CN117396497A

CN117396497A - 长效生长激素用于治疗炎症诱导的疾病的用途

Info

Publication number: CN117396497A
Application number: CN202280038557.7A
Authority: CN
Inventors: K·斯普罗格; M·J·凯尔加德-汉森; N·E·佐伊斯; T·图克森波尔森; Y·杨-马尔腾
Original assignee: Ascendis Pharma AS
Current assignee: Ascendis Pharma AS
Priority date: 2021-04-01
Filing date: 2022-03-31
Publication date: 2024-01-12
Also published as: AU2022246997A1; WO2022207798A1; CA3212417A1; BR112023018802A2; MX2023011059A; KR20230164709A; AU2022246997A9; JP2024514095A; IL307192A; EP4314035A1

Abstract

本发明涉及用于治疗炎症诱导的疾病的长效生长激素(GH)。

Description

长效生长激素用于治疗炎症诱导的疾病的用途

本发明涉及用于治疗炎症诱导的疾病的长效生长激素(GH)。

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种影响美国三分之一至五分之一的成年人和十分之一的儿童的疾病，其指饮少量酒或不饮酒的人的肝脏中积聚过多脂肪的病症。一些患有NAFLD的人可能出现更严重的称为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的病症：约2-5％的美国成年人和高达20％的肥胖者可能患有NASH。在NASH中，肝脏中的脂肪积聚与炎症和不同程度的疤痕/纤维化相关。NASH是一种潜在的严重疾病，具有进展为终末期肝病、肝硬化和肝细胞癌的巨大风险。一些发生肝硬化的患者有肝衰竭的风险，最终可能需要肝移植。

肝脏具有丰富的巨噬细胞，一旦激活，巨噬细胞就会通过广泛的炎症途径加速NASH的发展。肝组织中存在的大多数巨噬细胞是自我更新的驻留吞噬性库普弗(Kupffer)细胞，可分为M1(促炎)和M2(免疫调节)表型。在健康的肝脏中，M1和M2功能保持良好的平衡以控制炎症。在NASH中，朝向M1的失衡已经牵涉在引起过度炎症中。

历史上，在NAFLD/NASH中曾尝试过多种药理学干预，但总体益处有限。抗氧化剂可以阻止脂质过氧化，细胞保护剂可以稳定磷脂膜，但迄今为止尝试过的药物，包括熊去氧胆酸、维生素E(α-生育酚)和维生素C以及己酮可可碱，都没有显示出益处或仅有有限的益处。在NAFLD/NASH中的体重减轻研究大多数是持续时间短且成功率有限的试点研究，没有报道坏死性炎症或纤维化的改善或仅有有限的改善。一项针对吡格列酮(一种噻唑烷二酮过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ激动剂和胰岛素增敏剂)的单独的体重减轻的随机、双盲、安慰剂对照6个月试验未能证明单独的体重减轻有任何改善，但是用吡格列酮治疗改善了NASH和葡萄糖耐量受损或2型糖尿病患者的血糖控制、胰岛素敏感性、全身炎症指标(包括高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α和转化生长因子-β)以及肝脏组织学。不幸的是，吡格列酮在女性和男性中还伴有体重增加、水肿、充血性心力衰竭和骨质疏松性骨折的显著增加的风险。在撰写本文时，正在进行甲状腺激素受体-β(THR-β)激动剂瑞司美替罗(resmetirom)、C-C趋化因子受体2/5型(CCR2/CCR5)抑制剂cenicriviroc、硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD1)调节剂aramchol、半乳糖凝集素3抑制剂belapectin和选择性钠葡萄糖协同转运蛋白-2(SGLT-2)抑制剂达格列净(dapagliflozin)的III期NASH试验。法尼醇X受体(FXR)激动剂奥贝胆酸(obeticholic acid)完成了III期NASH试验，达到了FDA建议的两个主要终点之一：“使用NASH临床研究网络(CRN)纤维化评分，肝纤维化改善≥1个阶段，且无NASH恶化”或“使用NASH CRN纤维化评分的NASH消退且无肝纤维化恶化”。然而，该结果不足以获得监管部门的批准，表明对于治疗由于NASH具有肝纤维化的患者而言，基于替代组织病理学终点的预测益处仍然不确定，并且不足以超过潜在风险。已经有三项III期试验未能实现NASH的两个必要主要终点之一。在STELLAR3和STELLAR4试验中，细胞凋亡信号调节激酶1ASK1抑制剂Selonsertib未能达到纤维化改善≥1个阶段且无NASH恶化的主要终点。PPARα/δ激动剂Elafibranor也未能达到NASH消退且无纤维化恶化的主要终点。

目前还有其它药物处于早期临床开发阶段，显示出治疗NAFLD/NASH的潜力。其中包括成纤维细胞生长因子(FGF)-21激动剂Efruxifermin和Pegbelfermin、FGF-19激动剂Aldafermin、成纤维细胞生长因子受体1-βKlotho(FGFR1-KLB)抗体BFKB8488A和NGM313、胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂索马鲁肽(Semaglutide)、具有GLP-1和胰高血糖素活性的双受体激动剂Cotadutide和Efinopegdutide、抑胃多肽(GIP)和GLP-1双受体激动剂Tirzepatide以及激动剂Lanifibranor。

总之，需要更有效的对炎症诱导的疾病、特别是NAFLD/NASH的治疗。本发明的目标是至少部分地克服现有治疗选项的限制。

在第一方面，本发明涉及用于治疗炎症诱导的疾病的长效生长激素(GH)。在一些实施方案中，炎症诱导的疾病是炎症诱导的肝脏疾病。在一些实施方案中，炎症诱导的疾病是NAFLD。在一些实施方案中，炎症诱导的疾病是NASH。

出人意料地发现，稳定水平的生长激素，例如通过给患者施用长效生长激素获得的稳定水平的生长激素，触发了M1和M2之间的巨噬细胞表型再平衡。在一些实施方案中，这种巨噬细胞表型再平衡通过M1减少而获得。在一些实施方案中，这种巨噬细胞表型再平衡通过M2诱导而获得。

长效生长激素的使用减少了施用频率，这增加了患者依从性和因此可以改善治疗结果。

在本发明中，使用具有如下含义的术语。

如本文所用的术语“生长激素”或“GH”指所有的生长激素蛋白质序列，优选来自哺乳动物种属，更优选来自人和哺乳动物种属，更优选来自人和鼠科种属，并且在一些实施方案中还包括它们的变体、类似物、直向同源物、同源物及其衍生物和片段。生长激素的特征是在生长阶段促进生长和维持正常身体组成、合成代谢和脂质代谢。在一些实施方案中，术语“人生长激素”或“hGH”指SEQ ID NO:1的hGH多肽，包括其呈现出基本相同的生物学活性(即，在生长阶段促进生长，维持正常身体组成、合成代谢和脂质代谢)的变体、同源物和衍生物。在一些实施方案中，术语“hGH”指SEQ ID NO:1的序列。

SEQ ID NO:1具有如下序列:

如本文所用的术语“GH变体”指与参比GH蛋白质、例如SEQ ID NO:1的hGH不同的来自相同种属的GH蛋白质。在一些实施方案中，这类GH变体与参比GH、例如SEQ ID NO:1的hGH具有至少70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性。具有与所考察氨基酸序列至少例如95％“同一性”的氨基酸序列的蛋白质意欲表示，所述蛋白质的氨基酸序列与所考察序列相同，除了所述蛋白质序列相对于所考察氨基酸序列的每100个氨基酸可包括至多5个氨基酸改变。参比序列的这些改变可以发生在参比氨基酸序列的氨基(N-末端)或羧基末端(C-末端)位置，或者这些末端位置之间的任意位置，或其任意组合。参比序列的这些改变可以散布在参比序列的残基中，或者可以是参比序列内的一个或多个连续基团。这类GH变体可以是天然存在的变体，例如由占据染色体或生物体上给定基因座的GH的几种替代形式之一编码的天然存在的等位基因变体，或者由源自单个初级转录物的天然发生的剪接变体编码的同种型。或者，GH变体可以是尚未知晓天然存在的变体和可通过本领域已知的诱变技术获得的变体。

如本文所用的术语“GH类似物”指不同和不相关的生物体的GH，它们在每种生物体中执行相同的功能，但是并非源自生物体祖先共同的祖先结构。相反，类似的GHs是单独出现的，后来演变成执行相同或相似的功能。换言之，类似的GH蛋白质是具有非常不同的氨基酸序列、但执行相同生物活性(即，在生长阶段促进生长，维持正常身体组成、合成代谢和脂质代谢)的蛋白质。

如本文所用的术语“GH直向同源物”指两个不同物种内的GH，其序列通过祖先物种中共同的同源GH相互关联，但是已经进化为彼此不同。

如本文所用的术语“GH同源物”指不同生物体的GH，其在每个生物体中执行相同的功能，并且其来源于生物体祖先共同的祖先结构。换言之，同源GH蛋白质是具有非常相似的氨基酸序列的蛋白质，其执行相同的生物活性，即在生长期促进生长和维持正常的身体组成、合成代谢和脂质代谢。在一些实施方案中，这类GH同源物可以定义为呈现出与参比GH序列、例如SEQ ID NO:1的hGH至少40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的蛋白质。

因此，本发明的GH可以例如是这样的GH：(i)其中至少一个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基取代、在一些实施方案中被保守氨基酸残基取代，该被取代的氨基酸残基可以是或者可以不是遗传密码编码的；和/或(ii)其中至少一个氨基酸残基包括取代基基团；和/或(iii)其中GH与其它化合物融合，例如与增加多肽半衰期的化合物(例如聚乙二醇)融合；和/或(iv)其中另外的氨基酸融合到hGH多肽、例如IgG Fc融合区肽或前导或分泌序列或用于纯化上述形式的蛋白质或前蛋白质序列的序列。

GH蛋白质可以是单体或多聚体。多聚体可以是二聚体、三聚体、四聚体或包含至少五个单体多肽单元的多聚体。多聚体也可以是同源二聚体或异二聚体。本发明的多聚体可以是疏水性、亲水性、离子性和/或共价缔合的结果，和/或可以通过例如脂质体形成而间接连接。在一些实施方案中，GH是单体，特别是hGH单体，例如SEQ ID NO:1的hGH单体。

如本文所用的术语“GH片段”指包含GH蛋白质的氨基酸序列的一部分的连续一小段的任意肽或蛋白质，例如SEQ ID NO:1的hGH。更具体地，GH片段包含GH、例如SEQ ID NO:1的hGH的至少6个、优选至少8或10个、更优选至少12、15、20、25、30、35、40、50、60、75、100、125、150、175、191个连续氨基酸。

如本文所用的术语“长效生长激素”指这样的化合物：其包含结晶形式的GH，或其中GH被包埋、融合或共价偶联于至少一种其它化学化合物或部分，例如聚合物、脂肪酸或脂肪酸变体部分，并且与未修饰的GH相比在患者体内具有增加的清除半衰期，例如清除半衰期高于相应的未修饰GH的清除半衰期至少10倍、至少20倍、至少30倍、至少50倍、至少100倍或至少200倍。在一些实施方案中，GH是hGH，例如SEQ ID NO:1的hGH。如本文所用的术语“清除半衰期”指直至施用于患者的所有分子的一半从体内清除的时间。

如本文所用的有关第一部分与第二部分连接的术语“可逆”、“可逆地”、“可降解”或“可降解地”意指连接所述第一部分和第二部分的链接在生理条件(在pH7.4、37℃的水性缓冲液)下是可裂解的，半衰期为1小时至3个月，例如12小时至2个月、1天至1个月。裂解可以是酶促的或非酶促的，在一些实施方案中是非酶促的。因此，有关第一部分与第二部分连接的术语“稳定”或“永久”意指连接所述第一部分和第二部分的链接是在生理条件下以三个月以上的半衰期可裂解。

如本文所用的术语“试剂”表示包含至少一个官能团用于与其它化学化合物或药物的官能团反应的化学化合物。可以理解，包含官能团(例如伯胺或仲胺或羟基官能团)的药物也是试剂。

如本文所用的术语“部分”指分子的一部分，其与相应的试剂相比缺少一个或多个原子。例如，如果式“H-X-H”的试剂与另一种试剂反应并成为反应产物的一部分，则反应产物的相应部分具有结构“H-X-”或“-X-”，其中“-”各自表示与另一个部分连接。因此，药物部分作为药物从可逆的链接释放。

可以理解，如果提供了原子团的序列或化学结构，其中原子团与两个部分连接或插入部分中，则所述序列或化学结构可以以任意方向连接至两个部分，另有明确说明除外。例如，部分“-C(O)N(R¹)-”可以作为“-C(O)N(R¹)-”或作为“-N(R¹)C(O)-”连接至两个部分或插入部分中。类似地，部分可以作为/>或作为/>连接至两个部分或插入部分中。

如本文所用的术语“取代”表示分子或部分的一个或多个-H原子被不同的原子或原子基团替换，后者称为“取代基”。

如本文所用的术语“取代基”在一些实施方案中指选自如下的部分：卤素、-CN、-COOR^x1、-OR^x1、-C(O)R^x1、-C(O)N(R^x1R^x1a)、-S(O)₂N(R^x1R^x1a)、-S(O)N(R^x1R^x1a)、-S(O)₂R^x1、-S(O)R^x1、-N(R^x1)S(O)₂N(R^x1aR^x1b)、-SR^x1、-N(R^x1R^x1a)、-NO₂、-OC(O)R^x1、-N(R^x1)C(O)R^x1a、-N(R^x1)S(O)₂R^x1a、-N(R^x1)S(O)R^x1a、-N(R^x1)C(O)OR^x1a、-N(R^x1)C(O)N(R^x1aR^x1b)、-OC(O)N(R^x1R^x1a)、-T⁰、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基；其中-T⁰、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-R^x2取代和其中C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选插入有一个或多个选自-T⁰-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^x3)-、-S(O)₂N(R^x3)-、-S(O)N(R^x3)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-、-S-、-N(R^x3)-、-OC(OR^x3)(R^x3a)-、-N(R^x3)C(O)N(R^x3a)-和-OC(O)N(R^x3)-的基团；

-R^x1、-R^x1a、-R^x1b各自独立地选自-H、-T⁰、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基；其中-T⁰、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-R^x2取代和其中C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选插入有一个或多个选自如下的基团：-T⁰-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^x3)-、-S(O)₂N(R^x3)-、-S(O)N(R^x3)-；-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^x3)S(O)₂N(R^x3a)-、-S-、-N(R^x3)-、-OC(OR^x3)(R^x3a)-、-N(R^x3)C(O)N(R^x3a)-和-OC(O)N(R^x3)-；

每个T⁰独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C_3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T⁰独立地任选被一个或多个相同或不同的-R^x2取代；

每个-R^x2独立地选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-COOR^x4、-OR^x4、-C(O)R^x4、-C(O)N(R^x4R^x4a)、-S(O)₂N(R^x4R^x4a)、-S(O)N(R^x4R^x4a)、-S(O)₂R^x4、-S(O)R^x4、-N(R^x4)S(O)₂N(R^x4aR^x4b)、-SR^x4、-N(R^x4R^x4a)、-NO₂、-OC(O)R^x4、-N(R^x4)C(O)R^x4a、-N(R^x4)S(O)₂R^x4a、-N(R^x4)S(O)R^x4a、-N(R^x4)C(O)OR^x4a、-N(R^x4)C(O)N(R^x4aR^x4b)、-OC(O)N(R^x4R^x4a)和C_1-6烷基；其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；

每个-R^x3、-R^x3a、-R^x4、-R^x4a、-R^x4b独立地选自-H和C_1-6烷基；其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。

在一些实施方案中，任选被取代的分子的最多6个-H原子独立地被取代基取代，例如5个–H原子独立地被取代基取代，4个-H原子独立地被取代基取代，3个-H原子独立地被取代基取代，2个-H原子独立地被取代基取代，或1个-H原子被取代基取代。

如本文所用的术语“脂肪酸”指具有脂肪族尾的饱和或不饱和单元羧酸，其可以包括4至28个碳原子。脂肪酸可以是饱和或不饱和的、直链或支链的。术语“脂肪酸变体”指被修饰的脂肪酸，其中一些碳原子可以被其它原子或原子团替代，并且其可以是被取代的。

如本文所用的术语“肽”指至少2个和至多50个且包括50个通过肽(酰胺)键连接的氨基酸单体部分的链。术语“肽”还包括模拟肽、例如D-肽、类肽或β-肽，包括至多且包括50个单体部分的模拟肽链。还包括环肽、例如套索肽(lasso peptide)。

如本文所用的术语“蛋白质”指多于50个通过肽键连接的氨基酸单体部分(其还可以称为“氨基酸残基”)的链，在一些实施方案中，不多于12000个氨基酸单体、例如不多于10000个氨基酸单体部分、不多于8000个氨基酸单体部分、不多于5000个氨基酸单体部分或不多于2000个氨基酸单体部分通过肽键连接。

如本文所用的与数值组合的术语“约”用于指该数值加上和减去不多于所述数值的25％、在一些实施方案中加上和减去不多于所述数值的20％、在一些实施方案中加上和减去不多于所述数值的10％的范围，包括端值。例如，短语“约200”用于指包括端值的200+/-25％的范围，即包括端值的150至250的范围；在一些实施方案中，指包括端值的200+/-20％的范围，即包括端值的160至240的范围；在一些实施方案中，指包括端值的200+/-10％的范围，即包括端值的180至220的范围。可以理解，作为“约50％”给出的百分比不是指“50％+/-25％”、即包括端值的25至75％的范围，而是“约50％”指包括端值的37.5％至62.5％的范围，即加上和减去数值50的25％。

如本文所用的术语“聚合物”指包含通过化学键以线性、环状、分支、交联或树枝状方式或其组合连接的重复结构单元、即单体的分子，其可以是合成的或生物来源或两者的组合。可以理解，聚合物还可以包含一个或多个其它化学基团和/或部分，例如一个或多个官能团。同样，可以理解，肽或蛋白质是聚合物，虽然个体氨基酸残基的侧链可能是不同的。在一些实施方案中，可溶性聚合物具有至少0.5kDa的分子量，例如至少1kDa的分子量、至少2kDa的分子量、至少3kDa的分子量或至少5kDa的分子量。如果聚合物是可溶性的，其在一些实施方案中具有至多1000kDa的分子量，例如至多750kDa，例如至多500kDa，例如至多300kDa，例如至多200kDa，例如至多100kDa。可以理解，对于不溶性聚合物，例如水凝胶，不能提供有意义的分子量范围。

如本文所用的术语“聚合(的)”表示包含一种或多种聚合物或聚合物部分的试剂或部分。聚合试剂或部分可以任选地还包含一种或多种其它部分，其在一些实施方案中选自：

·C_1-50烷基、C_2-50烯基、C_2-50炔基、C_3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、苯基、萘基、茚基、茚满基和四氢萘基；和

·选自如下的链接：

其中

虚线指与部分或试剂的剩余部分连接；和

-R和-R^a相互独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基。

本领域技术人员理解，由聚合反应得到的聚合产物并非都具有相同的分子量，而是呈现出分子量分布。因此，如本文所用的分子量范围、分子量、聚合物中的单体数量范围和聚合物中的单体数量指数均分子量和数均单体，即聚合物或聚合部分的分子量的算术平均值和聚合物或聚合部分的单体数量的算术平均值。

因此，在包含“x”个单体单元的聚合部分中，对“x”给出的任意整数因此对应于单体数量的算术平均值。对“x”给出的任意整数范围提供了单体数量的算术平均值所处的整数范围。对“x”以“约x”给出的整数指单体数量的算术平均值处于x+/-25％、优选x+/-20％、更优选x+/-10％的整数范围内。

如本文所用的术语“数均分子量”指个体聚合物的分子量的普通算术平均值。

如本文所用的关于部分或试剂的术语“基于PEG”指所述部分或试剂包含PEG。在一些实施方案中，基于PEG的部分或试剂包含至少10％(w/w)PEG，例如至少20％(w/w)PEG，例如至少30％(w/w)PEG，例如至少40％(w/w)PEG，例如至少50％(w/w)，例如至少60％(w/w)PEG，例如至少70％(w/w)PEG，例如至少80％(w/w)PEG，例如至少90％(w/w)PEG，例如至少95％(w/w)PEG。基于PEG的部分或试剂的剩余重量百分比可以是其它部分，所述其它部分在一些实施方案中选自如下的部分和链接：

·选自如下的链接：

其中

虚线指与部分或试剂的剩余部分连接；和

术语“基于透明质酸”被相应地使用。

如本文所用的关于部分或试剂的术语“包含至少X％PEG的基于PEG的”指所述部分或试剂包含至少X％(w/w)乙二醇单元(-CH₂CH₂O-)，其中乙二醇单元在部分或试剂内可以以一个一个嵌段排列、交替排列或可以随机分布，在一些实施方案中，所述部分或试剂的所有乙二醇单元存在于一个嵌段中；基于PEG的部分或试剂的剩余重量百分比是其它部分，所述部分在一些实施方案中选自如下的部分和链接：

·选自如下的链接

其中

虚线指与部分或试剂的剩余部分连接，和

术语“包含至少X％透明质酸的基于透明质酸的”被相应地使用。

如本文所用的术语“水凝胶”指由均聚物或共聚物组成的亲水或两亲聚合物网络，其由于存在疏水相互作用、氢键、离子相互作用、共价化学交联或其任意组合而是不溶性的。在一些实施方案中，水凝胶由于存在共价化学交联而是不溶性的。通常，交联提供了网络结构和物理完整性。

术语“插入”表示部分插入在两个碳原子之间或–如果插入是在部分的末端之一时–插入在碳或杂原子和氢原子之间。

如本文所用的单独或组合的术语“C_1-4烷基”指具有1至4个碳原子的直链或分支烷基部分。如果存在于分子末端，直链或支链C_1-4烷基的实例有甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。当分子的两个部分通过C_1-4烷基连接，则这类C_1-4烷基基团的实例有-CH₂-、-CH₂-CH₂-、-CH(CH₃)-、-CH₂-CH₂-CH₂-、-CH(C₂H₅)-、-C(CH₃)₂-。C_1-4烷基碳的每个氢可以任选被如上文定义的取代基替换。任选地，C_1-4烷基可以插入有一个或多个如下文定义的部分。

如本文所用的单独或组合的术语“C_1-6烷基”指具有1至6个碳原子的直链或分支烷基部分。如果存在于分子末端，直链和支链C_1-6烷基基团的实例有甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基。当分子的两个部分通过C_1-6烷基基团连接时，则这类C_1-6烷基基团的实例有-CH₂-、-CH₂-CH₂-、-CH(CH₃)-、-CH₂-CH₂-CH₂-、-CH(C₂H₅)-和-C(CH₃)₂-。C_1-6碳的每个氢原子可以任选被如上文定义的取代基替换。任选地，C_1-6烷基可以插入有一个或多个如下文定义的部分。

因此，“C_1-10烷基”、“C_1-20烷基”或“C_1-50烷基”分别指具有1至10个、1至20个、或1至50个碳原子的烷基链，其中C_1-10、C_1-20或C_1-50碳的每个氢原子可以任选被如上文定义的取代基替换。任选地，C_1-10烷基或C_1-50烷基可以插入有一个或多个如下文定义的部分。

如本文所用的单独或组合的术语“C_2-6烯基”指具有2至6个碳原子的包含至少一条碳-碳双键的直链或支链烃部分。如果存在于分子末端，实例有-CH＝CH₂、-CH＝CH-CH₃、-CH₂-CH＝CH₂、-CH＝CHCH₂-CH₃和-CH＝CH-CH＝CH₂。当分子的两个部分通过C_2-6烯基基团连接时，则这类C_2-6烯基的实例有-CH＝CH-。C_2-6烯基部分的每个氢原子可以任选被如上文定义的取代基替换。任选地，C_2-6烯基可以插入有一个或多个如下文定义的部分。

因此，单独或组合的术语“C_2-10烯基”、“C_2-20烯基”或“C_2-50烯基”指具有2至10个、2至20个或2至50个碳原子的包含至少一条碳-碳双键的直链或支链烃部分。C_2-10烯基、C_2-20烯基或C_2-50烯基基团的每个氢原子可以任选被如上文定义的取代基替换。任选地，C_2-10烯基、C_2-20烯基或C_2-50烯基可以插入有一个或多个如下文定义的部分。

如本文所用的单独或组合的术语“C_2-6炔基”指具有2至6个碳原子的包含至少一条碳-碳三键的直链或支链烃部分。如果存在于分子末端，实例有-C≡CH、-CH₂-C≡CH、CH₂-CH₂-C≡CH和CH₂-C≡C-CH₃。当分子的两个部分通过炔基基团连接时，则实例有-C≡C-。C_2-6炔基基团的每个氢原子可以任选被如上文定义的取代基替换。任选地，可以存在一条或多条双键。任选地，C_2-6炔基可以插入有一个或多个如下文定义的部分。

因此，如本文所用的单独或组合的术语“C_2-10炔基”、“C_2-20炔基”和“C_2-50炔基”分别指具有2至10个、2至20个或2至50个碳原子的包含至少一条碳-碳三键的直链或支链烃部分。C_2-10炔基、C_2-20炔基或C_2-50炔基基团的每个氢原子可以任选被如上文定义的取代基替换。任选地，可以存在一条或多条双键。任选地，C_2-10炔基、C_2-20炔基或C_2-50炔基可以插入有一个或多个如下文定义的部分。

如上所述，C_1-4烷基、C_1-6烷基、C_1-10烷基、C_1-20烷基、C_1-50烷基、C_2-6烯基、C_2-10烯基、C_2-20烯基、C_2-50烯基、C_2-6炔基、C_2-10炔基、C_2-20烯基或C_2-50炔基可以任选插入有一个或多个部分，所述部分优选选自

其中

虚线指与部分或试剂的剩余部分连接；和

-R和-R^a相互独立地选自-H和甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基。

如本文所用的术语“C_3-10环烷基”指具有3至10个碳原子的环状烷基链，其可以是饱和或不饱和，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环己烯基、环庚基、环辛基,环壬基或环癸基。C_3-10环烷基碳的每个氢原子可以被如上文所定义的取代基替换。术语“C_3-10环烷基”还包括桥连双环，如降冰片烷或降冰片烯。

如本文所用的术语“8-至30-元碳多环基”或“8-至30-元碳多环”指具有8至30个环原子的两个或更多个环的环状部分，其中两个相邻环共享至少一个环原子，可以含有一直到最大数量的双键(芳族或非芳族环，其是完全饱和的、部分饱和的或不饱和的)。在一些实施方案中，8-至30-元碳多环基指两个、三个、四个或五个环的环状部分，更优选两个、三个或四个环的环状部分。

如本文所用的术语“3-至10-元杂环基”或“3-至10-元杂环”指具有3、4、5、6、7、8、9或10个环原子的环，其可以含有一直到最大数量的双键(芳族或非芳族环，其是完全饱和的、部分饱和的或不饱和的)，其中至少一个环原子直至4个环原子被选自硫(包括-S(O)-、-S(O)₂-)、氧和氮(包括＝N(O)-)的杂原子替换，和其中所述环经由碳或氮原子与分子的剩余部分连接。3-至10-元杂环的实例包括但不限于氮丙啶、环氧乙烷、硫杂环丙烷、氮杂环丙烯、环氧乙烯、硫杂丙烯环、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、呋喃、噻吩、吡咯、吡咯啉、咪唑、咪唑啉、吡唑、吡唑啉、噁唑、噁唑啉、异噁唑、异噁唑啉、噻唑、噻唑啉、异噻唑、异噻唑啉、噻二唑、噻二唑啉、四氢呋喃、四氢噻吩、吡咯烷、咪唑烷、吡唑烷、噁唑烷、异噁唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、噻二唑烷、环丁砜、吡喃、二氢吡喃、四氢吡喃、咪唑烷、吡啶、哒嗪、吡嗪、嘧啶、哌嗪、哌啶、吗啉、四唑、三唑、三唑烷、四唑烷、二氮杂环庚烷、氮杂和高哌嗪。3-至10-元杂环基或3-至10-元杂环状基团的每个氢原子可以被如下文所定义的取代基替换。

如本文所用的术语“8-至11-元杂双环基”或“8-至11-元杂双环”指具有8至11个环原子的两个环的杂环状部分，其中至少一个环原子被两个环共享，和其可以含有一直到最大数量的双键(芳族或非芳族环，其是完全饱和的、部分饱和的或不饱和的)，其中至少一个环原子直至6个环原子被选自硫(包括-S(O)-、-S(O)₂-)、氧和氮(包括＝N(O)-)的杂原子替换，和其中所述环经由碳或氮原子与分子的剩余部分连接。8-至11-元杂双环的实例有吲哚、吲哚啉、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并异噁唑、苯并噻唑、苯并异噻唑、苯并咪唑、苯并咪唑啉、喹啉、喹唑啉、二氢喹唑啉、喹啉、二氢喹啉、四氢喹啉、十氢喹啉、异喹啉、十氢异喹啉、四氢异喹啉、二氢异喹啉、苯并氮杂嘌呤和蝶啶。术语8-至11-元杂双环还包括两个环的螺环结构如1,4-二氧杂-8-氮杂螺环[4.5]癸烷或桥连杂环如8-氮杂-双环[3.2.1]辛烷。8-至11-元杂双环基或8-至11-元杂双环碳的每个氢原子可以被如下文所定义的取代基替换。

类似地，术语“8-至30-元杂多环基”或“8-至30-元杂多环”指具有8至30个环原子的多于两个环、在一些实施方案中三个、四个或五个环的杂环状部分，其中两个相邻环共享至少一个环原子，和其可以含有一直到最大数量的双键(芳族或非芳族环，其是完全饱和的、部分饱和的或不饱和的)，其中至少一个环原子直至10个环原子被选自硫(包括-S(O)-、-S(O)₂-)、氧和氮(包括＝N(O)-)的杂原子替换，和其中所述环是经由碳或氮原子与分子的剩余部分连接。

可以理解，与结构的部分有关的短语“基团对R^x/R^y与它们所连接的原子一起形成C_3-10环烷基或3-至10-元杂环基”指R^x和R^y形成下述结构：

其中R是C_3-10环烷基或3-至10-元杂环基。

还可以理解，与结构的部分有关的短语“基团对R^x/R^y与它们所连接的原子一起形成环A”指R^x和R^y形成下述结构：

如本文所用的“卤素”表示氟、氯、溴或碘。通常优选的是，卤素是氟或氯。

如本文所用的术语“官能团”表示可以与其它原子基团反应的原子基团。示例性的官能团例如是羧酸(-(C＝O)OH)、伯胺或仲胺(-NH₂、-NH-)、马来酰亚胺、硫醇(-SH)、磺酸(-(O＝S＝O)OH)、碳酸酯、氨甲酸酯(-O(C＝O)N<)、羟基(-OH)、醛(-(C＝O)H)、酮(-(C＝O)-)、肼(>N-N<)、异氰酸酯、异硫氰酸酯、磷酸(-O(P＝O)OHOH)、膦酸(-O(P＝O)OHH)、卤代乙酰基、卤代烷、丙烯酰基、芳基氟化物、羟胺、二硫化物、磺酰胺、硫酸、乙烯基砜、乙烯基酮、重氮烷、环氧乙烷和氮丙啶。

当长效GH包含一个或多个酸性或碱性基团时，本发明还包括其相应的药学上或毒理学上可接受的盐，特别是它们的药学上可利用的盐。因此，根据本发明，包含酸性基团的长效GH可以用作碱金属盐、碱土金属盐或铵盐。这类盐的更准确的实例包括钠盐、钾盐、钙盐、镁盐或与氨或有机胺形成的盐，例如乙胺、乙醇胺、三乙醇胺或氨基酸。包含一个或多个碱性基团(即可以被质子化的基团)的长效GH可以以它们与无机酸或有机酸的加成盐的形式存在，并且可以根据本发明进行使用。适宜酸的实例包括氢氯酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水杨酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、新戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富马酸、马来酸、苹果酸、氨基磺酸、苯基丙酸、葡萄糖酸、抗坏血酸、异烟酸、柠檬酸、己二酸和本领域技术人员已知的其它酸。对于本领域技术人员来说，将碱性基团转化为阳离子的其它方法是已知的，例如胺基团进行烷基化产生带正电荷的铵基团和盐的适当抗衡离子。如果长效GH同时包含酸性和碱性基团，则本发明除了所述的盐形式外还包括内盐或甜菜碱(两性离子)两性离子。各种盐可以通过本领域技术人员已知的惯例方法获得，例如通过在溶剂或分散剂中将这些化合物与有机或无机酸或碱接触，或者通过与其它盐的阴离子交换或阳离子交换。本发明还包括长效GH的所有盐，所述盐由于生理相容性低而不直接适用于药物，但是可以例如用作化学反应的中间体或用于制备可药用盐。

术语“可药用”指当施用于患者时不造成伤害的物质，优选指监管机构如EMA(欧洲)和/或FDA(美国)和/或任何其它国家监管机构批准用于动物、例如用于人的物质。

如本文所用的术语“赋形剂”指治疗剂如药物或前药与之一起施用的稀释剂、佐剂或载体。这类药用赋形剂可以是无菌液体，例如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些，包括但不限于花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当药物组合物口服施用时，水是优选的赋形剂。当药物组合物静脉内施用时，盐水和葡萄糖水溶液是优选的赋形剂。优选采用盐水溶液和葡萄糖水溶液和甘油溶液作为注射溶液的液体赋形剂。适宜的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、海藻糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。如果需要，药物组合物还可以含有少量润湿或乳化剂、pH缓冲剂如乙酸盐、琥珀酸盐、tris、碳酸盐、磷酸盐、HEPES(4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪乙磺酸)、MES(2-(N-吗啉代)乙磺酸)或可以含有去污剂，如吐温、泊洛沙姆、泊洛沙明(poloxamines)、CHAPS、Igepal或氨基酸如甘氨酸、赖氨酸或组氨酸。这些药物组合物可以采取溶液、混悬液、乳剂、片剂、丸剂、胶囊剂、粉末剂、缓释制剂等的形式。药物组合物可以配制成含有传统的粘合剂和赋形剂如甘油三酯的栓剂。口服制剂可以包括标准赋形剂，例如药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。这类组合物将含有治疗有效量的药物或生物活性部分以及适宜量的赋形剂以便给患者提供适当施用的形式。制剂应当适合施用模式。

通常，术语“包含”还包括“由…组成”。

在一些实施方案中，长效生长激素抑制炎性单核细胞向炎症位置的募集。如果炎症诱导的疾病是NAFLD、特别是NASH，则该炎症位置是肝脏。在一些实施方案中，如果炎症诱导的疾病是NAFLD、特别是NASH，则长效生长激素的施用导致肝脏中HLA-G的增加。在一些实施方案中，长效生长激素的施用导致IGF-1水平的增加。可以理解，在进行动物研究时，使用来自该动物种属的相应基因，例如HLA-G的鼠科直向同源物是H2/Bl。

在一些实施方案中，长效生长激素的施用导致一种或多种肝脏炎症标记物的变化，所述标记物选自细胞因子、趋化因子和其它转录和组织学标记物。在一些实施方案中，用于治疗炎症诱导的疾病、例如NAFLD和特别是NASH的长效生长激素导致纤维化的转录或组织学标记物改善。

在一些实施方案中，长效生长激素的施用导致脂肪变性降低。在一些实施方案中，如果炎症诱导的疾病是炎症引起的肝脏疾病，则长效生长激素导致肝脏的再生。

在一些实施方案中，长效生长激素每周一次施用于患者。在一些实施方案中，长效生长激素每两周一次施用于患者。在一些实施方案中，长效生长激素每四周一次施用于患者。在一些实施方案中，长效生长激素每个月一次施用于患者。

在另一方面，本发明涉及用于治疗炎症诱导的疾病的长效GH，其中所述治疗包括如下步骤：

(a)给患有炎症诱导的疾病的患者施用至少第一个剂量的长效GH；

(b)测定胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平；和

(c)如果IGF-1水平高于+3的标准差评分，则降低长效GH的剂量至少5％，如果IGF-1水平低于0的标准差评分，则增加长效GH的剂量至少5％。

可以理解，如果IGF-1水平落入0至+3范围的标准差评分，则在步骤(c)中不要求剂量调整。在一些实施方案中，重复步骤(a)至(c)，直至IGF-1水平稳定在0至+3的标准差评分的范围。

在一些实施方案中，如果IGF-1水平高于+2的标准差评分，则在步骤(c)中降低长效GH的剂量至少5％，如果IGF-1水平低于+0.5的标准差评分，则增加长效GH的剂量至少5％。因此，在这样的实施方案中，如果IGF-1水平落入+0.5至+2范围的标准差评分，则在步骤(c)中不要求剂量调整。在一些实施方案中，重复步骤(a)至(c)，直至IGF-1水平稳定在+0.5至+2的标准差评分的范围。

炎症诱导的疾病、施用频率和长效生长激素的实施方案如本文其它地方所述。

在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是5％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是6％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是7％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是8％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是9％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是10％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是11％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是12％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是13％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是14％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是15％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是16％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是17％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是18％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是19％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量减少是20％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是5％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是6％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是7％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是8％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是9％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是10％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是11％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是12％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是13％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是14％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是15％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是16％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是17％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是18％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是19％。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量增加是20％。

(a)给患有炎症诱导的疾病的患者至少施用第一个剂量的长效GH；

(b)测定指示M1和M2巨噬细胞的生物标记物；

(c)基于所述生物标记物指示的M1减少或M2诱导的巨噬细胞表型变化，调整长效GH的剂量。

在一些实施方案中，在开始用长效GH治疗之前测定指示M1和M2巨噬细胞的生物标记物。

在一些实施方案中，指示M1巨噬细胞的生物标记物选自白介素(IL)-1β、IL-6、IL-12、IL-23、IL-27、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-y)、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、CCL2、CCL3、CCL5、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCL1、CXCL16、CCR2、CCR7、IL1R1、TLR2、TLR4、MARCO、CD11c、CD38和iNOS。在一些实施方案中，指示M1巨噬细胞的生物标记物选自IL-6、TNF-α、CD11c和iNOS。

在一些实施方案中，指示M2巨噬细胞的生物标记物选自IL-2、IL-4、IL-10、IL-13、CCL17、CCL18、CCL22、CCL24、CCL13、CCL16、CXCR1、CXCR2、CD14、CD23、CD36、CD163、甘露糖受体(CD206)、清除剂受体A、Chi3l3/Ym1、Retnla/Fizz-1和精氨酸酶-1。在一些实施方案中，指示M2巨噬细胞的生物标记物选自IL-10、CD36、CD206、Retnla/Fizz-1和精氨酸酶-1。

在一些实施方案中，在步骤(c)中，如果M1:M2巨噬细胞比例是失衡的，例如当指示M1型巨噬细胞的生物标记物仍然增加或与指示M2巨噬细胞的生物标记物相比是优势的，则增加长效生长激素的剂量。在一些实施方案中，该剂量增加是增加5％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加6％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加7％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加8％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加9％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加10％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加11％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加12％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加13％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加14％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加15％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加16％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加17％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加18％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加19％。在一些实施方案中，该剂量增加是增加20％。如果在步骤(c)中，M1:M2巨噬细胞比例是平衡的，例如当指示M1和M2的生物标记物达到稳态，则在一些实施方案中不调节剂量，而是保持恒定。

在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量调整通过测定IGF-1水平来完成，长效GH的剂量调节使得IGF-1水平在0至+3标准差评分的范围。在一些实施方案中，步骤(c)中的剂量调整通过测定IGF-1水平来完成，长效GH的剂量调整使得IGF-1水平在+0.5至+2标准差评分的范围。

在一些实施方案中，重复步骤(b)和(c)直至获得巨噬细胞再平衡。

在另一方面，本发明涉及治疗炎症诱导的疾病的方法，其中所述方法包括施用药物有效量的长效生长激素的步骤。长效生长激素和炎症诱导的疾病的实施方案如本发明其它部分所述。

在另一方面，本发明涉及包括如下步骤的方法：

(b)测定胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平；和

步骤(c)的剂量调整的实施方案如本文其它地方所述。

在另一方面，本发明涉及包括如下步骤的方法：

(b)测定指示M1和M2巨噬细胞的生物标记物；

步骤(b)的生物标记物和步骤(c)的剂量调整的实施方案如本文其它地方所述。

在一些实施方案中，长效生长激素包含至少一种人生长激素(hGH)。在一些实施方案中，hGH具有SEQ ID NO:1的序列。在一些实施方案中，hGH具有与SEQ ID NO:1的序列至少90％同一性的序列。在一些实施方案中，hGH具有与SEQ ID NO:1的序列至少92％同一性的序列。在一些实施方案中，hGH具有与SEQ ID NO:1的序列至少94％同一性的序列。在一些实施方案中，hGH具有与SEQ ID NO:1的序列至少95％同一性的序列。在一些实施方案中，hGH具有与SEQ ID NO:1的序列至少96％同一性的序列。在一些实施方案中，hGH具有与SEQ IDNO:1的序列至少97％同一性的序列。在一些实施方案中，hGH具有与SEQ ID NO:1的序列至少98％同一性的序列。在一些实施方案中，hGH具有与SEQ ID NO:1的序列至少99％同一性的序列。

在一个实施方案中，长效GH包括非共价包埋或包封在含聚合物或脂质的基质中的生长激素。在一些实施方案中，长效GH包括非共价包埋或包封在聚合物中的生长激素。优选的聚合物基质包含选自如下的聚合物：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素(carbomethyl celluloses)、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖(rhamnogalacturonans)、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。

在一些实施方案中，聚合物选自PEG、丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)和透明质酸。在一些实施方案中，聚合物是PEG。在一些实施方案中，聚合物是PLGA。在一些实施方案中，聚合物是透明质酸。

在一些实施方案中，聚合物基质是包含选自如下的聚合物的水凝胶：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。在一些实施方案中，水凝胶包含选自PEG、丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)和透明质酸的聚合物。在一些实施方案中，水凝胶是基于PEG的水凝胶。在一些实施方案中，水凝胶包含PLGA。在一些实施方案中，水凝胶包含透明质酸。

在一些实施方案中，长效生长激素是结晶生长激素。

在一些实施方案中，长效生长激素包括与至少一种天然或非天然氨基酸序列融合的生长激素部分。可以理解，该氨基酸序列包含一个或多个氨基酸残基。在一些实施方案中，该生长激素融合蛋白在生长激素部分和天然或非天然氨基酸序列之间包含用于酶裂解的识别序列。在一些实施方案中，生长激素融合蛋白在生长激素部分和天然或非天然氨基酸序列之间包含化学裂解位点。在一些实施方案中，氨基酸序列选自如US2012/0035101中所述的绒毛膜促性腺激素的羧基末端肽；白蛋白；如WO2011123813A2中所述的XTEN序列；如WO2011/144756A1中所述的脯氨酸/丙氨酸无规卷曲序列；如WO2008/155134中所述的脯氨酸/丙氨酸/丝氨酸无规卷曲序列；和Fc融合蛋白。在一些实施方案中，长效生长激素包含hGH-CTP融合蛋白。在一些实施方案中，长效生长激素包含hGH-XTEN融合蛋白。在一些实施方案中，长效生长激素包含hGH-HSA融合蛋白。在一些实施方案中，长效生长激素包含hGH-Fc融合蛋白。

在一些实施方案中，长效生长激素包含共价偶联至一个或多个化学部分的生长激素部分。在一些实施方案中，化学部分是聚合部分，例如包含选自如下的聚合物的聚合部分：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。在一些实施方案中，聚合部分包含基于PEG的聚合物。在一些实施方案中，聚合部分包含基于透明质酸的聚合物。

在一些实施方案中，聚合部分包含直链、支链、树枝状或环状聚合物或其任意组合。在一些实施方案中，聚合部分包含直链聚合物。在一些实施方案中，聚合部分包含支链聚合物，例如具有一个、两个、三个、四个或五个分支点的聚合物，其分支点在一些实施方案中可以选自-N<、-CR^b1<和>C<，其中-R^b1选自-H、C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基；其中C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基任选被一个或多个相同或不同的-R^b2取代，和其中C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基任选地插入有-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^b3)-、-S(O)₂N(^b3)-、-S(O)N(R^b3)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^b3)S(O)₂N(R^b3a)-、-S-、-N(R^b3)-、-OC(OR^b3)(R^b3a)-、-N(R^b3)C(O)N(R^b3a)-和-OC(O)N(R^b3)-；其中-R^b2、-R^b3和-R^b3a选自-H、C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基。在一些实施方案中，聚合部分包含树枝状聚合物。在一些实施方案中，聚合部分包含环状聚合物。

在一些实施方案中，化学部分是脂肪酸或脂肪酸变体部分，其可以是任选被取代的。在一些实施方案中，该脂肪酸或脂肪酸变体部分具有如WO2005/027978A2和WO2014/060512A1中公开的结构。在一些实施方案中，长效生长激素是生长激素-脂肪酸缀合物。在一些实施方案中，长效生长激素是生长激素-脂肪酸变体缀合物。

在一些实施方案中，长效生长激素包含式(F)的部分：

其中所述虚线指示与长效生长激素的剩余部分连接。

在一些实施方案中，式(F)中的虚线指示与生长激素部分连接。在一些实施方案中，式(F)中的虚线指示与生长激素部分的半胱氨酸侧链的硫醇的硫连接。在一些实施方案中，生长激素部分具有SEQ ID NO:1，其中101位的亮氨酸突变为半胱氨酸，和其中式(F)中的虚线指示与101位的该半胱氨酸连接。可以理解，“与该半胱氨酸连接”表示与该半胱氨酸的硫醇的硫连接。

在一些实施方案中，脂肪酸或脂肪酸变体部分具有式(F-i)的结构：

其中所述虚线指示与长效生长激素的剩余部分连接。

在一些实施方案中，式(F-i)中的虚线指示与生长激素部分连接。在一些实施方案中，式(F-i)中的虚线指示与生长激素部分的半胱氨酸侧链的硫醇的硫连接。在一些实施方案中，生长激素部分具有SEQ ID NO:1，其中101位的亮氨酸突变为半胱氨酸，和其中式(F-i)中的虚线指示与101位的该半胱氨酸连接。可以理解，“与该半胱氨酸连接”表示与该半胱氨酸的硫醇的硫连接。

如果长效GH具有式(F-i)，生长激素部分具有SEQ ID NO:1的序列，其中101位的亮氨酸被半胱氨酸代替，虚线指示经由半胱氨酸的硫醇连接，则长效GH是帕西生长素(somapacitan)，其作为上市。

在一些实施方案中，生长激素部分和化学部分之间的键是稳定的共价键。在一些实施方案中，生长激素部分和化学部分之间的键是可逆的共价键。如果生长激素部分可逆地缀合至一个或多个化学部分，则该缀合物也可以称为前药。

在一些实施方案中，长效生长激素是式(Ia)或(Ib)的生长激素缀合物或其可药用盐

其中

每个-D独立地是生长激素部分；

每个-L¹-独立地是与-D共价可逆连接的连接子部分；

每个-L²-是独立地化学键或者是间隔基部分；

每个-Z独立地是聚合部分或脂肪酸部分，其是任选被取代的；

x是选自1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15和16的整数；和

y是选自2、3、4和5的整数。

在一些实施方案中，生长激素缀合物具有式(Ia)。在一些实施方案中，x是1。在一些实施方案中，生长激素缀合物具有式(Ib)。在一些实施方案中，y是2。在一些实施方案中，y是3。在一些实施方案中，y是4。

在一些实施方案中，缀合物的所有-D部分是相同的。在一些实施方案中，本发明的缀合物包含多于一种类型的-D，例如两个、三个、四个或五个不同类型的-D部分，条件是缀合物中存在多于一个-D部分。

在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有SEQ ID NO:1的序列。在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有与SEQ ID NO:1的序列至少90％同一性的序列。在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有与SEQ ID NO:1的序列至少92％同一性的序列。在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有与SEQ ID NO:1的序列至少94％同一性的序列。在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有与SEQ ID NO:1的序列至少95％同一性的序列。在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有与SEQ ID NO:1的序列至少96％同一性的序列。在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有与SEQ ID NO:1的序列至少97％同一性的序列。在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有与SEQ ID NO:1的序列至少98％同一性的序列。在一些实施方案中，式(Ia)和(Ib)的-D具有与SEQ ID NO:1的序列至少99％同一性的序列。

在一些实施方案中，缀合物的所有-L¹-部分是相同的，前体是缀合物中存在多于一个-L¹-部分。在一些实施方案中，本发明的缀合物包含多于一种类型的-L¹-，例如两个、三个、四个或五个不同的-L¹-部分。

-L¹-部分可以是允许-D可逆连接的任意部分。在一些实施方案中，-L¹-是无痕迹的连接子，即，来自药物D-H的连接子以其未修饰的形式释放，其也可以称为游离形式。

-L¹-部分可以连接至-D的蛋白氨基酸或非蛋白氨基酸残基。在一些实施方案中，-L¹-连接至非蛋白氨基酸残基。在一些实施方案中，-L¹-连接至蛋白氨基酸残基。如果连接发生在蛋白氨基酸残基上，所述蛋白氨基酸残基在一些实施方案中选自半胱氨酸、蛋氨酸、组氨酸、赖氨酸、色氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺和精氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸残基选自半胱氨酸、组氨酸、赖氨酸、色氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是半胱氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是组氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是赖氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是色氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是丝氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是苏氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是天冬氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是谷氨酸。在一些实施方案中，该蛋白氨基酸是精氨酸。

-L¹-部分可以通过任意类型的链接连接至-D，条件是其是可逆的，并且可以理解，选择用于连接的-D的官能团影响-L¹-和-D之间的链接。在一些实施方案中，-L¹-通过选自酰胺、酯、氨甲酸酯、缩醛、缩醛胺(aminal)、亚胺、肟、腙、二硫化物和酰基胍的链接连接至-D。在一些实施方案中，-L¹-通过选自酰胺、酯、氨甲酸酯和酰基胍的链接连接至-D。可以理解，这些链接本身可能不是可逆的，但是可逆性可以是中-L¹-存在的某些原子基团或部分的作用。在一些实施方案中，-L¹-通过酯链接连接至-D。在一些实施方案中，-L¹-通过氨甲酸酯链接连接至-D。在一些实施方案中，-L¹-通过酰基胍连接至-D。在一些实施方案中，-L¹-通过酰胺链接连接至-D。

在一些实施方案中，-D通过-D的胺官能团的氮缀合至-L¹-。该胺官能团可以是-D的N-末端胺官能团，或者可以是来自赖氨酸残基的侧链的胺官能团。在一些实施方案中，-D经由N-末端胺官能团的氮缀合至-L¹-。在一些实施方案中，-D通过来自赖氨酸残基的侧链的胺官能团的氮缀合至-L¹-。在一些实施方案中，-L¹-经由-D的赖氨酸残基的侧链的胺官能团的氮连接至-D，并且-D和-L¹-之间形成的链接是氨甲酸酯。在一些实施方案中，-L¹-经由-D的赖氨酸残基的侧链的胺官能团的氮连接至-D，并且-D和-L¹-之间形成的链接是酰胺。

在一些实施方案中，-L¹-具有如WO 2009/095479 A2中公开的结构。因此，在一些实施方案中，-L¹-部分具有式(II)：

其中所述虚线指示通过形成酰胺键连接至-D的氮；

-X-选自-C(R⁴R^4a)-；-N(R⁴)-；-O-；-C(R⁴R^4a)-C(R⁵R^5a)-；-C(R⁵R^5a)-C(R⁴R^4a)-；-C(R⁴R^4a)-N(R⁶)-；-N(R⁶)-C(R⁴R^4a)-；-C(R⁴R^4a)-O-；-O-C(R⁴R^4a)-；和-C(R⁷R^7a)-；

X¹选自C和S(O)；

-X²-选自-C(R⁸R^8a)-和-C(R⁸R^8a)-C(R⁹R^9a)-；

＝X³选自＝O；＝S和＝N-CN；

-R¹、-R^1a、-R²、-R^2a、-R⁴、-R^4a、-R⁵、-R^5a、-R⁶、-R⁸、-R^8a、-R⁹、-R^9a独立地选自-H；和C_1-6烷基；

-R³、-R^3a独立地选自-H；和C_1-6烷基，条件是当-R³、-R^3a之一或两者不是-H时，它们通过SP³-杂化碳原子连接至它们所连接的N；

-R⁷选自-N(R¹⁰R^10a)和-NR¹⁰-(C＝O)-R¹¹；

-R^7a、-R¹⁰、-R^10a、-R¹¹各自独立地选自-H和C_1-6烷基；

任选地，一个或多个基团对-R^1a/-R^4a、-R^1a/-R^5a、-R^1a/-R^7a、-R^4a/-R^5a、-R^8a/-R^9a形成化学键；

任选地，一个或多个基团对-R¹/-R^1a、-R²/-R^2a、-R⁴/-R^4a、-R⁵/-R^5a、-R⁸/-R^8a、-R⁹/-R^9a与它们所连接的原子一起形成C_3-10环烷基或3-至10-元杂环基；

任选地，一个或多个基团对-R¹/-R⁴、-R¹/-R⁵、-R¹/-R⁶、-R¹/-R^7a、-R⁴/-R⁵、-R⁴/-R⁶、-R⁸/-R⁹、-R²/-R³与它们所连接的原子一起形成环A；

任选地，R³/R^3a与它们所连接的氮原子一起形成3-至10-元杂环；

A选自苯基；萘基；茚基；茚满基；四氢萘基；C_3-10环烷基；3-至10-元杂环基；和8-至11-元杂双环基；和

其中-L¹-被至少一个-L²-Z取代和其中-L¹-任选被进一步取代，条件是式(II)中标记星号的氢不被-L²-Z或取代基替代。

在一些实施方案中，式(II)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(II)的-L¹-没有被进一步取代。

可以理解，如果式(II)中的-R³/-R^3a与它们所连接的氮原子一起形成3-至10-元杂环，则仅可以形成这样的3-至10-元杂环，其中直接与氮连接的原子是sp³-杂化碳原子。换言之，通过-R³/-R^3a连同它们所连接的氮原子一起形成的该3-至10-元杂环具有如下结构：

其中

虚线表示与-L¹-的其余部分的连接；

环包含包括至少一个氮的3至10个原子；和

R^#和R^##代表sp³-杂化碳原子。

还可以理解，所述3-至10-元杂环可以是进一步被取代的。

通过式(II)的-R³/-R^3a连同它们所连接的氮原子一起形成的适宜的3-至10-元杂环的示例性实施方案是如下的那些：

其中

虚线指示分子其余部分的连接；和

-R选自-H和C_1-6烷基。

式(II)的-L¹-部分可以任选被进一步取代。通常，可以使用任意取代基，只要裂解原则不受影响，即，式(II)中标记星号的氢不被取代，并且式(II)的部分的氮保持是伯胺、仲胺或叔胺的部分，即，-R³和-R^3a各自独立地-H或通过sp³-杂化碳原子连接至–N<。

在一个实施方案中，式(II)的-R¹或-R^1a被-L²-Z或-L²-Z’取代。在另一个实施方案中，式(II)的-R²或-R^2a被-L²-Z或-L²-Z’取代。在另一个实施方案中，式(II)的-R³或-R^3a被-L²-Z或-L²-Z’取代。在另一个实施方案中，式(II)的-R⁴被-L²-Z或-L²-Z’取代。在另一个实施方案中，式(II)的-R⁵或-R^5a被-L²-Z或-L²-Z’取代。在另一个实施方案中，式(II)的-R⁶被-L²-Z或-L²-Z’取代。在另一个实施方案中，式(II)的-R⁷或-R^7a被-L²-Z或-L²-Z’取代。在另一个实施方案中，式(II)的-R⁸或-R^8a被-L²-Z或-L²-Z’取代。在另一个实施方案中，式(II)的-R⁹或-R^9a被-L²-Z或-L²-Z’取代。

在一些实施方案中，-L¹-具有如WO2016/020373A1中公开的结构。因此，在一些实施方案中，-L¹-部分具有式(III)：

其中

虚线表示分别通过形成酰胺或酯链接与-D的伯胺或仲胺或羟基链接；

-R¹、-R^1a、-R²、-R^2a、-R³和-R^3a各自独立地选自-H、-C(R⁸R^8aR^8b)、-C(＝O)R⁸、-C≡N、-C(＝NR⁸)R^8a、-CR⁸(＝CR^8aR^8b)、-C≡CR⁸和-T；

-R⁴、-R⁵和-R^5a各自独立地选自-H、-C(R⁹R^9aR^9b)和-T；

a1和a2各自独立地是0或1；

每个-R⁶、-R^6a、-R⁷、-R^7a、-R⁸、-R^8a、-R^8b、-R⁹、-R^9a、-R^9b各自独立地选自-H、卤素、-CN、-COOR¹⁰、-OR¹⁰、-C(O)R¹⁰、-C(O)N(R¹⁰R^10a)、-S(O)₂N(R¹⁰R^10a)、-S(O)N(R¹⁰R^10a)、-S(O)₂R¹⁰、-S(O)R¹⁰、-N(R¹⁰)S(O)₂N(R^10aR^10b)、-SR¹⁰、-N(R¹⁰R^10a)、-NO₂、-OC(O)R¹⁰、-N(R¹⁰)C(O)R^10a、-N(R¹⁰)S(O)₂R^10a、-N(R¹⁰)S(O)R^10a、-N(R¹⁰)C(O)OR^10a、-N(R¹⁰)C(O)N(R^10aR^10b)、-OC(O)N(R¹⁰R^10a)、-T、C_1-20烷基、C_2-20烯基和C_2-20炔基；其中-T、C_1-20烷基、C_2-20烯基和C_2-20炔基任选被一个或多个相同或不同的-R¹¹取代，和其中C_1-20烷基、C_2-20烯基和C_2-20炔基任选插入有一个或多个选自如下的基团：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R¹²)-、-S(O)₂N(R¹²)-、-S(O)N(R¹²)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R¹²)S(O)₂N(R^12a)-、-S-、-N(R¹²)-、-OC(OR¹²)(R^12a)-、-N(R¹²)C(O)N(R^12a)-、和-OC(O)N(R¹²)-；

每个-R¹⁰、-R^10a、-R^10b独立地选自-H、-T、C_1-20烷基、C_2-20烯基和C_2-20炔基；其中-T、C_1-20烷基、C_2-20烯基和C_2-20炔基任选被一个或多个相同或不同的-R¹¹取代，和其中C_1-20烷基、C_2-20烯基和C_2-20炔基任选插入有一个或多个选自如下的基团：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R¹²)-、-S(O)₂N(R¹²)-、-S(O)N(R¹²)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R¹²)S(O)₂N(R^12a)-、-S-、-N(R¹²)-、-OC(OR¹²)(R^12a)-、-N(R¹²)C(O)N(R^12a)-、和-OC(O)N(R¹²)-；

每个T相互独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C_3-10环烷基、3-至10-元杂环基和8-至11-元杂双环基；其中每个T独立地任选被一个或多个相同或不同的-R¹¹取代；

每个-R¹¹相互独立地选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-COOR¹³、-OR¹³、-C(O)R¹³、-C(O)N(R¹³R^13a)、-S(O)₂N(R¹³R^13a)、-S(O)N(R¹³R^13a)、-S(O)₂R¹³、-S(O)R¹³、-N(R¹³)S(O)₂N(R^13aR^13b)、-SR¹³、-N(R¹³R^13a)、-NO₂、-OC(O)R¹³、-N(R¹³)C(O)R^13a、-N(R¹³)S(O)₂R^13a、-N(R¹³)S(O)R^13a、-N(R¹³)C(O)OR^13a、-N(R¹³)C(O)N(R^13aR^13b)、-OC(O)N(R¹³R^13a)和C_1-6烷基；其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；

每个-R¹²、-R^12a、-R¹³、-R^13a、-R^13b独立地选自-H和C_1-6烷基；其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；

任选地，一个或多个基团对-R¹/-R^1a、-R²/-R^2a、-R³/-R^3a、-R⁶/-R^6a、-R⁷/-R^7a与它们所连接的原子一起形成C_3-10环烷基或3-至10-元杂环基；

任选地，一个或多个基团对-R¹/-R²、-R¹/-R³、-R¹/-R⁴、-R¹/-R⁵、-R¹/-R⁶、-R¹/-R⁷、-R²/-R³、-R²/-R⁴、-R²/-R⁵、-R²/-R⁶、-R²/-R⁷、-R³/-R⁴、-R³/-R⁵、-R³/-R⁶、-R³/-R⁷、-R⁴/-R⁵、-R⁴/-R⁶、-R⁴/-R⁷、-R⁵/-R⁶、-R⁵/-R⁷、-R⁶/-R⁷与它们所连接的原子一起形成环A；

A选自苯基；萘基；茚基；茚满基；四氢萘基；C_3-10环烷基；3-至10-元杂环基；和8-至11-元杂双环基；

其中-L¹-被至少一个-L²-Z取代和其中-L¹-任选被进一步取代。

式(III)的-L¹-的任选的进一步的取代基如上文所述。

优选地，式(III)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一个实施方案中，式(III)的-L¹-没有被进一步取代。

在另一个实施方案中，-L¹-具有如EP1536334B1、WO2009/009712A1、WO2008/034122A1、WO2009/143412A2、WO2011/082368A2、和US8618124B2中公开的结构，这些文献通过引入并入本文。

在一些实施方案中，-L¹-具有如US8946405B2和US8754190B2中公开的结构。因此，在一些实施方案中，-L¹-具有式(IV)：

其中

虚线表示通过-D的选自-OH、-SH和-NH₂的官能团与-D的连接；

m是0或1；

-R¹和-R²中的至少一个或两个各自独立地选自-CN、-NO₂、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的烯基、任选被取代的炔基、-C(O)R³、-S(O)R³、-S(O)₂R³和-SR⁴，

-R¹和-R²中的一个且仅一个选自-H、任选被取代的烷基、任选被取代的芳基烷基和任选被取代的杂芳基烷基；

-R³选自-H、任选被取代的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂芳基烷基、-OR⁹和-N(R⁹)₂；

-R⁴选自任选被取代的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基和任选被取代的杂芳基烷基；

每个-R⁵独立地选自-H、任选被取代的烷基、任选被取代的烯基烷基、任选被取代的炔基烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基和任选被取代的杂芳基烷基；

-R⁹选自-H和任选被取代的烷基；

-Y-不存在且–X-选自-O-和-S-；or

-Y-是-N(Q)CH₂-且-X-是-O-；

Q选自任选被取代的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基和任选被取代的杂芳基烷基；

任选地，-R¹和-R²可以一起形成3至8-元环；和

任选地，两个-R⁹与它们所连接的氮一起形成杂环；

其中-L¹-被-L²-Z取代和其中-L¹-任选被进一步取代。

仅仅在式(IV)的上下文中，所用术语具有如下含义：

如本文所用的术语“烷基”包括1-8个碳或在一些实施方案中1-6个或1-4个碳原子的直链、支链或环状饱和烃基。

术语“烷氧基”包括键合至氧的烷基基团，包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基、环丙氧基、环丁氧基等。

术语“烯基”包括具有碳碳双键的非芳香族不饱和烃。

术语“炔基”包括具有碳碳三键的非芳香族不饱和烃。

术语“芳基”包括6至18个碳、优选6至10个碳的芳香族烃基，包括诸如苯基、萘基和蒽基的基团。术语“杂芳基”包括包含3至15个碳和含有至少一个N、O或S原子、优选3至7个碳和含有至少一个N、O或S原子的芳香族环，包括诸如以下的基团：吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基、茚基等。

在一些实例中，烯基、炔基、芳基或杂芳基部分可以通过亚烷基链接与分子的剩余部分偶联。在那些情况中，取代基将称为烯基烷基、炔基烷基、芳基烷基或杂芳基烷基，表明亚烷基部分在烯基、炔基、芳基或杂芳基部分和所述烯基、炔基、芳基或杂芳基所偶联的分子之间。

术语“卤素”包括溴、氟、氯和碘。

术语“杂环”指包含3至7个碳原子和至少一个N、O,或S原子的4至8元芳香族或非芳香族环。实例有哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吡咯烷和四氢呋喃基以及上文对术语“杂芳基”提供的示例性基团。

当环系任选被取代时，适宜的取代基选自烷基、烯基、炔基或另外的环，各自任选地被进一步取代。任意基团、包括上述基团上的任选的取代基包括卤代、硝基、氰基、-OR、-SR、-NR₂、-OCOR、-NRCOR、-COOR、-CONR₂、-SOR、-SO₂R、-SONR₂、-SO₂NR₂，其中每个R独立地是烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基，或两个R基团与它们所连接的原子一起形成环。

在一些实施方案中，式(IV)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(IV)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，-L¹-具有WO2013/036857A1中公开的结构。因此，在一些实施方案中，-L¹-具有式(V)：

其中

虚线表示通过-D的胺官能团与-D的连接；

-R¹选自任选被取代的C₁-C₆直链、支链或环状烷基；任选被取代的芳基；任选被取代的杂芳基；烷氧基；和-NR⁵ ₂；

-R²选自-H；任选被取代的C₁-C₆烷基；任选被取代的芳基；和任选被取代的杂芳基；

-R³选自-H；任选被取代的C₁-C₆烷基；任选被取代的芳基；和任选被取代的杂芳基；

-R⁴选自-H；任选被取代的C₁-C₆烷基；任选被取代的芳基；和任选被取代的杂芳基；

每个-R⁵相互独立地选自-H；任选被取代的C₁-C₆烷基；任选被取代的芳基；和任选被取代的杂芳基；当一起时，两个-R⁵可以是环烷基或环杂烷基；

其中-L¹-被-L²-Z取代和其中-L¹-任选被进一步取代。

仅在式(V)的上下文中，所用术语具有如下含义：

“烷基”、“烯基”、和“炔基”包括1-8个碳或1-6个碳或1-4个碳的直链、支链或环状烃基，其中烷基是饱和烃，烯基包括一条或多条碳-碳双键，和炔基包括一条或多条碳-碳三键。除非另有说明，否则这些含有1-6个C。

“芳基”包括6-18个碳、优选6-10个碳的芳香族烃基，包括诸如苯基、萘基和蒽的基团。“杂芳基”包括包含3-15个碳和含有至少一个N、O或S原子、优选3-7个碳和含有至少一个N、O或S原子的芳香族环，包括诸如以下的基团：吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基、茚基等。

术语“取代”表示烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基基团包含一个或多个取代基基团代替一个或多个氢原子。通常，取代基可以选自卤素，包括F、Cl、Br和I；低级烷基，包括直链、支链和环状；低级卤代烷基，包括氟烷基、氯烷基、溴烷基和碘烷基；OH；低级烷氧基，包括直链、支链和环状；SH；低级烷基硫基，包括直链、支链和环状；氨基、烷基氨基、二烷基氨基，硅烷基，烷基硅烷基、烷氧基硅烷基和芳基硅烷基；硝基；氰基；羰基；羧酸、羧基酯、羧酸酰胺、氨基羰基；氨基酰基；氨甲酸酯；脲；硫代氨甲酸酯；硫脲；酮；砜；磺酰胺；芳基，包括苯基、萘基和蒽基；杂芳基，包括5-元杂芳基，包括吡咯、咪唑、呋喃、噻吩、噁唑、噻唑、异噁唑、异噻唑、噻二唑、三唑、噁二唑和四唑，6-元杂芳基，包括吡啶、嘧啶、吡嗪，和稠合杂芳基，包括苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并咪唑、吲哚、苯并噻唑、苯并异噁唑和苯并异噻唑。

在一些实施方案中，式(V)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(V)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，-L¹-具有如US7585837B2中公开的结构。因此，在一些实施方案中，-L¹-具有式(VI)：

其中

虚线表示通过-D的胺官能团与-D的连接；

R¹和R²独立地选自氢、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、卤素、硝基、-SO₃H、-SO₂NHR⁵、氨基、铵、羧基、PO₃H₂和OPO₃H₂；

R³、R⁴和R⁵独立地选自氢、烷基和芳基；

其中-L¹-被-L²-Z取代和其中-L¹-任选被进一步取代。

适于式(VI)的取代基是烷基(例如C_1-6烷基)、烯基(例如C_2-6烯基)、炔基(例如C_2-6炔基)、芳基(例如苯基)、杂烷基、杂烯基、杂炔基、杂芳基(例如芳香族4至7元杂环)或卤素部分。

仅在式(VI)的上下文中，所用术语具有如下含义：

术语“烷基”、“烷氧基”、“烷氧基烷基”、“芳基”、“烷芳基”和“芳烷基”表示1-8个、优选1-4个碳原子的烷基基团，例如甲基、乙基、丙基、异丙基和丁基，和6-10个碳原子的芳基基团，例如苯基和萘基。术语“卤素”包括溴、氟、氯和碘。

在一些实施方案中，式(VI)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(VI)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，-L¹-具有如WO2002/089789A1中公开的结构。因此，在一些实施方案中，-L¹-具有式(VII)：

其中

虚线表示通过-D的胺官能团与-D的连接；

Y₁和Y₂独立地是O、S或NR⁷；

R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶和R⁷独立地选自氢、C_1-6烷基、C_3-12支链烷基、C_3-8环烷基、C_1-6被取代的烷基、C_3-8被取代的环烷基、芳基、被取代的芳基、芳烷基、C_1-6杂烷基、被取代C_1-6杂烷基、C_1-6烷氧基、苯氧基和C_1-6杂烷氧基；

Ar是当包括在式(VII)中时形成多取代芳香族烃或多取代杂环基团的部分；

X是化学键或主动转运至靶细胞中的部分、疏水性部分或其组合，

y是0或1；

其中-L¹-被-L²-Z取代和其中-L¹-任选被进一步取代。

仅在式(VII)的上下文中，所用术语具有如下含义：

术语“烷基”应理解为包括例如直链、支链、被取代的C_1-12烷基，包括烷氧基、C_3-8环烷基或被取代的环烷基等。

术语“取代”应理解为包括添加一个或多个不同的原子或用一个或多个不同的原子代替官能团或化合物中所含的一个或多个原子。

被取代的烷基包括羧基烷基、氨基烷基、二烷基氨基、羟基烷基和巯基烷基；被取代的环烷基包括诸如4-氯环己基的部分；芳基包括诸如萘基的部分；被取代的芳基包括诸如3-溴-苯基的部分；芳烷基包括诸如甲苯基(toluyl)的部分；杂烷基包括诸如乙基噻吩的部分；被取代的杂烷基包括诸如3-甲氧基噻吩(thiophone)的部分；烷氧基包括诸如甲氧基的部分；和苯氧基包括诸如3-硝基苯氧基的部分。卤代应理解为包括氟、氯、碘和溴。

在一些实施方案中，式(VII)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(VII)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，-L¹-包括式(VIII)的亚结构

其中

标有星号的虚线指示通过形成酰胺键与-D的氮连接；

未标记的虚线指示与-L¹-的剩余部分连接；和

其中-L¹-被-L²-Z取代和其中-L¹-任选被进一步取代。

在一些实施方案中，式(VIII)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(VIII)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，-L¹-包括式(IX)的亚结构

其中

标有星号的虚线指示通过形成氨甲酸酯键与-D的氮连接；

未标记的虚线指示与-L¹-的剩余部分连接；和

其中-L¹-被-L²-Z取代和其中-L¹-任选被进一步取代。

在一些实施方案中，式(IX)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(IX)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，-L¹-具有式(IX-a):

其中

标有星号的虚线指示与-D的氮连接，未标记的虚线指示与-L²-Z连接；

n是0、1、2、3或4；

＝Y₁和＝Y₅独立地选自＝O和＝S；

-Y₂-和-Y₃-独立地选自-O-和-S-；

-Y₄-选自-O-、-NR⁵-和-C(R⁶R^6a)-；

-R³、-R⁵、-R⁶和-R^6a各自独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；

-R⁴选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；

-W-选自C_1-20烷基，任选地插入有一个或多个选自C_3-10环烷基、8-至30-元碳多环基、3-至10-元杂环基、-C(O)-、-C(O)N(R⁷)-、-O-、-S-和-N(R⁷)-的基团；

-Nu是亲核基团，选自-N(R⁷R^7a)、-N(R⁷OH)、-N(R⁷)-N(R^7aR^7b)、-S(R⁷)、-COOH、

-Ar-选自

其中

虚线指示与-L¹-的剩余部分连接，

-Z¹-选自-O-、-S-和-N(R⁷)-，和

-Z²-是-N(R⁷)-；

-R⁷、-R^7a和-R^7b独立地选自-H、C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基；和

其中-L¹-任选被进一步取代。

在一些实施方案中，-D通过-D的胺官能团的氮与式(IX-a)的-L¹-连接，例如与-D的赖氨酸侧链的胺官能团的氮连接。

在一些实施方案中，式(IX-a)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(IX-a)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，-L¹-具有式(IX-b):

其中

n是0、1、2、3或4；

＝Y₁和＝Y₅独立地选自＝O和＝S；

-Y₂-和-Y₃-独立地选自-O-和-S-；

-Y₄-选自-O-、-NR⁵-和-C(R⁶R^6a)-；

-R²、-R³、-R⁵、-R⁶、-R^6a各自独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基；

-Ar-选自

其中

虚线指示与-L¹-的剩余部分连接，

-Z¹-选自-O-、-S-和-N(R⁷)-，且

-Z²-是-N(R⁷)-；

-R⁷、-R^7a、-R^7b各自独立地选自-H、C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基；和

其中-L¹-任选被进一步取代。

在一些实施方案中，-D通过-D的胺官能团的氮与式(IX-b)的-L¹-连接，例如与-D的赖氨酸侧链的胺官能团的氮连接。

在一些实施方案中，式(IX-b)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(IX-b)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的＝Y¹是＝O。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-Y²-是-O-。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-Y³-是-O-。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-Y⁴-是-NR⁵-。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的＝Y⁵是＝O。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的n是0或1。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的n是0。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的n是1。

在一些实施方案中，式(IX-b)的-R²选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。在一些实施方案中，式(IX-b)的-R²选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(IX-b)的-R²选自-H、甲基和乙基。在一些实施方案中，式(IX-b)的-R²是-H。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R³选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R³选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R³选自-H、甲基和乙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R³是-H。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁴各自独立地选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁴选自甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁴选自甲基和乙基。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁵选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁵选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁵选自甲基和乙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁵是甲基。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁶和-R^6a独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁶和-R^6a独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁶和-R^6a独立地选自-H、甲基和乙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁶和-R^6a均为-H。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的Ar是苯基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的Ar是

其中所述虚线指示与式(IX-a)和(IX-b)的部分的剩余部分连接。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的W是C_1-20烷基，任选地插入有C_3-10环烷基、-C(O)-、-C(O)N(R⁷)-、-O-、-S-和-N(R⁷)-。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的W是C_1-10烷基，任选地插入有C_3-10环烷基、-C(O)-、-C(O)N(R⁷)-、-O-、-S-和-N(R⁷)-。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的W是C_1-6烷基，任选地插入有C_3-10环烷基、-C(O)-、-C(O)N(R⁷)-、-O-、-S-和-N(R⁷)-。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的W是

其中

虚线指示分别与式(IX-a)或(IX-b)的部分的剩余部分连接。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-Nu是-N(R⁷R^7a)。

在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁷、-R^7a和-R^7b各自独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁷、-R^7a和-R^7b各自独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基和异丙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁷、-R^7a和-R^7b各自独立地选自甲基或乙基。在一些实施方案中，式(IX-a)和(IX-b)的-R⁷、-R^7a和-R^7b均为甲基。

在一些实施方案中，-L¹-具有式(IX-c)

其中

标有星号的虚线指示与-D的氮连接；

未标记的虚线指示与-L²-Z连接；和

s1是选自1、2、3、4、5、6、7、8、9和10的整数。

在一些实施方案中，-D通过-D的胺官能团的氮与式(IX-c)的-L¹-连接，例如与-D的赖氨酸侧链的胺官能团的氮连接。

在一些实施方案中，式(IX-c)的s1是选自1、2、3、4和5的整数。在一些实施方案中，式(IX-c)的s1是1。在一些实施方案中，式(IX-c)的s1是2。在一些实施方案中，式(IX-c)的s1是3。在一些实施方案中，式(IX-c)的s1是4。在一些实施方案中，式(IX-c)的s1是5。

在一些实施方案中，-L¹-具有式(IX-d)

其中

标有星号的虚线指示与-D的氮连接；和

未标记的虚线指示与-L²-Z连接。

在一些实施方案中，-D通过-D的胺官能团的氮与式(IX-d)的-L¹-连接，例如与-D的赖氨酸侧链的胺官能团的氮连接。

在一些实施方案中，-L¹-具有如WO2020/206358A1中公开的结构。因此，在一些实施方案中，-L¹-部分具有式(X)：

其中

未标记的虚线指示与-D连接；

标有星号的虚线指示与-L²-Z或-L²-Z’连接；

n是选自0、1、2、3、4、5和6的整数；

-R¹和-R²独立地是吸电子基团、烷基或-H、和其中-R¹或-R²中的至少一个是吸电子基团；

每个-R⁴独立地是C₁-C₃烷基，或两个-R⁴与它们所连接的碳原子一起形成3-至6-元环；和

当-D是通过胺连接的药物部分时，-Y-不存在，或者当-D是通过苯酚、醇、硫醇、硫代苯酚、咪唑或非碱性胺连接的药物部分时，-Y-是-N(R⁶)CH₂-；其中-R⁶是任选被取代的C₁-C₆烷基、任选被取代的芳基、或任选被取代的杂芳基。

在一些实施方案中，式(X)的-L¹-被一个-L²-Z部分取代。

在一些实施方案中，式(X)的-L¹-没有被进一步取代。

在一些实施方案中，式(X)的n是选自1、2、3、4、5和6的整数。在一些实施方案中，式(X)的n是选自1、2和3的整数。在一些实施方案中，式(X)的n是选自0、1、2和3的整数。在一些实施方案中，式(X)的n是1。在一些实施方案中，式(X)的n是2。在一些实施方案中，式(X)的n是3。

在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团选自-CN；-NO₂；任选被取代的芳基；任选被取代的杂芳基；任选被取代的烯基；任选被取代的炔基；-COR³、-SOR³或-SO₂R³，其中-R³是-H、任选被取代的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂芳基烷基、-OR⁸或-NR⁸ ₂，其中每个-R⁸是独立地-H或任选被取代的烷基，或者两个-R⁸基团与它们所连接的氮一起形成杂环；或-SR⁹，其中-R⁹是任选被取代的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、或任选被取代的杂芳基烷基。

在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是-CN。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是-NO₂。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的包含6至10个碳的芳基。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的苯基、萘基或蒽基。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的包含3至7个碳和包含至少一个N、O或S原子的杂芳基。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基或茚基。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的含2至20个碳原子的烯基。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的包含2至20个碳原子的炔基。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是-COR³、-SOR³或-SO₂R³，其中-R³是-H、任选被取代的包含1至20个碳原子的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂芳基烷基、-OR⁸或-NR⁸ ₂，其中每个-R⁸是独立地-H或任选被取代的包含1至20个碳原子的烷基，或者两个-R⁸基团与它们所连接的氮一起形成杂环。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²的吸电子基团是-SR⁹，其中-R⁹是任选被取代的包含1至20个碳原子的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、或任选被取代的杂芳基烷基。

在一些实施方案中，式(X)的-R¹或-R²中的至少一个是-CN、-SOR³或-SO₂R³。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²中的至少一个是-CN或-SO₂R³。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²中的至少一个是-CN或-SO₂R³，其中-R³是任选被取代的烷基、任选被取代的芳基、或-NR⁸ ₂。在一些实施方案中，式(X)的-R¹和-R²中的至少一个是-CN、-SO₂N(CH₃)₂、-SO₂CH₃、被-SO₂取代的苯基、被-SO₂和-Cl取代的苯基、-SO₂N(CH₂CH₂)₂O、-SO₂CH(CH₃)₂、-SO₂N(CH₃)(CH₂CH₃)或-SO₂N(CH₂CH₂OCH₃)₂。

在一些实施方案中，式(X)的-R⁴各自独立地是C₁-C₃烷基。在一些实施方案中，两个-R⁴均为甲基。

在一些实施方案中，式(X)的-Y-不存在。在一些实施方案中，式(X)的-Y-是-N(R⁶)CH₂-。

在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是-CN，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是-SO₂N(CH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是SO₂CH₃，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂)₂CHCH₃，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是被-SO₂取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是被-SO₂和-Cl取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂)₂O，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是-SO₂CH(CH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是-SO₂N(CH₃)(CH₂CH₃)，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂OCH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是1，-R¹是被-SO₂和-CH₃取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。

在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是-CN，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是-SO₂N(CH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是SO₂CH₃，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂)₂CHCH₃，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是被-SO₂取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是被-SO₂和-Cl取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂)₂O，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是-SO₂CH(CH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是-SO₂N(CH₃)(CH₂CH₃)，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂OCH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是2，-R¹是被-SO₂和-CH₃取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。

在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是-CN，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是-SO₂N(CH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是SO₂CH₃，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂)₂CHCH₃，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是被-SO₂取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是被-SO₂和-Cl取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂)₂O，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是-SO₂CH(CH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是-SO₂N(CH₃)(CH₂CH₃)，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是-SO₂N(CH₂CH₂OCH₃)₂，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。在一些实施方案中，-L¹-具有式(X)，其中n是3，-R¹是被-SO₂和-CH₃取代的苯基，-R²是-H，和-R⁴是-CH₃。

仅在式(X)的上下文中，所用术语具有如下含义：

术语“烷基”指1至20、1至12、1至8、1至6或1至4个碳原子的直链、支链或环状饱和烃基。在一些实施方案中，烷基是直链或支链的。直链或支链烷基基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基和正癸基。在一些实施方案中，烷基是环状的。环烷基基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊二烯基和环己基。

术语“烷氧基”指与氧键合的烷基基团，包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基、环丙氧基和环丁氧基。

术语“烯基”指具有碳-碳双键和2至20、2至12、2至8、2至6或2至4个碳原子的非芳香族不饱和烃。

术语“炔基”指具有碳-碳三键和2至20、2至12、2至8、2至6,或2至4个碳原子的非芳香族不饱和烃。

术语“芳基”指6至18个碳、优选6至10个碳的芳香族烃基，包括诸如苯基、萘基和蒽基的基团。术语“杂芳基”指包含3至15个碳和包含至少一个N、O或S原子、优选3至7个碳和包含至少一个N、O或S原子的芳香族环，包括诸如以下的基团：吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基和茚基。

在一些实施方案中，烯基、炔基、芳基或杂芳基部分可以通过烷基链接与分子的剩余部分偶联。在那些情况中，取代基将称为烯基烷基、炔基烷基、芳基烷基或杂芳基烷基，表明亚烷基部分在烯基、炔基、芳基或杂芳基部分和所述烯基、炔基、芳基或杂芳基所偶联的分子之间。

术语“卤素”或“卤代”指溴、氟、氯和碘。

术语“杂环”或“杂环基”指包含至少一个N、O或S原子的3-至15-元芳香族或非芳香族环。其实例包括哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吡咯烷和四氢呋喃基以及上文对术语“杂芳基”提供的示例性基团。在一些实施方案中，杂环或杂环基是非芳香族的。在一些实施方案中，杂环或杂环基是芳香族的。

术语“任选被取代的”指基团可以被一个或多个(例如1、2、3、4或5)个相同或不同的取代基取代。取代基的实例包括烷基、烯基、炔基、卤素、-CN、-OR^aa、-SR^aa、-NR^aaR^bb、-NO₂、-C＝NH(OR^aa)、-C(O)R^aa、-OC(O)R^aa、-C(O)OR^aa、-C(O)NR^aaR^bb、-OC(O)NR^aaR^bb、-NR^aaC(O)R^bb、-NR^aaC(O)OR^bb、-S(O)R^aa、-S(O)₂R^aa、-NR^aaS(O)R^bb、-C(O)NR^aaS(O)R^bb、-NR^aaS(O)₂R^bb、-C(O)NR^aaS(O)₂R^bb、-S(O)NR^aaR^bb、-S(O)₂NR^aaR^bb、-P(O)(OR^aa)(OR^bb)、杂环基、杂芳基、或芳基，其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、杂芳基和芳基各自独立地任选被-R^cc取代，其中-R^aa和-R^bb各自独立地是-H、烷基、烯基、炔基、杂环基、杂芳基或芳基，或-R^aa和-R^bb与它们所连接的氮原子一起形成杂环基，所述杂环基任选被烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷氧基或-CN取代，和其中：每个-R^cc是独立地烷基、烯基、炔基、卤素、杂环基、杂芳基、芳基、-CN或-NO₂。

在一些实施方案中，缀合物的所有-L²-部分是相同的，条件是缀合物中存在多于一个-L²-部分。在一些实施方案中，本发明的缀合物包含多于一种类型的-L²-，例如两个、三个、四个或五个不同的-L²-部分。该多于一种类型的-L²-可以与仅一个类型的-L¹-连接，或者可以与多于一种类型的-L¹-连接。

在一些实施方案中，-L²-是化学键。在一些实施方案中，-L²-是间隔基部分。

在一些实施方案中，-L²-选自-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^y1)-、-S(O)₂N(R^y1)-、-S(O)N(R^y1)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-、-S-、-N(R^y1)-、-OC(OR^y1)(R^y1a)-、-N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-、-OC(O)N(R^y1)-、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基；其中-T′-、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-R^y2取代，和其中C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选插入有一个或多个选自如下的基团：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^y3)-、-S(O)₂N(R^y3)-、-S(O)N(R^y3)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-、-S-、-N(R^y3)-、-OC(OR^y3)(R^y3a)-、-N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-和-OC(O)N(R^y3)-；

-R^y1和-R^y1a独立地选自-H、-T′、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基；其中-T′、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的-R^y2取代，和其中C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选插入有一个或多个选自如下的基团：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^y4)-、-S(O)₂N(R^y4)-、-S(O)N(R^y4)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-、-S-、-N(R^y4)-、-OC(OR^y4)(R^y4a)-、-N(R^y4)C(O)N(R^y4a)-和-OC(O)N(R^y4)-；

每个T′独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C_3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基；其中每个T′独立地任选被一个或多个相同或不同的-R^y2取代；

每个-R^y2独立地选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-C(O)OR^y5、-OR^y5、-C(O)R^y5、-C(O)N(R^y5)(R^y5a)、-S(O)₂N(R^y5)(R^y5a)、-S(O)N(R^y5)(R^y5a)、-S(O)₂R^y5、-S(O)R^y5、-N(R^y5)S(O)₂N(R^y5)(R^y5a)、-SR^y5、-N(R^y5)(R^y5a)、-NO₂、-OC(O)R^y5、-N(R^y5)C(O)R^y5a、-N(R^y5)S(O)₂R^y5a、-N(R^y5)S(O)R^y5a、-N(R^y5)C(O)OR^y5a、-N(R^y5)C(O)N(R^y5)(R^y5a)、-OC(O)N(R^y5)(R^y5a)和C_1-6烷基；其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；和

每个-R^y3、-R^y3a、-R^y4、-R^y4a、-R^y5、-R^y5a和-R^y5b独立地选自-H和C_1-6烷基；其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。

在一些实施方案中，-L²-选自-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^y1)-、-S(O)₂N(R^y1)-、-S(O)N(R^y1)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^y1)S(O)₂N(R^y1a)-、-S-、-N(R^y1)-、-OC(OR^y1)(R^y1a)-、-N(R^y1)C(O)N(R^y1a)-、-OC(O)N(R^y1)-、C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基；其中-T′-、C_1-20烷基、C_2-20烯基和C_2-20炔基任选被一个或多个相同或不同的-R^y2取代，和其中C_1-20烷基、C_2-20烯基和C_2-20炔基任选插入有一个或多个选自如下的基团：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^y3)-、-S(O)₂N(R^y3)-、-S(O)N(R^y3)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^y3)S(O)₂N(R^y3a)-、-S-、-N(R^y3)-、-OC(OR^y3)(R^y3a)-、-N(R^y3)C(O)N(R^y3a)-和-OC(O)N(R^y3)-；

-R^y1和-R^y1a独立地选自-H、-T′、C_1-10烷基、C_2-10烯基和C_2-10炔基；其中-T′、C_1-10烷基、C_2-10烯基和C_2-10炔基任选被一个或多个相同或不同的-R^y2取代，和其中C_1-10烷基、C_2-10烯基和C_2-10炔基任选插入有一个或多个选自如下的基团：-T′-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R^y4)-、-S(O)₂N(R^y4)-、-S(O)N(R^y4)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R^y4)S(O)₂N(R^y4a)-、-S-、-N(R^y4)-、-OC(OR^y4)(R^y4a)-、-N(R^y4)C(O)N(R^y4a)-和-OC(O)N(R^y4)-；

-R^y2选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-C(O)OR^y5、-OR^y5、-C(O)R^y5、-C(O)N(R^y5)(R^y5a)、-S(O)₂N(R^y5)(R^y5a)、-S(O)N(R^y5)(R^y5a)、-S(O)₂R^y5、-S(O)R^y5、-N(R^y5)S(O)₂N(R^y5a)(R^y5b)、-SR^y5、-N(R^y5)(R^y5a)、-NO₂、-OC(O)R^y5、-N(R^y5)C(O)R^y5a、-N(R^y5)S(O)₂R^y5a、-N(R^y5)S(O)R^y5a、-N(R^y5)C(O)OR^y5a、-N(R^y5)C(O)N(R^y5a)(R^y5b)、-OC(O)N(R^y5)(R^y5a)和C_1-6烷基；其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；和

-R^y1和-R^y1a独立地选自-H、-T′、C_1-10烷基、C_2-10烯基和C_2-10炔基；

每个T′独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C_3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基；

每个-R^y2独立地选自卤素和C_1-6烷基；和

在一些实施方案中，-L²-是C_1-20烷基链，其任选插入有一个或多个独立地选自如下的基团：-O-、-T′-和-C(O)N(R^y1)-；和所述C_1-20烷基链任选被一个或多个独立地选自如下的基团取代：-OH、-T′和-C(O)N(R^y6R^y6a)；其中-R^y1、-R^y6、-R^y6a独立地选自H和C_1-4烷基，和其中T′选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C_3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基。

在一些实施方案中，-L²-具有14g/mol至750g/mol的分子量范围。

在一些实施方案中，-L²-包含选自如下的部分：

其中虚线指分别与-L¹-、-L²-的剩余部分或Z连接；-R和-R^a独立地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2,2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基和3,3-二甲基丙基。

在一些实施方案中，缀合物的所有Z部分是相同的，条件是缀合物中存在多于一个Z部分。在一些实施方案中，本发明的缀合物包含多于一种类型的Z，例如两种、三种、四种或五种不同的Z部分。这种多于一种类型的Z可以与仅一种类型的-L²-连接或者可以与多于一种类型的-L²-连接。

在一些实施方案中，Z是任选被取代的脂肪酸部分。在一些实施方案中，Z是如WO2005/027978A2和WO 2014/060512 A1中公开的任选被取代的脂肪酸部分。

在一些实施方案中，Z是聚合部分，即包含至少一种聚合物的部分，例如选自如下的聚合物：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。在一些实施方案中，聚合部分包含基于PEG的聚合物。在一些实施方案中，聚合部分包含基于透明质酸的聚合物。

在一些实施方案中，Z是水不溶性的。

在一些实施方案中，Z包含水凝胶。该水凝胶可以是可降解的或不可降解的，即稳定的。在一些实施方案中，该水凝胶是可降解的。在一些实施方案中，该水凝胶是不可降解的。在一些实施方案中，该水凝胶包含一种或多种选自如下的聚合物：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。在一些实施方案中，水凝胶包含基于PEG或基于透明质酸的水凝胶。在一些实施方案中，Z包含基于PEG的水凝胶。在一些实施方案中，Z包含基于透明质酸的水凝胶。

在一些实施方案中，Z是如WO2006/003014、WO2011/012715A1、WO2014/056926A1或WO2020/064846A1中公开的水凝胶。

在一些实施方案中，Z是如WO 2013/036847 A1中所述的水凝胶。特别地，在一些实施方案中，Z是通过包括如下步骤的方法生产的水凝胶：使至少第一种反应活性聚合物与可裂解交联剂化合物反应，其中所述可裂解交联剂化合物包含与第一种反应活性聚合物反应的第一种官能团-Y¹和还包含在生理条件下通过消除而裂解的部分，其中所述部分包含与第二种反应活性聚合物反应的第二种官能团-Y²。在一些实施方案中，可裂解交联剂化合物具有式(PL-1)：

其中

m是0或1；

-X包含可在生理条件下消除的能够与反应活性聚合物结合的官能团和所述第二种官能团-Y²；

-R¹、-R²和-R⁵中的至少一个包含能够与聚合物结合的所述第一种官能团-Y¹；

-R¹和-R²中的一个且仅一个选自-H、烷基、芳基烷基和杂芳基烷基；

任选地，-R¹和-R²可以一起形成3-至8-元环；

-R¹和-R²中至少一个或两个独立地选自-CN、-NO₂、芳基、杂芳基、烯基、炔基、-COR³、-SOR³、-SO₂R³和-SR⁴；

-R³选自-H、烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、-OR⁹和-NR⁹ ₂；

-R⁴选自烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基和杂芳基烷基；

每个-R⁵独立地选自-H、烷基、烯基烷基、炔基烷基、(OCH₂CH₂)_pO-烷基且p为1至1000的整数、芳基、芳基烷基、杂芳基和杂芳基烷基；

每个-R⁹独立地选自-H和烷基，或者两个-R⁹与它们所连接的氮一起形成杂环；

和其中式(PL-1)的部分是任选进一步被取代的。

在一些实施方案中，式(PL-1)的-X选自琥珀酰亚氨基碳酸酯、磺基琥珀酰亚氨基碳酸酯卤化物、硫醚、酯、硝基苯基碳酸酯、氯甲酸酯、氟甲酸酯、任选被取代的苯酚和式(PL-2)：

其中

虚线表示与式(PL-1)的剩余部分连接；

-T*-选自-O-、-S-和-NR⁶-；

z是选自1、2、3、4、5和6的整数；

-X’-不存在或选自-OR⁷-和-SR⁷-；

-Y²是能够与反应活性聚合物结合的官能团；

-R⁶选自-H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基；和

-R⁷选自亚烷基、亚苯基和(OCH₂CH₂)_p，其中p为1至1000的整数。

在一些实施方案中，式(PL-1)的-X包含活化碳酸酯，例如琥珀酰亚氨基碳酸酯、磺基琥珀酰亚氨基碳酸酯或硝基苯基碳酸酯。在一些实施方案中，式(PL-1)的-X包含羰基卤，例如O(C＝O)Cl或O(C＝O)F。在一些实施方案中，式(PL-1)的-X具有式(PL-2)。在一些实施方案中，式(PL-1)的-X是OR⁷或SR⁷，其中R⁷是任选被取代的亚烷基、任选被取代的亚苯基或(OCH₂CH₂)_p，其中p是1至1000。

在一些实施方案中，式(PL-2)的p是1至100的整数。在一些实施方案中，式(PL-2)的p是1至10的整数。

在一些实施方案中，式(PL-1)的-Y¹和式(PL-2)的-Y²独立地包含N₃、NH₂、NH-CO₂ ^tBu、SH、S^tBu、马来酰亚胺、CO₂H、CO₂ ^tBu、1,3-二烯、环戊二烯、呋喃、炔、环辛炔、丙烯酸酯或丙烯酰胺，其中^tBu是叔丁基，和其中当-Y¹或-Y²之一包含N₃时，另一个不包含炔或环辛炔；当-Y¹或-Y²之一包含SH时，另一个不包含马来酰亚胺、丙烯酸酯或丙烯酰胺；当-Y¹或-Y²之一包含NH₂时，另一个不包含CO₂H；和当-Y¹或-Y²之一包含1,3-二烯或环戊二烯时，另一个不包含呋喃。

在一些实施方案中，可裂解交联剂化合物具有式(PL-3)：

其中

m是0或1；

n是选自1至1000的整数；

s是0、1或2；

t选自2、4、8、16和32；

-W-选自-O(C＝O)O-、-O(C＝O)NH-、-O(C＝O)S-、-O(C＝O)NR⁶CH₂O-和-O(C＝O)NR⁶S-；

-Q是化合价＝t的核心基团；其结合可裂解交联化合物的多个臂；

其中t是选自2、4、8、16和32的整数；和

其中-R¹、-R²和-R⁵如式(PL-1)中所定义。

在一些实施方案中，式(PL-3)的t是2。在一些实施方案中，式(PL-3)的t是4。在一些实施方案中，式(PL-3)的t是8。在一些实施方案中，式(PL-3)的t是16。在一些实施方案中，式(PL-3)的t是32。

在一些实施方案中，式(PL-3)的-Q具有选自如下的结构：

其中虚线指与可裂解交联剂化合物的剩余部分连接。

在一些实施方案中，式(PL-3)的-Q具有结构(PL-3-i)。在一些实施方案中，式(PL-3)的-Q具有结构(PL-3-ii)。在一些实施方案中，式(PL-3)的-Q具有结构(PL-3-iii)。

在一些实施方案中，可裂解交联剂化合物具有式(PL-3)，其中m是0，n是大约100，s是0，t是4，-W-是-O(C＝O)NH-，-Q具有结构(PL-3i)，-R²是H，一个-R⁵是-H和另一个-R⁵是(CH₂)₅N₃，和-R¹是(4-氯苯基)SO₂、被-SO₂取代的苯基、吗啉代-SO₂、或-CN。

在一些实施方案中，式(PL-3)的-Y¹包含N₃、NH₂、NH-CO₂ ^tBu、SH、S^tBu、马来酰亚胺、CO₂H、CO₂ ^tBu、1,3-二烯、环戊二烯、呋喃、炔、环辛炔、丙烯酸酯或丙烯酰胺，其中^tBu是叔丁基。

在一些实施方案中，式(PL-1)或(PL-3)的-Y¹和式(PL-2)的-Y²各自独立地是N₃、NH₂、NH-CO₂ ^tBu、SH、S^tBu、马来酰亚胺、CO₂H、CO₂ ^tBu、1,3-二烯、环戊二烯、呋喃、炔、环辛炔、丙烯酸酯或丙烯酰胺。

在一些实施方案中，-Y¹和-Y²之一是叠氮，且另一个是选自乙炔、环辛炔和马来酰亚胺的反应活性官能团。在一些实施方案中，-Y¹和-Y²之一是硫羟，且另一个是选自马来酰亚胺、丙烯酸酯、丙烯酰胺、乙烯基砜、乙烯基磺酰胺基和卤代羰基的反应活性官能团。在一些实施方案中，-Y¹和-Y²之一是胺，且另一个是选自羧酸和活化羧酸的选择性反应活性官能团。在一些实施方案中，-Y¹和-Y²之一是马来酰亚胺，且另一个是选自1,3-二烯、环戊二烯和呋喃的选择性反应活性官能团。

在一些实施方案中，第一种和任意第二种聚合物选自均聚或共聚的聚乙二醇、聚丙二醇、聚(N-乙烯基吡咯烷酮)、聚甲基丙烯酸酯、聚磷腈(polyphosphazenes)、聚交酯、聚丙烯酰胺、聚乙醇酸盐(polyglycolates)、聚乙烯亚胺、琼脂糖、葡聚糖、明胶、胶原、聚赖氨酸、壳聚糖、海藻酸盐、透明质烷、果胶和角叉菜胶，它们包含适宜的反应活性官能团或具有式[Y³-(CH₂)_s(CH₂CH₂O)_n]_tQ，其中-Y³是反应活性官能团，s是0、1或2，n是选自10至1000的整数，-Q是具有化合价t的核心基团，且t是选自2、4、8、16和32的整数。

在一些实施方案中，第一种聚合物包含多臂聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少三个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少四个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少五个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少六个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少七个臂。在一些实施方案中，第一种聚合物包含至少八个臂。

在一些实施方案中，第二种聚合物包含多臂聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少三个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少四个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少五个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少六个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少七个臂。在一些实施方案中，第二种聚合物包含至少八个臂。

在一些实施方案中，第一种聚合物包含2-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含4-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含8-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含16-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第一种聚合物包含32-臂聚乙二醇聚合物。

在一些实施方案中，第二种聚合物包含2-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含4-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含8-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含16-臂聚乙二醇聚合物。在一些实施方案中，第二种聚合物包含32-臂聚乙二醇聚合物。

在一些实施方案中，第一种和第二种反应活性聚合物顺序或同时与所述可裂解交联剂化合物反应。

在一些实施方案中，第一种和第二种官能团是相同的。

仅仅在(PL-1)、(PL-2)和(PL-3)的上下文中，所用术语具有以下含义：

术语“能够在生理条件下通过消除而裂解的部分”指包含基团H-C-(CH＝CH)_m-C-X’的结构，其中m是0或1，且X’是离去基，其中如上所述除去HX’元件的消除反应可以以使得在pH和温度的生理条件下的反应半衰期为1至10,000小时的速率进行。优选地，在pH和温度的生理条件下的反应半衰期为1至5,000小时、更优选1至1,000小时。pH和温度的生理条件指7至8的pH和30至40摄氏度的温度。

术语“反应活性聚合物和反应活性寡聚物”指这样的聚合物或寡聚物：其包含对其它官能团具有反应活性的官能团，更优选在可与肽、蛋白质和其它生物分子的稳定性要求相容的温和条件下。在反应活性聚合物中发现的适宜的官能团包括马来酰亚胺、硫羟或被保护的硫羟、醇、丙烯酸酯、丙烯酰胺、胺或被保护的胺、羧酸或被保护的羧酸、叠氮、炔且包括环炔、1,3-二烯且包括环戊二烯和呋喃、α-卤代羰基和N-羟基琥珀酰亚氨基、N-羟基磺基琥珀酰亚氨基或硝基苯基酯或碳酸酯。

术语“能够与反应活性聚合物结合的官能团”指与反应活性聚合物的相应官能团反应以形成与聚合物的共价键合的官能团。适宜的能够与反应活性聚合物结合的官能团包括马来酰亚胺、硫羟或被保护的硫羟、丙烯酸酯、丙烯酰胺、胺或被保护的胺、羧酸或被保护的羧酸、叠氮、炔且包括环炔、1,3-二烯且包括环戊二烯和呋喃、α-卤代羰基和N-羟基琥珀酰亚氨基、N-羟基磺基琥珀酰亚氨基、或硝基苯基酯或碳酸酯。

术语“取代的”指烷基、烯基、炔基、芳基或杂芳基基团包含一个或多个取代基代替一个或多个氢原子。取代基通常可以选自：卤素，包括F、CI、Br和I；低级烷基，包括线性、分支和环状；低级卤代烷基，包括氟烷基、氯烷基、溴烷基和碘烷基；OH；低级烷氧基，包括线性、分支和环状；SH；低级烷基硫基，包括线性、分支和环状；氨基、烷基氨基、二烷基氨基、硅烷基且包括烷基硅烷基、烷氧基硅烷基和芳基硅烷基；硝基；氰基；羰基；羧酸、羧酸酯、羧酸酰胺；氨基羰基；氨基酰基；氨甲酸酯；脲；硫代氨甲酸酯；硫脲；酮；磺基；磺酰胺；芳基，包括苯基、萘基和蒽基；杂芳基，包括5-元杂芳基，包括例如吡咯、咪唑、呋喃、噻吩、噁唑、噻唑、异噁唑、异噻唑、噻二唑、三唑、噁二唑和四唑，6-元杂芳基，包括吡啶、嘧啶、吡嗪，和稠合杂芳基，包括苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并咪唑、吲哚、苯并噻唑、苯并异噁唑和苯并异噻唑。

R¹和R²的性质可以通过供电子或吸电子取代基的任选加成进行改变。术语“供电子基团”指导致R¹R²CH的酸度降低的取代基；供电子基团通常与负性Hammettσ或Taftσ*常数相关，是物理有机化学领域熟知的(Hammett常数指芳基/杂芳基取代基，Taft常数指非芳族部分上的取代基)。适宜的供电子取代基的实例包括低级烷基、低级烷氧基、低级烷基硫基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基和硅烷基。

术语“吸电子基团”指导致R¹R²CH的酸度增加的取代基；吸电子基团通常与正性Hammettσ或Taftσ*常数相关，是物理有机化学领域熟知的。适宜的吸电子取代基的实例包括卤素、二氟甲基、三氟甲基、硝基、氰基、C(＝O)-R^x，其中-R^x是H、低级烷基、低级烷氧基或氨基，或S(O)_mR^Y，其中m是1或2且-R^Y是低级烷基、芳基或杂芳基。如本领域熟知的，取代基的电子影响可取决于取代基的位置。例如，芳基环的邻位或对位上的烷氧基取代基是供电子的，通过负性Hammettσ常数表征，而芳基环的间位上的烷氧基取代基是吸电子的，通过正性Hammettσ常数表征。

术语“烷基”、“烯基”和“炔基”包括1-8个碳或1-6个碳或1-4个碳的线性、分支或环状烃基团，其中烷基是饱和烃，烯基包括一条或多条碳-碳双键，和炔基包括一条或多条碳-碳三键。除非另有说明，否者这些含有1-6个碳。

术语“芳基”包括6-18个碳、优选6-10个碳的芳族烃基团，包括诸如苯基、萘基和蒽基的基团。术语“杂芳基”包括包含3-15个碳的含有至少一个N、O或S原子的芳族环，优选包含3-7个碳的含有至少一个N、O或S原子，包括诸如吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基、茚基等的基团。

术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。

术语“马来酰亚胺”是具有式的基团。

在一些实施方案中，Z是如WO 2020/206358 A1中所述的水凝胶。特别地，在一些实施方案中，Z是通过包括下述步骤的方法产生的水凝胶：

(a)提供包含多臂聚合物-P²的第一种预聚物，其中所述第一种预聚物具有式(PL-4)

其中

n是选自0、1、2、3、4、5和6的整数；

r是高于2的整数；

-Y是用于将所述第一种预聚物与第二种预聚物结合的反应活性官能团；

-R¹和-R²独立地是吸电子基团、烷基或-H，和其中-R¹和-R²是中至少一个是吸电子基团；

每个-R⁴独立地是C₁-C₃烷基，或者两个-R⁴与它们所连接的碳原子一起形成3-至6-元环；

-W-不存在或者是

其中标有星号的虚线表示与-NH-连接，未标记的虚线表示与-P²连接；

x、y和z各自独立地是选自0、1、2、3、4、5和6的整数；

-B’是-NH₂、-ONH₂、酮、醛、-SH、-OH、-CO₂H、氨甲酰基团或包含环辛炔或双环壬炔的基团；和

-C*是氨甲酰、硫醚、硫代琥珀酰亚氨基、三唑或肟；

(b)提供包含多臂聚合物-P¹的第二种预聚物，其中每个臂的末端是与步骤(a)的-Y反应的反应活性官能团-Y”；

(c)在其中-Y和-Y”反应形成链接-Y*-的条件下将步骤(a)和(b)的两种预聚物混合；和任选地

(d)分离所得水凝胶。因此，Z是可通过上述方法获得的水凝胶。在一些实施方案中，通过前述方法产生的水凝胶是可降解的。

在一些实施方案中，-Y和-Y”在步骤(c)中反应形成包含式(PL-4′)的交联的不溶性水凝胶基质：

其中n、r、-P¹、-Y*-、-R⁴、-R¹、-R²、-W-和-P²如上文定义。

在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是选自1、2、3、4、5和6的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是选自1、2和3的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是选自0、1、2和3的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是1。在一些实施方案中，n的式(PL-4)是2。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的n是3。

在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的多臂-P²是r-臂聚合物，其中r是选自2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是选自2、3、4、5、6、7和8的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是选自2、4、6和8的整数。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是2。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是4。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是6。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的r是8。

在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有至少1kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有1至100kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有1至80kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有1至60kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有1至40kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有1至20kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有1至10kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有1至5kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有约20kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有约40kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有约60kDa的分子量。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-P²具有约80kDa的分子量。

在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹是r-臂聚合物，其中r是选自2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12的整数。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P¹是r-臂聚合物，其中r是选自2、3、4、5、6、7和8的整数。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P¹是r-臂聚合物，其中r是选自2、4、6和8的整数。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P¹是r-臂聚合物，其中r是2。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P¹是r-臂聚合物，其中r是4。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P¹是r-臂聚合物，其中r是6。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂-P¹是r-臂聚合物，其中r是8。

在一些实施方案中，步骤(b)的-P¹具有至少1kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有1至100kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有1至80kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有1至60kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有1至40kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有1至20kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有1至10kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有1至5kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有约20kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有约40kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有约60kDa的分子量。在一些实施方案中，步骤(b)的多臂聚合物-P¹具有约80kDa的分子量。

在一些实施方案中，步骤(b)的-P¹和式(PL-4)或(PL-4′)的-P²包含聚乙二醇(PEG)、聚氧化乙烯(PEO)、聚乙烯亚胺(PEI)、葡聚糖、透明质酸或其共聚物。在一些实施方案中，步骤(b)的-P¹和式(PL-4)或(PL-4′)的P²是基于PEG的聚合物。在一些实施方案中，步骤(b)的-P¹和式(PL-4)或(PL-4′)的-P²是基于透明质酸的聚合物。

在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²独立地是吸电子基团、烷基或-H，和其中-R¹和-R²中的至少一个是吸电子基团。

在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是-CN、-NO₂、任选被取代的芳基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的烯基、任选被取代的炔基、-COR³、-SOR³、或-SO₂R³，其中-R³是-H、任选被取代的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂芳基烷基、-OR⁸或-NR⁸ ₂，其中每个-R⁸是独立地-H或任选被取代的烷基，或者两个-R⁸基团与它们所连接的氮一起形成杂环；或-SR⁹，其中-R⁹是任选被取代的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、或任选被取代的杂芳基烷基。

在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是-CN。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是-NO₂。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的含6至10个碳的芳基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的苯基、萘基或蒽基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的包含3至7个碳和含有至少一个N、O或S原子的杂芳基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基或茚基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的含2至20个碳原子的烯基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是任选被取代的含2至20个碳原子的炔基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是-COR³、-SOR³或-SO₂R³，其中R³是-H、任选被取代的含1至20个碳原子的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、任选被取代的杂芳基烷基、-OR⁸或-NR⁸ ₂，其中每个-R⁸是独立地-H或任选被取代的含1至20个碳原子的烷基，或者两个-R⁸基团与它们所连接的氮一起形成杂环。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²的吸电子基团是-SR⁹，其中-R⁹是任选被取代的含1至20个碳原子的烷基、任选被取代的芳基、任选被取代的芳基烷基、任选被取代的杂芳基、或任选被取代的杂芳基烷基。在一些实施方案中，-R¹和-R²中的至少一个是-CN或-SO₂R³。

在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²中的至少一个是-CN、-SOR³或-SO₂R³。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²中的至少一个是-CN或-SO₂R³。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²中的至少一个是-CN或-SO₂R³，其中-R³是任选被取代的烷基、任选被取代的芳基或-NR⁸ ₂。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的-R¹和-R²中的至少一个是-CN、-SO₂N(CH₃)₂、-SO₂CH₃、被-SO₂取代的苯基、被-SO₂和-Cl取代的苯基、-SO₂N(CH₂CH₂)₂O、-SO₂CH(CH₃)₂、-SO₂N(CH₃)(CH₂CH₃)、或-SO₂N(CH₂CH₂OCH₃)₂。

在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的每个-R⁴独立地是C₁-C₃烷基或一起可以形成3-至6-元环。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的每个-R⁴独立地是C₁-C₃烷基。在一些实施方案中，式(PL-4)或(PL-4′)的两个-R⁴是甲基。

在一些实施方案中，-Y和-Y”独立地选自胺、氨基氧基、酮、醛、马来酰亚氨基、硫羟、醇、叠氮、1,2,4,6-四嗪、反式环辛烯基、双环壬炔基、环辛炔基及其被保护的变体。

在一些实施方案中，Y和Y”可以相互反应，例如以选择性方式。例如，当-Y是胺时，-Y”是羧酸、活性酯或活性碳酸酯以产生残留的结合官能团-Y*-，其为酰胺或氨甲酸酯。作为另一个实例，当-Y是叠氮时，-Y”是炔基、双环壬炔基或环辛炔基以产生残留的结合官能团-Y*-，其为1,2,3-三唑。作为另一个实例，当-Y是NH₂O时，-Y”是酮或醛以产生残留的结合官能团-Y*-，其为肟。作为另一个实例，当-Y是SH时，-Y”是马来酰亚胺或卤代羰基以产生残留的结合官能团-Y*-，其为硫代琥珀酰亚氨基或硫醚。类似地，-Y和-Y”的这些作用可以倒转，以产生相反方向的-Y*-。

在一些实施方案中，-Y*-包含酰胺、肟、1,2,3-三唑、硫醚、硫代琥珀酰亚胺或醚。在一些实施方案中，-Y*-是-L²-。

这些结合反应可以在本领域已知的条件下进行，例如当-Y是叠氮且Y”是环辛炔时，结合可以在其中两种组分都显示出足够溶解度的任意溶剂中发生，尽管已知水溶液显示出更有利的反应速率。当在适当的溶剂、通常是水性缓冲液(当Y和Y”是叠氮/环辛炔时pH为2至7和当Y和Y”为活化酯和胺时pH为6至9)中混合时，Y和Y”基团反应形成包含式(PL-4′)的交联的不溶性水凝胶基质。该过程可以在原料相中进行，或者在混合有机/水系统中在乳化条件下进行以形成适合注射的微粒混悬液如微球。

在一些实施方案中，包含水凝胶Z的缀合物是通过包括如下步骤的方法生产的：

(a)提供式(PL-4)的第一种预聚物，

(b)使式(PL-4)的预聚物与式(PL-5)的连接子-药物反应，

其中

n、-R¹、-R²、-R⁴和-Y如式(PL-4)中定义；

-D是药物部分；

当-D是通过胺连接的药物部分时，-X-不存在；或者当-D是通过苯酚、醇、硫醇、苯硫酚、咪唑或非碱性胺连接的药物部分时，-X-是-N(R⁶)CH₂-；其中-R⁶是任选被取代的C₁-C₆烷基、任选被取代的芳基、或任选被取代的杂芳基；

以便式(PL-5)的-Y与式(PL-4)的-B’反应；

(c)提供包含多臂聚合物-P¹的第二预聚物，其中每个臂的末端是反应活性官能团-Y”，其与步骤(a)的-Y反应，和其中对-P¹的实施方案如上文所述；

(d)将步骤(a)和(b)的两种预聚物在其中-Y和-Y”反应形成残余的结合官能团-Y*-的条件下混合；和任选地

(e)分离所得水凝胶。

在一些实施方案中，缀合物是通过包括使水凝胶Z与式(PL-5)的连接子-药物反应的步骤的方法获得的，其中水凝胶Z上的-B’与式(PL-5)的-Y反应。

仅在式(PL-4)、(PL-4′)和(PL-5)的上下文中，所用术语具有如下含义：

术语“烷基”指1至20、1至12、1至8、1至6、或1至4个碳原子的直链、支链或环状饱和烃基。在一些实施方案中，烷基是直链或支链的。直链或支链烷基基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基和正癸基。在一些实施方案中，烷基是环状的。环烷基基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊二烯基和环己基。

术语“烯基”指具有碳-碳双键和2-20个、2-12个、2-8个、2-6个或2-4个碳原子的非芳族不饱和烃。

术语“炔基”指具有碳-碳三键和2-20个、2-12个、2-8个、2-6个或2-4个碳原子的非芳族不饱和烃。

术语“芳基”指6-18个碳、优选6-10个碳的芳族烃基团，包括诸如苯基、萘基和蒽基的基团。术语“杂芳基”指包含3-15个碳的包含至少一个N、O或S原子、优选3-7个碳的包含至少一个N、O或S原子的芳族环，包括诸如吡咯基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、喹啉基、吲哚基和茚基的基团。

在一些实施方案中，烯基、炔基、芳基或杂芳基部分可以通过烷基链接偶联至分子的剩余部分。在那些情况下，取代基将被称为烯基烷基、炔基烷基、芳基烷基或杂芳基烷基，表示亚烷基部分在烯基、炔基、芳基或杂芳基部分和所述烯基、炔基、芳基或杂芳基偶联的分子之间。

术语“卤素”或“卤代”指溴、氟、氯或碘。

术语“杂环”或“杂环基”指包含至少一个N、O或S原子的3-至15-元芳族或非芳族环。实例包括哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吡咯烷和四氢呋喃基以及上文对术语“杂芳基”提供的示例性基团。在一些实施方案中，杂环或杂环基是非芳族的。在一些实施方案中，杂环或杂环基是芳族的。

术语“任选取代”指基团可以是未被取代的或者被一个或多个(例如1、2、3、4或5个)可以相同或不同的取代基取代。取代基的实例包括烷基、烯基、炔基、卤素、-CN、-OR^aa、-SR^aa、-NR^aaR^bb、-NO₂、-C＝NH(OR^aa)、-C(O)R^aa、-OC(O)R^aa、-C(O)OR^aa、-C(O)NR^aaR^bb、-OC(O)NR^aaR^bb、-NR^aaC(O)R^bb、-NR^aaC(O)OR^bb、-S(O)R^aa、-S(O)₂R^aa、-NR^aa S(O)R^bb、-C(O)NR^aaS(O)R^bb、-NR^aaS(O)₂R^bb、-C(O)NR^aaS(O)₂R^bb、-S(O)NR^aaR^bb、-S(O)₂NR^aa R^bb、-P(O)(OR^aa)(OR^bb)、杂环基、杂芳基或芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、杂芳基和芳基各自独立地任选被-R^cc取代，其中-R^aa和-R^bb各自独立地是-H、烷基、烯基、炔基、杂环基、杂芳基或芳基，或者-R^aa和-R^bb与它们连接的氮原子一起形成杂环基，其任选被烷基、烯基、炔基、卤素、羟基、烷氧基或-CN取代，和其中：每个-R^cc独立地是烷基、烯基、炔基、卤素、杂环基、杂芳基、芳基、-CN或-NO₂。

在一些实施方案中，Z是如WO2018/175788A1中公开的基于透明质酸的水凝胶。在一些实施方案中，Z是如WO2020/064847A1中公开的基于透明质酸的水凝胶。

在一些实施方案中，Z是水溶性聚合部分。

在一些实施方案中，Z包含选自直链、支链、树枝状、多臂或环状聚合物或其组合的聚合物。在一些实施方案中，Z包含直链聚合物。在一些实施方案中，Z是基于PEG的支链聚合物。在一些实施方案中，Z是具有一个、两个、三个、四个、五个或六个分支点的基于PEG的支链聚合物。在一些实施方案中，Z是具有一个、两个或三个分支点的基于PEG的支链聚合物。在一些实施方案中，Z是具有一个分支点的基于PEG的支链聚合物。在一些实施方案中，Z是具有两个分支点的基于PEG的支链聚合物。在一些实施方案中，Z是具有三个分支点的基于PEG的支链聚合物。在一些实施方案中，Z是具有四个分支点的基于PEG的支链聚合物。在一些实施方案中，分支点选自-N<、-CH<和>C<。在一些实施方案中，Z包含树枝状聚合物。在一些实施方案中，Z包含多臂聚合物，例如包含3、4、5、6、7或8个臂的聚合物。在一些实施方案中，Z包含包括3个臂的多臂聚合物。在一些实施方案中，Z包含包括4个臂的多臂聚合物。在一些实施方案中，Z包含包括5个臂的多臂聚合物。在一些实施方案中，Z包含包括6个臂的多臂聚合物。在一些实施方案中，Z包含包括7个臂的多臂聚合物。在一些实施方案中，Z包含包括8个臂的多臂聚合物。在一些实施方案中，Z包含环状聚合物。在一些实施方案中，Z包含包括选自直链、支链、树枝状、多臂或环状聚合物的聚合物任意组合的聚合物。

如果Z是水溶性聚合部分，该聚合部分可以具有1kDa至1000kDa的分子量范围，包括端值。在一些实施方案中，Z具有5kDa至1000kDa的分子量范围，包括端值。在一些实施方案中，Z具有6kDa至500kDa的分子量范围，包括端值。在一些实施方案中，Z具有7kDa至250kDa的分子量范围，包括端值。在一些实施方案中，Z具有10kDa至150kDa的分子量范围，包括端值。在一些实施方案中，Z具有12kDa至100kDa的分子量范围，包括端值。在一些实施方案中，Z具有15kDa至80kDa的分子量范围，包括端值。在一些实施方案中，Z具有10kDa至80kDa的分子量范围，包括端值。在一些实施方案中，Z具有约80kDa的分子量。在一些实施方案中，Z具有约70kDa的分子量。在一些实施方案中，Z具有约60kDa的分子量。在一些实施方案中，Z具有约50kDa的分子量。在一些实施方案中，Z具有约40kDa的分子量。在一些实施方案中，Z具有约30kDa的分子量。在一些实施方案中，Z具有约20kDa的分子量。在一些实施方案中，Z具有约10kDa的分子量。在一些实施方案中，Z具有约5kDa的分子量。

在一些实施方案中，Z是包含选自如下的聚合物的水溶性聚合部分：2-异丁烯酰基-氧基乙基磷酰基胆碱、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚烷基氧基聚合物、聚酰胺、聚酰胺型胺、聚氨基酸、聚酐、聚天冬酰胺、聚丁酸、聚乙醇酸、聚对苯二甲酸丁二酯、聚己酸内酯、聚碳酸酯、聚氰基丙烯酸酯、聚二甲基丙烯酰胺、聚酯、聚乙烯、聚乙二醇、聚氧化乙烯、聚磷酸乙酯、聚(乙基噁唑啉)、聚乙醇酸、聚(羟基乙基丙烯酸酯)、聚(羟基乙基-噁唑啉)、聚(羟基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基甲基丙烯酰胺)、聚(羟基丙基甲基丙烯酸酯)、聚(羟基丙基噁唑啉)、聚(亚胺碳酸酯)、聚乳酸、聚乳酸-乙醇酸共聚物、聚甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基噁唑啉、聚有机磷腈、聚原酸酯、聚噁唑啉、聚丙二醇、聚硅氧烷、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯胺、聚乙烯基甲基醚、聚乙烯吡咯烷酮、硅酮、纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、壳多糖、壳聚糖、葡聚糖、糊精、明胶、透明质酸和衍生物、官能化透明质酸、甘露聚糖、果胶、鼠李半乳糖醛酸聚糖、淀粉、羟烷基淀粉、羟乙基淀粉及其它基于碳水化合物的聚合物、木聚糖及其共聚物。

在一些实施方案中，Z是包含蛋白质的水溶性聚合部分，所述蛋白质例如是选自如下的蛋白质：如US2012/0035101 A1中所述的绒毛膜促性腺激素的羧基-末端肽；白蛋白；如WO 2011123813A2中所述的XTEN序列；如WO 2011/144756 A1中所述的脯氨酸/丙氨酸无规卷曲序列；如WO 2008/155134 A1和WO 2013/024049 A1中所述的脯氨酸/丙氨酸/丝氨酸无规卷曲序列；和Fc-融合蛋白。

在一些实施方案中，Z包含无规卷曲蛋白质部分，其形成所述无规卷曲蛋白质部分的氨基酸总数的至少80％、在一些实施方案中至少85％、在一些实施方案中至少90％、在一些实施方案中至少95％、在一些实施方案中至少98％和在一些实施方案中至少99％选自丙氨酸和脯氨酸。在一些实施方案中，该无规卷曲蛋白质部分的氨基酸残基总数的至少10％、但少于75％、在一些实施方案中少于65％是脯氨酸残基。在一些实施方案中，该无规卷曲蛋白质部分是如WO 2011/144756A1中所述。在一些实施方案中，Z包含至少一个选自如下的部分：如WO2011/144756中公开的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ IDNO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ IDNO:17、SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:61，该文献通过引用并入本文。包含这类包含丙氨酸和脯氨酸的无规卷曲蛋白质部分的部分将称为“PA”或“PA部分”。因此，在一些实施方案中，Z包含PA部分。

在一些实施方案中，Z包含无规卷曲蛋白质部分，其形成所述无规卷曲蛋白质部分的氨基酸总数的至少80％、在一些实施方案中至少85％、在一些实施方案中至少90％、在一些实施方案中至少95％、在一些实施方案中至少98％和在一些实施方案中至少99％选自丙氨酸、丝氨酸和脯氨酸。在一些实施方案中，该无规卷曲蛋白质部分的氨基酸残基总数的至少4％、但少于40％是脯氨酸残基。在一些实施方案中，该无规卷曲蛋白质部分是如WO2008/155134 A1中所述。在一些实施方案中，Z包含至少一个选自如下的部分：如WO 2008/155134 A1中公开的SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:20、SEQ IDNO:22、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:28、SEQ ID NO:30、SEQ ID NO:32、SEQ IDNO:34、SEQ ID NO:36、SEQ ID NO:40、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:46、SEQ IDNO:50、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:56，该文献通过引用并入本文。包含这类包含丙氨酸、丝氨酸和脯氨酸的无规卷曲蛋白质部分的部分将称为“PAS”或“PAS部分”。因此，在一些实施方案中，Z包含PAS部分。

在一些实施方案中，Z包含无规卷曲蛋白质部分，其形成所述无规卷曲蛋白质部分的氨基酸总数的至少80％、在一些实施方案中至少85％、在一些实施方案中至少90％、在一些实施方案中至少95％、在一些实施方案中至少98％和在一些实施方案中99％选自丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸和脯氨酸。在一些实施方案中，该无规卷曲蛋白质部分是如WO 2010/091122A1中所述。在一些实施方案中，Z包含至少一个选自如下的部分：如WO2010/091122A1中公开的SEQ ID NO:182、SEQ ID NO:183、SEQ ID NO:184；SEQ ID NO:185、SEQ ID NO:186、SEQ ID NO:187、SEQ ID NO:188、SEQ ID NO:189、SEQ ID NO:190、SEQID NO:191、SEQ ID NO:192、SEQ ID NO:193、SEQ ID NO:194、SEQ ID NO:195、SEQ ID NO:196、SEQ ID NO:197、SEQ ID NO:198、SEQ ID NO:199、SEQ ID NO:200、SEQ ID NO:201、SEQID NO:202、SEQ ID NO:203、SEQ ID NO:204、SEQ ID NO:205、SEQ ID NO:206、SEQ ID NO:207、SEQ ID NO:208、SEQ ID NO:209、SEQ ID NO:210、SEQ ID NO:211、SEQ ID NO:212、SEQID NO:213、SEQ ID NO:214、SEQ ID NO:215、SEQ ID NO:216、SEQ ID NO:217、SEQ ID NO:218、SEQ ID NO:219、SEQ ID NO:220、SEQ ID NO:221、SEQ ID NO:759、SEQ ID NO:760、SEQID NO:761、SEQ ID NO:762、SEQ ID NO:763、SEQ ID NO:764、SEQ ID NO:765、SEQ ID NO:766、SEQ ID NO:767、SEQ ID NO:768、SEQ ID NO:769、SEQ ID NO:770、SEQ ID NO:771、SEQID NO:772、SEQ ID NO:773、SEQ ID NO:774、SEQ ID NO:775、SEQ ID NO:776、SEQ ID NO:777、SEQ ID NO:778、SEQ ID NO:779、SEQ ID NO:1715、SEQ ID NO:1716、SEQ ID NO:1718、SEQ ID NO:1719、SEQ ID NO:1720、SEQ ID NO:1721和SEQ ID NO:1722，该文献通过引用并入本文。包含这类包含丙氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸和脯氨酸的无规卷曲蛋白质部分的部分将根据其在WO 2010/091122 A1中的命名称为“XTEN”或“XTEN部分”。因此，在一些实施方案中，Z包含XTEN部分。

在一些实施方案中，Z包含至少60个、例如至少90个或至少120个弹性蛋白样肽结构单元，所述结构单元选自WO2021/030196中的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:13中的任一种。在一些实施方案中，Z包含WO2021/030196的SEQ ID NO:34的蛋白质。在一些实施方案中，Z包含WO2021/030196的SEQ ID NO:35的蛋白质。

在一些实施方案中，Z包含基于透明质酸的聚合物。

在一些实施方案中，Z包含如WO 2013/024047 A1中公开的聚合部分。在一些实施方案中，Z包含如WO 2013/024048 A1中公开的聚合部分。

在一些实施方案中，Z包含基于PEG的多臂聚合物。在一些实施方案中，Z包含基于PEG的多臂聚合物，其具有至少2个基于PEG的臂，例如2、3、4、5、6、7或8个基于PEG的臂。

在一些实施方案中，Z包含式(Z-i)的支链部分

其中

-BP¹<、-BP²<、-BP³<各自独立地选自-N<和-C(R⁸)<；

R⁸选自H、C_1-6烷基、C_2-6烯基和C_2-6炔基；

-P¹、-P²、-P³、-P⁴各自独立地是基于PEG的链，所述链包含至少40％ PEG和具有2至45kDa的分子量范围；

-C¹-、-C²-各自独立地选自C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基；其中C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选被一个或多个相同或不同的R⁹取代和其中C_1-50烷基、C_2-50烯基和C_2-50炔基任选插入有一个或多个选自如下的基团：-T-、-C(O)O-、-O-、-C(O)-、-C(O)N(R¹⁰)-、-S(O)₂N(R¹⁰)-、-S(O)N(R¹⁰)-、-S(O)₂-、-S(O)-、-N(R¹⁰)S(O)₂N(R^10a)-、-S-、-N(R¹⁰)-、-OC(OR¹⁰)(R^10a)-、-N(R¹⁰)C(O)N(R^10a)-、和-OC(O)N(R¹⁰)-；

每个T独立地选自苯基、萘基、茚基、茚满基、四氢萘基、C_3-10环烷基、3-至10-元杂环基、8-至11-元杂双环基、8-至30-元碳多环基和8-至30-元杂多环基；其中每个T独立地任选被一个或多个相同或不同的R⁹取代；

每个R⁹独立地选自卤素、-CN、氧代基(＝O)、-COOR¹¹、-OR¹¹、-C(O)R¹¹、-C(O)N(R¹¹R^11a)、-S(O)₂N(R¹¹R^11a)、-S(O)N(R¹¹R^11a)、-S(O)₂R¹¹、-S(O)R¹¹、-N(R¹¹)S(O)₂N(R^11aR^11b)、-SR¹¹,-N(R¹¹R^11a)、-NO₂、-OC(O)R¹¹、-N(R¹¹)C(O)R^11a、-N(R¹¹)S(O)₂R^11a、-N(R¹¹)S(O)R^11a、-N(R¹¹)C(O)OR^11a、-N(R¹¹)C(O)N(R^11aR^11b)、-OC(O)N(R¹¹R^11a)、和C_1-6烷基；其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代；和

每个R¹⁰、R^10a、R¹¹、R^11a和R^11b独立地选自-H和C_1-6烷基，其中C_1-6烷基任选被一个或多个相同或不同的卤素取代。

在一些实施方案中，式(Z-i)的BP¹是–N<。在一些实施方案中，式(Z-i)的BP²和BP²均为–CH<。如果第一个分支点BP¹和Z与-L¹-的链接位置被不多于某个数量的原子隔开，则是有利的。因此，在一些实施方案中，关键距离是少于60个原子，例如少于50个原子，例如少于40个原子，例如少于30个原子，例如少于20个原子或少于10个原子。术语“关键距离”指作为第一分支点BP¹和Z与-L¹-的连接位置之间的原子数目测定的最短距离。

在一些实施方案中，式(Z-i)的C¹和C²是插入有一个或多个选自-O-、-C(O)N(R¹⁰)-和3-至10元杂环基的基团的C_1-50烷基；其中所述3-至10元杂环基被至少一个氧代基(＝O)取代。

在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有约5至约40kDa的分子量范围。在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有约8至约25kDa的分子量范围。在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有约9至约22kDa的分子量范围。在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有约9至约15kDa的分子量范围。在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有10至12kDa的分子量范围。在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有约10kDa的分子量。在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有15至22kDa的分子量范围。在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有18至21kDa的分子量范围。在一些实施方案中，P¹、P²、P³和P⁴各自独立地具有约20kDa的分子量。

在一些实施方案中，式(Z-i)的C¹和C²具有式(Z-ia)

/>

其中

标有星号的虚线指示与BP¹连接；

未标记的虚线指示分别与BP2或BP3连接；

q1是1、2、3、4、5、6、7或8；

q2是1、2、3、4或5；

q3是1、2、3、4、5、6、7或8；

q4是1、2或3。

在一些实施方案中，式(Z-ia)的q1是4、5、6、7或8。在一些实施方案中，式(Z-ia)的q1是5、6或7。在一些实施方案中，式(Z-ia)的q1是6。在一些实施方案中，式(Z-ia)的q2是1、2或3。在一些实施方案中，式(Z-ia)的q3是2、3、4或5。在一些实施方案中，q3是2、3或4。在一些实施方案中，式(Z-ia)的q3是3。在一些实施方案中，式(Z-ia)的q4是1。

在一些实施方案中，式(Z-i)的P¹、P²、P³和P⁴各自独立地是式(Z-ib)

其中

虚线指示与R¹的剩余部分连接，即分别连接至BP²或BP³；

m是0或1；

p是45至1000的整数；和

q选自1、2、3、4、5、和6。

在一些实施方案中，式(Z-ib)的p的范围为115至900。在一些实施方案中，式(Z-ib)的p的范围为180至580。在一些实施方案中，式(Z-ib)的p的范围为200至340。在一些实施方案中，式(Z-ib)的p的范围为220至270。在一些实施方案中，式(Z-ib)的p的范围为220至240。在一些实施方案中，式(Z-ib)的p是约225。在一些实施方案中，式(Z-ib)的p的范围为340至500。在一些实施方案中，式(Z-ib)的p的范围为410至475。在一些实施方案中，式(Z-ib)的p是约450。

在一些实施方案中，Z包含式(Z-ic)的部分：

其中

p1、p2、p3和p4独立地是45至1000的整数。

在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是115至900的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是180至580的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是200至340的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是220至270的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是220至240的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是210至240的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是约225。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是340至500的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是410至475的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是420至480的整数。在一些实施方案中，p1、p2、p3和p4独立地是约450。

在一些实施方案中，生长激素缀合物是例如WO05099768 A2中所述的式(C-i)的缀合物

其中

-D是通过-D的胺官能团的氮与分子其余部分结合的hGH部分；和

p1、p2、p3和p4独立地是400至500的整数。

在一些实施方案中，式(C-i)的-D是SEQ ID NO:1的hGH部分。在一些实施方案中，式(C-i)的-D通过-D的赖氨酸侧链提供的胺官能团的氮与分子的其余部分结合。

在一些实施方案中，式(C-i)的p1、p2、p3和p4独立地是420至480的整数。在一些实施方案中，式(C-i)的p1、p2、p3和p4独立地是420至470的整数。在一些实施方案中，式(C-i)的p1、p2、p3和p4独立地是440至460的整数。在一些实施方案中，式(C-i)的p1、p2、p3和p4为约450。

在一些实施方案中，生长激素缀合物是例如WO2016/079114A1中所述的式(C-ii)的缀合物，

其中

-D是通过-D的胺官能团的氮与分子的其余部分结合的hGH部分；和

p1、p2、p3和p4独立地是200至250的整数。

在一些实施方案中，式(C-ii)的-D是SEQ ID NO:1的hGH部分。在一些实施方案中，式(C-ii)的-D通过-D的赖氨酸侧链提供的胺官能团的氮与分子的其余部分连接。

在一些实施方案中，式(C-ii)的p1、p2、p3和p4独立地是210至240的整数。在一些实施方案中，式(C-ii)的p1、p2、p3和p4独立地是220至240的整数。在一些实施方案中，式(C-ii)的p1、p2、p3和p4为约225。

如果长效GH具有式(C-ii)且-D具有SEQ ID NO:1，-D通过-D的赖氨酸侧链提供的胺官能团的氮与分子的其余部分连接，且p1、p2、p3和p4独立地是220至240的整数，则长效GH是隆培促生长素(lonapegsomatropin)，其在美国作为上市。

在一些实施方案中，长效生长激素选自曲更生长素(Somatrogon)、Albutropin、ARX201、ALTU-238、PHA-794428、hGH-OctoDex、Norditropin、Nutropin Depot、LB03002、Somatropin Biopartners、Efpegsomatropin、帕西生长素(Somapacitan)、Jintrolong、伊坦生长激素(Eftansomatropin)和TV-1106。在一些实施方案中，长效生长激素选自Somatrogen、Albutropin、Norditropin、Nutropin Depot、Somatropin Biopartners、Efpegsomatropin、帕西生长素(Somapacitan)、伊坦生长激素(Eftansomatropin)和Jintrolong。在一些实施方案中，长效生长激素是曲更生长素(Somatrogon)。在一些实施方案中，长效生长激素是Albutropin。在一些实施方案中，长效生长激素是ARX201。在一些实施方案中，长效生长激素是ALTU-238。在一些实施方案中，长效生长激素是PHA-794428。在一些实施方案中，长效生长激素是hGH-OctoDex。在一些实施方案中，长效生长激素是Norditropin。在一些实施方案中，长效生长激素是Nutropin Depot。在一些实施方案中，长效生长激素是LB03002。在一些实施方案中，长效生长激素是Somatropin Biopartners。在一些实施方案中，长效生长激素是Efpegsomatropin。在一些实施方案中，长效生长激素是帕西生长素(Somapacitan)。帕西生长素(Somapacitan)作为上市。在一些实施方案中，长效生长激素是TV-1106。在一些实施方案中，长效生长激素是Jintrolong。在一些实施方案中，长效生长激素是伊坦生长激素(Eftansomatropin)。/>

在另一方面，本发明涉及用于治疗炎症诱导的疾病的药物组合物，其包含至少一种长效生长激素和至少一种赋形剂，其中所述至少一种长效生长激素和所述治疗如本文其它地方所述。在一些实施方案中，该药物组合物具有pH3至pH8的pH，包括端点。在一些实施方案中，该药物组合物是混悬剂制剂。在一些实施方案中，该药物组合物是液体制剂。在一些实施方案中，该药物组合物是干制剂。

这类液体、混悬剂或干药物组合物包含至少一种赋形剂。胃肠外制剂中使用的赋形剂可以分类为例如缓冲剂、等张调节剂、防腐剂、稳定剂、抗吸收剂、氧化保护剂、粘度剂/增粘剂或其它辅料。但是，在一些情况中，一种赋形剂可以具有双重或三重功能。在一些实施方案中，本发明的药物组合物的至少一种赋形剂选自：

(i)缓冲剂：生理学上耐受的缓冲剂以维持pH在预期范围，例如磷酸钠、碳酸氢盐、琥珀酸盐、组氨酸、柠檬酸盐和乙酸盐、硫酸盐、硝酸盐、氯化物、丙酮酸盐；也可以使用抗酸剂，例如Mg(OH)₂或ZnCO₃；

(ii)等张调节剂：以使得在注射贮库处由于渗透压差引起的细胞损伤导致的疼痛最轻；实例有甘油和氯化钠；有效浓度可以通过渗透压测定法、使用假定的血清渗透压浓度285-315mOsmol/kg来确定；

(iii)防腐剂和/或抗菌剂：多剂量胃肠外制剂需要添加足以使患者在注射后感染的风险最低的浓度的防腐剂，已经制定了相应的监管要求；典型的防腐剂包括间甲酚、苯酚、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯、氯丁醇、苯甲醇、硝酸苯汞、硫柳汞(thimerosol)、山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸、氯甲酚和苯扎氯铵；

(iv)稳定剂：通过加强蛋白质稳定力、破坏变性状态或通过赋形剂与蛋白质直接结合来实现稳定；稳定剂可以是氨基酸如丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、脯氨酸，糖如葡萄糖、蔗糖、海藻糖，多元醇如甘油、甘露醇、山梨醇，盐如磷酸钾、硫酸钠，螯合剂如EDTA、六磷酸盐，配体如二价金属离子(锌、钙等)，其它盐或有机分子如酚衍生物；此外，还可以使用低聚物或聚合物如环糊精、葡聚糖、树枝状聚合物、PEG或PVP或鱼精蛋白或HAS；

(v)抗吸附剂：主要使用离子型或非离子型表面活性剂或其它蛋白质或可溶性聚合物来包覆或竞争吸附到制剂容器的内表面；例如，泊洛沙姆(Pluronic F-68)、PEG十二烷基醚(苄泽35)、聚山梨酯20和80、葡聚糖、聚乙二醇、PEG-聚组氨酸、BSA和HSA以及明胶；选择的赋形剂浓度和类型取决于要避免的作用，但是通常刚好高于CMC值在界面处形成单层表面活性剂；

(vi)氧化保护剂：抗氧化剂，例如抗坏血酸、依克多因(ectoine)、蛋氨酸、谷胱甘肽、一硫代甘油、桑色素、聚乙烯亚胺(PEI)、没食子酸丙酯和维生素E；也可以使用螯合剂如柠檬酸、EDTA、六磷酸盐和巯基乙酸；

(vii)增粘剂或粘度增加剂：延迟小瓶和注射器中颗粒的沉降，用于促进颗粒的混合和再混悬以及使混悬液更易于注射(即注射器柱塞上的力较小)；适宜的增粘剂或粘度增加剂是例如卡波姆增粘剂如Carbopol 940、Carbopol Ultrez 10、纤维素衍生物如羟丙基甲基纤维素(羟丙甲纤维素、HPMC)或二乙基氨基乙基纤维素(DEAE或DEAE-C)、胶体硅酸镁(Veegum)或硅酸钠、羟基磷灰石凝胶、磷酸三钙凝胶、黄原胶、角叉菜胶如Satia胶UTC30、脂肪族聚羟基酸如聚D,L-或L-乳酸(PLA)和聚乙醇酸(PGA)和它们的共聚物(PLGA)，D,L-丙交酯、乙交酯和己内酯的三元共聚物，泊洛沙姆、亲水性聚氧乙烯嵌段和疏水性聚氧丙烯嵌段以构成聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯的三嵌段(例如)、聚醚酯共聚物，例如聚对苯二甲酸乙二醇酯/聚对苯二甲酸丁二醇酯共聚物、乙酸异丁酸蔗糖酯(SAIB)、葡聚糖或其衍生物、葡聚糖和PEG的组合、聚二甲基硅氧烷、胶原蛋白、壳聚糖、聚乙烯醇(PVA)及其衍生物、聚烷基酰亚胺、聚(丙烯酰胺-共-二烯丙基二甲基铵(DADMA))、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、糖胺聚糖(GAGs)如硫酸皮肤素、硫酸软骨素、硫酸角质素、肝素、硫酸乙酰肝素、透明质酸，由疏水性A嵌段如聚丙交酯(PLA)或聚丙交酯-乙交酯(PLGA)和亲水性B嵌段如聚乙二醇(PEG)或聚乙烯吡咯烷酮组成的ABA三嵌段或AB嵌段共聚物，这类嵌段共聚物以及上述泊洛沙姆可表现出可逆的热胶凝行为(在室温下呈流体状态以促进施用，在注射后在体温处高于溶胶-凝胶转变温度呈凝胶状态)；

(viii)散布剂或扩散剂：通过细胞间隙中细胞外基质组分的水解来改变结缔组织的通透性，例如但不限于透明质酸(一种在结缔组织的细胞间隙中发现的多糖)；扩散剂，例如但不限于透明质酸酶暂时性地降低细胞外基质的粘度和促进注射药物的扩散；和

(ix)其它助剂：例如润湿剂、粘度调节剂、抗生素、透明质酸酶；酸和碱如盐酸和氢氧化钠是制备过程中调节pH值所必需的助剂。

在另一方面，本发明涉及长效生长激素用于治疗炎症诱导的疾病，其中施用长效生长激素抑制炎性单核细胞向炎症位置的募集。在一些实施方案中，炎症诱导的疾病是NAFLD，例如NASH。如果炎症诱导的疾病是NAFLD、特别是NASH，则炎症位置是肝脏。在一些实施方案中，如果炎症诱导的疾病是NAFLD、特别是NASH，则施用长效生长激素导致了肝脏中HLA-G的增加。在一些实施方案中，用于治疗炎症诱导的疾病的长效生长激素导致IGF-1水平的增加。

在一些实施方案中，用于治疗炎症诱导的疾病、例如NAFLD和特别是NASH的长效生长激素导致一种或多种选自细胞因子、趋化因子和其它转录和组织学标记物的肝脏炎症标记物的变化。在一些实施方案中，用于治疗炎症诱导的疾病、例如NAFLD和特别是NASH的长效生长激素导致纤维化的转录或组织学标记物的改善。

在一些实施方案中，用于治疗炎症诱导的疾病、例如NAFLD和特别是NASH的长效生长激素导致脂肪变性的减少。在一些实施方案中，用于治疗炎症引起的肝脏疾病、例如NAFLD和特别是NASH的长效生长激素导致肝脏再生。

长效生长激素和施用频率如本文其它地方所述。

实施例

实施例1

化合物1的合成

n＝200-250

化合物1可以如WO2016/079114A1中对化合物2(实施例2)所述进行合成，对应于隆培促生长素(lonapegsomatropin)。

实施例2

在雄性DIO-NASH小鼠中用化合物1处理2周对代谢参数、肝脏病理学和转录组学特征的影响

在前期研究中在给C57BL/6JRj小鼠单次注射化合物1(14.4mg/kg)后测定了血浆药代动力学性质，历经96小时收集血样。采用夹心ELISA测定了化合物1的血浆水平。所有的化合物1浓度是蛋白质(hGH)等同物。

给C57BL/6JRj小鼠(Janvier(法国,5周龄))喂食非酒精性脂肪性肝炎(NASH)诱导饮食达总共32周，所述饮食由40％脂肪、22％果糖和2％胆固醇组成(D09100310,SSNIFF,德国)。

通过手术从麻醉动物采集肝活检物，将其在10％中性缓冲福尔马林中固定用于组织学检查。基于对天狼猩红和苏木精和伊红(HE)染色肝脏组织的评价，选择根据基于Kleiner的评分系统(Kleiner,2005Hepatology,2005年1月；41(6):1313-21.doi:10.1002/hep.20701.PMID:15915461)脂肪变性评分为3、炎症评分为至少2和纤维化分期为至少1的动物肝脏用于研究。将动物(每组n＝12)每48小时通过皮下注射用溶媒或14.4mg/kg或28.8mg/kg剂量的化合物1治疗14天。在第一次给药后24小时和48小时采集血样，在第14天和最后给药后24小时再次采集血样，将衍生的肝素化血浆上清液转移到新的试管中，立即在干冰上冷冻，于-70℃储存。

在治疗14天后，在安乐死之前从麻醉动物收集肝脏。收集肝脏样品进行组织学评估、RNA测序(RNAseq)、甘油三酯和总胆固醇分析。

将石蜡包埋切片在二甲苯中去石蜡，在HE染色(HE；Dako)、CD68(克隆ED1,Abcam,Cat.Ab31630)和CD11b(Abcam,Cat.133357)之前在一系列分级乙醇中再水化。IHC采用标准程序进行。采用VIS软件(Visiopharm,丹麦)通过图像分析对IHC阳性染色进行定量。采用VIS软件通过Gubra开发的深度学习应用程序确定了具有脂滴和炎性病灶的肝细胞数量。

采用商业试剂盒(Roche Diagnostics)在cobas c 501自动分析仪上测量了血浆丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)以及肝匀浆甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)。

使用来自每份大体积肝脏样品的总共10ng-1μg纯化RNA、使用试剂盒(MACHEREY-NAGEL)分离了RNA。采用/>Ultra^TMIIDirectional RNA Library PrepKit for Illumina(New England Biolabs)产生了Aa cDNA文库，然后使用NextSeq 500/550High Output Kit V2(Illumina)在NextSeq 500上测序。

使用Spliced Transcripts Alignment to a Reference(STAR)软件将测序数据与小鼠基因组(Ensembl数据库)比对。对于生物信息学分析，使用标准RNA测序质量控制参数评估数据质量，使用主成分分析和层次聚类评估组间和组内变异性，并使用了R-packageDESeq2鉴定差异表达的基因。

结果

在正常C57BL/6JRj小鼠中进行的研究前药代动力学评估产生了在24小时时80μg/mL的最大平均血浆浓度。在随后的研究中，检测化合物1的暴露一直到96小时，每48小时相应地对DIO-NASH小鼠给药。

与溶媒相比，用化合物1(14.4mg/kg和28.8mg/kg)处置饮食诱导的(DIO)-NASH小鼠导致肝损伤的血浆标志物ALT和AST显著下降(分别为73％和83％)。与溶媒相比，两个剂量的化合物1使肝甘油三酯降低56-57％。高剂量治疗使肝脏总胆固醇降低30％。脂肪变性的减少得到了组织学评价的支持，并且与溶媒相比，低剂量和高剂量化合物1处理使脂质分数面积以及含有脂滴的肝细胞数量都减少了50-61％。表1总结了这些结果。

	溶媒	化合物1 14.4mg/kg	化合物1 28.8mg/kg
				血浆ALT U/L	263.0±15.4	67.4±6.9***	44.6±4.2***
血浆AST U/L	267±17.4	102.0±8.9***	73.1±14.3***
				肝TG(mg/g)	119±4.8	52.6±4.2***	51.5±12.2***
肝TC(mg/g)	22.3±1.6	19.7±1.4	15.7±4.5**
				肝脂质(％分数面积)	25.4±0.9	11.7±0.7***	10.0±1.2***
具有脂滴的肝细胞(％)	85.2±2.1	43.0±3.6***	37.3±8.3***

表1：血浆丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶、肝甘油三酯(TG)、肝总胆固醇(TC)、肝脂质和具有脂滴的肝细胞百分比(在HE染色肝切片上定量)。值表示为n＝12的平均值+SEM。Dunnett’s检验单因素直链模型。**:P<0.01,***:P<0.001,与溶媒相比。

通过组织学分析和基因表达分析检查了肝脏炎性状态。用化合物1(28.8mg/kg)处理后，对炎性标志物分化群11b(CD11b)(由单核细胞和巨噬细胞表达)的免疫组织化学染色显示出CD11b降低的趋势(40％降低,p＝0.051)。作为支持，化合物1(28.8mg/kg)显著下调了ITGAM编码CD11b的转录(47％)。这些结果概括在表2中。

	溶媒	化合物1 14.4mg/kg	化合物1 28.8mg/kg
				Itgam(CD11b)	0.49±0.07	0.39±0.05	0.26±0.08*
CD14	8.0±0.4	7.06±0.42	5.58±0.33***
				半乳凝素-3	28.9±1.56	22.6±2.55	15.9±1.17***
CCR1	0.54±0.077	0.31±0.057*	0.3±0.039*
				MCP-1(Ccl2)	4.33±0.28	2.53±0.26***	2.18±0.15***
CCR2	2.07±0.22	1.51±0.12	1.39±0.17*
				CCR7	1.16±0.15	0.68±0.054*	0.47±0.084***
CD11c	3.93±0.41	3.31±0.23	2.46±0.20***

表2：肝脏中炎性标记物的基因表达。值表示为RPKM,n＝8-9的平均值+SEM。伪发现率调整的p-值(DEseq2分析)。*:P<0.05,***:P<0.001,与溶媒相比。

同样，化合物1(28.8mg/kg)治疗下调了与单核细胞募集相关的炎性标记物分化群14(CD14)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、C-C Motif趋化因子受体1(CCR1)和C-C Motif趋化因子受体2(CCR2)以及巨噬细胞标记物半乳凝素-3的表达。

最后，观察到MCP-1、C-X-C Motif趋化因子配体1(CXCL1)、CCR2、C-C Motif趋化因子受体7(CCR7)、分化群11c(CD11c)的下调表达均与M1巨噬细胞极化相关(表2)。

在低剂量和高剂量治疗后，编码α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)(肝星状细胞活化的关键标志物)的基因的表达显著降低。纤维化标志物金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1))的基因表达也有显著的降低。结果如表3所示。

	溶媒	化合物1 14.4mg/kg	化合物1 28.8mg/kg
				α-SMA	2.8±0.2	1.7±0.1**	1.5±0.3***
TIMP-1	7.7±0.8	3.6±0.5***	2.6±0.4***

表3：肝纤维化相关标记物的基因表达。值表示为RPMK n＝8-9的平均值+SEM。伪发现率调节的p-值(DEseq2分析)。**:P<0.01,***:P<0.001与溶媒相比。

结论

用化合物1处理14天使得肝脂肪变性显著改善和肝酶ALT/AST血浆水平降低。而且，在NASH小鼠模型中发现了肝脏炎症的改善，通过巨噬细胞和单核细胞募集和积聚的减少、与M1巨噬细胞极化相关的所选基因的下调和纤维化关键标志物的基因表达的减少得到了证明。

缩写

ALT 丙氨酸转氨酶

AST 天冬氨酸转氨酶

CCL2 C-C Motif趋化因子配体2

CCR1 C-C Motif趋化因子受体1

CCR2 C-C Motif趋化因子受体2

CCR7 C-C Motif趋化因子受体7

CD11b 分化群11b

CD14 分化群14

CD68 分化群68

CXCL1 C-X-C Motif趋化因子配体1

DIO-NASH 饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎

GH 生长激素

HE 苏木精和伊红

NASH 非酒精性脂肪性肝炎

NBF 中性缓冲福尔马林

MCP-1 单核细胞趋化蛋白-1

PSR 天狼猩红

RNAseq RNA测序

TC 总胆固醇

TG 甘油三酯

TIMP-1 金属蛋白酶组织抑制剂1

序列表

<110> 阿森迪斯药物股份有限公司

<120> 长效生长激素用于治疗炎症诱导的疾病的用途

<130> CPX73611PC

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 191

<212> PRT

<213> 智人

<400> 1

Phe Pro Thr Ile Pro Leu Ser Arg Leu Phe Asp Asn Ala Met Leu Arg

1 5 10 15

Ala His Arg Leu His Gln Leu Ala Phe Asp Thr Tyr Gln Glu Phe Glu

20 25 30

Glu Ala Tyr Ile Pro Lys Glu Gln Lys Tyr Ser Phe Leu Gln Asn Pro

35 40 45

Gln Thr Ser Leu Cys Phe Ser Glu Ser Ile Pro Thr Pro Ser Asn Arg

50 55 60

Glu Glu Thr Gln Gln Lys Ser Asn Leu Glu Leu Leu Arg Ile Ser Leu

65 70 75 80

Leu Leu Ile Gln Ser Trp Leu Glu Pro Val Gln Phe Leu Arg Ser Val

85 90 95

Phe Ala Asn Ser Leu Val Tyr Gly Ala Ser Asp Ser Asn Val Tyr Asp

100 105 110

Leu Leu Lys Asp Leu Glu Glu Gly Ile Gln Thr Leu Met Gly Arg Leu

115 120 125

Glu Asp Gly Ser Pro Arg Thr Gly Gln Ile Phe Lys Gln Thr Tyr Ser

130 135 140

Lys Phe Asp Thr Asn Ser His Asn Asp Asp Ala Leu Leu Lys Asn Tyr

145 150 155 160

Gly Leu Leu Tyr Cys Phe Arg Lys Asp Met Asp Lys Val Glu Thr Phe

165 170 175

Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe

180 185 190

Claims

1.用于治疗炎症诱导的疾病的用途的长效生长激素(GH)。

2.权利要求1的用于所述用途的长效GH，其中所述炎症诱导的疾病是NAFLD。

3.权利要求1或2的用于所述用途的长效GH，其中所述炎症诱导的疾病是NASH。

4.权利要求1-3任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述长效GH包含与一个或多个化学部分共价结合的生长激素部分。

5.权利要求4的用于所述用途的长效GH，其中所述化学部分是聚合部分。

6.权利要求4或5的用于所述用途的长效GH，其中所述化学部分是基于PEG的部分。

7.权利要求4-6任一项的用于所述用途的长效GH，其中生长激素部分和化学部分之间的键是稳定的共价键。

8.权利要求4-6任一项的用于所述用途的长效GH，其中生长激素部分和化学部分之间的键是可逆的共价键。

9.权利要求1-3任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述长效GH包括非共价包埋或包封在包含聚合物或脂质的基质中的生长激素。

10.权利要求1-3任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述长效生长激素包括与至少一种天然或非天然氨基酸序列融合的生长激素部分。

11.权利要求1-10任一项的用于所述用途的长效GH，其中长效GH的施用触发M1和M2之间的巨噬细胞表型再平衡。

12.权利要求1-11任一项的用于所述用途的长效GH，其中长效生长激素的施用导致一种或多种选自细胞因子、趋化因子和其它转录和组织学标记物的肝脏炎症标记物的变化。

13.权利要求1-12任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述长效GH抑制炎性单核细胞向炎症位置的募集。

14.权利要求1-13任一项的用于所述用途的长效GH，其中长效生长激素的施用导致脂肪变性的减少。

15.权利要求1-14任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述长效GH每周一次施用于患者。

16.权利要求1-6、8或11-15任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述长效GH具有式(C-ii)

其中

-D是通过-D的胺官能团的氮与分子的剩余部分连接的hGH部分；和

p1、p2、p3和p4独立地是200至250的整数。

17.权利要求16的用于所述用途的长效GH，其中式(C-ii)的p1、p2、p3和p4独立地是210至240的整数。

18.权利要求16或17的用于所述用途的长效GH，其中式(C-ii)的p1、p2、p3和p4独立地是220至240的整数。

19.权利要求16-18任一项的用于所述用途的长效GH，其中-D是SEQ ID NO:1的hGH部分。

20.权利要求16-19任一项的用于所述用途的长效GH，其中-D通过-D的赖氨酸侧链提供的胺官能团的氮与分子的剩余部分连接。

21.权利要求1-4、7或11-15任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述长效GH是帕西生长素(somapacitan)。

22.权利要求1-21任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述治疗包括如下步骤：

(b)测量胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平；和

23.权利要求1-21任一项的用于所述用途的长效GH，其中所述治疗包括如下步骤：

(b)测量指示M1和M2巨噬细胞的生物标记物；

(c)基于通过所述生物标记物指示的M1减少或M2诱导的巨噬细胞表型变化调节长效GH的剂量。

24.权利要求23的用于所述用途的长效GH，其中指示M2巨噬细胞的生物标记物选自IL-2、IL-4、IL-10、IL-13、CCL17、CCL18、CCL22、CCL24、CCL13、CCL16、CXCR1、CXCR2、CD14、CD23、CD36、CD163、甘露糖受体(CD206)、清除剂受体A、Chi3l3/Ym1、Retnla/Fizz-1和精氨酸酶-1。

25.权利要求23或24的用于所述用途的长效GH，其中步骤(c)中的剂量调整通过测定IGF-1水平来完成，长效GH的剂量调节使得IGF-1水平在0至+3标准差评分的范围。

26.权利要求23-25任一项的用于所述用途的长效GH，其中重复步骤(b)和(c)直至实现巨噬细胞再平衡。