CN117899125A - 一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂 - Google Patents
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Abstract
一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,涉及微生物制剂领域,该制剂含有发酵粘液乳杆菌DP116。所述发酵粘液乳杆菌DP116的保藏编号为CCTCC NO:M 20231972。所述发酵粘液乳杆菌DP116对于血糖代谢异常小鼠的血糖有一定的调控作用,有效改善了小鼠葡萄糖不耐受的情况以及改善了小鼠胰岛素抵抗,提高了小鼠肠道中短链脂肪酸含量;同时,通过灌胃发酵粘液乳杆菌DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌DP116后生元悬液后,小鼠肠道菌群的丰富度和群落多样性明显增加,小鼠肠道中有益细菌增加,有害细菌丰度降低,发酵粘液乳杆菌DP116起到了调节肠道菌群平衡的功效。
Description
技术领域
本发明涉及微生物制剂技术领域,具体涉及一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂。
背景技术
近年来,高血糖的发病率不断上升,这些疾病对人类健康和社会经济发展都带来了巨大的负面影响。研究表明,肠道菌群失调可能是这些疾病的一个重要原因之一。因此,通过改善肠道菌群来预防和治疗这些疾病成为了研究的热点。
目前许多研究表明,可以通过调节肠道菌群来对高血糖和代谢疾病产生积极的影响。益生菌是一种对人体有益的微生物,可以在肠道内定居并增殖。益生菌可以促进肠道内的正常微生物菌群平衡,提高短链脂肪酸(SCFA)的产生量。SCFA是一种能量来源,可促进肠道运动和正常肠道黏膜细胞的生长和修复,同时还能降糖和肥胖水平。因此,增加SCFA的产生可以降低高血糖和代谢疾病的风险。
后生元是益生菌经加工处理后的益生菌代谢物成分统称,包括菌体与代谢产物。研究证实,经过筛选的后生元,增强免疫能力优于原活菌,即使经由高温作用或肠胃消化液处理,仍保有高度生理活性。相较于传统活性益生菌,后生元虽然不具有活性但却保留了大量营养和有效成分,如维生素、脂质、蛋白质、多肽、有机酸、菌体成分等。因此,通过益生菌和/或后生元改善肠道菌群、增加SCFA的产生,可能是预防和治疗高血糖的一种有效方法。这一领域的研究将对高血糖的防治提供新的思路和方法,从而有望改善人类的健康状况,促进社会的可持续发展。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,为预防和治疗高血糖提供一种有效的方法。
本发明为解决技术问题所采用的的技术方案如下:
本发明提供的一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,所述制剂含有发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116。
其中,所述发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116于2023年10月20日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M 20231972。
优选的,所述制剂是发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液制剂或发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液制剂。
优选的,所述发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液制剂的制备方法如下:
将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116接种于液体MRS培养基,摇床培养后离心弃上清,得到菌体沉淀;将菌体沉淀用无菌生理盐水配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液。
优选的,所述发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液制剂的制备方法如下:
将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116接种于液体MRS培养基,摇床培养后离心弃上清,得到菌体沉淀;将菌体沉淀用无菌生理盐水配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液;将所得菌悬液离心弃上清后加入无菌纯净水重悬;将所得重悬菌液在冰浴中进行超声破壁处理,将超声所得液体进行真空冷冻干燥,得到发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元冻干粉;将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元冻干粉溶解于生理盐水中配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液。
优选的,所述制剂是指以有效剂量的发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116作为主要活性成份制成的药品、食品、饮品、肠内营养制剂、兽药或者饲料添加剂。
本发明还提供了一种发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116在制备预防和/或治疗高血糖制剂中的应用。
优选的,所述制剂是发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元。
本发明的有益效果是:
本发明通过将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116接种于MRS培养基,摇床培养后离心弃上清;将所得菌体沉淀配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液;将所得菌悬液离心弃上清后加入无菌纯净水重悬;将所得重悬菌液在冰浴中进行超声破壁处理,将超声所得液体进行真空冷冻干燥得到发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元冻干粉;将所得后生元冻干粉溶解于生理盐水中配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液。所制备的发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对于血糖代谢异常小鼠的血糖有一定的调控作用,有效改善了小鼠葡萄糖不耐受的情况以及改善了小鼠胰岛素抵抗,提高了小鼠肠道中短链脂肪酸含量;同时,通过灌胃发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液后,小鼠肠道菌群的丰富度和群落多样性明显增加,小鼠肠道中有益细菌增加,有害细菌丰度降低,发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116起到了调节肠道菌群平衡的功效。
附图说明
图1为实施例2中发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对小鼠体重的影响。
图2为实施例2中发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对对小鼠胰岛素抵抗评估结果。
图3为实施例2中各试验组肝脏油红O染色切片和附睾苏木精-伊红染色切片。图中,A:空白组肝脏油红O染色切片;C:模型组肝脏油红O染色切片;E:益生菌组肝脏油红O染色切片;G:后生元组肝脏油红O染色切片;B:空白组附睾苏木精-伊红染色切片;D:模型组附睾苏木精-伊红染色切片;F:益生菌组附睾苏木精-伊红染色切片;H:后生元组附睾苏木精-伊红染色切片。
图4为实施例2中发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对FOXO1A水平的调节作用。
图5为实施例2中发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对AKT水平的调节作用。
图6为实施例2中发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对小鼠肠道菌群的调节作用中的肠道菌群α多样性分析结果。
图7为实施例2中发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对小鼠肠道菌群的调节作用中的肠道菌群PCA聚类分析结果。
图8为实施例2中发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对小鼠肠道菌群的调节作用中的肠道中菌属分析结果。
图9为实施例2中发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对小鼠肠道菌群的调节作用中的肠道菌群菌属热图分析结果。
具体实施方式
下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验,均设置三次重复实验,结果取平均值。
实验材料:
固体MRS培养基:溶剂为水,蛋白胨(10g/L)、牛肉膏(10g/L)、酵母浸粉(5g/L)、乙酸钠(5g/L)、柠檬酸钠(5g/L)、磷酸二氢钾(2g/L)、硫酸镁(0.2g/L)、硫酸锰(0.05g/L)、吐温-80(1mL/L)和葡萄糖(20g/L)、琼脂15g/L;如无特殊说明,pH=7.0。
液体MRS培养基与固体MRS培养基的区别仅在于液体MRS培养基中不加入琼脂,如无特殊说明,pH=7.4。
SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠,购于长春市亿斯实验动物技术有限公司,生产许可证号:SCXK(吉)-2011-0004。进行为期一周的适应性喂养,动物房温度为21±2℃,相对湿度为(40±10)%,采食和饮水自由进行。
基础饲料,购于长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。
高脂饲料(%代表g/100g):基础饲料75%,猪油10%,蛋黄粉10%,胆固醇(食品级,购于郑州苍宇化工产品有限公司)5%。
小鼠胰岛素(INS)酶联免疫试剂盒:购于上海江莱生物科技有限公司。
实施例1关于发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116的分离和鉴定以及保藏
一、菌株分离
2022年10月末,从吉林省通化市收集新鲜腌制的酸菜样品放入运输培养基中,迅速置于冰盒内送至实验室进行菌株分离。将酸菜样品用匀浆机在无菌条件下匀浆,将匀浆液于无菌条件下梯度稀释,选择合适稀释度的匀浆液均匀涂于固体MRS培养基中,37℃培养48-72h,挑取典型的单菌落(圆形,边缘整齐,乳白色,有光泽且不透明)划线于固体MRS培养基上继续培养,多次划线培养纯化,得到纯菌落。纯培养的菌种接种到液体MRS培养基培养,然后制备成甘油管,置于-80冰箱保存。将所获得的菌株命名为DP116。
其中,所采用的固体MRS培养基的配置方法如下:
溶剂为三级水,蛋白胨10g/L、牛肉膏10g/L、酵母膏5g/L、KH2PO42g/L、乙酸钠5g/L、柠檬酸钠5g/L、MgSO4·7H2O 0.2g/L、MnSO4·4H2O 0.05g/L、吐温-801mL/L、葡萄糖20g/L、琼脂15g/L,pH=6.6。
二、菌株鉴定
1、生理生化鉴定结果:
1、生理生化鉴定结果:
将菌株DP116利用革兰氏染色法对其进行染色并观察,发现菌株DP116革兰氏染色阳性,呈短杆、短链排列,不运动,无芽孢。取50uL菌株DP116的培养液直接滴加在3%过氧化氢中,立即观察菌株的接触酶反应,不产生气泡,因此判定菌株DP116接触酶阴性。
根据菌株在固体培养基中的生长情况、菌落形态,结合革兰氏染色和接触酶反应试验结果,初步判定菌株DP116为乳杆菌。
2、16S rDNA序列同源性分析:
将菌株DP116接种于液体MRS培养基(液体MRS培养基与固体MRS培养基的区别仅在于不加入琼脂)中,37℃培养16h后,利用细菌基因组提取试剂盒提取基因组,利用细菌16S引物(27F:AGAGTTTGATCCTGGCTCAG;1492R:TACGGCTACCTTGTTACGACTT)对其进行PCR扩增,将扩增产物送至北京六合华大基因科技有限公司测序,所获得的16s rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。将16s rDNA序列通过BLAST程序在GenBank数据库中进行同源性比对分析,发现菌株DP116与Limosilactobacillusfermentum strainMG4263(Ge nBank:OP102570.1)和Limosilactobacillusfermentum strain 3B152(GenBank:OM948682.1)同源性达到99.3%。
根据以上鉴定结果,菌株DP116被鉴定为发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)。
三、菌株的保藏
本发明的一株发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116株,于2023年10月20日保藏于中国典型培养物保藏中心,简称CCTCC,地址为:湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内(武汉大学保藏中心),保藏编号为:CCTCC NO:M 20231972。
实施例2制备含有发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116的制剂
一、发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液的制备
将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116接种于液体MRS培养基(葡萄糖10g/L,蛋白胨(10g/L)、牛肉膏(10g/L)、酵母浸粉(5g/L)、乙酸钠(5g/L)、柠檬酸钠(5g/L)、磷酸二氢钾(2g/L)、硫酸镁(0.2g/L)、硫酸锰(0.05g/L)、吐温-80(1mL/L)和葡萄糖(20g/L),使用NaOH调节该培养基的pH为7.4),50℃摇床180rpm培养10h,于3000r/min、4℃离心10min,弃上清,得到菌体沉淀;将菌体沉淀用无菌生理盐水配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116菌悬液,根据其OD600吸光度及平板计数结果,调整菌悬液的菌数为8×109CFU/mL。
二、发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液的制备
取50mL上述发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液,于3000r/min、4℃离心10min,弃上清,加入50mL无菌纯净水重悬,得到重悬菌液;使用超声破碎仪,在冰浴中对重悬菌液进行超声破壁,超声条件为:15min,800W;对超声破壁后的液体进行真空冷冻干燥(预冻温度-40℃,预冻时间24h;冻结物料厚度为2cm;干燥室真空度为10Pa;冻干时间36h),得到发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元冻干粉;将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元冻干粉溶解于50mL无菌生理盐水中配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液,用于后续动物实验。
试验例1关于发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元对肝脏中脂质代谢以及肝损伤影响的研究
一、分组处理
SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠80只,进行为期一周的适应性喂养,采食和饮水由小鼠自由进行。然后进行随机分组,分为4组,每组20只,具体分组及处理如下:
空白组:第2-8周给予基础饲料,自由摄食饮水。第9-16周每天灌胃一次生理盐水(单次单只的给予量为0.2mL),每周称量体重,实验结束当天测定小鼠空腹血糖,随后处死小鼠,取血、肝脏组织、附睾脂肪组织和粪便。
模型组:第2-16周给予高脂饲料,5%果糖自由饮水,血糖增加量超过正常空白组均值20%为造模成功。第9-16周每天灌胃一次生理盐水(单次单只的给予量为0.2mL),每周称量体重,实验结束当天测定小鼠空腹血糖,随后处死小鼠,取血、肝脏组织、附睾脂肪组织和粪便。
益生菌组:第2-16周给予高脂饲料,5%果糖自由饮水,血糖增加量超过正常空白组均值20%为造模成功。第9-16周每天灌胃一次实施例2制备获得的发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液(单次单只的给予量为0.2mL),每周称量体重,实验结束当天测定小鼠空腹血糖,随后处死小鼠,取血、肝脏组织、附睾脂肪组织和粪便。
后生元组:第2-16周给予高脂饲料,5%果糖自由饮水,血糖增加量超过正常空白组均值20%为造模成功。第9-16周每天灌胃一次实施例2制备获得的发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液(单次单只的给予量为0.2mL),每周称量体重,实验结束当天测定小鼠空腹血糖,随后处死小鼠,取血、肝脏组织、附睾脂肪组织和粪便。
二、相关生理生化指标检测
1、小鼠体重检测
小鼠起始体重约为17g-20g之间,并无显著性差异。在给小鼠进行高脂高糖饲喂8周后,小鼠体重出现了显著变化,体重约为28.4g-31.7g,空白组小鼠体重约为25.3g-26.7g,高脂高糖饲喂小鼠体重较空白组增加20%以上,说明模型成功,如图1所示。第8周开始灌胃实施例2制备获得的发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液或者后生元悬液,第九周开始益生菌组和后生元组小鼠体重下降,第16周实验结束模型组小鼠平均体重达到31.2g,空白组、益生菌组和后生元组小鼠平均体重为25.7g、29g和28.8g。这说明发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116后生元悬液均对小鼠的体重有一定的调控作用。
2、小鼠胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)评估
利用小鼠胰岛素(INS)酶联免疫试剂盒测定小鼠血清中胰岛素含量,使用胰岛素抵抗指数HOMA-IR评估小鼠胰岛素抵抗和糖代谢异常水平:HOMA-IR=空腹胰岛素(mU/L)×空腹血糖(mmol/L)/22.5。
如图2所示,从胰岛素抵抗指数计算结果可以看出,与空白组相比,模型组小鼠HOMA-IR水平极显著增加(P<0.01)(##与空白组比较,差异极显著(P<0.01);与模型组比较,差异极显著(P<0.01)),高糖和高脂饮食会导致胰岛素抵抗;与模型组相比,使用发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116后生元悬液干预后小鼠胰岛素抵抗指数下降,且差异极显著(P<0.01),并且给予发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116后生元悬液干预后小鼠胰岛素抵抗指数下降更多,这说明发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116后生元悬液对于胰岛素抵抗具有更出色的调节作用。
3、对肝脏组织和附睾脂肪组织的作用
油红O染色可特异性的将组织内甘油三酯等中性脂肪着色成红色。如图3(A、C、E、G)所示,通过对各组小鼠肝脏组织的油红O染色病理观察发现,空白组小鼠肝细胞、肝小叶结构清晰、完整、无脂质浸润;而模型组小鼠肝脏脂质浸润现象严重,中性脂肪分布密集;益生菌组和后生元组相对于模型组,一定程度上减少了小鼠肝脏脂质和浸润的现象,并且中性脂肪分布密度明显降低。
在检查附睾脂肪组织时,空白组(图3B)观察到有规则的脂肪细胞结构和大小;而模型组(图3D)的脂肪细胞最大,细胞壁最薄;益生菌组(图3F)在一定程度上抑制脂肪细胞的增加;最明显的影响是在后生元组(图3H),显示脂肪细胞大小接近正常组。
4、对FOX01A/AKT通路的调节作用
FOX01A/AKT是胰岛素抵抗和糖代谢异常的调节通路。因此,本发明通过检测FOX01A/AKT通路来研究发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116对胰岛素抵抗和糖代谢异常的影响。在肥胖模型组中,FOXO1A水平被抑制(图4),AKT水平被上调(图5)。补充发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116可减轻肥胖所引起的胰岛素抵抗和糖代谢异常。
5、对小鼠肠道菌群的调节作用
Chao 1指数反映样品中群落的丰富度,指数越大,物种越丰富;Shannon指数反映群落的多样性,Shannon指数越大,群落多样性越大。
由图6可以看出,模型组小鼠Chao 1指数均低于空白组,差异极显著(P<0.01);而后生元组Chao 1指数和Shannon指数均高于模型组,且差异显著(P<0.05),说明通过发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液后,小鼠肠道菌群的丰富度和群落多样性明显增加。
主坐标分析(PCoA)分析组间差异结果如图7所示,从图7中可以更加直观的观察到组间微生物群落差异。空白组与模型组距离较远且单独成簇,说明两组微生物群落结构差异较大。益生菌组与后生元组高度重合,说明发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液对于小鼠肠道微生物群落改变效果相似,肠道群落差异较小;同时后生元组与空白组相近,说明给予发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液干预后,模型组小鼠肠道微生物群落结构更为接近空白组。
对各组小鼠肠道菌群属水平进行了分析,分析结果见图8和图9。给予发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液和发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液干预后,试验小鼠肠道菌群中的微生物丰度发生变化。模型组小鼠肠道中乳杆菌属(Limosilactobacillus)丰度较空白组、益生菌组、后生元组降低,而Allobaculum等有害微生物丰度增加。肠道中乳杆菌属(Limosilactobacillus)可以代谢产生短链脂肪酸,从而增加营养物质的吸收,改善代谢异常;Allobaculum代谢产生有害物质,与肠上皮有密切互作,且与炎症性肠病(IBD)相关。另外,Allobaculum可降解肠上皮黏液层中的粘蛋白O-聚糖。益生菌组和后生元组小鼠肠道中有益细菌增加,有害细菌丰度降低,这充分说明了发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116起到了调节肠道菌群平衡的功效。
6、对肠道中短链脂肪酸含量的影响
肠道中短链脂肪酸具有抑制肠道中有害微生物生长、抗炎、增加饱腹感等有益的作用。各组小鼠肠道中短链脂肪酸含量见表1。模型组小鼠粪便中乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸含量明显低于正常组。与模型组比较,益生菌组和后生元组小鼠粪便中乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸含量显著升高(p<0.01)。对比益生菌组和后生元组粪便中短链脂肪酸,后生元组的乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、戊酸含量均高于益生菌组。这些结果表明,发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116后生元悬液相较于发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116菌悬液,更有利于提高模型组小鼠肠道中短链脂肪酸含量。
表1各组小鼠粪便中短链脂肪酸含量
分组 | 乙酸(μg/g) | 丙酸(μg/g) | 异丁酸(μg/g) | 丁酸(μg/g) | 异戊酸(μg/g) | 戊酸(μg/g) |
健康组 | 856.37±88.09 | 365.32±50.3 | 42.11±2.85 | 213.2±39.66 | 35,65±1.07 | 21.87±3.27 |
模型组 | 689.9±38.63 | 153.23±23.71 | 18.96±4.32 | 165.93±41.19 | 17.65±4.63 | 24.64±3.97 |
益生菌组 | 737.94±21.64** | 198.7±40.23** | 31.34±1.86** | 205.15±18.84** | 23.37±3.86** | 25.83±7.26** |
后生元组 | 875.97±55.87** | 308.13±41.86** | 36.1±2.7** | 271.55±55.87** | 24.93±2.54** | 36.64±2.92** |
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,其特征在于,所述制剂含有发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116。
2.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,其特征在于,所述发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116于2023年10月20日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M20231972。
3.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,其特征在于,所述制剂是发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液制剂或发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液制剂。
4.根据权利要求3所述的一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,其特征在于,所述发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液制剂的制备方法如下:
将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116接种于液体MRS培养基,摇床培养后离心弃上清,得到菌体沉淀;将菌体沉淀用无菌生理盐水配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液。
5.根据权利要求3所述的一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,其特征在于,所述发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液制剂的制备方法如下:
将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116接种于液体MRS培养基,摇床培养后离心弃上清,得到菌体沉淀;将菌体沉淀用无菌生理盐水配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116菌悬液;将所得菌悬液离心弃上清后加入无菌纯净水重悬;将所得重悬菌液在冰浴中进行超声破壁处理,将超声所得液体进行真空冷冻干燥,得到发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元冻干粉;将发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元冻干粉溶解于生理盐水中配制成发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元悬液。
6.根据权利要求1所述的一种用于预防和/或治疗高血糖的制剂,其特征在于,所述制剂是指以有效剂量的发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillus fermentum)DP116作为主要活性成份制成的药品、食品、饮品、肠内营养制剂、兽药或者饲料添加剂。
7.发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116在制备预防和/或治疗高血糖制剂中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述制剂是发酵粘液乳杆菌(Limosilactobacillusfermentum)DP116后生元。
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