CN117715520A - 用于改善蛋白质在植物表面上的耐雨性的组合物和方法 - Google Patents

用于改善蛋白质在植物表面上的耐雨性的组合物和方法 Download PDF

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CN117715520A
CN117715520A CN202280050279.7A CN202280050279A CN117715520A CN 117715520 A CN117715520 A CN 117715520A CN 202280050279 A CN202280050279 A CN 202280050279A CN 117715520 A CN117715520 A CN 117715520A
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C·拉塞尔
A·托夫特加德佩德森
K·E·凯拉尔
A·芬德森
K·S·B·萨顿
S·G·卡斯加德
I·马奎斯努内斯
G·S·马洛尼
C·鲁阿克-西沃德
M·A·斯特林格
J·昆兰
S·因克
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Abstract

本披露提供了用于改善蛋白质诸如酶和细胞信号传导肽在可能容易被细菌、真菌等侵染和/或感染的植物和其他表面上的耐雨性的组合物和方法。特别有用的是选自由有机改性的硅氧烷诸如聚醚三硅氧烷组成的组的耐雨剂。

Description

用于改善蛋白质在植物表面上的耐雨性的组合物和方法
相关申请
本申请要求以下美国临时申请号的优先权:2021年7月16日提交的63/222,612、2021年7月16日提交的63/222,620和2022年5月14日提交的63/342,064,这些美国临时申请中的每一项的披露内容通过援引以其全文并入本文。
序列表的引用
本申请含有计算机可读形式的序列表,该序列表通过援引以其全文并入本文。
技术领域
本披露涉及用于改善蛋白质(包括酶)在植物和植物部分的表面上的耐雨性(rainfastness)的组合物和方法。
背景技术
目前有许多化合物被批准用作植物保护剂。然而,由于许多这些农用化学品具有生态毒理学效应,因此非常期望开发有效且环保的替代物。
基于蛋白质的活性物质(诸如酶、细胞信号传导蛋白和抗体)是特别理想的,因为它们能够发挥非常特异且非常有效的植物保护活性,并且因为它们是可生物降解的,即使在使用多年后也不会在环境中积累。
不幸的是,由于蛋白质往往具有高度水溶性,因此它们很容易被降雨和/或灌溉事件冲走。在大多数情况下,处理后立即或处理后不久发生的降雨或灌溉事件将从所处理植物的表面除去所有或基本上所有基于蛋白质的活性物质。
本披露提供了用于改善蛋白质在植物表面上的耐雨性(即,用于增加蛋白质在降雨或灌溉事件后将保留在植物表面上的可能性)的组合物和方法。
具体实施方式
本说明书并非旨在成为可实现本文所披露的发明构思的所有不同方式或可添加到其中的所有特征的详细目录。例如,可将关于一个实施例示出的特征并入到其他实施例中,并且可将关于特定实施例示出的特征从该实施例中删除。另外,根据本披露,对本文提出的各种实施例的不背离本发明的多种变化和添加对于本领域技术人员来说将是显而易见的。因此,以下描述旨在说明本发明的一些实施例,而不是穷举地指定其所有排列、组合和变化。
本文所用的术语仅用于描述特定实施例的目的,而不旨在限制本发明。
除非另外定义,否则本文所用的所有术语(包括技术和科学术语)具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。将进一步理解的是,诸如通常使用的字典中定义的那些术语应该被解释为具有与其在说明书和相关领域的背景中的含义一致的含义,并且不应理解为理想化或过度正式意义,除非本文明确地如此定义。为了简洁和/或清楚起见,可能不会详细描述众所周知的功能或结构。
如本文所用,单数形式“一个/一种(a/an)”和“该(the)”也旨在包括复数形式,除非上下文另有明确指示。
如本文所用,当提及组合物内的组合的效果时,“添加剂”意指组合的效果通常与该组合单独的各个组分的效果的总和大致相同。产生这种效果的各个组分的组合可称为添加剂组合。
如本文所用,术语“农业上可接受的运载体”是指可以用于将农业上有益的药剂递送至植物、植物部分或植物生长培养基(例如,土壤)而对植物生长和/或产量不会造成/具有过度不利影响的物质或组合物。如本文所用,术语“叶面相容运载体”是指可以叶面施用于植物或植物部分而不会对植物、植物部分、植物生长、植物健康等造成/具有过度不利影响的材料。如本文所用,术语“种子相容运载体”是指可以施用于种子而不会对种子、由种子生长的植物、种子萌发等造成/具有过度不利影响的材料。如本文所用,术语“土壤相容运载体”是指可以添加到土壤中而不会对植物生长、土壤结构、土壤排水等造成/具有过度不利影响的材料。
如本文所用,术语“农业上有益的微生物”是指具有至少一种农业上有益的特性(例如,固氮的能力、溶解磷酸盐的能力和/或产生农业上有益的药剂诸如植物信号分子的能力)的微生物。
如本文所用,术语“和/或”旨在包括相关联的所列项目中的一个或多个的任何和全部组合,以及以可替代方式(“或”)解释时缺少组合。因此,短语“A、B和/或C”将被解释为“A、A和B、A和B以及C、A和C、B、B和C、或C”。
如本文所用,当提及组合物内的组合的效果时,“拮抗”意指组合的效果通常小于该组合单独的各个组分的效果的总和。这些组合物可称为拮抗组合。
如本文所用,术语“水性”是指含有超过痕量的水(即,基于组合物的总重量按重量计超过0.5%的水)的组合物。
如本文所用,当关于本披露的组合物与植物或植物部分之间的关系使用时,术语“与……相关联(associated with)”、“与……相关联(in association with)”和“与其相关联”是指组合物和植物或植物部分的至少一种并置或紧密接近。这种并置或紧密接近可通过使组合物直接接触植物或植物部分或者将其施用于植物或植物部分和/或通过将组合物施用于植物或植物部分将在其中生长(或目前正在其中生长)的植物生长培养基(例如,土壤)来实现。根据一些实施例,将组合物作为涂层施用于植物或植物部分的外表面。根据一些实施例,将组合物施用于植物或植物部分将在其中生长(或目前正在其中生长)的地点处、附近或周围的土壤。
如本文所用,术语“生物刺激剂”是指其施用增强植物或植物部分的一种或多种代谢和/或生理过程(例如,碳水化合物生物合成、离子摄取、核酸摄取、营养物递送、光合作用和/或呼吸)的药剂或药剂组合。
如本文所用,术语“结合模块”是指介导酶与底物结合的酶区域。
如本文所用,术语“催化结构域”是指含有酶的催化机器的酶区域。
如本文所用,术语“cDNA”是指可以通过从获自真核或原核细胞的成熟的剪接mRNA分子进行反转录而制备的DNA分子。cDNA缺乏可能存在于相应基因组DNA中的内含子序列。初始的初级RNA转录物是mRNA的前体,通过一系列步骤(包括剪接)对前体进行加工,然后呈现为成熟的剪接的mRNA。
如本文所用,术语“编码序列”是指直接指定多肽的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界通常由开放阅读框确定,该开放阅读框以起始密码子(如ATG、GTG或TTG)开始并且以终止密码子(如TAA、TAG或TGA)结束。编码序列可为基因组DNA、cDNA、合成DNA或其组合。
如本文所用,术语“菌落形成单位”和“cfu”是指当条件(例如,温度、湿度、营养物可利用性、pH等)有利于萌发和/或微生物生长时能够在合适的生长培养基或基质(例如,土壤)上或其中繁殖的微生物细胞/孢子。
如本文所用,当关于本披露的组合物和方法使用时,术语“基本上由……组成”意指组合物/方法可含有另外的组分/步骤,只要这些另外的组分/步骤不实质上改变组合物/方法。当应用于本披露的组合物/方法时,术语“实质上改变”是指组合物/方法的有效性增加或降低至少20%。例如,如果添加到本披露的组合物中的组分使组合物抑制靶植物病原体生长的能力增加或降低至少20%,则该组分可被认为“实质上改变”组合物。
如本文所用,术语“控制序列”是指涉及在特定生物体中或在体外调控多核苷酸的表达的核酸序列。每个控制序列对于编码多肽的多核苷酸而言可以是天然的(即,来自相同基因)或异源的(即,来自不同基因),并且相对于彼此是天然的或异源的。此类控制序列包括但不限于前导序列、聚腺苷酸化序列、前原肽、前肽、信号肽、启动子、终止子、增强子以及转录或翻译起始子和终止子序列。最少,这些控制序列包括启动子以及转录和翻译终止信号。出于引入有利于将控制序列与编码多肽的多核苷酸的编码区连接的特异性限制位点的目的,这些控制序列可以提供有多个接头。
如本文所用,术语“固氮生物”是指能够将大气氮(N2)转换为可被植物或植物部分利用的形式(例如,氨(NH3)、铵(NH4+)等)的生物体。
如本文所用,术语“分散剂”是指其施用降低相似颗粒的内聚性、液体的表面张力、两种液体之间的界面张力和/或液体与固体之间的界面张力的药剂或药剂组合。
如本文所用,术语“有效量”、“有效浓度”和“有效量/浓度”是指足以引起所需效果(例如,抑制植物病害、提高植物产量)的量或浓度。足以引起所需效果的量/浓度的绝对值可能受到以下因素的影响:诸如所需效果的类型和强度;将施用组合物的材料的类型、大小和体积;组合物中酶的类型;组合物中酶的量;组合物中酶的稳定性;以及储存条件(例如,温度、相对湿度、持续时间)。本领域技术人员将会理解如何使用常规剂量响应实验来选择有效量/浓度。在一些实例中,当单独使用时物质的有效量可能不同于当作为组合的一部分使用时相同物质的有效量。
如本文所用,术语“增强的生长”和“增强的植物生长”是指与一种或多种对照植物(例如,由未处理的种子萌发的植物或未处理的植物)相比植物生长和/或发育的一个或多个特征的改善。示例性植物生长/发育特征包括但不限于生物量、碳水化合物生物合成、叶绿素含量、耐冷性、耐旱性、高度、叶长、叶重、叶片数、叶表面积、叶片体积、营养物摄入量(例如钙、镁、氮、磷和/或钾摄入量)、一个或多个光合速率、根面积、根直径、根长、根质量、根瘤形成(例如根瘤质量、根瘤数量、根瘤体积)、根数量、根表面积、根体积、耐盐性、种子萌发、出苗率、枝条直径、枝条长度、枝条质量、枝条数量、枝条表面积、枝条体积、蔓延、气孔导度和存活率。
如本文所用,术语“增强的稳定性”和“增强的酶稳定性”是指与一种或多种对照(例如,除了缺少在本披露的组合物中发现的组分中的一种或多种以外,与本披露的组合物相同的对照组合物)相比酶稳定性的一个或多个特征的改善。示例性酶稳定性特征包括但不限于在施用于植物或植物部分和/或储存限定时间段后酶活性的维持,以及在施用于植物或植物部分和/或储存限定时间段后引起所需效果(例如,降低目标有害生物的植物病原性)的能力。
如本文所用,术语“提高的产量”和“提高的植物产量”是指与一种或多种对照植物(例如,由未处理的种子萌发的对照植物)相比植物产量的一个或多个特征的改善。示例性植物产量特征包括但不限于:生物量;蒲式耳/英亩;粒重/地块(GWTPP);营养含量;给定区域(例如地块)内不能产生籽粒的植物的百分比;标准水分百分比下的产量(YSMP),如标准水分百分比下的籽粒产量(GYSMP);产量/地块(YPP),如粒重/地块(GWTPP);以及减产(YRED)。
如本文所用,术语“表达”是指涉及多肽的产生的任何步骤,包括但不限于转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰和分泌。可以对表达进行测量—例如,来检测增加的表达—通过本领域已知的技术,如测量mRNA和/或翻译的多肽的水平。
如本文所用,术语“表达载体”是指包含编码多肽的DNA序列的线性或环状DNA构建体,该编码序列可操作地连接到能够影响DNA在合适宿主中表达的合适控制序列。此类控制序列可包括影响转录的启动子、控制转录的任选操纵子序列、编码mRNA上合适的核糖体结合位点的序列、增强子以及控制转录和翻译的终止的序列。
如本文所用,术语“延伸”是指将一个或多个氨基酸添加到多肽的氨基和/或羧基末端。
如本文所用,术语“叶面”是指通常在地面上生长的那些植物部分,包括但不限于叶片、秆、茎、花、子实体和果实。
如本文所用,术语“叶面施用”和“叶面施用的”是指将一种或多种活性成分施用于植物的叶面(例如,植物的叶片)。施用可通过任何合适的手段来实现,包括但不限于用包含活性成分的组合物对植物进行喷洒/雾化。在一些实施例中,将活性成分施用于植物的叶片、茎和/或秆而不施用于植物的花、子实体或果实。
如本文所用,术语“片段”是指成熟多肽的氨基和/或羧基末端缺少一个或多个氨基酸的多肽。
如本文所用,术语“融合多肽”是指其中一个多肽在本披露的多肽的N-末端和/或C-末端融合的多肽。融合多肽通过将编码另一多肽的多核苷酸与本披露的多核苷酸融合或通过将本披露的两个或更多个多核苷酸融合在一起而产生。用于产生融合多肽的技术是本领域已知的,并且包括连接编码多肽的编码序列使得它们符合读框,而且融合多肽的表达处于一个或多个相同的启动子和终止子的控制之下。还可以使用内含肽技术构建融合多肽,其中在翻译后产生融合多肽(Cooper等人,1993,EMBO J.[欧洲分子生物学学会杂志]12:2575-2583;Dawson等人,1994,Science[科学]266:776-779)。融合多肽可进一步包含两个多肽之间的切割位点。在融合蛋白分泌之时,该位点被切割,从而释放出这两种多肽。切割位点的实例包括但不限于在以下文献中披露的位点:Martin等人,2003,J.Ind.Microbiol.Biotechnol.[工业微生物学与生物技术杂志]3:568-576;Svetina等人,2000,J.Biotechnol.[生物技术杂志]76:245-251;Rasmussen-Wilson等人,1997,Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]63:3488-3493;Ward等人,1995,Biotechnology[生物技术]13:498-503;和Contreras等人,1991,Biotechnology[生物技术]9:378-381;Eaton等人,1986,Biochemistry[生物化学]25:505-512;Collins-Racie等人,1995,Biotechnology[生物技术]13:982-987;Carter等人,1989,Proteins:Structure,Function,and Genetics[蛋白质:结构、功能以及遗传学]6:240-248;以及Stevens,2003,Drug Discovery World[药物发现世界]4:35-48。
如本文所用,当用于描述多核苷酸或多肽与宿主细胞之间的关系时,术语“异源”是指不是在宿主细胞中天然存在的多核苷酸或多肽。
如本文所用,当用于描述多核苷酸或多肽与控制序列(例如,启动子序列)之间的关系时,术语“异源”是指多核苷酸和多肽不与控制序列天然缔合(即,控制序列来自不同于编码成熟多肽的基因的基因)。
如本文所用,术语“宿主株系”和“宿主细胞”是指其中已引入表达载体、噬菌体、病毒或其他DNA构建体(包括编码感兴趣的多肽(例如,淀粉酶)的多核苷酸)的生物体。示例性宿主株系是能够表达感兴趣的蛋白质的微生物细胞(例如,细菌、丝状真菌和酵母)和植物细胞。术语“宿主细胞”包括由细胞产生的原生质体。
如本文所用,术语“接种物组合物”和“接种物”是指包含微生物细胞和/或孢子的组合物,当条件(例如,温度、湿度、营养物可利用性、pH等)有利于萌发和/或微生物生长时,所述细胞/孢子能够在合适的生长培养基或基质(例如,土壤)上或其中繁殖/萌发。
如本文所用,当用于描述将核酸序列插入细胞中时,术语“引入”涵盖如本领域已知的“转染”、“转化”或“转导”。
如本文所用,术语“分离的”是指已从至少一种其他材料或组分(包括但不限于其他蛋白质、核酸、细胞等)中分离的多肽、核酸、细胞或其他指定材料或组分。因此,分离的多肽、核酸、细胞或其他材料呈自然界中不存在的形式。分离的多肽包括但不限于含有在宿主细胞中表达的分泌性多肽的培养液。
如本文所用,术语“异构体”包括其所指化合物和/或分子的所有立体异构体,包括对映异构体和非对映异构体,以及所有构象异构体、旋转异构体和互变异构体,除非另有说明。本文披露的化合物和/或分子包括基本上纯的左旋或右旋形式、或处于外消旋混合物或处于任何比例的对映异构体的所有对映异构体。在实施例披露了(D)-对映异构体的情况下,该实施例还包括(L)-对映异构体;在实施例披露了(L)-对映异构体的情况下,该实施例还包括(D)-对映异构体。在实施例披露了(+)-对映异构体的情况下,该实施例还包括(-)-对映异构体;在实施例披露了(-)-对映异构体的情况下,该实施例还包括(+)-对映异构体。在实施例披露了(S)-对映异构体的情况下,该实施例还包括(R)-对映异构体;在实施例披露了(R)-对映异构体的情况下,该实施例还包括(S)-对映异构体。实施例旨在包括处于非对映异构体纯的形式和处于所有比例的混合物形式的本文提及的化合物和/或分子的任何非对映异构体。除非在化学结构或化学名称中清楚地指明立体化学,否则化学结构或化学名称旨在包括描绘的化合物和/或分子的所有可能的立体异构体、构象异构体、旋转异构体以及互变异构体。
如本文所用,术语“成熟多肽”是指在N-末端和/或C-末端加工(例如,信号肽的去除)后呈其成熟形式的多肽。
如本文所用,术语“成熟多肽编码序列”是指编码成熟多肽的多核苷酸。
如本文所用,术语“经改良微生物株系”是指从分离自自然界的株系改良的微生物株系。经改良微生物株系可以通过任何合适的一种或多种方法产生,包括但不限于对株系内任何基因组内的多核苷酸进行化学或其他形式的诱导突变;在株系内的任何基因组内插入或缺失一个或多个核苷酸,或其组合;使株系内的任何基因组内的至少一个DNA区段倒位;使株系内任何基因组重排;将纯合或杂合多核苷酸区段广泛或特异性转导到株系内的任何基因组中;将一种或多种噬菌体引入株系的任何基因组中;转化任何株系,导致将稳定复制的自主染色体外DNA引入株系;作为与任何不同微生物株系接合的结果,对从自然界分离的株系内的任何基因组或总DNA组成进行任何变化;以及前述的任何组合。术语经改良微生物株系包括具有以下项的株系:(a)一种或多种异源核苷酸序列,(b)从自然界分离的核苷酸序列的一个或多个非天然存在的拷贝(即,在衍生出经改良微生物株系的微生物株系中天然存在的基因的另外的拷贝),(c)通过例如缺失核苷酸序列而缺少原本存在于天然参考株系中的一个或多个核苷酸序列,以及(d)添加的染色体外DNA。在一些实施例中,改良微生物株系包含两个或更多个核苷酸序列(例如,两个或更多个天然存在的基因,这些基因不天然存在于相同的微生物株系中)的组合,或在与天然基因座不同的基因座处包含从自然界分离的核苷酸序列。
如本文所用,术语“原初的”是指天然存在于宿主细胞中的多核苷酸或多肽。
如本文所用,术语“天然存在的”是指在自然界中发现的任何物质(例如,蛋白质、氨基酸或核酸序列)。相反地,术语“非天然存在的”是指在自然界中未发现的任何物质(例如,在实验室中产生的重组核酸和蛋白质序列、野生型序列的修饰、包含一种或多种合成组分的制剂、包含原本天然存在的组分的人工组合的制剂)。
如本文所用,术语“非水性”是指包含不超过痕量的水(即,基于组合物的总重量按重量计不超过0.5%的水)的组合物。
如本文所用,术语“营养物”是指可用于滋养植物的化合物或元素(例如,植物生长和/或发育所必需的维生素、常量矿物质、微量营养、痕量矿物质、有机酸等)。
如本文所用,术语“多核苷酸”涵盖DNA、RNA、异源双链体和能够编码多肽的合成分子。多核苷酸可以是单链的或双链的,并且可包含化学修饰。术语“核酸”和“多核苷酸”可互换使用。因为遗传密码是简并的,所以可使用多于一个密码子来编码特定氨基酸,并且本发明组合物和方法涵盖编码特定氨基酸序列的核苷酸序列。除非另有说明,否则核酸序列以5'至3'取向呈现。
如本文所用,术语“核酸构建体”是指分离自天然存在的基因或以原本不存在于自然界中的方式被修饰以含有核酸的区段或是合成的并且包含可操作地连接到核酸序列的一个或多个控制序列的单链或双链多核苷酸。
如本文所用,术语“可操作地连接”意指指定组分处于允许它们以预期方式起作用的关系(包括但不限于并置)。例如,调节序列可操作地连接到编码序列,使得编码序列的表达处于调节序列的控制之下。
如本文所用,术语“磷酸盐溶解微生物”是指能够将不溶性磷酸盐转化为可溶形式的磷酸盐的微生物。
如本文所用,术语“植物病原有害生物”包括对植物产生负面影响的任何生物体或病毒,包括但不限于传播病害、损害宿主植物和/或竞争土壤营养物的生物体和病毒。术语“植物病原有害生物”涵盖已知与植物相关并对植物的健康和/或活力造成不利影响的生物体和病毒。植物病原有害生物包括但不限于蛛形纲动物(例如螨、蜱、蜘蛛等)、细菌、真菌、腹足类动物(例如蛞蝓、蜗牛等)、侵入性植物(例如杂草)、昆虫(例如白蝇、蓟马、象鼻虫等)、线虫(例如根节线虫、大豆胞囊线虫等)、啮齿动物和病毒(例如烟草花叶病毒(TMV)、番茄斑萎病毒(TSWV)、花椰菜花叶病毒(CaMV)等)。
如本文所用,术语“植物”包括所有植物群体,包括但不限于农业、园艺和造林植物。术语“植物”涵盖通过常规植物育种和优化方法(例如标记辅助选择)获得的植物和通过基因工程获得的植物,包括可受植物育种者权利保护和不受保护的栽培种。
如本文所用,术语“植物细胞”是指完整植物的细胞、取自植物的细胞或来源于取自植物的细胞的细胞。因此,术语“植物细胞”包括种子、悬浮培养物、胚、分生组织区、愈伤组织、叶片、芽、配子体、孢子体、花粉和小孢子内的细胞。
如本文所用,术语“植物生长调节剂”是指其施用通过对植物的直接生理作用加速或延迟植物的生长/成熟速率或通过对植物的直接生理作用以其他方式改变植物的行为的药剂或药剂组合。“植物生长调节剂”不应解释为包括Federal Insecticide,Fungicide,and Rodenticide Act[联邦杀昆虫剂、杀真菌剂和灭鼠剂法](7U.S.C.§136(v))的第2(v)节中陈述的“植物调节剂”定义中排除的任何药剂或药剂组合。因此,“植物生长调节剂”不涵盖施用于植物、植物部分或植物生长培养基用以增强营养物的可利用性和/或摄取的微生物,正常植物生长所必需的营养物,用于改善有利于植物生长的土壤特征所施用的土壤改良剂或40C.F.R.§152.6(f)定义的维生素激素产品。
如本文所用,术语“植物部分”是指植物的任何部分,包括来源于植物的细胞和组织。因此,术语“植物部分”可以是指任何植物组分或器官(例如叶片、茎、根等)、植物组织、植物细胞和种子。植物部分的实例包括但不限于花药、胚、花、果实、子实体、叶片、胚珠、花粉、根茎、根、种子、芽、茎和块茎、以及接穗、砧木、原生质体、愈伤组织等。
如本文所用,术语“植物繁殖材料”是指可以由其生成完整植物的植物部分。植物繁殖材料的实例包括但不限于可以培养成完整植物的插条(例如叶片、茎)、根茎、种子、块茎和细胞/组织。
如本文所用,术语“蛋白质”并不意味着指特定氨基酸链长度,并且涵盖肽、寡肽和多肽。应当理解,术语“蛋白质”还涵盖组合形成编码产物的两种或更多种多肽,以及杂合多肽和融合多肽。
如本文所用,术语“纯化的”是指如通过本领域熟知的分析技术测定的基本上不含其他组分的多核苷酸、蛋白质或细胞(例如,纯化的多核苷酸或蛋白质可在电泳凝胶、色谱洗出液和/或经受密度梯度离心的介质中形成离散条带)。纯化的多核酸或蛋白质是至少约50%纯的,通常是至少约60%、约65%、约70%、约75%、约80%、约85%、约90%、约91%、约92%、约93%、约94%、约95%、约96%、约97%、约98%、约99%、约99.5%、约99.6%、约99.7%、约99.8%或更加纯的(例如,按重量计或以摩尔计的百分比)。在相关意义上,当在应用纯化或富集技术之后分子的浓度大幅度增加时,组合物富集了该分子。术语“富集的”是指以高于起始组合物的相对或绝对浓度存在于组合物中的化合物、多核苷酸、蛋白质、细胞、核酸、氨基酸或其他指定材料或组分。
在一个方面,如本文所用的术语“纯化的”是指蛋白质或细胞基本上不含来自生产生物体的组分(尤其是不溶性组分)。在其他方面,术语“纯化的”是指蛋白质基本上不含来自从中获得其的原初生物体的不溶性组分(尤其是不溶性组分)。在一个方面,将蛋白质与从中回收其的生物体和培养基的一些可溶性组分分离。可通过单元操作过滤、沉淀或色谱法中的一种或多种来纯化(即,分离)蛋白质。
相应地,可纯化蛋白质,使得仅存在少量的其他蛋白质,特别是其他蛋白质。如本文所用的术语“纯化的”可指去除存在于蛋白质来源的细胞中的其他组分,特别是其他蛋白质并且最特别是其他酶。蛋白质可以是“基本上纯的”,即不含来自产生其的生物体(例如,用于重组产生蛋白质的宿主生物体)的其他组分。在一个方面,按制备物中存在的总蛋白质材料的重量计,蛋白质是至少40%纯的。在一个方面,按制备物中存在的总蛋白质材料的重量计,蛋白质是至少50%、60%、70%、80%或90%纯的。如本文所用,“基本上纯的蛋白质”可表示含有按重量计至多10%、优选地至多8%、更优选地至多6%、更优选地至多5%、更优选地至多4%、更优选地至多3%、甚至更优选地至多2%、最优选地至多1%并且甚至最优选地至多0.5%的蛋白质与其天然或重组缔合的其他蛋白质材料的蛋白质制备物。
因此,优选的是按制备物中存在的总蛋白质材料的重量计,基本上纯的蛋白质是至少92%纯的、优选地至少94%纯的、更优选地至少95%纯的、更优选地至少96%纯的、更优选地至少97%纯的、更优选地至少98%纯的、甚至更优选地至少99%纯的、最优选地至少99.5%纯的。本披露的蛋白质优选地呈基本上纯的形式(即,制备物基本上不含其他蛋白质材料)。这可以例如通过由熟知的重组方法或通过经典的纯化方法制备蛋白质来实现。
如本文所用,术语“重组”以其常规含义使用,是指对核酸序列进行操纵(例如,切割和重接)以形成与在自然界中发现的序列群不同的序列群。术语重组指已从其原初状态修饰的细胞、核酸、蛋白质或载体。因此,例如,重组细胞表达在原初(非重组)形式的细胞内未发现的基因,或与在自然界中发现的相比,以不同水平表达或在不同条件下表达原初基因。术语“重组”与“遗传修饰的”和“转基因的”同义。
如本文所用,术语“回收(recover)”和“回收(recovery)”是指从选自细胞、核酸或其他指定材料的列表的至少一种发酵液组分中去除蛋白质,例如通过以下方法从整个发酵液或从无细胞发酵液中回收蛋白质:通过蛋白质晶体收获、通过过滤(例如,深度过滤(通过使用助滤剂或填充过滤介质、箱式过滤器中的布过滤、转鼓过滤、鼓过滤、旋转真空鼓过滤、烛式过滤器、水平叶过滤器或类似物、在框架式或模块化装置中使用片状或垫式过滤)或膜过滤(使用板过滤、模块过滤、烛式过滤、微过滤、横流、动态横流或死端操作中的超滤))或者通过离心(使用卧式离心机、圆盘堆式离心机、水式漩涡分离器(hyrdo cyclone)或类似物)或者通过沉淀蛋白质并使用相关的固-液分离方法以通过使用粒度分级分离从肉汤培养基中收获蛋白质。回收涵盖蛋白质的分离和/或纯化。
如本文所用,两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性由参数“序列同一性”描述。
出于本披露的目的,使用如在EMBOSS软件包(EMBOSS:欧洲分子生物学开放软件包(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite[欧洲分子生物学开放软件套件],Rice等人,2000,Trends Genet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选6.6.0版本或更新版本)的Needle程序中所实施的Needleman-Wunsch算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列同一性作为“最长同一性”的输出。使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。为了使Needle程序报告最长同一性,必须在命令行中指定-nobrief选项。Needle标记的“最长同一性”的输出计算如下:
(相同的残基×100)/(比对长度-比对中的空位总数)
出于本披露的目的,使用尼德曼-翁施算法(Needleman和Wunsch,1970,同上)来确定两个多核苷酸序列之间的序列同一性作为“最长同一性”的输出,该算法如EMBOSS软件包(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite[欧洲分子生物学开放软件套件],Rice等人,2000,同上)(优选6.6.0版本或更新版本)的Needle程序所实施的。使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5以及EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版本)取代矩阵。为了使Needle程序报告最长同一性,必须在命令行中指定非简化(nobrief)选项。Needle标记的“最长同一性”的输出计算如下:
(相同的脱氧核糖核苷酸×100)/(比对长度-比对中的空位总数)
如本文所用,术语“信号肽”是指附接到蛋白质的N-末端部分的氨基酸序列,该序列促进蛋白质分泌到细胞外。细胞外蛋白的成熟形式缺乏信号肽,该信号肽在分泌过程中被切割掉。
如本文所用,术语“稳定化合物”和“稳定剂”是指其施用增强酶的稳定性的药剂或药剂组合。
如本文所用,术语“子序列”是指成熟蛋白质编码序列的5'和/或3'端缺少一个或多个核苷酸的多核苷酸;其中子序列编码具有酶活性的片段。
如本文所用,术语“变体”是指在一个或多个位置处包含人为突变(即,取代、插入(包括延伸)和/或缺失(例如,截短))的蛋白质。取代意指用不同的氨基酸替代占据某一位置的氨基酸;缺失意指去除占据某一位置的氨基酸;并且插入意指与占据一个位置的氨基酸相邻并紧接其后添加1-5个氨基酸(例如,1-3个氨基酸,特别是1个氨基酸)。
如本文所用,关于氨基酸序列或核酸序列的术语“野生型”意指该氨基酸序列或核酸序列是原初的或天然存在的序列。
尽管在下文中将参照其实施例描述本披露的某些方面,但本领域普通技术人员将理解的是,在不脱离如权利要求所定义的本披露的精神和范围的情况下,可以在其中进行形式和细节上的各种改变。
本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献通过引用以其全文并入,除非它们与本文明确阐述的任何披露相矛盾。
本披露提供了可用于预防、治疗、抑制、消除由各种有害生物(包括但不限于园艺有害生物,诸如螨虫、细菌、真菌、腹足类动物、昆虫、线虫、卵菌、原生动物和杂草)引起的侵染/感染和/或降低其严重性的蛋白质,以及包含此类蛋白质的制剂、编码此类蛋白质的多核苷酸、表达此类蛋白质的生物体,以及在农业和其他努力领域中使用此类蛋白质、制剂、多核苷酸和生物体的方法。
本披露涵盖具有一种或多种催化活性的蛋白质,包括但不限于能够表现出属于酶委员会分类编号1(EC 1)、酶委员会分类编号3(EC 3)和/或酶委员会分类编号4(EC 4)的一种或多种催化活性的蛋白质。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 1的催化活性。例如,在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出葡萄糖氧化酶、纤维二糖脱氢酶、虫漆酶、过氧化氢酶和/或过氧化物酶活性,可用于预防、治疗、抑制、消除由有害生物(诸如螨虫、细菌、真菌、腹足类动物、昆虫、线虫、卵菌和原生动物)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1的氧化还原酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:1-12所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 1.1的氧化还原酶活性,诸如属于EC 1.1.3的氧化酶活性(例如,属于EC 1.1.3.4的葡萄糖氧化酶活性和/或属于EC 1.1.3.25的纤维二糖脱氢酶活性)。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.1的氧化还原酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:1-8所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.1.3的氧化酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:1-8所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.1.3.4的葡萄糖氧化酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:1-5所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.1.3.25(现在包括在EC1.1.99.18中)的纤维二糖脱氢酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:6-8所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 1.10的氧化还原酶活性,诸如属于EC 1.10.3的活性(例如,属于EC 1.10.3.2的虫漆酶活性)。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.10的氧化酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.10.3的氧化酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.10.3.2的虫漆酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 1.11的氧化还原酶活性,诸如属于EC 1.11.1的过氧化物酶活性(例如,属于EC 1.11.1.6的过氧化氢酶活性和/或属于1.11.1.7的过氧化物酶活性)。
在一些实施例中,本披露的酶表现出属于EC 1.11的过氧化物酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:10-12所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.11.1的过氧化物酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:10-12所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.11.1.6的过氧化氢酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:10-11所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.11.1.7的过氧化物酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 1.14的加氧酶活性,诸如属于1.14.99的加氧酶活性(例如,属于EC 1.14.99.56的裂解纤维素单加氧酶活性)。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.14的加氧酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:98-99所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.14.99的加氧酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:98-99所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 1.14.99.56的裂解纤维素单加氧酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:98-99所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 3的催化活性。例如,在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出脂肪酶、三酰甘油脂肪酶、果胶酯酶、磷脂酶、溶血磷脂酶、淀粉酶、葡糖苷酶、半乳糖苷酶、纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、神经酰胺酶、右旋糖酶、几丁质酶、壳聚糖酶、半乳糖醛酸酶(galacturonase)、岩藻糖苷酶、溶菌酶、木糖苷酶、lucosidass、普鲁兰酶、甘露糖苷酶、酰胺酶、天冬酰胺酶、氨基酶(aminidase)、麦芽糖水解酶(maltohydrolase)、纤维二糖苷酶(cellobiosidase)、果胶酶、氨肽酶、丝氨酸肽酶和/或金属肽酶活性,可用于预防、治疗、抑制、消除有害生物诸如螨虫、细菌、真菌、腹足类动物、昆虫、线虫、卵菌和原生动物的侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3的酯酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:13-48、100-148和150所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 3.1的酯酶活性,诸如属于EC 3.1.1的脂肪酶活性(例如,属于EC 3.1.1.3的三酰甘油脂肪酶活性、属于3.1.1.5的溶血磷脂酶活性、属于3.1.1.11的果胶酯酶活性和/或属于3.1.1.32的磷脂酶活性)和属于EC 3.1.4的水解酶活性(例如,属于3.1.4.3的磷脂酶C活性和/或属于3.1.4.11的磷酸肌醇磷脂酶C活性)。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.1的酯酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:13和100-108所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.1.1的酯酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:13和100-106所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.1.1.3的三酰甘油脂肪酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:100-103所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.1.1.5的溶血磷脂酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:13和104所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.1.1.11的果胶酯酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:100-103所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.1.1.32的磷脂酶A1活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:100-103所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 3.2的糖基酶活性,诸如属于EC 3.2.1的糖苷酶活性(例如,属于EC 3.2.1.1的α-淀粉酶活性、属于EC 3.2.1.2的β-淀粉酶活性、属于3.2.1.3的葡聚糖1,4-α-葡糖苷酶活性、属于3.2.1.4的纤维素酶活性、属于3.2.1.6的内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶活性、属于3.2.1.7的菊粉酶活性、属于3.2.1.8的内切-1,4-β-木聚糖酶活性、属于3.2.1.10的低聚-1,6-葡糖苷酶活性、属于3.2.1.11的右旋糖酶活性、属于3.2.1.14的几丁质酶活性、属于3.2.1.15的内切-聚半乳糖醛酸酶(果胶酶)活性、属于3.2.1.17的溶菌酶活性、属于3.2.1.20的α-葡糖苷酶活性、属于3.2.1.21的β-葡糖苷酶活性、属于3.2.1.22的α-半乳糖苷酶活性、属于3.2.1.23的β-半乳糖苷酶活性、属于3.2.1.24的α-甘露糖苷酶活性、属于3.2.1.25的β-甘露糖苷酶活性、属于3.2.1.26的β-果糖呋喃糖苷酶活性、属于3.2.1.28的α,α-海藻糖酶活性、属于3.2.1.32的内切-1,3-β-木聚糖酶活性、属于3.2.1.37的木聚糖1,4-β-木糖苷酶活性、属于3.2.1.39的葡聚糖内切-1,3-β-D-葡糖苷酶活性、属于3.2.1.41的普鲁兰酶活性、属于3.2.1.55的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶活性、属于3.2.1.58的葡聚糖1,3-β-葡糖苷酶活性、属于3.2.1.59的葡聚糖内切-1,3-α-葡糖苷酶活性、属于3.2.1.73的地衣多糖酶活性、属于3.2.1.75的葡聚糖内切-1,6-β-葡糖苷酶活性、属于3.2.1.78的甘露聚糖内切-1,4-β-甘露糖苷酶活性、属于3.2.1.91的1,4-β-纤维二糖苷酶活性、属于3.2.1.97的内切-α-N-乙酰半乳糖苷酶活性、属于3.2.1.101的甘露聚糖内切-1,6-α-甘露糖苷酶活性、属于3.2.1.109的内切半乳糖苷酶活性、属于3.2.1.111的1,3-α-L-岩藻糖苷酶活性、属于3.2.1.112的2-脱氧葡糖苷酶活性、属于3.2.1.132的壳聚糖酶活性、属于3.2.1.133的葡聚糖1,4-α-麦芽糖水解酶活性和/或属于3.2.1.176的1,4-β-纤维二糖苷酶活性)。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2的糖基酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:14-41和109-143所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1的糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:14-41和109-143所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.1的α-淀粉酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:14-16和109-113所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.3的葡聚糖1,4-α-葡糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:17-18所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.4的纤维素酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:19和114-116所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.6的内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:20和150所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.7的菊粉酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:117所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.8的内切-1,4-β-木聚糖酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:21-24和118-120所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.11的右旋糖酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.14的几丁质酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:121-124和141所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.15的内切-聚半乳糖醛酸酶(果胶酶)活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:125所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.17的溶菌酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.21的β-葡糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:126所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.37的木聚糖1,4-β-木糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:127所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.39的葡聚糖内切-1,3-β-D-葡糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:27-28和128所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.41的普鲁兰酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.55的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:129所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.59的葡聚糖内切-1,3-α-葡糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:30和130-131所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.73的地衣多糖酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:132所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.75的葡聚糖内切-1,6-β-葡糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:31-32和133所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.78的甘露聚糖内切-1,4-β-甘露糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:33和134所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.91的1,4-β-纤维二糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:135所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.101的甘露聚糖内切-1,6-α-甘露糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:34和136所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.109的内切半乳糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:35-40和137-138所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.132的壳聚糖酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:139-140所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.133的葡聚糖1,4-α-麦芽糖水解酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:41所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.2.1.176的1,4-β-纤维二糖苷酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:142-143所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 3.4的肽酶活性,诸如属于EC 3.4.11的氨肽酶活性(例如,属于EC 3.4.11.1的亮氨酰氨肽酶活性)、属于EC3.4.21的丝氨酸内肽酶活性(例如,属于EC 3.4.21.19的谷氨酰内肽酶活性和/或属于3.4.21.62的枯草杆菌蛋白酶活性)和属于EC 3.4.24的金属内肽酶活性(例如,属于EC3.4.24.28的杆菌溶素(bacillolysin)活性)。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.4的肽酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:42-48所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.4.21的丝氨酸内肽酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:42-48和144-145所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.4.21.19的谷氨酰内肽酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:43所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.4.21.62的枯草杆菌蛋白酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:44-47和145所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.4.24的金属内肽酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.4.24.28的杆菌溶素活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 3.5的水解酶活性,诸如属于EC 3.5.1的酰胺水解酶和酰胺酶活性(例如,属于EC 3.5.1.1的天冬酰胺酶活性、属于3.5.1.2的谷氨酰胺酶活性、属于3.5.1.4的酰胺酶活性、属于3.5.1.5的脲酶活性、属于3.5.1.12的生物素酶活性、属于3.5.1.19的烟酰胺酶活性、属于3.5.1.35的D-谷氨酰胺酶活性、属于3.5.1.38的谷氨酰胺-(天冬酰胺-)酶活性、属于3.5.1.41的几丁质脱乙酰酶活性、属于3.5.1.43的肽基-谷氨酰胺酶活性、属于3.5.1.44的蛋白质-谷氨酰胺谷氨酰胺酶活性、属于3.5.1.50的戊酰胺酶活性)。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.5的水解酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:146-148所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.5.1的脱乙酰酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:42-48和146-148所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 3.5.1.1的天冬酰胺酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:148所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 4的裂解酶活性。例如,在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出裂解酶活性,可用于预防、治疗、抑制、消除由有害生物(诸如螨虫、细菌、真菌、腹足类动物、昆虫、线虫、卵菌和原生动物)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出一种或多种属于EC 4.2的裂解酶活性,诸如属于EC 4.2.2的多糖裂解酶活性(例如,属于EC 4.2.2.2的果胶裂解酶活性、属于EC4.2.2.10的果胶裂解酶活性、属于EC 4.2.2.13的葡聚糖裂解酶活性、属于EC 4.2.2.25的结冷胶裂解酶活性、属于EC 4.2.2.26的寡-褐藻酸酶裂解酶活性、属于EC 4.2.2.27的果胶单糖裂解酶活性)。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 4.2的裂解酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:149所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 4.2.2的多糖裂解酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:149所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
在一些实施例中,本披露的蛋白质表现出属于EC 4.2.2.2的果胶裂解酶活性,并且任选地包含与本文如SEQ ID NO:149所示的氨基酸序列约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成。
应当理解,本披露延伸至能够表现出两种、三种、四种、五种或更多种不同催化活性的蛋白质(例如,包含具有第一催化活性的第一多肽和具有第二催化活性的第二多肽的融合蛋白)。
还应当理解,本披露的蛋白质不必具有毒性才有效。如下文将进一步详细解释,本披露的蛋白质可通过各种非致死手段发挥其作用,诸如通过降解食物来源减少有害生物被经处理的表面吸引。此外,在许多情况下,本披露的另外情况下有毒的蛋白质可以按非致死剂量使用以增强各种化学杀有害生物剂和生物杀有害生物剂的功效和/或扩大其目标有害生物范围。
表1提供了可用于预防、治疗、抑制、消除由一种或多种有害生物(诸如螨虫、细菌、真菌、昆虫、线虫、卵菌和原生动物)引起的侵染/感染和/或降低其严重性的蛋白质的非穷举列表。
表1.本披露的示例性蛋白质
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在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:1具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:1的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:49或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡萄糖氧化酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:2具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:50或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:2的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:2的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡萄糖氧化酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:3具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:3的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:51或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:3的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:3的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡萄糖氧化酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:4具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:4的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:52或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:4的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:4的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡萄糖氧化酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:5具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:53或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:5的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:5的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡萄糖氧化酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:6具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:6的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:54或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:6的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:6的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有纤维二糖氧化酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:7具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:7的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:55或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:7的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:7的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有纤维二糖氧化酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:8具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:56或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:8的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:8的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有纤维二糖氧化酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:9具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:9的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:57或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:9的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:9的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有虫漆酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:10具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:10的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:58或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:10的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:10的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有过氧化氢酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:11具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:11的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:59或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)由与SEQ ID NO:60或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:11的多肽;
f)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:11的成熟多肽的多肽;
g)衍生自a)至f)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
h)a)至g)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有过氧化氢酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:12具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:12的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:61或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:12的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:12的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有过氧化物酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:13具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:13的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:62或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:13的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:13的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有溶血磷脂酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:14具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:63或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:14的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:14的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-淀粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:15具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:15的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:64或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:15的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:15的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-淀粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:16具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:16的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:65或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:16的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:16的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-淀粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:17具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:17的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:66或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:17的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:17的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有三酰甘油脂肪酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:18具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:18的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:67或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:18的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:18的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有三酰甘油脂肪酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:19具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:19的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:68或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:19的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:19的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有纤维素酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:20具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:20的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:69或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:20的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:20的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:21具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:21的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:70或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:21的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:21的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,4-β-木聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:22具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:22的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:71或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:22的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:22的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,4-β-木聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:23具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:23的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:72或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:23的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:23的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,4-β-木聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:24具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:24的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:73或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:24的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:24的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,4-β-木聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:25具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:25的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:74或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:25的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:25的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有右旋糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:26具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:26的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:75或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:26的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:26的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有溶菌酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:27具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:27的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:76或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:27的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:27的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,3-β-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:28具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:28的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:77或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:28的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:28的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,3-β-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:29具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:29的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:78或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:29的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:29的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有普鲁兰酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:30具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:30的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:79或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:30的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:30的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,3-α-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:31具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:31的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:80或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:31的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:31的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,6-β-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:32具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:32的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:81或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:32的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:32的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,6-β-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:33具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:33的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:82或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:33的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:33的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有甘露聚糖内切-1,4-β-葡萄糖-甘露糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:34具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:34的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:83或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:34的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:34的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有甘露聚糖内切-1,6-α-葡萄糖-甘露糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:35具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:35的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:84或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:35的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:35的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切半乳糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:36具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:36的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:85或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:36的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:36的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切半乳糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:37具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:37的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:86或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:37的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:37的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切半乳糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:38具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:38的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:87或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:38的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:38的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切半乳糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:39具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:39的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:88或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:39的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:39的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切半乳糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:40具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:40的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:89或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:40的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:40的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切半乳糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:41具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:41的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:90或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:41的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:41的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖1,4-α-麦芽糖水解酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:42具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:42的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:91或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:42的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:42的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有丝氨酸内肽酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:43具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:43的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:92或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:43的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:43的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有谷氨酰内肽酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:44具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:44的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:93或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:44的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:44的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有枯草杆菌蛋白酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:45具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:45的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:94或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:45的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:45的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有枯草杆菌蛋白酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:46具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:46的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:95或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:46的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:46的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有枯草杆菌蛋白酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:47具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:47的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:96或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:47的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:47的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有枯草杆菌蛋白酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:48具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:48的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:97或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:48的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:48的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有杆菌溶素活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:98具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:98的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:151或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:98的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:98的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有裂解纤维素单加氧酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:99具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:99的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:152或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:99的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:99的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有裂解纤维素单加氧酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:100具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:100的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:153或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:100的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:100的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有三酰甘油脂肪酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:101具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:101的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:154或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:101的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:101的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有三酰甘油脂肪酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:102具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:102的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:155或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:102的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:102的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有三酰甘油脂肪酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:103具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:103的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:156或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:103的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:6的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有三酰甘油脂肪酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:104具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:104的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:157或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:104的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:104的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有溶血磷脂酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:105具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:105的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:158或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:105的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:105的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有果胶酯酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:106具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:106的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:159或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:106的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:106的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有磷脂酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:107具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:107的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:160或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:107的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:107的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有果胶酯酶C活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:108具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:108的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:59或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)由与SEQ ID NO:161或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:108的多肽;
f)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:108的成熟多肽的多肽;
g)衍生自a)至f)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
h)a)至g)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有磷酸肌醇磷脂酶C活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:109具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:109的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:162或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:109的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:109的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-淀粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:110具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:110的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:163或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:110的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:110的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-淀粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:111具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:111的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:164或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:111的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:111的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-淀粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:112具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:112的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:165或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:112的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:12的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-淀粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:113具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:113的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:166或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:113的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:113的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-淀粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:114具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:114的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:167或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:114的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:114的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有纤维素酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:115具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:115的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:168或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:115的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:115的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有纤维素酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:116具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:116的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:169或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:116的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:116的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有纤维素酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:117具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:117的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:170或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:117的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:117的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有菊粉酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:118具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:118的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:171或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:118的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:118的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,4-β-木聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:119具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:119的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:172或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:119的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:119的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,4-β-木聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:120具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:120的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:173或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:120的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:120的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,4-β-木聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:121具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:121的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:174或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:121的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:121的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有几丁质酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:122具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:122的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:175或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:122的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:122的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有几丁质酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:123具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:123的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:176或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:123的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:123的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有几丁质酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:124具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:124的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:177或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:124的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:124的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有几丁质酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:125具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:125的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:178或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:125的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:125的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-聚半乳糖醛酸酶(果胶酶)活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:126具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:126的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:179或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:126的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:126的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有β-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:127具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:127的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:180或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:127的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:127的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有木聚糖1,4-β-木糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:128具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:128的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:181或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:128的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:128的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,3-β-D-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:129具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:129的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:182或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:129的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:129的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:130具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:130的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:183或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:130的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:130的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,3-α-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:131具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:131的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:184或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:131的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:132的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,3-α-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:132具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:132的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:185或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:132的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:132的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有地衣多糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:133具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:133的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:186或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:133的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:133的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有葡聚糖内切-1,6-β-葡糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:134具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:134的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:187或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:134的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:134的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有甘露聚糖内切-1,4-β-甘露糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:135具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:135的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:188或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:135的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:135的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有1,4-β-纤维二糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:136具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:136的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:189或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:136的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:136的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有甘露聚糖内切-1,6-α-甘露糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:137具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:137的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:190或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:137的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:137的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切半乳糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:138具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:138的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:191或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:138的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:138的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切半乳糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:139具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:139的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:192或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:139的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:139的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有壳聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:140具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:140的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:193或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:140的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:140的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有壳聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:141具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:141的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:194或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:141的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:141的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有几丁质酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:142具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:142的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:195或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:142的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:142的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有1,4-β-纤维二糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:143具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:143的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:196或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:143的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:143的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有1,4-β-纤维二糖苷酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:144具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:144的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:197或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:144的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:144的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有丝氨酸内肽酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:145具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:145的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:198或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:145的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:145的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有枯草杆菌蛋白酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:146具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:146的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:199或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:146的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:146的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有脱乙酰酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:147具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:147的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:200或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:147的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:147的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有脱乙酰酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:148具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:148的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:201或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:148的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:148的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有天冬酰胺酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:149具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:149的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:202或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:149的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:149的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有果胶裂解酶活性。
在一些实施例中,蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:150具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:150的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:203或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:150的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:150的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段
其中多肽具有内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶活性。
在一些实施例中,蛋白质包含野生型多肽、基本上由该野生型多肽组成或者由该野生型多肽组成。例如,在一些实施例中,蛋白质包含与SEQ ID NO:1-48和98-150中任一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的野生型多肽、基本上由该野生型多肽组成或者由该野生型多肽组成。
在一些实施例中,蛋白质包含变体多肽、基本上由该变体多肽组成或者由该变体多肽组成。例如,在一些实施例中,蛋白质包含与SEQ ID NO:1-48和98-150中任一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的变体多肽、基本上由该变体多肽组成或者由该变体多肽组成。
在一些实施例中,蛋白质包含催化结构域、结合模块和所述催化结构域与所述结合模块之间的接头、基本上由这些部分组成或者由这些部分组成。
在一些实施例中,蛋白质包含两个或更多个催化结构域。
在一些实施例中,蛋白质包含两个或更多个结合模块。
在一些实施例中,蛋白质是包含第一多肽和第二多肽的融合蛋白,所述第二多肽不同于所述第一多肽,其中所述第一多肽选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或多个具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
g)a)至f)中任一项的多肽的片段,并且任选地
其中所述第二多肽选自由以下项组成的组:
h)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或多个具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
i)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
j)由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
k)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的多肽;
l)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的多肽;
m)衍生自h)至l)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及
n)h)至m)中任一项的多肽的片段。
在优选的实施例中,本披露的蛋白质包含SEQ ID NO:1-48和98-150中任一个的氨基酸序列或其成熟多肽、基本上由该氨基酸序列或其成熟多肽组成或由该氨基酸序列或其成熟多肽组成。
在优选的实施例中,本披露的蛋白质由包含SEQ ID NO:49-97和151-203中的一个或其cDNA、基本上由该一个或其cDNA组成或者由该一个或其cDNA组成的多核苷酸编码。
在一些实施例中,本披露的蛋白质包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个的片段或其成熟肽、基本上由该片段或其成熟肽组成或者由该片段或其成熟肽组成。例如,蛋白质可以是SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的片段或其成熟肽,所述片段包含在原始蛋白质中发现的至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的氨基酸。
如上所述,在一些实施例中,本披露的蛋白质包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽、基本上由该任一个或其成熟多肽组成或者由该任一个或其成熟多肽组成,该多肽具有一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的N-末端延伸、一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的C-末端延伸、一个或多个取代(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个取代)、一个或多个插入(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个插入)和/或一个或多个缺失(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个缺失)。氨基酸改变可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地为1-30个氨基酸的小缺失;小的氨基末端或羧基末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的小接头肽;或小的延伸,其通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合模块)来促进纯化。
可以根据本领域中已知的程序,如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(Cunningham和Wells,1989,Science[科学]244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一项技术中,在分子中的每个残基处引入单个丙氨酸突变,并且测试所得分子的催化活性以鉴定对于该分子的活性关键的氨基酸残基。还参见,Hilton等人,1996,J.Biol.Chem.[生物化学杂志]271:4699-4708。酶或其他生物学相互作用的活性位点还可以通过对结构的物理分析来确定,如由如以下技术确定:核磁共振、晶体学(crystallography)、电子衍射、或光亲和标记,连同对推定的接触位点氨基酸进行突变。参见例如,de Vos等人,1992,Science[科学]255:306-312;Smith等人,1992,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]224:899-904;Wlodaver等人,1992,FEBS Lett.[欧洲生化学会联合会快报]309:59-64。必需氨基酸的同一性也可以从与相关多肽的比对推断,以及/或者从与相关多肽或者多肽或蛋白质家族内与来自共同祖先的多肽/蛋白质(通常具有相似的三维结构、功能和显著的序列相似性)的序列同源性和保守催化机制推断。附加地或可替代地,蛋白质结构预测工具可以用于蛋白质结构建模以鉴定多肽的必需氨基酸和/或活性位点。参见例如Jumper等人,2021,“Highly accurateprotein structure prediction with AlphaFold[利用α折叠进行高度准确的蛋白质结构预测]”,Nature[自然]596:583-589。
使用已知的诱变、重组和/或改组方法,随后进行相关的筛选程序可以做出单或多氨基酸取代、缺失和/或插入并对其进行测试,该相关的筛选程序例如由Reidhaar-Olson和Sauer,1988,Science[科学]241:53-57;Bowie和Sauer,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]86:2152-2156;WO 95/17413;或WO 95/22625披露的那些。其他可以使用的方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如Lowman等人,1991,Biochemistry[生物化学]30:10832-10837;US 5223409;WO 92/06204)以及区域定向诱变(Derbyshire等人,1986,Gene[基因]46:145;Ner等人,1988,DNA 7:127)。
诱变/改组方法可以与高通量、自动化的筛选方法组合以检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(Ness等人,1999,Nature Biotechnology[自然生物技术]17:893-896)。可从宿主细胞回收编码活性多肽的诱变的DNA分子,并使用本领域的标准方法快速测序。这些方法允许快速确定多肽中各个氨基酸残基的重要性。
在一些实施例中,蛋白质是融合蛋白(例如,包含具有第一酶活性的第一多肽和具有第二酶活性的第二多肽的融合蛋白)。
在一些实施例中,蛋白质是杂合蛋白。
在一些实施例中,蛋白质是分离的。
在一些实施例中,蛋白质是纯化的。
应当理解,本披露的蛋白质可从任何属的微生物获得。出于本披露的目的,如本文结合给定来源使用的术语“从……获得”应当意指由多核苷酸编码的蛋白质是由该来源或由已经插入本披露的多核苷酸的株系产生的。在一个方面,从给定来源获得的蛋白质被分泌到细胞外。
在一些实施例中,蛋白质从革兰氏阴性细菌(诸如弯曲菌属(Campylobacter)、网团菌属(Dicytoglomus)(例如,嗜热网团菌(D.thermophilum))、埃希氏菌属(Escherichia)(例如,大肠杆菌(E.coli))、黄杆菌属(Flavobacterium)、梭杆菌属(Fusobacterium)、螺杆菌属(Helicobacter)、泥杆菌属(Ilyobacter)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙门氏菌属(Salmonella)或脲原体属(Ureaplasma))获得。
在一些实施例中,蛋白质从革兰氏阳性细菌(诸如芽孢杆菌属(Bacillus)(例如,粘琼脂芽孢杆菌(B.agaradhaerens)、嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alkalophilus)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、短芽孢杆菌(Bacillus brevis)、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)、克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)、凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)、脱支芽孢杆菌(B.deramificans)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、灿烂芽孢杆菌(Bacillus lautus)、迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)、嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis))、梭菌属(Clostridium)、肠球菌属(Enterococcus)、地芽孢杆菌属(Geobacillus)、乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、大洋芽孢杆菌属(Oceanobacillus)(例如,芭芭拉大洋芽孢杆菌(O.barbara))、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)(例如,似马链球菌(Streptococcus equisimilis)、酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)、乳房链球菌(Streptococcus uberis)和马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equisubsp.Zooepidemicus))或链霉菌属(Streptomyces)(例如,不产色链霉菌(Streptomycesachromogenes)、除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)、天蓝链霉菌(Streptomycescoelicolor)、灰色链霉菌(Streptomyces griseus)、浅青紫链霉菌(Streptomyceslividans))获得。
在一些实施例中,蛋白质从真菌(诸如支顶孢属(Acremonium)、曲霉属(Aspergillus)(例如,棘孢曲霉(A.aculeatus)、泡盛曲霉(Aspergillus awamori)、臭曲霉(Aspergillus foetidus)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、日本曲霉(Aspergillusjaponicus)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米曲霉(Aspergillus oryzae))、金黄担子菌属(Aureobasidium)、烟管菌属(Bjerkandera)(例如,多孔烟管菌(Bjerkandera adusta))、拟蜡菌属(Ceriporiopsis)(例如,干拟蜡菌(Ceriporiopsis aneirina)、卡内基拟蜡菌(Ceriporiopsis caregiea)、浅黄拟蜡菌(Ceriporiopsis gilvescens)、潘诺希塔拟蜡菌(Ceriporiopsis pannocinta)、环带拟蜡菌(Ceriporiopsis rivulosa)、微红拟蜡菌(Ceriporiopsis subrufa)、虫拟蜡菌(Ceriporiopsis subvermispora))、毛壳菌属(Chaetomium)(例如,无定毛壳菌(C.erraticum))、金孢子菌属(Chrysosporium)(例如,狭边金孢子菌(Chrysosporiuminops)、嗜角质金孢子菌(Chrysosporium keratinophilum)、卢克诺文思金孢子菌(Chrysosporium lucknowense)、粪状金孢子菌(Chrysosporium merdarium)、毡金孢子菌(Chrysosporium pannicola)、昆士兰金孢子菌(Chrysosporiumqueenslandicum)、热带金孢子菌(Chrysosporium tropicum)、带纹金孢子菌(Chrysosporium zonatum))、鬼伞属(Coprinus)(例如,灰盖鬼伞(Coprinus cinereus))、革盖菌属(Coriolus)(例如,毛革盖菌(Coriolus hirsutus))、隐球菌属(Cryptococcus)、丝梗霉属(Filibasidium)、镰孢属(Fusarium)(例如,杆孢状鐮孢(Fusariumbactridioides)、谷类镰孢(Fusarium cerealis)、库威镰孢(Fusarium crookwellense)、大刀镰孢(Fusarium culmorum)、禾谷镰孢(Fusarium graminearum)、禾赤镰孢(Fusariumgraminum)、异孢镰孢(Fusarium heterosporum)、合欢木镰孢(Fusarium negundi)、尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)、多枝镰孢(Fusarium reticulatum)、粉红镰孢(Fusariumroseum)、接骨木镰孢(Fusarium sambucinum)、肤色镰孢(Fusarium sarcochroum)、茄病镰孢(F.solani)、拟分枝孢镰孢(Fusarium sporotrichioides)、硫色镰孢(Fusariumsulphureum)、圆镰孢(Fusarium torulosum)、拟丝孢镰孢(Fusarium trichothecioides)、金大刀镰孢(Fusarium venenatum))、腐质霉属(Humicola)(例如,特异腐质霉(Humicolainsolens)、柔毛腐质霉(Humicola lanuginosa))、巨座壳属(Magnaporthe)、微座孢属(Microdochium)(例如,雪腐微座孢(M.nivale))、毛霉属(Mucor)(例如,米黑毛霉(Mucormiehei))、毁丝霉属(Myceliophthora)(例如,嗜热毁丝霉(Myceliophthorathermophila))、新美鞭菌属(Neocallimastix)、脉孢菌属(Neurospora)(例如,粗糙脉孢菌(Neurospora crassa))、拟青霉属(Paecilomyces)、青霉菌属(Penicillium)(例如,产紫青霉菌(Penicillium purpurogenum))、原毛平革菌属(Phanerochaete)(例如,黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium))、射脉菌属(Phlebia)(例如,侧射脉菌(Phlebiaradiata))、梨囊鞭菌属(Piromyces)、侧耳属(Pleurotus)(例如,刺芹侧耳(Pleurotuseryngii))、裂褶菌属(Schizophyllum)、踝节菌属(Talaromyces)(例如,埃默森踝节菌(Talaromyces emersonii))、嗜热子囊菌属(Thermoascus)(例如,橙色嗜热子囊菌(T.aurantiacus))、梭孢壳属(Thielavia)(例如,太瑞斯梭孢壳(Thielaviaterrestris))、弯颈霉属(Tolypocladium)、栓菌属(Trametes)(例如,长绒毛栓菌(Trametes villosa)、变色栓菌(Trametes versicolor))或木霉属(Trichoderma)(例如,深绿木霉(T.atroviride)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、康宁木霉(Trichodermakoningii)、长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)、里氏木霉(Trichoderma reesei)、绿色木霉(Trichoderma viride))获得。
在一些实施例中,蛋白质从酵母(诸如假丝酵母属(Candida)、汉逊酵母属(Hansenula)、克鲁维酵母属(Kluyveromyces)(例如,乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis))、毕赤酵母属(Pichia)、酵母属(Saccharomyces)(例如,卡尔酵母(Saccharomycescarlsbergensis)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、糖化酵母(Saccharomycesdiastaticus)、道格拉氏酵母(Saccharomyces douglasii)、克鲁弗酵母(Saccharomyceskluyveri)、诺地酵母(Saccharomyces norbensis)、卵形酵母(Saccharomycesoviformis))、裂殖酵母属(Schizosaccharomyces)或耶氏酵母属(Yarrowia)(例如,解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica))获得。
应当理解,对于前述物种,本披露涵盖完美和不完美状态,以及其他分类学等同物,例如无性型,而与它们已知的物种名无关。本领域的技术人员会容易地识别适当等同物的身份。
可使用上文提及的探针从其他来源(包括从自然界(例如,土壤、堆肥、水等)分离的微生物或从天然材料(例如,土壤、堆肥、水等)直接获得的DNA样品)中鉴定并获得蛋白质。用于从天然生境中直接分离微生物和DNA的技术是本领域熟知的。然后可通过类似地筛选另一微生物的基因组DNA或cDNA文库或者混合的DNA样品来获得编码该蛋白质的多核苷酸。一旦已经用探针检测到编码蛋白质的多核苷酸,就可以通过利用本领域的普通技术人员已知的技术来分离或克隆该多核苷酸(参见例如,Davis等人,2012,Basic Methods inMolecular Biology[分子生物学的基本方法],Elsevier[爱思唯尔公司])。
应当理解,本披露的蛋白质可使用任何合适的方法来产生,包括但不限于摇瓶培养和大规模发酵(包括连续、分批、补料分批、基于固态和/或微载体的发酵)方法。
本披露延伸至产生本披露的蛋白质的方法,这些方法包括(a)在有益于产生该蛋白质的条件下培养细胞,该细胞以其野生型形式产生该蛋白质;以及任选地(b)回收该蛋白质。
在一些实施例中,细胞是革兰氏阴性细菌细胞,诸如弯曲菌属、埃希氏菌属(例如,大肠杆菌)、黄杆菌属、梭杆菌属、螺杆菌属、泥杆菌属、奈瑟氏菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属或脲原体属。
在一些实施例中,细胞是革兰氏阳性细菌细胞,诸如芽孢杆菌属(例如,嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alkalophilus)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、短芽孢杆菌(Bacillus brevis)、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)、克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、脱支芽孢杆菌(B.deramificans)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、灿烂芽孢杆菌(Bacillus lautus)、迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis))、梭菌属(Clostridium)、肠球菌属(Enterococcus)、地芽孢杆菌属(Geobacillus)、乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、大洋芽孢杆菌属(Oceanobacillus)(例如,芭芭拉大洋芽孢杆菌(O.barbara))、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)(例如,似马链球菌(Streptococcusequisimilis)、酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)、乳房链球菌(Streptococcusuberis)和马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.Zooepidemicus))或链霉菌属(Streptomyces)(例如,不产色链霉菌(Streptomyces achromogenes)、除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)、天蓝链霉菌(Streptomyces coelicolor)、灰色链霉菌(Streptomyces griseus)、浅青紫链霉菌(Streptomyces lividans))获得。
在一些实施例中,细胞是真菌细胞,诸如支顶孢属、曲霉属(例如,泡盛曲霉、臭曲霉、烟曲霉、日本曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、米曲霉)、金黄担子菌属、烟管菌属(例如,多孔烟管菌)、拟蜡菌属(例如,干拟蜡菌、卡内基拟蜡菌、浅黄拟蜡菌、潘诺希塔拟蜡菌、环带拟蜡菌、微红拟蜡菌、虫拟蜡菌)、金孢子菌属(例如,狭边金孢子菌、嗜角质金孢子菌、卢克诺文思金孢子菌、粪状金孢子菌、毡金孢子菌、昆士兰金孢子菌、热带金孢子菌、带纹金孢子菌)、鬼伞属(例如,灰盖鬼伞)、革盖菌属(例如,毛革盖菌)、隐球菌属、丝梗霉属、镰孢属(例如,杆孢状鐮孢、谷类镰孢、库威镰孢、大刀镰孢、禾谷镰孢、禾赤镰孢、异孢镰孢、合欢木镰孢、尖孢镰孢、多枝镰孢、粉红镰孢、接骨木镰孢、肤色镰孢、拟分枝孢镰孢、硫色镰孢、圆镰孢、拟丝孢镰孢、金大刀镰孢)、腐质霉属(例如,特异腐质霉、柔毛腐质霉)、巨座壳属、毛霉属(例如,米黑毛霉)、毁丝霉属(例如,嗜热毁丝霉)、新美鞭菌属、脉孢菌属(例如,粗糙脉孢菌)、拟青霉属、青霉菌属(例如,产紫青霉菌)、原毛平革菌属(例如,黄孢原毛平革菌)、射脉菌属(例如,侧射脉菌)、梨囊鞭菌属、侧耳属(例如,刺芹侧耳)、裂褶菌属、踝节菌属(例如,埃默森踝节菌)、嗜热子囊菌属、梭孢壳属(例如,太瑞斯梭孢壳)、弯颈霉属、栓菌属(例如,长绒毛栓菌、变色栓菌)或木霉属(例如,哈茨木霉、康宁木霉、长枝木霉、里氏木霉、绿色木霉)。
在一些实施例中,细胞是酵母细胞,诸如假丝酵母属、汉逊酵母属、克鲁维酵母属(例如,乳酸克鲁维酵母)、毕赤酵母属、酵母属(例如,卡尔酵母、酿酒酵母、糖化酵母、道格拉氏酵母、克鲁弗酵母、诺地酵母、卵形酵母)、裂殖酵母属或耶氏酵母属(例如,解脂耶氏酵母)。
本披露还延伸至产生本披露的蛋白质的方法,这些方法包括(a)在有益于产生该蛋白质的条件下培养本披露的重组宿主细胞;以及任选地(b)回收该蛋白质。
在适合使用本领域中已知的方法产生该蛋白质的营养培养基中培养细胞。例如,可在合适的培养基中并且在允许表达和/或分离该蛋白质的条件下通过摇瓶培养或者在实验室或工业发酵罐中小规模或大规模发酵(包括连续、分批、补料分批或基于固态和/或微载体的发酵)来培养细胞。适合的培养基可从商业供应商获得或可根据公开的组成(例如,在美国典型培养物保藏中心的目录中)制备。如果蛋白质被分泌到营养培养基中,则可以直接从培养基中回收蛋白质。如果蛋白质不被分泌,则可以从细胞裂解物中回收。
可使用本领域已知的对蛋白质特异的方法来检测蛋白质,包括但不限于使用特异性抗体、酶产物形成、酶底物消失或者测定蛋白质的相对活性或比活性的测定法。
可使用本领域已知的方法从培养基中回收蛋白质,包括但不限于收集、离心、过滤、提取、喷雾干燥、蒸发或沉淀。在一个方面,回收包含蛋白质的整个发酵液。在另一方面,回收包含蛋白质的无细胞发酵液。
可通过本领域已知的多种程序来纯化蛋白质以获得基本上纯的蛋白质和/或蛋白质片段(参见例如,Wingfield,2015,Current Protocols in Protein Science[最新蛋白质科学实验指南];80(1):6.1.1-6.1.35;Labrou,2014,Protein Downstream Processing[蛋白质下游加工],1129:3-10)。
在一个替代方面,不回收蛋白质。
本披露的蛋白质可用于在任何时间(包括在种植前、种植时、种植后、萌发前、萌发后、出苗前、出苗时、出苗后、营养阶段前、营养阶段期间、营养阶段后、生殖阶段前、生殖阶段期间、生殖阶段后、开花前、开花时、开花后、结果前、结果时、结果后、成熟前、成熟时、成熟后、收获前、收获时和收获后)预防和/或治疗由园艺有害生物引起的侵染/感染。相应地,本披露的蛋白质可被配制用于在园艺过程中的任何阶段并且通过任何合适的施用方法(包括但不限于种子上施用、犁沟内施用、叶面施用、收获前施用和收获后施用)使用。
本披露的蛋白质可掺入包含任何合适运载体(包括但不限于种子相容性运载体、土壤相容性运载体、叶面相容性运载体、收获前运载体和收获后运载体)的制剂中。适当的运载体材料的选择将取决于预期的应用和待包括在制剂中的蛋白质,以及可存在于和/或添加到制剂中的任何其他组分。在一些实施例中,运载体是液体、凝胶、浆液或固体。在一些实施例中,运载体基本上由一种或多种蛋白稳定化合物组成或者由一种或多种蛋白稳定化合物组成。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%、5.1%、5.2%、5.3%、5.4%、5.5%、5.6%、5.7%、5.8%、5.9%、6%、6.1%、6.2%、6.3%、6.4%、6.5%、6.6%、6.7%、6.8%、6.9%、7%、7.1%、7.2%、7.3%、7.4%、7.5%、7.6%、7.7%、7.8%、7.9%、8%、8.1%、8.2%、8.3%、8.4%、8.5%、8.6%、8.7%、8.8%、8.9%、9%、9.1%、9.2%、9.3%、9.4%、9.5%、9.6%、9.7%、9.8%、9.9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%w/w或更多的蛋白质(即,本披露的一种或多种蛋白质的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%、5.1%、5.2%、5.3%、5.4%、5.5%、5.6%、5.7%、5.8%、5.9%、6%、6.1%、6.2%、6.3%、6.4%、6.5%、6.6%、6.7%、6.8%、6.9%、7%、7.1%、7.2%、7.3%、7.4%、7.5%、7.6%、7.7%、7.8%、7.9%、8%、8.1%、8.2%、8.3%、8.4%、8.5%、8.6%、8.7%、8.8%、8.9%、9%、9.1%、9.2%、9.3%、9.4%、9.5%、9.6%、9.7%、9.8%、9.9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%w/w或更多的选自由以下项组成的组的一种或多种蛋白质:
a)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
c)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的多肽;
e)衍生自以上a)至d)中任一项的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;
f)以上a)至e)中任一项的片段;以及
g)SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽的酶活性片段/突变体/变体。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约0.0001%至约40%w/w的蛋白质(即,本披露的一种或多种蛋白质的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%或5%w/w至约0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%、5.1%、5.2%、5.3%、5.4%、5.5%、5.6%、5.7%、5.8%、5.9%、6%、6.1%、6.2%、6.3%、6.4%、6.5%、6.6%、6.7%、6.8%、6.9%、7%、7.1%、7.2%、7.3%、7.4%、7.5%、7.6%、7.7%、7.8%、7.9%、8%、8.1%、8.2%、8.3%、8.4%、8.5%、8.6%、8.7%、8.8%、8.9%、9%、9.1%、9.2%、9.3%、9.4%、9.5%、9.6%、9.7%、9.8%、9.9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%或25%w/w(例如,约0.0001%至约1%w/w)的选自由蛋白质组成的组的一种或多种pH控制组分,这些蛋白质选自由以下项组成的组:
a)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
c)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的多肽;
e)衍生自以上a)至d)中任一项的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;
f)以上a)至e)中任一项的片段;以及
g)SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽的酶活性片段/突变体/变体。
本披露延伸至包含本披露的一种或多种蛋白质的颗粒/粒子。在实施例中,颗粒包含核心以及任选地包围该核心的一个或多个涂层(外层)。
核心的直径(测量为当量球径(基于体积的平均粒度))可以是20-2000μm,特别是50-1500μm、100-1500μm或250-1200μm。可以使用激光衍射诸如使用Malvern Mastersizer和/或在ISO13320(2020)下描述的方法来测定作为当量球径测量的核心直径。
在一个实施例中,核心包含本披露的一种或多种蛋白质。
核心可以包括另外的材料如填料、纤维材料(纤维素或合成纤维)、稳定剂、增溶剂、悬浮剂、粘度调节剂、轻球体、增塑剂、盐、润滑剂和芳香剂。
核心可以包括粘合剂,例如合成聚合物、蜡、脂肪或碳水化合物。
核心典型地作为均匀的共混物可以包括多价阳离子的盐、还原剂、抗氧化剂、过氧化物分解催化剂和/或酸性缓冲剂组分。
核心可以包括惰性粒子,其中蛋白质被吸附到该惰性粒子中,或者被施加(例如,通过流化床涂覆)到表面上。
该核心的直径可以是20-2000μm,特别是50-1500μm、100-1500μm或250-1200μm。
核心可被至少一个涂层包围,例如以改善储存稳定性、减少处理过程中的粉尘形成或用于着色该颗粒。任选的涂层可包括盐涂层或其他合适的涂覆材料,诸如聚乙二醇(PEG)、甲基羟基-丙基纤维素(MHPC)和聚乙烯醇(PVA)。
可按核心的重量计以至少0.1%(例如,至少0.5%、至少1%、至少5%、至少10%或至少15%)的量施加涂层。该量至多可以是100%、70%、50%、40%或30%。
涂层优选地是至少0.1μm厚,特别是至少0.5μm、至少1μm或至少5μm厚。在一些实施例中,涂层的厚度低于100μm,诸如低于60μm或低于40μm。
涂层应通过形成基本上连续的层来密封该核心单元。基本上连续的层应被理解为具有极少或没有孔洞的涂层,使得核心单元具有极少或没有未涂覆的区域。层或涂层的厚度特别应是均匀的。
涂层可以进一步包含如本领域已知的其他材料,例如填料、防粘剂、颜料、染料、增塑剂和/或粘合剂,诸如二氧化钛、高岭土、碳酸钙或滑石。
盐涂层可包含按重量计至少60%的盐,例如按重量计至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%。
为了提供可接受的保护,盐涂层优选地是至少0.1μm厚,例如至少0.5μm、至少1μm、至少2μm、至少4μm、至少5μm或至少8μm。在特定的实施例中,盐涂层的厚度低于100μm,诸如低于60μm或低于40μm。
盐可以从盐溶液(其中该盐是完全溶解的)中添加,或者从盐悬浮液(其中这些细粒子是少于50μm,例如少于10μm或少于5μm)中添加。
盐涂层可包含单一盐或者两种或更多种盐的混合物。盐可以是水溶性的,特别地具有在20℃在100g水中至少0.1g的溶解度,优选地至少0.5g/100g水,例如至少1g/100g水、例如至少5g/100g水。
盐可以是无机盐,例如硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、膦酸盐、硝酸盐、氯盐或碳酸盐或者简单有机酸(小于10个碳原子,例如6个或更少的碳原子)的盐如柠檬酸盐、丙二酸盐或乙酸盐。在这些盐中的阳离子的实例是碱或碱土金属离子、铵离子或第一过渡系的金属离子,例如钠、钾、镁、钙、锌或铝。阴离子的实例包括氯、溴、碘、硫酸根、亚硫酸根、亚硫酸氢根、硫代硫酸根、磷酸根、磷酸二氢根、二碱式磷酸根、次磷酸根、焦磷酸二氢根、四硼酸根、硼酸根、碳酸根、碳酸氢根、硅酸根、柠檬酸根、苹果酸根、马来酸根、丙二酸根、琥珀酸根、乳酸根、甲酸根、乙酸根、丁酸根、丙酸根、苯甲酸根、酒石酸根、抗坏血酸根或葡萄糖酸根。特别地,可以使用硫酸根、亚硫酸根、磷酸根、膦酸根、硝酸根、氯或碳酸根的碱或碱土金属盐或者简单有机酸的盐如柠檬酸盐、丙二酸盐或乙酸盐。
涂层中的盐在20℃下可具有60%以上、特别是70%以上、80%以上或85%以上的恒定湿度,或者它可以是这种盐的另一种水合物形式(例如,无水物)。盐涂层可如WO 00/01793或WO 2006/034710中所述。
合适的盐的特定实例是NaCl(CH20℃=76%)、Na2CO3(CH20℃=92%)、NaNO3(CH20℃=73%)、Na2HPO4(CH20℃=95%)、Na3PO4(CH25℃=92%)、NH4Cl(CH20℃=79.5%)、(NH4)2HPO4(CH20℃=93,0%)、NH4H2PO4(CH20℃=93.1%)、(NH4)2SO4(CH20℃=81.1%)、KCl(CH20℃=85%)、K2HPO4(CH20℃=92%)、KH2PO4(CH20℃=96.5%)、KNO3(CH20℃=93.5%)、Na2SO4(CH20℃=93%)、K2SO4(CH20℃=98%)、KHSO4(CH20℃=86%)、MgSO4(CH20℃=90%)、ZnSO4(CH20℃=90%)和柠檬酸钠(CH25℃=86%)。其他实例包括NaH2PO4、(NH4)H2PO4、CuSO4、Mg(NO3)2和乙酸镁。
该盐可以处于无水形式,或者它可以是水合盐,即具有结晶化的一个或多个结合水的结晶盐水合物,例如描述于WO 99/32595中。特定实例包括无水硫酸钠(Na2SO4)、无水硫酸镁(MgSO4)、七水硫酸镁(MgSO4·7H2O)、七水硫酸锌(ZnSO4·7H2O)、七水磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)、六水硝酸镁(Mg(NO3)2(6H2O))、二水柠檬酸钠和四水乙酸镁。
优选地,作为盐溶液使用该盐,例如使用流化床。
涂覆材料可以是蜡状涂覆材料和成膜涂覆材料。蜡状涂覆材料的实例是平均分子量为1000至20000的聚(环氧乙烷)产品(聚乙二醇,PEG);具有16至50个环氧乙烷单元的乙氧基化壬基酚;乙氧基化脂肪醇,其中该醇含有12至20个碳原子,并且其中存在15至80个环氧乙烷单元;脂肪醇;脂肪酸;以及脂肪酸的甘油单酯、和甘油二酯、和甘油三酯。适用于通过流化床技术施用的成膜涂覆材料的实例在GB 1483591中给出。
颗粒可任选地具有一个或多个另外的涂层。适合的涂覆材料的实例是聚乙二醇(PEG)、甲基羟基-丙基纤维素(MHPC)和聚乙烯醇(PVA)。具有多个涂层的酶颗粒的实例描述于WO 93/07263和WO 97/23606中。
该核心可以通过粒化各成分的共混物来制备,例如通过包括造粒技术的方法,诸如结晶、沉淀、锅涂覆(pan-coating)、流化床涂覆、流化床凝集、旋转雾化、挤出、颗粒化(prilling)、滚圆(spheronization)、粒度减小法、转鼓造粒(drum granulation)和/或高剪切造粒。
用于制备核心的方法可见于Handbook of Powder Technology[粉末技术手册];C.E.Capes的Particle size enlargement[粒度增大];第1卷;1980;Elsevier[爱思唯尔]中。制备方法包括已知的饲料和颗粒配制技术,例如:
(a)喷雾干燥产品,其中在喷雾干燥塔中雾化液体含蛋白质溶液以形成小液滴,在它们沿干燥塔下降的过程中干燥形成含蛋白质微粒状材料。用这种方法可以产生非常小的粒子(Michael S.Showell(编辑);Powdered detergents[粉状洗涤剂];SurfactantScience Series[表面活性剂科学系列];1998;第71卷;第140-142页;Marcel Dekker[马塞尔·德克尔公司])。
(b)层状产品,其中蛋白质在预形成的惰性核心粒子周围涂覆成层,其中通常在流化床装置中雾化含蛋白质溶液,在该流化床装置中预形成的核心粒子被流体化并且含蛋白质溶液附着到核心粒子上并干燥,直到使得干蛋白质层留在核心粒子的表面上。如果可以发现具有希望尺寸的有用核心粒子,则通过这种方式能够获得具有希望尺寸的粒子。这种类型的产品描述于,例如,WO 97/23606中。
(c)吸收的核心粒子,其中不是将蛋白质在核心周围涂覆成层,而是将蛋白质吸收到核心的表面上和/或表面中。这样的方法描述于WO 97/39116中。
(d)挤出或丸粒化的产品,其中将含蛋白质糊剂压成丸粒或在压力下通过小的开口挤出并切割为粒子,随后干燥这些丸粒。此类粒子通常具有相当大的尺寸,因为开有挤出开口的材料(通常是具有钻孔的平板)限制了通过挤出开口可允许的压力降。而且,当使用小开口时,非常高的挤出压力增加了蛋白质糊剂中的热发生,这对酶是有害的(MichaelS.Showell(编辑);Powdered detergents[粉状洗涤剂];Surfactant Science Series[表面活性剂科学系列];1998;第71卷;第140-142页;Marcel Dekker[马塞尔·德克尔公司])。
(e)喷射造粒产品,其中将含蛋白质粉末悬浮于熔化的蜡中,并将悬浮液喷洒(例如,通过转盘喷雾器)到冷却室中,在该冷却室中液滴快速固化(Michael S.Showell(编辑);Powdered detergents[粉状洗涤剂];Surfactant Science Series[表面活性剂科学系列];1998;第71卷;第140-142页;Marcel Dekker[马塞尔·德克尔公司])。所获得的产品是蛋白质均匀分布在整个惰性材料中而不是集中在其表面上的产品。US 4,016,040和US4,713,245描述了这种技术。
(f)混合器造粒产品,其中将含蛋白质液体添加到常规造粒组分的干燥粉末组合物中。将液体和粉末以适合的比例混合,并且随着液体的水分被吸收在干燥粉末中,干燥粉末的组分将开始粘附并凝聚,并且粒子将积聚,形成包含蛋白质的颗粒。这样的方法描述于US 4,106,991、EP 170360、EP 304332、EP 304331、WO 90/09440和WO 90/09428中。在该过程的特定方面,各种高剪切混合器可以用作造粒机。将由蛋白质、填料和粘合剂等组成的颗粒与纤维素纤维混合以强化粒子,从而产生所谓的T-颗粒。经强化的粒子更加坚固,并释放更少的酶粉尘。
(g)粒度减小,其中通过碾磨或压碎含蛋白质的较大的粒子、丸粒、平片体、坯块(briquette)等产生核心。通过将碾磨或压碎的产物过筛获得所需要的核心粒子级分。可以回收尺寸过大和尺寸过小的粒子。粒度减小描述于Martin Rhodes(编辑);Principles ofPowder Technology[粉末技术原理];1990;第10章;John Wiley&Sons[约翰·威利父子出版社]中。
(h)流化床造粒。流化床造粒涉及将微粒悬浮于空气流中并经喷嘴喷射液体到流体化粒子上。被喷洒的液滴击中的粒子湿润并发粘。发粘的粒子与其他粒子碰撞并附着到其上以形成颗粒。
(i)这些核心可经受干燥,例如在流化床干燥器中。本领域技术人员可以使用在饲料或酶工业中用于干燥颗粒的其他已知的方法。干燥优选地在25℃至90℃的产品温度下进行。对于一些蛋白质,重要的是包含蛋白质的核心在用盐涂覆之前含有少量的水。如果在去除过量的水之前用盐涂覆水敏性蛋白质,则过量的水将被截留在核心中并且可能对蛋白质的活性产生负面影响。干燥之后,这些核心优选地含有0.1-10%w/w的水。
无粉尘颗粒可例如如US 4,106,991和US 4,661,452中所披露产生,并且可任选地通过本领域已知的方法被涂覆。
颗粒可进一步包含一种或多种另外的酶,例如水解酶、异构酶、连接酶、裂解酶、氧化还原酶和转移酶。一种或多种另外的酶优选地选自由以下项组成的组:乙酰木聚糖酯酶、酰基甘油脂肪酶、淀粉酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、纤维二糖水解酶、纤维素酶、阿魏酸酯酶、半乳聚糖酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、β-葡聚糖酶、β-葡糖苷酶、溶血磷脂酶、溶菌酶、α-甘露糖苷酶、β-甘露糖苷酶(甘露聚糖酶)、植酸酶、磷脂酶A1、磷脂酶A2、磷脂酶D、蛋白酶、普鲁兰酶、果胶酯酶、三酰基甘油脂肪酶、木聚糖酶、β-木糖苷酶或它们的任何组合。然后,每种酶将存在于更多颗粒中,确保酶的更均匀分布,并且还由于不同的粒度而减少不同酶的物理分离。用于产生多酶共颗粒的方法披露于ip.com披露内容IPCOM000200739D中。使用共颗粒配制蛋白质的另一个实例披露于WO 2013/188331中。
本披露还涉及根据EP 238216中披露的方法制备的受保护的蛋白质。
本披露还延伸至包含本披露的一种或多种蛋白质的液体制剂。在一些实施例中,制剂包含一种或多种酶稳定剂、一种或多种pH控制组分、一种或多种耐雨剂和任选的一种或多种防腐剂。
本披露的制剂可包含任何合适的酶稳定剂,包括但不限于糖(例如单糖,诸如果糖、半乳糖和葡萄糖;二糖,诸如乳糖、麦芽糖和蔗糖;寡糖,诸如麦芽糖糊精;以及多糖,诸如纤维素和淀粉)、多元醇(例如糖醇,诸如阿拉伯糖醇、赤藓糖醇、乙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇和木糖醇;以及聚合物多元醇(诸如聚乙二醇和聚丙二醇)、聚乙烯醇、乳酸、乳酸衍生物、硼酸、硼酸衍生物(例如芳族硼酸酯和苯基硼酸衍生物,诸如4-甲酰基苯基硼酸)和可逆蛋白酶抑制剂。总体参见例如WO 2007/113241;WO 01/04279;WO 2013/004636;WO 95/02046;WO 2009/118375;WO 2020/115179;WO 96/41859;WO 2007/025549;WO 96/23062;WO2018/130654;WO 96/22366;WO 92/17571;WO 2017/044473;WO 2017/044545、WO 2017/116837、WO 2017/116846、WO 2017/210163、WO 2017/210166、WO 2018/118740、WO 2018/175681、WO 2018/183491、WO 2018/218008、WO 2018/218016;WO 2018/218035。应当理解,某些酶稳定剂可赋予本披露的制剂其他有益特性,诸如增强的流动性和/或改善的对植物表面的粘附性。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约/至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%w/w或更多的多元醇(即,一种或多种多元醇的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约/至少5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%w/w或更多的选自由以下项组成的组的一种或多种多元醇:甘油、山梨醇、丙二醇(MPG)、乙二醇、二乙二醇、三乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、二丙二醇、具有低于约600的平均分子量的聚乙二醇(PEG)和具有低于约600的平均分子量的聚丙二醇(PPG),优选地甘油、山梨醇和/或丙二醇(MPG)。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约5%至约95%w/w的多元醇(即,一种或多种多元醇的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、45%或50%w/w至约50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%w/w(例如,约20%至约40%w/w)的选自由以下项组成的组的一种或多种多元醇:甘油、山梨醇、丙二醇(MPG)、乙二醇、二乙二醇、三乙二醇、1,2-丙二醇或1,3-丙二醇、二丙二醇、具有低于约600的平均分子量的聚乙二醇(PEG)和具有低于约600的平均分子量的聚丙二醇(PPG),优选地甘油、山梨醇和/或丙二醇(MPG)。
本披露的制剂可包含任何合适的pH控制组分,包括但不限于乙酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐以及能够将制剂缓冲在所需pH并且具有大于1%w/w的水溶性的其他盐。在一些实施例中,优选的pH控制组分是含有离子物质HPO4 2-和H2PO4 -的磷酸盐缓冲剂。
pH控制组分可以是单一离子物质,其可以维持恒定的pH但仅提供对酸化或碱化的缓冲作用。这样的实例是HPO42-,其可以确保碱性pH(大约9)并提供针对酸化的缓冲作用。这在农业环境中可能有益于将pH保持恒定在碱性pH,因为大多数环境因素将会导致液滴和沉积物酸化。
在优选的实施例中,当溶剂从植物表面上的液滴蒸发时,pH控制组分不会显著改变pH(+/-0.5个pH单位)或在干燥后在所需方向上改变。一些缓冲剂在干燥时由于缓冲剂组分的溶解度差异将改变pH。例如,由Na2HPO4和NaH2PO4组成的磷酸钠缓冲剂在干燥时的pH可以降低至pH 4或更低,因为二元形式(Na2HPO4)将更大程度地结晶。相反,由K2HPO4和KH2PO4组成的磷酸钾缓冲剂在干燥时的pH将接近pH 9,因为一元形式(KH2PO4)具有最低溶解度(Sarciaux 1999)。
当pKa接近组合物的期望pH时,pH控制组分是最有效的(最高缓冲能力)。这将减少保持期望pH所需的缓冲剂的量。在一个实施例中,缓冲剂包括具有中性/碱性pKa(诸如6.5至10范围内的pKa)的盐。
根据经验,pH控制组分可以用于将溶液的pH从其pKa值控制在pH+/-1个pH单位。例如,pKa值高于6.5的pH控制组分可用于将pH控制在7.5或更高。合适的pH控制组分的实例包括但不限于磷酸钠或磷酸钾(pKa12.12、pKa2 7.21、pKa3 12.67)、碳酸钠或碳酸钾(pKa16.37、pKa2 10.32)、2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇(TRIS)(pKa 8.1)、[双(2-羟乙基)氨基]乙酸(Bicine)(pKa 8.35)、N-[三(羟甲基)甲基]甘氨酸(Tricine)(pKa 8.15)、4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸(HEPES)(pKa1 3.0、pKa2 7.5)、N-[三(羟甲基)甲基]-2-氨基乙烷磺酸(TES)(pKa 7.55)、3-(N-吗啉代)丙磺酸(MOPS)(pKa7.2)、三(羟甲基)甲基氨基]丙磺酸(TAPS)(pKa 8.44)、N-[三(羟甲基)甲基]-3-氨基-2-羟基丙磺酸(TAPSO)(pKa 7.6)、甘氨酰甘氨酸(pKa1 3.14pKa28.17)、2-(N-环己基氨基)乙烷磺酸(CHES)(pKa 9.3)、硼酸钠或硼酸钾(pKa19.24、pKa2 12.4、pKa3 13.3)、2-氨基-2-甲基-1,3-丙二醇(ammediol)(pKa8.8)、三乙醇胺(pKa 7.74)、2-氨基-2-甲基-1-丙醇(pKa 9.7)、甘氨酸(pKa12.34、pKa2 9.6)、组氨酸(pKa1 1.82、pKa2 6.00、pKa3 9.17)以及其他氨基酸缓冲剂。
非优选的pH控制组分包括但不限于具有不利pKa(例如,对于需要碱性pH的酶pKa<6.5或对于需要酸性pH的酶pKa>7.5)的pH控制组分、挥发性pH控制组分、显示显著植物毒性的pH控制组分(这有时可包括上文提及的“合适的”pH控制组分,因为植物毒性取决于缓冲剂浓度、pH和目标作物)以及在环境中不需要并且因此受当局监管的pH控制组分(这有时可包括上文提及的“合适的”pH控制组分因为世界各地的法规各不相同)。
在一些实施例中,pH控制组分可用于提供保持碱性pH的本披露的制剂。例如,在一些优选的实施例中,本披露的制剂包含一种或多种pH控制组分,这些pH控制组分经选择以提供具有碱性pH、优选地至少7.5、更优选地介于7.5与10之间、最优选地介于8与9.5之间的组合物。因此,在一些实施例中,本披露的制剂包含pH控制组分,诸如缓冲剂,其中pH控制组分(缓冲剂)的1%w/w水溶液具有碱性pH(例如,高于7.5、优选地高于8且低于10、优选地低于9.5)。
在一些实施例中,pH控制组分可用于提供保持中性pH的本披露的制剂。例如,在一些优选的实施例中,本披露的制剂包含一种或多种pH控制组分,这些pH控制组分经选择以提供具有中性pH、优选地介于6.5与7.5之间、更优选地介于6.75与7.25之间、最优选地约7的组合物。因此,在一些实施例中,本披露的制剂包含pH控制组分,诸如缓冲剂,其中pH控制组分(缓冲剂)的1%w/w水溶液具有中性pH(例如,高于6.5且低于7.5、优选地高于6.75且低于7.25、更优选地约7)。
在一些实施例中,pH控制组分可用于提供保持酸性pH的本披露的制剂。例如,在一些优选的实施例中,本披露的制剂包含一种或多种pH控制组分,这些pH控制组分经选择以提供具有酸性pH、优选地低于6.5、更优选地介于4与6.5之间、最优选地介于4.5与6之间的组合物。因此,在一些实施例中,本披露的制剂包含pH控制组分,诸如缓冲剂,其中pH控制组分(缓冲剂)的1%w/w水溶液具有酸性pH(例如,低于6.5、优选地低于6且高于4、优选地高于4.5)。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%w/w或更多的pH控制组分(即,一种或多种pH控制组分的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%w/w或更多的选自由以下项组成的一种或多种pH控制组分:乙酸盐、柠檬酸盐、碳酸盐和磷酸盐缓冲剂,优选地乙酸钠、柠檬酸钠、碳酸钠和/或磷酸钾缓冲剂。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约0.001%至约10%w/w的pH控制组分(即,一种或多种pH控制组分的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%或1%w/w至约0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%或5%w/w(例如,约0.01%至约1%w/w)的选自由以下项组成的一种或多种pH控制组分:乙酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐和磷酸盐缓冲剂,优选地乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸钠和/或磷酸钾缓冲剂。
本披露的制剂可包含任何合适的耐雨剂,包括但不限于有机改性的硅氧烷(有机硅氧烷),诸如有机改性的三硅氧烷(例如,聚醚改性的三硅氧烷,诸如聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷)和有机改性的聚硅氧烷(例如,聚醚改性的聚硅氧烷)。总体参见例如EP00245970;US 5496568;WO 2008/144024;WO 2009/135049;WO 2011/126832;WO 2017/083049;WO 2020/225276;WO 2021/055316;WO 2022/096688;WO 2022/096691;WO 2022/096692;WO 2022/096693;WO 2022/096694;WO/2022/096695;WO 2022/096696。
在一些实施例中,本披露的制剂包含一种或多种具有式1的通用分子结构的有机改性的硅氧烷:
R1 3SiO[R1 2SiO]A[R1R2SiO]BSiR1 3
其中
R1表示彼此相同或不同的1-10个碳的烃取代基或氢,优选的是甲基、乙基、丙基和苯基取代基,特别优选的是甲基取代基;
R2表示彼此相同或不同的通式II的聚醚取代基:
-R3O[CH2CH2O]C[CH2CH(CH3)O]D[CHR4CHR4O]ER5
其中
R3表示彼此相同或不同的任选地被氧原子中断的1-8个碳的烃部分。优选的是2-4个碳的线性烃,特别优选的是-CH2-CH2-CH2-。
R4表示彼此相同或不同的1-12个碳的烃取代基或氢,优选的是甲基、乙基、苯基或氢取代基。
R5表示彼此相同或不同的任选地含有氨基甲酸乙酯、羰基或羧酸官能团的1-16个碳的烃取代基或氢。
甲基或氢取代基是优选的,氢是最优选的。A为0-200、优选地0-1、更优选地0。B为0-200、优选地0.5-2、更优选地1。在优选的实施例中,A+B>0。C为0-60、优选地1-15。D为0-60、优选地0-10。E为0-20、优选地0-10、更优选地0。在优选的实施例中,C+D+E>0。
三硅氧烷可被定义为A=0且B=1的通式I的分子,而聚硅氧烷是A+B>1且A>1的通式I的分子。
可商购获得的有机改性的硅氧烷的实例包括但不限于表面活性剂(新西兰的格罗萨菲公司(Grosafe Chemicals Ltd.,New Zealand));表面活性剂(德国埃森的赢创运营有限公司(Evonik OperationsGmbh,Essen,Germany)),诸如/>AF 5503、/>AF 9902、AF 9903、/>OE 440、/>OE 444、OE 446、/>S200、/>S 233、S 240、/>S 255、/>S 279、S 301、/>SD 260和/>UNION;表面活性剂(德国韦瑟尔的毕克化学有限公司(BYK-Chemie GmbH,Wesel,Germany)),诸如/>-348;/>表面活性剂(新西兰的格罗萨菲公司);表面活性剂(美国科罗拉多州格里利的拉夫兰制品公司(LovelandProducts,Inc.,Greeley,CO,USA));以及SILWETTM表面活性剂(美国纽约州沃特福德的迈图公司(Momentive,Inc.,Waterford,NY,USA)),诸如SILWETTML-77、SILWETTMHS-312、SILWETTM408、SILWETTM618、SILWETTM625、SILWETTM636、SILWETTM641、SILWETTM806、SILWETTMDA-40、SILWETTMDRS-60、SILWETTMECO、SILWETTMFUSION、SILWETTMHS 312、SILWETTMHS604、SILWETTMHSEC、SILWETTMLF、SILWETTMOC和SILWETTMSTIK 2。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%、30%、35%、40%、45%、50%w/w或更多的耐雨剂(即,一种或多种耐雨剂的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%、6%、7%、8%、9%、10%w/w或更多的选自由以下项组成的组的一种或多种耐雨剂:有机改性的硅氧烷、优选地有机改性的三硅氧烷和有机改性的聚硅氧烷、更优选地包含一个或多个聚醚基团的有机改性的三硅氧烷和聚硅氧烷、最优选地三硅氧烷(聚)乙氧基化物和聚硅氧烷(聚)乙氧基化物。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约0.001%至约50%w/w的耐雨剂(即,一种或多种耐雨剂的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%或1%w/w至约0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%、6%、7%、8%、9%或10%w/w的选自由以下项组成的组的一种或多种耐雨剂:有机改性的硅氧烷、优选地有机改性的三硅氧烷和有机改性的聚硅氧烷、更优选地包含一个或多个聚醚基团的有机改性的三硅氧烷和聚硅氧烷、最优选地三硅氧烷(聚)乙氧基化物和聚硅氧烷(聚)乙氧基化物。
本披露的制剂可包含任何合适的防腐剂,包括但不限于苯甲酸钾、山梨酸钾、苯甲酸钠和山梨酸钠。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%、6%、7%、8%、9%、10%w/w或更多的防腐剂(即,一种或多种防腐剂的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约/至少0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%、5%w/w或更多的选自由以下项组成的一种或多种防腐剂:苯甲酸钾、山梨酸钾、苯甲酸钠和山梨酸钠,优选地山梨酸钾和/或苯甲酸钠。
在一些实施例中,基于制剂的总重量,本披露的制剂包含约0.001%至约10%w/w的防腐剂(即,一种或多种防腐剂的总量)。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含约0.001%、0.0015%、0.002%、0.0025%、0.003%、0.0035%、0.004%、0.0045%、0.005%、0.0055%、0.006%、0.0065%、0.007%、0.0075%、0.008%、0.0085%、0.009%、0.0095%、0.01%、0.015%、0.02%、0.025%、0.03%、0.035%、0.04%、0.045%、0.05%、0.055%、0.06%、0.065%、0.07%、0.075%、0.08%、0.085%、0.09%、0.095%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%、0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%或1%w/w至约0.5%、0.55%、0.6%、0.65%、0.7%、0.75%、0.8%、0.85%、0.9%、0.95%、1%、1.1%、1.2%、1.3%、1.4%、1.5%、1.6%、1.7%、1.8%、1.9%、2%、2.1%、2.2%、2.3%、2.4%、2.5%、2.6%、2.7%、2.8%、2.9%、3%、3.1%、3.2%、3.3%、3.4%、3.5%、3.6%、3.7%、3.8%、3.9%、4%、4.1%、4.2%、4.3%、4.4%、4.5%、4.6%、4.7%、4.8%、4.9%或5%w/w的选自由以下项组成的一种或多种防腐剂:苯甲酸钾、山梨酸钾、苯甲酸钠和山梨酸钠,优选地山梨酸钾和/或苯甲酸钠。
本披露的蛋白质可掺入包含许多组分(包括但不限于粘合剂(粘着剂)、化学活性剂、分散剂(铺展剂)、干燥剂、乳化剂、微生物、营养物、有害生物引诱剂和摄食刺激剂、pH控制组分、收获后处理剂、流变剂、安全剂、UV保护剂和/或润湿剂)的制剂中。
可包括在本披露的制剂中的粘合剂(粘着剂)的实例包括但不限于二糖(例如,麦芽糖、蔗糖、海藻糖)、树胶(例如,纤维素胶、瓜尔胶、阿拉伯胶、风车藤胶、黄原胶)、麦芽糖糊精(例如,DEV为约10至约20的麦芽糖糊精)、单糖、油(例如,矿物油、橄榄油、花生油、大豆油和/或向日葵油)和寡糖。总体参见例如POWERBLOXTM(美国密歇根州米德兰的陶氏公司(Dow,Midland,MI,USA)),诸如POWERBLOXTMADJ-65和POWERBLOXTMADJ-65;EP0 0245970;US5496568;WO 2008/144024;WO 2009/135049;WO 2011/126832;WO 2017/083049;WO 2020/225276;WO 2021/055316;WO 2022/096688;WO 2022/096691;WO 2022/096692;WO 2022/096693;WO 2022/096694;WO/2022/096695;WO 2022/096696。
可包括在本披露的制剂中的化学活性物的实例包括但不限于灭螨剂和杀螨剂(例如香芹酚、血根碱、偶氮苯、苯螨特、苯甲酸苄酯、溴螨酯、氯杀螨、杀螨醇、杀螨酯、敌螨特、乙酯杀螨醇、丙酯杀螨醇、丁氟螨酯、DDT、三氯杀螨醇、二苯基砜、苯氧炔螨、除螨酯、氟硝二苯胺、氟杀螨、格螨酯、六氯酚、苯螨醚、丙氯诺、四氯杀螨砜、杀螨好、苯菌灵、氯灭杀威、西维因、卡巴呋喃、甲硫威、速灭威、蜱虱威、残杀威、涕灭威、丁酮威、杀线威、抗虫威、久效威、联苯肼酯、乐杀螨、消螨酚、消螨通、敌螨普-4、敌螨普-6、邻敌螨消、硝戊酯、硝辛酯、硝丁酯、DNOC、虫螨脒、杀虫脒、灭螨眯、伐虫脒、胺甲威、杀螨脒、单甲脒、阿福拉纳(afoxolaner)、氟雷拉纳(fluralaner)、沙罗拉纳(sarolaner)、四抗菌素、阿维菌素、灭螨剂、阿巴美丁、多拉菌素、依立诺克丁、伊佛霉素、司拉克丁、弥拜菌素、奥克索米克、莫昔克丁、四螨嗪、灭蝇胺、氟螨嗪、苯氧炔螨、氟佐隆、氟苯亚胺噻唑、氟环脲、氟虫脲、噻螨酮、溴烯杀、毒杀芬、DDT、除螨灵、硫丹、林丹、毒虫畏、赛吸磷、敌敌畏、庚烯磷、速灭磷、久效磷、二溴磷、TEPP、司替罗磷、赛硫磷、胺吸磷、乙基保棉磷、甲基保棉磷、偶氮磷、苯噁磷(benoxafos)、溴硫磷、乙基溴硫磷、卡波硫磷、氯蜱硫磷、氯甲硫磷、蝇毒磷、果虫磷、内吸磷-O、内吸磷-S、甲基内吸磷-O、甲基内吸磷-S、内吸磷-S-甲基硫、氯亚胺硫磷、二嗪农、乐果、二噁硫磷、乙拌磷、因毒磷、乙硫磷、甲基益果、安果、马拉松、灭蚜磷、虫螨畏、氧化乐果、异砜磷(oxydeprofos)、砜拌磷、对硫磷、芬硫磷、甲拌磷、伏杀磷、亚胺硫磷、三磷锡、辛硫磷、甲基嘧啶磷、乙噻唑磷、发果、嘧硫磷、喹硫磷、喹磷、苏硫磷、硫特普、甲基乙拌磷、三唑磷、氯苯乙丙磷(trifenofos)、蚜灭多、敌百虫、水胺硫磷、甲胺磷、烯虫磷、甲氟磷、丙胺氟、八甲磷、三唑锡、三环锡、六苯丁锡氧、三磷锡、抑菌灵、氯亚磷、亚胺硫磷、腈吡螨酯、唑螨酯、派氟米德(pyflubumide)、吡螨胺、乙酰虫腈、氟虫腈、凡尼普罗(vaniliprole)、氟丙菊酯、联苯菊酯、溴氟菊酯、氯氟氰菊酯、α-氯氰菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯、氟氰戊菊酯、氟氯苯菊酯、氟胺氰菊酯、扑灭司林、苄螨醚、嘧螨醚、溴虫腈、血根碱、灭螨猛、克杀螨、吡氟菌酯(bifujunzhi)、嘧螨酯、氟菌螨酯、嘧螨胺、杀螨特、克螨特、螺螨酯、四螨嗪、氟螨嗪、氟螨噻、噻螨酮、苯硫威、螟蛉畏、丁醚脲、灭螨醌、磺胺螨酯、三氧化二砷、克仑吡林、氯生太尔、克罗米通、环螨酯、赛米唑、双硫仑、乙螨唑、抗螨唑、喹螨醚、联氟螨、甲硫芬、MNAF、伏蚁灵、尼可霉素、哒螨灵、舒非仑、氟虫胺、硫、苏云金素、苯噻螨以及它们的组合);杀真菌剂(例如嗜球果伞素,诸如嘧菌酯、甲香菌酯、丁香菌酯、醚菌胺、烯肟菌酯、氟嘧菌酯、醚菌酯、苯氧菌胺、肟醚菌胺、啶氧菌酯、唑菌胺酯、唑胺菌酯、唑菌酯、吡菌苯威、肟菌酯、2-[2-(2,5-二甲基-苯氧基甲基)-苯基]-3-甲氧基-丙烯酸甲酯和2-(2-(3-(2,6-二氯苯基)-1-甲基-亚烯丙基氨基氧基甲基)-苯基)-2-甲氧基亚氨基-N-甲基-乙酰胺;甲酰胺,例如甲酰苯胺类(例如苯霜灵、苯霜灵-M、麦锈灵、联苯吡菌胺(bixafen)、啶酰菌胺、萎锈灵、甲呋酰胺、环酰菌胺、氟酰胺、氟唑菌酰胺、呋吡菌胺、吡唑萘菌胺、异噻菌胺、基拉烷氧(kiralaxyl)、灭锈胺、甲霜灵、甲霜灵-M(精甲霜灵)、呋酰胺、噁霜灵、氧化萎锈灵、氟唑菌苯胺、吡噻菌胺、氟唑环菌胺(sedaxane)、叶枯酞、噻氟菌胺、噻酰菌胺、2-氨基-4-甲基-噻唑-5-甲酰苯胺、N-(4'-三氟甲硫基联苯基-2-基)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺、N-(2-(1,3,3-三甲基丁基)-苯基)-1,3-二甲基-5-氟-1H-吡唑-4-甲酰胺),甲酸吗啉类(例如烯酰吗啉、氟吗啉、丁吡吗啉),苯甲酸酰胺类(例如氟联苯菌、氟吡菌胺、氟吡菌酰胺、苯酰菌胺),环丙酰菌胺,双氯氰菌胺,双炔酰菌胺,土霉素,硅噻菌胺和N-(6-甲氧基-吡啶-3-基)环丙烷羧酸酰胺;唑类,例如三唑类(例如阿扎康唑、联苯三唑醇、糠菌唑、环唑醇、苯醚甲环唑、烯唑醇、烯唑醇-M、氧唑菌、腈苯唑、氟喹唑、氟硅唑、粉唑醇、己唑醇、亚胺唑、种菌唑、叶菌唑、腈菌唑、噁咪唑、多效唑、戊菌唑、丙环唑、丙硫菌唑、硅氟唑、戊唑醇、氟醚唑、三唑酮、三唑醇、灭菌唑、烯效唑)以及咪唑类(例如氰霜唑、抑霉唑、稻瘟酯、咪鲜胺、氟菌唑(triflumizol));杂环化合物,例如吡啶类(诸如氟啶胺、啶斑肟(cf.D1b)、3-[5-(4-氯-苯基)-2,3-二甲基-异噁唑烷-3-基]-吡啶、3-[5-(4-甲基-苯基)-2,3-二甲基-异噁唑烷-3-基]-吡啶)、嘧啶类(例如乙嘧酚磺酸酯、嘧菌环胺、二氟林、氯苯嘧啶醇、嘧菌腙、嘧菌胺、三氯甲基吡啶、氟苯嘧啶醇、嘧霉胺)、哌嗪类(例如,嗪氨灵)、吡咯类(例如,拌种咯、咯菌腈)、吗啉类(例如,艾敌吗啉(aldimorph)、吗菌灵、吗菌灵-乙酸盐、丁苯吗啉、十三吗啉)、哌啶类(例如,苯锈啶)、二甲酰亚胺类(例如氟菌丹、异菌脲、腐霉利、乙烯菌核利),非芳族5-元杂环类(例如噁唑菌酮、咪唑菌酮、弗吕噻菌胺(flutianil)、辛噻酮、噻菌灵、5-氨基-2-异丙基-3-氧代-4-邻-甲苯基-2,3-二氢-吡唑-1-羧硫代酸S-烯丙基酯)、阿拉酸式苯-S-甲基、辛唑嘧菌胺、吲唑磺菌胺、敌菌灵(anilazin)、杀稻瘟菌素-S、敌菌丹、克菌丹、灭螨猛、棉隆、乙氧咪、哒菌酮、野燕枯、野燕枯甲基硫酸酯、氰菌胺、灭菌丹、恶喹酸、粉病灵、丙氧喹啉、咯喹酮、喹氧灵、唑嗪、三环唑、2-丁氧基-6-碘-3-丙基色烯-4-酮、5-氯-1-(4,6-二甲氧基-嘧啶-2-基)-2-甲基-1H-苯并咪唑和5-氯-7-(4-甲基哌啶-1-基)-6-(2,4,6-三氟苯基)-[1,2,4]三唑-[1,5-a]嘧啶;苯并咪唑类,例如多菌灵;以及其他活性物质,例如胍类(例如胍、多果定、多果定游离碱、双胍盐、双胍辛乙酸盐、双胍辛胺)、双胍辛胺三乙酸盐和双胍三辛烷基苯磺酸盐(iminoctadine-tris(albesilate));抗生素(例如春雷霉素、春雷霉素盐酸盐-水合物、链霉素、多氧霉素和井冈霉素A);硝基苯基衍生物(例如乐杀螨、氯硝胺、敌螨通、敌螨普、酞菌酯(nitrothal-isopropyl)、四氯硝基苯(tecnazen));有机金属化合物(例如三苯锡基盐,例如薯瘟锡(fentin-acetate)、三苯锡氯(fentin chloride)、毒菌锡(fentinhydroxide));含硫杂环基化合物(例如二噻农、稻瘟灵);有机磷化合物(例如克瘟散、三乙膦酸(fosetyl)、三乙膦酸铝(fosetyl-aluminum)、异稻瘟净、磷酸及其盐、定菌磷、甲基立枯磷);有机氯化合物(例如百菌清、抑菌灵、二氯芬、磺菌胺、六氯苯、戊菌隆、五氯苯酚(pentachlorphenole)及其盐、四氯苯酞、五氯硝基苯、甲基托布津、托布津、对甲抑菌灵、N-(4-氯-2-硝基-苯基)-N-乙基-4-甲基-苯磺酰胺)、无机活性物质(例如波尔多混合物、乙酸铜、氢氧化铜、氯氧化铜、碱式硫酸铜、亚磷酸盐、硫、硫酸锌、纳他霉素以及它们的组合);杀腹足类动物剂(例如甲硫威、四聚乙醛、西维因、多杀菌素、硫酸铜与石灰的组合、硼酸、磷酸铁以及它们的组合);除草剂(例如2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、2,4,5-三氯苯氧乙酸(2,4,5-T)、莠灭净、氨唑草酮、环丙嘧啶酸、乙草胺、氟锁草醚、甲草胺、莠去津、唑啶草酮、灭草松、吡草酮、治草醚、除草定、溴草腈、丁草胺、氟丙嘧草酯、丁氧环酮、唑草酮、氯嘧磺隆、氯麦隆、烯草酮、炔草酯、异噁草酮、氰草津、噻草酮、氰氟草酯、甜菜安、敌草净、麦草畏、禾草灵、噁唑隆、敌草隆、氟硫草定、噁唑禾草灵、吡氟禾草灵、氟禾草灵、伏草隆、氟哒嗪草酯、氟烯草酸、丙炔氟草胺、乙羧氟草醚、氟噻甲草酯、氟磺胺草醚、氟磺胺草醚、草甘膦、草铵膦、吡氟氯禾灵、环嗪酮、甲氧咪草烟、灭草喹、咪唑乙烟酸、碘苯腈、异丙隆、异噁唑草酮、乳氟禾草灵、利谷隆、丙酸、氯丙酸、甲基磺草酮、苯嗪草酮、吡唑草胺、甲草苯隆、异丙甲草胺(和异丙甲草胺)、甲氧隆、嗪草酮、绿谷隆、丙炔噁草酮、噁草酮、乙氧氟草醚、甜菜宁、丙草胺、氯苯噻草酮、扑灭通、脯氨酸测定、扑草胺、敌稗、喔草酯、异丙草胺、吡草醚、杀草敏、吡唑特、苄草唑、哒草特、喹禾灵、精喹禾灵(例如喹禾灵、精喹禾灵、炔草酯、氰氟草酯、禾草灵、精噁唑禾草灵、氟禾草灵、氟吡甲禾灵、高效氟吡甲禾灵)、苯嘧磺草胺、稀禾定、环草隆、西玛津、西草净、磺草酮、甲磺草胺、丁噻隆、环磺酮、吡喃草酮、特草定、特丁通、特丁津、赛克斯托敏(thaxtomin)(例如在美国专利号7,989,393中描述的赛克斯托敏)、甲氧噻草胺、肟草酮、绿草定、草达津、苯吡唑草酮(tropramezone)、它们的盐和酯;它们的外消旋混合物和拆分异构体以及它们的组合);以及杀昆虫剂和杀线虫剂(例如抗生素杀昆虫剂,诸如阿洛氨菌素和苏云金素;大环内酯杀昆虫剂,如多杀菌素(spinosad)、乙基多杀菌素、以及其他多杀菌素(spinosyn),包括21-丁烯基多杀菌素及其衍生物;阿维菌素杀昆虫剂,如阿巴美丁、多拉克丁、依马克丁、依立诺克丁、伊维菌素以及司拉克丁;米尔倍霉素杀昆虫剂,如雷皮菌素、米尔螨素、米尔倍霉素肟以及莫昔克丁;含砷杀昆虫剂,如砷酸钙、乙酰亚砷酸铜、砷酸铜、砷酸铅、亚砷酸盐和亚砷酸钠钾;其他生物杀昆虫剂、植物掺入保护剂杀昆虫剂,如Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1F、Cry1A.105、Cry2Ab2、Cry3A、mir Cry3A、Cry3Bb1、Cry34、Cry35、以及VIP3A;植物性杀昆虫剂,如假木贼碱、印楝素、d-柠檬烯、烟碱、除虫菊酯类、瓜菊酯类、瓜菊酯I、瓜菊酯II、茉酮菊素I,茉酮菊素II、除虫菊酯I、除虫菊酯II、苦木、鱼藤酮、鱼尼丁以及沙巴草;氨基甲酸酯杀昆虫剂,如苯噁威以及卡巴立;苯并呋喃基甲基氨基甲酸酯杀昆虫剂,如丙硫克百威、呋喃丹、丁硫克百威、单甲基克百威(decarbofuran)以及呋线威;二甲基氨基甲酸酯杀昆虫剂氮芥(dimitan)、敌蝇威、氢奎酰(hyquincarb)以及抗蚜威;肟氨基甲酸酯杀昆虫剂,如棉铃威、涕灭威、涕灭氧威、丁酮威、丁酮氧威、灭多威、戊氰威、草氨酰、噻螨威、抗虫威、硫双威以及久效威;苯基甲基氨基甲酸酯杀昆虫剂,如除害威、灭害威、丁苯氨酯、畜虫威、氯灭杀威、地虫威、二甲苯基(dicresyl)、二氧威、EMPC、乙硫苯威、双乙威(fenethacarb)、仲丁威,异丙威、灭虫威、速灭威、自克威、蜱虱威(promacyl)、猛杀威、残杀威、三甲威(trimethacarb)、XMC以及灭杀威(xylylcarb);二硝基苯酚杀昆虫剂,如消螨酚、丙硝酚、戊硝酚以及DNOC;氟杀昆虫剂,如六氟硅酸钡、冰晶石、氟化钠、六氟硅酸钠以及氟虫胺;甲脒杀昆虫剂,如阿米曲士、氯苯甲脒、伐虫脒以及胺甲威(formparanate);熏蒸剂杀昆虫剂,如丙烯腈、二硫化物碳、四氯化碳、氯仿、三氯硝基甲烷、对二氯苯、1,2-二氯丙烷、甲酸乙酯、二溴乙烷、二氯乙烷、环氧乙烷、氰化氢、碘甲烷、甲基溴、甲基氯仿、二氯甲烷、萘、膦、硫酰氟和四氯乙烷;无机杀昆虫剂,如硼砂、多硫化钙、油酸铜、氯化亚汞、硫氰酸钾以及硫氰酸钠;甲壳素合成抑制剂,如双三氟虫脲、噻嗪酮、定虫隆、环丙马秦、二氟脲、氟螨脲、氟虫脲、氟铃脲、虱螨脲、双苯氟脲、多氟脲、氟幼脲、伏虫脲和杀虫脲;保幼激素模拟物,如保幼醚、苯氧威、烯虫乙酯(hydroprene)、烯虫炔酯、甲氧普烯、吡丙醚以及烯虫硫酯;保幼激素,如保幼激素I、保幼激素II以及保幼激素III;蜕皮激素激动剂,如环虫酰肼、氯虫酰肼、甲氧虫酰肼以及虫酰肼;蜕皮激素,如α-蜕皮激素以及脱皮甾酮;蜕皮抑制剂,如苯虫醚;早熟素,如早熟素I、早熟素II以及早熟素III;未分类的昆虫生长调节剂,如地昔尼尔;沙蚕毒素杀昆虫剂,如杀虫磺、杀螟丹、杀虫环以及杀虫双(thiosultap);烟碱类(nicotinoid)杀昆虫剂,如氟啶虫酰胺;硝基胍杀昆虫剂,如噻虫胺、呋虫胺、吡虫啉以及噻虫嗪;硝基亚甲基杀昆虫剂,如烯虫灵以及硝虫噻嗪;吡啶基甲胺杀昆虫剂,如啶虫脒、吡虫啉、烯虫灵以及噻虫啉;有机氯杀昆虫剂,如溴-DDT、毒杀芬、DDT、pp'-DDT、乙基-DDD、HCH、γ-HCH、林旦、甲氧氯、五氯酚以及TDE;环二烯杀昆虫剂,如艾氏剂、溴环烯、冰片丹、氯丹、十氯酮、狄氏剂、双羟丙茶碱、硫丹、异狄氏剂、HEOD、七氯、HHDN,碳氯灵,异艾氏剂、克来范以及灭蚁灵(mirex);有机磷酸酯杀昆虫剂,如溴苯烯磷、氯芬磷、丁烯磷、二氯松、百治磷、甲基毒虫畏、福司吡酯、庚烯磷、杀虫乙烯磷(methocrotophos)、速灭磷、久效磷、冰堆、萘肽磷、磷胺、丙虫磷、TEPP以及司替罗磷;有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如蔬果磷、丁苯硫磷以及稻丰散;有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如阿赛硫磷(acethion)、胺吸磷(amiton)、硫线磷、氯氧磷、氯甲磷、田乐磷、田乐磷-O、田乐磷-S、内吸磷、内吸磷-O、内吸磷-S、内吸磷-甲基、内吸磷-O-甲基、内吸磷-S-甲基、内吸磷-S-甲砜(methylsulphon)、乙拌磷、乙硫磷、灭线磷、IPSP、异丙磷、马拉硫磷、虫螨畏、砜吸磷-甲基、异亚砜磷(oxydeprofos)、砜拌磷(oxydisulfoton)、甲拌磷、治螟磷、特丁硫磷和甲基乙拌磷;脂肪族酰胺有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如赛硫磷、果虫磷、乐果、益果(ethoate-methyl)、安果、灭蚜磷、氧化乐果、发果、苏果以及灭蚜硫磷;肟有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如氯辛硫磷、辛硫磷以及辛硫磷-甲基;杂环有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如甲基吡噁磷、库马磷、环毒硫磷、敌噁磷、内毒磷、灭蚜松、茂果、伏杀硫磷、吡唑硫磷、哒嗪硫磷以及畜宁磷(quinothion);苯并硫吡喃有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如噻喃磷(dithicrofos)以及噻氯磷(thicrofos);苯并三嗪有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如谷硫磷-乙基以及谷硫磷-甲基;异吲哚有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如氯亚磷以及亚胺硫磷;异恶唑有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如异噁唑磷以及左拉普磷(zolaprofos);吡唑并嘧啶有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如灭虫吡啶(chlorprazophos)以及定菌磷;吡啶有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如毒死蜱以及毒死蜱-甲基;嘧啶有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如脱甲基丁嘧啶磷(butathiofos)、二嗪农、乙嘧硫磷、立瑞磷(lirimfos)、嘧啶磷-乙基、嘧啶磷-甲基、酰胺嘧啶啉(primidophos)、嘧硫磷以及丁嘧硫磷(tebupirimfos);喹喔啉有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如喹硫磷以及喹硫磷-甲基;噻二唑有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如乙基杀扑磷、噻唑磷、杀扑磷以及乙噻唑磷(prothidathion);三唑有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如异唑磷以及三唑磷;苯基有机硫代磷酸酯杀昆虫剂,如偶氮磷(azothoate)、溴硫磷、溴硫磷-乙基、卡波硫磷、虫螨磷(chlorthiophos)、杀螟腈、赛灭磷、异氯硫磷、除线磷、依他伏杀(etaphos)、氨磺磷、芬氯磷、杀螟硫磷丰索磷、倍硫磷、倍硫磷-乙基、速杀硫磷(heterophos)、碘硫磷(jodfenphos)、倍硫磷亚砜(mesulfenfos)、对硫磷、对硫磷-甲基、芬硫磷(phenkapton)、对氯硫磷(phosnichlor)、丙溴磷、丙硫磷、硫丙磷、双硫磷、皮蝇磷(trichlormetaphos)-3和三氯丙氧磷(trifenofos);磷酸酯杀昆虫剂,如布托酯以及敌百虫;硫代膦酸酯杀昆虫剂,如甲基灭蚜磷;苯基乙基膦酸酯杀昆虫剂,如地虫硫磷以及壤虫磷;苯基硫代膦酸苯基酯杀昆虫剂,如苯腈磷、EPN以及对溴磷;氨基磷酸酯杀昆虫剂,如克芦磷酯、苯线磷、丁硫环磷、依米细阿豪斯(imicyafos)、二噻磷、环硫磷以及甲胺啼磷(pirimetaphos);硫代磷酰胺酯(phosphoramidothioate)杀昆虫剂,如高灭磷、水胺硫磷、异丙胺磷、甲胺磷以及胺丙畏;磷二酰胺杀昆虫剂,如甲氟磷、叠氮磷(mazidox)、丙胺氟磷以及八甲磷;噁二嗪杀昆虫剂,如茚虫威;邻苯二甲酰亚胺杀昆虫剂,如氯亚磷、亚胺硫磷以及四甲司林;吡唑杀昆虫剂,如乙酰虫腈、乙虫腈、氟虫腈、吡嗪氟虫腈(pyrafluprole)、皮瑞普、吡螨胺,唑虫酰胺以及甲烯氟虫腈(vaniliprole);拟除虫菊酯杀昆虫剂,如氟酯菊酯、烯丙菊酯、生物烯丙菊酯、熏菊酯(barthrin)、联苯菊酯、戊环苄呋菊酯(bioethanomethrin)、环虫菊、乙氰菊酯、氟氯氰菊酯、β-氟氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、γ-氯氟氰菊酯、λ-氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、α-氯氰菊酯、β-氯氰菊酯、θ-氯氰菊酯、ζ-氯氰菊酯、苯醚氰菊酯、溴氰菊酯、四氟甲醚菊酯、苄菌酯(dimethrin)、烯炔菊酯、芬氟司林、吡氯氰菊酯(fenpirithrin)、甲氰菊酯、氰戊菊酯、高氰戊菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、τ-氟胺氰菊酯、抗虫菊(furethrin)、炔咪菊酯(imiprothrin)、甲氧苄氟菊酯、氯菊酯、生物氯菊酯、反式氯菊酯(transpermethrin)、醚菊酯、丙炔菊酯、丙氟菊酯、反灭虫菊(pyresmethrin)、苄呋菊酯、生物氯菊酯、顺式苄呋菊酯(cismethrin)、七氟菊酯、环戊烯丙菊酯、四甲司林、四溴菊酯(tralomethrin)和四氟菊酯;拟除虫菊酯醚杀昆虫剂,如依芬普司、三氟醚菊酯、溴氟醚菊酯、丙苯烃菊酯(protrifenbute)以及氟硅菊酯;嘧啶胺(pyrimidinamine)杀昆虫剂,如嘧虫胺以及嘧螨醚;吡咯杀昆虫剂,如溴虫腈;特窗酸杀昆虫剂,如季酮螨酯、螺甲螨酯以及螺虫乙酯;硫脲杀昆虫剂,如杀螨隆;尿素杀昆虫剂,如伏康脲(flucofuron)以及磺苯醚隆(sulcofuron);以及未分类的杀昆虫剂,如AKD-3088、氯虫苯甲酰胺、克罗散泰(closante)、克罗米通(crotamiton)、丁氟螨酯、E2Y45、EXD、伏螨唑、喹螨醚、非诺克林(fenoxacrim)、唑螨酯、FKI-1033、氟虫双酰胺、HGW86、氟蚁腙、IKI-2002,稻瘟灵、丙螨氰(malonoben)、氰氟虫腙、唾虫酮、尼氟利地、NNI-9850、NNI-0101、吡甲嗪、哒螨酮、啶虫丙醚、氟虫吡喹(pyrifluquinazon)、启德(Qcide)、雷复尼特、氯虫酰胺.TM.、SYJ-159、苯螨噻(triarathene)和唑蚜威以及它们的组合)。应当理解,本披露的制剂可包含化学活性剂的任何合适组合,并且因此可包含两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种上述活性剂。相反地,在一些实施例中,一种、两种、三种、四种、五种、六种、七种、八种、九种、十种或更多种上述活性物质明确地排除在本披露的制剂之外。
可掺入本披露的制剂中或本披露的蛋白质和其他组合物可掺入其中的化学活性组合物的非限制性实例包括但不限于以以下商标名销售的商业产品:来自德国路德维希港的巴斯夫公司(BASF,Ludwigshafen,Germany)的F/> KIXOR和/>来自美国密苏里州克雷夫科尔的拜尔作物科学公司(Bayer Crop Science,Creve Coeur,MO,USA)的/> 和/>来自美国印第安纳州印第安纳波利斯的科迪华农业科技公司(CortevaAgroscience,Indianapolis,IN,USA)的/> />ENLIST/>ENLIST/> INTREPID/>INTREPID/> 和/>来自美国加利福尼亚州蒙诺维亚的美国德高采后公司(Decco U.S.Post-Harvest,Inc.,Monrovia,CA,USA)的来自美国宾夕法尼亚州费城的富美实公司(FMC Corporation,Philadelphia,PA,USA)的/>
来自澳大利亚维多利亚的纽发姆有限公司(Nufarm Limited,Victoria,Australia)的/>GIN/> ULTRA/> CHAMPION++、/>
和/>来自美国华盛顿州沃帕托的佩斯国际公司(Pace International,Wapato,WA,USA)的/>/>PENBOTEC和SOPP;来自瑞士巴塞尔的先正达作物保护公司(Syngenta Crop Protection,Basel,Switzerland)的 和/>以及来自印度马哈拉施特拉邦孟买的印度联合磷化物有限公司(UPL Limited,Mumbai,Maharashtra,India)的/> BEAN/>/>PEGASUS、GOLIATH、POACONSTRICTOR、RAVEN、T-BIRD、/> ETHEPHONPEGASUS、GOLIATH、POACONSTRICTOR、RAVEN、T-BIRD、和/>
可包括在本披露的制剂中的分散剂(铺展剂)的实例包括但不限于阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂和非离子表面活性剂。总体参见例如EP 0245970;US 5496568;WO2008/144024;WO 2009/135049;WO 2011/126832;WO 2017/083049;WO 2020/225276;WO2021/055316;WO 2022/096688;WO 2022/096691;WO 2022/096692;WO 2022/096693;WO2022/096694;WO/2022/096695;WO 2022/096696。
在一些实施例中,本披露的制剂包含一种或多种阴离子表面活性剂。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含选自由以下项组成的组的一种或多种阴离子表面活性剂:烷基羧酸盐(例如硬脂酸钠)、烷基硫酸盐(例如烷基月桂基硫酸盐、月桂基硫酸钠)、烷基醚硫酸盐、烷基酰胺醚硫酸盐、烷基芳基聚醚硫酸盐、烷基芳基硫酸盐、烷基芳基磺酸盐、烷基磺酸盐、烷基酰胺磺酸盐、烷基芳基磺酸盐、烷基苯磺酸盐、烷基二苯基氧化物磺酸盐、α-烯烃磺酸盐、烷基萘磺酸盐、石蜡磺酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、烷基醚磺基琥珀酸盐、烷基酰胺磺基琥珀酸盐、烷基磺基琥珀酰胺酸盐、烷基磺基乙酸盐、烷基磷酸盐、烷基醚磷酸盐、酰基肌氨酸盐、酰基羟乙基磺酸盐、N-酰基牛磺酸盐、N-酰基-N-烷基牛磺酸盐、苯磺酸盐、枯烯磺酸盐、二辛基磺基琥珀酸钠、乙氧基化磺基琥珀酸盐、木质素磺酸盐、直链烷基苯磺酸盐、甘油单酯硫酸盐、全氟丁烷磺酸盐、全氟辛烷磺酸盐、磷酸酯、苯乙烯丙烯酸类聚合物、甲苯磺酸盐和二甲苯磺酸盐。
在一些实施例中,本披露的制剂包含一种或多种阳离子表面活性剂。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含选自由以下项组成的组的一种或多种阳离子表面活性剂:烷基三甲基铵盐(例如十六烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基氯化铵)、十六烷基氯化吡啶鎓、苯扎氯铵、苄索氯铵、5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷、二甲基二(十八烷基)氯化铵、十六烷基三甲基溴化铵、二(十八烷基)二甲基溴化铵和/或二盐酸奥替尼啶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含一种或多种非离子表面活性剂。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含选自由以下项组成的组的一种或多种非离子表面活性剂:醇乙氧基化物(例如,TERGITOLTM15-S表面活性剂(密歇根州米德兰的陶氏化学公司(The DowChemical Company,Midland,MI)),诸如TERGITOLTM15-S-9)、链烷醇酰胺、链烷醇胺缩合物、羧酸酯、十六醇十八醇混合物、鲸蜡醇、椰油酰胺DEA、十二烷基二甲基胺氧化物、乙醇胺、甘油酯和乙二醇酯的乙氧基化物、环氧乙烷聚合物、环氧乙烷-环氧丙烷共聚物、葡糖苷烷基醚、甘油烷基醚、甘油酯、乙二醇烷基醚(例如聚氧乙烯乙二醇烷基醚、聚氧丙二醇烷基醚)、乙二醇烷基酚醚(例如聚氧乙烯乙二醇烷基酚醚)、乙二醇酯、甘油一月桂酸酯、五乙二醇单十二烷基醚、泊洛沙姆、聚胺、聚甘油聚蓖麻酸酯、聚山梨酯、聚氧乙烯化脂肪酸、聚氧乙烯化硫醇、聚氧乙烯化聚氧丙烯二醇、聚氧乙烯乙二醇脱水山梨糖醇烷基酯、聚乙二醇-聚丙二醇共聚物、聚氧乙烯二醇辛基酚醚、聚乙烯吡咯烷酮、糖基烷基聚糖苷、磺酰基酰胺、脱水山梨糖醇脂肪酸醇乙氧基化物、脱水山梨糖醇脂肪酸酯乙氧基化物、脱水山梨糖醇脂肪酸酯和/或叔乙炔二醇。
在一些实施例中,本披露的制剂包含一种或多种两性离子表面活性剂。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含选自由以下项组成的组的一种或多种两性离子表面活性剂:3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基氨基]-1-丙烷磺酸盐、椰油酰胺丙基甜菜碱、椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱和/或一种或多种鞘磷脂。
在一些实施例中,本披露的制剂包含一种或多种皂和/或有机硅氧烷表面活性剂。
可掺入本披露的制剂中或本披露的蛋白质和其他组合物可掺入其中的分散剂的非限制性实例包括ATLOXTM(例如4916、4991;新泽西州爱迪生的克罗达国际公司(CrodaInternational PLC,Edison,NJ))、ATLOX METASPERSETM(新泽西州爱迪生的克罗达国际公司)、(例如N系列,诸如N1-3、N1-7、N1-5、N1-9、N23-3、N2.3-6.5、N25-3、N25-7、N25-9、N91-2.5、N91-6、N91-8;伊利诺伊州诺斯菲尔德的斯泰潘公司(Stepan Company,Northfield,IL))、/>非离子表面活性剂(例如DA-4、DA-6和DA-9;伊利诺伊州诺斯菲尔德的斯泰潘公司)、/>粉末(伊利诺伊州芝加哥的阿克苏诺贝尔表面化学有限公司(Akzo Nobel Surface Chemistry LLC,Chicago,IL)、MULTIWETTM表面活性剂(例如MO-85P-PW-(AP);新泽西州爱迪生的克罗达国际公司)、/>L-77(田纳西州科利维尔的海伦娜化工公司(Helena Chemical Company,Collierville,TN))、SPANTM表面活性剂(例如20、40、60、65、80和85;新泽西州爱迪生的克罗达国际公司)、TAMOLTM分散剂(密歇根州米德兰的陶氏化学公司)、TERGITOLTM表面活性剂(例如TMN-6和TMN-100X;密歇根州米德兰的陶氏化学公司)、TERSPERSE表面活性剂(例如2001、2020、2100、2105、2158、2700、4894和4896;德克萨斯州伍德兰的亨茨曼公司(Hunstman Corp.,The Woodlands,TX))、TRITONTM表面活性剂(例如X-100;密歇根州米德兰的陶氏化学公司)、/>表面活性剂(例如20、21、22、23、28、40、60、61、65、80、81和85;新泽西州爱迪生的克罗达国际公司)以及它们的组合。分散剂的另外实例可在Baird和Zublena.1993.Soil Facts:Usingwetting Agents(Nonionic Surfactants)on Soil[土壤事实:在土壤上使用润湿剂(非离子表面活性剂)](North Carolina Cooperative Extension Service Publication[北卡罗来纳州合作推广服务出版物]AG-439-25)(1993);Burges,Formulation of MicrobialBiopesticides:Beneficial Microorganisms,Nematodes and Seed Treatments[微生物生物杀有害生物剂的配制:有益微生物,线虫和种子处理](Springer Science&BusinessMedia[施普林格科学和商业传媒])(2012);McCarty,Wetting Agents[润湿剂](ClemsonUniversity Cooperative Extension Service Publication[克莱姆森大学合作推广服务出版物])(2001)中找到。
可包括在本披露的制剂中的干燥剂的实例包括但不限于干燥粉末。干燥剂的非限制性实例包括疏水性气相二氧化硅粉末(赢创公司(Evonik Corporation),帕西波尼(Parsippany),新泽西州)、/>粉末(比克化学有限公司(BYK-Chemie GmbH),韦塞尔(Wesel),德国)、/>粉末(创新技术公司,萨利纳斯,加利福尼亚州)、/>二氧化硅粉末(赢创公司,帕西波尼,新泽西州)及其组合。干燥剂的另外实例可在Burges,Formulation of Microbial Biopesticides:BeneficialMicroorganisms,Nematodes and Seed Treatments[微生物生物杀有害生物剂的配制:有益微生物、线虫和种子处理](Springer Science&Business Media[施普林格科学和商业传媒])(2012)中找到。在一些实施例中,本披露的组合物包含硬脂酸钙、粘土(例如,凹凸棒石粘土、蒙脱石粘土)、石墨、硬脂酸镁、硫酸镁、奶粉、二氧化硅(例如气相二氧化硅、疏水涂覆的二氧化硅、沉淀二氧化硅)、大豆卵磷脂和/或滑石。
可包括在本披露的制剂中的微生物的实例包括但不限于固氮生物、磷酸盐增溶微生物和生物杀有害生物剂。总体参见例如WO 92/08355;US 2003/082164;US 2008/320615;US 2016/345588;US 2018/168168;US 2005/187107;US 2006/258534;US 2018/279624;US10820594;US 2019/014786;US10874109;US10856552;US 2019/014787;US11076603;US2020/093125;US 2020/085065;US 2020/000098;US 2019/345572;US 2020/263734;WO2021/101949;WO 2021/101937;WO 2016/201284;WO 2018/186307;WO 2007/142543;WO2017/205800;WO 2015/003908;WO2021/018321;WO 2003/016510;WO 2016/044542;WO 92/11856。
在一些实施例中,本披露的制剂包含以下项中的一种或多种:巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)INTA Az-39、解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)D747、解淀粉芽孢杆菌NRRL B 50349、解淀粉芽孢杆菌TJ1000、解淀粉芽孢杆菌FZB24、解淀粉芽孢杆菌FZB42、解淀粉芽孢杆菌IN937a、解淀粉芽孢杆菌IT-45、解淀粉芽孢杆菌TJ1000、解淀粉芽孢杆菌MBI600、解淀粉芽孢杆菌BS27(保藏为NRRL B-5015)、解淀粉芽孢杆菌BS2084(保藏为NRRL B-50013)、解淀粉芽孢杆菌15AP4(保藏为ATCCPTA-6507)、解淀粉芽孢杆菌3AP4(保藏为ATCC PTA-6506)、解淀粉芽孢杆菌LSSA01(保藏为NRRL B-50104)、Bacillus amyloliquefaciens ABP278(保藏为NRRL B-50634)、解淀粉芽孢杆菌1013(保藏为NRRL B-50509)、解淀粉芽孢杆菌918(保藏为NRRL B-50508)、解淀粉芽孢杆菌22CP1(保藏为ATCC PTA-6508)和解淀粉芽孢杆菌BS18(保藏为NRRL B-50633)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)I-1562、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)I-1582、地衣芽孢杆菌(Bacillus lichenformis)BA842(保藏为NRRL B-50516)、地衣芽孢杆菌BL21(保藏为NRRL B-50134)、蕈状芽孢杆菌(Bacillus mycoides)NRRL B-21664、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NRRL B 21662、短小芽孢杆菌NRRL B-30087、短小芽孢杆菌ATCC55608、短小芽孢杆菌ATCC 55609、短小芽孢杆菌GB34、短小芽孢杆菌KFP9F、短小芽孢杆菌QST 2808、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ATCC 55078、枯草芽孢杆菌ATCC 55079、枯草芽孢杆菌MBI 600、枯草芽孢杆菌NRRL B-21661、枯草芽孢杆菌NRRL B-21665、枯草芽孢杆菌CX-9060、枯草芽孢杆菌GB03、枯草芽孢杆菌GB07、枯草芽孢杆菌QST-713、枯草芽孢杆菌FZB24、枯草芽孢杆菌D747、枯草芽孢杆菌3BP5(保藏为NRRL B-50510)、苏云金芽孢杆菌ATCC 13367、苏云金芽孢杆菌GC-91、苏云金芽孢杆菌NRRL B-21619、苏云金芽孢杆菌ABTS-1857、苏云金芽孢杆菌SAN 401I、苏云金芽孢杆菌ABG-6305、苏云金芽孢杆菌ABG-6346、苏云金芽孢杆菌AM65-52、苏云金芽孢杆菌SA-12、苏云金芽孢杆菌SB4、苏云金芽孢杆菌ABTS-351、苏云金芽孢杆菌HD-1、苏云金芽孢杆菌EG 2348、苏云金芽孢杆菌EG 7826、苏云金芽孢杆菌EG 7841、苏云金芽孢杆菌DSM 2803、苏云金芽孢杆菌NB-125、苏云金芽孢杆菌NB-176、慢生根瘤菌种(Bradyrhizobium spp)8A57、埃氏慢生根瘤菌(Bradyrhizobium elkanii)SEMIA 501、埃氏慢生根瘤菌SEMIA 587、埃氏慢生根瘤菌SEMIA 5019、大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)61A227、大豆慢生根瘤菌61A228、大豆慢生根瘤菌61A273、大豆慢生根瘤菌E-109、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50586(也保藏为NRRL B-59565)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50587(也保藏为NRRL B-59566)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50588(也保藏为NRRL B-59567)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50589(也保藏为NRRL B-59568)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50590(也保藏为NRRL B-59569)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50591(也保藏为NRRL B-59570)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50592(也保藏为NRRL B-59571)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50593(也保藏为NRRL B-59572)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50594(也保藏为NRRL B-50493)、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50608、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50609、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50610、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50611、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50612、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50726、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50727、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50728、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50729、大豆慢生根瘤菌NRRL B-50730、大豆慢生根瘤菌SEMIA 566、大豆慢生根瘤菌SEMIA 5079、大豆慢生根瘤菌SEMIA 5080、大豆慢生根瘤菌USDA 6、大豆慢生根瘤菌USDA 110、大豆慢生根瘤菌USDA 122、大豆慢生根瘤菌USDA 123、大豆慢生根瘤菌USDA127、大豆慢生根瘤菌USDA 129、大豆慢生根瘤菌USDA 532C、绿粘帚霉(Gliocladiumvirens)ATCC 52045、绿粘帚霉GL-21、根内球囊霉(Glomus intraradices)RTI-801、黑僵菌(Metarhizium anisopliae)F52、拜赖青霉菌(Penicillium bilaiae)ATCC 18309、拜赖青霉菌ATCC 20851、拜赖青霉菌ATCC 22348、拜赖青霉菌NRRL 50162、拜赖青霉菌NRRL50169、拜赖青霉菌NRRL 50776、拜赖青霉菌NRRL 50777、拜赖青霉菌NRRL 50778、拜赖青霉菌NRRL 50777、拜赖青霉菌NRRL 50778、拜赖青霉菌NRRL 50779、拜赖青霉菌NRRL 50780、拜赖青霉菌NRRL 50781、拜赖青霉菌NRRL 50782、拜赖青霉菌NRRL 50783、拜赖青霉菌NRRL50784、拜赖青霉菌NRRL 50785、拜赖青霉菌NRRL 50786、拜赖青霉菌NRRL 50787、拜赖青霉菌NRRL 50788、拜赖青霉菌RS7B-SD1、短密青霉菌(Penicillium brevicompactum)AgRF18、变灰青霉菌(Penicillium canescens)ATCC 10419、扩展青霉菌(Penicillium expansum)ATCC 24692、扩展青霉菌YT02、瘿青霉菌(Penicillium fellatanum)ATCC 48694、加斯特氏青霉菌(Penicillium gaestrivorus)NRRL 50170、平滑青霉菌(Penicillium glabrum)DAOM 239074、平滑青霉菌CBS 229.28、微紫青霉菌(Penicilliumjanthinellum)ATCC10455、拉诺索可鲁里木青霉菌(Penicillium lanosocoeruleum)ATCC 48919、甘蓝青霉菌(Penicillium radicum)ATCC 201836、甘蓝青霉菌FRR 4717、甘蓝青霉菌FRR 4719、甘蓝青霉菌N93/47267、雷斯青霉菌(Penicillium raistrickii)ATCC 10490、杰氏假单胞菌(Pseudomonas jessenii)PS06、豆科根瘤菌(Rhizobium leguminosarum)SO12A-2(IDAC080305-01)、费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)CCBAU114、费氏中华根瘤菌USDA205、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)SKT-1、棘孢木霉ICC 012、深绿木霉(Trichoderma atroviride)LC52、深绿木霉CNCM 1-1237、顶孢木霉(Trichodermafertile)JM41R、盖姆斯木霉(Trichoderma gamsii)ICC 080、钩状木霉(Trichodermahamatum)ATCC 52198、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)ATCC 52445、哈茨木霉KRL-AG2、哈茨木霉T-22、哈茨木霉TH-35、哈茨木霉T-39、哈茨木霉ICC012、里氏木霉(Trichodermareesi)ATCC 28217、绿木霉(Trichoderma virens)ATCC 58678、绿木霉Gl-3、绿木霉GL-21、绿木霉G-41、绿色木霉(Trichoderma viridae)ATCC 52440、绿色木霉ICC080、绿色木霉TV1、嗜虫耶尔森氏菌(Yersinia entomophaga)株系O43NEW(NRRL B-67598)、嗜虫耶尔森氏菌株系O24G3R(NRRL B-67599)、嗜虫耶尔森氏菌株系O24KEK(NRRL B-67600)和嗜虫耶尔森氏菌株系O333A4(NRRL B-67601)。
可掺入本披露的制剂中或本披露的蛋白质和其他组合物可掺入其中的微生物组合物的非限制性实例包括但不限于以以下商标名销售的商业产品:来自德国路德维希港的巴斯夫公司的来自美国密苏里州克雷夫科尔的拜尔作物科学公司的来自美国北卡罗来纳州达勒姆的诺维信北美公司(Novozymes NorthAmerica,Inc.,Durham,NC,USA)的
和/>
可包括在本披露的制剂中的营养物的实例包括但不限于有机酸(例如乙酸、柠檬酸、乳酸、苹果酸、牛磺酸等),常量矿物质(例如磷、钙、镁、钾、钠、铁等),痕量矿物质(如硼、钴、氯化物、铬、铜、氟化物、碘、锰、钼、硒、锌等),维生素(例如维生素A、维生素B复合物(即维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B8、维生素B9、维生素B12、胆碱)、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K),类胡萝卜素(α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、隐黄质、叶黄素、番茄红素、玉米黄质等)以及它们的组合。还可总体参见例如US 2014/235447;WO 2022/029224;WO 2022/029221;WO 2021/255118;WO 2021/247915;US 2021/300837;US 2020/148605;US 2012/247164;US 2016/355443;US 2020/055794;US 2011/154873;US 2006/243009;US 2017/088474。
可包括在本披露的制剂中的有害生物引诱剂和摄食刺激剂的实例包括但不限于小蠹性信息素、赛拉罗(ceralure)、十二碳烯醇(codlelure)、诱蝇酮、舞毒蛾性诱剂、谷蠹引诱剂(dominicalure)、丁香酚、南部松小蠹诱剂、红铃虫性诱剂、棉象甲性诱剂、红蛉诱烯(hexalure)、齿小蠹二烯醇、齿小蠹烯醇、日本弧丽跋素、latitlure、昆虫性引诱剂(lineatin)、litlure、粉纹夜蛾性诱剂、诱杀酯(medlure)、美甲托酸(megatomic acid)、甲基丁香酚、蘑菇醇(moguchun)、α-多纹素(α-multistriatin)、家蝇性诱剂、orfalure、oryctalure、欧斯摧蒙(ostramone)、红圆蚧引诱剂(rescalure)、诱虫环(siglure)、食菌甲诱醇、地中海实蝇性诱剂(trimedlure)、大粉长谷蠹信息素引诱剂(trunc-call)以及它们的组合。总体参见例如WO 00/28824;US 5607684;US 4510133;US 5290556;US 60774634;US 6773727;WO 2022/051661;EP 0563963;WO 2013/164384;WO 2003/020030;US8420070;US 5401506;WO 92/11856。
可包括在本披露的制剂中的收获后处理剂的实例包括但不限于精油、乙烯生物合成抑制剂(例如环丙烯)、杀有害生物剂和蜡。总体参见例如WO 00/10386;WO 01/43548;US2002/058592;US 2002/061822;US 2002/043730;US 2002/198107;US 2004/072694;US2003/100450;US 2004/077502;US 2005/043179;US 2005/250649;US 2005/261131;US2005/261132;US 2005/288189;CA 2512254;CA 2512256;US 2007/117720;US 2007/265166;US 2008/113867;US 2010/144533;US 2008/206823;US 2009/035380;US2009/077684;US 2009/118492;US 2009/230350;US 2010/047408;US 2011/321191;US 2011/034335;US 2011/014334;US 2012/272572;US 2012/282380;US 2011/293801;US 2012/004108;US 2013/065764;US2012/258220;US 2012/142534;US 2014/127309;US 2013/004634;US 2014/011679;US 2015/208679;WO 2014/120715;WO 2015/175157;WO 2017/180695;US 2014/080710;US 2015/237877;US 2015/272115;US 2016/000072;US 2015/366189;US 2014/242235;US 2014/271758;US 2016/066568;US 2016/095311;US 2015/018430;US 2015/087520;US 2015/231588;US 2015/366230;US 2016/235070;US 2016/324147;US 2017/251673;US 2017/251662;US 2017/251669;US 2017/265462;US 2017/318804;US 2018/139975;US 2018/356384;US 2021/102245;US 2021/238201;WO 2022/094214;EP 2468107;ES 2439616;WO 2014/128321;WO 2018/116027;WO 2018/128807;WO2019/058211;WO 2020/157714;US 2009/253578;US 2009/253579;US 2004/146617;US2022/087261;WO 2020/016728;US 2010/173773;US 2010/292080;US 5858436;EP0972450;US 6221414;US 6723364;WO 00/49880;US 6403139;US 2005/129662;US 2006/228458;US 2005/137090;US 2006/276336;US 2008/175926;US 2008/016766;US 2008/145499;US 2010/092631;US 2010/081636;US 2011/003694;US 2011/008475;US 2010/298147;US 2013/072383;US 2013/156835;US 2013/266670;US 2013/236562;US 2013/178489;US 2014/187570;US 2013/306158;US 2013/341809;US 2016/330987;WO 2017/001502;US 2019/159469;WO 2017/220581;US 2020/060300;US 2020/221719;WO 2020/016154;WO 2020/225066;WO 2021/233900;WO 2005/058014。
可掺入本披露的制剂中或本披露的蛋白质和其他组合物可掺入其中的收获后处理组合物的非限制性实例包括以以下商标名销售的商业产品:来自美国宾夕法尼亚州费城的阿格洛法士公司(AgroFresh,Inc.)的ACTISEALTM、ETHYLBLOC、FRESHSTART、SMARTCITRUS、TEYCER、VITAFRESH;来自荷兰塞拉迪斯作物保护公司(CERADIS Crop Protection,CeradisB.V.,Netherlands)的 和CERAFRUTA;来自美国加利福尼亚州蒙诺维亚的美国德高采后公司的/>APL-BRITE、/>CITRUBLUSH、CITRUSBRITE、CITRUS FIXTM、CITRUS/>DECCO和DECCONATURTM;来自美国华盛顿州沃帕托的佩斯国际公司的SEMPERFRESH、LUSTREDRY、NATURAL/> 和XEDAQUIN;来自瑞士巴塞尔的先正达作物保护公司的/> 和/>以及来自印度马哈拉施特拉邦孟买的印度联合磷化物有限公司的MAGNAPHOS、QUICKPHLO-R、QUICKPHOS。
应当理解,上文描述为“化学活性剂”和“化学活性组合物”的许多化合物可在收获前和收获后施用于植物和植物部分,因此也可被认为是“收获后处理剂”和“收获后处理组合物”。
合适的UV保护剂的实例包括但不限于芳族氨基酸(例如色氨酸、酪氨酸)、类胡萝卜素、肉桂酸盐、木质素磺酸盐(例如木质素磺酸钙、木质素磺酸钠)、黑色素、菌孢素、多酚和/或水杨酸盐。UV保护剂的非限制性实例包括Borregaard LignoTechTM木质素磺酸盐(例如Borresperse 3A、Borresperse CA、Borresperse NA、Marasperse AG、Norlig A、Norlig11D、Ufoxane 3A、Ultrazine NA、Vanisperse CB;挪威萨尔普斯堡的鲍利葛木质素科技公司(Borregaard Lignotech,Sarpsborg,Norway))以及它们的组合。UV保护剂的另外实例可在Burges,Formulation of Microbial Biopesticides:Beneficial Microorganisms,Nematodes and Seed Treatments[微生物生物杀有害生物剂的配制:有益微生物、线虫和种子处理](Springer Science&Business Media[施普林格科学和商业传媒])(2012)中找到。
合适的润湿剂的实例包括但不限于萘磺酸盐,诸如烷基萘磺酸盐(例如烷基萘磺酸钠)、异丙基萘磺酸盐(例如异丙基萘磺酸钠)和丁基萘磺酸盐(例如正丁基萘磺酸钠)。
应当理解,本披露的制剂可包含酶的组合,包括但不限于本文明确披露的酶的组合和与本文未明确披露的酶的组合。
在一些实施例中,本披露的制剂包含2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种本披露的蛋白质。例如,在一些实施例中,本披露的制剂包含2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种本文如SEQ ID NO:1-48和98-150所示的多肽或其成熟多肽。
应当理解,本披露的制剂可包含一种或多种填料和/或运载体材料以增加体积并改善制剂的可操作性。用于颗粒/粒子制剂的合适填料或运载体材料包括但不限于各种碳酸盐、氯化物、硅酸盐和硫酸盐,以及滑石、粘土等。用于液体制剂的合适填料或运载体材料包括但不限于水或低分子量伯醇和仲醇,包括多元醇和二元醇。此类醇的实例包括但不限于甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇。在一些实施例中,本披露的制剂包含约5%至约90%w/w的此类填料/运载体材料。
在一些优选的实施例中,本披露的制剂包含以下项、基本上由以下项组成或者由以下项组成:
a)约0.0001%至约25%w/w蛋白质(例如,本披露的一种或多种蛋白质),更优选地约0.0001%至约5%w/w,甚至更优选地约0.001%至约1%w/w;
b)约25%至约75%w/w酶稳定剂(例如,一种或多种多元醇,诸如甘油和/或山梨醇),更优选地约25%至约50%w/w,甚至更优选地约35%至约45%w/w;
c)约0.001%至约1%w/w防腐剂(例如,山梨酸钾和/或苯甲酸钠),更优选地约0.01%至约1%w/w,甚至更优选地0.1%至约0.5%;以及
d)水。
在一些优选的实施例中,本披露的制剂包含以下项、基本上由以下项组成或者由以下项组成:
a)约0.0001%至约25%w/w蛋白质(例如,本披露的一种或多种蛋白质),更优选地约0.0001%至约5%w/w,甚至更优选地约0.001%至约1%w/w;
b)约0.001%至约1%w/w防腐剂(例如,山梨酸钾和/或苯甲酸钠),更优选地约0.01%至约1%w/w,甚至更优选地0.1%至约0.5%;以及
c)水。
在一些优选的实施例中,本披露的制剂包含以下项、基本上由以下项组成或者由以下项组成:
a)约0.0001%至约25%w/w蛋白质(例如,本披露的一种或多种蛋白质),更优选地约0.0001%至约5%w/w,甚至更优选地约0.001%至约1%w/w;
b)约25%至约75%w/w酶稳定剂(例如,一种或多种多元醇,诸如甘油和/或山梨醇),更优选地约25%至约50%w/w,甚至更优选地约35%至约45%w/w;以及
c)水。
在一些优选的实施例中,本披露的制剂包含以下项、基本上由以下项组成或者由以下项组成:
a)约0.0001%至约5%w/w蛋白质(例如,本披露的一种或多种蛋白质),更优选地约0.0001%至约1%w/w,甚至更优选地约0.0001%至约0.5%w/w;
b)约0.001%至约10%w/w耐雨剂(例如,一种或多种有机改性的硅氧烷,诸如有机改性的三硅氧烷和有机改性的聚硅氧烷),更优选地约0.025%至约1%w/w,甚至更优选地约0.025%至约0.5%w/w;
c)约0.001%至约5%w/w pH控制组分(例如,一种或多种乙酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐和/或磷酸盐缓冲剂),更优选地约0.01%至约1%w/w,甚至更优选地0.05%至约0.5%;以及
d)水。
在一些优选的实施例中,本披露的制剂包含以下项、基本上由以下项组成或者由以下项组成:
a)约0.0001%至约5%w/w蛋白质(例如,本披露的一种或多种蛋白质),更优选地约0.0001%至约1%w/w,甚至更优选地约0.0001%至约0.5%w/w;
b)约0.001%至约10%w/w耐雨剂(例如,一种或多种有机改性的硅氧烷,诸如有机改性的三硅氧烷和有机改性的聚硅氧烷),更优选地约0.025%至约1%w/w,甚至更优选地约0.025%至约0.5%w/w;
c)约0.001%至约5%w/w pH控制组分(例如,一种或多种乙酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐和/或磷酸盐缓冲剂),更优选地约0.01%至约1%w/w,甚至更优选地0.05%至约0.5%;
d)约1%至约5%w/w酶稳定剂(例如,一种或多种多元醇,诸如甘油和/或山梨醇),更优选地约1%至约2.5%w/w,甚至更优选地约1%至约2%w/w;以及
e)水。
如以下所示的实例所证实,酶的组合可特别用于预防、治疗、抑制、消除由园艺有害生物(诸如螨虫、细菌、真菌、腹足类动物、昆虫、线虫、卵菌、原生动物和杂草)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,本披露的制剂包含两种或更多种不同的纤维素酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含两种或更多种不同的葡聚糖酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含两种或更多种不同的半纤维素酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含两种或更多种不同的果胶酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含两种或更多种不同的肽酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含两种或更多种不同的蛋白酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含两种或更多种不同的木聚糖酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种纤维素酶和至少一种半纤维素酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种淀粉酶、至少一种葡聚糖酶和至少一种杆菌溶素。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种纤维素酶、至少一种半纤维素酶和至少一种木聚糖酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种纤维素酶、至少一种葡聚糖酶和至少一种果胶酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种纤维素酶、至少一种葡聚糖酶和至少一种木聚糖酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种纤维素酶和至少一种木聚糖酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种呋喃糖苷酶和至少一种木聚糖酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种半纤维素酶和至少一种木聚糖酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含至少一种肽酶和至少一种蛋白酶。
在一些实施例中,本披露的制剂包含含有2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种酶的发酵液。
在一些实施例中,本披露的制剂包含含有2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种本披露的蛋白质的发酵液。
本披露还提供了编码本披露的蛋白质的多核苷酸,包括但不限于编码本披露的一种或多种酶的核酸构建体、重组表达载体和重组宿主细胞,以及产生此类多核苷酸的方法。
多核苷酸可以是基因组DNA、cDNA、合成DNA、合成RNA、mRNA或它们的组合。
多核苷酸可从任何合适的属、种或株系克隆。
在一些实施例中,蛋白质从革兰氏阴性细菌(诸如弯曲菌属、网团菌属(例如,嗜热网团菌)、埃希氏菌属(例如,大肠杆菌)、黄杆菌属、梭杆菌属、螺杆菌属、泥杆菌属、奈瑟氏菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属或脲原体属)克隆。
在一些实施例中,多核苷酸从革兰氏阳性细菌(诸如芽孢杆菌属(例如,粘琼脂芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、脱支芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌)、梭菌属、肠球菌属、地芽孢杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、大洋芽孢杆菌属(例如,芭芭拉大洋芽孢杆菌)、葡萄球菌属、链球菌属(例如,似马链球菌、酿脓链球菌、乳房链球菌和马链球菌兽疫亚种)或链霉菌属(例如,不产色链霉菌、除虫链霉菌、天蓝链霉菌、灰色链霉菌、浅青紫链霉菌)克隆。
在一些实施例中,多核苷酸从真菌(诸如支顶孢属、曲霉属(例如,棘孢曲霉、泡盛曲霉、臭曲霉、烟曲霉、日本曲霉、构巢曲霉、黑曲霉、米曲霉)、金黄担子菌属、烟管菌属(例如,多孔烟管菌)、拟蜡菌属(例如,干拟蜡菌、卡内基拟蜡菌、浅黄拟蜡菌、潘诺希塔拟蜡菌、环带拟蜡菌、微红拟蜡菌、虫拟蜡菌)、毛壳菌属(例如,无定毛壳菌)、金孢子菌属(例如,狭边金孢子菌、嗜角质金孢子菌、卢克诺文思金孢子菌、粪状金孢子菌、毡金孢子菌、昆士兰金孢子菌、热带金孢子菌、带纹金孢子菌)、鬼伞属(例如,灰盖鬼伞)、革盖菌属(例如,毛革盖菌)、隐球菌属、丝梗霉属、镰孢属(例如,杆孢状鐮孢、谷类镰孢、库威镰孢、大刀镰孢、禾谷镰孢、禾赤镰孢、异孢镰孢、合欢木镰孢、尖孢镰孢、多枝镰孢、粉红镰孢、接骨木镰孢、肤色镰孢、茄病镰孢、拟分枝孢镰孢、硫色镰孢、圆镰孢、拟丝孢镰孢、金大刀镰孢)、腐质霉属(例如,特异腐质霉、柔毛腐质霉)、巨座壳属、微座孢属(例如,雪腐微座孢)、毛霉属(例如,米黑毛霉)、毁丝霉属(例如,嗜热毁丝霉)、新美鞭菌属、脉孢菌属(例如,粗糙脉孢菌)、拟青霉属、青霉菌属(例如,产紫青霉菌)、原毛平革菌属(例如,黄孢原毛平革菌)、射脉菌属(例如,侧射脉菌)、梨囊鞭菌属、侧耳属(例如,刺芹侧耳)、裂褶菌属、踝节菌属(例如,埃默森踝节菌)、嗜热子囊菌属(例如,橙色嗜热子囊菌)、梭孢壳属(例如,太瑞斯梭孢壳)、弯颈霉属、栓菌属(例如,长绒毛栓菌、变色栓菌)或木霉属(例如,深绿木霉、哈茨木霉、康宁木霉、长枝木霉、里氏木霉、绿色木霉)克隆。
在一些实施例中,多核苷酸从酵母(诸如假丝酵母属、汉逊酵母属、克鲁维酵母属(例如,乳酸克鲁维酵母)、毕赤酵母属、酵母属(例如,卡尔酵母、酿酒酵母、糖化酵母、道格拉氏酵母、克鲁弗酵母、诺地酵母、卵形酵母)、裂殖酵母属或耶氏酵母属(例如,解脂耶氏酵母)克隆。
在一些实施例中,多核苷酸编码:
a)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或多个具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及/或者
g)a)至f)中任一项的多肽的片段。
在优选的实施例中,多核苷酸编码包含SEQ ID NO:1-48和98-150中任一个的氨基酸序列或其成熟多肽、基本上由该氨基酸序列或其成熟多肽组成或者由氨基酸序列或其成熟多肽组成的多肽。
在一些实施例中,多核苷酸包含与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的核酸序列、基本上由该核酸序列组成或者由该核酸序列组成;
在优选的实施例中,多核苷酸包含SEQ ID NO:49-97和151-203中任一个的核酸序列或其cDNA序列、基本上由该序列组成或者由该序列组成。
在一些实施例中,多核苷酸编码包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个的片段或其成熟肽、基本上由该片段或其成熟肽组成或者由该片段或其成熟肽组成的多肽。例如,多核苷酸可编码SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的片段或其成熟肽,所述片段包含在原始蛋白质中发现的至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的氨基酸。
在一些实施例中,本披露的多核苷酸编码包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽、基本上由该任一个或其成熟多肽组成或者由该任一个或其成熟多肽组成的多肽,该多肽具有一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的N-末端延伸、一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的C-末端延伸、一个或多个取代(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个取代)、一个或多个插入(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个插入)和/或一个或多个缺失(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个缺失)。氨基酸改变可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地为1-30个氨基酸的小缺失;小的氨基末端或羧基末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的小接头肽;或小的延伸,其通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合模块)来促进纯化。
本披露的多核苷酸可通过引入不会导致蛋白质的氨基酸序列改变但对应于旨在产生酶的宿主生物体的密码子使用的核苷酸取代或者通过引入可产生不同氨基酸序列的核苷酸取代来突变。对于核苷酸取代的一般描述,参见例如Ford等人,1991,ProteinExpression and Purification[蛋白质表达与纯化]2:95-107。
在一个方面,多核苷酸是分离的。
在另一方面,多核苷酸是纯化的。
本披露还涉及包含本披露的多核苷酸的核酸构建体,其中该多核苷酸可操作地连接至一个或多个控制序列,这些控制序列在与控制序列相容的条件下指导编码序列在合适的宿主细胞中表达。
该多核苷酸可以按多种方式操纵,以提供该蛋白质的表达。取决于表达载体,在多核苷酸插入载体之前对其进行操纵可能是理想的或必需的。用于利用重组DNA方法修饰多核苷酸的技术是本领域熟知的。
控制序列可以是启动子,即被宿主细胞识别用于表达编码本披露的蛋白质的多核苷酸的多核苷酸。该启动子包含转录控制序列,这些序列介导了该蛋白质的表达。该启动子可以是在宿主细胞中显示出转录活性的任何多核苷酸,包括突变型、截短型及杂合型启动子,并且可以是由编码与该宿主细胞同源或异源的细胞外或细胞内蛋白质的基因获得。
用于指导本披露的多核苷酸在细菌宿主细胞中转录的合适启动子的实例描述于Sambrook等人,1989,Molecular Cloning:A Laboratory Manual[分子克隆:实验室手册],Cold Spring Harbor Lab.,NY[纽约冷泉港实验室]、Davis等人,2012,同上;以及Song等人,2016,PLOS One[公共科学图书馆:综合]11(7):e0158447中。
用于指导本披露的多核苷酸在丝状真菌宿主细胞中转录的合适启动子的实例是从曲霉属、镰孢属、根毛霉属(Rhizomucor)和木霉属细胞获得的启动子,诸如Mukherjee等人,2013,“Trichoderma:Biology and Applications[木霉属:生物学和应用]”中以及Schmoll和2016,“Gene Expression Systems in Fungi:Advancements andApplications[真菌中的基因表达系统:进展和应用]”,Fungal Biology[真菌生物学]所述的启动子。
对于酵母宿主中的表达,有用的启动子的实例由Smolke等人,2018,“SyntheticBiology:Parts,Devices and Applications[合成生物学:零件、设备和应用]”(第6章:Constitutive and Regulated Promoters in Yeast:How to Design and Make Use ofPromoters in S.cerevisiae[酵母中的组成型和调控型启动子:如何设计和利用酿酒酵母中的启动子])以及由Schmoll和2016,“Gene Expression Systems inFungi:Advancements and Applications[真菌中的基因表达系统:进展和应用]”,FungalBiology[真菌生物学]描述。
控制序列也可以是被宿主细胞识别以终止转录的转录终止子。终止子可操作地连接到编码蛋白质的多核苷酸的3'-末端。在宿主细胞中有功能的任何终止子都可用于本披露中。
细菌宿主细胞的优选终止子可从以下项的基因获得:克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶(aprH)、地衣芽孢杆菌α-淀粉酶(amyL)和大肠杆菌核糖体RNA(rrnB)。
丝状真菌宿主细胞的优选终止子可从曲霉属或木霉属物种获得,诸如从黑曲霉葡糖淀粉酶、里氏木霉β-葡糖苷酶、里氏木霉纤维二糖水解酶I和里氏木霉内切葡聚糖酶I的基因获得,诸如Mukherjee等人,2013,“Trichoderma:Biology and Applications[木霉属:生物学和应用]”中以及Schmoll和2016,“Gene Expression Systems inFungi:Advancements and Applications[真菌中的基因表达系统:进展和应用]”,FungalBiology[真菌生物学]所述的终止子。
酵母宿主细胞的优选终止子可从以下项的基因获得:酿酒酵母烯醇酶、酿酒酵母细胞色素C(CYC1)和酿酒酵母甘油醛-3磷酸脱氢酶。酵母宿主细胞的其他有用的终止子由Romanos等人,1992,Yeast[酵母]8:423-488描述。
控制序列还可以是启动子下游和基因的编码序列上游的mRNA稳定子区域,其增加该基因的表达。
适合的mRNA稳定子区域的实例获得自苏云金芽孢杆菌cryIIIA基因(WO 94/25612)和枯草芽孢杆菌SP82基因(Hue等人,1995,J.Bacteriol.[细菌学杂志]177:3465-3471)。
真菌细胞的mRNA稳定剂区域的实例描述于Geisberg等人,2014,Cell[细胞]156(4):812-824以及Morozov等人,2006,Eukaryotic Cell[真核细胞]5(11):1838-1846中。
控制序列也可以是前导序列,即对宿主细胞翻译很重要的mRNA非翻译区。前导序列可操作地连接到编码蛋白质的多核苷酸的5'-末端。可使用在宿主细胞中有功能的任何前导序列。
细菌宿主细胞的合适前导序列由Hambraeus等人,2000,Microbiology[微生物学]146(12):3051-3059以及Kaberdin和2006,FEMS Microbiol.Rev.[FEMS微生物学综述]30(6):967-979描述。
丝状真菌宿主细胞的优选前导序列可从以下项的基因获得:米曲霉TAKA淀粉酶和构巢曲霉磷酸丙糖异构酶。
酵母宿主细胞的合适前导序列可从以下项的基因获得:酿酒酵母烯醇酶(ENO-1)、酿酒酵母3-磷酸甘油酸激酶、酿酒酵母α-因子和酿酒酵母醇脱氢酶/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(ADH2/GAP)。
控制序列还可以是多腺苷酸化序列,即可操作地连接到多核苷酸的3'-末端的序列,该序列在转录时被宿主细胞识别为将多腺苷酸残基添加到所转录的mRNA的信号。可使用在宿主细胞中有功能的任何多腺苷酸化序列。
丝状真菌宿主细胞的优选多腺苷酸化序列从以下项的基因获得:构巢曲霉邻氨基苯甲酸合酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、黑曲霉α-葡糖苷酶、米曲霉TAKA淀粉酶和尖孢镰孢胰蛋白酶样蛋白酶。
酵母宿主细胞的有用的多腺苷酸化序列由Guo和Sherman,1995,Mol.CellularBiol.[分子细胞生物学]15:5983-5990描述。
控制序列还可以是编码与蛋白质的N-末端连接的信号肽并指导蛋白质进入细胞的分泌途径的信号肽编码区。多核苷酸的编码序列的5'-端可固有地含有信号肽编码序列,该信号肽编码序列在翻译阅读框中与编码蛋白质的编码序列的区段天然地连接在一起。可替代地,编码序列的5'端可含有对于编码序列是异源的信号肽编码序列。在编码序列天然地不含有信号肽编码序列的情况下,可能需要异源信号肽编码序列。可替代地,异源信号肽编码序列可单纯地替代天然信号肽编码序列以增强蛋白质的分泌。可使用指导表达的蛋白质进入宿主细胞的分泌途径的任何信号肽编码序列。
细菌宿主细胞的有效信号肽编码序列是从以下项的基因获得的信号肽编码序列:芽孢杆菌属NCIB 11837产麦芽糖淀粉酶、地衣芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶、地衣芽孢杆菌β-内酰胺酶、嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶、嗜热脂肪芽孢杆菌中性蛋白酶(nprT、nprS、nprM)和枯草芽孢杆菌prsA。其他信号肽由Freudl,2018,Microbial Cell Factories[微生物细胞工厂]17:52描述。
丝状真菌宿主细胞的有效信号肽编码序列是从以下项的基因获得的信号肽编码序列:黑曲霉中性淀粉酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、米曲霉TAKA淀粉酶、特异腐质霉纤维素酶、特异腐质霉内切葡聚糖酶V、柔毛腐质霉脂肪酶和米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶,诸如由Xu等人,2018,Biotechnology Letters[生物技术快报]40:949-955描述的信号肽。
酵母宿主细胞的有用的信号肽从以下项的基因获得:酿酒酵母α-因子和酿酒酵母转化酶。其他有用的信号肽编码序列由Romanos等人,1992,同上描述。
控制序列还可以是编码位于蛋白质的N-末端处的前肽的前肽编码序列。所得的蛋白质被称为前酶或前蛋白(或在一些情况下被称为酶原)。前蛋白一般是无活性的并且可以通过从前蛋白催化或自催化切割前肽而转化为活性蛋白质。前肽编码序列可从以下项的基因获得:枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶(aprE)、枯草芽孢杆菌中性蛋白酶(nprT)、嗜热毁丝霉虫漆酶(WO 95/33836)、米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶和酿酒酵母α-因子。
在信号肽和前肽序列两者都存在的情况下,前肽序列位于蛋白质的N-末端旁边并且信号肽序列位于前肽序列的N-末端旁边。附加地或可替代地,当信号肽和前肽序列两者都存在时,蛋白质可仅包含信号肽序列的一部分和/或仅包含前肽序列的一部分。可替代地,最终或分离的蛋白质可包含成熟蛋白质和部分或全长包含前肽序列和/或信号肽序列的蛋白质的混合物。
还可能希望添加相对于宿主细胞的生长调节蛋白质的表达的调节序列。调节序列的实例是响应于化学或物理刺激而引起基因的表达开启或关闭的那些,包括调节化合物的存在。原核系统中的调节序列包括lac、tac和trp操纵子系统。在酵母中,可使用ADH2系统或GAL1系统。在丝状真菌中,可使用黑曲霉葡糖淀粉酶启动子、米曲霉TAKA α-淀粉酶启动子和米曲霉葡糖淀粉酶启动子、里氏木霉纤维二糖水解酶I启动子和里氏木霉纤维二糖水解酶II启动子。调节序列的其他实例是允许基因扩增的那些。在真菌系统中,这些调节序列包括在甲氨蝶呤存在下扩增的二氢叶酸还原酶基因以及用重金属扩增的金属硫蛋白基因。
控制序列也可以是转录因子,即编码多核苷酸特异性DNA结合蛋白的多核苷酸,该结合蛋白通过与特定多核苷酸序列结合来控制遗传信息从DNA转录到mRNA的速率。转录因子可单独和/或与复合物中的一种或多种其他蛋白质或转录因子一起通过促进或阻断RNA聚合酶的募集起作用。转录因子的特征在于包含至少一个DNA结合结构域,该结合结构域通常附接到与由转录因子调节的遗传元件相邻的特定DNA序列。转录因子可直接(即通过与其启动子结合来激活编码感兴趣的蛋白质的基因的转录)或间接(即诸如通过与另外的转录因子(其调节编码感兴趣的蛋白质的基因的转录)的启动子结合来激活另外的转录因子的转录)调节感兴趣的蛋白质的表达。真菌宿主细胞的合适转录因子描述于WO 2017/144177中。原核宿主细胞的合适转录因子描述于Seshasayee等人,2011,SubcellularBiochemistry[亚细胞生物化学]52:7-23以及Balleza等人,2009,FEMS Microbiol.Rev.[FEMS微生物学综述]33(1):133-151中。
本披露还涉及包含本披露的多核苷酸、启动子以及转录和翻译终止信号的重组表达载体。各种核苷酸和控制序列可连接在一起以产生重组表达载体,该重组表达载体可包括一个或多个便利的限制位点以允许在此类位点处插入或取代编码蛋白质的多核苷酸。可替代地,可以通过将多核苷酸或包含该多核苷酸的核酸构建体插入用于表达的适当载体中而表达该多核苷酸。在产生表达载体时,编码序列如此位于载体中,使得编码序列与用于表达的适当控制序列可操作地连接。
重组表达载体可以是可以方便地经受重组DNA程序并且可以引起多核苷酸表达的任何载体(例如,质粒或病毒)。载体的选择将典型地取决于载体与待引入载体的宿主细胞的相容性。载体可以是直链或闭合环状质粒。
载体可以是自主复制载体,即作为染色体外实体存在的载体,其复制独立于染色体复制,例如质粒、染色体外元件、微染色体或人工染色体。载体可以含有用于确保自我复制的任何手段。可替代地,载体可以是这样的载体,当它引入宿主细胞中时整合入基因组中并与其中已整合了它的一个或多个染色体一起复制。而且,可以使用单独的载体或质粒或两个或更多个载体或质粒,其共同含有待引入宿主细胞基因组的总DNA,或可以使用转座子。
载体优选地含有允许方便地选择转化细胞、转染细胞、转导细胞等细胞的一个或多个选择性标记。选择性标记是一种基因,其产物提供了杀生物剂抗性或病毒抗性、对重金属抗性、对营养缺陷型的原养型等。
载体优选地含有允许载体整合到宿主细胞的基因组中或载体在细胞中独立于基因组自主复制的至少一个元件。
为了整合到宿主细胞基因组中,载体可依赖于编码蛋白质的多核苷酸序列或用于通过同源重组(诸如同源定向修复(HDR))或非同源重组(诸如非同源末端连接(NHEJ))整合到基因组中的载体的任何其他元件。
为了自主复制,载体可以进一步包含复制起点,该复制起点使得载体能够在讨论中的宿主细胞中自主复制。复制起点可以是在细胞中发挥作用的介导自主复制的任何质粒复制子。术语“复制起点”或“质粒复制子”意指使质粒或载体能够在体内复制的多核苷酸。
可将本披露的多核苷酸的多于一个拷贝插入宿主细胞中以增加蛋白质的产生。例如,将2或3或4或5个或更多个拷贝插入宿主细胞中。可以通过将序列的至少一个另外的拷贝整合到宿主细胞基因组中或通过包括可与多核苷酸一起扩增的选择性标记基因来获得多核苷酸的拷贝数量增加,其中可以通过在适当的选择性试剂存在下培养细胞来选择含有选择性标记基因的扩增拷贝以及由此含有多核苷酸的另外的拷贝的细胞。
本披露还提供了表达本披露的一种或多种蛋白质的细胞,包括天然表达本披露的一种或多种酶的微生物和已被工程化为表达本披露的一种或多种酶的微生物。
在一些实施例中,细胞表达:
a)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或多个具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及/或者
g)a)至f)中任一项的多肽的片段。
在优选的实施例中,细胞表达包含SEQ ID NO:1-48和98-150中任一个的氨基酸序列或其成熟多肽、基本上由该氨基酸序列或其成熟多肽组成或者由氨基酸序列或其成熟多肽组成的多肽。
在一些实施例中,细胞表达包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个的片段或其成熟肽、基本上由该片段或其成熟肽组成或者由该片段或其成熟肽组成的多肽。例如,微生物可表达SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的片段或其成熟肽,所述片段包含在原始蛋白质中发现的至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的氨基酸。
在一些实施例中,细胞表达多肽,该多肽包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽、基本上由该任一个或其成熟多肽组成或者由该任一个或其成熟多肽组成的多肽,该多肽具有一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的N-末端延伸、一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的C-末端延伸、一个或多个取代(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个取代)、一个或多个插入(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个插入)和/或一个或多个缺失(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个缺失)。氨基酸改变可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地为1-30个氨基酸的小缺失;小的氨基末端或羧基末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的小接头肽;或小的延伸,其通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合模块)来促进纯化。
在一些实施例中,细胞包含与本文如SEQ ID NO:49-97和151-203所示的核酸序列中的一种或多种或其cDNA序列至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的同源或异源核酸序列。
在优选的实施例中,细胞包含多核苷酸,该多核苷酸编码包含SEQ ID NO:1-48和98-150中任一个的氨基酸序列或其成熟多肽、基本上由该氨基酸序列或其成熟多肽组成或者由氨基酸序列或其成熟多肽组成的多肽。
在一些实施例中,细胞包含多核苷酸,该多核苷酸包含编码具有与SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或多个具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽的核酸序列、基本上由该核酸序列组成或者由该核酸序列组成。
在一些实施例中,细胞包含多核苷酸,该多核苷酸包含编码具有与SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或多个的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽的核酸序列、基本上由该核酸序列组成或者由该核酸序列组成。
在优选的实施例中,细胞包含多核苷酸,该多核苷酸包含SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个的核酸序列或其cDNA序列、基本上由该核酸序列或其cDNA序列组成或者由该核酸序列或其cDNA序列组成。
在一些实施例中,细胞包含多核苷酸,该多核苷酸编码包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个的片段或其成熟肽、基本上由该片段或其成熟肽组成或者由该片段或其成熟肽组成的多肽。例如,微生物包含多核苷酸,该多核苷酸编码SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的片段或其成熟肽,所述片段包含在原始蛋白质中发现的至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的氨基酸。
在一些实施例中,细胞包含多核苷酸,该多核苷酸编码包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽、基本上由该任一个或其成熟多肽组成或者由该任一个或其成熟多肽组成的多肽,该多肽具有一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的N-末端延伸、一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的C-末端延伸、一个或多个取代(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个取代)、一个或多个插入(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个插入)和/或一个或多个缺失(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个缺失)。氨基酸改变可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地为1-30个氨基酸的小缺失;小的氨基末端或羧基末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的小接头肽;或小的延伸,其通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合模块)来促进纯化。
因此,本披露延伸至包含本披露的多核苷酸的重组宿主细胞,该多核苷酸可操作地连接到指导本披露的蛋白质产生的一个或多个控制序列。
将包含多核苷酸的构建体或载体引入宿主细胞中,使得构建体或载体作为染色体整合体或作为自主复制的染色体外载体维持,如较早前所述。宿主细胞的选择将在很大程度上取决于编码蛋白质的基因及其来源。蛋白质对于重组宿主细胞可以是天然的或异源的。而且,一个或多个控制序列中的至少一个对于编码蛋白质的多核苷酸可以是异源的。重组宿主细胞可包含本披露的多核苷酸的单个拷贝或至少两个拷贝,例如三个、四个、五个或更多个拷贝。
宿主细胞可以是可用于重组产生本披露的蛋白质的任何微生物细胞,例如原核细胞或真菌细胞。
原核宿主细胞可以是任何革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌。革兰氏阳性细菌包括但不限于:芽孢杆菌属、梭菌属、肠球菌属、土芽孢杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、大洋芽孢杆菌属、葡萄球菌属、链球菌属以及链霉菌属。革兰氏阴性细菌包括但不限于:弯曲杆菌属、大肠杆菌、黄杆菌属、梭杆菌属、螺杆菌属、泥杆菌属、奈瑟氏菌属、假单胞菌属、沙门氏菌属以及脲原体属。
细菌宿主细胞可以是任何芽孢杆菌属细胞,包括但不限于嗜碱芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、坚硬芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌以及苏云金芽孢杆菌细胞。在一个实施例中,芽孢杆菌细胞是解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌细胞。
出于本披露的目的,芽孢杆菌类/属/种应如Patel和Gupta,2020,Int.J.Syst.Evol.Microbiol.[国际系统与进化微生物学杂志]70:406-438中所述定义。
细菌宿主细胞还可以是任何链球菌属细胞,包括但不限于类马链球菌、酿脓链球菌、乳房链球菌以及马链球菌兽疫亚种细胞。
细菌宿主细胞还可以是任何链霉菌属细胞,包括但不限于:不产色链霉菌、除虫链霉菌、天蓝链霉菌、灰色链霉菌和浅青紫链霉菌细胞。
用于将DNA引入原核宿主细胞中的方法是本领域熟知的,并且可以使用任何合适的方法,包括但不限于原生质体转化、感受态细胞转化、电穿孔、接合、转导,其中DNA作为线性化或环状多核苷酸引入。本领域技术人员将能够容易地根据例如属来确定用于将DNA引入给定原核细胞中的合适方法。用于将DNA引入原核宿主细胞中的方法例如描述于Heinze等人,2018,BMC Microbiology[BMC微生物学]18:56、Burke等人,2001,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]98:6289-6294、Choi等人,2006,J.Microbiol.Methods[微生物方法杂志]64:391-397以及Donald等人,2013,J.Bacteriol.[细菌学杂志]195(11):2612-2620中。
宿主细胞可以是真菌细胞。如本文所用的“真菌”包括子囊菌门(Ascomycota)、担子菌门(Basidiomycota)、壶菌门(Chytridiomycota)和接合菌门(Zygomycota)以及卵菌门(Oomycota)和所有有丝分裂孢子真菌(如由Hawksworth等人在以下文献中所定义:Ainsworth and Bisby’s Dictionary of The Fungi[安斯沃思和拜斯比真菌字典],第8版,1995,CAB International[国际应用生物科学中心],University Press[大学出版社],Cambridge,UK[英国剑桥])。
真菌细胞可通过涉及原生质体介导的转化、土壤杆菌介导的转化、电穿孔、基因枪方法和冲击波介导的转化的过程(如Li等人,2017,Microbial Cell Factories[微生物细胞工厂]16:168中所综述)以及EP 238023、Yelton等人,1984,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]81:1470-1474;Christensen等人,1988,Bio/Technology[生物技术]6:1419-1422以及Lubertozzi和Keasling,2009,Biotechn.Advances[生物技术进展]27:53-75中所述的程序来转化。然而,可以使用本领域已知的用于将DNA引入真菌宿主细胞中的任何方法,并且DNA可以作为线性化或环状多核苷酸引入。
真菌宿主细胞可以是酵母细胞。如本文所用的“酵母”包括产子囊孢子酵母(ascosporogenous yeast)(内孢霉目(Endomycetales))、产担子孢子酵母(basidiosporogenous yeast)和属于半知菌类(Fungi Imperfecti)(芽孢纲(Blastomycetes))的酵母。出于本披露的目的,酵母应如Biology and Activities ofYeast[酵母的生物学和活性](Skinner,Passmore和Davenport编辑,Soc.App.Bacteriol.Symposium Series No.9[应用细菌学学会专题论文集系列9],1980)中所述那样定义。
酵母宿主细胞可以是假丝酵母属、汉逊酵母属、克鲁维酵母属、毕赤酵母属、酵母属、裂殖酵母属或耶氏酵母属细胞,诸如乳酸克鲁维酵母、卡尔酵母、酿酒酵母、糖化酵母、道格拉氏酵母、克鲁弗酵母、诺地酵母、卵形酵母或解脂耶氏酵母细胞。在一个优选的实施例中,酵母宿主细胞是毕赤酵母属或形氏酵母(Komagataella)细胞,例如巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)细胞(法夫驹形氏酵母(Komagataella phaffii))。
真菌宿主细胞可以是丝状真菌细胞。“丝状真菌”包括真菌门(Eumycota)和卵菌门细分的所有丝状形式(如由Hawksworth等人,1995,同上所定义)。丝状真菌的特征一般在于由几丁质、纤维素、葡聚糖、壳聚糖、甘露聚糖和其他复杂多糖构成的菌丝体壁。营养生长是通过菌丝延伸来进行的,而碳分解代谢是专性需氧的。相反,酵母(如酿酒酵母)的营养生长是通过单细胞菌体的出芽(budding)来进行的,而碳分解代谢可以是发酵性的。
丝状真菌宿主细胞可以是支顶孢属、曲霉属、金黄担子菌属、烟管菌属、拟蜡菌属、金孢子菌属、鬼伞属、革盖菌属、隐球菌属、丝梗霉属、镰孢属、腐质霉属、巨座壳属、毛霉属、毁丝霉属、新美鞭菌属、脉孢菌属、拟青霉属、青霉菌属、原毛平革菌属、射脉菌属、梨囊鞭菌属、侧耳属、裂褶菌属、踝节菌属、嗜热子囊菌属、梭孢壳属、弯颈霉属、栓菌属或木霉属细胞。在一个优选的实施例中,丝状真菌宿主细胞是曲霉属、木霉属或镰孢属细胞。在一个进一步优选的实施例中,丝状真菌宿主细胞是黑曲霉、米曲霉、里氏木霉或金大刀镰孢细胞。
例如,丝状真菌宿主细胞可以是泡盛曲霉(Aspergillus awamori)、臭曲霉(Aspergillus foetidus)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、日本曲霉(Aspergillusjaponicus)、构巢曲霉、黑曲霉、米曲霉、黑刺烟管霉(Bjerkandera adusta)、干拟蜡菌(Ceriporiopsis aneirina)、卡内基拟蜡菌(Ceriporiopsis caregiea)、浅黄拟蜡菌(Ceriporiopsis gilvescens)、潘诺希塔拟蜡菌(Ceriporiopsis pannocinta)、环带拟蜡菌(Ceriporiopsis rivulosa)、微红拟蜡菌(Ceriporiopsis subrufa)、虫拟蜡菌(Ceriporiopsis subvermispora)、狭边金孢子菌(Chrysosporiuminops)、嗜角质金孢子菌(Chrysosporium keratinophilum)、卢克诺文思金孢子菌(Chrysosporium lucknowense)、粪状金孢子菌(Chrysosporium merdarium)、租金孢子菌(Chrysosporium pannicola)、女王杜香金孢子菌(Chrysosporium queenslandicum)、热带金孢子菌(Chrysosporiumtropicum)、褐薄金孢子菌(Chrysosporium zonatum)、灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)、毛革盖菌(Coriolus hirsutus)、杆孢状镰孢、谷类镰孢、库威镰孢、大刀镰孢、谷类镰孢、禾赤镰孢、异孢镰孢、合欢木镰孢、尖孢镰孢、多枝镰孢、粉红镰孢、接骨木镰孢、肤色镰孢、拟分枝孢镰孢、硫色镰孢、圆镰孢、拟丝孢镰孢、镶片镰孢、特异腐质霉、疏棉状腐质霉、米黑根毛霉、嗜热毁丝霉、粗糙脉胞菌、产紫青霉、黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、射脉菌(Phlebia radiata)、刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)、埃默森篮状菌、土生梭孢霉、长域毛栓菌(Trametes villosa)、变色栓菌(Trametes versicolor)、哈茨木霉、康宁木霉、长枝木霉、里氏木霉或绿色木霉细胞。
在一个方面,宿主细胞是分离的。
在另一方面,宿主细胞是纯化的。
本披露还提供了表达本披露的一种或多种蛋白质的植物和植物部分,包括天然表达本披露的一种或多种酶的植物和已被工程化为表达本披露的一种或多种酶的植物。
在一些实施例中,植物或植物部分表达:
a)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或多个具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
b)与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽;
c)由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的多肽;
d)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的多肽;
e)通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的多肽;
f)衍生自a)至e)中任一项的多肽的多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;以及/或者
g)a)至f)中任一项的多肽的片段。
在优选的实施例中,植物或植物部分表达包含SEQ ID NO:1-48和98-150中任一个的氨基酸序列或其成熟多肽、基本上由该氨基酸序列或其成熟多肽组成或者由氨基酸序列或其成熟多肽组成的多肽。
在一些实施例中,植物或植物部分表达包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的一种的片段或其成熟肽、基本上由该片段或其成熟肽组成或者由该片段或其成熟肽组成的多肽。例如,微生物可表达SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的片段或其成熟肽,所述片段包含在原始蛋白质中发现的至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的氨基酸。
在一些实施例中,植物或植物部分表达包含SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽、基本上由该任一个或其成熟多肽组成或者由该任一个或其成熟多肽组成的多肽,该多肽具有一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的N-末端延伸、一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的C-末端延伸、一个或多个取代(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个取代)、一个或多个插入(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个插入)和/或一个或多个缺失(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个缺失)。氨基酸改变可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地为1-30个氨基酸的小缺失;小的氨基末端或羧基末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的小接头肽;或小的延伸,其通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合模块)来促进纯化。
在一些实施例中,植物或植物部分包含同源或异源核酸序列,该同源或异源核酸序列与本文如SEQ ID NO:49-97和151-203所示的核酸序列中的一种或多种或其cDNA序列至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同。
在优选的实施例中,植物或植物部分包含多核苷酸,该多核苷酸编码包含SEQ IDNO:1-48和98-150中任一个的氨基酸序列或其成熟多肽、基本上由该氨基酸序列或其成熟多肽组成或者由氨基酸序列或其成熟多肽组成的多肽。
在一些实施例中,植物或植物部分包含多核苷酸,该多核苷酸包含编码具有与SEQID NO:1-48和98-150中的任一个或多个具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽的核酸序列、基本上由该核酸序列组成或者由该核酸序列组成。
在一些实施例中,植物或植物部分包含多核苷酸,该多核苷酸包含编码具有与SEQID NO:1-48和98-150中的任一个或多个的成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽的核酸序列、基本上由该核酸序列组成或者由该核酸序列组成。
在优选的实施例中,植物或植物部分包含多核苷酸,该多核苷酸包含SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个的核酸序列或其cDNA序列、基本上由该核酸序列或其cDNA序列组成或者由该核酸序列或其cDNA序列组成。
在一些实施例中,植物或植物部分包含多核苷酸,该多核苷酸编码包含SEQ IDNO:1-48和98-150中的一个的片段或其成熟肽、基本上由该片段或其成熟肽组成或者由该片段或其成熟肽组成的多肽。例如,微生物包含多核苷酸,该多核苷酸编码SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的片段或其成熟肽,所述片段包含在原始蛋白质中发现的至少85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的氨基酸。
在一些实施例中,植物或植物部分包含多核苷酸,该多核苷酸编码包含SEQ IDNO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽、基本上由该任一个或其成熟多肽组成或者由该任一个或其成熟多肽组成的多肽,该多肽具有一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的N-末端延伸、一个或多个氨基酸(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个氨基酸)的C-末端延伸、一个或多个取代(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个取代)、一个或多个插入(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个插入)和/或一个或多个缺失(例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个缺失)。氨基酸改变可以具有微小性质,即,不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入;典型地为1-30个氨基酸的小缺失;小的氨基末端或羧基末端延伸,如氨基末端的甲硫氨酸残基;多达20-25个残基的小接头肽;或小的延伸,其通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合模块)来促进纯化。
本披露还延伸至包含本披露的多核苷酸的植物,例如转基因植物、植物部分或植物细胞,以便以可回收的量表达和产生本披露的蛋白质。蛋白质可从植物或植物部分回收。可替代地,含有蛋白质的植物或植物部分可按原样用于改善食品或饲料的质量,例如改善营养价值、可口性和流变特性,或以破坏抗营养因子。
转基因植物可以是双子叶的(双子叶植物)或单子叶的(单子叶植物)。单子叶植物的实例是草,诸如草地早熟禾(蓝草,早熟禾属);饲用草,诸如羊茅属(Festuca)、黑麦草属(Lolium);温带草,诸如翦股颖属(Agrostis);以及谷物,例如小麦、燕麦、黑麦、大麦、稻、高粱、和玉蜀黍(玉米)。
双子叶植物的实例是烟草、豆科植物(诸如羽扇豆、马铃薯、糖甜菜、豌豆、菜豆和大豆)、以及十字花科植物(十字花科)(诸如花椰菜、油菜籽、和紧密相关的模式生物体拟南芥(Arabidopsis thaliana))。
植物部分的实例是茎、愈伤组织、叶、根、果实、种子、和块茎以及包含这些部分的独立组织,例如表皮、叶肉、薄壁组织、维管组织、分生组织。特定植物细胞区室,诸如叶绿体、质外体(apoplast)、线粒体、液泡、过氧化物酶体以及细胞质也被认为是植物部分。此外,任何植物细胞,无论是何种组织来源,都被认为是植物部分。同样地,植物部分,诸如分离以有助于本发明的利用的特定组织和细胞也被认为是植物部分,例如胚、胚乳、糊粉和种皮。
还包括在本披露的范围内的是此类植物、植物部分和植物细胞的子代。
表达该蛋白质的转基因植物或植物细胞可根据本领域已知的方法来构建。简言之,通过将编码该蛋白质的一个或多个表达构建体掺入植物宿主基因组或叶绿体基因组中并且将所得经修饰的植物或植物细胞繁殖成转基因植物或植物细胞来构建植物或植物细胞。在一个实施例中,植物细胞不属于植物品种。
表达构建体便利地是包含编码蛋白质的多核苷酸的核酸构建体,其中多核苷酸与多核苷酸在选择的植物或植物部分中表达所需的适当调节序列可操作地连接。此外,表达构建体可以包含用于鉴定整合了此表达构建体的植物细胞的选择性标记,和将此构建体引入所讨论的植物中所必需的DNA序列(后者取决于所用的引入DNA的方法)。
例如,基于期望在何时、何处和如何表达蛋白质来确定对调节序列诸如启动子和终止子序列以及任选的信号或转运序列的选择(Sticklen,2008,Nature Reviews[自然综述]9:433-443)。例如,编码蛋白质的基因的表达可以是组成型的或诱导型的,或者可以是发育、阶段或组织特异性的,并且可将基因产物靶向特定组织或植物部分,诸如种子或叶片。调节序列由例如Tague等人,1988,Plant Physiology[植物生理学]86:506描述。
对于组成型表达,可以使用35S-CaMV、玉米泛素1、或稻肌动蛋白1启动子(Franck等人,1980,Cell[细胞]21:285-294;Christensen等人,1992,Plant Mol.Biol.[植物分子生物学]18:675-689;Zhang等人,1991,Plant Cell[植物细胞]3:1155-1165)。器官特异性启动子可以是例如来自贮藏库组织(诸如种子、马铃薯块茎和果实)(Edwards和Coruzzi,1990,Ann.Rev.Genet.[遗传学年度评论]24:275-303)或来自代谢库组织(诸如分生组织)(Ito等人,1994,Plant Mol.Biol.[植物分子生物学]24:863-878)的启动子;种子特异性启动子,诸如来自水稻的谷蛋白、醇溶谷蛋白、球蛋白或白蛋白启动子(Wu等人,1998,PlantCell Physiol.[植物与细胞生理学]39:885-889);来自豆球蛋白B4的蚕豆(Vicia faba)启动子和来自蚕豆的未知种子蛋白基因(Conrad等人,1998,J.Plant Physiol.[植物生理学杂志]152:708-711);来自种子油体蛋白的启动子(Chen等人,1998,Plant Cell Physiol.[植物与细胞生理学]39:935-941);来自欧洲油菜(Brassica napus)的贮藏蛋白napA启动子;或本领域已知的任何其他种子特异性启动子,例如,如在WO 91/14772中所描述的。此外,启动子可以是叶特异性启动子,诸如来自稻或番茄的rbcs启动子(Kyozuka等人.,1993,Plant Physiol.[植物生理学]102:991-1000)、小球藻病毒腺嘌呤甲基转移酶基因启动子(Mitra和Higgins,1994,Plant Mol.Biol.[植物分子生物学]26:85-93)、来自水稻的aldP基因启动子(Kagaya等人,1995,Mol.Gen.Genet.[分子遗传学与普通遗传学]248:668-674)、或伤口诱导型启动子(诸如马铃薯pin2启动子)(Xu等人,1993,Plant Mol.Biol.[植物分子生物学]22:573-588)。同样地,该启动子可以通过诸如温度、干旱或盐度变化等非生物处理来诱导,或通过外源地应用使该启动子活化的物质(例如,乙醇;雌激素;植物激素,诸如乙烯、脱落酸、和赤霉酸;及重金属)来诱导。
启动子增强子元件也可用于实现蛋白质在植物中的更高表达。例如,启动子增强子元件可以是置于启动子与编码蛋白质的多核苷酸之间的内含子。例如,Xu等人,1993,同上,披露了使用稻肌动蛋白1基因的第一内含子以增强表达。
选择性标记基因及表达构建体的任何其他部分可以选自本领域中可用的那些。
可以根据本领域中已知的常规技术将核酸构建体并入到植物基因组中,这些常规技术包括土壤杆菌介导的转化、病毒介导的转化、微注射、粒子轰击、生物射弹转化、以及电穿孔(Gasser等人,1990,Science[科学]244:1293;Potrykus,1990,Bio/Technology[生物/技术]8:535;Shimamoto等人,1989,Nature[自然]338:274)。
根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的基因转移是用于产生转基因双子叶植物(关于综述,请参见Hooykas和Schilperoort,1992,Plant Mol.Biol.[植物分子生物学]19:15-38)并且用于转化单子叶植物的方法,尽管对于这些植物可以使用其他转化方法。一种用于生成转基因单子叶植物的方法是胚性愈伤组织或发育的胚的粒子轰击(涂覆有转化DNA的微观金或钨颗粒)(Christou,1992,Plant J.[植物杂志]2:275-281;Shimamoto,1994,Curr.Opin.Biotechnol.[生物技术当前述评]5:158-162;Vasil等人,1992,Bio/Technology[生物/技术]10:667-674)。用于转化单子叶植物的替代方法是基于原生质体转化,如由Omirulleh等人,1993,Plant Mol.Biol.[植物分子生物学]21:415-428所描述的。另外的转化方法包括美国专利号6,395,966和7,151,204(两者都通过援引以其全文并入本文)中所描述的那些。
在转化后,根据本领域熟知的方法选出已并入了表达构建体的转化体,并使其再生成为完整植物。通常设计转化程序用于通过如下方法在再生期间或在后续世代中选择性消除选择基因:例如,使用带有两个独立的T-DNA构建体的共转化或利用特异性重组酶位点特异性地切除选择基因。
除用本披露的构建体直接转化特定植物基因型之外,还可通过使具有该构建体的植物与缺乏该构建体的第二植物杂交来制备转基因植物。例如,可以通过杂交将编码蛋白质的构建体引入特定植物品种中,而不需要直接转化该给定品种的植物。因此,本披露不仅涵盖从已经根据本披露转化的细胞直接再生的植物,而且还涵盖此类植物的子代。如本文所用,子代可指根据本披露制备的亲本植物的任何世代的后代。这种子代可包括根据本披露制备的DNA构建体。杂交导致通过将起始系用供体植物系交叉授粉,将转基因引入植物系中。此类步骤的非限制性实例描述于美国专利号7,151,204中。
植物可以通过回交转化工艺生成。例如,植物包括被称为回交转化的基因型、种系、近交体或杂交体的植物。
遗传标记可用于协助本披露的一种或多种转基因从一个遗传背景基因渗入到另一个中。标记协助的选择提供了相对于常规育种的优势,在于其可以用于避免由表型变异引起的错误。此外,遗传标记可以在特定杂交的个别子代中提供有关良种种质相对程度的数据。例如,当具有所需性状并且另外具有非农艺学所希望的遗传背景的植物与良种亲本杂交时,可以使用遗传标记来选择不仅具有感兴趣的性状,还具有相对较大比例所需种质的子代。以这种方式,使一种或多种性状渗入特定遗传背景中所需的世代数得以最小化。
本披露还涉及产生本披露的蛋白质的方法,这些方法包括(a)在有益于产生该蛋白质的条件下培养包含编码该蛋白质的多核苷酸的转基因植物或植物细胞;以及(b)回收该蛋白质。
本披露还衍生至产生亲本细胞的突变体的方法,这些方法包括破坏或缺失编码本披露的蛋白质的多核苷酸或其部分,这导致在相同条件下培养时,突变细胞比亲本细胞产生更少的蛋白质。
突变细胞可通过使用本领域熟知的方法(例如,一个或多个核苷酸插入、一个或多个基因破坏、一个或多个核苷酸替换或者一个或多个核苷酸缺失)减少或消除多核苷酸的表达来构建。
待修饰或失活的多核苷酸可以是例如编码区或其活性所必需的部分,或者编码区表达所需的调节或控制元件(例如,启动子序列的功能部分),以及/或者多核苷酸转录或翻译所需的调节或控制元件。用于可能的修饰的其他控制序列包括但不限于前导序列、多腺苷酸化序列、前肽序列、信号肽序列、转录终止子和转录激活子。
该多核苷酸的修饰或灭活可以通过使亲本细胞经受诱变,并且选择该多核苷酸的表达被降低或消除的突变细胞来进行。该诱变可以是特异的或随机的,例如可以通过使用适合的物理或化学诱变剂、通过使用适合的寡核苷酸、或通过使DNA序列经受PCR产生的诱变来进行。此外,诱变可通过使用这些诱变剂的任何组合来进行。
物理或化学诱变剂的实例包括紫外线(UV)照射、羟胺、N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)、O-甲基羟胺、亚硝酸、甲磺酸乙酯(EMS)、亚硫酸氢钠、甲酸和核苷酸类似物(参见J.L.Bose,Springer Protocols[斯普林格协议]2016,Methods in Molecular Biology,The Genetic Manipulation of Staphylococci[分子生物学方法:葡萄球菌属的基因操纵])。
附加地或可替代地,可插入或去除核苷酸以使得引入终止密码子、去除起始密码子或改变开放阅读框。这种修饰或失活可通过根据本领域已知的方法的定点诱变或PCR产生的诱变或者通过使用一种或多种核酸酶(例如,锌指核酸酶或CRISPR相关核酸酶)的靶向基因编辑来完成。附加地或可替代地,修饰或失活可通过基因沉默、遗传遏制、遗传激活和/或翻译后诱变(例如,通过采用非编码RNA、RNAi、siRNA、miRNA、核酶、催化失活核酸酶、CRISPRi、核苷酸甲基化和/或组蛋白乙酰化的方法)来实现。修饰可以是瞬时的和/或可逆的、不可逆的和/或稳定的,或者修饰可依赖于化学诱导剂或依赖于培养条件,诸如培养温度。
修饰可在体内进行,即直接在表达待修饰的多核苷酸的细胞上进行,或者修饰可在体外进行。
消除或降低多核苷酸的表达的便利的方法的实例是基于基因替代、基因缺失、或基因破坏技术的。例如,在基因破坏方法中,将对应于内源多核苷酸的核酸序列在体外进行诱变以产生缺陷的核酸序列,然后将其转化到亲本细胞中以产生缺陷的基因。通过同源重组,缺陷的核酸序列替代内源多核苷酸。可能令人希望的是,缺陷的多核苷酸还编码可用于选择其中该多核苷酸已经被修饰或破坏的转化体的标记。在一个方面,用选择性标记(诸如本文描述的那些)来破坏多核苷酸。
本披露进一步涉及亲本细胞的突变细胞,该突变细胞包含编码蛋白质的多核苷酸或其控制序列的破坏或缺失、或者编码蛋白质的沉默基因,这导致突变细胞与亲本细胞相比产生更少的蛋白质或不产生蛋白质。
蛋白质缺陷型突变细胞可用作用于表达天然和异源蛋白质的宿主细胞。因此,本披露进一步涉及产生天然或异源蛋白质的方法,这些方法包括(a)在有益于产生该蛋白质的条件下培养突变细胞;以及(b)回收该蛋白质。术语“异源蛋白”意指对宿主细胞而言并非天然的蛋白质,例如天然蛋白质的变体。宿主细胞可包含编码天然或异源蛋白的多核苷酸的多于一个拷贝。
用于产生基本上不含[酶]的产物的本披露的方法在蛋白质(例如,诸如酶的蛋白质)的产生中是令人感兴趣的。[酶]缺陷型细胞也可用于表达在制药上感兴趣的异源蛋白,诸如激素、生长因子、受体等。
在一些实施例中,本披露涉及通过本披露的方法产生的基本上不含[酶]活性的蛋白质产物。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除由许多有害生物引起的侵染/感染和/或降低其严重性,这些有害生物包括但不限于园艺有害生物,诸如螨虫、细菌、真菌、腹足类动物、昆虫、线虫、卵菌、原生动物和杂草。
本披露的组合物(即,本披露的蛋白质、制剂、多核苷酸和生物体)可用于预防、治疗、抑制、消除螨虫侵染和/或降低其严重性,例如通过减少螨虫被表面吸引、抑制螨虫进入材料、抑制螨虫的栖息、抑制螨虫的摄食、抑制螨虫的生长、抑制螨虫的繁殖和/或增殖、降解螨虫的一种或多种结构组分(例如前表皮组分(诸如几丁质)和上表皮组分(诸如脂蛋白、烃、多元酚以及脂肪酸和醇的酯))、杀死螨虫和/或减轻螨虫侵染的一种或多种症状。在一些实施例中,这种抑制是完全的或基本上完全的,使得螨虫不能以有效引发和/或维持明显侵染的速率栖息/摄食/生长/繁殖/增殖。例如,用本披露的酶喷洒植物可降低植物对螨虫的吸引力、降低螨虫栖息于植物的欲望/能力、抑制螨虫以植物为食的欲望/能力、抑制螨虫在其栖息于植物/以植物为食后的生长、抑制螨虫在植物上/中的繁殖和/或增殖、降解植物上/中的螨虫的一种或多种结构组分(例如一种或多种几丁质、一种或多种脂蛋白和/或一种或多种长链烃)和/或杀死植物上/中的螨虫,从而与未处理的对照植物相比,减轻植物的一种或多种侵染症状和/或增强植物的一种或多种生长和/或产量特征。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除由许多螨虫引起的侵染和/或降低其严重性,这些螨虫包括但不限于草食性螨虫,诸如宽螨、球茎根螨、仙客来螨、土螨、瘿螨、路易斯螨、刺皮瘿螨、锈螨和蜘蛛螨。在一些实施例中,本披露的酶用于预防和/或治疗植物或植物部分由一种或多种以下病菌引起的感染:赤螨属(Auculops)(例如,番茄赤螨(A.lycopersici))、瘿螨属(Calacarus)(例如,木瓜瘿螨(C.flagelliseta))、真叶螨属(Eutetranychus)(例如,路易氏真叶螨(E.lewesi))、土螨属(Halotydeus)(例如,红腿土螨(H.destructor))、多食跗线螨属(Polyphagotarsonemus)(例如,侧多食跗线螨(P.latus))、根螨属(Rhizoglyphus)、跗线螨属(Tarsonemus)(例如,苍白跗线螨(T.pallidus))和/或叶螨属(Tetranychus)(例如,朱砂叶螨(T.cinnabarinus)、伊凡氏叶螨(T.evansi)、卢氏叶螨(T.ludeni)、二斑叶螨(T.urticae))。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除细菌侵染/感染和/或降低其严重性,例如通过抑制细菌与表面的粘附、抑制细菌进入材料、抑制细菌的栖息、抑制细菌的生长、抑制细菌的繁殖和/或增殖、降解细菌的一种或多种结构组分(例如细胞壁组分,诸如肽聚糖和脂多糖)、杀死细菌和/或减轻细菌侵染/感染的一种或多种症状。在一些实施例中,这种抑制是完全的或基本上完全的,使得细菌不能以有效引发和/或维持明显侵染/感染的速率栖息/摄食/生长/繁殖/增殖。例如,用本披露的酶喷洒植物可抑制细菌粘附到植物表面的能力、抑制细菌进入植物的能力、抑制细菌栖息于植物的能力、抑制细菌在植物上/中的生长、抑制细菌在植物上/中的繁殖和/或增殖、降解植物上/中的细菌的一种或多种结构组分(例如,一种或多种肽聚糖和/或一种或多种脂多糖)和/或杀死细菌,从而与未处理的对照植物相比,减轻植物的一种或多种侵染症状和/或增强植物的一种或多种生长和/或产量特征。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除由许多植物病原细菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性,这些植物病原细菌包括但不限于植物病原欧文菌科(Erwiniaceae)和黄单胞菌目(Xanthomonadales)。在一些实施例中,本披露的酶用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种以下病菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性:土壤杆菌属(Agrobacterium)(例如,发根土壤杆菌(A.rhizogenes)、根癌土壤杆菌(A.tumefaciens)、葡萄土壤杆菌(A.vitis))、伯克霍尔德菌属(Burkholderia)(例如,唐菖蒲伯克霍尔德菌(B.gladioli))、梭菌属(Clostridium)、迪基氏菌属(Dickeya)(例如,达旦提迪基氏菌(D.dadantii)、茄迪基氏菌(D.solani))、欧文氏菌属(Erwinia)(例如,解淀粉欧文氏菌(E.amylovora)、蚜虫欧文氏菌(E.aphidicola)、胡萝卜软腐欧文氏菌(E.carotovora)、菊欧文氏菌(E.chrysanthemi)、木瓜欧文氏菌(E.papayae)、桃色欧文氏菌(E.persicina)、番石榴欧文氏菌(E.psidii)、沙梨欧文氏菌(E.pyrifoliae)、大黄欧文氏菌
(E.rhapontici)、瓜萎蔫病欧文氏菌(E.tracheiphila))、坚固杆菌属
(Pectobacterium)(例如,黑腐坚固杆菌(P.atrosepticum)、胡萝卜软腐坚固杆菌(P.carotovorum))、假单胞菌属(Pseudomonas)(例如,伞菌假单胞菌(P.agarici)、杏仁假单胞菌(P.amygdali)、洋榛假单胞菌(P.avellanae)、大麻假单胞菌(P.cannabina)、番木瓜假单胞菌(P.caricapapayae)、菊苣假单胞菌(P.cichorii)、冠状假单胞菌(P.coronafaciens)、康氏假单胞菌(P.costantinii)、无花果假单胞菌(P.ficuserectae)、褐藻假单胞菌(P.fuscovaginae)、甲橙假单胞菌(P.helianthin)、苦楝假单胞菌(P.meliae)、萨氏假单胞菌(P.savastanoi)、丁香假单胞菌(P.syringae)、托拉斯假单胞菌(P.tolaasii)、西红柿假单胞菌(P.tomato)、涡轮假单胞菌(P.turbinellae)、浅绿黄假单胞菌(P.viridiflava))、雷尔氏菌属(Ralstonia)(例如,青枯雷尔氏菌(R.solanacearum))、黄单胞菌属(Xanthomonas)(例如,苜蓿黄单胞菌(X.alfalfae)、葡萄黄单胞菌(X.ampelina)、木纹黄单胞菌(X.arboricola)、地毯草黄单胞菌(X.axonopodia)、波利斯黄单胞菌(X.boreopolis)、巴氏黄单胞菌(X.badrii)、溴黄单胞菌(X.bromi)、野油菜黄单胞菌(X.campestris)、木薯黄单胞菌(X.cassavae)、柑橘黄单胞菌(X.citri)、瓜类黄单胞菌(X.cucrurbitae)、青色黄单胞菌(X.cyanopsidis)、蓟黄单胞菌(X.cynarae)、真泡黄单胞菌(X.euvesicatoria)、弗拉格黄单胞菌(X.frageriae)、加德那黄单胞菌(X.gardneri)、栖绒毛草黄单胞菌(X.holcicola)、天竺葵黄单胞菌(X.hortorum)、风信子黄单胞菌(X.hyacinthi)、灰盖黄单胞菌(X.maliensis)、锦葵黄单胞菌(X.malvacearum)、木薯萎蔫病黄单胞菌(X.manihotis)、香瓜(X.melonis)、稻黄单胞菌(X.oryzae)、栖罂粟黄单胞菌(X.papavericola)、穿孔黄单胞菌(X.perforans)、菜豆黄单胞菌(X.phaseoli)、皮斯黄单胞菌(X.pisi)、杨属黄单胞菌(X.populi)、糖黄单胞菌
(X.sacchari)、赤叶斑病黄单胞菌(X.theicola)、半透明黄单胞菌(X.translucens)、血管黄单胞菌(X.vasicola)、辣椒斑点病黄单胞菌(X.vesicatoria))和/或焦枯病菌属(Xylella)(例如,叶缘焦枯病菌(X.fastidiosa))。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除真菌侵染/感染和/或降低其严重性,例如通过抑制真菌与表面的粘附、抑制真菌进入材料、抑制真菌的栖息、抑制真菌的生长、抑制真菌的繁殖和/或增殖、降解真菌的一种或多种结构组分(例如细胞壁组分(诸如几丁质、葡聚糖和甘露聚糖)和细胞膜组分(诸如麦角固醇))、杀死真菌和/或减轻真菌侵染/感染的一种或多种症状。在一些实施例中,这种抑制是完全的或基本上完全的,使得真菌不能以有效引发和/或维持明显侵染/感染的速率栖息/摄食/生长/繁殖/增殖。例如,用本披露的酶喷洒植物可抑制真菌粘附到植物表面的能力、抑制真菌进入植物的能力、抑制真菌栖息于植物的能力、抑制真菌在植物上/中的生长、抑制真菌在植物上/中的繁殖和/或增殖、降解植物上/中的真菌的一种或多种结构组分(例如一种或多种几丁质、一种或多种葡聚糖和/或一种或多种甘露聚糖)和/或杀死真菌,从而与未处理的对照植物相比,减轻植物的一种或多种侵染症状和/或增强植物的一种或多种生长和/或产量特征。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除由许多植物病原真菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性,这些植物病原真菌包括但不限于植物病原子囊菌纲(Ascomycetes)、担子菌纲(Basidiomycetes)、壶菌门(Chytridiomycota)、半知菌门(Deueromycota)、霜孢菌门(Peronosporomycota)、根肿菌门(Plasmodiophoromycota)和接合菌门(Zygomycota),诸如叶枯病、枯萎病、黑穗病、瘿病、霉病、霉菌、腐烂病、锈病、疮痂病、黑粉病和萎蔫病。在一些实施例中,本披露的酶用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种以下病菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性:孢锈菌属(Aecidium)(例如,尖蕊花孢锈菌(A.aechmantherae)、石蒜孢锈菌(A.amaryllidis)、山漆孢锈菌(A.breyniae)、风铃草孢锈菌(A.campanulastri)、大麻孢锈菌(A.cannabis)、芋类孢锈菌(A.cantensis)、辣椒孢锈菌(A.capsicum)、小茴香孢锈菌(A.foeniculi)、水仙孢锈菌(A.narcissi))、链格孢属(Alternaria)(例如,互隔交链格孢(A.alternata)、莲子草链格孢(A.alternantherae)、花生链格孢(A.arachidis)、乔木链格孢(A.arborescens)、果园链格孢(A.arbusti)、七里香链格孢(A.blumeae)、芸薹链格孢(A.brassicae)、甘蓝链格孢(A.brassicicola)、巴恩斯链格孢(A.burnsii)、胡萝卜黑腐病链格孢(A.carotiincultae)、红花链格孢(A.carthami)、鸡冠花链格孢(A.celosiae)、瓜叶菊链格孢(A.cinerariae)、柑橘链格孢(A.citri)、联接链格孢(A.conjuncta)、瓜类链格孢(A.cucumerina)、胡萝卜链格孢(A.dauci)、石竹链格孢(A.dianthi)、双肠形链格孢(A.dianthicola)、水葫芦链格孢(A.eichhorniae)、大戟生链格孢(A.euphorbiicola)、盖森链格孢(A.gaisen)、向日葵链格孢(A.helianthi)、向日葵黑斑病菌链格孢(A.helianthicola)、匈牙利链格孢(A.hungarica)、感染链格孢(A.infectoria)、日本链格孢(A.japonica)、白花菊链格孢(A.leucanthemi)、亚麻生链格孢(A.linicola)、长柄链格孢(A.longipes)、苹果链格孢(A.mali)、梨链格孢(A.molesta)、稻毛锥链格孢(A.padwickii)、人参链格孢(A.panax)、佩氏链格孢(A.perpunctulata)、帕特罗链格孢(A.patroselini)、葱链格孢(A.porri)、青冈链格孢(A.quericola)、根链格孢(A.radicina)、萝卜链格孢(A.raphani)、皂草链格孢(A.saponariae)、塞里尼链格孢(A.selini)、山豆根链格孢(A.senecionis)、司米尼链格孢(A.smyrnii)、茄链格孢(A.solani)、苦苣菜链格孢(A.sonchi)、极细链格孢(A.tenuissima)、小麦链格孢(A.triticina)、葫芦猪笼草链格孢(A.ventricosa)、百日草链格孢(A.zinniae))、壳二孢属(Ascochyta)(例如,天冬酰胺壳二孢(A.asparagina)、波西米亚壳二孢(A.bohemica)、番木瓜壳二孢((A.caricae)、多孔壳二孢(A.doronici)、蚕豆壳二孢(A.fabae)、棉壳二孢(A.gossypii)、禾壳二孢(A.graminea)、大麦壳二孢(A.hordei)、葎草壳二孢(A.humuli)、梅迪卡壳二孢(A.medicaginicola)、豆类壳二孢(A.pinodes)、豌豆壳二孢(A.pisi)、丝孢壳二孢(A.prasadii)、拉比壳二孢(A.rabiei)、大黄壳二孢(A.rhei)、高粱壳二孢(A.sorghi)、索吉尼那壳二孢(A.sorghinia)、菠菜壳二孢(A.spinaciae)、塔尔达壳二孢(A.tarda)、小麦壳二孢(A.tritici)、野豌豆壳二孢(A.viciae)、维也纳壳二孢(A.vindobonensis))、子囊孢属(Ascospora)(例如,红核子囊孢(A.ruborum))、曲霉属(Aspergillus)(例如,棘孢曲霉(A.aculeatus)、亮白曲霉(A.candidus)、棒曲霉(A.clavatus)、费舍尔曲霉(A.fisherianus)、黄曲霉(A.flavus)、烟曲霉(A.fumigatus)、黑曲霉(A.niger)、寄生曲霉(A.parasiticus)、局限曲霉(A.restrictus)、酱油曲霉(A.sojae)、茄曲霉(A.solani))、星壳孢属(Asteroma)(例如,山核桃星壳孢(A.caryae))、奥斯特锈病菌属(Austropuccinia)(例如,番石榴奥斯特锈病菌(A.psidii))、平脐蠕孢属(Bipolaris)(例如,仙人掌平脐蠕孢(B.cactivora)、库氏平脐蠕孢(B.cookei)、内弯平脐蠕孢(B.incurvata)、甘蔗平脐蠕孢(B.sacchari)、高粱平脐蠕孢(B.sorghicola)、玉米平脐蠕孢(B.zeae))、布氏白粉菌属(Blumeria)(例如,禾本科布氏白粉菌(B.graminis))、波尔菌属(Boeremia)(例如,番茄波尔菌(B.lycopersici))、葡萄孢属(Botrytis)(例如,葱腐葡萄孢(B.allii)、喜花葡萄孢(B.anthophila)、灰葡萄孢(B.cinerea)、橘蜡蚧葡萄孢(B.citricola)、黄花菜葡萄孢(B.citrina)、椭圆葡萄孢(B.elliptica)、蚕豆葡萄孢(B.fabae)、拟蚕豆葡萄孢(B.fabiopsis)、加兰葡萄孢(B.galanthina)、唐菖蒲葡萄孢(B.gladioli)、棉色葡萄孢(B.gossypina)、霍米妮葡萄孢(B.hormini)、风信子葡萄孢(B.hyacinthi)、深黄被葡萄孢(B.isabellina)、蛛形葡萄孢(B.latebricola)、百合葡萄孢(B.liliorum)、蛞蝓葡萄孢(B.limacidae)、卢特葡萄孢(B.luteobrunnea)、土黄色葡萄孢(B.lutescens)、玛丽葡萄孢(B.mali)、串珠状葡萄孢(B.monilioides)、菌核病葡萄孢(B.narcissicola)、讷坎斯葡萄孢(B.necans)、牡丹葡萄孢(B.paeoniae)、佩若诺葡萄孢(B.peronosporoides)、匹斯提葡萄孢(B.pistiae)、螺旋藻葡萄孢(B.platensis)、章鱼葡萄孢(B.pruinosa)、假灰葡萄孢(B.pseudocinerea)、金字塔形葡萄孢(B.pyramidalis)、瑞沃特葡萄孢(B.rivoltae)、玫瑰葡萄孢(B.rosea)、冬凌草葡萄孢(B.rubescens)、如第库葡萄孢(B.rudiculoides)、色奇莫托葡萄孢(B.sekimotoi)、色普托葡萄孢(B.septospora)、色土力葡萄孢(B.setuligera)、斯诺葡萄孢(B.sinoallii)、桑植那葡萄孢(B.sonchina)、诗芬达葡萄孢(B.splendida)、番荔枝葡萄孢(B.squamosa)、红豆杉葡萄孢(B.taxi)、土棲葡萄孢(B.terrestris)、管状葡萄孢(B.tracheiphila)、三叶草葡萄孢(B.trifolii)、郁金香葡萄孢(B.tulipae)、蚕豆葡萄孢(B.viciae-hirsutae)、元葡萄孢(B.yuae))、丽赤壳属(Calonectria)(例如,冬青丽赤壳(C.ilicicola)、囊群盖丽赤壳(C.indusiate)、京都丽赤壳(C.kyotensis)、普特瑞迪斯丽赤壳(C.pteridis)、焦丽赤壳(C.pyrochroa)、奎斯塔丽赤壳(C.quinqueseptata))、卡玛菌属(Camarotella)(例如,垂花卡玛菌(C.acrocomiae)、科斯塔卡玛菌(C.costaricensis)、念珠菌属(Candida)(例如,白色念珠菌(C.albicans))、煤炱属(Capnodium)(例如,茶茎煤炱(C.theae))、头孢霉属(Cephalosporium)(例如,禾条斑头孢霉(C.gramineum))、长喙壳菌属(Ceratocystis)(例如,甘薯长喙壳菌(C.fimbriata))、角担菌属(Ceratobasidium)(例如,禾谷角担菌(C.cereale))、盘尾孢属(Cercoseptoria)(例如,滑圆盘尾孢(C.ocellata))、尾孢属(Cercospora)(例如,安格瑞慈尾孢(C.angreci)、芹菜尾孢(C.apii)、变灰尾孢(C.apiicola)、落花生尾孢(C.arachidicola)、芦笋尾孢(C.asparagi)、黑线尾孢(C.atrofiliformis)、菾菜尾孢(C.beticola)、新疆杨尾孢(C.bolleana)、细窄尾孢(C.brachypus)、布拉西尾孢(C.brassicola)、天竺葵尾孢(C.brunkii)、灰色尾孢(C.canescens)、大麻透尾孢(C.cannabis)、坎地尾孢(C.cantuariensis)、辣椒尾孢(C.capsici)、卡瑞巴尾孢(C.caribaea)、胡萝卜尾孢(C.carotae)、核果尾孢(C.circumscissa)、瓜氨酸尾孢(C.citrulline)、厚唇兰尾孢(C.clemensiae)、咖啡尾孢(C.coffeicola)、考瑞利尾孢(C.coryli)、榛尾孢(C.corylina)、椮尾孢(C.eleusine)、草莓尾孢(C.fragariae)、豇豆尾孢(C.fuchsiae)、蒲公英尾孢(C.fusca)、梭斑尾孢(C.fusimaculans)、非洲菊尾孢(C.gerberae)、霍耳斯特尾孢(C.halstedii)、杜鹃花假尾孢(C.handelii)、干草尾孢(C.hayi)、绣球花尾孢(C.hydrangeae)、柿尾孢(C.kaki)、菊池尾孢(C.kikuchii)、扁豆尾孢(C.lentis)、液体尾孢(C.liquidambraris)、长足尾孢(C.longipes)、极长尾孢(C.longissima)、野桐尾孢(C.malloti)、番木瓜尾孢(C.mamaonis)、芒果尾孢(C.mangiferae)、苜蓿尾孢(C.medicaginis)、茄尾孢(C.melongenae)、极小尾孢(C.minima)、微小尾孢(C.minuta)、芭蕉尾孢(C.musae)、烟草尾孢(C.nicotianae)、牙舌尾孢(C.odontoglossi)、水稻尾孢(C.oryzae)、番木瓜尾孢(C.papayae)、盆尼瑟提尾孢(C.penniseti)、球座尾孢(C.personata)、水葫芦尾孢(C.piaropi)、豌豆尾孢(C.pisa-sativae)、普拉塔尾孢(C.platanicola)、普德瑞尾孢(C.puderii)、一品红尾孢(C.pulcherrima)、观音棕竹生尾孢(C.rhapidicola)、蔷薇生尾孢(C.rosicola)、红染尾孢(C.rubrotincta)、大豆尾孢(C.sojina)、茄尾孢(C.solani)、茄-韭菜尾孢(C.solani-tuberosi)、高粱尾孢(C.sorghi)、茶尾孢(C.theae)、结节尾孢(C.tuberculans)、钟器尾孢(C.vexans)、维科斯尾孢(C.vicosae)、玉蜀尾孢(C.zeae-maydis)、吊竹尾孢(C.zebrina)、轮纹尾孢(C.zonata))、小尾孢属(Cercosporella)(例如,黑莓小尾孢(C.rubi))、笄霉属(Choanephora)(例如,瓜笄霉(C.cucurbitarum))、枝孢属(Cladosporium)(例如,节状枝孢(C.arthropodii)、甘蓝枝孢(C.brassicae)、芸薹枝孢(C.brassicola)、绿原酸枝孢(C.chrysanthemi)、柑橘枝孢(C.citri)、芽枝状枝孢(C.cladosporioides)、瓜枝孢(C.cucumerinum)、黄枝孢(C.fulvum)、栖棉枝孢(C.gossypiicola)、多主枝孢(C.herbarum)、绣球枝孢(C.hydrangeae)、豆类枝孢(C.leguminicola)、芭蕉枝孢(C.musae)、致枝孢(C.oncobae)、兰科枝孢(C.orchidis)、豌豆枝孢(C.pisi)、山红叶枝孢(C.rhododendri)、萨利那枝孢(C.salinae)、球孢枝孢(C.spharospermum)、高粱枝孢(C.sorghi)、丁香枝孢(C.syringae)、赛润吉枝孢(C.syringicola)、玉卡枝孢(C.yuccae)、玉蜀黍枝孢(C.zeae))、麦角菌属(Claviceps)(例如,非洲麦角菌(C.africana)、纺锤麦角菌(C.fusiformis)、雀稗麦角菌(C.paspali)、紫草麦角菌(C.purpurea)、高粱麦角菌(C.sorghi)、茭白麦角菌(C.zizaniae))、杯伞菌属(Clitocybe)(例如,寄生杯伞菌(C.parasitica))、球孢子菌属(Coccidioides)(例如,粗球孢子菌(C.immitus))、旋孢腔菌属(Cochliobolus)(例如,炭色旋孢腔菌(C.carbonum)、芸香草旋孢腔菌(C.cymbopogonis)、夏威夷旋孢腔菌(C.hawaiiensis)、异螺旋孢腔菌(C.heterostrophus)、月状旋孢腔菌(C.lunatus)、宫部旋孢腔菌(C.miyabeanus)、黄粉旋孢腔菌(C.ravenelii)、禾旋孢腔菌(C.sativus)、狗尾草旋孢腔菌(C.setariae)、穗状旋孢腔菌(C.spicifer)、甘蔗旋孢腔菌(C.stenospilus)、圆疣旋孢腔菌(C.tuberculatus)、维多利亚旋孢腔菌(C.victoriae))、鞘锈菌属(Coleosporium)(例如,向日葵鞘锈菌(C.helianthi)、番薯鞘锈菌(C.ipomoeae)、中间鞘锈菌(C.madiae)、太平洋鞘锈菌(C.pacificum)、款冬鞘锈菌(C.tussilaginis))、刺盘孢属(Colletotrichum)(例如,尖孢刺盘孢(C.acutatum)、龙舌兰刺盘孢(C.agaves)、花生刺盘孢(C.arachidis)、博宁刺盘孢(C.boninense)、巴西刺盘孢(C.brasiliense)、芸苔刺盘孢(C.brassicola)、短孢刺盘孢(C.brevisporum)、可可刺盘孢(C.cacao)、辣椒刺盘孢(C.capsici)、尾状核刺盘孢(C.caudatum)、禾本刺盘孢(C.cereale)、柑橘刺盘孢(C.citri)、橘蜡蚧刺盘孢(C.citricola)、山茶刺盘孢(C.coccodes)、咖啡刺盘孢(C.coffeanum)、水葫芦刺盘孢(C.crassipes)、姜黄刺盘孢(C.curcumae)、束状刺盘孢(C.dematium)、代氏刺盘孢(C.derridis)、烟草刺盘孢(C.destructivum)、松针刺盘孢(C.fioriniae)、草莓刺盘孢(C.fragariae)、福式刺盘孢(C.fructi)、福式考拉刺盘孢(C.fruticola)、福式沃姆刺盘孢(C.fructivorum)、胶胞刺盘孢(C.gloeosporioides)、大豆刺盘孢(C.glycines)、禾生刺盘孢(C.graminicola)、普通刺盘孢(C.gossypii)、哈那刺盘孢(C.hanaui)、希金斯刺盘孢(C.higginsianum)、杰氏刺盘孢(C.jacksonii)、卡哈瓦刺盘孢(C.kahawae)、小扁豆刺盘孢(C.lentis)、利莫尼刺盘孢(C.limonicola)、菜豆刺盘孢(C.lindemuthianum)、亚麻刺盘孢(C.lini)、卢皮尼刺盘孢(C.lupini)、曼氏刺盘孢(C.mangenotii)、瓜类刺盘孢(C.melonis)、密斯坎枝刺盘孢(C.miscanthi)、芭蕉刺盘孢(C.musae)、尼氏刺盘孢(C.nicholsonii)、黑刺盘孢(C.nigrum)、圆刺盘孢(C.orbiculare)、奥尔奇迪斯刺盘孢(C.orchidis)、帕斯帕里刺盘孢(C.paspali)、豌豆刺盘孢(C.pisi)、皮斯刺盘孢(C.pisicola)、拉蒂齐斯刺盘孢(C.radicis)、蔷薇刺盘孢(C.roseum)、塞拉诺刺盘孢(C.serranegrense)、酱油刺盘孢(C.sojae)、斯皮那刺盘孢(C.spinaceae)、柿树刺盘孢(C.sublineolum)、高粱刺盘孢(C.sublineola)、烟草刺盘孢(C.tabacum)、常春藤刺盘孢(C.trichellum)、三叶草刺盘孢(C.trifolii)、平头刺盘孢(C.truncatum)、结缕草刺盘孢(C.zoysiae))、小圆锥孢菌属(Coniella)、链孢霉属(Coniothecium)(例如,冢镶链孢霉(C.chomatosporum))、盾壳霉属(Coniothyrium)(例如,丰利柯西盾壳霉(C.henriquesii)、蔷薇盾壳霉(C.rosarum)、温氏盾壳霉(C.wernsdorffiae))、墨头菌属(Coprinopsis)(例如,皮塞墨头菌(C.psychromorbida))、暗双孢属(Cordana)(例如,约氏暗双孢(C.johnstonii)、芭蕉暗双孢(C.musae))、伏革菌属(Corticum)(例如,茶伏革菌(C.theae))、隐丛赤壳菌属(Cryphonectria)(例如,寄生隐丛赤壳菌(C.parasitica))、柱孢属(Cylindrocarpon)(例如,依瑟里柱孢(C.ianthothele)、卷钩丝壳柱孢(C.magnusianum)、芭蕉柱孢(C.musae))、小帚梗柱孢属(Cylindrocladiella)(例如,山茶小帚梗柱孢(C.camelliae)、姬小帚梗柱孢(C.parva))、帚梗柱孢属(Cylindrocladium)(例如,矛尖帚梗柱孢(C.lanceolatum)、秘鲁帚梗柱孢(C.peruvianum))、柱盘孢属(Cylindrosporium)(例如,大麻柱盘孢(C.cannabinum)、核桃柱盘孢(C.juglandis)、覆盆子柱盘孢(C.rubi))、黑斑座囊菌属(Cymadothea)(例如,三叶草黑斑座囊菌(C.trifolii))、壳囊孢属(Cytospora)(例如,棕榈壳囊孢(C.palmarum)、球座壳囊孢(C.personata)、甘蔗壳囊孢(C.sacchari)、球状囊壳囊孢(C.sacculus)、松节油壳囊孢(C.terebinthi))、环孢菌属(Cytosporina)(例如,鲁氏环孢菌(C.ludibunda))、间座壳属(Diaporthe)(例如,牛蒡子间座壳(D.arctii)、芦笋间座壳(D.asparagi)、辣椒间座壳(D.capsici)、柑橘间座壳(D.citri)、咖啡间座壳(D.coffeae)、欧白英间座壳(D.dulcamarae)、甜樱间座壳(D.eres)、向日葵间座壳(D.helianthi)、朗氏间座壳(D.lagunensis)、洛科间座壳(D.lokoyae)、瓜间座壳(D.melonis)、芭蕉间座壳(D.musae)、直角间座壳(D.orthoceras)、有毒间座壳(D.perniciosa)、菜豆间座壳(D.phaseolorum)、野生间座壳(D.rudis)、田中间座壳(D.tanakae)、葡萄生间座壳(D.viticola))、色二孢属(Diplodia)(例如,棉色二孢(D.gossypina))、德氏霉属(Dreschlera)(例如,燕麦德氏霉(D.avenacea)、鼠尾草德氏霉(D.campanulata)、德玛替德氏霉(D.dematioidea)、巨紫荆德氏霉(D.gigantea)、大豆德氏霉(D.glycines)、禾本科德氏霉(D.graminea)、夏威夷德氏霉(D.hawaiiensis)、芭蕉德氏霉(D.musae)、梨德氏霉(D.poae)、圆德氏霉(D.teres)、威尔德氏霉(D.wirreganensis))、假囊酵母属(Eremothcium)(以前为针孢酵母属(Nematospora))(例如,棉假囊酵母(E.gossypii))、白粉菌属(Erysiphe)(例如,甜菜白粉菌(E.betae)、菊科白粉菌(E.cichoracearum)、普生白粉菌(E.communis)、十字花科白粉菌(E.cruciferarum)、碎米荠白粉菌(E.flexuosa)、独活白粉菌(E.heraclei)、葡萄白粉菌(E.necator)、豌豆白粉菌(E.pisi)、蓼白粉菌(E.polygoni)、刺槐白粉菌(E.robiniae)、丁香白粉菌(E.syringae))、突脐蠕孢属(Exserohilum)(例如,水稻条斑突脐蠕孢(E.oryzicola)、水稻突脐蠕孢(E.oryzinum))、镰孢属(Fusarium)(例如,瓣状镰孢(F.affine)、节孢镰孢(F.arthrosporioides)、燕麦镰孢(F.avenaceum)、松脂镰孢(F.circinatum)、库威镰孢(F.crookwellense)、大黄镰孢(F.culmorum)、藤仓镰孢(F.fujikuroi)、禾谷镰孢(F.graminearum)、变红镰孢(F.incarnatum)、朗塞斯镰孢(F.langsethiae)、芒果镰孢(F.mangiferae)、节状镰孢(F.merismoides)、串珠镰孢(F.moniliforme)、尖孢镰孢(F.oxysporum)、苍白镰孢(F.pallidoroseum)、梨镰孢(F.poae)、层出镰孢(F.proliferatum)、芬芳镰孢(F.redolens)、粉红镰孢(F.roseum)、甘蔗镰孢(F.sacchari)、茄镰孢(F.solani)、拟枝孢镰孢(F.sporotrichioides)、不育镰孢(F.sterilihyphosum)、胶孢镰孢(F.subglutinans)、硫色镰孢(F.sulphureum)、三线镰孢(F.tricinctum)、轮枝镰孢(F.verticillioides)、大豆猝死综合症镰孢(F.virguliforme))、顶囊壳属(Gaeumannomyces)(例如,禾顶囊壳(G.graminis))、地丝菌属(Geotrichum)(例如,念珠地丝菌(G.candidum))、赤霉菌属(Gibberella)(例如,藤仓赤霉(G.fujikuroi)、虱状赤霉(G.pulicaris)、斯帝博赤霉(G.stilboides)、三联赤霉(G.tricincta)、木糖赤霉(G.xylarioides)、玉米赤霉(G.zeae))、吉尔霉属(Gilbertella)(例如,桃吉尔霉(G.persicaria))、小丛壳属(Glomerella)(例如,围小丛壳(G.cingulata))、胶锈菌属(Gymnosporangium)(例如,雪松苹果胶锈菌(G.juniperi-virginianae))、长蠕孢属(Helminthosporium)(例如,水稻长蠕孢(H.oryzae)、茄长蠕孢(H.solani))、驼孢锈菌属(Hemileia)(例如,咖啡驼孢锈菌(H.coffeicola)、瓦氏驼孢锈菌(H.vastatrix))、小球腔霉属(Leptosphaeria)(例如,尖孢小球腔霉(L.acuta)、芦笋小球腔霉(L.asparagi)、麻叶小球腔霉(L.cannabina)、咖啡小球腔霉(L.coffaeicida)、盾壳小球腔霉(L.coniothyrium)、格莱斯小球腔霉(L.glyceriae)、棉小球腔霉(L.gossypii)、稻瘟小球腔霉(L.grisea)、长孢小球腔霉(L.longispora)、十字花科小球腔霉(L.maculans)、玉蜀黍小球腔霉(L.maydis)、芭蕉小球腔霉(L.musae)、水稻条斑小球腔霉(L.oryzicola)、水稻小球腔霉(L.oryzina)、皮尼小球腔霉(L.pini)、普拉塔小球腔霉(L.platanicola)、草地小球腔霉(L.pratensis)、萝卜小球腔霉(L.raphani)、蔗生小球腔霉(L.saccharicola)、茄小球腔霉(L.solani)、茄生小球腔霉(L.solanicola)、三叶草小球腔霉(L.trifolii)、蚕豆小球腔霉(L.viciae)、向日葵小球腔霉(L.woroninii)、玉米小球腔霉(L.zeae)、玉蜀黍小球腔霉(L.zeae-maydis))、壳球孢属(Macrophomina)(例如,菜豆壳球孢(M.phaseolina))、巨座壳属(Magnaporthe)(例如,灰巨座壳(M.grisea)、稻巨座壳(M.oryzae))、栅锈菌属(Melamspora)(例如,亚麻栅锈菌(M.lini))、链核盘菌属(Monilinia)(例如,果生链核盘菌(M.fructicola))、毛霉属(Mucor)(例如,梨形毛霉(M.piriformis))、球腔菌属(Mycosphaerella)(例如,斐济球腔菌(M.fijiensis)、禾生球腔菌(M.graminicola)、塔森球腔菌(M.tassiana)、玉蜀黍球腔菌(M.zeae-maydis))、明孢盘菌属(Neofabraea)(例如,玛丽明孢盘菌(N.malicorticus))、长喙壳菌属(Ophiostoma)(例如,新榆长喙壳菌(O.novo-ulmi)、榆长喙壳菌(O.ulmi))、副球孢子菌属(Paracoccidioides)(例如,巴西副球孢子菌(P.braziliensis))、青霉菌属(Penicillium)(例如,指状青霉菌(P.digitatum)、扩展青霉菌(P.expansum)、意大利青霉菌(P.italicum)、皱褶青霉菌(P.rugulosum)、疣梗青霉菌(P.verrucosum))、层锈菌属(Phakopsora)(例如,棉层锈菌(P.gossypii)、山马蝗层锈菌(P.meibomiae)、豆薯层锈菌(P.pachyrhizi))、瓶霉属(Phialophora)(例如,大豆瓶霉(P.gregata))、茎点霉属(Phoma)(例如,大豆茎点霉(P.glycinicola))、拟茎点霉属(Phomopsis)(例如,芦笋拟茎点霉(P.asparagi)、咖啡拟茎点霉(P.coffeae)、洛基拟茎点霉(P.logicolla)、芒果拟茎点霉(P.mangiferae)、暗纹拟茎点霉(P.obscurans)、鳄梨拟茎点霉(P.perseae)、扑尔诺拟茎点霉(P.purnorum)、大豆拟茎点霉(P.sojae)、黄瓜黑色根腐病拟茎点霉(P.sclerotioides)、塔纳拟茎点霉(P.tanakae)、茶拟茎点霉(P.theae)、葡萄拟茎点霉(P.vitcola))、瘤梗孢属(Phymatotrichopsis)(例如,棉根腐病瘤梗孢(P.omnivora))、囊孢壳属(Physalospora)(例如,扁柏囊孢壳(P.obtusa))、植物霉属(Phytomyxea)、肺囊虫属(Pneumocystis)(例如,卡氏肺囊虫(P.carinii))、叉丝单囊壳属(Podosphaera)(例如,蔷薇科叉丝单囊壳(P.oxyacanthae))、假小尾孢属(Pseudocercosporella)、柄锈菌属(Puccinia)(例如,芦笋柄锈菌(P.asparagi)、卡氏柄锈菌(P.cacahata)、禾柄锈菌(P.graminis)、库氏柄锈菌(P.kuehnii)、黑头柄锈菌(P.melanocephala)、葱柄锈菌(P.porri)、斑形柄锈菌(P.punctiformis)、隐匿柄锈菌(P.recondita)、谢氏柄锈菌(P.schedonnardii)、无柄柄锈菌(P.sessilis)、高粱柄锈菌(P.sorghi)、条形柄锈菌(P.striiformis)、小麦柄锈菌(P.tritici)、小麦隐匿柄锈菌(P.triticina))、核腔菌属(Pyrenophora)(例如,偃麦草核腔菌(P.tritici-repentis))、梨孢属(Pyricularia)、丝核菌属(Rhizoctonia)(例如,茄丝核菌(R.solani))、根霉属(Rhizopus)(例如,黑根霉(R.nigricans)、匍枝根霉(R.stolonifer))、喙孢属(Rhynchosporium)、核盘菌属(Sclerotinia)(例如,北方核盘菌(S.borealis)、球茎核盘菌(S.bulborum)、币斑病核盘菌(S.homoeocarpa)、大豆核盘菌(S.libertiana)、小核盘菌(S.minor)、蓖麻子核盘菌(S.ricini)、油菜核盘菌(S.sclerotiorum)、三叶草盲种核盘菌(S.spermophila)、三叶草核盘菌(S.trifoliorum))、小核菌属(Sclerotium)(例如,齐整小核菌(S.rolfsii))、帚霉属(Scopulariopsis)(例如,短帚霉(S.brevicaulis))、壳针孢属(Septoria)(例如,芹菜生壳针孢(S.apiicola)、阿次库壳针孢(S.aciculosa)、葡萄壳针孢(S.ampelina)、燕麦壳针孢(S.avenae)、杜鹃壳针孢(S.azalea)、甘薯生壳针孢(S.bataticola)、风铃草壳针孢(S.campanulae)、美核桃壳针孢(S.caryae)、柑桔壳针孢(S.citri)、瓜角斑壳针孢(S.cucurbitacearum)、赛提斯壳针孢(S.cytisi)、石竹壳针孢(S.dianthi)、芭蕉壳针孢(S.eumusae)、草莓壳针孢(S.fragariae)、草莓黑斑病菌壳针孢(S.fragariaecola)、大豆壳针孢(S.glycines)、向日葵壳针孢(S.helianthin)、矮小壳针孢(S.humuli)、绣球壳针孢(S.hydrangea)、莴苣壳针孢(S.lactucae)、番茄壳针孢(S.lycopersici)、马拉壳针孢(S.malagutii)、薄荷壳针孢(S.menthae)、杨树壳针孢(S.musiva)、奥思特锐壳针孢(S.ostryae)、大麦壳针孢(S.passerinii)、豌豆壳针孢(S.pisi)、皮斯塔壳针孢(S.pistaciae)、秋海棠壳针孢(S.platanifolia)、山红叶(S.rhododendri)、色凯斯壳针孢(S.secais)、色乐诺壳针孢(S.selenophomoides))、孢堆黑粉菌属(Sporisorium)(例如,甘蔗鞭孢堆黑粉菌(S.scitamineum))、集壶菌属(Synchytrium)(例如,内生集壶菌(S.endobioticum))、外囊菌属(Taphrina)(例如,畸形外囊菌(T deformans))、根串珠霉属(Thielaviopsis)(例如,根黑腐病根串珠霉(T.basicola)、塞拉米卡根串珠霉(T.ceremica))、腥黑粉菌属(Tilletia)(例如,狼尾草腥黑粉菌(T.barclayana)、小麦网腥黑粉菌(T.caries)、小麦矮腥黑粉菌(T.controversa)、小麦光腥黑粉菌(T.foetida)、小麦印度腥黑粉菌(T.indica)、小麦光滑腥黑粉菌(T.laevis)、小麦腥黑穗菌(T.tritici))、钩丝壳属(Uncinula)、单胞锈菌属(Uromyces)(例如,黑顶单胞锈菌(U.melanocephala))、黑粉菌属(Ustilago)(例如,菰黑粉菌(U.esculenta)、玉米黑粉菌(U.maydis)、裸黑粉菌(U.nuda)、甘蔗鞭黑粉菌(U.scitaminea)、小麦散黑粉菌(U.tritici)、稻曲黑粉菌(U.virens))、黑星菌属(Venturia)、轮枝孢属(Verticillium)(例如,苜蓿轮枝孢(V.alfalfae)、大丽轮枝孢(V.dahliae)、爱克萨轮枝孢(V.isaacii)、长孢轮枝孢(V.longisporum)、可可轮枝孢(V.theobromae)、狗草轮枝孢(V.zaregamsianum))和/或叶枯病菌属(Zymoseptoria)(例如,小麦叶枯病菌(Z.tritici))。可使用本披露的蛋白质、制剂、多核苷酸和生物体靶向的真菌的另外实例可在Bradley,Managing Diseases[管理病害],Illinois Agronomy Handbook[伊利诺伊农学手册](2008)中找到。
本披露的组合物可用于预防和/或治疗腹足类动物侵染,通过例如减少腹足类动物被表面吸引、抑制腹足类动物的栖息、抑制腹足类动物的摄食、抑制腹足类动物的生长、抑制腹足类动物的繁殖和/或增殖、降解腹足类动物的一种或多种结构组分(例如___________)、杀死腹足类动物和/或减轻腹足类动物侵染的一种或多种症状。在一些实施例中,这种抑制是完全的或基本上完全的,使得腹足类动物不能以有效引发和/或维持明显侵染的速率栖息/摄食/生长/繁殖/增殖。例如,用本披露的酶喷洒植物可降低植物对腹足类动物的吸引力、降低腹足类动物栖息于植物的欲望/能力、抑制腹足类动物以植物为食的欲望/能力、抑制腹足类动物在其栖息于植物/以植物为食后的生长、抑制腹足类动物在植物上/中的繁殖和/或增殖、降解植物上/中的腹足类动物的一种或多种结构组分(例如___________)和/或杀死腹足类动物,从而与未处理的对照植物相比,减轻植物的一种或多种侵染症状和/或增强植物的一种或多种生长和/或产量特征。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除由许多腹足类动物引起的侵染和/或降低其严重性,这些腹足类动物包括但不限于蛞蝓和蜗牛。
本披露的组合物可用于预防和/或治疗昆虫侵染,例如通过减少昆虫被表面吸引、抑制昆虫进入材料、抑制昆虫的栖息、抑制昆虫的摄食、抑制昆虫的生长、抑制昆虫的繁殖和/或增殖、降解昆虫的一种或多种结构组分(例如前表皮组分(诸如几丁质)和上表皮组分(诸如脂蛋白、烃、多元酚以及脂肪酸和醇的酯))、杀死昆虫和/或减轻昆虫侵染的一种或多种症状。在一些实施例中,这种抑制是完全的或基本上完全的,使得昆虫不能以有效引发和/或维持明显侵染的速率栖息/摄食/生长/繁殖/增殖。例如,用本披露的酶喷洒植物可降低植物对昆虫的吸引力、降低昆虫栖息于植物的欲望/能力、抑制昆虫以植物为食的欲望/能力、抑制昆虫在其栖息于植物/以植物为食后的生长、抑制昆虫在植物上/中的繁殖和/或增殖、降解植物上/中的昆虫的一种或多种结构组分(例如一种或多种几丁质、一种或多种脂蛋白和/或一种或多种长链烃)和/或杀死昆虫,从而与未处理的对照植物相比,减轻植物的一种或多种侵染症状和/或增强植物的一种或多种生长和/或产量特征。
本披露的组合物可用于预防和/或治疗许多昆虫的侵染,包括但不限于鞘翅目(Coleoptera)、革翅目(Dermaptera)、双翅目(Diptera)、半翅目(Hemiptera)、同翅目(Homoptera)、膜翅目(Hymenoptera)、鳞翅目(Lepidoptera)、直翅目(Orthoptera)和缨翅目(Thysanoptera),诸如蚜虫、粘虫、甲虫、螟蛉虫、臭虫、毛毛虫、切根虫、蝇、蛾和蓟马。在一些实施例中,本披露的酶用于预防、治疗、抑制、消除由一种或多种以下病菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性:叶甲属(Acalymma)、三齿豆象属(Acanthaoscelides)(例如菜豆象)、缘蝽属(Anasa)(例如南瓜缘蝽)、实蝇属(例如墨西哥按实蝇)、星天牛属(例如光肩星天牛)、花象属(例如胡椒花象)、无网蚜属(例如碗豆蚜)、果实蝇属(例如桔小实蝇)、小粉虱属(例如银叶粉风、烟粉虱)、短棒蚜属(例如菜蚜)、锥胸豆象属(例如暗条豆象)、豆象属(例如具微点豆象、齿突豆象、欧洲兵豆象、豌豆象和/或B.rufipes)、瘤背豆象属(例如绿豆象、四纹豆象、罗得西亚豆象、西非花生豆象、可可豆象)、花生豆象属(例如花生豆象)、Cassadinae、蜡实蝇属(例如地中海实蝇)、叶甲亚科、叶蝉属(Circulifer)(例如甜菜叶蝉)、负泥虫亚科、隐头叶甲亚科、扁谷盗属(例如锈赤扁谷盗、长角扁谷盗、微扁谷盗)、甘薯象属(例如甘薯象虫)、地种蝇属(例如葱地种蝇)、叶甲属(Diabrotica)、绢野螟属(例如黄瓜绢野螟)、桔木虱属(例如柑橘木虱)、水叶甲亚科、粉斑螟属(例如粉斑螟、烟草粉斑螟、地中海斑螟)、食植瓢虫属(例如墨西哥豆瓢虫)、褐卷蛾属(Epiphyas)(例如苹果褐卷蛾)、肖叶甲亚科、萤叶甲亚科、棉铃虫属(例如玉米穗虫)、Heteroligus(例如H.meles)、小卷蛾属(Iobesia)(例如鲜食葡萄小卷蛾(I.botrana))、隐肢叶甲亚科、毛食骸甲属(例如烟草甲)、金花虫属(例如马铃薯甲虫)、喙缘蝽属、斑潜蝇属(例如斑潜蝇)、烟草天蛾属、透翅蛾属(Melittia)(例如葫芦科透翅蛾)、瘤蚜属(例如桃蚜)、稻绿蝽属(例如稻绿蝽)、Orzaephilus(例如O.merator、O.surinamensis)、秆野螟属(例如玉米螟)、茄麦蛾属(例如马铃薯块茎蛾)、粉蝶属(例如菜青虫)、谷斑螟属(例如印度谷螟)、菜蛾属(例如小菜蛾)、弧丽金龟属(例如日本甲虫)、尖帽胸长蠹属(例如大谷蠹)、茎潜蝇属、Rhizopertha(例如谷蠹)、缢管蚜属(例如玉米蚜)、茎甲亚科、火蚁属(例如红火蚁)、Spilopyrinae、象虫属(例如谷象、米象和/或玉米象)、麦蛾属(例如麦蛾)、夜蛾属(例如草地贪夜蛾)、药材甲属(例如药材甲)、锯胸叶甲亚科、拟步行虫属(例如马兰士黄粉虫(T.malens)和/或黄粉虫)、蓟马属(例如葱蓟马)、粉虱属(例如温室粉虱)、拟谷盗属(例如赤拟谷盗和/或拟谷盗)、粉夜蛾属(例如粉纹夜蛾)、斑皮蠹属(例如谷斑皮蠹)和/或谷盗科(例如摩洛哥谷盗)。可使用本披露的酶、制剂、多核苷酸和生物体靶向的另外的昆虫物种可在Capinera,Handbook ofVegetable Pests[蔬菜有害生物手册](2001)以及Steffey和Gray,Managing InsectPests[管理昆虫有害生物],Illinois Agronomy Handbook[伊利诺伊州农学手册](2008)中找到。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除线虫侵染/感染和/或降低其严重性,例如通过抑制线虫与表面的粘附、抑制线虫进入材料、抑制线虫的栖息、抑制线虫的生长、抑制线虫的繁殖和/或增殖、降解线虫的一种或多种结构组分(例如角质层组分,诸如胶原、角质素、糖蛋白和脂质)、杀死线虫和/或减轻线虫侵染/感染的一种或多种症状。在一些实施例中,这种抑制是完全的或基本上完全的,使得线虫不能以有效引发和/或维持明显侵染/感染的速率栖息/摄食/生长/繁殖/增殖。例如,用本披露的酶喷洒植物可抑制线虫粘附到植物表面的能力、抑制线虫进入植物的能力、抑制线虫栖息于植物的能力、抑制线虫在植物上/中的生长、抑制线虫在植物上/中的繁殖和/或增殖、降解植物上/中的线虫的一种或多种结构组分(例如一种或多种胶原、一种或多种角质素、一种或多种糖蛋白和/或一种或多种脂质)和/或杀死线虫,从而与未处理的对照植物相比,减轻植物的一种或多种侵染症状和/或增强植物的一种或多种生长和/或产量特征。
本披露的组合物可用于预防、治疗、抑制、消除由许多植物病原线虫引起的侵染/感染和/或降低其严重性,这些植物病原线虫包括但不限于根结线虫、孢囊线虫、穿孔线虫、根腐线虫、枯萎线虫和肾形线虫。在一些实施例中,本披露的酶用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种以下病菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性:根结线虫属(Meloidogyne)(例如,花生根结线虫(M.arenaria)、拟禾本科根结线虫(M.graminicola)、北方根结线虫(M.hapla)、南方根结线虫(M.incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica))、金线虫属(Globodera)(例如,苍白球金线虫(G.pallida)、马铃薯金线虫(G.rostochiensis))、异皮线虫属(Heterodera)(例如,禾谷异皮线虫(H.avenae)、菲利普异皮线虫(H.filipjevi)、大豆异皮线虫(H.glycines)、甜菜异皮线虫(H.schachtii))、短体线虫属(Pratylenchus)(例如,穿刺短体线虫(P.penetrans)、索氏短体线虫(P.thornei)、落选短体线虫(P.neglectus)、玉米短体线虫(P.zae)、伤残短体线虫(P.vulnus)、咖啡短体线虫(P.coffeae))、穿孔线虫属(Radopholus)(例如,香蕉穿孔线虫(R.similis))、茎线虫属(Ditylenchus)(例如,鳞球茎茎线虫(D.dipsaci)、水稻茎线虫(D.angustus)、腐烂茎线虫(D.desctructor)、非洲茎线虫(D.africanus)、蘑菇茎线虫(D.myceliophagus)、牡蛎茎线虫(D.gigas))、伞滑刃线虫属(Bursaphelenchus)(例如,松材伞滑刃线虫(B.xylophilus)、拟松材伞滑刃线虫(B.mucronatus))、盘旋线虫属(Rotylenchus)(例如,肾形盘旋线虫(R.reniformis)、微小盘旋线虫(R.parvus))、剑线虫属(Xiphinema)(例如,标准剑线虫(X.index)、意大利剑线虫(X.italiae)、威优特剑线虫(X.viuttenezi)、迪韦尔斯剑线虫(X.diversicaudatun))和/或珍珠线虫属(Nacobbus)(例如,异常珍珠线虫(N.aberrans))。可被本披露的酶、制剂、多核苷酸和生物体靶向的线虫的另外实例可在Capinera,Handbook of Vegetable Pests[蔬菜有害生物手册](2001)以及Niblack,Nematodes[线虫],Illinois Agronomy Handbook[伊利诺伊农学手册](2008)中找到。
本披露的组合物可用于预防和/或治疗卵菌侵染/感染,例如通过抑制卵菌与表面的粘附、抑制卵菌进入材料、抑制卵菌的栖息、抑制卵菌的生长、抑制卵菌的繁殖和/或增殖、降解卵菌的一种或多种结构组分(例如细胞壁组分,诸如纤维素和其他β-葡聚糖)、杀死卵菌和/或减轻卵菌侵染/感染的一种或多种症状。在一些实施例中,这种抑制是完全的或基本上完全的,使得卵菌不能以有效引发和/或维持明显侵染/感染的速率栖息/摄食/生长/繁殖/增殖。例如,用本披露的酶喷洒植物可抑制卵菌粘附到植物表面的能力、抑制卵菌进入植物的能力、抑制卵菌栖息于植物的能力、抑制卵菌在植物上/中的生长、抑制卵菌在植物上/中的繁殖和/或增殖、降解植物上/中的卵菌的一种或多种结构组分(例如,一种或多种β-葡聚糖)和/或杀死卵菌,从而与未处理的对照植物相比,减轻植物的一种或多种侵染症状和/或增强植物的一种或多种生长和/或产量特征。
本披露的组合物可用于预防和/或治疗许多植物病原卵菌的侵染/感染,这些植物病原卵菌包括但不限于植物病原白锈菌科(Albuginaceae)、霜霉菌科(Peronosporaceae)和腐霉菌科(Pythiaceae),诸如枯萎病、霉病、霉菌、根腐病和锈病。在一些实施例中,本披露的蛋白质用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种以下病菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性:绵霉属(Achlya)、白锈菌属(Albugo)(例如,荠菜白锈菌(A.candida))、丝囊霉属(Aphanomyces)(例如,螺壳状丝囊霉(A.cochlioides)、根腐丝囊霉(A.euteiches)、侵入性丝囊霉(A.invadans)、鸢尾丝囊霉(A.iridis)、萝卜丝囊霉(A.raphani))、盘霜霉属(Bremia)(例如,油麦菜盘霜霉(B.lactucae))、透明霜霉属(Hyaloperonospora)(例如,拟南芥透明霜霉(H.arabidopsidis))、霜霉属(Peronospora)(例如,罗勒霜霉(P.belbahrii)、葱霜霉(P.destructor)、藜霜霉(P.effusa)、粉霜霉(P.farinose)、萱草霜霉(P.fulva)、洛托霜霉(P.lotorum)、东北霜霉(P.manshurica)、寄生霜霉(P.parasitica)、紫苏梗霜霉(P.potentillae)、覆盆子霜霉(P.rubi)、甜菜霜霉(P.schachtii)、稀疏霜霉(P.sparsa)、烟草霜霉(P.tabacina)、三叶草霜霉(P.trifolii)、蚕豆霜霉(P.viciae))、疫霉属(Phytophthora)(例如,阿加蒂疫霉(P.agathidicia)、苎麻疫霉(P.boehmeriae)、仙人掌疫霉(P.cactorum)、栗黑水疫霉(P.cambivora)、辣椒疫霉(P.capsica)、樟疫霉(P.cinnamomi)、柑橘疫霉(P.citricola)、柑桔褐腐疫霉(P.citrophthora)、隐地疫霉(P.cryptogea)、掘氏疫霉(P.drechsleri)、红败疫霉(P.erythroseptica)、稻苗疫霉(P.fragariae)、橡胶疫霉(P.heveae)、致病疫霉(P.infestans)、核疫霉(P.kernoviae)、雪松疫霉(P.lateralis)、梅加疫霉(P.megakaryam)、大雄疫霉(P.megasperma)、烟草疫霉(P.nicotianae)、棕榈疫霉(P.palmivora)、寄生疫霉(P.parasitica)、橡树疫霉(P.ramorum)、大豆疫霉(P.sojae)、丁香疫霉(P.syringae))、单轴霉属(Plasmopara)(例如,霍尔斯单轴霉(P.halstedii)、葡萄单轴霉(P.viticola))、假霜霉属(Pseudeoperonospora)(例如,古巴假霜霉(P.cubensis)、葎草假霜霉(P.humuli))、假指梗霉属(Pseudosclerospora)(例如,菲利普假指梗霉(P.philippinesis)、甘蔗假指梗霉(P.sacchari)、高粱假指梗霉(P.sorghi))、腐霉属(Pythium)(例如,棘腐霉(P.acanthicum)、瓜果腐霉(P.aphanidermatum)、芒孢腐霉(P.aristosporum)、强雄腐霉(P.arrhenomanes)、巴特勒氏腐霉(P.butleri)、重锥科拉腐霉(P.chondricola)、桔腐霉(P.citrinum)、长葫芦状腐霉(P.cucurbitacearum)、德巴利腐霉(P.debaryanum)、德里腐霉(P.delicense)、伊民腐霉(P.emineosum)、禾生腐霉(P.graminicola)、异宗结合腐霉(P.heterothallicum)、海波荄姆腐霉(P.hypogynum)、隐袭腐霉(P.insidiosum)、畸雌腐霉(P.irregulare)、岩山腐霉(P.iwayamae)、奇雄腐霉(P.middletonii)、结群腐霉(P.myriotylum)、奥卡诺根腐霉(P.okanoganense)、奥纳卡蒲腐霉(P.oopapillum)、水稻腐霉(P.paddicum)、侧雄腐霉(P.paroecandrum)、合欢腐霉(P.perniciosum)、紫菜腐霉(P.porphyrae)、喙腐霉(P.rostratum)、硬化腐霉(P.scleroteichum)、刺腐霉(P.spinosum)、芨芨草腐霉(P.splendens)、等腐霉属(P.sulcatum)、缓生腐霉(P.tardicrescens)、嗜导管腐霉(P.tracheiphilum)、终极腐霉(P.ultimum)、堇菜腐霉(P.violae)、卷旋腐霉(P.volutum))、水霉属(Saprolegnia)(例如,寄生水霉(S.parasitica))、指疫霉属(Sclerophthora)(例如,大孢指疫霉(S.macrospora)、玉米褐条指疫霉(S.rayssiae))和/或指梗霉属(Sclerospora)(例如,禾生指梗霉(S.graminicola))。可使用本披露的蛋白质、制剂、多核苷酸和生物体靶向的真菌的另外实例可在Bradley,Managing Diseases[管理病害],Illinois Agronomy Handbook[伊利诺伊农学手册](2008)中找到。
本披露的组合物可特别用于预防、治疗、抑制、消除由植物病原真菌和卵菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性,这些植物病原真菌和卵菌诸如白锈菌属(Albugo)(例如,荠菜白锈菌、西方白锈菌(A.occidentalis))、链格孢属(例如,互隔交链格孢、莲子草链格孢、花生链格孢、乔木链格孢、果园链格孢、七里香链格孢、芸薹链格孢、甘蓝链格孢、巴恩斯链格孢、胡萝卜黑腐病链格孢、红花链格孢、鸡冠花链格孢、瓜叶菊链格孢、柑橘链格孢、联接链格孢、瓜类链格孢、胡萝卜链格孢、石竹链格孢、双肠形链格孢、水葫芦链格孢、大戟生链格孢、盖森链格孢、向日葵链格孢、向日葵黑斑病菌链格孢、匈牙利链格孢、感染链格孢、日本链格孢、白花菊链格孢、亚麻生链格孢、长柄链格孢、苹果链格孢、梨链格孢、稻毛锥链格孢、人参链格孢、佩氏链格孢、帕特罗链格孢、葱链格孢、青冈链格孢、根链格孢、萝卜链格孢、皂草链格孢、塞里尼链格孢、山豆根链格孢、司米尼链格孢、茄链格孢、苦苣菜链格孢、极细链格孢、小麦链格孢、葫芦猪笼草链格孢、百日草链格孢、布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,葱腐葡萄孢(B.aclada)、大葱葡萄孢、灰葡萄孢、椭圆葡萄孢(B.elliptica)、蚕豆葡萄孢、葱鳞葡萄孢(B.squamosa))、长喙壳菌属(例如,甘薯长喙壳菌)、刺盘孢属、色二孢属(例如,棉色二孢)、欧文氏菌属(例如,解淀粉欧文氏菌、蚜虫欧文氏菌、胡萝卜软腐欧文氏菌、菊欧文氏菌、木瓜欧文氏菌、桃色欧文氏菌、番石榴欧文氏菌、沙梨欧文氏菌、大黄欧文氏菌、瓜萎蔫病欧文氏菌)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、茄镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、地丝菌属(例如,念珠地丝菌)、赤霉菌属(例如,藤仓赤霉、虱状赤霉、玉米赤霉)、吉尔霉属(例如,桃吉尔霉)、小丛壳属(例如,围小丛壳)、透明霜霉属(例如,拟南芥透明霜霉)、壳球孢属(例如,菜豆壳球孢)、巨座壳属(例如灰巨座壳、稻巨座壳)、栅锈菌属(例如,亚麻栅锈菌)、链核盘菌属(例如,果生链核盘菌)、毛霉属(例如,梨形毛霉)、球腔菌属(例如,禾生球腔菌)、明孢盘菌属(例如,玛丽明孢盘菌)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大利青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、囊孢壳属(例如,扁柏囊孢壳)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、单轴霉属(例如,葡萄单轴霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)、柄锈菌属(例如,芦笋柄锈菌、卡氏柄锈菌、禾柄锈菌、库氏柄锈菌、黑头柄锈菌、葱柄锈菌、斑形柄锈菌、隐匿柄锈菌、谢氏柄锈菌、无柄柄锈菌、高粱柄锈菌、条形柄锈菌、小麦柄锈菌、小麦隐匿柄锈菌)、腐霉属(例如,巴特勒氏腐霉、终极腐霉)、丝核菌属(例如,茄丝核菌)、根霉属(例如,黑根霉、匍枝根霉)、核盘菌属(例如,北方核盘菌、球茎核盘菌、币斑病核盘菌、大豆核盘菌、小核盘菌、蓖麻子核盘菌、油菜核盘菌、三叶草盲种核盘菌、三叶草核盘菌)、壳针孢属(例如,瓜角斑壳针孢、大豆壳针孢、莱蔻斯壳针孢(S.lycospersici))、黑粉菌属(例如,菰黑粉菌、玉米黑粉菌、裸黑粉菌)、叶枯病菌属(例如,小麦叶枯病菌)。
叶枯病侵染/感染(诸如由巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 1.1.3(例如,1.1.3.4、1.1.3.25)、1.11.1(例如,1.11.1.6)、3.2.1(例如,3.2.1.6)和/或3.4.21的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ ID NO:1、2、5、6、10、11、14、21、99、101、116、126中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用酶的组合来预防、治疗、抑制和/或消除,诸如一种或多种纤维素酶、一种或多种半纤维素酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种肽酶和一种或多种蛋白酶;一种或多种纤维素酶、一种或多种葡糖苷酶和一种或多种木聚糖酶。
枯萎病侵染/感染(诸如由链格孢属(例如,互隔链格孢、胡萝卜黑腐病链格孢、人参链格孢、佩特罗链格孢(A.petroselini)、茄链格孢、小麦链格孢)、刺盘孢属、镰孢属(例如,禾谷镰孢)、赤霉属(例如,玉米赤霉)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、致病疫霉、橡树疫霉)介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 1.1.3(例如,1.1.3.4、1.1.3.25)、1.10.3(例如,1.10.3.2)、1.11.1(例如,1.11.1.6)、3.1.1(例如,3.1.1.5)、3.2.1(例如,3.2.1.1、3.2.1.3、3.2.1.4、3.2.1.5、3.2.1.6、3.2.1.8、3.2.1.11、3.2.1.15、3.2.1.39、3.2.1.41、3.2.1.58、3.2.1.75、3.2.1.78、3.2.1.111)、3.4.11(例如,3.4.11.1)、3.4.21(例如,3.4.21.19、3.4.21.62)和/或3.4.24(例如,3.4.24.28)的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ ID NO:1、6、9、10、11、12、13、14、15、16、17、19、20、21、22、24、25、29、33、42、43、44、45、46、48、99、100、101、105、109、110、114、116、117、125、126、132、149中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用酶的组合来预防、治疗、抑制和/或消除,诸如两种或更多种纤维素酶;两种或更多种果胶酶;两种或更多种葡聚糖酶;两种或更多种肽酶;两种或更多种果胶酶;一种或多种纤维素酶、一种或多种半纤维素酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种葡聚糖酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种淀粉酶、一种或多种葡聚糖酶和一种或多种木聚糖酶。
斑点病侵染/感染(诸如由球腔菌属(例如,禾本球腔菌)和发酵菌属(例如,小麦发酵菌)介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 1.1.3(例如,1.1.3.4、1.1.3.25)、1.10.3(例如,1.10.3.2)、1.11.1(例如,1.11.1.6)、3.1.1(例如,3.1.1.5)、3.2.1(例如,3.2.1.1、3.2.1.3、3.2.1.6、3.2.1.8、3.2.1.11、3.2.1.15、3.2.1.39、3.2.1.41、3.2.1.58、3.2.1.75、3.2.1.78、3.2.1.101、3.2.1.109、3.2.1.110、3.2.1.112)、3.4.11(例如,3.4.11.1)、3.4.21(例如,3.4.21.62)和/或3.4.24(3.4.24.28)的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ ID NO:1、6、9、10、11、13、14、15、17、21、22、24、25、29、42、44、45、48、101、103、114、149中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用酶的组合来预防、治疗、抑制和/或消除,诸如一种或多种纤维素酶、一种或多种裂解酶和一种或多种果胶酶;一种或多种纤维素酶、一种或多种半纤维素酶和一种或多种木聚糖酶;两种或更多种纤维素酶;两种或更多种葡聚糖酶;两种或更多种果胶酶;一种或多种葡聚糖酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种肽酶和一种或多种蛋白酶。
霜霉病侵染/感染(诸如由盘霜霉属(例如,油麦菜盘霜霉)、透明霜霉属(例如,拟南芥透明霜霉、寄生透明霜霉)、霜霉属(例如,罗勒霜霉、葱霜霉、藜霜霉、粉霜霉、萱草霜霉、洛托霜霉、东北霜霉、寄生霜霉、紫苏梗霜霉、覆盆子霜霉、甜菜霜霉、稀疏霜霉、烟草霜霉、三叶草霜霉、蚕豆霜霉)、指霜霉属(Peronosclerospora)、单轴霉属(例如,霍尔斯单轴霉、葡萄单轴霉)和假霜霉属(例如,古巴假霜霉、葎草假霜霉)介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 3.2.1(例如,3.2.1.8、3.2.1.78)和/或3.4.21(例如,3.4.21.19、3.4.21.62)的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ IDNO:22、42、43、44、45中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。
粉霉病侵染/感染(诸如由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、白粉菌属(例如,菊科白粉菌、葡萄白粉菌)、高氏白粉菌属、内丝白粉菌属(例如,鞑靼内丝白粉菌)、叉丝壳属(例如,扩散叉丝壳)、粉孢属、球针壳属、叉丝单囊壳属(例如,羽翼草叉丝单囊壳、白叉丝单囊壳、斑点叉丝单囊壳、苍耳叉丝单囊壳)、单囊壳属和钩丝壳属介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 1.1.3(例如,1.1.3.4)、3.2.1(例如,3.2.1.8、3.2.15)和/或3.4.21的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ ID NO:1、10、22、42中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用酶的组合来预防、治疗、抑制和/或消除,诸如两种或更多种果胶酶。
霉菌侵染/感染(诸如由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢、椭圆葡萄孢)、青霉菌属(例如,指状青霉菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、橡树疫霉)介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 1.1.3(例如,1.1.3.4、1.1.3.25)、1.10.3(例如,1.10.3.2)、1.11.1(例如,1.11.1.6、1.11.1.7)、3.2.1(例如,3.2.1.1、3.2.1.3、3.2.1.4、3.2.1.5、3.2.1.6、3.2.1.8、3.2.1.11、3.2.1.15、3.2.1.17、3.2.1.39、3.2.1.41、3.2.1.58、3.2.1.75、3.2.1.109、3.2.1.110、3.2.1.111、3.2.1.112)、3.4.11(例如,3.4.11.1)、3.4.21(例如,3.4.21.62)和/或3.4.24(例如,3.4.24.28)的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ ID NO:1、6、9、10、11、12、13、14、16、17、20、21、22、24、25、29、33、41、42、44、45、48、99、101、102、111、116、119、126、129、149中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用酶的组合来预防、治疗、抑制和/或消除,诸如两种或更多种纤维素酶;两种或更多种果胶酶;一种或多种纤维素酶、一种或多种半纤维素酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种肽酶和一种或多种蛋白酶;一种或多种淀粉酶、一种或多种葡聚糖酶和一种或多种杆菌溶素;一种或多种纤维素酶、一种或多种半纤维素酶和一种或多种木聚糖酶;两种或更多种肽酶;一种或多种葡聚糖酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种肽酶和一种或多种蛋白酶;一种或多种纤维素酶、一种或多种葡糖苷酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种纤维素酶、一种或多种呋喃糖苷酶和一种或多种木聚糖酶。
冠/果实/根/茎腐病侵染/感染(诸如由刺盘孢属、镰孢属(例如,茄病镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、烟草疫霉、寄生疫霉、大豆疫霉)、腐霉属(例如,禾谷腐霉、终极腐霉)、水霉属(例如,寄生水霉)介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 1.1.3(例如,1.1.3.4、1.1.3.25)、1.11.1(例如,1.11.1.6)、3.2.1(例如,3.2.1.6、3.2.1.8、3.2.1.11、3.2.1.39、3.2.1.58、3.2.1.75、3.2.1.109、3.2.1.110、3.2.1.111)和/或3.4.21(例如,3.4.21.19)的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ ID NO:1、6、9、10、11、12、13、14、15、16、17、20、21、22、24、25、29、41、42、43、44、45、48中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用酶的组合来预防、治疗、抑制和/或消除,诸如两种或更多种纤维素酶;两种或更多种果胶酶;两种或更多种葡聚糖酶;两种或更多种肽酶;一种或多种淀粉酶、一种或多种葡聚糖酶和一种或多种杆菌溶素;一种或多种纤维素酶、一种或多种裂解酶和一种或多种果胶酶;一种或多种纤维素酶、一种或多种半纤维素酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种葡聚糖酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种肽酶和一种或多种蛋白酶。
锈病侵染/感染(诸如由白锈菌属(例如,荠菜白锈菌、西方白锈菌)、驼孢锈菌属(例如,咖啡驼孢锈菌、瓦氏驼孢锈菌)、栅锈菌属(例如,亚麻栅锈菌)、层锈菌属(例如,山马蝗层锈菌、豆薯层锈菌)、柄锈菌属(例如,芦笋柄锈菌、卡氏柄锈菌、禾柄锈菌、库氏柄锈菌、黑头柄锈菌、葱柄锈菌、斑形柄锈菌、隐匿柄锈菌、谢氏柄锈菌、无柄柄锈菌、高粱柄锈菌、条形柄锈菌、小麦柄锈菌、小麦隐匿柄锈菌)和单胞锈菌属(例如,疣顶单胞锈菌(U.appendiculatus))介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 1.1.3(例如,1.1.3.4)、1.10.3(例如,1.10.3.2)、3.1.1(例如,3.1.1.5)、3.2.1(例如,3.2.1.1、3.2.1.3、3.2.1.4、3.2.1.5、3.2.1.6、3.2.1.8、3.2.1.15、3.2.1.41、3.2.1.58、3.2.1.78)、3.4.11(例如,3.4.11.1)、3.4.21(例如,3.4.21.19、3.4.21.62)和/或3.4.24(例如,3.4.24.28)的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ ID NO:1、9、13、15、16、17、19、20、23、24、29、33、42、43、44、45、46、48中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用酶的组合来预防、治疗、抑制和/或消除,诸如两种或更多种葡聚糖酶;一种或多种肽酶和一种或多种蛋白酶;以及一种或多种淀粉酶、一种或多种葡聚糖酶和一种或多种杆菌溶素。
萎蔫病侵染/感染(诸如由镰孢属(例如,尖孢镰孢)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、致病疫霉、橡树疫霉)介导的那些)可用本披露的许多组合物来预防、治疗、抑制和/或消除,包括但不限于表现出属于EC 1.1.3(例如,1.1.3.4、1.1.3.25)、1.10.3(例如,1.10.3.2)、1.11.1(例如,1.11.1.6)、3.1.1(例如,3.1.1.5)、3.2.1(例如,3.2.1.1、3.2.1.3、3.2.1.4、3.2.1.5、3.2.1.6、3.2.1.8、3.2.1.11、3.2.1.15、3.2.1.39、3.2.1.41、3.2.1.58、3.2.1.75、3.2.1.78、3.2.1.111)、3.4.11(例如,3.4.11.1)、3.4.21(例如,3.4.21.19、3.4.21.62)和/或3.4.24(例如,3.4.24.28)的一种或多种活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用SEQ ID NO:1、6、9、10、11、12、13、14、15、16、17、19、20、21、22、24、25、33、42、43、44、45、46、48、99、101、114、116、125、126中的一个或多个及其酶活性片段/突变体/变体来预防、治疗、抑制和/或消除。在一些实施例中,此类侵染/感染可使用酶的组合来预防、治疗、抑制和/或消除,诸如两种或更多种纤维素酶;两种或更多种果胶酶;两种或更多种葡聚糖酶;两种或更多种肽酶;两种或更多种果胶酶;一种或多种纤维素酶、一种或多种半纤维素酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种葡聚糖酶和一种或多种木聚糖酶;一种或多种淀粉酶、一种或多种葡聚糖酶和一种或多种木聚糖酶。
表现出属于EC 1.1的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(Zymoseptoria)(例如,小麦叶枯菌(Z.tritici))引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:1-8所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.1.3的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:1-8所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.1.3.4的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:1-5所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.1.3.25(现在包括在EC 1.1.99.18中)的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:6-8所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.10的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.10.3的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.10.3.2的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.11的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:10-12所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.11.1的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ IDNO:10-12所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.11.1.6的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQID NO:10-11所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.11.1.7的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.14的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:99所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.14.99的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ IDNO:99所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 1.14.99.56的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:99所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.1的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:13和100-106所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.1.1的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:13、100-103和105所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.1.1.3的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:100-103所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.1.1.5的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.1.1.11的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:105所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:14-41和109-143所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:14-41和109-143所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.1的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:14-16和109-111所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.3的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:17-18所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.4的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:19和114-116所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.6的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.7的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)和镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:117所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.8的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:21-24和119所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.11的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.15的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:125所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.17的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.21的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)和疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:126所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.39的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:27-28所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.41的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.55的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:129所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.58的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.59的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:30所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.73的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:132所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.75的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:31-32所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.78的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:33所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.101的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:34所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.109的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:35-40所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.2.1.133的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:41所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.4的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:42-48所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.4.11的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.4.11.1的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.4.21的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:42-47所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.4.21.19的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和假霜霉属(例如,古巴假霜霉)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:43所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.4.21.62的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:44-47所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.4.24的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 3.4.24.28的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 4.2的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:149所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 4.2.2的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:149所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
表现出属于EC 4.2.2.2的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。包含与本文如SEQ ID NO:149所示的氨基酸序列中的一种或多种约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)可特别用于预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
应当理解,本披露的组合物不必具有毒性才有效。如上所述,本披露的蛋白质可通过各种非致死手段发挥其作用,诸如减少有害生物被经处理的表面吸引、抑制摄食等。此外,本披露的蛋白质和组合物(甚至能够发挥毒性作用的那些)可以按非致死剂量使用以增强各种化学杀有害生物剂和生物杀有害生物剂的功效和/或扩大其目标有害生物范围。
本披露延伸至使用本披露的组合物(例如,本披露的蛋白质、制剂、多核苷酸和生物体)来预防、治疗、抑制、消除由园艺有害生物(诸如植物病原螨虫、细菌、真菌、腹足类动物、昆虫、线虫、卵菌、原生动物和杂草)引起的侵染/感染和/或降低其严重性的方法。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.1的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,氧化还原酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:1-8所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.1.3的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,氧化还原酶(其中氧作为受体)、任选地包含与本文如SEQ ID NO:1-8所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.1.3.4的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,葡萄糖氧化酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:1-5所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.1.3.25(现在包括在EC 1.1.99.18中)的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,纤维二糖脱氢酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:6-8所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.10的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,氧化酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.10.3的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,氧化酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.10.3.2的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,虫漆酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.11的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,过氧化物酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:10-12所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.11.1的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,过氧化物酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:10-12所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.11.1.6的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,过氧化氢酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:10-11所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.11.1.7的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,过氧化物酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.14的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,加氧酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:99所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.14.99的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,单加氧酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:99所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 1.14.99.56的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,裂解纤维素单加氧酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:99所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.1的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,水解酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:13和100-106所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.1.1的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,羧酸酯水解酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:13、100-103和105所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.1.1.3的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,三酰基甘油脂肪酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:100-103所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.1.1.5的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,溶血磷脂酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.1.1.11的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,果胶酯酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:105所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,糖基酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:14-41和109-143所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:14-41和109-143所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.1的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,α-淀粉酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:14-16和109-111所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.3的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,葡聚糖1,4-α-葡糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:17-18所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.4的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,纤维素酶、任选地包含与本文如SEQID NO:19和114-116所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.6的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.7的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)和镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,菊粉酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:117所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.8的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,内切-1,4-β-木聚糖酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:21-24和119所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.11的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,右旋糖酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:25所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.15的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,内切-聚半乳糖醛酸酶(果胶酶)、任选地包含与本文如SEQ ID NO:125所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.17的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,溶菌酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.21的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)和疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,β-葡糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:126所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.39的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,葡聚糖内切-1,3-β-D-葡糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:27-28所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.41的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,普鲁兰酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.55的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:129所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.58的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,葡聚糖1,3-β-葡糖苷酶(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.59的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,葡聚糖内切-1,3-α-葡糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:30所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.73的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,地衣多糖酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:132所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.75的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,葡聚糖内切-1,6-β-葡糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:31-32所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.78的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,甘露聚糖内切-1,4-β-甘露糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:33所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.101的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,包含与本文如SEQ ID NO:34所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。例如,甘露聚糖内切-1,6-α-甘露糖苷酶(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.109的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,内切半乳糖苷酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:35-40所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.2.1.133的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,葡聚糖1,4-α-麦芽糖水解酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:41所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.4的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,肽酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:42-48所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.4.11的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,氨肽酶(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.4.11.1的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,亮氨酰氨肽酶(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.4.21的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种布氏白粉菌属(例如,禾本科布氏白粉菌)、葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、巨座壳属(例如,稻瘟巨座壳菌、稻旁叶螨巨座壳菌)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,丝氨酸内肽酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:42-47所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.4.21.19的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和假霜霉属(例如,古巴假霜霉)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,谷氨酰内肽酶、任选地包含与本文如SEQID NO:43所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.4.21.62的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)、假霜霉属(例如,古巴假霜霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,枯草杆菌蛋白酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:44-47所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.4.24的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,金属内肽酶、任选地包含与本文如SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 3.4.24.28的活性的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、层锈菌属(例如,豆薯层锈菌)、疫霉属(例如,辣椒疫霉、樟疫霉、致病疫霉、寄生疫霉、橡树疫霉、大豆疫霉)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,杆菌溶素、任选地包含与本文如SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 4.2的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,碳-氧裂解酶、任选地包含与本文如SEQ IDNO:149所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 4.2.2的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,多糖裂解酶、任选地包含与本文如SEQ IDNO:149所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
在一些实施例中,表现出属于EC 4.2.2.2的活性的蛋白质(以及相应的制剂、多核苷酸和生物体)用于预防、治疗、抑制、消除植物或植物部分由一种或多种葡萄孢属(例如,灰葡萄孢)、镰孢属(例如,禾谷镰孢、尖孢镰孢、大豆猝死综合症镰孢)、青霉菌属(例如,指状青霉菌、扩展青霉菌、意大青霉菌、皱褶青霉菌、疣梗青霉菌)和叶枯菌属(例如,小麦叶枯菌)引起的侵染/感染和/或降低其严重性。例如,果胶裂解酶、任选地包含与本文如SEQ IDNO:149所示的氨基酸序列中的一个或多个约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%相同的氨基酸序列、基本上由该氨基酸序列组成或者由该氨基酸序列组成的蛋白质(或者相应的制剂、多核苷酸或生物体)可施用于植物或植物部分以预防、治疗、抑制、消除此类侵染/感染和/或降低其严重性。
本披露的组合物可施用于任何植物类型,包括但不限于行式作物和蔬菜。在一些实施例中,本披露的组合物被配制用于处理一种或多种选自以下项的植物:苋科(例如牛皮菜、菠菜、甜菜、藜麦)、菊科(例如洋蓟、紫苑、甘菊、菊苣、菊花、大丽花、雏菊、松果菊、麒麟草、银胶菊、莴苣、金盏花、红花、向日葵、百日草)、十字花科(例如芝麻菜、西兰花、白菜、球芽甘蓝、卷心菜、花椰菜、卡诺拉油菜、羽衣甘蓝、白萝卜、独行菜、辣根、无头甘蓝、芥菜、萝卜、油菜籽、大头菜、芜菁、山葵、豆瓣菜、拟南芥)、番木瓜科(例如番木瓜)、葫芦科(例如哈密瓜、黄瓜、蜜瓜、甜瓜、西葫芦、南瓜(例如橡实形南瓜、冬南瓜、夏南瓜)、西瓜、小西葫芦)、豆科(例如苜蓿、豆类、角豆树、三叶草、瓜尔豆、扁豆、豆科灌木、豌豆、花生、大豆、罗望子、黄芪胶、野豌豆)、锦葵科(例如可可、棉花、榴莲、木槿、洋麻、可乐树、秋葵)、禾本科(例如竹、大麦、玉米、马唐属植物、草坪草(例如巴伊亚草、狗牙根、蓝草、野牛草、蜈蚣草、羊茅或结缕草)、粟、燕麦、观赏草、稻、黑麦、高粱、甘蔗、小黑麦、小麦和其他谷类作物)、蓼科(例如荞麦)、蔷薇科(例如扁桃、苹果、杏、黑莓、蓝莓、樱桃、桃、李子、柑橘、树莓、玫瑰、草莓)、茄科(例如灯笼椒、辣椒、茄子、矮牵牛、马铃薯、烟草、番茄)和葡萄科(例如葡萄)。
可用本披露的组合物处理的植物的非限制性实例包括以以下商标名销售的植物: ALFOREXTM、/>BOLLGARD IITM、BOLLGARDTM3、BREVANTTM、CHANNELTM、CONFIDORTM、CORTEVA AGRISCIENCETM、CORVUSTMCROPSTARTM、DAIRYLANDTM、/>DELTAPINETM、DERUITERTMENLIST/>GAUCHOTMHOEGEMEYERTM、INTACTA RR2PROTMLIBERTY/>NUTECHRIBROUNDUP/>ROUNDUP READY 2/>ROUNDUP READY 2SEMETES AGROCERESTM、SEMINISTMTRUFLEXTM、VT DOUBLE/>VT TRIPLE/>YIELDGARD VT/>YIELDGARD VT/>和/或XTENDFLEXTM
可将本披露的组合物施用于植物的任何部分。在一些实施例中,将组合物施用于植物繁殖材料(例如插条、根茎、种子和块茎)。在一些实施例中,将组合物施用于植物的根部。在一些实施例中,将组合物施用于植物的枝叶。在一些实施例中,将组合物施用于植物的根部和枝叶两者。在一些实施例中,将组合物施用于植物繁殖材料和由所述植物繁殖材料生长的植物。
可将本披露的组合物施用于任何植物生长介质,包括但不限于土壤。
可将本披露的组合物以任何合适的方式(包括但不限于种子上施用、犁沟中施用和叶面施用)施用于植物、植物部分和/或植物生长介质。
可使用任何合适的方法(包括但不限于涂覆、滴落、撒粉、包封、雾化、浸渍、喷洒和浸泡)施用本披露的组合物。可采用其中将预定批量的材料和组合物递送到混合器中的批量系统。也可采用被校准为以与连续材料流成比例的预定速率施用组合物的连续处理系统。在一些实施例中,使用喷杆喷雾器或果园喷雾器施用本披露的组合物。
在一些实施例中,将本披露的组合物直接施用于植物繁殖材料(例如,种子)。根据一些实施例,将植物繁殖材料浸泡在本披露的组合物中至少0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.25、1.5、1.75、2、3、4、5、6、9、12、15、18、21、24、36、48小时。根据一些实施例,用这些组合物涂覆植物繁殖材料。可将植物繁殖材料涂覆有一个或多个附加层(例如,用于增强本披露的酶/生物体的稳定性和/或活性的一个或多个保护层和/或包含可降低本披露的酶/生物体的稳定性和/或活性的物质(如果包括在与本披露的酶/生物体相同的层中)的一个或多个隔离层)。在一些实施例中,涂层包含本披露的组合物和干燥粉末、基本上由本披露的组合物和干燥粉末组成或者由本披露的组合物和干燥粉末组成。
在一些实施例中,将本披露的组合物直接施用于植物生长介质(例如,土壤)。根据一些实施例,将这些组合物施用在植物繁殖材料(例如,种子)附近。根据一些实施例,将这些组合物施用于植物的根区。根据一些实施例,使用滴灌系统施用这些组合物。
在一些实施例中,将本披露的组合物直接施用于植物。根据一些实施例,将组合物雾化、喷雾、喷洒和/或洒喷到待处理的植物上(例如,叶面喷洒)。
在一些实施例中,将本披露的组合物施用于收获的植物和/或植物部分。
可分开或一起施用组合物的各个组分(例如,本披露的蛋白质和化学杀有害生物剂)。例如,在一些实施例中,可将本披露的组合物并入有害生物综合治理策略中(例如,可将包含本披露的一种或多种蛋白质的制剂作为有害生物综合治理策略的一部分施用于果园/葡萄园,其包括在被设计成减少/防止化学杀有害生物剂诱导的植物毒性和/或有害生物抗性的轮次中分开施用2、3、4、5种或更多种不同的杀有害生物剂)。
在一些实施例中,将本披露的组合物冷冻喷雾干燥或喷雾冷冻干燥,然后施用于植物/植物部分。例如,在一些实施例中,将包含本披露的酶/生物体和一种或多种稳定组分(例如,DEV为约15至约20的一种或多种麦芽糖糊精)的制剂冷冻喷雾干燥或喷雾冷冻干燥,与干燥粉末(例如,包含硬脂酸钙、凹凸棒石粘土、蒙脱石粘土、石墨、硬脂酸镁、二氧化硅(例如气相二氧化硅、疏水涂覆的二氧化硅和/或沉淀的二氧化硅)和/或滑石的干燥粉末)混合,然后涂覆在已用一种或多种粘合剂(例如,包含一种或多种麦芽糖糊精,一种或多种单糖、二糖或寡糖,一种或多种蛋白胨等的粘合剂组合物)、一种或多种杀有害生物剂和/或一种或多种植物信号分子(例如,一种或多种LCO)预处理的种子上。
可将本披露的组合物以任何合适的量/浓度施用于植物、植物部分和/或植物生长介质。
本披露的组合物可用于在任何时间(包括在种植前、种植时、种植后、萌发前、萌发后、出苗前、出苗时、出苗后、营养阶段前、营养阶段期间、营养阶段后、生殖阶段前、生殖阶段期间、生殖阶段后、开花前、开花时、开花后、结果前、结果时、结果后、成熟前、成熟时、成熟后、收获前、收获时和收获后)预防和/或治疗由园艺有害生物引起的侵染/感染。实际上,本披露的组合物可用于通过在收获后数周/数月内预防、治疗、抑制、消除由螨虫、细菌、真菌、昆虫、卵菌和原生动物引起的侵染/感染和/或降低其严重性来延长收获产品的贮藏期。
可将本披露的组合物在任何时间(包括但不限于在种植前、种植时、种植后、萌发前、萌发时、萌发后、出苗前、出苗时、出苗后、营养阶段前、营养阶段期间、营养阶段后、生殖阶段前、生殖阶段期间、生殖阶段后、开花前、开花时、开花后、结果前、结果时、结果后、成熟前、成熟时、成熟后、收获前、收获时和收获后)施用于植物、植物部分和/或植物生长培养基。
在一些实施例中,将本披露的组合物在种植前约/至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、28、32、36、40、44、48、52、56、60、64、68、72、76、80、84、88、92、96、100、104周施用于植物繁殖材料(例如,种子)。
在一些实施例中,将本披露的组合物在种植时施用于植物繁殖材料(例如,种子)。
在一些实施例中,将本披露的组合物在种植后但在萌发前施用于植物繁殖材料(例如,种子)。
在一些实施例中,将本披露的组合物在出苗后施用于植物。
在一些实施例中,将本披露的组合物在收获前(即,在(要)收获植物或植物部分之前1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15天或更多天内)施用于植物或植物部分。
在一些实施例中,将本披露的组合物在收获后(即,在已经收获植物或植物部分之后)施用于植物或植物部分。
在一些实施例中,将本披露的组合物施用于加工植物产品。
在一些实施例中,将本披露的组合物在加工/运输设施处施用于收获植物或植物部分。
在一些实施例中,将本披露的组合物施用于加工植物产品。
因此,本披露延伸至已经用本披露的组合物处理的植物和植物部分(例如,用包含本披露的一种或多种酶的制剂涂覆的植物繁殖材料、用包含本披露的一种或多种酶的制剂喷洒的植物、用包含本披露的一种或多种酶的制剂涂覆的收获植物部分)、从用本披露的组合物处理的植物繁殖材料生长的植物、从已经用本披露的组合物处理的植物收获的植物部分、从用本披露的组合物处理的植物繁殖材料生长的植物收获的植物部分、包含用本披露的组合物处理的多个植物的作物、包含从用本披露的组合物处理的植物繁殖材料生长的多个植物的作物、用本披露的组合物处理的作物、来源于用本披露的组合物处理的植物的加工产品、来源于从用本披露的组合物处理的植物部分生长的植物的加工产品以及用本披露的组合物处理的加工产品。
如上所述,可将本披露的蛋白质配制成包含多种组分(诸如粘合剂(粘着剂)、化学活性剂、分散剂(铺展剂)、干燥剂、乳化剂、微生物、营养物、有害生物引诱剂和摄食刺激剂、pH控制组分、收获后处理剂、耐雨剂、流变剂、安全剂、稳定剂、UV保护剂和润湿剂)的组合物。应当理解,本披露的组合物和方法同样可与此类组分(作为单独和不同的组合物)组合使用(例如,作为有害生物综合管理策略的一部分)。
应当理解,本披露的组合物和方法不限于园艺用途。使得本披露的酶、制剂、核酸和生物体可用于预防、治疗、抑制、消除由园艺有害生物引起的侵染/感染和/或降低其严重性的相同活性同样使它们可用于预防、治疗、抑制、消除由各种介质(诸如食物储存容器、动物垫料/饲料、衣物、硬表面、医疗器械等)中和这些介质上的细菌、真菌、昆虫和卵菌引起的侵染/感染和/或降低其严重性。因此,应当理解,可对本披露的组合物和方法进行改良以用于其中这样的预防、治疗、抑制、消除和/或减轻病害严重性可能具有益处的任何其他工业或活动。
以下是本披露所涵盖的概念和实施例的非穷举列表:
本披露的蛋白质或制剂用于以下中的任一项、两项、三项、四项、五项、六项、七项、八项、九项、十项或更多项的用途:
1)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由园艺有害生物引起的侵染/感染
2)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由螨虫引起的侵染/感染
3)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由细菌引起的侵染/感染
4)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由真菌引起的侵染/感染
5)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由腹足类动物引起的侵染/感染
6)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由昆虫引起的侵染/感染
7)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由线虫引起的侵染/感染
8)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由卵菌引起的侵染/感染
9)预防/治疗/抑制/消除植物或植物部分由原生动物引起的侵染/感染
10)降低受一种或多种园艺有害生物影响的植物的病害严重性
11)降低受一种或多种植物病原螨虫影响的植物的病害严重性
12)降低受一种或多种植物病原细菌影响的植物的病害严重性
13)降低受一种或多种植物病原真菌影响的植物的病害严重性
14)降低受一种或多种植物病原腹足类动物影响的植物的病害严重性
15)降低受一种或多种植物病原昆虫影响的植物的病害严重性
16)降低受一种或多种植物病原线虫影响的植物的病害严重性
17)降低受一种或多种植物病原卵菌影响的植物的病害严重性
18)降低受一种或多种植物病原原生动物影响的植物的病害严重性
19)处理容易被园艺有害生物侵染/感染的表面/物质
20)处理容易被螨虫侵染/感染的表面/物质
21)处理容易被细菌侵染/感染的表面/物质
22)处理容易被真菌侵染/感染的表面/物质
23)处理容易被腹足类动物侵染/感染的表面/物质
24)处理容易被昆虫侵染/感染的表面/物质
25)处理容易被线虫侵染/感染的表面/物质
26)处理容易被卵菌侵染/感染的表面/物质
27)处理容易被原生动物侵染/感染的表面/物质
28)预防/治疗/抑制/消除园艺有害生物对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
29)预防/治疗/抑制/消除螨虫对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
30)预防/治疗/抑制/消除细菌对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
31)预防/治疗/抑制/消除真菌对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
32)预防/治疗/抑制/消除腹足类动物对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
33)预防/治疗/抑制/消除昆虫对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
34)预防/治疗/抑制/消除线虫对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
35)预防/治疗/抑制/消除卵菌对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
36)预防/治疗/抑制/消除原生动物对容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器的侵染/感染
37)处理(例如,涂覆、浸渍、浸润、雾化、喷雾、浸泡、喷洒)植物或植物部分
38)处理(例如,浸润、雾化、灌溉、喷雾、喷洒)植物生长介质
39)处理种植/灌溉/施肥/收获/包装/储存设备
40)在将植物或植物部分引入储存容器之前/与其同时/在其之后处理(例如,涂覆、浸渍、浸润、雾化、喷雾、浸泡、喷洒)所述储存容器
41)处理(例如,涂覆、浸渍、浸润、雾化、喷雾、浸泡、喷洒)收获的植物或植物部分
42)延长收获的植物或植物部分的贮藏期
43)延迟收获的植物或植物部分的成熟
44)加速收获的植物或植物部分的成熟
45)改善化学杀有害生物剂的功效
46)改善化学杀螨剂的功效
47)改善化学杀菌剂的功效
48)改善化学杀真菌剂的功效
49)改善化学杀腹足类动物剂的功效
50)改善化学除草剂的功效
51)改善化学杀昆虫剂的功效
52)改善化学杀线虫剂的功效
53)改善化学杀卵菌剂的功效
54)改善化学杀原生动物剂的功效
55)改善生物杀有害生物剂的功效
56)改善生物杀螨剂的功效
57)改善生物杀菌剂的功效
58)改善生物杀真菌剂的功效
59)改善生物杀腹足类动物剂的功效
60)改善生物除草剂的功效
61)改善生物杀昆虫剂的功效
62)改善生物杀线虫剂的功效
63)改善生物杀卵菌剂的功效
64)改善生物杀原生动物剂的功效
65)改善收获前处理剂的功效
66)改善收获后处理剂的功效
67)扩大化学杀有害生物剂的目标谱
68)扩大化学杀螨剂的目标谱
69)扩大化学杀菌剂的目标谱
70)扩大化学杀真菌剂的目标谱
71)扩大化学杀腹足类动物剂的目标谱
72)扩大化学除草剂的目标谱
73)扩大化学杀昆虫剂的目标谱
74)扩大化学杀线虫剂的目标谱
75)扩大化学杀卵菌剂的目标谱
76)扩大化学杀原生动物剂的目标谱
77)扩大生物杀有害生物剂的目标谱
78)扩大生物杀螨剂的目标谱
79)扩大生物杀菌剂的目标谱
80)扩大生物杀真菌剂的目标谱
81)扩大生物杀腹足类动物剂的目标谱
82)扩大生物除草剂的目标谱
83)扩大生物杀昆虫剂的目标谱
84)扩大生物杀线虫剂的目标谱
85)扩大生物杀卵菌剂的目标谱
86)扩大生物杀原生动物剂的目标谱
87)扩大收获前处理剂的目标谱
88)扩大收获后处理剂的目标谱
89)减少化学杀有害生物剂诱导的有害生物抗性和/或植物毒性
90)减少生物杀有害生物剂诱导的有害生物抗性和/或植物毒性
91)作为有害生物综合治理策略的一部分纳入。
前述用途中的任一项,其中以下中的任一项、两项、三项、四项、五项、六项、七项、八项、九项、十项或更多项为真:
1)蛋白质是酶
2)蛋白质是属于EC 1的酶
3)蛋白质是属于EC 1.1的酶
4)蛋白质是属于EC 1.1.3的酶
5)蛋白质是属于EC 1.1.3.4的酶
6)蛋白质是属于EC 1.1.3.25的酶
7)蛋白质是属于EC 1.10的酶
8)蛋白质是属于EC 1.10.3的酶
9)蛋白质是属于EC 1.10.3.2的酶
10)蛋白质是属于EC 1.11的酶
11)蛋白质是属于EC 1.11.1的酶
12)蛋白质是属于EC 1.11.1.6的酶
13)蛋白质是属于EC 1.11.1.7的酶
14)蛋白质是属于EC 1.14的酶
15)蛋白质是属于EC 1.14.99的酶
16)蛋白质是属于EC 1.14.99.56的酶
17)蛋白质是属于EC 3的酶
18)蛋白质是属于EC 3.1的酶
19)蛋白质是属于EC 3.1.1的酶
20)蛋白质是属于EC 3.1.1.3的酶
21)蛋白质是属于EC 3.1.1.5的酶
22)蛋白质是属于EC 3.1.1.11的酶
23)蛋白质是属于EC 3.1.1.32的酶
24)蛋白质是属于EC 3.1.4的酶
25)蛋白质是属于EC 3.1.4.3的酶
26)蛋白质是属于EC 3.1.4.11的酶
27)蛋白质是属于EC 3.2的酶
28)蛋白质是属于EC 3.2.1的酶
29)蛋白质是属于EC 3.2.1.1的酶
30)蛋白质是属于EC 3.2.1.3的酶
31)蛋白质是属于EC 3.2.1.4的酶
32)蛋白质是属于EC 3.2.1.5的酶
33)蛋白质是属于EC 3.2.1.6的酶
34)蛋白质是属于EC 3.2.1.7的酶
35)蛋白质是属于EC 3.2.1.8的酶
36)蛋白质是属于EC 3.2.1.11的酶
37)蛋白质是属于EC 3.2.1.14的酶
38)蛋白质是属于EC 3.2.1.15的酶
39)蛋白质是属于EC 3.2.1.17的酶
40)蛋白质是属于EC 3.2.1.21的酶
41)蛋白质是属于EC 3.2.1.37的酶
42)蛋白质是属于EC 3.2.1.39的酶
43)蛋白质是属于EC 3.2.1.41的酶
44)蛋白质是属于EC 3.2.1.55的酶
45)蛋白质是属于EC 3.2.1.58的酶
46)蛋白质是属于EC 3.2.1.59的酶
47)蛋白质是属于EC 3.2.1.73的酶
48)蛋白质是属于EC 3.2.1.75的酶
49)蛋白质是属于EC 3.2.1.78的酶
50)蛋白质是属于EC 3.2.1.91的酶
51)蛋白质是属于EC 3.2.1.101的酶
52)蛋白质是属于EC 3.2.1.109的酶
53)蛋白质是属于EC 3.2.1.132的酶
54)蛋白质是属于EC 3.2.1.133的酶
55)蛋白质是属于EC 3.2.1.176的酶
56)蛋白质是属于EC 3.4的酶
57)蛋白质是属于EC 3.4.11的酶
58)蛋白质是属于EC 3.4.11.1的酶
59)蛋白质是属于EC 3.4.21的酶
60)蛋白质是属于EC 3.4.21.19的酶
61)蛋白质是属于EC 3.4.21.62的酶
62)蛋白质是属于EC 3.4.24的酶
63)蛋白质是属于EC 3.4.24.28的酶
64)蛋白质是属于EC 3.5的酶
65)蛋白质是属于EC 3.5.1的酶
66)蛋白质是属于EC 3.5.1.1的酶
67)蛋白质是属于EC 4的酶
68)蛋白质是属于EC 4.2的酶
69)蛋白质是属于EC 4.2.2的酶
70)蛋白质是属于EC 4.2.2.2的酶
71)蛋白质包含与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的一种或多种多肽
72)蛋白质包含由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的一种或多种多肽
73)蛋白质包含通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的一种或多种多肽
74)蛋白质包含通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的一种或多种多肽
75)蛋白质包含衍生自71)至74)中任一项的一种或多种多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸
76)蛋白质包含71)至75)中任一项的片段
77)蛋白质是SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽的酶活性片段/突变体/变体
78)制剂包含本披露的2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种蛋白质或其酶活性片段/突变/变体
79)制剂包含一种或多种粘合剂
80)制剂包含一种或多种有害生物引诱剂
81)制剂包含一种或多种有害生物摄食刺激剂
82)制剂包含一种或多种化学杀有害生物剂
83)制剂包含一种或多种化学杀螨剂
84)制剂包含一种或多种化学杀菌剂
85)制剂包含一种或多种化学杀真菌剂
86)制剂包含一种或多种化学杀腹足类动物剂
87)制剂包含一种或多种化学除草剂
88)制剂包含一种或多种化学杀昆虫剂
89)制剂包含一种或多种化学杀线虫剂
90)制剂包含一种或多种化学杀卵菌剂
91)制剂包含一种或多种化学杀原生动物剂
92)制剂包含一种或多种生物杀有害生物剂
93)制剂包含一种或多种生物杀螨剂
94)制剂包含一种或多种生物杀菌剂
95)制剂包含一种或多种生物杀真菌剂
96)制剂包含一种或多种生物杀腹足类动物剂
97)制剂包含一种或多种生物除草剂
98)制剂包含一种或多种生物杀昆虫剂
99)制剂包含一种或多种生物杀线虫剂
100)制剂包含一种或多种生物杀卵菌剂
101)制剂包含一种或多种生物杀原生动物剂
102)制剂包含一种或多种分散剂
103)制剂包含一种或多种多元醇
104)制剂包含甘油
105)制剂包含山梨醇
106)制剂包含一种或多种pH控制组分
107)制剂包含乙酸盐缓冲剂
108)制剂包含乙酸钠缓冲剂
109)制剂包含碳酸盐缓冲剂
110)制剂包含碳酸钠缓冲剂
111)制剂包含柠檬酸盐缓冲剂
112)制剂包含柠檬酸钠缓冲剂
113)制剂包含磷酸盐缓冲剂
114)制剂包含磷酸钾缓冲剂
115)制剂具有约3至约7的pH
116)制剂具有约3至约6的pH
117)制剂具有约3至约5的pH
118)制剂具有约4至约5的pH
119)制剂具有小于5的pH
120)制剂具有大于5的pH
121)制剂具有约5至约6的pH
122)制剂具有约5至约7.5的pH
123)制剂具有小于6的pH
124)制剂具有大于6的pH
125)制剂具有约6至约7的pH
126)制剂具有小于6.5的pH
127)制剂具有大于6.5的pH
128)制剂具有小于7的pH
129)制剂具有大于7的pH
130)制剂具有约6至约7.5的pH
131)制剂具有大于7.5的pH
132)制剂具有约7.5至约10的pH
133)制剂具有约8至约10的pH
134)制剂具有约8.5至约9.5的pH
135)制剂包含一种或多种耐雨剂
136)制剂包含一种或多种有机改性的硅氧烷
137)制剂包含一种或多种有机改性的三硅氧烷
138)制剂包含一种或多种聚醚三硅氧烷
139)制剂包含一种或多种有机改性的聚硅氧烷
140)制剂包含一种或多种聚醚聚硅氧烷
141)制剂包含一种或多种防腐剂
142)制剂包含苯甲酸钾
143)制剂包含山梨酸钾
144)制剂包含苯甲酸钠
145)制剂包含山梨酸钠
146)制剂包含一种或多种收获后处理剂
147)制剂包含一种或多种精油
148)制剂包含一种或多种乙烯生物合成抑制剂
149)制剂包含一种或多种环丙烯
150)制剂包含一种或多种蜡
151)蛋白质或制剂以杀有害生物有效量施用
152)蛋白质或制剂以杀螨有效量施用
153)蛋白质或制剂以杀菌有效量施用
154)蛋白质或制剂以杀真菌有效量施用
155)蛋白质或制剂以腹足类动物有效量施用
156)蛋白质或制剂以除草有效量施用
157)蛋白质或制剂以杀昆虫有效量施用
158)蛋白质或制剂以杀线虫有效量施用
159)蛋白质或制剂以杀卵菌有效量施用
160)蛋白质或制剂以杀原生动物有效量施用
161)蛋白质或制剂以杀有害生物无效量(例如,作为佐剂)施用
162)蛋白质或制剂以杀螨无效量(例如,作为佐剂)施用
163)蛋白质或制剂以杀菌无效量(例如,作为佐剂)施用
164)蛋白质或制剂以杀真菌无效量(例如,作为佐剂)施用
165)蛋白质或制剂以杀腹足类动物无效量(例如,作为佐剂)施用
166)蛋白质或制剂以除草无效量(例如,作为佐剂)施用
167)蛋白质或制剂以杀昆虫无效量(例如,作为佐剂)施用
168)蛋白质或制剂以杀线虫无效量(例如,作为佐剂)施用
169)蛋白质或制剂以杀卵菌无效量(例如,作为佐剂)施用
170)蛋白质或制剂以杀原生动物无效量(例如,作为佐剂)施用
171)蛋白质或制剂与一种或多种粘合剂组合(例如,以桶混物)使用
172)蛋白质或制剂与一种或多种有害生物引诱剂组合(例如,以桶混物)使用
173)蛋白质或制剂与一种或多种有害生物摄食刺激剂组合(例如,以桶混物)使用
174)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀有害生物剂组合(例如,以桶混物)使用
175)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀螨剂组合(例如,以桶混物)使用
176)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀菌剂组合(例如,以桶混物)使用
177)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀真菌剂组合(例如,以桶混物)使用
178)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀腹足类动物剂组合(例如,以桶混物)使用
179)蛋白质或制剂与一种或多种化学除草剂组合(例如,以桶混物)使用
180)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀昆虫剂组合(例如,以桶混物)使用
181)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀线虫剂组合(例如,以桶混物)使用
182)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀卵菌剂组合(例如,以桶混物)使用
183)蛋白质或制剂与一种或多种化学杀原生动物剂组合(例如,以桶混物)使用
184)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀有害生物剂组合(例如,以桶混物)使用
185)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀螨剂组合(例如,以桶混物)使用
186)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀菌剂组合(例如,以桶混物)使用
187)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀真菌剂组合(例如,以桶混物)使用
188)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀腹足类动物剂组合(例如,以桶混物)使用
189)蛋白质或制剂与一种或多种微生物除草剂组合(例如,以桶混物)使用
190)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀昆虫剂组合(例如,以桶混物)使用
191)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀线虫剂组合(例如,以桶混物)使用
192)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀卵菌剂组合(例如,以桶混物)使用
193)蛋白质或制剂与一种或多种微生物杀原生动物剂组合(例如,以桶混物)使用
194)蛋白质或制剂与一种或多种固氮生物组合(例如,以桶混物)使用
195)蛋白质或制剂与一种或多种磷酸盐增溶性微生物组合(例如,以桶混物)使用
196)蛋白质或制剂与一种或多种植物生长调节剂组合(例如,以桶混物)使用
197)蛋白质或制剂与一种或多种耐雨剂组合(例如,以桶混物)使用
198)蛋白质或制剂与一种或多种有机改性的硅氧烷组合(例如,以桶混物)使用
199)蛋白质或制剂与一种或多种有机改性的三硅氧烷组合(例如,以桶混物)使用
200)蛋白质或制剂与一种或多种聚醚三硅氧烷组合(例如,以桶混物)使用
201)蛋白质或制剂与一种或多种有机改性的聚硅氧烷组合(例如,以桶混物)使用
202)蛋白质或制剂与一种或多种聚醚聚硅氧烷组合(例如,以桶混物)使用
203)蛋白质或制剂与一种或多种防腐剂组合(例如,以桶混物)使用
204)蛋白质或制剂与一种或多种收获前处理剂组合(例如,以桶混物)使用
205)蛋白质或制剂与一种或多种收获后处理剂组合(例如,以桶混物)使用
206)蛋白质或制剂与一种或多种精油组合(例如,以桶混物)使用
207)蛋白质或制剂与一种或多种乙烯生物合成抑制剂组合(例如,以桶混物)使用
208)蛋白质或制剂与一种或多种环丙烯组合(例如,以桶混物)使用
209)蛋白质或制剂与一种或多种蜡组合(例如,以桶混物)使用。
转基因微生物、植物或植物部分,它们:
1)包含编码与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多肽的一种或多种多核苷酸
2)包含由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的一种或多种多核苷酸
3)表达与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的一种或多种多肽
4)包含编码通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的多肽的一种或多种多核苷酸
5)表达通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的一种或多种多肽
6)包含编码通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的多肽的一种或多种多核苷酸
7)表达通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的一种或多种多肽
8)包含编码衍生自以上71)至74)中任一项的多肽的一种或多种多核苷酸,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸
9)表达衍生自以上71)至74)中任一项的一种或多种多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸
10)包含编码以上71)至77)中任一项的酶活性片段的一种或多种多核苷酸
11)表达以上71)至77)中任一项的酶活性片段。
耐雨剂用于以下中的任一项、两项、三项、四项、五项、六项、七项、八项、九项、十项或更多项的用途:
1)改善蛋白质在容易被园艺有害生物侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
2)改善蛋白质在容易被螨虫侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
3)改善蛋白质在容易被细菌侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
4)改善蛋白质在容易被真菌侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
5)改善蛋白质在容易被腹足类动物侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
6)改善蛋白质在容易被昆虫侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
7)改善蛋白质在容易被线虫侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
8)改善蛋白质在容易被卵菌侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
9)改善蛋白质在容易被原生动物侵染/感染的表面/物质上的粘附/铺展/耐雨性
10)改善蛋白质在容器诸如种子容器、种植盆、水培生长系统、实验生长室、温室、收获后储存容器、收获后处理室或收获后运输容器上的粘附/铺展/耐雨性
11)改善蛋白质在植物或植物部分上的粘附/铺展/耐雨性
12)改善蛋白质在收获的植物或植物部分上的粘附/铺展/耐雨性
13)改善本披露的蛋白质或制剂的杀有害生物功效
14)改善本披露的蛋白质或制剂的杀螨功效
15)改善本披露的蛋白质或制剂的杀菌功效
16)改善本披露的蛋白质或制剂的杀真菌功效
17)改善本披露的蛋白质或制剂的杀腹足类动物功效
18)改善本披露的蛋白质或制剂的除草功效
19)改善本披露的蛋白质或制剂的杀昆虫功效
20)改善本披露的蛋白质或制剂的杀线虫功效
21)改善本披露的蛋白质或制剂的杀卵菌效力
22)改善本披露的蛋白质或制剂的杀原生动物功效。
前述用途中的任一项,其中以下中的任一项、两项、三项、四项、五项、六项、七项、八项、九项、十项或更多项为真:
1)耐雨剂包含一种或多种有机改性的硅氧烷
2)耐雨剂包含一种或多种有机改性的三硅氧烷
3)耐雨剂包含一种或多种聚醚三硅氧烷
4)耐雨剂包含一种或多种三硅氧烷乙氧基化物
5)耐雨剂包含一种或多种三硅氧烷聚乙氧基化物
6)耐雨剂包含一种或多种有机改性的聚硅氧烷
7)耐雨剂包含一种或多种聚醚聚硅氧烷
8)耐雨剂包含一种或多种聚硅氧烷乙氧基化物
9)耐雨剂包含一种或多种聚硅氧烷聚乙氧基化物
10)耐雨剂包含一种或多种有机改性的硅氧烷,这些有机改性的硅氧烷选自由通式I描述的三硅氧烷和聚硅氧烷组成的组:
R1 3SiO[R1 2SiO]A[R1R2SiO]BSiR1 3
其中
A为0-200,优选地A为0-1,更优选地A为0;
B为0-200,优选地B为0.5-2;更优选地B为1;
A+B>0;
R1表示彼此相同或不同的1-10个碳的烃取代基或氢,优选地甲基、乙基、丙基和/或苯基取代基,更优选地甲基取代基;以及
R2表示彼此相同或不同的通式II的聚醚取代基:
-R3O[CH2CH2O]C[CH2CH(CH3)O]D[CHR4CHR4O]ER5
其中
R3表示彼此相同或不同的任选地被氧原子中断的1-8个碳的烃部分,优选地2-4个碳的线性烃,更优选地-CH2-CH2-CH2-;
R4表示彼此相同或不同的1-12个碳的烃取代基或氢,优选地甲基、乙基、苯基和/或氢取代基;
R5表示彼此相同或不同的任选地含有氨基甲酸乙酯、羰基或羧酸官能团的1-16个碳的烃取代基或氢;优选地甲基或氢;更优选地氢;
C为0-60,优选地C为1-15;
D为0-60,优选地D为0-10;
E为0-20,优选地E为0-10,更优选地E为0;以及
C+D+E>0
11)耐雨剂包含2-甲基-环氧乙烷与环氧乙烷、单[3-[1,3,3,3-四甲基-1-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-1-二硅氧烷基]丙基]醚的聚合物
12)耐雨剂包含3-(2-甲氧基乙氧基)丙基-甲基-双(三甲基甲硅烷氧基)硅烷
13)耐雨剂包含聚环氧烷硅烷和异十三烷醇乙氧基化物
14)耐雨剂包含3-(聚氧乙烯)丙基七甲基三硅氧烷
15)耐雨剂包含硅氧烷聚环氧烷和脂肪醇(C10-12)乙氧基化物丙氧基化物
16)耐雨剂包含2-甲基-环氧乙烷与环氧乙烷、单[3-[1,3,3,3-四甲基-1-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-1-二硅氧烷基]丙基]醚的聚合物。
实例
提供以下实施以说明某些实施例,而不应被解释为限制本披露中所描述的发明构思。
实例1-3:有机改性的硅氧烷改善植物表面上的酶耐雨性
测试的商业佐剂:
S 301:2-甲基-环氧乙烷与环氧乙烷、单[3-[1,3,3,3-四甲基-1-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-1-二硅氧烷基]丙基]醚的聚合物(德国埃森的赢创运营有限公司)
L-77:3-(2-甲氧基乙氧基)丙基-甲基-双(三甲基甲硅烷氧基)硅烷(美国纽约州沃特福德的迈图公司)
HS-312:聚环氧烷硅烷和异十三烷醇乙氧基化物(美国纽约州沃特福德的迈图公司)
408:3-(聚氧乙烯)丙基七甲基三硅氧烷(美国纽约州沃特福德的迈图公司)
STIK 2:硅氧烷聚环氧烷和脂肪醇(C10-12)乙氧基化物丙氧基化物(美国纽约州沃特福德的迈图公司)
719:2-甲基-环氧乙烷与环氧乙烷、单[3-[1,3,3,3-四甲基-1-[(三甲基甲硅烷基)氧基]-1-二硅氧烷基]丙基]醚的聚合物(美国纽约州沃特福德的迈图公司)
L-1010:聚氧乙烯(10)聚氧丙烯(10)脱水山梨糖醇单月桂酸酯(英国东约克郡的克罗达国际公司(Croda International Plc,East Yorkshire,UnitedKingdom))
24:聚氧乙烯(16)脱水山梨糖醇单月桂酸酯(英国东约克郡的克罗达国际公司)
ADSEETM 900:脂肪醇乙氧基化物(C10)(瑞典斯泰农松德的诺力昂表面化学有限公司(Nouryon Surface Chemistry AB,Stenungsund,Sweden))
ADSEETM 973:醇乙氧基化物共混物(瑞典斯泰农松德的诺力昂表面化学有限公司)
ROIL:酯化油和表面活性剂的共混物(德国勒沃库森的利华高化工有限公司(LEVACO Chemicals Gmbh,Leverkusen,Germany))
ADSEETMST4:麦芽糖糊精/乙烯基吡咯烷酮聚合物(瑞典斯泰农松德的诺力昂表面化学有限公司)
995:醇乙氧基化物丙氧基化物(C16-18)(瑞典斯泰农松德的诺力昂表面化学有限公司)
C/15:椰油烷基胺乙氧基化物(瑞典斯泰农松德的诺力昂表面化学有限公司)
耐雨性测定:
在24孔板中进行耐雨性测定。用加热的1%琼脂溶液填充孔,该溶液在冷却至室温后固化。制备优选植物的12mm叶片圆片并将其添加到琼脂顶部(琼脂支撑叶片使其不那么快变干)。
在制备桶混物制剂后,将每个样品的25μL液滴置于叶片圆片中间。观察液滴的铺展行为,以避免包括液滴铺展得太远以至于材料从叶片上损失的样品结果。添加所有样品后,让孔板在通风橱中干燥24小时。
当干燥时,用1mL自来水洗涤每个圆片。将水分配到叶片上总共3次。之后,通过使用以下等式分析样品的酶活性以确定叶片上的残留量:
%处理保留=1-(洗涤溶液中酶的活性单位/添加到叶片上的喷雾溶液的活性单位)
添加到喷雾溶液中的蛋白质的量以感兴趣的蛋白质的重量百分比(%w/w)给出,就酶而言,使用比色测定法测定该重量百分比。
实例1
在有和没有三硅氧烷佐剂S 301的情况下评价三种酶(从雪腐微座孢(Microdochium nivale)获得的纤维二糖氧化酶(NZ蛋白#6;SEQ ID NO:6)、从黑曲霉获得的过氧化氢酶(NZ蛋白#10;SEQ ID NO:10)和从拟诺卡氏菌属物种获得的丝氨酸蛋白酶(NZ蛋白#42;SEQ ID NO:42))的保留。将喷雾溶液施用于番茄和葡萄叶片圆片的顶部。表2示出了在模拟的降雨事件后叶片上酶的保留。
表2.蛋白质在模拟的降雨事件后在番茄和葡萄叶片上的保留。
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表2中的结果示出了当用三硅氧烷(S301)配制喷雾桶溶液时耐雨性的明显差异。此外,结果表明耐雨性有显著改善,与酶类别和叶片类型无关。
实例2
在存在各种可商购获得的有机改性的硅氧烷的情况下评价从拟诺卡氏菌属物种获得的丝氨酸蛋白酶(NZ蛋白#42;SEQ ID NO:42)在番茄叶片圆片上的保留。
表3示出了利用所测试的有机改性的硅氧烷进行的耐雨性测定中蛋白酶的保留。三硅氧烷(L-77、/>408、/>719和/>S 301)和聚硅氧烷(/>HS-312和/>STIK 2)都显著改善了蛋白酶的耐雨性。
表3.在存在不同的有机改性的硅氧烷的情况下从拟诺卡氏菌属物种获得的丝氨酸蛋白酶(NZ蛋白#42;SEQ ID NO:42)在番茄叶片圆片上的保留。
实例3
当将酶与一系列可商购获得的佐剂组合时,确定24孔板中模拟的降雨事件后从拟诺卡氏菌属物种获得的丝氨酸蛋白酶(NZ蛋白#42;SEQ ID NO:42)在番茄叶片圆片上的保留。
表4.模拟降雨后常见类型的佐剂对酶保留的影响
实验数据表明,在有机改性的硅氧烷中观察到酶具有独特的耐雨性改善,这是用农业应用中常用的其他佐剂无法观察到的。
实例4-5:碱性pH改善丝氨酸蛋白酶的杀真菌功效
实例4
在基于平板的测定中在碱性pH下测试从拟诺卡氏菌属物种获得的丝氨酸蛋白酶(NZ蛋白#42;SEQ ID NO:42)对番茄晚疫病和黄瓜霜霉病的功效。
对于番茄晚疫病平板测定,将24孔板用2mL补充有0.5%山梨醇的1.2%琼脂铺板。每个孔具有用#6软木钻从番茄植株(栽培种Moneymaker)上切割的1.125cm叶片圆片。将叶片圆片正面向上(顶面朝上)放置。向每个叶片圆片中添加15μL我们的处理剂,每种处理剂总共8个孔/重复。让叶片圆片在层流罩中干燥2.25小时。将每个叶片圆片击伤,然后将10μL浓度为5E4个孢子囊/mL的孢子悬浮液接种到伤口上。将每个板用石蜡膜密封并在18℃和18:6光:暗循环下保持5天,然后进行评分(0=无感染,1=感染)。
对于黄瓜霜霉病平板测定,将48孔板用700μL 1%琼脂铺板。每个孔含有0.875cm的黄瓜叶片圆片(栽培种Iznik),底面朝上。我们向每个孔中添加15μL我们的处理剂,总共16个孔/处理剂。将圆片在层流罩中干燥1-2小时。通过用浸入无菌水中的10μL环刮擦被感染且形成孢子的黄瓜叶片来制备病原体,然后经由血细胞计数器对孢子囊进行定量,并最终将其调节为5E4个孢子囊/mL的浓度。将每个叶片圆片击伤,然后将10μL 5E4个孢子囊/mL溶液吸移到伤口上。将板在18℃和18:6光:暗循环下保持5天,然后进行评分(0=无感染,1=感染)。
表5.pH对从拟诺卡氏菌属物种获得的丝氨酸蛋白酶(NZ蛋白#42;SEQ ID NO:42)对番茄晚疫病和黄瓜霜霉病的有效性的影响
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实例5
在温室试验中在碱性pH下测试从拟诺卡氏菌属物种获得的丝氨酸蛋白酶(NZ蛋白#42;SEQ ID NO:42)对番茄晚疫病的功效。
对于温室测定,将30天的番茄(栽培种Sungold)用处理剂以30-40加仑/英亩的速率进行处理,并使其风干24小时,然后用致病疫霉的孢子囊悬浮液(无菌ddH2O中1E4个孢子囊/mL)对它们进行喷洒。
在用孢子囊(每株植物大约10mL)喷洒后,将植物置于18℃、带加湿器的黑暗环境中48小时。然后取出植物并保持在18℃、16:8光:暗循环下。5天后,评估植物的病害严重性(整个植物的病害组织的百分比)。
在未处理的对照上测得的病害严重性为32.5%。
表6.pH对从拟诺卡氏菌属物种获得的丝氨酸蛋白酶(NZ蛋白#42;SEQ ID NO:42)对番茄晚疫病的有效性的影响
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实例6-9:有机改性的三硅氧烷改善喷洒在植物表面上的酶的保留和它们对小麦 叶枯菌(Zymoseptoria tritici)的有效性
原理
首先用酶喷洒生长在1L盆中的STB易感型冬小麦品种(变种Hereford),并在24小时后用小麦叶枯菌的孢子悬浮液喷洒。在接种后14天评估受侵袭的叶面积百分比,并每隔3天再次评估,直到发现全部效果。对于评分,使用标准EPPO量表(EPPO standards:Guidelines on good plant protection practice[EPPO标准:良好植物保护实践指南].Wheat[小麦].第2/10(1)页)。实验由丹麦弗莱克比约的奥胡斯大学(Aarhus University,Flakkebjerg,Denmark)进行。
材料
冬小麦(变种Hereford)、小麦叶枯菌孢子悬浮液(参见下文的接种物A和接种物B)、K2HPO4、KH2PO4、乙酸钠、乙酸、甘油、20(聚氧乙烯山梨醇酯,西格玛奥德里奇公司(Sigma-Aldrich))、/>S301(聚醚三硅氧烷,赢创工业股份公司(Evonik Industries AG))和SILWETTM L77(聚环氧烷改性的七甲基三硅氧烷,迈图高新材料公司(Momentive Performance Materials Inc.))。酶在实例中描述。
缓冲剂
如表7所示使用软化水制备1M磷酸钾储备溶液(pH 6、7或8)。
表7
如果需要,使用盐酸或氢氧化钠溶液将pH调节至目标值。
通过将5.7g乙酸钠和1.8g冰醋酸与水(总体积100mL)(pH 5缓冲剂)混合来制备1M乙酸盐pH 5储备溶液。
接种物(小麦叶枯菌孢子悬浮液)
接种物A
使小麦叶枯菌的五个分离株(在2020年从丹麦田间自然感染的植物中收集并且被认为代表当年丹麦的天然壳针孢属群落)在PDA(马铃薯葡萄糖琼脂,可得自例如从西格玛-奥德里奇公司)上生长,并收获相应的孢子并将其混合到独特悬浮液中,浓度近似于2×106个孢子/ml。在使用前新鲜制备接种物,并且该接种物含有0.1%20,以确保在叶片上良好铺展。
接种物B
使小麦叶枯菌的五个分离株(在2021年从丹麦田间自然感染的植物中收集并且被认为代表当年丹麦的天然壳针孢属群落)在PDA(马铃薯葡萄糖琼脂,可得自例如从西格玛-奥德里奇公司)上生长,并收获相应的孢子并将其混合到独特悬浮液中,浓度近似于2×106个孢子/ml。在使用前新鲜制备接种物,并且该接种物含有0.1%20,以确保在叶片上良好铺展。
程序
1)将小麦粒播种在1L盆中并使其在温室条件下萌发和生长大约2周,直到达到两叶作物生长阶段(BBCH12)。
2)通过如下过程制备待测试的每种酶的桶混物:将缓冲剂储备溶液稀释100倍(桶混物中的所得浓度为10mM),并添加酶使其达到实例中所指示的浓度,并添加表面活性剂使其达到0.1%(w/v)的最终浓度。实例中给出了缓冲剂pH、表面活性剂的类型和酶的类型。在一些实验中,不添加缓冲剂。
3)通过使用舱式喷洒器(容积-600mL;150L/ha,3.6km/小时,黄色喷嘴0.2)喷洒桶混物溶液来处理植物。在施用发生前数小时制备桶混物溶液。缓冲剂的pH取决于所使用的酶。
4)对于壳针孢属接种物,使小麦叶枯菌的5个分离株(在2020年从丹麦田间自然感染的植物中收集)在PDA上生长,并收集相应的孢子并将其混合到溶液中。壳针孢属接种物的浓度近似于2×106个孢子/mL,并含有0.1%20,以确保孢子在叶片上很好地铺展。使用前新鲜制备接种物。
5)施用酶24小时后,用壳针孢属接种物(每盆2mL)喷洒植物。接种后,将植物保持在高相对湿度下,用黑色塑料覆盖3天,并用透明塑料再覆盖9天,以确保病原体的感染和进一步发展。
6)对每种条件进行6次重复。作为对照,用由0.1%SILWETTML-77(不添加酶)制备的桶混物喷洒植物。
7)在接种后14天确定被STB侵袭的叶面积百分比,并每隔3天再次评估,直到发现全部效果。对于评分,使用标准EPPO量表(EPPO standards:Guidelines on good plantprotection practice[EPPO标准:良好植物保护实践指南].Wheat[小麦].第2/10(1)页)。
实例6
如上所述使用接种物A测试酶对感染了小麦叶枯菌的冬小麦的功效。所测试的酶、所使用的缓冲剂和表面活性剂以及所获得的结果描述于表8中。结果表示为病害压力为18.7%时相对于未处理对照(UTC)的病害控制百分比。控制%越高,结果越好。100%意指在处理中没有检测到病害,而0%意指病害处于与未处理对照(UTC)相同的水平。与具有20的桶混物相比,具有pH缓冲剂和SILWETTML-77的桶混物改善了NZ蛋白号1和10,1(p=0.153)、42(p=0.004)、21(p=0.014)和22的性能。
表8.有机改性的三硅氧烷对喷洒在小麦上的酶的功效的影响
**每100mL桶混物包含0.1mL甘油
实例7
如上所述使用接种物A测试酶对感染了小麦叶枯菌的冬小麦的功效。所测试的酶、所使用的缓冲剂和表面活性剂以及所获得的结果描述于表9中。结果表示为病害压力为15.7%时相对于未处理对照(UTC)的病害控制百分比。控制%越高,结果越好。100%意指在处理中没有检测到病害,而0%意指病害处于与未处理对照(UTC)相同的水平。与具有20的桶混物相比,具有pH缓冲剂和SILWETTML-77的桶混物显著改善了果胶酶混合物(p=0.069)的性能。
表9.有机改性的三硅氧烷对喷洒在小麦上的酶的功效的影响
实例8
如上所述使用接种物B测试酶对感染了小麦叶枯菌的冬小麦的功效。所测试的酶、所使用的缓冲剂和表面活性剂以及所获得的结果描述于表10中。结果表示为在两个时间点相对于未处理对照(UTC)的病害控制百分比:T1-病害压力为19.2%;T2-病害压力为29.2%。控制%越高,结果越好。100%意指在处理中没有检测到病害,而0%意指病害处于与未处理对照(UTC)相同的水平。与具有pH缓冲剂和S 301的桶混物相比,具有pH缓冲剂和SILWETTML-77的桶混物改善了NZ蛋白42的性能。与具有pH缓冲剂和SILWETTML-77的桶混物相比,具有pH缓冲剂和/>S 301的桶混物改善了NZ蛋白10的性能。与具有pH缓冲剂和/>S 301或单独的/>20的桶混物相比,具有pH缓冲剂和SILWETTML-77的桶混物改善了NZ蛋白1的性能。与具有单独的20的桶混物相比,具有pH缓冲剂和/>S 301的桶混物还改善了NZ蛋白1的性能。
表10.有机改性的三硅氧烷对喷洒在小麦上的酶的功效的影响
**每100mL桶混物包含0.1mL甘油
***每100mL桶混物包含0.05mL甘油
实例9
如上所述使用接种物B测试酶对感染了小麦叶枯菌的冬小麦的功效。所测试的酶、所使用的缓冲剂和表面活性剂以及所获得的结果描述于表11中。结果表示为在两个时间点相对于未处理对照(UTC)的病害控制百分比:T1-病害压力为16.7%;T2-病害压力为26.7%。控制%越高,结果越好。100%意指在处理中没有检测到病害,而0%意指病害处于与未处理对照(UTC)相同的水平。与具有pH缓冲剂和S 301或单独的20的桶混物相比,具有pH缓冲剂和SILWETTML-77的桶混物改善了NZ蛋白21的性能。与具有单独的/>20的桶混物相比,具有pH缓冲剂和/>S 301的桶混物还改善了NZ蛋白21的性能。与具有pH缓冲剂和/>S 301的桶混物相比,具有pH缓冲剂和SILWETTML-77的桶混物改善了NZ蛋白22的性能。与具有/>20的桶混物相比,具有pH缓冲剂和SILWETTML-77的桶混物改善了NZ蛋白25的性能。
表11.有机改性的三硅氧烷对喷洒在小麦上的酶的功效的影响
实例10:有机改性的三硅氧烷改善喷洒在植物表面上的酶的保留和它们对致病疫 霉(Phytophthora infestans)的有效性
原理
使晚疫病易感番茄品种(Sungold)在温室中生长大约3周,然后收获叶片用于在24孔板内进行叶片圆片测定。用0.25至2.5mg/ml酶处理叶片圆片并使其完全干燥大约2小时。干燥后,将10μl致病疫霉(US 23)以每毫升1×105个孢子囊的浓度移液到叶片表面。接种后6天评估病害。实验由美国弗吉尼亚州塞勒姆的诺维信生物制剂公司(NovozymesBiologicals,Salem,VA,USA)进行。
材料
ο易感番茄植物(Sungold)
ο黑麦A培养基(每升60g黑麦颗粒、20g蔗糖、15g琼脂)
ο酶
ο致病疫霉(US 23分离株)
ο磷酸钾缓冲剂(0.05M,pH 7.88)
ο佐剂A:SILWETTM L-77(三硅氧烷乙氧基化物)
ο佐剂B:SP 133(聚甘油酯和脂肪酸酯)
ο0.5%Butterfield缓冲剂琼脂(每升5g琼脂,1L Butterfield缓冲剂),24孔板的每个孔内2ml
ο10ml喷雾器喷洒瓶
ο恒温箱(18℃),计时器上有冷荧光灯
ο14mm软木钻
ο血细胞计数器
ο相差显微镜(10倍物镜)
程序
叶片圆片测定
1.将含有2ml凝固的0.5%Butterfield缓冲剂琼脂(Butterfield缓冲剂用作典型水琼脂的替代物以平衡pH)的24孔板在通风橱中短暂干燥以除去凝结物。
2.用磷酸钾缓冲剂(0.05M,pH 7.88)进行酶稀释,以下缓冲剂中的一种的蛋白质浓度和蛋白质浓度为0.25、0.5、1.0和2.5mg/ml
3.在一些情况下,佐剂也与酶及其适当的缓冲剂一起施用。佐剂和测试浓度如下列出:
浓度为0.1%的SILWETTM L-77
浓度为0.1%的SP 133
4.在大约3周龄时从易感番茄品种(Sungold)的中间区域分离叶片。
5.使用软木钻(14mm直径)切下叶片圆片并将其放置(正面/上侧向上)到每个孔中。
6.用喷雾器喷洒瓶将酶稀释液施用于叶片表面。将两个喷洒泵应用于每个叶片圆片,它们充分覆盖叶片圆片而不汇聚。在施用期间覆盖具有不同处理剂的孔,以消除过度喷洒造成的污染。
7.使酶施用物在叶片表面上干燥大约2小时。
8.等待时,使用以下方案制备孢子溶液。
9.在酶干燥后,用10μl含有1×105个孢子囊/ml的孢子悬浮液(或10μl无菌水用于未接种的对照)接种叶片圆片的中心。
10.用石蜡膜密封板并在18℃下在16小时光/8小时暗循环下孵育。
11.在感染后5-6天捕获叶片圆片板的图像并分析病害。
孢子溶液制备
1.使致病疫霉在18℃下在黑暗条件下在黑麦A培养基上生长2-3周。
2.用大约3ml冷无菌蒸馏水淹没板,并用接种环轻轻刮擦板的表面。
3.将水从板中吸出并置于15ml锥形管中。以大约45度角,将另外2ml无菌蒸馏水每次1ml吸移到板上。将该体积转移到同一15ml锥形管中。
4.使用血细胞计数器对孢子囊进行计数。
5.将孢子悬浮液在4℃下孵育0.5-2小时以诱导游动孢子释放,然后稀释至1×105个孢子囊/ml的浓度。
实例10
如上所述测试酶对致病疫霉感染的番茄的功效。在该实例中,使用磷酸钾缓冲剂(0.05M,pH 7.88)稀释酶并在0.25、0.5、1.0和2.5mg蛋白质/ml的浓度下进行测试。在没有佐剂以及有0.1%SILWETTM L-77或0.1%SP 133的情况下测试酶。感染后6天时在叶片圆片上观察到的病害控制功效在表12中示出。每种处理完成至少两次实验重复,每次实验重复四次。病害减轻被定义为(-)无减轻、(+)轻度减轻、(++)中度减轻和(+++)重度减轻。在添加SILWETTM L-77和/>SP 133的情况下,可以观察到酶的剂量反应以及改善的病害减轻。在一些情况下,添加佐剂使得可以在较低的酶剂量下产生相当的功效结果。
表12.有机改性的三硅氧烷对喷洒在番茄叶片上的酶的功效的影响
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Claims (15)

1.有机改性的硅氧烷、任选地有机改性的三硅氧烷或有机改性的聚硅氧烷用于改善蛋白质在植物表面上的耐雨性的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于所述有机改性的硅氧烷是包含一个或多个聚醚基团的有机改性的三硅氧烷,任选地三硅氧烷乙氧基化物。
3.根据权利要求1所述的用途,其特征在于所述有机改性的硅氧烷是包含一个或多个聚醚基团的有机改性的聚硅氧烷,任选地聚硅氧烷乙氧基化物。
4.根据权利要求1所述的用途,其特征在于所述有机改性的硅氧烷选自由通式I描述的三硅氧烷和聚硅氧烷组成的组:
R1 3SiO[R1 2SiO]A[R1R2SiO]BSiR1 3
其中
A为0-200,优选地A为0-1,更优选地A为0;
B为0-200,优选地B为0.5-2;更优选地B为1;
A+B>0;
R1表示彼此相同或不同的1-10个碳的烃取代基或氢,优选地甲基、乙基、丙基和/或苯基取代基,更优选地甲基取代基;以及
R2表示彼此相同或不同的通式II的聚醚取代基:
-R3O[CH2CH2O]C[CH2CH(CH3)O]D[CHR4CHR4O]ER5
其中
R3表示彼此相同或不同的任选地被氧原子中断的1-8个碳的烃部分,优选地2-4个碳的线性烃,更优选地-CH2-CH2-CH2-;
R4表示彼此相同或不同的1-12个碳的烃取代基或氢,优选地甲基、乙基、苯基和/或氢取代基;
R5表示彼此相同或不同的任选地含有氨基甲酸乙酯、羰基或羧酸官能团的1-16个碳的烃取代基或氢;优选地甲基或氢;更优选地氢;
C为0-60,优选地C为1-15;
D为0-60,优选地D为0-10;
E为0-20,优选地E为0-10,更优选地E为0;以及
C+D+E>0。
5.根据前述权利要求中任一项所述的用途,其特征在于所述蛋白质是酶,任选地表现出脂肪酶、三酰甘油脂肪酶、果胶酯酶、磷脂酶、溶血磷脂酶、淀粉酶、葡糖苷酶、半乳糖苷酶、纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、神经酰胺酶、右旋糖酶、几丁质酶、壳聚糖酶、半乳糖醛酸酶、岩藻糖苷酶、溶菌酶、木糖苷酶、lucosidass、普鲁兰酶、甘露糖苷酶、酰胺酶、天冬酰胺酶、氨基酶、麦芽糖水解酶、纤维二糖苷酶、果胶酶、氨肽酶、丝氨酸肽酶和/或金属肽酶活性的蛋白质。
6.根据前述权利要求中任一项所述的用途,其特征在于所述蛋白质:
a)包含与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的一种或多种多肽;
b)包含由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的一种或多种多肽;
c)包含通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的一种或多种多肽;
d)包含通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的一种或多种多肽;
e)包含衍生自以上a)至d)中任一项的一种或多种多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;
f)包含以上a)至e)中任一项的片段;以及/或者
g)是SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽的酶活性片段/突变体/变体。
7.一种水性液体制剂,其特征在于该水性液体制剂包含:
a)0.0001%至40%w/w的蛋白质,优选地0.0001%至25%w/w,更优选地0.0001%至1%w/w;
b)0.001%至50%w/w的有机改性的三硅氧烷、任选地有机改性的三硅氧烷或有机改性的聚硅氧烷,优选地0.001%至10%w/w,更优选地0.025%至0.5%w/w;
c)0.001%至10%w/w的pH控制组分,优选地0.001%至5%w/w,更优选地0.01%至1%w/w。
8.根据权利要求7所述的水性液体制剂,其特征在于所述有机改性的硅氧烷是包含一个或多个聚醚基团的有机改性的三硅氧烷,任选地三硅氧烷乙氧基化物。
9.根据权利要求7所述的水性液体制剂,其特征在于所述有机改性的硅氧烷是包含一个或多个聚醚基团的有机改性的聚硅氧烷,任选地聚硅氧烷乙氧基化物。
10.根据权利要求7所述的水性液体制剂,其特征在于所述有机改性的硅氧烷选自由通式I描述的三硅氧烷和聚硅氧烷组成的组:
R1 3SiO[R1 2SiO]A[R1R2SiO]BSiR1 3
其中
A为0-200,优选地A为0-1,更优选地A为0;
B为0-200,优选地B为0.5-2;更优选地B为1;
A+B>0;
R1表示彼此相同或不同的1-10个碳的烃取代基或氢,优选地甲基、乙基、丙基和/或苯基取代基,更优选地甲基取代基;以及
R2表示彼此相同或不同的通式II的聚醚取代基:
-R3O[CH2CH2O]C[CH2CH(CH3)O]D[CHR4CHR4O]ER5
其中
R3表示彼此相同或不同的任选地被氧原子中断的1-8个碳的烃部分,优选地2-4个碳的线性烃,更优选地-CH2-CH2-CH2-;
R4表示彼此相同或不同的1-12个碳的烃取代基或氢,优选地甲基、乙基、苯基和/或氢取代基;
R5表示彼此相同或不同的任选地含有氨基甲酸乙酯、羰基或羧酸官能团的1-16个碳的烃取代基或氢;优选地甲基或氢;更优选地氢;
C为0-60,优选地C为1-15;
D为0-60,优选地D为0-10;
E为0-20,优选地E为0-10,更优选地E为0;以及
C+D+E>0。
11.根据权利要求7所述的水性液体制剂,其特征在于所述蛋白质是酶,任选地表现出脂肪酶、三酰甘油脂肪酶、果胶酯酶、磷脂酶、溶血磷脂酶、淀粉酶、葡糖苷酶、半乳糖苷酶、纤维素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、神经酰胺酶、右旋糖酶、几丁质酶、壳聚糖酶、半乳糖醛酸酶、岩藻糖苷酶、溶菌酶、木糖苷酶、lucosidass、普鲁兰酶、甘露糖苷酶、酰胺酶、天冬酰胺酶、氨基酶、麦芽糖水解酶、纤维二糖苷酶、果胶酶、氨肽酶、丝氨酸肽酶和/或金属肽酶活性的蛋白质。
12.根据权利要求7所述的水性液体制剂,其特征在于所述蛋白质:
a)包含与SEQ ID NO:1-48和98-150中的一个或多个或其成熟多肽具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的一种或多种多肽;
b)包含由与SEQ ID NO:49-97和151-203中的任一个或多个或其cDNA序列具有约/至少60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%序列同一性的多核苷酸编码的一种或多种多肽;
c)包含通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的一种或多种多肽;
d)包含通过一个或多个氨基酸的取代、缺失或插入衍生自SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个的成熟多肽的一种或多种多肽;
e)包含衍生自以上a)至d)中任一项的一种或多种多肽,其中N-和/或C-末端已通过添加一个或多个氨基酸而延伸;
f)包含以上a)至e)中任一项的片段;以及/或者
g)是SEQ ID NO:1-48和98-150中的任一个或其成熟多肽的酶活性片段/突变体/变体。
13.一种用于制备根据权利要求7至12中任一项所述的水性液体制剂的方法,其特征在于该方法包括:
a)提供包含所述有机改性的硅氧烷和所述pH控制组分的水性缓冲溶液;以及
b)将所述蛋白质引入所述水性缓冲溶液中。
14.一种用于将蛋白质沉积在植物表面上的方法,其特征在于该方法包括:
a)制备根据权利要求7至12中任一项所述的水性液体制剂;以及
b)将所述水性液体制剂喷洒到植物上,从而将所述蛋白质沉积在所述植物的表面上。
15.一种用于改善水性液体制品中的蛋白质的耐雨性的方法,其特征在于该方法包括将有机改性的硅氧烷、任选地有机改性的三硅氧烷或有机改性的聚硅氧烷、任选地聚醚三硅氧烷或聚醚聚硅氧烷引入所述水性液体制剂中,使浓度为0.001%至50%w/w、优选地0.001%至10%w/w、更优选地0.025%至0.5%w/w。
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