CN117844700A - 罗伊特氏黏液乳杆菌及其产品和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种罗伊特氏黏液乳杆菌及其产品和应用,涉及生物技术领域。本发明提供的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M 20231145。该菌株具有安全性好,具有较强的酸、胆盐和人工胃肠液耐受能力,以及良好的黏附能力,抗氧化能力强,抑菌效果好,能够用于肠炎的治疗。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其是涉及一种罗伊特氏黏液乳杆菌及其产品和应用。
背景技术
目前随着生活水平提高,宠物也存在营养过剩、运动不足、饮食不均衡等导致的一系列健康问题。其中免疫力差、软便、腹泻、肥胖、心脑血管疾病尤为突出。“健康的肠道”对维护宿主的正常的生理功能和健康的身体至关重要。最近的研究表明,优良的益生菌具有促进动物生长、调节肠道菌群、改善肠道屏障能力、提高机体免疫力等作用。益生菌在维持肠道健康方面发挥着尤其重要的功能,它们通过产生有机酸、细菌素、过氧化氢和抗粘附分子等抗菌特性从而发挥防腹泻维持肠道健康的作用。目前益生菌研究的关键问题之一在于优良菌株的开发和筛选。不同动物的肠道内环境不同,不同来源益生菌对动物肠道的适应能力不同,影响其定植和作用效果。近年来,对猫肠道微生物的研究也在逐年增加,然而目前猫源益生菌市场还存在菌种来源不明确、功效不确切、应用方法模糊等问题。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010,以提高宠物营养物质消化率,调节宠物免疫功能,促进宠物健康,能够解决上述问题中的至少一种。
本发明的第二目的在于提供一种菌剂。
本发明的第三目的在于提供上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备抗氧化产品中的应用。
本发明的第四目的在于提供上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备抑制病原菌的产品中的应用。
本发明的第五目的在于提供上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备治疗肠炎的产品中的应用。
本发明的第六目的在于提供一种饲料。
本发明的第七目的在于提供一种药物。
第一方面,本发明提供了一种罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010,所述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M 20231145。
作为进一步技术方案,所述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010来源于中华田园猫肠道。
第二方面,本发明提供了一种菌剂,包括上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010。
第三方面,本发明提供了上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备抗氧化产品中的应用。
第四方面,本发明提供了上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备抑制病原菌的产品中的应用;
所述病原菌包括大肠杆菌、沙门氏菌或金黄色葡萄球菌。
第五方面,本发明提供了上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备治疗肠炎的产品中的应用。
作为进一步技术方案,所述肠炎包括由葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的肠炎或者由沙门氏杆菌诱导的肠炎。
第六方面,本发明提供了一种饲料,包括上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者菌剂。
第七方面,本发明提供了一种药物,包括上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者菌剂。
作为进一步技术方案,所述药物还包括辅料。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
本发明提供的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010来源于中华田园猫的肠道,安全性好,具有较强的酸、胆盐和人工胃肠液耐受能力,以及良好的黏附能力,抗氧化能力强,抑菌效果好,能够用于肠炎的治疗。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明菌株CFDR010显微镜(1000X)观察照片;
图2为本发明菌株CFDR010菌落形态平皿照片;
图3为本发明菌株CFDR010的扫描电镜图;
图4为系统发育树;
图5为本发明菌株CFDR010的生长曲线;
图6为本发明菌株CFDR010的产酸曲线;
图7为小鼠的腹腔解剖图;
图8为菌株CFDR010在不同pH培养基中的生长曲线;
图9为空白组结肠肠道切片;
图10为DSS模型组结肠肠道切片;
图11为DSS模型+CFDR010组结肠肠道切片;
图12为沙门菌模型组结肠肠道切片;
图13为沙门菌模型+CFDR010组结肠肠道切片。
具体实施方式
下面将结合实施方式和实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施方式和实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
第一方面,本发明提供了一种乳酸杆菌,该菌株的分类学命名为:罗伊特氏黏液乳杆菌,拉丁文学名:Limosilactobacillus reuteri,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址:中国武汉武汉大学,保藏日期:2023年6月30日,保藏编号:CCTCC NO:M 20231145。
本发明提供的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010来源于中华田园猫的肠道,安全性好,具有较强的酸、胆盐和人工胃肠液耐受能力,以及良好的黏附能力,抗氧化能力强,抑菌效果好,能够用于肠炎的治疗。
第二方面,本发明提供了一种菌剂,包括上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010。
该菌剂由于包括本发明提供的罗伊特氏黏液乳杆菌CFDR010,因此,具有本发明罗伊特氏黏液乳杆菌CFDR010的全部技术效果。
第三方面,本发明提供了上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备抗氧化产品中的应用。
经发明人研究发现,本发明提供的罗伊特氏黏液乳杆菌CFDR010对于DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)具有一定的清除能力,因此能够用于制备抗氧化产品。
在一些优选的实施方式中,所述产品包括饲料或者药物。
第四方面,本发明提供了上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备抑制病原菌的产品中的应用;
所述病原菌包括大肠杆菌、沙门氏菌或金黄色葡萄球菌。
经发明人研究发现,本发明提供的罗伊特氏黏液乳杆菌CFDR010对于大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的生长具有良好的抑制作用,因此,能够用于制备抑菌产品。
在一些优选的实施方式中,所述产品包括饲料或者药物。
第五方面,本发明提供了上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillusreuteri)菌株CFDR010或者菌剂在制备治疗肠炎的产品中的应用。
在一些优选的实施方式中,所述肠炎包括由葡聚糖硫酸钠诱导的肠炎或者由沙门氏杆菌诱导的肠炎。
经发明人研究发现,本发明提供的罗伊特氏黏液乳杆菌CFDR010对于小鼠肠炎(DSS诱导模型和沙门氏杆菌诱导模型)具有良好的治疗作用,因此,能够用于制备治疗肠炎的产品。
在一些优选的实施方式中,所述产品包括饲料或者药物。
第六方面,本发明提供了一种饲料,包括上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者菌剂。
第七方面,本发明提供了一种药物,包括上述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者菌剂。
在一些优选的实施方式中,所述药物还包括辅料。
本发明中对于辅料的选择不作具体限制,采用本领域技术人员所熟知的药物辅料即可。
本发明提供的饲料和药物包含本发明的罗伊特氏黏液乳杆菌CFDR010,因此具有该罗伊特氏黏液乳杆菌CFDR010的全部有益效果。
下面通过具体的实施例进一步说明本发明,但是,应当理解为,这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用,而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
实施例1菌株的分离和鉴定
1实验方法
1.1样品制备
样品的全部制备过程均遵循无菌操作程序。
以无菌操作称取10g(mL)中华田园猫新鲜粪便样品,置于装有90mL生理盐水的灭菌锥形瓶内,制成1:10的样品匀液。
1.2稀释及分离培养
1.2.1用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1.0mL,沿管壁缓慢注于装有9mL生理盐水的无菌试管中(注意吸管尖端不要触及稀释液),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。
1.2.2另取1mL无菌吸管或微量移液器吸头,按1.2.1操作顺序,做10倍递增样品匀液,每递增稀释一次,即换用1次1mL灭菌吸管或吸头。
1.2.3根据待鉴定菌种的活菌数,选择三个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取0.1mL稀释液,采用倾注培养法,接种在MRS琼脂平板兼性培养48h±2h,可延长至72h±2h。
1.3菌种鉴定
1.3.1显微镜检:挑取平板上生长的乳酸菌单个菌落进行革兰氏染色。
1.3.2 16SrRNA序列检测
利用27f,1492r乳酸菌通用引物,进行序列检测,送上海生工生物有限公司进行测序,利用BLAST程序与Genbank数据库中序列进行比对,初步确定菌株分类学地位。基于16SrRNA基因序列比对结果以Oenococcus oeni JCM 6125(AB022924.1)为外枝构建Neighbor-Joining系统发育树,及进一步确定菌株的分类学特征。
2结果与分析
2.1如图1、图2和图3所示,菌株形态学观察菌株在MRS平板上的菌落形态为圆形、乳白色、边缘整齐、表明无褶皱、湿润有光泽;革兰染色结果显示为阳性,显微镜下菌体形态表现为单个、成对或成链状排列及不产芽孢的杆状细菌,记该菌株为CFDR010。
2.2菌株系统发育树构建
基于16S rRNA基因序列比对结果以Oenococcus oeni JCM 6125(AB022924.1)为外枝构建的Neighbor-Joining系统发育树,如图4所示。
2.3菌株的生理生化特性
利用Biolog微生物鉴定仪对菌株进行生理生化特性以及酶活性进行检测,菌株的生理生化特征如表1和表2所示。
表1菌株CFDR010生理生化特性-酶活、碳源氧化
+:阳性反应;-:阴性反应。(4)发酵始于管的下部,氧化始于管的上部。
表2菌株CFDR010生理生化特性-利用碳源产酸
+:阳性反应;-:阴性反应。
综合以上实验结果,鉴定本发明菌株CFDR010为罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)。
实施例2菌株的生长特性
取对数生长期菌液,按2.0%(V/V)接种量接种于MRS培养液中,以未接菌MRS培养液为空白,37℃静置培养24h,每隔2h取一次培养液分别采用酶标仪和pH计测定600nm下的吸光度值(OD600)和pH值,以时间为横坐标,培养液的OD600和pH为纵坐标,绘制生长曲线和产酸曲线,其生长曲线如图5所示,产酸曲线如图6所示。由图可知,0-2h为生长迟缓期;2h后生长速度达到最大,代谢旺盛,为对数生长期;10h之后繁殖速度渐趋下降,增殖数与死亡数大致平衡,进入稳定期。菌株CFDR010在接种后2h内pH下降缓慢,从6.21下降至6.02;2~10h内,菌液pH从6.02快速下降至4.07;10h后菌液pH变化趋于平缓,基本稳定在4.10左右。综上所述,菌株CFDR010可以在10h内达到最大生长量和较低的pH。
实施例3安全性评价
实验设计:
参考GB15193.3-2014设计试验。将体重22-27g的昆明系雌性小白鼠24只随机分为2组,实验组一次性腹腔注射0.2mL的新鲜菌液(菌液浓度调节为1×109CFU/mL),对照组腹腔注射等量的生理盐水,连续观察14d,记录观察期内小鼠的死亡情况,观察结束后剖检观察各组小鼠的内脏中毒情况。
通过小鼠始末体重、日增重、脾重、肝重和死亡率,得出小鼠安全评价指标,结果如表3所示。
表3安全评价指标
处理 | 初始体重(g) | 末体重(g) | 日增重(g) | 脾重(g) | 肝重(g) | 死亡率(%) |
空白组 | 16.42 | 19.03 | 0.18 | 0.043 | 0.67 | 0 |
010组 | 16.48 | 17.27 | 0.05 | 0.062 | 0.69 | 0 |
对处理后的小鼠进行全血检测,结果如表4所示。
表4全血检测结果
实验结束后将小鼠腹腔解剖,结果如图7所示。
在灌胃期间,小鼠全部健康存活,没有出现任何不良反应。解剖后,心、肝、肺、脾和肾脏均正常;肠道正常,无充血及出血点,无菌环境下肝、脾、肾涂布的MRS未见菌落生长,血液学检测结果2组无差异。表明菌株对健康小鼠是安全的,无毒副作用。
实施例4酸、胆盐、人工胃、肠液的耐受能力研究
将菌株CFDR010在不同pH的培养基中培养,检测吸光度,结果如图8所示。从图中可以看出,菌株CFDR010的生长速度随着pH的升高而增加,在pH为1.0~3.0的培养液中无法生长;当pH提高为4.0或者更高时,生长速度明显加快,菌株在pH≥5.0的培养液中生长最佳。
将菌株CFDR010在含有3g/L胆盐的培养基中培养,结果如表5所示,培养6h后,活菌数约为2.3×106CFU/mL,菌株的存活率为90.02%,说明菌株CFDR010对胆盐有良好的耐受性。
表5菌株CFDR010在牛磺胆酸钠溶液中的存活率
按2013版《中国药典》配制pH=3.0的人工胃液和pH=6.8的人工肠液,均以0.22μm微孔无菌滤膜过滤备用。新鲜过夜培养菌液,离心洗涤重悬,按重悬液:人工胃液或人工肠液=1:9混合均匀,37℃孵育0h,3h,分别取0h和3h混合液涂板进行活菌计数,重复三次取平均值,计算细菌存活率,结果如表6所示:
存活率=(lgNt/lgNo)×100%;
其中No为0h活菌数,Nt为t(t=3)h活菌数。
将菌株CFDR010分别在人工胃液和人工肠液中培养,接种于人工胃液3h后,菌株CFDR010存活率为91.18%,活菌数约为3.3×107CFU/mL;接种于人工肠液3h后,菌株CFDR010存活率为99.52%,活菌数约为2.32×108CFU/mL,说明菌株CFDR010对人工胃肠液有很好的耐受性。
表6菌株CFDR010在人工胃肠液中的存活率
实施例5菌株的黏附能力试验
菌株表面疏水性测定采用细菌碳烃化合物黏着法,通过乳酸菌对碳烃化合物的亲和力来反映菌株表面的疏水性能;自凝聚性是根据混匀的菌液静置后菌体的下沉来测定的。PBS洗涤过夜培养的新鲜菌液并调节菌液OD600=0.25±0.05(A0)作为待测液,取3mL待测液与等体积二甲苯混合,涡旋振荡3min,在37℃下分别孵育1h和2h,吸取水相(形成两相体系,水相在下层),测量OD600(At),每个时间点3个重复。疏水率计算公式如下:
疏水率(CSH)=[(A0-At)/A0]×100%;
式中:At为1h或2h的吸光度;A0为t为0时的吸光度。
取37℃过夜培养16h新鲜菌液,4℃,6000rmp离心10min,PBS洗涤两次,2倍体积PBS重新悬浮细菌,取2mL上述待测液,涡旋振荡10s,测其在600nm处吸光度(A0),37℃分别静置2h和4h,小心吸取上清液200μl,测其吸光度(At)。每个时间点3个重复。自凝聚率计算公式如下:
自凝聚率=[(A0-At)/A0]×100%
式中:At为2h或4h的吸光度;A0为t为0时的吸光度。
结果如表7所示。
表7菌株CFDR010的自凝聚率和表面疏水性结果
细菌根据表面疏水性定义标准,一般设定CSH>50%为高度疏水,CSH介于20%和50%为中度疏水,CSH<20%为非疏水。自凝聚能力一般分为:低(16%~35%)、中等(35%~50%)和高(50%以上)3类。上述实验结果表明,菌株CFDR010的表面CSH>70%,具有高度疏水性;自凝聚率4h为(64.60±4.03)%,具有高自凝聚能力,疏水性较高的菌株,可能会对小肠组织具有较高的黏附能力,说明菌株CFDR010具有良好的黏附能力。
实施例6抗氧化能力
取培养24h的新鲜菌液,于4℃,8000rpm离心10min,取沉淀,用PBS洗涤3次后加入等体积的生理盐水重悬作为样品备用。取2mL样品加入2mL 0.2mmol/L DPPH的无水乙醇溶液,充分混匀,放置于37℃恒温培养箱中避光反应1h,然后经过8000rpm离心10min,取上清液,于517nm处测定吸光度。用等体积的生理盐水代替样品溶液作为对照组,同时以等体积的生理盐水和无水乙醇的混合液作为空白调零。通过测定菌株CFDR010对DPPH的清除能力来反映菌株的抗氧化能力。DPPH自由基清除率的计算公式如下:
DPPH自由基清除率(%)=[1-(A样品-A空白)/A对照]×100%;
根据测定结果换算得到菌株CFDR010的DPPH自由基清除率为(25.51±3.58)%。说明菌株CFDR010具有一定的抗氧化作用。
实施例7抑菌试验
取对数生长期菌液按2.0%接种量接种于MRS培养液中,37℃180rpm/min震荡培养24h,6000rpm/min,4℃离心10min,取上清液,0.2μm无菌滤膜过滤,备用,采用牛津杯法(牛津杯外径×内径×高度=8mm×6mm×10mm)测定抑菌活性,每杯150μL上清液,取大肠杆菌ATCC 25922,金黄色葡萄球菌ATCC 25923,沙门氏菌ATCC 14028,37℃培养24h,测量抑菌圈直径,结果如表8所示。
表8菌株CFDR010对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑菌结果
抑菌圈直径7~10mm(弱);抑菌圈直径10~13mm(良);抑菌圈直径>13mm(强)。
如上表所示,菌株CFDR010的发酵上清液对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均有非常好的抑制作用,对大肠杆菌的抑菌活性最强,抑菌圈直径为21.2±1.15mm;对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为14.1±0.56mm和17.6±0.23mm;而对照组MRS液体培养基对致病菌无抑制作用。
实施例8菌株CFDR010对肠炎的治疗研究
肠炎模型:DSS诱导模型和沙门氏菌诱导模型。
实验分组:5周龄雄性小鼠(C57)40只,随机分为5组,每组8只。各组处理方法如表9所示。
表9实验分组及处理说明
注:010菌液是指含有菌株CFDR010的菌液,菌液浓度2.2×108cfu/mL。
疾病活动指数(DAI)评分标准如表10所示。
表10疾病活动指数(DAI)评分标准
DAI评分结果如表11所示。
表11 DAI评分结果
序号 | 分组 | 评分 |
1 | 空白组 | 0 |
2 | DSS模型组 | 4 |
3 | 沙门菌模型组 | 3 |
4 | DSS模型组+CFDR010组 | 2 |
5 | 沙门菌模型+CFDR 010组 | 1 |
结肠炎症可出现腹泻、血便、体重减轻、食欲减退、发热等症状,是由于病原体入侵肠道,引起机体发生应激、抵抗力下降。严重者可破坏肠道黏膜屏障,导致炎性细胞(中性粒细胞等)大量浸出,释放出大量促炎性因子(IL-1β和TNF-α等),这些炎性因子能使巨噬细胞发生趋化作用,进一步合成环氧化酶,最终导致动物肠道炎症的发生,进而出现腹痛、腹泻、便血等症状。
因此本试验对肠炎模型小鼠的血清生化、免疫因子、结肠肠道结构进行检测。
血清生化指标如表12所示。由结果可知,DSS处理组血清碱性磷酸酶含量明显下降(p<0.05),应用益生菌处理后,ALP含量有所增加,但仍然显著低于对照组。DSS处理后血清胆固醇含量明显增加(p<0.05),益生菌处理后胆固醇含量有所下降,但仍明显低于对照组。其他指标各组间差异不显著。有结果可知,DSS处理的小鼠肝脏可能受到损伤,导致影响胆固醇的代谢,但是应用益生菌处理后,肝脏损伤和情况有所缓解,但仍需结合其他指标进行进一步研究。
表12.DSS组血清生化指标
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DSS肠炎试验血清免疫指标
促炎细胞因子负责在病原体入侵时激活机体先天和获得性免疫系统,消灭入侵者;抗炎细胞因子是在消灭入侵者以后消除炎症使机体恢复到正常免疫和生理水平。血清免疫学指标表明(表13),IL-2含量在DSS处理组和益生菌处理组显著增加,这表明小鼠受到炎症后自身免疫机制被激活,当添加益生菌后小鼠IL-2含量增加更为显著。由此说明应用本益生菌可能提高机体免疫器官细胞和体液免疫水平,发挥了免疫增强效应。
表13.DSS组血清免疫指标(单位pg/mL)
沙门氏菌组血清生化指标
与空白对照组相比,模型组血清AST、甘油三酯含量明显增加,ALP、白蛋白、高密度脂蛋白、ALT含量显著下降,说明沙门氏菌杆菌组,对肝脏产生明显影响,应用益生菌处理后AST、LDH含量下降,其他指标也有相应的改善,说明应用该菌株对肝脏产生了一定的保护作用。
表14沙门氏菌处理组血清生化指标
沙门氏菌肠炎试验血清免疫指标
由表15结果可知,与沙门氏菌组相比,益生菌组抗炎性因子IL-2含量显著增加,这表明该益生菌可增强小鼠机体获得性免疫抵抗的能力。当机体受到炎症侵袭时,抗炎因子做出积极反应,沙门氏菌处理组由于受到病原菌的入侵,IL-4含量显著性降低,但干预益生菌后,该抗炎因子水平恢复至正常水平。
表15沙门氏菌处理组血清免疫学指标(单位pg/mL)
空白组结肠肠道切片如图9所示,DSS模型组结肠肠道切片如图10所示,DSS模型+益生菌组结肠肠道切片如图11所示。
结果表明,DSS模型组黏膜下层发生水肿,与肌层的紧密连接受损,中性粒细胞增加,杯状细胞数量无明显变化。益生菌处理组明显减轻了黏膜下层水肿现象,杯状细胞数量增多,肠道损伤情况得到改善。
沙门菌模型组结肠肠道切片如图12所示,沙门菌模型+益生菌组结肠肠道切片如图13所示。
结果表明,沙门菌会导致肠粘膜受损产生细菌性肠道炎症,同时伴随大量中性粒细胞浸润,杯状细胞减少。添加益生菌明显减少了中性粒细胞数量,杯状细胞数量也有所增加,改善肠粘膜损伤程度,提高黏膜完整性。
以上结果说明,利用罗伊特氏粘液乳杆菌可改善由葡聚糖硫酸钠导致的溃疡性肠炎,明显减轻由沙门氏菌引起的细菌性肠炎并改善肝脏损伤情况。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (10)
1.一种罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010,其特征在于,所述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:M 20231145。
2.根据权利要求1所述的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010,其特征在于,所述罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010来源于中华田园猫肠道。
3.一种菌剂,其特征在于,包括权利要求1所述的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010。
4.权利要求1所述的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者权利要求3所述的菌剂在制备抗氧化产品中的应用。
5.权利要求1所述的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者权利要求3所述的菌剂在制备抑制病原菌的产品中的应用;
所述病原菌包括大肠杆菌、沙门氏菌或金黄色葡萄球菌。
6.权利要求1所述的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者权利要求3所述的菌剂在制备治疗肠炎的产品中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述肠炎包括由葡聚糖硫酸钠诱导的肠炎或者由沙门氏菌诱导的肠炎。
8.一种饲料,其特征在于,包括权利要求1所述的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者权利要求3所述的菌剂。
9.一种药物,其特征在于,包括权利要求1所述的罗伊特氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri)菌株CFDR010或者权利要求3所述的菌剂。
10.根据权利要求9所述的药物,其特征在于,所述药物还包括辅料。
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