CN117924495A - 抗人CD11c抗体及其制备和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了抗人CD11c抗体及其制备和应用，涉及抗体技术领域。所述抗人CD11c抗体重链CDR区氨基酸序列选自SEQ ID NO：1‑3或SEQ ID NO：7‑9，轻链CDR区氨基酸序列选自SEQ ID NO：4‑6或SEQ ID NO：10‑12。本发明属于抗体领域，本发明提供了抗人CD11c鼠单抗的蛋白序列，建立该基因的稳转CHO细胞株进行重组表达，表达纯化的抗体能够特异性识别人CD11c抗原，抗体表达产量达到g/L级别，远远高于传统的杂交瘤细胞制备抗体的产量。
Description
技术领域
本发明属于抗体领域，具体涉及抗人CD11c抗体及其制备和应用。
背景技术
分化簇(cluster of differentiation,CD)专指白细胞膜上的抗原或抗原识别的抗体，又称为白细胞分化抗原。多是细胞膜上的穿膜蛋白或糖蛋白，目前“CD”不仅代表白细胞表面抗原，还有红细胞、血小板和髓系细胞表面抗原，以及其他组织细胞表面或细胞内容的抗原。在生理学上，CD分子有许多用途，通常用作细胞的重要受体或配体。不仅可作为表面标志用于细胞的鉴定和分离，还广泛参与细胞的生长、成熟、分化、发育、迁移、激活。
CD11c是一种约150kDa的I型跨膜糖蛋白，是一种广泛应用树突状细胞的标志物。它可被用来区分免疫系统中树突状细胞的亚型(参考CD11c在人类和鼠类免疫系统中的表达)，但是CD11c对树突状细胞可能不仅仅是一个标志物(参考CD11c和炎症)。此外，CD11c也被用以癌症研究和诊断(参考CD11c在正常和组织中的表达)。
CD11c通常被用作小鼠树突状细胞的标记物。然而，CD11c不仅限于树突状细胞，也可被其它免疫细胞表达。在人体中，单核细胞和树突状细胞都可以表达CD11c(Collin etal.,2012)。在肠道巨噬细胞中、炎症中的嗜中性粒细胞亚群中、B细胞的一小部分中、自然杀伤细胞及T细胞亚群中，均能检测到CD11c的表达。当CD11c在人类单核细胞来源的和人类普通的树突状细胞中高度表达时，可以在人类肿瘤中发现CD11c+细胞，并且分布在肿瘤浸润淋巴细胞数量较多的区域。此外，同源小鼠模型实验中具有免疫活性的小鼠显示，CD11c+树突状细胞在抗体疗法中的杀瘤活动中起着关键的作用(Haynes et al.,2010)。以上研究均表明，CD11c+细胞的组织学检测在临床肿瘤学中是一个非常重要的生物标记物。
杂交瘤制备技术不仅在生物学和免疫学基础研究中具有重要的价值，而且在实践中的应用范围亦极为广泛。然而在利用杂交瘤制备技术制备抗体时，由于杂交瘤不稳定，抗体基因容易丢失，并且传统的杂交瘤制备技术不会对目标抗体的基因序列及蛋白序列进行鉴定，不利于对目标抗体后续的生产、制备及研发工作。基因工程方法可以很好地解决杂交瘤方法中的问题，并且通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应，基因工程抗体的分子量较小，可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病灶的核心部位。然而通过基因工程方法进行抗体的制备必需的条件是明确抗体的序列，因此，挖掘更适用于CD11c检测的单克隆抗体是当前更为合适的研发方向。
发明内容
针对上述不足，本发明提供了两种新的抗人CD11c鼠单抗，并通过设计基因与蛋白序列，建立该基因的稳转CHO细胞株进行重组表达，经验证，表达纯化的抗体能够特异性识别人CD11c抗原，抗体表达产量达到g/L级别，远远高于传统的杂交瘤细胞制备抗体的产量。
术语：
本发明中，氨基酸包含天然氨基酸、合成氨基酸、以及以类似于天然氨基酸的方式起作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然氨基酸是由遗传密码编码的氨基酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸在本文中可以由其通常已知的三字母符号或由IUPAC-IUB生物化学命名法委员会所推荐的单字母符号来提及。
本发明中，互补决定区，本文中又称CDR。本文中公开的互补决定区指抗体的重链或轻链可变区内的抗原结合点，即抗体中引起抗原结合的氨基酸残基。轻链和重链的互补决定区共同组成抗体的抗原结合部位。通常而言，抗体的轻链或重链的通常包含3个决定簇互补区。本文中的互补决定区指重链的互补决定区时，简称为HCDR，并以数字指代3个不同的互补决定区，例如HCDR1、HCDR2、HCDR3。本文中的互补决定区指轻链的互补决定区时，简称为LCDR，并以数字指代3个不同的互补决定区，例如LCDR1、LCDR2、LCDR3。
本发明中，可变区指免疫球蛋白轻链和重链靠近N端氨基酸序列变化较大的区域称为可变区。
本发明中，重链指抗体中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链)；轻链指抗体中2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。
本发明中，相似性指同源蛋白质的氨基酸序列中一致性和可取代氨基酸所占的比例。
本发明中，单克隆抗体指由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。
本发明中，鼠源化抗体指将来源于免疫接种过的小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞融合，得到的鼠杂交融合细胞分泌的抗体。
本发明中，自制鼠抗人CD11c抗体ZXClone-HCD11c-02；自制鼠抗人CD11c抗体[ZXClone-HCD11c-03]，二者均为抗人CD11c鼠单抗由CHO稳转的细胞株生产的重组蛋白，并非由单克隆的杂交瘤细胞进行生产。
一方面，本发明提供了抗CD11c抗体。
所述的抗CD11c抗体包括重链和轻链，所述的重链包括重链互补决定区，所述的轻链包括轻链互补决定区，其中：
所述的抗体重链互补决定区包括如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述抗体的轻链可变区包括如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQID NO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
或者，所述的抗体重链互补决定区包括如SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8和SEQ IDNO：9所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述抗体的轻链可变区包括如SEQ ID NO：10、SEQ IDNO：11和SEQ ID NO：12所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
具体地，所述的抗CD11c抗体重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：13，轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：14；或所述的抗CD11c抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ IDNO：15，轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：16。
具体地，所述的抗CD11c抗体为单克隆抗体。
优选地，所述的抗CD11c抗体为鼠源化抗体。
具体地，所述的抗CD11c抗体的重链氨基酸序列为SEQ ID NO：17，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO：18；或所述的抗CD11c抗体的重链氨基酸序列为SEQ ID NO：19，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO：20。
另一方面，本发明提供了表达前述的抗CD11c抗体的核苷酸。
所述的核苷酸可以是通过密码子简并性优化后的序列，用于编码前述的抗CD11c抗体均可。
优选地，重链SEQ ID NO：17对应的核苷酸序列为SEQ ID NO：21所示，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO：18对应的核苷酸序列为SEQ ID NO：22所示；重链SEQ ID NO：19对应的核苷酸序列为SEQ ID NO：23所示，轻链SEQ ID NO：20对应的核苷酸序列为SEQ ID NO：24所示。
再一方面，本发明提供了包括前述的核苷酸序列的表达载体。
所述的表达载体可以包括但不限于质粒、噬菌体、病毒。
又一方面，本发明提供了表达前述的抗CD11c抗体或核苷酸序列或表达载体的细胞。
所述的细胞的作用在于可以高效表达抗CD11c抗体。
具体地，所述的细胞包括但不限于HEK293或CHO。
又一方面，本发明提供了制备前述的抗CD11c抗体的方法，所述的方法中包括培养前述的细胞。
所述的方法中还可能包括抗体纯化步骤。
所述的抗体纯化步骤包括但不限于沉淀法、广谱亲和纯化、抗原特异性纯化、离子交换法。
又一方面，本发明提供了对前述的抗CD11c抗体进行荧光标记的方法，所述的方法中包括使用大分子染料对抗CD11c抗体进行标记。
优选地，所述的大分子染料为PE；小分子染料为FITC
又一方面，本发明提供了一种抗CD11c抗体的检测方法，所述检测方法通过前述的抗CD11c抗体进行检测。
具体地，所述检测方法中还可以包括样品前处理步骤。
所述的前处理步骤为样本的采集及处理。
优选地，所述检测方法非疾病诊断或治疗方法。
又一方面，本发明提供了前述抗CD11c抗体、核酸、表达载体和/或宿主细胞在CD11c检测中的应用。
具体地，所述应用通过抗体抗原结合实现。
又一方面，本发明提供了一种CD11c检测试剂盒，所述试剂盒包括前述抗CD64抗体或核苷酸序列或表达载体或宿主细胞。
具体地，所述的试剂盒中还包括其他用于CD11c检测的试剂，如：缓冲液、样品处理剂。
具体地，所述的试剂盒中还可以包括用于荧光标记抗体的分子。
进一步具体地，所述的分子可以是大分子染料或小分子染料。
优选地，所述的大分子染料为PE；所述大分子染料为FITC。
本发明所取得的的技术效果：
本发明提供了两种新的抗人CD11c鼠单抗，并通过设计基因与蛋白序列，建立该基因的稳转CHO细胞株进行重组表达，经验证，表达纯化的抗体能够特异性识别人CD11c抗原，抗体表达产量达到g/L级别，远远高于传统的杂交瘤细胞制备抗体的产量。此外，将抗体的小鼠IgG1置换成小鼠IgG2b，保留可变区不变，建立鼠单抗的稳转CHO细胞株进行重组表达，表达纯化的抗体能够保持特异性识别人CD11c抗原。
附图说明
图1为鼠抗人CD11c外购抗体和自制抗体SDS凝胶电泳图。
图2为外购鼠抗人CD11c[3.9]-FITC流式检测图。
图3为自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]-FITC流式检测图。
图4为自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]-FITC流式检测图。
图5为外购鼠抗人CD11c[3.9]-PE流式检测图。
图6为自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]-PE流式检测图。
图7为自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]-PE流式检测图。
图8为对照组的特异性检测结果。
图9为实验组自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]特异性检测图。
图10为实验组自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]特异性检测图。
图11外购鼠抗人CD11c[3.9]效价检测图
图12自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]效价检测图。
图13自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]效价检测图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明进行说明，下述实施例不用于限制本发明，仅用于说明本发明，以使本发明技术方案更易于理解掌握。下属实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明均可从商业途径获得。
实施例1抗体的制备及检测
本实施例中外购抗体信息如下：外购CD11c[3.9](厂家：Biolgend，货号：301601)。
本实施例中制备了两种抗体：
抗体1：自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]；
抗体2：自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]；
自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]重链氨基酸序列为SEQ ID NO.17，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO.18；自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]重链氨基酸序列为SEQID NO.19，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO.20。常规方法设计表达相应抗体的核苷酸序列，重链SEQ ID NO.17、19对应的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23所示、轻链SEQID NO.18、20对应的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24所示。将核苷酸序列克隆至CHO稳转株后进行抗体稳转表达，进一步将构建载体导入CHO细胞。
转染和筛选：
(1)CHO细胞使用CHO CD培养基培养，2×105cells/mL接种，加4mM谷氨酰胺。细胞密度达到4×106cells/mL，活力大于95％，离心收集细胞，使用电转缓冲液重悬细胞，调整密度到1×107cells/mL。
(2)取无菌的EP管，加入0.8mL细胞悬液，加入5μg质粒，轻轻混匀，孵育15min，冰浴5min。电转仪设置参数为电压280V，脉冲次数3次，脉冲时间5ms，脉冲间隙0.784s，电转杯内径4mm。在每个电转杯中加入0.5mL细胞和质粒的混合液，放入电转仪启动电击程序，完成后迅速将电转杯中的细胞吸出，转移到装有20mL CHO CD培养基的125mL锥形瓶中，重复上述步骤电击第二个电转杯。轻轻混合摇瓶中的细胞，然后盖紧盖子置于37℃摇床中培养。
(3)48h后，将细胞转移到离心管中1000rpm离心5min。去掉上清，用20mL的含有2、5、20μM MSX的CHO CD培养基重悬细胞，计算细胞密度和活性。细胞密度在1.2×106cells/mL左右。
(4)将细胞转移到新的摇瓶中。从第七天开始，每两天观测细胞密度和活性。细胞密度从开始的1.2×106cells/mL往下降低，在第5-7天到达密度最低值，在第10-15天开始，细胞密度升高。当细胞密度升高到1×106cells/mL后，使用含有50μM MSX的CD OPM培养基将细胞传代到细胞密度3×105cells/mL，继续培养。
(5)当细胞密度增长到4×106cells/mL后，使用含有50μM MSX的CD OPM培养基将细胞扩增或传代，最低接种密度仍是3×105cells/mL，可以开始准备冻存或扩大培养。
(6)抗体收集方法：使用protein A亲和层析进行抗体纯化。
纯度检测：
(1)样本处理：分别取外购CD11c[3.9]、自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]、自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]10μg(样本：上样缓冲液体积比＝4：1)，100℃水浴30min，10000rpm室温离心1min后待用。其中，上样缓冲液购自上海天能生物科技有限公司(货号：180-8210D)。
(2)上样：取出预制胶安装于电泳槽内，注入电泳缓冲液，拨梳子，上样。蛋白Marker 10μL，样品的上样5μg。其中预制胶和电泳缓冲液均购自上海雅酶生物科技有限公司生产(货号：025C2010)。蛋白Marker购自上海天能生物科技有限公司(货号：180-60016)
(3)电泳：电压80V，电泳时间90min。溴酚蓝指示带至底部时即可结束电泳。
(4)染色：取出凝胶放于适宜考马斯亮蓝染色30min，脱色液体脱色1h，重复5次后，拍照。
结果表明实施例1制备得到的抗体重轻链完整，条带清晰，纯度达到90％以上，结果见图1。
实施例2抗体标记
本实施例中，外购抗体信息如下：外购CD11c[3.9]-PE(厂家：Biolgend，货号：301605)，外购CD11c[3.9]-FITC(厂家：Biolgend，货号：301603)。
使用FITC(异硫氰酸荧光素)或PE标记CD11c[ZXClone-HCD11c-02]和CD11c[ZXClone-HCD11c-03]。
1、FITC标记
(1)分别取CD11c[ZXClone-HCD11c-02]0.2mg和CD11c[ZXClone-HCD11c-03]0.2mg各于超滤管内，用浓度1mM的PBS洗涤抗体3次后。4000g，2min倒立离心超滤管，收集浓缩抗体，用浓度为1mM的PBS稀释至10mg/mL。
(2)取小分子染料FITC(按n(摩尔质量)抗体：n(摩尔质量)FITC＝1：15加染料)加入单克隆抗体反应液中，混匀。
(3)25℃室温，于振荡器上避光反应45min。
(4)转移反应液于超滤离心管内，用浓度1mM的PBS洗涤抗体5次后。
4000g，2min倒立离心超滤管，收集浓缩抗体，用浓度1mM的PBS稀释抗体终浓度为0.5mg/mL。
标记后的抗体记为CD11c[ZXClone-HCD11c-02]-FITC和CD11c[ZXClone-HCD11c-03]-FITC。
2、PE标记
按照“荧光蛋白和/或偶联蛋白单克隆抗体标记方法及其试剂盒(CN202010972671.X)”专利所述方法分别标记实施例1中制备得到的自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]、自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]，标记后的抗体记为自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]-PE、自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]-PE。
3、标记荧光抗体效果检测
1)于1.5mL离心管中加入100μL细胞质控品(Beckman Coulter，CAT#：6607077)。
2)取1μL的荧光标记抗体CD11c[ZXClone-HCD11c-02]-FITC、CD11c[ZXClone-HCD11c-02]-PE、CD11c[ZXClone-HCD11c-03]-FITC、CD11c[ZXClone-HCD11c-03]-PE分别加入样本中；取5μL的对照荧光抗体CD11c[3.9]-FITC(Biolegend，CAT#：301603)、CD11c[3.9]-PE(Biolegend，CAT#：301605)分别加入样本中。
3)上述4个样品均避光反应15分钟。
4)加入1mL溶血素，继续反应15分钟，溶血素选用正熙流式细胞仪用溶血素溶血素：浙湖械备20200133号)。
5)4000rpm离心2min，弃上清，加入500μL PBS重悬待检测样本。
6)流式细胞仪(安捷伦NovoCyte流式细胞仪)检测样本阳性细胞检测比例、图谱分群情况等指标，进而确定CD11c[ZXClone-HCD11c-02]和CD11c[ZXClone-HCD11c-03]是否能标记上荧光染料FITC和PE，以及标记的荧光抗体检测靶抗原的是否正确。
结果显示，FITC和PE均成功标记CD11c[ZXClone-HCD11c-02]和CD11c[ZXClone-HCD11c-03]，与商品化Biolegend的对照CD11c[3.9]比例相近(图2-图7)。
实施例3抗体特异性
本实施例中，所用抗体信息如下：
抗体1：实施例1制备得到的抗人CD11c抗体，记为CD11c[ZXClone-HCD11c-02]；
抗体2：实施例1制备得到的抗人CD11c抗体，记为CD11c[ZXClone-HCD11c-03]；
抗体3：小鼠同型对照抗体(RMG1克隆号)(厂家：Biolgend，货号：406601)
荧光抗体1：实施例2获得的标记抗体，记为CD11c[ZXClone-HCD11c-02]-PE；
荧光抗体2：实施例2获得的标记抗体，记为CD11c[ZXClone-HCD11c-03]-PE；
荧光抗体3：外购抗人CD11c[3.9]-PE(厂家：Biolgend，货号：301605)；
抗体特异性检测方法：
(1)淋巴细胞获取，取100μL人外周血样本(湖州正熙医学检验所，样本编号：02-048)。加入1mL溶血素，继续反应15分钟，溶血素选用正熙流式细胞仪用溶血素溶血素：浙湖械备20200133号)。
4000rpm离心2min，弃上清，加入100μL PBS重悬样本。
(2)本实施例分为实验组和对照组
实验组：在两个样本中分别加入抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]和CD11c[ZXClone-HCD11c-03]3μL，避光反应15分钟后，加入500μL PBS重悬样本，4000rpm离心2min，弃上清，再加入100μL PBS重悬样本。在2个封闭样本中加上CD11c[3.9]-PE测纯抗特异性。经纯抗CD11c[ZXClone-HCD11c-02]封闭后的样本中分别加入5μL CD11c[3.9]-PE。在经纯抗CD11c[ZXClone-HCD11c-03]封闭后的样本中分别加入5μL CD11c[3.9]-PE。
对照组：在样本中加入小鼠同型对照抗体(RMG1克隆号)纯抗1uL，避光反应15分钟后，加入500μL PBS重悬样本，4000rpm离心2min，弃上清，再加入100μL PBS重悬样本。在重悬样本分别加入5μL CD11c[3.9]-PE。
(3)所有样本避光反应15分钟后。加入500μL PBS重悬样本，4000rpm离心2min，弃上清，再加入500μL PBS重悬样本。
(5)流式细胞仪(安捷伦NovoCyte流式细胞仪)检测样本阳性细胞比例、图谱分群情况等指标，进而确定CD11c[ZXClone-HCD11c-02]和
CD11c[ZXClone-HCD11c-03]是否能特异性识别CD11c靶抗原。
由图8-图10可知，无CD11c[3.9]-PE荧光抗体的信号。对照组，同型对照抗体无法封闭，有CD11c[3.9]-PE的荧信号。以此说明，两个由CHO制备所得的CD11c抗体，克隆号ZXClone-HCD11c-02和克隆号ZXClone-HCD11c-03，能特异性识别封闭CD11c靶抗原。
实施例4抗体效价
本实施例选用抗体为：
抗体1：阳性对照，商品化CD11c[3.9](厂家：Biolgend，货号：301605)；
抗体2：实施例1获得的抗人CD11c抗体，记为CD11c[ZXClone-HCD11c-02]；
抗体3：实施例1获得的抗人CD11c抗体，记为CD11c[ZXClone-HCD11c-03]。
抗体效价检测方法：
首先，将已知浓度的CD11c[ZXClone-HCD11c-02]、CD11c[ZXClone-HCD11c-03]、商品化CD11c[3.9]先稀释为1mg/mL，然后用PBS按1：100，1：1000，1：3000，1：6000，1：12000，1：24000，1：48000，1：60000，1：96000的比例再次对抗体进行稀释。其中，CD11c[ZXClone-HCD11c-02]，CD11c[ZXClone-HCD11c-03]抗体作为实验组，商品化CD11c[3.9]抗体作为对照组。
实验组为两组，对照组为一组，每组取100μL人外周血样本(湖州正熙医学检验所，样本编号：02-048)。向4组实验中分别加入1mL溶血素(正熙流式细胞仪用溶血素溶血素：浙湖械备20200133号)，继续反应15min。4000rpm离心2min，弃上清。
实验组分别加入按比例稀释的100μL的CD11c[ZXClone-HCD11c-02]、CD11c[ZXClone-HCD11c-03]抗体，对照组分别加入按比例稀释的100μL商品化抗人CD11c[3.9]抗体，涡旋混匀，室温避光孵育15min。加入900μL PBS重悬混匀样本，4000rpm离心2min，弃上清。再加入100μL PBS，涡旋混匀。向每组中加入1μL羊抗鼠IgG-PE商品化流式荧光抗体(厂家：Biolgend，货号：405307)，涡旋混匀，室温避光孵育15分钟。加入900μL PBS重悬混匀样本，4000rpm离心2min，弃上清。再加入1000μL PBS重悬混匀样本，4000rpm离心2min，弃上清。加入500μL PBS重悬待检测样本，流式细胞仪检测。
3种抗体的亲和力分别为：
商品化CD11c[3.9]抗体，其亲和力(kd)为：165.1(1mg/mL)，见图11。
自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-02]抗体，其亲和力(kd)为：156.9(1mg/mL)，见图12。
自制鼠抗人CD11c[ZXClone-HCD11c-03]抗体，其亲和力(kd)为：149.2(1mg/mL)，见图13。
结果表明，CD11c[ZXClone-HCD11c-02]和CD11c[ZXClone-HCD11c-03]的亲和力均强于阳性对照CD11c[3.9]抗体的亲和力。
上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围。应当指出的是，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。因此，本发明专利的保护范围应以所附要求为准。
Claims (10)
1.一种抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗体包括重链和轻链，所述的重链包括重链互补决定区，所述的轻链包括轻链互补决定区，其中：
所述的抗体重链互补决定区包括如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述抗体的轻链可变区包括如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ IDNO：6所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3；
或所述的抗体重链互补决定区包括如SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8和SEQ ID NO：9所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；所述抗体的轻链可变区包括如SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11和SEQID NO：12所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
2.根据权利要求1所述的抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗CD11c抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：13，轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：14；或所述的抗CD11c抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：15，轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO：16。
3.根据权利要求1所述的抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗CD11c抗体为单克隆抗体。
4.根据权利要求3所述的抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗CD11c抗体为鼠源化抗体。
5.根据权利要求1-4所述的抗CD11c抗体，其特征在于，所述的抗CD11c抗体的重链氨基酸序列为SEQ ID NO：17，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO：18；或所述的抗CD11c抗体的重链氨基酸序列为SEQ ID NO：19，轻链氨基酸序列为SEQ ID NO：20。
6.一种核酸，其特征在于，所述的核酸编码权利要求1-5中的任意一项所述抗CD11c抗体。
7.一种表达载体，其特征在于，所述的表达载体包含权利要求6所述的核酸。
8.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞包括权利要求7所述的表达载体。
9.一种CD11c的检测方法，其特征在于，通过权利要求15任一项所述的抗CD11c抗体进行检测，所述的方法为非疾病诊断或治疗方法。
10.一种抗CD11c检测试剂盒，其特征在于，所述抗CD11c检测试剂盒包括权利要求1-5任一项所述的抗CD11c抗体，或权利要求6所述的核酸，或权利要求7所述的表达载体，或权利要求8所述宿主细胞。
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