CN117618672A - 一种注射用琼脂糖凝胶剂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医学美容技术领域，具体涉及注射用琼脂糖凝胶剂的制备方法。本发明注射用琼脂糖凝胶剂的制备是使用包括琼脂糖、透明质酸钠衍生物凝胶液和缓冲液的原料制备得到。本发明透明质酸钠衍生物凝胶液的制备是包括使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到。由本发明得到的凝胶剂的耐酶效果优异、体内保留时间长、低毒、残留低且推挤力小。
Description
技术领域
本发明涉及医学美容技术领域，具体涉及含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂的制备方法。
背景技术
注射美容是非手术整形美容的一种，利用注射的方法将生物材料或人工合成的生物相容性好的材料注射入真皮层或皮下，通过不同的作用机理达到减少皮肤皱褶或塑形的一类整形美容的方法。
透明质酸是由葡萄糖醛酸和乙酰氨基葡糖双糖单位重复组成的一种直链高分子粘性多糖。透明质酸是人体内本身具有的内源性物质，具有良好的生物相容性；具有高粘弹性和非牛顿流变学特性；无毒、无免疫源性、无刺激性，具有很高的安全性，以及可通过注射透明质酸酶降解消除等特点，被广泛用作美容中的软组织填充剂。即将透明质酸注射至皮肤内，以增加软组织体积，可达到除皱或塑形等目的。
但是由于透明质酸本身以液体形式存在，在体内透明质酸酶和自由基的作用下非常容易被分解，透明质酸类凝胶在体内6个月左右就基本上完成降解吸收，消费者又要重新进行注射，加重了消费者的负担。因此难以达到塑性效果且填充效果持续时间短。
因此，提供一种耐酶效果优异、体内保留时间长、低毒、残留低且推挤力小的注射用琼脂糖凝胶剂是亟需解决的问题。
发明内容
本发明基于上述技术问题的解决，从而提出本发明的技术方案，本发明的技术方案包括含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂的制备方法，所述方法得到的产品，以及该产品的应用。
本发明含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂的制备是使用包括琼脂糖、透明质酸钠衍生物凝胶液和缓冲液的原料制备得到。本发明透明质酸钠衍生物凝胶液的制备是包括使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到。由本发明得到的凝胶剂的耐酶效果优异、体内保留时间长、低毒、残留低且推挤力小。
一方面地，本发明提供含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：称取原料：琼脂糖、透明质酸钠衍生物凝胶液和缓冲液；
步骤2：将缓冲液置于混合容器，然后加入琼脂糖和透明质酸钠衍生物凝胶液，加热、混合均匀，冷却，灭菌，得到所述注射用琼脂糖凝胶剂。
进一步地，所述原料按照质量份数计算，含有4-8份琼脂糖、20-40份透明质酸钠衍生物凝胶液、180-300份缓冲液。
进一步地，所述琼脂糖的用量为4质量份、4.5质量份、5质量份、5.5质量份、6质量份、6.5质量份、7质量份、7.5质量份、8质量份的任意值或任意两值之间的范围。
进一步地，所述透明质酸钠衍生物凝胶液的用量为20质量份、25质量份、25质量份、30质量份、33质量份、35质量份、38质量份、40质量份的任意值或任意两值之间的范围。
进一步地，所述缓冲液的用量为180质量份、190质量份、200质量份、210质量份、220质量份、230质量份、240质量份、250质量份、260质量份、270质量份、280质量份、290质量份、300份的任意值或任意两值之间的范围。所述的缓冲液A的pH为6.2-6.8。
进一步地，所述步骤2的加热温度为35-60℃，或35℃、37℃、39℃、40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃、52℃、54℃、56℃、58℃、60℃的任意值或任意两值之间的范围。
进一步地，所述步骤2的混合均匀为搅拌混合的方式。所述搅拌的转速为30-5000转/分、50-1500转/分、60-1000转/分、80-800转/分、100-700转/分或100-500转/分。所述搅拌的时间为0.2-10小时、0.2-9小时、0.2-8小时、0.3-7小时、0.4-6小时、0.5-5小时或0.6-4小时。
所述步骤3的冷却温度为15-30℃，或15℃、17℃、19℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃的任意值或任意两值之间的范围。
进一步地，所述透明质酸钠衍生物凝胶液的制备是包括使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到。
进一步地，所述透明质酸钠的分子量为20万-250万道尔顿，更进一步选择20万、30万、40万、50万、60万、70万、80万、90万、100万、110万、120万、130万、140万、150万、160万、170万、180万、190万、200万、210万、220万、230万、240万、250万的任意值的道尔顿分子量或任意两值之间范围的道尔顿的分子量。
进一步地，所述丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚的质量比为1：(3-5)、1：(3.2-5)、1：(3.2-4.7)、1：(3.5-4.7)、1：(3.5-4.5)或1：(3.7-4.2)。
进一步地，所述丙三醇三缩水甘油醚与透明质酸钠的质量比为1：(50-500)、1：(50-400)、1：(50-300)、1：(60-200)、1：(70-150)或1：(80-120)。
进一步地，所述透明质酸钠衍生物凝胶液的制备包括如下步骤：
步骤A：将透明质酸钠与碱溶液混合均匀；
步骤B：加入丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚，加热，进行交联反应，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；
步骤C：将中间料进行破碎、过筛，然后使用缓冲液B进行多次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入缓冲液C，再过筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液。
进一步地，所述步骤A的透明质酸钠与碱溶液的质量比为1：(5-20)、1：(5-18)、1：(6-15)、1：(6-12)或1：(6-10)。
进一步地，所述步骤A的碱液为碱的水溶液，碱为氢氧化钠、氢氧化钾中的至少一种。所述碱液的质量浓度为0.5-2.5％、0.6-2.4％、0.7-2.3％、0.8-2.2％、0.9-2.1％或1-2％。
进一步地，所述步骤A的混合均匀为搅拌混合的方式。所述搅拌的转速为30-5000转/分、50-1500转/分、60-1000转/分、80-800转/分、100-700转/分或100-500转/分。所述搅拌的时间为0.2-10小时、0.2-9小时、0.2-8小时、0.3-7小时、0.4-6小时、0.5-5小时或0.6-4小时。
进一步地，所述步骤B的加热温度为35-60℃，或35℃、37℃、39℃、40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃、52℃、54℃、56℃、58℃、60℃的任意值或任意两值之间的范围。
进一步地，所述步骤B的进行交联反应是在保持步骤A搅拌转速的情况下进行的交联反应，反应时间为0.5-20小时、3-18小时、5-16小时、6-15小时、7-14小时、8-14小时或9-13小时。
进一步地，所述步骤C的过筛为过40目、50目、60目、70目、80目、90目或100目的筛。
进一步地，所述步骤C的缓冲液B为pH为7.2-7.6。所述缓冲液B的总质量为待透析物质量的50-500倍、60-450倍、65-400倍、70-300倍、80-250倍或90-200倍。所述透析的次数为2次、3次、4次或更多次。
进一步地，所述步骤D中的缓冲液C的pH为6.7-7.2。所述缓冲液C的加入使得交联的透明质酸钠的含量为20-50mg/mL。
进一步地，所述步骤D的过筛为过30目、40目、50目、60目、70目、80目或90目。
进一步地，所述透明质酸钠衍生物凝胶液的制备包括如下步骤：
步骤A：将分子量为20万-250万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为0.5-2.5％氢氧化钠和/或氢氧化钾的水溶液按照质量比为1：(5-20)，在转速为30-5000转/分条件下搅拌0.2-10小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入质量比为1：(3-5)的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚，加热至35-60℃，进行交联反应0.5-20小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，丙三醇三缩水甘油醚与透明质酸钠的质量比为1：(50-500)；
步骤C：将中间料进行破碎、过筛，然后使用相对于过筛物质量50-500倍的pH为7.2-7.6的缓冲液进行多次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为6.7-7.2的缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为20-50mg/mL，再过筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液。
另一方面地，本发明提供由上述制备方法制备得到的含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂。
另一方面地，本发明提供一种应用，包括将所述的含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂在医疗美容中的非治疗用途。
有益效果：
本发明含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂的制备是使用包括琼脂糖、透明质酸钠衍生物凝胶液和缓冲液的原料制备得到。本发明透明质酸钠衍生物凝胶液的制备是包括使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到。由本发明得到的凝胶剂的耐酶效果优异、体内保留时间长、低毒、残留低且推挤力小。
本发明使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到的透明质酸钠衍生物凝胶液的生物相容性效果好，具有低毒性；由质量比为1:4的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚制备得到的透明质酸钠衍生物凝胶液显示出最优的生物相容性效果。
本发明使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到的透明质酸钠衍生物凝胶液的抑制透明质酸酶降解效果好，在体内具有较长的保留时间。
本发明使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚在质量比为1：(3-5)范围对透明质酸钠进行交联，得到的透明质酸钠衍生物凝胶液的体外酶稳定性更好。
本发明注射用琼脂糖凝胶剂使用方便，推挤力小，使用安全，不良反应情况率低，无致癌性，无遗传毒性，细胞毒性和皮肤致敏均不大于I级，符合国家行业标准对生物医用材料的规定。
本发明产品制备方法简单，绿色环保，效果优异，具有很好的应用前景。
具体实施方式
下文将结合具体实施方式阐述本发明，本发明的各种效果将由此更加清楚地呈现。本领域技术人员应理解，这些具体实施方式是用于说明本发明，而非限制本发明。
一、透明质酸钠衍生物凝胶液的制备
1、透明质酸钠衍生物凝胶液1：
制备步骤如下：
步骤A：将分子量约为80万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为1.2％氢氧化钠水溶液按照质量比为1：12，在转速为600转/分条件下搅拌2小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入质量比为1：4的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚(两者作为交联剂)，加热至45℃，进行交联反应9.5小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，丙三醇三缩水甘油醚与透明质酸钠的质量比为1：100，即交联剂与透明质酸钠的质量比为1:20；
步骤C：将中间料进行破碎、过70目筛，然后使用相对于过筛物质量100倍的pH为7.4的磷酸缓冲液进行平均用量的3次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为6.8的磷酸缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为30mg/mL，再过60目筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液1。
2、透明质酸钠衍生物凝胶液2：
制备步骤如下：
步骤A：将分子量约为100万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为1.5％氢氧化钠水溶液按照质量比为1：15，在转速为800转/分条件下搅拌2.2小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入质量比为1：3.2的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚，加热至40℃，进行交联反应9小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，丙三醇三缩水甘油醚与透明质酸钠的质量比为1：95；
步骤C：将中间料进行破碎、过60目筛，然后使用相对于过筛物质量200倍的pH为7.5的磷酸缓冲液进行平均用量的4次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为7.2的磷酸缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为30mg/mL，再过50目筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液2。
3、透明质酸钠衍生物凝胶液3：
制备步骤如下：
步骤A：将分子量约为80万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为1.2％氢氧化钠水溶液按照质量比为1：12，在转速为600转/分条件下搅拌2小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入丙三醇三缩水甘油醚(作为交联剂)，加热至45℃，进行交联反应9.5小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，交联剂(即丙三醇三缩水甘油醚)与透明质酸钠的质量比为1：20；
步骤C：将中间料进行破碎、过70目筛，然后使用相对于过筛物质量100倍的pH为7.4的磷酸缓冲液进行平均用量的3次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为6.8的磷酸缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为30mg/mL，再过60目筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液3。
4、透明质酸钠衍生物凝胶液4：
制备步骤如下：
步骤A：将分子量约为80万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为1.2％氢氧化钠水溶液按照质量比为1：12，在转速为600转/分条件下搅拌2小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入新戊二醇二缩水甘油醚(作为交联剂)，加热至45℃，进行交联反应9.5小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，交联剂与透明质酸钠的质量比为1：20；
步骤C：将中间料进行破碎、过70目筛，然后使用相对于过筛物质量100倍的pH为7.4的磷酸缓冲液进行平均用量的3次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为6.8的磷酸缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为30mg/mL，再过60目筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液4。
5、透明质酸钠衍生物凝胶液5：
制备步骤如下：
步骤A：将分子量约为80万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为1.2％氢氧化钠水溶液按照质量比为1：12，在转速为600转/分条件下搅拌2小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入质量比为1：1的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚(两者作为交联剂)，加热至45℃，进行交联反应9.5小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，交联剂与透明质酸钠的质量比为1:20；
步骤C：将中间料进行破碎、过70目筛，然后使用相对于过筛物质量100倍的pH为7.4的磷酸缓冲液进行平均用量的3次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为6.8的磷酸缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为30mg/mL，再过60目筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液5。
6、透明质酸钠衍生物凝胶液6：
制备步骤如下：
步骤A：将分子量约为80万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为1.2％氢氧化钠水溶液按照质量比为1：12，在转速为600转/分条件下搅拌2小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入质量比为1：2的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚(两者作为交联剂)，加热至45℃，进行交联反应9.5小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，交联剂与透明质酸钠的质量比为1:20；
步骤C：将中间料进行破碎、过70目筛，然后使用相对于过筛物质量100倍的pH为7.4的磷酸缓冲液进行平均用量的3次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为6.8的磷酸缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为30mg/mL，再过60目筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液6。
7、透明质酸钠衍生物凝胶液7：
制备步骤如下：
步骤A：将分子量约为80万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为1.2％氢氧化钠水溶液按照质量比为1：12，在转速为600转/分条件下搅拌2小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入质量比为1：6的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚(两者作为交联剂)，加热至45℃，进行交联反应9.5小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，交联剂与透明质酸钠的质量比为1:20；
步骤C：将中间料进行破碎、过70目筛，然后使用相对于过筛物质量100倍的pH为7.4的磷酸缓冲液进行平均用量的3次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为6.8的磷酸缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为30mg/mL，再过60目筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液7。
8、透明质酸钠衍生物凝胶液8：
制备步骤如下：
步骤A：将分子量约为80万道尔顿的透明质酸钠与质量浓度为1.2％氢氧化钠水溶液按照质量比为1：12，在转速为600转/分条件下搅拌2小时，混合均匀；
步骤B：保持搅拌，加入质量比为1：4的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚(两者作为交联剂)，加热至45℃，进行交联反应9.5小时，得到含有交联的透明质酸钠的凝胶的中间料；其中，交联剂与透明质酸钠的质量比为1:20；
步骤C：将中间料进行破碎、过70目筛，然后使用相对于过筛物质量100倍的pH为7.4的磷酸缓冲液进行平均用量的3次透析，去除液体，得到凝胶；
步骤D：在步骤C得到的凝胶中加入pH为6.8的磷酸缓冲液以调整交联的透明质酸钠的含量为30mg/mL，再过60目筛，得到所述透明质酸钠衍生物凝胶液8。
9、对上述透明质酸钠衍生物凝胶液1-8进行细胞毒性测试。
将上述透明质酸钠衍生物凝胶液1-8使用γ射线辐照灭菌(剂量25kGy)，然后进行细胞毒性测试。
细胞毒性测试是参照《医疗器械的生物学评价—体外细胞毒性试验》标准，检测细胞增殖率。本实验采用浸提的方法，采用L929细胞进行细胞毒性测试，利用酶联免疫测试仪测定吸光度值来计算细胞的相对增值率(RCR，％)，RCR越高，表明生物相容性越好，毒性越低。上述透明质酸钠衍生物凝胶液的细胞毒性结果见表1内容。
表1：透明质酸钠衍生物凝胶液的细胞毒性测试
由表1的测试结果可知，本发明使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到的透明质酸钠衍生物凝胶液的生物相容性效果好，具有低毒性；由质量比为1:4的丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚制备得到的透明质酸钠衍生物凝胶液显示出最优的生物相容性效果。
10、对上述透明质酸钠衍生物凝胶液1-8进行体外酶稳定性测试。
将上述透明质酸钠衍生物凝胶液1-8使用γ射线辐照灭菌(剂量25kGy)，然后进行体外酶稳定性测试。
取上述透明质酸钠衍生物凝胶液0.5g，加入活力为300U/mL透明质酸酶溶液2mL，然后再37℃下酶解解40小时；酶解后，加入PBS缓冲液至5mL；再取1mL，加入无水乙醇4mL混匀，然后再10000r/min转速下进行离心12min；取离心后的上清液2mL，用PBS缓冲液定容至5mL，作为K1液。
取上述透明质酸钠衍生物凝胶液0.5g，加入浓度为0.5mol/L硫酸溶液10mL，在沸水浴条件下水解15min，然后加水稀释至100mL，作为K2液。
分别取K1液和K2液各1mL，用改良咔唑显色法测K1液和K2液中的葡萄糖醛酸含量。
计算凝胶液的体外抗酶降解系数R，计算公式为：R＝100*(1-0.625T1/T2)，其中T1为K1液的葡萄糖醛酸含量，T2为K2液的葡萄糖醛酸含量。
其中，体外抗酶降解系数R值越高，说明其体外抗酶降解性能越好，凝胶越稳定。上述透明质酸钠衍生物凝胶液1-8进行体外酶稳定性测试结果见表2内容。
表2：透明质酸钠衍生物凝胶液的体外酶稳定性测试
由表2的测试结果可知，本发明使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到的透明质酸钠衍生物凝胶液的抑制透明质酸酶降解效果好，在体内具有较长的保留时间。由凝胶液1、5-8的比较结果可得到，使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚在质量比为1：(3-5)范围对透明质酸钠进行交联，得到的透明质酸钠衍生物凝胶液的体外酶稳定性更好，分析可能是因为不同交联剂带来的分子链的交联程度以及交联链的强度、链长从而影响交联产物的物理和化学性质，且不同交联剂掺杂进行交联，所得到的交联产物的性质更为稳定。
二、含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂的制备
注射用琼脂糖凝胶剂的制备如下：
步骤1：称取原料，质量份计：5份琼脂糖、35份透明质酸钠衍生物凝胶液、220份pH为6.7的醋酸缓冲液；
步骤2：将缓冲液置于混合容器，然后加入琼脂糖和透明质酸钠衍生物凝胶液，加热至50℃，500转/分进行搅拌1小时以混合均匀，冷却至25℃，γ射线辐照灭菌(剂量28kGy)，得到所述注射用琼脂糖凝胶剂；
其中，使用上述透明质酸钠衍生物凝胶液1-8制备得到的注射用琼脂糖凝胶剂依次命名为注射用琼脂糖凝胶剂1-8。然后进行产品的性能测试，测试结果如表3。
表3：凝胶剂性能测试
由表3测试内容可知，本发明注射用琼脂糖凝胶剂使用方便，推挤力小，使用安全，不良反应情况率低，无致癌性，无遗传毒性，细胞毒性和皮肤致敏均不大于I级，符合国家行业标准对生物医用材料的规定。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (10)
1.一种注射用琼脂糖凝胶剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤1：按质量份称取原料：4-8份琼脂糖、20-40份透明质酸钠衍生物凝胶液、180-300份缓冲液A；
步骤2：将缓冲液置于混合容器，然后加入琼脂糖和透明质酸钠衍生物凝胶液，加热、混合均匀，冷却，灭菌，得到所述注射用琼脂糖凝胶剂；
其中，所述透明质酸钠衍生物凝胶液的制备是包括使用丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚对透明质酸钠进行交联制备得到。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的缓冲液A的pH为6.2-6.8。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述丙三醇三缩水甘油醚和新戊二醇二缩水甘油醚的质量比为1：(3-5)。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述丙三醇三缩水甘油醚与透明质酸钠的质量比为1：(50-500)。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述透明质酸钠的分子量为20万-250万道尔顿。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤2的加热温度为35-60℃。
7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤3的冷却温度为15-30℃。
8.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述丙三醇三缩水甘油醚与透明质酸钠的质量比为1：(60-200)。
9.一种如权利要求1-8任意一项所述的制备方法制备得到的含有透明质酸钠衍生物注射用琼脂糖凝胶剂。
10.一种应用，其特征在于，包括将权利要求9所述的注射用琼脂糖凝胶剂在医疗美容中的非治疗用途。
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