CN117586912A - 一种食糖驹形杆菌y-1及其发酵应用 - Google Patents
一种食糖驹形杆菌y-1及其发酵应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117586912A CN117586912A CN202311526869.5A CN202311526869A CN117586912A CN 117586912 A CN117586912 A CN 117586912A CN 202311526869 A CN202311526869 A CN 202311526869A CN 117586912 A CN117586912 A CN 117586912A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bacillus
- saccharomyces
- fermentation
- tea
- kombucha
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 title claims abstract description 54
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 44
- 235000019226 kombucha tea Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 claims abstract description 31
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 23
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 claims abstract description 19
- 235000006468 Thea sinensis Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 235000020279 black tea Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 241000222178 Candida tropicalis Species 0.000 claims abstract description 11
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 241000090004 Komagataeibacter saccharivorans Species 0.000 claims abstract description 6
- 235000019985 fermented beverage Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims abstract description 5
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 claims abstract 13
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims abstract 2
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims abstract 2
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims abstract 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 17
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 17
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 14
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 10
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 9
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 7
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 7
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 7
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims description 7
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims description 6
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 5
- 101150013736 gyrB gene Proteins 0.000 claims description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 4
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 3
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 2
- 230000005070 ripening Effects 0.000 claims description 2
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 claims 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 abstract description 19
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 abstract description 19
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 13
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 6
- 235000021016 apples Nutrition 0.000 abstract description 3
- 241000894007 species Species 0.000 abstract description 3
- 241001474750 Komagataeibacter Species 0.000 abstract description 2
- 244000141359 Malus pumila Species 0.000 abstract 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 8
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 7
- 241000220225 Malus Species 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 5
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 4
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 3
- YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N Citric acid monohydrate Chemical compound O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O YASYEJJMZJALEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 235000021425 apple cider vinegar Nutrition 0.000 description 3
- 229940088447 apple cider vinegar Drugs 0.000 description 3
- 229960002303 citric acid monohydrate Drugs 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- DGLRDKLJZLEJCY-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogenphosphate dodecahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O DGLRDKLJZLEJCY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N Acetoin Chemical compound CC(O)C(C)=O ROWKJAVDOGWPAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 235000015197 apple juice Nutrition 0.000 description 2
- FUSUHKVFWTUUBE-UHFFFAOYSA-N buten-2-one Chemical compound CC(=O)C=C FUSUHKVFWTUUBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 235000019225 fermented tea Nutrition 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N methyl salicylate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1O OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 238000012807 shake-flask culturing Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 1,1-diphenyl-2-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazine;ethanol Chemical compound CCO.[O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1NN(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 OCZVHBZNPVABKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=NC=CN1 XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 description 1
- 241000589218 Acetobacteraceae Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 229920002749 Bacterial cellulose Polymers 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 1
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101001121408 Homo sapiens L-amino-acid oxidase Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102100026388 L-amino-acid oxidase Human genes 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 241001185316 Rhodospirillales Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 241001148470 aerobic bacillus Species 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019568 aromas Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000005016 bacterial cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N beta-methyl-butyric acid Natural products CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000019987 cider Nutrition 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 1
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 description 1
- MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N diphenyl-(2,4,6-trinitrophenyl)iminoazanium Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1N=[N+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 MGJZITXUQXWAKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-amino-4-(trifluoromethyl)-1,3-thiazole-5-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1SC(N)=NC=1C(F)(F)F XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 1
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl propionaldehyde Natural products CCC(=O)CO GFAZHVHNLUBROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960001047 methyl salicylate Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- CXQXSVUQTKDNFP-UHFFFAOYSA-N octamethyltrisiloxane Chemical compound C[Si](C)(C)O[Si](C)(C)O[Si](C)(C)C CXQXSVUQTKDNFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940067107 phenylethyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 238000004987 plasma desorption mass spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23B—PRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
- A23B2/00—Preservation of foods or foodstuffs, in general
- A23B2/70—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals
- A23B2/725—Preservation of foods or foodstuffs, in general by treatment with chemicals in the form of liquids or solids
- A23B2/729—Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
- A23B2/783—Microorganisms; Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23F—COFFEE; TEA; THEIR SUBSTITUTES; MANUFACTURE, PREPARATION, OR INFUSION THEREOF
- A23F3/00—Tea; Tea substitutes; Preparations thereof
- A23F3/16—Tea extraction; Tea extracts; Treating tea extract; Making instant tea
- A23F3/166—Addition of, or treatment with, enzymes or microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12J—VINEGAR; PREPARATION OR PURIFICATION THEREOF
- C12J1/00—Vinegar; Preparation or purification thereof
- C12J1/04—Vinegar; Preparation or purification thereof from alcohol
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
- C12R2001/25—Lactobacillus plantarum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
- C12R2001/72—Candida
- C12R2001/74—Candida tropicalis
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
Abstract
本发明提供了一种食糖驹形杆菌Y‑1及其发酵应用，所述驹形杆菌分类学命名为食糖驹形杆菌Komagataeibactersaccharivorans Y‑1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期是2021年05月21日，保藏编号为CGMCC No.22579。所述食糖驹形杆菌Y‑1分离自苹果自然发酵液，发酵特性好、产风味物质多，可用于包括发酵饮品、食用醋在内的产品酿造加工使用，不仅产品风味醇厚，还有较高的抗氧化性和丰富的氨基酸种类。将所述食糖驹形杆菌Y‑1，与热带假丝酵母和植物乳植物杆菌复配，发酵制得的红茶菌饮料风味醇厚优良，有令人愉悦的酸香和果香，同时有茶香。经测定证实，通过发酵红茶中的抗氧化性和氨基酸的种类有较大的提升，让人体更能吸收茶叶中的氨基酸。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，特别涉及一种食糖驹形杆菌Y-1及其发酵应用。
背景技术
驹形杆菌属主要存在于发酵食品中，如醋、椰果和果汁中。因其最高产酸量高于醋酸杆菌，在工业上常用于生产醋酸。驹形杆菌大多能产生细菌纤维素，例如木驹形杆菌和中间驹形杆菌等。
红茶菌，又名康普茶(Kombucha)、海宝或胃宝，是一种以糖茶水为原料通过菌种发酵而成的茶饮料，富含益生菌及各种活性因子的传统发酵茶饮料。微生物发酵红茶菌的生物种类众多，主要是以酵母菌、醋酸菌和和少量乳酸菌。微生物利用茶糖水中的糖和茶叶中成分生长繁殖而成的茶饮料，有发酵茶汤和浮在表面的菌膜组成，有独特的发酵风味，口感酸甜。
通过人工复配一定比例的醋酸菌、酵母菌和乳酸杆菌，形成纯化培养的红茶菌，加入到茶糖水中进行适当发酵，可以得到发酵过程可控、发酵周期短、产品质量和安全性高的纯化红茶菌饮料。经研究发现红茶菌饮料中，对其风味影响较大是醋酸菌，因此筛选获得性能好的醋酸菌有重要意义。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种食糖驹形杆菌Y-1及其发酵应用，该食糖驹形杆菌Y-1保藏编号为CGMCCNo.22579，其分离自苹果自然发酵液，发酵特性好、产风味物质多，可用于包括发酵饮品、食用醋在内的产品酿造加工使用，不仅产品风味醇厚，还有较高的抗氧化性和丰富的氨基酸种类。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
本发明的第一方面提供了一种食糖驹形杆菌，其分类学命名为食糖驹形杆菌KomagataeibactersaccharivoransY-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期是2021年05月21日，保藏编号为CGMCCNo.22579。
进一步的，食糖驹形杆菌Y-1的16SrDNA序列如SEQNO.1所示，其gyrB基因序列如SEQNO.2所示。
食糖驹形杆菌Y-1的16S r DNA基因序列为：
GGCTTAAGGTCAAACCAACTCCCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGG
CCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCA
CCTTCATGCACTCGAGTTGCAGAGTGCAATCCGAACTGAGACGGCTTTTAG
AGATCGGCTCGGTATCGCTACCTGGCTTCCCACTGTCACCGCCATTGTAGCA
CGTGTGTAGCCCAGGACATAAGGGCCATGAGGACTTGACGTCATCCCCACC
TTCCTCCGGCTTGTCACCGGCAGTTCCTCTAGAGTGCCCACCCAAACGTGA
TGGCAACTAAaGGCGAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTtaACCCAACATCTC
ACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTGCTGGAGGTCTCTTG
CGAGAAATGCCCATCTCTGGACACGGCCTCCGCATGTCAAGCCCTGGTAAG
GTTCTGCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGC
CCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAACCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGT
GTGCTTATCGCGTTAACTACGACACTGAATGACAAAGTCACCCAACATCCA
GCACACATCGTTTACAGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCC
CCACGCTTTCGCGCCTCAGCGTCAGTAATGAGCCAGGTTGCCGCCTTCGCC
ACCGGTGTTCTTCCCAATATCTACGAATTTCACCTCTACACTGGGAATTCCA
CAACCCTCTCTCACACTCTAGTCTCAACGTATCAAATGCAGCCCCCAGGTT
AAGCCCAGGAATTTCACATCTGACTGTTAAAACCGCCTACGCGCCCTTTAC
GCCCAGTCATTCCGAGCAACGCTTGCCCCETTCGTATTACCGCGGCTGCTG
GCACGAAGTTAGCCGGGGCTTCTTCTGCGGGTACCGTCATCATCGTCCCCG
CTGAAAGTGCTTTACAATCCGAAAACCTTCTTCACACACGCGGCATTGCTG
GATCAGGCTTGCGCCCATTGTCCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGA
GTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCTGATCATCCTCTCAGACCAGC
TATCGATCATCGCCTTGGTAGGCCTTTACCCCACCAACTAGCTAATCGAACG
CAGGTTCCTCCACAGGCGACTTGCGCCTTTGACCCTCAGGTGTCATGCGGT
ATTAGCTTCAGTTTCCCAAAGTTATCCCCCACCCATGGACAGATCCCTACGCGTTACTCACCCGTCCGCCACTAACCCCGAAAGG。
所述食糖驹形杆菌Y-1的gyrB基因序列为：
AGCGCAGTTTCTCGATCGAAAAACCACCATGTTCCACATCACCACGCCCGA
TGCCCGTGCCCAGCGCCGTAATCAGCGTGCCGATTTCAGCCGAACCCAGCA
TGCGGTCGAACCGCGCGCGCTCGACATTCAGGATTTTGCCCTTCAGCGGCA
GAATCGCCTGAAAACGCCGGTCACGTCCCTGCTTGGCGGTCCCACCGGCC
GAGTCACCCTCGACGATGAACAGTTCGGAGCGTGAGGGATCGCGTTCCTG
ACAGTCCGCAAGCTTGCCCGGCAGGGATGAAATATCCAGTACCCCCTTGCG
CCGGGTCAGTTCACGCGCACGACGCGCGGCTTCACGCGCGGCGGCGGCAT
CCATCACCTTCGCCACGATGTGACGGGCTTCCTTGGGATGGGTTTCAAACC
AGTGGGCGATCATGTCCGCCGCCGCGGCATGCACCACCGGCTGCACTTCGG
AGGAGACCAGCTTGTCCTTGGTCTGGGACGAGAATTTGGGGTCCGGCACC
TTGACCGACAGCACGGCGGTCAGCCCCTCGCGCATGTCCTCGCCATTCAGG
GCGTGGCTGTCCTTCTTGCTGGCATTGGCTTCGGCATAGCGGCCCACCACG
CGGGTCAGGGCCTGACGGAAACCGGCCAGATGGGAGCCGCCATCACGCTG
CGGAATGTTGTTTGTGAAGCACAGCATGGTTTCATGGAAACTGTCGTTCCA
TGTCAGGGCGAATTCGACCTTGATGCCGTTTTCCTCGTTCTGCAGGCTGCC
GGTAATGGGCGGCTCGACAATCGCGTTCTTGCCCTGATCCAGCCATTCGAC
AAAGGCGCACAGACCGCCTTCATAAAAGAAATTCTCTTCGCGCGCGGGGG
TATGCCGTTCATCGCGCAGCACGATCCGCATGCCGGAATTGAGAAAAGCCA
GTTCCCGCAGGCGCCGTTCAAGAATCGGGAATTCAAATTCCRACCTTTGCA
AAGGTCTCGGCACTGGGCTTGRACGTGACCTGCGTGCCGCGCGGCTCGGC
GCTTTCGCCCACAACACGCAGCGCCTCATCGCGTTCGCCGCCACGGAAGC
GGATCACATGTTCCTTGCCTTCACGCCAGATGCGCACTTCCATCCATTCGGACAGGGCGTTCACCACGGCGGC。
本发明的第二方面提供了一种上述食糖驹形杆菌的培养方法，将食糖驹形杆菌接种于固体培养基中28℃培养2d，所述固体培养基为：酵母浸粉10g/L，葡萄糖10g/L，琼脂20g/L，灭菌后添加3％体积比的无水乙醇。
另一方面，本发明提供含有上述食糖驹形杆菌或其菌液发酵物的组合物。
另一方面，本发明提供含有上述食糖驹形杆菌或其菌液发酵物的菌剂。
另一方面，本发明提供含有上述食糖驹形杆菌、含有所述食糖驹形杆菌的组合物或菌剂在制备发酵食品、保健品中的用途。
优选的在一些具体实施例中，所述发酵食品包括发酵饮品、食用醋。所述食用醋包括液态果醋、固态酿造食醋。
另一方面，本发明提供了所述的食糖驹形杆菌或菌剂作为食品抑菌剂、抗氧化剂的用途。
另一方面，本发明提供了一种食糖驹形杆菌益生菌组合物，所述益生菌组合物由食糖驹形杆菌、热带假丝酵母以及植物乳植物杆菌组成，三种菌活菌含量5：2：2配比混合制成菌剂；
食糖驹形杆菌为食糖驹形杆菌Y-1，保藏编号为CGMCC No.22579。
另一方面，本发明提供了一种发酵生产红茶菌饮料的方法，包括以下步骤：
(1)将红茶浓缩液按3～4倍体积比扩大比例加入煮沸后的水，再加入白砂糖，白砂糖溶解后降至室温，制备茶糖水；
(2)向步骤(1)所得茶糖水中接种上述食糖驹形杆菌，含有所述食糖驹形杆菌的组合物或菌剂，或所述益生菌组合物，培养制得发酵液；
(3)将步骤(2)得到的发酵液分离杀菌，静置后熟，即得到红茶菌饮料。
本发明相比现有技术的有益效果为：
1、本发明从苹果自然发酵液中，成功筛选到一株发酵特性好、产风味物质多的食糖驹形杆菌Y-1，保藏编号为CGMCC No.22579，保藏日期是2021年05月21日。
2、本发明所述食糖驹形杆菌Y-1可用于包括发酵饮品、食用醋在内的产品酿造加工使用，不仅产品风味醇厚，还有较高的抗氧化性和丰富的氨基酸种类。
3、食糖驹形杆菌在液体培养基发酵后其风味有很大的改变，有明显的酸酸的果香味，且食糖驹形杆菌能利用乙醇；而热带假丝酵母能产生乙醇、乙酸和乙酸乙酯；植物乳植物杆菌能产生乳酸。红茶菌一般都是由醋酸菌、酵母菌和乳酸菌组成的，主要是醋酸菌和酵母菌为主，因此在选择复配剂的时候选择了能产生乙醇的热带假丝酵母菌和能产乳酸的植物乳植物杆菌。将本发明所述食糖驹形杆菌Y-1，与热带假丝酵母和植物乳植物杆菌复配，发酵制得的红茶菌饮料风味醇厚优良，有令人愉悦的酸香和果香，同时有茶香。检测结果证实通过发酵，红茶中的抗氧化性和氨基酸的种类有较大的提升，让人体更能吸收茶叶中的氨基酸；并且与传统发酵方法不同，本发明所述发酵生产红茶菌饮料的方法周期较短，产品质量可控，提高菌种的利用率，有一定的工业应用价值。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明：
图1是本发明所述食糖驹形杆菌Y-1的菌落照片。
具体实施方式
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。应当能够理解的是，以下实施例仅用于示例性地进一步详细解释和说明本发明的内容，而不用于限制本发明。
以下实施例中，涉及到的原料来源如下：
热带假丝酵母，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏编号为CICC33173。
植物乳植物杆菌，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏编号为CICC20764。
红茶浓缩液，购自浙江茗皇天然食品开发股份有限公司。
苹果浓缩液，购自山东佳美食品工业有限公司。
以下实施例中，涉及到的性能的测试方法如下：
1、DPPH自由基清除能力测试：
溶液配制：0.1mM的DPPH乙醇溶：称取0.0021g DPPH，用无水乙醇溶解，定容至50mL，避光保存。现配现用，4℃可保存一周。
样品处理：将红茶发酵液用无菌蒸馏水稀释64倍用于检测。
样品组sample：样品溶液100μL，DPPH溶液100μL做三个平行。
空白组blank：样品溶液100μL，无水乙醇100μL，做三个平行。
对照组control：DPPH溶液100μL，水100μL，做三个平行。
96孔板，振荡30s，避光反应30min，517nm测定吸光度。
计算公式：清除率(％)＝1-(Asample-Ablank)/Acontrol*100。
2、氨基酸的测定：
按照食品安全国家标准中的食品中氨基酸的测定(GB 5009.124-2016)中规定的方法测定红茶菌液中氨基酸的含量，包括天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸共16种氨基酸。
3、挥发性风味物质测定：
采用顶空-固相微萃取-气相色谱-质谱联用的方法进行：
取样品5ml，在加入2g分析级氯化钠于20mL顶空瓶中，将样品瓶密封。
①萃取条件：50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取纤维头，孵化时间15min；孵化温度45℃；振摇速度450rpm；萃取时间40min；解吸进样时间10min；萃取头老化温度260℃。
②仪器条件：安捷伦7890-5975C：DB-WAX UI色谱柱(60mm×250mm×0.25μm)；不分流，载气为高纯氦气；进样口温度250℃，接口温度280℃；升温程序：初始温度40℃，保持3min，然后以3℃/min升至120℃，保持5min，然后以5℃/min升至200℃，保持5min，然后以20℃/min升至240℃，保持10min。
③质谱条件：EI离子源；离子源温度230℃；四极杆温度150℃；电子能量为70eV，扫描质量范围20-400amu。
④数据处理与分析：测的化合物与NIST.11library相匹配，匹配度大于85(最大值为100)的鉴定结果予以确认；将C7-C30作为混标物质，计算各化合物的保留指数(retention index，RI)，结合文献对化合物进行定性。定量采用峰面积归一化法计算所有组分的相对峰面积比。样品中各组分风味物质浓度计算公式如是：Ci＝Ai/As*Cs；其中Ci-样品中各挥发性风味物质浓度，μg/L；Cs-内标浓度，μg/L；Ai-样品中待测物质对应的色谱峰面积；As-内标的色谱峰面积。
实施例1——食糖驹形杆菌的分离、鉴定
本实施例提供了食糖驹形杆菌的分离方法，具体包括以下步骤：
(1)平板初筛：将苹果自然发酵的混合液体10g放到90mL无菌水中，摇匀震荡混合，后取1ml样品于9ml无菌水中稀释混匀，再取1ml样品于9ml无菌水中混匀，以此类推进行梯度稀释。选取三个合适的浓度进行涂布固体培养平板，选用醋酸菌分离培养基：酵母浸粉10g、葡萄糖10g、碳酸钙20g，溴甲酚紫0.015g、琼脂15g、pH 6.8±0.2，3％无水乙醇，1000ml蒸馏水。28℃培养2-3d，选取平板上产生透明圈较大的菌株，备用。
(2)摇瓶复筛：将初筛出的菌株接种到复筛固体培养基平板(葡萄糖40g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、十二水磷酸氢二钠3.38g、一水柠檬酸1.5g、pH6、琼脂15g、蒸馏水1000ml)，28℃培养48h后选出生长较好的菌株。将筛选出的菌株接种到复筛液体培养基(葡萄糖10g、蛋白胨15g、醋酸3g、酵母浸粉8g、无水乙醇5g、无水乙醇1000ml)，28℃、120rpm摇瓶培养40h。
(3)经过步骤(2)方法的多次复筛，最终得到一株风味好、耐乙醇的菌株Y-1。
如图1所示本实施例筛选得到的产酸的微生物Y-1，送至鉴定中国科学院微生物研究所进行鉴定，根据菌种的细胞形态、生理生化特征、16rRNA基因序列(如SEQ NO.1所示)、gyrB基因序列(如SEQ NO.2所示)等实验数据综合分析，参考《伯杰氏系统细菌学手册》以及International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology有关研究论文，该菌为红螺菌目(Rhodospirillales)醋杆菌科(Acetobacteraceae)驹形杆菌属(Komagataeibacter)食糖驹形杆菌(Komagataeibactersaccharivorans)。该菌为杆状，革兰氏阴性，菌落小，表面光滑，异养菌，生长利用葡萄糖，好氧菌，最适温度为25～32℃。
实施例2——利用食糖驹形杆菌发酵制备红茶菌饮料
本实施例提供了一种发酵生产红茶菌饮料的方法，包括以下步骤：
(1)斜面固体培养：
将在4℃冰箱保存的实施例1所述食糖驹形杆菌Y-1接种在固体培养基表面，置于28℃培养2-3d，得到斜面培养基的活化菌种，备用。
所述斜面培养基配方：葡萄糖40g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、十二水磷酸氢二钠3.38g、一水柠檬酸1.5g、pH6、琼脂15g、蒸馏水1000mL。
(2)摇瓶菌种扩大培养：
食糖驹形杆菌种子液：取步骤(1)得到的食糖驹形杆菌活化菌种，加入无菌水支撑菌体悬浮液，无菌水的添加量按照一支试管5mL，将菌体悬浮液接种于液体种子扩大培养基的10％，28℃、120rpm培养1-2d，得到食糖驹形杆菌种子液。
1L液体种子扩大培养基配方：酵母浸粉10g，葡萄糖10g，30mL的无水乙醇，1000ml蒸馏水，pH 6.8±0.2。
热带假丝酵母种子液：将热带假丝酵母接种至装有100mL的YPD液体培养基中，28℃、120rpm培养40h，得到热带假丝酵母种子液。
植物乳植物杆菌种子液：将植物乳植物杆菌接种至装有100mL的MRS液体培养基中，37℃、120rpm培养36h，得到植物乳植物杆菌种子液。
(2)制备茶糖水：将红茶浓缩液按3-4倍体积比扩大比例加入煮沸后的水，再加入总体积是15％-18％的白砂糖，溶解后降至室温，制备茶糖水。
(3)红茶菌发酵：将食糖驹形杆菌、热带假丝酵母、植物乳植物杆菌按照接种量为5％、2％、2％的比例接种到茶糖水中，28℃静置发酵5d。
(4)过滤后熟：取发酵5d的红茶菌液，经过滤后杀菌。杀菌后的红茶菌发酵液避光冷藏后熟5d，即得到红茶菌饮料。
对比例1——未发酵红茶液的制备
本对比例提供了一种未发酵红茶液的制备方法，包括以下步骤：
将红茶浓缩液按3-4倍体积比扩大比例加入煮沸后的水，再加入总体积是15％-18％的白砂糖，溶解后降至室温，即制备得到未发酵红茶液。
测试例
本测试例对实施例2发酵完成获得的红茶菌饮料以及对比例1所述未发酵红茶叶，分别进行抗氧化性、氨基酸含量的测定、以及香气成分的测定。
结果分析：
表1：营养指标对比表
通过对实施例2制得的红茶菌饮料进行DPPH自由基清除率的测定，结果如表1所示，发现其清除率对比未发酵红茶液有所提高，说明通过添加本申请所述食糖驹形杆菌Y-1进行发酵能很好转化茶叶中的天然成分，提高茶叶的附加经济水平。
表2：氨基酸含量对比表
通过对实施例2制得的红茶菌饮料进行16种氨基酸含量的测定，结果如表2所示，发现氨基酸的种类和含量有所提高，说明通过添加本申请所述食糖驹形杆菌Y-1进行发酵，能将部分大分子蛋白质水解为小分子的氨基酸或者是多肽，提高红茶菌饮料的附加值。
表3：红茶菌饮料中的挥发性风味物质种类。
对实施例2制得的红茶菌饮料的挥发性物质进行分析，经过数据处理后结果如表3所示，红茶液经过添加本申请所述食糖驹形杆菌Y-1进行发酵后，化合物种类数量有所提高，说明经过发酵的红茶菌饮料能有更加丰富的香气物质，乙酸乙酯和乙酸等的含量有大幅度的提高，具体见表4。
表4：红茶菌饮料中的挥发性物质。
综上可见，经过发酵后的红茶菌饮料其风味物质含量有很大的提升，其含量提高较大的风味物质有乙酸乙酯、水杨酸甲酯、乙酸、异戊酸、异戊醇、苯甲醇、苯乙醇、乙偶姻、丁烯酮等，给发酵后的红茶菌饮料带来丰富的香气。
实施例3——利用食糖驹形杆菌发酵苹果醋
本实施例提供了一种发酵生产苹果醋的方法，包括以下步骤：
(1)斜面固体培养：
将在4℃冰箱保存的实施例1所述食糖驹形杆菌Y-1接种在固体培养基表面，置于28℃培养2-3d，得到斜面培养基的活化菌种，备用。
培养基配方：葡萄糖40g、酵母提取物10g、蛋白胨10g、十二水磷酸氢二钠3.38g、一水柠檬酸1.5g、pH 6、琼脂15g、蒸馏水1000mL。
(2)摇瓶菌种扩大培养：
食糖驹形杆菌种子液：取步骤(1)得到的食糖驹形杆菌活化菌种，加入无菌水支撑菌体悬浮液，无菌水的添加量按照一支试管5mL，将菌体悬浮液接种于液体种子扩大培养基的10％，28℃、120rpm培养1-2d，得到活化的食糖驹形杆菌种子液。
1L液体种子扩大培养基配方：酵母浸粉10g，葡萄糖10g，30mL的无水乙醇，1000ml蒸馏水，pH 6.8±0.2。
热带假丝酵母种子液：将热带假丝酵母菌接种至装有100mL的YPD液体培养基中，28℃、120rpm培养40h，得到活化的热带假丝酵母菌种子液。
(3)酶解：将苹果浓缩液按3-4倍体积比扩大比例加入煮沸后的无菌水，后用NaOH溶液调节pH至3.5，后在加入0.3％(体积比)果胶酶，45℃酶解2h。酶解完成后冷却过滤得到苹果汁上清液。再加入10％(体积质量比)的白砂糖后65℃巴氏灭菌30min。
(4)酒精发酵：将活化好的热带假丝酵母菌种子液按照5％的接种量接入加糖后的苹果汁中，发酵容器严格密封，并在发酵期间定期排气处理，30℃培养，直到乙醇体积分数约6％发酵结束，后巴氏杀菌灭菌降温离心得到上清液。
(5)醋酸发酵：将活化好的食糖驹形杆菌种子液按照5％的接种量接种到发酵好的苹果酒中，用8层干燥无菌纱布密封发酵瓶，28℃好氧培养10d。
(6)过滤后熟：取发酵10d后的苹果醋，经过杀菌后过滤。后避光保藏10d，得到苹果醋。
得到的苹果醋经过品评其风味成分丰富，明显的果香、花香。
最后应说明的是，以上仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳布置方案对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围。
Claims (9)
1.一种食糖驹形杆菌，其特征在于，所述驹形杆菌分类学命名为食糖驹形杆菌Komagataeibactersaccharivorans Y-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期是2021年05月21日，保藏编号为CGMCCNo.22579。
2.根据权利要求1所述的食糖驹形杆菌，其特征在于，食糖驹形杆菌Y-1的16S rDNA序列如SEQ NO.1所示，其gyrB基因序列如SEQ NO.2所示。
3.一种如权利要求1所述食糖驹形杆菌的培养方法，其特征在于，将食糖驹形杆菌接种在固体培养基中28℃培养2d，所述固体培养基为：酵母浸粉10g/L，葡萄糖10g/L，琼脂20g/L，灭菌后添加3％体积比的无水乙醇。
4.一种含有权利要求1所述食糖驹形杆菌或其菌液发酵物的菌剂。
5.权利要求1所述的食糖驹形杆菌、权利要求4所述菌剂在制备发酵食品、保健品中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述发酵食品包括发酵饮品、食用醋。
7.权利要求1所述的食糖驹形杆菌、权利要求4所述菌剂作为食品抑菌剂、抗氧化剂的用途。
8.一种食糖驹形杆菌益生菌组合物，其特征在于，所述益生菌组合物由食糖驹形杆菌、热带假丝酵母以及植物乳植物杆菌组成，三种菌活菌含量5：2：2配比混合制成菌剂；
食糖驹形杆菌为食糖驹形杆菌Y-1，保藏编号为CGMCC No.22579。
9.一种发酵生产红茶菌饮料的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)将红茶浓缩液按3～4倍体积比扩大比例加入煮沸后的水，再加入白砂糖，白砂糖溶解后降至室温，制备茶糖水；
(2)向步骤(1)所得茶糖水中接种如权利要求1或2所述的食糖驹形杆菌，或权利要求4所述菌剂，或如权利要求8所述的益生菌组合物，培养制得发酵液；
(3)将步骤(2)得到的发酵液分离杀菌，静置后熟，即得到红茶菌饮料。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311526869.5A CN117586912A (zh) | 2023-11-16 | 2023-11-16 | 一种食糖驹形杆菌y-1及其发酵应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311526869.5A CN117586912A (zh) | 2023-11-16 | 2023-11-16 | 一种食糖驹形杆菌y-1及其发酵应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117586912A true CN117586912A (zh) | 2024-02-23 |
Family
ID=89914353
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311526869.5A Pending CN117586912A (zh) | 2023-11-16 | 2023-11-16 | 一种食糖驹形杆菌y-1及其发酵应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117586912A (zh) |
-
2023
- 2023-11-16 CN CN202311526869.5A patent/CN117586912A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106190893B (zh) | 一株适用于食醋酿造的发酵乳杆菌及其菌粉的制备方法和应用 | |
| CN111248409B (zh) | 一种低盐豆瓣酱发酵方法 | |
| CN109652347B (zh) | 一种建立在菌种互作基础上的山西老陈醋复合菌剂开发及多阶段强化的方法 | |
| CN113528379B (zh) | 一株温驯驹形杆菌sw-1及其发酵应用 | |
| WO2024212376A1 (zh) | 异常威克汉姆酵母、微生物制剂和枸杞西打酒及其酿造方法 | |
| CN109749963B (zh) | 建立在菌种互作基础上的优良土著复合乳酸菌直投式发酵剂及其强化山西老陈醋生产的方法 | |
| CN113969242A (zh) | 一种高产γ-氨基丁酸的酿酒酵母菌以及在制备γ-氨基丁酸产品中的应用 | |
| CN111329034A (zh) | 一种提高酱油品质的方法 | |
| CN106119166B (zh) | 一株瑞士乳酸菌及其应用 | |
| CN116555077A (zh) | 一株戊糖乳杆菌sj-2及其发酵应用 | |
| CN115812936B (zh) | 一种乳酸菌直投式发酵豇豆及其制备方法 | |
| CN117448228A (zh) | 一种植物乳杆菌及其应用 | |
| CN117987298A (zh) | 一种植物乳植杆菌及采用该菌株制备芦笋发酵饮料的方法 | |
| CN118755635A (zh) | 一种戊糖乳植杆菌及其在制备直投式发酵芦笋泡菜中的应用 | |
| CN109666616A (zh) | 高产乙偶姻及增香莫海威芽孢杆菌直投式发酵剂的制备方法及在山西老陈醋生产中的应用 | |
| CN115093988B (zh) | 一种复合菌豆瓣酱发酵剂及应用 | |
| CN117586912A (zh) | 一种食糖驹形杆菌y-1及其发酵应用 | |
| CN114317375B (zh) | 马氏芽孢杆菌及其应用 | |
| CN102125230B (zh) | 风味发酵茄子的制作方法 | |
| JP2019525752A (ja) | ガス発生量の低いリゥコノストック・メゼンテロイデスｃｊｌｍ６２７菌株およびこれを用いたキムチの製造方法 | |
| CN119040192B (zh) | 棒状乳杆菌棒状亚种及其在改善泡菜品质中的应用 | |
| CN117165481B (zh) | 一株可降解苹果酸的植物乳杆菌及其应用 | |
| CN116426353B (zh) | 一种提高发酵型果酒风味品质的酿造工艺 | |
| CN116410875B (zh) | 一株产低聚糖益生元的大仁红酵母及其应用 | |
| CN115772477B (zh) | 东方伊萨酵母菌株及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |