CN117481992A - 一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物及其应用 - Google Patents

一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物及其应用，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物包括乙酰基六肽‑8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽‑4和乙酰基二肽‑1鲸蜡酯。本发明的多肽组合物通过乙酰基六肽‑8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽‑4和乙酰基二肽‑1鲸蜡酯搭配使用，四者具有协同增效的作用，可以多靶向的对皮肤的表皮层、基底层、真皮层和肌肉层进行修复，进而可以使组合物具有更好的去皱抗衰老作用，满足消费者的功能需求。

Description

一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物及其应用
技术领域
本发明属于日化护肤品技术领域，具体涉及一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物及其应用。
背景技术
衰老是每个人都要面对的问题，衰老主要来自于两个方面的因素，分为内源性和外源性。内源即人类随着年龄的增长，人体内的新陈代谢，会导致胶原蛋白的衰退及流失，这个并不可逆的；外源性即随着生活中污染的物质越来越多，氧化物质也随着增多，产生的自由基会破坏胶原蛋白的链接使其断裂失去弹性。随着经济的发展，人们的生活质量逐步改善，在工作、生活越来越快节奏的同时对抗衰也越来越重视。
CN109771323A公开了一种抗衰老多肽组合物及其应用。该发明提供的抗衰老多肽组合物包含乙酰基六肽-8、乙酰基四肽-5和水解弹性蛋白。该抗衰老多肽组合物通过科学的研究合理复配各多肽功效成分，能够实现协同增效，从而达到最佳的抗衰祛皱功效，并且与其他活性物复配使用不影响多肽组合物的抗衰老功效。该抗衰老多肽组合物用于化妆品中，可满足不同的使用需求。因此，该抗衰老多肽组合物作为原料添加到乳液、膏霜、化妆水或精华液等化妆品中，为肌肤供给营养，兼具抗衰老和保湿的功效。
CN109528545A公开了一种祛皱抗衰活性多肽，所述多肽用脂质成分包裹于纳米包裹体中，纳米包裹体还包括多元醇、表面活性剂、pH缓冲剂成分，祛皱抗衰活性多肽的质量百分浓度为0.0001％-5％，脂质成分的质量百分浓度为2％-20％，多元醇的质量百分浓度为2％-20％，表面活性剂的质量百分浓度为0.1％-10％，pH缓冲剂的质量百分浓度为0.001％-1％。该发明所述祛皱抗衰活性多肽的稳定性好，安全性高；易于透皮吸收；与纳米包裹前相比，纳米包裹后祛皱抗衰活性多肽在皮肤的蓄积量更高，同样的投料量可以达到更优异的祛皱抗衰效果。
目前市面上的针对抗衰老的多肽组合物虽聚焦内外源性抗衰老，但作用的内外源性靶点相对单一，且对组合的协同增效未有明确机理和数据支撑。因此，开发和研制一种多靶点精准抗衰的多肽组合物具有重要的市场价值。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物及其应用，所述多种多肽组合物通过多靶点精准组合，对内外源性皮肤抗衰老精准作用，能达到最佳的抗衰祛皱效果，满足消费者的需求。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物包括乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽-4和乙酰基二肽-1鲸蜡酯。
本发明的多肽组合物中所述乙酰基六肽-8为神经递质抑制多肽，其可模仿神经递质SNAP-25蛋白的N端结构，进而减少乙酰胆碱(Ach)的释放；所述类蛇毒肽是一种模拟蛇毒毒素Waglerin I活性的神经递质抑制多肽，可结合nmAChR的ε亚单位从而阻滞乙酰胆碱与受体的结合，阻断神经兴奋传递；所述棕榈酰五肽-4可促进Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白、纤维粘连蛋白的生成；所述乙酰基二肽-1鲸蜡酯能够增加内啡肽和脑啡肽的自然合成，即时舒缓皮肤的红热刺痛，抗炎舒敏，并能有效刺激弹性蛋白的再生。本发明中，四者搭配使用，具有协同增效的作用，可以多靶向的对皮肤的表皮层、基底层、真皮层和肌肉层进行修复，进而可以使组合物具有更好的去皱抗衰老作用，满足消费者的功能需求。
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计包括乙酰基六肽-81-10份、类蛇毒肽5-15份、棕榈酰五肽-4 1-10份和乙酰基二肽-1鲸蜡酯2-8份。
本发明的具有抗衰去皱功效的多肽组合物中所述乙酰基六肽-8的添加量可以为2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份或9份等；
所述类蛇毒肽的添加量可以为6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份或14份等；
所述棕榈酰五肽-4的添加量可以为2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份或9份等；
所述乙酰基二肽-1鲸蜡酯的添加量可以为2份、3份、4份、5份、6份、7份或8份等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计包括乙酰基六肽-84-7份、类蛇毒肽8-12份、棕榈酰五肽-4 3-8份和乙酰基二肽-1鲸蜡酯4-6份。
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物还包括棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2或肌肽中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物还包括棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2和肌肽。
作为本发明的优选技术方案，所述多肽组合物中添加棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2和肌肽后可以使组合物的抗衰去皱效果更佳。其中所述棕榈酰三肽-5能够激活转化生长因子TGF-β，抑制MMP(基质金属蛋白酶)的活性；所述乙酰基四肽-2能针对DEJ半桥粒组成胶原COL17A1有一定的促进作用，同时能有效促进胶原蛋白水平和弹性纤维，促进细胞与ECM的结合，对抗导致皮肤紧实度和粘附力丧失的不利作用；所述肌肽可以阻碍自由基反应和糖基化反应，防止氧化应激产物和糖基化末端(AGE)产物产生，促进胶原生成，清除糖基化暗黄蛋白，三者与乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽-4和乙酰基二肽-1鲸蜡酯协同配合，可以更好的提高组合物的抗衰去皱效果。
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计包括乙酰基六肽-81-10份、类蛇毒肽5-15份、棕榈酰五肽-4 1-10份、乙酰基二肽-1鲸蜡酯2-8份、棕榈酰三肽-5 1-5份、乙酰基四肽-2 1-3份和肌肽0.1-2份。
本发明的具有抗衰去皱功效的多肽组合物中所述棕榈酰三肽-5的添加量可以为1.5份、2份、2.5份、3份、3.5份、4份或4.5份等；
所述乙酰基四肽-2的添加量可以为1.2份、1.5份、1.8份、2份、2.2份、2.5份或2.8份等；
所述肌肽的添加量可以为0.2份、0.4份、0.8份、1份、1.2份、1.5份或1.8份等。
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计包括乙酰基六肽-84-7份、类蛇毒肽8-12份、棕榈酰五肽-4 3-8份、乙酰基二肽-1鲸蜡酯4-6份、棕榈酰三肽-52-4份、乙酰基四肽-2 1.5-2.5份和肌肽0.5-1.5份。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物在化妆品中的应用。
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物在所述化妆品中的质量百分含量为1-15％，例如可以为2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％或14％等，上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述化妆品包括乳液、化妆水、面霜、精华液或面膜。
第三方面，本发明提供了一种具有抗衰去皱功效的精华液，所述具有抗衰去皱功效的精华液包括：保湿剂、肤感调节剂、乳化剂、皮肤调理剂、第一方面所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物和水。
本发明的精华液通过所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与保湿剂、乳化剂、皮肤调理剂等组分的配合，既能够为皮肤细胞提供更多的营养及能量，深层滋润肌肤，还能够具有更好的延缓皮肤衰老的效果。
优选地，所述具有抗衰去皱功效的精华液以质量百分含量计包括：保湿剂1-10％、肤感调节剂0.1-2％、乳化剂1-5％、皮肤调理剂1-10％、第一方面所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物1-10％和水。
本发明的具有抗衰去皱功效的精华液中所述保湿剂的添加量可以为2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％或9％等；
所述肤感调节剂的添加量可以为0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1％、1.2％、1.4％、1.6％或1.8％等；
所述乳化剂的添加量可以为1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％或4.5％等；
所述皮肤调理剂的添加量可以为2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％或9％等；
所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物的添加量可以为2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％或9％等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述保湿剂包括甘油、丁二醇、1,2-戊二醇或透明质酸钠中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述肤感调节剂包括聚丙烯酰基二甲基牛磺酸钠和/或丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物。
优选地，所述乳化剂包括卵磷脂、鲸蜡硬脂醇或聚甘油-3蜂蜡酸酯中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述皮肤调理剂包括乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因、乙酰壳多糖或羟乙基哌嗪乙烷磺酸中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述皮肤调理剂为乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因、乙酰壳多糖和羟乙基哌嗪乙烷磺酸的组合。
本发明所涉及的精华液中皮肤调理剂为乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因、乙酰壳多糖和羟乙基哌嗪乙烷磺酸的组合时，其在可使精华液在抗氧化抗衰老方面的功效进一步提高。
优选地，所述乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因、乙酰壳多糖和羟乙基哌嗪乙烷磺酸的质量比为(1-3):(1-5):(0.5-2):(0.1-1)。
其中“1-3”可以为1.2、1.4、1.5、1.6、1.8、2、2.2、2.4、2.5、2.6或2.8等；
“1-5”可以为1.2、1.5、1.8、2、2.2、2.5、2.8、3、3.2、3.5、3.8、4、4.2、4.5或4.8等；
“0.5-2”可以为0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8或1.9等；
“0.1-1”可以为0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8或0.9等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
第四方面，本发明提供了一种如第三方面所述的具有抗衰去皱功效的精华液的制备方法，所述制备方法包括：
(1)将水、保湿剂、肤感调节剂加入水相锅，搅拌升温，在65-75℃(例如可以为66℃、68℃、70℃、72℃或74℃等)下保温1-2h(例如可以为1.1h、1.3h、1.5h、1.7h或1.9h等)得到混合物A；将乳化剂、皮肤调理剂加入油相锅，搅拌升温，在70-80℃(例如可以为71℃、73℃、75℃、77℃或79℃等)下保温1-2h(例如可以为1.1h、1.3h、1.5h、1.7h或1.9h等)保温得到混合物B；
(2)保温结束后，将混合物A和混合物B均质后，降温，加入第一方面所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物，搅拌，得到所述具有抗衰去皱功效的精华液；
优选地，所述均质的温度为60-70℃(例如可以为61℃、63℃、65℃、67℃或69℃等)；均质的转速为500-1000rpm(例如可以为600rpm、700rpm、800rpm或900rpm等)。
优选地，所述降温是指降温至35-45℃，例如可以为36℃、38℃、40℃、42℃或44℃等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明的多肽组合物通过乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽-4和乙酰基二肽-1鲸蜡酯搭配使用，四者具有协同增效的作用，可以多靶向的对皮肤的表皮层、基底层、真皮层和肌肉层进行修复，进而可以使组合物具有更好的去皱抗衰老作用，满足消费者的功能需求。
(2)本发明的精华液通过所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与保湿剂、乳化剂、皮肤调理剂等组分的配合，既能够为皮肤细胞提供更多的营养及能量，深层滋润肌肤，还能够具有更好的延缓皮肤衰老的效果。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
下述实施例、对比例中所涉及的重量份数均以市售原料中含有的实际功效成分来计，市售原料中还选择性的含有溶剂、填充剂、稀释剂、稳定剂、pH调节剂、抗菌剂、抗氧化剂或允许范围内的杂质中的任意一种或至少两种的组合。
下述实施例、对比例中所涉及的部分原料的规格信息如下：
原料 来源
乙酰基六肽-8 浙江湃肽生物有限公司
类蛇毒肽 浙江湃肽生物有限公司
棕榈酰五肽-4 浙江湃肽生物有限公司
乙酰基二肽-1鲸蜡酯 浙江湃肽生物有限公司
棕榈酰三肽-5 浙江湃肽生物有限公司
乙酰基四肽-2 浙江湃肽生物有限公司
肌肽 东莞市维琪科技有限公司
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实施例1
本实施例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计为乙酰基六肽-8 5份、类蛇毒肽10份、棕榈酰五肽-4 5份、乙酰基二肽-1鲸蜡酯5份、棕榈酰三肽-5 3份、乙酰基四肽-2 2份和肌肽1份。
实施例2
本实施例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计为乙酰基六肽-8 3份、类蛇毒肽12份、棕榈酰五肽-4 3份、乙酰基二肽-1鲸蜡酯6份、棕榈酰三肽-5 2份、乙酰基四肽-2 2.5份和肌肽0.5份。
实施例3
本实施例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计为乙酰基六肽-8 7份、类蛇毒肽8份、棕榈酰五肽-4 8份、乙酰基二肽-1鲸蜡酯4份、棕榈酰三肽-5 4份、乙酰基四肽-2 1.5份和肌肽1.5份。
实施例4
本实施例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物不包括棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2和肌肽，其余组分与实施例1一致。
实施例5
本实施例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与实施例1的区别仅在于不包括棕榈酰三肽-5，其减少量按份数比例分配至乙酰基四肽-2和肌肽中，其余组分与实施例1一致。
实施例6
本实施例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与实施例1的区别仅在于不包括乙酰基四肽-2，其减少量按份数比例分配至棕榈酰三肽-5和肌肽中，其余组分与实施例1一致。
实施例7
本实施例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与实施例1的区别仅在于不包括肌肽，其减少量按份数比例分配至棕榈酰三肽-5和乙酰基四肽-2中，其余组分与实施例1一致。
对比例1
本对比例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与实施例1的区别仅在于不包括乙酰基六肽-8，其减少量按份数比例分配至类蛇毒肽、棕榈酰五肽-4和乙酰基二肽-1鲸蜡酯中，其余组分与实施例1一致。
对比例2
本对比例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与实施例1的区别仅在于不包括棕榈酰五肽-4，其减少量按份数比例分配至类蛇毒肽、乙酰基六肽-8和乙酰基二肽-1鲸蜡酯中，其余组分与实施例1一致。
对比例3
本对比例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与实施例1的区别仅在于不包括类蛇毒肽，其减少量按份数比例分配至乙酰基六肽-8、棕榈酰五肽-4和乙酰基二肽-1鲸蜡酯中，其余组分与实施例1一致。
对比例4
本对比例提供一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物与实施例1的区别仅在于不包括乙酰基二肽-1鲸蜡酯，其减少量按份数比例分配至乙酰基六肽-8、类蛇毒肽和棕榈酰五肽-4中，其余组分与实施例1一致。
应用例1
本应用例提供了一种具有抗衰去皱功效的精华液，所述精华液的组分按质量百分含量计为：
其制备方法为：
(1)将水、保湿剂、肤感调节剂加入水相锅，搅拌升温，在70℃下保温1h得到混合物A；将乳化剂、皮肤调理剂加入油相锅，搅拌升温，在85℃下保温1.5h保温得到混合物B；
(2)保温结束后，将混合物A和混合物B在70℃、800rpm的转速下均质5min后，降温至35℃，加入实施例1的具有抗衰去皱功效的多肽组合物，在500rpm下搅拌20min，得到所述具有抗衰去皱功效的精华液。
应用例2-7
本应用例提供七种具有抗衰去皱功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于将实施例1的多肽组合物分别替换为等量的实施例2-7的多肽组合物，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
应用例8
本应用例提供一种具有抗衰去皱功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于皮肤调理剂不包括乳酸杆菌发酵溶胞产物，其减少量按含量配比分配至依克多因、乙酰壳多糖和羟乙基哌嗪乙烷磺酸中，并保持皮肤调理剂的添加量不变，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
应用例9
本应用例提供一种具有抗衰去皱功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于皮肤调理剂不包括依克多因，其减少量按含量配比分配至乳酸杆菌发酵溶胞产物、乙酰壳多糖和羟乙基哌嗪乙烷磺酸中，并保持皮肤调理剂的添加量不变，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
应用例10
本应用例提供一种具有抗衰去皱功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于皮肤调理剂不包括乙酰壳多糖，其减少量按含量配比分配至乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因和羟乙基哌嗪乙烷磺酸中，并保持皮肤调理剂的添加量不变，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
应用例11
本应用例提供一种具有抗衰去皱功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于皮肤调理剂不包括羟乙基哌嗪乙烷磺酸，其减少量按含量配比分配至乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因和乙酰壳多糖中，并保持皮肤调理剂的添加量不变，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
对比应用例1-4
本对比应用例提供四种具有抗衰去皱功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于将实施例1的多肽组合物分别替换为等量的对比例1-4的多肽组合物，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
对比应用例5
本对比应用例提供一种具有抗衰去皱功效的精华液，其配方与应用例1的区别仅在于不包括实施例1的多肽组合物，其减少量由水补足，其他成分及含量保持不变。制备方法参照应用例1。
测试例1抗氧化功效研究——DPPH自由基清除实验
准确称取DPPH试剂47.7mg，定容至100ml棕色容量瓶，取其中5ml用无水乙醇定容至50ml棕色容量瓶，得到DPPH测试液(47.7mg/L)。分别移取2mLDPPH测试液，按表1所示分别加入0.1mL应用例1-11及对比应用例1-5制得的具有抗衰去皱功效的精华液，再加入适量无水乙醇，使其总质量相等。充分混合后在暗处静置30min，以无水乙醇为空白对照，于517nm处测定其吸光度，并设置维生素C为对照，按照以下公式计算各提取液对DPPH的清除率：DPPH清除率(％)＝[1-(As-Ar)/A0]×100％
式中：As——提取液与DPPH反应体系的吸光度；Ar——提取液-无水乙醇的吸光度；A0——空白对照无水乙醇的吸光度。
表1反应液组成
DPPH自由基清除率一定程度上反映了其抗氧化能力，其清除率越高，表明其抗氧化程度越好，抗衰老效果也越好，所以可以通过精华液对清除DPPH自由基能力的研究来判断其抗衰老效果。维C是化妆品行业公认的高效抗氧化剂，本次实验以维C为对照，考察其抗氧化能力。结果见表2。
表2
样品名称 DPPH清除率(％)
维生素C 92.81
应用例1 87.65
应用例2 85.31
应用例3 88.94
应用例4 81.67
应用例5 82.36
应用例6 85.53
应用例7 81.97
应用例8 84.71
应用例9 84.85
应用例10 83.37
应用例11 82.38
对比应用例1 75.66
对比应用例2 75.35
对比应用例3 77.63
对比应用例4 76.98
对比应用例5 74.42
由表2可知，应用例1-11及对比应用例1-5对DPPH均具有较好的清除效果，清除率均在73％以上。其中，应用例1的清除率要高于对比应用例5，表明本发明的精华液添加所述多肽组合物后的抗氧化能力更好，而应用例1的清除率高于应用例4-8以及对比应用例1-4验证了本发明多肽组合物配伍的合理性。其中乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽-4、乙酰基二肽-1鲸蜡酯、棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2和肌肽在抗氧化功效上相互促进，具有预料不到的协同增效作用。
测试例2：抗衰老测试
对应用例1-11及对比应用例1-5制得的精华液进行抗衰老效果评价：
具体测试方法如下所示：
(1)对金属蛋白酶(MMP-1)表达的抑制率：
测试原理：皮肤老化的主要原因之一是真皮层的结构发生了改变。由于一些外界因素作用，激活体内的基质金属蛋白酶(MMPs)，可导致皮肤真皮中支撑皮肤结构的胶原蛋白和弹性蛋白被过度降解，从而使皮肤出现皱缩、无弹性等衰老症状。金属蛋白酶MMP-1又称胶原酶-1，可降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ和X型胶原明胶及蛋白多糖。通过测试样品对MMP-1的抑制率来评估这些样品的抗衰老效果；
测试方法：将成纤维细胞接种到12孔细胞培养板每个孔含有0.75×105个细胞，并且在无血清培养基中饥饿培养24h。用PBS冲洗经饥饿培养的细胞，并且用蓝光处理。然后，在48h内，向细胞中加入测试样品2次。用试剂盒(BIOTRAK，RPN2610)测量培养基中分离的MMP-1。通过计算MMP-1的表达抑制率来评估抗衰老功效的强弱；
计算公式如下：抑制率＝(M0-M1)/M0×100％；
其M0为未添加测试样品，但经蓝光照射后MMP-1的表达量，M1为添加测试样品并经蓝光照射后MMP-1的表达量；
(2)弹性蛋白酶活性抑制功效的测定
测试原理：皮肤老化的主要原因之一是真皮层的结构发生了改变。由于一些外界因素作用，激活体内的弹性蛋白酶，可导致皮肤真皮中支撑皮肤结构的胶原蛋白和弹性蛋白被过度降解，通过测试样品对弹性蛋白酶抑制率来评估这些样品的抗衰老效果；
测试方法：在96孔板在调制成10mg/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液混合200μL的各测试样品及50μL的20μg/mL弹性蛋白酶-III型溶液。将250μM的EGCG作为阳性对照组来使用，并且作为阴性对照组的非处理组使用了蒸馏水，并且在25℃下反应15min。反应结束后，测定410nm波长下的吸光度。
计算公式如下：弹性蛋白酶活性抑制率(％)＝1-(C-D)/(A-B)×100％；
其A为没有添加试验物质，而添加酶时，在410nm波长下的吸光度，B为没有添加试验物质、酶时，在410nm波长下的吸光度，C为在添加试验物质、酶时，在410nm波长下的吸光度，D为在添加试验物质，而没有添加酶时，在410nm波长下的吸光度；
具体测试结果如下表3所示：
表3
由表3结果显示：本发明应用例1-3的精华液对金属蛋白酶MMP-1表达的抑制率在62％以上，对弹性蛋白酶抑制率在83％以上，都明显高于对比应用例5。这说明本发明所述精华液添加所述多肽组合物后具有显著的抗衰老功效。
由应用例1和应用例4-8的对比可知，所述多肽组合物中添加棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2和肌肽后对金属蛋白酶MMP-1以及弹性蛋白酶的抑制效果更佳；
由应用例1和应用例8-11可知，本发明中皮肤调理剂的配方也影响着所述精华液抗衰老的效果；
由应用例1和对比应用例1-4的对比可知，所述乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽-4和乙酰基二肽-1鲸蜡酯在抗衰老功效上具有预料不到的协同增效作用。
测试例3：VISIA皮肤分析评价实验
VISIA皮肤图像分析仪采用多重光谱影像科技，通过1200万像素摄像头，可从正面、左侧面、右侧面三个角度拍摄，在标准白光、平行偏振光、紫外光三种光源三次成像，因此VISIA面部图像分析系统可系统分析受试者面部皮肤的色素斑、纹理、毛孔、皱纹、紫外线光斑、稳色斑、红色区、紫质，为皮肤提供精确、定量的分析依据。通过记录受试者试验前后面部的色素斑、皱纹、纹理，绝对分值代表皮肤指征检测值的面积和强度，用于观察皮肤性质的改变情况，因此选取绝对分值所得的数据(正面、左侧面、右侧面测试结果取平均值)作为分析标准和数据统计依据。将每位受试者所有数据输入计算机，对测定结果进行比较，经统计学处理分析受试者皮肤特点及各项指标数据。试验采用的测试仪器为VISIA面部图像分析系统(美国CANFIELD科技公司)。
测试方法具体为：
随机选取160名20-45岁的试用者，分成16组，每组10名。16组试用者分别使用应用例1-11及对比应用例1-5制得的精华液(早晚各一次)，持续28天，并要求试验的第14天(D14)及第28天(D28)进行回访。同一个受试者的测试由同一个测量人员完成，受试者在试验期间不得使用其他保持皮肤弹性的物品及影响结果判定的化妆品，试验期间不改变原来的饮食习惯。
受试部位前15天不能使用任何产品(化妆品或外用药品或内服保健品)。使用统一的洁面产品对面部进行彻底清洁后，用纸巾轻轻拭干，在室温为21℃±1℃，相对湿度为50±10％的房间内，静待30分钟后用VISIA面部图像分析仪拍摄测试者的面部照片，分析区域应尽量避免反光区域和头发的干扰。对受试者面部(包括正面、左侧面、右侧面)进行拍摄，将所得的绝对分值进行数据统计，记录受试者面部的纹理、皱纹的检测数据。试验结果如表4所示。
表4
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由表4的试验结果可知，应用例1-3的精华液相较于对比应用例5的精华液具有更明显的皱纹、纹理的改观功效。
由应用例1和应用例4-8的对比可知，所述多肽组合物中添加棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2和肌肽后去除皱纹、抚平纹理的效果更佳；
由应用例1和应用例8-11可知，本发明中皮肤调理剂的配方也影响着所述精华液去除皱纹、抚平纹理的效果；
由应用例1和对比应用例1-4的对比可知，所述乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽-4和乙酰基二肽-1鲸蜡酯在去除皱纹、抚平纹理的功效上具有预料不到的协同增效作用。
测试例4
安全性评价：
具体方法为：选取年龄在18-35周岁的女性40名，无过敏史，每位受试者均试用应用例1-11制得的精华液。清洁受试者背部后，将加有样品的斑试器用无刺激胶带贴敷于背部选定位置，粘贴好后用手指轻压使之均匀贴于皮肤上，持续24h。受试者24h内保持斑贴部位干燥，避免激烈运动、挠抓斑试部位、长时间日光照射等。24h后去除试器并做好标记，30min后等压痕消失后在充足灯光下进行判定。
皮肤不良反应分级标准如表5所示：
表5
结果如表6所示：
表6
由表6数据可知：受试者均为阴性反应，说明对应的精华液对人体无不良反应，安全性高。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物及其应用，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (10)

1.一种具有抗衰去皱功效的多肽组合物，其特征在于，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物包括乙酰基六肽-8、类蛇毒肽、棕榈酰五肽-4和乙酰基二肽-1鲸蜡酯。
2.根据权利要求1所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物，其特征在于，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计包括乙酰基六肽-8 1-10份、类蛇毒肽5-15份、棕榈酰五肽-4 1-10份和乙酰基二肽-1鲸蜡酯2-8份；
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计包括乙酰基六肽-8 4-7份、类蛇毒肽8-12份、棕榈酰五肽-4 3-8份和乙酰基二肽-1鲸蜡酯4-6份。
3.根据权利要求1或2所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物，其特征在于，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物还包括棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2或肌肽中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物还包括棕榈酰三肽-5、乙酰基四肽-2和肌肽。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物，其特征在于，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计包括乙酰基六肽-8 1-10份、类蛇毒肽5-15份、棕榈酰五肽-4 1-10份、乙酰基二肽-1鲸蜡酯2-8份、棕榈酰三肽-5 1-5份、乙酰基四肽-2 1-3份和肌肽0.1-2份；
优选地，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物按重量份数计包括乙酰基六肽-8 4-7份、类蛇毒肽8-12份、棕榈酰五肽-4 3-8份、乙酰基二肽-1鲸蜡酯4-6份、棕榈酰三肽-5 2-4份、乙酰基四肽-2 1.5-2.5份和肌肽0.5-1.5份。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物在化妆品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述具有抗衰去皱功效的多肽组合物在所述化妆品中的质量百分含量为1-15％；
优选地，所述化妆品包括乳液、化妆水、面霜、精华液或面膜。
7.一种具有抗衰去皱功效的精华液，其特征在于，所述具有抗衰去皱功效的精华液包括：保湿剂、肤感调节剂、乳化剂、皮肤调理剂、权利要求1-4中任一项所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物和水。
8.根据权利要求7所述的具有抗衰去皱功效的精华液，其特征在于，所述具有抗衰去皱功效的精华液以质量百分含量计包括：保湿剂1-10％、肤感调节剂0.1-2％、乳化剂1-5％、皮肤调理剂1-10％、权利要求1-4中任一项所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物1-10％和水。
9.根据权利要求7或8所述的具有抗衰去皱功效的精华液，其特征在于，所述保湿剂包括甘油、丁二醇、1,2-戊二醇或透明质酸钠中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述肤感调节剂包括聚丙烯酰基二甲基牛磺酸钠和/或丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物；
优选地，所述乳化剂包括卵磷脂、鲸蜡硬脂醇或聚甘油-3蜂蜡酸酯中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述皮肤调理剂包括乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因、乙酰壳多糖或羟乙基哌嗪乙烷磺酸中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述皮肤调理剂为乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因、乙酰壳多糖和羟乙基哌嗪乙烷磺酸的组合；
优选地，所述乳酸杆菌发酵溶胞产物、依克多因、乙酰壳多糖和羟乙基哌嗪乙烷磺酸的质量比为(1-3):(1-5):(0.5-2):(0.1-1)。
10.根据权利要求7-9中任一项所述的具有抗衰去皱功效的精华液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
(1)将水、保湿剂、肤感调节剂加入水相锅，搅拌升温，在65-75℃下保温1-2h得到混合物A；将乳化剂、皮肤调理剂加入油相锅，搅拌升温，在70-80℃下保温1-2h保温得到混合物B；
(2)保温结束后，将混合物A和混合物B均质后，降温，加入权利要求1-4中任一项所述的具有抗衰去皱功效的多肽组合物，搅拌，得到所述具有抗衰去皱功效的精华液；
优选地，所述均质的温度为60-70℃；均质的转速为500-1000rpm；
优选地，所述降温是指降温至35-45℃。
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