CN117813107A - 用于产生人血浆来源的因子viii/冯·维勒布兰德因子的方法和获得的组合物 - Google Patents
用于产生人血浆来源的因子viii/冯·维勒布兰德因子的方法和获得的组合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117813107A CN117813107A CN202280056315.0A CN202280056315A CN117813107A CN 117813107 A CN117813107 A CN 117813107A CN 202280056315 A CN202280056315 A CN 202280056315A CN 117813107 A CN117813107 A CN 117813107A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fviii
- vwf
- concentration
- vial
- composition
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 47
- 229940003169 factor viii / von willebrand factor Drugs 0.000 title claims description 4
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 claims abstract description 125
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 claims abstract description 124
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 claims abstract description 92
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims abstract description 29
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 24
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 21
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims abstract description 11
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 10
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims abstract description 8
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000027276 Von Willebrand disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000012137 von Willebrand disease (hereditary or acquired) Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 claims abstract description 6
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 claims description 3
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 abstract description 6
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 abstract description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 31
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 23
- 230000036515 potency Effects 0.000 description 21
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 6
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 4
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 4
- 239000013011 aqueous formulation Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000008364 bulk solution Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010081391 Ristocetin Proteins 0.000 description 1
- 208000026552 Severe hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N chembl1095986 Chemical compound C1[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]1C(N[C@H](C2=CC(O)=CC(O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=C2C=2C(O)=CC=C(C=2)[C@@H](NC(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3C=4C=C(C(=C(O)C=4)C)OC=4C(O)=CC=C(C=4)[C@@H](N)C(=O)N[C@@H](C(=O)N3)[C@H](O)C=3C=CC(O4)=CC=3)C(=O)N1)C(O)=O)=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=C(O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[C@@H]5[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O5)O)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C4=CC2=C1 BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229940105778 coagulation factor viii Drugs 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 102000057593 human F8 Human genes 0.000 description 1
- 229960000900 human factor viii Drugs 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000002480 immunoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- A61K38/37—Factors VIII
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/08—Solutions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明涉及用于产生冻干药物组合物的新方法，所述冻干药物组合物包含人血浆来源的因子Vlll/冯·维勒布兰德因子(FVIII/VWF)复合物，所述方法包括以下步骤：a)提供包含FVIII/VWF的初始水溶液，其中每mg总蛋白质中具有至少(90)III的FVIII，其中VWF/FVIII活性的比率为至少0.7；b)添加精氨酸、组氨酸和人血清白蛋白(HAS)；c)将步骤b)中获得的FVIII/VWF溶液冻干；以及d)在注射用水中重构经冻干的FVIII/VWF，以获得足够用于治疗血友病A和血管性血友病的治疗产品，其中在施用于患者之前，精氨酸的浓度为(42)至(98)mmol/L，组氨酸的浓度为(10)至(24)mmol/L，并且白蛋白的浓度为(1)％至(2.5)％(w/v)，FVIII效力和VWF效力等于或高于200ILI/mL，并且所获得的产品具有最高至3600lU/小瓶的FVIII剂量和最高至5040lll/小瓶的VWF剂量。
Description
背景技术
本发明涉及新方法和用所述方法获得的药物组合物，与目前市场中可获得的那些相比，该药物组合物包含活性成分FVIII和VWF二者的每小瓶的剂量(IU/小瓶)更高和效力(IU/ml)更高的人血浆来源的凝血因子VIII/冯·维勒布兰德因子(FVIII/VWF)复合物。此外，新的配制步骤允许以更高的FVIII和VWF效力将FVIII/VWF复合物溶解、冻干和在施用之前重构，导致用于治疗血友病A和用于治疗血管性血友病的注射体积更小。
FVIII浓缩物目前可在市场上获得，其同时含有FVIII和VWF二者，或作为不具有VWF或具有低含量VWF的FVIII。针对血友病A和血管性血友病的治疗，仅指示了第一类(其包含来源于人血浆的池(pool)的产品，其中FVIII和VWF紧密结合形成天然复合物(FVIII/VWF))。
在血流中，VWF的存在通过防止血浆蛋白酶进行降解以及通过干扰FVIII抑制剂对抗原的识别，在保持FVIII功能方面发挥着至关重要的双重作用(Delignat S.etal.Immunoprotective effect of von Willebrand Factor towards therapeuticfactor VIII in experimental Haemophilia A.Haemophilia2012；18:248-254)。当评估FVIII产品的免疫原性时，不仅FVIII的来源(重组或血浆来源的)，而且以生理学形成的FVIII/VWF复合物形式存在的VWF，显示在抑制剂对FVIII的识别中是重要的[Peyvandi F,et al.Source ofFactor VIII Replacement(plasmatic or recombinant)and Incidenceof Inhibitory Alloantibodies in Previously Untreated Patients with SevereHemophilia A:The Multicenter Randomized Sippet Study.Blood 2015；126:5,andBravo et al.Neutralizing capacity of inhibitors on FVIII is lower for naturalFVIII/VWF complex than for isolated FVIII:in vitro comparability study ineleven different therapeutic FVIII concentrates.Haemophilia 2016；22:e301-e348]。
另一方面，VWF构成已知最大的可溶性血浆蛋白。它具有复杂的多聚体结构，具有在460kDa(二聚体形式，其是较小的血浆的(plasmatic)形式)直至超过20,000kDa(对于具有较大分子量的多聚物形式而言)内变化的分子量。
如上所述，市场上有数种可获得的含有FVIII/VWF的产品，其通常以注射用溶液的冻干粉存在，每小瓶标称含有250、500、1000或1500IU的人凝血因子VIII。这些产品通过静脉内途径施用于患者，并且待输注的体积直接取决于可用剂量和FVIII或VWF一旦重构的效力。在实践中，在正常治疗中，必须通过缓慢的静脉内注射(IV)将数毫升输注给患者。因此，仍然需要降低待施用于患者的体积，从而降低具有相关的治疗益处的治疗的持续时间。
在这种情况下，已经做出了在不改变配方(formula)组成的情况下提高浓缩的FVIII的效力的尝试，例如，通过降低冻干产品的重构体积。这些尝试都没有成功，主要是因为VWF的低溶解度，其导致絮凝物的出现或将重构时间提高多至不可接受的值。通过提高赋形剂浓度来进一步提高溶解度的尝试导致待输注至患者的最终产品的渗量浓度不可接受。
本发明的发明人已经开发了用于产生包含人血浆来源的FVIII/VWF复合物的药物组合物的新方法，其中在配制步骤中，与市场上已有的类似产品相比，白蛋白的浓度略微提高，同时组氨酸和精氨酸的浓度降低，利用该药物组合物可以提高FVIII的效力，并因此提高FVIII的量，从而提高VWF的量，最高至每小瓶3,600IU，而不影响最终产品的品质参数，特别是渗量浓度和溶解度。本发明人不知晓之前的任何天然的血浆来源的FVIII/VWF产品曾获得过这样的呈现(presentation)。另外，对于通过本发明的方法获得的产品来说，可以降低所有呈现的施用体积，特别是与儿科使用的剂量相关的(其中与市场上的类似产品相比，所述体积降低最高至4倍)，同时，另一方面，将产品渗量浓度保持在目前产品的张力范围内，即使对于每小瓶呈现的高3000IU的FVIII来说也是如此。渗量浓度随产品的剂量和效力而提高，并因此与更高的治疗剂量特别相关。
发明内容
本发明涉及产生冻干药物组合物的方法，冻干药物组合物包含人血浆来源的因子VIII/冯·维勒布兰德因子(FVIII/VWF)复合物，所述方法包括以下步骤：
a)提供包含FVIII/VWF的初始水溶液，其中每mg总蛋白质中具有至少90IU的FVIII，其中VWF/FVIII活性的比率为至少0.7；
b)添加精氨酸、组氨酸和人血清白蛋白(human serum albumin，HSA)；
c)将步骤b)中获得的FVIII/VWF溶液冻干；以及
d)在注射用水中重构经冻干的FVIII/VWF，以获得足够用于治疗血友病A和血管性血友病的治疗产品，
其中在施用于患者之前，精氨酸的浓度为42至98mmol/L，组氨酸的浓度为10至24mmol/L，白蛋白的浓度为1％和2.5％(w/v)，FVIII效力和VWF效力等于或高于200IU/mL，并且获得的产品具有最高至3600IU/小瓶的FVIII剂量和最高至5040IU/小瓶的VWF剂量。
优选地，在施用之前，FVIII剂量为2400IU/小瓶至3600IU/小瓶并且VWF剂量为2160IU/小瓶至5040IU/小瓶。
优选地，步骤b)中的白蛋白浓度为1.2％至2.3％(w/v)。优选地，步骤b)中的组氨酸浓度为13至21mmol/L。优选地，精氨酸浓度为50至90mmol/L。
优选地，本发明的方法还包括热处理步骤。所述热处理可例如在70℃至90℃，更优选75℃至85℃，甚至更优选80℃至82℃的温度下进行70至80小时，更优选72至74小时。更优选地，FVIII/VWF复合物不受所述热处理的影响，并且经加热的产物与存在于血浆中的FVIII/VWF复合物相似。
优选地，步骤d)中获得的产物的渗量浓度等于或高于240mOsm/kg。更优选地，所述渗量浓度为240至600mOsm/kg，甚至更优选240至500mOsm/kg，最优选240至400mOsm/kg，甚至对于3000IU剂量来说也是如此。优选地，步骤d)中的重构时间小于10分钟。更优选地，步骤d)中重构时间小于5分钟，甚至更优选地小于3分钟。
在另一个方面中，本发明公开了包含冻干FVIII/VWF复合物的组合物，其中在重构之后精氨酸的浓度为42至98mmol/L，在重构之后组氨酸的浓度为10至24mmol/L，并且在重构之后人血清白蛋白(HSA)的浓度为1.0％至2.5％(w/v)，并且其中FVIII效力和VWF效力等于或高于200IU/mL，并且FVIII剂量最高至3600IU/小瓶以及VWF剂量最高至5040IU/小瓶。
优选地，在所述组合物中，白蛋白浓度为1.2％至2.3％(w/v)。优选地，组氨酸浓度为13至21mmol/L。优选地，精氨酸浓度为50至90mmol/L。
优选地，在所述组合物中，FVIII剂量为2400IU/小瓶至3600IU/小瓶，并且VWF剂量为2160IU/小瓶至5040IU/小瓶。
优选地，组合物的渗量浓度等于或高于240mOms/kg。更优选地，所述渗量浓度为240至600mOsm/kg，甚至更优选240至500mOsm/kg、最优选240至400mOsm/kg。优选地，冻干组合物的重构时间小于10分钟。更优选地，步骤d)中的重构时间小于5分钟，甚至更优选地小于3分钟。
优选地，本发明的组合物已经过热处理。所述热处理可例如在70℃至90℃，更优选75℃至85℃，甚至更优选80℃至82℃的温度下进行70至80小时，更优选72至74小时。更优选地，FVIII/VWF复合物不受所述热处理的影响，并且与血浆中存在的FVIII/VWF复合物相似。
优选地，本发明的组合物在5℃或30℃下具有至少36个月的稳定性，并且在40℃下具有至少12个月的稳定性。
在另一个方面中，本发明涉及如上所述的用于治疗血友病A和血管性血友病的组合物。
具体实施方式
定义
如本文中所用，章节标题仅用于组织目的，并且不应被解释为以任何方式限制所描述的主题。本申请中引用的所有文献和类似材料，包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、论文和互联网网页，出于任何目的明确地通过引用整体并入。当并入的参考文献中的术语定义似乎与本教导中提供的定义不同时，应以本教导中提供的定义为准。应当理解，在本教导中讨论的温度、浓度、时间等之前存在隐含的“大约”，使得轻微和非实质的偏差在本文的教导的范围内。
在本申请中，除非另外特别说明，否则单数的使用包括复数。此外，术语“包含”(“comprise”、“comprises”、“comprising”)、“含有”(“contain”、“contains”、“containing”)、“包括”(“include”、“includes”和“including”)不旨在是限制性的。
如本说明书和权利要求中所用，除非上下文另有明确规定，否则没有数量词修饰的名词包括一个/种和更多个/种。
术语“治疗”及其变形意指对对象(例如，哺乳动物)中的疾病或病症的任何治疗，包括：针对疾病或病症进行预防或保护，即导致临床症状不发生；抑制疾病或病症，即阻止或遏止(suppress)临床症状的发展；和/或减轻疾病或病症，即导致临床症状消退。
尽管本公开内容是在某些实施方案和实施例的背景下进行的，但是本领域技术人员将理解，本公开内容超出了具体公开的实施方案，延伸到另一些替代实施方案和/或实施方案的用途及其明显的修改方案和等同方案。另外，尽管已经示出和详细描述了数种实施方案的变化，但对本领域技术人员而言，基于本公开内容，另一些在本公开内容范围内的修改将是显而易见的。
还考虑可进行的实施方案的特定特征和方面的各种组合或子组合，并且仍然落入公开内容的范围内。应当理解的是，所公开的实施方案的多种特征和方面可彼此组合或替换，以便形成变化模式或公开内容的实施方案。因此，意图是本文中公开的本公开内容的范围不应受上述具体公开的实施方案的限制。
然而，应当理解，该描述虽然指示了本公开内容的一些优选实施方案，但是仅以示例说明的方式给出，因为在本公开内容的精神和范围内的多种变化和修改对于本领域的技术人员来说将变得明显。
本文描述中使用的术语不旨在以任何有限的或限制性的方式进行解释。相反，这些术语仅与系统、方法和相关组分的实施例的详细描述联合使用。此外，实施方案可包含数个新的特征，其中没有单个特征仅负责其理想属性或被认为对实践本文中所述实施方案是必要的。
本公开内容中的术语“FVIII效力”是指使用欧洲药典(European Pharmacopoeia)显色测定来确定的因子VIII:C效力(IU/mL)，这是技术人员公知的。本公开内容中的术语“人血浆来源”是指使用任何常规或非常规人血浆分馏过程以获得产品(即人血浆)的起始材料来源。常规血浆分馏过程的一个实例是科恩法(Cohn′s method)。
本公开内容中的术语“VWF效力”是指使用如欧洲药典中描述的瑞斯托霉素(ristocetin)辅因子测定来确定的冯·维勒布兰德因子效力(IU/mL)，这是技术人员公知的。
用于获得人血浆来源的FVIII/VWF复合物的过程
用于获得人血浆来源的因子VIII的过程与US 8354505 B2中公开的过程非常相似，直至制备高纯度FVIII/VWF复合物的步骤，其中调整了不同的赋形剂浓度。首先，对人血浆进行合并和冷沉淀(使用来自1,000多个供体的血浆来进行)，并随后在下游进一步纯化为高纯度FVIII沉淀。将所述高纯度沉淀重悬于白蛋白、精氨酸和组氨酸溶液中。在重悬之后，将白蛋白、组氨酸和精氨酸的浓度以及pH值重新调节至无菌本体(sterile bulk)中的既定值。最终将FVIII活性调节至无菌本体效力预定标称值，并因此调节VWF活性。所述溶液通过梯度的过滤器向下过滤至0.22μm无菌滤膜，以获得无菌本体溶液。然后将所述溶液根据期望的呈现填充至小瓶中。在本发明中，可以填充高至3000IU的FVIII/小瓶，这在市场上的类似产品上是不可获得的，然后将其冻干和热处理以获得最终的FVIII/VWF产品。对于静脉内施用来说，所述冻干产品在注射用水(water for injection，WFI)中重构至期望效力。与市场上的类似产品相比，利用本发明的组合物，在冻干之后的重构体积可降低一半至四倍。
白蛋白在FVIII/VWF稳定中的作用
已知白蛋白将提高在纯化过程中以及产品的保质期内的FVIII/VWF的溶解度和稳定性。另一方面，渗量浓度是药物产品中必须表征的关键问题。出乎意料的是，在冻干之前无菌本体中白蛋白浓度的小增量(其引起最小的对最终产物渗量浓度的影响)，大大提高了最终产物在施用之前的溶解度。白蛋白浓度的提高(其不会太高以至于引起不期望的副作用)出乎意料地使本发明组合物中氨基酸组氨酸和精氨酸的浓度降低，降低施用之前产品的总体张力。
现在已总体上描述了本发明，通过参考通过举例说明提供的并且不旨在限制本发明的以下实施例将更容易理解本发明。
实施例
实施例1.经过本发明配制获得天然FVIII/VWF复合物的过程：
如专利US 8354505 B2中所示，从解冻人血浆时产生的冷沉淀物获得的天然FVIII/VWF复合物溶液，可例如在通过聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)沉淀纯化并随后通过色谱纯化之后，从溶解的冷沉淀物混悬液中纯化。如专利EP 0639203中所示，将洗脱的溶液浓缩并随后进一步纯化(例如通过用甘氨酸沉淀)以获得高纯度FVIII/VWF复合物。
获得的高纯度中间体保持了适合用赋形剂和稳定剂直至(down to)本体配制的合适特性。根据期望剂量将FVIII/FVW本体溶液填充至小瓶中，冷冻干燥并进行最终热处理，以获得无病毒且长期(在室温下3年)稳定的最终产物，定义为天然FVIII/VWF复合物。
表1
(1)使用FVIII单位除以在280nm处的光密度确定的近似蛋白质来确定比活性
(2)对于高纯度中间体来说，比活性也被确定为FVIII单位除以总蛋白质。假设消光系数为ε1％13.64cm-1来确定总蛋白质
(3)FVW活性被确定为冯·维勒布兰德因子的瑞斯托霉素辅因子活性(FVW:RCo)。
总之，整个过程(表1)保持的功能活性比FVW:RCo/FVIII与最终获得的纯度一起，导向了适合用本发明的制剂配制的高纯度FVIII/VWF中间体，从而获得稳定的天然FVIII/VWF复合物，与血浆中的复合物相似，具有其相应的治疗适应证。
上述用于获得高纯度中间体的详细过程用于本发明的所有配制实施例中。VWF活性通过使用瑞斯托霉素辅因子活性来测量，得到在所有情况下的比值为1.3±0.1。因此，在所有实施例中，1IU的FVIII涉及大约1.3IU的VWF活性。
实施例2.在本领域组合物(100mM Arg、25mM Hist、0.5％ Alb)的目前可用的状态下，增加以下两个因素对FVIII/VWF溶解度的影响：FVIII效力(IU/ml)和剂量(IU/小瓶)。
批量配制如实施例1中所述获得的高纯度FVIII/VWF并冷冻干燥，使得在施用之前最终产物是等同于现有技术配方的水性制剂，即100mM Arg、25mM His和0.5％白蛋白。
为了评估剂量(UI/小瓶)和施用效力(UI/小瓶)这两个因素对FVIII/VWF溶解度的影响，将已配制的本体以3000UI剂量填充，并以100和200UI/ml的两个效力重构。此外，作为对照，将部分本体填充在现有技术中存在的较小剂量(1500和2000IU)内的小瓶中，并评价溶解度参数。最终冷冻干燥的产物以100UI/ml或200UI/ml溶解，显示出非常不同的溶解参数：
A)现有技术的剂量和效力
B)以100IU FVIII/ml重构的3000IU/小瓶
C)以200IU FVIII/ml重构的3000IU/小瓶
表2
总之，现有技术的组合物，即100mM Arg、25mM His、0.5％白蛋白，即使对于3000IU的大呈现来说，也显示出足以以100IU FVIII/mL来溶解FVIII/FVW，但对于相同剂量的3000IU来说，其不能以200IU FVIII/ml来溶解FVIII/FVW复合物(即观察到更大的重构时间和絮凝物的出现)。因此，活性因素即总剂量(UI/小瓶)和每ml效力(UI/ml)二者都导致施用之前产品溶解困难。
实施例3.FVIII/VWF天然复合物的溶解度和渗量浓度平衡：白蛋白、精氨酸和组氨酸浓度提高两倍的影响。
为了评估仅提高白蛋白以及提高白蛋白和氨基酸二者对3000IU溶解度的影响，配制如实施例1中所述获得的高纯度FVIII/VWF中间体，以在每种情况下获得冷冻干燥产品，其中在重构之后的所述制剂是水性制剂，其等同于以下：
-配方A)以200IU FVIII/ml重构的100mM Arg、25mM His和0.5％alb
-配方B)以200、250和300IU FVIII/ml重构的100mM Arg、25mM His和1％alb。
-配方C)以200、250和300IU FVIII/ml重构的200mM Arg、50mM His和1％alb。
表3
值得注意的是，白蛋白的提高导致溶解度的显著改善，而对渗量浓度的影响可以忽略不计(配方B)。然而，赋形剂的另外提高(精氨酸高至200mM，组氨酸高至50mM)，同时保持这1％的白蛋白，出乎意料地没有对溶解度提供任何另外的改善(配方C vs.B)，而对最终产品渗量浓度值的影响非常高(配方C vs.B)。
总之，已经评估了在本配方中通过仅提高白蛋白同时保持其他氨基酸，在溶解度方面的出乎意料的益处，以及在保持渗量浓度方面的另外优势。
实施例4.FVIII/VWF天然复合物的溶解度和渗量浓度平衡：白蛋白提高高至2％和氨基酸提高1.5倍的影响
配制如实施例1中所述获得的高纯度FVIII/VWF中间体，以在每种情况下获得冷冻干燥产品，其在重构之后等同于以下水性制剂：
A)复制100mM Arg、25mM His和0.5％alb作为对照(现有技术配方)
B)150mM Arg，37.5mM His，和2％alb：白蛋白和氨基酸提高1.5倍
对于两种制剂来说，测试了高效力(200IU FVIII/ml)下3000IU/小瓶的剂量：
表4
获得的结果表明，高至2％的白蛋白和氨基酸(精氨酸高至150mM和组氨酸高至37.5mM)的提高导致在溶解度(重构时间和已重构溶液的外观)方面的高效力(200IUFVIII/ml)下标准(standard)的3000IU剂量。然而，所评价的组合物(150mM Arg，37mMHist，2％白蛋白)还导致不期望的渗量浓度提高。
实施例5.FVIII/VWF天然复合物的溶解度和渗量浓度平衡。在3000IU剂量和200UI/ml效力下保持溶解度的情况下，白蛋白/精氨酸比率对渗量浓度的影响。
配制如实施例1中所述获得的高纯度FVIII/VWF中间体，以获得冷冻干燥产品，其在重构之后等同于以下水性制剂：
-A)200mM Arg、50mM His和1％alb(比率alb/Arg：0.05)
-B)110mM Arg、22mM His和1.8％alb(比率alb/Arg：0.16)
-C)70mM Arg、17mM His和1.8％alb(比率alb/Arg：0.26)
这些制剂以3000IU/小瓶的剂量在高FVIII和FVW效力(标称200IU FVIII/ml)下进行测试：
表5
出乎意料的是，高至1.8％的白蛋白提高降低了制剂中氨基酸的浓度(70mM Arg和17mM His)，同时保持溶解度标准，并在3000IU的非常高剂量和高FVIII效力下对渗量浓度的影响最小。
总之，如实施例1获得的FVIII/VWF的高纯度中间体，用70mM精氨酸、17mM组氨酸和1.8％白蛋白配制，并且具有完美平衡的Alb/Arg比率，能够最终产生具有3000UI/ml的FVIII、4200UI/ml的FVW的产品，其可以以15ml并且具有小于400mOsm/kg的最终渗量浓度以及以小于3分钟的重构时间施用。
实施例6.进行热处理的本发明的制剂对冷冻干燥产品保持FVIII和FVW二者活性的合适性。
如实施例1中所述，从工业规模的大量6800L血浆中获得不同的高纯度FVIII/VWF中间体。HP FVIII/FVW复合物中间体用本发明的配方配制，并填充至250、500、1000、2000和3000IU小瓶中。对小瓶进行冷冻干燥，以确保标准的水分，并随后在81±1℃下进行具有使病毒失活能力的热处理72至74小时。除了以100IU/ml重构的250IU(最终配方：70mM Arg、17mM His、1.8％alb)外，所有剂量均以200IU/ml的标称效力重构。
表6
结果表明，本发明的制剂适用于在热处理过程中保护FVIII/VWF复合物，保持FVIII和FVW:RCo二者的生物活性。因此，指示复合物的功能状态的FVW:RCo/FVIII的比率在该热处理步骤之后从而得到保持，与其在血浆中类似，产生稳定、安全、可溶性的天然FVIII/VWF复合物及其相应的治疗适应证。
实施例7.用本发明配方配制的FVIII/VWF复合物的长期稳定性。
获得250、500、1000、2000和3000IU小瓶的FVIII/VWF。将这些最终产品在5℃和30℃下进行持续36个月的长期稳定性研究，以及在40℃下进行持续12个月的长期稳定性研究。结果如表7中所示。
表7
复合物的功能状态(FVIII和FVW:RCo活性)以及溶解度参数(重构时间)在不同温度条件下和随时间变化的结果如表7中所示。
结果表明，本发明的制剂适合在不同温度条件下随时间保护FVIII/VWF复合物。FVIII和FVW二者的生物学活性在5℃和30℃下至少保存长达36个月，以及在40℃下保存长达12个月，并且溶解度随时间保持不变。
Claims (15)
1.用于产生冻干药物组合物的方法，所述冻干药物组合物包含人血浆来源的因子VIII/冯·维勒布兰德因子(FVIII/VWF)复合物，所述方法包括以下步骤：
a)提供包含FVIII/VWF的初始水溶液，其中每mg总蛋白质中具有至少90IU的FVIII，其中VWF/FVIII活性的比率为至少0.7；
b)添加精氨酸、组氨酸和人血清白蛋白(HSA)；
c)将步骤b)中获得的FVIII/VWF溶液冻干；以及
d)在注射用水中重构经冻干的FVIII/VWF，以获得足够用于治疗血友病A和血管性血友病的治疗产品，
其中在施用于患者之前，精氨酸的浓度为42至98mmol/L，组氨酸的浓度为10至24mmol/L，白蛋白的浓度为1.0％至2.5％(w/v)，FVIII效力和VWF效力等于或高于200IU/mL，并且所获得的产品具有最高至3600IU/小瓶的FVIII剂量和最高至5040IU/小瓶的VWF剂量。
2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤b)中的白蛋白浓度为1.2％至2.3％(w/v)。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤b)中的组氨酸浓度为13至21mmol/L。
4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中精氨酸浓度为50至90mmol/L。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其还包括热处理步骤。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述FVIII/VWF复合物不受所述热处理的影响，并且与血浆中存在的FVIII/VWF复合物相似。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤d)中获得的所述产品的渗量浓度等于或高于240mOsm/kg。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤d)中的重构时间小于10分钟。
9.组合物，其包含冻干FVIII/VWF复合物，其中在重构之后精氨酸的浓度为42至98mmol/L，在重构之后组氨酸的浓度为10至24mmol/L，并且在重构之后人血清白蛋白(HAS)的浓度为1.0％至2.5％(w/v)，并且其中FVIII效力和VWF效力等于或高于200IU/mL，并且FVIII剂量最高至3600IU/小瓶以及VWF剂量最高至5040IU/小瓶。
10.根据权利要求9所述的组合物，其中白蛋白浓度为1.2％至2.3％(w/v)。
11.根据权利要求9或10所述的组合物，其中组氨酸浓度为13至21mmol/L。
12.根据权利要求9至11中任一项所述的组合物，其中精氨酸浓度为50至90mmol/L。
13.根据权利要求9至12中任一项所述的组合物，其中FVIII剂量为2400至3600IU/小瓶，并且VWF剂量为2160至5040IU/小瓶。
14.根据权利要求9至14任一项所述的组合物，其中冻干组合物的重构时间小于10分钟。
15.根据权利要求9至14中任一项所述的组合物，其用于在有此需要的对象中治疗血友病A和血管性血友病。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP21382756.1 | 2021-08-11 | ||
| EP21382756 | 2021-08-11 | ||
| PCT/EP2022/072325 WO2023017020A1 (en) | 2021-08-11 | 2022-08-09 | Method for producing human plasma-derived factor viii / von willebrand factor and composition obtained |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117813107A true CN117813107A (zh) | 2024-04-02 |
Family
ID=77595491
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202280056315.0A Pending CN117813107A (zh) | 2021-08-11 | 2022-08-09 | 用于产生人血浆来源的因子viii/冯·维勒布兰德因子的方法和获得的组合物 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20240342254A1 (zh) |
| EP (1) | EP4384205A1 (zh) |
| JP (1) | JP2024528312A (zh) |
| CN (1) | CN117813107A (zh) |
| AU (1) | AU2022326188A1 (zh) |
| CA (1) | CA3228445A1 (zh) |
| MX (1) | MX2024001882A (zh) |
| WO (1) | WO2023017020A1 (zh) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5288853A (en) | 1992-04-30 | 1994-02-22 | Alpha Therapeutic Corporation | Factor viii purification process |
| DE69333928T2 (de) * | 1992-04-30 | 2006-08-17 | Probitas Pharma Inc., Los Angeles | Verbesserte solubilisierung und stabilisierung des faktor viii-komplexes |
| DK2130554T3 (da) * | 1999-02-22 | 2012-12-03 | Univ Connecticut | Albuminfrie faktor VIII-præparater |
| ES2229931B1 (es) * | 2003-10-03 | 2006-01-16 | Grifols, S.A. | Composicion liquida bilogicamente estable de fviii, de fvw o del complejo fviii/fvw humanos. |
| ES2298096B1 (es) | 2008-01-08 | 2009-01-01 | Grifols, S.A. | Procedimiento para la obtencion de un concentrado de factor von willebrand o del complejo de factor viii/factor von willebrand y utilizacionde los mismos. |
-
2022
- 2022-08-09 CA CA3228445A patent/CA3228445A1/en active Pending
- 2022-08-09 JP JP2024508420A patent/JP2024528312A/ja active Pending
- 2022-08-09 US US18/682,306 patent/US20240342254A1/en active Pending
- 2022-08-09 WO PCT/EP2022/072325 patent/WO2023017020A1/en active Application Filing
- 2022-08-09 EP EP22764390.5A patent/EP4384205A1/en active Pending
- 2022-08-09 MX MX2024001882A patent/MX2024001882A/es unknown
- 2022-08-09 CN CN202280056315.0A patent/CN117813107A/zh active Pending
- 2022-08-09 AU AU2022326188A patent/AU2022326188A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2023017020A1 (en) | 2023-02-16 |
| MX2024001882A (es) | 2024-02-29 |
| US20240342254A1 (en) | 2024-10-17 |
| AU2022326188A1 (en) | 2024-02-22 |
| JP2024528312A (ja) | 2024-07-26 |
| CA3228445A1 (en) | 2023-02-16 |
| EP4384205A1 (en) | 2024-06-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3809501B2 (ja) | 安定化された第ｖｉｉｉ因子調製物 | |
| JP3827713B2 (ja) | 凝固因子ｖｉｉｉからなる医薬製剤 | |
| TWI285112B (en) | Pharmaceutical preparation of recombinant factor VIII lyophilized without albumin as a stabilizer | |
| CN107249622B (zh) | 包含纤溶酶原的药物组合物和其用途 | |
| US10071136B2 (en) | Stable liquid formulations of recombinant fusion proteins | |
| JP3927248B2 (ja) | Ｈｇｆ凍結乾燥製剤 | |
| IL172844A (en) | Process for obtaining cryoprecipitable proteins including a virus inactivation step | |
| TW201325611A (zh) | 用木糖醇穩定化之依那西普調配物 | |
| WO1995016460A1 (fr) | Dispositif a semi-conducteur | |
| EP0809512A1 (en) | Pharmaceutical non inorganic saline solutions for endonasal administration of a calcitonin | |
| EP1641486B1 (en) | Stable, aqueous solution of human erythropoietin, not containing serum albumin | |
| Berntorp | Plasma product treatment in various types of von Willebrand’s disease | |
| KR20180114018A (ko) | 동결 건조된 약학적 제제 및 그의 용도 | |
| CN117813107A (zh) | 用于产生人血浆来源的因子viii/冯·维勒布兰德因子的方法和获得的组合物 | |
| CN115845032A (zh) | 生长激素fc融合蛋白注射液及其用途 | |
| TW202317178A (zh) | 因子ⅷ嵌合蛋白的配製品及其用途 | |
| JP3822383B2 (ja) | 可溶性トロンボモジュリン含有組成物 | |
| JP2013520480A (ja) | 第ｉｘ因子の安定組成物 | |
| WO2009138042A1 (zh) | 一种糖蛋白激素组合物 | |
| EP4387993A1 (en) | Dry heat treatment of plasma-derived factor viii | |
| CN116685309A (zh) | 改善的冻干制剂 | |
| PT1689437E (pt) | Formulação de eritropoietina em solução | |
| EA021610B1 (ru) | Жидкое противовирусное лекарственное средство |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication |