CN117897378A - 对除草剂具有增加的耐受性的植物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于在植物栽培地点控制不期望的植被的方法，该方法包括以下步骤：在所述地点提供包含至少一种核酸的植物，向所述地点施用有效量的所述除草剂，该至少一种核酸包含编码对抑制PPO的除草剂具有抗性或耐受性的原卟啉原氧化酶(PPO)的核苷酸序列。本发明进一步涉及包含野生型或突变PPO酶的植物，以及获得这样的植物的方法。

Description

对除草剂具有增加的耐受性的植物
技术领域
本发明总体上涉及用于赋予植物对除草剂的农业水平的耐受性的方法。特别地，本发明涉及对抑制PPO的除草剂具有增加的耐受性的植物。更特定地，本发明涉及通过诱变和杂交育种以及转化获得的、对抑制PPO的除草剂具有增加的耐受性的方法和植物。
背景技术
自20世纪60年代以来，抑制原卟啉原氧化酶(下文称为Protox或PPO；EC:1.3.3.4)(原卟啉IX生物合成中的关键酶)的除草剂已经用于进行选择性杂草控制。PPO催化叶绿素和血红素生物合成的最后一个共同步骤，即原卟啉原IX氧化为原卟啉IX(Matringe等人1989.Biochem.[生物化学]1.260:231)。抑制PPO的除草剂包括许多不同结构类别的分子(Duke等人1991.Weed Sci.[杂草科学]39:465；Nandihalli等人1992.PesticideBiochem.Physiol.[杀有害生物剂生物化学和生理学]43:193；Matringe等人1989.FEBSLett.[欧洲生化学会联合会快报]245:35；Yanase和Andoh.1989.PesticideBiochem.Physiol.[杀有害生物剂生物化学和生理学]35:70)。这些除草化合物包括二苯基醚类{例如乳氟禾草灵(lactofen)，(+-)-5-{2-氯-4-(三氟甲基)苯氧基}-2-硝基苯甲酸2-乙氧基-1-甲基-2-氧代乙基酯；三氟羧草醚(acifluorfen)，5-{2-氯-4-(三氟甲基)苯氧基}-2-硝基苯甲酸；其甲基酯；或乙氧氟草醚(oxyfluorfen)，2-氯-1-(3-乙氧基-4-硝基苯氧基)-4-(三氟苯)}、噁二唑类(oxidiazoles)(例如噁草酮(oxadiazon)，3-{2,4-二氯-5-(1-甲基乙氧基)苯基}-5-(1,1-二甲基乙基)-1,3,4-噁二唑-2-(3H)-酮)、环酰亚胺类(例如S-23142，N-(4-氯-2-氟-5-炔丙基氧基苯基)-3,4,5,6-四氢邻苯二甲酰亚胺；氯代酞酰亚胺(chlorophthalim)，N-(4-氯苯基)-3,4,5,6-四氢邻苯二甲酰亚胺)、苯基吡唑类(例如TNPP-乙基，2-{1-(2,3,4-三氯苯基)-4-硝基吡唑基-5-氧基}丙酸乙酯；M&B 39279)、吡啶衍生物(例如LS 82-556)、和吡落草(phenopylate)及其邻苯基吡咯烷代和哌啶代氨基甲酸酯类似物。这些化合物中的许多竞争性抑制酶催化的正常反应，显然充当底物类似物。
抑制PPO的除草剂的施用导致原卟啉原IX在叶绿体和线粒体中积累，据信该原卟啉原IX会渗漏到细胞质溶胶中，并在细胞质溶胶中被过氧化物酶氧化。当暴露于光时，原卟啉IX导致细胞质溶胶中单线态氧的形成和其他活性氧物质的形成，这可以引起脂质过氧化和膜破坏，从而导致细胞迅速死亡(Lee等人1993.Plant Physiol.[植物生理学]102:881)。
并非所有的PPO酶都对抑制植物PPO酶的除草剂敏感。大肠杆菌(Escherichiacoli)PPO酶和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)PPO酶(Sasarmen等人1993.Can.J.Microbiol.[加拿大微生物学杂志]39:1155；Dailey等人1994.J.Biol.Chem.[生物化学杂志]269:813)对这些除草抑制剂具有抗性。已经报道了对苯酰亚胺除草剂S-23142具有抗性的单细胞藻类莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)的突变体(Kataoka等人1990.J.Pesticide Sci.[杀有害生物剂科学杂志]15:449；Shibata等人1992.于Research in Photosynthesis[光合作用研究],第III卷,N.Murata,编辑Kluwer:Netherlands.[克吕韦尔出版社：荷兰]第567-70页中)。这些突变体中的至少一种似乎具有改变的PPO活性，其不仅对用于选择突变体的除草抑制剂具有抗性，而且对其他类别的protox抑制剂具有抗性(Oshio等人1993.Z.Naturforsch.48c:339；Sato等人1994.于ACSSymposium on Porphyric Pesticides[美国化学学会关于卟啉类杀有害生物剂的研讨会],S.Duke,编辑ACS Press:Washington,D.C.[美国化学学会出版社：华盛顿特区]中)。还报道了对抑制剂S-21432具有抗性的突变体烟草细胞系(Che等人1993.Z.Naturforsch.48c:350)。营养缺陷型大肠杆菌突变体已被用于确认克隆植物对抑制PPO的除草剂的除草剂抗性。
有三种主要策略可用于使植物对除草剂耐受，即(1)用将除草剂或其活性代谢物转化为无毒产物的酶(例如对溴苯腈或basta具有耐受性的酶(EP 242236，EP 337899))对该除草剂进行解毒；(2)将靶酶突变成对除草剂或其活性代谢物敏感性较低的功能性酶，例如对草甘膦(glyphosate)具有耐受性的酶(EP 293356，Padgette S.R.等人,J.Biol.Chem.[生物化学杂志],266,33,1991)；或(3)过表达敏感酶，从而在植物中产生相对于除草剂而言足够的靶酶，考虑到该酶的动力学常数，从而尽管存在其抑制剂，仍有足够的功能性酶可用。描述了用于成功获得对PPO抑制剂耐受的植物的第三种策略(参见例如，US 5,767,373或US 5,939,602及其专利家族成员)。另外，US 2010/0100988和WO 2007/024739披露了编码具有酶活性的氨基酸序列的核苷酸序列，使得这些氨基酸序列对PPO抑制剂除草化学物质、特别是3-苯基尿嘧啶抑制剂特异性PPO突变体具有抗性。
WO 2012/080975披露了以下植物：所述植物对称为(1,5-二甲基-6-硫代-3-(2,2,7-三氟-3-氧代-4-(丙-2-炔基)-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪-6-基)-1,3,5-三嗪烷-2,4-二酮)的抑制PPO的除草剂的耐受性通过用编码突变PPO突变酶的核酸转化所述植物而增加。特别地，WO 2012/080975披露了引入编码苋属II型PPO的突变PPO(其中位置128处的精氨酸已被亮氨酸、丙氨酸或缬氨酸替代，并且位置420处的苯丙氨酸已被甲硫氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸或苏氨酸替代)的核酸赋予了对苯并噁嗪酮衍生物除草剂的增加的耐受性/抗性。WO 2013/189984披露了以下植物：所述植物对PPO抑制剂的耐受性通过用编码突变PPO酶(其中对应于苋属II型PPO的位置397的亮氨酸已被替代，并且对应于苋属II型PPO的位置420的苯丙氨酸已被替代)的核酸转化所述植物而增加。WO2015/022636披露了以下植物：所述植物对PPO抑制剂的耐受性通过用编码突变PPO酶(其中对应于苋属II型PPO的位置128的精氨酸已被替代，并且对应于苋菜II型PPO的位置420的苯丙氨酸已被替代，但是用与WO 2012/080975中披露的氨基酸不同的氨基酸进行替代)的核酸转化所述植物而增加。WO 2015/092706描述了来自多种生物的PPO多肽，这些PPO多肽已经突变以包含用于苋属II型PPO的有利突变。WO 2015/022640披露了来自大穗看麦娘(Alopecurusmyosuroides)的PPO多肽及其突变体，其赋予对广谱抑制PPO的除草剂的耐受性。
本发明的诸位发明人现已出人意料地发现，那些类型的突变体赋予了对一类新的PPO抑制剂(下文中描述为苯基尿嘧啶或苯基尿嘧啶除草剂)的增加的耐受性/抗性。因此，迄今为止，现有技术尚未描述含有根据本发明的突变PPO核酸的苯基尿嘧啶耐受性植物，这些植物对广泛选择的苯基尿嘧啶具有耐受性/抗性。因此，本领域需要作物植物和对苯基尿嘧啶具有增加的耐受性并含有至少一种野生型和/或突变PPO核酸(根据本发明)的作物植物。还需要用于控制这样的作物植物中或作物植物附近杂草生长的方法。当将除草剂施用于含有作物植物的区域或施用于作物植物时，这些组合物和方法将允许使用喷洒技术。
发明内容
通过本发明解决技术问题，本发明涉及用于在植物栽培地点控制不期望的植被的方法，该方法包括以下步骤：
a)在所述地点提供包含至少一种核酸的植物，该至少一种核酸包含编码对“抑制PPO的除草剂”具有抗性或耐受性的原卟啉原氧化酶(PPO)多肽的核苷酸序列；
b)向所述地点施用有效量的所述除草剂，
其中该抑制PPO的除草剂是具有式(I)的苯基尿嘧啶，
其中取代基具有以下含义：
R1氢、NH2、C1-C6-烷基或C3-C6-炔基；
R2氢、C1-C6-烷基或C1-C6-卤代烷基；
R3氢或C1-C6-烷基；
R4 H或卤素；
R5卤素、CN、C1-C3-卤代烷基、C1-C3-烷氧基、C1-C3-卤代烷氧基、C1-C3-烷硫基、(C1-C3-烷基)氨基、二(C1-C3-烷基)氨基、C1-C3-烷氧基-C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基羰基；
R6 H、卤素、C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基；
R7 OR8、SR8、NR9R10、NR8OR9、NR8S(O)2R9或NR8S(O)2NR9R10，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C3-C6-卤代烯基、C3-C6-卤代炔基、C1-C6-氰基烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-炔氧基羰基-C1-C6-烷基、氨基、(C1-C6-烷基)氨基、二(C1-C6-烷基)氨基、(C1-C6-烷基羰基)氨基、氨基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、氨基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基，
-N＝CR11R12，其中R11和R12彼此独立地是H、C1-C4-烷基或苯基；
C3-C6-环烷基、C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基、C3-C6-杂环基、C3-C6-杂环基-C1-C6-烷基、苯基、苯基-C1-C4-烷基或5元或6元杂芳基，
其中每个环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环可以被一至四个选自R13或3元至7元碳环的取代基取代，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员
-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
其中R13是卤素、NO2、CN、C1-C4-烷基、C1-C4-卤代烷基、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷氧基羰基；
R9、R10彼此独立地是R8，或一起形成3元至7元碳环，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员：-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
n 1至3；
Q CH2、O、S、SO、SO2、NH或(C1-C3-烷基)N；
W O或S；
X NH、NCH3、O或S；
Y O或S；
Z苯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基或吡嗪基，
其各自任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
包括其农业上可接受的盐、酰胺、酯或硫酯，前提是这些具有式(I)的苯基尿嘧啶具有羧基基团，
并且其中该有效量的所述除草剂不杀死a)的除草剂耐受性植物或抑制其生长。
在一个实施例中，除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含以下基序1、2和/或3中的一个或多个：
a.基序1：SQ[N/K/H]KRYI，其中所述基序内位置5处的Arg被任何其他氨基酸取代；
b.基序2：TLGTLFSS，其中所述基序内位置2处的Leu、和/或位置3处的Gly、和/或位置5处的Leu被任何其他氨基酸取代；
c.基序3：[F/Y]TTF[V/I]GG，其中所述基序内位置4处的Phe被任何其他氨基酸取代。
在另一个实施例中，除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的氨基酸序列的变体，该变体包含以下取代中的一个或多个：
a.对应于SEQ ID NO:1的Arg128的氨基酸被任何其他氨基酸取代
b.对应于SEQ ID NO:1的Gly211的氨基酸被任何其他氨基酸取代
c.对应于SEQ ID NO:1的Leu397的氨基酸被任何其他氨基酸取代
d.对应于SEQ ID NO:1的Gly398的氨基酸被任何其他氨基酸取代
e.对应于SEQ ID NO:1的Leu400的氨基酸被任何其他氨基酸取代
f.对应于SEQ ID NO:1的Phe420的氨基酸被任何其他氨基酸取代。
在仍另一个实施例中，除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含SEQ IDNO:265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960的氨基酸序列或其变体或同源物。
在仍另一个实施例中，除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含SEQ ID NO:240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262或264的氨基酸序列。
另一个目的涉及鉴定编码对苯基尿嘧啶除草剂具有抗性或耐受性的突变PPO的核苷酸序列的方法，该方法包括：
a)生成编码突变PPO的核酸的文库，
b)通过在细胞或植物中表达所述核酸中的每一种并用苯基尿嘧啶处理所述细胞或植物来筛选所得编码突变PPO的核酸的群体，
c)将所述编码突变PPO的核酸的群体提供的苯基尿嘧啶除草剂耐受水平与编码对照PPO的核酸提供的苯基尿嘧啶耐受水平进行比较，
d)选择至少一种编码突变PPO的核酸，与编码对照PPO的核酸提供的对苯基尿嘧啶的耐受水平相比，该编码突变PPO的核酸提供了显著增加的对苯基尿嘧啶的耐受水平。
在优选的实施例中，与编码对照PPO的核酸提供的对苯基尿嘧啶的耐受性相比，在步骤d)中选择的编码突变PPO的核酸提供至少2倍的对苯基尿嘧啶的耐受性。
抗性或耐受性可以通过生成包含步骤a)文库的核酸序列的转基因植物并将所述转基因植物与对照植物进行比较来确定。
另一个目的涉及鉴定植物或藻类的方法，该植物或藻类含有编码对苯基尿嘧啶具有抗性或耐受性的突变PPO的核酸，该方法包括：
a)在植物细胞或绿藻的培养物中鉴定有效量的苯基尿嘧啶，
b)用诱变剂处理所述植物细胞或绿藻，
c)使所述诱变的细胞群体与a)中鉴定的有效量的苯基尿嘧啶除草剂接触，
d)选择在这些测试条件下存活的至少一个细胞，
e)对来自d)中选择的细胞的PPO基因进行PCR扩增和测序，并将这样的序列分别与野生型PPO基因序列进行比较。
在优选的实施例中，诱变剂是甲基磺酸乙酯。
在另一个实施例中，本发明涉及由野生型或突变PPO核酸(根据本发明)转化的并表达其的植物细胞，或已经被突变(以获得表达，优选地过表达，野生型或突变PPO核酸的植物(根据本发明))的植物，其中所述核酸在该植物细胞中的表达导致，与植物细胞的野生型品种相比，对苯基尿嘧啶的抗性或耐受性增加。
在另一个实施例中，本发明涉及表达诱变的或重组突变PPO多肽的植物，并且其中与植物的相应野生型品种相比，所述突变PPO当在植物中表达时赋予植物增加的苯基尿嘧啶耐受性。
在另一个实施例中，本发明涉及包含根据本发明的植物细胞的植物，其中核酸在该植物中的表达导致，与植物的野生型品种相比，该植物对苯基尿嘧啶除草剂的抗性增加。
本发明的植物可以是转基因的或非转基因的。
优选地，与植物的野生型品种相比，本发明的核酸在植物中的表达导致该植物对苯基尿嘧啶除草剂的抗性增加。
在另一个实施例中，本发明涉及用于使根据本发明的植物生长同时控制所述植物附近的杂草的方法，所述方法包括以下步骤：
a)使所述植物生长；以及
b)将包含苯基尿嘧啶除草剂的除草剂组合物施用于植物和杂草，其中该除草剂通常以可抑制相应野生型植物生长的除草剂的水平抑制原卟啉原氧化酶。
在另一个实施例中，本发明涉及由包含本发明的植物细胞的转基因植物产生的种子，或涉及由表达诱变的PPO多肽的非转基因植物产生的种子，其中与种子的野生型品种相比，该种子是对苯基尿嘧啶除草剂抗性增加的真实育种(true breeding)。
在另一个实施例中，本发明涉及产生与植物细胞的野生型品种相比对苯基尿嘧啶除草剂的抗性增加的转基因植物细胞的方法，该方法包括用包含野生型或突变PPO核酸的表达盒转化该植物细胞。
在另一个实施例中，本发明涉及产生转基因植物的方法，该方法包括：(a)用包含野生型或突变PPO核酸的表达盒转化植物细胞，以及(b)从植物细胞生成对苯基尿嘧啶除草剂具有增加的抗性的植物。
优选地，表达盒进一步包含在植物中具有功能的转录起始调控区和翻译起始调控区。
在另一个实施例中，本发明涉及使用本发明的突变PPO作为选择性标志物。本发明提供了鉴定或选择转化的植物细胞、植物组织、植物或其部分的方法，该方法包括a)提供转化的植物细胞、植物组织、植物或其部分，其中所述转化的植物细胞、植物组织、植物或其部分包含编码如下文所述的本发明的突变PPO多肽的分离的核酸，其中该多肽用作选择标志物，并且其中所述转化的植物细胞、植物组织、植物或其部分可以任选地包含进一步分离的目的核酸；b)使该转化的植物细胞、植物组织、植物或其部分与至少一种抑制PPO的抑制化合物接触；c)确定该植物细胞、植物组织、植物或其部分是否受到抑制剂或抑制化合物的影响；以及d)鉴定或选择该转化的植物细胞、植物组织、植物或其部分。
本发明还体现在含有本文所述突变的纯化突变PPO蛋白中，这些蛋白可用于分子建模研究中，以设计对除草剂耐受性的进一步改进。蛋白质纯化的方法是众所周知的，并且可以使用可商购的产品或特别设计的方法容易地完成，例如在Protein Biotechnology[蛋白质生物技术],Walsh和Headon(Wiley[威利公司],1994)中阐述的。
在另一个实施例中，本发明涉及可用于杂草控制的组合，该组合包含(a)编码根据本发明的突变PPO多肽的多核苷酸，该多核苷酸能够在植物中表达，从而向该植物提供对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性；和(b)苯基尿嘧啶除草剂。
在另一个实施例中，本发明涉及用于制备可用于杂草控制的组合的方法，该方法包括(a)提供编码根据本发明的突变PPO多肽的多核苷酸，该多核苷酸能够在植物中表达，从而向该植物提供对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性；以及(b)提供苯基尿嘧啶除草剂。
在优选的实施例中，所述提供多核苷酸的步骤包括提供含有该多核苷酸的植物。
在另一个优选实施例中，所述提供多核苷酸的步骤包括提供含有该多核苷酸的种子。
在另一个优选实施例中，所述方法进一步包括将苯基尿嘧啶除草剂施用于种子的步骤。
在另一个实施例中，本发明涉及可用于杂草控制的组合在植物栽培地点控制杂草的用途，该组合包含(a)编码根据本发明的突变PPO多肽的多核苷酸，该多核苷酸能够在植物中表达，从而向该植物提供对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性；和(b)苯基尿嘧啶除草剂。
附图说明
pBas05425
SEQ ID NO:661；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；
pBas05426
SEQ ID NO:661；对大豆进行密码子优化；并与源自糙果苋(Amaranthustuberculatus)的PPO2的线粒体/叶绿体双重靶向肽融合；
pBas05427
SEQ ID NO:661；其中位置129处的精氨酸被谷氨酰胺取代；对大豆进行密码子优化；并与PPO1的叶绿体靶向肽融合，
pBas05428
SEQ ID NO:665；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；
图1示出了喷洒12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯三天后单个橹豆(Glycine max)转化体的除草剂损害百分比
图2示出了喷洒4g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯三天后单个橹豆转化体的除草剂损害百分比
图3示出了喷洒12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯三天后单个橹豆转化体的除草剂损害百分比
图4示出了喷洒25g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯四天后单个橹豆转化体的除草剂损害百分比
图5示出了喷洒25g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯三天后单个橹豆转化体的除草剂损害百分比
图6A–H示出了用4种携带除草剂抗性/耐受性PPO酶的构建体转化的单个橹豆(T0)植物
A：
SEQ ID NO:661；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；4DAT
B：
SEQ ID NO:661；对大豆进行密码子优化；并与源自糙果苋(Amaranthustuberculatus)的PPO2的线粒体/叶绿体双重靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；4DAT
C：
SEQ ID NO:661；其中位置129处的精氨酸被谷氨酰胺取代；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；4DAT
D:
1：SEQ ID NO:661；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；4DAT
2：SEQ ID NO:661；其中位置129处的精氨酸被谷氨酰胺取代；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；4DAT
3：SEQ ID NO:661；对大豆进行密码子优化；并与源自糙果苋(Amaranthustuberculatus)的PPO2的线粒体/叶绿体双重靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；4DAT
E：
SEQ ID NO:661；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；6DAT；与未转化的野生型相比
F：
SEQ ID NO:661；对大豆进行密码子优化；并与源自糙果苋(Amaranthustuberculatus)的PPO2的线粒体/叶绿体双重靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；6DAT；与未转化的野生型相比
G：
SEQ ID NO:661；其中位置129处的精氨酸被谷氨酰胺取代；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；6DAT；与未转化的野生型相比
H：
SEQ ID NO:665；对大豆进行密码子优化；并与源自亚麻荠(Camelina sativa)的PPO1的叶绿体靶向肽融合；12.5g a.i./ha 2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；15DAT；
具体实施方式
本文使用的冠词“一个”和“一种”(“a”和“an”)是指一个/种或多于一个/种(即，至少一个/种)该冠词的语法宾语。举例来说，“一个/种元素”意指一个/种或多个/种元素。
同样如本文所用，用词“包含(comprising)”或其变体如“包含(comprises或comprising)”应理解为意指，包括所述元素、整数或步骤，或元素、整数或步骤的组，但不排除任何其他元素、整数或步骤，或元素、整数或步骤的组。
本发明的诸位发明人已经发现，通过过表达编码下文所述的PPO多肽的核酸可以显著增加植物对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性或抗性。
本发明涉及用于在植物栽培地点控制不期望的植被的方法，该方法包括以下步骤：
a)在所述地点提供包含至少一种核酸的植物，该至少一种核酸包含编码对如下文所定义的抑制PPO的除草剂具有抗性或耐受性的原卟啉原氧化酶(突变PPO)的核苷酸序列，
b)向所述地点施用有效量的所述除草剂，
其中该抑制PPO的除草剂是具有式(I)的苯基尿嘧啶，
其中
R1氢、NH2、C1-C6-烷基或C3-C6-炔基；
R2氢、C1-C6-烷基或C1-C6-卤代烷基；
R3氢或C1-C6-烷基；
R4 H或卤素；
R5卤素、CN、C1-C3-卤代烷基、C1-C3-烷氧基、C1-C3-卤代烷氧基、C1-C3-烷硫基、(C1-C3-烷基)氨基、二(C1-C3-烷基)氨基、C1-C3-烷氧基-C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基羰基；
R6 H、卤素、C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基；
R7 OR8、SR8、NR9R10、NR8OR9、NR8S(O)2R9或NR8S(O)2NR9R10，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C3-C6-卤代烯基、C3-C6-卤代炔基、C1-C6-氰基烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-炔氧基羰基-C1-C6-烷基、氨基、(C1-C6-烷基)氨基、二(C1-C6-烷基)氨基、(C1-C6-烷基羰基)氨基、氨基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、氨基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基，
-N＝CR11R12，其中R11和R12彼此独立地是H、C1-C4-烷基或苯基；
C3-C6-环烷基、C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基、C3-C6-杂环基、C3-C6-杂环基-C1-C6-烷基、苯基、苯基-C1-C4-烷基或5元或6元杂芳基，
其中每个环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环可以被一至四个选自R13或3元至7元碳环的取代基取代，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员
-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
其中R13是卤素、NO2、CN、C1-C4-烷基、C1-C4-卤代烷基、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷氧基羰基；
R9、R10彼此独立地是R8，或一起形成3元至7元碳环，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员：-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
n 1至3；
Q CH2、O、S、SO、SO2、NH或(C1-C3-烷基)N；
W O或S；
X NH、NCH3、O或S；
Y O或S；
Z苯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基或吡嗪基，
其各自任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
包括其农业上可接受的盐、酰胺、酯或硫酯，前提是这些具有式(I)的苯基尿嘧啶具有羧基基团，
术语“控制不期望的植被”应理解为意指杀死杂草和/或以其他方式阻滞或抑制杂草的正常生长。杂草在最广泛意义上理解，意指生长在不期望其出现的地方，例如(作物)植物栽培地点的所有那些植物。本发明的杂草包括例如双子叶杂草和单子叶杂草。双子叶杂草包括但不限于以下属的杂草：白芥属(Sinapis)、独行菜属(Lepidium)、拉拉藤属(Galium)、繁缕属(Stellaria)、母菊属(Matricaria)、春黄菊属(Anthemis)、牛膝菊属(Galinsoga)、藜属(Chenopodium)、荨麻属(Urtica)、千里光属(Senecio)、苋属、马齿苋属(Portulaca)、苍耳属(Xanthium)、旋花属(Convolvulus)、番薯属(Ipomoea)、蓼属(Polygonum)、田菁属(Sesbania)、豚草属(Ambrosia)、蓟属(Cirsium)、飞廉属(Carduus)、苦苣菜属(Sonchus)、茄属(Solanum)、蔊菜属(Rorippa)、节节菜属(Rotala)、母草属(Lindernia)、野芝麻属(Lamium)、婆婆纳属(Veronica)、苘麻属(Abutilon)、角刺酸模属(Emex)、曼陀罗属(Datura)、堇菜属(Viola)、鼬瓣花属(Galeopsis)、罂粟属(Papaver)、矢车菊属(Centaurea)、车轴草属(Trifolium)、毛莨属(Ranunculus)和蒲公英属(Taraxacum)。单子叶杂草包括但不限于以下属的杂草：稗属(Echinochloa)、狗尾草属(Setaria)、黍属(Panicum)、马唐属(Digitaria)、梯牧草属(Phleum)、早熟禾属(Poa)、羊茅属(Festuca)、穇属(Eleusine)、臂形草属(Brachiaria)、黑麦草属(Lolium)、雀麦属(Bromus)、燕麦属(Avena)、莎草属(Cyperus)、高粱属(Sorghum)、冰草属(Agropyron)、狗牙根属(Cynodon)、雨久花属(Monochoria)、飘拂草属(Fimbristyslis)、慈姑属(Sagittaria)、荸荠属(Eleocharis)、藨草属(Scirpus)、雀稗属(Paspalum)、鸭嘴草属(Ischaemum)、尖瓣花属(Sphenoclea)、龙爪茅属(Dactyloctenium)、剪股颖属(Agrostis)、看麦娘属(Alopecurus)和阿披拉草属(Apera)。另外，本发明的杂草可以包括例如在不期望的位置生长的作物植物。例如，如果玉蜀黍植物在大豆植物的田地中是不期望的，则主要包含大豆植物的田地中的自生玉蜀黍植物可以被认为是杂草。
术语“植物”以其最广泛的意义使用，因为它涉及有机材料，并旨在涵盖作为植物界成员的真核生物，植物实例包括但不限于维管植物、蔬菜、谷物、花、树、草本植物、灌木、草、藤本植物、蕨类植物、藓类、真菌和藻类等，以及用于无性繁殖的植物的克隆、侧枝(offset)和部分(例如插枝(cutting)、管(piping)、枝条、根茎、地下茎、丛生(clump)、冠、鳞茎、球茎、块茎、根茎、组织培养中产生的植物/组织等)。术语“植物”进一步涵盖整个植物、植物祖先和子代以及植物部分，包括种子、枝条、茎、叶子、根(包括块茎)、花、小花(floret)、果实、肉茎(pedicle)、花序梗、雄蕊、花药、柱头、花柱、子房、花瓣、萼片、心皮(carpel)、根尖、根冠(root cap)、根毛、叶毛、种毛、花粉粒、小孢子、子叶、下胚轴、上胚轴、木质部、韧皮部、薄壁组织、胚乳、伴胞、保卫细胞、以及植物的任何其他已知器官、组织和细胞、以及组织和器官，其中上述中的每一个都包含目的基因/核酸。术语“植物”还涵盖植物细胞、悬浮培养物、愈伤组织、胚、分生组织区、配子体、孢子体、花粉和小孢子，同样，其中上述中的每一个都包含目的基因/核酸。
特别地，可用于本发明方法的植物包括属于绿色植物(Viridiplantae)超家族的所有植物，特别是单子叶和双子叶植物，包括饲料或草料豆类、观赏植物、食用作物、选自包含以下的列表的树木或灌木：槭属物种(Acerspp.)、猕猴桃属物种(Actinidia spp.)、秋葵属物种(Abelmoschus spp.)、剑麻(Agave sisalana)、冰草属物种(Agropyron spp.)、匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera)、葱属物种(Allium spp.)、苋属物种(Amaranthusspp.)、滨草(Ammophila arenaria)、菠萝(Ananas comosus)、番荔枝属物种(Annona spp.)、旱芹(Apium graveolens)、落花生属物种(Arachisspp)、波罗蜜属物种(Artocarpus spp.)、石刁柏(Asparagus officinalis)、燕麦属物种(Avena spp.)(例如，燕麦(Avena sativa)、野燕麦(Avenafatua)、比赞燕麦(Avena byzantina)、野燕麦变种sativa(Avenafatuavar.sativa)、杂种燕麦(Avena hybrida))、阳桃(Averrhoa carambola)、簕竹属物种(Bambusa sp.)、冬瓜(Benincasa hispida)、巴西栗(Bertholletiaexcelsea)、甜菜(Betavulgaris)、芸薹属物种(Brassica spp.)(例如，欧洲油菜(Brassica napus)、莞根亚种(Brassica rapa ssp.)[卡诺拉油菜(canola)、油菜籽油菜(oilseed rape)、球茎甘蓝(turnip rape)])、卡达巴木(Cadaba farinosa)、茶(Camellia sinensis)、美人蕉(Cannaindica)、大麻(Cannabis sativa)、辣椒属物种(Capsicum spp.)、苔草(Carexelata)、番木瓜(Carica papaya)、大花假虎刺(Carissamacrocarpa)、山核桃属物种(Caryaspp.)、红花(Carthamus tinctorius)、栗属物种(Castanea spp.)、吉贝(Ceibapentandra)、栽培菊苣(Cichoriumendivia)、樟属物种(Cinnamomum spp.)、西瓜(Citrullus lanatus)、柑橘属物种(Citrus spp.)、椰子属物种(Cocos spp.)、咖啡属物种(Coffeaspp.)、芋(Colocasia esculenta)、可乐果属物种(Cola spp.)、黄麻属物种(Corchorus sp.)、芜荽(Coriandrum sativum)、榛属物种(Corylusspp.)、山楂属物种(Crataegus spp.)、藏红花(Crocus sativus)、南瓜属物种(Cucurbita spp.)、黄瓜属物种(Cucumis spp.)、菜蓟属物种(Cynaraspp.)、野胡萝卜(Daucus carota)、山蚂蝗属物种(Desmodium spp.)、龙眼(Dimocarpus longan)、薯蓣属物种(Dioscorea spp.)、柿属物种(Diospyros spp.)、稗属物种(Echinochloa spp.)、油棕属(Elaeis)(例如，非洲油棕(Elaeis guineensis)、美洲油棕(Elaeis oleifera))、穇子(Eleusine coracana)、画眉草苔麸(Eragrostis tef)、蔗茅属物种(Erianthussp.)、枇杷(Eriobotrya japonica)、桉属物种(Eucalyptus sp.)、红果仔(Eugenia uniflora)、荞麦属物种(Fagopyrum spp.)、水青冈属物种(Fagus spp.)、苇状羊茅(Festuca arundinacea)、无花果(Ficus carica)、金橘属物种(Fortunella spp.)、草莓属物种(Fragaria spp.)、银杏(Ginkgobiloba)、大豆属物种(Glycine spp.)(例如，橹豆(Glycine max)、黄豆(Soja hispida)或大豆(Soja max))、陆地棉(Gossypium hirsutum)、向日葵属物种(Helianthus spp.)(例如，向日葵(Helianthus annuus))、黄花萱草(Hemerocallis fulva)、木槿属物种(Hibiscus spp.)、大麦属物种(Hordeum spp.)(例如，大麦(Hordeum vulgare))、甘菜(Ipomoeabatatas)、胡桃属物种(Juglans spp.)、莴苣(Lactuca sativa)、山黧豆属物种(Lathyrus spp.)、兵豆(Lens culinaris)、亚麻(Linum usitatissimum)、荔枝(Litchi chinensis)、百脉根属物种(Lotus spp.)、棱角丝瓜(Luffaacutangula)、羽扇豆属物种(Lupinus spp.)、地杨梅(Luzula sylvatica)、番茄属物种(Lycopersicon spp.)(例如，番茄(Lycopersiconesculentum)、樱桃番茄(Lycopersicon lycopersicum)、梨形番茄(Lycopersiconpyriforme))、硬皮豆属物种(Macrotyloma spp.)、苹果属物种(Malusspp.)、西印度樱桃(Malpighia emarginata)、曼蜜苹果(Mammeaamericana)、芒果(Mangifera indica)、木薯属物种(Manihot spp.)、人参果(Manilkara zapota)、紫苜蓿(Medicago sativa)、草木犀属物种(Melilotus spp.)、薄荷属物种(Mentha spp.)、芭茅(Miscanthus sinensis)、苦瓜属物种(Momordica spp.)、黑桑(Morus nigra)、芭蕉属物种(Musaspp.)、烟草属物种(Nicotiana spp.)、木犀榄属物种(Olea spp.)、仙人掌属物种(Opuntia spp.)、料豆属物种(Ornithopus spp.)、稻属物种(Oryza spp.)(例如，水稻(Oryza sativa)、阔叶稻(Oryza latifolia))、黍(Panicum miliaceum)、柳枝稷(Panicumvirgatum)、西番莲(Passifloraedulis)、欧防风(Pastinaca sativa)、狼尾草属物种(Pennisetum sp.)、鳄梨属物种(Persea spp.)、欧芹(Petroselinum crispum)、虉草(Phalarisarundinacea)、菜豆属物种(Phaseolus spp.)、梯牧草(Phleum pratense)、刺葵属物种(Phoenix spp.)、芦苇(Phragmites australis)、酸浆属物种(Physalis spp.)、松属物种(Pinus spp.)、阿月浑子(Pistacia vera)、豌豆属物种(Pisum spp.)、早熟禾属物种(Poa spp.)、杨属物种(Populusspp.)、牧豆树属物种(Prosopis spp.)、李属物种(Prunus spp.)、番石榴属物种(Psidium spp.)、石榴(Punica granatum)、西洋梨(Pyruscommunis)、栎属物种(Quercus spp.)、萝卜(Raphanus sativus)、波叶大黄(Rheumrhabarbarum)、茶藨子属物种(Ribes spp.)、篦麻(Ricinuscommunis)、悬钩子属物种(Rubus spp.)、甘蔗属物种(Saccharum spp.)、柳属物种(Salix sp.)、接骨木属物种(Sambucus spp.)、黑麦(Secalecereale)、胡麻属物种(Sesamum spp.)、白芥属物种(Sinapis spp.)、茄属物种(Solanum spp.)(例如，马铃薯(Solanum tuberosum)、红茄(Solanumintegrifolium)或番茄(Solanum lycopersicum))、高粱(Sorghumbicolor)、菠菜属物种(Spinacia spp.)、蒲桃属物种(Syzygium spp.)、万寿菊属物种(Tagetes spp.)、酸豆(Tamarindus indica)、可可(Theobromacacao)、车轴草属物种(Trifolium spp.)、指状加拿草(Tripsacumdactyloides)、小黑麦(Triticosecale rimpaui)、小麦属物种(Triticum spp.)(例如，小麦(Triticum aestivum)、硬粒小麦(Triticum durum)、圆锥小麦(Triticum turgidum)、hybernum小麦(Triticum hybernum)、莫迦小麦(Triticummacha)、浮小麦(Triticum sativum)、一粒小麦(Triticummonococcum)或普通小麦(Triticum vulgare))、小金莲花(Tropaeolumminus)、旱金莲(Tropaeolum majus)、越橘属物种(Vaccinium spp.)、野豌豆属物种(Vicia spp.)、豇豆属物种(Vigna spp.)、香堇菜(Violaodorata)、葡萄属物种(Vitis spp.)、玉蜀黍(Zea mays)、沼生菰(Zizaniapalustris)、枣属物种(Ziziphus spp.)、苋菜、朝鲜蓟、芦笋、西兰花、球芽甘蓝(Brussels sprouts)、卷心菜、卡诺拉油菜、胡萝卜、花椰菜、芹菜、羽衣甘蓝(collardgreens)、亚麻、甘蓝菜(kale)、小扁豆(lentil)、油菜籽油菜、秋葵、洋葱、马铃薯、稻、大豆、草莓、糖甜菜、甘蔗、向日葵、番茄、南瓜、茶叶和藻类等。根据本发明的优选实施例，植物是作物植物。作物植物的实例尤其包括大豆、向日葵、卡诺拉油菜、紫花苜蓿、油菜籽油菜(rapeseed)、棉花、番茄、马铃薯或烟草。进一步优选地，植物是单子叶植物，如甘蔗。进一步优选地，植物是谷物，如稻、玉蜀黍、小麦、大麦、粟、黑麦、高梁或燕麦。
在优选的实施例中，先前已经通过以下方法产生植物，该方法包括通过引入和过表达野生型或突变PPO转基因(根据本发明)来重组制备该植物，如下文更详细地描述。
在另一个优选实施例中，植物先前已经通过包括原位诱变植物细胞的方法产生，以获得表达突变PPO的植物细胞。
如本文所披露的，本发明的核酸可用于增强植物的除草剂耐受性，这些植物在其基因组中包含编码除草剂耐受性野生型或突变PPO蛋白的基因。这样的基因可以是内源基因或转基因，如下文所述。
因此，在另一个实施例中，本发明涉及增加或增强植物的苯基尿嘧啶除草剂耐受性或抗性的方法，该方法包括过表达编码PPO多肽的核酸，该PPO多肽包含以下基序1、2和/或3中的一个或多个：
a.基序1：SQ[N/K/H]KRYI，其中所述基序内位置5处的Arg被任何其他氨基酸取代；
b.基序2：TLGTLFSS，其中所述基序内位置2处的Leu、和/或位置3处的Gly、和/或位置5处的Leu被任何其他氨基酸取代；
c.基序3：[F/Y]TTF[V/I]GG，其中所述基序内位置4处的Phe被任何其他氨基酸取代。
在另一个实施例中，本发明涉及增加或增强植物的苯基尿嘧啶除草剂耐受性或抗性的方法，该方法包括过表达编码除草剂抗性或耐受性PPO多肽的核酸，该对除草剂具有抗性或耐受性的PPO多肽包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的氨基酸序列的变体，该变体包含以下取代中的一个或多个：
a.对应于SEQ ID NO:1的Arg128的氨基酸被任何其他氨基酸取代
b.对应于SEQ ID NO:1的Gly211的氨基酸被任何其他氨基酸取代
c.对应于SEQ ID NO:1的Leu397的氨基酸被任何其他氨基酸取代
d.对应于SEQ ID NO:1的Gly398的氨基酸被任何其他氨基酸取代
e.对应于SEQ ID NO:1的Leu400的氨基酸被任何其他氨基酸取代
f.对应于SEQ ID NO:1的Phe420的氨基酸被任何其他氨基酸取代。
在另一个实施例中，本发明涉及增加或增强植物的苯基尿嘧啶除草剂耐受性或抗性的方法，该方法包括过表达编码除草剂抗性或耐受性PPO多肽的核酸，该除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含SEQ ID NO:265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960的氨基酸序列或其变体或同源物。
在另一个实施例中，本发明涉及增加或增强植物的苯基尿嘧啶除草剂耐受性或抗性的方法，该方法包括过表达编码除草剂抗性或耐受性PPO多肽的核酸，该除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含SEQ ID NO:240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262或264的氨基酸序列。
另外地，在某些实施例中，本发明的核酸可以与目的多核苷酸序列的任何组合堆叠，以产生具有期望的表型的植物。例如，本发明的核酸可以与编码具有杀有害生物和/或杀昆虫活性的多肽的任何其他多核苷酸堆叠，这些多肽例如苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)毒素蛋白(描述于美国专利号5,366,892、5,747,450、5,737,514、5,723,756、5,593,881；和Geiser等人(1986)Gene[基因]48:109中)。
举例来说，可以与本发明的核酸堆叠的多核苷酸包括编码赋予对有害生物/病原体如病毒、线虫、昆虫或真菌等的抗性的多肽的核酸。可以与本发明的核酸堆叠的示例性多核苷酸包括编码以下的多核苷酸：具有杀有害生物和/或杀昆虫活性的多肽，如其他苏云金芽孢杆菌毒性蛋白(描述于美国专利号5,366,892、5,747,450、5,737,514、5,723,756、5,593,881；和Geiser等人,(1986)Gene[基因]48:109中)、凝集素(VanDamme等人(1994)PlantMol.Biol.[植物分子生物学]24:825)、喷汀(pentin)(描述于美国专利号5,981,722中)等；对于疾病或除草剂抗性而言期望的性状(例如，伏马菌素解毒基因(美国专利号5,792,931)；无毒和疾病抗性基因(Jones等人(1994)Science[科学]266:789；Martin等人,(1993)Science[科学]262:1432；Mindrinos等人(1994)Cell[细胞]78:1089)；导致除草剂抗性的乙酰乳酸合酶(ALS)突变体，如S4和/或Hra突变；草甘膦抗性(例如，5-烯醇-丙酮酰(pyrovyl)-莽草酸-3-磷酸-合酶(EPSPS)基因，描述于美国专利号4,940,935和5,188,642中；或草甘膦N-乙酰转移酶(GAT)基因，描述于Castle等人(2004)Science[科学],304:1151-1154中；以及美国专利申请公开号20070004912、20050246798和20050060767中)；草铵膦抗性(例如，膦丝菌素乙酰转移酶基因PAT和BAR，描述于美国专利号5,561,236和5,276,268)；对除草剂(包括磺酰脲、DHT(2,4D)和PPO除草剂)的抗性(例如，草甘膦乙酰转移酶、芳氧基链烷酸酯双加氧酶、乙酰乳酸合酶和原卟啉原氧化酶)；赋予对除草剂(尤其是HPPD除草剂)抗性或耐受性的细胞色素P450或其变体(美国专利申请序列号12/156,247；美国专利号6,380,465、6,121,512、5,349,127、6,649,814、和6,300,544；以及PCT专利申请公开号WO 2007000077)；以及对于加工或工艺产品而言期望的性状，如高油(例如，美国专利号6,232,529)；改性油(例如，脂肪酸去饱和酶基因(美国专利号5,952,544；WO 94/11516))；改性淀粉(例如，ADPG焦磷酸化酶(AGPase)、淀粉合酶(SS)、淀粉分支酶(SBE)和淀粉去分支酶(SDBE))；和聚合物或生物塑料(例如，美国专利号5,602,321；β-酮硫解酶、聚羟基丁酸合酶和乙酰乙酰辅酶A还原酶(Schubert等人(1988)J.Bacteriol.[细菌学杂志]170:5837-5847)有利于聚羟基链烷酸酯(PHA)的表达)；将其披露内容通过引用并入本文。
在优选的实施例中，植物包含至少一种另外的异源核酸，该异源核酸包含编码除草剂耐受酶的核苷酸序列，该除草剂耐受酶选自例如由以下组成的组：如WO 02/068607中披露的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)、草甘膦乙酰转移酶(GAT)、细胞色素P450单加氧酶、膦丝菌素乙酰转移酶(PAT)、乙酰羟酸合酶(AHAS；EC 4.1.3.18，也称为乙酰乳酸合酶或ALS)、羟基苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)、八氢番茄红素去饱和酶(PD)和麦草畏降解酶，或如WO 2008141154或WO 2005107437中披露的苯氧基乙酸衍生物和苯氧基丙酸衍生物降解酶。生成的组合还可以包括目的多核苷酸中的任一种的多个拷贝。
通常，本文使用的术语“除草剂”意指杀死植物、控制或以其他方式不利地改变植物生长的活性成分。除草剂的优选量或浓度是“有效量”或“有效浓度”。“有效量”和“有效浓度”分别指足以杀死类似的野生型植物、植物组织、植物细胞或宿主细胞或抑制其生长的量和浓度，但是所述量不会杀死本发明的除草剂抗性植物、植物组织、植物细胞和宿主细胞或不会严重抑制其生长。典型地，除草剂的有效量是在农业生产系统中常规用于杀死目的杂草的量。这样的量是本领域普通技术人员已知的。当可用于本发明的除草剂在生长的任何阶段或在种植或出苗之前直接施用于植物或施用于植物的场所时，它们表现出除草活性。观察到的效果取决于要控制的植物物种、植物的生长阶段、施用参数——稀释及喷雾液滴大小、固体组分的粒度、使用时的环境条件、所用的特定化合物、所用的特定辅助剂和载体、土壤类型等，以及施用的化学物质的量。可以如本领域已知的那样调节这些和其他因素以促进非选择性或选择性除草作用。通常，优选在出苗后向相对不成熟的非期望植被施用除草剂，以实现对杂草的最大控制。
“除草剂耐受性”或“除草剂抗性”植物意指对通常会杀死正常或野生型植物，或抑制其生长的水平的至少一种除草剂具有耐受性或抗性的植物。“除草剂耐受性野生型或突变PPO蛋白”或“除草剂抗性野生型或突变PPO蛋白”意指当存在已知干扰PPO活性的至少一种除草剂，并且该除草剂处于已知抑制野生型突变PPO蛋白的PPO活性的浓度或水平时，相对于野生型PPO蛋白的PPO活性，这样的PPO蛋白显示出更高的PPO活性。此外，这样的除草剂耐受性或除草剂抗性突变PPO蛋白的PPO活性在本文中可称为“除草剂耐受性”或“除草剂抗性”PPO活性。
在特别优选的实施例中，可用于本发明的除草剂是指具有式(I)的苯基尿嘧啶，
其中
R1氢、NH2、C1-C6-烷基或C3-C6-炔基；
R2氢、C1-C6-烷基或C1-C6-卤代烷基；
R3氢或C1-C6-烷基；
R4 H或卤素；
R5卤素、CN、C1-C3-卤代烷基、C1-C3-烷氧基、C1-C3-卤代烷氧基、C1-C3-烷硫基、(C1-C3-烷基)氨基、二(C1-C3-烷基)氨基、C1-C3-烷氧基-C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基羰基；
R6 H、卤素、C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基；
R7 OR8、SR8、NR9R10、NR8OR9、NR8S(O)2R9或NR8S(O)2NR9R10，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C3-C6-卤代烯基、C3-C6-卤代炔基、C1-C6-氰基烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-炔氧基羰基-C1-C6-烷基、氨基、(C1-C6-烷基)氨基、二(C1-C6-烷基)氨基、(C1-C6-烷基羰基)氨基、氨基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、氨基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基，
-N＝CR11R12，其中R11和R12彼此独立地是H、C1-C4-烷基或苯基；
C3-C6-环烷基、C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基、C3-C6-杂环基、C3-C6-杂环基-C1-C6-烷基、苯基、苯基-C1-C4-烷基或5元或6元杂芳基，
其中每个环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环可以被一至四个选自R13或3元至7元碳环的取代基取代，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员
-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
其中R13是卤素、NO2、CN、C1-C4-烷基、C1-C4-卤代烷基、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷氧基羰基；
R9、R10彼此独立地是R8，或一起形成3元至7元碳环，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员：-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
n 1至3；
Q CH2、O、S、SO、SO2、NH或(C1-C3-烷基)N；
W O或S；
X NH、NCH3、O或S；
Y O或S；
Z苯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基或吡嗪基，
其各自任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
包括其农业上可接受的盐、酰胺、酯或硫酯，前提是这些具有式(I)的苯基尿嘧啶具有羧基基团，
如果如本文所述的具有式(I)的苯基尿嘧啶能够形成几何异构体，例如E/Z异构体，则可以根据本发明使用纯异构体及其混合物二者。
如果如本文所述的具有式(I)的苯基尿嘧啶具有一个或多个手性中心并且因此作为对映异构体或非对映异构体存在，则可以根据本发明使用纯对映异构体和非对映异构体及其混合物二者。
在具有式(I)的苯基尿嘧啶的取代基中，也可以使用相应的同位素氘代替氢。
如果如本文所述的具有式(I)的苯基尿嘧啶具有可离子化官能团，则它们还能以其农业上可接受的盐形式使用。合适的通常是其阳离子和阴离子分别对活性化合物的活性没有不利影响的那些阳离子的盐和那些酸的酸加成盐。
优选的阳离子是碱金属的离子，优选锂、钠和钾离子，碱土金属的离子，优选钙和镁离子，以及过渡金属的离子，优选锰、铜、锌和铁离子，此外铵和其中一至四个氢原子被C1-C4-烷基、羟基-C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基-C1-C4-烷基、羟基-C1-C4-烷氧基-C1-C4-烷基、苯基或苄基替代的取代铵，优选铵、甲基铵、异丙基铵、二甲基铵、二乙基铵、二异丙基铵、三甲基铵、三乙基铵、三(异丙基)铵、庚基铵、十二烷基铵、十四烷基铵、四甲基铵、四乙基铵、四丁基铵、2-羟基乙基铵(乙醇胺盐)、2-(2-羟基乙-1-氧基)乙-1-基铵(二甘醇胺盐)、二(2-羟基乙-1-基)铵(二乙醇胺盐)、三(2-羟基乙基)铵(三乙醇胺盐)、三(2-羟基丙基)铵、苄基三甲基铵、苄基三乙基铵、N,N,N-三甲基乙醇铵(胆碱盐)，此外鏻离子，锍离子，优选三(C1-C4-烷基)锍，如三甲基锍，以及氧化锍离子，优选三(C1-C4-烷基)氧化锍，以及最后多元胺如N,N-双-(3-氨基丙基)甲基胺和二亚乙基三胺的盐。
有用的酸加成盐的阴离子主要是氯离子、溴离子、氟离子、碘离子、硫酸氢根、甲基硫酸根、硫酸根、磷酸二氢根、磷酸氢根、硝酸根、碳酸氢根、碳酸根、六氟硅酸根、六氟磷酸根、苯甲酸根以及还有C1-C4-链烷酸的阴离子，优选甲酸根、乙酸根、丙酸根和丁酸根。
如本文所述的具有式(I)的苯基尿嘧啶可以带有羧基基团。
如本文所述的具有羧基基团的具有式(I)的苯基尿嘧啶(即，根据本发明的带有羧基基团的具有式(I)的苯基尿嘧啶，即前提是具有式(I)的苯基尿嘧啶具有羧基基团，如苯基尿嘧啶)能以酸的形式、以如上所提及的农业上合适的盐的形式或者另外以农业上可接受的衍生物的形式，例如作为酰胺，如单-和二-C1-C6-烷基酰胺或芳基酰胺，作为酯，例如作为烯丙基酯、炔丙基酯、C1-C10-烷基酯、烷氧基烷基酯、四氢糠基(tefuryl)((四氢呋喃-2-基)甲基)酯以及还有作为硫酯，例如作为C1-C10-烷硫基酯使用。优选的单-和二-C1-C6-烷基酰胺是甲基和二甲基酰胺。优选的芳基酰胺是例如酰替苯胺和2-氯酰替苯胺。优选的烷基酯是例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、戊基、1-甲基己基(mexyl/1-methylhexyl)、1-甲基庚基(meptyl/1-methylheptyl)、庚基、辛基或异辛基(2-乙基己基)酯。优选的C1-C4-烷氧基-C1-C4-烷基酯是直链或支链C1-C4-烷氧基乙基酯，例如2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、2-丁氧基乙基(丁氧基乙基)、2-丁氧基丙基或3-丁氧基丙基酯。直链或支链C1-C10-烷硫基酯的实例是乙硫基酯。
在变量R1至R13和Ra至Re的定义中提及的有机部分，像术语卤素，是各个基团成员的各个列举的集合性术语。术语卤素在每种情况下表示氟、氯、溴或碘。所有烃链可以是直链或支链的，前缀Cn-Cm在每种情况下表示基团中的可能碳原子数。
这样的含义的实例是：
-C1-C3-烷基以及还有二(C1-C3-烷基)氨基、C1-C3-烷氧基-C1-C3-烷基的C1-C3-烷基部分：例如CH3、C2H5、正丙基和CH(CH3)2；
-C1-C4-烷基以及还有苯基-C1-C4-烷基的C1-C4-烷基部分：例如CH3、C2H5、正丙基、CH(CH3)2、正丁基、CH(CH3)–C2H5、CH2–CH(CH3)2和C(CH3)3；
-C1-C6-烷基以及还有C1-C6-氰基烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-炔氧基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基羰基)氨基、氨基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、氨基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基、C3-C6-杂环基-C1-C6-烷基的C1-C6-烷基部分：如上所提及的C1-C4-烷基，以及还有例如正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、正己基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1,1,2-三甲基丙基、1,2,2-三甲基丙基、1-乙基-1-甲基丙基或1-乙基-2-甲基丙基，优选甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基、正丁基、1,1-二甲基乙基、正戊基或正己基；
-C1-C3-卤代烷基：部分或全部被氟、氯、溴和/或碘取代的如上所提及的C1-C3-烷基，例如，氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯氟甲基、二氯氟甲基、氯二氟甲基、溴甲基、碘甲基、2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、2-碘乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-氯-2-氟乙基、2-氯-2,2-二氟乙基、2,2-二氯-2-氟乙基、2,2,2-三氯乙基、五氟乙基、2-氟丙基、3-氟丙基、2,2-二氟丙基、2,3-二氟丙基、2-氯丙基、3-氯丙基、2,3-二氯丙基、2-溴丙基、3-溴丙基、3,3,3-三氟丙基、3,3,3-三氯丙基、2,2,3,3,3-五氟丙基、七氟丙基、1-(氟甲基)-2-氟乙基、1-(氯甲基)-2-氯乙基、1-(溴甲基)-2-溴乙基；
-C1-C4-卤代烷基：部分或全部被氟、氯、溴和/或碘取代的如上所提及的C1-C4-烷基，例如，氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯氟甲基、二氯氟甲基、氯二氟甲基、溴甲基、碘甲基、2-氟乙基、2-氯乙基、2-溴乙基、2-碘乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基、2-氯-2-氟乙基、2-氯-2,2-二氟乙基、2,2-二氯-2-氟乙基、2,2,2-三氯乙基、五氟乙基、2-氟丙基、3-氟丙基、2,2-二氟丙基、2,3-二氟丙基、2-氯丙基、3-氯丙基、2,3-二氯丙基、2-溴丙基、3-溴丙基、3,3,3-三氟丙基、3,3,3-三氯丙基、2,2,3,3,3-五氟丙基、七氟丙基、1-(氟甲基)-2-氟乙基、1-(氯甲基)-2-氯乙基、1-(溴甲基)-2-溴乙基、4-氟丁基、4-氯丁基、4-溴丁基、九氟丁基、1,1,2,2-四氟乙基和1-三氟甲基-1,2,2,2-四氟乙基；
-C1-C6-卤代烷基：如上所提及的C1-C4-卤代烷基，以及还有，例如，5-氟戊基、5-氯戊基、5-溴戊基、5-碘戊基、十一氟戊基、6-氟己基、6-氯己基、6-溴己基、6-碘己基和十二氟己基；
-C3-C6-烯基以及还有C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基-C1-C6-烷基的C3-C6-烯基部分：例如1-丙烯基、2-丙烯基、1-甲基乙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-甲基-1-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-甲基-1-丁烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、1-甲基-2-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-甲基-3-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、3-甲基-3-丁烯基、1,1-二甲基-2-丙烯基、1,2-二甲基-1-丙烯基、1,2-二甲基-2-丙烯基、1-乙基-1-丙烯基、1-乙基-2-丙烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、1-甲基-1-戊烯基、2-甲基-1-戊烯基、3-甲基-1-戊烯基、4-甲基-1-戊烯基、1-甲基-2-戊烯基、2-甲基-2-戊烯基、3-甲基-2-戊烯基、4-甲基-2-戊烯基、1-甲基-3-戊烯基、2-甲基-3-戊烯基、3-甲基-3-戊烯基、4-甲基-3-戊烯基、1-甲基-4-戊烯基、2-甲基-4-戊烯基、3-甲基-4-戊烯基、4-甲基-4-戊烯基、1,1-二甲基-2-丁烯基、1,1-二甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-1-丁烯基、1,2-二甲基-2-丁烯基、1,2-二甲基-3-丁烯基、1,3-二甲基-1-丁烯基、1,3-二甲基-2-丁烯基、1,3-二甲基-3-丁烯基、2,2-二甲基-3-丁烯基、2,3-二甲基-1-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-3-丁烯基、3,3-二甲基-1-丁烯基、3,3-二甲基-2-丁烯基、1-乙基-1-丁烯基、1-乙基-2-丁烯基、1-乙基-3-丁烯基、2-乙基-1-丁烯基、2-乙基-2-丁烯基、2-乙基-3-丁烯基、1,1,2-三甲基-2-丙烯基、1-乙基-1-甲基-2-丙烯基、1-乙基-2-甲基-1-丙烯基和1-乙基-2-甲基-2-丙烯基；
-C3-C6-卤代烯基以及还有C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基的C3-C6-卤代烯基部分：部分或全部被氟、氯、溴和/或碘取代的如上所提及的C3-C6-烯基，例如2-氯丙-2-烯-1-基、3-氯丙-2-烯-1-基、2,3-二氯丙-2-烯-1-基、3,3-二氯丙-2-烯-1-基、2,3,3-三氯-2-烯-1-基、2,3-二氯丁-2-烯-1-基、2-溴丙-2-烯-1-基、3-溴丙-2-烯-1-基、2,3-二溴丙-2-烯-1-基、3,3-二溴丙-2-烯-1-基、2,3,3-三溴-2-烯-1-基或2,3-二溴丁-2-烯-1-基；
-C3-C6-炔基以及还有C3-C6-炔氧基羰基-C1-C6-烷基的C3-C6-炔基部分：例如1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、1-甲基-3-丁炔基、2-甲基-3-丁炔基、3-甲基-1-丁炔基、1,1-二甲基-2-丙炔基、1-乙基-2-丙炔基、1-己炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基、5-己炔基、1-甲基-2-戊炔基、1-甲基-3-戊炔基、1-甲基-4-戊炔基、2-甲基-3-戊炔基、2-甲基-4-戊炔基、3-甲基-1-戊炔基、3-甲基-4-戊炔基、4-甲基-1-戊炔基、4-甲基-2-戊炔基、1,1-二甲基-2-丁炔基、1,1-二甲基-3-丁炔基、1,2-二甲基-3-丁炔基、2,2-二甲基-3-丁炔基、3,3-二甲基-1-丁炔基、1-乙基-2-丁炔基、1-乙基-3-丁炔基、2-乙基-3-丁炔基和1-乙基-1-甲基-2-丙炔基；
-C3-C6-卤代炔基：部分或全部被氟、氯、溴和/或碘取代的如上所提及的C3-C6-炔基，例如1,1-二氟丙-2-炔-1-基、3-氯丙-2-炔-1-基、3-溴丙-2-炔-1-基、3-碘丙-2-炔-1-基、4-氟丁-2-炔-1-基、4-氯丁-2-炔-1-基、1,1-二氟丁-2-炔-1-基、4-碘丁-3-炔-1-基、5-氟戊-3-炔-1-基、5-碘戊-4-炔-1-基、6-氟己-4-炔-1-基或6-碘己-5-炔-1-基；
-C1-C3-烷氧基以及还有C1-C3-烷氧基-C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基羰基的C1-C3-烷氧基部分：例如甲氧基、乙氧基、丙氧基；
-C1-C4-烷氧基以及还有C1-C4-烷氧基羰基的C1-C4-烷氧基部分：例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基丁氧基、1-甲基丙氧基、2-甲基丙氧基和1,1-二甲基乙氧基；
-C1-C6-烷氧基以及还有C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基的C1-C6-烷氧基部分：如上所提及的C1-C4-烷氧基，以及还有，例如，戊氧基、1-甲基丁氧基、2-甲基丁氧基、3-甲氧基丁氧基、1,1-二甲基丙氧基、1,2-二甲基丙氧基、2,2-二甲基丙氧基、1-乙基丙氧基、己氧基、1-甲基戊氧基、2-甲基戊氧基、3-甲基戊氧基、4-甲基戊氧基、1,1-二甲基丁氧基、1,2-二甲基丁氧基、1,3-二甲基丁氧基、2,2-二甲基丁氧基、2,3-二甲基丁氧基、3,3-二甲基丁氧基、1-乙基丁氧基、2-乙基丁氧基、1,1,2-三甲基丙氧基、1,2,2-三甲基丙氧基、1-乙基-1-甲基丙氧基和1-乙基-2-甲基丙氧基。
-C1-C3-卤代烷氧基：部分或全部被氟、氯、溴和/或碘取代的如上所提及的C1-C3-烷氧基，即例如，氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氯二氟甲氧基、溴二氟甲氧基、2-氟乙氧基、2-氯乙氧基、2-溴乙氧基、2-碘乙氧基、2,2-二氟乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、2-氯-2-氟乙氧基、2-氯-2,2-二氟乙氧基、2,2-二氯-2-氟乙氧基、2,2,2-三氯乙氧基、五氟乙氧基、2-氟丙氧基、3-氟丙氧基、2-氯丙氧基、3-氯丙氧基、2-溴丙氧基、3-溴丙氧基、2,2-二氟丙氧基、2,3-二氟丙氧基、2,3-二氯丙氧基、3,3,3-三氟丙氧基、3,3,3-三氯丙氧基、2,2,3,3,3-五氟丙氧基、七氟丙氧基、1-(氟甲基)-2-氟乙氧基、1-(氯甲基)-2-氯乙氧基、1-(溴甲基)-2-溴乙氧基；
-C1-C4-卤代烷氧基：部分或全部被氟、氯、溴和/或碘取代的如上所提及的C1-C4-烷氧基，即例如，氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、氯二氟甲氧基、溴二氟甲氧基、2-氟乙氧基、2-氯乙氧基、2-溴乙氧基、2-碘乙氧基、2,2-二氟乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基、2-氯-2-氟乙氧基、2-氯-2,2-二氟乙氧基、2,2-二氯-2-氟乙氧基、2,2,2-三氯乙氧基、五氟乙氧基、2-氟丙氧基、3-氟丙氧基、2-氯丙氧基、3-氯丙氧基、2-溴丙氧基、3-溴丙氧基、2,2-二氟丙氧基、2,3-二氟丙氧基、2,3-二氯丙氧基、3,3,3-三氟丙氧基、3,3,3-三氯丙氧基、2,2,3,3,3-五氟丙氧基、七氟丙氧基、1-(氟甲基)-2-氟乙氧基、1-(氯甲基)-2-氯乙氧基、1-(溴甲基)-2-溴乙氧基、4-氟丁氧基、4-氯丁氧基、4-溴丁氧基和九氟丁氧基；
-C1-C6-卤代烷氧基以及还有C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基的C1-C6-卤代烷氧基部分：如上所提及的C1-C4-卤代烷氧基，以及还有，例如，5-氟戊氧基、5-氯戊氧基、5-溴戊氧基、5-碘戊氧基、十一氟戊氧基、6-氟己氧基、6-氯己氧基、6-溴己氧基、6-碘己氧基和十二氟己氧基；
-C1-C3-烷硫基：例如甲硫基、乙硫基、丙硫基、1-甲基乙硫基；
-C1-C4-烷硫基：例如甲硫基、乙硫基、丙硫基、1-甲基乙硫基、丁硫基、1-甲基丙硫基、2-甲基丙硫基和1,1-二甲基乙硫基；
-C1-C6-烷硫基以及还有C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基的C1-C6-烷硫基部分：如上所提及的C1-C4-烷硫基，以及还有，例如，戊硫基、1-甲基丁硫基、2-甲基丁硫基、3-甲基丁硫基、2,2-二甲基丙硫基、1-乙基丙硫基、己硫基、1,1-二甲基丙硫基、1,2-二甲基丙硫基、1-甲基戊硫基、2-甲基戊硫基、3-甲基戊硫基、4-甲基戊硫基、1,1-二甲基丁硫基、1,2-二甲基丁硫基、1,3-二甲基丁硫基、2,2-二甲基丁硫基、2,3-二甲基丁硫基、3,3-二甲基丁硫基、1-乙基丁硫基、2-乙基丁硫基、1,1,2-三甲基丙硫基、1,2,2-三甲基丙硫基、1-乙基-1-甲基丙硫基和1-乙基-2-甲基丙硫基；
-C1-C6-烷基亚磺酰基(C1-C6-烷基-S(＝O)-)以及还有C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基的C1-C6-烷基亚磺酰基部分：例如甲基亚磺酰基、乙基亚磺酰基、丙基亚磺酰基、1-甲基乙基亚磺酰基、丁基亚磺酰基、1-甲基丙基亚磺酰基、2-甲基丙基亚磺酰基、1,1-二甲基乙基亚磺酰基、戊基亚磺酰基、1-甲基丁基亚磺酰基、2-甲基丁基亚磺酰基、3-甲基丁基亚磺酰基、2,2-二甲基丙基亚磺酰基、1-乙基丙基亚磺酰基、1,1-二甲基丙基亚磺酰基、1,2-二甲基丙基亚磺酰基、己基亚磺酰基、1-甲基戊基亚磺酰基、2-甲基戊基亚磺酰基、3-甲基戊基亚磺酰基、4-甲基戊基-亚磺酰基、1,1-二甲基丁基亚磺酰基、1,2-二甲基丁基亚磺酰基、1,3-二甲基丁基-亚磺酰基、2,2-二甲基丁基亚磺酰基、2,3-二甲基丁基亚磺酰基、3,3-二甲基丁基-亚磺酰基、1-乙基丁基亚磺酰基、2-乙基丁基亚磺酰基、1,1,2-三甲基丙基亚磺酰基、1,2,2-三甲基丙基亚磺酰基、1-乙基-1-甲基丙基亚磺酰基和1-乙基-2-甲基丙基亚磺酰基；
-C1-C6-烷基磺酰基(C1-C6-烷基-S(O)2-)以及还有C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基的C1-C6-烷基磺酰基部分：例如甲基磺酰基、乙基磺酰基、丙基磺酰基、1-甲基乙基磺酰基、丁基磺酰基、1-甲基丙基磺酰基、2-甲基-丙基磺酰基、1,1-二甲基乙基磺酰基、戊基磺酰基、1-甲基丁基磺酰基、2-甲基丁基磺酰基、3-甲基丁基磺酰基、1,1-二甲基丙基磺酰基、1,2-二甲基丙基磺酰基、2,2-二甲基丙基磺酰基、1-乙基丙基磺酰基、己基磺酰基、1-甲基戊基磺酰基、2-甲基戊基磺酰基、3-甲基戊基磺酰基、4-甲基戊基磺酰基、1,1-二甲基丁基磺酰基、1,2-二甲基丁基磺酰基、1,3-二甲基丁基磺酰基、2,2-二甲基丁基磺酰基、2,3-二甲基丁基磺酰基、3,3-二甲基丁基磺酰基、1-乙基丁基磺酰基、2-乙基丁基磺酰基、1,1,2-三甲基-丙基磺酰基、1,2,2-三甲基丙基磺酰基、1-乙基-1-甲基丙基磺酰基和1-乙基-2-甲基丙基磺酰基；
-(C1-C3-烷基)氨基：例如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、1-甲基乙基氨基；
-(C1-C4-烷基)氨基：例如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、1-甲基乙基氨基、丁基氨基、1-甲基丙基氨基、2-甲基丙基氨基或1,1-二甲基乙基氨基；
-(C1-C6-烷基)氨基：如上所提及的(C1-C4-烷基氨基)，以及还有，例如，戊基氨基、1-甲基丁基氨基、2-甲基丁基氨基、3-甲基丁基氨基、2,2-二甲基丙基氨基、1-乙基丙基氨基、己基氨基、1,1-二甲基丙基氨基、1,2-二甲基丙基氨基、1-甲基戊基氨基、2-甲基戊基氨基、3-甲基戊基氨基、4-甲基戊基氨基、1,1-二甲基丁基氨基、1,2-二甲基丁基氨基、1,3-二甲基丁基氨基、2,2-二甲基丁基氨基、2,3-二甲基丁基-氨基3,3-二甲基丁基氨基、1-乙基丁基氨基、2-乙基丁基氨基、1,1,2-三甲基丙基氨基、1,2,2-三甲基-丙基氨基、1-乙基-1-甲基丙基氨基或1-乙基-2-甲基丙基氨基；
-二(C1-C6-烷基)氨基：如上所提及的二(C1-C4-烷基)氨基，以及还有，例如，N-甲基-N-戊基氨基、N-甲基-N-(1-甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(2-甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(3-甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(2,2-二甲基丙基)氨基、N-甲基-N-(1-乙基丙基)氨基、N-甲基-N-己基氨基、N-甲基-N-(1,1-二甲基丙基)氨基、N-甲基-N-(1,2-二甲基丙基)氨基、N-甲基-N-(1-甲基戊基)氨基、N-甲基-N-(2-甲基戊基)氨基、N-甲基-N-(3-甲基戊基)氨基、N-甲基-N-(4-甲基戊基)氨基、N-甲基-N-(1,1-二甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(1,2-二甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(1,3-二甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(2,2-二甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(2,3-二甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(3,3-二甲基丁基)氨基、N-甲基-N-(1-乙基丁基)氨基、N-甲基-N-(2-乙基丁基)氨基、N-甲基-N-(1,1,2-三甲基丙基)氨基、N-甲基-N-(1,2,2-三甲基丙基)氨基、N-甲基-N-(1-乙基-1-甲基丙基)氨基、N-甲基-N-(1-乙基-2-甲基丙基)氨基、N-乙基-N-戊基氨基、N-乙基-N-(1-甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(2-甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(3-甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(2,2-二甲基丙基)氨基、N-乙基-N-(1-乙基丙基)氨基、N-乙基-N-己基氨基、N-乙基-N-(1,1-二甲基丙基)氨基、N-乙基-N-(1,2-二甲基丙基)氨基、N-乙基-N-(1-甲基戊基)氨基、N-乙基-N-(2-甲基戊基)氨基、N-乙基-N-(3-甲基戊基)氨基、N-乙基-N-(4-甲基戊基)氨基、N-乙基-N-(1,1-二甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(1,2-二甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(1,3-二甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(2,2-二甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(2,3-二甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(3,3-二甲基丁基)氨基、N-乙基-N-(1-乙基丁基)氨基、N-乙基-N-(2-乙基丁基)氨基、N-乙基-N-(1,1,2-三甲基丙基)氨基、N-乙基-N-(1,2,2-三甲基丙基)氨基、N-乙基-N-(1-乙基-1-甲基丙基)氨基、N-乙基-N-(1-乙基-2-甲基丙基)氨基、N-丙基-N-戊基氨基、N-丁基-N-戊基氨基、N,N-二戊基氨基、N-丙基-N-己基氨基、N-丁基-N-己基氨基、N-戊基-N-己基氨基或N,N-二己基氨基；
-C3-C6-环烷基以及还有C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基的环烷基部分：具有3至6个环成员的单环饱和烃，如环丙基、环丁基、环戊基和环己基；
-C3-C6-杂环基以及还有C3-C6-杂环基-C1-C6-烷基的杂环基部分：具有3至6个环成员的脂肪族杂环，其除了碳原子外还含有1至4个氮原子，或1至3个氮原子和氧或硫原子，或氧或硫原子，例如
三元或四元杂环，像2-氧杂环丁烷基、3-氧杂环丁烷基、2-硫杂环丁烷基、3-硫杂环丁烷基、1-氮杂环丁烷基、2-氮杂环丁烷基、1-氮杂环丁烯基、2-氮杂环丁烯基；五元饱和杂环，像2-四氢呋喃基、3-四氢呋喃基、2-四氢噻吩基、3-四氢噻吩基、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、3-异噁唑烷基、4-异噁唑烷基、5-异噁唑烷基、2-异噻唑烷基、3-异噻唑烷基、4-异噻唑烷基、5-异噻唑烷基、1-吡唑烷基、3-吡唑烷基、4-吡唑烷基、5-吡唑烷基、2-噁唑烷基、4-噁唑烷基、5-噁唑烷基、2-噻唑烷基、4-噻唑烷基、5-噻唑烷基、1-咪唑烷基、2-咪唑烷基、4-咪唑烷基、3-噁唑烷基、1,2,4-噁二唑烷-3-基、1,2,4-噁二唑烷-5-基、3-噻唑烷基、1,2,4-噻二唑烷-3-基、1,2,4-噻二唑烷-5-基、1,2,4-三唑烷-3-基、1,2,4-噁二唑烷-2-基、1,2,4-噁二唑烷-4-基、1,3,4-噁二唑烷-2-基、1,2,4-噻二唑烷-2-基、1,2,4-噻二唑烷-4-基、1,3,4-噻二唑烷-2-基、1,2,4-三唑烷-1-基、1,3,4-三唑烷-2-基；六元饱和杂环，像1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、1,3-二噁烷-5-基、1,4-二噁烷基、1,3-二噻烷-5-基、1,3-二噻烷基、1,3-氧硫杂环己烷-5-基、1,4-氧硫杂环己烷基、2-四氢吡喃基、3-四氢吡喃基、4-四氢吡喃基、2-四氢噻喃基、3-四氢噻喃基、4-四氢噻喃基、1-六氢哒嗪基、3-六氢哒嗪基、4-六氢哒嗪基、1-六氢嘧啶基、2-六氢嘧啶基、4-六氢嘧啶基、5-六氢嘧啶基、1-哌嗪基、2-哌嗪基、1,3,5-六氢三嗪-1-基、1,3,5-六氢三嗪-2-基、1,2,4-六氢三嗪-1-基、1,2,4-六氢三嗪-3-基、四氢-1,3-噁嗪-1-基、四氢-1,3-噁嗪-2-基、四氢-1,3-噁嗪-6-基、1-吗啉基、2-吗啉基、3-吗啉基；
-5元或6元杂芳基：具有5或6个环成员的芳族杂芳基，其除了碳原子外还含有1至4个氮原子，或1至3个氮原子和氧或硫原子，或氧或硫原子，例如5元芳族环像呋喃基(例如2-呋喃基、3-呋喃基)、噻吩基(例如2-噻吩基、3-噻吩基)、吡咯基(例如吡咯-2-基、吡咯-3-基)、吡唑基(例如吡唑-3-基、吡唑-4-基)、异噁唑基(例如异噁唑-3-基、异噁唑-4-基、异噁唑-5-基)、异噻唑基(例如异噻唑-3-基、异噻唑-4-基、异噻唑-5-基)、咪唑基(例如咪唑-2-基、咪唑-4-基)、噁唑基(例如噁唑-2-基、噁唑-4-基、噁唑-5-基)、噻唑基(例如噻唑-2-基、噻唑-4-基、噻唑-5-基)、噁二唑基(例如1,2,3-噁二唑-4-基、1,2,3-噁二唑-5-基、1,2,4-噁二唑-3-基、1,2,4-噁二唑-5-基、1,3,4-噁二唑-2-基)、噻二唑基(例如1,2,3-噻二唑-4-基、1,2,3-噻二唑-5-基、1,2,4-噻二唑-3-基、1,2,4-噻二唑-5-基、1,3,4-噻二唑-2-基)、三唑基(例如1,2,3-三唑-4-基、1,2,4-三唑-3-基)；1-四唑基；6元芳族环像吡啶基(例如吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基)、吡嗪基(例如哒嗪-3-基、哒嗪-4-基)、嘧啶基(例如嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、嘧啶-5-基)、吡嗪-2-基、三嗪基(例如1,3,5-三嗪-2-基、1,2,4-三嗪-3-基、1,2,4-三嗪-5-基、1,2,4-三嗪-6-基)；
-3元至7元碳环：具有三至七个环成员的三元至七元单环、饱和、部分不饱和或芳族环，其除了碳原子外还任选地包含一或两个选自由以下组成的组的环成员：-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-。
下文所提及的本发明的优选实施例应理解为彼此独立地或彼此组合地是优选的。
根据本发明的优选实施例，还优选具有式(I)的那些苯基尿嘧啶，其中变量彼此独立地或彼此组合地具有以下含义：
优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是NH2或C1-C6-烷基；
优选地是NH2或C1-C4-烷基；
特别优选是NH2或CH3；
还优选地是C1-C6-烷基；
特别优选是C1-C4-烷基；
尤其优选是CH3。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R2是C1-C6-烷基或C1-C6-卤代烷基；
优选地是C1-C4-烷基或C1-C4-卤代烷基；
更优选是C1-C4-卤代烷基；
特别优选是C1-C2-卤代烷基；
尤其优选是CF3。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R3是H；
还优选地是C1-C6-烷基，
特别优选是C1-C4-烷基，
尤其优选是CH3；
还优选地是H或C1-C4-烷基；
特别优选是H或CH3。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R4是H、F或Cl；
特别优选是H或F；
尤其优选是H；
还特别优选是H或Cl；
尤其优选是Cl；
还特别优选是F或Cl；
尤其优选是F。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R5是卤素、C1-C3-卤代烷基、C1-C3-烷氧基、C1-C3-卤代烷氧基、C1-C3-烷硫基或C1-C3-烷氧基羰基；
优选地是卤素、C1-C3-卤代烷基、C1-C3-烷氧基或C1-C3-烷硫基；
特别优选是卤素、C1-C3-烷氧基或C1-C3-烷硫基；
更优选是F、OCH3或SCH3；
还特别优选是C1-C3-卤代烷基或C1-C3-烷氧基；
尤其优选是C1-C3-烷氧基；
更优选是OCH3。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R6是H、C1-C3-烷基或卤素；
特别优选是H或卤素；
尤其优选是H或F；
更优选是H。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R7是OR8、SR8、NR8OR9、NR8S(O)2R9或NR8S(O)2NR9R10；
特别优选是OR8、SR8、NR8OR9或NR8S(O)2R9；
尤其优选OR8、NR8OR9或NR8S(O)2R9；
尤其优选是OR8或NR8S(O)2R9。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R7是OR8，
其中R8优选如下所定义；
优选地是C1-C6-烷基；
特别优选是C1-C4-烷基；
尤其优选是CH3、C2H5、正丙基、CH(CH3)2、正丁基、CH(CH3)–C2H5、CH2–CH(CH3)2或C(CH3)3；
更优选是CH3或C2H5；
最优选是CH3；
还最优选是C2H。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C3-C6-卤代烯基、C3-C6-卤代炔基、C1-C6-氰基烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-炔氧基羰基-C1-C6-烷基、氨基、(C1-C6-烷基)氨基、二(C1-C6-烷基)氨基、(C1-C6-烷基羰基)氨基、氨基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、氨基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基，
-N＝CR11R12，
其中R11和R12彼此独立地是H、C1-C4-烷基或苯基；
C3-C6-环烷基、C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基、C3-C6-杂环基、苯基、苯基-C1-C4-烷基或5元或6元杂芳基，
其中每个环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环可以被一至四个选自R13或3元至7元碳环的取代基取代，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员：-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代，
其中R13是卤素、NO2、CN、C1-C4-烷基、C1-C4-卤代烷基、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷氧基羰基；
优选地是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基或C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基；
特别优选是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基或C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基；
还特别优选是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基或C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基；
尤其优选是氢、C1-C6-烷基或C3-C6-烯基；
更优选是氢、CH3、C2H5或CH2CH＝CH2；
最优选是氢、CH3或C2H5。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R9是C1-C6-烷基或C3-C6-环烷基；
特别优选是C1-C6-烷基；
更优选是CH3。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R10是C1-C6-烷基或C3-C6-环烷基；
特别优选是C1-C6-烷基；
更优选是CH3、C2H5或CH(CH3)2。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R11是苯基或C1-C4-烷基；
特别优选是苯基或CH3；
还特别优选是苯基；
还特别优选是C1-C4-烷基。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R12是苯基或C1-C4-烷基；
特别优选是苯基或CH3；
还特别优选是苯基；
还特别优选是C1-C4-烷基。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R13是卤素、C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷氧基羰基；特别优选是卤素或C1-C4-烷基；
尤其优选是F、Cl或CH3；
还特别优选是卤素；
尤其优选是F或Cl；
还特别优选是C1-C6-烷基；
尤其优选是CH3。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
n是1或2；
特别优选是2；
还特别优选是1。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Q是O、S、SO、SO2、NH或(C1-C3-烷基)N；
优选地是O或S；
特别优选是O。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
W是O，
还优选地是S。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
X是O，
还优选地是S。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Y是O，
还优选地是S。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Z是苯基或吡啶基，
其各自任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基和C1-C6-卤代烷氧基；
优选地是苯基，
其任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基和C1-C6-卤代烷氧基；
还优选地是吡啶基，
其任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基和C1-C6-卤代烷氧基。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Z是苯基或吡啶基，
其各自任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基和C1-C6-卤代烷氧基；
优选地是苯基或吡啶基，
其各自任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选是苯基或吡啶基，
其各自任选地被1至4个选自由卤素或C1-C6-烷基组成的组的取代基取代；
尤其优选是苯基或吡啶基，
其各自任选地被1至4个选自由F、Cl或CH3组成的组的取代基取代；
更优选是苯基或吡啶基，
其各自是未取代的。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Z是苯基，
其任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基和C1-C6-卤代烷氧基；
优选地是苯基，
其任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选是苯基，
其任选地被1至4个选自由卤素或C1-C6-烷基组成的组的取代基取代；
尤其优选是苯基，
其任选地被1至4个选自由F、Cl或CH3组成的组的取代基取代；
更优选是未取代的苯基。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Z是吡啶基，
其任选地被1至3个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基和C1-C6-卤代烷氧基；
优选地是吡啶基，
其任选地被1至3个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选是吡啶基，
其任选地被1至3个选自由卤素或C1-C6-烷基组成的组的取代基取代；
尤其优选是吡啶基，
其任选地被1至3个选自由F、Cl或CH3组成的组的取代基取代；
更优选是未取代的吡啶基。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Z选自由Z1至Z29组成的组，
/>
Z-29
其中
*表示Z与X的附接点；
**表示Z与Q的附接点；以及
Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是
H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
优选地H、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选H、卤素或C1-C6-烷基；
尤其优选H、F、Cl或CH3；
更优选H。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Z选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11、Z12、Z13和Z21；
特别优选选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z2、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11和Z21；
更特别优选选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z4、Z5、Z6、Z7和Z21；
尤其优选选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z4、Z5、Z6和Z7；
更优选选自由如上所定义的Z1和Z7组成的组。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
Z选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11、Z12、Z13和Z21；其中
Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是
H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
优选地H、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选H、卤素或C1-C6-烷基；
尤其优选H、F、Cl或CH3；
更优选H；
特别优选选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z2、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11和Z21，其中
Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是
H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
优选地H、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选H、卤素或C1-C6-烷基；
尤其优选H、F、Cl或CH3；
更优选H；
更特别优选选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z4、Z5、Z6、Z7和Z21，其中
Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是
H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
优选地H、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选H、卤素或C1-C6-烷基；
尤其优选H、F、Cl或CH3；
更优选H；
尤其优选选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z4、Z5、Z6和Z7，其中
Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是
H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
优选地H、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选H、卤素或C1-C6-烷基；
尤其优选H、F、Cl或CH3；
更优选H；
更优选选自由如上所定义的Z1和Z7组成的组，其中
Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是
H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
优选地H、卤素、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基或C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选H、卤素或C1-C6-烷基；
尤其优选H、F、Cl或CH3；
更优选H。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是C1-C6-烷基，
R2是C1-C4-卤代烷基，
R3是H，
R4是H、F或Cl，并且
Y是O。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是C1-C6-烷基，
R2是C1-C4-卤代烷基，
R3是H，
R4是H或F，并且
Y是O。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R5是C1-C3-烷氧基，并且
R6是H。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R7是OR8、NR8OR9或NR8S(O)2R9，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基或C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基；以及
R9是C1-C6-烷基。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中n是1。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中Q、W和X是O。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是NH2或C1-C6-烷基；
R2是C1-C4-卤代烷基；
R3是H；
R4是H、F或Cl；
R5是卤素、C1-C3-卤代烷基、C1-C3-烷氧基或C1-C3-烷硫基；
R6是H；
R7是OR8、SR8、NR8OR9或NR8S(O)2R9；其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C3-C6-卤代烯基、C3-C6-卤代炔基、C1-C6-氰基烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基-C1-C6-烷基、氨基、(C1-C6-烷基)氨基、二(C1-C6-烷基)氨基、(C1-C6-烷基羰基)氨基、氨基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、氨基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、-N＝CR11R12、C3-C6-环烷基、C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基、C3-C6-杂环基、苯基、苯基-C1-C4-烷基或5元或6元杂芳基，
其中每个环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环可以被一至四个选自R13或3元至7元碳环的取代基取代，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员：-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
R9是C1-C6-烷基；
R11是苯基或CH3；
R12是苯基或CH3；
R13是卤素或C1-C4-烷基；
n是1或2；
Q是O、S、SO、SO2、NH或(C1-C3-烷基)N；
W是O；
X是O；
Y是O；
Z是如上所定义的Z1、Z2、Z3、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11、Z12、Z13和Z21，其中
Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
特别优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是NH2或C1-C4-烷基；
R2是C1-C4-卤代烷基；
R3是H；
R4是H、F或Cl；
R5是C1-C3-卤代烷基或C1-C3-烷氧基；
R6是H；
R7 OR8、NR8OR9或NR8S(O)2R9；其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基或C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基；
R9是C1-C6-烷基；
n是1；
Q是O、S、SO、SO2、NH或(C1-C3-烷基)N；
W是O；
X是O；
Y是O；
Z选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z2、Z4、Z5、Z6、Z7、Z8、Z9、Z10、Z11和Z21，其中Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
尤其优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是NH2或CH3；
R2是C1-C4-卤代烷基；
R3是H；
R4是H、F或Cl；
R5是C1-C3-烷氧基；
R6是H；
R7是OR8或NR8S(O)2R9，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基或C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基，并且
R9是C1-C6-烷基；
n是1；
Q是O或S；
W是O；
X是O；
Y是O；
Z选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z4、Z5、Z6、Z7和Z21，其中Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
还尤其优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是NH2或CH3；
R2是C1-C4-卤代烷基；
R3是H；
R4是H、F或Cl；
R5是C1-C3-烷氧基；
R6是H；
R7是OR8或NR8S(O)2R9，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基或C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基，并且
R9是C1-C6-烷基；
n是1；
Q是O或S；
W是O；
X是O；
Y是O；
Z选自由以下组成的组：如上所定义的Z1、Z4、Z5、Z6和Z7，其中Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
更优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是CH3；
R2是CF3；
R3是H；
R4是H、F或Cl；
R5是OCH3；
R6是H；
R7是OR8或NR8S(O)2R9；其中
R8是氢、C1-C6-烷基或C3-C6-烯基；以及
R9是C1-C6-烷基；
n是1；
Q是O；
W是O；
X是O；
Y是O；
Z选自由如上所定义的Z1和Z7组成的组，其中Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基。
还优选具有式(I)的苯基尿嘧啶，其中
R1是CH3；
R2是CF3；
R3是H；
R4是H、F或Cl；
R5是OCH3；
R6是H；
R7 OR8、SR8、NR8OR9、NR8S(O)2R9或NR8S(O)2NR9R10，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C3-C6-卤代烯基、C3-C6-卤代炔基、C1-C6-氰基烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-炔氧基羰基-C1-C6-烷基、氨基、(C1-C6-烷基)氨基、二(C1-C6-烷基)氨基、(C1-C6-烷基羰基)氨基、氨基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、氨基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基，
-N＝CR11R12，其中R11和R12彼此独立地是H、C1-C4-烷基或苯基；
C3-C6-环烷基、C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基、C3-C6-杂环基、C3-C6-杂环基–C1-C6-烷基、苯基、苯基-C1-C4-烷基或5元或6元杂芳基，
其中每个环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环可以被一至四个选自R13或3元至7元碳环的取代基取代，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员
-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
其中R13是卤素、NO2、CN、C1-C4-烷基、C1-C4-卤代烷基、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷氧基羰基；
R9、R10彼此独立地是R8，或一起形成3元至7元碳环，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员：-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
n是1；
Q是O；
W是O；
X是O；
Y是O；
Z选自由如上所定义的Z1和Z7组成的组，其中Ra、Rb、Rc、Rd和Re彼此独立地是H、卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基。
特别优选具有式(I.a)(对应于式(I)，其中R1是CH3，R2是CF3，R3是H，R6是H，n是1，Q、W、X和Y是O，并且Z是所定义的Z-1，其中Ra、Rb、Rc和Rd是H)的苯基尿嘧啶：
其中变量R4、R5和R7具有如上所定义的含义，特别是优选含义；
尤其优选表A的具有式(I.a.1)至(I.a.56)的苯基尿嘧啶，其中变量R4、R5和R7的定义不仅彼此组合地而且在每种情况下也独立地对根据本发明的化合物特别重要：
表A
/>
/>
还优选具有式(I.b)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.b.1)至(I.b.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.b.1)至(I.b.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Q是S：
还优选具有式(I.c)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.c.1)至(I.c.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.c.1)至(I.c.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-2，其中Ra、Rb、Rc和Re是H：
还优选具有式(I.d)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.d.1)至(I.d.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.d.1)至(I.d.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-3，其中Ra、Rb、Rd和Re是H：
还优选具有式(I.e)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.e.1)至(I.e.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.e.1)至(I.e.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-4，其中Rb、Rc和Rd是H：
还优选具有式(I.f)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.f.1)至(I.f.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.f.1)至(I.f.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-5，其中Ra、Rc和Rd是H：
还优选具有式(I.g)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.g.1)至(I.g.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.g.1)至(I.g.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-6，其中Ra、Rb和Rd是H：
还优选具有式(I.h)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.h.1)至(I.h.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.h.1)至(I.h.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-7，其中Ra、Rb和Rc是H：
还优选具有式(I.i)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.i.1)至(I.i.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.i.1)至(I.i.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-7，其中Ra、Rb和Rc是H，并且Q是S：
还优选具有式(I.k)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.k.1)至(I.k.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.k.1)至(I.k.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-8，其中Rb、Rc和Re是H：
还优选具有式(I.l)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.l.1)至(I.l.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.l.1)至(I.l.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-9，其中Ra、Rc和Re是H：
还优选具有式(I.m)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.m.1)至(I.m.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.m.1)至(I.m.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-10，其中Ra、Rb和Re是H：
还优选具有式(I.n)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.n.1)至(I.n.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.n.1)至(I.n.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-11，其中Ra、Rb和Rc是H：
还优选具有式(I.o)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.o.1)至(I.o.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.o.1)至(I.o.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-12，其中Rb、Rd和Re是H：
还优选具有式(I.p)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.p.1)至(I.p.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.p.1)至(I.p.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-13，其中Ra、Rd和Re是H：
还优选具有式(I.q)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.q.1)至(I.q.56)的苯基尿嘧啶、更优选地(I.q.1)至(I.q.54)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶、优选地具有式(I.a.1)至(I.a.54)的苯基尿嘧啶的不同仅在于Z是Z-21，其中Ra和Rc是H：
还优选具有式(I.r)[对应于式(I.a)，其中R7是N(CH3)OCH3；即，对应于式(I)，其中R1是CH3，R2是CF3，R3是H，R6是H，R7是N(CH3)OCH3，n是1，Q、W、X和Y是O，并且Z是所定义的Z-1，其中Ra、Rb、Rc和Rd是H]的苯基尿嘧啶，其中变量R4和R5具有如上所定义的含义，特别是优选含义；
优选地具有式(I.r.1)和(I.r.29)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)和(I.a.29)的相应苯基尿嘧啶的不同仅在于R7是N(CH3)OCH3：
还优选具有式(I.s)[对应于式(I.a)，其中R5是SCH3；即，对应于式(I)，其中R1是CH3，R2是CF3，R3是H，R5是SCH3，R6是H，n是1，Q、W、X和Y是O，并且Z是所定义的Z-1，其中Ra、Rb、Rc和Rd是H]的苯基尿嘧啶，其中变量R4和R7具有如上所定义的含义，特别是优选含义；
优选地具有式(I.s.1)至(I.s.56)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶的不同仅在于R5是SCH3：
还优选具有式(I.t)[对应于式(I.a)，其中R5是F；即，对应于式(I)，其中R1是CH3，R2是CF3，R3是H，R5是F，R6是H，n是1，Q、W、X和Y是O，并且Z是所定义的Z-1，其中Ra、Rb、Rc和Rd是H]的苯基尿嘧啶，其中变量R4和R7具有如上所定义的含义，特别是优选含义；优选地具有式(I.t.1)至(I.t.56)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶的不同仅在于R5是F：
还优选具有式(I.u)的苯基尿嘧啶，优选地具有式(I.u.1)至(I.u.56)的苯基尿嘧啶，其与具有式(I.a.1)至(I.a.56)的相应苯基尿嘧啶的不同仅在于R3是CH3：
还优选具有式(I.a)、(I.h)、(I.r)、(I.s)、(I.t)和(I.u)的苯基尿嘧啶；
特别优选具有式(I.a)的苯基尿嘧啶。
还优选具有式(I.a.1)至(1.a.56)，(I.h.1)至(I.h.56)，(I.r.1)，(I.r.29)，(I.s.1)至(I.s.56)，(I.t.1)至(I.t.56)和(I.u.1)至(I.u.56)的苯基尿嘧啶；
特别优选具有式(I.a.1)至(1.a.56)的苯基尿嘧啶。
还优选具有式(I.a.29)、(I.a.30)、(I.a.31)、(I.a.35)、(I.a.36)、(I.a.43)、(I.a.53)、(I.h.30)、(I.r.29)、(I.s.30)、(I.t.31)和(I.u.30)的苯基尿嘧啶；
特别优选具有式(I.a.29)、(I.a.30)、(I.a.31)、(I.a.35)、(I.a.36)、(I.a.43)、(I.a.53)的苯基尿嘧啶；
还特别优选具有式(I.a.30)、(I.h.30)、(I.s.30)和(I.u.30)的苯基尿嘧啶。
尤其优选的苯基尿嘧啶是
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸乙酯；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸乙酯；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸乙酯；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸烯丙酯；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸烯丙酯；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸烯丙酯；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸丙-2-炔基酯；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸丙-2-炔基酯；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸丙-2-炔基酯；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸2-甲氧基乙基酯；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸2-甲氧基乙基酯；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸2-甲氧基乙基酯；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-N,2-二甲氧基-N-甲基-乙酰胺；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-N,2-二甲氧基-N-甲基-乙酰胺；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-N,2-二甲氧基-N-甲基-乙酰胺；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-N-甲基磺酰基-乙酰胺；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-N-甲基磺酰基-乙酰胺；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-N-甲基磺酰基-乙酰胺；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲基硫烷基-乙酸甲酯；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲基硫烷基-乙酸甲酯；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-甲基硫烷基-乙酸甲酯；
rac-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-氟-乙酸乙酯；
(2S)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-氟-乙酸乙酯；
(2R)-2-[2-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]苯氧基]-2-氟-乙酸乙酯；
rac-2-[2-[2-溴-5-[3,5-二甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]-4-氟-苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；
(2S)-2-[2-[2-溴-5-[3,5-二甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]-4-氟-苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；
(2R)-2-[2-[2-溴-5-[3,5-二甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]-4-氟-苯氧基]苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；
rac-2-[[3-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]-2-吡啶基]氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；
(2S)-2-[[3-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]-2-吡啶基]氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯；
(2R)-2-[[3-[2-溴-4-氟-5-[3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)嘧啶-1-基]苯氧基]-2-吡啶基]氧基]-2-甲氧基-乙酸甲酯。
为了拓宽作用谱并实现协同效应，具有式(I)的苯基尿嘧啶可以与大量其他除草或生长调节活性成分组的代表混合并且然后伴随地施用。用于混合物的合适的组分是例如，
来自以下类别的除草剂：乙酰胺、酰胺、芳氧基苯氧基丙酸酯、苯甲酰胺、苯并呋喃、苯甲酸、苯并噻二嗪酮、联吡啶鎓、氨基甲酸酯、氯乙酰胺、氯代羧酸、环己二酮、二硝基苯胺、二硝基苯酚、二苯基醚、甘氨酸、咪唑啉酮、异噁唑、异噁唑烷酮、腈、N-苯基邻苯二甲酰亚胺、噁二唑、噁唑烷二酮、氧乙酰胺、苯氧基羧酸、苯基氨基甲酸酯、苯基吡唑、苯基吡唑啉、苯基哒嗪、次膦酸、氨基磷酸酯、二硫代磷酸酯、邻氨基甲酰苯甲酸酯、吡唑、哒嗪酮、吡啶、吡啶羧酸、吡啶羧酰胺、嘧啶二酮、嘧啶基(硫代)苯甲酸酯、喹啉羧酸、缩氨基脲、磺酰氨基羰基三唑啉酮、磺酰脲、四唑啉酮、噻二唑、硫代氨基甲酸酯、三嗪、三嗪酮、三唑、三唑啉酮、三唑并羧酰胺、三唑并嘧啶、三酮、尿嘧啶、脲。
此外，可能有益的是单独或与其他除草剂组合或者另外以与其他作物保护剂的混合物形式，例如与用于控制有害生物或植物病原性真菌或细菌的试剂一起施用具有式(I)的苯基尿嘧啶。还令人感兴趣的是与用于处理营养和痕量元素缺乏的矿物盐溶液的溶混性。还可以添加其他添加剂如非植物毒性油和油浓缩物。
在本发明的一个实施例中，根据本发明的组合物包含至少一种具有式(I)的苯基尿嘧啶(化合物A)和至少一种选自以下的另外的活性化合物：除草剂B，优选地b1)至b15)类除草剂B、和安全剂C(化合物C)。
在本发明的另一个实施例中，根据本发明的组合物包含至少一种具有式(I)的苯基尿嘧啶和至少一种另外的活性化合物B(除草剂B)。
另外的除草化合物B(组分B)优选地选自b1)至b15)类除草剂：
B)b1)至b15)类除草剂：
b1)脂质生物合成抑制剂；
b2)乙酰乳酸合酶抑制剂(ALS抑制剂)；
b3)光合作用抑制剂；
b4)原卟啉原-IX氧化酶抑制剂，
b5)漂白剂除草剂；
b6)烯醇丙酮酰莽草酸3-磷酸合酶抑制剂(EPSP抑制剂)；
b7)谷氨酰胺合成酶抑制剂；
b8)7,8-二氢蝶酸合酶抑制剂(DHP抑制剂)；
b9)有丝分裂抑制剂；
b10)极长链脂肪酸合成抑制剂(VLCFA抑制剂)；
b11)纤维素生物合成抑制剂；
b12)去偶除草剂(decoupler herbicide)；
b13)植物生长素除草剂；
b14)生长素运输抑制剂；以及
b15)选自由以下组成的组的其他除草剂：溴丁酰草胺、整形醇、整形醇甲酯、环庚草醚、苄草隆(cumyluron)、茅草枯、棉隆、野燕枯、野燕枯-甲基磺酸酯、噻节因、DSMA、杀草隆(dymron)、草多索(endothal)及其盐、乙氧苯草胺、麦草氟、麦草氟-异丙酯、麦草氟-甲酯、麦草氟-M-异丙酯、麦草氟-M-甲酯、抑草丁、抑草丁丁酯(flurenol-butyl)、呋嘧醇、杀木膦、杀木膦铵、茚草酮、茚嗪氟草胺、马来酰肼、氟磺酰草胺、威百亩、异噁噻草醚、甲基叠氮化物、甲基溴、甲基-杀草隆、甲基碘、MSMA、油酸、噁嗪草酮、壬酸、稗草畏、灭藻醌、四氟络草胺(tetflupyrolimet)、三嗪氟草胺、灭草环、6-氯-3-(2-环丙基-6-甲基苯氧基)-4-哒嗪醇(CAS 499223-49-3)及其盐和酯、6-氯-4-(2,7-二甲基-1-萘基)-5-羟基-2-甲基-哒嗪-3-酮(CAS2414510-21-5)；
包括其农业上可接受的盐或衍生物；
可以与根据本发明的具有式(I)的苯基尿嘧啶组合使用的除草剂B的实例是：
b1)来自脂质生物合成抑制剂的组：
ACC-除草剂，如禾草灭、禾草灭-钠、丁苯草酮、烯草酮、炔草酸、炔草酸-炔丙基、噻草酮、氰氟草酯、氰氟草酯-丁基、禾草灵、禾草灵-甲基、噁唑禾草灵、噁唑禾草灵-乙基、精噁唑禾草灵、精噁唑禾草灵-乙基、吡氟禾草灵、吡氟禾草灵-丁基、精吡氟禾草灵、精吡氟禾草灵-丁基、吡氟氯禾灵、吡氟氯禾灵-甲基、精吡氟氯禾灵、精吡氟氯禾灵-甲基、噁唑酰草胺(metamifop)、唑啉草酯(pinoxaden)、环苯草酮、喔草酯、喹禾灵、喹禾灵-乙基、喹禾灵-四氢糠基、精喹禾灵、精喹禾灵-乙基、精喹禾灵-四氢糠基、烯禾啶、吡喃草酮、肟草酮、4-(4'-氯-4-环丙基-2'-氟[1,1'-联苯基]-3-基)-5-羟基-2,2,6,6-四甲基-2H-吡喃-3(6H)-酮(CAS1312337-72-6)；4-(2',4'-二氯-4-环丙基[1,1'-联苯基]-3-基)-5-羟基-2,2,6,6-四甲基-2H-吡喃-3(6H)-酮(CAS1312337-45-3)；4-(4'-氯-4-乙基-2'-氟[1,1'-联苯基]-3-基)-5-羟基-2,2,6,6-四甲基-2H-吡喃-3(6H)-酮(CAS1033757-93-5)；4-(2',4'-二氯-4-乙基[1,1'-联苯基]-3-基)-2,2,6,6-四甲基-2H-吡喃-3,5(4H,6H)-二酮(CAS1312340-84-3)；5-(乙酰基氧基)-4-(4'-氯-4-环丙基-2'-氟[1,1'-联苯基]-3-基)-3,6-二氢-2,2,6,6-四甲基-2H-吡喃-3-酮(CAS1312337-48-6)；5-(乙酰基氧基)-4-(2′,4'-二氯-4-环丙基-[1,1'-联苯基]-3-基)-3,6-二氢-2,2,6,6-四甲基-2H-吡喃-3-酮；5-(乙酰基氧基)-4-(4'-氯-4-乙基-2'-氟[1,1'-联苯基]-3-基)-3,6-二氢-2,2,6,6-四甲基-2H-吡喃-3-酮(CAS1312340-82-1)；5-(乙酰基氧基)-4-(2',4'-二氯-4-乙基[1,1'-联苯基]-3-基)-3,6-二氢-2,2,6,6-四甲基-2H-吡喃-3-酮(CAS1033760-55-2)；4-(4'-氯-4-环丙基-2'-氟[1,1'-联苯基]-3-基)-5,6-二氢-2,2,6,6-四甲基-5-氧代-2H-吡喃-3-基碳酸甲酯(CAS1312337-51-1)；4-(2′,4'-二氯-4-环丙基-[1,1'-联苯基]-3-基)-5,6-二氢-2,2,6,6-四甲基-5-氧代-2H-吡喃-3-基碳酸甲酯；4-(4'-氯-4-乙基-2'-氟[1,1'-联苯基]-3-基)-5,6-二氢-2,2,6,6-四甲基-5-氧代-2H-吡喃-3-基碳酸甲酯(CAS1312340-83-2)；4-(2',4'-二氯-4-乙基[1,1'-联苯基]-3-基)-5,6-二氢-2,2,6,6-四甲基-5-氧代-2H-吡喃-3-基碳酸甲酯(CAS1033760-58-5)；和非ACC除草剂，如呋草黄(benfuresate)、苏达灭(butylate)、环草敌(cycloate)、茅草枯、哌草丹、EPTC、戊草丹、乙氧呋草黄、四氟丙酸、草达灭(molinate)、坪草丹(orbencarb)、克草猛(pebulate)、苄草丹、TCA、禾草丹、仲草丹、野麦畏和灭草猛(ernolate)；
b2)来自ALS抑制剂的组：
磺酰脲类，如酰嘧磺隆、四唑嘧磺隆、苄嘧磺隆、苄嘧磺隆-甲基、氯嘧磺隆、氯嘧磺隆-乙基、绿磺隆、醚磺隆、环丙嘧磺隆、胺苯磺隆、胺苯磺隆-甲基、乙氧嘧磺隆、啶嘧磺隆、氟吡磺隆、氟啶嘧磺隆、氟啶嘧磺隆-甲基-钠、甲酰胺磺隆、氯吡嘧磺隆、氯吡嘧磺隆-甲基、唑吡嘧磺隆、碘甲磺隆、碘甲磺隆-甲基-钠、碘磺隆、碘磺隆-钠、甲基二磺隆、嗪吡嘧磺隆(metazosulfuron)、甲磺隆、甲磺隆-甲基、烟嘧磺隆、嘧苯胺磺隆、环氧嘧磺隆、氟嘧磺隆、氟嘧磺隆-甲基、丙嗪嘧磺隆、氟磺隆、吡嘧磺隆、吡嘧磺隆-乙基、砜嘧磺隆、甲嘧磺隆、甲嘧磺隆-甲基、磺酰磺隆、噻吩磺隆、噻吩磺隆-甲基、醚苯磺隆、苯磺隆、苯磺隆-甲基、三氟啶磺隆、氟胺磺隆、氟胺磺隆-甲基和三氟甲磺隆，
咪唑啉酮类，如咪草酸、咪草酸-甲基、甲氧咪草烟、甲基咪草烟、灭草烟、灭草喹和咪草烟、三唑并嘧啶除草剂，和磺酰苯胺类，如氯酯磺草胺酸、氯酯磺草胺酸-甲基、双氯磺草胺、唑嘧磺草胺、双氟磺草胺、磺草唑胺、五氟磺草胺、嘧氟磺草胺(pyrimisulfan)和啶磺草胺，
嘧啶基苯甲酸酯类，如双草醚、双草醚-钠、嘧啶肟草醚、环酯草醚、嘧草醚、嘧草醚-甲基、嘧草硫醚、嘧草硫醚-钠、4-[[[2-[(4,6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧基]苯基]甲基]氨基]-苯甲酸-1-甲基乙基酯(CAS 420138-41-6)、4-[[[2-[(4,6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧基]苯基]甲基]氨基]-苯甲酸丙基酯(CAS 420138-40-5)、N-(4-溴苯基)-2-[(4,6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧基]苯甲胺(CAS 420138-01-8)，
磺酰基氨基羰基-三唑啉酮除草剂，如氟酮磺隆、氟酮磺隆-钠、丙苯磺隆、丙苯磺隆-钠、噻酮磺隆和噻酮磺隆-甲基；以及氟酮磺草胺；
其中，本发明的优选实施例涉及包含至少一种咪唑啉酮除草剂的那些组合物；
b3)来自光合作用抑制剂的组：
氨唑草酮，光系统II的抑制剂，例如1-(6-叔丁基嘧啶-4-基)-2-羟基-4-甲氧基-3-甲基-2H-吡咯-5-酮(CAS1654744-66-7)、1-(5-叔丁基异噁唑-3-基)-2-羟基-4-甲氧基-3-甲基-2H-吡咯-5-酮(CAS1637455-12-9)、1-(5-叔丁基异噁唑-3-基)-4-氯-2-羟基-3-甲基-2H-吡咯-5-酮(CAS1637453-94-1)、1-(5-叔丁基-1-甲基-吡唑-3-基)-4-氯-2-羟基-3-甲基-2H-吡咯-5-酮(CAS1654057-29-0)、1-(5-叔丁基-1-甲基-吡唑-3-基)-3-氯-2-羟基-4-甲基-2H-吡咯-5-酮(CAS1654747-80-4)、4-羟基-1-甲氧基-5-甲基-3-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]咪唑烷-2-酮；(CAS2023785-78-4)、4-羟基-1,5-二甲基-3-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]咪唑烷-2-酮(CAS2023785-79-5)、5-乙氧基-4-羟基-1-甲基-3-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]咪唑烷-2-酮(CAS1701416-69-4)、4-羟基-1-甲基-3-[4-(三氟甲基)-2-吡啶基]咪唑烷-2-酮(CAS1708087-22-2)、4-羟基-1,5-二甲基-3-[1-甲基-5-(三氟甲基)吡唑-3-基]咪唑烷-2-酮(CAS2023785-80-8)、1-(5-叔丁基异噁唑-3-基)-4-乙氧基-5-羟基-3-甲基-咪唑烷-2-酮(CAS1844836-64-1)，三嗪类除草剂，包括氯三嗪、三嗪酮类、三嗪二酮类(triazindiones)、甲硫基三嗪类、和哒嗪酮类，如莠灭净、莠去津、氯草敏、草净津、敌草净、异戊乙净、环嗪酮、赛克津(metribuzin)、扑灭通(prometon)、扑草净(prometryn)、扑灭津(propazine)、西玛津(simazine)、西草净(simetryn)、特丁通(terbumeton)、特丁津(terbuthylazin)、去草净(terbutryn)和草达津(trietazin)，芳基脲如氯溴隆、绿麦隆、枯草隆(chloroxuron)、噁唑隆、敌草隆、伏草隆、异丙隆、异噁隆、利谷隆、苯嗪草酮、甲基苯噻隆、吡喃隆、甲氧隆、绿谷隆、草不隆、环草隆、丁噻隆和噻苯隆(thiadiazuron)，苯基氨基甲酸酯类如甜菜安(desmedipham)、卡草灵(karbutilat)、苯敌草(phenmedipham)、苯敌草-乙基，腈类除草剂如杀草全(bromofenoxim)、溴苯腈及其盐和酯、碘苯腈及其盐和酯，尿嘧啶类如除草定、环草定和特草定、以及噻草平和噻草平-钠、达草止(pyridate)、氯苯哒醇(pyridafol)、蔬草灭和敌稗，以及光系统I的抑制剂，如敌草快、敌草快-二溴化物、对草快(paraquat)、对草快-二氯化物和对草快-双硫酸甲酯。其中，本发明的优选实施例涉及包含至少一种芳基脲除草剂的那些组合物。其中，本发明的优选实施例同样涉及包含至少一种三嗪除草剂的那些组合物。其中，本发明的优选实施例同样涉及包含至少一种腈类除草剂的那些组合物；
b4)来自原卟啉原-IX氧化酶抑制剂的组：
三氟羧草醚、三氟羧草醚-钠、唑啶草酮(azafenidin)、苯唑磺隆(bencarbazone)、双苯嘧草酮、治草醚、氟丙嘧草酯、唑酮草酯、唑酮草酯-乙基、甲氧除草醚(chlomethoxyfen)、氯酰亚胺(chlorphthalim)、吲哚酮草酯、环丙吡草腈(cyclopyranil)、异丙吡草酯(fluazolate)、氟哒嗪草酯(flufenpyr)、氟哒嗪草酯-乙基、氟烯草酸、氟烯草酸-戊基、丙炔氟草胺(flumioxazin)、乙羧氟草醚(fluoroglycofen)、乙羧氟草醚-乙基、嗪草酸、嗪草酸甲酯、氟磺胺草醚、氟硝磺酰胺(halosafen)、乳氟禾草灵、丙炔噁草酮(oxadiargyl)、噁草酮、乙氧氟草醚、环戊噁草酮(pentoxazone)、氟唑草胺(profluazol)、双唑草腈(pyraclonil)、吡草醚、吡草醚-乙基、苯嘧磺草胺(saflufenacil)、甲磺草胺(sulfentrazone)、噻二唑胺(thidiazimin)、氟嘧硫草酯(tiafenacil)、三氟草嗪(trifludimoxazin)、氟嘧草啶、N-乙基-3-(2,6-二氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基-1H-吡唑-1-甲酰胺(CAS 452098-92-9)、N-四氢糠基-3-(2,6-二氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基-1H-吡唑-1-甲酰胺(CAS 915396-43-9)、N-乙基-3-(2-氯-6-氟-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基-1H-吡唑-1-甲酰胺(CAS 452099-05-7)、N-四氢糠基-3-(2-氯-6-氟-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基-1H-吡唑-1-甲酰胺(CAS 452100-03-7)、3-[7-氟-3-氧代-4-(丙-2-炔基)-3,4-二氢-2H-苯并[1,4]噁嗪-6-基]-1,5-二甲基-6-硫代-[1,3,5]三嗪烷-2,4-二酮(CAS451484-50-7)、2-(2,2,7-三氟-3-氧代-4-丙-2-炔基-3,4-二氢-2H-苯并[1,4]噁嗪-6-基)-4,5,6,7-四氢-异吲哚-1,3-二酮(CAS 1300118-96-0)、1-甲基-6-三氟甲基-3-(2,2,7-三氟-3-氧代-4-丙-2-炔基-3,4-二氢-2H-苯并[1,4]噁嗪-6-基)-1H-嘧啶-2,4-二酮(CAS1304113-05-0)、(E)-4-[2-氯-5-[4-氯-5-(二氟甲氧基)-1H-甲基-吡唑-3-基]-4-氟-苯氧基]-3-甲氧基-丁-2-烯酸甲酯(CAS 948893-00-3)、和3-[7-氯-5-氟-2-(三氟甲基)-1H-苯并咪唑-4-基]-1-甲基-6-(三氟甲基)-1H-嘧啶-2,4-二酮(CAS 212754-02-4)、2-[2-氯-5-[3-氯-5-(三氟甲基)-2-吡啶基]-4-氟苯氧基]-2-甲氧基-乙酸甲基酯(CAS1970221-16-9)、2-[2-[[3-氯-6-[3,6-二氢-3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)-1(2H)-嘧啶基]-5-氟-2-吡啶基]氧基]苯氧基]-乙酸甲基酯(CAS2158274-96-3)、2-[2-[[3-氯-6-[3,6-二氢-3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)-1(2H)-嘧啶基]-5-氟-2-吡啶基]氧基]苯氧基]乙酸乙基酯(CAS158274-50-9)、2-[[3-[2-氯-5-[4-(二氟甲基)-3-甲基-5-氧代-1,2,4-三唑-1-基]-4-氟-苯氧基]-2-吡啶基]氧基]乙酸甲酯(CAS 2271389-22-9)、2-[[3-[2-氯-5-[4-(二氟甲基)-3-甲基-5-氧代-1,2,4-三唑-1-基]-4-氟-苯氧基]-2-吡啶基]氧基]乙酸乙酯(CAS2230679-62-4)、2-[[3-[[3-氯-6-[3,6-二氢-3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)-1(2H)-嘧啶基]-5-氟-2-吡啶基]氧基]-2-吡啶基]氧基]-乙酸甲基酯(CAS 2158275-73-9)、2-[[3-[[3-氯-6-[3,6-二氢-3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)-1(2H)-嘧啶基]-5-氟-2-吡啶基]氧基]-2-吡啶基]氧基]乙酸乙基酯(CAS 2158274-56-5)、2-[2-[[3-氯-6-[3,6-二氢-3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)-1(2H)-嘧啶基]-5-氟-2-吡啶基]氧基]苯氧基]-N-(甲基磺酰基)-乙酰胺(CAS2158274-53-2)、2-[[3-[[3-氯-6-[3,6-二氢-3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)-1(2H)-嘧啶基]-5-氟-2-吡啶基]氧基]-2-吡啶基]氧基]-N-(甲基磺酰基)-乙酰胺(CAS2158276-22-1)、3-[2-氯-5-[3,6-二氢-3-甲基-2,6-二氧代-4-(三氟甲基)-1(2H)-嘧啶基]-4-氟苯基]-4,5-二氢-5-甲基-5-异噁唑甲酸乙基酯(CAS1949837-17-5)；
b5)来自漂白剂除草剂的组：
PDS抑制剂：氟丁酰草胺、吡氟酰草胺、氟啶草酮、氟咯草酮(flurochloridone)、呋草酮、达草灭、氟吡酰草胺、4-(3-三氟甲基苯氧基)-2-(4-三氟甲基苯基)嘧啶(CAS180608-33-7)和利米沙芬(rimisoxafen)，HPPD抑制剂：双环磺草酮(benzobicyclon)、吡草酮(benzofenap)、氟吡草酮、广灭灵(clomazone)、芬喹酮、异噁唑草酮(isoxaflutole)、硝磺草酮、氧戊磺草酮(oxotrione)(CAS1486617-21-3)、磺酰草吡唑、吡唑特(pyrazolynate)、苄草唑(pyrazoxyfen)、磺草酮、呋喃磺草酮(tefuryltrione)、环磺酮、吡唑草酯、苯唑草酮、双唑草酮(bipyrazone)、苯唑氟草酮(fenpyrazone)、环吡氟草酮(cypyrafluone)、三唑磺草酮(tripyrasulfone)、喹草酮(benquitrione)、双氧代吡硫翁(dioxopyritrione)；漂白剂，未知目标：苯草醚(aclonifen)、杀草强、伏草隆2-氯-3-甲基硫烷基-N-(1-甲基四唑-5-基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(CAS1361139-71-0)、二氯异噁草酮(bixlozone)和2-(2,5-二氯苯基)甲基-4,4-二甲基-3-异噁唑烷酮(CAS 81778-66-7)；
b6)来自EPSP合酶抑制剂的组：
草甘膦、草甘膦-异丙基铵、草甘膦-钾和草甘膦-三甲基硫(草硫膦)；
b7)来自谷氨酰胺合酶抑制剂的组：
双丙氨酰膦(双丙氨膦)、双丙氨酰膦-钠、草铵膦、精草铵膦和草铵膦-铵；
b8)来自DHP合酶抑制剂的组：
黄草灵(asulam)；
b9)来自有丝分裂抑制剂的组：
K1组化合物：二硝基苯胺类，如氟草胺、仲丁灵、敌乐胺、丁氟消草(ethalfluralin)、氟消草(fluchloralin)、黄草消(oryzalin)、二甲戊乐灵(pendimethalin)、氨氟乐灵(prodiamine)和氟乐灵(trifluralin)，磷酰胺类，如胺草磷、胺草磷-甲基和抑草磷(butamiphos)，苯甲酸除草剂，如敌草索(chlorthal)、敌草索-二甲基，吡啶类，如氟硫草定和噻草啶，苯甲酰胺类，如拿草特(propyzamide)和牧草胺(tebutam)；K2组化合物：长杀草(carbetamide)、氯苯胺灵、麦草氟、麦草氟-异丙基、麦草氟-甲基、麦草氟-M-异丙基、麦草氟-M-甲基和苯胺灵；其中，K1组化合物，特别是二硝基苯胺类是优选的；
b10)来自VLCFA抑制剂的组：
氯乙酰胺类，如乙草胺(acetochlor)、甲草胺(alachlor)、乙酰氨草胺、丁草胺、二甲草胺(dimethachlor)、二甲酚草胺(dimethenamid)、精二甲酚草胺、吡草胺、异丙甲草胺(metolachlor)、异丙甲草胺-S、烯草胺(pethoxamid)、丙草胺(pretilachlor)、毒草安、异丙草胺(propisochlor)和噻吩草胺(thenylchlor)，氧乙酰苯胺类，如氟噻草胺和苯噻草胺，乙酰苯胺类，如草乃敌(diphenamid)、萘丙胺、敌草胺和敌草胺-M，四唑啉酮类，如四唑酰草胺(fentrazamide)，以及其他除草剂，如莎稗磷(anilofos)、唑草胺(cafenstrole)、苯磺噁唑草(fenoxasulfone)、三唑酰草胺(ipfencarbazone)、哌草磷、砜吡草唑(pyroxasulfone)、二甲草磺酰胺和具有式II.1、II.2、II.3、II.4、II.5、II.6、II.7、II.8和II.9的异噁唑啉化合物
具有式(II)的异噁唑啉化合物是本领域已知的，例如来自WO 2006/024820、WO2006/037945、WO 2007/071900和WO 2007/096576；
在VLCFA抑制剂中，优选氯乙酰胺和氧乙酰胺；
b11)来自纤维素生物合成抑制剂的组：
草克乐(chlorthiamid)、敌草腈(dichlobenil)、氟胺草唑、茚嗪氟草胺、异噁酰草胺(isoxaben)、三嗪氟草胺和1-环己基-5-五氟苯氧基-14-[1,2,4,6]噻三嗪-3-基胺(CAS175899-01-1)；
b12)来自去偶除草剂的组：
地乐酚、特乐酚(dinoterb)和DNOC及其盐；
b13)来自植物生长素除草剂的组：
2,4-D及其盐和酯，如氯酰草膦(clacyfos)、2,4-DB及其盐和酯、环丙嘧啶酸(aminocyclopyrachlor)及其盐和酯，氯氨吡啶酸(aminopyralid)及其盐，如氯氨吡啶酸-二甲基铵、氯氨吡啶酸-三(2-羟基丙基)铵及其酯、草除灵(benazolin)、草除灵-乙基、豆科威(chloramben)及其盐和酯、克普草(clomeprop)、二氯吡啶酸(clopyralid)及其盐和酯、麦草畏及其盐和酯、2,4-滴丙酸(dichlorprop)及其盐和酯、精2,4-滴丙酸及其盐和酯、氯氟吡啶酯(flopyrauxifen)、氯氟吡氧乙酸(fluroxypyr)、氯氟吡氧乙酸丁氧异丙酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯、氟氯吡啶酯(halauxifen)及其盐和酯(CAS 943832-60-8)；MCPA及其盐和酯、MCPA-硫代乙基、MCPB及其盐和酯、二甲四氯丙酸(mecoprop)及其盐和酯、精二甲四氯丙酸及其盐和酯、毒莠定及其盐和酯、二氯喹啉酸(quinclorac)、氯甲喹啉酸(quinmerac)、TBA(2,3,6)及其盐和酯、绿草定(triclopyr)及其盐和酯、氯氟吡啶酯(florpyrauxifen)、氯氟吡啶酯-苄基(CAS1390661-72-9)和4-氨基-3-氯-5-氟-6-(7-氟-1H-吲哚-6-基)吡啶甲酸(CAS1629965-65-6)；
b14)来自生长素运输抑制剂的组：氟吡草腙(diflufenzopyr)、氟吡草腙-钠、萘草胺(naptalam)和萘草胺-钠；
b15)来自其他除草剂的组：溴丁酰草胺、整形醇、整形醇甲酯、环庚草醚、苄草隆、环哒嗪草酯(cyclopyrimorate)及其盐和酯、茅草枯、棉隆、野燕枯、野燕枯-甲基磺酸酯、噻节因、DSMA、杀草隆、草多索及其盐、乙氧苯草胺、抑草丁、抑草丁丁酯、呋嘧醇、杀木膦、杀木膦铵、茚草酮、马来酰肼、氟磺酰草胺、威百亩、异噁噻草醚、甲基叠氮化物、甲基溴、甲基-杀草隆、甲基碘、MSMA、油酸、噁嗪草酮、壬酸、稗草畏、灭藻醌四氟络草胺、灭草环、6-氯-4-(2,7-二甲基-1-萘基)-5-羟基-2-甲基-哒嗪-3-酮(CAS2414510-21-5)。
具有羧基基团的活性化合物B和C能以酸的形式、如上所提及的农业上合适的盐的形式或农业上可接受的衍生物的形式用于根据本发明的组合物中。
在麦草畏的情况下，合适的盐包括其中抗衡离子是农业上可接受的阳离子的盐。例如，麦草畏的合适的盐是麦草畏-钠、麦草畏-钾、麦草畏-甲基铵、麦草畏-二甲基铵、麦草畏-异丙基铵、麦草畏-二甘醇胺、麦草畏-乙醇胺、麦草畏-二乙醇胺、麦草畏-三乙醇胺、麦草畏-N,N-双-(3-氨基丙基)甲基胺和麦草畏-二亚乙基三胺。合适的酯的实例是麦草畏-甲基酯和麦草畏-丁氧基乙基酯(butotyl)。
2,4-D的合适的盐是2,4-D-铵、2,4-D-二甲基铵、2,4-D-二乙基铵、2,4-D-二乙醇铵(2,4-D-二乙醇胺)、2,4-D-三乙醇铵、2,4-D-异丙基铵、2,4-D-三异丙醇铵、2,4-D-庚基铵、2,4-D-十二烷基铵、2,4-D-十四烷基铵、2,4-D-三乙基铵、2,4-D-三(2-羟基丙基)铵、2,4-D-三(异丙基)铵、2,4-D-三乙醇胺、2,4-D-锂、2,4-D-钠。2,4-D的合适的酯的实例是2,4-D-丁氧基乙基酯、2,4-D-2-丁氧基丙基酯、2,4-D-3-丁氧基丙基酯、2,4-D-丁基酯、2,4-D-乙基酯、2,4-D-乙基己基酯、2,4-D-异丁基酯、2,4-D-异辛基酯、2,4-D-异丙基酯、2,4-D-1-甲基庚基酯、2,4-D-甲基酯、2,4-D-辛基酯、2,4-D-戊基酯、2,4-D-丙基酯、2,4-D-四氢糠基酯和氯酰草膦。
2,4-DB的合适的盐是例如2,4-DB-钠、2,4-DB-钾和2,4-DB-二甲基铵。2,4-DB的合适的酯是例如2,4-DB-丁基酯和2,4-DB-异辛基酯。
2,4-滴丙酸的合适的盐是例如2,4-滴丙酸-钠、2,4-滴丙酸-钾和2,4-滴丙酸-二甲基铵。2,4-滴丙酸的合适的酯的实例是2,4-滴丙酸-丁氧基乙基酯和2,4-滴丙酸-异辛基酯。
MCPA的合适的盐和酯包括MCPA-丁氧基乙基酯、MCPA-丁基酯、MCPA-二甲基铵、MCPA-二乙醇胺、MCPA-乙基酯、MCPA-硫代乙基酯、MCPA-2-乙基己基酯、MCPA-异丁基酯、MCPA-异辛基酯、MCPA-异丙基酯、MCPA-异丙基铵、MCPA-甲基酯、MCPA-乙醇胺、MCPA-钾、MCPA-钠和MCPA-三乙醇胺。
MCPB的合适的盐是MCPB钠。MCPB的合适的酯是MCPB-乙基酯。
二氯吡啶酸的合适的盐是二氯吡啶酸-钾、二氯吡啶酸-乙醇胺和二氯吡啶酸-三-(2-羟基丙基)铵。二氯吡啶酸的合适的酯的实例是二氯吡啶酸-甲基。
氯氟吡氧乙酸的合适的酯的实例是氯氟吡氧乙酸异辛酯和氯氟吡氧乙酸-2-丁氧基-1-甲基乙基酯，其中优选氯氟吡氧乙酸异辛酯。
毒莠定的合适的盐是毒莠定-二甲基铵、毒莠定-钾、毒莠定-三异丙醇铵、毒莠定-三异丙基铵和毒莠定-三乙醇胺。毒莠定的合适的酯是毒莠定-异辛基酯。
绿草定的合适的盐是绿草定-三乙基铵。绿草定的合适的酯是例如绿草定-乙基酯和绿草定-丁氧基乙基酯。
豆科威的合适的盐和酯包括豆科威-铵、豆科威-二乙醇胺、豆科威-甲基酯、豆科威-甲基铵和豆科威-钠。2,3,6-TBA的合适的盐和酯包括2,3,6-TBA-二甲基铵、2,3,6-TBA-锂、2,3,6-TBA-钾和2,3,6-TBA-钠。
氯氨吡啶酸的合适的盐和酯包括氯氨吡啶酸-钾、氯氨吡啶酸-二甲基铵和氯氨吡啶酸-三(2-羟基丙基)铵。
草甘膦的合适的盐是例如草甘膦-铵、草甘膦-二铵、草甘膦-二甲基铵、草甘膦-异丙基铵、草甘膦-钾、草甘膦-钠、草甘膦-三甲基硫以及乙醇胺和二乙醇胺盐，优选地草甘膦-二铵、草甘膦-异丙基铵和草甘膦-三甲基硫(草硫膦)。
草铵膦的合适的盐是例如草铵膦-铵。
精草铵膦的合适的盐是例如精草铵膦-铵。
溴苯腈的合适的盐和酯是例如溴苯腈-丁酸酯、溴苯腈-庚酸酯、溴苯腈-辛酸酯、溴苯腈-钾和溴苯腈-钠。
碘苯腈(ioxonil)的合适的盐和酯是例如碘苯腈-辛酸酯、碘苯腈-钾和碘苯腈-钠。
二甲四氯丙酸的合适的盐和酯包括二甲四氯丙酸-丁氧基乙基酯、二甲四氯丙酸-二甲基铵、二甲四氯丙酸-二乙醇胺、二甲四氯丙酸-乙二醇基(ethadyl)、二甲四氯丙酸-2-乙基己基酯、二甲四氯丙酸-异辛基酯、二甲四氯丙酸-甲基酯、二甲四氯丙酸-钾、二甲四氯丙酸-钠和二甲四氯丙酸-三乙醇胺。
精二甲四氯丙酸的合适的盐是例如精二甲四氯丙酸-丁氧基乙基、精二甲四氯丙酸-二甲基铵、精二甲四氯丙酸-2-乙基己基、精二甲四氯丙酸-异丁基、精二甲四氯丙酸-钾和精二甲四氯丙酸-钠。
氟吡草腙的合适的盐是例如氟吡草腙-钠。
萘草胺的合适的盐是例如萘草胺-钠。
环丙嘧啶酸的合适的盐和酯是例如环丙嘧啶酸-二甲基铵、环丙嘧啶酸-甲基、环丙嘧啶酸-三异丙醇铵、环丙嘧啶酸-钠和环丙嘧啶酸-钾。
二氯喹啉酸的合适的盐是例如二氯喹啉酸-二甲基铵。
氯甲喹啉酸的合适的盐是例如氯甲喹啉酸-二甲基铵。
甲氧咪草烟的合适的盐是例如甲氧咪草烟-铵。
甲基咪草烟的合适的盐是例如甲基咪草烟-铵和甲基咪草烟-异丙基铵。
灭草烟的合适的盐是例如灭草烟-铵和灭草烟-异丙基铵。
灭草喹的合适的盐是例如灭草喹-铵。
咪草烟的合适的盐是例如咪草烟-铵和咪草烟-异丙基铵。
苯唑草酮的合适的盐是例如苯唑草酮-钠。
特别优选的除草剂B是如上所定义的除草剂B；特别是除草剂B.1-B.215：
表B：
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此外，将具有式(I)的苯基尿嘧啶与安全剂组合施用可能是有用的。安全剂是防止或减少对有用植物的损害而不会对具有式(I)的苯基尿嘧啶针对不想要的植物的除草作用产生重大影响的化学化合物。它们可以在有用植物的播种前(例如在种子处理、枝条或幼苗上)施用或者出苗前施用或出苗后施用。安全剂和具有式(I)的苯基尿嘧啶以及任选地除草剂B可以同时或依次施用。
在本发明的另一个实施例中，可用于本发明的组合物包含至少一种具有式(I)的苯基尿嘧啶和至少一种安全剂C(组分C)。
合适的安全剂是例如(喹啉-8-氧基)乙酸、1-苯基-5-卤代烷基-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸、1-苯基-4,5-二氢-5-烷基-1H-吡唑-3,5-二甲酸、4,5-二氢-5,5-二芳基-3-异噁唑甲酸、二氯乙酰胺、α-肟基苯基乙腈、苯乙酮肟、4,6-二卤代-2-苯基嘧啶、N-[[4-(氨基羰基)苯基]磺酰基]-2-苯甲酰胺、1,8-萘二甲酸酐、2-卤代-4-(卤代烷基)-5-噻唑甲酸、硫代磷酸酯和N-烷基-O-苯基氨基甲酸酯及其农业上可接受的盐和农业上可接受的衍生物，如酰胺、酯和硫酯，前提是它们具有酸基团。
优选的安全剂C的实例是解草嗪、解草酸、解草胺腈、环丙磺酰胺、二氯丙烯胺(dichlormid)、双环咯酮(dicyclonon)、增效磷(dietholate)、解草唑(fenchlorazole)、解草啶(fenclorim)、解草胺(flurazole)、氟草肟(fluxofenim)、解草噁唑(furilazole)、双苯噁唑酸(isoxadifen)、吡唑解草酸(mefenpyr)、灭芬酯(mephenate)、萘二甲酸酐、解草腈、4-(二氯乙酰基)-1-氧杂-4-氮杂螺[4.5]癸烷(MON4660，CAS 71526-07-3)、2,2,5-三甲基-3-(二氯乙酰基)-1,3-噁唑烷(R-29148，CAS 52836-31-4)、解草磺酰胺和BPCMS(CAS54091-06-4)；
尤其优选解草嗪、解草酸、解草胺腈、环丙磺酰胺、二氯丙烯胺、双环咯酮、增效磷、解草唑、解草啶、解草胺、氟草肟、解草噁唑、双苯噁唑酸、吡唑解草酸、灭芬酯、萘二甲酸酐、解草腈、4-(二氯乙酰基)-1-氧杂-4-氮杂螺[4.5]癸烷(MON4660，CAS 71526-07-3)、2,2,5-三甲基-3-(二氯乙酰基)-1,3-噁唑烷(R-29148，CAS 52836-31-4)和解草磺酰胺。
特别优选的安全剂C作为组分C，是根据本发明的组合物的成分，其是如上所定义的安全剂C；特别是下表C中列出的安全剂C.1-C.17：
表C
b1)至b15)组的活性化合物B和活性化合物C是已知的除草剂和安全剂，参见例如杀有害生物通用名称纲要(The Compendium ofPesticide Common Names)(http://www.alanwood.net/pesticides/)；FarmChemicals Handbook[农用化学物质手册]2000第86卷,MeisterPublishing Company[迈斯特出版公司],2000；B.Hock,C.Fedtke,R.R.Schmidt,Herbizide[除草剂],Georg Thieme Verlag[格奥尔格蒂梅出版社],斯图加特(Stuttgart)1995；W.H.Ahrens,Herbicide Handbook[除草剂手册],第7版,WeedScience Society of America[美国杂草科学学会],1994；和K.K.Hatzios,HerbicideHandbook[除草剂手册],第7版增刊,WeedScience Society of America[美国杂草科学学会],1998。2,2,5-三甲基-3-(二氯乙酰基)-1,3-噁唑烷[CAS号52836-31-4]也被称为R-29148。4-(二氯乙酰基)-1-氧杂-4-氮杂螺[4.5]癸烷[CAS号71526-07-3]也被称为AD-67和MON 4660。
基于目前的知识将活性化合物分配至相应的作用机制。如果几种作用机制适用于一种活性化合物，则这种物质仅被分配到一种作用机制。
通常优选将对本发明有用的化合物与除草剂组合使用，这些除草剂对所处理的作物具有选择性，并且在所采用的施用率下补充由这些化合物控制的杂草谱。通常进一步优选同时施用本发明的化合物和其他互补除草剂，作为组合配制品或作为桶混物(tankmix)。
应认识到，本发明的多核苷酸分子和多肽涵盖以下多肽，这些多肽包含与SEQ IDNo:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、637、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960中列出的氨基酸序列或其变体或同源物具有足够的同一性的氨基酸序列。术语“足够的同一性”在本文中用于指第一氨基酸或核苷酸序列含有足够或最少数目的与第二氨基酸或核苷酸序列相同或等同(如具有相似侧链)的氨基酸残基或核苷酸，使得该第一和第二氨基酸或核苷酸序列具有共同的结构域和/或共同的功能活性。
通常，“序列同一性”是指两个最佳比对的DNA或氨基酸序列在组分(例如核苷酸或氨基酸)的整个比对窗口中不变的程度。用于测试序列和参考序列的比对区段的“同一性分数”是由两个比对序列共有的相同组分的数量除以参考序列区段(即整个参考序列或参考序列的较小定义部分)中的组分总数。“百分比同一性”是同一性分数乘以100。用于比对比较窗口的序列的最佳比对是本领域技术人员众所周知的，并且可以通过如Smith和Waterman的局部同源性算法、Needleman和Wunsch的同源性比对算法、Pearson和Lipman的搜索相似性方法的工具来进行，并且优选地通过这些算法的计算机化实施，如GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA，可作为GCG.Wisconsin Package.(马塞诸塞州柏林顿(Burlington，Mass.)的阿赛乐德公司(Accelrys Inc.))的一部分获得。
多核苷酸和寡核苷酸
对于“分离的多核苷酸”，包括DNA、RNA或它们的组合，单链或双链的，有义或反义方向或两者的组合，dsRNA或其他，我们意指至少部分地从与其天然状态下相关或相连的多核苷酸序列中分离的多核苷酸。这意味着其他核酸分子基于重量计以小于所期望的核酸量的5％的量存在，优选地按重量计小于2％、更优选地按重量计小于1％、最优选地按重量计小于0.5％。优选地，“分离的”核酸不含天然侧接生物基因组DNA中核酸(即位于该核酸5’端和3’端的序列)的一些序列，该生物为该核酸来源。例如，在不同的实施例中，分离的除草剂抗性和/或耐受性相关蛋白编码核酸分子可含有小于约5kb、4kb、3kb、2kb、1kb、0.5kb或0.1kb的核苷酸序列，这些核苷酸序列天然侧接细胞基因组DNA中的核酸分子，该细胞为该核酸来源。此外，“分离的”核酸分子(如cDNA分子)可不含与其天然相关的一些其他细胞材料或当通过重组技术产生时，不含培养基，或当化学合成时不含化学前体或其他化学物质。优选地，分离的多核苷酸至少60％不含，优选地至少75％不含，且最优选地至少90％不含与它们天然相关的其他组分。如技术人员将意识到的，分离的多核苷酸可以是存在于例如天然不包含该多核苷酸的转基因生物中的外源多核苷酸。此外，术语“一种或多种多核苷酸”、“一种或多种核酸序列”、“一种或多种核苷酸序列”、“一种或多种核酸”、“核酸分子”在本文中可互换使用，并且是指任何长度的呈聚合不分支形式的核苷酸(核糖核苷酸或脱氧核糖核苷酸或两者的组合)。
术语“突变PPO核酸”是指具有以下序列的PPO核酸，该序列从野生型PPO核酸突变，例如SEQ ID NO:118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、624、626或650，或其同源物、旁系同源物和直系同源物；并且该序列赋予表达其的植物增加的苯基尿嘧啶除草剂耐受性。
此外，术语“突变原卟啉原氧化酶(突变PPO)”是指用另一种氨基酸替代野生型一级序列SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、637、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960或其变体、衍生物、同源物、直系同源物或旁系同源物的氨基酸。表述“突变的氨基酸”将在下文中用于表示被另一种氨基酸替代的氨基酸，从而表示蛋白质的一级序列中的突变位点。
在优选的实施例中，编码突变PPO的PPO核苷酸序列包含SEQ ID NO:118,119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、624、626或650的序列或其变体或衍生物。
此外，本领域技术人员将理解，PPO核苷酸序列涵盖如下文所定义的SEQ ID NO:118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、624、626或650的同源物、旁系同源物和直系同源物。
关于序列(例如多肽或核酸序列，如本发明的转录调节核苷酸序列)，术语“变体”旨在意指基本上相似的序列。对于包含开放阅读框的核苷酸序列，变体包括由于遗传密码的简并性而编码天然蛋白质的相同氨基酸序列的那些序列。通过使用众所周知的分子生物学技术，例如聚合酶链式反应(PCR)和杂交技术，可以识别如这些变体的天然存在的等位基因变体。变体核苷酸序列还包括合成衍生的核苷酸序列，如通过使用定点诱变和开放阅读框生成的编码天然蛋白质的核苷酸序列，以及编码相对于天然蛋白质具有氨基酸取代的多肽的核苷酸序列，例如如本文披露的根据本发明的突变PPO。
通常，本发明的核苷酸序列变体将与编码SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、637、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960的多肽或其变体、衍生物、同源物、直系同源物或旁系同源物的核苷酸序列具有至少30％、40％、50％、60％至70％，例如优选地71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％至79％，通常至少80％，例如81％-84％、至少85％，例如86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％至98％和99％核苷酸“序列同一性”。
多核苷酸的同一性％通过GAP(Needleman和Wunsch,1970)分析(GCG程序)确定，其中空位产生罚分＝5，空位延伸罚分＝0.3。除非另有说明，查询序列的长度为至少45个核苷酸，并且GAP分析在至少45个核苷酸的区域上比对两个序列。优选地，查询序列的长度为至少150个核苷酸，并且GAP分析在至少150个核苷酸的区域上比对两个序列。更优选地，查询序列的长度为至少300个核苷酸，并且GAP分析在至少300个核苷酸的区域上比对两个序列。甚至更优选地，GAP分析在两条序列的全长上比对它们。
多肽
“基本上纯的多肽”或“纯的”多肽意指已经自该多肽天然状态下与其关联的一种或多种脂质、核酸、其它多肽或其它污染分子中分离。优选地，基本上纯的多肽至少60％不含，更优选地至少75％不含，且更优选地至少90％不含与其天然相关的其他组分。如技术人员将理解的，纯的多肽可以是重组产生的多肽。术语“多肽”和“蛋白质”通常可以互换使用，并且是指单个多肽链，其可以或者可以没有通过添加非氨基酸基团而被修饰。应当理解，这样的多肽链可以与其他多肽或蛋白质或其他分子如辅因子相关。如本文所用，术语“蛋白质”和“多肽”还包括如本文所述的本发明多肽的变体、突变体、修饰、类似物和/或衍生物。
多肽的同一性％通过GAP(Needleman和Wunsch,1970)分析(GCG程序)确定，其中空位产生罚分＝5，空位延伸罚分＝0.3。查询序列的长度为至少25个氨基酸，并且GAP分析在至少25个氨基酸的区域上比对两个序列。更优选地，查询序列的长度为至少50个氨基酸，并且GAP分析在至少50个氨基酸的区域上比对两个序列。更优选地，查询序列的长度为至少100个氨基酸，并且GAP分析在至少100个氨基酸的区域上比对两个序列。甚至更优选地，查询序列的长度为至少250个氨基酸，并且GAP分析在至少250个氨基酸的区域上比对两个序列。甚至更优选地，GAP分析在两条序列的全长上比对它们。
关于所定义的多肽，应当理解，高于上文提供的同一性％数字的同一性％数字将涵盖优选的实施例。因此，在可适用的情况下，根据最小同一性％数字，优选地本发明的PPO多肽包含与SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、637、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960或其变体、衍生物、同源物、直系同源物或旁系同源物具有至少40％、更优选地至少45％、更优选地至少50％、更优选地至少55％、更优选地至少60％、更优选地至少65％、更优选地至少70％、更优选地至少75％、更优选地至少80％、更优选地至少85％、更优选地至少90％、更优选地至少91％、更优选地至少92％、更优选地至少93％、更优选地至少94％、更优选地至少95％、更优选地至少96％、更优选地至少97％、更优选地至少98％、更优选地至少99％、更优选地至少99.1％、更优选地至少99.2％、更优选地至少99.3％、更优选地至少99.4％、更优选地至少99.5％、更优选地至少99.6％、更优选地至少99.7％、更优选地至少99.8％、以及甚至更优选地至少99.9同一性％的氨基酸序列。
“变体”多肽意指通过以下衍生自SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、637、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960的蛋白质或其变体、衍生物、同源物、直系同源物或旁系同源物的多肽：在天然蛋白质的N-末端和/或C-末端缺失(所谓的截短)或添加一个或多个氨基酸；在天然蛋白质的一个或多个位点处缺失或添加一个或多个氨基酸；或在天然蛋白质的一个或多个位点处取代一个或多个氨基酸。这样的变体可能由例如遗传多态性或人工操作引起。这样的操作的方法是本技术领域中所公知的。
蛋白质的“衍生物”涵盖肽、寡肽、多肽、蛋白质和酶，这些肽、寡肽、多肽、蛋白质和酶相对于所讨论的未经修饰的蛋白质具有氨基酸取代、缺失和/或插入，并且与衍生它们的未经修饰的蛋白质具有相似的生物学和功能活性。
蛋白质的“同源物”涵盖肽、寡肽、多肽、蛋白质和酶，这些肽、寡肽、多肽、蛋白质和酶相对于所讨论的未经修饰的蛋白质具有氨基酸取代、缺失和/或插入，并且与衍生它们的未经修饰的蛋白质具有相似的生物学和功能活性。
缺失是指从蛋白质中去除一个或多个氨基酸。
插入是指将一个或多个氨基酸残基引入蛋白质的预定位点。插入可以包含N-末端和/或C-末端融合以及单个或多个氨基酸的序列内插入。通常，氨基酸序列内的插入将比N-末端或C-末端融合小，大约1至10个残基的数量级。N-末端或C-末端融合蛋白或肽的实例包括酵母双杂交系统中使用的转录激活因子的结合结构域或激活结构域、噬菌体外壳蛋白、(组氨酸)-6-标签、谷胱甘肽S-转移酶-标签、蛋白A、麦芽糖结合蛋白、二氢叶酸还原酶、标签100表位、c-myc表位、-表位、lacZ、CMP(钙调蛋白结合肽)、HA表位、蛋白C表位和VSV表位。
取代是指用具有相似特性(如相似的疏水性、亲水性、抗原性、形成或破坏α-螺旋结构或β-折叠结构的倾向)的其他氨基酸替代蛋白质的氨基酸。氨基酸取代典型地是单个残基取代，但可为簇集的(取决于施加在多肽上的功能限制)且可在1至10个氨基酸的范围内；插入通常为约1至10个氨基酸残基的数量级。氨基酸取代优选地是保守氨基酸取代。保守性取代表是本领域众所周知的(参见例如Creighton(1984)Proteins.[蛋白质]W.H.Freeman and Company[W.H.弗里曼公司](编辑))。
表1：保守氨基酸取代的实例
残基 保守性取代 残基 保守性取代
Ala Ser Leu Ile；Val
Arg Lys Lys Arg；Gln
Asn Gln；His Met Leu；Ile
Asp Glu Phe Met；Leu；Tyr
Gln Asn Ser Thr；Gly
Cys Ser Thr Ser；Val
Glu Asp Trp Tyr
Gly Pro Tyr Trp；Phe
His Asn；Gln Val Ile；Leu
Ile Leu，Val
氨基酸取代、缺失和/或插入可以容易地使用本领域众所周知肽合成技术(如固相肽合成等)或通过重组DNA操作来进行。操作DNA序列以产生蛋白质的取代、插入或缺失变体的方法是本领域众所周知的。例如，在DNA中的预定位点处进行取代突变的技术是本领域技术人员众所周知的，并且包括M13诱变、T7-Gen体外诱变(USB公司，克利夫兰(Cleveland)，俄亥俄州(OH))、QuickChange定点诱变(斯图特基因公司(Stratagene)，圣地亚哥，加利福尼亚州)、PCR介导的定点诱变或其他定点诱变方案。
“衍生物”进一步包括肽、寡肽、多肽，与天然存在形式的蛋白质(如目的蛋白)的氨基酸序列相比，它们可以包含用非天然存在的氨基酸残基取代氨基酸，或添加非天然存在的氨基酸残基。蛋白质的“衍生物”还涵盖肽、寡肽、多肽，与天然存在形式的多肽的氨基酸序列相比，它们包含天然存在的改变(糖基化、酰化、异戊二烯化、磷酸化、肉豆蔻酰化、硫酸化等)或非天然改变的氨基酸残基。与衍生其的氨基酸序列相比，衍生物还可以包含一个或多个非氨基酸取代基或添加物，例如与氨基酸序列共价或非共价结合的报告分子或其他配体，如结合以便于其检测的报告分子，以及相对于天然存在蛋白质的氨基酸序列的非天然存在的氨基酸残基。此外，“衍生物”还包括天然存在形式的蛋白质与标签肽(如FLAG、HIS6或硫氧还蛋白)的融合(关于标签肽的综述，参见Terpe,Appl.Microbiol.Biotechnol.[应用微生物学与生物技术]60,523-533,2003)。
“直系同源物”和“旁系同源物”涵盖用于描述基因祖先关系的进化概念。旁系同源物是相同物种内的基因，其起源自祖先基因的复制；直系同源物是来自不同生物的基因，它们通过物种形成起源，并且也源自共同的祖先基因。
本领域熟知的是，旁系同源物和直系同源物可以共享在给定位点携带合适的氨基酸残基的不同结构域，如用于特定底物的结合口袋或用于与其他蛋白质相互作用的结合基序。
术语“结构域”是指沿进化相关蛋白质序列的比对在特定位置处保守的一组氨基酸。虽然其他位置处的氨基酸可以在同源物之间变化，但在特定位置处高度保守的氨基酸表明可能是在蛋白质的结构、稳定性或功能中必需的氨基酸。“结构域”通过在蛋白质同源物家族的比对序列中其高度的保守性而鉴定，其可以用作标识符来确定所讨论的任何多肽是否属于先前鉴定的多肽家族。
术语“基序”或“共有序列”是指进化相关蛋白质序列中的短保守区域。基序通常是结构域的高度保守部分，但也可能只包括结构域的一部分，或者位于保守结构域之外(如果基序的所有氨基酸都落在限定的结构域之外)。包含在根据本发明的PPO多肽的序列中的优选基序是SQ[N/K/H]KRYI、TLGTLFSS、[F/Y]TTF[V/I]GG。
存在用于鉴定结构域的专业数据库，例如SMART(Schultz等人(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]95,5857-5864；Letunic等人(2002)Nucleic Acids Res[核酸研究]30,242-244)、InterPro(Mulder等人,(2003)Nucl.Acids.Res.[核酸研究]31,315-318)、Prosite(Bucher和Bairoch(1994),Ageneralized profile syntax for biomolecularsequences motifs and its functionin automatic sequence interpretation.[用于生物分子序列基序的概括特征结构及其在自动化序列解读中的功能](在)ISMB-94；Proceedings 2nd International Conferenceon Intelligent Systemsfor Molecular Biology.[第2届分子生物学智能系统国际会议论文集]Altman R.,Brutlag D.,Karp P.,Lathrop R.,Searls D.,编辑,第53-61页,AAAIPress[AAAI出版社],门洛帕克(Menlo Park)；Hulo等人,Nucl.Acids.Res.[核酸研究]32:D134-D137,(2004))、或Pfam(Bateman等人,Nucleic Acids Research[核酸研究]30(1):276-280(2002))。一组用于蛋白质序列的计算机分析的工具可在ExPASy蛋白质组学服务器上获得(瑞士生物信息学研究所(Swiss Institute of Bioinformatics))(Gasteiger等人,ExPASy:the proteomics server for in-depth protein knowledge andanalysis[ExPASy：用于深入认识和分析蛋白质的蛋白质组学服务器],Nucleic Acids Res.[核酸研究]31:3784-3788(2003))。结构域或基序也可以使用常规技术，例如通过序列比对来鉴定。
用于比对序列以进行比较的方法是本领域众所周知的，这样的方法包括GAP、BESTFIT、BLAST、FASTA和TFASTA。GAP使用Needleman和Wunsch((1970)J Mol Biol[分子生物学杂志]48:443-453)的算法来寻找两个序列的全局(即跨越完整序列)比对，从而最大化匹配数并最小化空位数。BLAST算法(Altschul等人(1990)J Mol Biol[分子生物学杂志]215:403-10)计算序列同一性百分比，并对两个序列之间的相似性进行统计分析。可通过美国国家生物技术信息中心(National Centre forBiotechnology Information，NCBI)公开获得用于进行BLAST分析的软件。可以使用例如ClustalW多序列比对算法(版本1.83)，用默认的成对比对参数和百分比评分方法来容易地鉴定同源物。相似性和同一性的全局百分比也可以使用MatGAT软件包中可用的方法之一来确定(Campanella等人,BMCBioinformatics.[BMC生物信息学]2003年7月10日；4:29.MatGAT:an application thatgenerates similarity/identitymatrices using protein or DNA sequences.[MatGAT：使用蛋白质或DNA序列生成相似性/同一性矩阵的应用])。可以进行少量的手动编辑来优化保守基序之间的比对，这对于本领域技术人员来说是显而易见的。此外，也可以使用特定的结构域代替使用全长序列来鉴定同源物。可以使用上述程序使用默认参数，在整个核酸或氨基酸序列上或在选择的结构域或一个或多个保守基序上确定序列同一性值。对于局部比对，Smith-Waterman算法特别有用(Smith TF,Waterman MS(1981)J.Mol.Biol[分子生物学杂志]147(1)；195-7)。
本发明的诸位发明人已经发现，与具有SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的野生型PPO酶的活性相比，通过取代一个或多个关键氨基酸残基，采用例如上述方法中的一种来突变编码核酸，可以显著增加苯基尿嘧啶除草剂耐受性或抗性。突变PPO的优选取代是增加植物的除草剂耐受性但基本上不影响氧化酶活性的生物活性的取代。
因此，在本发明的另一个目的中，包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的PPO酶，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物的关键氨基酸残基被任何其他氨基酸取代。
在一个实施例中，PPO酶，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物的关键氨基酸残基被如表1所示的保守氨基酸取代。
本领域技术人员将理解，位于紧邻下述氨基酸位置的氨基酸也可以被取代。因此，在另一个实施例中，SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物的变体包含突变PPO，其中距离关键氨基酸±3、±2或±1个氨基酸位置的氨基酸被任何其他氨基酸取代。
基于本领域公知的技术，可以开发高度特征性的序列模式，通过该序列模式可以进一步搜索具有期望的活性的突变PPO候选物。
本发明还涵盖通过应用合适的序列模式来搜索另外的突变PPO候选物。技术人员将理解，本发明的序列模式不受所述模式的两个相邻氨基酸残基之间的精确距离的限制。上述模式中两个相邻氨基酸之间的距离中的每一个可以例如彼此独立地变化多达±10、±5、±3、±2或±1个氨基酸位置，而基本上不影响期望的活性。
此外，通过应用定点诱变的方法，特别是饱和诱变(参见例如Schenk等人,Biospektrum[生物光谱]03/2006,第277-279页)，本发明的诸位发明人已经鉴定并生成了特定的氨基酸取代及其组合，当通过转化和表达相应的编码突变PPO的核酸将这些氨基酸取代及其组合引入植物时，赋予所述植物对苯基尿嘧啶除草剂增加的除草剂抗性或耐受性。
因此，在特别优选的实施例中，突变PPO的变体或衍生物是指包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117或637的多肽，该多肽在下表2a中描述的位置处包含单个氨基酸取代。
表2a-1：SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117或637内的单个氨基酸取代
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表2a-2：参考SEQ ID NO:1或637的另外的单个氨基酸取代
在进一步特别优选的实施例中，突变PPO的变体或衍生物是指SEQID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117或637，在下表2b中描述的位置处包含单个氨基酸取代。
应该注意的是，表2a)的突变位点1对应于表2b)的位置1；表2a)的突变位点2对应于表2b)的位置16；表2a)的突变位点3对应于表2b)的位置17；表2a)的突变位点4对应于表2b)的位置38；表2a)的突变位点5对应于表2b)的位置42。
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测试这样的突变体的功能性的测定是本领域容易获得的，并且分别在本发明的实例部分中描述。
在优选的实施例中，突变PPO是指SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116或117的多肽，其中氨基酸序列在根据表2a的突变位点1(对应于SEQ ID NO:1的Arg128)处和/或根据表2a的突变位点5(对应于SEQID NO:1的Phe420)处不同。
这些氨基酸位置处的差异的实例包括但不限于以下中的一种或多种：
突变位点1处的氨基酸不是精氨酸(或酪氨酸、或半胱氨酸；根据表2a视情况而定)；
突变位点5处的氨基酸不是苯丙氨酸(或甲硫氨酸、或酪氨酸、或亮氨酸；根据表2a视情况而定)。
在特别优选的实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1(对应于SEQ ID NO:1的Arg128)处的氨基酸是Leu、Ala、Val、Ile、Met、Tyr、Gly、Asn、Cys、Phe、Ser、Thr、Gln或His，并且突变位点5(对应于SEQ ID NO:1的Phe420)处的氨基酸是Ala、Leu、Val、Ile或Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Leu，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Leu，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Leu，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Leu，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Leu，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点1处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO是指SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116或117的多肽，其中氨基酸序列在根据表2a的突变位点4(对应于SEQ ID NO:1的Leu397)处和/或根据表2a的突变位点5(对应于SEQ ID NO:1的Phe420)处不同。
这些氨基酸位置处的差异的实例包括但不限于以下中的一种或多种：
突变位点4处的氨基酸不是亮氨酸(或丙氨酸、或丝氨酸、或苯丙氨酸，根据表2a视情况而定)；
突变位点5处的氨基酸不是苯丙氨酸(或甲硫氨酸、或酪氨酸、或亮氨酸；根据表2a视情况而定)。
在特别优选的实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4(对应于SEQ ID NO:1的Leu397)处的氨基酸是Ala、Arg、Val、Ile、Met、His、Lys、Asp、Glu、Ser、Thr、Asn、Gln、Cys、Gly、Pro、Phe、Tyr、或Trp，并且突变位点5(对应于SEQ ID NO:1的Phe420)处的氨基酸是Ala、Leu、Val、Ile、Met、His、Lys、Asp、Glu、Ser、Thr、Asn、Gln、Cys、Gly、Pro、Arg、Tyr或Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ala，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Arg，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Val，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ile，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Met，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是His，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Lys，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asp，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Glu，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Ser，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Thr，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Asn，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gln，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Cys，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Gly，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Pro，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Phe，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Tyr，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Leu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Val。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Ile。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Met。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是His。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Lys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Asp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Glu。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Ser。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Thr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Asn。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Gln。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Cys。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Gly。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Pro。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Tyr。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点4处的氨基酸是Trp，并且突变位点5处的氨基酸是Trp。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点3处的氨基酸不是Gly，优选地是Arg。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点6处的氨基酸不是Gly，优选地是Ala。
在另一个优选实施例中，突变PPO包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的序列，其变体、衍生物、直系同源物、旁系同源物或同源物，其中：
突变位点7处的氨基酸不是Leu，优选地是Phe。
将在本领域技术人员的知识范围内鉴定包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的PPO多肽的同源物、直系同源物和旁系同源物之间共有的保守区域和基序。鉴定出可能代表合适的结合基序的这样的保守区域后，可以选择对应于表2a和2b中列出的氨基酸的氨基酸被任何其他氨基酸取代，优选地被突变位点1、2、3、4或5下列出的氨基酸取代。
因此，上述PPO多肽的同源物、直系同源物和旁系同源物之间共有的优选基序是基序1：SQ[N/K/H]KRYI，其中所述基序内位置5处的Arg被Leu、Ala、Val、Ile、Met、Tyr、Gly、Asn、Cys、Phe、Ser、Thr、Gln或His取代；基序2：TLGTLFSS，其中所述基序内位置2处的Leu被Ala、Arg、Val、Ile、Met、His、Lys、Asp、Glu、Ser、Thr、Asn、Gln、Cys、Gly、Pro、Phe、Tyr或Trp取代；和/或其中所述基序内位置3处的Gly被Ala、Arg、Val、Ile、Met、His、Lys、Asp、Glu、Ser、Thr、Asn、Gln、Cys、Leu、Pro、Phe、Tyr或Trp取代；和/或其中所述基序内位置5处的Leu被Ala、Arg、Val、Ile、Met、His、Lys、Asp、Glu、Ser、Thr、Asn、Gln、Cys、Gly、Pro、Phe、Tyr或Trp取代；基序3：[F/Y]TTF[V/I]GG，其中所述基序内位置4处的Phe被Ala、Leu、Val、Ile、Met、His、Lys、Asp、Glu、Ser、Thr、Asn、Gln、Cys、Gly、Pro、Arg、Tyr或Trp取代。
这样的同源物、直系同源物和旁系同源物的另外的实例是包含SEQID NO:577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637的氨基酸序列的PPO多肽。
另外，本发明涉及通过使用如上文所定义的除草剂耐受性PPO多肽来鉴定苯基尿嘧啶除草剂的方法。
所述方法包括以下步骤：
a)生成包含编码突变PPO的核酸的转基因细胞或植物，其中表达突变PPO；
b)将苯基尿嘧啶除草剂施用于a)的转基因细胞或植物以及相同品种的对照细胞或植物；
c)施用所述苯基尿嘧啶除草剂后，测定该转基因细胞或植物以及该对照细胞或植物的生长或生存力，以及
d)选择与该转基因细胞或植物的生长相比使该对照细胞或植物生长减少的“苯基尿嘧啶除草剂”。
“对照细胞”或“类似的、野生型的植物、植物组织、植物细胞或宿主细胞”分别是指缺乏本文披露的本发明的除草剂抗性特征和/或特定多核苷酸的植物、植物组织、植物细胞或宿主细胞。因此，术语“野生型”的使用并不意指植物、植物组织、植物细胞或其他宿主细胞在其基因组中缺乏重组DNA，和/或不具有与本文披露的除草剂抗性特征不同的除草剂抗性特征。
另一个目的涉及鉴定编码对苯基尿嘧啶除草剂具有抗性或耐受性的突变PPO的核苷酸序列的方法，该方法包括：
a)生成编码突变PPO的核酸的文库，
b)通过在细胞或植物中表达所述核酸中的每一种并用苯基尿嘧啶除草剂处理所述细胞或植物来筛选所得编码突变PPO的核酸的群体，
c)将所述编码突变PPO的核酸的群体提供的苯基尿嘧啶除草剂耐受水平与编码对照PPO的核酸提供的苯基尿嘧啶除草剂耐受水平进行比较，
d)选择至少一种编码突变PPO的核酸，与编码对照PPO的核酸提供的对苯基尿嘧啶除草剂的耐受水平相比，该编码突变PPO的核酸提供了显著增加的对苯基尿嘧啶除草剂的耐受水平。
在优选的实施例中，与编码对照PPO的核酸提供的细胞或植物对苯基尿嘧啶除草剂的抗性或耐受性相比，在步骤d)中选择的编码突变PPO的核酸提供至少2倍的细胞或植物对苯基尿嘧啶的抗性或耐受性。
在进一步优选的实施例中，与编码对照PPO的核酸提供的细胞或植物对苯基尿嘧啶除草剂的抗性或耐受性相比，在步骤d)中选择的编码突变PPO的核酸提供至少2倍、至少5倍、至少10倍、至少20倍、至少50倍、至少100倍、至少500倍的细胞或植物对苯基尿嘧啶的抗性或耐受性。
抗性或耐受性可以通过生成包含步骤a)文库的核酸序列的转基因植物或宿主细胞，优选地植物细胞并将所述转基因植物与对照植物或宿主细胞，优选地植物细胞进行比较来确定。
另一个目的涉及鉴定植物或藻类的方法，该植物或藻类含有包含编码野生型PPO或对苯基尿嘧啶除草剂具有抗性或耐受性的突变PPO的核苷酸序列的核酸，该方法包括：
a)在植物细胞或绿藻培养物中鉴定导致所述细胞死亡的有效量的苯基尿嘧啶除草剂。
b)用诱变剂处理所述植物细胞或绿藻，
c)使所述诱变的细胞群体与a)中鉴定的有效量的苯基尿嘧啶除草剂接触，
d)选择在这些测试条件下存活的至少一个细胞，
e)对来自d)中选择的细胞的PPO基因进行PCR扩增和测序，并将这样的序列分别与野生型PPO基因序列进行比较。
在优选的实施例中，所述诱变剂是甲基磺酸乙酯(EMS)。
本领域技术人员众所周知许多方法可用于从多种不同的潜在来源生物(包括微生物、植物、真菌、藻类、混合培养物等)以及DNA的环境来源如土壤中获得合适的候选核酸，用于鉴定编码突变PPO的核苷酸序列。这些方法尤其包括制备cDNA或基因组DNA文库、使用适当简并的寡核苷酸引物、使用基于已知序列的探针或互补测定法(例如，酪氨酸上的生长)以及使用诱变和改组以提供重组或改组的编码突变PPO的序列。
包含编码候选物和对照PPO的序列的核酸可以在酵母、细菌宿主菌株、藻类或高等植物(如烟草或拟南芥属(Arabidopsis))中表达，并且在不同浓度的选择的苯基尿嘧啶除草剂存在下，根据转化菌株或植物的可见指示表型筛选编码PPO的序列的固有耐受性的相对水平。与这些指示表型(棕色的形成、生长抑制、除草效果等)相关的剂量应答和剂量应答的相对变化可以方便地以例如GR50(生长减少50％的浓度)或MIC(最小抑制浓度)值表示，其中值的增加对应于表达的PPO的固有耐受性的增加。例如，在基于细菌(如大肠杆菌)的转化的相对快速测定系统中，每个编码突变PPO的序列可以例如作为在可控启动子(如lacZ启动子)的表达控制下的DNA序列而表达，并例如通过使用合成DNA，适当考虑密码子使用等问题，以便获得不同PPO序列尽可能相当的表达水平。表达包含替代候选PPO序列的核酸的这样的菌株可以在任选地补充酪氨酸的培养基中的不同浓度的选择的苯基尿嘧啶除草剂上铺板，并且基于抑制棕色(褐黄病色素(ochronotic pigment))形成的程度和MIC来估计表达的PPO酶的固有耐受性的相对水平。
在另一个实施例中，将候选核酸转化到植物材料中以生成转基因植物，再生成形态学上正常的可育植物，然后测量这些可育植物对选择的苯基尿嘧啶除草剂的差异耐受性，如下文实例部分中所述。使用合适的选择标志物(如卡那霉素)、二元载体(如来自农杆菌属(Agrobacterium))的转化和植物再生(例如来自烟草叶盘)的许多合适的方法是本领域众所周知的。任选地，同样用表达对照PPO的核酸转化对照植物群体。可替代地，未转化的双子叶植物如拟南芥属或烟草可用作对照，因为这种植物在任何情况下都表达其自身的内源PPO。基于在一系列不同除草剂浓度下的植物损伤、分生组织漂白症状等，以常规方式评估上述一系列原代植物转化事件或其子代对苯基尿嘧啶除草剂的除草剂耐受性水平的平均值和分布。这些数据可以表示为例如源自剂量/应答曲线的GR50值，这些曲线在x轴上绘制有“剂量”并且在y轴上绘制有“杀伤百分比”、“除草效果”、“新生绿色植物的数量”等，其中GR50值增加对应于表达的PPO的固有耐受性水平的增加。除草剂可以适当地在出苗前或出苗后施用。
在另一个实施例中，本发明涉及由编码本文披露的除草剂耐受性PPO多肽的核酸转化的植物细胞，或已经突变(以获得表达编码根据本发明的突变PPO多肽的核酸的植物)的植物细胞，其中与植物细胞的野生型品种相比，该核酸在植物细胞中的表达导致对苯基尿嘧啶除草剂的抗性或耐受性增加。
术语“表达(expression/expressing)”或“基因表达”意指特定基因(一个或多个)或特定基因构建体的转录。术语“表达”或“基因表达”特别意指将基因(一个或多个)或基因构建体转录成结构RNA(rRNA、tRNA)或mRNA，随后将后者翻译成蛋白质或不翻译。该过程包括DNA转录和所得mRNA产物的加工。
为了获得期望的效果，即对本发明的苯基尿嘧啶除草剂衍生物除草剂具有耐受性或抗性的植物，应当理解，通过本领域技术人员已知的方法和手段“过表达”至少一种核酸。
如本文所用，术语“增加的表达”或“过表达”意指除了原始野生型表达水平之外的任何形式的表达。用于增加基因或基因产物的表达的方法在本领域中有充分记载，并且包括例如由适当的启动子驱动的过表达、转录增强子或翻译增强子的使用。可以将充当启动子或增强子元件的分离的核酸引入非异源形式的多核苷酸的适当位置(典型地上游)，以便上调编码目的多肽的核酸的表达。例如，可以通过突变、缺失和/或取代在体内改变内源启动子(参见Kmiec,US 5,565,350；Zarling等人,WO 9322443)，或者可以将分离的启动子以适当的方向和与本发明基因的距离引入植物细胞中，以控制该基因的表达。
如果期望多肽表达，则通常期望在多核苷酸编码区的3'-末端包括聚腺苷酸化区。聚腺苷酸化区可以源自天然基因、多种其他植物基因或T-DNA。要添加的3'末端序列可以源自例如胭脂碱合酶或章鱼碱合酶基因，或者可替代地源自另一种植物基因，或者不太优选地源自任何其他真核基因。
还可以将内含子序列添加到5'非翻译区(UTR)或部分编码序列的编码序列中，以增加在细胞质溶胶中积累的成熟信使的量。已经显示，在植物和动物表达构建体的转录单位中包含可剪接内含子，可在mRNA和蛋白质水平上使基因表达增加高达1000倍(Buchman和Berg(1988)Mol.Cell biol.[分子细胞生物学]8:4395-4405；Callis等人(1987)GenesDev[基因与发育]1:1183-1200)。当置于转录单位的5'末端附近时，这样的内含子增强的基因表达典型地是最大的。玉蜀黍内含子(Adh1-S内含子1、2和6、Bronze-1内含子)的用途是本领域已知的。有关一般信息，参见：The Maize Handbook[玉蜀黍手册],第116章,Freeling和Walbot,编辑,Springer[施普林格],纽约州(1994)。
本文提及的术语“引入”或“转化”涵盖将外源多核苷酸转移到宿主细胞中，而不考虑用于转移的方法。能够随后进行克隆繁殖的植物组织，无论是通过器官发生还是胚胎发生，都可以用本发明的基因构建体转化，并由其再生出整个植物。所选择的特定组织将根据可用于且最适合被转化的特定物种的克隆繁殖系统而变化。示例性的组织靶标包括叶盘(leaf disk)、花粉、胚、子叶、下胚轴、雌配子体、愈伤组织、现有分生组织(例如，顶端分生组织、腋芽和根分生组织)和诱导分生组织(例如，子叶分生组织和下胚轴分生组织)。可以将多核苷酸瞬时地或稳定地引入宿主细胞，并且可以保持非整合，例如作为质粒。可替代地，它可以整合到宿主基因组中。然后，所得转化的植物细胞可用于以本领域技术人员已知的方式再生转化植物。
将外来基因转移到植物基因组中被称为转化。植物物种的转化现在是一种相当常规的技术。有利地，可以使用几种转化方法中的任一种来将目的基因引入合适的祖先细胞(ancestor cell)中。所描述的用于从植物组织或植物细胞转化和再生植物的方法可用于瞬时或稳定转化。转化方法包括使用脂质体、电穿孔、增加游离DNA摄取的化学物质、将DNA直接注射到植物中、粒子枪轰击、使用病毒或花粉进行转化、和显微投射法(microprojection)。方法可以选自用于原生质体的钙/聚乙二醇方法(Krens,F.A.等人,(1982)Nature[自然]296,72-74；Negrutiu I等人(1987)Plant Mol Biol[植物分子生物学]8:363-373)；原生质体的电穿孔(Shillito R.D.等人(1985)Bio/Technol[生物技术]3,1099-1102)；向植物材料的显微注射(Crossway A等人,(1986)Mol.Gen Genet[分子和普通遗传学]202:179-185)；DNA或RNA包被的粒子轰击(Klein TM等人,(1987)Nature[自然]327:70)(非整合)病毒感染等。转基因植物(包括转基因作物植物)优选地经由农杆菌属介导的转化产生。有利的转化方法是植物原位转化。为此，可以例如使农杆菌属作用于植物种子或用农杆菌属接种植物分生组织。已证明根据本发明特别有利的是使转化的农杆菌属悬浮液作用于完整植物或至少作用于花原基。随后使植物生长，直至获得经处理的植物的种子(Clough和Bent,Plant J.[植物杂志](1998)16,735–743)。用于农杆菌属介导稻转化方法包括用于稻转化的众所周知的方法，如在以下任一项中描述的方法：欧洲专利申请EP1198985 A1，Aldemita和Hodges(Planta[植物学]199:612-617,1996)；Chan等人(PlantMol Biol[植物分子生物学]22(3):491-506,1993)、Hiei等人(Plant J[植物杂志]6(2):271-282,1994)，其披露内容如同完全阐述的那样通过引用并入本文。在玉米转化的情况下，优选的方法描述于Ishida等人(Nat.Biotechnol[自然生物技术]14(6):745-50,1996)或Frame等人(PlantPhysiol[植物生理学]129(1):13-22,2002)，其披露内容如同完全阐述的那样通过引用并入本文。所述方法以实例形式进一步描述于B.Jenes等人,Techniquesfor Gene Transfer[基因转移技术],于：Transgenic Plants[转基因植物],第1卷,Engineering and Utilization[工程与利用],编辑S.D.Kung和R.Wu,Academic Press[学术出版社](1993)128-143，以及于Potrykus Rev.Plant Physiol.Plant Molec.Biol.[植物生理学和植物分子生物学年评]42(1991)205-225。优选地将待表达的核酸或构建体克隆到适于转化根癌农杆菌(Agrobacterium tumefacien)的载体中，例如pBin19(Bevan等人,Nucl.Acids Res.[核酸研究]12(1984)8711)。然后，以已知的方式使用通过这样的载体转化的农杆菌属来转化植物，如用作模型的植物，像拟南芥属植物(拟南芥在本发明的范围内，不被认为是作物植物)，或作物植物，如烟草植物，例如通过将擦伤的叶子或切碎的叶子浸入农杆菌属溶液中，然后将它们培养在合适的培养基中。例如，通过根癌农杆菌转化植物由例如和Willmitzer，于Nucl.Acid Res.[核酸研究](1988)16,9877中描述，或尤其从以下可知：F.F.White,Vectorsfor Gene Transfer in Higher Plants[用于高等植物基因转移的载体]；于Transgenic Plants[转基因植物],第1卷,Engineering andUtilization[工程与利用],编辑S.D.Kung和R.Wu,Academic Press[学术出版社],1993,第15-38页。
除了转化体细胞(其然后不得不再生为完整植物)外，还可以转化植物分生组织的细胞，特别是发育成配子的那些细胞。在这种情况下，转化的配子遵循自然的植物发育，产生转基因植物。因此，例如，用农杆菌属处理拟南芥属的种子，并从发育中的植物获得种子，其中一定比例的植物被转化并因此是转基因的[Feldman,KA和Marks MD(1987).Mol GenGenet[分子遗传学与基因组学]208:274-289；Feldmann K(1992).于：C Koncz,N-H Chua和J Shell,编辑,Methods in ArabidopsisResearch.[拟南芥属研究方法]Word Scientific[世界科学],新加坡,第274-289页]。替代方法是基于反复去除花序并将莲座中心的切除部位与转化的农杆菌属一起孵育，由此同样可以在稍后的时间点获得转化的种子(Chang(1994).Plant J.[植物杂志]5:551-558；Katavic(1994).Mol GenGenet[分子遗传学与基因组学],245:363-370)。然而，特别有效的方法是真空渗透法及其改进，如“浸花(loraldip)”法。在拟南芥属真空渗透的情况下，用农杆菌属悬浮液处理减压下的完整植物[Bechthold,N(1993).C R Acad Sci Paris Life Sci[巴黎生命科学科学院院刊],316:1194-1199]，而在“浸花”法的情况下，发育中的花组织与表面活性剂处理的农杆菌属悬浮液一起短暂孵育[Clough,SJ和Bent AF(1998)ThePlant J.[植物杂志]16,735-743]。在这两种情况下都收获了一定比例的转基因种子，并且通过在上述选择条件下生长，这些种子可以与非转基因种子区分开来。另外，质体的稳定转化是有利的，因为质体在大多数作物中是母性遗传的，从而减少或消除了转基因通过花粉流失的风险。叶绿体基因组的转化通常通过Klaus等人,2004[Nature Biotechnology[自然生物技术]22(2),225-229]中示意性展示的方法来实现。简而言之，将待转化的序列与选择性标志物基因一起克隆到与叶绿体基因组同源的侧接序列之间。这些同源侧接序列指导位点特异性整合到质体基因组中。已经描述了许多不同植物物种的质体转化，并且在以下中给出了概述：Bock(2001)Transgenicplastids in basic research and plant biotechnology.[基础研究和植物生物技术中的转基因质体]J Mol Biol.[分子生物学杂志]2001年9月21日；312(3):425-38或Maliga,P(2003)Progress towardscommercialization of plastid transformation technology.[质体转化技术商业化的进展]Trends Biotechnol.[生物科技趋势]21,20-28。最近以无标志物的质体转化体的形式报道了进一步的生物技术进展，其可以通过瞬时共整合的标志物基因产生(Klaus等人,2004,Nature Biotechnology[自然生物技术]22(2),225-229)。经基因修饰的植物细胞可以经由技术人员熟悉的所有方法再生。合适的方法可以在上述出版物中找到：S.D.Kung和R.Wu、Potrykus或和Willmitzer。
通常在转化后，根据一个或多个标志物的存在来选择植物细胞或细胞群，该一个或多个标志物由与目的基因共转移的植物可表达基因编码，随后将转化的材料再生成整个植物。为了选择转化植物，通常将在转化中获得的植物材料经受选择性条件，以便可以将转化植物与未转化植物区分开来。例如，可以种植以上述方式获得的种子，并且在初始生长期之后，通过喷洒进行合适的选择。另一种可能性在于，如果合适的话，在灭菌后，在使用合适的选择剂的琼脂板上生长种子，使得只有转化的种子才能生长成植物。可替代地，针对选择性标志物(例如上文所述的选择性标志物)的存在筛选转化植物。
DNA转移和再生后，还可以例如使用Southern分析来评估推定的转化植物中是否存在目的基因、拷贝数和/或基因组组织。可替代地或另外地，可以使用Northern和/或Western分析来监测新引入的DNA的表达水平，这两种技术都是本领域普通技术人员众所周知的。
生成的转化植物可以通过多种方式繁殖，如通过克隆繁殖或经典育种技术。例如，第一代(或T1)转化植物可以是自交的，并选择纯合的第二代(或T2)转化体，然后可以通过经典育种技术进一步繁殖T2植物。生成的转化生物可以呈多种形式。例如，它们可以是转化细胞和非转化细胞的嵌合体；克隆转化体(例如，转化为含有表达盒的所有细胞)；转化和未转化组织的嫁接体(例如，在植物中，转化的砧木嫁接到未转化的接穗上)。
优选地，野生型或突变PPO核酸包含选自由以下组成的组的多核苷酸序列：a)编码如SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637中所示的多肽或其变体或衍生物的多核苷酸；b)包含a)中任一个的至少60个连续核苷酸的多核苷酸；以及c)与a)至b)中任一个的多核苷酸互补的多核苷酸。
优选地，与植物的野生型品种相比，核酸在植物中的表达导致植物对苯基尿嘧啶除草剂的抗性增加。
在另一个实施例中，本发明涉及包含根据本发明的植物细胞的植物，优选地转基因植物，其中与植物的野生型品种相比，核酸在该植物中的表达导致该植物对苯基尿嘧啶除草剂的抗性增加。
本文描述的植物可以是转基因作物植物或非转基因植物。
出于本发明的目的，“转基因的”、“转基因”或“重组”意指对于例如核酸序列、包含核酸序列的表达盒、基因构建体或载体或用根据本发明的核酸序列、表达盒或载体转化的生物而言，所有那些构建体都通过重组方法获得的，其中
(a)编码可用于本发明方法的蛋白质的核酸序列，或
(b)与根据本发明的核酸序列可操作地连接的一个或多个遗传控制序列，例如启动子，或
(c)a)和b)
不位于其天然遗传环境中或已通过重组方法修饰，该修饰可能采用例如一或多个核苷酸残基的取代、添加、缺失、倒位或插入的形式，以允许表达本发明的突变PPO。天然遗传环境被理解为意指原始植物中的天然基因组或染色体基因座或存在于基因组文库中。在基因组文库的情况下，优选地至少部分保留核酸序列的天然遗传环境。该环境至少在一侧侧接于核酸序列并且具有至少50bp、优选地至少500bp、特别优选地至少1000bp、最优选地至少5000bp的序列长度。当天然存在的表达盒–例如核酸序列的天然启动子与编码可用于本发明方法的多肽的相应核酸序列的天然存在的组合，如上所定义的–通过非天然、合成(“人工”)方法例如诱变处理修饰时，该表达盒成为转基因表达盒。合适的方法描述于例如US 5,565,350或WO 00/15815中。
因此，用于本发明目的的转基因植物被理解为意指，如上所述，本发明的核酸不在所述植物基因组中的它们的天然基因座处，这些核酸可以同源或异源表达。然而，如上所述，转基因还意指，虽然根据本发明或在本发明方法中使用的核酸处于它们在植物基因组中的天然位置，但序列已经相对于天然序列被修饰，和/或天然序列的调控序列已经被修饰。转基因优选地理解为意指根据本发明的核酸在基因组中的非天然基因座处的表达，即发生核酸的同源或优选地异源表达。本文提及了优选的转基因植物。此外，术语“转基因”是指含有至少一种重组多核苷酸的全部或部分的任何植物、植物细胞、愈伤组织、植物组织或植物部分。在许多情况下，全部或部分重组多核苷酸被稳定地整合到染色体或稳定的染色体外元件中，从而将其传递给连续的后代。出于本发明的目的，术语“重组多核苷酸”是指已经通过基因工程改变、重排或修饰的多核苷酸。实例包括连接或接合至异源序列的的任何一种或多种克隆的多核苷酸。术语“重组”不是指由天然发生的事件(如自发突变)引起的多核苷酸的改变或非自发诱变随后选择性育种引起的多核苷酸的改变。
含有由于非自发诱变和选择性育种而产生的突变的植物在本文中称为非转基因植物，并且包括在本发明中。在其中植物是转基因的并且包含多个突变PPO核酸的实施例中，核酸可以源自不同的基因组或源自相同的基因组。可替代地，在其中植物是非转基因的并且包含多个突变PPO核酸的实施例中，核酸位于不同的基因组或相同的基因组上。
如本文所用，“诱变的”是指与相应野生型生物或DNA的遗传物质的序列相比，其天然遗传物质的生物分子序列中具有一个或多个改变的生物或其DNA，其中该遗传物质中的一个或多个改变是由人类行为诱导和/或选择的。诱导突变的方法可以诱导遗传物质中随机位置的突变，或者可以诱导遗传物质中特定位置的突变(即，可以是定向诱变技术)，如通过使用基因成形术(genoplasty)技术。
在某些实施例中，本发明涉及通过突变育种产生的抗除草剂植物。这样的植物包含编码突变PPO的多核苷酸，并且对一种或多种苯基尿嘧啶除草剂耐受。这样的方法可以涉及，例如，将植物或种子暴露于诱变剂，特别是化学诱变剂例如甲基磺酸乙酯(EMS)，并选择对至少一种或多种苯基尿嘧啶除草剂具有增强耐受性的植物。
然而，本发明不限于通过涉及化学诱变剂EMS的诱变方法产生的除草剂耐受性植物。本领域已知的任何诱变方法都可用于产生本发明的除草剂抗性植物。这样的诱变方法可以涉及例如使用以下诱变剂中的任何一种或多种：辐射，如X射线、γ射线(例如钴60或铯137)、中子(例如原子反应堆中铀235的核裂变产物)、β辐射(例如磷32或碳14等放射性同位素发射的辐射)、和紫外线辐射(优选地2500至2900nm)，以及化学诱变剂，如碱基类似物(例如5-溴-尿嘧啶)、相关化合物(例如8-乙氧基咖啡因)、抗生素(例如链黑霉素)、烷基化剂(例如硫芥、氮芥、环氧化物、乙烯胺、硫酸盐、磺酸盐、砜、内酯)、叠氮化物、羟胺、亚硝酸或吖啶。还可以通过使用组织培养方法选择包含除草剂抗性突变的植物细胞，然后由其再生成除草剂抗性植物来产生除草剂抗性植物。参见例如，美国专利号5,773,702和5,859,348，这两个专利均通过引用以其全文并入本文。突变育种的进一步细节可以在“PrincipalsofCultivar Development[栽培品种发展的原则]”Fehr,1993麦克米兰出版公司(Macmillan Publishing Company)中找到，其披露内容通过引用并入本文
可替代地，还可以通过使用基因组编辑方法选择包含除草剂抗性突变的植物细胞，然后由其再生成除草剂抗性植物来产生根据本发明除草剂抗性植物。“基因组编辑”是指基因工程的类型，其中使用工程化核酸酶在生物的基因组中插入、缺失或替代DNA。本领域技术人员已知这些核酸酶在基因组中期望的位置处产生位点特异性双链断裂。诱导的双链断裂通过非同源末端连接或同源重组进行修复，从而产生靶向突变。本领域目前已知可用于本发明目的的四个工程化核酸酶家族：大范围核酸酶、锌指核酸酶(ZFN)、基于转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)和CRISPR-Cas系统。有关参考，参见例如，Esvelt,KM.和Wang,HH.(2013)“Genome-scale engineering for systems and synthetic biology[系统与合成生物学的基因组规模工程]”,Mol Syst Biol.[分子系统生物学]9(1):641；Tan,WS.等人,(2012)“Precision editing of large animal genomes[大型动物基因组的精确编辑]”,Adv Genet.[遗传学进展]80:37–97；Puchta,H.和Fauser,F.(2013)“Genetargeting in plants:25years later[植物基因靶向：25年后]”,Int.J.Dev.Biol.[发育生物学国际杂志]57:629–637；Boglioli,Elsy和Richard,Magali“Rewriting the book oflife:a new era in precisiongenome editing[重写生命之书：精确基因组编辑的新时代]”,波士顿咨询集团(Boston Consulting Group),2015年11月30日检索；Method oftheYear 2011.[2011年度方法]Nat Meth[自然方法]9(1),1-1。
因此，在另一个实施例中，本发明涉及包含根据本发明的植物细胞的非转基因植物，其中与植物的野生型品种相比，编码突变PPO的核酸在该植物中的表达导致该植物对苯基尿嘧啶除草剂的抗性增加。
除上述定义外，术语“植物”旨在涵盖处于任何成熟或发育阶段的作物植物，以及取自或衍生自任何这样的植物的任何组织或器官(植物部分)，除非上下文另有明确说明。植物部分包括但不限于茎、根、花、胚珠、雄蕊、叶子、胚、分生组织区、愈伤组织、花药培养物、配子体、孢子体、花粉、小孢子、原生质体等。
本发明的植物包含至少一种突变PPO核酸或过表达的野生型PPO核酸，并且与植物的野生型品种相比具有增加的对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性。本发明的植物可以具有来自不同基因组的多种野生型或突变PPO核酸，因为这些植物可以含有多于一个基因组。例如，植物含有两个基因组，通常称为A和B基因组。由于PPO是必需的代谢酶，因此假设每个基因组具有至少一个编码PPO酶的基因(即至少一个PPO基因)。如本文所用，术语“PPO基因座”是指PPO基因在基因组上的位置，并且术语“PPO基因”和“PPO核酸”是指编码PPO酶的核酸。每个基因组上的PPO核酸的核苷酸序列与另一个基因组上的PPO核酸的核苷酸序列不同。本领域技术人员可以通过本领域技术人员已知的遗传杂交和/或测序方法或外切核酸酶消化方法来确定每种PPO核酸起源的基因组。
本发明包括包含一个、两个、三个或更多个突变PPO等位基因的植物，其中与该植物的野生型品种相比，该植物具有增加的对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性。突变PPO等位基因可以包含选自由以下组成的组的核苷酸序列：编码如SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、或637、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960中定义的多肽或其变体或衍生物、同源物、直系同源物、旁系同源物的多核苷酸，该多核苷酸包含上述多核苷酸中的任一个的至少60个连续核苷酸；和与上述多核苷酸中的任一个互补的多核苷酸。
“等位基因”或“等位基因变体”是位于相同染色体位置的给定基因的替代形式。等位基因变体涵盖单核苷酸多态性(SNP)以及小插入/缺失多态性(INDEL)。INDEL的大小通常小于100bp。SNP和INDEL形成大多数生物天然存在的多态性菌株中最大的序列变体集。
术语“品种”是指通过共有本领域技术人员可接受的足以将一个栽培品种或品种与另一个栽培品种或品种区分开来的一组共同特征或性状而定义的物种内的一组植物。任何术语都不意味着任何给定栽培品种或品种的所有植物在整个基因或分子水平上都是遗传相同，或者任何给定植物在所有基因座上都是纯合的。如果当真实育种栽培品种或品种自花授粉时，所有子代都含有该性状，则该栽培品种或品种被认为是特定性状的“真实育种”。术语“育种品系”或“品系(line)”是指通过共有本领域技术人员可接受的足以将一个育种品系或品系与另一个育种品系或品系区分开来的一组共同特征或性状而定义的栽培品种内的一组植物。任何术语都不意味着任何给定育种品系或品系的所有植物在整个基因或分子水平上都是遗传相同的，或者任何给定植物在所有基因座上都是纯合的。如果当真实育种品系或育种品系自花授粉时，所有子代都含有该性状，则该育种品系或品系被认为是具有特定性状的“真实育种”。在本发明中，性状源自植物或种子的PPO基因的突变。
在一些实施例中，采用传统植物育种，由此将苯基尿嘧啶除草剂耐受性性状引入由其产生的子代植物中。在一个实施例中，本发明提供了用于产生苯基尿嘧啶除草剂耐受性子代植物的方法，该方法包括：将亲本植物与苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物杂交，以将苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物的苯基尿嘧啶除草剂耐受性特征引入子代植物的种质中，其中相对于亲本植物，子代植物具有增加的对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性。在其他实施例中，该方法进一步包括通过传统植物育种技术，基因渗入苯基尿嘧啶除草剂耐受性特征的步骤，以获得具有苯基尿嘧啶除草剂耐受性特征的后代植物。
包含编码突变PPO多肽的多核苷酸的本发明的除草剂抗性植物还可用于通过涉及有性繁殖的常规植物育种来增加植物的除草剂抗性的方法。这些方法包括将作为本发明的除草剂抗性植物的第一植物与第二植物杂交，该第二植物可以与第一植物对相同的一种或多种除草剂具有或不具有抗性，或者可以与第一植物对不同的一种或多种除草剂具有抗性。第二植物可以是当与第一植物杂交时能够产生有活力的子代植物(即种子)的任何植物。典型地但不一定，第一植物和第二植物是相同的物种。这些方法可以任选地涉及选择包含第一植物的突变PPO多肽和第二植物的除草剂抗性特征的子代植物。当与第一植物或第二植物或两者相比时，通过本发明的该方法产生的子代植物对除草剂具有增加的抗性。当第一和第二植物对不同的除草剂具有抗性时，子代植物将具有第一和第二植物的除草剂耐受性特征的组合。本发明的方法可进一步涉及将第一次杂交的子代植物与和第一或第二植物具有相同品系或基因型的植物回交一代或多代。可替代地，第一次杂交或任何后续杂交的子代可以与第三植物杂交，该第三植物与第一或第二植物为不同的品系或基因型。本发明还提供了用本发明的至少一种多核苷酸分子、表达盒或转化载体转化的植物、植物器官、植物组织、植物细胞、种子和非人宿主细胞。这样的转化植物、植物器官、植物组织、植物细胞、种子和非人宿主细胞在分别杀死未转化植物、植物组织、植物细胞或非人宿主细胞或抑制其生长的除草剂水平下对至少一种除草剂具有增强的耐受性或抗性。优选地，本发明的转化植物、植物组织、植物细胞和种子是拟南芥和作物植物。
在其他方面，本发明的植物包括除了对苯基尿嘧啶除草剂耐受之外还通过育种、诱变或基因工程进行了进一步的遗传修饰的植物，例如由于常规育种或基因工程方法而使其对特定其他类别的除草剂的施用耐受，如AHAS抑制剂；植物生长素除草剂；漂白除草剂如羟基苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)抑制剂或八氢番茄红素去饱和酶(PDS)抑制剂；EPSPS抑制剂，如草甘膦；谷氨酰胺合成酶(GS)抑制剂如草铵膦；脂类生物合成抑制剂如乙酰CoA羧化酶(ACCase)抑制剂；或苯腈(即溴苯腈或碘苯腈)除草剂。因此，可以通过多种遗传修饰使本发明的苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物对多种类别的除草剂具有抗性，如对草甘膦和草铵膦两者具有抗性，或者对草甘膦和来自另一类的除草剂(如HPPD抑制剂、AHAS抑制剂或ACCase抑制剂)两者具有抗性。这些除草剂抗性技术例如描述于Pest Management Science[有害生物管理科学](卷,年,页):61,2005,246；61,2005,258；61,2005,277；61,2005,269；61,2005,286；64,2008,326；64,2008,332；Weed Science[杂草科学]57,2009,108；AustralianJournal of Agricultural Research[澳大利亚农业研究杂志]58,2007,708；Science[科学]316,2007,1185；以及其中引用的参考文献。例如，在一些实施例中，本发明的苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物可以耐受ACCase抑制剂，如“dims”{例如，噻草酮、烯禾啶、烯草酮或吡喃草酮)、“fops”{例如，炔草酸、禾草灵、吡氟禾草灵、吡氟氯禾灵或喹禾灵)和“dens”(如唑啉草酯)；耐受植物生长素除草剂，如麦草畏；耐受EPSPS抑制剂，如草甘膦；耐受其他PPO抑制剂；并且耐受GS抑制剂，如草铵膦。
除了这些类别的抑制剂之外，本发明的苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物还可以耐受具有其他作用模式的除草剂，例如叶绿素/类胡萝卜素色素抑制剂、细胞膜破坏剂(disrupter)、光合作用抑制剂、细胞分裂抑制剂、根抑制剂、枝条抑制剂及其组合。
这样的耐受性性状可以表达为例如：突变体或野生型PPO蛋白、突变体AHASL蛋白、突变体ACCase蛋白、突变体EPSPS蛋白或突变体谷氨酰胺合成酶蛋白；或突变体天然、近交或转基因芳氧基链烷酸酯双加氧酶(AAD或DHT)，卤代芳基腈水解酶(BXN)，2,2-二氯丙酸脱卤酶(DEH)，草甘膦-N-乙酰转移酶(GAT)，草甘膦脱羧酶(GDC)，草甘膦氧化还原酶(GOX)，谷胱甘肽-S-转移酶(GST)，膦丝菌素乙酰转移酶(PAT或bar)或具有除草剂降解活性的CYP450s蛋白。
本文的苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物还可以与其他性状叠加，包括但不限于杀有害生物性状，如Bt Cry和对鞘翅目(coleopteran)、鳞翅目(lepidopteran)、线虫或其他有害生物具有杀有害生物活性的其他蛋白质；营养或营养保健品性状，如改性油含量或油特征性状、高蛋白质或高氨基酸浓度性状以及本领域已知的其他性状类型。
此外，在其他实施例中，还覆盖苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物，这些植物通过使用重组DNA技术和/或通过育种和/或以其他方式选择这样的特征，使得能够合成一种或多种杀昆虫蛋白，这些杀昆虫蛋白尤其是已知来自细菌芽孢杆菌属，特别是苏云金芽孢杆菌的那些，如[δ]-内毒素，例如CrylA(b)、CrylA(c)、CrylF、CryIF(a2)、CryllA(b)、CrylllA、CrylllB(bl)或Cry9c；无性杀昆虫蛋白(VIP)，例如VIP1、VIP2、VIP3或VIP3A；定殖在线虫上的细菌的杀昆虫蛋白，例如发光杆菌属物种(Photorhabdusspp.)或致病杆菌属物种(Xenorhabdus spp.)；由动物产生的毒素，如蝎子毒素、蜘蛛毒素、黄蜂毒素或其他昆虫特异性神经毒素；由真菌产生的毒素，如链霉菌毒素；植物凝集素，如豌豆或大麦凝集素；凝集素；蛋白酶抑制剂，如胰蛋白酶抑制剂、丝氨酸蛋白酶抑制剂、马铃薯糖蛋白、半胱氨酸蛋白酶抑制剂或木瓜蛋白酶抑制剂；核糖体失活蛋白(RIP)，如蓖麻蛋白、玉蜀黍-RIP、相思豆毒蛋白、丝瓜籽蛋白、皂草素或异株腹泻毒蛋白；类固醇代谢酶，如3-羟基-类固醇氧化酶、蜕化类固醇-IDP-糖基-转移酶、胆固醇氧化酶、蜕皮激素抑制剂或HMG-CoA-还原酶；离子通道阻断剂，如钠或钙通道阻断剂；保幼激素酯酶；利尿激素受体(Helicokinin受体)；茋合酶，联苄合酶，壳多糖酶或葡聚糖酶。在本发明的上下文中，这些杀昆虫蛋白或毒素还应当特别理解为前毒素、杂合蛋白、截短的或其他方面改性的蛋白。杂合蛋白的特征在于蛋白质结构域的新组合(参见，例如WO 02/015701)。这样的毒素或能够合成这样的毒素的经基因修饰的植物的另外实例例如披露于EP-A 374 753、WO 93/007278、WO 95/34656、EP-A 427 529、EP-A 451 878、WO 03/18810和WO 03/52073中。用于生产这样的经基因修饰的植物的方法通常是本领域技术人员已知的并且例如描述于上述出版物中。经基因修饰的植物中包含的这些杀昆虫蛋白赋予产生这些蛋白的植物对来自所有节肢动物分类群的有害的有害生物，尤其是甲虫(鞘翅目)、双翅目昆虫(双翅目)和蛾(鳞翅目)以及线虫(线虫纲)的耐受性。
在一些实施例中，一种或多种蛋白毒素(例如杀昆虫蛋白)在苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物中的表达对于控制生物是有效的，这些生物包括例如以下纲和目的成员：鞘翅目，如美国菜豆象(菜豆象(Acanthoscelides obtectus))；叶甲(杨毛臀萤叶甲(Agelasticaalni))；叩甲(直条叩甲(Agriotes lineatus)、暗色叩甲(Agriotes obscurus)、二色叩甲(Agriotes bicolor))；扁谷盗(米扁虫(Ahasverus advena))；马铃薯鳃金龟(summerschafer，Amphimallon solstitialis)；家具窃蠹(furniture beetle，Anobiumpunctatum)；花象属物种(Anthonomus spp.)(象鼻虫(weevil))；侏儒金甲虫(Pygmymangold beetle)，甜菜隐食甲(Atomaria linearis)；红缘皮蠹(carpet beetles)(圆皮蠹属物种(Anthrenus spp.)、毛皮蠹属物种(Attagenus spp.))；豇豆象(四纹豆象(Callosobruchus maculates))；干果甲虫(fried fruit beetle)，黄斑露尾甲(Carpophilus hemipterus)；卷心菜荚象甲(白菜房原象甲(Ceutorhynchus assimilis))；冬油菜茎象甲(rape winter stem weevil，Ceutorhynchus picitarsis)；线虫，烟草金针虫(Conoderus vespertinus)和宽胸金针虫(Conoderus falli)；香蕉象甲(bananaweevil，Cosmopolitessordidus)；新西兰草地蛴螬(新西兰草金龟(Costelytrazealandica))；六月金龟(绿六月花金龟(Cotinis nitida))；向日葵茎象(sunflowerstemweevil，Cylindrocopturus adspersus)；火腿皮蠹(larder beetle，Dermesteslardarius)；玉米根虫(玉米根萤叶甲(Diabrotica virgifera)、Diabroticavirgifera virgifera和巴氏根萤叶甲(Diabrotica barberi))；墨西哥豆瓢虫(Mexican bean beetle，Epilachna varivestis)；北美家天牛(old houseborer，Hylotropes bajulus)；紫苜蓿叶象(lucerne weevil，Hypera postica)；裸蛛甲(shinyspider beetle，Gibbium psylloides)；烟草甲虫(cigarettebeetle，Lasiodermaserricorne)；科罗拉多马铃薯甲虫(马铃薯叶甲(Leptinotarsa decemlineata))；粉蠹甲虫(Lyctus beetles)，{粉蠹属物种(Lyctus spp.)，花粉甲虫(油菜露尾甲(Meligethesaeneus))；普通鳃角金龟(common cockshafer，Melolontha melolontha)；美洲蛛甲(American spider beetle，Mezium americanum)；金蜘蛛甲虫(goldenspider beetle，Niptus hololeucs)；扁谷盗，锯谷盗(Oryzaephilussurinamensis)和大眼锯谷盗(Oryzaephilus Mercator)；葡萄黑象甲(blackvine weevil，Otiorhynchus sulcatus)；芥子甲虫(辣根猿叶甲(Phaedoncochleariae))；十字花科植物条跳甲(蔬菜黄条跳甲(Phyllotretacruciferae))；黄曲条跳甲(striped flea beetle，Phyllotretastriolata)；卷心菜茎跳甲(油菜蚤跳甲(Psylliodes chrysocephala))；蛛甲属物种(Ptinus spp.)(蛛甲(spider beetle))；谷蠹(lesser grain borer，Rhizoperthadominica)；豌豆象和豆象(条纹根瘤象甲(Sitona lineatus))；米象和谷象(米象(Sitophilus oryzae)和谷象(Sitophilus granaries))；红色瓜子象(黄褐小爪象(Smicronyx fulvus))；窃蠹甲(药材甲(Stegobiumpaniceum))；大黄粉虫(黄粉虫(Tenebrio molitor))；粉甲(赤拟谷盗(Tribolium castaneum)和杂拟谷盗(Triboliumconfusum))；仓库和橱柜甲虫(warehouse and cabinet beetle){斑皮蠹属物种(Trogodermaspp.))；向日葵叶甲(sunflower beetle，Zygogramma exclamationis)；革翅目(Dermaptera)(蠼螋(earwig))，如欧洲蠼螋(普通蠼螋(Forficulaauricularia))和条纹蠼螋(striped earwig，Labidura riparia)；网翅目(Dictyoptera)，如东方蜚蠊(orientalcockroach，Blatta orientalis)；温室千足虫(greenhouse millipede，Oxidusgracilis)；甜菜潜叶蝇(beet fly，Pegomyia betae)；麦秆蝇(黑麦秆蝇(Oscinellafrit))；果蝇(实蝇属物种(Dacus spp.)、果蝇属物种(Drosophila spp.))；等翅目(Isoptera)(白蚁(termite))，包括来自以下的物种：草白蚁科(Hodotermitidae)、木白蚁科(Kalotermitidae)、澳白蚁科(Mastotermitidae)、鼻白蚁科(Rhinotermitidae)、毛白蚁科(Serritermitidae)、白蚁科(Termitidae)、原白蚁科(Termopsidae)；牧草盲蝽(tarnished plant bug，Lygus lineolaris)；蚕豆蚜(black bean aphid，Aphis fabae)；棉花蚜或甜瓜蚜(棉蚜(Aphisgossypii))；苹果绿蚜(苹果蚜(Aphis pomi))；橘刺粉虱(茶园黑刺粉虱(Aleurocanthus spiniferus))；甘薯粉虱(烟粉虱(Bemesia tabaci))；甘蓝蚜(cabbage aphid，Brevicoryne brassicae)；梨木虱(pear psylla，Cacopsyllapyricola)；黑醋栗蚜(茶藨隐瘤蚜(Cryptomyzus ribis))；葡萄根瘤蚜(grapephylloxera，Daktulosphaira vitifoliae)；柑橘木虱(citruspsylla，Diaphorinacitri)；马铃薯微叶蝉(potato leafhopper，Empoascafabae)；蚕豆微叶蝉(beanleafhopper，Empoasca Solana)；葡萄微叶蝉(vine leafhopper Empoasca vitis)；绵蚜(苹果绵蚜(Eriosomalanigerum))；欧洲果蚧(水木球蜡蚧(Eulecanium corni))；桃粉蚜(桃大尾蚜(Hyalopterus arundinis))；小褐飞虱(small brown planthopper，Laodelphaxstriatellus)；马铃薯蚜(马铃薯长管蚜(Macrosiphumeuphorbiae))；绿桃蚜(green peachaphid，Myzus persicae)；稻黑尾叶蝉(green rice leafhopper，Nephotettixcinticeps)；褐飞虱(brownplanthopper，Nilaparvata lugens)；蛇麻蚜(蛇麻疣额蚜(Phorodonhumuli))；黍缢蚜(禾谷缢管蚜(Rhopalosiphum padi))；麦长管蚜(grainaphid，Sitobion avenae)；鳞翅目(Lepidoptera)，如棉褐带卷蛾(Adoxophyes orana，summer fruit tortrix moth)；果黄卷蛾(果树梢卷蛾(fruit tree tortrix moth))；梨角折蛾(Bucculatrix pyrivorella，pearleafminer)；棉叶潜蛾(Bucculatrixthurberiella，cotton leaf perforator)；松树尺蠖(Bupalus piniarius，pine looper)；苹果蠹蛾(Carpocapsapomonella，codling moth)；二化螟(Chilo suppressalis，stripedrice borer)；云杉卷叶蛾(Choristoneura fumiferana，eastern spruce budworm)；条纹向日葵螟(带纹向日葵蛾(banded sunflower moth))；西南玉米杆草螟(Diatraeagrandiosella)(西南玉米螟)；环针单纹卷蛾(Eupoeciliaambiguella，European grapeberry moth)；棉铃虫(Helicoverpa armigera，cotton bollworm)；谷实夜蛾(Helicoverpazea)(棉铃虫)；烟芽夜蛾(Heliothis vires cens)(烟夜蛾幼虫(tobacco budworm))、向日葵斑螟(Homeosoma electellum)(向日葵蛾)；后黄卷叶蛾(Homonamagnanima，orientaltea tree tortrix moth)；斑幕潜叶蛾(Lithocolletisblancardella，spotted tentiformleafminer)；舞毒蛾(Lymantria dispar，gypsy moth)；黄褐天幕毛虫(Malacosomaneustria)(天幕毛虫)；甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae，cabbage armyworm)；蓓带夜蛾(Mamestraconfigurata，Bertha armyworm)；冬尺蠖蛾(Operophtera brumata，wintermoth)；欧洲玉米螟(Ostrinia nubilalis，European corn borer)、小眼夜蛾(Panolis flammea，松美蛾(pine beauty moth))、柑橘潜叶蛾(Phyllocnistis citrella，citrus leafminer)；大菜粉蝶(Pieris brassicae)(菜粉蝶)；薄荷灰夜蛾(Rachiplusiani)(大豆尺蠖)；甜菜夜蛾(Spodoptera exigua，beet armywonn)；海灰翅夜蛾(Spodopteralittoralis，cotton leafworm)；棉大卷叶螟(Sylepta derogata，cotton leaf roller)；粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)(甘蓝尺蠖)；直翅目(Orthoptera)，如家蟋蟀(commoncricket，Acheta domesticus)、树蝗虫(tree locust)(树蝗属物种(Anacridium spp.))、飞蝗(migratory locust，Locusta migratoria)、双带黑蝗(twostriped grasshopper，Melanoplus bivittatus)、异黑蝗(differential grasshopper，Melanoplus differentialis)、红足黑蝗(redleggedgrasshopper，Melanoplus femurrubrum)、飞蝗(血黑蝗(Melanoplussanguinipes))、北方蝼蛄(六指蝼蛄(Neocurtilla hexadectyla))、红翅蝗(red locust，Nomadacris septemfasciata)、短翅蝼蛄(shortwinged molecricket，Scapteriscus abbreviatus)、南方蝼蛄(southern mole cricket，Scapteriscusborellii)、黄褐色蝼蛄(tawny mole cricket，Scapteriscusvicinus)和沙漠蝗虫(desertlocust，Schistocerca gregaria)；综合纲(Symphyla)，如白松虫(garden symphylan，Scutigerella immaculata)；缨翅目(Thysanoptera)，如烟蓟马(tobacco thrip，Frankliniella fusca)、花蓟马(flower thrip，Frankliniella intonsa)、西方花蓟马(western flowerthrip，Frankliniella occidentalism)、棉芽蓟马(cotton bud thrip，Frankliniellaschultzei)、带状温室蓟马(banded greenhouse thrip，Hercinothripsfemoralis)、大豆蓟马(soybean thrip，Neohydatothrips variabilis)、椪柑蓟马(柑桔黄绿蓟马(Pezothrips kellyanus))、鳄梨蓟马(avocado thrip，Scirtothrips perseae)、甜瓜蓟马(棕榈蓟马(Thrips palmi))和洋葱蓟马(烟蓟马(Thrips tabaci))等，以及含前述生物中的一种或多种的组合。
在一些实施例中，一种或多种蛋白毒素(例如，杀昆虫蛋白)在苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物中的表达对于控制跳甲，即叶甲科(Chrysomelidae)跳甲族的成员，优选地针对条跳甲属物种(Phyllotretaspp.)，如十字花科植物条跳甲和/或黄曲条跳甲(Phyllotretastriolata)有效的。在其他实施例中，一种或多种蛋白毒素(例如杀昆虫蛋白)在苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物中的表达对于控制卷心菜心皮象鼻虫、蓓带夜蛾、盲蝽(Lygus bug)或菱背螟(diamondback moth)是有效的。
此外，在一个实施例中，还覆盖苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物，这些植物例如通过使用重组DNA技术和/或通过育种和/或以其他方式选择这样的性状，使得能够合成一种或多种蛋白质以增加那些植物对细菌、病毒或真菌病原体的抗性或耐受性。用于生产这样的经基因修饰的植物的方法通常是本领域技术人员已知的。
此外，在另一个实施例中，还覆盖苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物，这些植物例如通过使用重组DNA技术和/或通过育种和/或以其他方式选择这样的性状，使得能够合成一种或多种蛋白质以提高那些植物的生产力(例如油含量)，对干旱、盐度或其他生长限制性环境因素的耐受性或对有害生物以及真菌、细菌或病毒病原体的耐受性。
此外，在其他实施例中，还覆盖苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物，这些植物例如通过使用重组DNA技术和/或通过育种和/或以其他方式选择这样的性状，改变为含有修饰量的一种或多种物质或新物质，例如以改善人或动物营养，例如产生促进健康的长链ω-3脂肪酸或不饱和ω-9脂肪酸的油料作物(例如Nexera(R)油菜，加拿大陶氏益农农业科技公司(Dow Agro Sciences,Canada))。
此外，在一些实施例中，还覆盖苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物，这些植物例如通过使用重组DNA技术和/或通过育种和/或以其他方式选择这样的性状，改变为含有增加量的维生素和/或矿物质，和/或营养保健品化合物的改善特征。
在一个实施例中，相对于野生型植物，本发明的苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物包含增加量的或改善特征的选自由以下组成的组的化合物：芥子油苷(例如，萝卜硫苷(4-亚磺酰基丁基-芥子油苷)、萝卜硫素、3-吲哚基甲基-芥子油苷(芸苔葡糖硫苷)、l-甲氧基-3-吲哚基甲基-芥子油苷(新芸苔葡糖硫苷))；酚类(例如，类黄酮(例如，槲皮素、山柰酚)、羟基肉桂酰衍生物(例如，1,2,2'-三芥子酰龙胆二糖、1,2-二阿魏酰龙胆二糖、l,2'-二芥子酰-2-阿魏酰龙胆二糖、3-0-咖啡酰-奎宁酸(新绿原酸))；以及维生素和矿物质(例如维生素C、维生素E、胡萝卜素、叶酸、烟酸、核黄素、硫胺素、钙、铁、镁、钾、硒和锌)。
在另一个实施例中，相对于野生型植物，本发明的苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物包含增加量的或改善特征的选自由以下组成的组的化合物：前致甲状腺肿素(progoitrin)；异硫氰酸盐；吲哚(芥子油苷水解产物)；谷胱甘肽；类胡萝卜素，如β-胡萝卜素、番茄红素和叶黄素类胡萝卜素，如黄体素(lutein)和玉米黄质；包含类黄酮的酚类，如黄酮醇(例如槲皮素、芦丁)、黄烷/单宁(如包含香豆素、原花色素、儿茶素和花青素的原花青素)；黄酮类；植物雌激素类，如香豆雌酚(coumestan)、木脂素、白藜芦醇、异黄酮，例如染料木黄酮、黄豆苷元和黄豆黄素；二羟基苯甲酸(resorcyclic acid)内酯类；有机硫化合物；植物甾醇类；萜类，如鼠尾草酚(carnosol)、迷迭香酸、甘草甜素和皂苷；叶绿素；叶绿酸(chlorophyllin)、糖、花青素和香草。在其他实施例中，相对于野生型植物，本发明的苯基尿嘧啶除草剂耐受性植物包含增加量的或改善特征的选自由以下组成的组的化合物：长春新碱、长春花碱、紫杉烷类(例如，紫杉醇(taxol/paclitaxel)、浆果赤霉素III、10-去乙酰浆果赤霉素III、10-去乙酰紫杉醇、木糖基紫杉醇、7-表紫杉醇、7-表浆果赤霉素III、10-脱乙酰基三尖杉宁碱、7-表三尖杉宁碱、泰素帝、三尖杉宁碱，木糖基三尖杉宁碱、紫杉吉芬、8-苯甲酰氧基紫杉吉芬、9-乙酰基氧基紫杉素、9-羟基紫杉素、taiwanxam、紫杉烷Ia、紫杉烷Ib、紫杉烷Ic、紫杉烷Id、GMP紫杉醇、9-二氢13-乙酰浆果赤霉素III、10-脱乙酰基-7-表紫杉醇、四氢大麻酚(THC)、大麻二酚(CBD)、染料木黄酮、大豆黄素(diadzein)、可待因、吗啡、奎宁、紫草素、四氢蛇根碱(ajmalacine)、蛇纹石(serpentine)等。
应当理解，除了突变PPO核酸之外，本发明的植物还可以包含野生型PPO核酸。预期苯基尿嘧啶除草剂耐受性品系可能仅在多种PPO同工酶中的一种中含有突变。因此，本发明包括除一种或多种野生型PPO核酸之外还包含一种或多种突变PPO核酸的植物。
在另一个实施例中，本发明涉及由包含本发明的植物细胞的转基因植物产生的种子，其中与种子的野生型品种相比，该种子是对苯基尿嘧啶除草剂抗性增加的真实育种。
在另一个实施例中，本发明涉及产生与植物细胞的野生型品种相比对苯基尿嘧啶除草剂的抗性增加的转基因植物细胞的方法，该方法包括用包含突变PPO核酸的表达盒转化该植物细胞。
在另一个实施例中，本发明涉及产生转基因植物的方法，该方法包括：(a)用包含突变PPO核酸的表达盒转化植物细胞，以及(b)从植物细胞生成对苯基尿嘧啶除草剂具有增加的抗性的植物。
因此，本发明的突变PPO核酸被提供在表达盒中，用于在目的植物中表达。该盒将包括与本发明的突变PPO核酸序列可操作地连接的调控序列。如本文使用，术语“调节元件”是指能够调节可操作地连接的多核苷酸的转录的多核苷酸。它包括但不限于启动子、增强子、内含子、5’UTR和3’UTR。“可操作地连接”是指启动子和第二序列之间的功能连接，其中启动子序列启动并介导与第二序列相对应的DNA序列的转录。通常，可操作地连接意指连接的核酸序列是毗邻的，且在需要连接两个蛋白编码区时这些连接的核酸序列是毗邻的并处在同一阅读框中。另外地，盒可以含有至少一个待共转化至生物中的另外的基因。可替代地，一个或多个另外的基因可以设置于多表达盒上。
在优选的实施例中，表达盒包含SEQ ID NO:240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262或264的序列。
这样的表达盒设有多个限制位点，用于在调控区的转录调控作用下插入突变PPO核酸序列。表达盒可以另外地含有选择性标志物基因。
本发明的表达盒将以5'-3'方向转录方向包括在植物中具有功能的转录和翻译起始区(即，启动子)，本发明的编码突变PPO的核酸序列、以及转录和翻译终止区(即终止区)。对于植物宿主和/或本发明的突变PPO核酸序列而言，启动子可以是天然的或类似的、或外来的或异源的。另外地，启动子可以是天然的序列或者可替代地合成的序列。当启动子对于植物宿主而言是“外来”或“异源”的时，它是指启动子在被引入该启动子的天然植物中未发现。当启动子对于本发明的突变PPO核酸序列而言是“外来的”或“异源的”时，它是指启动子对于本发明的可操作地连接的突变PPO核酸序列不是天然的或天然存在的启动子。如本文所用，嵌合基因包含可操作地连接到转录起始区的编码序列，该转录起始区对编码序列而言是异源的。
虽然使用异源启动子表达本发明的突变PPO核酸可能是优选的，但是也可以使用天然启动子序列。这样的构建体将改变植物或植物细胞中突变PPO蛋白的表达水平。因此，植物或植物细胞的表型被改变。
终止区可以对转录起始区而言是天然的，可以对可操作地连接的目的突变PPO序列而言是天然的，可以对植物宿主而言是天然的，或者可能从另一来源衍生而来(即，对于启动子、目的突变PPO核酸序列、植物宿主、或其任意组合而言外来的或异源的)。合适的终止区可以从根癌农杆菌的Ti-质粒得到，例如章鱼碱合酶和胭脂碱合酶终止区。还参见Guerineau等人(1991)MoI.Gen.Genet.[分子遗传学与基因组学]262:141-144；Proudfoot(1991)Cell[细胞]64:671-674；Sanfacon等人(1991)Genes Dev.[基因与发育]5:141-149；Mogen等人(1990)Plant Cell[植物细胞]2:1261-1272；Munroe等人(1990)Gene[基因]91:151-158；Ballas等人(1989)Nucleic Acids Res.[核酸研究]17:7891-7903；和Joshi等人(1987)Nucleic Acid Res.[核酸研究]15:9627-9639。在适当情况下，可优化一种或多种基因以增加在转化植物中的表达。也就是说，可以使用植物偏好的密码子来合成基因以改善表达。参见例如，Campbell和Gowri(1990)Plant Physiol.[植物生理学]92:1-11来讨论宿主优选的密码子使用。用于合成植物优选基因的方法是本技术领域已知的。参见例如，美国专利号5,380,831和5,436,391，以及Murray等人(1989)Nucleic AcidsRes.[核酸研究]17:477-498，通过引用并入本文。
已知另外的序列修饰可以增强细胞宿主中的基因表达。这些包括消除以下序列：编码假聚腺苷酸化信号的序列、编码外显子-内含子剪接位点信号的序列、编码转座子样重复序列的序列、以及得到充分表征的可能不利于基因表达的其他这样的序列。序列的G-C含量可以调节到给定细胞宿主的平均水平，如通过参考宿主细胞中表达的已知基因计算的。如果可能，对序列进行修饰以避免预测的发夹二级mRNA结构。用于增强基因表达的核苷酸序列也可用于植物表达载体中。这些包括玉蜀黍Adhl、intronl基因的内含子(Callis等人，Genes and Development[基因与发育]1:1183-1200,1987)和来自烟草花叶病毒(TMV)、玉蜀黍褪绿斑驳病毒和苜蓿花叶病毒的前导序列(W-序列)(Gallie等人NucleicAcid Res.[核酸研究]15:8693-8711,1987和Skuzeski等人Plant MoI.Biol.[植物分子生物学]15:65-79,1990)。来自玉蜀黍shrunken-1基因座的第一个内含子已被证明增加嵌合基因构建体中基因的表达。美国专利号5,424,412和5,593,874披露了特定内含子在基因表达构建体中的用途，并且Gallie等人(Plant Physiol.[植物生理学]106:929-939,1994)也表明内含子可用于在组织特异性基础上调节基因表达。为了进一步增强或优化突变PPO基因表达，本发明的植物表达载体也可以包含含有基质附着区(MAR)的DNA序列。然后，用这样的修饰的表达系统转化的植物细胞可以表现出本发明的核苷酸序列的过表达或组成型表达。
本发明的表达盒可在表达盒构建体中另外地含有5'前导序列。这样的前导序列可以起到增强翻译的作用。翻译前导序列在本领域是已知的，并且包括：小核糖核酸病毒前导序列，例如，EMCV前导序列(脑心肌炎病毒5'非编码区)(Elroy-Stein等人(1989)Proc.Natl.Acad.ScL USA[美国国家科学院院刊]86:6126-6130)；马铃薯Y病毒属前导序列，例如TEV前导序列(烟草蚀纹病毒(Tobacco Etch Virus))(Gallie等人(1995)Gene[基因]165(2):233-238)、MDMV前导序列(玉蜀黍矮花叶病毒(Maize Dwarf Mosaic Virus))(Virology[病毒学]154:9-20)和人免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP)(Macejak等人(1991)Nature[自然]353:90-94)；来自苜蓿花叶病毒外壳蛋白mRNA的非翻译前导序列(AMV RNA4)(Jobling等人(1987)Nature[自然]325:622-625)；烟草花叶病毒前导序列(TMV)(Gallie等人(1989)于Molecular Biologyof RNA[RNA分子生物学],编辑Cech(Liss公司,纽约州),第237-256页)；以及玉蜀黍褪绿斑驳病毒前导序列(MCMV)(Lommel等人(1991)Virology[病毒学]81:382-385)。还参见Della-Cioppa等人(1987)PlantPhysiol.[植物生理学]84:965-968。也可以利用已知的增强翻译的其他方法，例如内含子等。
在制备表达盒时，可以操作各种DNA片段，以提供处于正确方向的DNA序列，并且适当时，提供处于正确阅读框的DNA序列。为此，可以采用衔接子或接头来连接DNA片段，或者可以涉及其他操作来提供方便的限制性位点、去除多余的DNA、去除限制性位点等。为此目的，可能涉及体外诱变、引物修复、限制、退火、再取代，例如转换和颠换。
许多启动子可以应用在本发明的实践中。可以基于期望的结果来选择启动子。核酸可以与组成型启动子、组织优选启动子或其它启动子组合，以在植物中表达。这样的组成型启动子包括例如Rsyn7启动子的核心启动子和WO 99/43838和美国专利号6,072,050中披露的其他组成型启动子；核心CaMV 35S启动子(Odell等人(1985)Nature[自然]313:810-812)；稻肌动蛋白(McElroy等人(1990)Plant Cell[植物细胞]2:163-171)；泛素(Christensen等人(1989)Plant MoI.Biol.[植物分子生物学]12:619-632和Christensen等人(1992)Plant MoI.Biol.[植物分子生物学]18:675-689)；pEMU(Last等人(1991)Theor.Appl.Genet.[理论与应用遗传学]81:581-588)；MAS(Velten等人(1984)EMBO J.[欧洲分子生物学学会杂志]3:2723-2730)；ALS启动子(美国专利号5,659,026)等。其他组成型启动子包括例如美国专利号5,608,149、5,608,144、5,604,121、5,569,597、5,466,785、5,399,680、5,268,463、5,608,142、和6,177,611。
组织偏好性启动子可以用于靶向特定植物组织内的增强的突变PPO表达。这样的组织偏好性启动子包括但不限于叶子偏好性启动子、根偏好性启动子、种子偏好性启动子和茎偏好性启动子。组织偏好性启动子包括Yamamoto等人(1997)Plant J.[植物杂志]12(2):255-265；Kawamata等人(1997)Plant Cell Physiol.[植物细胞生理学]38(7):792-803；Hansen等人(1997)MoI.Gen Genet.[分子遗传学与基因组学]254(3):337-343；Russell等人(1997)Transgenic Res.[转基因研究]6(2):157-168；Rinehart等人(1996)Plant Physiol.[植物生理学]112(3):1331-1341；Van Camp等人(1996)Plant Physiol.[植物生理学]112(2):525-535；Canevascini等人(1996)Plant Physiol.[植物生理学]112(2):513-524；Yamamoto等人(1994)Plant Cell Physiol.[植物细胞生理学]35(5):773-778；Lam(1994)ResultsProbl.Cell Differ.[细胞分化中的结果和问题]20:181-196；Orozco等人(1993)Plant MoI Biol.[植物分子生物学]23(6):1129-1138；Matsuoka e/[alpha]/.(1993)Proc Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]90(20):9586-9590；和Guevara-Garcia等人(1993)Plant J.[植物杂志]4(3):495-505。如果需要，这样的启动子可以被修饰用于弱表达。在一个实施例中，将目的核酸靶向叶绿体进行表达。以这种方式，当目的核酸没有直接插入叶绿体中时，表达盒将另外地含有叶绿体靶向序列，该序列包含编码叶绿体转运肽的核苷酸序列，以将目的基因产物导向叶绿体。这样的转运肽是本领域已知的。对于叶绿体靶向序列，“可操作地连接”意指编码转运肽的核酸序列(即叶绿体靶向序列)与本发明的突变PPO核酸连接，使得这两个序列是连续的并且在相同的阅读框中。参见例如,Von Heijne等人(1991)Plant MoI.Biol.Rep.[植物分子生物学报道]9:104-126；Clark等人(1989)J.Biol.Chem.[生物化学杂志]264:17544-17550；Della-Cioppa等人(1987)Plant Physiol.[植物生理学]84:965-968；Romer等人(1993)Biochem.Biophys.Res.Commun.[生物化学和生物物理学研究通讯]196:1414-1421；和Shah等人(1986)Science[科学]233:478-481。虽然本发明的突变PPO蛋白包括天然叶绿体转运肽，但通过将叶绿体靶向序列可操作地连接到编码本发明成熟突变PPO蛋白的核苷酸序列的5’-末端，本领域已知的任何叶绿体转运肽都可以与本发明成熟突变PPO蛋白的氨基酸序列融合。叶绿体靶向序列是本领域已知的，并且包括核酮糖-l,5-二磷酸羧化酶(Rubisco)的叶绿体小亚基(de Castro Silva Filho等人(1996)Plant MoI.Biol.[植物分子生物学]30:769-780；Schnell等人(1991)J.Biol.Chem.[生物化学杂志]266(5):3335-3342)；5-(烯醇丙酮酰)莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)(Archer等人(1990)J.Bioenerg.Biomemb.[生物能学与生物膜杂志]22(6):789-810)；色氨酸合酶(Zhao等人(1995)J.Biol.Chem.[生物化学杂志]270(11):6081-6087)；质体蓝素(Lawrence等人(1997)J.Biol.Chem.[生物化学杂志]272(33):20357-20363)；分支酸合酶(Schmidt等人(1993)J.Biol.Chem.[生物化学杂志]268(36):27447-27457)；和集光叶绿素a/b结合蛋白(LHBP)(Lamppa等人(1988)J.Biol.Chem.[生物化学杂志]263:14996-14999)。还参见Von Heijne等人(1991)PlantMoI.Biol.Rep.[植物分子生物学报道]9:104-126；Clark等人(1989)J.Biol.Chem.[生物化学杂志]264:17544-17550；Della-Cioppa等人(1987)Plant Physiol.[植物生理学]84:965-968；Romer等人(1993)Biochem.Biophys.Res.Commun.[生物化学和生物物理学研究通讯]196:1414-1421；和Shah等人(1986)Science[科学]233:478-481。
在优选的实施例中，转运肽包含SEQ ID NO:129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226的氨基酸序列。
优选的表达盒包含与PPO或PPO样多肽融合的来自苋属PPO-2的转运肽，如具有SEQID NO:240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262或264的嵌合表达盒。
转化叶绿体的方法是本领域已知的。参见例如，Svab等人(1990)Proc.Natl.Acad.ScL USA[美国国家科学院院刊]87:8526-8530；Svab和Maliga(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]90:913-917；Svab和Maliga(1993)EMBOJ.[欧洲分子生物学学会杂志]12:601-606。该方法依赖于粒子枪递送含有选择性标志物的DNA，以及通过同源重组将DNA靶向到质体基因组中。另外地，可以通过核编码的、质体导向的RNA聚合酶的组织偏爱型表达反式激活沉默质体携带的转基因来完成质体转化。这样的系统已经被报道于McBride等人(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]91:7301-7305中。可以针对在叶绿体中的表达来优化待靶向叶绿体的目的核酸，以解决植物核与该细胞器之间密码子使用的差异。以此方式，可以使用叶绿体偏好的密码子合成目的核酸。参见例如，美国专利号5,380,831，其通过引用并入本文。
在优选的实施例中，突变PPO核酸包含选自由以下组成的组的多核苷酸序列：a)编码如SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627、637、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960中所示的多肽或其变体或衍生物的多核苷酸；b)包含a)中任一个的至少60个连续核苷酸的多核苷酸；以及c)与a)至b)中任一个的多核苷酸互补的多核苷酸。
优选地，本发明的表达盒进一步包含在植物中具有功能的转录起始调控区和翻译起始调控区。
虽然本发明的多核苷酸可用作选择性标志物基因用于植物转化，但本发明的表达盒可以包括用于选择转化细胞的另一种选择性标志物基因。选择性标志物基因(包括本发明的那些)用于选择转化的细胞或组织。标志物基因包括但不限于编码抗生素抗性的基因，如编码新霉素磷酸转移酶II(NEO)和潮霉素磷酸转移酶(HPT)的那些基因，以及赋予对除草化合物(如草铵膦铵、溴苯腈、咪唑啉酮类和2,4-二氯苯氧基乙酸酯(2,4-D))的抗性的基因。通常参见Yarranton(1992)Curr.Opin.Biotech.[生物技术的当前观点]3:506-511；Christophers等人(1992)Proc.Natl.Acad.ScL USA[美国国家科学院院刊]89:6314-6318；Yao等人(1992)Cell[细胞]71:63-72；Reznikoff(1992)MoI Microbiol[分子微生物学]6:2419-2422；Barkley等人(1980)于The Operon[操纵子],第177-220页；Hu等人(1987)Cell[细胞]48:555-566；Brown等人(1987)Cell[细胞]49:603-612；Figge等人(1988)Cell[细胞]52:713-722；Deuschle等人(1989)Proc.Natl Acad.AcL USA[美国国家科学院院刊]86:5400-5404；Fuerst等人(1989)Proc.Natl Acad.ScL USA[美国国家科学院院刊]86:2549-2553；Deuschle等人(1990)Science[科学]248:480-483；Gossen(1993)Ph.D.Thesis[博士学位论文],University ofHeidelberg[海德堡大学]；Reines等人(1993)Proc.NatlAcad.ScL USA[美国国家科学院院刊]90:1917-1921；Labow等人(1990)MoI Cell Biol[分子细胞生物学]10:3343-3356；Zambretti等人(1992)Proc.Natl Acad.ScL USA[美国国家科学院院刊]89:3952-3956；Bairn等人(1991)Proc.Natl Acad.ScL USA[美国国家科学院院刊]88:5072-5076；Wyborski等人(1991)Nucleic Acids Res.[核酸研究]19:4647-4653；Hillenand-Wissman(1989)Topics MoI Struc.Biol[热点分子结构生物学]10:143-162；Degenkolb等人(1991)Antimicrob.Agents Chemother.[抗微生物剂与化学疗法]35:1591-1595；Kleinschnidt等人(1988)Biochemistry[生物化学]27:1094-1104；Bonin(1993)Ph.D.Thesis[博士学位论文],University ofHeidelberg[海德堡大学]；Gossen等人(1992)Proc.Natl Acad.ScL USA[美国国家科学院院刊]89:5547-5551；Oliva等人(1992)Antimicrob.Agents Chemother.[抗微生物剂与化学疗法]36:913-919；Hlavka等人(1985)Handbook of Experimental Pharmacology[实验药理学手册],第78卷(施普林格(Springer-Verlag),柏林)；Gill等人(1988)Nature[自然]334:721-724。将这样的披露内容通过引用并入本文。选择性标志物基因的以上列表并非意在具有限制性。本发明中可以使用任何选择性标志物基因。
本发明进一步提供了分离的重组表达载体，该重组表达载体包含含有如上所述的突变PPO核酸的表达盒，其中与宿主细胞的野生型品种相比，该载体在宿主细胞中的表达导致对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性增加。如本文所用，术语“载体”是指能够转运与其连接的另一种核酸的核酸分子。一种类型的载体是“质粒”，其是指可以将另外的DNA区段连接到其中的环状双链DNA环。另一种类型的载体是病毒载体，其中可以将另外的DNA区段连接到病毒基因组中。某些载体能够在引入它们的宿主细胞中自主复制(例如，具有细菌复制起点的细菌载体和附加型哺乳动物载体)。其他载体(例如，非附加型哺乳动物载体)在引入到宿主细胞后被整合到宿主细胞的基因组中，并且从而随着宿主基因组一起复制。此外，某些载体能够指导它们可操作地连接的基因的表达。这样的载体在本文中称为“表达载体”。一般而言，在重组DNA技术中有用的表达载体通常呈质粒的形式。在本说明书中，“质粒”和“载体”可互换使用，因为质粒是最常用的载体形式。但是，本发明旨在包括这样的其他形式的表达载体，例如病毒载体(例如复制缺陷型逆转录病毒、腺病毒和腺相关病毒)，它们具有等效功能。
本发明的重组表达载体以适于在宿主细胞中表达核酸的形式包含本发明的核酸，这意味着重组表达载体包括一个或多个调控序列，这些调控序列基于待用于表达的宿主细胞来选择，可操作地连接至待表达的核酸序列。调控序列包括指导核苷酸序列在许多类型的宿主细胞中组成型表达的那些调控序列以及指导核苷酸序列仅在某些宿主细胞中或在某些条件下表达的那些调控序列。本领域技术人员应理解，表达载体的设计可以取决于例如待转化的宿主细胞的选择、所期望多肽的表达水平等因素。可以将本发明的表达载体引入宿主细胞中，由此产生由本文所述的核酸编码的多肽或肽，包括融合多肽或肽(例如，突变PPO多肽、融合多肽等)。
在本发明的优选实施例中，突变PPO多肽在植物和植物细胞如单细胞植物细胞(如藻类)(参见Falciatore等人,1999,Marine Biotechnology[海洋生物技术]1(3):239-251和其中的参考文献)和来自高等植物的植物细胞(例如种子植物(spermatophyte)，如作物植物)中表达。突变PPO多核苷酸可以通过任何方式“引入”到植物细胞中，包括转染、转化或转导、电穿孔、粒子轰击、农杆菌感染、生物射弹等。
用于转化或转染宿主细胞(包括植物细胞)的合适方法可以在以下中找到：Sambrook等人(Molecular Cloning:A Laboratory Manual.[分子克隆：实验室手册]第2版,Cold Spring Harbor Laboratory[冷泉港实验室],Cold Spring Harbor LaboratoryPress[冷泉港实验室出版社],冷泉港,纽约州,1989)和其他实验室手册，如Methods inMolecular Biology[分子生物学方法],1995,第44卷,Agrobacterium protocols[农杆菌属方案],编辑:Gartland和Davey,Humana Press[胡马纳出版社],新泽西州托托瓦市(Totowa,New Jersey)。由于增加的对苯基尿嘧啶除草剂的耐受性是希望遗传到多种植物中的一般性状，这些植物如玉蜀黍、小麦、黑麦、燕麦、黑小麦、稻、大麦、大豆、花生、棉花、油菜籽油菜和卡诺拉油菜、木薯、胡椒、向日葵和万寿菊、马铃薯、烟草、茄子和番茄等茄科植物、蚕豆属物种、豌豆、紫花苜蓿、灌木植物(咖啡、可可、茶)、柳属物种、树木(油棕、椰子)、多年生草本植物和草料作物，作为本发明的又一实施例，这些作物植物也是基因工程的优选靶植物。在优选的实施例中，植物是作物植物。草料作物包括但不限于小麦草(Wheatgrass)、金丝雀草(Canarygrass)、雀麦草(Bromegrass)、披喊草(Wildrye Grass)、早熟禾(Bluegrass)、果园草、紫花苜蓿、Salfoin、百脉根(Birdsfoot Trefoil)、杂三叶草(Alsike Clover)、红三叶草和甜三叶草。
在本发明的一个实施例中，通过农杆菌属介导的基因转移实现将突变PPO多核苷酸转染至植物中。本领域技术人员已知的一种转化方法是将开花植物浸入农杆菌属溶液中，其中农杆菌属含有突变PPO核酸，随后对经转化的配子进行育种。农杆菌属介导的植物转化可以使用以下进行：例如GV3101(pMP90)(Koncz和Schell,1986,Mol.Gen.Genet.[分子遗传学与基因组学]204:383-396)或LBA4404(克罗泰克公司(Clontech))根癌农杆菌菌株。转化可以通过标准转化和再生技术进行(Deblaere等人,1994,Nucl.Acids.Res.[核酸研究]13:4777-4788；Gelvin,Stanton B.和Schilperoort,Robert A,Plant MolecularBiology Manual[植物分子生物学手册],第2版编辑-Dordrecht:Kluwer Academic Publ.[多德雷赫特：克鲁沃学术出版社],1995.-于部分Ringbuc Zentrale Signatur:BT11-PISBN 0-7923-2731-4中；Glick,Bernard R.和Thompson,John E.,Methods in PlantMolecular Biology and Biotechnology[植物分子生物学和生物技术方法],Boca Raton:CRC Press[博卡拉顿：CRC出版社],1993360S.,ISBN 0-8493-5164-2)。例如，油菜籽油菜可以通过子叶或下胚轴转化来转化(Moloney等人,1989,Plant Cell Report[植物细胞报道]8:238-242；De Block等人,1989,Plant Physiol.[植物生理学]91:694-701)。用于农杆菌属和植物选择的抗生素的使用取决于用于转化的二元载体和农杆菌属菌株。油菜籽油菜选择通常使用卡那霉素作为可选择性植物标志物进行。可以使用例如Mlynarova等人,1994,Plant Cell Report[植物细胞报道]13:282-285描述的技术对亚麻进行农杆菌属介导的基因转移。另外地，大豆的转化可以使用例如欧洲专利号0424 047、美国专利号5,322,783、欧洲专利号0397 687、美国专利号5,376,543或美国专利号5,169,770中描述的技术进行。玉蜀黍的转化可以通过粒子轰击、聚乙二醇介导的DNA摄取或通过碳化硅纤维技术来实现。(参见例如，Freeling和Walbot“The maize handbook[玉蜀黍手册]”Springer Verlag[施普林格]:纽约州(1993)ISBN 3-540-97826-7)。玉蜀黍转化的特定实例见于美国专利号5,990,387，而小麦转化的特定实例可见于PCT申请号WO 93/07256。
根据本发明，如果将引入的突变PPO多核苷酸掺入非染色体自主复制子或整合到植物染色体中，则其可以稳定地维持在植物细胞中。可替代地，引入的突变PPO多核苷酸可以存在于染色体外非复制载体上，并且瞬时表达或瞬时有活性。在一个实施例中，可以产生其中突变PPO多核苷酸整合到染色体中的同源重组微生物，制备含有至少一部分PPO基因的载体，在该PPO基因已引入缺失、添加或取代，从而改变例如功能上破坏内源PPO基因，并产生突变PPO基因。为了通过同源重组产生点突变，DNA-RNA杂交体可用于称为嵌合修复术(chimeraplasty)的技术中(Cole-Strauss等人,1999,Nucleic Acids Research[核酸研究]27(5):1323-1330和Kmiec,1999,Gene therapy American Scientist[美国科学家基因疗法]87(3):240-247)。小麦属(Triticum)物种中的其他同源重组方法在本领域中也是众所周知的，并考虑在本文中使用。
在同源重组载体中，突变PPO基因可以在其5’和3’末端侧接PPO基因的另外的核酸分子，以允许在微生物或植物中在由载体携带的外源突变PPO基因和内源PPO基因之间发生同源重组。另外的侧接的PPO核酸分子的长度足以与内源基因成功同源重组。典型地，在载体中包括数百个碱基对至数千个碱基的侧接DNA(在5’和3’末端)(同源重组载体的描述，参见例如Thomas,K.R.,和Capecchi,M.R.,1987,Cell[细胞]51:503，或对于小立碗藓(Physcomitrella paten)中基于cDNA的重组，参见例如Strepp等人,1998,PNAS[美国国家科学院院刊],95(8):4368-4373)。然而，由于突变PPO基因通常与PPO基因在很少的氨基酸处不同，侧接序列并不总是必要的。将同源重组载体引入微生物或植物细胞中(例如，通过聚乙二醇介导的DNA)，并使用本领域已知的技术选择其中引入的突变PPO基因已与内源PPO基因同源重组的细胞。
在另一个实施例中，可以产生含有选择的系统的重组微生物，这些系统允许调节表达引入的基因。例如，将突变PPO基因包含在载体上，将其置于lac操纵子的控制下，使得突变PPO基因仅在IPTG存在的情况下表达。这样的调节系统是本领域众所周知的。
本发明的另一方面涉及本发明的重组表达载体已引入其中的宿主细胞。术语“宿主细胞”和“重组宿主细胞”在本文中可互换使用。应当理解，这样的术语不仅指特定的主题细胞，而且还适用于这样的细胞的子代或潜在子代。因为某些修饰可由于突变或环境影响而出现在后继世代中，这样的子代实际上可能不与亲本细胞完全相同，但是仍然包括在如本文使用的术语范围内。宿主细胞可以是任何原核或真核细胞。例如，突变PPO多核苷酸可以在细菌细胞如谷氨酸棒状杆菌(C.glutamicum)、昆虫细胞、真菌细胞或哺乳动物细胞(如中国仓鼠卵巢细胞(CHO)或COS细胞)、藻类、纤毛虫、植物细胞、真菌或其他微生物如谷氨酸棒状杆菌中表达。其他适合的宿主细胞是本领域技术人员已知的。
本发明的宿主细胞，如培养物中的原核或真核宿主细胞，可用于产生(即，表达)突变PPO多核苷酸。因此，本发明进一步提供了用于使用本发明的宿主细胞产生突变PPO多肽的方法。在一个实施例中，该方法包括在合适的培养基中培养本发明的宿主细胞(其中已引入编码突变PPO多肽的重组表达载体，或已将编码野生型或突变PPO多肽的基因引入其基因组)，直到产生突变PPO多肽。在另一个实施例中，该方法进一步包括从培养基或宿主细胞中分离突变PPO多肽。本发明的另一方面涉及分离的突变PPO多肽及其生物活性部分。当通过重组DNA技术生产时，“分离的”或“纯的”多肽或其生物活性部分不含一些细胞物质，或当化学合成时，不含化学前体或其他化学物质。语言“基本上不含细胞物质”包括突变PPO多肽的制剂，其中多肽与天然或重组生产该多肽的细胞的一些细胞组分分离。在一个实施例中，语言“基本上不含细胞物质”包括突变PPO多肽的制剂，其具有小于约30％(按干重计)的非突变PPO物质(在本文中也称为“污染多肽”)，更优选地小于约20％的非突变PPO物质，仍更优选地小于约10％的非突变PPO物质，并且最优选地小于约5％的非突变PPO物质。
当重组产生突变PPO多肽或其生物活性部分时，其优选地也基本上不含培养基，即培养基占小于约20％，更优选地小于约10％，并且最优选地小于约5％的多肽制剂体积。语言“基本上不含化学前体或其他化学物质”包括突变PPO多肽的制剂，其中多肽与参与多肽合成的化学前体或其他化学物质分离。在一个实施例中，语言“基本上不含化学前体或其他化学物质”包括突变PPO多肽的制剂，其具有小于约30％(按干重计)的化学前体或非突变PPO化学物质，更优选地小于约20％的化学前体或非突变PPO化学物质，仍更优选地小于约10％的化学前体或非突变PPO化学物质，并且最优选地小于约5％的化学前体或非突变PPO化学物质。在优选的实施例中，分离的多肽或其生物活性部分缺少来自衍生突变PPO多肽的同一生物的污染多肽。典型地，这样的多肽是通过例如在其他植物或微生物(如谷氨酸棒状杆菌、纤毛虫、藻类或真菌)中重组表达例如突变PPO多肽而产生的。
在其他方面，提供了用于处理本发明的植物的方法。
在一些实施例中，该方法包括使植物与农艺上可接受的组合物接触。
在另一方面，本发明提供了用于制备后代种子的方法。该方法包括种植本发明植物的种子或能够产生本发明植物的种子。在一个实施例中，该方法进一步包括从种子生长后代植物；以及从后代植物中收获后代种子。在其他实施例中，该方法进一步包括向后代植物施用苯基尿嘧啶除草剂除草组合物。
在另一个实施例中，本发明涉及根据本发明的转基因植物的可收获部分。优选地，可收获部分包含本发明的PPO核酸或PPO蛋白。可收获部分可以是包含PPO核酸或PPO蛋白的种子、根、叶子和/或花，或其部分。大豆植物的优选部分是包含PPO核酸或PPO蛋白的大豆。
在另一个实施例中，本发明涉及源自根据本发明的植物、其部分或其可收获部分的产品。优选的植物产品是饲料、种子粉(seed meal)、油或经种子处理包衣的种子(seed-treatment-coated seeds)。优选地，粉和/或油包含本发明的突变PPO核酸或PPO蛋白。
在另一个实施例中，本发明涉及用于生产产品的方法，该方法包括
a)使本发明的植物或可通过本发明的方法获得的植物生长，以及
b)从或通过本发明的植物和/或这些植物的部分(例如种子)生产所述产品。
在另外的实施例中，该方法包括以下步骤：
a)使本发明的植物生长，
b)从这些植物移走如上所定义的可收获部分，以及
c)从或通过本发明的可收获部分生产所述产品。
可以在植物生长的地点生产产品，可以从植物生长的地点移走植物和/或其部分以生产产品。典型地，使植物生长，从植物移走(如果可行的话，重复周期性地移走)期望的可收获部分，并且从植物的可收获部分制造产品。每次进行本发明的方法时，可以仅进行一次使植物生长的步骤，而允许重复多次进行产品生产步骤，例如通过重复移走本发明植物的可收获部分，以及如果必要的话，进一步加工这些部分以获得产品。也可以重复使本发明的植物生长的步骤，并且储存植物或可收获部分，直到接下来对积累的植物或植物部分进行一次产品生产。此外，使植物生长和生产产品的步骤可以在时间上重叠进行，甚至在很大程度上同时进行或顺序进行。通常，在生产产品之前，使植物生长一段时间。
在一个实施例中，通过本发明的所述方法生产的产品是植物产品，如但不限于食品(foodstuff)、饲料(feedstuff)、食品补充剂、饲料补充剂、纤维、化妆品和/或药物。食品被视为是用于营养和/或补充营养的组合物。特别地，动物饲料和动物饲料补充剂被视为食品。
在另一个实施例中，本发明的生产方法用于制造农产品，如但不限于植物提取物、蛋白质、氨基酸、碳水化合物、脂肪、油、聚合物、维生素等。
植物产品在很大程度上可能由一种或多种农产品组成。
如上所述，本发明教导了与植物或种子的野生型品种相比，用于增加作物植物或种子的PPO抑制耐受性的组合物和方法。在优选的实施例中，作物植物或种子的PPO抑制耐受性是增加的，使得该植物或种子能够承受优选地大约1-1000g ai ha-1、更优选地1-200gai ha-1、甚至更优选地5-150g ai ha-1、并且最优选地10-100g ai ha-1的苯基尿嘧啶除草剂施用。如本文所用，“承受”苯基尿嘧啶除草剂施用意指植物未被这样的施用杀死或仅被这样的施用中度损伤。本领域技术人员将理解，施用率可以变化，这取决于环境条件，如温度或湿度，并且取决于所选择的除草剂种类(活性成分ai)。
此外，本发明提供了涉及使用至少一种苯基尿嘧啶除草剂的方法，该苯基尿嘧啶除草剂任选地与如上文详细描述的一种或多种除草化合物B和任选地安全剂C组合。
在这些方法中，苯基尿嘧啶除草剂可以通过本领域已知的任何方法施用，包括但不限于种子处理、土壤处理和叶处理。在施用之前，可以将苯基尿嘧啶除草剂转化成常规配制品，例如溶液、乳液、悬浮液、粉剂、散剂、糊剂和颗粒剂。使用形式取决于特定预期目的；在每种情况下，应当确保根据本发明的化合物的精细和均匀分布。
通过提供对苯基尿嘧啶除草剂具有增加的耐受性的植物，可以采用多种配制品来保护植物免受杂草侵害，从而促进植物生长并减少对养分的竞争。苯基尿嘧啶除草剂本身可用于本文所述作物植物周围区域中出苗前、出苗后、种植前和种植时的杂草控制，或者可使用含有其他添加剂的苯基尿嘧啶除草剂配制品。苯基尿嘧啶除草剂也可用作种子处理剂。苯基尿嘧啶除草剂配制品中的添加剂包括其他除草剂、洗涤剂、辅助剂、铺展剂(spreading agent)、粘着剂、稳定剂等。苯基尿嘧啶除草剂配制品可以是湿制剂或干制剂，并且可以包括但不限于可流动粉末、可乳化浓缩物和液体浓缩物。苯基尿嘧啶除草剂和除草剂配制品可以按照常规方法施用，例如通过喷洒、灌溉、撒粉等。
合适的配制品详细描述于PCT/EP2009/063387和PCT/EP2009/063386中，其通过引用并入本文。
还应当理解，前述内容涉及本发明的优选实施例，并且在不脱离本发明范围的情况下，可以在其中进行多种改变。以下实例进一步说明了本发明，这些实例不应被解释为以任何方式对其范围构成限制。相反，应清楚理解，在不脱离本发明的精神和/或所附权利要求的范围的情况下，在阅读本文的说明书之后，可以采取可为本领域技术人员提出的各种其他实施例、修改和其等效物。
实例
以下实例中使用的根据本发明的苯基尿嘧啶的图例：
实例1：定点诱变PPO
编码除草剂耐受性PPO多肽的所有核酸编码序列以及所有单突变体和双突变体均由Geneart(Geneart公司(Geneart AG)，雷根斯堡(Regensburg)，德国)合成并克隆。合理设计的突变体由Geneart合成。随机PPO基因文库由Geneart合成。通过进行质粒小量制备从大肠杆菌TOP10中分离出质粒，并通过DNA测序进行确认。
实例2：重组野生型和突变体PPO的表达和纯化
(摘自：Franck E.Dayan,Pankaj R.Daga,Stephen O.Duke,Ryan M.Lee,PatrickJ.Tranel,Robert J.Doerksen.Biochemical and structuralconsequences of aglycine deletion in theα-8helix of protoporphyrinogenoxidase.[原卟啉原氧化酶α-8螺旋中甘氨酸缺失的生物化学和结构后果]Biochimica et Biophysica Acta[生物化学与生物物理学学报]1804(2010),1548-56)将pRSET载体中的克隆转化到大肠杆菌的BL21(DE3)-pLysS菌株中。使细胞在含有100μgmL-1羧苄青霉素的250mL LB中生长，在37℃下振荡过夜。将培养物稀释在1L含抗生素的LB中，并使其在37℃下振荡生长2h，用1mM IPTG诱导，并在25℃下再振荡生长5小时。通过在1600×g下离心收获细胞，用0.09％NaCl洗涤，并在-80℃下储存。在50mM磷酸钠(pH 7.5)、1M NaCl、5mM咪唑、5％甘油和1μg mL-1亮抑酶肽中，使用弗氏压碎器(French press)在140MPa下裂解细胞。裂解后，添加0.5U benzonase(诺瓦根公司(Novagen)，EMD化学品公司(EMD Chemicals,Inc.)，吉布斯敦，新泽西州)和PMSF(最终浓度为1mM)。通过在3000×g下离心去除细胞碎片。将His标记的PPO蛋白在镍活化Hitrap螯合HP柱(通用医疗生物科学公司(GEHealthcare Bio-Sciences Corp.)，皮斯卡塔韦，新泽西州)上纯化，将该柱用20mM磷酸钠(pH 8.0)、50mM NaCl、5mM咪唑、5mM MgCl2、0.1mM EDTA和17％甘油平衡。将PPO用250mM咪唑洗脱。将活性蛋白在PD-10柱(通用医疗生物科学公司，皮斯卡塔韦，新泽西州)上脱盐，将该柱用20mM磷酸钠缓冲液(pH 7.5)、5mMMgCl2、1mMEDTA和17％甘油平衡。每升培养物提供大约10mg的纯PPO，将其在-20℃下储存，直至在测定中使用。
实例3：PPO酶测定(非重组)
如前所述(Grossmann等人2010)，从在暗处生长的玉米、龙葵(blacknightshade)、牵牛花和绒毛叶(velvetleaf)幼苗的胚芽鞘或枝条(150g鲜重)中提取PPO蛋白(EC1.3.3.4)。收获前，使幼苗在光照下变绿2小时，以便在低叶绿素浓度下在类囊体级分中获得最高比酶活性。在高叶绿素浓度下，会发生显著的荧光淬灭，这限制了可用于测试的绿色类囊体的数量。使用1:4的鲜重与体积比用Braun搅拌机对植物材料进行冷匀浆。匀浆缓冲液由三(羟基甲基)氨基甲烷(Tris)-HCl(50mM；pH7.3)、蔗糖(0.5M)、氯化镁(1mM)、乙二胺四乙酸(EDTA)(1mM)和牛血清白蛋白(2g L-1)组成。通过四层Miracloth过滤后，在10 000xg下离心5min，然后重悬于匀浆缓冲液中，然后在150x g下离心2min，以去除粗细胞碎片，获得粗质体制剂。将上清液在4000x g下离心15min，并将沉淀级分重悬于1ml含有Tris-HCl(50mM；pH 7.3)、EDTA(2mM)、亮抑酶肽(2μM)、胃酶抑素(2μM)和甘油(200mlL-1)的缓冲液中，并在-80℃储存直至使用。以牛血清白蛋白为标准，测定酶提取物中的蛋白质。通过监测初始速度条件下从化学还原的原卟啉原IX形成Proto的速率，以荧光法测定PPO活性。测定混合物由总体积为200μl的Tris-HCl(100mM；pH 7.3)、EDTA(1mM)、二硫苏糖醇(5mM)、Tween80(0.085％)、原卟啉原IX(2μM)和40μg提取的蛋白质组成。通过在22℃下添加底物原卟啉原IX来引发反应。在二甲基亚砜(DMSO)溶液(测定中DMSO浓度为0.1mM)中制备上述披露的苯基尿嘧啶和作为阴性对照的光合作用抑制剂敌草隆，并以0.005pM至5μM的浓度添加到测定混合物中后进行孵育。使用POLARstar Optima/Galaxy(BMG公司)直接从测定混合物中监测荧光，其中在405nm处激发并在630nm处监测发射。热灭活提取物存在下的非酶活性可以忽略不计。以相对于未处理的对照的抑制百分比表示由除草剂诱导的酶活性的抑制。50％酶抑制所需化合物的摩尔浓度(IC50值)是通过使用非线性回归分析将值拟合到剂量应答方程来计算的。
实例4：PPO酶测定(重组)
Proto购自西格玛奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)(密尔沃基(Milwaukee)，威斯康星州)。根据以下制备Protogen：Jacobs和Jacobs(N.J.Jacobs,J.M.Jacobs,Assay forenzymatic protoporphyrinogen oxidation,a late step in heme synthesis[酶促原卟啉原氧化测定，血红素合成的后期步骤],Enzyme[酶]28(1982)206–219)。在含有0.1mMEDTA、0.1％Tween 20、5μM FAD和500mM咪唑的100mM磷酸钠(pH 7.4)中进行测定。在150μMProtogen存在下获得了使用上述披露的苯基尿嘧啶、作为阴性对照的光合作用抑制剂敌草隆和MC-15608的剂量应答曲线。激发和发射带宽分别设置为1.5和30nm。所有测定均一式两份或三份进行，并使用POLARstar Optima/Galaxy(BMG公司)测量，其中在405nm处激发并在630nm处监测发射。50％酶抑制所需化合物的摩尔浓度(IC50值)是通过使用非线性回归分析将值拟合到剂量应答方程来计算的。结果在表x1-x3中示出
X1)苯基尿嘧啶1
苋属 基于SEQ ID NO:1
IC50 变体
7,16E-10 WT
3,57E-07 L397Q，F420M
3,54E-07 L397Q，F420M
5,79E-06 L397E-F420V
5,45E-06 L397E-F420V
1,00E-05 AMATU G398A F420L
1,00E-05 AMATU G398A F420L
X2)苯基尿嘧啶2
X3)苯基尿嘧啶3
苋属 基于SEQ ID NO:1
IC50 变体
1,43E-07 397Q-420M
2,81E-06 397E，420V
1,83E-10 AMATU WT
实例5：工程化具有野生型或突变PPO序列的PPO衍生物除草剂耐受性植物。
通过Olhoft等人(美国专利2009/0049567)描述的方法产生PPO衍生物除草剂耐受性大豆(Glyceine max)(植物)。对于大豆或拟南芥的转化，使用如Sambrook等人(Molecular cloning[分子克隆](2001)Cold Spring Harbor Laboratory Press[冷泉港实验室出版社])中所述的标准克隆技术将编码除草剂耐受性PPO多肽的野生型或突变型PPO序列克隆到二元载体中，该二元载体含有泛素启动子(PcUbi)和胭脂碱合酶终止子(NOS)序列之间的抗性标志物基因盒(AHAS)和突变PPO序列(标记为GOI)。对于玉米转化，使用如Sambrook等人(Molecular cloning[分子克隆](2001)Cold Spring HarborLaboratory Press[冷泉港实验室出版社])中所述的标准克隆技术将野生型或突变PPO序列克隆到二元载体中，该二元载体含有玉米泛素启动子(ZmUbi)和胭脂碱合酶终止子(NOS)序列之间的抗性标志物基因盒(AHAS)和突变PPO序列(标记为GOI)。将二元质粒引入根癌农杆菌用于植物转化。通过农杆菌属介导的转化，将质粒构建体引入幼苗外植体主节(primary node)处的大豆腋生分生组织细胞中。接种并与农杆菌属共培养后，将外植体转移到枝条引入培养基中，不进行选择，持续一周。随后将外植体转移至含有1-3μM灭草烟(Arsenal)的枝条诱导培养基中持续3周，以选择转化的细胞。然后将主节处具有健康愈伤组织/枝条垫的外植体转移到含有1-3μM灭草烟的枝条伸长培养基中，直至枝条伸长或外植体死亡。使转基因小植株生根，对其进行TaqMan分析以确定转基因的存在，将其转移到土壤中并使其在温室中生长至成熟。根据Peng等人(WO 2006/136596)概述的程序，通过农杆菌属介导的转化将含有突变PPO序列的植物转化载体构建体引入玉蜀黍未成熟胚中。.
在补充有0.5-1.5μM咪草烟的选择培养基中选择转化细胞3-4周。转基因小植株在植物再生培养基上再生并随后生根。在将转基因小植株移植到盆栽混合物中并在温室中生长至成熟之前，对其进行TaqMan分析以确定转基因的存在。如McElver和Singh(WO 2008/124495)所述，通过浸花法用野生型或突变PPO序列转化拟南芥。对转基因拟南芥属植物进行TaqMan分析，以分析整合基因座的数量。水稻(稻)的转化是通过原生质体转化完成的，如Peng等人(US 6653529)所述。在温室研究和小地块(mini-plot)研究中，使用上述披露的苯基尿嘧啶和光合作用抑制剂敌草隆作为阴性对照，测试了含有突变PPO序列的大豆、玉米和稻的T0或T1转基因植物对PPO衍生除草剂的耐受性的改善。
实例6：组织培养条件。
已经开发了体外组织培养诱变测定来分离和表征对抑制原卟啉原氧化酶的除草剂(例如上述披露的苯基尿嘧啶和作为阴性对照的光合作用抑制剂敌草隆)耐受的植物组织(例如玉蜀黍、稻组织)。该测定利用体外组织培养中发现的体细胞克隆变异。源自体细胞克隆变异的自发突变可以通过化学诱变剂(例如甲基磺酸乙酯、N-乙基-N-亚硝基脲、N-亚硝基-N-甲基脲)处理以及随后递增除草剂浓度逐步选择来增强。
本发明提供了促进可再生的脆弱胚发生玉蜀黍或稻愈伤组织生长的组织培养条件。愈伤组织源自稻栽培品种籼稻(籼稻I)。将种子在70％乙醇中表面消毒大约1min，随后用20％商业Clorox漂白剂消毒20分钟。用无菌水冲洗种子，并铺在R001M培养基上。表y列出了测试培养基的成分列表。
表y
R001M愈伤组织诱导培养基是在测试了多种变化后选择的。将培养物在30℃下在黑暗中保存。10-14天后将胚性愈伤组织传代培养到新鲜培养基中。
实例7：除草剂耐受性愈伤组织的选择。
一旦确定了组织培养条件，通过用苯嘧磺草胺、三氟草嗪、甲磺草胺和上述披露的苯基尿嘧啶以及作为阴性对照的光合作用抑制剂敌草隆分析杀伤曲线中的组织存活来进一步建立选择条件。仔细考虑除草剂在组织中的积累，以及其在细胞和培养基中的持久性和稳定性。通过这些实验，已经确定了用于突变材料初始选择的亚致死剂量。在建立了上述披露的苯基尿嘧啶和作为阴性对照的光合作用抑制剂敌草隆在选择培养基中的起始剂量后，通过每次转移逐步增加PPO抑制剂浓度以逐步方式选择组织，直到回收到了在毒性剂量存在下生长旺盛的细胞。将所得愈伤组织每3-4周进一步传代培养至含选择剂的R001M。对超过26,000个愈伤组织进行4-5次传代培养的选择，直到选择压力高于根据杀伤曲线和持续培养观察确定的毒性水平。可替代地，从MS711R中的愈伤组织开始液体培养，缓慢振荡，并且每周传代培养。一旦建立了液体培养，在每次传代培养时将选择剂直接添加到烧瓶中。在2-4轮液体选择后，将培养物转移到固体R001M培养基上的过滤器中进行进一步生长。
实例8：植物的再生。
再生耐受组织，例如稻组织，并对其进行有关PPO基因(例如PPO2序列突变)的分子表征和/或有关在存在选择试剂下PPO活性改变的生物化学表征。另外，还对直接和/或间接参与四吡咯生物合成和/或代谢途径的基因进行测序以表征突变。最后，改变命运(如代谢、易位、运输)的酶也是特征突变的序列。除草剂选择后，使用如下培养基方案再生愈伤组织：R025M持续10–14天，R026M持续大约2周，R327M直到出现良好形成的枝条，R008S直到枝条生根良好以便转移到温室。再生是在光下进行的。再生期间不包括选择剂。一旦建立了强壮的根，M0再生体就会被移植到温室的方形或圆形盆(pot)中。将移植物保持在透明塑料杯下，直到它们适应温室条件。温室的白天/晚上循环设置为27℃/21℃(80°F/70°F)，并采用600W高压钠灯补充光照，以维持14小时的白天长度。根据需要给植物浇水，取决于天气和每日施肥。
实例9：序列分析。
从分离用于移植的克隆植物中收集叶组织，并作为个体进行分析。使用Chloropure核酸提取试剂盒(Agencourt公司，美国专利号5,898,071、5,705,628、6,534,262)按照制造商的指导提取基因组DNA。使用适当的正向和反向引物对分离的DNA进行PCR扩增。
使用LongAmp HotStart Taq DNA聚合酶混合物(新英格兰生物实验室(NewEngland Biolabs))，使用如下所示热循环程序进行PCR扩增：94℃持续30秒，随后进行35个循环(94℃，30秒；54℃，30秒；65℃，300秒)，在65℃下持续10min。
通过琼脂糖凝胶电泳验证PCR产物的浓度和片段大小。使用PCR引物(金唯智公司(Genewiz)或金斯瑞公司(GenScript))，通过直接测序分析去磷酸化的PCR产物。使用Sequencher(基因代码公司(Gene Codes))或Vector NTI Advance 10TM(英杰公司(Invitrogen))分析色谱跟踪文件(.scf)相对于野生型基因的突变。基于序列信息，在几个个体中鉴定出突变。在代表性色谱图上进行序列分析，以默认设置进行相应的比对并进行编辑以调用二级峰。
实例10：除草剂耐受性的证明。
在温室研究和小地块研究中，用上述披露的苯基尿嘧啶和任选的作为阴性对照的光合作用抑制剂敌草隆，测试含有PPO1和或PPO2序列的大豆、玉米、卡诺拉油菜品种和稻的T0或T1转基因植物对除草剂耐受性的改善。对于出苗前处理，播种后通过精细分布的喷嘴直接施用除草剂。温和灌溉容器以促进发芽和生长并且随后用透明塑料罩覆盖直到植物生根。此覆盖导致测试植物的均匀发芽，除非这被除草剂损害。对于出苗后处理，首先使测试植物生长到3至15cm的高度，这取决于植物习性，并仅在此时用除草剂处理。为此目的，将测试植物直接播种并在相同容器中生长，或者首先使它们单独生长并在处理之前几天移植到测试容器中。
为了测试T0植物，可以使用插枝。就大豆植物而言，用于插枝的最佳枝条高度为约7.5至10cm，至少有两个节。每个插枝均取自原始转化体(母本植物)并浸入生根激素粉末(吲哚-3-丁酸，IBA)中。然后将插枝放置在生物穹顶内的绿洲楔形物中。还同时取野生型插枝作为对照。将插枝在生物穹顶中保持5-7天，然后移植到盆中，然后在生长室中再适应两天。随后，将插枝转移到温室中，适应大约4天，然后按照指示进行喷洒测试。取决于物种，将植物保持在10℃-25℃或20℃-35℃。测试期延续3周。在此时间期间，照料植物，并评价它们对各处理的应答。在处理后2周和3周进行除草剂损伤评估。植物损伤评级为0％至100％，0％表示无损伤，100％表示完全死亡。
可以在48孔板中测定转基因拟南芥植物对上述披露的苯基尿嘧啶的耐受性的改善。因此，通过在乙醇+水(按体积计70+30)中搅拌5min，用乙醇+水(按体积计70+30)冲洗一次，用无菌去离子水冲洗两次，对T2种子进行表面灭菌。将种子重悬于溶于水的0.1％琼脂(w/v)中。将每孔四至五颗种子铺在由半强度murashige skoog营养液(pH 5.8)(Murashige和Skoog(1962)Physiologia Plantarum[植物生理学]15:473-497)组成的固体营养培养基上。将化合物溶解在二甲基亚砜(DMSO)中，并在固化前添加到培养基中(最终DMSO浓度为0.1％)。将多孔板在22℃、75％相对湿度和110μmol Phot*m-2*s-1，以14:10h光照:黑暗光周期，在生长室中孵育。在播种后七至十天相比于野生型植物评估生长抑制。
实例11：使用组织培养进行除草剂选择。
按照如上所述，选择使用的培养基和形成杀伤曲线。为了进行选择，使用不同的技术。采用逐步选择，或者采用临致死水平的除草剂。在每种情况下，对于每轮新的选择，转移所有愈伤组织。选择为4-5个培养周期，每个周期3-5周。将愈伤组织放置在尼龙膜上以促进转移(200微米孔片，生物设计公司(Biodesign)，萨柯，缅因州)。将膜切割成适合100x 20mm培养皿，并在使用前进行高压灭菌，每个板中使用25-35个愈伤组织(平均重量/愈伤组织为22mg)。另外，在液体培养基中对一组愈伤组织进行选择，每周进行传代培养，随后在半固体培养基上进一步选择。使用如上述披露的苯基尿嘧啶和任选的作为阴性对照的光合作用抑制剂敌草隆来选择突变体品系。基于产生可再生突变体品系的愈伤组织的百分比或基于按所用组织克数确定的品系的数量，获得突变体的效率是高的。
实例12：大豆转化和PPO抑制剂耐受性测试。
如Siminszky等人，Phytochem Rev.[植物化学评论]5:445-458(2006)先前所述转化大豆栽培种Jake(cv Jake)。再生后，将转化体移植到小盆中的土壤中，置于生长室中(16小时白天/8小时晚上；白天25℃/晚上23℃；65％的相对湿度；130-150microE m-2s-1)，并随后对其通过Taqman分析测试T-DNA的存在。几周后，将健康的、转基因阳性、单拷贝的事件移植到更大的盆中并允许其在生长室中生长。用于插枝的最佳枝条高度为约3-4英寸，至少有两个节。每个插枝均取自原始转化体(母本植物)并浸入生根激素粉末(吲哚-3-丁酸，IBA)中。然后将插枝放置在生物穹顶内的绿洲楔形物中。在温室中取得至成熟的母本植物，并收获种子。还同时取野生型插枝作为阴性对照。将插枝在生物穹顶中保持5-7天，然后移植到3英寸的盆中，然后在生长室中再适应两天。随后，将插枝转移到温室中，适应大约4天，然后进行喷洒。用如上述披露的苯基尿嘧啶处理剂和任选的作为阴性对照的光合作用抑制剂敌草隆喷洒T0或2周龄的T1植物。在处理后2、7、14和21天进行除草剂损伤评估。
在温室中用指示量的苯基尿嘧啶1+1％(v/v)MSO喷洒具有PPO抑制剂耐受性状的转基因T2或T4大豆植物。在处理后3天(DAT)和处理后1周(WAT)进行评估，并显示为相对于非转基因处理植物的损伤(0-9)。损伤等级：0-9，0＝无损伤，9＝最大损伤。注释：分离品系。
/>
/>
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下面给出了上述测量的损伤评分的定义：
评分损伤描述
0无损伤
1轻微损伤，仅有几片叶子损伤或萎黄。
2极小损伤，有轻微较强的萎黄。全部生长点未被破坏。
3在次生叶组织上轻微较强的损伤，但是初生叶和生长点未被破坏。
4总体植物形态轻微改变，在次生生长点和叶组织中一些萎黄和坏死。茎完整。1周内高度可能再生长。
5总体植物形态明显不同，在少数叶子和生长点上有一些萎黄、坏死，但初生生长点完整。茎组织仍为绿色。1周内高度可能再生长。
6新的小叶生长上可以观察到强损伤。植物具有高度可能性会在不同生长点仅通过再生长而存活。大多数叶子萎黄/坏死，但茎组织仍然是绿色的。可能具有再生长，但有具有显著的损伤外观。
7大多数活的生长点坏死。可能有单个生长点，该生长点能存活，并且可以是部分萎黄或绿色的并且部分坏死。两片叶子可能仍然萎黄，有一些绿色；植物的其余部分包括茎坏死。
8植物可能死亡，所有生长点都坏死。一片叶子可能仍然萎黄，有一些绿色。植物的其余部分坏死了。
9植物死亡。

Claims (7)

1.一种用于在植物栽培地点控制不期望的植被的方法，该方法包括以下步骤：
a)在所述地点提供包含至少一种核酸的植物，该至少一种核酸包含编码对“抑制PPO的除草剂”具有抗性或耐受性的原卟啉原氧化酶(PPO)多肽的核苷酸序列；
d)向所述地点施用有效量的所述除草剂，
其中该抑制PPO的除草剂是具有式(I)的苯基尿嘧啶，
其中
R1氢、NH2、C1-C6-烷基或C3-C6-炔基；
R2氢、C1-C6-烷基或C1-C6-卤代烷基；
R3氢或C1-C6-烷基；
R4 H或卤素；
R5卤素、CN、C1-C3-卤代烷基、C1-C3-烷氧基、C1-C3-卤代烷氧基、C1-C3-烷硫基、(C1-C3-烷基)氨基、二(C1-C3-烷基)氨基、C1-C3-烷氧基-C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基羰基；
R6 H、卤素、C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基；
R7 OR8、SR8、NR9R10、NR8OR9、NR8S(O)2R9或NR8S(O)2NR9R10，其中
R8是氢、C1-C6-烷基、C3-C6-烯基、C3-C6-炔基、C1-C6-卤代烷基、C3-C6-卤代烯基、C3-C6-卤代炔基、C1-C6-氰基烷基、C1-C6-烷氧基
-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷氧基)C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-卤代烯氧基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基-C1-C6-烷氧基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷硫基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷基羰基-C1-C6-烷基、C1-C6-烷氧基羰基
-C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C3-C6-烯氧基羰基
-C1-C6-烷基、C3-C6-炔氧基羰基-C1-C6-烷基、氨基、(C1-C6-烷基)氨基、二(C1-C6-烷基)氨基、(C1-C6-烷基羰基)氨基、氨基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基-C1-C6-烷基、氨基羰基-C1-C6-烷基、(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基、二(C1-C6-烷基)氨基羰基-C1-C6-烷基，
-N＝CR11R12，其中R11和R12彼此独立地是H、C1-C4-烷基或苯基；
C3-C6-环烷基、C3-C6-环烷基-C1-C6-烷基、C3-C6-杂环基、C3-C6-杂环基-C1-C6-烷基、苯基、苯基-C1-C4-烷基或5元或6元杂芳基，
其中每个环烷基、杂环基、苯基或杂芳基环可以被一至四个选自R13或3元至7元碳环的取代基取代，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员
-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
其中R13是卤素、NO2、CN、C1-C4-烷基、C1-C4-卤代烷基、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷氧基羰基；
R9、R10彼此独立地是R8，或一起形成3元至7元碳环，
该碳环任选地除了碳原子外还具有一或两个选自由以下组成的组的环成员：-N(R11)-、-N＝N-、-C(＝O)-、-O-和-S-，并且
该碳环任选地被一至四个选自R13的取代基取代；
n 1至3；
Q CH2、O、S、SO、SO2、NH或(C1-C3-烷基)N；
W O或S；
X NH、NCH3、O或S；
Y O或S；
Z苯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基或吡嗪基，
其各自任选地被1至4个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、CN、C1-C6-烷基、C1-C6-卤代烷基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-卤代烷氧基；
包括其农业上可接受的盐、酰胺、酯或硫酯，前提是这些具有式(I)的苯基尿嘧啶具有羧基基团，
并且其中该有效量的所述除草剂不杀死a)的除草剂耐受性植物或抑制其生长。
2.根据权利要求1所述的方法，其中该除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含以下基序1、2和/或3中的一个或多个：
a.基序1：SQ[N/K/H]KRYI，其中所述基序内位置5处的Arg被任何其他氨基酸取代；
b.基序2：TLGTLFSS，其中所述基序内位置2处的Leu、和/或位置3处的Gly、和/或位置5处的Leu被任何其他氨基酸取代；
c.基序3：[F/Y]TTF[V/I]GG，其中所述基序内位置4处的Phe被任何其他氨基酸取代。
3.根据权利要求1所述的方法，其中该除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含以下的氨基酸序列的变体：SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、577、579、581、583、585、587、589、591、593、595、597、599、601、603、605、607、609、611、613、615、617、619、621、623、625、627或637，该变体包含以下取代中的一个或多个：
a.对应于SEQ ID NO:1的Arg128的氨基酸被任何其他氨基酸取代
b.对应于SEQ ID NO:1的Gly211的氨基酸被任何其他氨基酸取代
c.对应于SEQ ID NO:1的Leu397的氨基酸被任何其他氨基酸取代
d.对应于SEQ ID NO:1的Gly398的氨基酸被任何其他氨基酸取代
e.对应于SEQ ID NO:1的Leu400的氨基酸被任何其他氨基酸取代
f.对应于SEQ ID NO:1的Phe420的氨基酸被任何其他氨基酸取代。
4.根据权利要求1所述的方法，其中该除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含以下的氨基酸序列或其变体：SEQ ID NO:265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、419、420、421、422、423、424、425、426、427、428、429、430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、714、715、716、717、718、719、720、721、722、723、724、725、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、795、882、883、884、885、886、887、888、889、890、891、892、893、894、895、896、897、898、899、900、901、902、903、904、905、906、907、908、909、910、911、912、913、914、915、916、917、918、919、920、921、922、923、924、925、926、927、928、929、930、931、932、933、934、935、936、937、938、939、940、941、942、943、944、945、946、947、948、949、950、951、952、953、954、955、956、957、958、959、960。
5.根据权利要求1所述的方法，其中该除草剂抗性或耐受性PPO多肽包含SEQ ID NO:240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261或263的氨基酸序列。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中该植物包含至少一种另外的异源核酸，该至少一种另外的异源核酸包含编码除草剂耐受酶的核苷酸序列。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中该具有式(I)的苯基尿嘧啶与一种或多种另外的除草剂一起施用。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024012905A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Basf Se Herbicidal composition comprising azine compounds

Family Cites Families (83)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5380831A (en) 1986-04-04 1995-01-10 Mycogen Plant Science, Inc. Synthetic insecticidal crystal protein gene
BR8600161A (pt) 1985-01-18 1986-09-23 Plant Genetic Systems Nv Gene quimerico,vetores de plasmidio hibrido,intermediario,processo para controlar insetos em agricultura ou horticultura,composicao inseticida,processo para transformar celulas de plantas para expressar uma toxina de polipeptideo produzida por bacillus thuringiensis,planta,semente de planta,cultura de celulas e plasmidio
US5569597A (en) 1985-05-13 1996-10-29 Ciba Geigy Corp. Methods of inserting viral DNA into plant material
ATE85360T1 (de) 1985-08-07 1993-02-15 Monsanto Co Glyphosat resistente pflanzen.
DE3765449D1 (de) 1986-03-11 1990-11-15 Plant Genetic Systems Nv Durch gentechnologie erhaltene und gegen glutaminsynthetase-inhibitoren resistente pflanzenzellen.
US5276268A (en) 1986-08-23 1994-01-04 Hoechst Aktiengesellschaft Phosphinothricin-resistance gene, and its use
US5268463A (en) 1986-11-11 1993-12-07 Jefferson Richard A Plant promoter α-glucuronidase gene construct
US5608142A (en) 1986-12-03 1997-03-04 Agracetus, Inc. Insecticidal cotton plants
BE1000563A6 (fr) 1987-05-18 1989-02-07 Cedres Castro Herminio S Dispositif accessoire, retractable dans un wc du type traditionnel destine a l'hygiene du corps.
US5169770A (en) 1987-12-21 1992-12-08 The University Of Toledo Agrobacterium mediated transformation of germinating plant seeds
FR2629098B1 (fr) 1988-03-23 1990-08-10 Rhone Poulenc Agrochimie Gene chimerique de resistance herbicide
US5990387A (en) 1988-06-10 1999-11-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Stable transformation of plant cells
CA2005658A1 (en) 1988-12-19 1990-06-19 Eliahu Zlotkin Insecticidal toxins, genes encoding these toxins, antibodies binding to them and transgenic plant cells and plants expressing these toxins
US4940935A (en) 1989-08-28 1990-07-10 Ried Ashman Manufacturing Automatic SMD tester
US5212296A (en) 1989-09-11 1993-05-18 E. I. Du Pont De Nemours And Company Expression of herbicide metabolizing cytochromes
US5322783A (en) 1989-10-17 1994-06-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean transformation by microparticle bombardment
DK0427529T3 (da) 1989-11-07 1995-06-26 Pioneer Hi Bred Int Larvedræbende lactiner og planteinsektresistens baseret derpå
ES2187497T3 (es) 1990-04-12 2003-06-16 Syngenta Participations Ag Promotores preferentemente en tejidos.
AU639788B2 (en) 1990-04-26 1993-08-05 Plant Genetic Systems N.V. New bacillus thuringiensis strains and their genes encoding insecticidal toxins
US5498830A (en) 1990-06-18 1996-03-12 Monsanto Company Decreased oil content in plant seeds
US5277905A (en) 1991-01-16 1994-01-11 Mycogen Corporation Coleopteran-active bacillus thuringiensis isolate
US5399680A (en) 1991-05-22 1995-03-21 The Salk Institute For Biological Studies Rice chitinase promoter
DE69227911T2 (de) 1991-08-02 1999-05-12 Mycogen Corp Neuer mikroorganismus und insektizid
JPH06510187A (ja) 1991-08-27 1994-11-17 ノバルティス　アクチエンゲゼルシャフト 同翅類昆虫に対する殺虫性質を有したタンパク質及び植物保護におけるそれらの用法
UA48104C2 (uk) 1991-10-04 2002-08-15 Новартіс Аг Фрагмент днк, який містить послідовність,що кодує інсектицидний протеїн, оптимізовану для кукурудзи,фрагмент днк, який забезпечує направлену бажану для серцевини стебла експресію зв'язаного з нею структурного гена в рослині, фрагмент днк, який забезпечує специфічну для пилку експресію зв`язаного з нею структурного гена в рослині, рекомбінантна молекула днк, спосіб одержання оптимізованої для кукурудзи кодуючої послідовності інсектицидного протеїну, спосіб захисту рослин кукурудзи щонайменше від однієї комахи-шкідника
WO1993007256A1 (en) 1991-10-07 1993-04-15 Ciba-Geigy Ag Particle gun for introducing dna into intact cells
TW261517B (zh) 1991-11-29 1995-11-01 Mitsubishi Shozi Kk
JPH07501701A (ja) 1991-12-04 1995-02-23 イー・アイ・デユポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー 植物由来の脂肪酸不飽和化酵素遺伝子
US5593874A (en) 1992-03-19 1997-01-14 Monsanto Company Enhanced expression in plants
AU4115693A (en) 1992-04-24 1993-11-29 Sri International In vivo homologous sequence targeting in eukaryotic cells
DE69333025T2 (de) 1992-11-17 2004-04-29 E.I. Du Pont De Nemours And Co., Wilmington Für mikrosom delta 12 fettsäuredesaturase kodierende gene und verwandte enzyme von pflanzen
CA2127807A1 (en) 1992-11-20 1994-06-09 John Maliyakal Transgenic cotton plants producing heterologous bioplastic
KR100386337B1 (ko) 1993-12-09 2004-03-24 토마스 제퍼슨 대학교 진핵세포에서부위-특이적돌연변이를위한화합물과그방법
US5593881A (en) 1994-05-06 1997-01-14 Mycogen Corporation Bacillus thuringiensis delta-endotoxin
US5530195A (en) 1994-06-10 1996-06-25 Ciba-Geigy Corporation Bacillus thuringiensis gene encoding a toxin active against insects
US5939602A (en) 1995-06-06 1999-08-17 Novartis Finance Corporation DNA molecules encoding plant protoporphyrinogen oxidase and inhibitor-resistant mutants thereof
US5767373A (en) 1994-06-16 1998-06-16 Novartis Finance Corporation Manipulation of protoporphyrinogen oxidase enzyme activity in eukaryotic organisms
US5608144A (en) 1994-08-12 1997-03-04 Dna Plant Technology Corp. Plant group 2 promoters and uses thereof
US5792931A (en) 1994-08-12 1998-08-11 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Fumonisin detoxification compositions and methods
US5705628A (en) 1994-09-20 1998-01-06 Whitehead Institute For Biomedical Research DNA purification and isolation using magnetic particles
US5659026A (en) 1995-03-24 1997-08-19 Pioneer Hi-Bred International ALS3 promoter
US5981722A (en) 1995-11-20 1999-11-09 Board Of Regents For The University Of Oklahoma Trypsin inhibitors with insecticidal properties obtained from PENTACLETHRA MACROLOBA
US5737514A (en) 1995-11-29 1998-04-07 Texas Micro, Inc. Remote checkpoint memory system and protocol for fault-tolerant computer system
US6072050A (en) 1996-06-11 2000-06-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Synthetic promoters
US5859348A (en) 1996-07-17 1999-01-12 Board Of Trustees Operating Michigan State University Imidazolinone and sulfonyl urea herbicide resistant sugar beet plants
US5773702A (en) 1996-07-17 1998-06-30 Board Of Trustees Operating Michigan State University Imidazolinone herbicide resistant sugar beet plants
US6232529B1 (en) 1996-11-20 2001-05-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods of producing high-oil seed by modification of starch levels
EP0970191A2 (en) 1997-03-07 2000-01-12 Novartis AG Cytochrome p450 monooxygenases
CN1249779A (zh) 1997-03-07 2000-04-05 诺瓦提斯公司 细胞色素p450单加氧酶
US7105724B2 (en) 1997-04-04 2006-09-12 Board Of Regents Of University Of Nebraska Methods and materials for making and using transgenic dicamba-degrading organisms
US6121512A (en) 1997-10-10 2000-09-19 North Carolina State University Cytochrome P-450 constructs and method of producing herbicide-resistant transgenic plants
AU762993C (en) 1998-02-26 2004-06-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Constitutive maize promoters
WO1999058664A1 (en) 1998-05-14 1999-11-18 Whitehead Institute For Biomedical Research Solid phase technique for selectively isolating nucleic acids
US6380465B1 (en) 1998-07-12 2002-04-30 University Of Kentucky Research Foundation Cytochrome P450 enzymes and related compounds and methods
BR9911681A (pt) 1998-08-12 2001-10-02 Maxygen Inc Embaralhamento de dna para produzir culturas seletivas para herbicidas
US6555732B1 (en) 1998-09-14 2003-04-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Rac-like genes and methods of use
EP1198985B1 (en) 1999-07-22 2010-09-08 National Institute Of Agrobiological Sciences Method for superrapid transformation of monocotyledon
AU2001259206B2 (en) 2000-04-28 2006-05-25 Basf Aktiengesellschaft Use of the maize x112 mutant ahas 2 gene and imidazolinone herbicides for selection of transgenic monocots, maize, rice and wheat plants resistant to the imidazolinone herbicides
ES2243543T3 (es) 2000-08-25 2005-12-01 Syngenta Participations Ag Hibridos de proteinas cristalinas de bacillus thurigiensis.
US7462481B2 (en) 2000-10-30 2008-12-09 Verdia, Inc. Glyphosate N-acetyltransferase (GAT) genes
US7230167B2 (en) 2001-08-31 2007-06-12 Syngenta Participations Ag Modified Cry3A toxins and nucleic acid sequences coding therefor
WO2003052073A2 (en) 2001-12-17 2003-06-26 Syngenta Participations Ag Novel corn event
US7405074B2 (en) 2004-04-29 2008-07-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Glyphosate-N-acetyltransferase (GAT) genes
EP2298901B2 (en) 2004-04-30 2017-04-26 Dow AgroSciences LLC Novel herbicide resistance genes
WO2005121345A1 (en) 2004-06-07 2005-12-22 Basf Plant Science Gmbh Improved transformation of soybean
US8680290B2 (en) 2004-09-03 2014-03-25 Syngenta Limited Isoxazoline derivatives and their use as herbicides
BRPI0516442A (pt) 2004-10-05 2008-09-02 Syngenta Ltd composto, processo para a preparação de um composto, composição herbicida, e, método para controlar gramìneas e ervas daninhas em safras de plantas úteis
BRPI0612671A2 (pt) 2005-06-23 2010-11-30 Basf Plant Science Gmbh métodos melhorados para a produção de plantas férteis zea mays (milho) estavelmente transformadas
WO2007000077A1 (en) 2005-06-28 2007-01-04 Zhejiang University A bentazon and sulfonylurea herbicide-resistant gene cyp81a6 of rice
US7671254B2 (en) 2005-08-25 2010-03-02 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Herbicide resistance gene, compositions and methods
US7842856B2 (en) 2005-08-25 2010-11-30 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Herbicide resistance gene, compositions and methods
GB0526044D0 (en) 2005-12-21 2006-02-01 Syngenta Ltd Novel herbicides
GB0603891D0 (en) 2006-02-27 2006-04-05 Syngenta Ltd Novel herbicides
CN104017817B (zh) 2007-04-04 2017-12-01 巴斯福植物科学有限公司 Ahas突变体
US8278505B2 (en) 2007-05-09 2012-10-02 Dow Agrosciences, Llc. Herbicide resistance genes for resistance to aryloxyalkanoate herbicides
WO2011137088A1 (en) * 2010-04-27 2011-11-03 E. I. Du Pont De Nemours And Company Herbicidal uracils
KR102085133B1 (ko) 2010-12-16 2020-03-05 바스프 아그로 비.브이. 제초제에 대한 내성이 증가된 식물
AR091489A1 (es) 2012-06-19 2015-02-11 Basf Se Plantas que tienen una mayor tolerancia a herbicidas inhibidores de la protoporfirinogeno oxidasa (ppo)
AU2014307660A1 (en) 2013-08-12 2016-03-03 Basf Agro B. V. Plants having increased tolerance to herbicides
WO2015022640A2 (en) 2013-08-12 2015-02-19 Basf Se Plants having increased tolerance to herbicides (ppo)
MD4770B1 (ro) 2013-12-18 2021-10-31 BASF Agro B.V. Plante cu toleranţă sporită la erbicide
US20200305429A1 (en) * 2017-11-23 2020-10-01 Basf Se Herbicidal phenylethers
EP4114828A1 (en) * 2020-03-06 2023-01-11 Basf Se Herbicidal phenyluracils

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