CN117561060A

CN117561060A - 用于治疗代谢性疾病和hfpef的hdac6抑制剂2-氟烷基-1,3,4-噁二唑-5-基-噻唑

Info

Publication number: CN117561060A
Application number: CN202280045546.1A
Authority: CN
Inventors: 杨进; M·A·曼德加尔; T·C·霍伊
Original assignee: Tenaya Therapeutics Inc
Current assignee: Tenaya Therapeutics Inc
Priority date: 2021-05-04
Filing date: 2022-05-04
Publication date: 2024-02-13

Abstract

本文中提供了用HDAC6抑制剂治疗或预防代谢性疾病的方法。本文中还提供了用HDAC6抑制剂治疗或预防射血分数保留的心力衰竭的方法。本文中描述了用于治疗或预防代谢性疾病或射血分数保留的心力衰竭的各种HDAC6抑制剂。一方面，本文中描述了通过口服施用HDAC6抑制剂，如式(I)或式(II)的抑制剂来治疗人类患者的方法。

Description

用于治疗代谢性疾病和HFPEF的HDAC6抑制剂2-氟烷基-1,3, 4-噁二唑-5-基-噻唑

相关申请交叉引用

本申请要求2021年5月4日提交的美国临时专利申请第63/183,914号、2021年6月15日提交的美国临时专利申请第63/210,690号和2021年6月15日提交的美国临时专利申请第63/210,676号的权益，所述文献中的每一个的整个公开内容通过引用以其整体并入本文。

技术领域

本公开涉及代谢性疾病的治疗。本公开还涉及射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的治疗。

背景技术

代谢性疾病是健康问题的主要来源，在高卡路里饮食典型的国家尤其如此。具体地，饮食诱导的肥胖症(DIO)影响全世界越来越多的人。与肥胖症相关的代谢性疾病包含糖尿病和糖尿病前期、糖尿病性心肌病、代谢综合征(被称为与代谢相关的心脏相关病症)、高血压和高甘油三酯血症/血脂异常。

射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)是一种重大健康问题，没有有效疗法。这种综合征的流行率正在上升，并且与高发病率和死亡率相关。HFpEF，还称为舒张性心力衰竭，仅在美国每年就影响至少250万人。(Gazewood和Turner.《美国家庭医生(Am Fam Physician.)》2017年11月1日；96(9):582-588)。风险因素包含年龄较大、女性、肥胖症、高血压、烟草使用、糖尿病、冠状动脉疾病(CAD)、瓣膜性心脏病和心房纤颤。2013年，直接归因于心力衰竭的医疗支出总计大约300亿美元。

寻找针对肥胖症和相关代谢性疾病的有效药物治疗仍然具有挑战性。对针对代谢性疾病的治疗的需求未得到满足。

寻找针对HFpEF的有效药物治疗也仍然具有挑战性。用于HFpEF的最常见的药物治疗仍然是施用利尿剂。对针对HFpEF的治疗的需求未得到满足。

本公开解决了这些需求。

发明内容

在一些方面，本公开涉及通过施用HDAC6抑制剂来治疗或预防代谢性疾病的方法。

在一些实施例中，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的代谢性疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种预防有需要的受试者的代谢性疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，所述代谢性疾病是与肥胖症，如饮食诱导的肥胖症相关的代谢性疾病。在一些实施例中，所述代谢性疾病不是饮食诱导的。在一些实施例中，所述代谢性疾病是糖尿病、糖尿病前期、糖尿病性心肌病、代谢综合征、高血压、高甘油三酯血症或血脂异常。在一些实施例中，所述代谢性疾病是2型糖尿病。

在一些实施例中，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的糖尿病的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的糖尿病的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的2型糖尿病的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的糖尿病前期的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的糖尿病性心肌病的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的代谢综合征的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的高血压的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的代谢性高甘油三酯血症和/或血脂异常的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，所述受试者是肥胖的。在其它实施例中，所述受试者不是肥胖的。

在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的肥胖症的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。所述受试者可以是肥胖受试者或有患上肥胖症的风险的受试者。

在一些实施例中，所述受试者患有高血压或有患上高血压的风险。在一些实施例中，所述受试者患有糖尿病(diabetes，例如，糖尿病(diabetes mellitus)或2型糖尿病)或有患上糖尿病的风险。在一些实施例中，所述受试者患有糖尿病性心肌病或有患上糖尿病性心肌病的风险。在一些实施例中，所述受试者患有代谢综合征或有患上代谢综合征的风险。在一些实施例中，所述受试者患有高甘油酯血症或血脂异常或有患上高甘油酯血症或血脂异常的风险。

在一些实施例中，所述受试者是人。在一些实施例中，所述受试者为至少65岁。在一些实施例中，所述受试者为至少70岁。

在一些实施例中，本公开提供了治疗有需要的受试者的代谢性疾病(例如，如糖尿病等糖尿病或代谢综合征)或治疗肥胖症的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂，其中所述HDAC6抑制剂为氟烷基-噁二唑衍生物。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是根据下式的氟烷基-噁二唑衍生物：

在一些实施例中，本公开提供了预防有需要的受试者的代谢性疾病(例如，如糖尿病等糖尿病或代谢综合征)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂，其中所述HDAC6抑制剂为氟烷基-噁二唑衍生物。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是根据下式的氟烷基-噁二唑衍生物：

在一些实施例中，所述方法治疗或预防代谢性疾病的至少一种症状。在一些实施例中，所述方法改善葡萄糖耐受性。在一些实施例中，所述方法改善胰岛素抵抗。在一些实施例中，所述方法降低葡萄糖水平。在一些实施例中，所述方法抑制脂肪组织中的炎性基因。在一些实施例中，所述方法减小所述受试者的体重。

在其它方面，本公开提供了一种HDAC6抑制剂，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用。

在其它方面，本公开提供了一种药物组合物，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用，所述药物组合物包括HDAC6抑制剂。

在其它方面，本公开提供了一种试剂盒，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用，所述试剂盒包括HDAC6抑制剂和说明书。

在其它方面，本公开提供了一种HDAC6抑制剂在治疗代谢性疾病中的用途。

在一些方面，本公开涉及通过施用HDAC6抑制剂来治疗或预防射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的方法。

在一些实施例中，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本公开提供了一种预防有需要的受试者的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的心脏纤维化(例如，与HFpEF相关)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的舒张功能障碍(例如，与HFpEF相关)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

在一些实施例中，所述受试者患有代谢性疾病或有患上代谢性疾病的风险。在一些实施例中，所述受试者患有高血压或有患上高血压的风险。在一些实施例中，所述受试者患有糖尿病(diabetes，例如，糖尿病(diabetes mellitus)或2型糖尿病)或有患上糖尿病的风险。在一些实施例中，所述受试者患有冠状动脉疾病(CAD)或有患上CAD的风险。在一些实施例中，所述受试者患有瓣膜性心脏病或有患上瓣膜性心脏病的风险。在一些实施例中，所述受试者患有心房纤颤或有患上心房纤颤的风险。在一些实施例中，所述受试者患有代谢综合征或有患上代谢综合征的风险。在一些实施例中，所述受试者是肥胖的。

在一些实施例中，所述受试者不患有代谢性疾病。在一些实施例中，所述受试者不患有代谢综合征。在一些实施例中，所述受试者不患有糖尿病(diabetes，例如，不患有糖尿病(diabetes mellitus)或2型糖尿病)。在一些实施例中，所述受试者不患有高血压。在一些实施例中，所述受试者不是肥胖的。

在一些实施例中，所述方法治疗或预防HFpEF的至少一种症状。在一些实施例中，所述方法减少左心室(LV)质量。在一些实施例中，所述方法减小LV壁厚度。在一些实施例中，所述方法改善LV松弛。在一些实施例中，所述方法改善LV充盈压。在一些实施例中，所述方法预防所述受试者的心力衰竭。

在一些实施例中，本文所述的方法减少心脏纤维化(例如，与HFpEF相关)。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于显著减少细胞中(例如，细胞培养物中或体内)的心脏成纤维细胞活化。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于减少细胞中(例如，细胞培养物中或体内)的心脏成纤维细胞活化，例如，减少10％、20％、30％、40％、50％、60％、80％、90％或更多(相对于施用前或在不存在施用的情况下)。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于显著减少与纤维化相关的一个或多个基因的表达(例如，在向受试者施用HDAC6抑制剂之后在所述受试者的细胞中)。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于减少与纤维化相关的一个或多个基因的表达(例如，在向受试者施用HDAC6抑制剂之后在所述受试者的细胞中)，例如，减少10％、20％、30％、40％、50％、60％、80％、90％或更多(相对于施用前或在不存在施用的情况下)。

在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于显著减少TGF-β受体信号传导(例如，在向受试者施用HDAC6抑制剂之后在所述受试者的细胞中)。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于减少TGF-β受体信号传导(例如，在向受试者施用HDAC6抑制剂之后在所述受试者的细胞中)，例如，减少10％、20％、30％、40％、50％、60％、80％、90％或更多(相对于施用前或在不存在施用的情况下)。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于显著减少与TGF-β受体信号传导相关的一个或多个基因的表达(例如，在向受试者施用HDAC6抑制剂之后在所述受试者的细胞中)。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于减少与TGF-β受体信号传导相关的一个或多个基因的表达(例如，在向受试者施用HDAC6抑制剂之后在所述受试者的细胞中)，例如，减少10％、20％、30％、40％、50％、60％、80％、90％或更多(相对于施用前或在不存在施用的情况下)。

在一些实施例中，本文所述的方法减少心肌肥大(例如，与HFpEF相关)。

在一些实施例中，本文所述的方法减少线粒体功能障碍。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于显著增加与氧化磷酸化和/或线粒体复合物I相关的基因的表达(例如，在向受试者施用HDAC6抑制剂之后在所述受试者的细胞中)。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于增加与氧化磷酸化和/或线粒体复合物I相关的基因的表达增加(例如，在向受试者施用HDAC6抑制剂之后在所述受试者的细胞中)，例如增加10％、20％、30％、40％、50％、60％、80％、90％或更多(相对于施用前或在不存在施用的情况下)。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于增加(例如，显著增加)细胞中(例如，体外或体内)的线粒体膜电位。在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用有效用于增加(例如，显著增加)细胞中(例如，细胞培养物中或体内)的备用呼吸量。

在一些实施例中，本公开提供了治疗有需要的受试者的HFpEF的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂，其中所述HDAC6抑制剂是氟烷基-噁二唑衍生物。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是根据下式的氟烷基-噁二唑衍生物：

在一些实施例中，本公开提供了预防有需要的受试者的HFpEF的方法，所述方法包括施用HDAC6抑制剂，其中所述HDAC6抑制剂是氟烷基-噁二唑衍生物。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是根据下式的氟烷基-噁二唑衍生物：

在其它方面，本公开提供了一种HDAC6抑制剂，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用。

在其它方面，本公开提供了一种药物组合物，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用，所述药物组合物包括HDAC6抑制剂。

在其它方面，本公开提供了一种试剂盒，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用，所述试剂盒包括HDAC6抑制剂和说明书。

在其它方面，本公开提供了一种HDAC6抑制剂在治疗射血分数保留的心力衰竭中的用途。

在本文所述的方法中的任何方法的一些实施例中，所述向所述受试者的施用是口服(例如，向人类受试者口服施用)。在一些实施例中，所述治疗减少或缓解(即，有效用于减少或缓解)所治疗的疾病的一种或多种症状或一个或多个参数。

在一些方面，所述方法包括通过对多种候选化合物中的每个成员进行HDAC6选择性抑制的体外测试来选择所述HDAC6抑制剂，由此鉴定用作所述HDAC6抑制剂的选定化合物。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是根据式(I)的化合物：

其中

R¹选自由以下组成的组：

R^a选自由以下组成的组：H、卤代、C_1-3烷基、环烷基、卤代烷基和烷氧基；

R²和R³独立地选自由以下组成的组：H、卤代、烷氧基、卤代烷基、芳基、杂芳基、烷基和环烷基，其中的每一者任选地被取代，或者R²和R³与其所连接的原子一起形成环烷基或杂环基；

R⁴和R⁵独立地选自由以下组成的组：H、–(SO₂)R²、–(SO₂)NR²R³、–(CO)R²、–(CONR²R³)、芳基、芳基杂芳基、亚烷基芳基、杂芳基、环烷基、杂环基、烷基、卤代烷基和烷氧基，其中的每一者任选地被取代，或者R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成环烷基或杂环基，其中的每一者任选地被取代；

R⁹选自由以下组成的组：H、C₁-C₆烷基、卤代烷基、环烷基和杂环基；

X¹选自由以下组成的组：S、O、NH和NR⁶，其中R⁶选自由以下组成的组：C₁-C₆烷基、烷氧基、卤代烷基、环烷基和杂环基；

Y选自由以下组成的组：CR²、O、N、S、SO和SO₂，其中当Y是O、S、SO或SO₂时，R⁵不存在，并且当R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成环烷基或杂环基时，Y是CR²或N；并且

n选自0、1和2。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是根据式(Ik)的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R^b是H、卤素、烷基、环烷基、-CN、卤代烷基或卤代烷氧基；并且

R⁴是烷基、烷氧基、卤代烷基或环烷基，其中的每一者任选地被取代。

在式(Ik)的一些实施例中，R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

在式(Ik)的一些实施例中，R⁴是任选地经取代的烷基或环烷基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是根据式(Ik-1)的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

在式(Ik-1)的一些实施例中，R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

在式(Ik-1)的一些实施例中，R⁴是任选地经取代的烷基或环烷基。

在式(Ik-1)的一些实施例中，R⁴是烷基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是根据式(Ik-2)的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

在式(Ik-2)的一些实施例中，R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

在式(Ik-2)的一些实施例中，R⁴是任选地经取代的烷基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是化合物是根据式I(y)的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

X¹是S；

R^a选自由以下组成的组：H、卤素和C_1-3烷基；

R¹是

R²选自由以下组成的组：烷基、烷氧基和环烷基，其中的每一者任选地被取代；

R³是H或烷基；

R⁴选自由以下组成的组：烷基、-(SO₂)R²、-(SO₂)NR²R³和-(CO)R²；并且

R⁵是芳基或杂芳基；或者R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成杂环基，其中的每一者任选地被取代。

在式I(y)的一些实施例中，R^a是H。

在式I(y)的一些实施例中，R¹是

在式I(y)的一些实施例中，R⁴是-(SO₂)R²。

在式I(y)的一些实施例中，–(SO₂)R²是–(SO₂)烷基、–(SO₂)亚烷基杂环基、–(SO₂)卤代烷基、–(SO₂)卤代烷氧基或–(SO₂)环烷基。

在式I(y)的一些实施例中，R⁵是杂芳基。

在式I(y)的一些实施例中，杂芳基是5至6元杂芳基。

在式I(y)的一些实施例中，所述5至6元杂芳基选自由以下组成的组：其中R^b是卤素、烷基、烷氧基、环烷基、-CN、卤代烷基或卤代烷氧基；并且m是0或1。

在式I(y)的一些实施例中，R^b是F、Cl、-CH₃、-CH₂CH₃、-CF₃、-CHF₂、-CF₂CH₃、-CN、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-OCH(CH₃)₂、-OCF₃、-OCHF₂、-OCH₂CF₂H和环丙基。

在式I(y)的一些实施例中，所述芳基选自由以下组成的组：苯基、3-氯苯基、3-氯-4-氟苯基、3-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基和2,6-二氟苯基。

在式I(y)的一些实施例中，所述化合物是：

或其药学上可接受的盐。

在式I(y)的一些实施例中，所述化合物是：或其药学上可接受的盐。

在式I(y)的一些实施例中，所述化合物是：或其药学上可接受的盐。在式I(y)的一些实施例中，所述化合物是：/>或其药学上可接受的盐。

在式I(y)的一些实施例中，所述化合物是：或其药学上可接受的盐。在式I(y)的一些实施例中，所述化合物是：或其药学上可接受的盐。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂选自由以下组成的组：

/>

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是

或其类似物。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是式(II)化合物：

其中

n是0或1；

X是O、NR⁴或CR⁴R⁴'；

Y是键、CR²R³或S(O)₂；

R¹选自由以下组成的组：H、酰胺基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基；

R²和R³独立地选自由以下组成的组：H、卤素、烷基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH₂)-碳环基、-(CH₂)-杂环基、-(CH₂)-芳基和-(CH₂)-杂芳基；或者

R¹和R²与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；或者

R²和R³与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；并且

R⁴和R⁴'各自独立地选自由以下组成的组：H、烷基、-CO₂-烷基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、-(CH₂)-碳环基、-(CH₂)-杂环基、-(CH₂)-芳基和-(CH₂)-杂芳基；或者

R⁴和R⁴'与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；

其中每个烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基独立地任选地被一个或多个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、卤代烷基、氧代、羟基、烷氧基、-OCH₃、-CO₂CH₃、-C(O)NH(OH)、-CH₃、吗啉和-C(O)N-环丙基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是CAY10603、吐巴辛(tubacin)、利可司他(ricolinostat)(ACY-1215)、西他司他(citarinostat)(ACY-241)、ACY-738、QTX-125、CKD-506、nexturastatA、妥巴斯汀A(tubastatinA)或HPOB。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是妥巴斯汀A。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是利可司他(ricolinostat)。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是CAY10603。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是nexturastatA。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂对HDAC6的选择性为对HDAC的所有其它同工酶的选择性的至少100倍。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂将HDAC6活性降低至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少75％、至少80％、至少90％、至少95％或至少98％。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂基本上消除了HDAC6活性。

附图说明

图1A-1L示出了，用TYA-11631进行的HDAC6抑制改善饮食诱导的肥胖小鼠模型的葡萄糖耐受性和胰岛素抵抗。

图1A至图1F示出了通过在禁食6小时后注射葡萄糖(在盐水中2g/kg)进行的腹膜内葡萄糖耐受性测试(GTT)的结果。在葡萄糖施用之前(0分钟)和之后15分钟、30分钟、45分钟、60分钟和120分钟，用血糖仪测量尾部血糖水平(mg/dl)。相比于对照，饮食诱导的肥胖(DIO)小鼠在16周龄时出现严重葡萄糖不耐受。图1A示出了对照小鼠和DIO小鼠的GTT结果。基于葡萄糖AUC水平，将DIO小鼠均匀地随机化到四个处理组中以接受媒剂(n＝9)或三种剂量3mg/kg、10mg/kg、30mg/kg的TYA-11631(每种n＝10)。对照小鼠还被分成用媒剂(n＝10)或30mg/kgTYA-11631(n＝10)口服给药。为了评估TYA-11631对葡萄糖代谢的急性应答，在第1次给药后6小时进行GTT。图1B示出了给药TYA-11631之前的GTT结果。图1C和图1D示出了单次给药TYA-11631之后的GTT结果。单次给药所有三种剂量的TYA-11631显著降低了葡萄糖水平。图1E和图1F示出了TYA-11631处理2周后的GTT结果。持续2周的TYA-11631处理使葡萄糖耐受性以剂量依赖性方式显著改善。

图1G和图1H示出了通过在禁食6小时后注射胰岛素(1U/kg)进行的腹膜内胰岛素耐受性测试(ITT)的结果。在胰岛素施用之前(0分钟)和之后15分钟、30分钟、45分钟、60分钟和120分钟，用血糖仪测量尾部血糖水平(mg/dl)。持续4周的HDAC6抑制剂(TYA-11631)处理改善DIO小鼠的胰岛素抵抗。10mg/kg和30mg/kg以相当的活性显著降低了葡萄糖AUC(ITT)，3mg/kg显示出降低的趋势。

图1I示出了TYA-11631对非禁食小鼠的血糖的影响。在早晨收集尾部血液样品，并且用血糖仪对尾部血液样品进行测量。持续6周的TYA-11631处理引起非禁食葡萄糖的剂量依赖性减少，这与禁食后的葡萄糖耐受测试的数据一致。

图1J和图1K示出了用TYA-11631进行的处理引起DIO小鼠的体重的剂量依赖性减小。图1L示出了组之间未观察到食物消耗的差异。值得注意的是，用30mg/kg TYA-11631给药6周的对照小鼠未显示出血糖水平和体重的变化。条和误差条显示出平均值和SEM。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。

图2A、图2B和图2C显示出，用TYA-11631进行的HDAC6抑制抑制饮食诱导肥胖小鼠模型的脂肪组织中的炎性基因。在单次给药30mg/kg TYA-116316小时后，解剖来自DIO小鼠的白色脂肪组织(附睾)。实时q-PCR数据显示，TYA-11631明显地抑制白色脂肪组织中的促炎基因IL-6(图2A)、IL-10(图2B)和TGFb1(图2C)的上调。

图3A-3C示出了在db/db糖尿病小鼠中的TYA-11018效应。图3A示出了TYA-11018引起db/db小鼠的禁食葡萄糖的剂量依赖性降低。图3B显示，相比于经媒剂处理的db/db小鼠，1.5mg/kg和15mg/kg两者在给药/禁食4小时后均显著降低血糖。图3C显示，15mg/kg TYA-11018在给药6小时后显著降低禁食葡萄糖。条和误差条显示出平均值和SEM。

图4A-4H显示，以HFD与中度TAC的组合饲喂的小鼠出现心脏代谢性心力衰竭表型，所述心脏代谢性心力衰竭表型重现HFpEF在人体内的全身和心血管特征。

图4A示出了通过在野生型小鼠体内进行伴随性代谢和中度压力过载应激持续12周的HFpEF模型诱导的示意性概述。对照组中的n＝5只小鼠以常规饮食饲喂，未进行mTAC外科手术，HFpEF模型开发组中的n＝15只小鼠用HFD/mTAC进行诱导。

图4B和图4C分别显示出相比于对照小鼠，HFD/mTAC诱导的连续体重增加和葡萄糖不耐受。

图4D示出了，在通过超声心动描记术评估的利用HFD/mTAC的小鼠中，左心室射血分数(LVEF)保留。

在HFD/mTAC动物中存在显著同心性左心室(LV)肥大，如通过LV质量(图4E)和LV舒张壁厚度(图4F)的增加表明的。

HFD/mTAC小鼠中出现伴随左心室充盈压增加的LV舒张功能障碍，如通过无创多普勒成像(noninvasiveDopplerimaging)测量的降低的e'速度(图4H)和提高的E/e'比(图4G)证明的。条和误差条显示出平均值和SEM。*P<0.05，**P<0.01，***p<0.001，相对于对照组。

图5A-5O示出了TYA-11631的口服给药改善了HFD/mTAC小鼠的葡萄糖耐受性和舒张功能障碍。在建立HFpEF表型后，将动物随机化为分别用30mg/kg TYA-11631(n＝8)或媒剂(n＝7)口服给药，每天一次，持续六周。对照组中的n＝3只小鼠用媒剂给药。相比于媒剂给药的动物，用TYA-11631进行的处理显著改善葡萄糖耐受性(图5A)，其中体重变化无差异(图5B)。超声心动图评估(代表性超声心动描记术来源的M模式跟踪，参见图5D)揭示了，TYA-11631处理未改变射血分数(图5C)，然而显著减少左心室质量(图5E)和LV壁厚度(图5F)。

另外，无创多普勒成像(代表性脉冲波多普勒(图5G)和组织多普勒(图5J)跟踪)和有创导管插入分析显示，TYA-11631处理维持改善的LV松弛和LV充盈压，如通过等容松弛时间的延长减少(图5H)、较低的E/A(图5I)和E/e'比(图5K)、提高的e'速度(图5L)和降低的末期舒张压(图5M)示出的。这些功效参数中的每一个相对于对照水平归一化。

用TYA-11631处理的HFD/mTAC小鼠显示出心脏重量(图5N)和肺重量(图5O)的趋势性减少，这表明LV肥大和肺充血分别有所改善，这与降低的充盈压一致。条和误差条显示出平均值和SEM。*P<0.05，**P<0.01，****p<0.0001。

TYA-11631抑制通常与HFpEF疾病相关的上调基因，如图6A-6H中以Z-评分呈现。实时q-PCR数据显示，TYA-11631显著抑制HFD/mTAC小鼠的心脏组织中与纤维化相关的基因Postn(图6A)、Col1a1(图6B)、Col3a1(图6C)和Col5a2(图6D)；与心脏应激相关的基因Nppb(图6E)和Myh6(图6F)；以及与炎症相关的基因Tnfα(图6G)和Casp1(图6H)的上调，这与LV结构和心脏功能的改善一致。条和误差条显示出平均值和SEM。

图7A-7L显示，与用N[w]-硝基-1-精氨酸甲酯持续八周对组成型一氧化氮合酶抑制相关的高脂肪饮食(HFD/L-NAME)的野生型(WT)小鼠出现肥胖症、高血压和舒张功能障碍，从而重现人体内的HFpEF表型。

图7A示出了通过高脂肪饮食和使用N^ω硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对组成型一氧化氮合酶的抑制组合引发的野生型小鼠的伴随性代谢和高血压应激引起的HFpEF模型诱导的示意性概述。对照组中的n＝7只小鼠以常规饮食饲喂，HFpEF模型开发组中的n＝26只小鼠处于用HFD/L-NAME进行诱导。

相比于对照小鼠，持续8周的HFD/L-NAME处理显著诱导体重增加(图7B)、高血压(图7C)和葡萄糖不耐受(图7D)。超声心动图评估表明左心室射血分数(LVEF)的持续保存(图7E)。在HFD/L-NAME小鼠中存在显著同心性左心室(LV)肥大，如通过LV质量(图7F)和心脏舒张时的LV壁厚度(图7G)的增加、没有LV室扩张(图7H)表明的。另外，伴随性地暴露于HFD/L-NAME的小鼠表现出LV舒张功能障碍与松弛受损和左心室充盈压增加的迹象，如通过无创多普勒成像测量的延长的IVRT(图7I)、减小的e'速度(图7J)和提高的E/e'比(图7K)、E/A(图7L)证明的。条和误差条显示出平均值和SEM。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001，相对于对照组。

图8A-8S显示出持续9周的TYA-11631处理改善HFD/L-NAME模型中的葡萄糖耐受性和舒张功能障碍。

图8A和图8B示出了给药5周后进行的葡萄糖耐受性测试(GTT)的结果。用TYA-11631进行的处理显著改善HFD/L-NAME小鼠的葡萄糖耐受性，但对照动物中无变化。

图8C示出了在GTT期间在指定时间点(葡萄糖注射后0分钟和30分钟)的血浆胰岛素水平，如通过敏感小鼠胰岛素检测试剂盒(目录80-INSMS-E01，ALPCO)测量。TYA-11631处理使胰岛素分泌减少，这表明葡萄糖耐受性改善可能是由于胰岛素作用/敏感性改善。

图8D和图8E分别显示出，用TYA-11631进行的处理使体重显著降低，但在用HFD/L-NAME饲喂的小鼠中食物消耗没有差异。

图8F显示出，TYA-11631不影响通过无创尾压方法测量的HFD/L-NAME小鼠的收缩压。

超声心动描记术显示出，TYA-11631处理保留射血分数(图8G)，但显著减少左心室质量(图8H)和LV壁厚度(图8I)。

无创多普勒成像和终末有创插管分析揭示了，用TYA-11631持续9周进行的处理减少了等容松弛时间的延长(图8J)、E/A(图8K)和E/e'比(图8L)、提高了e'速度(图8M)并且降低了末期舒张压(图8N)，这表明LV松弛和充盈压有所改善。另外，用TYA-11631处理的HFD/L-NAME小鼠显示出肺重量减小(图8O)，这表明肺充血有所改善，这与充盈压的降低一致。

值得注意的是，未观察到与TYA-11631相关的不良反应。用TYA-11631给药的对照动物在LV结构和功能参数以及ECG信号--QT、QRS、R振幅和PR间隔中的每一者方面均无变化(分别地，图8P、图8Q、图8R和图8S)，这进一步支持化合物的总体良好的安全性谱。条和误差条显示出平均值和SEM。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。

图9示出了来自显著改变的功能基因集的选定基因的热图。仅示出了在每个(GO)和WikiPathways(WP)数据库基因集中具有显著表达差异的基因。热图示出了与心肌、纤维化和线粒体功能相关的关键基因的校正。

图10示出了来自Gene Ontology(GO)和WikiPathways(WP)数据库的显著改变的基因集。选定类别基于归一化富集评分(NES)和FDR<0.25。对于每种病状，左侧的条表示相对于健康对照的媒剂处理的HFpEF小鼠的数据，并且右侧的条表示相对于媒剂用TYA-11631处理的HFpEF小鼠的数据。TGFβ：转化生长因子β，PDGFR：血小板源性生长因子受体，OXPHOS：氧化磷酸化。

图11A-11F示出了线粒体基因和舒张功能的相关性。在图11A-11F中，x轴上与线粒体呼吸电子传递链的不同亚基(NADH：泛醌氧化还原酶亚基)相关的基因的表达水平针对y轴上的舒张功能标志物(LVPWd和MV E/E')进行绘制。具体地，x轴上的Ndufa13(图11A)、Ndufa5(图11B)、Ndufs7(图11C)针对y轴上的舒张功能标志物LVPWd进行绘制。x轴上的Ndufa13(图11D)、Ndufa5(图11E)、Ndufs7(图11F)针对y轴上的舒张功能标志物MV E/E'进行绘制。为了更好地可视化，以对数尺度(log₂ TPM)绘制基因的表达水平。值是皮尔逊相关系数。黑色圆圈表示媒剂处理的健康动物的数据。深灰色和浅灰色圆圈分别示出了用媒剂或TYA-11631处理的HFpEF小鼠。图11G示出了用TYA-11631(3μM)处理的人iPSC源性CM(相对于DMSO对照)中的线粒体膜电位增加，并且图11H示出了所述人iPSC源性CM中的储备呼吸量增强。氧气消耗率值相对于核计数归一化。数据表示平均值±SEM。

图12A-12C示出了针对y轴上的舒张功能参数LVPWd绘制的x轴上的与纤维化相关的基因Col1a2(图12A)、Col3a1(图12B)、Fbn1(图12C)的表达水平。图12D-12F示出了针对y轴上的舒张功能参数IVRT绘制的x轴上的与纤维化相关的基因Col1a2(图12D)、Col3a1(图12E)、Fbn1(图12F)的表达水平。

图13A-13B显示HDAC6抑制剂防止人心脏成纤维细胞中由TGF-β进行的成纤维细胞活化。图13A示出了对照(从顶部开始的第一个图)、在存在TGF-β的情况下用媒剂(从顶部开始的第二个图)或在存在TGF-β的情况下用1uM TYA-11631(从顶部开始的第三个图)处理的人心脏成纤维细胞中的α-SMA(平滑肌肌动蛋白)的免疫染色。使用10ng/mlTGF-β。比例尺为50μM。图13B显示，TYA-11631(1uM)有效减少l TGF-β诱导的人心脏成纤维细胞活化，如通过α-SMA+细胞所测量的。通过盲法分析确定α-SMA染色计数。每个点表示每孔9个图像。数据表示平均值±SEM。

图14A示出了在已建立的小鼠HFpEF模型中，单剂量的TYA-11018(具有与TYA-11631的效力相似的效力的HDAC6选择性抑制剂)将葡萄糖耐受性显著提高到与恩格列净(Empagliflozin，SGLT2选择性抑制剂，10mg/kg)的水平相似的水平。图14B-14D显示出，用TYA-11018持续9周进行的慢性处理减少了LV肥大(图14B)，并且改善了舒张功能，如通过E/e'测量的(图14C)和末期舒张压LVEDP(图14D)。

实时q-PCR数据显示，相比于媒剂组，持续9周的TYA-11018处理引起对HFpEF小鼠的心脏组织中的Nppb(图14E)和Col3a1(图14F)的显著抑制。值得注意的是，TYA-11018显示出相比于恩格列净，对这些基因的抑制的优越作用。条和误差条显示出平均值。

具体实施方式

概述

本公开总体上涉及体内证明HDAC6抑制剂在代谢性疾病中的功效。具体地，如本文所公开的，当向代谢性疾病的动物模型(包含饮食诱导的肥胖症模型和饮食无关的糖尿病模型)施用HDAC6抑制剂时，代谢性疾病的各种生理指标得到改善。进一步地，本文公开了大量各种HDAC6抑制剂对HDAC6的效力。因此，本公开提供了对使用HDAC6抑制剂以治疗代谢性疾病的支持。

在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的代谢性疾病(如本文所述的任何代谢性疾病)的方法，所述方法包括施用治疗有效量的HDAC6抑制剂。在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的代谢综合征的方法，所述方法包括施用治疗有效量的HDAC6抑制剂。在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的糖尿病(diabetes，例如，糖尿病(diabetes mellitus))的方法，所述方法包括施用治疗有效量的HDAC6抑制剂。在一些方面，本公开提供了一种治疗有需要的受试者的肥胖症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的HDAC6抑制剂。

在一些实施例中，本文中提供了治疗或预防有需要的受试者的代谢性疾病(例如，代谢性疾病，例如，糖尿病或代谢综合征或肥胖症)的方法，所述方法包括向人类受试者口服施用HDAC6抑制剂。

另一方面，本公开总体上涉及在体内证明HDAC6抑制剂在射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)中的功效。具体地，如本文所公开的，当向HFpEF的动物模型施用HDAC6抑制剂时，HFpEF的各种生理指标得到改善。进一步地，本文公开了大量各种HDAC6抑制剂对HDAC6的效力。因此，本公开提供了对使用HDAC6抑制剂以治疗HFpEF的支持。

在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的方法，所述方法包括施用治疗有效量的HDAC6抑制剂。

在一些实施例中，本文中提供了治疗或预防有需要的受试者的HFpEF的方法，所述方法包括向人类受试者口服施用HDAC6抑制剂。

在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的心脏纤维化的方法，所述方法包括施用治疗有效量的HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本文中提供了治疗或预防有需要的受试者的与HFpEF相关的心脏纤维化的方法，所述方法包括向受试者(例如，人)施用(例如，口服)HDAC6抑制剂。

在一些方面，本公开提供了一种治疗或预防有需要的受试者的舒张功能障碍的方法，所述方法包括施用治疗有效量的HDAC6抑制剂。在一些实施例中，本文中提供了治疗或预防有需要的受试者的与HFpEF相关的舒张功能障碍的方法，所述方法包括向受试者(例如，人)施用(例如，口服)HDAC6抑制剂。

有利地，选择性HDAC6抑制剂的施用的毒性可能比泛HDAC抑制剂的毒性更低。不受理论束缚，HDAC6抑制剂可以(1)通过抑制白色脂肪组织中的促炎基因而起到抗炎剂的作用，所述促炎基因是导致胰岛素抵抗和代谢功能障碍的肥胖症相关炎症的主要来源，和/或(2)改善线粒体活性/功能。不受理论束缚，HDAC6抑制剂还可以：1)以肌节水平通过保护微管免受机械损伤而直接起作用，2)改善肌细胞顺应性，和/或3)促进自噬通量和误折叠且损伤的蛋白质的清除。HDAC6抑制可以直接使微管稳定化并且保护微管免受损坏并且保护Z盘。

定义

除非上下文另外指示，否则明确意图是可以以任何组合使用本文描述的本发明的各种特征。此外，本公开还设想，在一些实施例中，可以排除或省略本文阐述的任何特征或特征组合。为了说明，如果说明书指出复合物包括组分A、B和C，那么尤其期望A、B或C中的任一个或其组合可以单独地或以任何组合形式省略和否认。

包含范围的所有数字标识，例如pH、温度、时间、浓度和分子量是以1.0或0.1的增量(+)或(-)变化，视情况而定，或者可替代地以+/-15％，或者可替代地10％，或者可替代地5％，或者可替代地2％的变化的近似值。应理解的是，尽管并不总是明确地说明，但所有的数字标识的前面有术语“约”。应当理解的是，此类范围格式是为了方便和简洁而使用的，并且应该灵活地理解为包含明确指定为范围的界限的数值，而且还包含所述范围内涵盖的所有单独数值或子范围，如同每个数值和子范围被明确指定一样。例如，约1至约200范围内的比率应该理解为包含约1和约200的明确列举的界限，但也包含如约2、约3和约4等单独比率以及如约10至约50、约20至约100等子范围。还应理解，尽管并不总是明确地说明，但本文所描述的试剂仅仅是示例性的，并且其等效物在本领域中是已知的。

此外，如本文所使用的，“和/或”是指并且涵盖相关所列项中的一个或多个项的任何和所有可能的组合，以及当以替代形式(“或”)解释时组合的缺乏。

术语“一个(a)”或“一种(an)”是指一个或多个这种实体，即可以指复数指示物。因此，术语“一个”、“一种”、“一个或多个”和“至少一个”在本文可互换地使用。另外，通过不定冠词“一个”或“一种”提及“要素”并不排除存在多于一个要素的可能性，除非上下文明确地要求存在要素中的一个且仅一个要素。

在整个本申请中，术语“约”用于表示值包含对于用于测定值的装置、方法的固有的误差变化，或被测量的样品之间存在的变化。除非另外说明或从上下文中另外显而易见，否则术语“约”意指在高于或低于所报告的数值的10％内(除非此类数值将超过可能值的100％或低于0％)。当与值的范围或系列结合使用时，除非另有说明，否则术语“约”适用于所述范围的端点或所述系列中所列举的值中的每个值。如本申请中使用的，术语“约”和“大约”用作等同物。

如本文所使用的，术语“HDAC6”是指人体中由HDAC6基因编码的酶。

如本文所使用的，术语“HDAC6抑制剂”是指抑制HDAC6的至少一种酶活性的化合物。

HDAC6抑制剂可以是“选择性”HDAC6抑制剂。如本文所使用的，术语“选择性”是指对其它HDAC，在本领域中称为“同工酶”的选择性。在一些实施例中，HDAC6相对于HDAC1的选择性比率为约5至约30,0000，例如，约5、约10、约20、约30、约40、约50、约60、约70、约80、约90、约100、约1000、约2000、约3000、约4000、约5000、约6000、约7000、约8000、约9000、约10,000、约15,000、约20,000、约25,000或约30,000，包含其间的所有值和范围。

例如，HDAC6抑制剂对HDAC6的选择性可以为对HDAC的所有其它同工酶的选择性的至少100倍。在一些情况下，选择性可以通过参考另一种HDAC抑制剂，如泛HDAC抑制剂来确定，所述泛HDAC抑制剂是抑制除HDAC6之外除HDAC6之外的HDAC的抑制剂。吉维诺司他是泛HDAC6抑制剂的实例。在一些实施例中，选择性HDAC6抑制剂抑制除HDAC6之外的HDAC的效率是吉维诺司他抑制除HDAC6之外的HDAC的效率的至多1/100。

“烷基”或“烷基基团”是指具有一至十二个碳原子的完全饱和的直链或支链烃链，并且其通过单键与分子的其余部分连接。包括包含从1个至12个的任何数目的碳原子的烷基。包括至多12个碳原子的烷基是C₁-C₁₂烷基，包括至多10个碳原子的烷基是C₁-C₁₀烷基，包括至多6个碳原子的烷基是C₁-C₆烷基，并且包括至多5个碳原子的烷基是C₁-C₅烷基。C₁-C₅烷基包含C₅烷基、C₄烷基、C₃烷基、C₂烷基和C₁烷基(即，甲基)。C₁-C₆烷基包含上面关于C₁-C₅烷基描述的所有部分，但还包含C₆烷基。C₁-C₁₀烷基包含上面关于C₁-C₅烷基和C₁-C₆烷基描述的所有部分，但还包含C₇、C₈、C₉和C₁₀烷基。类似地，C₁-C₁₂烷基包含所有前述部分，但还包含C₁₁和C₁₂烷基。C₁-C₁₂烷基的非限制性实例包含甲基、乙基、正丙基、异丙基、仲丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、叔戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十一烷基和正十二烷基。除非在说明书中另外具体地说明，否则烷基基团可以任选地被取代。

“亚烷基”或“亚烷基链”是指具有一至十二个碳原子的完全饱和的、直链或支链二价烃链残基。C₁-C₁₂亚烷基的非限制性实例包含亚甲基、亚乙基、亚丙基、正亚丁基等。亚烷基链通过单键与分子的其余部分连接和通过单键与残基基团(例如，本文描述的那些)连接。亚烷基链与分子的其余部分和与残基基团的连接点可以是通过该链内的一个碳或任何两个碳。除非在说明书中另外具体地说明，否则亚烷基链可以任选地被取代。

“烯基”或“烯基基团”是指具有二至十二个碳原子且具有一个或多个碳-碳双键的直链或支链烃链。每个烯基基团通过单键与分子的其余部分连接。包括包含从2个至12个的任何数目的碳原子的烯基基团。包括至多12个碳原子的烯基是C₂-C₁₂烯基，包括至多10个碳原子的烯基是C₂-C₁₀烯基，包括至多6个碳原子的烯基是C₂-C₆烯基，并且包括至多5个碳原子的烯基是C₂-C₅烯基。C₂-C₅烯基包含C₅烯基、C₄烯基、C₃烯基和C₂烯基。C₂-C₆烯基包含上面关于C₂-C₅烯基描述的所有部分，但还包含C₆烯基。C₂-C₁₀烯基包含上面关于C₂-C₅烯基和C₂-C₆烯基描述的所有部分，但还包含C₇、C₈、C₉和C₁₀烯基。类似地，C₂-C₁₂烯基包含所有前述部分，但还包含C₁₁和C₁₂烯基。C₂-C₁₂烯基的非限制性实例包含乙烯基(ethenyl，乙烯基(vinyl))、1-丙烯基、2-丙烯基(propenyl，烯丙基(allyl))、异丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、1-庚烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、5-庚烯基、6-庚烯基、1-辛烯基、2-辛烯基、3-辛烯基、4-辛烯基、5-辛烯基、6-辛烯基、7-辛烯基、1-壬烯基、2-壬烯基、3-壬烯基、4-壬烯基、5-壬烯基、6-壬烯基、7-壬烯基、8-壬烯基、1-癸烯基、2-癸烯基、3-癸烯基、4-癸烯基、5-癸烯基、6-癸烯基、7-癸烯基、8-癸烯基、9-癸烯基、1-十一烯基、2-十一烯基、3-十一烯基、4-十一烯基、5-十一烯基、6-十一烯基、7-十一烯基、8-十一烯基、9-十一烯基、10-十一烯基、1-十二烯基、2-十二烯基、3-十二烯基、4-十二烯基、5-十二烯基、6-十二烯基、7-十二烯基、8-十二烯基、9-十二烯基、10-十二烯基和11-十二烯基。除非在说明书中另外具体地说明，否则烷基基团可以任选地被取代。

“亚烯基”或“亚烯基链”是指具有一种或多种烯烃和二至十二个碳原子的不饱和的、直链或支链二价烃链残基。C₂-C₁₂亚烯基的非限制性实例包含亚乙基、亚丙基、正亚丁基等。亚烯基链通过单键与分子的其余部分连接和通过单键与残基基团(例如，本文描述的那些)连接。亚烯基链与分子的其余部分和与残基基团的连接点可以是通过该链内的一个碳或任何两个碳。除非在说明书中另外具体地说明，否则亚烯基链可以任选地被取代。

“炔基”或“炔基基团”是指具有二至十二个碳原子且具有一个或多个碳-碳三键的直链或支链烃链。每个炔基基团通过单键与分子的其余部分连接。包括包含从2个至12个的任何数目的碳原子的炔基基团。包括至多12个碳原子的炔基是C₂-C₁₂炔基，包括至多10个碳原子的炔基是C₂-C₁₀炔基，包括至多6个碳原子的炔基是C₂-C₆炔基，并且包括至多5个碳原子的炔基是C₂-C₅炔基。C₂-C₅炔基包含C₅炔基、C₄炔基、C₃炔基和C₂炔基。C₂-C₆炔基包含上面关于C₂-C₅炔基描述的所有部分，但还包含C₆炔基。C₂-C₁₀炔基包含上面关于C₂-C₅炔基和C₂-C₆炔基描述的所有部分，但还包含C₇、C₈、C₉和C₁₀炔基。类似地，C₂-C₁₂炔基包含所有前述部分，但还包含C₁₁和C₁₂炔基。C₂-C₁₂烯基的非限制性实例包含乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基等。除非在说明书中另外具体地说明，否则烷基基团可以任选地被取代。

“亚炔基”或“亚炔基链”是指具有一种或多种炔烃和二至十二个碳原子的不饱和的、直链或支链二价烃链残基。C₂-C₁₂亚烷基的非限制性实例包含亚乙基、亚丙基、正亚丁基等。亚炔基链通过单键与分子的其余部分连接和通过单键与残基基团(例如，本文描述的那些)连接。亚炔基链与分子的其余部分和与残基基团的连接点可以是通过链内具有合适化合价的任何两个碳。除非在说明书中另外具体地说明，否则亚炔基链可以任选地被取代。

“烷氧基”是指式-OR_a的基团，其中R_a是如上定义的含有一个至十二个碳原子的烷基、烯基或炔基。除非在说明书中另外具体地说明，否则烷氧基基团可以任选地被取代。

“芳基”是指包括氢、6至18个碳原子和至少一个芳族环的烃环体系，并且其通过单键与分子的其余部分连接。为了本公开的目的，芳基可以是单环、二环、三环或四环环体系，其可以包含稠合的或桥连的环体系。芳基包含但不限于从醋蒽烯、苊烯、醋菲烯、蒽、环戊并环庚五烯、苯、、荧蒽、芴、不对称引达省、对称引达省、茚满、茚、萘、非那烯、菲、七曜烯、芘和苯并菲衍生出的芳基。除非在说明书中另外具体地说明，否则“芳基”可以任选地被取代。

“碳环基”或“碳环”是指环结构，其中形成环的原子各自为碳，并且其通过单键与分子的其余部分连接。碳环在环中可以包括3至20个碳原子。碳环包含如本文中定义的芳基和环烷基、环烯基和环炔基。除非在说明书中另外具体地说明，否则碳环基基团可以任选地被取代。

“碳环基烷基”是指式-R_b-R_d的残基，其中R_b是如上定义的亚烷基、亚烯基或亚炔基基团，且R_d是如上定义的碳环基残基。除非在说明书中另外具体地说明，否则碳环基烷基基团可以任选地被取代。

“环烷基”是指仅由碳和氢原子组成的稳定的非芳族单环或多环完全饱和烃，其可以包含稠合的或桥连的环体系，具有三至二十个碳原子(例如，具有三至十个碳原子)，并且其通过单键与分子的其余部分连接。单环环烷基包含，例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。多环环烷基包含，例如，金刚烷基、降冰片基、十氢萘基、7,7-二甲基-二环[2.2.1]庚烷基等。除非在说明书中另外具体地说明，否则环烷基基团可以任选地被取代。

“环烯基”是指仅由碳和氢原子组成的稳定的非芳族单环或多环烃，具有一个或多个碳-碳双键，其可以包含稠合的或桥连的环体系，具有三至二十个碳原子，优选地具有三至十个碳原子，并且其通过单键与分子的其余部分连接。单环环烯基包含，例如，环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环辛烯基等。多环环烯基包含，例如，双环[2.2.1]庚-2-烯基等。除非在说明书中另外具体地说明，否则环烯基基团可以任选地被取代。

“环炔基”是指仅由碳和氢原子组成的稳定的非芳族单环或多环烃，具有一个或多个碳-碳三键，其可以包含稠合的或桥连的环体系，具有三至二十个碳原子，优选地具有三至十个碳原子，并且其通过单键与分子的其余部分连接。单环环炔基包含，例如，环庚炔基、环辛炔基等。除非在说明书中另外具体地说明，否则环炔基基团可以任选地被取代。

“卤代烷基”是指被一个或多个卤素残基取代的如上定义的烷基，例如，三氟甲基、二氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1,2-二氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1,2-二溴乙基等。除非在说明书中另外具体地说明，否则卤代烷基基团可以任选地被取代。

“杂环基”或“杂环”是指稳定的饱和的、不饱和的或芳族的3至20元环，其由二至十九个碳原子和一至六个选自由氮、氧和硫组成的组的杂原子组成，并且其通过单键与分子的其余部分连接。杂环基或杂环包含杂芳基、杂环基烷基、杂环基烯基和杂环基炔基。除非说明书中另有特定说明，否则杂环基可以为单环、双环、三环或四环体系，所述环体系可以包含稠环或桥环体系；并且杂环基中的氮、碳或硫原子可以任选地被氧化；氮原子可以任选地被季铵化；并且杂环基可以是部分或完全饱和的。这样的杂环基的实例包含但不限于二氧杂环戊烷基、噻吩基[1,3]二硫杂环己基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、噁唑烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、三硫杂环己基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、硫吗啉基、1-氧代-硫代吗啉基和1,1-二氧代-硫代吗啉基。除非在说明书中另外具体地说明，否则杂环基基团可以任选地被取代。

“杂芳基”是指包括氢原子、一个至十九个碳原子、一个至六个选自由氮、氧和硫组成的组的杂原子、至少一个芳香族环，并且通过单个键与分子的其余部分连接的5元至20元环体系。出于本公开的目的，杂芳基可以为单环、双环、三环或四环环体系，所述环体系可以包含稠环或桥环体系；并且杂芳基中的氮、碳或硫原子可以任选地被氧化；氮原子可以任选地被季铵化。实例包含但不限于氮杂环庚三烯基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并吲哚基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[b][1,4]二氧杂环庚三烯基、1,4-苯并二氧杂环己烷基、苯并萘并呋喃基、苯并噁唑基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并二氧杂环己烯基、苯并吡喃基、苯并吡喃酮基、苯并呋喃基、苯并呋喃酮基、苯并噻吩基(苯并噻吩基)、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、噌啉基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、呋喃基、呋喃酮基、异噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、吲哚啉基、异吲哚啉基、异喹啉基、吲嗪基、异噁唑基、萘啶基、噁二唑基、2-氧代氮杂环庚三烯基、噁唑基、氧杂环丙基、1-氧代吡啶基、1-氧代嘧啶基、1-氧代吡嗪基、1-氧代哒嗪基、1-苯基-1H-吡咯基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、酞嗪基、喋啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、奎宁环基、异喹啉基、四氢喹啉基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基和噻吩基(即噻吩基)。除非在说明书中另外具体地说明，否则杂芳基基团可以任选地被取代。

“杂环基烷基”是指式-R_b-R_d的残基，其中R_b是如上定义的亚烷基、亚烯基或亚炔基基团，且R_d是如上定义的杂环基残基。除非在说明书中另外具体地说明，否则杂环烷基烷基可以任选地被取代。

本文所使用的术语“被取代”意指其中至少一个氢原子通过键被替代为非氢原子的本文所描述的任何基团(例如，烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳基、芳烷基、碳环基、环烷基、环烯基、环炔基、卤代烷基、杂环基和/或杂芳基)，所述非氢原子例如但不限于：卤素原子，如F、Cl、Br和I；如羟基、烷氧基和酯基等基团中的氧原子；如硫醇基、硫代烷基、砜基团、磺酰基和亚砜基团等基团中的硫原子；如胺、酰胺、烷基胺、二烷基胺、芳基胺、烷基芳基胺、二芳基胺、N-氧化物、酰亚胺和烯胺等基团中的氮原子；如三烷基甲硅烷基、二烷基芳基甲硅烷基、烷基二芳基甲硅烷基和三芳基甲硅烷基等基团中的硅原子；以及各种其它基团中的其它杂原子。“被取代”还意指上述基团中其中一个或多个氢原子通过更高阶的键(例如，双键或三键)被替代为杂原子的任何基团，所述杂原子是如氧代基团、羰基、羧基和酯基中的氧；以及如亚胺、肟、腙和腈等基团中的氮。例如，“被取代”包含上述基团中其中一个或多个氢原子被-NR_gR_h、-NR_gC(＝O)R_h、-NR_gC(＝O)NR_gR_h、-NR_gC(＝O)OR_h、-NR_gSO₂R_h、-OC(＝O)NR_gR_h、-OR_g、-SR_g、-SOR_g、-SO₂R_g、-OSO₂R_g、-SO₂OR_g、＝NSO₂R_g和SO₂NR_gR_h替代的任何基团。“被取代”还意指上述基团中其中一个或多个氢原子被-C(＝O)R_g、-C(＝O)OR_g、-C(＝O)NR_gR_h、-CH₂SO₂R_g、-CH₂SO₂NR_gR_h替代的任何基团。在前述内容中，R_g和R_h是相同或不同且独立地是氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷基氨基、硫代烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烯基、环炔基、环烷基烷基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、杂环基、N-杂环基、杂环基烷基、杂芳基、N-杂芳基和/或杂芳基烷基。“被取代”进一步意指上述基团中的任一个，其中一个或多个氢原子被与氨基、氰基、羟基、亚氨基、硝基、氧代、硫代、卤素、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷基氨基、硫代烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烯基、环炔基、环烷基烷基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、杂环基、N-杂环基、杂环基烷基、杂芳基、N-杂芳基和/或杂芳基烷基基团的键替代。另外，前述取代基中的每一者还可以任选地被上述取代基中的一者或多者取代。

如本文所使用的，符号(在下文中可以被称作“连接点键”)表示作为两个化学实体之间的连接点的键，其中一个被描绘为与连接点键连接，且其中另一个不被描绘为与连接点键连接。例如，/>指示，化学实体“XY”经由连接点键与另一个化学实体键合。此外，可以通过推断来指定与未描绘的化学实体的特定连接点。例如，化合物CH₃-R³(其中R³是H)或/>推断，当R³是“XY”时，连接点键是与R³被描述为与CH₃键合的键相同的键。

如本文所使用的，术语“治疗”是指用药剂作用于疾病、病症或病状以减少或改善所述疾病、病症、病状和/或者其症状的有害或任何其它不期望的影响。

如本文所使用的，术语“预防”是指降低疾病、病症、病状和/或症状的有害或任何其它不期望的影响的发生率或发展风险，或延迟其发展。

“施用(Administration)”、“施用(administering)”等是指由医疗专业人员或通过由受试者进行自我施用向受试者施用，以及间接施用，所述间接施用可以是开出本发明的组合物的处方的行为。通常，施用有效量，该量可由本领域技术人员确定。可以使用任何施用方法。对受试者的施用可以通过以下来实现：例如口服施用、以液体或固体形式，例如以胶囊或片剂形式；血管内注射；心肌内递送；或其它合适的施用形式。

如本文所使用的，术语“有效量”等是指足以诱导期望的生理结果(例如，心脏功能改善、死亡率降低或住院的风险/发生率降低、运动能力改善或与心力衰竭相关的一种或多种生物标志物，如BNP的表达减少)的量。有效量可以分一次或多次施用、施加或剂量进行施用。此类递送取决于许多变量，包含要使用单个剂量单位的时间、组合物的生物利用度、施用途径等。然而，应当理解，用于任何特定受试者的组合物的具体量取决于多种因素，包含所采用的特定药剂的活性，受试者的年龄、体重、总体健康状况、性别和饮食、施用时间、排泄速率、组合物组合、所治疗的具体疾病的严重程度和施用形式。

如本文所使用的，术语“受试者”或“患者”是指任何动物，如驯养动物、动物园动物或人。“受试者”或“患者”可以是哺乳动物，如狗、猫、马、家畜、动物园动物或人。受试者或患者还可以是任何驯养动物，如鸟、宠物或农场动物。“受试者”和“患者”的具体实例包含但不限于患有代谢性疾病(例如，肥胖症)的个体和具有代谢性疾病相关特征或症状的个体。“受试者”和“患者”的具体实例还包含但不限于患有心脏疾病或病症的个体和具有心脏疾病相关特征或症状的个体。

本文采用短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内，适合与人和动物组织接触使用，而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，与合理的效益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。

术语“药学上可接受的盐”包含通过使作为碱起作用的活性化合物与无机或有机酸反应形成盐而获得的那些，例如，盐酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、樟脑磺酸、草酸、马来酸、琥珀酸、柠檬酸、甲酸、氢溴酸、苯甲酸、酒石酸、富马酸、水杨酸、扁桃酸、碳酸等的盐。本领域技术人员将进一步认识到，通过多种已知方法中的任一种使所述化合物与适当的无机或有机酸反应，可以制备酸加成盐。

如本文所使用的，术语“恢复”是指将生物化学或生理参数的水平增加到在疾病或病状发展之前在受试者中观察到的水平，或增加到在没有疾病或病状的受试者中观察到的水平。

如本文所使用的，术语“降低”是指降低生物化学或生理参数的水平。

如本文所使用的，术语“代谢性疾病”是指由于过度营养摄入或由于身体未能适当地代谢营养物而导致的病状。代谢性疾病包含但不限于肥胖症。其是一系列一起发生的与心脏疾病、2型糖尿病和中风相关的病状。这些病状包含高血压、高血糖、身体脂肪过多和胆固醇或甘油三酯水平异常。

术语“肥胖症”是指身体脂肪过多的病状。肥胖症可能增加糖尿病、心脏疾病、中风和关节炎的风险。高于被视为对于给定身高来说健康的体重的体重被描述为过重或肥胖症。身体质量指数(BMI)是用于过重和肥胖症的筛选工具。BMI是以千克为单位的人的体重除以以米为单位的身高的平方。BMI计算器可在www.cdc.gov以obesity/adult/defining.html获得。在各个实施例中，受试者的BMI可以为25、30、35、40或更高，如BMI为25-30、25-30或25-40。在一些情况下，受试者可能患有严重肥胖症(还被称为3类肥胖症)，所述严重肥胖被定义为BMI为40或更大。肥胖症是一种慢性疾病，也是其它疾病，如心脏疾病、高血压、中风、糖尿病等的风险因素。

在一些实施例中，本公开的方法减少、预防或改善代谢性疾病的一种或多种症状。代谢性疾病的症状包含葡萄糖不耐受、胰岛素抵抗、高葡萄糖水平和脂肪组织中的炎症。

如本文所使用的，术语“心力衰竭”是指心脏无法泵送足够的血液以满足身体需要的病状。

“心力衰竭(HF)”是复杂的临床综合征，其可以由在不过度增加左心室充盈压的情况下导致全身灌注不足以满足身体的代谢需求的任何结构性或功能性心血管病症引起。其特征在于特定症状，如呼吸困难和疲劳，以及体征，如流体滞留。如本文所使用的，“慢性心力衰竭”或“充血性心力衰竭”或“CHF”可互换地指持续或持久形式的心力衰竭。CHF的常见风险因素包含年龄大、糖尿病、高血压和超重。根据左心室的收缩功能，CHF被广泛分类为射血分数(HFrEF和HFpEF)降低或保留的HF。术语“心力衰竭”并不意味着心脏已经停止或完全衰竭，而是比健康人的正常心脏弱。在一些情况下，病状可以是轻度的，引起症状，所述症状可能仅在运动时明显，在其它情况下，病状可能更严重，引起可能危及生命的症状，即使在休息时也是如此。慢性心力衰竭的最常见症状包含呼吸急促、疲劳、腿部和脚踝肿胀、胸部疼痛和咳嗽。在一些实施例中，本公开的方法减少、预防或改善患有CHF(例如，HFpEF)或有患上CHF的风险的受试者的CHF(例如，HFpEF)的一种或多种症状。在一些实施例中，本公开提供了治疗CHF和可能导致CHF的病状的方法。

如本文所使用的，“急性心力衰竭”或“失代偿性心力衰竭”可互换地指反映心脏无法以与正常充盈压下的身体需要相称的速率泵送血液的体征和症状恶化的综合征。AHF通常在数天至数周的过程内逐渐发展，并且之后由于这些体征或症状的严重性而发生失代偿，需要急迫或紧急治疗。AHF可以是心脏的收缩或舒张功能的重大紊乱或异常静脉或动脉血管收缩的结果，但通常表现出多个因素的相互作用，包含体积过载。患有AHF的大多数患者患有慢性心力衰竭(CHF)的失代偿，并且因此CHF的病理生理学、表现和诊断的大部分讨论与对AHF的理解直接相关。在其它情况下，AHF由心脏损伤或损害心脏功能的事件引起，如急性心肌梗塞、重度高血压、心脏瓣的损伤、心律异常、心脏炎症或感染、毒素和药物。在一些实施例中，本公开的方法减少、预防或改善患有AHF或有患上AHF的风险的受试者的AHF的一种或多种症状。在一些实施例中，本公开提供了治疗AHF和可能导致AHF的病状的方法。AHF可以是与心肌梗塞相关的缺血的结果。

在一些实施例中，本公开的方法减少、预防或改善患有与HFpEF相关的心力衰竭或有患上与HFpEF相关的心力衰竭的风险的受试者的心力衰竭的一种或多种症状。术语“射血分数保留的心力衰竭”或“舒张性心力衰竭”可互换使用，通常是指特征在于心力衰竭的迹象和症状以及大于50％的左心室射血分数(LVEF)的心力衰竭的形式。所述术语还可涵盖与LVEF的中度减小(40％至49％)相关的心力衰竭。在一些实施例中，HFpEF包括与CHF相关的HFpEF。在一些实施例中，HFpEF包括与AHF相关的HFpEF。

HFpEF在老年患者和女性中更常见。典型症状包含疲劳、虚弱、气喘、整形呼吸暂停、阵发性夜间气喘、水肿。HFpEF(例如，与CHF相关的HFpEF)的体征可以包含S3心音、移位的心尖脉冲和颈静脉扩张。正常射血分数伴舒张功能受损的超声心动图结果证实了诊断。利钠肽(例如，BNP或NT-proBNP)的测量可用于评估在走动情况下患有疑似射血分数保留的心力衰竭的患者。

如本文所使用的，术语“有害突变”是指降低基因功能的突变。有害突变可以包含错义突变、编码区中的缺失或插入、影响基因表达或基因剪接的非编码突变，或其它。有害突变包含基因的部分或全部缺失。如本文所使用的，术语可以指基因中的纯合或杂合突变，条件是突变对载体表现出表型效应。

如本文所使用的，术语“心脏舒张时的左心室内径”或“LVIDd”是指心脏舒张时的左心室大小。

如本文所使用的，术语“心脏收缩时的左心室内径”或“LVIDs”是指心脏收缩时的左心室大小。

如本文所使用的，术语“左心室质量”是指左心室的重量。

如本文所使用的，术语“射血分数”是指每次收缩时从左心室中跳出的血液量，表达为左心室中血液总量的百分比。

本公开的详细描述仅出于读者的方便而被分成各个部分，并且在任何部分中发现的公开内容可以与在另一个部分中的公开内容组合。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。虽然类似或等效于本文所描述的那些方法和材料的任何方法和材料也可以用于本发明的实践或测试，但现在描述优选的方法和材料。

治疗或预防代谢性疾病

本文中提供了用HDAC6抑制剂治疗或预防代谢性疾病的方法。

治疗或预防射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)

本文中提供了用HDAC6抑制剂治疗或预防射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的方法。

HDAC6抑制剂

组蛋白去乙酰化酶(“HDAC”)是一类具有去乙酰化酶活性的酶，具有宽范围的基因组和非基因组底物。基于序列同一性和催化活性，分类了十一种锌依赖性的HDAC酶(Haberland等人,2009)。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂已被描述为肿瘤学(Yoon和Eom,2016)、神经变性(Butler等人,2010)、自身免疫性疾病(Choi等人,2018)、化学疗法诱导的周围神经病(Krukowski等人,2017)和心脏适应症(Zhang等人,2002)中的治疗剂。鉴于核HDAC在调节基因转录中的作用，已知抑制这类靶标在各种细胞类型中具有多效性效应；最显著的是导致细胞毒性。因此，限制泛HDAC抑制剂的毒性已经成为这类化合物的广泛使用的主要障碍。另外，已经在临床上观察到泛HDAC抑制剂(例如SAHA和帕比司他(Panabinostat))的显著不良作用，包含疲劳、恶心、腹泻和血小板减少症(Subramanian等人,2010)。

在心脏适应症领域，大多数研究已经使用泛HDAC抑制剂(例如SAHA、TSA和吉维诺司他)来处理患有收缩功能障碍的压力过载的啮齿动物模型，包含横向主动脉狭窄(TAC)(Cao等人,2011)、在Dahl盐敏感大鼠的高血压(Jeong等人,2018)和心肌梗塞(Nagata等人,2019)。另外，HDAC6选择性抑制剂已被用于改善压力过载的啮齿动物模型的LV舒张功能障碍(Demos-Davies等人,2014)，并且提供了针对转基因心肌病小鼠模型中的蛋白质毒性的保护(McLendon等人,2014)。然而，均伴随有射血分数降低并且表现出HFrEF表型的压力过载啮齿动物模型中的这些实验不能预测对HFpEF的处理。通过常规横向主动脉收缩介导的压力过载诱导心脏肥大，随后是射血分数降低的心力衰竭(HFrEF)而不是HFpEF(Mohammadi等人,2021)。HFpEF不同于HFrEF。两种形式的心力衰竭在病理生理机制和心肌丧失/功能障碍的程度、腔室的重塑模式和超结构水平以及对治疗干预的应答方面在根本上是不同的。(Schiattarella等人,2020)。

HDAC6属于IIb类酶并含有两个催化结构域、一个泛素结合结构域和一个细胞质保留结构域(Haberland等人,2009)。HDAC6主要是细胞质酶并且其最佳表征的底物包含微管蛋白、HSP90和皮层肌动蛋白(Brindisi等人,2020)。

HDAC6的药理学抑制会阻断其去乙酰化酶活性，从而导致其底物(最特别是微管蛋白)的高度乙酰化(Hubbert等人,2002)。

由于HDAC6底物的细胞质性质以及降低的对核靶标(包含H3K9和c-MYC)和对总转录的影响，已知HDAC6选择性抑制剂具有降低的细胞毒性(Nebbioso等人,2017)。

氧肟酸是锌螯合剂，并已经广泛用于开发泛和HDAC选择性抑制剂。然而，大多数基于异羟肟酸的HDAC抑制剂缺乏期望的选择性，或者表现出差的生物利用度和差的药代动力学特性(Butler等人,2010；Santo等人,2012)。

各种选择性HDAC6在本领域中是已知的。另外，使用已知方法筛选化合物以鉴定另外的选择性HDAC6抑制剂是常规的。具体地，给定已知的HDAC6抑制剂，本领域技术人员可以鉴定化合物的哪些类似物具有选择性HDAC6活性。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是如RNA沉默剂(例如，siRNA)等基因沉默剂。在一些实施例中，HDAC6抑制剂不是基因沉默剂。在一些实施例中，HDAC6是小分子HDAC6抑制剂。

已知的HDAC6抑制剂

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是CAY10603、吐巴辛、利可司他(ACY-1215)、西他司他(ACY-241)、ACY-738、QTX-125、CKD-506、nexturastatA、妥巴斯汀A或HPOB(在表1中列出)或其类似物。

表1

另外的说明性HDAC6抑制剂在以下中提供：美国专利公开第US8227516B2号、第US20100292169A1号、第US20070207950A1号、第US8222423B2号、第US20100093824A1号、第US20100216796A1号、第US8673911B2号、第US8217076B2号、第US8440716B2号、第US20110195432A1号、第US8624040B2号、第US9096518B2号、第US8431538B2号、第US20120258993A1号、第US8546588B2号、第US8513421B2号、第US20140031368A1号、第US20120015943A1号、第US20120015942A1号、第US20140243335A1号、第US20130225543A1号、第US8471026B2号、第US9238028B2号、第US8765773B2号、第USRE47009E1号、第US20140294856A1号、第US9512083B2号、第US9670193B2号、第US9345905B2号、第US9409858B2号、第US9663825B2号、第US20150119327A1号、第US20150250786A1号、第US10041046B2号、第US9586973B2号、第US20160069887A1号、第US20140357512A1号、第US9751832B2号、第US20160228434A1号、第US20150105358A1号、第US10660890B2号、第US20160271083A1号、第US20150176076A1号、第US20200405716A1号、第US9890136B2号、第US10287255B2号、第US20170173083A1号、第US10016421B2号、第US9987258B2号、第US10568854B2号、第US10106540B2号、第US10266489B2号、第US9993459B2号、第US10183934B2号、第US10494354B2号、第US10494353B2号、第US10112915B2号、第US10377726B2号、第US10829462B2号、第US10829461B2号、第US20210009539A1号、第US20210009538A1号、第US10239845B2号、第US10472337B2号、第US10479772B2号、第US10464911B2号、第US10584117B2号、第US10538498B2号、第US10011611B2号、第US10494355B2号、第US10040769B2号、第US10858323B2号、第US10654814B2号、第US20190209559A1号、第US20190185462A1号、第US20190192521A1号、第US20190321361A1号、第US20200046698A1号、第US20190262337A1号、第US20190282573A1号、第US20190282574A1号、第US20200071288A1号、第US10745389B2号、第US10357493B2号、第US20200171028A1号、第US20200054773A1号、第US20200308174A1号、第US20200155549A1号、第US10435399B2号、第US20200216563A1号、第US20190216751A1号、第US20200339569A1号、第US20210078963A1号、第US20210077487A1号、第US20190270733A1号、第US20190270744A1号、第US20200022966A1号和第US20210094944A1号，所述美国专利公开出于鉴定可以用于本文所公开的方法中的HDAC6抑制剂而并入本文。在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是TYA-631或其类似物。

氟烷基-噁二唑衍生物

在一些实施例中，HDAC6抑制剂是氟烷基-噁二唑衍生物。可以用作HDAC6抑制剂的说明性氟烷基-噁二唑衍生物包含本文所描述的那些和公开为WO2021127643A1的国际专利申请第PCT/US2020/066439号中所描述的那些，所述文献的内容通过引用整体并入本文。公开为WO2021127643A1的PCT/US2020/066439也描述了此类化合物的合成方法，所述国际专利申请通过引用具体并入本文。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是式(I)化合物：

其中

R¹选自由以下组成的组：

/>

n选自0、1和2。

在式(I)的一些实施例中，n是0。在一些实施例中，n是1。在一些实施例中，n是2。在一些实施例中，n是0或1。在一些实施例中，n是1或2。在一些实施例中，n是0或2。

在式(I)的一些实施例中，X¹是O。在一些实施例中，X¹是S。在一些实施例中，X¹是NH。在一些实施例中，X¹是NR⁶。在一些实施例中，X¹选自由以下组成的组：S、O和NR⁶。在一些实施例中，X¹选自由以下组成的组：S、O和NCH₃。在一些实施例中，X¹是S或O。在一些实施例中，X¹是S或NR⁶。在一些实施例中，R⁶为C₁-C₆烷基。

在式(I)的一些实施例中，R²和R³是H。

在式(I)的一些实施例中，Y是N、CR²或O。在一些实施例中，Y是N或O。在一些实施例中，Y是N。在一些实施例中，Y是CR²。在一些实施例中，Y是O。

在一些实施例中，R⁴和R⁵独立地选自由以下组成的组：H、–(SO₂)R²、–(SO₂)NR²R³、–(CO)R²、–(CONR²R³)、芳基、芳基杂芳基、杂芳基、亚烷基芳基、环烷基、亚烷基环烷基、杂环基、亚烷基杂环基、烷基、卤代烷基和烷氧基，其中的每一者任选地被取代，或者R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成环烷基或杂环基，其中的每一者任选地被取代。

在式(I)的一些实施例中，R⁴选自由以下组成的组：-C(O)-烷基、-C(O)-环烷基、-C(O)-芳基、-C(O)-杂芳基、-(SO₂)NR²R³、-SO₂-烷基和-SO₂-环烷基，其各自任选地被取代。在一些实施例中，R⁴选自由以下组成的组：-C(O)-烷基、-C(O)-环烷基、-SO₂-烷基、-SO₂-卤代烷基、-SO₂环烷基和-(SO₂)NR²R³，其各自任选地被取代。在一些实施例中，芳基任选地被一个或多个卤素取代。在式(I)的一些实施例中，R⁴选自由以下组成的组：-SO₂烷基、-SO₂卤代烷基或-SO₂环烷基。在式(I)的一些实施例中，R⁴选自由以下组成的组：–SO₂Me、–SO₂Et和–SO₂-cPr。在一些实施例中，R²和R³各自独立地是-C_1-5烷基。在一些实施例中，R²和R³与其所连接的氮原子一起形成任选地经取代的杂环基。在一些实施例中，所述任选地经取代的杂环基是吗啉、硫代吗啉或硫代吗啉1,1-二氧化物。

在式(I)的一些实施例中，R⁵是芳基、杂芳基或环烷基，其中的每一者任选地被取代。

在一些实施例中，R⁵是芳基。在一些实施例中，芳基是其中R^b是选自由以下组成的组的一种或多种：卤素、卤代烷基、烷基、O烷基、O卤代烷基、亚烷基-O卤代烷基、环烷基、杂环基芳基、杂芳基、烷基腈或CN。在一些实施例中，所述卤代烷基选自CF₃、CF₂CH₃、CHF₂或CH₂F。在一些实施例中，所述烷基是-C_1-5烷基。在一些实施例中，-C_1-5烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基。在一些实施例中，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基任选地被OH取代。在一些实施例中，所述环烷基是C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述芳基是苯基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子的5或6元杂芳基。在一些实施例中，所述杂环基是具有1或2个选自N、O和S的杂原子的4至7元杂环基。在一些实施例中，O卤代烷基选自OCF₃、OCHF₂或OCH₂F。在一些实施例中，所述O烷基是O-甲基、O-乙基、O-丙基、O-异丙基、O-丁基或O-叔丁基。

在一些实施例中，R⁵是杂芳基。在一些实施例中，杂芳基是任选地经取代的5至14元杂芳基。在一些实施例中，杂芳基是具有1、2或3个选自由N、O和S组成的组的杂原子的任选地经取代的5至14元杂芳基。在一些实施例中，所述任选地经取代的5至14元杂芳基选自由以下组成的组：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、噌啉基、吲嗪基、氮杂吲嗪基、吲哚基、氮杂吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、咪唑并吡啶基、咪唑并吡嗪基和苯并咪唑基。在一些实施例中，所述任选地经取代的5至14元杂芳基选自由以下组成的组：吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、苯并噁唑基、咪唑并吡啶基和咪唑并吡嗪基。在一些实施例中，R⁵是其中R^b是选自由以下组成的组的一种或多种：卤素、卤代烷基、烷基、O烷基、O卤代烷基、亚烷基-O卤代烷基、环烷基、杂环基芳基、杂芳基、烷基腈或CN。在一些实施例中，所述卤代烷基选自CF₃、CF₂CH₃、CHF₂或CH₂F。在一些实施例中，所述烷基是-C_1-5烷基。在一些实施例中，-C_1-5烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基。在一些实施例中，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基任选地被OH取代。在一些实施例中，所述环烷基是C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述芳基是苯基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子的5或6元杂芳基。在一些实施例中，所述杂环基是具有1或2个选自N、O和S的杂原子的4至7元杂环基。在一些实施例中，O卤代烷基选自OCF₃、OCHF₂或OCH₂F。在一些实施例中，所述O烷基是O-甲基、O-乙基、O-丙基、O-异丙基、O-丁基或O-叔丁基。

在一些实施例中，R⁵是环烷基。在一些实施例中，环烷基是环丙基、环丁基、环戊基或环己基，其中的每一者任选地被取代。在一些实施例中，所述任选地经取代的环烷基是

在一些实施例中，R⁵选自由以下组成的组：苯基、3-氯苯基、3-氯-4-氟苯基、3-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基和2,6-二氟苯基。在一些实施例中，R⁵是环丙基。在一些实施例中，R⁵选自由吡啶-3-基和1-甲基吲唑-6-基组成的组。在一些实施例中，R⁵选自由以下组成的组：H、苯基、3-氯苯基、3-氯-4-氟苯基、3-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基、环丙基、吡啶-3-基、1-甲基吲唑-6-基、3,3-二氟环丁基和4,4-二氟环己基。在一些实施例中，R⁵是3-氯苯基。在一些实施例中，R⁵是H。在一些实施例中，R⁵是在一些实施例中，R⁵为––CH₂CH₂Ph。在一些实施例中，R⁵选自由以下组成的组：H、芳基、杂芳基、亚烷基芳基、环烷基、杂环基、烷基和卤代烷基，其各自任选地被取代，或者R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成任选地经取代的杂环基。

在式(I)的一些实施例中，R⁵任选地被一个或多个卤素、卤代烷基、烷基、O烷基、O卤代烷基、环烷基、杂环基芳基或杂芳基取代。在一些实施例中，所述卤代烷基选自CF₃、CHF₂或CH₂F。在一些实施例中，所述烷基是-C_1-5烷基。在一些实施例中，-C_1-5烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基。在一些实施例中，所述环烷基是C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述芳基是苯基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子的5或6元杂芳基。在一些实施例中，所述杂环基是具有1或2个选自N、O和S的杂原子的4至7元杂环基。在一些实施例中，O卤代烷基选自OCF₃、OCHF₂或OCH₂F。在一些实施例中，所述O烷基是O-甲基、O-乙基、O-丙基、O-异丙基、O-丁基或O-叔丁基。

在式(I)的一些实施例中，R⁴是H或-C_1-5烷基并且R⁵是芳基。在一些实施例中，R⁴是H或-C_1-5烷基并且R⁵是杂芳基。在一些实施例中，R⁴是H或-C_1-5烷基并且R⁵是环烷基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是甲基、乙基或丙基。在一些实施例中，所述-C_1-5烷基是甲基。在一些实施例中，所述芳基是任选地经取代的苯基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自由N、O和S组成的组的杂原子的5至14元杂芳基。在一些实施例中，所述任选地经取代的5至14元杂芳基选自由以下组成的组：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、噌啉基、吲嗪基、氮杂吲嗪基、吲哚基、氮杂吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、咪唑并吡啶基、咪唑并吡嗪基和苯并咪唑基。在一些实施例中，所述杂芳基是5或6元杂芳基环。在一些实施例中，所述5元杂芳基任选地被吡唑基、咪唑基或噁唑基取代。在一些实施例中，所述6元杂芳基任选地被吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基取代。在一些实施例中，环烷基任选地被环丙基、环丁基、环戊基或环己基取代。在一些实施例中，芳基任选地被一个或多个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷基、O-C_1-6烷基、O-C_1-6卤代烷基或C_3-6环烷基。在一些实施例中，杂芳基任选地被一个或多个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷基、O-C_1-6烷基、O-C_1-6卤代烷基或C_3-6环烷基。

在式(I)的一些实施例中，R⁴是-(CO)R²并且R⁵是芳基。在一些实施例中，R⁴是-(CO)R²并且R⁵是杂芳基。在一些实施例中，R⁴是-(CO)R²并且R⁵是环烷基。在一些实施例中，所述芳基是任选地经取代的苯基。在一些实施例中，所述芳基是任选地经取代的苯基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自由N、O和S组成的组的杂原子的5至14元杂芳基。在一些实施例中，所述任选地经取代的5至14元杂芳基选自由以下组成的组：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、噌啉基、吲嗪基、氮杂吲嗪基、吲哚基、氮杂吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、咪唑并吡啶基、咪唑并吡嗪基和苯并咪唑基。在一些实施例中，所述杂芳基是5或6元杂芳基环。在一些实施例中，所述5元杂芳基任选地被吡唑基、咪唑基、噁唑基取代。在一些实施例中，所述6元杂芳基任选地被吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基取代。在一些实施例中，环烷基任选地被环丙基、环丁基、环戊基或环己基取代。在一些实施例中，芳基任选地被一个或多个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷基、O-C_1-6烷基、O-C_1-6卤代烷基或C_3-6环烷基。在一些实施例中，杂芳基任选地被一个或多个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷基、O-C_1-6烷基、O-C_1-6卤代烷基或C_3-6环烷基。

在式(I)的一些实施例中，R⁴是-(SO₂)R²并且R⁵是芳基。在一些实施例中，R⁴是–(SO₂)R²并且R⁵是杂芳基。在一些实施例中，R⁴是-(SO₂)R²并且R⁵是环烷基。在一些实施例中，所述芳基是任选地经取代的苯基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自由N、O和S组成的组的杂原子的5至14元杂芳基。在一些实施例中，所述任选地经取代的5至14元杂芳基选自由以下组成的组：吡唑基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、噌啉基、吲嗪基、氮杂吲嗪基、吲哚基、氮杂吲哚基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、咪唑并吡啶基、咪唑并吡嗪基和苯并咪唑基。在一些实施例中，所述杂芳基是5或6元杂芳基环。在一些实施例中，所述5元杂芳基任选地被吡唑基、咪唑基或噁唑基取代。在一些实施例中，所述6元杂芳基任选地被吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基取代。在一些实施例中，环烷基任选地被环丙基、环丁基、环戊基或环己基取代。在一些实施例中，芳基任选地被一个或多个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷基、O-C_1-6烷基、O-C_1-6卤代烷基或C_3-6环烷基。在一些实施例中，杂芳基任选地被一个或多个选自由以下组成的组的取代基取代：卤素、C_1-6卤代烷基、C_1-6烷基、O-C_1-6烷基、O-C_1-6卤代烷基或C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述C_1-6卤代烷基是CF₃、CHF₂或CH₂F。在一些实施例中，所述O-C_1-6卤代烷基是OCF₃、OCHF₂或OCH₂F。在一些实施例中，环烷基任选被卤素、C_1-6烷基或O-C_1-6烷基取代。

在式(I)的一些实施例中，R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成环烷基或杂环基。在一些实施例中，R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成环烷基或杂环基，其中的每一者任选地被取代。在一些实施例中，所述环烷基或杂环基任选地被-NS(O-₂)(烷基)(芳基)取代。在一些实施例中，所述烷基是C-_1-5烷基并且所述芳基是任选地被一个或多个卤素原子取代的苯基。在一些实施例中，所述杂环基是4至10元杂环基。在一些实施例中，所述杂环基是饱和4至7元杂环基。

在式(I)的一些实施例中，n是0并且R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成选自由以下组成的组的任选地经取代的杂环基：

在一些实施例中，所述任选地经取代的杂环基是/>在一些实施例中，所述任选地经取代的杂环基是/>在一些实施例中，所述任选地经取代的杂环基是/>

在式(I)的一些实施例中，R¹选自由组成的组。

在式(I)的一些实施例中，R¹是在一些实施例中，R¹是在一些实施例中，R¹是/>在一些实施例中，R¹

在式(I)的一些实施例中，R^a是H、卤代、C_1-3烷基或卤代烷基。在一些实施例中，R^a是H。在一些实施例中，R^a是C_1-3烷基。在一些实施例中，R^a是卤代烷基。在一些实施例中，卤代是F。在一些实施例中，所述C_1-3烷基烷基是甲基、乙基或异丙基。在一些实施例中，卤代烷基是CF₃、CHF₂或CH₂F。

在式(I)的一些实施例中，Y是CH并且R⁴和R⁵是H。

在式(I)的一些实施例中，Y是N，R⁴是H，并且R⁵是任选地被–N(S(O₂)烷基)(芳基)或–N(S(O₂)环烷基)(芳基)取代的乙基。在一些实施例中，烷基是C-_1-5烷基，环烷基是C-_3-6环烷基，并且芳基是任选地被一个或多个卤素原子取代的苯基。

在式(I)的一些实施例中，n是1，X¹是O或N，Y是N，R¹是或R²和R³是H，R⁴是H、-C_1-5烷基、-C(O)烷基、-C(O)环烷基、-(SO₂)NR²R³、-SO₂烷基、-SO₂卤代烷基和-SO₂环烷基，其中的每一者任选地被取代，并且R⁵是芳基、杂芳基或环烷基，其中的每一者任选地被取代。

在式(I)的一些实施例中，n是1，X¹是O或N，Y是O，R¹是或R²和R³是H，并且R⁵是芳基、杂芳基、环烷基或亚烷基环烷基，其中的每一者任选地被取代。

在式(I)的一些实施例中，n是0，X¹是O或N，Y是N，R¹是

并且R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成环烷基或杂环基，其中的每一者任选地被取代。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ia)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R^a、X¹、n和Y如上文关于式(I)所定义。

在式(Ia)的一些实施例中，R¹是n是1；Y是N；X¹是S或O；并且变量R²、R³、R⁴、R⁵和R^a如上文关于式(I)所定义。

在式(Ia)的一些实施例中，n是1，X¹是S，Y是N，R¹是或R²和R³是H，R⁴是-SO₂烷基、-SO₂卤代烷基或-SO₂环烷基，其中的每一者任选地被取代，R⁵是杂芳基，其中的每一者任选地被取代，并且R^a是H或F。在一些另外的实施例中，R⁴是-SO₂C_1-5-烷基、-SO₂环丙基、-SO₂CF₃或-SO₂CHF₂，并且所述杂芳基是任选地经取代的吡啶或吡嗪。在一些另外的实施例中，所述杂芳基是任选地经取代的吡啶。

在式(Ia)的一些实施例中，n是1，X¹是S，Y是N，R¹是

R²和R³是H，R⁴是-SO₂Me、-SO₂Et或-SO₂环丙基，其中的每一者任选地被取代，R⁵是吡啶或吡嗪，其中的每一者任选地被取代，并且R^a是H。在一些实施例中，R⁵是任选地经取代的吡啶。

在式(Ia)的一些实施例中，n是1，X¹是S，Y是N，R¹是

R²和R³是H，R⁴是-SO₂烷基或-SO₂环烷基，其中的每一者任选地被取代，R⁵是

其中R^b选自由以下组成的组：卤素、-C_1-5烷基、卤代烷基、-OC_1-5烷基、-O卤代烷基、-CH₂O卤代烷基、环丙基和CN，并且R^a是H。在一些实施例中，所述卤素是F或Cl。在一些实施例中，所述卤代烷基是CF₃、CHF₂、CH₂CF₃或CF₂CH₃。在一些实施例中，所述-C_1-5烷基是甲基。

在式(Ia)的一些实施例中，n是1，X¹是S，Y是N，R¹是

R²和R³是H，R⁴是-SO₂Me、-SO₂Et或-SO₂环丙基，其中的每一者任选地被取代，并且R⁵是

其中R^b选自由以下组成的组：卤素、-C_1-5烷基、卤代烷基、-OC_1-5烷基、-O卤代烷基、-CH₂O卤代烷基、环丙基或CN，并且R^a是H。在一些实施例中，所述卤素是F或Cl。在一些实施例中，所述卤代烷基是CF₃、CHF--₂、CH₂CF₃或CF₂CH₃。在一些实施例中，所述-C_1-5烷基是甲基。

在式(Ia)的一些实施例中，n是1，X¹是S，Y是N，R¹是

其中R^b选自由以下组成的组：Cl、F、Me、环丙基、CF₃、CHF₂、CF₂CH₃、OCF₃、OCHF₂、OCH2CF2H和CN，并且R^a是H。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ib)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

在式(I)-(Ib)的一些实施例中，每个任选地经取代的烷基独立地是任选地经取代的C_1-6烷基。在一些实施例中，所述C_1-6烷基是Me或Et。

在式(I)-(Ib)的一些实施例中，每个任选地经取代的卤代烷基独立地是任选地经取代的C_1-6卤代烷基。在一些实施例中，所述C_1-6卤代烷基是CF₃、CHF₂或CH₂F。在一些实施例中，所述C_1-6卤代烷基是CF₃或CHF₂。

在式(I)-(Ib)的一些实施例中，每个任选地经取代的环烷基独立地是任选地经取代的C_3-12环烷基。在一些实施例中，所述环烷基是C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述环烷基选自由以下组成的组：环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

在式(I)-(Ib)的一些实施例中，每个任选地经取代的杂环基独立地是具有1或2个独立地选自N、O和S的杂原子的任选地经取代的3-12元杂环烷基。在一些实施例中，每个任选地经取代的杂环基独立地是具有1或2个独立地选自N、O和S的杂原子的任选地经取代的3-6元杂环烷基。在另外的实施例中，所述杂环烷基是具有1或2个独立地选自N、O和S的杂原子的任选地经取代的5元或6元杂环。在一些实施例中，所述杂环基选自由以下组成的组：氮杂环丙基、氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基和吗啉基和硫代吗啉基。

在式(I)-(Ib)的一些实施例中，每个任选地经取代的芳基独立地是C_6-12芳基。在另外的实施例中，所述C_6-12芳基是任选地经取代的苯基。

在式(I)-(Ib)的一些实施例中，每个任选地经取代的杂芳基独立地是具有1、2或3个独立地选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳基。在一些实施例中，每个任选地经取代的杂芳基独立地是具有3个独立地选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳基。在一些实施例中，每个任选地经取代的杂芳基独立地是具有2个独立地选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳基。在一些实施例中，每个任选地经取代的杂芳基独立地是具有1个独立地选自N、O和S的杂原子的5-12元杂芳基。在另外的实施例中，每个任选地经取代的杂芳基是具有1个独立地选自N、O和S的杂原子的任选地经取代的5元或6元杂芳基。在一些实施例中，每个杂芳基独立地选自由以下组成的组：四唑、噁二唑、噻二唑、咪唑、吡唑、噻唑或噁唑，其中的每一者任选地被取代。

在一些实施例中，式(I)化合物选自由以下组成的组：

/>

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ic)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R^a是H、Me或F；并且

R⁴和R⁵如上文式(I)中所定义。

在式(Ic)的一些实施例中，R^a是H。在一些实施例中，R^a是F。在一些实施例中，R^a是Me。

在式(Ic)的一些实施例中，R⁴选自由以下组成的组：亚烷基烷氧基、亚烷基杂环基、-S(O)₂烷基、-S(O)₂环烷基、-S(O)₂亚烷基环烷基、-S(O)₂亚烷基杂环基、-S(O)₂N(H)亚烷基杂环基、-C(O)烷基、-C(O)环烷基、-C(O)亚烷基环烷基、-C(O)亚烷基杂环基和-C(O)N(H)亚烷基杂环基。在一些实施例中，R⁴选自由以下组成的组：亚烷基杂环基、-S(O)₂烷基、-S(O)₂环烷基、-S(O)₂亚烷基杂环基、-C(O)亚烷基杂环基和-C(O)N(H)亚烷基杂环基。在一些实施例中，R⁴选自由以下组成的组：-S(O)₂烷基、-S(O)₂环烷基和-S(O)₂亚烷基杂环基。在一些实施例中，R⁴是-S(O)₂烷基。在一些实施例中，R⁴是-S(O)₂环烷基。在一些实施例中，R⁴是-S(O)₂N(H)亚烷基杂环基。在一些实施例中，所述亚烷基是C_1-5亚烷基，并且所述杂环基是具有1、2或3个选自由N、O和S组成的组的杂原子的任选地经取代的4至10元杂环基。在一些实施例中，所述亚烷基是C_1-5亚烷基，并且所述杂环基是具有1、2或3个选自由N、O和S组成的组的杂原子的任选地经取代的4至7元杂环基。在一些实施例中，所述亚烷基是C_2-4亚烷基，并且所述杂环基是具有1、2或3个选自由N、O和S组成的组的杂原子的任选地经取代的6元杂环基。在一些实施例中，所述杂环基选自由以下组成的组：哌啶、吗啉、硫代吗啉、硫代吗啉1-氧化物、硫代吗啉1,1-二氧化物和哌嗪，其中的每一者任选地被取代。在一些实施例中，所述任选取代基选自由以下组成的组：烷基、卤代烷基、烷氧基、酰基、磺酰基、杂芳基和杂环基。

在式(Ic)的一些实施例中，R⁵选自由以下组成的组：

在一些实施例中，R⁵是/>在一些实施例中，R⁵是/>在一些实施例中，R⁵是在一些实施例中，R⁵是/>在一些实施例中，R^b选自由以下组成的组：卤素、卤代烷基、烷基、O烷基、O卤代烷基、亚烷基-O卤代烷基、环烷基、杂环基芳基、杂芳基、烷基腈或CN。在一些实施例中，R^b选自由以下组成的组：卤代、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、酰基、磺酰基、环烷基、杂芳基和杂环基。在一些实施例中，所述卤代烷基选自CF₃、CF₂CH₃、CHF₂或CH₂F。在一些实施例中，所述烷基是-C_1-5烷基。在一些实施例中，-C_1-5烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基。在一些实施例中，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基任选地被OH取代。在一些实施例中，所述环烷基是C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述芳基是苯基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子的5或6元杂芳基。在一些实施例中，所述杂环基是具有1或2个选自N、O和S的杂原子的4至7元杂环基。在一些实施例中，O卤代烷基选自OCF₃、OCHF₂或OCH₂F。在一些实施例中，所述O烷基是O-甲基、O-乙基、O-丙基、O-异丙基、O-丁基或O-叔丁基。在一些实施例中，R^b选自由以下组成的组：F、Cl、-CH₃、-CH₂CH₃、-CF₃、-CHF₂、-CF₂CH₃、-CN、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-OCH(CH₃)₂、-OCHF₂、-OCH₂CF₂H和环丙基。在一些实施例中，m是0、1或2。在一些实施例中，m是0或1。在一些实施例中，m是0。在一些实施例中，m是1。在一些实施例中，m是2。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Id)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

U是NR^d、O、S、S(O)、S(O)₂、CH₂、CHF或CF₂；

R^a是H、Me或F；

R^b各自独立地是卤代、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')、-S(O₂)R^e、环烷基、杂芳基或杂环基；

R^c各自独立地是F、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')、-S(O₂)R^e、杂芳基或杂环基，和/或两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成桥接或稠合的C_3-7环烷基、桥接或稠合的4至7元杂环基；或5或6元杂芳基，其中的每一者任选地被取代；

R^d是H、烷基、酰基、磺酰基、环烷基、芳基或杂芳基；

R^e和R^e'各自独立地是H、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-CH₂环烷基、-CH₂杂环基、-CH₂芳基或-CH₂杂芳基；

m是0、1、2或3；

p是0、1、2或3；

q是0、1或2；并且

r是1、2、3或4。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ie)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

U是NR^d、O、S、S(O)、S(O)₂、CH₂、CHF或CF₂；

R^a是H、Me或F；

R^b各自独立地是卤代、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')、磺酰基、环烷基、杂芳基或杂环基；

R^c各自独立地是F、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')、-S(O₂)R^e、杂芳基或杂环基，和/或两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成桥接或稠合的C_3-7环烷基、桥接或稠合的4至6元杂环基；或5或6元杂芳基，其中的每一者任选地被取代；

R^d是H、烷基、酰基、磺酰基、环烷基、芳基或杂芳基；

m是0、1、2或3；

p是0、1、2或3；

q是0、1或2；并且

r是1、2、3或4。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(If)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

U是NR^d、O、S、S(O)、S(O)₂、CH₂、CHF或CF₂；

R^a是H、Me或F；

R^d是H、烷基、酰基、磺酰基、环烷基、芳基或杂芳基；

m是0、1、2或3；

p是0、1、2或3；

q是0、1或2；并且

r是1、2、3或4。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ig)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

U是NR^d、O、S、S(O)、S(O)₂、CH₂、CHF或CF₂；

R^a是H、Me或F；

R^d是H、烷基、酰基、磺酰基、环烷基、芳基或杂芳基；

m是0、1、2或3；

p是0、1、2或3；

q是0、1或2；并且

r是1、2、3或4。

在一些实施例中，所述化合物具有下式：

其中：

U、R^a、R^b、m和r如上文在式(Id)、(Ie)、(If)和(Ig)中所定义；并且

V是O或NR^d。

在式(Id)-(Ig)和(Id-1)-(Ig-1)的一些实施例中，U是NR^d、O或S并且V是O。在一些实施例中，U是N、O或S并且V是NR^d。在一些实施例中，U是NR^d并且V是NR^d。在一些实施例中，U是O并且V是NR^d。在一些实施例中，U是S并且V是NR^d。在一些实施例中，U是NR^d并且V是O。在一些实施例中，U是O并且V是O。在一些实施例中，U是S并且V是O。

在式(Id)-(Ig)和(Id-1)-(Ig-1)的一些实施例中，U是O、S、S(O)₂、CH₂或NR^d。在一些实施例中，U是O、S、CH₂或NR^d。在一些实施例中，U是O、S或NR^d。在一些实施例中，U是O或CH-₂。在一些实施例中，U是O。在一些实施例中，U是S。在一些实施例中，U是NR^d。在一些实施例中，U是S(O)₂。

在式(Id)-(Ig)和(Id-1)-(Ig-1)的一些实施例中，R^a是H。在一些实施例中，R^a是F。在一些实施例中，R^a是Me。

在式(Id)-(Ig)和(Id-1)-(Ig-1)的一些实施例中，R^b是卤代、烷基、卤代烷基、烷基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、杂芳基或腈。在一些实施例中，R^b是卤代、烷基、卤代烷基、烷基、卤代烷氧基、环烷基或腈。在一些实施例中，所述卤代烷基选自CF₃、CF₂CH₃、CHF₂或CH₂F。在一些实施例中，所述烷基是-C_1-5烷基。在一些实施例中，-C_1-5烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基。在一些实施例中，所述环烷基是C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子的5或6元杂芳基。在一些实施例中，所述杂环基是具有1或2个选自N、O和S的杂原子的4至7元杂环基。在一些实施例中，卤代烷氧基选自OCF₃、OCHF₂或OCH₂F。在一些实施例中，所述烷氧基是O-甲基、O-乙基、O-丙基、O-异丙基、O-丁基或O-叔丁基。在一些实施例中，R^b是-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')。

在式(Id)-(Ig)的一些实施例中，R^c是F、C_1-5烷基、卤代烷基、C_1-5烷氧基、卤代烷氧基、酰基、磺酰基、5或6元杂芳基或C_3-6杂环基。在一些实施例中，R^c是-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成桥接或稠合的C_3-7环烷基、桥接或稠合的5或6元杂环基或5或6元杂芳基，其中的每一者任选地被取代。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成任选地经取代的桥接或稠合的C_3-7环烷基。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成任选地经取代的桥接或稠合的5或6元杂环基。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成烷氧基或氨基烷基桥。在一些实施例中，所述任选取代基是一种或多种如上文所定义的R^b。在一些实施例中，所述任选取代基选自由以下组成的组：F、C_1-5烷基、C_1-5烷氧基、CF₃、CF₂H、CFH₂、-OCF₃、-OCF₂H、-OCFH₂、-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')和-SO₂R^e。在一些实施例中，所述任选取代基选自由以下组成的组：F、C_1-5烷基、C_1-5烷氧基、CF₃、CF₂H、CFH₂、-OCF₃、-OCF₂H和-OCFH₂。在一些实施例中，所述任选取代基是F或C_1-5烷基。在一些实施例中，所述任选取代基是F。在一些实施例中，所述任选取代基是C_1-5烷基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是甲基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是乙基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是丙基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是异丙基。

在式(Id)-(Ig)和(Id-1)-(Ig-1)的一些实施例中，R^e和R^e'各自独立地是H、烷基、环烷基或-CH₂环烷基。在一些实施例中，所述烷基是-C_1-5烷基。在一些实施例中，-C_1-5烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基。在一些实施例中，所述环烷基是C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述环烷基是环丙基。在一些实施例中，R^e和R^e'是H。

在式(Id)-(Ig)和(Id-1)-(Ig-1)的一些实施例中，m是0、1或2。在一些实施例中，m是0或1。在一些实施例中，m是0。在一些实施例中，m是1。在一些实施例中，m是2。

在式(Id)-(Ig)的一些实施例中，p是0、1或2。在一些实施例中，p是0或1。在一些实施例中，p是1或2。在一些实施例中，p是0。在一些实施例中，p是1。在一些实施例中，p是2。

在式(Id)-(Ig)和(Id-1)-(Ig-1)的一些实施例中，r是1、2或3。在一些实施例中，r是1或2。在一些实施例中，r是2或3。在一些实施例中，r是1。在一些实施例中，r是2。在一些实施例中，r是3。在一些实施例中，r是4。

在式(Id)-(Ig)的一些实施例中，q是0或1。在一些实施例中，q是0。在一些实施例中，q是1。在一些实施例中，q是2。

在式(Id)-(Ig)的一些实施例中，r是1并且p是1。在一些实施例中，r是2并且p是1。在一些实施例中，r是3并且p是1。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ih)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

U是NR^d、O、S、S(O)、S(O)₂、CH₂、CHF或CF₂；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地是CH或N；

R^a是H、Me或F；

R^b各自独立地是卤代、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')、-SO₂R^e、环烷基、杂芳基或杂环基；

R^c各自独立地是F、烷基、卤代烷基、烷氧基或卤代烷氧基，和/或两个R^c基团与其所连接的原子一起形成任选地经取代的C_3-7环烷基；

R^d是H、烷基、酰基、磺酰基、环烷基、芳基或杂芳基；

m是0、1、2或3；

p是0、1、2或3；并且

q是0、1或2。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ii)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

U是NR^d、O、S、S(O)、S(O)₂、CH₂、CHF或CF₂；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地是CH或N；

R^a是H、Me或F；

R^d是H、烷基、-C(O)R^e、磺酰基、环烷基、芳基或杂芳基；

m是0、1、2或3；

p是0、1、2或3；并且

q是0、1或2。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ij)化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

U是NR^d、O、S、S(O)、S(O)₂、CH₂、CHF或CF₂；

X¹、X²、X³和X⁴各自独立地是CH或N；

R^a是H、Me或F；

R^d是H、烷基、-C(O)R^e、磺酰基、环烷基、芳基或杂芳基；

m是0、1、2或3；

p是0、1、2或3；并且

q是0、1或2。

在式(Ih)-(Ij)的一些实施例中，NR^d、O、S、S(O)₂或CH₂。在一些实施例中，U是NR^d、O、S或CH₂。在一些实施例中，U是O或CH₂。在一些实施例中，U是O。在一些实施例中，U是CH₂。在一些实施例中，U是S。在一些实施例中，U是S(O)₂。在一些实施例中，U是NR^d。

在式(Ih)-(Ij)的一些实施例中，X¹、X²、X³和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，X¹、X²、X³和X⁴之一是N。在一些实施例中，X¹、X²、X³和X⁴中的两个是N。在一些实施例中，X¹是N并且X²、X³和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，X²是N并且X¹、X³和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，X³是N并且X¹、X²和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，X⁴是N并且X¹、X²和X³中的每一者是CH。

在式(Ih)-(Ij)的一些实施例中，U是CH₂并且X¹、X²、X³和X⁴之一是N。在一些实施例中，U是CH₂，X¹是N并且X²、X³和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，U是CH₂，X²是N并且X¹、X³和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，U是CH₂，X³是N并且X¹、X²和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，U是CH₂，X⁴是N并且X¹、X²和X³中的每一者是CH。在一些实施例中，p是0。在一些实施例中，p是1。

在式(Ih)-(Ij)的一些实施例中，U是O并且X¹、X²、X³和X⁴之一是N。在一些实施例中，U是O，X¹是N并且X²、X³和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，U是O，X²是N并且X¹、X³和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，U是O，X³是N并且X¹、X²和X⁴中的每一者是CH。在一些实施例中，U是O，X⁴是N并且X¹、X²和X³中的每一者是CH。

在式(Ih)-(Ij)的一些实施例中，R^a是H。在一些实施例中，R^a是F。在一些实施例中，R^a是Me。

在式(Ih)和(Ij)的一些实施例中，R^b是卤代、烷基、卤代烷基、烷基、卤代烷氧基、环烷基、杂环基、杂芳基或腈。在一些实施例中，R^b是卤代、烷基、卤代烷基、烷基、卤代烷氧基、环烷基或腈。在一些实施例中，所述卤代烷基选自CF₃、CF₂CH₃、CHF₂或CH₂F。在一些实施例中，所述烷基是-C_1-5烷基。在一些实施例中，-C_1-5烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基或叔丁基。在一些实施例中，所述环烷基是C_3-6环烷基。在一些实施例中，所述杂芳基是具有1、2或3个选自N、O和S的杂原子的5或6元杂芳基。在一些实施例中，所述杂环基是具有1或2个选自N、O和S的杂原子的4至7元杂环基。在一些实施例中，卤代烷氧基选自OCF₃、OCHF₂或OCH₂F。在一些实施例中，所述烷氧基是O-甲基、O-乙基、O-丙基、O-异丙基、O-丁基或O-叔丁基。

在式(Ih)-(Ij)的一些实施例中，R^c是F、C_1-5烷基、卤代烷基、C_1-5烷氧基、卤代烷氧基、酰基、磺酰基、5或6元杂芳基或C_3-6杂环基。在一些实施例中，R^c是F、C_1-5烷基、卤代烷基、C_1-5烷氧基或卤代烷氧基。在一些实施例中，R^c是F或C_1-5烷基。在一些实施例中，R^c是F或甲基。在一些实施例中，R^c是F。在一些实施例中，R^c是甲基。在一些实施例中，所述两个R^c基团与同一碳原子连接，这也可以被称为生发取代。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的原子一起形成任选地经取代的C_3-6环烷基。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的原子一起形成任选地经取代的环丙基。在一些实施例中，所述任选取代基是一种或多种如上文定义的R^b。在一些实施例中，所述任选取代基选自由以下组成的组：F、C_1-5烷基、C_1-5烷氧基、CF₃、CF₂H、CFH₂、-OCF₃、-OCF₂H、-OCFH₂、-C(O)R^e、-C(O)OR^e、-C(O)N(R^e)(R^e')和-SO₂R^e。在一些实施例中，所述任选取代基选自由以下组成的组：F、C_1-5烷基、C_1-5烷氧基、CF₃、CF₂H、CFH₂、-OCF₃、-OCF₂H和-OCFH₂。在一些实施例中，所述任选取代基是F或C_1-5烷基。在一些实施例中，所述任选取代基是F。在一些实施例中，所述任选取代基是C_1-5烷基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是甲基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是乙基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是丙基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是异丙基。在一些实施例中，两个任选取代基与同一碳连接，这也被称为生发取代。

在式(Ih)-(Ij)的一些实施例中，当U是NR^d时，R^d和R^c与其所连接的原子一起形成5至7元杂环基。在一些实施例中，R^d和R^c与其所连接的原子一起形成6元杂环基。在一些实施例中，所述杂环基包括1或2个选自N、O和S的杂原子。

在一些实施例中，本公开提供了一种式(Ih-1)、式(Ii-1)或式(Ij-1)化合物：

其中R^a、R^b、R^c、X¹、X²、X³、X⁴、U和m如上文在式(Ih)、式(Ii)和式(Ij)中所定义。

在式(Ih-1)、式(Ii-1)和式(Ij-1)的一些实施例中，每个R^c是F。在一些实施例中，每个R^c是Me。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成任选地经取代的C_3-6环烷基。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成环丙基或环丁基，其中的每一者任选地被取代。在一些实施例中，两个R^c基团与其所连接的碳原子一起形成任选地经取代的环丙基。在一些实施例中，所述任选取代基是F或C_1-5烷基。在一些实施例中，所述任选取代基是F。在一些实施例中，所述任选取代基是C_1-5烷基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是甲基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是乙基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是丙基。在一些实施例中，所述C_1-5烷基是异丙基。在一些实施例中，两个任选取代基与同一碳连接，这也被称为生发取代。

在一些实施例中，R^d是H、烷基或环烷基。在一些实施例中，R^d是H。在一些实施例中，R^d是烷基。在一些实施例中，R^d是环烷基。在一些实施例中，烷基是甲基、乙基、丙基、异丙基或叔丁基。在一些实施例中，所述环烷基是环丙基、环戊基或环己基。

在一些实施例中，m是0、1或2。在一些实施例中，m是0或1。在一些实施例中，m是0。在一些实施例中，m是1。在一些实施例中，m是2。

在一些实施例中，p是0、1或2。在一些实施例中，p是0或1。在一些实施例中，p是1或2。在一些实施例中，p是0。在一些实施例中，p是1。在一些实施例中，p是2。

在一些实施例中，q是0或1。在一些实施例中，q是0。在一些实施例中，q是1。在一些实施例中，q是2。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂具有下式：

或其药学上可接受的盐，

其中：

X¹是S；

R^a选自由以下组成的组：H、卤素和C_1-3烷基；

R¹是

R³是H或烷基；

R⁵是芳基或杂芳基；或者R⁴和R⁵与其所连接的原子一起形成杂环基，其中的每一者任选地被取代；

在一些实施例中，R^a是H。

在一些实施例中，R¹是

在一些实施例中，R⁴是-(SO₂)R²。

在一些实施例中，–(SO₂)R²是–(SO₂)烷基、–(SO₂)亚烷基杂环基、–(SO₂)卤代烷基、–(SO₂)卤代烷氧基或–(SO₂)环烷基。

在一些实施例中，R⁵是杂芳基。

在一些实施例中，所述杂芳基是5至6元杂芳基。

在一些实施例中，所述5至6元杂芳基选自由以下组成的组：其中R^b是卤素、烷基、烷氧基、环烷基、-CN、卤代烷基或卤代烷氧基；并且m是0或1。

在一些实施例中，R^b是F、Cl、-CH₃、-CH₂CH₃、-CF₃、-CHF₂、-CF₂CH₃、-CN、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-OCH(CH₃)₂、-OCF₃、-OCHF₂、-OCH₂CF₂H和环丙基。

在一些实施例中，所述芳基选自由以下组成的组：苯基、3-氯苯基、3-氯-4-氟苯基、3-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基和2,6-二氟苯基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂具有式(Ik)：

或其药学上可接受的盐，

其中：

在一些实施例中，R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

在一些实施例中，R⁴是任选地经取代的烷基或环烷基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂具有以下结构：

或其药学上可接受的盐，

其中：

在一些实施例中，R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

在一些实施例中，R⁴是任选地经取代的烷基或环烷基。

在一些实施例中，R⁴是烷基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂具有以下结构：

或其药学上可接受的盐，

其中：

在一些实施例中，R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

在一些实施例中，R⁴是任选地经取代的烷基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是具有下式的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

X¹是S；

R^a选自由以下组成的组：H、卤素和C_1-3烷基；

R¹是

R³是H或烷基；

在式I(y)的一些实施例中，R^a是H。

在式I(y)的一些实施例中，R¹是

在式I(y)的一些实施例中，R⁴是-(SO₂)R²。

在式I(y)的一些实施例中，R⁵是杂芳基。

在式I(y)的一些实施例中，杂芳基是5至6元杂芳基。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂具有以下结构：

在一些实施例中，氟烷基-噁二唑衍生物是TYA-018或其类似物。TYA-018的结构是：

TYA-018的类似物包含但不限于表2中列出的化合物。

表2

/>

5-氟烟酰胺衍生物

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是5-氟烟酰胺衍生物。可以用作HDAC6抑制剂的说明性5-氟烟酰胺衍生物包含本文描述的那些和公开为WO2021067859A1的国际专利申请公开第PCT/US2020/054134号中所描述的那些，所述文献的内容通过引用整体并入本文。公开为WO2021067859A1的PCT/US2020/054134也描述了此类化合物的合成方法，所述国际专利申请通过引用具体并入本文。

在一些实施例中，所述HDAC6抑制剂是式(II)化合物：

其中

n是0或1；

X是O、NR⁴或CR⁴R⁴'；

Y是键、CR²R³或S(O)₂；R¹选自由以下组成的组：H、酰胺基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基；

R¹和R²与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；或者

R²和R³与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；并且

R⁴和R⁴'与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；

药物组合物和试剂盒

在本公开的各个实施例中，提供了包括一种或多种本文所公开的HDAC6抑制剂或其药学上可接受的盐、或其药学上可接受的溶剂化物、水合物、互变异构体、N-氧化物或盐和药学上可接受的赋形剂或佐剂的药物组合物。药学上可接受的赋形剂和佐剂为了多种目的而添加组合物或调配物。在一些实施例中，包括本文所公开的一种或多种化合物或其药学上可接受的溶剂化物、水合物、互变异构体、N-氧化物或其盐的药物组合物进一步包括药学上可接受的载体。在一些实施例中，药学上可接受的载体包含药学上可接受的赋形剂、粘合剂和/或稀释剂。在一些实施例中，合适的药学上可接受的赋形剂包含但不限于水、盐溶液、醇、聚乙二醇(例如，聚乙二醇300)、明胶、乳糖、淀粉酶、硬脂酸镁、滑石粉、硅酸、粘稠石蜡、羟基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。

在一些实施例中，本文所描述的药物组合物中的HDAC6抑制剂是以下中的一种或多种化合物：式(I)、式(Ia)、式(Ib)、式(Ic)、式(Id)、式(Id-1)、式(Id-2)、式(Id-3)、式(Id-4)、式(Ie)、式(1e-1)、式(If)、式(If-1)、式(Ig)、式(Ig-1)、式(Ih)、式(Ih-1)、式(Ii)、式(Ii-1)、式(Ij)、式(Ij-1)、式(Ik)、式(Ik-1)、式(Ik-2)、式(Ik-3)、式I(y)或式(II)。在一些实施例中，本文所描述的药物组合物中的HDAC6抑制剂是式(I)化合物。在一些实施例中，本文所描述的药物组合物中的HDAC6抑制剂是式(Ic)化合物。在一些实施例中，本文所描述的药物组合物中的HDAC6抑制剂是式(Ik)化合物。在一些实施例中，本文所描述的药物组合物中的HDAC6抑制剂是式I(y)(其在本文中也可以被称为式(Iy))化合物。

另一方面，本公开提供了一种HDAC6抑制剂，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用。

另一方面，本公开提供了一种试剂盒，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用，所述试剂盒包括HDAC6抑制剂或其药物组合物和说明书。

另一方面，本公开提供了一种HDAC6抑制剂用于治疗代谢性疾病的用途。

另一方面，本公开提供了一种HDAC6抑制剂，其在用于治疗HFpEF的方法中使用。

另一方面，本公开提供了一种试剂盒，其用于治疗HFpEF的方法中使用，所述试剂盒包括HDAC6抑制剂或其药物组合物和说明书。

另一方面，本公开提供了一种HDAC6抑制剂在治疗HFpEF中的用途。

施用方法

本文所描述的HDAC6抑制剂(和包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)可以通过本文所公开的或本领域已知的任何合适的方式施用于受试者。

在一些实施例中，HDAC6抑制剂的施用是口服施用。在一些实施例中，所述方法包括向受试者口服施用以下的HDAC6抑制剂：式(I)、式(Ia)、式(Ib)、式(Ic)、式(Id)、式(Id-1)、式(Id-2)、式(Id-3)、式(Id-4)、式(Ie)、式(1e-1)、式(If)、式(If-1)、式(Ig)、式(Ig-1)、式(Ih)、式(Ih-1)、式(Ii)、式(Ii-1)、式(Ij)、式(Ij-1)、式(Ik)、式(Ik-1)、式(Ik-2)、式(Ik-3)、式I(y)或式(II)。在一些实施例中，所述方法包括向受试者口服施用式(I)的HDAC6抑制剂。在一些实施例中，所述方法包括向受试者口服施用式(Ic)的HDAC6抑制剂。在一些实施例中，所述方法包括向受试者口服施用式(Ik)的HDAC6抑制剂。在一些实施例中，所述方法包括向受试者口服施用式I(y)的HDAC6抑制剂。在一些实施例中，所述方法包括向受试者口服施用式(II)的HDAC6抑制剂。在一些实施例中，口服施用借助于片剂或胶囊。在一些实施例中，向人口服施用本文所描述的HDAC6抑制剂(或其药物组合物)。

设想了本文所描述的HDAC6抑制剂(和包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)的各种给药方案，包含一段时间内的单次施用或多次施用。

在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂(或包括抑制剂的药物组合物)每天施用两次、每天一次、每两天一次、每三天一次、每周一次、每两周一次、每三周一次或每月一次。在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂(或包括抑制剂的药物组合物)每天施用一次。

在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂(或包括抑制剂的药物组合物)单次施用。在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂(或包括抑制剂的药物组合物)在一段时间内施用，例如(或长于)1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、1年。在一些实施例中，向所治疗的受试者施用本文所描述的HDAC6抑制剂(或包括抑制剂的药物组合物)至少1个月、至少6周、至少2个月、至少3个月或至少6个月。在一些实施例中，向所治疗的受试者施用本文所描述的HDAC6抑制剂(或包括抑制剂的药物组合物)少于1个月、6周、2个月、3个月或6个月。

本文所描述的用于本文所描述的方法中的HDAC6抑制剂的适当剂量将取决于所使用的抑制剂的类型、受试者的状况(例如，年龄、体重、健康)、受试者的应答性、受试者使用的其它药物以及由执行治疗的执业医生决定考虑的其它因素。

在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂以每天1mg至500mg范围内的量施用于受试者。在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂以每天1mg至500mg范围内的量口服施用于人。在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂以1mg至500mg范围内的量以单剂量口服施用于人。在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂以1mg至500mg范围内的量每日一次，例如，在一个疗程内(例如，1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、1年或更长时间)口服施用于人。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂以介于0.5mg/天与3mg/天(例如，1mg/天)之间的起始剂量施用于人类受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂以0.5mg/天的起始剂量施用于人类受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂以1mg/天的起始剂量施用于人类受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂以1.5mg的起始剂量施用于人类受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂以3mg的起始剂量施用于人类受试者。此剂量可以递增或保持相同，这取决于受试者对治疗的应答。HDAC6抑制剂可以以被视为治疗有效的量施用。

组合治疗和试剂盒

在一些实施例中，本文所描述的HDAC6抑制剂(和包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)可以与另一种药物或疗法组合施用于受试者。在一些实施例中，可以将两种或三种不同的HDAC6抑制剂(例如，本文所描述的那些抑制剂中)施用于受试者。

在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(和包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)中的一种或多种可以以与不同于所述一种或多种HDAC6抑制剂的一种或多种疗法的组合施用于受试者，其中所述疗法是心脏保护疗法、抗高血压疗法、低血糖疗法、针对心脏病状(例如，心力衰竭)的疗法、针对HFpEF的疗法或针对代谢性疾病的疗法。另外的疗法可以是本领域已知的任何此类疗法。在代谢性疾病治疗的一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与另一种代谢性疾病疗法(如用于治疗代谢性疾病的药剂)组合施用于受试者。在HFpEF治疗的一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与另一种HFpEF疗法(如用于治疗HFpEF的药剂)组合施用于受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与低血糖疗法(如用于治疗低血糖的药剂)组合施用于受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与抗高血压疗法(如用于治疗高血压的药剂)组合施用于受试者。

在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与抗高血压剂组合施用于受试者。例如但不限于，以下抗高血压剂中的任何抗高血压剂可以与HDAC6抑制剂组合使用：噻嗪利尿剂(例如，卡波齐德(Capozide)、呔安齐德(Dyazide)、海捷亚(Hyzaar)、洛普索HCT(LopressorHCT)、麦克西德(Maxzide)、普林齐德(Prinzide)、克洛普雷斯(Clorpres)、泰诺瑞克(Tenoretic)或氯噻酮(Thalitone))、钙通道阻滞剂(例如，氨氯地平(Amlodipine)、地尔硫卓(Diltiazem)、非洛地平(Felodipine)、依拉地平(Isradipine)、尼卡地平(Nicardipine)、硝苯地平(Nifedipine)、尼索地平(Nisoldipine)或维拉帕米(Verapamil))、ACE抑制剂(例如，贝那普利(Benazepril)、卡托普利(Captopril)、依那普利(Enalapril)、福辛普利(Fosinopril)、赖诺普利(Lisinopril)、莫昔普利(Moexipril)、(Perindopril)、培哚普利(Quinapril)、雷米普利(Ramipril)或群多普利(Trandolapril))、血管紧张素II受体拮抗剂(ARB)(例如，阿齐沙坦(Azilsartan)、坎地沙坦(Candesartan)、依普沙坦(Eprosartan)、厄贝沙坦(Irbesartan)、洛沙坦(Losartan)、奥美沙坦(Olmesartan)、替米沙坦(Telmisartan)或缬沙坦(Valsartan))以及β阻滞剂(例如，醋丁洛尔(Acebutolol)、阿替洛尔(Atenolol)、比索洛尔(Bisoprolol)、美托洛尔(Metoprolol)、纳多洛尔(Nadolol)、奈比洛尔(Nebivolol)或普萘洛尔(Propranolol)。

在一些实施例中，将本文所描述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与ACE抑制剂组合施用于受试者。在一些实施例中，将本文所描述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与β阻断剂组合施用于受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与噻嗪利尿剂组合施用于受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与钙通道阻滞剂组合施用于受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与血管紧张素II受体拮抗剂(ARB)组合施用于受试者。

在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与醛固酮受体激动剂(例如，螺内酯)组合施用于受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与螺内酯组合施用于受试者。

在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与血管紧张素和脑啡肽酶受体激动剂(例如，沙库巴曲-缬沙坦(sacubitril-valsartan))组合施用于受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与血管紧张素受体-脑啡肽酶抑制剂(ARNi)组合施用于受试者。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与沙库巴曲和/或缬沙坦组合施用于受试者。

在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与降低血糖水平的低血糖剂(例如，用于治疗2型糖尿病的口服低血糖疗法)组合施用于受试者。例如但不限于，以下低血糖剂(或药剂类别)中的任何低血糖剂可以与HDAC6抑制剂组合使用：磺脲(sulfonylureas)、美格列脲(meglitinides)、双胍(二甲双胍(metformin))、噻唑烷二酮、α-葡糖苷酶抑制剂、DPP4抑制剂、塞克洛瑟(cycloset)和SGLT2抑制剂。在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与口服低血糖剂(例如，其用于治疗2型糖尿病)组合施用于受试者。

在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)与钠-葡萄糖共转运体2(SLGT2)抑制剂(例如，恩格列净)组合施用于受试者。

在一些实施例中，本文所述的HDAC6抑制剂(或包括此类HDAC6抑制剂的药物组合物)在另外的疗法之前、同时或之后施用于受试者。在一些实施例中，任何HDAC6抑制剂以治疗有效量施用于受试者，并且本文所述的任何另外的疗法以治疗有效量施用于受试者。

在一些实施例中，根据本文所述的方法治疗的受试者尚未接受抗高血压疗法。在一些实施例中，根据本文所述的方法治疗的受试者尚未接受低血糖疗法。在一些实施例中，根据本文所述的方法治疗的受试者尚未接受代谢性疾病疗法。在一些实施例中，根据本文所述的方法治疗的受试者尚未接受HFpEF疗法。在一些实施例中，根据本文所述的方法治疗的受试者尚未接受心脏保护疗法和/或心脏病状(例如，心力衰竭)疗法。在一些实施例中，根据本文所述的方法治疗的受试者尚未接受SGLT2抑制剂。

在一些实施例中，本文中提供了试剂盒，其包括本文所述的HDAC6抑制剂(或包括所述抑制剂的药物组合物)和一种或多种另外的药剂(例如，用于治疗代谢性疾病的另外的药剂、用于治疗HFpEF的另外的药剂、抗高血压剂和/或低血糖剂)。在一些实施例中，本文中提供了试剂盒，其包括(i)HDAC6抑制剂(例如，以治疗有效量)和(ii)一种或多种另外的药剂(如本文所述的任何另外的药剂，例如但不限于，噻嗪利尿剂、钙通道阻滞剂、ACE抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂(ARB)、SGLT2抑制剂(例如，恩格列净)或β阻滞剂(例如，以治疗有效量))。

待治疗的患者群体

在一些实施例中，所述受试者是人。在一些实施例中，所述人是成人。在一些实施例中，所述人为60岁或以上。在一些实施例中，所述人超过60岁。在一些实施例中，所述人为65岁或以上。在一些实施例中，所述人超过65岁。在一些实施例中，所述人为70岁或以上。在一些实施例中，所述人超过70岁。在一些实施例中，所述受试者是男性(例如，至少或大于60岁、65岁或70岁的男性)。在一些实施例中，所述受试者是女性(例如，至少或大于60岁、65岁或70岁的女性)。

在一些实施例中，所治疗的受试者是肥胖的(例如，BMI为30或更高)。在一些实施例中，所述受试者有患上肥胖症的风险(例如，BMI为25或更高)。在一些实施例中，所治疗的受试者患有代谢性疾病。在一些实施例中，所述受试者有患上代谢性疾病的风险。在一些实施例中，所述受试者患有糖尿病(或有患上糖尿病的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有糖尿病(或有患上糖尿病的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有糖尿病前期(或有患上糖尿病前期的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有糖尿病性心肌病(或有患上糖尿病性心肌病的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有代谢综合征(或有患上代谢综合征的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有高血压(或有患上高血压的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有高甘油三酯血症(或有患上高甘油三酯血症的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有血脂异常(或有患上血脂异常的风险)。

在一些实施例中，所治疗的受试者不是肥胖的(例如，BMI小于30)。在一些实施例中，所述受试者的BMI小于25。在一些实施例中，所治疗的受试者不患有代谢性疾病。在一些实施例中，所治疗的受试者不患有糖尿病(diabetes，例如，不患有糖尿病(diabetesmellitus))。在一些实施例中，所述受试者不患有糖尿病前期。在一些实施例中，所述受试者不患有糖尿病性心肌病。在一些实施例中，所述受试者不患有代谢综合征。在一些实施例中，所述受试者不患有高血压。在一些实施例中，所述受试者不患有高甘油三酯血症。在一些实施例中，所述受试者不患有血脂异常。例如，根据本文所述的方法治疗的患有HFpEF的受试者可能患有或不患有这些病状。

在一些实施例中，所治疗的受试者患有HFpEF。在一些实施例中，所治疗的受试者有患上HFpEF的风险。在一些实施例中，所述受试者患有心脏纤维化(或有患上心脏纤维化的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有舒张功能障碍(或有患上舒张功能障碍的风险)。

在一些实施例中，所述受试者患有冠状动脉疾病(CAD)(或有患上CAD的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有瓣膜性心脏病(或有患上瓣膜性心脏病的风险)。在一些实施例中，所述受试者患有心房纤颤(或有患上心房纤颤的风险)。

本发明的带编号实施例(I)

1.一种治疗或预防有需要的受试者的代谢性疾病的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

2.根据实施例1所述的方法，其中所述受试者是肥胖的或有患上肥胖症的风险。

3.根据实施例1或实施例2所述的方法，其中所述代谢性疾病是与肥胖症，任选地饮食诱导的肥胖症相关的代谢性疾病。

4.根据实施例1至3中任一项所述的方法，其中所述代谢性疾病是糖尿病(diabetes，例如，糖尿病(diabetes mellitus))、糖尿病前期、糖尿病性心肌病、代谢综合征、高血压、高甘油三酯血症或血脂异常。

5.根据实施例4所述的方法，其中所述代谢性疾病是糖尿病。

6.根据实施例4所述的方法，其中所述代谢性疾病是代谢综合征。

7.一种治疗有需要的受试者的肥胖症的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

8.根据实施例1至7所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是氟烷基-噁二唑衍生物。

9.根据实施例8所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是根据下式的氟烷基-噁二唑衍生物：

10.根据实施例1至9所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是根据式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中

R¹选自由以下组成的组：

n选自0、1和2。

11.根据实施例10所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂选自由以下组成的组：

/>

12.根据实施例10所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是

或其类似物。

13.根据实施例10所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是

14.根据实施例10所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂选自表13(在实例7中)中的任何HDAC6抑制剂。

15.根据实施例14所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是表13中的IC₅₀等于或小于0.03μM的任何HDAC6抑制剂。

16.根据实施例10所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是具有下式的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

X¹是S；

R^a选自由以下组成的组：H、卤素和C_1-3烷基；

R¹是

R³是H或烷基；

17.根据实施例16所述的方法，其中R^a是H。

18.根据实施例16或17所述的方法，其中R¹是

19.根据实施例16至18中任一项所述的方法，其中R⁴是-(SO₂)R²。

20.根据实施例19所述的方法，其中–(SO₂)R²是-(SO₂)烷基、-(SO₂)亚烷基杂环基、-(SO₂)卤代烷基、-(SO₂)卤代烷氧基或-(SO₂)环烷基。

21.根据实施例16至20任一项所述的方法，其中R⁵是杂芳基。

22.根据实施例21所述的方法，其中所述杂芳基是5至6元杂芳基。

23.根据实施例22所述的方法，其中所述5至6元杂芳基选自由以下组成的组：其中R^b是卤素、烷基、烷氧基、环烷基、-CN、卤代烷基或卤代烷氧基；并且m是0或1。

24.根据实施例23所述的方法，其中R^b是F、Cl、-CH₃、-CH₂CH₃、-CF₃、-CHF₂、-CF₂CH₃、-CN、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-OCH(CH₃)₂、-OCF₃、-OCHF₂、-OCH₂CF₂H和环丙基。

25.根据实施例16至24中任一项所述的方法，其中所述芳基选自由以下组成的组：苯基、3-氯苯基、3-氯-4-氟苯基、3-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基和2,6-二氟苯基。

26.根据实施例10所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是具有式(Ik)的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

27.根据实施例26所述的方法，其中R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

28.根据实施例26或27所述的方法，其中R⁴是任选地经取代的烷基或环烷基。

29.根据实施例26所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是具有以下结构的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

30.根据实施例29所述的方法，其中R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

31.根据实施例29或30所述的方法，其中R⁴是任选地经取代的烷基或环烷基。

32.根据实施例29所述的方法，其中R⁴是烷基。

33.根据实施例26所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是具有以下结构的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

34.根据实施例33所述的方法，其中R^b是H、卤素、卤代烷基或卤代烷氧基。

35.根据实施例33或34所述的方法，其中R⁴是任选地经取代的烷基。

36.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

37.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

38.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

39.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

40.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

41.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

42.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

43.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

44.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

45.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

46.根据实施例16所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是以下式化合物：

或其药学上可接受的盐。

47.根据实施例1至7中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是式(II)化合物：

其中

n是0或1；

X是O、NR⁴或CR⁴R⁴'；

Y是键、CR²R³或S(O)₂；

R¹和R²与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；或者

R²和R³与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；并且

R⁴和R⁴'与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；

48.根据实施例1至7中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是CAY10603、吐巴辛(tubacin)、利可司他(ACY-1215)、西他司他(citarinostat)(ACY-241)、ACY-738、QTX-125、CKD-506、nexturastat A、妥巴斯汀A(tubastatinA)或HPOB。

49.根据前述实施例中任一项所述的方法，其中所述化合物是所述化合物而不是其药学上可接受的盐。

50.根据实施例1至49中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂对HDAC6的选择性为对HDAC的所有其它同工酶的选择性的至少100倍。

51.根据实施例1至50中任一项所述的方法，其中所述施用是口服。

52.根据实施例1至51中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。

53.根据实施例1至52中任一项所述的方法，其中所述受试者患有高血压或有患上高血压的风险。

54.根据实施例1至53中任一项所述的方法，其中所述受试者患有糖尿病或有患上糖尿病的风险。

55.根据实施例1至54中任一项所述的方法，其中所述受试者患有糖尿病性心肌病或有患上糖尿病性心肌病的风险。

56.根据实施例1至55中任一项所述的方法，其中所述受试者患有代谢综合征或有患上代谢综合征的风险。

57.根据实施例1至56中任一项所述的方法，其中所述受试者患有高甘油酯血症或血脂异常或有患上高甘油酯血症或血脂异常的风险。

58.根据实施例1至57中任一项所述的方法，其中所述受试者是至少65岁的人。

59.根据实施例58所述的方法，其中所述受试者是至少70岁的人。

60.根据实施例1至59中任一项所述的方法，其中所述方法治疗或预防代谢性疾病的至少一种症状。

61.根据实施例1至60中任一项所述的方法，其中所述方法改善葡萄糖耐受性。

62.根据实施例1至61中任一项所述的方法，其中所述方法改善胰岛素抵抗。

63.根据实施例1至62中任一项所述的方法，其中所述方法降低葡萄糖水平。

64.根据实施例1至63中任一项所述的方法，其中所述方法抑制脂肪组织中的炎性基因。

65.根据实施例1至64中任一项所述的方法，其中所述方法预防所述受试者的心力衰竭。

66.一种HDAC6抑制剂，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用。

67.根据实施例66所述的HDAC6抑制剂，其中所述HDAC6抑制剂是实施例8至50中所描述的任一种HDAC6抑制剂。

68.一种药物组合物，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用，所述药物组合物包括HDAC6抑制剂。

69.根据实施例68所述的药物组合物，其中所述HDAC6抑制剂是实施例8至50中所描述的任一种HDAC6抑制剂。

70.一种试剂盒，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用，所述试剂盒包括HDAC6抑制剂和说明书。

71.根据实施例70所述的试剂盒，其中所述HDAC6抑制剂是实施例8至50中所描述的任一种HDAC6抑制剂。

72.一种HDAC6抑制剂在治疗代谢性疾病中的用途。

73.根据实施例72所述的用途，其中所述HDAC6抑制剂是实施例8至50中所描述的任一种HDAC6抑制剂。

本发明的带编号实施例(II)

1.一种治疗或预防有需要的受试者的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

2.一种治疗或预防有需要的受试者的舒张功能失调(例如，与HFpEF相关)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

3.一种治疗或预防有需要的受试者的心脏纤维化(例如，与HFpEF相关)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

4.根据实施例1至3中任一项所述的方法，其中所述施用是口服。

5.根据实施例1至4中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。

6.根据实施例5所述的方法，其中所述受试者为至少65岁。

7.根据实施例5所述的方法，其中所述受试者为至少70岁。

或其药学上可接受的盐，其中

R¹选自由以下组成的组：

n选自0、1和2。

/>

12.根据实施例10所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是

或其类似物。

13.根据实施例10所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是

或其药学上可接受的盐，

其中：

X¹是S；

R^a选自由以下组成的组：H、卤素和C_1-3烷基；

R¹是

R³是H或烷基；

17.根据实施例16所述的方法，其中R^a是H。

18.根据实施例16或17所述的方法，其中R¹是

21.根据实施例16至20任一项所述的方法，其中R⁵是杂芳基。

或其药学上可接受的盐，

其中：

或其药学上可接受的盐，

其中：

32.根据实施例29所述的方法，其中R⁴是烷基。

或其药学上可接受的盐，

其中：

或其药学上可接受的盐。

其中

n是0或1；

X是O、NR⁴或CR⁴R⁴'；

Y是键、CR²R³或S(O)₂；

R¹和R²与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；或者

R²和R³与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；并且

R⁴和R⁴'与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；

48.根据实施例1至7中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是CAY10603、吐巴辛、利可司他(ACY-1215)、西他司他(ACY-241)、ACY-738、QTX-125、CKD-506、nexturastatA、妥巴斯汀A或HPOB。

51.根据实施例1至50中任一项所述的方法，其中所述受试者患有高血压或有患上高血压的风险。

52.根据实施例1至51中任一项所述的方法，其中所述受试者患有糖尿病或有患上糖尿病的风险。

53.根据实施例1至52中任一项所述的方法，其中所述受试者患有冠状动脉疾病(CAD)或有患上CAD的风险。

54.根据实施例1至53中任一项所述的方法，其中所述受试者患有瓣膜性心脏病或有患上瓣膜性心脏病的风险。

55.根据实施例1至54中任一项所述的方法，其中所述受试者患有心房纤颤或有患上心房纤颤的风险。

56.根据实施例1至55中任一项所述的方法，其中所述方法治疗或预防HFpEF的至少一种症状。

57.根据实施例1至56中任一项所述的方法，其中所述方法减小左心室(LV)质量。

58.根据实施例1至57中任一项所述的方法，其中所述方法减小LV壁厚度。

59.根据实施例1至58中任一项所述的方法，其中所述方法改善LV松弛。

60.根据实施例1至59中任一项所述的方法，其中所述方法改善LV充盈压。

61.根据实施例1至60中任一项所述的方法，其中所述方法预防所述受试者的心力衰竭。

62.一种HDAC6抑制剂，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用。

63.根据实施例62所述的HDAC6抑制剂，其中所述HDAC6抑制剂是实施例8至50中描述的任一种HDAC6抑制剂。

64.一种药物组合物，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用，所述药物组合物包括HDAC6抑制剂。

65.根据实施例64所述的药物组合物，其中所述HDAC6抑制剂是实施例8至50中所描述的任一种HDAC6抑制剂。

66.一种试剂盒，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用，所述试剂盒包括HDAC6抑制剂和说明书。

67.根据实施例66所述的试剂盒，其中所述HDAC6抑制剂是实施例8至50中所描述的任一种HDAC6抑制剂。

68.一种HDAC6抑制剂在治疗射血分数保留的心力衰竭中的用途。

69.根据实施例68所述的用途，其中所述HDAC6抑制剂是实施例8至50中所描述的任一种HDAC6抑制剂。

实例

通过以下实施例进一步说明本发明。以下实施例是非限制性的，仅代表本发明的各个方面。

实例1：HDAC6选择性抑制剂改善饮食诱导的肥胖症小鼠模型的葡萄糖耐受性和胰岛素抵抗

此实例证明，组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)选择性抑制剂改善饮食诱导的肥胖小鼠模型的葡萄糖耐受性和胰岛素抵抗。饮食诱导的肥胖症模型密切模拟导致人类肥胖症的高脂肪/高密度食物。(综述于Wang等人,《分子生物学方法(MethodsMolBiol.)》821:421–433(2012)中)。

图1A-1L示出了，用TYA-11631进行的HDAC6抑制改善饮食诱导的肥胖小鼠模型的葡萄糖耐受性和胰岛素抵抗。TYA-11631是式(I)内以及例如式(Ic)、式(Ik)和式I(y)内的化合物。

16周雄性饮食诱导的肥胖(DIO)C57BL/6J(目录380050)小鼠和年龄/性别匹配的对照(目录000664)购自Jackson从6周龄开始，向DIO小鼠(n＝40)饲喂具有60kcal％脂肪的啮齿动物饮食(D12492)，并且向对照小鼠饲喂具有10kcal％脂肪的啮齿动物饮食(D12450B)。

通过在禁食6小时后注射葡萄糖(在盐水中2g/kg)进行腹膜内葡萄糖耐受性测试(GTT)。在葡萄糖施用之前(0分钟)和之后15分钟、30分钟、45分钟、60分钟和120分钟，用血糖仪测量尾部血糖水平(mg/dl)。相比于对照，DIO小鼠在16周龄时出现严重葡萄糖不耐受。(图1A、图1B)。

基于葡萄糖AUC水平，将DIO小鼠均匀地随机化到四个处理组中以接受媒剂(n＝9)或三种剂量3mg/kg、10mg/kg、30mg/kg的TYA-11631(每种n＝10)。对照小鼠还被分成用媒剂(n＝10)或30mg/kgTYA-11631(n＝10)口服给药。为了评估TYA-11631对葡萄糖代谢的急性应答，在第1次给药后6小时进行GTT。令人惊讶的是，单次给药所有三种测试剂量的TYA-11631显著降低了葡萄糖水平。(图1C、图1D)。持续2周的TYA-11631处理使葡萄糖耐受性以剂量依赖性方式显著改善。(图1E、图1F)。

为了评估TYA-11631对胰岛素抵抗的影响，通过在禁食6小时后注射胰岛素(1U/kg)进行腹膜内胰岛素耐受性测试(ITT)。在胰岛素施用之前(0分钟)和之后15分钟、30分钟、45分钟、60分钟和120分钟，用血糖仪测量尾部血糖水平(mg/dl)。持续4周的HDAC6抑制剂(TYA-11631)处理改善DIO小鼠的胰岛素抵抗。10mg/kg和30mg/kg以相当的活性显著降低了葡萄糖AUC(ITT)，3mg/kg显示出降低的趋势。(图1G、图1H)

还在非禁食小鼠中评估了TYA-11631对血糖的影响。在早晨收集尾部血液样品，并且用血糖仪对尾部血液样品进行测量。持续6周的TYA-11631处理引起非禁食葡萄糖的剂量依赖性减少，这与禁食后的葡萄糖耐受测试的数据一致。(图1I)

用TYA-11631进行的处理引起DIO小鼠的体重的剂量依赖性减小。(参见图1J、图1K、图1L)组之间未观察到食物消耗的差异。值得注意的是，用30mg/kg TYA-11631给药6周的对照小鼠未显示出血糖水平和体重的变化。条和误差条显示出平均值和SEM。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。

图2A-C显示出，用TYA-11631进行的HDAC6抑制抑制饮食诱导的肥胖小鼠模型的脂肪组织中的炎性基因。

在单次给药30mg/kg TYA-116316小时后，解剖来自DIO小鼠的白色脂肪组织(附睾)。实时q-PCR数据显示，TYA-11631明显地抑制白色脂肪组织中的促炎基因IL-6(图2A)、IL-10(图2B)和TGFb1(图2C)的上调。这些基因的抑制或消融已显示出通过葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性的改善来保护小鼠免于饮食诱导的肥胖症(Han等人,《美国国家科学院院刊(PNAS)》2020；Rajbhandari等人,《细胞(Cell)》2018)。

总之，这些数据显示出，组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)选择性抑制剂改善饮食诱导的肥胖小鼠模型的葡萄糖耐受性和胰岛素抵抗，并且表明了构成全身葡萄糖代谢的影响的基础的潜在分子机制。

实例2：HDAC6抑制剂改善糖尿病小鼠模型的葡萄糖代谢和代谢性疾病的症状

此实例表明，组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)选择性抑制剂改善糖尿病小鼠模型的葡萄糖代谢和代谢性疾病的症状(与高脂肪饮食无关)。

材料和方法

在此实例中使用了HDAC6抑制剂TYA-11018。TYA-11018是式(I)内以及例如式(Ic)和式I(y)内的化合物。媒剂在纯化水中含有5％DMSO+45％PEG-300。

测试系统：

8周龄雄性db/db(目录000697，纯合Lepr^db)小鼠和年龄/性别匹配的野生型对照(目录000664购自杰克森实验室(缅因州巴尔港(Bar Harbor,ME))。将动物用正常食物(LabDiet 5053，10kcal％脂肪饮食，密苏里州圣路易斯(StLouis,MO))饲喂，并且根据国家科学院国家研究委员会实验室动物的护理和使用指南(National Research Councilofthe National Academies guidelines for the care and use oflaboratoryanimals)圈养在动物研究设施中。所有小鼠在适应期1周后用于实验。

基线葡萄糖和动物随机化：

从尾静脉提取处于饲喂状态(在施用TYA-11018或单独的媒剂之前)的血液样本，以确定基线葡萄糖。基于体重和血糖水平两者，将db/db小鼠随机化到三个组中，以口服接受媒剂或两种剂量，即1.5mg/kg或15mg/kg的TYA-11018。向野生型小鼠口服给药媒剂用于对照。

单次口服施用和血糖测试：

在以10ml/kg的体积通过胃管单次施用TYA-11018或媒剂后，将动物转移到清洁笼中并且在顶部与水瓶连线以禁食。在单次给药TYA-11018或媒剂后0.5小时、1小时、2小时、4小时和6小时从尾静脉提取处于禁食状态的血液样本，以确定葡萄糖。通过与AimStripPlus血糖监测系统一起使用的AimStrip Plus血糖条(德克萨斯州圣安东尼奥的杰曼实验室(Germaine Laboratories,SanAntonio,TX))测量血糖水平(mg/dL)。

结果

动物纳入和随机化：

基于体重和基线葡萄糖，将动物随机化并纳入用于单次施用研究。在饲喂状态下，就在TYA-11018或媒剂施用之前，测量体重和尾部血糖水平(mg/dL)。相比于对照，db/db小鼠在9周龄时出现严重肥胖症与高血糖。将动物随机化并均匀地分布成三个组，以接受的媒剂(n＝8)或两种剂量1.5(n＝8)和15mg/kg(n＝9)的TYA-11018。将对照(年龄和性别匹配的野生型小鼠)用媒剂(n＝8)口服给药(表3)。

表3：动物随机化和组信息

在db/db糖尿病小鼠中单次施用TYA-11018剂量依赖性地降低的禁食葡萄糖：

为了评估TYA-11018对葡萄糖代谢的急性应答，在单次给药后0.5小时、1小时、2小时、4小时和6小时测量血糖。如图3A-3C中所示，用TYA-11018进行的处理显示出对降低禁食葡萄糖的剂量依赖性影响。在给药/禁食后四小时，相比于经媒剂处理的db/db糖尿病小鼠，1.5mg/kg和15mg/kg两者均显著降低血糖。值得注意的是，单次施用15mg/kgTYA-11018使禁食葡萄糖在4小时内归一化。这些数据支持HDAC6选择性抑制剂在改善葡萄糖代谢和代谢性疾病的症状方面的效用。

实例3：HDAC6选择性抑制剂改善HFpEF小鼠模型的心脏结构和心脏功能

此实例表明，组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)选择性抑制剂改善射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的小鼠模型的心脏结构和心脏功能。

首先，建立了HFpEF的动物模型：发现在以高脂肪饮食(HFD)饲喂的野生型C57BL6小鼠中以外科手术方式施加中度经主动脉收缩(mTAC)诱导心脏代谢性心力衰竭表型，所述心脏代谢性心力衰竭表型再现人的HFpEF的全身和心血管特征(图4A-4H)。

用30mg/kgHDAC6抑制剂(TYA-11631)或媒剂对HFpEF模型动物进行口服给药，每天一次，持续六周。HDAC6抑制剂有效地处理HFpEF。HDAC6抑制剂处理显著减少通过超声心动图仪测量的左心室(LV)质量(图5E)和LV壁厚度(图5F)；并且HDAC6抑制剂处理改善葡萄糖耐受性(图5A)。另外，TYA-11631处理维持改善的LV松弛和LV充盈压，如通过以下示出的：等容松弛时间的延长减少(图5H)；较低的E/A(图5I)和E/e'比(图5L)；提高的e'速度(图5K)；以及降低的末期舒张压(图5M)。这些功效参数中的每一个相对于对照水平归一化。

此外，用TYA-11631处理的HFD/mTAC小鼠显示出肺重量(图5O)的趋势性减少，这表明肺充血有所改善，这与降低的充盈压一致。在研究中在动物中未观察到处理相关的不良事件或毒性。

在分子水平上，HDAC6抑制剂显著抑制HFD/mTAC小鼠的心脏组织中的通常与纤维化相关的基因(Postn、Col1a1、Col3a1、Col5a2)、与心脏应激相关的基因(Nppb)和与炎症相关的基因(Tnfα)的上调(图6A-6H)。

结果表明，选择性抑制HDAC6会逆转HFpEF中的许多不良病理生理过程。

实例4：HDAC6选择性抑制剂改善第二HFpEF小鼠模型的心脏结构和心脏功能

此实例表明，组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)选择性抑制剂改善射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的第二小鼠模型的心脏结构和心脏功能，所述射血分数保留的心力衰竭重现了综合征的绝大多数临床特征：与用N[w]-硝基-1-精氨酸甲酯(L-NAME)抑制组成型一氧化氮合酶(NOS)相关的高脂肪饮食(HFD)。(Schiattarella等人《自然(Nature)》568(7752):351-356(2019))。

首先，验证小鼠模型。相比于对照小鼠，HFD/L-NAME处理显著诱导体重增加(图7B)、高血压(图7C)和葡萄糖不耐受(图7D)。超声心动图评估表明左心室射血分数(LVEF)的持续保存(图7E)。在HFD/L-NAME小鼠中存在显著同心性左心室(LV)肥大，如通过LV质量(图7F)和心脏舒张时的LV壁厚度(图7G)的增加、没有LV室扩张(图7H)表明的。另外，伴随性地暴露于HFD/L-NAME的小鼠表现出LV舒张功能障碍与松弛受损和左心室充盈压增加的迹象，如通过无创多普勒成像测量的延长的IVRT(图7I)、减小的e'速度(图7J)和提高的E/e'比(图7K)、E/A(图7L)证明的。

其次，在HFD/L-NAME模型中，用HDAC6抑制剂TYA-11631进行的处理显示出改善葡萄糖耐受性和舒张功能障碍。

将动物随机化为分别用30mg/kg TYA-11631(n＝8)或媒剂(n＝12)口服给药，每天一次，持续九周。在对照组中，6只小鼠接受媒剂，并且8只小鼠用30mg/kg TYA-11631给药。如图8A和图8B中示出的，给药5周后进行葡萄糖耐受性测试(GTT)。

用TYA-11631进行的处理显著改善HFD/L-NAME小鼠的葡萄糖耐受性，但对照动物中无变化。(图8B)在GTT期间在指定时间点(葡萄糖注射后0分钟和30分钟)的血浆胰岛素水平通过敏感小鼠胰岛素检测试剂盒(目录80-INSMS-E01，ALPCO)测量。TYA-11631处理使胰岛素分泌减少，这表明葡萄糖耐受性改善可能是由于胰岛素作用/敏感性改善。(图8C)用TYA-11631进行的处理使体重显著降低，但在用HFD/L-NAME饲喂的小鼠中食物消耗没有差异。(图8D、图8E)TYA-11631不影响通过无创尾压方法测量的HFD/L-NAME小鼠的收缩压。(图5F)超声心动描记术显示出，TYA-11631处理保留射血分数(图8G)，然而显著减少左心室质量(图8H)和LV壁厚度(图8I)。

值得注意的是，尚未观察到与TYA-11631相关的不良反应。用TYA-11631给药的对照动物在LV结构和功能参数以及ECG信号-QT、QRS、PR间隔和R振幅中的每一者方面均无变化(分别地，图8P、图8Q、图8R和图8S)，这进一步支持化合物的总体良好的安全性谱。

实例5：HDAC6抑制剂减少HFpEF的小鼠模型的心脏纤维化并增强线粒体功能

此实例证明，组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)选择性抑制剂减少HFpEF小鼠模型的心脏纤维化并增强线粒体功能。具体地，此实例证明，HDAC6选择性抑制剂(i)校正HFpEF模型的失调的纤维化和氧化磷酸化基因表达，(ii)增加人iPSC-CM的线粒体膜电位和备用呼吸量，以及(iii)防止原代人心脏成纤维细胞中由TGF-β进行的成纤维细胞活化。

如下所述，使用RNA测序和qPCR对来自具有HFpEF的小鼠的心脏组织进行转录分析。本文呈现的RNA测序数据显示，在用TYA-11631处理的HFpEF小鼠中，与肥大、纤维化和PDGFR信号传导相关的基因集的表达降低。qPCR数据进一步证实了与改善的舒张功能相关的纤维化基因的表达降低。另外，本文呈现的RNA测序数据显示，与线粒体能量产生相关的基因集富集在经TYA-11631处理的HFpEF小鼠中。线粒体基因的表达增加与改善的舒张功能相关。进一步测试了TYA-11631，以确定其是否在使用人诱导的多能干细胞衍生的心肌细胞的体外模型中对代谢有直接影响。本文呈现的数据显示出储备呼吸量增强，这表明响应于经TYA-11631处理的人iPSC衍生的CM中的应激的ATP产生有所改善。

材料和方法

在高脂肪饮食饲喂的小鼠中，通过中度经主动脉收缩以外科手术方式诱导HFpEF，持续12周(mTAC/HFD)。在建立HFpEF表型后，小鼠每天一次口服接受TYA-11631(30mg/kg)或媒剂，持续6周。经TYA-11631处理的小鼠显示出心脏功能改善，如通过减小的左心室后壁厚度(LVPWd)、等容舒张时间(IVRT)和二尖瓣E/e'(MV E/e')所测量的。TYA-11631是式(I)内以及例如式(Ic)、式(Ik)和式I(y)内的化合物。

测试系统

十二周龄雄性C57Bl/6NJ小鼠购自杰克森实验室。将小鼠维持在特定不含病原体的条件下，并且向其随意提供无菌食物和水。将动物根据国家学院国家研究委员会实验室动物的护理和使用指南圈养在动物研究设施中。在实验之前，使动物适应3天。

诱导多能干细胞衍生的心肌细胞(iPSC衍生的心肌细胞)：iCell心肌细胞²购自细胞动力公司(Cellular Dynamics，威斯康辛州麦迪逊(Madison,WI))。在处理前将细胞培养在低葡萄糖和富含脂质的培养基中一周，以增强细胞成熟。

RNA提取和mRNA测序(RNA测序)方法和分析

使用来自因美纳公司(Illumina)的polyA尾特定方案(加利福尼亚州圣地亚哥(SanDiego)，目录号20020594)从小鼠心脏组织(对照小鼠，经媒剂处理的n＝3，HFpEF小鼠，经媒剂处理的，n＝5，以及HFpEF小鼠，经TYA-11631处理的，n＝6)提取RNA。使用TruSeq链式mRNA试剂盒(因美纳公司，加利福尼亚州圣地亚哥，目录号20020594)按照制造商的说明对100ng RNA进行RNA文库制备和核糖体RNA去除。使用因美纳公司NovaSeq SP将文库按100bp单端读段进行测序，平均每个样品4570万个读段。将FASTQ格式的原始RNA测序读段直接与GENCODE(第M25版)比对，以用于参考转录本组装(GRCm38.p6和集成体101)。接下来，使用采用tximport的脚本来产生相对于每百万转录本(TPM)归一化的表达矩阵。在此分析中，仅使用在所有样品中的至少90％中检测到的基因。使用Ensembl发布小鼠注释(Ensemblreleasemusmusculus annotations，GRCm38，2020年4月))确定蛋白质编码基因，并且通过biomaRt(第2.46.3版)提取蛋白质编码基因。省去非蛋白质编码和线粒体基因，之后相对于TPM重新归一化。在添加1作为伪计数之后，对所产生的表达矩阵(16,499个基因)进行log₂变换。

为了评估功能扰动，使用由博得研究生(BroadInstitute)开发的GSEA(第4.1.0版)进行预先排序的基因集富集分析。GSEA评估两种表型之间的基因集表达的差异是否是统计上显著的(Subramanian,2005)。在分析之前，利用基于t统计值分配评分和方向(“+”或“-”)的每个基因计算排序的列表。仅当假发现率(FDR)小于0.25时，基因集才被视为是统计上显著的，如通过多重假设测试校正方法确定的(Benjamini,1995)。使用反映基因集在排序的列表中过表达的程度并且针对基因集大小归一化的经归一化的富集评分(NES)以选择显著改变的基因集。使用皮尔逊相关系数以计算所关注基因与心脏舒张功能参数之间的相关性。

RNA提取和TaqMan qPCR分析方法

将十五至三十毫克(15-30mg)小鼠心脏组织(对照小鼠，经媒剂处理的，n＝3，HFpEF小鼠，经媒剂处理的，n＝5以及HFpEF小鼠，经TYA-11631处理的，n＝6)直接放置到500μLTri-Reagent(加利福尼亚州尔湾市的兹莫研究公司(Zymo research,Irvine,CA)，目录号R2050-1-200)中并且在-80℃下快速冷冻。将样品解冻并且在4℃下通过Bullet Blender组织均质器(Storm Pro BT24M，特洛伊市的Next Advance公司(Next Advance,Troy))均质化15分钟。使用Direct-Zol RNA小量Plus试剂盒(Direct-Zol RNA Miniprep Plus Kit，加利福尼亚州尔湾市的兹莫研究公司，目录号R2070)根据制造商说明提取RNA。在收集RNA时，通过NanoDrop(马萨诸塞州沃尔瑟姆的赛默飞世尔科技公司(ThermoScientific,Waltham,MA))确定浓度。使用SuperScriptIII试剂盒(马萨诸塞州沃尔瑟姆的英杰公司(Invitrogen,Waltham,Ma)，目录号18080051)通过随机六聚体由750ngRNA转录cDNA。将cDNA样品在不含核酸酶的水中稀释6倍。使用标准TaqMan通用PCR主混合物(马萨诸塞州沃尔瑟姆的应用生物系统公司(Applied Biosystems,Waltham,MA)，目录号43-181-57)利用表4中所列的TaqMan探针(加利福尼亚州圣地亚哥的生命技术公司(Life Technologies,San Diego,CA))进行实时qPCR反应。

表4：qPCR分析中使用的TaqMan探针

基因探针	基因ID	外显子边界	扩增子长度(bp)
				Col1a1	Mm00801666_g1	49-50	89
Col3a1	Mm01254476_m1	50-51	136
				Postn	Mm00450111_m1	3-4	79
Gapdh	Mm99999915_g1	2-3	107

使用QuantStudio7 Flex实时PCR系统(加利福尼亚州圣地亚哥的生命技术公司)利用50℃下2分钟UNG温育、95℃下10分钟聚合酶活化和由95℃下15秒的变性和60℃下1分钟退火/延长组成的40个PCR循环的热循环参数进行实时qPCR反应。将基因表达相对于Gapdh归一化为管家基因。分析每个样品的四个技术复制品。使用2^–ΔΔC _T方法确定相对基因表达。在Prism第9版(加利福尼亚州圣地亚哥的GraphPad软件公司(GraphPad Software,San Diego,CA))中使用未配对t测试进行统计分析。

使用Seahorse血氧仪进行代谢测量

使用测量活细胞在多孔板中的氧气消耗率(OCR)的Seahorse Xfe96分析仪(加利福尼亚州圣克拉拉的安捷伦公司(Agilent,Santa Clara,CA))以评估人诱导多能干细胞衍生的心肌细胞(iPSC衍生的CM)的代谢活性。将Seahorse XF96 V3 PS细胞培养微型板(目录号101085-004)用1/100稀释的含100μL Matrigel(纽约州康宁市的康宁公司(Corning,Corning,NY)，目录号356231)的不含苯酚的DMEM培养基涂覆过夜。第二天，将Matrigel去除，并且将25μL铺板培养基(威斯康辛州麦迪逊的细胞动力公司，目录号R1151)添加到SeahorseXF96V3 PS细胞培养微型板的每个孔中。将一小瓶iCell心肌细胞²(约6百万个细胞，威斯康辛州麦迪逊的细胞动力公司，目录号01434)在37℃水浴中冷冻2分钟。将细胞直接接种到Seahorse XF96V3 PS细胞培养微型板上，以在铺板培养基中达到每孔15,000个细胞的最终密度。从背景记录中排除角孔。使细胞在室温下静置10分钟以允许均匀的接种分布，然后置于37℃温育箱中。在细胞接种后五小时，将培养基变为维持培养基(威斯康辛州麦迪逊的细胞动力公司，目录号R1151)持续3天，以进行恢复。在观察到跳动单层后，将培养基变为脂肪酸富集的成熟培养基(Feyen,2020)持续一周，以提高iPSC衍生的CM的代谢成熟度。每3天用新鲜培养基补充细胞。在测定当天，将细胞在含有于DMEM(加利福尼亚州圣克拉拉的安捷伦公司，目录号103575-100)中的2mM谷氨酰胺的饥饿培养基中温育一小时。然后将细胞用含DMSO(0.1％)或TYA-11631(3μM)的Mercola培养基中处理6小时。将细胞洗涤，并且在测定之前与补充有2mM谷氨酰胺、2mM丙酮酸盐和3mM葡萄糖的Seahorse XF DMEM基础培养基一起温育1小时。根据制造商的指南制备SeahorseXfe96筒。Mito应激测试(加利福尼亚州圣克拉拉的安捷伦公司，目录号103015-100)后利用按以下顺序注射的抑制剂测量氧气消耗率(OCR)：寡霉素(2.5μM)、FCCP(1μM)、鱼藤酮和抗霉素A(0.5μM)。将OCR相对于总核计数归一化，如通过赫斯特染色(Hoechststaining)所测量的。基础呼吸计算如下：(第一次寡霉素注射之前的最后一次速率测量结果)–(鱼藤酮/抗霉素之后的最小速率测量结果)。储备呼吸量(RRC)计算如下：(添加FFCP之后的最大呼吸)-(基础呼吸)。在Prism第9版(加利福尼亚州圣地亚哥的GraphPad软件公司)中使用未配对t测试进行统计分析。

结果

通过RNA测序对HFpEF小鼠模型的TYA-11631影响的转录分析

使用RNA测序对来自对照小鼠和HFpEF小鼠(mTAC/HFD)的心脏组织中的蛋白质编码基因进行全面转录谱分析。为了评估功能扰动，对两个比较进行无偏差基因集富集分析：1)经媒剂处理的HFpEF小鼠组织相对于经媒剂处理的对照小鼠组织，2)经TYA-11631处理的HFpEF小鼠组织相对于经媒剂处理的HFpEF小鼠组织。

相对于对照，将与肌肉肥大和收缩、纤维化(转化生长因子β受体信号传导、I型胶原蛋白合成、胞外基质结构组成)和血小板源性生长因子受体(PDGFR)信号传导相关的基因集富集在经媒剂处理的HFpEF动物中，并且在用TYA-11631处理的HFpEF小鼠中逆转(图9和图10)。相对于对照，在用媒剂处理的HFpEF小鼠中，与线粒体功能相关的基因集显著耗竭，所述线粒体功能包含电子传递链、氧化磷酸化和复合物I(图9和图10)。这些线粒体基因集显著富集在用TYA-11631处理的HFpEF小鼠中(图9、图10和表5)。

表5：用媒剂或TYA-11631处理的HFpEF小鼠中改变(FDR<0.25)的GSEA类别

在通过GSEA分析鉴定的基因的表达与LV结构和心脏舒张功能的不同参数之间进行皮尔逊相关系数分析，所述不同参数包含末期心脏舒张处的左心室后壁厚度(LVPWd)和等容舒张时间(IVRT)或二尖瓣E/e'(MVE/e')。在舒张功能受损的经媒剂处理的HFpEF动物中，与纤维化相关的几种基因(Col1a2、Col3a1、Fbn1、Postn、Cilp)的表达水平显著提高，如通过增加的LVPWd和IVRT所示的。TYA-11631处理使HFpEF小鼠的纤维化相关的基因的表达减少，伴随着舒张功能改善(图12A-12J，表6和表7)。

表6：超声心动图数据和纤维化基因的表达水平

经媒剂处理的健康动物用作对照。

表7：超声心动图数据和与纤维化相关的基因之间的皮尔逊相关系数(r值)和统计显著性(p值)

与线粒体呼吸电子传输链的不同亚基(NADH：泛醌氧化还原酶亚基；Ndufa13、Ndufa13、Ndufa5、Ndufs7、Ndufa1、Ndufa8)相关的基因的表达水平在舒张功能受损的经媒剂处理的HFpEF动物中显著降低，如通过LVPWd和MVE/e'增加示出的。响应于TYA-11631处理，线粒体基因的表达水平在HFpEF小鼠中有所增加，并且与改善的舒张功能正相关(图11A-11F、表8和表9)。

表8：超声心动图数据和线粒体基因的表达水平

使用用媒剂处理的健康动物作为对照。

表9：超声心动图数据和与线粒体相关的基因之间的皮尔逊相关系数(r)和统计显著性(p值)

通过qPCR得出的TYA-11631对HFpEF小鼠模型中的纤维化基因的影响

纤维化标志物骨膜蛋白(由Postn基因编码)、胶原蛋白3A1(由Col3a1基因编码)和胶原蛋白1A1(由Col1a1基因编码)显示出HFpEF小鼠心脏中的表达增加的趋势，如通过qPCR测量的。TYA-11631处理使纤维化基因的表达显著降低至接近健康对照的水平(表)。

表10：通过qPCR测量的mRNA表达水平

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Rep表示复制品。

TYA-11631对iPSC-CM代谢状态的影响

将用TYA-11631(3μM)处理的人iPSC衍生的CM与经媒剂处理的细胞(DMSO)的代谢状态进行比较。使用Seahorse血氧定量法收集基础呼吸和储备呼吸量的测量结果。虽然两组都具有相似的基础呼吸速率，但经TYA-11631处理的人iPSC衍生的CM具有更高的膜电位和储备呼吸量，这表明ATP产生、细胞对能量应激作出应答的能力以及对心肌细胞的直接影响较大(图11G和11H以及表10)。

表11：人iPSC衍生的CM中的代谢参数。

因此，TYA-11631处理显示出减少在HFpEF的小鼠模型中激活的致病转录特征(基因集包含肥大、纤维化和血小板源性生长因子受体信号传导)。使用qPCR的靶向基因表达分析证实了与改善的舒张功能相关的纤维化基因的表达降低。另外，基于RNA测序数据，TYA-11631富集了与HFpEF小鼠的线粒体能量产生相关的基因集。线粒体基因的表达增加与改善的HFpEF表型相关。为了在功能上评估TYA-11631在体外的代谢效应，使用iPSC衍生的CM。数据显示，经TYA-11631处理的人iPSC衍生的CM的储备呼吸量增加，这表明响应于代谢需求改进的ATP产生。

总之，这些结果显示出，HDAC6选择性抑制剂通过心脏中的与纤维化和线粒体功能障碍相关的多个通路逆转预先存在的舒张功能障碍，所述纤维化和线粒体功能障碍两者都促进HFpEF发病机制。这些结果还证实，HDAC6选择性抑制剂对HFpEF模型中的心脏有直接益处，并且所观察到的改善是由于心脏中的多模式机制，并且不仅是由于全身代谢和炎症的改善的结果。

实例6：HDAC6选择性抑制剂和恩格列净在HFpEF小鼠模型中的功效

所述研究被设计成并排比较TYA-11018(选择性HDAC6抑制剂)与恩格列净(选择性SGLT2抑制剂，MedChemExpress公司(MedChemExpress LLC))在由高脂肪饮食和使用N^ω-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)对组成型一氧化氮合酶的抑制的组合诱导的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的小鼠模型中的功效。在确立HFpEF表型后，小鼠每天一次口服接受15mg/kgTYA-11018或10mg/kg恩格列净或媒剂，持续9周。每周进行健康监测，并记录体重。在第1次给药后进行葡萄糖耐受性测试。在处理9周后通过超声心动描记术记录心脏功能。在给药后9周，在末端处通过PV环测量末端舒张压(EDP)。

测试系统

动物：使用具有确立的HFpEF表型的小鼠队列和年龄/性别匹配的野生型对照用于给药研究。如先前所述完成HFpEF模型制备(Schiattarella,G.G.等人,《自然》568,351–356(2019))。简言之，10周大雄性C57BL/6J(目录000664)小鼠购自杰克森实验室(缅因州巴尔港)。在适应1周后，向一组小鼠饲喂含有0.07％L-NAME的高脂肪饮食(LabDiet5G5V，密苏里州圣路易斯)，持续15周。向对照组的小鼠饲喂正常饲料(LabDiet 5053，密苏里州圣路易斯)。在动物入选功效研究之前，进行超声心动描记术以证明HFpEF发作。将动物根据国家学院国家研究委员会实验室动物的护理和使用指南圈养在动物研究设施中。

HFpEF模型诱导

十(10)周大雄性C57BL/6J(目录000664)小鼠购自杰克森实验室(缅因州巴尔港)。在适应1周后，向一组小鼠饲喂含有0.07％N^ω-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)的高脂肪饮食持续15周(根据Schiattarella,G.G.等人,《自然》568,351–356(2019)的参考文献进行修改)。向第二组小鼠饲喂标准饲料用于对照。

常规超声心动描记术和多普勒成像

使用配备有MS400换能器的VisualSonics Vevo 2100系统进行经胸超声心动描记术(安大略省多伦多的Visual Sonics公司(Visual Sonics,Toronto,ON))。从中心室水平的短轴M-模式扫描中获得LVEF和收缩功能的其它指标，如通过有意识的温和约束的小鼠中乳头肌的存在所指示的。在麻醉的小鼠中获得心尖四腔视图以使用脉冲波和二尖瓣水平的组织多普勒成像进行舒张功能测量。麻醉由5％异氟烷诱导，并且通过对后爪之一上的坚硬压力缺乏响应进行证实。在超声心动图采集期间，—在体温控制的条件下，将异氟烷减少至1.0％-1.5％，并且进行调整以将心率维持在450-500次心跳/分钟的范围内。收集的参数包含：左心室射血分数(LVEF)、左心室质量(LV质量)、左心室末端舒张后壁(LVPWd)、早期心脏舒张期间跨二尖瓣的峰多普勒血液流入速度(E波)、晚期心脏舒张期间跨二尖瓣的峰多普勒血液流入速度(e')、等容舒张时间(IVRT)。在程序结束时，所有小鼠都在没有困难的情况下从麻醉中恢复。

腹膜内葡萄糖耐受性测试(IP-GTT)

在禁食6小时(从上午7点到下午1点)后通过注射葡萄糖(2g/kg在盐水中)进行腹膜内葡萄糖耐受性测试。在葡萄糖施用后0分钟(基线，葡萄糖给药前)、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟和120分钟，通过与AimStripPlus血糖监测系统(德克萨斯州圣安东尼奥的杰曼实验室)一起使用的AimStrip Plus血糖条测量尾部血糖水平(mg/dL)。

功效测试中的动物入选和随机化

在HFpEF表型确立之后，利用超声心动描记术的平衡参数，将HFD/L-NAME或对照饮食的动物随机化为两组，以分别接受利用30mg/kg TYA-11631或媒剂进行的口服给药，每天一次，持续九周。将TYA-11631调配在媒剂5％DMSO+45％PEG-300+50％纯净水中。在研究期间每天监测体重和食物消耗。

压力-容积分析

通过从喉底部开始直至锁骨正上方的中线切口将气管暴露。用一件聚乙烯-90管对小鼠进行插管。在使用6-0丝缝线将管固定在位之后，将100％氧气轻轻吹过开口。将接受通风的小鼠放置在温热(37℃)的垫上。然后分离右颈动脉。小心以防止对迷走神经的损伤。用异氟烷对小鼠进行轻微麻醉，从而将其心率维持在450-550次心跳/分钟。将1.2F压力-容积导管(FTE-1212B-4518，纽约州伊萨卡的Transonic公司(Transonic,Inc,Ithaca,NY))插入到右颈动脉中，并且然后推进到左心室中。在换能器推进到心室后，将换能器牢固地绑扎在位，如压力曲线的变化所证明的。然后记录闭胸模式下的血液动力学参数。

动物随机化

向具有确立的HFpEF表型的小鼠随机化以口服施用15mg/kg TYA-11018或10mg/kg恩格列净或媒剂(n＝12/组)，每天一次，持续九周。在对照(非HFpEF)组中，9只小鼠接受媒剂。

表12：动物募集和随机化

结果

单剂量的TYA-11018将禁食葡萄糖和葡萄糖耐受性提高到与恩格列净的水平相似的水平

在第1次给药6小时后进行葡萄糖耐受性测试(IP-GTT)。使动物在6小时期间禁食。15mg/kg TYA-11018的单次口服剂量显著降低了禁食葡萄糖，并且将葡萄糖耐受性提高到与确立的小鼠HFpEF模型中的恩格列净的水平相似的水平(图14A)。

持续9周的TYA-11018处理表现出与HFpEF模型中的恩格列净的功效相当的功效。

在处理9周后，使用超声心动描记术以测量LV结构和功能。M模式超声心动描记术显示出，TYA-11018处理保留了射血分数，并且显著减少左心室质量，这与恩格列净类似。非侵入性多普勒成像和末端侵入性插管分析揭示，用两种化合物持续9周的处理降低了E/A、E/e'比率并且降低了末端舒张压，这表明LV松弛性和充盈压得到改善。值得注意的是，在TYA-11018的情况下，相比于恩格列净，观察到E/e'的优异降低(图14B-14F)。

TYA-11018抑制心脏组织中的心肌应激和纤维化的标志物基因的上调。

在处理9周后收集和处理心脏组织以用于基因表达分析。使用TRIzol试剂(马萨诸塞州沃尔瑟姆的英杰公司)从小鼠心脏组织中提取总RNA。使用总共500ngRNA以使用SuperScript^TMIII第一链合成系统(马萨诸塞州沃尔瑟姆的英杰公司)进行逆转录。使用TaqMan基因表达测定探针与Nppb和Col3a1基因序列的特定引物一式两份进行实时PCR。使用了使用Gapdh以进行归一化的2-ΔΔCt相对定量方法以估计样品中的靶mRNA的量，并且计算相对于来自对照样品的mRNA表达水平的倍数比。

TYA-11018显著抑制Nppb和Col3a1，即两个通常分别用于揭示心脏组织中的心脏应激和纤维化的标志物基因的上调。心脏组织中的基因表达变化与心脏结构和功能的改善一致。值得注意的是，这种选择性HDAC6抑制剂表现出相比于恩格列净对这些基因的抑制的优异作用。选择性HDAC6抑制剂对促纤维化基因Col3a1的显著作用还表明形成不同于SGLT2抑制的HDAC6抑制的作用的基础的潜在机制。

总之，在进行HDAC6抑制的HFpEF模型和SGLT2抑制剂中观察到的相当的功效提供了这些发现可转化为临床开发的证据。

实例7：

式(I)的各种HDAC6抑制剂的生物化学活性和效力

根据公开为WO2021127643A1的PCT/US2020/066439中所公开的方法合成本文所公开的化合物，具体地那些式(I)化合物，所述文献通过引用整体并入本文。在生物化学测定中测试这些化合物对HDAC6的效力和对HDAC1的选择性。采用使用发光HDAC-Glo I/II测定(普洛麦格公司(Promega))的生物化学测定，并测量HDAC6和HDAC1重组蛋白的相对活性。将化合物首先分别在HDAC6或HDAC1存在下温育，然后加入发光底物。使用平板读数器获取数据，并相应地从数据计算生物化学IC₅₀。数据在表13中列出。从这些研究确定，本公开的化合物相对于HDAC1是HDAC6的选择性抑制剂，提供从约5至约30,0000的选择性比率。

表13：式(I)化合物的表征数据和HDAC6活性。

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实例8：

式(II)的各种HDAC6抑制剂的生物化学活性和效力

根据WO2021067859中所公开的方法合成本文所公开的化合物，具体地那些式(II)化合物，所述文献通过引用整体并入本文。在生物化学测定中测试这些化合物对HDAC6的效力和对HDAC1的选择性。采用使用发光HDAC-Glo I/II测定(普洛麦格公司)的生物化学测定，并测量HDAC6和HDAC1重组蛋白的相对活性。将化合物首先分别在HDAC6或HDAC1存在下温育，然后加入发光底物。使用平板读数器获取数据，并相应地从数据计算生物化学IC₅₀。数据在表14中列出。从这些研究确定，本公开的化合物相对于HDAC1是HDAC6的选择性抑制剂，提供从约5至约30,0000的选择性比率。

表14：对所公开的化合物的HDAC6活性和选择性的评估。

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下文提供了本实施例中所描述的化合物的结构、化学名称和另外的生物化学性质。

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参考文献

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通过引用并入

出于所有目的，本文中引用的所有参考文献、文章、出版物、专利、专利出版物和专利申请均通过引用的方式完全并入本文。然而，本文引用的任何参考文献、文章、出版物、专利、专利出版物和专利申请的提及不是也不应该被视为承认或以任何形式暗示其构成有效的现有技术或形成世界上的任何国家的公知常识的一部分。

Claims

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者是肥胖的或有患上肥胖症的风险。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述代谢性疾病是与肥胖症，任选地饮食诱导的肥胖症相关的代谢性疾病。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述代谢性疾病是糖尿病、糖尿病前期、糖尿病性心肌病、代谢综合征、高血压、高甘油三酯血症或血脂异常。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述代谢性疾病是糖尿病。

6.一种治疗有需要的受试者的肥胖症的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述受试者患有高血压或有患上高血压的风险。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述受试者患有代谢综合征或有患上代谢综合征的风险。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述受试者患有糖尿病或有患上糖尿病的风险。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述受试者患有糖尿病性心肌病或有患上糖尿病性心肌病的风险。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述受试者患有高甘油酯血症或血脂异常或有患上高甘油酯血症或血脂异常的风险。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述方法治疗或预防代谢性疾病的至少一种症状。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述方法改善葡萄糖耐受性。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述方法改善胰岛素抵抗。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述方法降低葡萄糖水平。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述方法抑制脂肪组织中的炎性基因。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述方法预防所述受试者的心力衰竭。

18.一种治疗或预防有需要的受试者的射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)的方法，所述方法包括向所述受试者施用HDAC6抑制剂。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述受试者患有高血压或有患上高血压的风险。

20.根据权利要求18或19中任一项所述的方法，其中所述受试者患有糖尿病或有患上糖尿病的风险。

21.根据权利要求18至20中任一项所述的方法，其中所述受试者患有冠状动脉疾病(CAD)或有患上CAD的风险。

22.根据权利要求18至21中任一项所述的方法，其中所述受试者患有瓣膜性心脏病或有患上瓣膜性心脏病的风险。

23.根据权利要求18至22中任一项所述的方法，其中所述受试者患有心房纤颤或有患上心房纤颤的风险。

24.根据权利要求18至23中任一项所述的方法，其中所述方法治疗或预防HFpEF的至少一种症状。

25.根据权利要求18至24中任一项所述的方法，其中所述方法减少左心室(LV)质量。

26.根据权利要求18至25中任一项所述的方法，其中所述方法减小LV壁厚度。

27.根据权利要求18至26中任一项所述的方法，其中所述方法改善LV松弛。

28.根据权利要求18至27中任一项所述的方法，其中所述方法改善LV充盈压。

29.根据权利要求18至28中任一项所述的方法，其中所述方法预防所述受试者的心力衰竭。

30.根据权利要求1至29中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。

31.根据权利要求30所述的方法，其中所述受试者为至少65岁或70岁。

32.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是根据式(I)的化合物：

其中

R¹选自由以下组成的组：

n选自0、1和2。

33.根据权利要求32所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂选自由以下组成的组：

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是

或其类似物。

35.根据权利要求34所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是

36.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是根据式I(y)的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中：

X¹是S；

R^a选自由以下组成的组：H、卤素和C_1-3烷基；

R¹是

R³是H或烷基；

37.根据权利要求36所述的方法，其中R^a是H。

38.根据权利要求36或37所述的方法，其中R¹是

39.根据权利要求36至38中任一项所述的方法，其中R⁴是-(SO₂)R²。

40.根据权利要求39所述的方法，其中-(SO₂)R²是-(SO₂)烷基、-(SO₂)亚烷基杂环基、-(SO₂)卤代烷基、-(SO₂)卤代烷氧基或-(SO₂)环烷基。

41.根据权利要求36至40中任一项所述的方法，其中R⁵是杂芳基。

42.根据权利要求41所述的方法，其中所述杂芳基是5至6元杂芳基。

43.根据权利要求42所述的方法，其中所述5至6元杂芳基选自由以下组成的组：其中R^b是卤素、烷基、烷氧基、环烷基、-CN、卤代烷基或卤代烷氧基；并且m是0或1。

44.根据权利要求43所述的方法，其中R^b是F、Cl、-CH₃、-CH₂CH₃、-CF₃、-CHF₂、-CF₂CH₃、-CN、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-OCH(CH₃)₂、-OCF₃、-OCHF₂、-OCH₂CF₂H和环丙基。

45.根据权利要求36至44中任一项所述的方法，其中所述芳基选自由以下组成的组：苯基、3-氯苯基、3-氯-4-氟苯基、3-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基和2,6-二氟苯基。

46.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：

或其药学上可接受的盐。

47.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：

或其药学上可接受的盐。

48.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：

或其药学上可接受的盐。

49.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：或其药学上可接受的盐。

50.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：或其药学上可接受的盐。

51.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：或其药学上可接受的盐。

52.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：或其药学上可接受的盐。

53.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：或其药学上可接受的盐。

54.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：

或其药学上可接受的盐。

55.根据权利要求36所述的方法，其中所述化合物是：

或其药学上可接受的盐。

56.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是式(II)化合物：

其中

n是0或1；

X是O、NR⁴或CR⁴R⁴'；

Y是键、CR²R³或S(O)₂；

R¹和R²与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；或者

R²和R³与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；并且

R⁴和R⁴'与其所连接的碳原子一起形成碳环基或杂环基；

57.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是CAY10603、吐巴辛(tubacin)、利可司他(ricolinostat)(ACY-1215)、西他司他(citarinostat)(ACY-241)、ACY-738、QTX-125、CKD-506、nexturastat A、妥巴斯汀A(tubastatinA)或HPOB。

58.根据权利要求57所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是妥巴斯汀A。

59.根据权利要求57所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是利可司他。

60.根据权利要求57所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是CAY10603。

61.根据权利要求57所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂是nexturastat A。

62.根据权利要求1至61中任一项所述的方法，其中所述HDAC6抑制剂对HDAC6的选择性为对HDAC的所有其它同工酶的选择性的至少100倍。

63.根据权利要求1至62中任一项所述的方法，其中所述方法包括通过对多种候选化合物中的每个成员进行HDAC6选择性抑制的体外测试来选择所述HDAC6抑制剂，由此鉴定用作所述HDAC6抑制剂的选定化合物。

64.一种HDAC6抑制剂，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用。

65.一种药物组合物，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用，所述药物组合物包括HDAC6抑制剂。

66.一种试剂盒，其在用于治疗代谢性疾病的方法中使用，所述试剂盒包括HDAC6抑制剂和说明书。

67.一种HDAC6抑制剂在治疗代谢性疾病中的用途。

68.一种HDAC6抑制剂，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用。

69.一种药物组合物，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用，所述药物组合物包括HDAC6抑制剂。

70.一种试剂盒，其在用于治疗射血分数保留的心力衰竭的方法中使用，所述试剂盒包括HDAC6抑制剂和说明书。

71.一种HDAC6抑制剂在治疗射血分数保留的心力衰竭中的用途。