CN117545769A - 一种抗angptl3抗体或其抗原结合片段的药物组合物及其用途 - Google Patents
一种抗angptl3抗体或其抗原结合片段的药物组合物及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117545769A CN117545769A CN202280041925.3A CN202280041925A CN117545769A CN 117545769 A CN117545769 A CN 117545769A CN 202280041925 A CN202280041925 A CN 202280041925A CN 117545769 A CN117545769 A CN 117545769A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antibody
- angptl
- pharmaceutical composition
- buffer
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 104
- 230000027455 binding Effects 0.000 title claims abstract description 102
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 97
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 97
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 97
- 239000012634 fragment Substances 0.000 title claims abstract description 93
- BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M sodium acetic acid acetate Chemical compound [Na+].CC(O)=O.CC([O-])=O BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 73
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 claims abstract description 39
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 57
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 claims description 57
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 57
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 57
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 claims description 57
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 53
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 53
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 52
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 51
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 47
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 43
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 20
- 239000012931 lyophilized formulation Substances 0.000 claims description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 17
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 claims description 16
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 claims description 10
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 claims description 10
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 10
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 claims description 9
- SILCDLWESNHZKB-UHFFFAOYSA-L disodium 4-hydroxy-4-oxobutanoate Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CCC([O-])=O.OC(=O)CCC([O-])=O SILCDLWESNHZKB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 8
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 claims description 7
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 claims description 7
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims description 6
- 208000008338 non-alcoholic fatty liver disease Diseases 0.000 claims description 6
- 206010053219 non-alcoholic steatohepatitis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000004644 retinal vein occlusion Diseases 0.000 claims description 6
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims description 5
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 5
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000008362 succinate buffer Substances 0.000 claims description 5
- QZNNVYOVQUKYSC-JEDNCBNOSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 QZNNVYOVQUKYSC-JEDNCBNOSA-N 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 4
- 208000020346 hyperlipoproteinemia Diseases 0.000 claims description 4
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 claims description 4
- XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K trisodium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 4
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 claims description 3
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 claims description 3
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 3
- 206010070901 Diabetic dyslipidaemia Diseases 0.000 claims description 3
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 3
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 claims description 3
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 claims description 3
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims description 3
- 206010024604 Lipoatrophy Diseases 0.000 claims description 3
- 206010049287 Lipodystrophy acquired Diseases 0.000 claims description 3
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010033647 Pancreatitis acute Diseases 0.000 claims description 3
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 claims description 3
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010038933 Retinopathy of prematurity Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 3
- 201000003229 acute pancreatitis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 claims description 3
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 3
- 201000005667 central retinal vein occlusion Diseases 0.000 claims description 3
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006575 hypertriglyceridemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006132 lipodystrophy Diseases 0.000 claims description 3
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 claims description 3
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 3
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 claims description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 2
- 125000000185 sucrose group Chemical group 0.000 claims 2
- 101000693085 Homo sapiens Angiopoietin-related protein 3 Proteins 0.000 description 81
- 102100025668 Angiopoietin-related protein 3 Human genes 0.000 description 64
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 50
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 50
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 42
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 37
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 34
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 32
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 27
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 26
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 26
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 23
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 22
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 22
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 22
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 22
- 102000053580 human ANGPTL3 Human genes 0.000 description 21
- LEAHFJQFYSDGGP-UHFFFAOYSA-K trisodium;dihydrogen phosphate;hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OP(O)([O-])=O.OP([O-])([O-])=O LEAHFJQFYSDGGP-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 21
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 19
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 18
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 18
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 101100001705 Mus musculus Angptl3 gene Proteins 0.000 description 15
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 14
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 14
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 14
- 229950004341 evinacumab Drugs 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 13
- 108010013563 Lipoprotein Lipase Proteins 0.000 description 12
- 102100022119 Lipoprotein lipase Human genes 0.000 description 12
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 12
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 11
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 10
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 10
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 10
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 10
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 10
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 10
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 9
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 8
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 8
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 8
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 101150037123 APOE gene Proteins 0.000 description 7
- 102100029470 Apolipoprotein E Human genes 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 7
- 238000002868 homogeneous time resolved fluorescence Methods 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 6
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 5
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 5
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 102100024640 Low-density lipoprotein receptor Human genes 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 5
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 5
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 5
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- -1 linoleyl-sarcosine Chemical compound 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 5
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 101710085848 Angiopoietin-related protein 3 Proteins 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 4
- 108010001831 LDL receptors Proteins 0.000 description 4
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 4
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 4
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 4
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 229940074404 sodium succinate Drugs 0.000 description 4
- ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L sodium succinate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 150000002411 histidines Chemical class 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- VBGUQBPWJMPQBI-UHFFFAOYSA-M sodium;butanedioic acid;4-hydroxy-4-oxobutanoate Chemical compound [Na+].OC(=O)CCC(O)=O.OC(=O)CCC([O-])=O VBGUQBPWJMPQBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 3
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 102100031375 Endothelial lipase Human genes 0.000 description 2
- 101710087274 Endothelial lipase Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000935587 Homo sapiens Flavin reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 238000013357 binding ELISA Methods 0.000 description 2
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 2
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 2
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 2
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol Natural products OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000007639 printing Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M sodium;dodecane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCS([O-])(=O)=O DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- SERLAGPUMNYUCK-DCUALPFSSA-N 1-O-alpha-D-glucopyranosyl-D-mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SERLAGPUMNYUCK-DCUALPFSSA-N 0.000 description 1
- OTKWLUKIHNEGIG-UHFFFAOYSA-N 2-[3-(hexadecanoylamino)propyl-dimethylazaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O OTKWLUKIHNEGIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKMIHKCGXQMFEU-UHFFFAOYSA-N 2-[dimethyl(tetradecyl)azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O KKMIHKCGXQMFEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIHXSRXTECMMJY-MURFETPASA-N 2-[dimethyl-[(9z,12z)-octadeca-9,12-dienyl]azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O DIHXSRXTECMMJY-MURFETPASA-N 0.000 description 1
- LMVGXBRDRZOPHA-UHFFFAOYSA-N 2-[dimethyl-[3-(16-methylheptadecanoylamino)propyl]azaniumyl]acetate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O LMVGXBRDRZOPHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZKWJQNCOTNUNMF-QXMHVHEDSA-N 2-[dimethyl-[3-[[(z)-octadec-9-enoyl]amino]propyl]azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O ZKWJQNCOTNUNMF-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- BMYCCWYAFNPAQC-UHFFFAOYSA-N 2-[dodecyl(methyl)azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCN(C)CC(O)=O BMYCCWYAFNPAQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYIOVYZMKITKRO-UHFFFAOYSA-N 2-[hexadecyl(dimethyl)azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O TYIOVYZMKITKRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SNQVCAOGQHOSEN-UHFFFAOYSA-N 2-[methyl(octadecyl)amino]acetic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCN(C)CC(O)=O SNQVCAOGQHOSEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFJVDSDGRBUNKZ-UHFFFAOYSA-N 2-[methyl(tetradecyl)azaniumyl]acetate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCN(C)CC(O)=O QFJVDSDGRBUNKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIROHOMJLWMERM-UHFFFAOYSA-N 3-[dimethyl(octadecyl)azaniumyl]propane-1-sulfonate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O DIROHOMJLWMERM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102000006501 Angiopoietin-like Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010019425 Angiopoietin-like Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010024284 Apolipoprotein C-II Proteins 0.000 description 1
- 102000018616 Apolipoproteins B Human genes 0.000 description 1
- 108010027006 Apolipoproteins B Proteins 0.000 description 1
- 102000013918 Apolipoproteins E Human genes 0.000 description 1
- 108010025628 Apolipoproteins E Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101000619870 Bos taurus Lipoprotein lipase Proteins 0.000 description 1
- HHNJQTAVFGQHBP-UHFFFAOYSA-L C(C)(=O)O.C(C)(=O)[O-].[Mg+2].C(C)(=O)[O-] Chemical compound C(C)(=O)O.C(C)(=O)[O-].[Mg+2].C(C)(=O)[O-] HHNJQTAVFGQHBP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BMCZJPYYEFQOCO-UHFFFAOYSA-H C(CC(O)(C(=O)[O-])CC(=O)[O-])(=O)[O-].[Mg+2].C(CC(O)(C(=O)O)CC(=O)O)(=O)O.C(CC(O)(C(=O)[O-])CC(=O)[O-])(=O)[O-].[Mg+2].[Mg+2] Chemical compound C(CC(O)(C(=O)[O-])CC(=O)[O-])(=O)[O-].[Mg+2].C(CC(O)(C(=O)O)CC(=O)O)(=O)O.C(CC(O)(C(=O)[O-])CC(=O)[O-])(=O)[O-].[Mg+2].[Mg+2] BMCZJPYYEFQOCO-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 108010075254 C-Peptide Proteins 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N D-arabinitol Chemical compound OC[C@@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N D-melezitose Natural products O1C(CO)C(O)C(O)C(O)C1OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O QWIZNVHXZXRPDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005033 Fourier transform infrared spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 238000013218 HFD mouse model Methods 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 208000000563 Hyperlipoproteinemia Type II Diseases 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 238000001265 Jonckheere trend test Methods 0.000 description 1
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- NBGXQZRRLOGAJF-UHFFFAOYSA-N Maltulose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)(CO)OCC1O NBGXQZRRLOGAJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- QGCUAFIULMNFPJ-UHFFFAOYSA-N Myristamidopropyl betaine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O QGCUAFIULMNFPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- UQZIYBXSHAGNOE-USOSMYMVSA-N Stachyose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[C@@H]2[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O2)O1 UQZIYBXSHAGNOE-USOSMYMVSA-N 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 239000012505 Superdex™ Substances 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 206010045261 Type IIa hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- BHATUINFZWUDIX-UHFFFAOYSA-N Zwittergent 3-14 Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O BHATUINFZWUDIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000005388 borosilicate glass Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- DGPUYHMCOANORE-UHFFFAOYSA-L calcium;acetic acid;diacetate Chemical compound [Ca+2].CC(O)=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O DGPUYHMCOANORE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- PBUBJNYXWIDFMU-UHFFFAOYSA-L calcium;butanedioate Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)CCC([O-])=O PBUBJNYXWIDFMU-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000000533 capillary isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- MRUAUOIMASANKQ-UHFFFAOYSA-O carboxymethyl-[3-(dodecanoylamino)propyl]-dimethylazanium Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC(O)=O MRUAUOIMASANKQ-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000000546 chi-square test Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940001468 citrate Drugs 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- MRUAUOIMASANKQ-UHFFFAOYSA-N cocamidopropyl betaine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O MRUAUOIMASANKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940073507 cocamidopropyl betaine Drugs 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- CVOQYKPWIVSMDC-UHFFFAOYSA-L dipotassium;butanedioate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O CVOQYKPWIVSMDC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- CBMPTFJVXNIWHP-UHFFFAOYSA-L disodium;hydrogen phosphate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O CBMPTFJVXNIWHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 201000001386 familial hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- 201000011110 familial lipoprotein lipase deficiency Diseases 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001506 fluorescence spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 229940050411 fumarate Drugs 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 238000007131 hydrochloric acid regeneration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000055 hyoplipidemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000000905 isomalt Substances 0.000 description 1
- 235000010439 isomalt Nutrition 0.000 description 1
- HPIGCVXMBGOWTF-UHFFFAOYSA-N isomaltol Natural products CC(=O)C=1OC=CC=1O HPIGCVXMBGOWTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000000832 lactitol Substances 0.000 description 1
- 235000010448 lactitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N lactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N 0.000 description 1
- 229960003451 lactitol Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N lactulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N 0.000 description 1
- 229960000511 lactulose Drugs 0.000 description 1
- PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N lactulose keto form Natural products OCC(=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 229940075468 lauramidopropyl betaine Drugs 0.000 description 1
- IZWSFJTYBVKZNK-UHFFFAOYSA-N lauryl sulfobetaine Chemical compound CCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O IZWSFJTYBVKZNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008604 lipoprotein metabolism Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- JCQLYHFGKNRPGE-HFZVAGMNSA-N maltulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-HFZVAGMNSA-N 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N melezitose Chemical compound O([C@@]1(O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)CO)CO)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- NZXVYLJKFYSEPO-UHFFFAOYSA-N n-[3-(dimethylamino)propyl]-16-methylheptadecanamide Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCCN(C)C NZXVYLJKFYSEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDHJUCZXTYXGCZ-UHFFFAOYSA-N n-[3-(dimethylamino)propyl]hexadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCCN(C)C BDHJUCZXTYXGCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IFYDWYVPVAMGRO-UHFFFAOYSA-N n-[3-(dimethylamino)propyl]tetradecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCCN(C)C IFYDWYVPVAMGRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002840 non-reducing disaccharides Chemical group 0.000 description 1
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N octyl beta-D-glucopyranoside Chemical compound CCCCCCCCO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HEGSGKPQLMEBJL-RKQHYHRCSA-N 0.000 description 1
- 125000001117 oleyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000012510 peptide mapping method Methods 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- FHUOTRMCFQTSOA-UHFFFAOYSA-M potassium;acetic acid;acetate Chemical compound [K+].CC(O)=O.CC([O-])=O FHUOTRMCFQTSOA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BUCIWTBCUUHRHZ-UHFFFAOYSA-K potassium;disodium;dihydrogen phosphate;hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[K+].OP(O)([O-])=O.OP([O-])([O-])=O BUCIWTBCUUHRHZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000002818 protein evolution Methods 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 230000006884 regulation of angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- UQZIYBXSHAGNOE-XNSRJBNMSA-N stachyose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O3)O)O2)O)O1 UQZIYBXSHAGNOE-XNSRJBNMSA-N 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 238000000528 statistical test Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229940117986 sulfobetaine Drugs 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 229940104261 taurate Drugs 0.000 description 1
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000005979 thermal decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- SYSWJPSVYLUKCH-UHFFFAOYSA-H tricalcium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O SYSWJPSVYLUKCH-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- SPRBJFWIUVWXBT-UHFFFAOYSA-K tripotassium 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [K+].[K+].[K+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O SPRBJFWIUVWXBT-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
一种抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的药物组合物及其用途。具体地，所述药物组合物包含抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段以及醋酸‑醋酸钠缓冲液；所述药物组合物还可以包含糖和表面活性剂，具有良好的抗体稳定性。
Description
本申请要求2021年07月21日提交的申请号为202110822526.8的中国专利申请的优先权。
本公开涉及药物制剂领域，具体涉及一种包含抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的药物组合物及其医药用途。
血管生成素样蛋白3(Angiopoietin-like protein 3，ANGPTL3)是一种分泌蛋白，作为血管生成素样蛋白家族的成员，其主要在肝脏表达。ANGPTL3的氨基末端卷曲的区域与抑制脂蛋白脂肪酶(Lipoprotein lipase，LPL)活性有关，调节甘油三酯(triglyceride，TG)羧基端纤维蛋白原样区域主要与调节血管生成有关，因此，该蛋白具有调节脂质代谢和促进血管生成的功能。
ANGPTL3主要作用为调节脂蛋白代谢，通过抑制LPL和内皮脂酶(EL)在调节脂质代谢中发挥作用。目前ANGPTL3抑制物分为2种，一种是ANGPTL3-ASO，另一种为ANGPTL3单克隆抗体如Evinacumab，二者机制与作用部位不同，ANGPTL3-ASO主要作用于肝细胞，而Evinacumab在血液循环中起效。但无论是从表型还是基因水平上抑制ANGPTL3后均有突出且稳定的降脂效果。靶向ANGPTL3的IgG4亚型的单克隆抗体，能结合ANGPTL3，通过阻断ANGPTL3与LPL的结合，解除ANGPTL3对LPL酶活的抑制，促进血浆中甘油三酯的降解，从而达到治疗高血脂症的目的。
WO2021147984A提供了一种降血脂效果更好也更为持久的抗ANGPTL3抗体及其抗原结合片段。抗体药物分子量大，结构复杂，容易降解、聚合或发生不希望发生的化学修饰等而变得不稳定。为了使抗体适合于给药，并且在储存及随后使用过程中能保持稳定性，发挥更好的治疗效果，抗体药物的稳定制剂研究显得尤为重要。因此，对于抗ANGPTL3抗体及其抗原结合片段，需要研制较为稳定的制剂。本公开提供一种足够稳定、冻干形态好且更适于给药的包含抗ANGPTL3抗体及其抗原结合片段的药物组合物。
发明内容
本公开提供一种药物组合物，其包含抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，以及缓冲剂。以及，本公开提供所述药物组合物用于治疗、预防疾病的方法，及其医药用途。
在一些实施方案中，前述缓冲剂选自醋酸盐缓冲剂、组氨酸缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、琥珀酸盐缓冲剂和枸橼酸缓冲剂中的任一种，例如醋酸盐缓冲剂。
在一些实施方案中，前述缓冲剂选自醋酸-醋酸钠、组氨酸-盐酸盐、磷酸二氢钠-磷酸氢二钠、琥珀酸-琥珀酸钠和枸橼酸-枸橼酸钠缓冲剂中的任一种，例如醋酸-醋酸钠缓冲剂。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，其中：所述重链可变区包含如SEQ ID NO：9所示氨基酸序列的重链可变区中的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或所述轻链可变区包含如SEQ ID NO：10所示氨基酸序列的轻链可变区中的LCDR1、LCDR2和LCDR3。其中，所述CDR是根据Kabat、IMGT、Chothia、AbM或Contact编号系统定义的，一些具体实施方案中，为Kabat编号系统定义的。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，其中：所述重链可变区包含氨基酸序列如SEQ ID NO：14所示的HCDR1，如LINPRDDSTSYAQKFQG(SEQ ID NO：23)所示的HCDR2，和如SEQ ID NO：16所示的HCDR3；和/或所述轻链可变区包含氨基酸序列如RSSQSLLHSNGYTYLD(SEQ ID NO：24)所示的LCDR1，如SEQ ID NO：12所示的LCDR2，和如SEQ ID NO：13所示的HCDR3。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，其中：所述重链可变区包含如SEQ ID NO：17所示氨基酸序列的重链可变区的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或所述轻链可变区包含如SEQ ID NO：18所示氨基酸序列的轻链可变区的LCDR1、LCDR2和LCDR3。其中，所述CDR是根据Kabat、IMGT、Chothia、AbM或Contact编号系统定义的，一些具体实施方案中，为Kabat编号系统定义的。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，其中：所述重链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，和/或所述轻链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：13所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段选自鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体、全人抗体；在一些具体实施方案中，为人源化抗体。
在一些实施方案中，药物组合物中所述的人源化ANGPTL3抗体轻链和重链可变区上的轻链和重链FR序列分别来源于人种系轻链和重链的FR或其突变序列。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，其中：所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示或与之具有至少80％、至少85％、至少90％以上序列同一性，和/或所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示或与之具有至少80％、至少85％、至少90％以上序列同一性。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，其中：所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：17所示或与之具有至少80％、至少85％、至少90％及以上的序列同一性，和/或所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示或与之具有至少80％、至少85％、至少90％及以 上的序列同一性。
本公开中，“至少90％及以上的序列同一性”涵盖至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％及以上的序列同一性。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，其中：所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，其中：所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：17所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示。
在一些实施方案中，所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段进一步包含重链恒定区和轻链恒定区。在可选的实施方案中，所述重链恒定区源自人IgG1、IgG2、IgG3和IgG4恒定区，所述轻链恒定区源自人κ和λ链恒定区。
在一些实施方案中，所述重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO：19所示或与之具有至少80％、至少85％、至少90％及以上的序列同一性，和/或所述轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示或与之具有至少80％、至少85％、至少90％及以上的序列同一性。
在一些实施方案中，所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含重链和轻链，其中：所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示或与之具有至少80％、至少85％、至少90％及以上的序列同一性，和/或所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO：22所示或与之具有至少80％、至少85％、至少90％及以上的序列同一性。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链和轻链，其中：所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示，且所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO：22所示。
在一些实施方案中，本公开所述的抗原结合片段选自：Fab、F(ab')2、Fab'、Fd、Fv、dsFv、scFv、Fab和双特异性抗体。
在一些实施方案中，药物组合物中所述缓冲剂的pH值为4.0至7.0，例如4.0至6.9、4.0至6.8、4.0至6.7、4.0至6.6、4.0至6.5、4.0至6.4、4.0至6.3、4.0至6.2、4.0至6.1、4.0至6.0、4.0至5.9、4.0至5.8、4.0至5.7、4.0至5.6、4.0至5.5、4.5至6.5、4.5到6.0、4.5至5.5、5.0至7.0、5.0至6.5、5.0至6.0、5.0至5.5、4.6至6.6、4.6至6.5、4.6至6.4、4.6至6.3、4.6至6.2、4.6至6.1、4.6至6.0、4.6至5.9、4.6至5.8、4.6至5.7、4.6至5.6、4.6至5.5、4.6至5.4、4.8至6.6、4.8至6.5、4.8至6.4、4.8至6.3、4.8至6.2、4.8至6.1、4.8至6.0、4.8至5.9、4.8至5.8、4.8至5.7、4.8至5.6、4.8至5.5、4.8至5.4、4.9至5.4、5.0至5.4；在一些具体实施方案中，所述缓冲剂的pH值为约4.0、约4.1、约4.2、约4.3、约4.4、约4.5、约4.6、约4.7、约4.8、约4.9、约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.5、约6.6、约6.7、约6.8、约6.9、 或者约7.0，例如约5.2。
在一些实施方案中，药物组合物中所述缓冲剂浓度为5mM至40mM，例如5mM至30mM、5mM至20mM、5mM至15mM、5mM至10mM、10mM至15mM、8mM至12mM；一些具体实施方案中，所述缓冲剂的浓度为约5mM、约6mM、约7mM、约8mM、约9mM、约10mM、约11mM、约12mM、约13mM、约14mM、约15mM、约18mM、约20mM，例如约10mM。
在一些实施方案中，药物组合物中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段浓度为10mg/mL至200mg/mL，例如50mg/mL至200mg/mL、50mg/mL至150mg/mL、60mg/mL至150mg/mL、60mg/mL至120mg/mL、80mg/mL至150mg/mL、80mg/mL至120mg/mL、90mg/mL至120mg/mL、90mg/mL至110mg/mL；一些具体实施方案中，所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段浓度为约10mg/mL、约20mg/mL、约30mg/mL、约50mg/mL、约60mg/mL、约65mg/mL、约70mg/mL、约75mg/mL、约80mg/mL、约85mg/mL、约90mg/mL、约95mg/mL、约100mg/mL、约105mg/mL、约110mg/mL、约115mg/mL、约120mg/mL、约130mg/mL、约140mg/mL、约150mg/mL、约160mg/mL、约170mg/mL、约180mg/mL、约190mg/mL、约200mg/mL、或任意两数值间任意值，例如约100mg/mL。
在一些实施方案中，药物组合物中包含的表面活性剂可选自聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、聚羟亚烃、Triton、十二烷基磺酸钠、月桂基磺酸钠、辛基糖甙钠、月桂基-磺基甜菜碱、肉豆蔻基-磺基甜菜碱、亚油基-磺基甜菜碱、硬脂基-磺基甜菜碱、月桂基-肌氨酸、肉豆蔻基-肌氨酸、亚油基-肌氨酸、硬脂基-肌氨酸、亚油基-甜菜碱、肉豆蔻基-甜菜碱、鲸蜡基-甜菜碱、月桂酰胺基丙基-甜菜碱、柯卡酰胺基丙基-甜菜碱、亚油酰胺基丙基-甜菜碱、肉豆蔻酰胺基丙基-甜菜碱、棕榈酰胺基丙基-甜菜碱、异硬脂酰胺基丙基-甜菜碱、肉豆蔻酰胺基丙基-二甲基胺、棕榈酰胺基丙基-二甲基胺、异硬脂酰胺基丙基-二甲基胺、甲基可可酰基钠、甲基油基牛磺酸钠、聚乙二醇、聚丙二醇、乙烯与丙烯二醇的共聚物等等。一些具体实施方案中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20，例如聚山梨醇酯80。
在一些实施方案中，药物组合物中表面活性剂的浓度为0.05mg/mL至0.6mg/mL、例如0.1mg/mL至0.6mg/mL、0.1mg/mL至0.5mg/mL、0.1mg/mL至0.4mg/mL，例如0.1mg/mL至0.3mg/mL；一些具体实施方案中，所述药物组合物中表面活性剂的浓度为约0.1mg/mL、约0.15mg/mL、约0.2mg/mL、约0.25mg/mL、约0.3mg/mL、约0.4mg/mL、约0.5mg/mL、约0.6mg/mL，例如约0.2mg/mL。
在一些实施方案中，药物组合物还包括稳定剂。在可选的实施方案中，其中所述的稳定剂选自糖或氨基酸。在可选的实施方案中，糖包含常规组合物(CH
2O)
n及其衍生物，包括单糖、二糖、三糖、多糖、糖醇、还原性糖、非还原性糖等。在可选的实施方案中，糖可选自葡萄糖、蔗糖、海藻糖、乳糖、果糖、麦芽糖、右旋糖苷、甘油、赤藻糖醇、丙三醇、阿拉伯糖醇、木糖、山梨糖醇、甘露醇、密里二糖、松三糖、蜜三糖、甘露三糖、水苏糖、麦芽糖、乳果糖、麦芽酮糖、山梨醇、麦芽糖醇、乳糖醇、异-麦芽酮糖等。 一些具体实施方案中，所述糖是非还原性二糖，例如蔗糖。一些具体实施方案中，所述氨基酸选自甘氨酸、甲硫氨酸和脯氨酸。
在一些实施方案中，药物组合物中糖的浓度为40mg/mL至110mg/mL，例如为40mg/mL至95mg/mL、60mg/mL至90mg/mL、60mg/mL至80mg/mL、70mg/mL至90mg/mL、70mg/mL至80mg/mL；一些具体实施方案中，所述糖的浓度为约60mg/mL、约65mg/mL、约70mg/mL、约75mg/mL、约80mg/mL、约85mg/mL、约90mg/mL或任意两数值间任意值，例如约75mg/mL。
本公开提供一种药物组合物，其包含：
(a)10mg/mL至200mg/mL(例如，约50mg/mL)的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，和
(b)约10mM组氨酸-盐酸组氨酸缓冲液；
可选地，所述药物组合物的pH为6.0至6.6(例如，约6.0、约6.6)。
本公开提供一种药物组合物，其包含：
(a)10mg/mL至200mg/mL(例如，约50mg/mL)的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，和
(b)约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液；
可选地，所述药物组合物的pH为4.6至5.0(例如，约4.6、约5.0)。
本公开提供一种药物组合物，其包含：
(a)10mg/mL至200mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，和
(b)5mM至30mM的醋酸盐缓冲液(例如，醋酸-醋酸钠缓冲液)。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含：
(a)10mg/mL至200mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，
(b)5mM至30mM的醋酸盐缓冲液(例如，醋酸-醋酸钠缓冲液)，
(c)40mg/mL至90mg/mL的糖(例如，蔗糖)，和
(d)0.05mg/mL至0.6mg/mL的表面活性剂(例如，聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20)；
可选地，所述药物组合物的pH为4.5至6.5，例如5.0至5.4，例如约5.2。
本公开提供一种药物组合物，其包含：
(a)10mg/mL至200mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，和
(b)5mM至20mM的醋酸盐缓冲液(例如，醋酸-醋酸钠缓冲液)；
可选地，所述药物组合物的pH为5.0至5.5。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含：
(a)50mg/mL至150mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，
(b)5mM至15mM的醋酸盐缓冲液(例如，醋酸-醋酸钠缓冲液)，
(c)60mg/mL至90mg/mL的蔗糖，
(d)0.05mg/mL至0.5mg/mL的聚山梨醇酯80；
可选地，所述药物组合物的pH为5.0至6.0。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含：
(a)40mg/mL至120mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，
(b)5mM至15mM的醋酸盐缓冲液(例如，醋酸-醋酸钠缓冲液)，
(c)60mg/mL至90mg/mL的蔗糖，
(d)0.1mg/mL至0.4mg/mL的聚山梨醇酯80；
可选地，所述药物组合物的pH为5.0至5.8。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含：
(a)80mg/mL至120mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，
(b)5mM至15mM的醋酸盐缓冲液(例如，醋酸-醋酸钠缓冲液)，
(c)70mg/mL至90mg/mL的蔗糖，
(d)0.1mg/mL至0.3mg/mL的聚山梨醇酯80；
可选地，所述药物组合物的pH为5.0至5.5。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含：
(a)80mg/mL至120mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，
(b)5mM至15mM的醋酸盐缓冲液(例如，醋酸-醋酸钠缓冲液)，
(c)70mg/mL至90mg/mL的蔗糖，
(d)0.1mg/mL至0.3mg/mL的聚山梨醇酯80；
可选地，所述药物组合物的pH为5.0至5.5。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含：
(a)90mg/mL至110mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，
(b)8mM至12mM的醋酸盐缓冲液(例如，醋酸-醋酸钠缓冲液)，
(c)75mg/mL至85mg/mL的蔗糖，
(d)0.15mg/mL至0.25mg/mL的聚山梨醇酯80；
可选地，所述药物组合物的pH为5.1至5.3。
在一些实施方案中，所述药物组合物包含：
(a)约100mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，
(b)5mM至15mM的醋酸-醋酸钠缓冲液，
(c)60mg/mL至90mg/mL的蔗糖，
(d)0.1mg/mL至0.4mg/mL的聚山梨醇酯80；
可选地，所述药物组合物的pH为5.0至5.4。
在一些具体实施方案中，所述的药物组合物包含：
(1)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约75mg/mL蔗糖，约0.1mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(2)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约75mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约 5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(3)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约75mg/mL蔗糖，约0.4mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(4)约80mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约75mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(5)约120mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约75mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(6)约150mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约75mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(7)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约60mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(8)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约65mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(9)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约70mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(10)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约80mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(11)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约90mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(12)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约75mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约5mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)；
(13)约100mg/mL抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，约75mg/mL蔗糖，约0.2mg/mL聚山梨酯80，和约15mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4(例如，约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4)。
上述实施方案中，所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段选自：
1)所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段含有重链可变区和轻链可变区，所述轻 链可变区含有氨基酸序列分别如SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:13所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3，和所述重链可变区含有氨基酸序列分别如SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；
2)所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示；
3)所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链和轻链，所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示，且所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO：22所示；
4)所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段含有重链可变区和轻链可变区，所述轻链可变区含有氨基酸序列分别如SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:13所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3，和所述重链可变区含有氨基酸序列分别如SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:16所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；
5)所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示。
本公开所述药物组合物已具有足够成药稳定性，可以长期稳定放置。本公开的药物组合物至少具有稳定性好，冻干形态好等优势。
在一些实施方案中，所述药物组合物于2-8℃稳定至少3个月，至少6个月，至少12个月，至少18个月或至少24个月。在一些实施方案中，所述药物组合物于25℃稳定至少3个月，至少6个月，至少12个月，至少18个月或至少24个月。在一些实施方案中，所述药物组合物于40℃稳定至少7天，至少14天或至少28天。
在一些实施方案中，所述药物组合物于200rpm、室温下震荡至少12h小时、至少24小时、至少36小时、至少48小时、或者至少60小时后仍保持稳定。
在一些实施方案中，所述药物组合物于-35℃/室温下冻融至少1次、至少2次、至少3次、至少4次、至少5次、至少6次后仍保持稳定。
在一些实施方案中，所述药物组合物于5000Lx、25℃下光照至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天后仍保持稳定。
本公开还提供了制备前述药物组合物的方法，包括将抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段原液经缓冲剂置换的步骤，其中所述的缓冲剂可以为醋酸-醋酸钠缓冲剂。
一些实施方案中，前述药物组合物为液体制剂。另一些实施方案中，前述药物组合物为冻干制剂。
本公开还提供一种制备含有抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的冻干制剂的方法，其中包括将前述药物组合物经冷冻干燥的步骤。在可选的实施方案中，所述冷冻干燥依次包括预冻、一次干燥和二次干燥的步骤。
本公开还提供一种含有抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的冻干制剂，其是经前 述制备冻干制剂的方法制备获得的。
本公开还提供制备含有抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的冻干制剂的复溶溶液的方法，其中包括将前述冻干制剂经复溶的步骤，其复溶所用溶液选自但不限于注射用水、生理盐水或葡萄糖溶液。
本公开还提供一种含抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的复溶溶液，其是经前述制备复溶溶液的方法制备获得的。
本公开提供一种制品、产品或试剂盒，其含有前述本公开任意的含抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的药物组合物、液体制剂、冻干制剂、复溶溶液。可选地，还含有一个或多个容器，所述容器中装有任意前述本公开的药物组合物、液体制剂、冻干制剂、复溶溶液的容器。在一些实施方案中，所述容器为玻璃瓶，例如，为中性硼硅玻璃管制注射剂瓶。
本公开还提供一种制品，其包括容器，该容器中装有前述的药物组合物或冻干制剂或冻干制剂的复溶溶液。
本公开还提供药物组合物或冻干制剂或冻干制剂的复溶溶液，其用于治疗和预防疾病或病症的方法中。
本公开还提供前述的药物组合物或冻干制剂或冻干制剂的复溶溶液在制备用于治疗和/或预防疾病或病症的药物中的用途。
本公开还提供一种治疗和/或预防疾病或病症的方法，包括给予有需要的受试者治疗和/或预防有效量的前述的药物组合物或冻干制剂或冻干制剂的复溶溶液。一些实施方案中，所述受试者为人类受试者。
在一些实施方案中，所述的疾病或病症为与ANGPTL3活性有关的任何疾病或病症，包括由ANGPTL3介导的疾病或病症。
在一些实施方案中，所述的疾病或病症的实例包括但不限于涉及脂质代谢的疾病或病症，例如高脂血症、高脂蛋白血症和血脂异常。在一些实施方案中，所述的疾病或病症的实例包括但不限于动脉粥样硬化性血脂异常、糖尿病性血脂异常、高甘油三酸酯血症(包括严重的甘油三酸酯血症，TG>1000mg/dL)、高胆固醇血症、乳糜微粒血症、混合血脂异常(例如肥胖、代谢综合征、糖尿病等)、脂肪营养不良、脂肪萎缩等。在一些实施方案中，所述的疾病或病症的实例可以是由LPL活性降低、LPL缺乏、LDL受体(LDLR)活性降低、LDL受体缺乏症(例如，LDLR
-/-纯合子家族性高胆固醇血症)、改变的ApoC2/ApoE缺乏、ApoB增加、极低密度脂蛋白(VLDL)的产生和/或消除减少、某些药物治疗(例如糖皮质激素治疗引起的血脂异常)、任何遗传易感性、饮食、生活方式等导致的血脂异常。
在一些实施方案中，所述的疾病或病症可以是与高脂血症、高脂蛋白血症和/或血脂异常相关或由其引起的疾病或病症，其包括但不限于心血管疾病或病症，例如动脉粥样硬化、动脉瘤、高血压、心绞痛、中风、脑血管疾病、充血性心力衰竭、冠状动脉疾病、心肌梗塞、周围血管疾病等；急性胰腺炎；非酒精性脂肪性肝炎(NASH)；血糖异常，例 如糖尿病、肥胖等。
在一些实施方案中，所述的疾病或病症的其他实例包括癌症/肿瘤以及与非肿瘤性血管生成相关的疾病或病症。在可选的实施方案中，所述疾病或病症可以是眼血管生成相关疾病或病症，如年龄相关性黄斑变性、视网膜中央静脉阻塞或视网膜分支静脉阻塞、糖尿病性视网膜病、早产儿视网膜病等。在可选的实施方案中，所述疾病或病症可以是炎性疾病或病症，例如关节炎、类风湿性关节炎(RA)、牛皮癣等。
图1：P8BG抗体对SD(Sprague Dawley，斯泼累格·多雷)大鼠血清甘油三酯的影响；
图2：抗ANGPTL3抗体对HFD(High-fat-diet，高脂饮食)小鼠血浆甘油三酯的影响；
图3：抗ANGPTL3抗体对HFD小鼠血浆低密度脂蛋白胆固醇(Low-Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C)的影响；
图4：抗ANGPTL3抗体对HFD小鼠血浆总胆固醇的影响；
图5：抗ANGPTL3抗体对APOE小鼠(载脂蛋白E(apolipoprotein E，ApoE)基因敲除小鼠)血浆甘油三酯的影响；
图6：抗ANGPTL3抗体对APOE小鼠血浆高密度脂蛋白胆固醇(High density liptein cholesterol，HDL-C)的影响；
图7：抗ANGPTL3抗体在小鼠体内药代动力学实验结果；
图8：抗ANGPTL3抗体在食蟹猴体内的药代动力学实验结果。
一、术语
为了更容易理解本公开，以下具体定义了某些技术和科学术语。除非在本文中另有明确定义，本文使用的所有其它技术和科学术语都具有本公开所属领域的一般技术人员通常理解的含义。
“缓冲剂”指通过其酸-碱共轭组分的作用而耐受pH变化的缓冲剂。将pH控制在适当范围中的缓冲剂的例子包括醋酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐、葡萄糖酸盐、组氨酸盐、草酸盐、乳酸盐、磷酸盐、枸橼酸盐、酒石酸盐、延胡索酸盐、甘氨酰甘氨酸和其它有机酸缓冲剂。
“组氨酸盐缓冲剂”是包含组氨酸根离子的缓冲剂。组氨酸盐缓冲剂的实例包括组氨酸-盐酸盐，组氨酸-醋酸盐，组氨酸-磷酸盐，组氨酸-硫酸盐等缓冲剂，例如组氨酸-醋酸盐缓冲剂或组氨酸-盐酸盐缓冲剂，组氨酸-醋酸盐缓冲剂是组氨酸与醋酸配制而成，组氨酸盐缓冲剂是组氨酸与盐酸配制而成。
“枸橼酸盐缓冲剂”是包括枸橼酸根离子的缓冲剂。枸橼酸盐缓冲剂的实例包括枸 橼酸-枸橼酸钠、枸橼酸-枸橼酸钾、枸橼酸-枸橼酸钙、枸橼酸-枸橼酸镁等。枸橼酸盐缓冲剂可以是枸橼酸-枸橼酸钠。
“琥珀酸盐缓冲剂”是包括琥珀酸根离子的缓冲剂。琥珀酸盐缓冲剂的实例包括琥珀酸-琥珀酸钠、琥珀酸-琥珀酸钾、琥珀酸-琥珀酸钙盐等。琥珀酸盐缓冲剂可以是琥珀酸-琥珀酸钠。
“磷酸盐缓冲剂”是包括磷酸根离子的缓冲剂。磷酸盐缓冲剂的实例包括磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、磷酸氢二钠-磷酸二氢钾、磷酸氢二钠-枸橼酸等。磷酸盐缓冲剂可以是磷酸氢二钠-磷酸二氢钠。
“醋酸盐缓冲剂”是包括醋酸根离子的缓冲剂。醋酸盐缓冲剂的实例包括醋酸-醋酸钠、醋酸组氨酸盐、醋酸-醋酸钾、醋酸-醋酸钙、醋酸-醋酸镁等。醋酸盐缓冲剂可以是醋酸-醋酸钠。
“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，所述其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。本文中，“药物组合物”和“制剂”可以互换使用。
本公开中所述药物组合物的溶液形式，若无特殊说明，其中的溶剂均为水。
“冻干制剂”表示液体或溶液形式的药物组合物或溶液制剂经过真空冷冻干燥步骤之后获得的制剂或药物组合物。
本文所用术语“约”或“大约”是指数值在由本领域一般技术人员所测定的具体值的可接受误差范围内，所述数值部分取决于怎样测量或测定(即测量体系的限度)。例如，在本领域每一次实行中“约”可意味着在1内或超过1的标准差。或者，“约”或“基本上包含”可意味着至多±20％的范围，例如，约5.5的pH意指pH5.5±1.1。此外，特别对于生物学系统或过程而言，该术语可意味着至多一个数量级或数值的至多5倍。除非另外说明，否则当具体值在本申请和权利要求中出现时，“约”或“基本上包含”的含义应该假定为在该具体值的可接受误差范围内。
本公开所述的药物组合物能够达到一种稳定的效果：其中的抗体在贮藏后基本上保留其物理稳定性和/或化学稳定性和/或生物学活性，例如药物组合物在贮藏后基本上保留其物理和化学稳定性以及其生物学活性。贮藏期一般基于药物组合物的预定保存期来选择。目前有多种测量蛋白质稳定性的分析技术，可测量在选定温度贮藏选定时间段后的稳定性。
稳定的药物抗体制剂是在下述情况下没有观察到显著变化的制剂：在冷藏温度(2-8℃)保存至少3个月、至少6个月、至少1年、最多达2年。另外，稳定的液体制剂包括这样的液体制剂：其在包括25℃保存包括1个月、3个月、6个月或在40℃保存1个月在内的时段后表现出期望的特征。稳定性的典型的可接受的标准如下：通过SEC-HPLC测得，通常不超过约10％、例如不超过约5％的抗体单体发生降解。通过视觉分析，药物抗体制剂是无色的，或澄清至稍微乳白色。所述制剂的浓度、pH和重量克分子渗透压浓 度具有不超过±10％变化。通常观察到不超过约10％、例如不超过约5％的截短，通常形成不超过约10％、例如不超过约5％的聚集。
如果在目检颜色和/或澄清度后，或者通过UV光散射、尺寸排阻色谱法(SEC)和动态光散射(DLS)测得，抗体没有显示出显著的聚集增加、沉淀和/或变性，那么所述抗体在药物制剂中“保留它的物理稳定性”。蛋白构象的变化可以通过荧光光谱法(其确定蛋白三级结构)和通过FTIR光谱法(其确定蛋白二级结构)来评价。
如果抗体没有显示出显著的化学改变，那么所述抗体在药物制剂中“保留它的化学稳定性”。通过检测和定量化学上改变的形式的蛋白，可以评估化学稳定性。经常改变蛋白化学结构的降解过程包括水解或截短(通过诸如尺寸排阻色谱法和SDS-PAGE等方法来评价)、氧化(通过诸如与质谱法或MALDI/TOF/MS结合的肽谱法等方法来评价)、脱酰胺作用(通过诸如离子交换色谱法、毛细管等电聚焦、肽谱法、异天冬氨酸测量等方法来评价)和异构化(通过测量异天冬氨酸含量、肽谱法等来评价)。
如果抗体在给定时间的生物活性是在制备药物制剂时表现出的生物活性的预定范围内，那么所述抗体在药物制剂中“保留它的生物活性”。抗体的生物活性可以例如通过抗原结合测定来确定。
本公开所用氨基酸三字母代码和单字母代码如J.biol.chem，243，p3558(1968)中所述。
本公开所述的“抗体”指免疫球蛋白，天然完整抗体是由两条相同的重链和两条相同的轻链通过链间二硫键连接而成的四肽链结构。免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不同，故其抗原性也不同。据此，可将免疫球蛋白分为五类，或称为免疫球蛋白的同种型，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE，其相应的重链分别为μ链、δ链、γ链、α链、和ε链。同一类Ig根据其铰链区氨基酸组成和重链二硫键的数目和位置的差别，又可分为不同的亚类，如IgG可分为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。轻链通过恒定区的不同分为κ链或λ链。五类Ig中每类Ig都可以有κ链或λ链。
抗体重链和轻链靠近N端的约110个氨基酸的序列变化很大，为可变区(Fv区)；靠近C端的其余氨基酸序列相对稳定，为恒定区。可变区包括3个高变区(HVR)和4个序列相对保守的骨架区(FR)。3个高变区决定抗体的特异性，又称为互补性决定区(CDR)。每条轻链可变区(LCVR)和重链可变区(HCVR)由3个CDR区4个FR区组成，从氨基端到羧基端依次排列的顺序为：FR1，CDR1，FR2，CDR2，FR3，CDR3，FR4。轻链的3个CDR区指LCDR1、LCDR2、和LCDR3；重链的3个CDR区指HCDR1、HCDR2和HCDR3。本公开所述的抗体或抗原结合片段的LCVR区和HCVR区的CDR氨基酸残基在数量和位置符合已知的Kabat编号规则(LCDR1-3，HCDR2-3)，或者符合kabat和chothia的编号规则(HCDR1)。
本公开的抗体包括鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体，例如人源化抗体。
术语“鼠源抗体”在本公开中为根据本领域知识和技能制备的针对人ANGPTL3的单克隆抗体。制备时用ANGPTL3抗原注射试验对象，然后分离表达具有所需序列或功能特性的抗体的杂交瘤。在本公开一个可选的实施方案中，所述的鼠源抗ANGPTL3抗 体或其抗原结合片段，可进一步包含鼠源κ、λ链或其变体的轻链恒定区，或进一步包含鼠源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体的重链恒定区。
术语“嵌合抗体(chimeric antibody)”，是将异源(例如，鼠源)性抗体的可变区与抗体(例如人抗体)的恒定区融合而成的抗体，可以减轻异源性抗体诱发的免疫应答反应。例如人鼠嵌合抗体，建立嵌合抗体，要先建立分泌鼠源性特异性单抗的杂交瘤，然后从鼠杂交瘤细胞中克隆可变区基因，再根据需要克隆人抗体的恒定区基因，将鼠可变区基因与人恒定区基因连接成嵌合基因后插入表达载体中，最后在真核系统或原核系统中表达嵌合抗体分子。在本公开一个可选的实施方案中，所述的抗ANGPTL3嵌合抗体的抗体轻链进一步包含人源κ、λ链或其变体的轻链恒定区。所述的ANGPTL3嵌合抗体的抗体重链进一步包含人源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体的重链恒定区，例如包含人源IgG1、IgG2或IgG4重链恒定区，或者使用氨基酸突变(例如L234A和/或L235A突变，和/或S228P突变)的IgG1、IgG2或IgG4变体。
术语“人源化抗体(humanized antibody)”，也称为CDR移植抗体(CDR-grafted antibody)，是指将异源(例如，鼠源)的CDR序列移植到人的抗体可变区框架，即不同类型的人种系抗体框架序列中产生的抗体。可以克服嵌合抗体由于携带大量鼠蛋白成分，从而诱导的异源性反应。此类构架序列可以从包括种系抗体基因序列的公共DNA数据库或公开的参考文献获得。如人重链和轻链可变区基因的种系DNA序列可以在“VBase”人种系序列数据库(在因特网
www.mrccpe.com.ac.uk/vbase可获得)，以及在Kabat，E.A.等人，1991Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版中找到。为避免免疫原性下降的同时，引起的活性下降，可对所述的人抗体可变区框架序列进行最少反向突变或回复突变，以保持活性。本公开的人源化抗体也包括进一步由酵母菌展示对CDR进行亲和力成熟突变后的人源化抗体。
术语“人抗体”与“人源抗体”可以互换使用，是指有一或多个可变区和恒定区来源于人免疫球蛋白序列。其中一个可选的方式是所有的可变区和恒定区均来自于人免疫球蛋白序列，即“完全人源抗体”或“全人抗体”。这些抗体可以通过多种方式制备获得，包括通过噬菌体展示技术，从人PBMC、脾脏、淋巴结组织分离B细胞，构建天然单链噬菌体人抗体库，或者通过免疫可表达人抗体轻重链的转基因小鼠，筛选获得的抗体。本公开的人抗体还包括在人抗体基础上经过一个或更多个氨基酸的突变获得的仍结合目标抗原的抗体。
本公开“抗体”除包括全长抗体外，还包括能结合抗原的抗原结合片段。
术语“抗原结合片段”或“功能片段”是指抗体的保持特异性结合抗原(例如，ANGPTL3)的能力的一个或更多个片段。已显示可利用全长抗体的片段来进行抗体的抗原结合功能。术语“抗原结合片段”中包含的结合片段的实例包括(i)Fab片段，由VL、VH、CL和CH1结构域组成的单价片段；(ii)F(ab')
2片段，包含通过铰链区上的二硫桥连接的两个Fab片段的二价片段，(iii)由VH和CH1结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体的单臂的VH和VL结构域组成的Fv片段；(v)dsFv，由VH和VL经链间二硫 键形成的稳定的抗原结合片段；(vi)包含scFv、dsFv、Fab等片段的双抗体、双特异性抗体和多特异性抗体。此外，虽然Fv片段的两个结构域VL和VH由分开的基因编码，但可使用重组方法，通过合成的接头连接它们，从而使得其能够产生为其中VL和VH区配对形成单价分子的单个蛋白质链(称为单链Fv(scFv)；参见，例如，Bird等人(1988)Science242:423-426；和Huston等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci USA85:5879-5883)。此类单链抗体也包括在术语抗体的“抗原结合片段”中。使用本领域技术人员已知的常规技术获得此类抗体片段，并且以与对于完整抗体的方式相同的方式就功用性筛选片段。可通过重组DNA技术或通过酶促或化学断裂完整免疫球蛋白来产生抗原结合部分。抗体可以是不同同种型的抗体，例如，IgG(例如，IgG1，IgG2，IgG3或IgG4亚型)，IgA1，IgA2，IgD，IgE或IgM抗体。
本公开中所述的突变序列中的“突变”包括但不限于“回复突变”、“保守修饰”或“保守置换或取代”。本公开中所述的“保守修饰”或“保守置换或取代”是指具有类似特征(例如电荷、侧链大小、疏水性/亲水性、主链构象和刚性等)的其它氨基酸置换蛋白中的氨基酸，使得可频繁进行改变而不改变蛋白的生物学活性。本领域技术人员知晓，一般而言，多肽的非必需区域中的单个氨基酸置换基本上不改变生物学活性(参见例如Watson等(1987)Molecular Biology of the Gene，The Benjamin/Cummings Pub.Co.，第224页，(第4版))。另外，结构或功能类似的氨基酸的置换不大可能破环生物学活性。
本公开所述的“突变序列”是指对本公开的核苷酸序列和/或氨基酸序列进行适当的替换、插入或缺失等突变修饰情况下，得到的与本公开的核苷酸序列和/或氨基酸序列具有不同百分比序列同一性程度的核苷酸序列和/或氨基酸序列。本公开中所述的序列同一性可以至少为85％、90％或95％，例如至少为95％。非限制性实施例包括85％，86％，87％，88％，89％，90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％，100％。两个序列之间的序列比较和同一性百分比测定可以通过National Center For Biotechnology Institute网站上可得的BLASTN/BLASTP算法的默认设置来进行。
“序列同一性”或“序列同源性”当用于氨基酸序列时，是指两个蛋白或多肽之间的序列相似性。当两个比较序列中的位置均被相同氨基酸残基占据时，例如如果两个多肽的一个位置都被同一个氨基酸残基占据时，那么所述分子在该位置是一致的。适于确定序列同一性百分比和序列相似性百分比的算法的实例是BLAST和BLAST2.0算法，它们分别描述于Altschul et al.(1990)J.Mol.Biol.215:403-410和Altschul et al.(1977)Nucleic Acids Res.25:3389-3402。用于执行BLAST分析的软件可在美国国家生物技术信息中心公开获取(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)。
现有技术中熟知生产和纯化抗体和抗原结合片段的方法，如冷泉港的抗体实验技术指南，5-8章和15章。本公开所述的抗体或抗原结合片段用基因工程方法在非人源的CDR区加上一个或多个人源FR区。人FR种系序列可以通过比对IMGT人类抗体可变区种系 基因数据库和MOE软件，从ImMunoGeneTics(IMGT)的网站http://imgt.cines.fr得到，或者从免疫球蛋白杂志，2001ISBN012441351上获得。
本公开工程化的抗体或抗原结合片段可用常规方法制备和纯化。比如，编码重链和轻链的cDNA序列，可以克隆并重组至GS表达载体。重组的免疫球蛋白表达载体可以稳定地转染CHO细胞。作为一种更推荐的现有技术，哺乳动物类表达系统会导致抗体的糖基化，特别是在Fc区的高度保守N端位点。通过表达与人CD40特异性结合的抗体得到稳定的克隆。阳性的克隆在生物反应器的无血清培养基中扩大培养以生产抗体。分泌了抗体的培养液可以用常规技术纯化。比如，用含调整过的缓冲液的A或G Sepharose FF柱进行纯化。洗去非特异性结合的组分。再用pH梯度法洗脱结合的抗体，用SDS-PAGE检测抗体片段，收集。抗体可用常规方法进行过滤浓缩。可溶的混合物和多聚体，也可以用常规方法去除，比如分子筛、离子交换。得到的产物需立即冷冻，如-70℃，或者冻干。
“给予”和“处理”当应用于动物、人、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，是指外源性药物、治疗剂、诊断剂或组合物与动物、人、受试者、细胞、组织、器官或生物流体的接触。“给予”和“处理”可以指例如治疗、药物代谢动力学、诊断、研究和实验方法。细胞的处理包括试剂与细胞的接触，以及试剂与流体的接触，其中所述流体与细胞接触。“给予”和“处理”还意指通过试剂、诊断、结合组合物或通过另一种细胞体外和离体处理例如细胞。“处理”当应用于人、兽医学或研究受试者时，是指治疗处理、预防或预防性措施，研究和诊断应用。
“治疗”意指给予受试者内用或外用治疗剂，例如包含本公开的任一种结合化合物的组合物，所述受试者具有一种或多种疾病症状，而已知所述治疗剂对这些症状具有治疗作用。通常，在受治疗受试者或群体中以有效缓解一种或多种疾病症状的量给予治疗剂，以诱导这类症状退化或抑制这类症状发展到任何临床可测量的程度。有效缓解任何具体疾病症状的治疗剂的量(也称作“治疗有效量”)可根据多种因素变化，例如受试者的疾病状态、年龄和体重，以及药物在受试者产生需要疗效的能力。通过医生或其它专业卫生保健人士通常用于评价该症状的严重性或进展状况的任何临床检测方法，可评价疾病症状是否已被减轻。尽管本公开的实施方案(例如治疗方法或制品)在缓解每个目标疾病症状方面可能无效，但是根据本领域已知的任何统计学检验方法如Student t检验、卡方检验、依据Mann和Whitney的U检验、Kruskal-Wallis检验(H检验)、Jonckheere-Terpstra检验和Wilcoxon检验确定，其在统计学显著数目的受试者中应当减轻目标疾病症状。
“有效量”包含足以改善或预防医学疾病的症状或病症的量。有效量还意指足以允许或促进诊断的量。用于特定受试者或兽医学受试者的有效量可依据以下因素而变化：例如，待治疗的病症、受试者的总体健康情况、给药的方法途径和剂量以及副作用严重性。有效量可以是避免显著副作用或毒性作用的最大剂量或给药方案。
“Tm值”是指蛋白质热变性温度，即一半蛋白去折叠时的温度，此时蛋白的空间结构被破坏，所以Tm值越高，蛋白热稳定性越高。
实施例
以下结合实施例进一步描述本公开，但这些实施例并非限制着本公开的范围。本公开实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，如冷泉港的抗体技术实验手册，分子克隆手册；或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。
实施例1、ANGPTL3抗原设计及表达
以人ANGPTL3蛋白(Uniprot号：Q9Y5C1)、小鼠ANGPTL3蛋白(Uniprot号：Q9R182)、食蟹猴ANGPTL3蛋白(Uniprot号：A0A2K5UDC5)、大鼠ANGPTL3蛋白(Uniprot号：F7FHP0)作为本披露ANGPTL3的模板，设计本披露涉及的抗原及检测用蛋白，在ANGPTL3蛋白基础上融合不同的标签，分别克隆到pTT5载体上(Biovector，Cat#:102762)，在293细胞中瞬时转染表达、然后纯化，获得编码本披露抗原及检测用蛋白。
1、人全长ANGPTL3：人-ANGPTL3(17-460)-His，可用于免疫和检测，其氨基酸序列如下：
注释：单下划线部分为信号肽序列，斜体字部分为His序列，粗体字部分为人ANGPTL3全长蛋白的第17至第460位氨基酸。
2、人ANGPTL3胞外区：人ANGPTL3(17-170)-Flag-His，可用于免疫和检测，其氨基酸序列如下：
注释：单下划线部分为信号肽，双下划线部分为连接肽，斜体部分为Flag和His，粗体字部分为人ANGPTL3全长蛋白的第17至第170位氨基酸。
3、人ANGPTL3胞外区(人ANGPTL3(17-170))与小鼠IgG2aFc段(缩写：mFc)的融合蛋 白：人ANGPTL3(17-170)-mFc，可用于检测，其氨基酸序列如下：
注释：下划线部分为信号肽，斜体部分为小鼠IgG2aFc，粗体字部分为人ANGPTL3全长蛋白的第17至第170位氨基酸。
4、人ANGPTL3胞外区(人ANGPTL3(17-220))与小鼠IgG2aFc段的融合蛋白：人ANGPTL3(17-220)-mFc，用于免疫和检测，其氨基酸序列如下：
注释：下划线部分为信号肽，斜体部分为小鼠IgG2aFc，粗体字部分为人ANGPTL3全长蛋白的第17至第220位氨基酸。
5、小鼠全长ANGPTL3：小鼠ANGPTL3(17-455)-His，用于免疫和检测，其氨基酸序列如下：
注释：下划线部分为信号肽，斜体部分为His序列，粗体字部分为小鼠ANGPTL3全长蛋白的第17至第455位氨基酸。
6、小鼠ANGPTL3胞外区(mouse-ANGPTL3(17-220))与小鼠IgG2aFc段的融合蛋白：小鼠ANGPTL3(17-220)-mFc，用于免疫，其氨基酸序列如下：
注释：下划线部分为信号肽，斜体部分为小鼠IgG2aFc，粗体字部分为小鼠ANGPTL3全长蛋白的第17至第220位氨基酸。
7、食蟹猴全长ANGPTL3：食蟹猴ANGPTL3(17-460)-His，用于检测，其氨基酸序列如下：
注释：下划线部分为信号肽，斜体部分为His序列，粗体字部分为食蟹猴ANGPTL3全长蛋白的第17至第460位氨基酸。
8、大鼠全长ANGPTL3：大鼠ANGPTL3(17-455)-His，用于检测，其氨基酸序列如下：
注释：划横线部分为信号肽，斜体部分为His序列，粗体字部分为大鼠ANGPTL3全长蛋白的第17至第455位氨基酸。
实施例2、ANGPTL3抗原蛋白、杂交瘤抗体、重组抗体的纯化
2.1带His标签的重组蛋白或带Flag-his标签的重组蛋白的纯化
将细胞表达样品高速离心去除细胞和不溶杂质，收集上清并加入咪唑至终浓度为5mM。用含有5mM咪唑的PBS溶液平衡镍柱，冲洗2-5倍柱体积。将细胞上清上柱。用含有5mM咪唑的PBS溶液冲洗柱子，至A280读数降至基线。然后用PBS+10mM咪唑冲洗层析柱，除去非特异结合的杂蛋白，并收集流穿液。再用含有300mM咪唑的PBS溶液洗脱目的蛋白，并收集洗脱峰。
收集的洗脱液用Superdex凝胶过滤柱进行进一步精纯，分管收集。所得到的样品经过SDS-PAGE、肽图、LC-MS鉴定为正确后，分装备用。得到带His标签的重组蛋白或带Flag-his标签的重组蛋白。
2.2杂交瘤抗体或带mFc标签的重组蛋白的纯化
将样品高速离心去除细胞及不溶性杂质，留上清。使用1×PBS平衡Protein A亲和柱，冲洗2-5倍柱体积。将离心后的细胞表达上清样品上柱。用1×PBS冲洗柱子，至A280读数降至基线。用1×PBS冲洗柱子。用0.1M乙酸(pH3.5-4.0)洗脱目的蛋白，并收集，之后立即用1M Tris-HCl(pH 7.0)调节洗脱蛋白pH至中性，最后透析或者浓缩换液至1×PBS缓冲液中。收集样品，经电泳、肽图、LC-MS鉴定正确后分装备用。得到带mFc标签的重组蛋白或杂交瘤抗体。
2.3抗体、带Fc标签的重组蛋白的纯化
将样品高速离心去除细胞及不溶性杂质，留上清。使用1×PBS平衡Protein G亲和柱，冲洗2-5倍柱体积。将离心后的细胞表达上清样品上柱。用1×PBS冲洗柱子，至A280读数降至基线。用1×PBS冲洗柱子。用乙酸(pH 3.0)洗脱目的蛋白，并收集，之后立即用1M Tris-HCl(pH 7.0)调节洗脱蛋白pH至中性，最后透析或者浓缩换液至1×PBS缓冲液中。收集样品经电泳、肽图、LC-MS鉴定正确后，分装备用。得到抗体或者带hFc标签的重组蛋白。
实施例3、抗ANGPTL3抗体的制备
3.1通过噬菌体库筛选抗ANGPTL3人源抗体
人源噬菌体单链抗体库进行包装浓缩，将噬菌体库(10
12～10
13/pfu)悬浮于1mL 2％MPBS(含有2％脱脂奶粉的PBS)中，并加入100μl
M-280链霉亲和素(Invitrogen Cat No.11206D)，置于转台上反复翻转，室温封闭1小时。将管子置于磁力架上2分钟，去除Dynabeads，噬菌体库转移至新的管子中。向封闭后的噬菌体库中加入2μg/mL生物素标记的人ANGPTL3(17-460)-His，置于转台上反复翻转1小时。同时取100μl Dynabeads悬浮于1mL 2％MPBS中，置于转台上反复翻转，室温封闭1小时。将管子置于 磁力架上2分钟，吸去封闭液。将封闭后的Dynabeads加入到噬菌体库和人ANGPTL3(17-460)-His混合液中，置于转台上反复翻转15分钟。将管子置于磁力架上2分钟，吸去混合液。用1mL PBST(含0.1％Tween-20的PBS)洗Dynabeads 10次，再加入0.5mL 1mg/mL胰蛋白酶(Sigma Cat No.T1426-250MG)，置于转台上反复翻转孵育15分钟，进行洗脱，将洗脱下来的噬菌体感染大肠杆菌TG1涂平板，随机挑取单克隆，用于噬菌体ELISA。
将克隆接种于96孔深孔板(Nunc Cat No.260251)37度培养16～18小时。取少量接种至另一个96孔深孔板，至OD600达到0.5左右，加入M13K07辅助噬菌体(NEB Cat No.N0315S)进行包装。4000g离心10分钟去除菌体，吸取培养液进行ANGPTL3结合ELISA检测。阳性克隆菌种冻存保种并送测序公司测序。其中，测得阳性克隆P8对应的氨基酸序列如下：
>P8重链可变区序列：
>P8轻链可变区序列：
备注：序列中下划线部分为根据Kabat编号系统确定的CDR序列，斜体为FR序列。
3.2抗ANGPTL3抗体的突变
以P8抗体的三维结构为基础，将P8重链可变区的第55位氨基酸残基(自然顺序编号)由D突变为E，将P8轻链可变区的第34位氨基酸残基(自然顺序编号)由G突变为V，得到新的抗体分子P8B，P8B的氨基酸序列如下：
>P8B重链可变区序列：
>P8B轻链可变区序列：
备注：序列中下划线部分为根据Kabat编号系统确定的CDR序列，斜体为FR序列。
表1.P8B抗体分子的CDR序列
3.3抗ANGPTL3抗体的构建和表达
设计引物PCR搭建抗体VH/VK基因片段，再与表达载体pHr(带信号肽及恒定区基因(CH1-FC/CL)片段)进行同源重组，构建抗体全长表达载体VH-CH1-FC-pHr/VK-CL-pHr。抗体的重链恒定区可选自人IgG1、IgG2、IgG4及其变体的恒定区，轻链恒定区可选自人源κ、λ链或其变体的轻链恒定区。示例性的，抗体重链恒定区选自序列如SEQ ID NO：19所示的人IgG4-YTE变体，轻链恒定区选自序列如SEQ ID NO：20所示的人κ链的恒定区。
>人IgG4-YTE变体重链恒定区序列：
>人κ链轻链恒定区序列：
示例性地，上述轻链/重链恒定区与前述P8B的可变区组合形成完整的抗ANGPTL3抗体：P8BG，抗体的轻链/重链序列如下：
>P8BG重链序列：
>P8BG轻链序列：
实施例4、抗ANGPTL3抗体的体外评价
4.1抗ANGPTL3抗体结合ANGPTL3蛋白的ELISA实验
抗ANGPTL3抗体通过与ANGPTL3蛋白结合来抑制或者干扰ANGPTL3蛋白的至少一种活性。用ELISA实验检测抗ANGPTL3抗体与ANGPTL3抗原的结合活性。ANGPTL3蛋白(人ANGPTL3(17-170)-mFc)通过与包被在酶标板中的羊抗鼠IgG结合从而固定到96孔酶标板中，根据抗体加入后信号的强弱判断抗体和ANGPTL3的结合活性。同时用生物素标记试剂盒(东仁化学，LK03)标记的带HIS标签的ANGPTL3蛋白(小鼠ANGPTL3(17-455)-His、食蟹猴ANGPTL3(17-460)-His、大鼠ANGPTL3(17-455)-His)通过与包被在酶标板中的链霉亲和素结合从而固定到96孔酶标板中，根据抗体加入后信号的强弱判断抗体和ANGPTL3的结合活性。
用pH7.4的PBS(上海源培，B320)缓冲液将羊抗鼠IgG(Sigma，M3534-1ML)稀释至2μg/mL浓度，以50μL/孔的体积加入96孔酶标板(Corning，CLS3590-100EA)中，于37℃孵育箱中放置3小时或4℃放置过夜(16-18小时)。弃去液体后，加入用PBS稀释的5％脱脂牛奶(BD，232100)封闭液250μL/孔，37℃孵育箱孵育3小时或4℃放置过夜(16-18小时)进行封闭。封闭结束后，弃去封闭液，并用PBST缓冲液(pH7.4PBS含0.05％吐温-20)洗板3次后，加入50μL/孔用样品稀释液(pH7.4PBS含1％BSA)稀释至0.5μg/mL人ANGPTL3(17-170)-mFc(序列如SEQ ID NO：3)置37℃孵育箱孵育2小时。孵育结束后，弃去酶标板中的反应液，用PBST洗板3次后，加入50μL/孔用样品稀释液稀释的不同浓度待测抗体，放于37℃孵育箱孵育2小时。孵育结束后用PBST洗板3次，加入50μL/孔用样品稀释液稀释的羊抗人二抗(Jackson Immuno Research，109-035-003)，37℃孵育1小时。用PBST洗板3次后，加入50μL/孔TMB显色底物(KPL，52-00-03)，于室温孵育2-5分钟(min)，加入50μL/孔MH
2SO
4终止反应，用VersaMax酶标仪在450nm处读取吸收值，计算抗ANGPTL3抗体对ANGPTL3抗原蛋白的结合的EC
50值。实验结果见表3。
用pH7.4的PBS(上海源培，B320)缓冲液将链霉亲和素(Sigma，S4762-5MG)稀释至3μg/mL浓度，以50μL/孔的体积加入96孔酶标板(Corning，CLS3590-100EA)中，于37℃孵育箱中放置3小时或4℃放置过夜(16-18小时)。弃去液体后，加入用PBS稀释的5％脱脂牛奶(BD，232100)封闭液250μL/孔，37℃孵育箱孵育3小时或4℃放置过夜(16-18小时)进行封闭。封闭结束后，弃去封闭液，并用PBST缓冲液(pH7.4PBS含0.05％吐温-20)洗板3次后，加入50μL/孔用样品稀释液(pH7.4PBS含1％BSA)稀释至0.5μg/mL的生物素标记的小鼠ANGPTL3(17-455)-His(序列如SEQ ID NO：5)、食蟹猴ANGPTL3(17-460)-His(序列如SEQ ID NO：7)、大鼠ANGPTL3(17-455)-His(序列如SEQ ID NO：8)，置37℃孵育箱孵育2小时。孵育结束后，弃去酶标板中的反应液，用PBST洗板3次后，加入50μL/孔用样品稀释液稀释的不同浓度待测抗体，放于37℃孵育箱孵育2小时。孵育结束后用PBST洗板3次，加入50μL/孔用样品稀释液稀释的HRP标记的羊抗鼠二抗(Jackson Immuno Research，115-035-003)或者是羊抗人二抗(Jackson Immuno Research，109-035-003)或者小鼠HRP/抗M13偶联的二抗(义翘神州，Cat No.11973-MM05-100，用于噬菌体筛选)，37℃孵育1小时。用PBST洗板3次后，加入50μL/孔TMB显色底物(KPL，52-00-03)，于室温孵育2-5分钟(min)，加入50μL/孔MH
2SO
4终止反应，用VersaMax酶标仪在450nm处读取吸收值，计算抗ANGPTL3抗体对ANGPTL3抗原蛋白的结合的EC
50值。实验结果见表2，实验结果显示，本披露的抗ANGPTL3抗体能够结合不同种属的ANGPTL3蛋白。
表2.抗ANGPTL3抗体与不同种属ANGPTL3蛋白结合ELISA实验
4.2抗ANGPTL3抗体与ANGPTL3抗原蛋白的HTRF结合实验
HTRF实验同样被用来检测抗ANGPTL3抗体与抗原的结合活性。用生物素标记试剂盒(东仁化学，LK03)标记的带HIS标签的ANGPTL3(人ANGPTL3(17-460)-His，小鼠ANGPTL3(17-455)-His，食蟹猴ANGPTL3(17-460)-His，大鼠ANGPTL3(17-455)-His)与HTRF试剂Streptavidin-Tb cryptata(Cisbio，610SATLA)结合，抗体加入后，抗体会分别与HTRF试剂Pab抗小鼠IgG-XL665(Cisbio，61PAMXLA)以及血管生成素样蛋白3结合，信号的强弱被用于判断抗体和血管生成素样蛋白3的结合活性。
用稀释液(pH7.4PBS含1％BSA)配置4μg/mL的生物素标记的人ANGPTL3(17-460)-His(序列如SEQ ID NO：1所示)，小鼠ANGPTL3(17-455)-His(序列如SEQ ID NO：5所示)，食蟹猴ANGPTL3(17-460)-His(序列如SEQ ID NO：7所示)，大鼠ANGPTL3(17-455)-His(序列如SEQ ID NO：8所示)，5μL/孔加入到384孔板中(PerkinElmer，optiplate-384)，然后加入5μL/孔的HTRF试剂Streptavidin-Tb cryptata以及Pab抗鼠IgG-XL665的混合液，最后加入10μL/孔用样品稀释液稀释的不同浓度待测抗体，放在25℃孵育1小时。用PHERAstar FS(BMG LabTECH)在HTRF模块读取数值，计算抗ANGPTL3抗体对血管生成素样蛋白3的结合EC50值。实验结果见表3，实施结果表明，本披露的抗体对人、小鼠、食蟹猴、大鼠等种属的ANGPTL3抗原均具有良好的结合活性。
表3.抗ANGPTL3抗体与ANGPTL3蛋白的HTRF结合实验
4.3抗ANGPTL3抗体抑制LPL的酶活实验
LPL的酶活检测实验用来检测抗ANGPTL3抗体阻断ANGPTL3蛋白对LPL酶抑制作用的活性。
用稀释缓冲液(pH7.4PBS+2mg/mL BSA)稀释牛LPL(Sigma，L2254-5KU)到12.5单位，25μL/孔加入到96孔板中(Corning，3603)，然后加入25μL/孔用样品稀释液稀释的不同浓度待测抗体，再加入25μL/孔浓度为27.6μg/mL的ANGPTL3蛋白(人ANGPTL3(17-170)-Flag-His(序列如SEQ ID NO：2)、小鼠ANGPTL3(17-455)-His(序列如SEQ ID NO：5)、食蟹猴ANGPTL3(17-460)-His(序列如SEQ ID NO：7)、大鼠ANGPTL3(17-455)-His(序列如SEQ ID NO：8)，将96孔板在振荡器上振荡混匀，37℃培养箱中孵育30min。最后加入25μL/孔用稀释缓冲液稀释的20μM的底物(Sigma，30058-10MG-F)，将96孔板在振荡器上振荡混匀，37℃培养箱中孵育30min。在Flexstation3酶标仪以Ex535/Em612读数。用Graphpad Prism 5软件处理浓度和对应荧光值数据，并计算IC
50。实验结果见表4，实施结果表明，本披露的抗体具有良好的LPL酶抑制作用。
表4.抗ANGPTL3抗体阻断不同种属ANGPTL3抑制LPL的活性实验结果
4.4抗ANGPTL3抗体与ANGPTL3蛋白的Biacore检测实验
用Biacore测定待测抗ANGPTL3抗体和人、猴、大鼠及小鼠ANGPTL3的亲和力。方法如下：
分别用Protein A生物传感芯片(Cat.#29127556，GE)亲和捕获一定量的待测抗体，然后于芯片表面流经一定浓度的人、猴、大鼠及小鼠的ANGPTL3抗原(人-ANGPTL3(R&D，3829-AN)、小鼠ANGPTL3(17-455)-His(序列如SEQ ID NO：5)、食蟹猴ANGPTL3(17-460)-His(序列如SEQ ID NO：7)、大鼠ANGPTL3(17-455)-His(序列如SEQ ID NO：8))。利用Biacore T200仪器实时检测反应信号从而获得结合和解离曲线。在每个循环解离完成后，使用pH 1.5的甘氨酸-盐酸再生溶液(Cat.#BR-1003-54，GE)将生物芯片洗净再生。试验运行缓冲液为1×HBS-EP缓冲溶液(Cat.#BR-1001-88，GE)。试验得到的数据用GE Biacore T200评估软件3.0版本以(1:1)Langmuir模型进行拟合，得出亲和力数值。实验结果见表5，实验结果表明，本披露的抗ANGPTL3抗体能与人、食蟹猴、大鼠及小鼠的ANGPTL3抗原以高亲和力结合。
表5.抗ANGPTL3抗体与ANGPTL3蛋白的Biacore检测实验结果
实施例5、抗ANGPTL3抗体大鼠体内药效评价
5.1 P8BG抗体在大鼠体内降脂实验
实验用SD大鼠于实验室环境适应性饲养1周(4周龄SD大鼠，SPF，100g左右，雄性，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。合格证号：20170005013017，SCXK(沪)2017-0005)，给予12/12小时光/暗周期调节，温度23±1℃，湿度40～50％，动物均给予标准灭菌鼠饲料，自由进食饮水。在实验开始前7天，动物禁食4h后眼眶采血，3500RPM离心15min，取血清。利用ADVIA 2400化学系统(Siemens)测定血清脂质浓度(甘油三酯)。将大鼠按甘油三酯水平分6组(非相关同型人IgG蛋白(hIgG，以下同)作为阴性对照组、Evinacumab(序列结构参见WHO Drug Information，Vol.29，No.3，2015中的Evinacumab序列)3.5mpk组、Evinacumab7mpk组、P8BG3.5mpk组、P8BG1.75mpk组、P8BG7mpk组)，每组6只大鼠，皮下注射给药一次，于注射后第1天、第5天、第9天、第13天和第16天将各组大鼠禁食4小时后采血分离血清，用ADVIA 2400化学系统(Siemens)测定血清脂质浓度(甘油三酯)。实验数据表示为平均值±标准差(Mean±SEM)，并Graphpad Prism5软件作图，采用TTEST进行统计学分析。
实验结果见图1及表6所示，与阴性对照组相比，给药1天后，各治疗组甘油三酯均下降，除了Evinacumab3.5mpk组，其余各组均有统计差异，实验过程中，P8BG 7mpk组的甘油三酯最大下降83.7％，P8BG 3.5mpk组甘油三酯最大下降81.8％，P8BG 1.75mpk组甘油三酯最大下降68.7％；给药5天后，P8BG 3.5mpk组、P8BG 1.75mpk组、P8BG 7mpk组组甘油三酯下降仍有统计差异，而Evinacumab 3.5mpk组、Evinacumab 7mpk组无统计差异；给药9天后，P8BG 7mpk组和P8BG 3.5mpk组仍有统计差异。这说明，同一剂量下P8BG比Evinacumab的降甘油三酯效果更好也更为持久。而且实验过程中各组动物体重正常。
表6.P8BG抗体对大鼠血清甘油三酯的影响
(注：Max Inh％表示相对于阴性对照组TG的最大降脂百分比，mpk表示mg/kg.)
5.2在高脂高胆固醇喂养c57bl/6小鼠中测定抗ANGPTL3抗体对血浆脂质浓度的体内效应
c57bl/6小鼠按5只/笼饲养(4周龄c57bl/6小鼠，SPF，16-18g左右，雄性，购自上海卡文斯实验动物有限责任公司。合格证号：201913812，SCXK(苏)2016-0010)，于实验室环境适应性饲养4周，给予12/12小时光/暗周期调节，温度23±1℃，湿度40～50％，动物均给予普通饲料喂养，自由进食饮水。预采血5天后将普通饲料换成高脂高胆固醇饲料(D12079B，购自：江苏省协同医药生物工程有限责任公司)喂养小鼠，直到实验结束。在实验开始前8天为动物禁食，禁食4小时后眼眶采血，8000RPM离心2min，收集血浆。利用ADVIA 2400化学系统(Siemens)测定血浆脂质浓度。将小鼠按甘油三酯水平分为4组(hIgG阴性对照组、Evinacumab25mpk组、P8BG25mpk组、P8BG5mpk组)，每组11只，皮下给药，每周注射一次，共给药8次。于实验开始后第2周，3周，5周，7周，9周，10周和11周时，将各组小鼠禁食4小时后眼眶采血并收集血浆。利用ADVIA 2400化学系统(Siemens)测定血浆脂质浓度(甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)以及LDL胆固醇(LDL-C))。实验数据表示为平均值±标准差(Mean±SEM)，并用Graphpad Prism5软件作图，采用TTEST进行统计学分析。
实验结果见表7至表9和图2-4所示，与hIgG阴性对照组相比，实验第2周、3周、5周及7周后P8BG 25mpk组的TG、TC及LDL-C均显著下降；Evinacumab25mpk及P8BG5mpk组在实验3周，5周及7周后TG、TC及LDL-C下降。实验9周后，与hIgG阴性对照组相比，只有P8BG25mpk和P8BG5mpk两组甘油三酯显著下降。与Evinacumab25mpk组相比，实验第2周，第3周，第9周，P8BG25mpk组的甘油三酯及总胆固醇均显著下降；与Evinacumab25mpk组相比，实验第2周、第9周，P8BG25mpk组的LDL-C显著下降。在第一至第11周的整个实验周期中，Evinacumab25mpk组TG最低降至40.5±2.3，与开始TG相比下降了32.60％；而P8BG25mpk组TG最低降至21.1±1.3，与开始TG相比下降了64.90％。这说明，P8BG抗体比Evinacumab的降血脂效果更为有效且持久。
表7.抗ANGPTL3抗体对c57bl/6小鼠血浆TG的影响
(注：max Inh％表示相对于开始TG的最大降脂百分比)
表8.抗ANGPTL3抗体对c57bl/6小鼠血浆LDL的影响
(注：Max Inh％表示相对于阴性对照组LDL的最大降脂百分比)
表9.抗ANGPTL3抗体对c57bl/6小鼠血浆TC的影响
(注：Max Inh％表示相对于阴性对照组TC的最大降脂百分比)
5.3在APOE小鼠中测定抗ANGPTL3抗体对血浆脂质浓度的体内效应
APOE小鼠按2只/笼饲养(8周龄APOE小鼠，SPF，22g左右，雄性，购自上海卡文斯实验动物有限责任公司。合格证号：201917260，SCXK(苏)2016-0010)，于实验室环境适应性饲养4周，给予12/12小时光/暗周期调节，温度23±1℃，湿度40～50％，动物均给予高脂饲料(D12108C)喂养，自由进食饮水。在实验开始前7天为动物禁食，禁食4小时(h)后眼眶采血，8000RPM离心2分钟(min)，收集血浆。利用ADVIA 2400化学系统(Siemens)测定血浆脂质浓度。将小鼠按甘油三酯水平分为5组(hIgG阴性对照组、Evinacumab10mpk组、Evinacumab5mpk组、P8BG10mpk组、P8BG5mpk组)，每组8只，分别皮下注射给药一次(各组给药剂量见表6)，给药后的第1天(d)、第7天及第11天分别将各组小鼠禁食4小时后眼眶采血，收集血浆，利用ADVIA 2400化学系统(Siemens)测定血浆脂质浓度(甘油三酯、HDL胆固醇)。实验数据表示为平均值±标准差(Mean±SEM)，并用Graphpad Prism5软件作图，采用TTEST进行统计学分析。
本次实验结果见图5、6和表10所示，与hIgG阴性对照组相比，给药1d后，各治疗组甘油三酯均下降，Evinacumab(10mpk)组甘油三酯最低降至65.6±5.4mg/dL，与开始TG值相比下降了46.2％，Evinacumab(5mpk)组甘油三酯最低降至71.8±3.3mg/dL，与开始TG值相比下降了42.1％，P8BG(10mpk)组甘油三酯最低降至33.3±2.2mg/dL，与开始TG值相比下降了72.9％，P8BG(5mpk)组甘油三酯最低降至37.0±1.7mg/dL，与开始TG值相比下降了70.2％。另外，实验结果显示，给药1天后P8BG10mpk组的血浆HDL-C有所升高，Evinacumab10mpk组血浆HDL-C下降，而在降脂实验中，通常并不希望降脂的同时引起HDL-C的下降。
表10.抗ANGPTL3抗体对APOE小鼠血浆甘油三酯的影响
(注：max Inh％表示相对于开始TG的最大降脂百分比)
实施例6、抗ANGPTL3抗体药代动力学评价
6.1抗ANGPTL3抗体小鼠体内药代动力学实验
体重18-24g的C57BL/6小鼠(购自浙江维通利华实验动物技术有限公司)。实验室环境适应性饲养不小于3天，12/12小时光/暗周期调节，温度16-26℃，相对湿度40-70％，饲养期间自由摄取饲料和水。实验开始前一天，对C57BL/6小鼠进行编号，随机分组，每组3只。实验当天，每组小鼠分别静脉注射受试药物P8BG和Evinacumab，给药剂量为10mg/kg；注射体积均为5mL/kg。
给药组于给药前及给药后5min、8h、1d、2d、4d、7d、10d、14d、21d、28d采集全血0.1mL，不加抗凝，取血后在4℃放置30min，1000g离心15min，取上清(血清)置于EP管中，于-80℃保存。
采用ELISA方法检测血清中的抗体浓度，采用Winnolin软件计算受试药物的药动学参数。所得主要药动学结果见表11和图7。实验结果表明本披露的P8BG抗体在小鼠体内的半衰期高于阳性对照Evinacumab。
表11.抗ANGPTL3抗体在小鼠药代动力学
| 抗体 | P8BG | Evinacumab |
| 给药方式 | i.v. | i.v. |
| 给药剂量(mg/kg) | 10 | 10 |
| t 1/2(h) | 131.4±18.8 | 71.1±6.1 |
| t 1/2(d) | 5.47±0.78 | 2.96±0.25 |
| AUC0-∞(h*ug/mL) | 23272±2887 | 16904±4481 |
(注：AUC0-∞：药时曲线下面积；t
1/2(h)：半衰期(以小时为单位)；t
1/2(d)：半衰期(以天为单位)；i.v.静脉内注射。)
6.2抗ANGPTL3抗体在食蟹猴体内的药代动力学评价
使用体重3-4kg的食蟹猴(购自广东前沿生物科技有限公司)。动物转入实验前至少进行14天的检疫驯养。动物饲养于不锈钢笼具中，每组每笼不超过2只。动物房的室温控制在18℃～26℃，相对湿度在40％～70％，光照12小时明暗交替。实验过程中动物自由摄水。根据生化指标将6只食蟹猴中随机分成2组，每组3只动物。每组分别皮下注射受 试药物P8BG和Evinacumab，给药剂量为10mg/kg；注射体积均为2mL/kg。
分组后动物禁食过夜，分别于给药前、给药开始后1小时(h)、2h、4h、8h、12h、1天(d)、3d、5d、7d、10d、14d、21d、28d、35d、42d、49d和56d于下肢静脉取血2mL左右，置含分离胶的采血管中，取血后于室温放置30分钟(min)，1000g离心15min，取上清分装于2个干净的EP管中，-70℃以下暂存(采血后2h内完成)。采用ELISA方法检测血清中的抗体浓度，采用Winnolin软件计算受试药物的药动学参数。所得主要药动学结果见表12和图8。实验结果表明本披露的P8BG抗体在食蟹猴体内的半衰期高于阳性对照Evinacumab。
表12.抗ANGPTL3抗体在食蟹猴药代动力学
(注：AUC 0-∞：药时曲线下面积；t
1/2(h)：半衰期(以小时为单位)；t
1/2(d)：半衰期(以天为单位)；sc.皮下注射。)
实施例7、示例性抗体药物组合物(制剂)制备工艺
第一步：抗ANGPTL3抗体与稳定剂配制成含抗ANGPTL3抗体的制剂原液，经过滤后中控取样检测无菌。将原液过0.22μm PVDF滤芯，收集滤液。
第二步：调节装量进行灌装(灌装量和包材待定)，加塞，分别于灌装开始、灌装中间、灌装结束时取样中控检测装量差异。
第三步：开启轧盖机，加铝盖，进行轧盖。
第四步：目检，确认产品无装量不准等缺陷。打印、粘贴西林瓶标签；打印纸盒标签，折叠纸盒，装盒，贴纸盒标签。
实施例7-13中所用的抗ANGPTL3抗体是P8BG抗体，其重链序列如SEQ ID NO：21所示，轻链序列如SEQ ID NO：22所示。
实施例8、抗ANGPTL3抗体制剂pH值的筛选
配制下列缓冲液，制备抗ANGPTL3抗体浓度为1.0mg/mL的抗体制剂，通过测定样品的熔解温度(Tm)、热分解起始温度(Tonset)，考察抗ANGPTL3抗体在不同pH条件下的热稳定性，通过测定样品的聚集温度(Tagg)及粒径(Radius)，考察抗ANGPTL3抗体在不同pH条件下的胶体稳定性。
1)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 4.2
2)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 4.6
3)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 5.0
4)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 5.4
5)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 5.8
6)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 6.2
7)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 6.6
8)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 7.0
9)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 7.4
10)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 7.8
11)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 8.2
12)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠，pH 8.6
表13.抗ANGPTL3抗体pH值筛选结果
(注：％PD表示分散系数，值越小，表明粒径分布越均一；N/A表示不适用)
结果显示：抗ANGPTL3抗体在pH值为5.0±0.4条件下，Tagg和Tonset值较高；在pH值为6.2±0.4条件下，粒径较小，分布更均一，且Tm1值较高，表明该抗体在pH值为5.0±0.4和6.2±0.4条件下热稳定性和胶体稳定性较好。
实施例9、抗ANGPTL3抗体制剂缓冲体系的筛选和确认
9.1 pH 6.0缓冲体系筛选
选择10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠pH 6.0、10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH 6.0的缓冲体系，制备含50mg/mL抗ANGPTL3抗体的制剂，取样品进行高温(40℃)和室温(25℃)稳定性研究：
1)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠pH 6.0
2)10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH 6.0
表14.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 6.0)筛选稳定性结果1
(注：此表为抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 6.0)筛选0时样品稳定性结果)
表15.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 6.0)筛选稳定性结果2
(注：1W表示1周；粒径反映胶体稳定性；％PD表示分散系数)
表16.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 6.0)筛选稳定性结果3
(注：1W表示1周)
结果显示:相同考察条件下，相比于10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠pH 6.0缓冲体系，抗ANGPTL3抗体在10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH 6.0缓冲体系Tagg值更高，粒径更小，聚体含量更低，表明抗ANGPTL3抗体在10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH 6.0缓冲体系稳定性更好。
9.2 pH6.6缓冲体系的筛选
选择10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠pH 6.6、10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH 6.6的缓冲体系，制备含50mg/mL抗ANGPTL3抗体的制剂，取样品进行高温(40℃)和室温(25℃)稳定性研究：
1)10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠pH 6.6
2)10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH 6.6
表17.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 6.6)筛选稳定性结果1
(注：此表为抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 6.6)筛选0时样品稳定性结果)
表18.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 6.6)筛选稳定性结果2
(注：1W表示1周；粒径反映胶体稳定性；％PD表示分散系数)
表19.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 6.6)筛选稳定性结果3
(注：1W表示1周)
结果显示:相同考察条件下，相比于10mM磷酸二氢钠-磷酸氢二钠pH 6.6缓冲体系，抗ANGPTL3抗体在10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH 6.6缓冲体系Tonset值更低，Tagg值更高，粒径相对更大，但聚体含量相对更低，单体和主峰含量相对更高，综合考虑抗ANGPTL3抗体在10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH 6.6缓冲体系稳定性更好。
9.3 pH4.6缓冲体系的筛选
选择10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH 4.6、10mM醋酸-醋酸钠pH 4.6的缓冲体系，制备含50mg/mL蛋白的抗体制剂，取样品进行高温(40℃)和室温(25℃)稳定性研究：
1)10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH 4.6
2)10mM醋酸-醋酸钠pH 4.6
表20.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 4.6)筛选稳定性结果1
(注：此表为抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 4.6)筛选0时样品稳定性结果；N/A表示不适用)
表21.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 4.6)筛选稳定性结果2
(注：1W表示1周；粒径反映胶体稳定性；％PD表示分散系数；N/A表示不适用)
表22.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 4.6)筛选稳定性结果3
(注：1W表示1周)
结果显示：相同考察条件下，相比于10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH 4.6缓冲体系，抗ANGPTL3抗体在10mM醋酸-醋酸钠pH 4.6缓冲体系Tm
1值更低，但Tonset值更高，粒径更小，且聚体含量更低，表明抗ANGPTL3抗体在10mM醋酸-醋酸钠pH 4.6缓冲体系稳定性更好。
9.4 pH5.0缓冲体系的筛选
选择10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH 5.0、10mM醋酸-醋酸钠pH 5.0的缓冲体系，制备含50mg/mL抗ANGPTL3抗体的制剂，取样品进行高温(40℃)和室温(25℃)稳定性研究：
1)10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH 5.0
2)10mM醋酸-醋酸钠pH 5.0
表23.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 5.0)筛选稳定性结果1
(注：此表为缓冲体系(pH 5.0)筛选0时样品稳定性结果；N/A表示不适用)
表24.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 5.0)筛选稳定性结果2
(注：1W表示1周；粒径反映胶体稳定性；％PD表示分散系数)
表25.抗ANGPTL3抗体缓冲体系(pH 5.0)筛选稳定性结果3
(注：1W表示1周)
结果显示:相同考察条件下，相比于10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH 5.0缓冲体系，抗ANGPTL3抗体在10mM醋酸-醋酸钠pH 5.0缓冲体系Tm
1值、Tonset值、Tagg值更高，且粒径更小，聚体含量更低，单体和主峰含量更高，表明抗ANGPTL3抗体在10mM醋酸-醋酸钠pH 5.0缓冲体系稳定性更好。
抗ANGPTL3抗体缓冲体系筛选结果显示：抗ANGPTL3抗体在10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH4.6、10mM醋酸-醋酸钠pH4.6、10mM醋酸-醋酸钠pH5.0缓冲体系外观较好，且Tm
1、Tagg及Tonset值较高，但在高温40℃条件下，聚体明显增加；在10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH6.0缓冲体系外观较差，Tm
1、Tagg及Tonset值较高，高温条件下，聚体无明显增加。考虑到缓冲体系筛选所用样品为混合样品，为进一步确认最终pH和缓冲体系，用单克隆抗体样品进行缓冲体系确认。
9.5抗ANGPTL3抗体制剂缓冲体系的确认
选择10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH6.0、10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH4.6、10mM醋酸-醋酸钠pH4.6、10mM醋酸-醋酸钠pH5.0的缓冲体系，制备含50mg/mL抗ANGPTL3抗体的制剂，取样品进行高温60℃和40℃稳定性研究：
1)10mM组氨酸-盐酸组氨酸，pH6.0；
2)10mM琥珀酸-琥珀酸钠，pH4.6；
3)10mM醋酸-醋酸钠，pH4.6；
4)10mM醋酸-醋酸钠，pH5.0；
表26.抗ANGPTL3抗体制剂缓冲体系确认结果1
(注：h表示小时；d表示天；粒径反映胶体稳定性；％PD表示分散系数；NT表示未检测；Imcompleted表示样品较差，导致仪器未能成功检测)
表27.抗ANGPTL3抗体制剂缓冲体系确认结果2
(注：h表示小时；d表示天；NT表示未检测)
结果表明:相比于10mM琥珀酸-琥珀酸钠pH4.6和10mM醋酸-醋酸钠pH4.6缓冲体系，抗ANGPTL3抗体在10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH6.0、10mM醋酸-醋酸钠pH5.0缓冲体系下稳定性更好；而在10mM组氨酸-盐酸组氨酸pH6.0缓冲体系下，呈显著乳光，且加聚山梨酯80后外观无改善。
实施例10、抗ANGPTL3抗体制剂中糖浓度的筛选
选择10mM醋酸-醋酸钠pH5.0的缓冲体系，制备含不同糖浓度的缓冲体系或抗ANGPTL3抗体制剂：
1)10mM醋酸-醋酸钠，pH 5.0；
2)10mM醋酸-醋酸钠，0.2mg/mL聚山梨酯80，60mg/mL蔗糖，pH5.0；
3)10mM醋酸-醋酸钠，0.2mg/mL聚山梨酯80，70mg/mL蔗糖，pH5.0；
4)10mM醋酸-醋酸钠，0.2mg/mL聚山梨酯80，75mg/mL蔗糖，pH5.0；
5)10mM醋酸-醋酸钠，0.2mg/mL聚山梨酯80，80mg/mL蔗糖，pH5.0；
6)10mM醋酸-醋酸钠，0.2mg/mL聚山梨酯80，90mg/mL蔗糖，pH5.0；
7)10mM醋酸-醋酸钠，0.2mg/mL聚山梨酯80，80mg/mL蔗糖，pH5.0；
以上1)至7)中，均含有100mg/mL的抗ANGPTL3抗体。
各样品渗透压结果见下表：
表28.抗ANGPTL3抗体不同蔗糖浓度渗透压结果
| 序号 | 蔗糖浓度 | 蛋白浓度 | 聚山梨酯80浓度 | 渗透压值(mOsm/kg) |
| 1) | 0mg/mL | 100mg/mL | 0mg/mL | 28 |
| 2) | 60mg/mL | 0mg/mL | 0.2mg/mL | 217 |
| 3) | 70mg/mL | 0mg/mL | 0.2mg/mL | 239 |
| 4) | 75mg/mL | 0mg/mL | 0.2mg/mL | 257 |
| 5) | 80mg/mL | 0mg/mL | 0.2mg/mL | 270 |
| 6) | 90mg/mL | 0mg/mL | 0.2mg/mL | 322 |
| 7) | 80mg/mL | 100mg/mL | 0.2mg/mL | 317 |
根据渗透压结果，蔗糖的可用浓度为60-90mg/mL，例如蔗糖浓度为75mg/mL，用以制备等渗的抗ANGPTL3抗体制剂。
实施例11、抗ANGPTL3抗体制剂中表面活性剂浓度的筛选
选择10mM醋酸-醋酸钠，制备含100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，不同浓度聚山梨酯80的制剂，并考察震荡、冻融、光照、高温条件下抗体稳定性。
1)10mM醋酸-醋酸钠，0.1mg/mL聚山梨酯80，75mg/mL蔗糖，抗ANGPTL3抗体浓度100mg/mL，pH 5.0
2)10mM醋酸-醋酸钠，0.4mg/mL聚山梨酯80，75mg/mL蔗糖，抗ANGPTL3抗体浓度100mg/mL，pH 5.0
表29.不同浓度表面活性剂制剂稳定性结果1
(注：h表示小时；W表示周；RT表示室温；粒径反映胶体稳定性；％PD表示分散系数；NT表示未检测)
表30.不同浓度表面活性剂制剂稳定性结果2
(注：h表示小时；W表示周；RT表示室温)
结果表明：含0.1mg/mL或0.4mg/mL聚山梨酯80的抗ANGPTL3抗体制剂，在震荡、冻融、光照、高温条件下，稳定性无明显差异，因此，抗ANGPTL3抗体制剂中聚山梨酯80可用的浓度范围为0.1mg/mL～0.4mg/mL。
实施例12、制剂pH对稳定性的影响
选择10mM醋酸-醋酸钠，制备含75mg/mL蔗糖，0.2mg/mL聚山梨酯80，抗ANGPTL3抗体浓度100mg/mL，pH分别为5.0和5.4的制剂，考察震荡、冻融、光照、高温条件下抗体制剂稳定性。
1)10mM醋酸-醋酸钠，0.2mg/mL聚山梨酯80，75mg/mL蔗糖，抗ANGPTL3抗体浓度100mg/mL，pH5.0
2)10mM醋酸-醋酸钠，0.2mg/mL聚山梨酯80，75mg/mL蔗糖，抗ANGPTL3抗体浓度100mg/mL，pH5.4
表31.制剂pH对稳定性影响考察结果1
(注：h表示小时；W表示周；RT表示室温；粒径反映胶体稳定性；％PD表示分散系数)
表32.制剂pH对稳定性影响考察结果2
(注：h表示小时；W表示周；RT表示室温)
结果表明：与0时相比，在震荡、冻融、光照、高温条件下，pH5.0和5.4制剂的蛋白变化趋势相近，因此，抗ANGPTL3抗体制剂pH的范围定为5.0～5.4。
0.1mg/mL聚山梨酯80和0.4mg/mL聚山梨酯80，对抗体稳定性的影响不是很大，所以制剂可用的聚山梨酯80浓度范围为0.1～0.4mg/mL；pH值5.0和5.4对抗体稳定性的影响不是很大，所以制剂可用pH范围为5.0～5.4；抗ANGPTL3抗体浓度定为100mg/mL。
实施例13、可选择的制剂配方
此外，本公开还提供其它制剂配方的抗ANGPTL3抗体药物制剂，包含但不限于：
(1)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.1mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.0；
(2)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.2mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.0；
(3)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.4mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.0；
(4)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.1mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.2；
(5)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.2mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.2；
(6)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.4mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.2；
(7)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.1mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.4；
(8)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.2mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.4；
(9)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.4mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液pH5.4；
(10)80mg/mL、100mg/mL、120mg/mL或150mg/mL抗ANGPTL3抗体，75mg/mL蔗糖，0.2mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4；
(11)100mg/mL抗ANGPTL3抗体，60mg/mL、70mg/mL、75mg/mL、80mg/mL、85mg/mL或90mg/mL蔗糖，0.2mg/mL聚山梨酯80，和10mM醋酸-醋酸钠缓冲液，pH为5.0至5.4。
实验结果表明，上述制剂配方的抗ANGPTL3抗体制剂均具有良好的稳定性，可应用于抗ANGPTL3抗体药物的配制。
Claims (19)
- 一种药物组合物，其包含抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，以及缓冲剂，其中所述缓冲剂选自醋酸-醋酸钠、琥珀酸-琥珀酸钠、组氨酸-盐酸盐和枸橼酸-枸橼酸钠缓冲剂中的任一种，优选为醋酸-醋酸钠或琥珀酸-琥珀酸钠缓冲剂；其中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3，且所述轻链可变区包含氨基酸序列分别如SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：12和SEQ ID NO：13所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3。
- 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述的缓冲剂的pH为4.0至7.0，优选为5.0至5.4，最优选为约5.2。
- 根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述缓冲剂浓度为5mM至40mM，优选为5mM至20mM，最优选为约10mM。
- 根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的浓度为10mg/mL至200mg/mL，优选为80mg/mL至120mg，最优选为约100mg/mL。
- 根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其还包含表面活性剂；所述的表面活性剂优选为聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20，更优选为聚山梨醇酯80。
- 根据权利要求5所述的药物组合物，其中所述表面活性剂的浓度为0.05mg/mL至0.6mg/mL，优选为0.1mg/mL至0.4mg/mL，更优选为约0.2mg/mL。
- 根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合物，其还包括稳定剂，其中所述稳定剂为糖；优选地，所述的糖选自蔗糖、海藻糖、甘露醇和山梨醇；更优选地，所述糖为蔗糖。
- 根据权利要求7所述的药物组合物，其中所述糖的浓度为60mg/mL至90mg/mL，优选为70mg/mL至80mg/mL，最优选为约75mg/mL。
- 根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物，其包含：(a)10mg/mL至200mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，(b)5mM至30mM的醋酸盐缓冲液，(c)60mg/mL至90mg/mL的蔗糖，(d)0.05mg/mL至0.6mg/mL的聚山梨醇酯80，所述药物组合物的pH优选为4.5至6.5，更优选为5.0至5.4。
- 根据权利要求1至9中任一项所述的药物组合物，其包含：(a)约100mg/mL的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段，(b)5mM至15mM的醋酸-醋酸钠缓冲液，(c)60mg/mL至90mg/mL的蔗糖，(d)0.1mg/mL至0.4mg/mL的聚山梨醇酯80，所述药物组合物的pH优选为5.0至5.4，更优选为约5.2。
- 根据权利要求1至10中任一项所述的药物组合物，其中所述的抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段为鼠源抗体、嵌合抗体或人源化抗体；优选地，所述人源抗体的轻链和重链FR序列分别来源于人种系轻链和重链的FR。
- 根据权利要求1至11中任一项所述的药物组合物，其中所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：17所示或与之具有至少90％序列同一性，和所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示或与之具有至少90％序列同一性。
- 根据权利要求1至12中任一项所述的药物组合物，其中抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段包含抗体重链和轻链，其中：所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO：21所示或与之至少90％序列同一性，且所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO：22所示或与之具有至少90％序列同一性。
- 制备权利要求1至13中任一项所述的药物组合物的方法，包括将所述抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段原液经缓冲剂置换的步骤，其中所述的缓冲剂优选为醋酸-醋酸钠缓冲剂。
- 一种含抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的冻干制剂，所述冻干制剂通过将权利要求1至13中任一项所述的药物组合物经冷冻干燥获得；优选地，所述冷冻干燥依次包括预冻、一次干燥和二次干燥的步骤。
- 一种含有抗ANGPTL3抗体或其抗原结合片段的复溶溶液，其中所述的复溶溶液是通过将权利要求15所述的冻干制剂经复溶获得。
- 一种制品，其包括容器，该容器中装有权利要求1至13中任一项所述的 药物组合物，或权利要求15所述的冻干制剂，或权利要求16所述的复溶溶液。
- 权利要求1至13中任一项所述的药物组合物，或权利要求15所述的冻干制剂，或权利要求16所述的复溶溶液在制备用于治疗和/或预防疾病或病症的药物中的用途；优选地，所述疾病或病症选自高脂血症、高脂蛋白血症、血脂异常、心血管疾病或病症、癌症或肿瘤、非肿瘤性血管生成相关疾病或病症、以及炎性疾病或病症中的一种或多种；更优选地，所述疾病或病症选自动脉粥样硬化性血脂异常、糖尿病性血脂异常、高甘油三酸酯血症、高胆固醇血症、乳糜微粒血症、混合血脂异常、脂肪营养不良、脂肪萎缩、动脉粥样硬化、动脉瘤、高血压、心绞痛、中风、脑血管疾病、充血性心力衰竭、冠状动脉疾病、心肌梗塞、周围血管疾病、急性胰腺炎、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、血糖异常、年龄相关性黄斑变性、视网膜中央静脉阻塞或视网膜分支静脉阻塞、糖尿病性视网膜病、早产儿视网膜病、关节炎、类风湿性关节炎(RA)和牛皮癣中的一种或多种。
- 一种治疗和/或预防疾病或病症的方法，包括向有需要的受试者施用权利要求1至13中任一项所述的药物组合物，或权利要求16所述的复溶溶液；优选地，所述疾病或病症选自高脂血症、高脂蛋白血症、血脂异常、心血管疾病或病症、癌症或肿瘤、非肿瘤性血管生成相关疾病或病症、以及炎性疾病或病症中的一种或多种；更优选地，所述疾病或病症选自动脉粥样硬化性血脂异常、糖尿病性血脂异常、高甘油三酸酯血症、高胆固醇血症、乳糜微粒血症、混合血脂异常、脂肪营养不良、脂肪萎缩、动脉粥样硬化、动脉瘤、高血压、心绞痛、中风、脑血管疾病、充血性心力衰竭、冠状动脉疾病、心肌梗塞、周围血管疾病、急性胰腺炎、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、血糖异常、年龄相关性黄斑变性、视网膜中央静脉阻塞或视网膜分支静脉阻塞、糖尿病性视网膜病、早产儿视网膜病、关节炎、类风湿性关节炎(RA)和牛皮癣中的一种或多种。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2021108225268 | 2021-07-21 | ||
| CN202110822526 | 2021-07-21 | ||
| PCT/CN2022/106993 WO2023001228A1 (zh) | 2021-07-21 | 2022-07-21 | 一种抗angptl3抗体或其抗原结合片段的药物组合物及其用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117545769A true CN117545769A (zh) | 2024-02-09 |
Family
ID=84980057
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202280041925.3A Pending CN117545769A (zh) | 2021-07-21 | 2022-07-21 | 一种抗angptl3抗体或其抗原结合片段的药物组合物及其用途 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP4375298A1 (zh) |
| JP (1) | JP2024529377A (zh) |
| KR (1) | KR20240035835A (zh) |
| CN (1) | CN117545769A (zh) |
| AU (1) | AU2022314036A1 (zh) |
| CA (1) | CA3225970A1 (zh) |
| MX (1) | MX2024000891A (zh) |
| TW (1) | TW202320847A (zh) |
| WO (1) | WO2023001228A1 (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117535353A (zh) * | 2023-10-11 | 2024-02-09 | 首都医科大学附属北京潞河医院 | 一种糖尿病视网膜病变模型的建立方法及应用 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL2121751T3 (pl) * | 2006-12-08 | 2017-07-31 | Lexicon Pharmaceuticals, Inc. | Przeciwciała monoklonalne przeciwko ANGPTL3 |
| AR087329A1 (es) * | 2011-06-17 | 2014-03-19 | Regeneron Pharma | Anticuerpos humanos contra proteina 3 de tipo angiopoietina humana |
| US20200369760A1 (en) * | 2019-05-24 | 2020-11-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Stabilized formulations containing anti-angptl3 antibodies |
| CN112516090B (zh) * | 2019-09-18 | 2023-06-20 | 上海复旦张江生物医药股份有限公司 | 抗体偶联药物的药物组合、冷冻干燥剂及制备方法、用途 |
| CN114829395B (zh) | 2020-01-22 | 2023-12-12 | 江苏恒瑞医药股份有限公司 | 抗angptl3抗体及其应用 |
-
2022
- 2022-07-21 AU AU2022314036A patent/AU2022314036A1/en active Pending
- 2022-07-21 JP JP2024503454A patent/JP2024529377A/ja active Pending
- 2022-07-21 CA CA3225970A patent/CA3225970A1/en active Pending
- 2022-07-21 KR KR1020247004874A patent/KR20240035835A/ko unknown
- 2022-07-21 MX MX2024000891A patent/MX2024000891A/es unknown
- 2022-07-21 TW TW111127404A patent/TW202320847A/zh unknown
- 2022-07-21 WO PCT/CN2022/106993 patent/WO2023001228A1/zh active Application Filing
- 2022-07-21 CN CN202280041925.3A patent/CN117545769A/zh active Pending
- 2022-07-21 EP EP22845392.4A patent/EP4375298A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2024000891A (es) | 2024-02-06 |
| WO2023001228A1 (zh) | 2023-01-26 |
| KR20240035835A (ko) | 2024-03-18 |
| TW202320847A (zh) | 2023-06-01 |
| CA3225970A1 (en) | 2023-01-26 |
| JP2024529377A (ja) | 2024-08-06 |
| AU2022314036A1 (en) | 2024-02-01 |
| EP4375298A1 (en) | 2024-05-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111744007B (zh) | 一种抗tigit抗体药物组合物及其用途 | |
| CN112512550A (zh) | 一种TGF-β受体融合蛋白药物组合物及其用途 | |
| CN111356476B (zh) | Lag-3抗体药物组合物及其用途 | |
| WO2022116858A1 (zh) | 一种抗tslp抗体药物组合物及其用途 | |
| CN114829395B (zh) | 抗angptl3抗体及其应用 | |
| CN109952093B (zh) | 一种sost抗体药物组合物及其用途 | |
| JP2023501377A (ja) | 高濃度抗ｃ５抗体配合物 | |
| EP4190353A1 (en) | Anti-pd-1 antibody pharmaceutical composition and use thereof | |
| WO2023001228A1 (zh) | 一种抗angptl3抗体或其抗原结合片段的药物组合物及其用途 | |
| CN112839961B (zh) | 一种cd40抗体药物组合物及其用途 | |
| CN110431153B (zh) | 一种pcsk-9抗体药物组合物及其用途 | |
| EP4104858A1 (en) | Pharmaceutical composition containing anti-il-4r antibody and use thereof | |
| WO2021190582A1 (zh) | 一种抗ox40抗体药物组合物及其用途 | |
| US20240352113A1 (en) | Pharmaceutical composition of anti-angptl3 antibody or antigen binding fragment thereof and its application | |
| CN113507938A (zh) | 包含抗il-5抗体的药物组合物及其用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 40106911 Country of ref document: HK |