluN2C和GluN2D的活性

实施例3.体外药物分析

A.材料和方法

肝微粒体稳定性、细胞色素P450抑制和血浆蛋白结合

使用人和小鼠肝微粒体(Xenotech，美国)评估代谢稳定性。测定的最终组合物包括1μM的测试化合物或由DMSO或乙腈储备液制备的参考标准物(丙咪嗪和双氯芬酸钠)，使得DMSO和乙腈的最终浓度分别为0.2％和0.8％。将测试化合物与0.5mg/mL微粒体蛋白一起温育，所述0.5mg/mL微粒体蛋白不含辅因子(单独100mM磷酸钾缓冲液，pH 7.4)或含有辅因子(5.0mM 6-磷酸葡萄糖、0.06U 6-磷酸葡萄糖脱氢酶、2.0mM MgCl₂、1.0mM NADP⁺/NADPH)。将测试化合物和标准物与人和小鼠肝微粒体在37℃下孵育；在0、5、15、30、60和120分钟时取出反应混合物的等分试样(100μL)。通过添加2.5mL叔丁基甲基醚来终止等分试样中的反应，并将样品摇动15分钟。然后，将样品在10℃下以4000rpm旋转15分钟，将有机相蒸发至干，然后用溶剂重构以进行LC-MS/MS分析。相对于0分钟时测试化合物的峰面积计算指定温育期后剩余的测试化合物的百分比。

通过根据制造商的方法，在96孔板中孵育2倍系列稀释液(9个样品)的测试化合物与试剂盒试剂和反应缓冲液，使用重组人亚型和Vivid CYP蓝色筛选试剂盒(Invitrogen，美国)完成对CYP2D6和CYP3A4的抑制。然后将板在室温下孵育30分钟，然后用读板器测量荧光。在这些研究中，使用参考标准酮康唑(CYP3A4)和奎尼丁(CYP2D6)作为对照。

根据制造商的说明(ThermoFisher，美国)，使用含有截留分子量为8,000道尔顿的透析膜的快速平衡透析(RED)装置进行血浆蛋白结合。将血浆样品(pH 7.4)和测试化合物溶液(1或5μM)或参考标准品(华法林(Warfarin)和普萘洛尔(Propranolol)，10μM)合并(DMSO最终浓度0.1％)。将300μL加标血浆样品添加到样品室中，并将500μL空白PBS缓冲液(pH 7.4)添加到缓冲室中。将RED装置用粘合膜密封，然后在37℃下以300rpm摇动孵育4小时。孵育后，从每个孔(加标血浆和缓冲液侧)取出等分试样(50μL)并用等体积的相应相反基质(空白缓冲液或空白血浆)稀释以消除基质效应，然后提取并通过LC-MS/MS进行分析。游离材料的量由下式确定：

％游离＝(缓冲液侧的测试化合物的LC-MS/MS峰面积/血浆侧的测试化合物的LC-MS/MS峰面积)×100％

脱靶筛选

使用QPatch(Sophion Bioscience A/S，丹麦)和自动平行膜片钳系统(ChanTest，克利夫兰，俄亥俄州)，在室温下在稳定表达hERG(人类ether-à-go-go-相关基因)的HEK哺乳动物细胞中评估NP10679对hERG钾通道电流(IKr的替代物，快速激活的延迟整流心脏钾电流)的体外影响。将NP10679在HB-PS溶液中稀释0.1、0.3、1和3μM时进行评估，所述HB-PS溶液由以下成分组成(以mM为单位)：NaCl,137；氯化钾，4.0；氯化钙，1.8；氯化镁，1；HEPES，10；葡萄糖，10；pH调节至7.4。每个测试浓度在两个或多个细胞中进行测试(n≥2)。暴露于每种测试物品浓度的持续时间为3分钟。使用阳性对照(0.5μM E-4301)来确认细胞对hERG抑制剂的敏感性。

NP10679的脱靶放射性配体结合置换研究是在北卡罗来纳大学教堂山分校(University of North Carolina at Chapel Hill)的国家心理健康研究所精神活性药物筛选项目(NIMH PDSP)中进行的。简而言之，将该化合物提交给NIMH PDSP，并在平衡条件下以单一浓度(10μM)的测试品进行筛选，以确定其取代特定放射性配体与其体外哺乳动物细胞膜中表达的靶标结合的能力。每个受体靶标进行四次测定，并在pH 7.4下测定每个靶标的放射性配体结合的抑制百分比。如果抑制百分比>50％，则进行完全竞争置换结合研究以确定IC₅₀值，并使用Cheng-Prusoff方程(K_i＝IC₅₀/[1+(L/K_d)])得出K_i值，其中L是竞争结合测定中使用的放射性配体浓度，并且K_d是在上述饱和结合测定中确定的放射性配体平衡结合亲和力。

测试了以下靶标(括号内为放射性配体)：5-HT1A([³H]8-OH-DPAT)、5-HT1B([³H]5-甲酰胺色胺)、5-HT1D([³H]5-甲酰胺色胺)、5-HT1E([³H]5HT)、5-HT2A([³H]Ketanserin)、5-HT2B([³H]LSD)、5-HT2C([³H]Mesulergine)、5-HT3([³H]LY278584)、5-HT5A([³H]LSD)、5-HT6([³H]LSD)、5-HT7([³H]LSD)、Alpha1A([³H]哌唑嗪)、Alpha1B([³H]哌唑嗪)、Alpha1D([³H]哌唑嗪)、Alpha2A([³H]-Rauwolscine)、Alpha2B([³H]-Rauwolscine)、Alpha2C([³H]-Rauwolscine)、Beta1([¹²⁵I]吲哚洛尔)、Beta2([³H]CGP12177)、Beta3([³H]CGP12177)、BZPRat Brain Site([³H]氟硝西泮)、D1([³H]SCH23390)、D2([³H]N-甲基螺哌隆)、D3([³H]N-甲基螺哌隆)、D4([³H]N-甲基螺哌隆)、D5([³H]SCH23390)、DAT([³H]WIN35428)、DOR([³H]DADLE)、GABAA([³H]蝇蕈醇)、H1([³H]吡拉明)、H2([³H]硫替丁),H3([³H]α-甲基组胺)、H4([³H]组胺)、KOR([³H]U69593)、M1([³H]QNB)、M2([³H]QNB)、M3([³H]QNB)、M4([³H]QNB)、M5([³H]QNB)、MOR([³H]DAMGO)、NET([³H]尼索西汀)、PBR([³H]PK11195)、SERT([³H]西酞普兰)、Sigma 1([³H]喷他佐辛(+))和Sigma 2([³H]DTG)。

一些受体靶标也在功能研究中进行了测试，以确定NP10679是作为激动剂还是拮抗剂。这些受体靶标包括5-HT_2A受体，其功能研究在pH 7.4下进行(Porter等人，Br JPharmacol,1999,128:13-20；CEREP,France)。为了评估激动作用，将转染人5-HT_2A的HEK293细胞与浓度不断增加的NP10679(重复孔/浓度)一起在37℃下孵育30分钟。受体的激活通过方法检测到的IP1水平的变化来确定。用10μM血清素刺激的单独孔作为阳性对照。为了确定NP10679的拮抗作用，将细胞与浓度不断增加的化合物(每个浓度重复孔)在37℃下孵育30分钟。用100nM血清素刺激细胞。受体的激活通过/>方法检测到的IP1水平的变化来确定。单独运行对照抑制剂酮色林以确认测定数据的准确性和可靠性。

进行了类似的研究来评估转染人α_1A肾上腺素受体的CHO细胞中的激动和拮抗作用，这些受体与浓度不断增加的NP10679(每个浓度重复孔)在室温、pH 7.4下孵育(Vicentic等人，J Pharmacol Exp Ther,2002,302:58-65)。通过fura-2荧光检测方法(CEREP，法国)通过细胞内[Ca²⁺]的变化来确定受体的激活。用30nM肾上腺素刺激单独的孔作为阳性对照。为了评估拮抗作用，将细胞与浓度不断增加的NP10679(重复孔/浓度)一起在室温下孵育，然后用3nM肾上腺素刺激细胞。通过fura-2荧光检测方法(CEREP，法国)通过细胞内[Ca²⁺]的变化来确定受体的激活。

为了评估对人H₁-组胺受体的激动作用和拮抗作用，将转染H₁受体的HEK293细胞与浓度不断增加的NP10679(每个浓度重复孔)在pH 7.4下室温孵育(Miller等人，J BiomolScreen,1999,4(5):249-258)。通过fura-2荧光检测方法通过细胞内[Ca²⁺]的变化来确定受体的激活。用10μM组胺刺激的单独孔作为阳性对照。为了评估NP10679的拮抗作用，将细胞与浓度不断增加的化合物(每个浓度重复孔)一起在室温下孵育，然后用300nM组胺刺激细胞。通过fura-2荧光检测方法通过细胞内[Ca²⁺]的变化来确定受体的激活。单独运行对照抑制剂吡拉明以确认测定数据的准确性和可靠性(CEREP，法国)。

B.结果

使用人和小鼠肝微粒体以及由DMSO储液(DMSO 0.2％最终浓度)制备的1μMNP10679进行代谢稳定性测试。将化合物和标准品与含有或不含辅因子的人和小鼠肝微粒体一起孵育，并如上所述提取和使用LC-MS/MS分析样品。NP10679在人和小鼠肝微粒体中均表现出优异的稳定性，在37℃下孵育一小时后，在辅因子存在下，72％的NP10679仍与人微粒体一起孵育，54％的NP10679仍与小鼠肝微粒体一起孵育。

此外，1μM的NP10679不会抑制人重组细胞色素450同工型CYP3A4或CYP2D6。

此外，NP10679分别以97.7％(n＝2)、98.2％(n＝2)和98.2％(n＝1)与人、小鼠和狗血浆蛋白结合。

还在竞争性受体结合测定中测试了10μM NP10679通过放射性配体的置换与41种神经递质受体、酶和通道的结合。对10μM NP10679置换超过50％放射性配体的靶标进行全面剂量效应置换研究，确定了其中5个靶标的亚微摩尔K_i值，即5-HT_2A血清素受体(0.638μM)、α_1A(0.603μM)和α_1D(0.495μM)肾上腺素受体、H₁组胺受体(0.040μM)和血清素转运蛋白SERT(0.135μM)。参见表4。还测试了三种受体(5-HT2A、α_1A肾上腺素能的和H₁组胺)的功能激动作用和拮抗作用；在所有情况下，该化合物均表现为拮抗剂(表4)。在用hERG钾通道cDNA转染的哺乳动物HEK细胞中，通过膜片钳电生理学测量四种浓度的NP10679对人延迟整流心脏钾电流通道(hERG通道)的抑制，结果显示关于抑制的IC₅₀为0.617μM(表4)。

表4.NP10679对脱靶蛋白质的效力

实施例4.体内功效和药代动力学研究

A.材料和方法

配方和药物剂量

对于MCAO、运动和旋转棒研究，将NP10679、MK-801和艾芬地尔配制在2％或10％N’,N’-二甲基乙酰胺、10％丙二醇和30％2-羟丙基-β-环糊精水溶液中，剂量体积为10mL/kg，通过腹膜内(IP)途径给药。药代动力学研究制剂使用2％或10％N’,N’-二甲基乙酰胺、10％丙二醇和30％2-羟丙基-β-环糊精水溶液，剂量体积为10mL/kg(所有给药途径)。

短暂性局灶性缺血的体内模型

所有涉及动物的方案均得到佐治亚州立大学IACUC(一个AAALAC认可的项目)的批准，并在有执照的兽医的监督下。小鼠被分组饲养，在12小时的光/暗周期下，为小鼠提供可随意获取食物颗粒和水的巢穴和庇护所。在手术开始前，将小鼠带到单独的房间并放置至少30分钟。

对小鼠(C57Bl6，>90天，Jackson Labs)进行短暂(60分钟)大脑中动脉闭塞(MCAO)，并在再灌注后24小时测量梗塞体积，与之前描述的类似(Yuan等人，Neuron,2015,85(6):1305-1318)。本实验使用雄性小鼠，以减少发情周期中黄体酮变化造成的潜在混淆，这可能具有神经保护作用。简而言之，通过将管腔内缝合线插入MCA 60分钟，在麻醉(2％异氟烷/98％O₂)小鼠中诱导短暂性缺血(Junge等人，Proc Natl Acad Sci USA,2003,100:13019-13024)。用直肠温度计监测每只小鼠的体温，并通过使用恒温毯将其维持在37℃。使用激光多普勒流量计探头(Perimed)监测局部脑血流的变化，该探头通过胶水固定在头骨外侧4-6毫米和前囟后2毫米处。将尖端呈火焰圆形的11毫米5-0Dermalon或Look(SP185)黑色尼龙不可吸收缝合线通过颈外动脉残端引入左颈内动脉，缝合线插入深度达10.5-11毫米。只有在60分钟内血流量减少至<20％且拆线后血流量恢复至>90％的小鼠才能完成研究。封闭期后，将小鼠放回它们的笼子中，放在温暖的毯子(37℃)上几个小时，并监测翻正反射和轻柔触摸时的走动能力。闭塞后24小时，通过过量异氟醚对小鼠实施安乐死，迅速取出大脑并切成2毫米切片，并在37℃下在磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)中的2％2,3,5-三苯基氯化四唑(TTC)中孵育20分钟，然后置于4℃进行成像。然后使用NIH IMAGE软件(ScionCorporation，Beta 4.0.2版本)测量梗塞区域。通过TTC染色的数字阈值降低至比对侧皮质中观察到的强度低≤20％来确定每个切片的病变面积。然后用光标手动勾勒出梗塞区域的轮廓，并确定每个切片的梗塞体积，然后将每只动物的所有四个切片相加，以获得总梗塞体积。对侧与同侧半球体积的比率乘以相应的梗塞切片体积以校正水肿。手术开始前5分钟(血管闭塞前约15分钟)通过IP注射给药。所有药物剂量都是随机的，并且在整个研究过程中，从手术过程到染色切片分析再到梗塞体积测量，一个或多个研究者均处于盲态。

统计数据

根据历史变异性和45-50％的预期效应大小，我们估计每组n＝12(每项研究4组)足以检测具有足够功效的显着效应(α＝0.05)，(β＝0.90)(G*Power 3.1)。将给药药物剂量后的梗塞体积与通过单向方差分析和Dunnett检验(one-way ANOVA and Dunnett’stests)的空白对照(p<0.05)进行比较。

药代动力学研究

NP10679的药代动力学研究外包给Anthem Biosciences(印度班加罗尔)，并根据CPCSEA指南在获得机构动物伦理委员会(Institutional Animal Ethics Committee)(IAEC)许可后进行。

NP10679特性的评估是在雄性BALB/c小鼠(8-10周龄，20-30g)中进行的。简而言之，通过IP注射(10mL/kg剂量体积)给小鼠施用2mg/kg或5mg/kg剂量(每只n＝3)，并在0.08、0.25、0.5、1、2、4、8和24小时时收集血液样品，置于冰上装有肝素钠的试管中。将100μL血浆与50μL内标(氟哌啶醇，10μg/mL)混合，然后将试管在4000g下旋转10分钟(4℃)，将血浆转移至干净的试管中并储存在-80℃直至分析。使用API 3200Q-trap LC-MS/MS对分析物NP10679进行定量，并与WinNonlin 6.3(Pharsight)分析的标准品和数据进行比较。

在另一项研究中，BALB/c小鼠接受口服剂量(10mg/kg)或静脉注射剂量(3mg/kg)NP10679(10mL/kg注射量)。给药后0.08、0.25、0.5、1、2、4、8和24小时将血样收集到在冰上的肝素钠管中。如上所述制备和分析样品，不同的是这里的内标是氟康唑(10μg/mL)。

在两项独立的研究中，在脑室中测量了NP10679与3mg/kg IV给药后0.25小时和1小时的血液比较，并按照上述方法收集和制备了血液样品。在这里，脑样品首先用去离子水清洗以去除血液，记录重量，然后转移到新鲜的1mL水中，均质化，并储存在-80℃直至分析。然后计算脑(g)中与血液(mL)中的化合物的比率。

B.结果

前几代的非选择NMDAR抑制剂无论亚基组成如何都会阻断所有NMDAR，会产生脱靶和在靶副作用，从而使临床开发变得复杂或中止。报告的最突出的副作用包括运动功能障碍、认知障碍和拟精神病作用，例如幻觉和思维混乱(Lees等人，Lancet,2000,355:1949-1954；Sacco等人，JAMA,2001,285:1719-1728；Diener等人，J Neurol,2002,249:561-568；Rowland,Aviat Space Environ Med,2005,76:C52-C58；Blagrove等人，Psychopharmacol,2009,203:109-120)。尽管GluN2B选择性NMDAR负变构调节剂似乎比竞争性拮抗剂或通道阻滞剂具有更好的耐受性，但它们仍然会表现出副作用(Chaperon等人，Behav Pharmacol,2003,14:477-487；DeVry和Jentzsch,Behav Pharmacol,2003,14:229-235；Yurkewicz等人，J Neurotrauma,2005,22:1428-1443；Nicholson等人，Behav Pharmacol,2007,18:731-743；Preskorn等人，J Clin Psychopharmacol,2008,28:631-637；Nutt等人，Mov Disord,2008,23:1860-1866)。

在MCAO实验中，在大脑中动脉闭塞引起短暂性缺血之前施用NP10679。短暂性缺血60分钟后，空白治疗的小鼠表现出大量神经元细胞死亡，梗死体积为101±8.7mm³。相比之下，NP10679的梗塞体积以剂量依赖性方式减少，ED₅₀为1mg/kg IP剂量，最大梗塞体积减少52％(图1)。与空白对照相比，5mg/kg(56±6.6mm³)和10mg/kg(49±3.0mm³)剂量均显著减少了梗塞体积(图1)。

在药代动力学研究中，将小鼠口服溶液(10mg/kg)或通过IV注射(3mg/kg)给药，以确定NP10679的口服生物利用度和血浆药代动力学(图2A，表5)。口服途径的血浆终末半衰期为7.06小时，IV注射的血浆终末半衰期为8.56小时，分布容积高，为1.59L/kg，清除率为2.44mL/min/kg，口服生物利用度高(75.7％)。参见表5。

在另一项研究中，将小鼠IP注射2和5mg/kg的NP10679，以按照MCAO神经保护研究中使用的相同剂量和给药途径提供小鼠的药物处置信息。在此，NP10679显示出剂量依赖性，给药后30分钟血浆中峰值水平分别为581ng/mL和1431ng/mL，血浆半衰期为7.5至9.9小时(表5)。因此，单次IP注射NP10679提供了充足的暴露量，可在缺血后24小时的大部分时间里促进神经保护。图2B显示了2和5mg/kg IP剂量下计算的游离血浆水平(未结合药物)，其表明5mg/kg剂量后的游离药物水平高于pH 6.9时针对GluN2B的IC₅₀。NP10679的游离血浆水平是根据上述血浆结合研究确定的游离药物分数计算的。

此外，脑室中的药代动力学研究表明，NP10679表现出较高的脑渗透性，与IV给药一小时后小鼠的血浆水平相比，脑室中的水平高出1.3至2.6倍(表5)。基于这些脑:血浆比率，估计在MCAO研究中使用5mg/kg IP剂量后，脑中游离药物浓度在给药后1、2、4和8小时时可分别达到60-134nM、51-103nM、33-66nM和28-56nM。鉴于在pH 6.9时NP10679对GluN2B的效力为23nM，因此脑室中在pH 6.9时GluN2B受体的占有率足以驱动显著的GluN2B抑制。

表5.在小鼠中测定的NP10679的药代动力学参数

实施例5.运动活动和旋转棒性能

A.材料和方法

运动活动和旋转棒性能的测量

运动和旋转棒研究得到了佐治亚州立大学IACUC的批准，该大学是AAALAC认可的机构，由有执照的兽医监督。小鼠被分组饲养，在12小时的光/暗周期下，为小鼠提供可随意获取食物颗粒和水的巢穴和庇护所。

对于运动活动测量，在药物测试之前，将小鼠(C57Bl6，>90天大，Jackson Labs)放置在封闭的(开灯的)的活动监测箱中一小时以适应。一小时后，将动物取出并注射(IP)药物，然后返回活动监测箱并监测总运动活动两小时。笼中光束中断的总数(水平)由计算机确定，并对每种药物的结果进行平均。通过ANOVA和Dunnett事后检验对结果进行分析，以比较药物治疗组与空白对照的水平活动。雄性动物用于这些行为测试，因为在MCAO短暂性缺血研究中仅使用雄性小鼠。

对于旋转棒实验，使用Rotamax 4/8旋转棒(Columbus Instruments，Columbus，Ohio)测试雄性C57BL/6小鼠(>90天)。在训练和测试之前，将小鼠带到测试室并使其适应两个小时，然后再进行任何进一步处理。将小鼠放置在直径为3.8厘米、宽8厘米、距离室底高30厘米的旋转杆(5rpm)上。以固定速度旋转10秒后，在5分钟内将旋转速度从5rpm缓慢加速至35rpm。记录小鼠可以停留在旋转棒上而不悬停的完整旋转或不跌落的持续时间。小鼠每天训练4次，试验间间隔为25分钟，持续两天。第三天，将小鼠随机分配到治疗组，并在测试前25分钟给予测试药物或载体(通过IP给药)(4次试验，试验间间隔为25分钟)。进行实验的个人对每个治疗组的身份不知情。通过ANOVA和Dunnett事后检验对结果进行分析，以比较药物治疗组与空白对照在旋转杆上的持续时间。

B.结果

进行研究以评估NP10679是否扰乱运动协调或功能。小鼠在服用NP10679后接受了旋转棒挑战研究的测试。在这里，连续两天训练小鼠停留在旋转和加速杆上的能力，每天进行4次试验(试验间间隔为25分钟)。在日内试验中，小鼠从第1天到第2天表现出改善的表现，如图3所示。第3天，将小鼠随机分配到治疗组，给予载体或药物，然后在给药后25分钟开始测试四次，并确定每次试验的平均跌倒潜伏期(图3)。在所有四项试验中，当剂量为2mg/kg或5mg/kg时，NP10679没有出现显著损害。与空白对照(168±14秒)相比，10mg/kgNP10679剂量组在第四次试验中的跌倒潜伏期(87±13秒)缩短。然而，在试验1、2或3中，该治疗组没有观察到与空白对照相比有统计学上的显著变化。相比之下，在所有四项测试试验中，30mg/kg剂量的艾芬地尔导致跌倒潜伏期评分显著降低(图3)。选择较高剂量的艾芬地尔是因为它对抗GluN2B的效力不如NP10679(Kew等人，J Physiol,1996,497:761-772；Mott,etal.,Nat Neurosci,1998,1(8):659-67)，并且需要更高的浓度才能在体外产生神经保护作用(Chenard等人，J Med Chem,1991,34(10):3085-90)。

在封闭的照明室中评估单剂量NP10679改变小鼠运动活动的能力(图4)。经过一小时的适应期后，给小鼠施用20mg/kg剂量的NP10679或0.3mg/kg MK-801，然后将其返回封闭的、有光照的室，并测量水平活动两小时。与空白对照(每只n＝6)相比，该剂量的NP10679并未使小鼠的水平活动产生任何统计上显著的降低。相比之下，施用0.3mg/kg MK-801导致水平活动显著增加(p<0.01)(n＝4)。

综上所述，相对于pH 7.6，NP10679在细胞外酸性pH值(pH 6.9)下对GluN2B的抑制作用增强。值得注意的是，与其S对映异构体(NP10309)相比，NP10679表现出高得多的针对GluN2B效力，同时保持pH提升。

这些特性使NP10679成为比其S对映异构体更有效的NMDAR抑制剂，在突触处响应高频动作电位，因为含谷氨酸的囊泡在其管腔内呈酸性。此外，缺血组织周围半影区域的酸化也可以增强NP10679的作用，从而改善神经保护。

当在非人类灵长类动物中进行急性给药后的认知任务和学习范式测试时，两种GluN2B抑制剂traxoprodil和BMT-108908以剂量依赖性方式产生认知障碍(Weed等人，Neuropsychopharm,2016,46:568-577)。Traxoprodil对抑制pH 6.8至pH 7.5之间的受体不具有显著的pH敏感性(Mott等人，Nat Neurosci,1998,1(8):659-67)。NP10679对GluN2B的高效力和显著的pH提升作用在将副作用与所需的靶向活性分开方面比现有的GluN2B靶向药物和候选药物具有优势。

此外，NP10679具有高口服生物利用度和优异的脑渗透性，因此适合静脉内和口服给药用于人类治疗用途。

实施例6.人类临床研究

A.材料和方法

原料物质及产品

用于药品的NP10679的GMP质量活性药理成分(API)的合成外包给DavosPharma(新泽西州萨德尔河)。该药品的生产由爱荷华大学制药公司(UI-P)根据为生成冻干产品制定的程序进行。为了配制药物产品，将API溶解在50mM磷酸二氢钾缓冲液(pH 6.0)中的25％羟丙基-β-环糊精(HPBCD)载体中，浓度为5mg/mL。然后将该溶液过滤、灭菌并冻干到每个含有50mg API的无菌小瓶中。通过添加适量的2.5％HPBCD的0.9％生理盐水，将冻干API配制成用于临床现场IV输注的药物产品。

方法

单次剂量递增(SAD)和多次剂量递增(MAD)研究方案均已由美国食品和药物管理局根据新药研究申请进行审查和批准。这些方案以及受试者知情同意书也经过了该研究的机构审查委员会(IRB)(位于德克萨斯州奥斯汀的IntegReview IRB)的审查和批准。这两项研究的临床研究组织(CRO)是马里兰州巴尔的摩的Pharmaron CPC。所有受试者均被告知研究的性质和目的，并在进行任何与研究相关的程序之前获得他们的书面知情同意书。研究是根据赫尔辛基宣言和国际协调会议三方良好临床实践指南中规定的原则进行的。

纳入和排除标准

年龄在18岁至55岁之间的健康男性和女性受试者，只要能够表示同意并能够遵守访视时间表和其他协议要求，就有资格参加研究。如果性活跃且有生育潜力(男性和女性)，志愿者必须同意在研究期间使用两种形式的避孕方法(一种屏障)。

排除标准包括前臂外周静脉通路不足、怀孕或哺乳、研究期间使用含尼古丁的产品、当前或近期(12个月内)酒精或药物滥用史、近期(90天内)献血以及之前参与90天内进行临床试验。过度嗜睡的受试者以及在7天内使用过可能导致嗜睡的药物或制剂的受试者也被排除。因病史、检查或临床实验室测试而患有严重医学或精神疾病、可能影响研究结果或妨碍知情同意和研究依从性的志愿者也被排除在外。

临床研究设计

SAD研究(NP10679-101)是一项单中心、随机、双盲、安慰剂对照、单剂量、剂量递增试验，旨在调查NP10679在六个递增剂量组中的健康成年志愿者中的安全性、耐受性和药代动力学(PK)。该研究的主要目的是评估单剂量NP10679与安慰剂相比，通过IV输注给药时的安全性、耐受性和PK。次要目标是在健康成年志愿者中获得NP10679的最大耐受剂量，并确定MAD研究(NP10679-102)的安全起始剂量。

该研究包括30天的筛选期、第1天(NP10679或安慰剂单次IV输注，随机)、第2天临床/隔夜评估和第3天评估。受试者在第1天入住诊所，并在第3天服药后48小时抽血期间一直留在诊所，之后出院。受试者在出院后第8天返回诊所进行随访。

NP10679-101中研究了六个剂量组。每个队列由8名受试者组成。每个队列的六名受试者接受NP10679治疗，两名受试者接受安慰剂。在升级到下一个剂量水平之前按顺序评估剂量。研究中的剂量为5、15、50、100和200毫克。药物和安慰剂在75ml给药载体中，通过IV输注历时30分钟进行给药。所有队列均采用哨兵给药、适应性设计方法，其中前2名受试者(1名活性药物、1名安慰剂)在第1天给药并观察48小时或直到经过足够的时间来审查安全性。如果安全委员会(至少由首席研究员(PI)和医学监察员(独立于研究进行的主题医学博士)同意继续进行是安全的，则该队列中的其余6名受试者(5名活性药物，1名安慰剂)以相同的剂量水平给药。在下一组受试者给药之前，对安全性/耐受性数据以及可用的PK数据进行了审查。中期安全性/耐受性审查的可接受结果触发下一个给药队列的入组。

MAD研究的目的是评估NP10679重复给药直至达到稳态后的安全性和药代动力学。根据SAD研究的结果，确定每日一次给药5天即可达到稳定状态。MAD研究(NP10679-102)中的受试者的治疗方式与NP10679-101中的受试者相同。该研究包括30天的筛选期、第1天至第5天的给药(按随机顺序，在30分钟内单次75ml IV输注NP10679或安慰剂)、第6天的临床/过夜评估以及第7天出院前的评估。受试者在第1天入住诊所，并在第7服药后48小时抽血期间一直留在诊所，之后出院。受试者在第9天返回诊所进行随访。招募了三个剂量组，每个组有8名受试者(6名药物和2名安慰剂)，并按照NP10679-101做出剂量决定。剂量水平包括25、50和100毫克。

安全性评估

根据方案评估时间表评估安全性/耐受性参数，包括根据体检、输注部位检查、实验室检查结果、神经精神评估、生命体征和受试者报告的耐受性对治疗中出现的不良事件进行评估。终点还包括血液学、化学、尿液分析和12导联ECG。汉密尔顿抑郁量表(HamiltonDepression Rating Scale)(HDRS)、简易精神状态检查(Mini-Mental StatusExamination)(MMSE)、自杀行为问卷修订版(Suicide Behaviors Questionnaire-Revised)(SBQ-R)、7项一般性焦虑症量表(7-item General Anxiety Disorders scale)(GAD-7)和临床医生管理的解离量量表(Clinician-Administered Dissociative StatesScale)(CADSS)被列为标准评估。还添加了改良观察者警觉/镇静评估(ModifiedObserver’s Assessment of Alertness/镇静)(MOAA/S)和Bond-Lader VAS嗜睡量表。

所有接受过至少一剂试验药物并进行安全随访的受试者，无论是否提前退出，均纳入安全性分析。通过报告分类和顺序测量的每个类别中受试者的数量和百分比以及连续测量的平均值、SD、中位数和范围来总结数据。安全终点包括治疗中出现的临床和实验室不良事件及其严重程度的总结。所有不良事件均根据监管活动医学词典(MedDRA)按系统器官类别和首选术语进行编码。治疗引起的不良事件按剂量水平、系统器官类别和首选术语制成表格。

药代动力学测量

对于SAD研究，通过输注臂对面的静脉抽取血液(如果可能)，以测定给药前和输注结束时(20分钟±5分钟)以及给药后0.5、1、2、4、6、8、10、12、18、24、36、48小时的全身NP10679水平。使用含有K2EDTA的收集管在每个时间点收集5mL的全血样本。收集后立即将试管倒置以将抗凝剂与血样混合。然后将管在4℃下以约3000g力的速度离心10分钟。离心后5分钟内，将血浆组分分成两等份(每份1.25mL)转移至2mL冷冻管中，然后冷冻并储存在-70℃(±10℃)下直至装运。对于MAD研究，还通过输注臂对面的静脉抽取血液(如果可能)，以确定给药前和输注结束时(30分钟±5分钟)以及第1-5天的0.5、1、2、4、6、8、10、12、18小时和第5天最后一次给药后24、36、48和96小时的全身NP10679水平。

MPI Research(密歇根州马塔万)开发并验证了灵敏、特异且可重复的生物分析方法来定量NP10679。蛋白质沉淀后，通过经过验证的LC-MS/MS测定对含有NP10679的标准品、对照品和测试血浆样品进行定量。使用NP10679的结构类似物(NP10767，结构如下所示)作为内标(IS)。通过TMD Pharmaceutical Research(特拉华州纽瓦克)对该方法进行了调整并用于测量血浆样品。NP10679和IS的色谱保留是在Agilent Poroshell 120EC-C18，2.1×30mm，2.7μm色谱柱(加利福尼亚州圣克拉拉)上在梯度条件下以0.3mL/分钟的流速获得的。使用MDS Sciex API 4000质谱仪(AB Sciex，Framingham，MA)在正模式下通过多重反应监测来检测分析物。使用根据已知浓度的NP10679构建的6-10点校准曲线计算所得LC-MS/MS数据的血浆浓度。稀释血浆中NP10679的定量下限(LLOQ)为2ng/mL。

根据NP10679的血浆浓度计算描述性药代动力学参数。使用MS基于非房室分析方法(M.Garibaldi和D Perrier,Pharmacokinetics 2^nd Edition,Chapter 11,MarcelDekker Inc.,New York,1982)进行药代动力学分析。

B.结果

NP10679-101研究的6个队列中招募了48名受试者(表6)，并完成了47名受试者。一名受试者由于与研究无关的个人原因自愿退出研究。本研究的中位年龄为33.5岁(最小/最大–22/52岁)。共有30名男性和18名女性参加了这项研究。大多数受试者是黑人(35名)，其次是白人(13名：包括10名非西班牙裔和3名西班牙裔)和1名亚洲人。

表6.研究NP10679-101的人口统计数据

NP10679-102 MAD研究将24名受试者纳入4个队列(表7)。本研究的中位年龄为44.5岁最小/最大–20/54岁)。共有15名男性和9名女性参与了这项研究。与SAD研究一样，大多数受试者是黑人(15)，其次是白人(8)和亚洲人(1)。

表7.研究NP10679-102的人口统计数据

表8总结了NP10679-101按器官类别和剂量划分的治疗中出现的不良事件(TEAE)。在最高测试剂量(200毫克)下，最常见的治疗中出现的不良事件(TEAE)是嗜睡。

表8.研究NP10679-101的按系统器官类别和首选术语列出的治疗中出现的不良事件总结

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TEAE＝治疗中出现的不良事件；N＝安全人群中各自剂量水平和治疗的受试者数量；n＝发生事件的受试者数量。

嗜睡是最常见的TEAE，存在剂量反应(见表9)。改良的观察者警觉/镇静评估(MOAA/S)量表的评分范围为0至5，其中5级代表最低镇静水平。在第5级，受试者很容易对正常的语音做出反应，第4级表示对声音做出昏昏欲睡的反应，第3级则需要更大的声音才能引起反应。低于3分的分数需要增加身体刺激水平才能唤醒受试者。NP10679在较高剂量水平下对MOAA/S量表产生中等影响。剂量为5和15mg的6名受试者中的1名，以及50-200mg剂量的6名受试者中的5名出现嗜睡。100毫克和150毫克组中各有两名受试者在MOAA/S量表上达到短暂的3级得分。然而，最高剂量组(200mg)中没有受试者达到这一分数。从50mg剂量开始一直到200mg剂量，Bond-Lader VAS评分也有适度增加。研究中观察到的嗜睡被认为在现象学上与经典镇静催眠药观察到的嗜睡不同。这降低了人们对评分工具的整体信心。即使在最高剂量的测试下，当受试者受到刺激时，他们也会在几秒钟内迅速适应环境，并能够执行相对复杂的任务，例如数字符号替换测试DSST)。

表9.NP10679-101 MOAA/S中相对于基线的偏移汇总

*基线后最差(Worst post-baseline)是所有基线后访问的最低分数，包括任何计划的、计划外的和ET/FU访问。

在100毫克或以上的较高剂量下，头晕TEAE也可能更常见。据报道，1名受试者在100mg剂量下出现了这种情况，2名受试者分别在150mg和200mg剂量下出现了这种情况。头痛和先兆晕厥不太常见，并且似乎没有表现出剂量反应。服用100mg的受试者曾发生一次震颤TEAE。这些TEAE均不被认为会影响受试者的安全。除神经系统疾病外，在200mg剂量下，6名受试者中有3名观察到结膜和巩膜充血。这被认为与在最高两个剂量下观察到的非临床显著血压(收缩压和舒张压)降低有关。然而，给药后4小时，150mg剂量的NP10679(-23mgHg)的血压降低幅度比200mg剂量(-7.2mg Hg)更显著。研究中生命体征或ECG没有出现临床上显著的变化。因此，在NP10679-101研究中没有观察到使用先前的GluN2B抑制剂所观察到的QTc间期增加或高血压。

研究中未观察到严重不良事件(SAE)。根据临床医生管理的解离状态量表(Clinician Administered Dissociative States Scale)(CADSS)或数字符号替换测试(Digit Symbol Substitution Test)(DSST)的结果，研究中没有任何模式表明与NP10679相关的解离症状或认知障碍。虽然一名受试者在150mg剂量时出现侵入性想法，但根据临床医生管理的解离状态量表(CADSS)表明，研究中没有任何模式表明与NP10679相关的解离症状。

表10总结了NP10679-102按器官类别和剂量划分的治疗中出现的不良事件(TEAE)。与SAD研究的情况一样，MAD研究中没有出现SAE。同样反映SAD研究的是，最常见的不良反应是嗜睡。50毫克和100毫克组的3名受试者均观察到了这种副作用。然而，安慰剂组的3名受试者也注意到了这一点。重复给药后没有出现嗜睡增加的迹象。虽然嗜睡效应可能有所缓解，但由于这种效应的观察大部分仅发生在给药的第一天和第二天，因此没有足够的模式来支持明确的结论。根据临床医生管理的解离状态量表(CADSS)，研究中没有任何模式表明与NP10679相关的解离症状。

表10.NP10679-102按系统器官类别和首选术语列出的治疗中出现的不良事件总结

TEAE＝治疗中出现的不良事件；N＝安全人群中接受相应治疗的受试者数量；n＝发生事件的受试者数量；％＝n/N*100。

不良事件使用MedDRA 21.1版进行编码。

在同一优选术语内多次发生不良事件的受试者在该优选术语内仅计数一次。

在同一系统器官类别中多次发生不良事件的受试者在该系统器官类别中仅计数一次。

系统器官类别以及系统器官类别下的首选术语在组合NP10679组中首先按频率降序排序，然后是安慰剂组。

在NP10679-101研究中，NP10679血浆浓度(见图5和表11)随剂量线性增加，5mg剂量时的平均C_max为30.0±14.8ng/mL，200mg剂量时平均C_max为2066±798ng/mL。此后，血浆浓度呈多指数下降，终末半衰期分别为27.6±12.0小时至17.4±2.8小时。在所研究的剂量范围内，总清除率范围为9.82L/h±2.89至10.4±2.51L/h。与人体87L/h的肝血流量相比，NP10679在体内的清除速度低于肝血流量的12％。NP10679似乎广泛分布于全身，分布体积超过221L，相当于身体总水空间的4.5倍。

根据功效模型方法，AUC_(0-inf)呈线性且与剂量成比例增加，表明NP10679在5至200mg范围内遵循线性动力学。

表11.NP10679-101静脉给药后的NP10679药代动力学参数

*表示为基于折刀方差(jackknife variance)的调和平均值和伪SD。

在NP10679-102 MAD研究中，所有受试者在前4次给药后24小时(第二天的给药前时间点)和第五次(第5天)给药后96小时(最后一个PK时间点)血浆中具有可量化的NP10679浓度，50毫克队列中的一名受试者除外。平均C_max随着剂量的增加而增加(图6)。在所研究的剂量(25至100mg)中，第1天和第5天的C_max分别增加了5.9倍和2.7倍(药代动力学参数见表12)。平均AUC也随着剂量的增加而增加。从25mg增加到100mg，第1天的AUC_0-24h增加了3.8倍，第5天的AUC_0-24h和AUC_0-96h分别增加了4.0倍和3.6倍。因此，C_max和AUC与剂量的增加大致呈线性关系。所有研究剂量和天数的终末半衰期相似，25mg、50mg和100mg组的平均范围分别为15.4小时至36.2小时、15.5小时至25.6小时和12.5小时至34.0小时。各研究剂量的稳态清除率相似，25mg、50mg和100mg队列的平均值分别为11.5L/h、11.8L/h和11.2L/h。随着剂量增加，稳态时的分布容积略有下降，25mg、50mg和100mg队列的平均值分别为360L、302L和252L。

表12.NP10679-102血浆NP10679的药代动力学参数

临床试验中观察到的不良事件很轻微，仅限于中度嗜睡。在SAD研究中，从50mg的中间剂量开始，这似乎与剂量相关。在MAD研究中，在5天的给药过程中，观察到的嗜睡似乎并未恶化。观察到的嗜睡与使用经典镇静剂观察到的嗜睡并不相似。即使在SAD研究中的最高剂量(200毫克)下，受试者也很容易被唤醒并能够完成复杂的任务，例如数字符号替换测试(DSST)。

值得注意的是，在SAD或MAD研究中均未观察到解离症状或认知能力下降。此外，没有发现与心血管系统相关的临床显著事件。

SAD和MAD研究的药代动力学数据表明，暴露量与剂量呈线性关系，半衰期(～20小时)适合每日一次给药。

总之，初步人体研究NP10679-101和NP10679-102证明NP10679在测试剂量下是安全的。

Claims (29)

1.一种具有根据式I的结构的化合物或其药学上可接受的盐、水合物或水合盐，

其中R¹选自：

其中R^A、R^B、R^C和R^D独立地选自氢、甲基和卤甲基，并且

其中R²和R³独立地选自氢、甲基和卤甲基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为：

3.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为：

4.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中R²和R³都是氢。

5.根据权利要求1所述的化合物，所述化合物选自：

及其药学上可接受的盐、水合物或水合盐。

6.一种具有根据式II的结构的化合物或其药学上可接受的盐、水合物或水合盐，

其中R⁴选自氢、甲基、卤甲基、乙基、卤乙基、异丙基和卤异丙基，并且

其中R⁵和R⁶独立地选自氢、甲基和卤甲基。

7.根据权利要求6所述的化合物，其中R⁴选自甲基和卤甲基。

8.根据权利要求6或7所述的化合物，其中R⁵和R⁶都是氢。

9.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，其中相对于如式I和II中所示的由*符号标记的立构中心，所述化合物的R构型对映体过量大于80％、85％、90％或95％。

10.根据权利要求9所述的组合物，其中相对于如式I和II中所示的由*符号标记的立构中心，所述化合物的R构型对映体过量大于95％。

11.一种药物制剂，所述药物制剂包含根据权利要求1-8中任一项所述的化合物或根据权利要求9或10所述的组合物，其中所述药物制剂还包含药学上可接受的赋形剂。

12.根据权利要求11所述的药物制剂，其中所述药物制剂处于选自下列各项的形式：片剂、胶囊、囊片、丸剂、珠剂、颗粒剂、颗粒、粉末、凝胶、乳膏、溶液、混悬剂、乳液和纳米颗粒制剂。

13.根据权利要求11或12的药物制剂，其中所述药物制剂是口服或静脉内制剂。

14.根据权利要求11或12的药物制剂，其中所述药物制剂处于冻干粉末的形式。

15.根据权利要求11或12的药物制剂，其中所述药物制剂处于无菌水溶液的形式。

16.一种治疗有需要的受试者的病症、障碍或疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1-8中任一项所述的化合物或根据权利要求9或10所述的组合物，

其中所述病症、障碍或疾病选自中风、蛛网膜下腔出血、脑缺血、脑血管痉挛、缺氧、急性CNS损伤、脊髓损伤、创伤性脑损伤、冠状动脉搭桥、持续性或慢性咳嗽、药物滥用障碍、阿片类药物戒断、阿片类药物耐受、双相型障碍、有自杀意念、疼痛、纤维肌痛、抑郁、产后抑郁、静止性震颤、痴呆、癫痫、癫痫发作、运动障碍和神经退行性疾病。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述病症、障碍或疾病是疼痛、抑郁、中风或蛛网膜下腔出血。

18.根据权利要求16或17所述的方法，其中所述疼痛是神经性疼痛。

19.根据权利要求16或17所述的方法，其中所述疼痛是慢性疼痛。

20.根据权利要求16或17所述的方法，其中所述疼痛是癌性疼痛。

21.根据权利要求16或17所述的方法，其中所述抑郁是难治性抑郁。

22.根据权利要求16所述的方法，其中所述神经退行性疾病是亨廷顿病、阿尔茨海默病或帕金森病。

23.根据权利要求16所述的方法，其中所述癫痫是由基因突变引起的。

24.根据权利要求16所述的方法，其中所述癫痫发作是婴儿痉挛症。

25.根据权利要求16所述的方法，其中所述痴呆是AIDS诱发的痴呆。

26.根据权利要求16所述的方法，其中所述缺氧是由呼吸功能不全、长时间使用呼吸机或它们两者引起的。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述呼吸功能不全、长时间使用呼吸机或它们两者与COVID-19相关。

28.根据权利要求16-27中任一项所述的方法，其中所述化合物或组合物经口服或静脉内施用。

29.根据权利要求16-28中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。