CN117568190A - 一种促进山慈菇种子萌发的菌株及快速繁育种苗的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进山慈菇种子萌发的菌株及快速繁育种苗的方法,所述菌株由山慈菇种子共生菌种分离筛选得到,其经ITS测序鉴定为辐毛小鬼伞,拉丁名为Coprinellus radians,保藏编号为CGMCC NO:40970。将所述菌株通过PDA斜面培养基培养,再转接到原种培养基中进一步生长,再将原种在栽培培养基中生长至菌种由白转棕红色即获得栽培种;将栽培种与山慈菇种子拌种大棚栽培后,能够促进山慈菇种子萌发,快速繁育种苗,经试验证明,山慈菇种子萌发成苗可达650株/m2左右,简单、实用、易行,能一次性获取大量的山慈菇种苗,迅速满足市场需求,获得较好经济效益,解决了山慈菇种苗短缺及商品市场问题,以及促进其规范化育种和栽培的关键性难题。
Description
技术领域
本发明属于微生物和种植技术领域,具体涉及一种促进山慈菇种子萌发的菌株,以及采用该菌株快速繁育山慈菇种苗的方法。
背景技术
山慈菇属于兰科植物,长于海拔800m以上沟边湿地或山坡林下荫湿地,分布范围包括国内的西藏、贵州、四川、云南中部及西北部、陕西南部以及山西南部等地,国外的尼泊尔、不丹、印度、越南、泰国和日本等国也有分布。山慈菇以假鳞茎入药,其味甘、微辛,性凉,具有清热解毒、消痈散结等功效,常用于痈肿疔毒、瘰疬痰核、蛇虫咬伤、瘸瘕痞块。现代有文献研究发现,山慈菇提取物能够抑制血管形成,此作用机制在抗肿瘤方面有较好的前景。同时,丽江山慈菇是国内提取、分离和制备秋水仙碱及其类似物的主要药材来源,秋水仙碱对急性痛风性关节炎也具有治疗作用,还具有降压作用,现代临床用于治疗肝硬化、食管贲门癌梗阻,宫颈癌等。因此,近年山慈菇成了中药界野生品种的一颗明星,身价年年提高,争购者众多,用量也不断上升,制药企业吸纳作投料的用量日趋增长,大型中医院、民营医院药用配方的用量也在增加中。随着市场需求量的不断扩大,产量逐年减少,用量逐年增加,供不应求日益加剧,野生的山慈菇遭到毁灭性采挖,濒临灭绝。
山慈菇种子极小,数量大,果荚内有种子2万~3万粒。但无胚乳,自然界萌发率极低,野生资源有限,相应市场需求旺盛,导致野生种群数量急剧减少。近几年来,在云南省丽江市有人工栽培,主要是采挖野生丽江山慈菇的地下鳞茎进行种植,由于95%的丽江山慈菇鳞茎有更替生长的特性,使得鳞茎播种产量低。种子是最佳的繁殖材料,但种子休眠期长。很多地方开展不同基质山慈菇种子播种试验、山慈菇种子组培试验等工作,但种子组织培育技术条件高、繁育环境初期要求无菌繁殖,一般很难掌握,且出苗率低,技术复杂、成本高,现在还多以假鳞茎无性繁殖为主,系数极低、周期漫长。因此,寻找一种能促进山慈菇种子萌发生长,快速繁育种苗的技术,可迅速满足市场需求,获得较好经济效益。
发明内容
本发明的目的是提供一种促进山慈菇种子萌发的菌株,以及采用该菌株快速繁育山慈菇种苗的方法。
针对上述目的,本发明提供的促进山慈菇种子萌发的菌株的分类命名为辐毛小鬼伞(Coprinellus radians)N2,于2023年11月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO:40970,保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
进一步,所述菌株的ITS序列如SEQ ID NO.1所示。
上述促进山慈菇种子萌发的菌株的获取方法包括下述步骤:
步骤1:选择表型性状优良的山慈菇植株,取其成熟果荚种子,测试活力。
步骤2:将步骤1中有活力种子放入种子袋,于12月放置于有野生山慈菇植株分布的根周围15cm范围内,用周围土覆盖1~2.5cm厚后用树叶覆盖。
步骤3:将经过步骤2生长2个月后的种子挖出,显微镜下挑选萌发种子,将萌发种子进行表面消毒后,置于PDA培养基上,25~30℃恒温培养;待长出菌丝后,挑取不同形态特征的菌丝到新的PDA培养基上扩大培养,分离获得单一菌株。其中,所述PDA培养基的组成为:每1000mL水中加入马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂15~20g,pH 5.6±0.2。
步骤4:将分离得到的单一菌株分别与山慈菇种子于OMA培养基上进行共生萌发培养,选择山慈菇种子萌发最好的菌株,即得到目标菌株。其中,所述OMA培养基的组成为:燕麦粉2.5g、琼脂7.0g、水1000mL,pH值5.8。
上述步骤4中,优选所述共生萌发培养的条件为:在25~30℃、湿度60%~65%的人工培养箱中培养15~20天。
所述目标菌株的鉴定方法为:
1、形态观察
将菌株接种于固体PDA培养基上,28℃培养7天后,观察菌落形态、菌落颜色、菌丝形态。所述菌株的生物学形态特征为:菌丝最初为白色,绒毛状;生长后期会产生大量的橙色菌丝束。
2、分子鉴定
使用真菌DNA提取试剂盒提取菌株的基因组DNA,采用真菌通用引物ITS1(5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3')、ITS4(5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')进行PCR扩增,扩增产物送擎科生物科技有限公司进行测序。将测序结果与GenBank数据库中的序列进行比对分析,结果表明菌株与辐毛小鬼伞(MN547379.1)的同源性为99.85%。因此,将菌株命名为辐毛小鬼伞(Coprinellus radians)N2。
本发明提供的山慈菇种子快速繁育种苗的方法包括以下步骤:
步骤1:菌种制作
(1)母种制作
取黄豆粒大小的上述保藏编号为CGMCC NO:40970的辐毛小鬼伞(Coprinellusradians)N2菌株接种于试管内的10mL PDA斜面培养基中,在20~25℃培养10~15天,获得母种;其中,所述PDA斜面培养基的组成为:每1000mL水中加入马铃薯190~210g、葡萄糖18~22g、磷酸二氢钾1~2g、硫酸镁0.3~0.6g、琼脂15~20g,pH值自然。
(2)原种制作
在接种箱内用无菌镊子挑花生豆大小母种于750mL塑料瓶的原种培养基质上,25~30℃生长50~60天,菌丝由白色转变为橙色时获得原种;所述原种培养基质由干料与水按质量比1:1~1.5混合而成,pH6.5;所述干料的质量百分比组成为:锯末75%~80%、麦麸17%~22%、石膏粉1%~2%、蔗糖1%~2%,浸泡24h的小麦粒1%~2%。
(3)栽培种制作
在接种箱内用无菌镊子挑核桃大小原种于1100mL 3丝塑料袋的栽培培养基质上,机器窝扣后,海绵塞封口,20~25℃生长50~60天;待整个菌种长满塑料袋后,在袋口刺4~5个小孔放气,增加透氧量,促进菌丝生长,菌种由白转棕橙再转红棕色即获得栽培种。所述栽培培养基质是由基质与营养素、水混合而成,pH6.5;其中,所述基质的质量百分比组成为:木屑65%~75%、棉籽壳颗粒12%~18%、麸皮12%~20%,石膏1%~2%,营养素的加入量为基质质量的0.15%~0.2%,基质与营养素的总质量和水的质量比1:1.1~1.5。
步骤2:拌种
当气温升高稳定在25℃以上时,将山慈菇种子从冰箱里取出,稍微阴凉使种子不粘连后,按2个蒴果对应1袋栽培种均匀拌种后,再按10袋栽培种装入一个黑色塑料袋后放置室内萌发5~7天,获得含有已萌发山慈菇种子的菌种。
步骤3:大棚种苗繁育
(1)选地
选择排灌便利,肥沃、疏松、保水保肥、耕作层较厚的偏酸性土壤,按100kg/亩撒播过磷酸钙,整完地后搭建镀锌钢管简易蔬菜大棚,上搭遮阳率40%~50%遮阳网。
(2)苗床准备
在整完地上除去杂物,整细土壤,做成宽1.2~1.5m、高10~15cm的畦,畦面刮开4~6cm土层后,均分放置直径3~4cm的干后浸湿木材,木材间距0.8~1.3cm,木材之间间距用腐殖土填平,保持木材上覆盖土壤1~1.5cm,然后浇透水,作为育苗苗床。
(3)播种
将含有已萌发山慈菇种子的菌种按1200袋/亩均匀撒播于育苗苗床上,覆腐殖土2~3cm,洒透水,再覆4~5cm浸湿的树叶。
(4)护苗壮苗
播种后,控制苗床内土壤温度为20~25℃、湿度为60%~70%、酸碱度为6.0~6.5,待种子萌发形成的顶芽冒出地面后,选择阴天及时去除覆盖的树叶。
(5)起苗移栽
待大棚苗床密度大于400株/m2,在次年春季选择雨后或阴天采挖生长至高10~15cm的山慈菇苗,移栽定植至大田或林地中,使大棚留床苗间距保持在5cm×5cm。
(6)苗床管理
随时观察大棚苗床内杂草的生长情况,人工拔草;拔草时按住杂草根部,以防带出旁边的幼苗;大棚出苗展叶后及时换为4针遮阳网,使遮阳率70%,苗床土壤湿度保持在40%~50%,视苗床情况适时浇水或排涝,并及时喷施辛硫磷乳剂除虫害。
本发明的有益效果如下:
本发明将保藏编号为CGMCC NO:40970的菌株先通过PDA斜面培养基培养后转接到原种培养基中进一步生长获得原种,再将原种在栽培培养基中生长至菌种由白转棕红色即获得栽培种;通过将获得的栽培种与山慈菇种子拌种、萌发后,播种在人工种植大棚内的苗床上,控制苗床内土壤温度、湿度、酸碱度,种子逐渐形成顶芽、长成展叶小苗,起苗定植移栽,合理进行苗床管理。采用本发明菌株培育种苗的方法简单易行,成苗快,成活率高,易栽培,经试验验证,山慈菇种子萌发成苗可达650株/m2左右,可以一次性获取大量的山慈菇种苗,迅速满足市场需求,获得较好经济效益。与实验室组培相比,本技术条件要求简单,便于操作,栽培种成本低廉,与实验室组培苗相比成本降低90%,效益大于100%。本发明菌株和育苗方法同样适用于大田或林间山慈菇种子的直播育苗。
附图说明
图1是本发明菌株在PDA培养基上培养形成的菌落的可见菌丝形态特征。
图2是实施例2中山慈菇种子大棚直播80天后苗生长大小。
图3是林间山慈菇种子直播100天后的试验效果。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明,但本发明的保护范围不仅限于这些实施例。
实施例1
菌株的分离、纯化、鉴定
步骤1:选择表型性状优良的山慈菇植株,取其成熟果荚种子,测试活力;
步骤2:将步骤1中有活力种子放入种子袋,于12月放置于有野生山慈菇植株分布的根周围15cm范围内,用周围土覆盖1~2.5cm厚后用树叶覆盖;
步骤3:将经过步骤2生长2个月后的种子挖出,显微镜下挑选萌发种子,将萌发种子进行表面消毒后,置于PDA培养基上,28℃恒温培养;待长出菌丝后,挑取不同形态特征的菌丝到新的PDA培养基上扩大培养,分离获得数个单一菌株。所述PDA培养基的组成为:马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000mL,pH值5.6±0.2。
步骤4:将分离得到的单一菌株分别与山慈菇种子于OMA培养基上进行共生萌发培养,共生萌发培养的条件为:在25℃、湿度65%的人工培养箱培养20天,观察种子萌发情况后,选择山慈菇种子萌发最好菌株进行ITS序列测试和鉴定,即得到目标菌株。所述OMA培养基的组成为:燕麦粉2.5g、琼脂7.0g、水1000mL、pH值5.8。
所述菌株鉴定和保藏如下:
1、菌株的形态观察
将菌株接种于固体PDA培养基上,28℃培养7天后,观察菌落形态、菌落颜色、菌丝形态。如图1所示,所述菌株的生物学形态特征为:菌丝最初为白色,绒毛状;生长后期会产生大量的橙色菌丝束。
2、分子鉴定
使用真菌DNA提取试剂盒提取菌株的基因组DNA,采用真菌通用引物ITS1(5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3')、ITS4(5'-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3')进行PCR扩增,PCR反应体积为50μL,包括模板DNA 5μL、引物ITS1 1μL、引物ITS4 1μL、d NTP Mixture(各2.5mmol/L)4μL、10×PCR Buffer 5μL、5U/μL Taq酶0.5μL,灭菌蒸馏水33.5μL,PCR反应条件为:94℃预变性5min;94℃30s、55℃30s、72℃1min,共30个循环;72℃延伸7min。扩增产物送擎科生物科技有限公司进行测序,将测序结果与GenBank数据库中的序列进行比对分析,所得的ITS核苷酸序列在NCBI上进行同源性比较,结果表明该菌株与辐毛小鬼伞(MN547379.1)的同源性为99.85%。因此,将菌株命名为辐毛小鬼伞(Coprinellus radians)N2。所述菌株的ITS序列如SEQ ID NO.1所示。
3、菌株保藏
将辐毛小鬼伞(Coprinellus radians)N2菌株接种于PDA斜面培养基上,28℃生长7天,于2023年11月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种保藏编号为CGMCC NO:40970,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
实施例2
山慈菇种子快速繁育种苗的方法
1、菌种制作
(1)母种制作
取黄豆粒大小的上述保藏编号为CGMCC NO:40970的辐毛小鬼伞(Coprinellusradians)N2菌株接种于50mL试管内的10mL PDA斜面培养基中,在25℃培养15天,获得母种。
所述PDA斜面培养基的组成为:马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾1.5g、硫酸镁0.5g、琼脂20g、水1000mL,pH值自然;其制法是:将洗净去皮的马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用八层纱布过滤,加热,再加琼脂,继续加热搅拌混匀,待琼脂溶解完后,加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁,搅拌均匀,稍冷却后再补足水,分装试管,加塞、包扎,115℃灭菌20分钟后取出试管摆斜面,冷却至室温。
(2)原种制作
在接种箱内用无菌镊子挑花生豆大小母种于装满750mL塑料瓶的原种培养基质上,25℃生长60天,菌丝由白色转变为橙色,获得原种。
所述原种培养基质由干料与水按质量比1:1~1.5混合而成,pH6.5;所述干料的质量百分比组成为:锯末77%、麦麸20%、石膏粉1%、蔗糖1%,浸泡24h的小麦粒1%。原种培养基质的制法为:将锯末、麦麸、石膏粉、浸泡24h的小麦粒称量好后拌匀,再将蔗糖化水后撒入其中,并混拌均匀,边加水边搅拌至湿度达到手捏成团不滴水,松手即散,手中粘有少量锯末的程度,高压蒸汽125℃灭菌2h,灭菌结束后冷却至室温。
(3)栽培种制作
在接种箱内用无菌镊子挑核桃大小原种于1100mL 3丝塑料袋的栽培培养基质上,机器窝扣后,海绵塞封口,25℃生长50~60天;待整个菌种长满塑料袋后,在袋口刺4~5个小孔放气,增加透氧量,促进菌丝生长,菌种由白转棕橙再转红棕色即获得栽培种。
所述栽培培养基质是由基质与营养素、水混合而成,pH6.5;其中,所述基质的质量百分比组成为:木屑69%、棉籽壳颗粒15%、麸皮15%,石膏1%,营养素的加入量为基质质量的0.2%,基质与营养素的总质量和水的质量比1:1.1~1.5。栽培培养基质的制法为:将木屑、棉籽壳颗粒、麸皮、石膏与营养素称量好后拌匀,再将水均匀撒入其中,并混拌均匀,边加水边搅拌至湿度达到手捏成团不滴水,松手即散,手中粘有少量锯末的程度,高压蒸汽125℃灭菌2h,灭菌结束后冷却至室温。
2、拌种
当气温升高稳定在25℃以上时,将山慈菇种子从冰箱里取出,稍微阴凉使种子不粘连后,按2个蒴果对应1袋栽培种均匀拌种后,再按10袋栽培种装入一个黑色塑料袋后放置室内萌发5~7天,获得含有已萌发山慈菇种子的菌种。
步骤3:大棚种苗繁育
(1)选地
选择排灌便利,肥沃、疏松、保水保肥、耕作层较厚的偏酸性土壤,按100kg/亩撒播过磷酸钙,整完地后搭建镀锌钢管简易蔬菜大棚,上搭遮阳率40%遮阳网。
(2)苗床准备
在整完地上除去杂物,整细土壤,做成宽1.2~1.5m、高10~15cm的畦,畦面刮开4~6cm土层后,均分放置直径3~4cm的干后浸湿木材,木材间距0.8~1.3cm,木材之间间距用腐殖土填平,保持木材上覆盖土壤1~1.5cm,然后浇透水,作为育苗苗床。
(3)播种
将含有已萌发山慈菇种子的菌种按1200袋/亩均匀撒播于育苗苗床上,覆腐殖土2~3cm,洒透水,再覆4~5cm浸湿的树叶。
(4)护苗壮苗
播种后,控制苗床内土壤温度为20~25℃、湿度为60%~70%、酸碱度为6.0~6.5。20天左右种子萌发形成类似圆形白色长5mm、茎宽3mm的原基,随着时间推移,原基再次长大形成带顶芽的3~9个分支。60天左右,顶芽冒出地面,选择阴天及时去除覆盖的树叶,很快形成单叶绿色植株,开始长出3~5个须根,植物开始光合作用,生长加快。如图2所示,80天后,种子可以长成高5~10cm展叶小苗。
(5)起苗移栽
待大棚苗床密度大于400株/m2,在次年春季选择雨后或阴天采挖生长至高10~15cm的山慈菇苗,移栽定植至大田或林地中,使大棚留床苗间距保持在5cm×5cm。
(6)苗床管理
随时观察大棚苗床内杂草的生长情况,人工拔草;拔草时按住杂草根部,以防带出旁边的幼苗;大棚出苗展叶后及时换为4针遮阳网,使遮阳率70%,苗床土壤湿度保持在40%~50%,视苗床情况适时浇水或排涝,并及时喷施辛硫磷乳剂除虫害。
本发明也可按照上述实施例2的方法对山慈菇种子进行林间种苗繁育,在选地时应该选择遮阳度在40~50%树林,整理呈带状呈畦,畦大小因地制宜。其他步骤与实施例2中大田种苗繁育方法相同。山慈菇种子林间直播100天后的效果如图3。
Claims (5)
1.一种促进山慈菇种子萌发的菌株,其特征在于:所述菌株的分类命名为辐毛小鬼伞(Coprinellus radians)N2,于2023年11月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO:40970。
2.根据权利要求1所述的促进山慈菇种子萌发的菌株,其特征在于:所述菌株的ITS序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种权利要求1所述的促进山慈菇种子萌发的菌株的获取方法,其特征在于包括下述步骤:
步骤1:选择表型性状优良的山慈菇植株,取其成熟果荚种子,测试活力;
步骤2:将步骤1中有活力种子放入种子袋,于12月放置于有野生山慈菇植株分布的根周围15cm范围内,用周围土覆盖1~2.5cm厚后用树叶覆盖;
步骤3:将经过步骤2生长2个月后的种子挖出,显微镜下挑选萌发种子,将萌发种子进行表面消毒后,置于PDA培养基上,25~30℃恒温培养;待长出菌丝后,挑取不同形态特征的菌丝到新的PDA培养基上扩大培养,分离获得单一菌株;
步骤4:将分离得到的单一菌株分别与山慈菇种子于OMA培养基上进行共生萌发培养,选择山慈菇种子萌发最好的菌株,即得到目标菌株。
4.根据权利要求3所述的促进山慈菇种子萌发的菌株的获取方法,其特征在于:步骤4中,所述共生萌发培养的条件为:在25~30℃、湿度60%~65%的人工培养箱中培养15~20天。
5.一种山慈菇种子快速繁育种苗的方法,其特征在于包括以下步骤:
步骤1:菌种制作
(1)母种制作
取黄豆粒大小的权利要求1所述保藏编号为CGMCC NO:40970的辐毛小鬼伞(Coprinellus radians)N2菌株接种于试管内的10mL PDA斜面培养基中,在20~25℃培养10~15天,获得母种;
所述PDA斜面培养基的组成为:每1000mL水中加入马铃薯190~210g、葡萄糖18~22g、磷酸二氢钾1~2g、硫酸镁0.3~0.6g、琼脂15~20g,pH值自然;
(2)原种制作
在接种箱内用无菌镊子挑花生豆大小母种于750mL塑料瓶的原种培养基质上,25~30℃生长50~60天,菌丝由白色转变为橙色时获得原种;
所述原种培养基质由干料与水按质量比1:1~1.5混合而成,pH6.5;所述干料的质量百分比组成为:锯末75%~80%、麦麸17%~22%、石膏粉1%~2%、蔗糖1%~2%,浸泡24h的小麦粒1%~2%;
(3)栽培种制作
在接种箱内用无菌镊子挑核桃大小原种于1100mL 3丝塑料袋的栽培培养基质上,机器窝扣后,海绵塞封口,20~25℃生长50~60天;待整个菌种长满塑料袋后,在袋口刺4~5个小孔放气,增加透氧量,促进菌丝生长,菌种由白转棕橙再转红棕色即获得栽培种;
所述栽培培养基质是由基质与营养素、水混合而成,pH6.5;其中,所述基质的质量百分比组成为:木屑65%~75%、棉籽壳颗粒12%~18%、麸皮12%~20%,石膏1%~2%,营养素的加入量为基质质量的0.15%~0.2%,基质与营养素的总质量和水的质量比1:1.1~1.5;
步骤2:拌种
当气温升高稳定在25℃以上时,将山慈菇种子从冰箱里取出,稍微阴凉使种子不粘连后,按2个蒴果对应1袋栽培种均匀拌种后,再按10袋栽培种装入一个黑色塑料袋后放置室内萌发5~7天,获得含有已萌发山慈菇种子的菌种;
步骤3:大棚种苗繁育
(1)选地
选择排灌便利,肥沃、疏松、保水保肥、耕作层较厚的偏酸性土壤,按100kg/亩撒播过磷酸钙,整完地后搭建镀锌钢管简易蔬菜大棚,上搭遮阳率40%~50%遮阳网;
(2)苗床准备
在整完地上除去杂物,整细土壤,做成宽1.2~1.5m、高10~15cm的畦,畦面刮开4~6cm土层后,均分放置直径3~4cm的干后浸湿木材,木材间距0.8~1.3cm,木材之间间距用腐殖土填平,保持木材上覆盖土壤1~1.5cm,然后浇透水,作为育苗苗床;
(3)播种
将含有已萌发山慈菇种子的菌种按1200袋/亩均匀撒播于育苗苗床上,覆腐殖土2~3cm,洒透水,再覆4~5cm浸湿的树叶;
(4)护苗壮苗
播种后,控制苗床内土壤温度为20~25℃、湿度为60%~70%、酸碱度为6.0~6.5,待种子萌发形成的顶芽冒出地面后,选择阴天及时去除覆盖的树叶;
(5)起苗移栽
待大棚苗床密度大于400株/m2,在次年春季选择雨后或阴天采挖生长至高10~15cm的山慈菇苗,移栽定植至大田或林地中,使大棚留床苗间距保持在5cm×5cm;
(6)苗床管理
随时观察大棚苗床内杂草的生长情况,人工拔草;拔草时按住杂草根部,以防带出旁边的幼苗;大棚出苗展叶后及时换为4针遮阳网,使遮阳率70%,苗床土壤湿度保持在40%~50%,视苗床情况适时浇水或排涝,并及时喷施辛硫磷乳剂除虫害。
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CN202311586722.5A CN117568190A (zh) | 2023-11-27 | 2023-11-27 | 一种促进山慈菇种子萌发的菌株及快速繁育种苗的方法 |
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CN202311586722.5A CN117568190A (zh) | 2023-11-27 | 2023-11-27 | 一种促进山慈菇种子萌发的菌株及快速繁育种苗的方法 |
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CN117701397A (zh) * | 2023-03-16 | 2024-03-15 | 中南民族大学 | 一种促进杜鹃兰种子萌发的小鬼伞属庭院小鬼伞菌及其应用 |
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2023
- 2023-11-27 CN CN202311586722.5A patent/CN117568190A/zh active Pending
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CN117701397A (zh) * | 2023-03-16 | 2024-03-15 | 中南民族大学 | 一种促进杜鹃兰种子萌发的小鬼伞属庭院小鬼伞菌及其应用 |
CN117701397B (zh) * | 2023-03-16 | 2024-05-31 | 中南民族大学 | 一种促进杜鹃兰种子萌发的小鬼伞属庭院小鬼伞菌及其应用 |
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