CN117447558A - 靶向Nectin-4的双环肽核素配体、探针及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及核医学领域与放射性药物技术领域，具体涉及靶向Nectin‑4的双环肽核素配体、探针及其制备方法和应用。本发明提供了靶向Nectin‑4的双环肽核素配体及其制备方法、靶向Nectin‑4的双环肽核素探针及其制备方法，本发明还提供了所述靶向Nectin‑4的双环肽核素配体和探针在制备实体瘤诊断试剂或治疗药物中的应用。与现有提供的Nectin‑4的双环肽核素配体或探针相比，本发明提供的Nectin‑4的双环肽核素配体或探针具有良好的稳定性、药代动力学优良、与肿瘤Nectin‑4结合特异性好，具有较高的肿瘤摄取以及较高的肿瘤与肌肉摄取比，良好的体内代谢性能，具有良好的临床应用前景。

Description

靶向Nectin-4的双环肽核素配体、探针及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及核医学领域与放射性药物技术领域，具体涉及靶向Nectin-4的双环肽核素配体、探针及其制备方法和应用。

背景技术

Nectin-4(基因名为PVRL4，脊髓灰质炎病毒受体4)是一种I型跨膜免疫球蛋白样细胞间粘附分子。作为Nectin蛋白家族的一员，Nectin-4也同样参与了细胞间黏着连接的形成，介导细胞间连接，并组成信号传导平台参与调节细胞增殖、分化、迁移等生理过程。除此之外，Nectin4还能够介导麻疹病毒入侵细胞，或是与TIGIT等分子相互作用参与免疫调节。与此同时，Nectin-4的表达模式也已被广泛研究。正常情况下，Nectin-4主要在胚胎和胎盘中特异性表达，在成年人正常组织中表达有限。但是已有多篇文献报到能够在多种癌症样本中检测到Nectin-4的异常高表达，是多种癌症的可靠标志物，尤其是在膀胱癌、乳腺癌和肺癌中，超过一半的患者标本均呈现出Nectin4中度至强染色。综合Nectin-4的表达模式和水平，以及其介导内吞的能力，Nectin-4成为了多种疾病中ADCs研发的诱人靶标。

在癌症治疗药物研发领域，目前以Nectin-4为靶点的最成功的抗肿瘤药物是Enfortumab Vedotin它是一种新型的、完全人源化的ADC，由抗Nectin-4抗体与高效微管抑制剂MMAE偶联而成，能够以高亲和力结合细胞表面表达的Nectin-4，随后被细胞内吞并水解释放MMAE破坏微管蛋白聚合，导致有丝分裂阻滞、诱导细胞死亡。已于2019年被FDA批准上市，主要用于治疗局部晚期或转移性尿路上皮癌(最常见的膀胱癌类型)，预计到2026年其市场份额将达到35亿美元。临床前研究表明，EV能够与大鼠和猴子的Nectin-4特异性结合，并抑制几种表达Nectin-4的异种移植瘤的生长，包括人乳腺癌、尿路上皮癌、胰腺癌和肺癌的小鼠异种移植瘤，并导致乳腺癌和尿路上皮癌异种移植的肿瘤消退(Cancer Res.2016,76(10):3003-3013.)。总体而言，这些发现证实了Nectin-4是多种实体瘤的有效治疗靶点，并支持进一步针对Nectin-4的ADC药物的临床开发、研究和应用。

尽管靶向Nectin-4的ADC药物具有广阔的应用前景，但临床上仍面临如何筛选适用于靶向Nectin-4的ADC药物的患者以及如何评价药物疗效等问题。此外，临床研究表明，转移病灶中Nectin-4的表达经常降低或缺失。并且值得注意的是，在的治疗过程中，Nectin-4表达的缺失或者较低可以预测到/>耐药的产生。

核医学分子显像技术可以从分子水平反映组织的生理、病理、代谢等功能性变化，已被广泛的应用于肿瘤膜受体和微环境中免疫检查点的显像研究中。相比于传统影像模态，具有极高灵敏度的核医学显像手段通过配合高特异性的分子探针，能够特异、准确、无创伤地反映组织器官的功能和代谢，故开发靶向Nectin-4的核医学探针对Nectin-4阳性实体瘤的诊断、精准定位以及疗效评估具有重要的临床意义。

目前报道的Nectin-4靶向核医学诊疗试剂的是放射性核素⁸⁹Zr、¹⁸F和^99mTc标记的Nectin-4单克隆抗体。但该类显像剂具有分子量大，体内循环时间长，辐射剂量大；细胞膜穿透性差；靶/本底比值低等缺陷，直接将单克隆抗体应用于临床常规分子影像试剂具有一定的局限性。因此，急需开发合适的方法以评估患者在治疗前和治疗过程中Nectin-4的表达水平为其诊疗方案的制定提供依据。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供靶向Nectin-4的双环肽核素配体、探针及其制备方法和应用，本发明提供了用于Nectin-4高表达肿瘤的诊断和治疗一体化的靶向Nectin-4的双环肽核素配体和探针，并提供了配体和探针的制备方法和应用。

本发明提供了靶向Nectin-4的双环肽核素配体，其具有如通式(1)的结构：

其中，X为如下式(2)～式(7)所示基团中的至少一种：

R为如下式(8)～式(10)所示基团中的至少一种：

其中，a为1～12的整数，b为1～4的整数，c为1～12的整数。

与现有技术中显像剂相比，本发明提供的小分子示踪剂相较于单抗具有合理的半衰期，更强的肿瘤渗透性、在较短的时间内给出准确的评估结果等优点，从而获得更准确的技术效果。

进一步地，a为3～8的整数，b为1～3的整数，c为4～12的整数。

在一些实施例中，所述X为如式(2)或式(5)所示基团；

所述R为如式(8)或式(9)所示基团，其中所述a为4，所述b为2。

在一些具体实施例中，所述靶向Nectin-4的双环肽核素配体具有如式(11)或式(12)所示的结构：

本发明提供了所述靶向Nectin-4的双环肽核素配体的制备方法，包括如下步骤：

步骤1、以Fmoc-氨性树脂为载体，依次偶联N-乙酰-S-三苯甲基-L-半胱氨酸，脯氨酸，1-萘基丙氨酸，D型-Fmoc-赖氨酸，S-三苯甲基-L-半胱氨酸，蛋氨酸，(2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基)-L-高精氨酸，组氨酸，色氨酸，丝氨酸，缩氨酸，脯氨酸，羟脯氨酸，色氨酸和S-三苯甲基-L-半胱氨酸；

步骤2、所述偶联的反应后，脱去D型-Fmoc-赖氨酸的Fmoc基团，与所述X基团和所述R基团进行偶联，获得肽树脂；

步骤3、所述肽树脂经裂解后获得线性多肽，所述线性多肽与1,3,5-三丙烯酰基六-1,3,5-三嗪反应后获得所述靶向Nectin-4的双环肽核素配体。

在一些实施例中，所述经裂解后获得的线性多肽采用制备液相纯化后获得纯度大于95％的线性多肽纯品。

在一些实施例中，所述线性多肽与1,3,5-三丙烯酰基六-1,3,5-三嗪反应后，采用制备液相纯化并经冻干后获得所述靶向Nectin-4的双环肽核素配体。

本发明提供了靶向Nectin-4的双环肽核素探针，其包括放射性核素标记的所述的靶向Nectin-4的双环肽核素配体或所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素配体。

进一步地，所述放射性核素包括诊断用放射性核素或治疗用放射性核素，其中：

所述诊断用放射性核素包括⁶⁸Ga、⁶⁴Cu、¹⁸F、⁸⁶Y、⁹⁰Y、⁸⁹Zr、¹¹¹In、^99mTc、¹¹C、¹²³I、¹²⁵I和¹²⁴I中的至少一种；

所述治疗用放射性核素包括¹⁷⁷Lu、¹²⁵I、¹³¹I、²¹¹At、¹¹¹In、¹⁵³Sm、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、⁶⁷Cu、²¹²Pb、²²⁵Ac、²¹³Bi、²¹²Bi和²¹²Pb中的至少一种。

本发明提供了所述的靶向Nectin-4的双环肽核素探针的制备方法，包括：取所述放射性核素和所述的靶向Nectin-4的双环肽核素配体或所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素配体进行反应，获得所述靶向Nectin-4的双环肽核素探针。

本发明提供了如下Ⅰ～Ⅳ中的至少一项在制备肿瘤诊断试剂或治疗药物中的应用：

Ⅰ、所述的靶向Nectin-4的双环肽核素配体；

Ⅱ、所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素配体；

Ⅲ、所述的靶向Nectin-4的双环肽核素探针；

Ⅳ、所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素探针。

进一步地，所述肿瘤包括实体瘤和非实体瘤。

更进一步地，所述实体瘤包括Nectin-4高表达肿瘤。

在一些实施例中，所述Nectin-4高表达肿瘤包括尿路上皮癌、乳腺癌、肺癌、头颈癌、卵巢癌和胰腺癌中的任意一种或几种。

本发明提供了诊断试剂或治疗药物，包括如下①～④中的至少一项：

①、所述的靶向Nectin-4的双环肽核素配体；

②、所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素配体；

③、所述的靶向Nectin-4的双环肽核素探针；

④、所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素探针。

本发明提供了Nectin-4高表达肿瘤的检测方法，包括：采用本发明所述的诊断试剂对样本进行检测。

本发明提供了Nectin-4高表达肿瘤的治疗方法，包括：给予本发明所述的治疗药物。

本发明提供了靶向Nectin-4的双环肽核素配体及其制备方法、靶向Nectin-4的双环肽核素探针及其制备方法，本发明还提供了所述靶向Nectin-4的双环肽核素配体和探针在制备实体瘤诊断试剂或治疗药物中的应用。与现有提供的Nectin-4的双环肽核素配体或探针相比，本发明提供的Nectin-4的双环肽核素配体或探针具有良好的稳定性、药代动力学优良、与肿瘤Nectin-4结合特异性好，具有较高的肿瘤摄取以及较高的肿瘤与肌肉摄取比，良好的体内代谢性能，具有良好的临床应用前景。

附图说明

图1为DN68和DN96的质谱图，其中，图中A图为DN68质谱图，B图为DN96质谱图；

图2为通过SPR检测DN68与人Nectin4的结合亲和力图；

图3为肿瘤细胞MC38-Nectin4、MC38和MDA-MB-468的流式检测图；

图4为实施例5的Radio-iTLC检测结果图，其中，A图为⁶⁸Ga-DN68双环肽核素探针的标记率，B图为⁶⁸Ga-DN68双环肽核素探针纯化后的放化纯，C图为⁶⁸Ga-DN96双环肽核素探针纯化后的放化纯，D图为Al¹⁸F-DN96双环肽核素探针纯化后的放化纯；

图5为乳腺癌MDA-MB-468肿瘤模型Balb/c裸鼠分别注射200μCi的⁶⁸Ga-DN68(A)和⁶⁸Ga-DN68与阻断剂量的DN68(B)后分别于30min、1h、2h后全身Micro-PET/CT MIP显像图；

图6为MC38-Nectin4肿瘤模型Balb/c裸鼠注射200μCi的后分别于1h动态显像和2h静态扫描后全身Micro-PET/CT MIP显像图；

图7为乳腺癌MDA-MB-468肿瘤模型Balb/c裸鼠注射200μCi的⁶⁸Ga-DN96(A)和在MC38-Nectin4肿瘤模型Balb/c裸鼠注射200μCi的Al¹⁸F-DN96后于1h、2h后全身Micro-PET/CT MIP显像图。

具体实施方式

本发明提供了靶向Nectin-4的双环肽核素配体、探针及其制备方法和应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本发明。

实施例1

本实施例公开了靶向Nectin-4双环肽DN68的合成方法，具体为：

选择Fmoc-氨性树脂，按照Fmoc固相合成策略，依次偶联N-乙酰-S-三苯甲基-L-半胱氨酸，脯氨酸，1-萘基丙氨酸，D型-Fmoc-赖氨酸，S-三苯甲基-L-半胱氨酸，蛋氨酸，(2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基)-L-高精氨酸，组氨酸，色氨酸，丝氨酸，缩氨酸，脯氨酸，羟脯氨酸，色氨酸和S-三苯甲基-L-半胱氨酸，完成偶联之后，脱去D型-Fmoc-赖氨酸的Fmoc基团，在与PEG4和1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸三叔丁酯(DOTA)进行偶联。完成所有氨基酸和DOTA片段的偶联后，将多肽从树脂上切除下来，得到线性多肽粗品，采用制备液相纯化，得到线性多肽纯品(>95％)。将线性多肽纯品与TATA进行关环得到双环肽DN68的粗品，并通过制备液相进行纯化，冻干后得到目标配体DN68。配体结构经质谱鉴定，如图1所示。

本实施例还公开了靶向Nectin-4双环肽DN96的合成方法，具体为：

选择Fmoc-氨性树脂，按照Fmoc固相合成策略，依次偶联N-乙酰-S-三苯甲基-L-半胱氨酸，脯氨酸，1-萘基丙氨酸，D型-Fmoc-赖氨酸，S-三苯甲基-L-半胱氨酸，蛋氨酸，(2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基)-L-高精氨酸，组氨酸，色氨酸，丝氨酸，缩氨酸，脯氨酸，羟脯氨酸，色氨酸和S-三苯甲基-L-半胱氨酸，完成偶联之后，脱去D型-Fmoc-赖氨酸的Fmoc基团，在与4-氨甲基苯甲酸、4-氨甲基苯甲酸和2,2',2”-(1,4,7-三氮杂环壬烷-1,4,7-三基)三乙酸(NOTA)进行偶联。完成所有氨基酸和NOTA片段的偶联后，将多肽从树脂上切除下来，得到线性多肽粗品，采用制备液相纯化，得到线性多肽纯品(>95％)。将线性多肽纯品与TATA进行关环得到双环肽DN96的粗品，并通过制备液相进行纯化，冻干后得到目标配体DN96。配体结构经质谱鉴定，如图1所示。

实施例2

本实施例公开了DN68与人Nectin-4蛋白的结合亲和力，具体为：

在Biacore 8K上进行SPR实验以确定DN68与人Nectin-4蛋白的k_a(M^-1s^-1)、k_d(s^-1)和K_D(nM)值。首先由新鲜混合的50mmol/L N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和200mmol/L 1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)激活传感器芯片。随后将抗原用10mmol/L的NaAC稀释后固定在流通池2的芯片上，固定水平为1600RU。将稀释好的多肽(浓度分别为25、12.5、6.25、3.125和1.5625nM)在25℃下以30μL/min的流速注射到芯片上，结合时间为120秒，解离时间为360秒。每个循环后，采用再生步骤(15μL 10mM甘氨酸pH 2.0)。所有数据均使用Biacore 8K评估软件4.0版进行处理。每个循环中的流通池1和电泳缓冲液的空白进样用作共振单元减法的双重参考，结果如图2及表1所示。

表1.DN68与人Nectin4蛋白的结合亲和力

结果表明，DN68具有与人Nectin-4蛋白很高的结合亲和力，其KD值为0.64nM。

实施例3

本实施例公开了Nectin-4高表达的MC38肿瘤细胞的构建，具体为：

取对数增殖期MC38细胞，5x10⁵/3mL接种6孔板一个孔，感染Lenti-CMV-Nectin4-puro慢病毒。慢病毒感染48小时后，更换培养基，加浓度8μg/mL puromycin。同时，未转染病毒的MC38细胞加浓度8μg/mL puromycin。连续培养3天，未转染病毒的MC38(完全死亡)。细胞筛选成功后，进行扩增，取MC38-Nectin4-puro细胞，孵育抗体，进行流式检测。其Nectin-4阳性表达率如图3所示，其中Nectin4阳性表达率高达99％，与天然高表达的MDA-MB-468细胞的阳性表达率相当，说明我们成功构建了Nectin4阳性表达的MC38细胞株。

实施例4

本实施例公开了Nectin-4双环肽核素探针化合物的合成，具体为：

1.⁶⁸Ga标记Nectin-4双环肽核素探针的方法

配置Nectin-4双环肽前体DN68和DN96的DMSO溶液(浓度为10mg/ml)，取10μL的前体溶液放入反应瓶，向反应瓶中加入230μL 1M的醋酸钠及1mL新鲜淋洗的⁶⁸Ga淋洗液(⁶⁸Ga淋洗在0.1M的盐酸溶液中)，反应液pH值约为4.0，混匀后将DN68混合液置于100℃反应10min，将DN96混合液置于37℃反应15min，反应完成后使用C18柱进行纯化，经Radio-iTLC检测产物放射化学纯度大于98％。

2.¹⁸F标记Nectin-4双环肽核素探针的方法

取50μg DN96冻干粉溶于10μL去离子水中，加入约1.6μg AlCl3溶液(6μL,2mM)、10μL冰醋酸、30-50mCi ¹⁸F，以及上述溶液总体积4-5倍的无水乙腈，PH调节至约3左右。充分混匀，然后将混合物放置在100℃恒温金属加热器中孵育10分钟，反应完成后使用C18柱进行纯化，经Radio-iTLC检测产物放射化学纯度大于98％。

质控：

⁶⁸Ga及¹⁸F标记的配合物的放射化学纯度使用radio-TLC(放射性薄层色谱仪)测定。取反应液点至iTLC-SG层析版，展开剂为10mM的柠檬酸缓冲液，所有配合物的放射化学纯度均大于98％。

实施例5

本实施例公开了本发明的化合物⁶⁸Ga-DN68、⁶⁸Ga-DN96和Al¹⁸F-DN96的活体显像试验：

1.人乳腺癌MDA-MB-468模型裸鼠Micro-PET/CT显像

将MDA-MB-468异种移植瘤模型裸鼠在瘤组织至100-300mm³时分别给予尾静脉注射⁶⁸Ga-DN68和⁶⁸Ga-DN96(200μCi/只)，在注射后的不同时间点(30、60和120min)进行10min的静态扫描，肿瘤显影清晰。扫描结束后，迭代重建(OSEM 3D)扫描数据，利用ASIProVM软件勾画两处肿瘤及其他组织为感兴趣区域(ROI)计算各ROI放射性摄取％ID/g。

2.MC38-Nectin-4和MC38模型裸鼠Micro-PET/CT的动态扫描

在Balb/c裸鼠左侧和右侧腋下分别植入5×10⁶个MC38和MC38-Nectin-4肿瘤细胞。在瘤组织长至100-300mm³时分别给予尾静脉注射⁶⁸Ga-DN68(200μCi/只)，在注射后进行60min动态扫描，并在120min的时间点进行10min的静态扫描，肿瘤显影清晰。扫描结束后，迭代重建(OSEM 3D)一小时的动态图像，并将其从0分钟到60分钟分割为12帧，每帧跨越5分钟的长度。利用ASIProVM软件勾画两处肿瘤及其他组织为感兴趣区域(ROI)计算各ROI放射性摄取％ID/g。

3.MC38-Nectin-4和MC38模型裸鼠Micro-PET/CT显像

在MC38-Nectin-4和MC38模型裸鼠的瘤组织长至100-300mm³时分别给予尾静脉注射Al¹⁸F-DN96(200μCi/只)，在注射后的不同时间点(30、60和120min)进行10min的静态扫描，肿瘤显影清晰。扫描结束后，迭代重建(OSEM 3D)扫描数据，利用ASIProVM软件勾画两处肿瘤及其他组织为感兴趣区域(ROI)计算各ROI放射性摄取％ID/g。

其中，上述实验中Radio-iTLC检测结果如图4所示，乳腺癌MDA-MB-468肿瘤模型Balb/c裸鼠分别注射200μCi的⁶⁸Ga-DN68(A)和⁶⁸Ga-DN68与阻断剂量的DN68(B)后分别于30min、1h、2h后全身Micro-PET/CT MIP显像结果如图5，MC38-Nectin4肿瘤模型Balb/c裸鼠注射200μCi的后分别于1h动态显像和2h静态扫描后全身Micro-PET/CT MIP显像结果如图6所示，乳腺癌MDA-MB-468肿瘤模型Balb/c裸鼠注射200μCi的⁶⁸Ga-DN96(A)和在MC38-Nectin4肿瘤模型Balb/c裸鼠注射200μCi的Al¹⁸F-DN96后于1h、2h后全身Micro-PET/CT MIP显像结果如图7所示。

如图4～7所示，⁶⁸Ga-DN68、⁶⁸Ga-DN96和Al¹⁸F-DN96均能在肿瘤区域明显浓集，而阴性肿瘤部位几乎无摄取。其中⁶⁸Ga-DN68具有最高的摄取值，并且动态研究表明，⁶⁸Ga-DN68在30-40min之间摄取值最高。此外，阻断研究表明⁶⁸Ga-DN68能够被冷的DN68特异性阻断，证明了该探针的靶向性和特异性。上述分子探针主要经肾脏排泄出体外，非靶器官清除迅速。随时间延长，探针在肿瘤与肌肉的摄取比值增加。相较于DN96，DN68采用亲水性的PEG链作为Linker，其肝摄取要低很多。上述研究表明，⁶⁸Ga-DN68具有更好的临床研究前景。

实施例6

1.人乳腺癌MDA-MB-468模型裸鼠体内组织分布

将MDA-MB-468异种移植瘤模型裸鼠在瘤组织至100-300mm³时分别给予尾静脉注射⁶⁸Ga-DN68和⁶⁸Ga-DN96(50μCi/只)，在注射后30、60、120min解剖取血。每组小鼠都取出瘤组织以及心、肝、脾、肺、胃、胰、肠、肾、肌肉、骨等组织器官，称重并测定其放射性(CPM)，结果换算为ID％/g，计算肿瘤(T)与其他组织(NT)的放射性比值(T/NT)。

2.MC38-Nectin-4和MC38模型裸鼠体内组织分布

将MDA-MB-468异种移植瘤模型裸鼠在瘤组织至100-300mm³时分别给予尾静脉注射⁶⁸Ga-DN68和Al¹⁸F-DN96(50μCi/只)，在注射后30、60、120min解剖取血。每组小鼠都取出瘤组织以及心、肝、脾、肺、胃、胰、肠、肾、肌肉、骨等组织器官，称重并测定其放射性(CPM)，结果换算为ID％/g，计算肿瘤(T)与其他组织(NT)的放射性比值(T/NT)。

以上结果如表2及表3所示。

表2.⁶⁸Ga-DN68和⁶⁸Ga-DN96在MDA-MB-468模型中组织分布数据

表3.⁶⁸Ga-DN68和Al¹⁸F-DN96在MDA-MB-468模型中组织分布数据

组织分布研究结果表明，与PET显像数据一致，⁶⁸Ga-DN68、⁶⁸Ga-DN96和Al¹⁸F-DN96在肿瘤组织中均有较高的摄取，并且⁶⁸Ga-DN68具有最高的肿瘤摄取。⁶⁸Ga-DN68、⁶⁸Ga-DN96和Al¹⁸F-DN96主要通过肾脏代谢，在非靶器官摄取较少，上述分子探针均具有较高的肿瘤与肌肉的靶本比。此外，⁶⁸Ga-DN68的肝脏摄取均小于⁶⁸Ga-DN96和Al¹⁸F-DN96，这表明⁶⁸Ga-DN68具有更好的临床应用前景。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.靶向Nectin-4的双环肽核素配体，其特征在于，其具有如通式(1)的结构：

其中，X为如下式(2)～式(7)所示基团中的至少一种：

R为如下式(8)～式(10)所示基团中的至少一种：

其中，a为1～12的整数，b为1～4的整数，c为1～12的整数。

2.根据权利要求1所述的双环肽核素配体，其特征在于，a为3～8的整数，b为1～3的整数，c为4～12的整数。

3.根据权利要求1或2所述的双环肽核素配体，其特征在于，

所述X为如式(2)或式(5)所示基团；

所述R为如式(8)或式(9)所示基团，其中所述a为4，所述b为2。

4.根据权利要求1～3任一项所述的双环肽核素配体，其特征在于，其具有如式(11)或式(12)所示的结构：

5.权利要求1～4任一项所述靶向Nectin-4的双环肽核素配体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1、以Fmoc-氨性树脂为载体，依次偶联N-乙酰-S-三苯甲基-L-半胱氨酸，脯氨酸，1-萘基丙氨酸，D型-Fmoc-赖氨酸，S-三苯甲基-L-半胱氨酸，蛋氨酸，(2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基)-L-高精氨酸，组氨酸，色氨酸，丝氨酸，缩氨酸，脯氨酸，羟脯氨酸，色氨酸和S-三苯甲基-L-半胱氨酸；

步骤2、所述偶联的反应后，脱去D型-Fmoc-赖氨酸的Fmoc基团，与所述X基团和所述R基团进行偶联，获得肽树脂；

步骤3、所述肽树脂经裂解后获得线性多肽，所述线性多肽与1,3,5-三丙烯酰基六-1,3,5-三嗪反应后获得所述靶向Nectin-4的双环肽核素配体。

6.靶向Nectin-4的双环肽核素探针，其特征在于，其包括放射性核素标记的权利要求1～4任一项所述的靶向Nectin-4的双环肽核素配体或权利要求5所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素配体。

7.根据权利要求6所述的靶向Nectin-4的双环肽核素探针，其特征在于，所述放射性核素包括诊断用放射性核素或治疗用放射性核素，其中：

所述诊断用放射性核素包括⁶⁸Ga、⁶⁴Cu、¹⁸F、⁸⁶Y、⁹⁰Y、⁸⁹Zr、¹¹¹In、^99mTc、¹¹C、¹²³I、¹²⁵I和¹²⁴I中的至少一种；

所述治疗用放射性核素包括¹⁷⁷Lu、¹²⁵I、¹³¹I、²¹¹At、¹¹¹In、¹⁵³Sm、¹⁸⁶Re、¹⁸⁸Re、⁶⁷Cu、²¹²Pb、²²⁵Ac、²¹³Bi、²¹²Bi和²¹²Pb中的至少一种。

8.权利要求6或7所述的靶向Nectin-4的双环肽核素探针的制备方法，其特征在于，包括：取所述放射性核素和权利要求1～4任一项所述的靶向Nectin-4的双环肽核素配体或权利要求5所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素配体进行反应，获得所述靶向Nectin-4的双环肽核素探针。

9.如下Ⅰ～Ⅳ中的至少一项在制备肿瘤诊断试剂或治疗药物中的应用：

Ⅰ、权利要求1～4任一项所述的靶向Nectin-4的双环肽核素配体；

Ⅱ、权利要求5所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素配体；

Ⅲ、权利要求6或7所述的靶向Nectin-4的双环肽核素探针；

Ⅳ、权利要求8所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素探针。

10.诊断试剂或治疗药物，其特征在于，包括如下①～④中的至少一项：

①、权利要求1～4任一项所述的靶向Nectin-4的双环肽核素配体；

②、权利要求5所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素配体；

③、权利要求6或7所述的靶向Nectin-4的双环肽核素探针；

④、权利要求8所述制备方法制得的靶向Nectin-4的双环肽核素探针。