CN117804867A - 利用血液制品中间产品组分制备特种蛋白质控品的方法及特种蛋白质控品 - Google Patents
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Abstract
本申请公开了一种利用血液制品中间产品组分制备特种蛋白质控品的方法及特种蛋白质控品。本申请中提供的方法采用血液制品中废弃的中间产品组分原料作为特种蛋白制备原料进行特种蛋白的制备，不仅为特种蛋白的制备开发了来源稳定和质量可控的新原料，更为血液制品中间产品的回收利用开辟了新思路，所得产品生物安全性有保证、稳定性好、性价比高。
Description
技术领域
本发明涉及生物废弃物再利用领域，特别涉及利用血液制品中间产品组分制备特种蛋白质控品的方法及特种蛋白质控品。
背景技术
血液制品是指血液或血浆来源的治疗性产品，如红细胞，血小板，成分血浆，人血白蛋白，人免疫球蛋白类产品和人凝血因子产品等。这类产品生产原料来自人正常的血液或血浆，将人正常的血液或血浆采用低温乙醇工艺进行分离，得到血液制品半成品或成品。在制备工艺中，中间产品如组分I、II+III或IV等产量大，但回收价值小，常作为废弃物进行报废处理。本领域亟需发掘这些废弃物的回收价值。
特种蛋白，也叫做特定蛋白，在人体血清中含有许多蛋白质，它们来源于组织细胞，是血清中含有的功能蛋白，执行着各种功能，很多疾病都可以引起血清蛋白质的变化。蛋白质具有良好的抗原性，可以采用个抗原-抗体反应对具有某一特定抗原性的蛋白质进行测定，故又称特定蛋白检测。特种蛋白项目包括机体感染指标蛋白IgG、IgM、IgA，风湿类项目如抗链球菌溶血素(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)，急性炎症蛋白项目如C-反应蛋白(CRP)、α1-酸性糖蛋白(AAG)、触珠蛋白(HPT)、α1-抗胰蛋白酶(AAT)，患者的营养状况相关指标蛋白前白蛋白(PA)、转铁蛋白(TRF)，肾功能项目有α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)等，这些特定蛋白的检测能够辅助医生进行诊断，例如诊断白血病、多发性骨髓瘤、自身免疫性疾病、非何杰金氏淋巴瘤、风湿或类风湿性疾病、感染类疾病、营养不良、贫血、肾小球和肾小管功能障碍等疾病。临床实验室为获得稳定可靠的诊断结果，需要建立稳定可靠的质量控制体系，而建立特种蛋白稳定可靠的质量控制体系依赖高质量特种蛋白质控品。
然而，目前国内临床特种蛋白实验室检测质控品主要来自国外进口或是检验室利用病人血清临时配置的非标准化产品。国外进口的特种蛋白质控品多为单一项目质控，部分复合质控但检测项目数量仍然较少。利用病人血清制备的质控品标准化程度低，质量不稳定，且人血清血浆均属于严格管控的产品，价格高昂且来源有限无法规模制备。因此，本领域亟需开发一种能够低成本商品化生产的多项复合特种蛋白质控品生产工艺，为特种蛋白项目检测的质量控制提供技术和经济上的保证。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用血液制品中间产品组分制备特种蛋白质控品的方法。
本发明的另一目的在于提供经上述方法制备得到的特种蛋白质控品。
为解决上述技术问题，本发明的第一方面，提供了一种利用血液制品中间产品组分制备特种蛋白质控品的方法，所述方法包括步骤：
分别从组分II+III和组分IV中提取特种蛋白高值原料；和
使用所述特种蛋白高值原料配制特种蛋白质控品；
其中，所述特种蛋白包括IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)、转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)。
在一些优选的方案中，所述分别从组分II+III和组分IV中提取特种蛋白高值原料包括步骤：
从组分II+III中提取IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)和视黄醇结合蛋白(RBP)的高值原料；和
从组分IV中提取转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)的高值原料。
在一些优选的方案中，所述分别从组分II+III和组分IV中提取特种蛋白高值原料包括步骤：
取组分II+III进行预处理，然后从预处理后的组分II+III中提取IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)和视黄醇结合蛋白(RBP)的高值原料；和
取组分IV进行预处理，然后从预处理后的组分中IV中提取转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)的高值原料。
在一些优选的方案中，对组分II+III进行预处理包括步骤：
取组分II+III溶解后依次进行脱脂处理和除杂处理，得到经预处理的组分II+III。
在一些优选的方案中，对组分IV进行预处理包括步骤：
取组分IV溶解后依次进行脱脂处理和除杂处理，得到经预处理的组分IV。
在一些优选的方案中，溶解组分II+III包括步骤：取组分II+III溶解在pH为7-8的Tris溶液中，静置形成凝胶，搅碎所述凝胶并离心处理，取上清即得溶解后的组分II+III。
在一些优选的方案中，溶解组分IV包括步骤：取组分IV溶解在pH为7-8的Tris溶液中，静置形成凝胶，搅碎所述凝胶并离心处理，取上清即得溶解后的组分IV。
在一些优选的方案中，所述脱脂处理包括依次进行的半脱脂处理和全脱脂处理；其中，所述半脱脂处理包括步骤：从溶解后的组分中去除低密度脂蛋白(LDL)，所述全脱脂处理包括步骤：从经半脱脂处理的溶解后的组分中去除高密度脂蛋白(HDL)。
在一些优选的方案中，所述半脱脂处理包括步骤：取溶解后的组分，加入硫酸葡聚糖(DS)使其浓度为0.1-1g/L，然后加入CaCl2至终浓度为0.05-0.2mol/L，静置并离心，分离沉淀取上清，即可。
在一些优选的方案中，所述全脱脂处理包括步骤：从经半脱脂处理的溶解后的组分，加入硫酸葡聚糖(DS)使其浓度为3-7g/L，然后加入CaCl2至终浓度为0.05-0.2mol/L，静置并离心，分离沉淀取上清，即可。
在一些优选的方案中，所述除杂处理包括步骤：对经全脱脂处理的组分进行除钙处理，然后加入硫酸铵至其质量浓度为20-25wt％，静置并离心处理，分离沉淀取上清，即可。
在一些优选的方案中，所述除钙处理包括步骤：在经全脱脂处理的组分中加入过量草酸钾，静置并离心处理，分离沉淀取上清，即可。
在一些优选的方案中，所述从预处理后的组分II+III中提取IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)和视黄醇结合蛋白(RBP)的高值原料包括步骤：
S1，取经预处理的组分II+III，加入硫酸铵至其浓度40-45wt％，静置并离心处理，分离沉淀和上清得到第一沉淀和第一上清，所述第一沉淀为lgA、lgM、lgG、补体C3、补体C4.、抗链球菌溶血素O(ASO)、C反应蛋白(CRP)和类风湿因子(RF)高值原料；和
S2，取第一上清加入固体硫酸铵至终浓度78-85wt％，静置并离心处理，弃上清得到第二沉淀，所述第二沉淀为α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)高值原料。
在一些优选的方案中，所述从预处理后的组分IV中提取转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)的高值原料包括步骤：
S11，取经预处理的组分IV加入固体硫酸铵至其浓度为78-85wt％，静置并离心处理，弃上清得到第三沉淀，所述第三沉淀为转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)的高值原料。
在一些优选的方案中，将得到的特种蛋白高值原料进行透析处理。优选地，所述透析处理中所用透析液为牛血清白蛋白溶液。
在一些优选的方案中，所述使用所述特种蛋白高值原料配制特种蛋白质控品包括步骤：
使用质控品稀释剂将所述特种蛋白高值原料配制成预设的浓度，然后进行冻干处理，即可。
在一些优选的方案中，所述质控品稀释剂包括：表面活性剂(优选为吐温-20)、氯化钠、磷酸盐缓冲液、稳定剂(优选为麦芽糖和海藻糖共用)和保护剂(优选为牛血清白蛋白)。
在一些优选的方案中，所述质控品稀释剂包括如下组分：
保护剂……1-5％；
表面活性剂……0.1-1％；
氯化钠……0.5-3wt％；
磷酸盐缓冲液……0.5-2M；
稳定剂……1-5％。
在一些优选的方案中，所述质控品稀释剂的组成如下：
牛血清白蛋白……2％；
表面活性剂……0.2％；
氯化钠……0.9wt％；
磷酸盐缓冲液……1M；
麦芽糖……2％；和
海藻糖……2％。
本发明的第二方面，提供了经上述方法制备得到的特种蛋白质控品。
本发明相对于现有技术而言，至少具有下述优势：
(1)本发明提供的方法采用血液制品中废弃的中间产品组分原料作为特种蛋白制备原料进行特种蛋白的制备，不仅为特种蛋白的制备开发了来源稳定和质量可控的新原料，更为血液制品中间产品的回收利用开辟了新思路，所得产品生物安全性有保证、稳定性好、性价比高；
(2)本发明中从废弃的血液制品中间产品组分原料中提取高达15中特种蛋白原料，并将经过稀释剂优化和浓度配比探索将其制备成稳定的复合特种蛋白质控品，满足病人单次多项检查的需求。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
具体实施方式
现有的血液制品生产工艺中产生许多中间组分，这些中间组分常作为生物废弃物处理，回收利用率低。本发明人经过广泛而深入的研究，开发了一种以血液制品中间组分为原料，制备多达15种特种蛋白复合质控品的方法，不仅为这些中间组分提供了回收利用的新方式，更解决了特种蛋白质控品来源稀缺的问题。基于此完成此发明。
制备特征蛋白质控品的方法
本发明涉及一种利用血液制品中间产品组分制备特种蛋白质控品的方法，包括步骤：分别从组分II+III和组分IV中提取特种蛋白高值原料；和使用上述得到的特种蛋白高值原料配制特种蛋白质控品。
本发明中的方法制备得到的特种蛋白高值原料中涉及的特种蛋白包括IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)、转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)，几乎涵盖了全部的临床常见特种蛋白检查项。
在本发明优选的实施方式中，分别从组分II+III和组分IV中提取特种蛋白高值原料包括：从组分II+III中提取IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)和视黄醇结合蛋白(RBP)的高值原料；和从组分IV中提取提取转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)的高值原料。
从组分II+III或组分IV中提取高值原料前，优选地需对其进行预处理，去除脂蛋白和杂蛋白以及其他杂质等以直接得到较为纯净的特种蛋白。在本发明优选的实施方式中，预处理的步骤包括：首先将组分II+III或组分IV溶解，然后再进行脱脂处理和除杂处理。组分II+III和组分IV均可从市售渠道获得。组分II+III和组分IV常温下均为凝胶状，将组分II+III或组分IV溶解的步骤包括：取凝胶状的组分II+III或组分IV溶解在pH为7-8的缓冲溶液(通常为Tris溶液)中，静置形成凝胶，搅碎凝胶并离心处理，取上清即得溶解后的组分II+III或组分IV。
脱脂处理包括依次进行的半脱脂处理和全脱脂处理步骤，即对溶解后的组分II+III或组分IV先进行半脱脂处理，然后再进行全脱脂处理。半脱脂处理的主要目的是去除低密度脂蛋白(LDL)。作为半脱脂处理，其包括步骤：取溶解后的组分，加入硫酸葡聚糖(DS)使其浓度为0.1-1g/L，然后加入CaCl2至终浓度为0.05-0.2mol/L，静置并离心，分离沉淀取上清，即可。沉淀即为低密度脂蛋白(LDL)，回收沉淀可将其应用于所需领域。全脱脂处理的主要目的是去除高密度脂蛋白(HDL)。作为全脱脂处理，其包括步骤：从经半脱脂处理组分中，加入硫酸葡聚糖(DS)使其浓度为3-7g/L，然后加入CaCl2至终浓度为0.05-0.2mol/L，静置并离心，分离沉淀取上清，即可，沉淀中高密度脂蛋白(HDL)占比90％以上，其余为其他杂蛋白，回收沉淀去除其他杂蛋白，可将所得高密度脂蛋白应用于所需领域。
发明人在研究中发现，经过脱脂处理后的组分II+III或组分IV中还含有部分杂质，这些杂质的存在致使后续提取纯度较高的特种蛋白高值原料难度加大。因此本发明优选的实施方式中，脱脂处理后还需进一步除杂处理从而去除杂蛋白和其他杂质，其包括步骤：对经全脱脂处理的组分进行除钙处理，然后加入硫酸铵至其质量浓度为20-25wt％，静置并离心处理，分离沉淀取上清，即可，该沉淀即为杂蛋白。脱脂处理中加入过量的CaCl2至致使组分内存在大量钙离子，因此在除杂蛋白处理前，可进行除钙处理去除大量钙离子。除钙处理步骤中所得沉淀为草酸钙，这里也可以加入其它沉淀剂使钙离子沉淀。
取经过预处理的组分II+III或组分IV，进行提取目标特种蛋白的步骤。具体地，从预处理后的组分II+III中提取IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)和视黄醇结合蛋白(RBP)的高值原料包括步骤：S1，取经预处理的组分II+III，加入硫酸铵至其浓度40-45wt％，静置并离心处理，分离沉淀和上清得到第一沉淀和第一上清，第一沉淀为lgA、lgM、lgG、补体C3、补体C4.、抗链球菌溶血素O(ASO)、C反应蛋白(CRP)和类风湿因子(RF)高值原料；和S2，取第一上清加入固体硫酸铵至终浓度78-85wt％，静置并离心处理，弃上清得到第二沉淀，第二沉淀为α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)高值原料。从预处理后的组分IV中提取转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)的高值原料包括步骤：S11，取经预处理的组分IV加入固体硫酸铵至其浓度为78-85wt％，静置并离心处理，弃上清得到第三沉淀，第三沉淀为转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、α1-酸性糖蛋白(AAG)和α1-抗胰蛋白酶(AAT)的高值原料。在本发明优选的实施方式中，得到的特种蛋白高值原料可进行透析处理，去除硫酸铵。透析的方法为本领域常规技术手段。
将组分II+III和组分IV中提取得到的特种蛋白高值原料按照预设的浓度进行复配。作为预设的特种蛋白复合质控品的浓度，可根据临床检验的需要进行设置，在本发明优选的实施方式中，预设的浓度如下：
质控水平一
| 组分 | 含量 |
| IGG | 9.97g/l |
| IGA | 1.88g/l |
| IGM | 0.95g/l |
| C3 | 1.07g/l |
| C4 | 0.225g |
| ASO | 117IU/ml |
| RF | 28IU/ml |
| CRP | 11mg/l |
| α1-MG | 19.33mg/l |
| β2-MG | 2.1mg/l |
| RBP | 22mg/l |
| TRF | 1.45g/l |
| PA | 171mg/l |
| AAT | 0.74g/l |
| AAG | 0.36g/l |
质控水平二
复配所用质控品稀释剂配方如下：蛋白保护剂……1-5％；表面活性剂……0.1-1％；氯化钠……0.5-3wt％；磷酸盐缓冲液……0.5-2M；和稳定剂……1-5％。稳定剂优选为麦芽糖和海藻糖的混合物，表面活性剂优选为吐温-20，保护剂优选为牛血清白蛋白。当特种蛋白高值原料使用前述质控品稀释剂时，得到的产品稳定性更优。
进一步地，还可以将所得特种蛋白复合质控品进行冻干处理，便于存放。冻干处理可参考本领域常规技术进行。
本发明还涉及应用本发明中的制备方法制备得到的特种蛋白质控品。
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。以下实施例中所用的实验材料和试剂如无特别说明均可从市售渠道获得。
除非另有指明，本文所用的技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义，需要注意的是，本文所用的术语仅为了描述具体实施方式，而非意图限制本申请的示例性实施方式。
除非另有指明，否则术语“或”意指术语“和/或”并且可与术语“和/或”互换使用。
如本文使用的，包括所附权利要求，除非上下文另外明确说明，否则例如“一个”、“一种”和“所述”在内的词语的单数形式包括它们相应的复数指代物。
实施例1
本实施例中，从组分Ⅱ+Ⅲ中(购自上海莱士血液制品股份有限公司)提取得到IGG、IGM、IGA、C3、C4、ASO、RF、CRP、α1-MG、β2-MG、RBP高值原料。具体步骤如下：
(1)组分溶解
取1kg组分Ⅱ+Ⅲ用5L的0.02M Tris pH7.7溶液溶解,搅拌后静止过夜，第二天搅碎凝胶，离心后过滤，弃沉淀，取上清。
(2)半脱脂处理
取1L步骤1中的上清，置搅拌器上搅拌，取0.5g硫酸葡聚糖(DS)溶于5ml纯化水中，缓慢加入上述上清中，搅拌5分钟后加入2mol/L的CaCl2至终浓度为0.1mol/L，搅拌5分钟后，静置过夜然后离心，沉淀留作LDL高值原料，取上清。
(3)全脱脂处理
取1L步骤2中的上清，置搅拌器上搅拌，取5g硫酸葡聚糖(DS)溶于50ml纯化水中，缓慢加入上述上清中，搅拌5分钟后加入2mol/L的CaCl2至终浓度为0.1mol/L，搅拌5分钟后，静置过夜然后离心，沉淀留作HDL高值原料，取上清。
(4)除杂处理
取1L步骤3中的上清，置搅拌器上搅拌，加入17gK2C2O4，搅拌5分钟后静置过夜，离心弃沉淀，取上清，上清中加固体硫酸铵至终浓度22％，搅拌2h后静置过夜，离心取上清，沉淀为杂蛋白。
(5)提取免疫五项(IGG、IGM、IGA、C3、C4)和风湿三项(ASO、RF、CRP)高值
取步骤4中的上清，加固体硫酸铵至终浓度45％，搅拌2h后静置过夜，离心后取沉淀即为免疫五项、风湿三项高值，用含0.2％的牛白的PBS溶液透析至无硫酸铵，上清备用。
(6)提取尿液三项(α1-MG、β2-MG、RBP)高值
取步骤5中的上清加固体硫酸铵至终浓度80％，搅拌2h后静置过夜，离心后取沉淀即为尿液三项高值，用含0.2％的牛白的PBS溶液透析至无硫酸铵，弃上清。
(7)测值
取步骤5和6中透析后的溶液上生化分析仪测各项目的浓度值。
实施例2
本实施例中，从组分Ⅳ-4的纯化获取TRF、PA、AAG、AAT高值原料。具体步骤如下：
(1)组分溶解
取1kg组分Ⅳ-4用5L的0.02M Tris pH7.7溶液溶解,搅拌后静止过夜，第二天搅碎凝胶，离心后过滤，弃沉淀，取上清。
(2)半脱脂处理
取1L步骤1中的上清，置搅拌器上搅拌，取0.5g硫酸葡聚糖(DS)溶于5ml纯化水中，缓慢加入上述上清中，搅拌5分钟后加入2mol/L的CaCl2至终浓度为0.1mol/L，搅拌5分钟后，静置过夜然后离心，沉淀留作LDL高值原料，取上清。
(3)全脱脂处理
取1L步骤2中的上清，置搅拌器上搅拌，取5g硫酸葡聚糖(DS)溶于50ml纯化水中，缓慢加入上述上清中，搅拌5分钟后加入2mol/L的CaCl2至终浓度为0.1mol/L，搅拌5分钟后，静置过夜然后离心，沉淀留作HDL高值原料，取上清。
(4)除杂处理
取1L步骤3中的上清，加入17gK2C2O4，搅拌5分钟后静置过夜，离心弃沉淀，取上清。
(5)提取TRF、PA、AAG和AAT高值
取步骤4中的上清加固体硫酸铵至终浓度80％，搅拌2h后静置过夜，离心后取沉淀即为TRF、PA、AAG、AAT高值，用含0.2％的牛白的PBS溶液透析至无硫酸铵，弃上清。
(6)测值
步骤5中透析后的溶液上生化分析仪测各项目的浓度值。
实施例3
本实施例中，使用实施例1和2中得到的15项特种蛋白进行浓度探索，并使用经配方优化的稀释剂将其稀释成目标浓度。具体步骤如下：
(1)配制质控品稀释剂
按照表1配制特种蛋白质控品稀释剂。
表1质控品稀释液配方
| 组分 | 含量 |
| 牛血清白蛋白 | 2％ |
| 吐温-20 | 0.2％ |
| 麦芽糖 | 2％ |
| 海藻糖 | 2％ |
| PBS | 1M |
| 氯化钠 | 0.9％ |
(2)使用质控品稀释剂将15项特种蛋白配置成下表2的浓度
表2特种蛋白质控品配方质控水平一
| 组分 | 含量 |
| IGG | 9.97g/l |
| IGA | 1.88g/l |
| IGM | 0.95g/l |
| C3 | 1.07g/l |
| C4 | 0.225g |
| ASO | 117IU/ml |
| RF | 28IU/ml |
| CRP | 11mg/l |
| α1-MG | 19.33mg/l |
| β2-MG | 2.1mg/l |
| RBP | 22mg/l |
| TRF | 1.45g/l |
| PA | 171mg/l |
| AAT | 0.74g/l |
| AAG | 0.36g/l |
质控水平二
实施例4
本实施例中，将实施例3所得的特种蛋白质控品在冻干机上进行冻干，得到了15项特种蛋白冻干品。具体冻干工艺参考表3。
表3：冻干工艺
| 温度(℃) | 维持时间(h) | 温度(℃) | 维持时间(h) |
| -30 | 12 | 0 | 2 |
| -25 | 3 | 5 | 1 |
| -20 | 2 | 10 | 1 |
| -15 | 2 | 15 | 1 |
| -10 | 2 | 20 | 1 |
| -5 | 2 | 30 | 6 |
本领域的普通技术人员可以理解，上述各实施方式是实现本发明的具体实施例，而在实际应用中，可以在形式上和细节上对其作各种改变，而不偏离本发明的精神和范围。
Claims (10)
1.一种利用血液制品中间产品组分制备特种蛋白质控品的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：
分别从组分II+III和组分IV中提取特种蛋白高值原料；和
使用所述特种蛋白高值原料配制特种蛋白质控品；
其中，所述特种蛋白包括IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素、类风湿因子、C-反应蛋白、α1-微球蛋白、β2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、前白蛋白、α1-酸性糖蛋白和α1-抗胰蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分别从组分II+III和组分IV中提取特种蛋白高值原料包括步骤：
取组分II+III进行预处理，然后从预处理后的组分II+III中提取IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素、类风湿因子、C-反应蛋白、α1-微球蛋白、β2-微球蛋白和视黄醇结合蛋白的高值原料；和
取组分IV进行预处理，然后从预处理后的组分中IV中提取转铁蛋白、前白蛋白、α1-酸性糖蛋白和α1-抗胰蛋白酶的高值原料。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述从预处理后的组分II+III中提取IgG、IgM、IgA、补体C3、补体C4、抗链球菌溶血素、类风湿因子、C-反应蛋白、α1-微球蛋白、β2-微球蛋白和视黄醇结合蛋白的高值原料包括步骤：
S1，取经预处理的组分II+III，加入硫酸铵至其浓度40-45wt％，静置并离心处理，分离沉淀和上清得到第一沉淀和第一上清，所述第一沉淀为lgA、lgM、lgG、补体C3、补体C4.、抗链球菌溶血素O、C反应蛋白和类风湿因子高值原料；和
S2，取第一上清加入固体硫酸铵至终浓度78-85wt％，静置并离心处理，弃上清得到第二沉淀，所述第二沉淀为α1-微球蛋白、β2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白高值原料。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述从预处理后的组分IV中提取转铁蛋白、前白蛋白、α1-酸性糖蛋白和α1-抗胰蛋白酶的高值原料包括步骤：
S11，取经预处理的组分IV加入固体硫酸铵至其浓度为78-85wt％，静置并离心处理，弃上清得到第三沉淀，所述第三沉淀为转铁蛋白、前白蛋白、α1-酸性糖蛋白和α1-抗胰蛋白酶的高值原料。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，对组分II+III进行预处理包括步骤：
取组分II+III溶解后依次进行脱脂处理和除杂处理，得到经预处理的组分II+III；和/或，
对组分IV进行预处理包括步骤：
取组分IV溶解后依次进行脱脂处理和除杂处理，得到经预处理的组分IV。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，溶解组分II+III包括步骤：取组分II+III进行溶解在pH为7-8的Tris溶液中，静置形成凝胶，搅碎所述凝胶并离心处理，取上清即得溶解后的组分II+III；和/或，
溶解组分IV包括步骤：取组分IV进行溶解在pH为7-8的Tris溶液中，静置形成凝胶，搅碎所述凝胶并离心处理，取上清即得溶解后的组分IV。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述脱脂处理包括依次进行的半脱脂处理和全脱脂处理；其中，所述半脱脂处理包括步骤：从溶解后的组分中去除低密度脂蛋白(LDL)，所述全脱脂处理包括步骤：从经半脱脂处理的溶解后的组分中去除高密度脂蛋白(HDL)。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述半脱脂处理包括步骤：取溶解后的组分，加入硫酸葡聚糖(DS)使其浓度为0.1-1g/L，然后加入CaCl2至终浓度为0.05-0.2mol/L，静置并离心，分离沉淀取上清，即可；和/或，
所述全脱脂处理包括步骤：从经半脱脂处理的溶解后的组分，加入硫酸葡聚糖(DS)使其浓度为3-7g/L，然后加入CaCl2至终浓度为0.05-0.2mol/L，静置并离心，分离沉淀取上清，即可。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述除杂处理包括步骤：对经全脱脂处理的组分进行除钙处理，然后加入硫酸铵至其质量浓度为20-25wt％，静置并离心处理，分离沉淀取上清，即可。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法制备的特种蛋白质控品。
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