CN117321049A

CN117321049A - 取代的螺环衍生物

Info

Publication number: CN117321049A
Application number: CN202280033667.4A
Authority: CN
Inventors: O·A·G·凯罗勒; 戴学东; 蔡伟; J·W·J·图灵; 方李超; 厉铭; 刘连柱; 刘颖涛; L·琴; J·吴; 徐彦平; P·R·安吉博; H·F·S·科隆贝尔; I·N·C·皮拉特; V·S·庞塞莱; C·S·克莱默; V·潘德
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2021-05-08
Filing date: 2022-05-06
Publication date: 2023-12-29
Also published as: MX2023013174A; WO2022237626A1; EP4334310A1; KR20240006542A; BR112023023154A2; JP2024518434A; AU2022272692A1; CA3215379A1

Abstract

本发明涉及可用于哺乳动物的治疗和/或预防的药剂，包含此类化合物的药物组合物，以及它们作为可用于治疗疾病诸如癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病的menin/MLL蛋白/蛋白相互作用抑制剂的用途。

Description

取代的螺环衍生物

技术领域

背景技术

影响混合谱系白血病基因(MLL；MLL1；KMT2A)的染色体重排导致所有年龄组的侵袭性急性白血病，并且仍然主要表现为强调迫切需要新型治疗方法的不治之症。具有这些MLL染色体易位的急性白血病表现为淋巴、骨髓或双表型疾病，并且在成人急性白血病中占5％至10％，并且在婴儿中占大约70％(Marschalek,Br J Haematol 2011.152(2),141-54；Tomizawa等人，Pediatr Blood Cancer 2007.49(2),127-32)。

MLL是在赖氨酸4(H3K4)上甲基化组蛋白H3并在多蛋白复合物中起作用的组蛋白甲基转移酶。使用Mll1的可诱导的功能丧失等位基因表明，Mll1在维持造血干细胞(HSC)和发育B细胞中起重要作用，尽管其组蛋白甲基转移酶活性对于造血是不必要的(Mishra等人，Cell Rep 2014.7(4),1239-47)。

迄今已报道MLL与超过60种不同配偶体进行融合，并与白血病形成/进展有关(Meyer等人，Leukemia 2013.27,2165–2176)。有趣的是，MLL的SET(Su(var)3-9、zeste的增强子和trithorax)结构域不保留在嵌合蛋白中，而是被融合配偶体替换(Thiel等人，Bioessays 2012.34,771-80)。通过融合配偶体募集染色质修饰酶如Dot1L和/或pTEFb复合物导致包括最突出的基因的HOXA基因(例如，HOXA9)和HOX辅因子MEIS1的MLL靶基因的增强的转录和转录延伸。这些基因的异常表达反过来又阻断造血分化并增强增殖。

由多发性内分泌肿瘤1型(MEN1)基因编码的Menin被普遍表达并且主要位于细胞核中。已经显示它与许多蛋白质相互作用，并因此涉及多种细胞过程。对menin最佳理解的功能是其作为MLL融合蛋白的致癌辅因子的作用。Menin与保留在所有融合蛋白、MBM1(menin结合基序1)和MBM2中的MLL的N末端片段内的两种基序相互作用(Thiel等人，Bioessays 2012.34,771-80)。Menin/MLL相互作用导致用于晶状体上皮衍生生长因子(LEDGF)的新的相互作用表面的形成。尽管MLL直接与LEDGF结合，但menin对于MLL和LEDGF之间的稳定相互作用以及通过LEDGF的PWWP结构域的MLL复合物的基因特异性染色质募集是必须的(Cermakova等人，Cancer Res 2014.15,5139-51；Yokoyama&Cleary,Cancer Cell2008.8,36-46)。此外，许多遗传学研究已经显示，menin是通过MLL融合蛋白进行致癌性转化所必需的，表明menin/MLL相互作用是有吸引力的治疗靶标。例如，Men1的条件性缺失预防异位表达MLL融合的骨髓祖细胞中的白血病发生(Chen等人，Proc Natl Acad Sci2006.103,1018-23)。类似地，通过功能缺失突变对menin/MLL融合相互作用的遗传破坏消除了MLL融合蛋白的致癌特性，阻断体内白血病的发展并释放MLL转化的白血病母细胞的分化阻滞。这些研究还表明，menin是通过MLL融合蛋白维持HOX表达所必需的(Yokoyama等人，Cell 2005.123,207-18)。此外，已经开发了表明这种蛋白/蛋白相互作用的药物性的menin/MLL相互作用的小分子抑制剂，并且还已证明了在AML的临床前模型中的功效(Borkin等人，Cancer Cell 2015.27,589-602；Cierpicki和Grembecka,Future Med Chem2014.6,447-462)。连同在正常造血期间，menin不是MLL1的必需辅因子(Li等人，Blood2013.122,2039-2046)的观察结果一起，这些数据证实了menin/MLL相互作用的破坏用于治疗MLL重排的白血病和具有活性HOX/MEIS1基因标记的其他癌症是有希望的新治疗方法。例如，在MLL基因的5'区域内的内部部分串联重复(PTD)表示主要发生在从头性和继发性AML以及骨髓发育不良综合症中的另一种主要畸变。尽管MLL-PTD的分子机制和生物学功能尚未得到充分的了解，但影响menin/MLL相互作用的新治疗靶向策略也可以证明在MLL-PTD相关白血病的治疗中有效。此外，已显示去势抗性前列腺癌依赖于menin/MLL相互作用(Malik等人，Nat Med 2015.21,344-52)。

MLL蛋白在科学领域中也称为组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶2A(KMT2A)蛋白(UniProt登录号Q03164)。

若干参考文献描述了靶向menin-MLL相互作用的抑制剂：WO2011029054,J MedChem 2016,59,892-913描述了噻吩并嘧啶和苯并二氮卓衍生物的制备；WO2014164543描述了噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶衍生物；Nature Chemical Biology 2012年3月，8,277-284和Ren,J.；等人Bioorg Med Chem Lett(2016),26(18),4472-4476描述了噻吩并嘧啶衍生物；JMed Chem 2014,57,1543-1556描述了羟基-和氨甲基哌啶衍生物；Future Med Chem2014,6,447-462综述了小分子和拟肽化合物；WO2016195776描述了呋喃并[2,3-d]嘧啶、9H-嘌呤、[1,3]噁唑并[5,4-d]嘧啶、[1,3]噁唑并[4,5-d]嘧啶、[1,3]噻唑并[5,4-d]嘧啶、噻吩并[2,3-b]吡啶和噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物；WO2016197027描述了5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶、5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶、吡啶并[2,3-d]嘧啶和喹啉衍生物；并且WO2016040330描述了噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶化合物。WO2017192543描述了作为Menin抑制剂的哌啶。WO2017112768、WO2017207387、WO2017214367、WO2018053267和WO2018024602描述了menin-MLL相互作用的抑制剂。WO2017161002和WO2017161028描述了menin-MLL的抑制剂。WO2018050686、WO2018050684和WO2018109088描述了menin-MLL相互作用的抑制剂。WO2018226976描述了用于抑制menin与MLL蛋白相互作用的方法和组合物。WO2019060365描述了menin-MLL的取代的抑制剂。Krivtsov等人，Cancer Cell 2019.第6期第36卷，660-673描述了menin-MLL抑制剂。

WO2020069027公开了Menin的抑制剂。WO2018175746公开了用于治疗血液恶性肿瘤和尤因肉瘤(ewing's sarcoma)的方法。WO2020045334公开了在药物组合物中使用的氮杂双环衍生物。WO2019120209公开了作为menin/MLL蛋白/蛋白相互作用抑制剂的取代的杂环化合物。CN111297863公开了menin混合谱系白血病(MLL)抑制剂的用途。WO2021121327描述了取代的直链螺环衍生物以及它们作为menin/MLL蛋白/蛋白相互作用抑制剂的用途。

发明内容

本发明涉及式(I)的新型化合物，

以及其互变异构体和立体异构形式，其中

R^1a表示-C(＝O)-NR^xaR^xb；或

R^xa和R^xb各自独立地选自由以下项组成的组：氢；C_3-6环烷基；C_1-4烷基；被1、2或3个卤代基原子取代的C_1-4烷基；以及被一个-OH、-OC_1-4烷基或NR^11cR^11d取代的C_1-4烷基；

R^1b表示F或Cl；

Y¹表示-CR^5aR^5b-、-O-、-S-或-NR^5c-；

R²选自由以下项组成的组：氢、卤代基、C_1-4烷基、-O-C_1-4烷基和-NR^7aR^7b；

U¹和U²各自独立地表示N或CH；

n1、n2、n3和n4各自独立地选自1和2；

X¹表示CH，并且X²表示N；

R⁴表示C_1-5烷基；

R^5a、R^5b、R^5c、R^7a和R^7b各自独立地选自由以下项组成的组：氢、C_1-4烷基和C_3-6环烷基；

R³选自由以下项组成的组：Het¹、Het²、Cy²和-C_1-6烷基-NR^xcR^xd；

R^xc表示Cy¹；Het⁵；-C_1-6烷基-Cy¹；-C_1-6烷基-Het³；-C_1-6烷基-Het⁴；或-C_1-6烷基-苯基；

R^xd表示氢；C_1-4烷基；或被一个、两个或三个选自由卤代基、-OH、-O-C_1-4烷基和氰基组成的组的取代基取代的C_1-4烷基；

或者R^xc和R^xd连同它们所连接的N原子合在一起形成含有一个N原子和任选的一个选自O、S和N的另外的杂原子的4元至7元单环完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂，其中所述杂环基任选地被一个、两个或三个选自由卤代基、-OH、-O-C_1-4烷基和氰基组成的组的取代基取代；

Het¹表示含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；或含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的双环C-连接的6元至11元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；

其中所述杂环基在一个氮上任选地被选自由R⁶和-C(＝O)-R⁸组成的组的取代基取代；并且其中所述杂环基在一个或两个碳原子上任选地被总共一个、两个、三个或四个各自独立地选自由卤代基、R⁶、Het^6a、Het^6b、C_1-4烷基、氧代基、-NR^9aR^9b和-OH组成的组的取代基取代；

Het²表示C-连接的吡唑基或三唑基；所述基团在一个氮原子上被R^6a取代；

R⁶选自由以下项组成的组：

Het³；-C(＝O)-NH-R⁸；

任选地被一个或两个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代的C_1-6烷基：Het³、Het⁴、Het^6a、Het^6b、Cy¹、-CN、-OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基-C_3-6环烷基、-C(＝O)-OH、-NR^11aR^11b和-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基；和

任选地被一个或两个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代的C_3-6环烷基：-CN、-OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基、-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基和任选地被一个取代基取代的C_1-4烷基，所述取代基选自由OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基和-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基组成的组；

R^6a表示被一个选自由-NR^11aR^11b、Het^3a和Het^6a组成的组的取代基取代的C_1-6烷基；

R⁸表示任选地被一个、两个或三个各自独立地选自由-OH、卤代基、氰基、-NR^11aR^11b、Het^3a和Het^6a组成的组的取代基取代的C_1-6烷基；

Het³和Het⁵各自独立地表示含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；或含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的双环C-连接的6元至11元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；

其中所述杂环基在一个碳原子上任选地被C_1-4烷基、卤代基、-OH、-NR^11aR^11b或氧代基取代；并且其中所述杂环基在一个氮原子上任选地被C_1-4烷基取代；

Het^3a和Het^5a各自独立地表示含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；或含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的双环C-连接的6元至11元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；

Het⁴和Het⁷各自独立地表示含有一个、两个、三个或四个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的5元或6元芳族环；其中所述5元芳族环在一个氮原子上任选地被C_1-4烷基取代；并且其中所述5元或6元芳族环在一个碳原子上任选地被-OH取代；

Het^6a和Het⁸各自独立地表示含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的单环N-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；其中所述杂环基在一个或两个碳原子上任选地被总共一个、两个、三个或四个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤代基、-OH、氧代基、-(C＝O)-NR^10aR^10b、-O-C_3-6环烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、氰基、C_1-4烷基、-C_1-4烷基-OH、-O-C_1-4烷基、-O-(C＝O)-NR^10aR^10b和-O-(C＝O)-C_1-4烷基；并且其中所述杂环基在一个氮上任选地被选自由-C(＝O)-C_1-4烷基和-(C＝O)-NR^10aR^10b组成的组的取代基取代；

Het^8a各自独立地表示含有两个N原子和任选的一个选自O、S和N的另外的杂原子的单环N-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；其中所述杂环基在一个或两个碳原子上任选地被总共一个、两个、三个或四个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：卤代基、-OH、氧代基、-(C＝O)-NR^10aR^10b、-O-C_3-6环烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、氰基、C_1-4烷基、C_1-4烷基-OH、-O-C_1-4烷基、-O-(C＝O)-NR^10aR^10b和-O-(C＝O)-C_1-4烷基；并且其中所述杂环基在一个氮上任选地被选自由-C(＝O)-C_1-4烷基和-(C＝O)-NR^10aR^10b组成的组的取代基取代；

Het^6b表示含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的双环N-连接的6元至11元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；其中所述杂环基在一个或两个碳原子上任选地被总共一个或两个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代：C_1-4烷基、-OH、氧代基、-(C＝O)-NR^10aR^10b、-NH-C(＝O)-C_1-4烷基、-NH-C(＝O)-Cy³和-O-C_1-4烷基；并且其中所述杂环基在一个氮上任选地被选自由-C(＝O)-C_1-4烷基、-C(＝O)-Cy³、-(C＝O)-C_1-4烷基-OH、-C(＝O)-C_1-4烷基-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-C_1-4烷基-NR^11aR^11b和C_1-4烷基组成的组的取代基取代；

Cy¹表示任选地被一个、两个或三个选自由以下项组成的组的取代基取代的C_3-6环烷基：-OH、-NH-C(＝O)-C_1-4烷基、C_1-4烷基、-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-O-C_1-4烷基；

Cy²表示被一个或两个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代的C_3-7环烷基：-NR^9aR^9b；Het^6a；Het^6b；以及被一个或两个各自独立地选自由Het^3a、Het^6a、Het^6b和-NR^9aR^9b组成的组的取代基取代的C_1-6烷基；并且所述C_3-7环烷基任选地被一个或两个各自独立地选自由以下项组成的组的附加取代基取代：卤代基、R⁶、C_1-4烷基和-OH；

Cy³表示C_3-7环烷基；其中所述C_3-7环烷基任选地被一个、两个或三个卤代基取代基取代；

R^9a和R^9b各自独立地选自由以下项组成的组：氢；

C_1-4烷基；C_3-6环烷基；Het⁵；-C_1-4烷基-R¹⁶；-C(＝O)-C_1-4烷基-Het^3a；-C(＝O)-R¹⁴；

被一个、两个或三个选自由卤代基、-OH、-O-C_1-4烷基、-NR^11aR^11b和氰基组成的组的取代基取代的C_3-6环烷基；和

被一个、两个或三个选自由卤代基、-OH、-O-C_1-4烷基、-NR^11aR^11b和氰基组成的组的取代基取代的C_1-4烷基；

R^11a、R^11b、R^13a、R^13b、R^15a、R^15b、R^17a和R^17b各自独立地选自由氢和C_1-4烷基组成的组；

R^11c和R^11d各自独立地选自由以下项组成的组：氢、C_1-6烷基和-C(＝O)-C_1-4烷基；

R¹⁴表示Het^5a；Het^8a；或被一个、两个或三个选自由-NR^13aR^13b和Het^8a组成的组的取代基取代的C_1-4烷基；

R¹⁶表示-C(＝O)-NR^17aR^17b、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、Het⁵、Het⁷或Het⁸；

以及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

本发明还涉及一种药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及药学上可接受的载体或赋形剂。

另外，本发明涉及用作药物的式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，并且涉及用于治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病的式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物。

在一个具体实施方案中，本发明涉及用于治疗或预防癌症的式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物。

在一个具体的实施方案中，所述癌症选自白血病、骨髓瘤或实体瘤癌症(例如前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑素瘤和成胶质细胞瘤等)。在一些实施方案中，所述白血病包括急性白血病、慢性白血病、骨髓性白血病、髓细胞性白血病、成淋巴细胞性白血病、淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病(AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性成淋巴细胞性白血病(CLL)、T细胞幼淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL扩增白血病、MLL阳性白血病、表现出HOX/MEIS1基因表达特征的白血病等。

本发明还涉及式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物与另外的药剂组合用于治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病的用途。

此外，本发明涉及一种用于制备根据本发明的药物组合物的方法，其特征在于将药学上可接受的载体与治疗有效量的式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物紧密混合。

本发明还涉及包含式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物和另外的药剂的产品，其作为组合制剂用于在治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病中同时、单独或依序使用。

另外，本发明涉及一种治疗或预防温血动物的细胞增生性疾病的方法，所述方法包括向所述动物施用有效量的如本文所定义的式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，或如本文所定义的药物组合物或组合。

具体实施方式

如本文所用，术语“卤代基”或“卤素”表示氟、氯、溴和碘。

如本文所用，前缀“C_x-y”(其中x和y为整数)是指给定基团中的碳原子数。因此，C_1-6烷基基团含有1至6个碳原子，依此类推。

如本文用作基团或基团的一部分的术语“C_1-4烷基”表示具有1至4个碳原子的直链或支链饱和烃基，诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基等。

类似地，如本文用作基团或基团的一部分的术语“C_1-6烷基”表示具有1至6个碳原子的直链或支链饱和烃基，诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。

如本文用作基团或基团的一部分的术语“C_3-6环烷基”定义为具有3至6个碳原子的饱和的环状烃基，诸如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

如本文用作基团或基团的一部分的术语“C_3-7环烷基”定义为具有3至7个碳原子的饱和的环状烃基，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。

技术人员清楚的是，S(＝O)₂或SO₂表示磺酰基部分。

技术人员清楚的是，CO或C(＝O)表示羰基部分。

技术人员清楚的是，基团如-CRR-表示此类基团的示例为-CR^5aR^5b-。

技术人员将清楚的是，基团如-NR-表示此类基团的示例为-NR^5c-。

术语“含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基”定义为具有4至7个环成员并且含有1个氮原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的完全饱和的环状烃基，例如C-连接的氮杂环丁烷基、C-连接的吡咯烷基、C-连接的吗啉基和C-连接的哌啶基。术语“含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的单环N-连接的4元至7元完全饱和杂环基”被类似地定义，但经由氮原子与式(I)的分子的其余部分连接。示例为N-连接的氮杂环丁烷基、N-连接的吡咯烷基、N-连接的吗啉基、N-连接的硫代吗啉基、N-连接的哌嗪基、N-连接的1,4-二氮杂环庚烷基和N-连接的哌啶基。连同它们所连接的N原子合在一起形成含有一个N原子和任选的一个选自O、S和N的另外的杂原子的4元至7元单环完全饱和杂环基的两个R基团的定义是相似的。

术语“含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基”定义为具有4至7个环成员并且含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的完全饱和环状烃基，例如C-连接的氮杂环丁烷基、C-连接的吡咯烷基、C-连接的吗啉基、C-连接的四氢呋喃基、C-连接的硫杂环戊烷基、C-连接的氧杂环丁烷基、C-连接的硫杂环丁烷基、C-连接的四氢吡喃基和C-连接的哌啶基。术语“含有两个N原子和任选的一个选自O、S和N的另外的杂原子的单环N-连接的4元至7元完全饱和杂环基”定义为具有4至7个环成员并且含有2个氮原子和任选的一个选自O、S和N的另外的杂原子的完全饱和环状烃基，例如N-连接的哌嗪基和N-连接的1,4-二氮杂环庚烷基。

为清楚起见，4元至7元完全或部分饱和的杂环基具有4至7个环成员，包括杂原子。

“含有一个或两个氮原子和任选的羰基部分的单环5元或6元芳族环”的非限制性示例包括但不限于吡唑基、咪唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、1H-1,2,4-三唑基、4H-1,2,4-三唑基、1,2,4-三嗪基、1,2-二氢-2-氧代-5-嘧啶基、1,2-二氢-2-氧代-6-吡啶基、1,2-二氢-2-氧代-4-吡啶基和1,6-二氢-6-氧代-3-哒嗪基。

“含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的5元或6元芳族环”的非限制性示例包括但不限于C-连接的吡唑基、C-连接的咪唑基、C-连接的吡啶基、C-连接的三唑基、C-连接的哒嗪基、C-连接的嘧啶基、C-连接的噁唑基、C-连接的呋喃基、C-连接的异噻唑基或C-连接的吡嗪基。

在本发明的上下文中，双环C-连接的6元至11元完全饱和的杂环基包括稠合双环、螺双环和桥连双环。

在本发明的上下文中，双环N-连接的6元至11元完全饱和的杂环基包括稠合双环、螺双环和桥连双环。

稠合双环基团是共享两个原子和这些原子之间的键的两个环。

螺双环基团是在单个原子处接合的两个环。

桥连双环基团是共享多于两个原子的两个环。

含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的双环C-连接的6元至11元完全饱和杂环基的示例包括但不限于

等。

含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的双环C-连接的6元至11元完全饱和杂环基的示例包括但不限于

等。

含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的双环N-连接的6元至11元完全饱和杂环基的示例包括但不限于

等。

每当取代基由化学结构表示时，例如

“----”表示与式(I)的分子的其余部分连接的键。

当任何变量在任何成分中出现一次以上时，每个定义是独立的。

当任何变量在任何式(例如式(I))中出现一次以上时，每个定义是独立的。

在上下文中，还应当清楚的是，术语如“任选地被一个、两个或三个选自由以下项组成的组的取代基取代”等同于“任选地被一个、两个或三个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代”。

通常，除非另外指明或从上下文中清楚地看出，每当术语“取代的”用于本发明中时，意指在使用“取代的”的表达中指出的原子或基团上的一个或多个氢，特别是1至4个氢，更特别是1至3个氢，优选地1或2个氢，更优选地1个氢被来自所示基团的选择替代，前提条件是不超过正常化合价，并且该取代产生化学稳定的化合物，即足够稳固以经受住从反应混合物分离至有用纯度的化合物。在一个具体实施方案中，当取代基的数目未明确指定时，取代基的数目为一。

取代基和/或变量的组合只有在这样的组合产生化学稳定的化合物时才是允许的。“稳定的化合物”意指足够稳固以经受住从反应混合物分离至有用纯度的化合物。

技术人员将理解，术语“任选地被取代的”意指在使用“任选地被取代的”的表达中所指示的原子或基团可以是或可以不是取代的(这分别意指取代的或未取代的)。

当在部分上存在两个或更多个取代基时，在可能的情况下并且除非另外指明或从上下文中清楚地看出，它们可替代相同原子上的氢，或者它们可替代该部分中不同原子上的氢原子。

在本发明的上下文中，如果没有另外说明，则“饱和的”意指“完全饱和的”。

除非另外指明或从上下文中清楚可见，否则芳族环和杂环基基团可通过任何可用的环碳原子(C-连接的)或氮原子(N-连接的)连接到式(I)的分子的其余部分。

除非另外指明或从上下文中清楚可见，否则芳族环和杂环基基团可任选地在可能的情况下根据实施方案在碳和/或氮原子上被取代。

如本文所用，术语“受试者”是指动物，优选哺乳动物(例如，猫、狗、灵长类动物或人类)，更优选是或曾经是治疗、观察或实验对象的人类。

如本文所用，术语“治疗有效量”意指在组织系统、动物或人体中引起研究人员、兽医、医生或其他临床医师正在寻求的生物或药物反应(包括缓解或逆转所治疗的疾病或障碍的症状)的活性化合物或药剂的量。

术语“组合物”旨在涵盖包含指定量的指定成分的产品，以及通过组合指定量的指定成分而直接或间接得到的任何产品。

如本文所用，术语“治疗”旨在指其中可存在疾病进展的减慢、中断、阻止或停止的所有过程，但不一定是指所有症状的完全消除。

如本文所用，术语“本发明的化合物”或“根据本发明的化合物”意指包括式(I)的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

如本文所用，具有仅显示为实线的键而不显示为实心楔形或散列楔形键或者以其他方式表示为在一个或多个原子周围具有特定构型(例如，R、S)的任何化学式设想了每种可能的立体异构体，或者两种或更多种立体异构体的混合物。

在上文和下文中，术语“式(I)的化合物”意指包括其互变异构体和其立体异构形式。

术语“立体异构体”、“立体异构形式”或“立体化学异构形式”在上文或下文中可互换使用。

本发明包括本发明化合物的所有立体异构体作为纯立体异构体或作为两种或更多种立体异构体的混合物。

对映体是互为不可重叠镜像的立体异构体。一对对映体的1:1混合物是外消旋体或外消旋混合物。

阻转异构体(或阻转异构体(atropoisomers))是具有特定空间构型的立体异构体，由于大的空间位阻，其产生围绕单键的受限旋转。式(I)的化合物的所有阻转异构形式旨在包括在本发明的范围内。

非对映体(或非对映异构体)是不为对映体的立体异构体，即它们不与镜像相关。如果化合物含有双键，则取代基可以是E或Z构型。

二价环状饱和或部分饱和基团上的取代基可具有顺式或反式构型；例如，如果化合物含有二取代的环烷基基团，则取代基可以是顺式或反式构型。

因此，只要化学上可能，本发明包括对映体、阻转异构体、非对映体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体以及它们的混合物。

所有那些术语，即对映体、阻转异构体、非对映体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体以及它们的混合物的含义是技术人员已知的。

根据Cahn-Ingold-Prelog系统指定绝对构型。不对称原子处的构型由R或S指定。绝对构型未知的拆分的立体异构体可根据其旋转平面偏振光的方向由(+)或(-)指定。例如，绝对构型未知的拆分的对映体可根据其旋转平面偏振光的方向由(+)或(-)指定。

当鉴定特定的立体异构体时，这意指所述立体异构体基本上不含其他立体异构体，即与小于50％，优选地小于20％，更优选地小于10％，甚至更优选地小于5％，特别地小于2％以及最优选地小于1％的其他立体异构体相关。因此，当式(I)的化合物例如指定为(R)时，这意味着化合物基本上不含(S)异构体；当式(I)的化合物例如指定为E时，这意味着化合物基本上不含Z异构体；当式(I)的化合物例如指定为顺式时，这意味着化合物基本上不含反式异构体。

一些根据式(I)的化合物还可以其互变异构形式存在。尽管在上式(I)中没有明确指出，但只要它们可能存在，这些形式都旨在包括在本发明的范围内。

例如

等同于/>

由此可见，单一化合物可以立体异构体和互变异构体的形式存在。

药学上可接受的盐包括酸加成盐和碱加成盐。此类盐可通过常规方法形成，例如通过游离酸或游离碱形式与一个或多个当量的适当碱或酸，任选地在溶剂中或在盐不溶于其中的介质中反应，接着使用标准技术(例如，真空、通过冷冻干燥或通过过滤)去除所述溶剂或所述介质。盐还可通过使盐形式的本发明化合物的抗衡离子与另一种抗衡离子交换来制备，例如使用合适的离子交换树脂。

如上文或下文提及的药学上可接受的盐是指包含式(I)的化合物和其溶剂化物能够形成的治疗活性的非毒性酸和非毒性碱盐形式。

合适的酸包括例如无机酸，诸如氢卤酸(例如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸等酸；或有机酸，诸如例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环拉酸、水杨酸、对氨基水杨酸、扑酸等酸。相反地，所述盐形式可通过用适当的碱处理而转化成游离碱形式。

含有酸性质子的式(I)的化合物和其溶剂化物也可通过用适当的有机碱和无机碱处理而转化成其无毒的金属或胺盐形式。

适当的碱盐形式包括例如铵盐、碱金属和碱土金属盐(例如锂、钠、钾、铯、镁、钙盐等)、与有机碱的盐，该有机碱例如伯、仲和叔脂族和芳族胺，诸如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、四种丁胺异构体、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二异丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎宁环、吡啶、喹啉和异喹啉；苄星、N-甲基-D-葡糖胺、海巴明盐以及与氨基酸(诸如例如精氨酸、赖氨酸等)的盐。相反，盐形式可通过用酸处理而转化成游离酸形式。

术语溶剂化物包括式(I)的化合物能够形成的溶剂加成形式及其盐。此类溶剂加成形式的示例为例如水合物、醇化物等。

在下述方法中制备的本发明化合物可以对映体的混合物，特别是对映体的外消旋混合物的形式合成，所述混合物可按照本领域已知的拆分方法彼此分离。分离式(I)的化合物和其药学上可接受的盐和溶剂化物的对映体形式的方式涉及使用手性固定相的液相色谱法。所述纯立体化学异构体形式还可衍生自适当起始物质的对应纯立体化学异构体形式，前提条件是反应立体特异性地发生。优选地，如果需要特定的立体异构体，则所述化合物将通过立体特异性制备方法合成。这些方法将有利地采用光学纯的起始物质。

如本文所用，术语“光学纯”意指产物含有至少80重量％的一种对映体和20重量％或更少的另一种对映体。优选地，产物含有至少90重量％的一种对映体和10重量％或更少的另一种对映体。在最优选的实施方案中，术语“光学纯”意指组合物含有至少99重量％的一种对映体和1％或更少的另一种对映体。

本发明还涵盖本发明的同位素标记的化合物，其与本文所述的那些相同，但事实上一个或多个原子被原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的原子质量或质量数(或在自然界中发现的最丰富的原子质量或质量数)的原子替代。

在本发明化合物的范围内设想如本文指定的任何特定原子或元素的所有同位素和同位素混合物，无论是天然存在还是合成产生，无论是天然丰度还是同位素富集形式。可掺入到本发明化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，诸如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³⁵S、¹⁸F、³⁶Cl、¹²²I、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br和⁸²Br。优选地，同位素选自²H、³H、¹¹C和¹⁸F的组。更优选地，同位素为²H。特别地，氘代化合物旨在包括在本发明的范围内。

本发明的某些同位素标记的化合物(例如，用³H和¹⁴C标记的那些)可用于例如底物组织分布测定。氚化(³H)和碳-14(¹⁴C)同位素因其易于制备和可检测性而有用。此外，用较重的同位素诸如氘(即，²H)进行置换可以提供由更大的代谢稳定性所带来的某些治疗优势(例如，体内半衰期延长或需要的剂量减少)并且因此在一些情况下可以是优选的。正电子发射同位素诸如¹⁵O、¹³N、¹¹C和¹⁸F可用于正电子发射断层扫描(PET)研究。癌症中的PET成像可用于帮助定位和识别肿瘤、对疾病进行分期并确定合适的治疗。人癌细胞过表达许多受体或蛋白，它们是潜在的疾病特异性分子靶标。以高亲和力和特异性结合肿瘤细胞上的此类受体或蛋白质的放射性标记的示踪剂具有用于诊断成像和靶向放射性核素疗法的巨大潜力(Charron,Carlie L.等人，Tetrahedron Lett.2016,57(37),4119-4127)。另外，靶特异性PET放射性示踪剂可用作生物标志物以通过例如测量靶表达和治疗反应来检查和评估病理学(Austin R.等人，Cancer Letters(2016),doi:10.1016/j.canlet.2016.05.008)。

本发明尤其涉及如本文所定义的式(I)的化合物以及其互变异构体和立体异构形式，其中

R^1a表示-C(＝O)-NR^xaR^xb；或

R^xa和R^xb各自独立地选自由以下项组成的组：氢；

C_3-6环烷基；C_1-4烷基；以及被1、2或3个卤代基原子取代的C_1-4烷基；

R^1b表示F或Cl；

Y¹表示-CR^5aR^5b-、-O-、-S-或-NR^5c-；

U¹和U²各自独立地表示N或CH；

n1、n2、n3和n4各自独立地选自1和2；

X¹表示CH，并且X²表示N；

R⁴表示C_1-5烷基；

或者R^xc和R^xd连同它们所连接的N原子合在一起形成含有一个N原子和任选的一个选自O、S和N的另外的杂原子的4元至7元单环完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂，其中所述杂环基任选地被一个、两个或三个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤代基、-OH、-O-C_1-4烷基和氰基；

R⁶选自由以下项组成的组：

Het³；-C(＝O)-NH-R⁸；

任选地被一个或两个各自独立地选自由Het³、Het⁴、Het^6a、Het^6b、Cy¹、-CN、-OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基-C_3-6环烷基、-C(＝O)-OH、-NR^11aR^11b和-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基组成的组的取代基取代的C_1-6烷基；和

R⁸表示被一个选自由-OH、-NR^11aR^11b、Het^3a和Het^6a组成的组的取代基取代的C_1-6烷基；

Het⁴和Het⁷各自独立地表示含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的5元或6元芳族环；其中所述5元芳族环在一个氮原子上任选地被C_1-4烷基取代；并且其中所述5元或6元芳族环在一个碳原子上任选地被-OH取代；

Het^6b表示含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的双环N-连接的6元至11元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；其中所述杂环基在一个碳原子上任选地被选自由以下项组成的组的取代基取代：-OH、氧代基、-(C＝O)-NR^10aR^10b、-NH-C(＝O)-C_1-4烷基、-NH-C(＝O)-Cy³和-O-C_1-4烷基；并且其中所述杂环基在一个氮上任选地被选自由-C(＝O)-C_1-4烷基、-C(＝O)-Cy³和C_1-4烷基组成的组的取代基取代；

R^9a和R^9b各自独立地选自由以下项组成的组：氢；

被一个、两个或三个选自由卤代基、-OH、-O-C_1-4烷基和氰基组成的组的取代基取代的C_3-6环烷基；和

被一个、两个或三个选自由卤代基、-OH、-O-C_1-4烷基和氰基组成的组的取代基取代的C_1-4烷基；

R^10a、R^10b、R^11a、R^11b、R^13a、R^13b、R^15a、R^15b、R^17a和R^17b各自独立地选自由氢和C_1-4烷基组成的组；

以及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R^1a表示-C(＝O)-NR^xaR^xb；

R^xa和R^xb各自独立地选自由以下项组成的组：

R^1b表示F；

Y¹表示-O-；

R²表示氢；

U¹和U²各自独立地表示N或CH；

n1、n2、n3和n4各自独立地选自1和2；

X¹表示CH，并且X²表示N；

R⁴表示C_1-5烷基；

R³选自由Het¹和Cy²组成的组；

Het¹表示含有一个N原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基；

其中所述杂环基在一个氮上任选地被选自由R⁶和-C(＝O)-R⁸组成的组的取代基取代；并且其中所述杂环基在一个或两个碳原子上任选地被总共一个、两个、三个或四个卤代基取代基取代；

R⁶选自由以下项组成的组：Het³；

任选地被一个或两个各自独立地选自由Het³、Het⁴、Het^6a、Cy¹、-OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基-C_3-6环烷基和-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基组成的组的取代基取代的C_1-6烷基；

R⁸表示被一个选自由-OH和-NR^11aR^11b组成的组的取代基取代的C_1-6烷基；

Het³和Het⁵各自独立地表示含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；

其中所述杂环基在一个碳原子上任选地被-OH或氧代基取代；

Het⁴表示含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的5元或6元芳族环；其中所述5元或6元芳族环在一个碳原子上任选地被-OH取代；

Het^6a表示含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的单环N-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；其中所述杂环基在一个或两个碳原子上任选地被总共一个、两个、三个或四个各自独立地选自由氧代基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-O-C_1-4烷基组成的组的取代基取代；并且其中所述杂环基在一个氮原子上任选地被-C(＝O)-C_1-4烷基取代；

Het^6b表示含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O、S和N的另外的杂原子的双环N-连接的6元至11元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；其中所述杂环基在一个碳原子上任选地被-(C＝O)-NR^10aR^10b取代；并且其中所述杂环基在一个氮上任选地被-C(＝O)-C_1-4烷基取代；

Cy¹表示任选地被一个、两个或三个选自由以下项组成的组的取代基取代的C_3-6环烷基：-OH、-NH-C(＝O)-C_1-4烷基、C_1-4烷基、-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-O-C_1-4烷基；

Cy²表示被一个或两个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代的C_3-7环烷基：-NR^9aR^9b；Het^6a；以及Het^6b；

R^9a和R^9b各自独立地选自由以下项组成的组：氢；

C_1-4烷基；C_3-6环烷基；Het⁵；-C_1-4烷基-R¹⁶；以及

被一个、两个或三个-O-C_1-4烷基取代基取代的C_1-4烷基；

R^10a、R^10b、R^11a和R^11b表示C_1-4烷基；

R¹⁶表示Het⁵；

以及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R^1a表示-C(＝O)-NR^xaR^xb；

R^xa和R^xb表示C_1-4烷基；

R^1b表示F；

Y¹表示-O-；

R²表示氢；

U¹和U²各自独立地表示N或CH；

n1、n2、n3和n4各自独立地选自1和2；

X¹表示CH，并且X²表示N；

R⁴表示异丙基；

R³选自由Het¹和Cy²组成的组；

其中所述杂环基在一个氮上任选地被选自由R⁶组成的组的取代基取代；

R⁶表示被一个Het³取代的C_1-6烷基；

Het³表示含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；

Het^6a表示含有一个N原子的单环N-连接的4元至7元完全饱和杂环基；其中所述杂环基在一个碳原子上任选地被一个-O-C_1-4烷基取代；

Het^6b表示含有一个N原子和任选的一个或两个各自独立地选自O和N的另外的杂原子的双环N-连接的6元至11元完全饱和杂环基；其中所述杂环基在一个碳原子上任选地被-(C＝O)-NR^10aR^10b取代；并且其中所述杂环基在一个氮上任选地被-C(＝O)-C_1-4烷基取代；

Cy²表示被一个选自由Het^6a和Het^6b组成的组的取代基取代的C_3-7环烷基；

R^10a和R^10b表示C_1-4烷基；

以及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在一个实施方案中，本发明涉及如任何其他实施方案中所提及的那些式(I)的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中

R^1a表示-C(＝O)-NR^xaR^xb。

R^1b表示F。

R²表示氢。

在一个实施方案中，本发明涉及如任何其他实施方案中所提及的那些式(I)的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中n1为1，n2为2，n3为1并且n4为1。

在一个实施方案中，本发明涉及如任何其他实施方案中所提及的那些式(I)的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中U¹表示N。

在一个实施方案中，本发明涉及如任何其他实施方案中所提及的那些式(I)的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中U¹表示N，并且U²表示N。

在一个实施方案中，本发明涉及如任何其他实施方案中所提及的那些式(I)的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中U¹表示CH，并且U²表示N。

Y¹表示-O-。

Y¹表示-O-；并且

U²表示N。

Y¹表示-O-；并且

U¹表示N。

Y¹表示-O-；

U²表示N；

R^1b表示F；并且

R²表示氢。

Y¹表示-O-；

U¹表示N；

R^1b表示F；并且

R²表示氢。

Y¹表示-O-；

U¹表示N；

R^1b表示F；

R²表示氢；并且

R⁴表示异丙基。

R³表示Het¹或Cy²。

R³表示Cy²。

R³表示Het¹。

其中所述杂环基在一个氮上任选地被R⁶取代；并且其中所述杂环基在一个或两个碳原子上任选地被总共一个、两个、三个或四个各自独立地选自由卤代基、R⁶、Het^6a、Het^6b、C_1-4烷基、氧代基、-NR^9aR^9b和-OH组成的组的取代基取代。

R³表示Het¹；

R⁶选自由以下项组成的组：

Het³；-C(＝O)-NH-R⁸；

被一个或两个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代的C_3-6环烷基：-CN、-OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基、-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基和任选地被一个取代基取代的C_1-4烷基，所述取代基选自由OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基和-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基组成的组。

R⁶选自由以下项组成的组：

Het³；-C(＝O)-NH-R⁸；

被一个或两个各自独立地选自由Het³、Het⁴、Het^6a、Het^6b、Cy¹、-CN、-OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基-C_3-6环烷基、-C(＝O)-OH、-NR^11aR^11b和-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基组成的组的取代基取代的C_1-6烷基；和

R⁴表示

R³表示Het¹；

其中所述杂环基在一个氮上被R⁶取代；并且其中所述杂环基在一个或两个碳原子上任选地被总共一个、两个、三个或四个卤代基取代基取代；

R⁶选自由以下项组成的组：任选地被一个或两个各自独立地选自由Het³、Het⁴、Het^6a和Cy¹组成的组的取代基取代的C_1-6烷基。

U¹表示N；

R³表示Het¹；

U¹表示N；

Y¹表示-O-；

R^1b表示F；

R²表示氢；

R⁴表示异丙基；

R³表示Het¹；

其中所述杂环基在一个氮上被R⁶取代；

R⁶表示被一个Het³取代的C_1-6烷基。

U¹表示N；

R³表示Het¹；

其中所述杂环基在一个氮上被R⁶取代；

R⁶表示被一个Het³取代的C_1-6烷基。

U¹表示N；

Y¹表示-O-；

R^1b表示F；

R²表示氢；

R⁴表示异丙基；

R³表示Het¹；

其中所述杂环基在一个氮上被R⁶取代；

R⁶表示被一个Het³取代的C_1-6烷基。

在一个实施方案中，本发明涉及如任何其他实施方案中所提及的那些式(I)的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中式(I)的化合物限于式(I-y)的化合物：

其中R³如针对如任何其他实施方案中所提及的式(I)的化合物或其任何子组所定义。

其中R³表示Het¹。

其中R³表示Cy²。

在一个实施方案中，本发明涉及如任何其他实施方案中所提及的那些式(I)的化合物以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中式(I)的化合物限于式(I-z)的化合物：

其中R³表示Het¹。

其中R³表示Cy²。

在一个实施方案中，本发明涉及如通用反应方案中所定义的式(I)的子组。

在一个实施方案中，式(I)的化合物选自由以下项组成的组：示例性化合物、其互变异构体和立体异构形式、及其游离碱、任何药学上可接受的盐和溶剂化物。

上述实施方案的所有可能的组合被认为包含在本发明的范围内。

制备式(I)的化合物的方法

在该部分中，如在所有其他部分中，除非上下文另外指示，否则对式(I)的提及还包括如本文所定义的所有其他子组和其示例。

式(I)的化合物的一些典型示例的一般制备描述于下文和具体实施例中，并且通常由可商购获得或通过有机化学领域技术人员常用的标准合成方法制备的起始材料制备。下面的方案仅意在代表本发明的示例，而绝无意于限制本发明。

另选地，本发明的化合物还可通过如下文一般方案中所述的类似反应方案与本领域技术人员常用的标准合成方法结合来制备。

技术人员将认识到，在方案中描述的反应中，尽管这并不总是明确示出的，但可能需要保护最终产物中期望的反应性官能团(例如羟基、氨基或羧基基团)，以避免它们不期望地参与反应。通常，可根据标准实践使用常规保护基团。可使用本领域已知的方法在方便的后续阶段去除保护基团。

技术人员将认识到，在方案中描述的反应中，在惰性气氛下，例如在N₂-气体气氛下进行反应可能是可取的或必要的。

对于技术人员显而易见的是，可能需要在反应后处理之前冷却反应混合物(是指分离和纯化化学反应的产物所需的一系列操作，例如淬灭、柱色谱法、萃取)。

技术人员将认识到，在搅拌下加热反应混合物可增强反应结果。在一些反应中，可使用微波加热代替常规加热来缩短总反应时间。

技术人员将认识到，下文方案中所示的化学反应的另一顺序也可产生所需的式(I)的化合物。

技术人员将认识到，下文方案中所示的中间体和最终化合物可根据本领域技术人员熟知的方法进一步官能化。本文所述的中间体和化合物可以游离形式或作为其盐或溶剂化物分离。本文所述的中间体和化合物可以互变异构体和立体异构形式的混合物的形式合成，所述互变异构体和立体异构形式可按照本领域已知的拆分方法彼此分离。

方案1

通常，式(I)的化合物(其中Y¹限于Y^1a为-O-或-NR^5c-)，由此命名为式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)的化合物，可根据以下反应方案1制备。在方案1中，W¹表示氟、氯、溴或碘；所有其他变量根据本发明的范围来定义。

在方案1中，应用以下反应条件：

步骤1：在合适的温度(诸如室温至90℃范围内)处，在合适的碱(例如二异丙基乙胺或三乙胺或碳酸钠)的存在下，在合适的溶剂(例如乙腈或二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中；

步骤2：在室温至130℃范围内的合适温度处，在合适的碱(例如碳酸铯)的存在下，在合适的溶剂(例如二甲基甲酰胺或1-甲基-2-吡咯烷酮)中；

另选地，在合适的温度(例如室温)处，在合适的去质子化剂(例如氢化钠)的存在下，在合适的溶剂(例如二甲基亚砜)中；

另选地，在合适的温度(诸如室温)处，在合适的碱(诸如1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU))的存在下，在合适的溶剂(例如四氢呋喃)中；

步骤3：在合适的温度(诸如室温)处，在合适的催化剂(诸如钯/碳(Pd/C))的存在下，在合适的溶剂(诸如甲醇)中，在H₂压力(例如1巴至3巴)下，任选地在碱(诸如三乙胺)的存在下；

另选地，在合适的温度(诸如室温)处，在合适的催化剂(例如1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物)、合适的还原剂(诸如硼氢化钠)、合适的碱(例如N,N,N',N'-四甲基乙二胺)的存在下，在合适的溶剂(例如四氢呋喃)中；

步骤4：在100℃至130℃范围内的合适温度处，在合适的碱(例如碳酸铯)的存在下，在合适的溶剂(例如二甲基甲酰胺或1-甲基-2-吡咯烷酮)中；

步骤5：在100℃至130℃范围内的合适温度处，在合适的碱(例如碳酸铯)的存在下，在合适的溶剂(例如二甲基甲酰胺或1-甲基-2-吡咯烷酮)中；

另选地，在80℃至100℃范围内的合适温度处，在合适的催化剂(诸如乙酸钯(Pd(OAc)₂))的存在下，在合适的配体(诸如2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘)的存在下，在合适的碱(诸如碳酸铯)的存在下，在合适的溶剂(例如二噁烷)中；

步骤6：在室温至60℃的合适温度处，在合适的催化剂(诸如乙酸钯(Pd(OAc)₂)或三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd₂dba₃))的存在下，在存在或不存在合适配体(例如三苯基膦)的情况下，在合适溶剂(例如二噁烷)中；

方案2

通常，式(I)的化合物(其中Y¹限于-CH₂-，并且R²限于W¹)，由此命名为式(If)的化合物，可根据以下反应方案2制备。在方案2中，所有其他变量根据本发明的范围来定义。

在方案2中，应用以下反应条件：

步骤1：在60℃至100℃范围内的合适温度处，在合适催化剂(诸如乙酸钯(Pd(OAc)₂)或三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(Pd₂(dba)₃)或四(三苯基膦)钯(0))的存在下，在合适溶剂(例如四氢呋喃或二噁烷)中。

技术人员将认识到，以化合物(If)作为起始材料，可以进行如方案1中步骤3、4、5和6中所报道的类似化学反应。

方案3

通常，式(I)的化合物(其中Y¹限于-CR^5aR^5b并且R²限于W¹)，由此命名为式(Ig)的化合物，可以根据以下反应方案3制备。在方案3中，R^5a和R^5b中的至少一者不是氢。所有其他变量根据本发明的范围来定义。

在方案3中，应用以下反应条件：

步骤1：在80℃至200℃范围内的合适温度处，在合适的催化剂(诸如乙酸钯(Pd(OAc)₂))的存在下，在合适的配体(例如三苯基膦或三环己基膦)的存在下，在合适的溶剂(例如二噁烷)中，优选在密封条件下，任选地在微波照射下。

技术人员将认识到，以化合物(Ig)作为起始材料，可以进行如方案1中步骤3、4、5和6中所报道的类似化学反应。

方案4

通常，由此命名为式(Ib)的化合物的式(I)的化合物可以另选地根据以下反应方案4制备。在方案4中，PG¹表示合适的保护基团，例如叔丁氧基羰基，并且LG¹是离去基团，例如氯、溴、碘或甲苯磺酸酯或甲磺酸酯；所有其他变量如之前所列或根据本发明的范围来定义。

在方案4中，应用以下反应条件：

步骤3：在合适的温度(诸如室温)处，在合适的催化剂(诸如钯/碳(Pd/C))的存在下，在合适的溶剂(诸如甲醇)中，在H₂压力(例如1巴至3巴)下；

步骤4：当PG¹为叔丁氧基羰基时，在合适的温度范围(例如0℃至室温)处，在合适的裂解条件(例如酸如HCl或三氟乙酸)的存在下，在合适的溶剂(诸如乙腈或DCM或甲醇(MeOH))中；

步骤5：表示所有类型的反应，例如还原酰胺化、亲核取代，得到最终的实施例(Ib)；

技术人员将认识到，以中间体XI作为起始材料，可以进行如方案1中步骤3、4、5和6中所报道的类似化学反应。

方案5

通常，式(I)的化合物(其中U限于N并且Y¹限于Y^1b为O)，由此命名为式(Iba)的化合物，可以根据以下反应方案5制备。在方案5中，PG¹表示合适的保护基团，例如叔丁氧基羰基，并且W²表示离去基团，例如氯、甲苯磺酸酯或甲磺酸酯；所有其他变量根据本发明的范围来定义。

在方案5中，应用以下反应条件：

步骤1：在合适的温度(诸如室温)处，在合适的碱(例如碳酸钾)的存在下，在合适的溶剂(例如二甲基甲酰胺)中；

步骤2：在合适的温度(诸如室温)处，在合适的碱(诸如氢氧化锂)的存在下，在合适的溶剂(例如四氢呋喃、乙醇和水的混合物)中；

步骤3：在合适的温度(诸如室温)处，在二溴异氰脲酸酯的存在下，在合适的溶剂(诸如二氯乙烷)中；

步骤4：当W²为氯时，在合适的温度范围(诸如室温)处，在氯化试剂(诸如草酰氯)的存在下，在催化量的二甲基甲酰胺的存在下，在合适的碱(诸如三乙胺)的存在下，在合适的溶剂(诸如二氯甲烷)中；

当W²为三氟乙氧基时，在合适的温度(诸如65℃)处，在存在或不存在作为溶剂的2,2,2-三氟乙醇的情况下，在合适的活化剂(诸如1,3-二溴-1,3,5-三嗪烷-2,4,6-三酮的存在下，在分子筛的存在下；

步骤5：在合适的温度(诸如室温)处，在合适的碱(例如三乙胺或1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU))的存在下，在合适的溶剂(例如二氯甲烷或乙腈)中；

步骤6：在合适的温度(诸如室温)处，在合适的碱(例如三乙胺或1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU))的存在下，在合适的溶剂(例如二氯甲烷或乙腈)中；

步骤7：当PG¹为叔丁氧基羰基时，在合适的温度范围(例如0℃至室温)处，在合适的裂解条件(例如酸如HCl或三氟乙酸)的存在下，在合适的溶剂(诸如乙腈或DCM或甲醇(MeOH))中；

步骤8：表示所有类型的反应，例如还原酰胺化、亲核取代，得到最终的实施例(Iba)。

方案6

通常，式IIIa的中间体可以根据以下反应方案5制备。在方案5中，PG²表示合适的保护基团，例如苄氧基羰基；所有其他变量根据本发明的范围来定义或如前述方案中所定义。

步骤1：在合适的温度(诸如室温)处，在氯甲酸苄酯的存在下，在合适的碱(例如三乙胺)的存在下，在合适的溶剂(例如二氯甲烷)中；

步骤2：当PG¹为叔丁氧基羰基时，在合适的温度范围(例如0℃至室温)处，在合适的裂解条件(例如酸如HCl或三氟乙酸)的存在下，在合适的溶剂(诸如乙腈或DCM或甲醇(MeOH))中；

步骤3：代表所有类型的反应，例如还原酰胺化、亲核取代，得到中间体IIIa。

方案7

通常，式XXVI的中间体可以根据以下反应方案7制备。变量根据本发明的范围来定义或如前述方案中所定义。

步骤1：在合适的温度(诸如120℃)处，在合适的碱(例如碳酸铯)的存在下，在合适的溶剂(例如二甲基乙酰胺)中；

步骤2：在合适的温度(诸如0℃至室温)处，在合适的氧化剂(例如过氧化氢脲)的存在下，在合适的试剂(诸如三氟乙酸酐)的存在下，在合适的溶剂(例如四氢呋喃)中；

步骤3：在合适的温度(诸如0℃至室温)处，在合适的氯化剂(例如磷酰氯)的存在下，在合适的碱(诸如二异丙基乙胺)的存在下，在合适的溶剂(例如乙酸乙酯)中；

本领域技术人员将清楚，从中间体XXVI开始，可以进行如方案4中所报道的从中间体II开始的类似化学反应。

方案8

通常，式XXVIII的中间体可以根据以下反应方案8制备。变量根据本发明的范围来定义或如前述方案中所定义。

本领域技术人员将清楚，从中间体XXVIII开始，可以应用如方案1中所报道的类似化学反应(即步骤3、4、5和6)来官能化第一位置2。然后，根据所获得的中间体，可以应用如方案2和3中所报道的类似化学反应来用中间体IV、VIII和VIIa对位置5进行官能化。

应当理解，在存在合适的官能团的情况下，各种式的化合物或在其制备中使用的任何中间体可通过采用缩合、取代、氧化、还原或裂解反应的一种或多种标准合成方法进一步衍生化。特定的取代方法包括常规的烷基化、芳基化、杂芳基化、酰化、磺酰化、卤化、硝化、甲酰化和偶联程序。

式(I)的化合物可以对映体的外消旋混合物的形式合成，所述混合物可按照本领域已知的拆分方法彼此分离。含有碱性氮原子的式(I)的外消旋化合物可通过与合适的手性酸反应转化成对应的非对映体盐形式。随后例如通过选择性或分级结晶分离所述非对映体盐形式，并且通过碱从其中释放对映体。分离式(I)的化合物的对映体形式的替代方式涉及使用手性固定相的液相色谱法。所述纯立体化学异构体形式还可衍生自适当起始物质的对应纯立体化学异构体形式，前提条件是反应立体特异性地发生。

在本发明化合物的制备中，可能需要保护中间体的末端官能团(例如，伯胺或仲胺)。对这种保护的需要将根据末端官能团的性质和制备方法的条件而变化。合适的氨基保护基团(NH-Pg)包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧羰基(CBz)和9-芴基亚甲基氧羰基(Fmoc)。本领域技术人员容易地确定对这种保护的需要。对于保护基团和其用途的一般描述，参见T.W.Greene and P.G.M.Wuts,Protective Groups in OrganicSynthesis，第4版，Wiley,Hoboken,New Jersey,2007。

药理学

已发现，本发明的化合物阻断menin与MLL蛋白和致癌MLL融合蛋白的相互作用。因此，根据本发明的化合物和包含此类化合物的药物组合物可用于治疗或预防，特别是治疗疾病如癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病。

特别地，根据本发明的化合物及其药物组合物可用于治疗或预防癌症。根据一个实施方案，可受益于用本发明的menin/MLL抑制剂治疗的癌症包括白血病、骨髓瘤或实体瘤癌症(例如前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑素瘤和成胶质细胞瘤等)。在一些实施方案中，所述白血病包括急性白血病、慢性白血病、骨髓性白血病、髓细胞性白血病、成淋巴细胞性白血病、淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病(AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性成淋巴细胞性白血病(CLL)、T细胞幼淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL扩增白血病、MLL阳性白血病、表现出HOX/MEIS1基因表达特征的白血病等。

因此，本发明涉及用作药物的式(I)的化合物、其互变异构体和立体异构形式以及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

本发明还涉及根据本发明的式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐、或溶剂化物、或药物组合物用于制造药剂的用途。

本发明还涉及根据本发明的式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐、或溶剂化物、或药物组合物，其用于治疗、预防、改善、控制哺乳动物(包括人)中与menin与MLL蛋白和致癌MLL融合蛋白的相互作用相关的病症或降低其风险，所述病症治疗或预防通过阻断menin与MLL蛋白和致癌MLL融合蛋白的相互作用来影响或促进。

此外，本发明涉及根据本发明的式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐、或溶剂化物、或药物组合物用于制造用于治疗、预防、改善、控制哺乳动物(包括人)中与menin与MLL蛋白和致癌MLL融合蛋白的相互作用相关的病症或降低其风险的药物的用途，所述病症的治疗或预防通过阻断menin与MLL蛋白和致癌MLL融合蛋白的相互作用来影响或促进。

本发明还涉及式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于上文提及的任何一种疾病的治疗或预防。

本发明还涉及式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗或预防上文提及的任何一种疾病。

本发明还涉及式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物用于制造用于治疗或预防上文提及的任何一种病症的药物的用途。

本发明的化合物可以施用于哺乳动物，优选人类，用于治疗或预防上文提及的任何一种疾病。

鉴于式(I)的化合物、其互变异构体和立体异构形式以及其药学上可接受的盐和溶剂化物的效用，提供了一种治疗患有上文提及的任何一种疾病的温血动物(包括人)的方法。

所述方法包括向温血动物(包括人)施用(即全身或局部施用)治疗有效量的式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

因此，本发明还涉及用于治疗或预防上文提及的任何一种疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的根据本发明的化合物。

本领域技术人员将认识到，本发明化合物的治疗有效量是足以具有治疗活性的量，并且该量尤其根据疾病类型、治疗制剂中化合物的浓度和患者的病状而变化。有效的治疗每日量将为约0.005mg/kg至100mg/kg。实现治疗效果所需的根据本发明的化合物(本文中也称为活性成分)的量可以根据具体情况而变化，例如根据具体化合物、施用途径、接受者的年龄和病状以及所治疗的具体病症或疾病。治疗方法还可以包括以每天一至四次摄入的方案施用活性成分。在这些治疗方法中，优选在施用之前配制根据本发明的化合物。

本发明还提供了用于预防或治疗本文所提及的病症的组合物。所述组合物包含治疗有效量的式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及药学上可接受的载体或稀释剂。

虽然活性成分可以单独施用，但优选其以药物组合物的形式存在。因此，本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含根据本发明的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。载体或稀释剂在与组合物的其他成分相容的意义上必须是“可接受的”，并且对其接受者无害。

药物组合物可以通过药房领域熟知的任何方法制备，例如，使用诸如描述于Gennaro等人Remington's Pharmaceutical Sciences(第18版，Mack PublishingCompany,1990，尤其参见Part 8:Pharmaceutical preparations and theirManufacture)中的那些的方法。

本发明的化合物可单独施用或与一种或多种附加的治疗剂组合施用。组合疗法包括施用含有根据本发明的化合物和一种或多种附加的治疗剂的单一药物剂量制剂，以及施用在其各自单独的药物剂量制剂中的根据本发明的化合物和每种附加的治疗剂。

因此，本发明的一个实施方案涉及一种产品，所述产品包含作为第一活性成分的根据本发明的化合物以及作为另外的活性成分的一种或多种抗癌剂，作为组合制剂用于在治疗患有癌症的患者中同时、单独或依序使用。

一种或多种其他药剂和根据本发明的化合物可以同时(例如，在单独或单一组合物中)或按任一顺序依序施用。在后一种情况下，两种或更多种化合物将在足以确保实现有利或协同作用的时间段内且以足以确保实现有利或协同作用的量和方式施用。应当理解，组合的每种组分的优选施用方法和顺序以及相应的剂量和方案将取决于所施用的特定其他药剂和本发明的化合物、它们的施用途径、具体病状、特别是所治疗的肿瘤和所治疗的特定宿主。

以下实施例进一步说明本发明。

实施例

在以下实施例中说明用于制备本发明化合物的几种方法。除非另有说明，否则所有起始材料均可购自商业供应商并且无需进一步纯化即可使用，或另选地可由技术人员通过使用熟知的方法来合成。

如本领域技术人员所理解的，使用所示方案合成的化合物可以作为溶剂化物存在，例如水合物，并且/或者含有残余溶剂或少量杂质。以盐形式分离的化合物可以是整数化学计量的，即单盐或二盐，或者是中间化学计量的。当以下实验部分中的中间体或化合物表示为“HCl盐”而没有标明HCl的当量数时，这意味着HCl的当量数尚未确定。

当分离混合物时，一些化合物中的中心的立体化学构型可表示为“R”或“S”；对于某些化合物，当绝对立体化学未确定时(即使键是明确立体绘制的)，指定中心处的立体化学构型被指定为“*R”或“*S”，尽管该化合物本身已被分离为单一立体异构体并且是光学纯的。

例如，清楚的是，化合物3

上文关于立体化学构型的段落也适用于中间体。

技术人员将认识到，即使在以下实验方案中未明确提及的情况下，通常在柱色谱法纯化之后，收集所需的级分并且蒸发溶剂。

在未指示立体化学的情况下，这意味着其是立体异构体的混合物，除非另外指明或从上下文中是清楚的。

除非另外指明，否则当用“RS”表示立构中心时，这意味着在指定的中心获得外消旋混合物。

技术人员将理解，当在表中报告中间体或化合物时，从所指示的起始材料到所需中间体/化合物的合成方法可以经过一个或多个反应步骤。

当两种对映体、非对映体或异构体存在于下表之一的相同单元中时，技术人员将理解这些中间体或化合物通过使用合适的色谱方法例如SFC或反相分离而彼此分离。

中间体的制备

对于在下一反应步骤中作为粗品或作为部分纯化的中间体使用的中间体，在一些情况下，在下一反应步骤中没有提及此类中间体的摩尔量，或另选地在下一反应步骤中此类中间体的估计摩尔量或理论摩尔量在下述反应方案中指出。

在下文中，术语：“ACN”或‘MeCN’意指乙腈，“DCM”意指二氯甲烷，“DIPEA或DIEA”意指N,N-二异丙基乙胺，“h”意指小时，“min”意指分钟，“DMF”意指N,N-二甲基甲酰胺，“TEA”或“Et₃N’意指三乙胺，“EtOAc”或“EA”意指乙酸乙酯，“THF”意指四氢呋喃；“HPLC”意指高效液相色谱法，“Prep-HPLC”意指制备型HPLC；“MeOH”意指甲醇，“NMR”意指核磁共振，“rt”或“RT”意指室温，“SFC”意指超临界流体色谱法，“q.s.”意指适量，“DMSO”意指二甲基亚砜，“Pd/C”或“Pd/C(10％)”意指钯/碳，“atm”意指大气压，“ee”意指对映体过量，“PE”意指石油醚，“NaBH(OAc)₃”意指三乙酰氧基硼氢化钠，“TFA”意指三氟乙酸，“DCE”意指二氯乙烷，并且“DMA”意指N,N-二甲基乙酰胺；“IPA”意指异丙醇；“iPrNH₂”意指异丙胺；NH₄OH意指氢氧化铵；“Pd(OH)₂”意指氢氧化钯；DBU意指1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯；“Cbz”意指苯甲酰基羰基；NaBH₃CN意指氰基硼氢化钠；NaBH₄意指硼氢化钠；tlc意指薄层色谱法；FCC意指快速柱色谱法；HATU意指1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐，N-[(二甲基氨基)-1H-1,2,3-三唑并-[4,5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物；EDCI意指N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐；“HOBT”或“HOBt”意指1-羟基苯并三唑水合物；TMEDA意指N,N,N′,N′-四甲基乙二胺；Pd(dppf)Cl₂.DCM意指[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的络合物；“Ni(acac)₂”意指乙酰丙酮镍(II)；“Zn”意指锌；“MS”意指分子筛；“Boc₂O”意指二碳酸二叔丁酯；“Ar”意指氩气；“FA”意指甲酸；“CC”意指柱色谱法；“T₃P”意指丙基膦酸酐。

A.中间体的制备

实施例A1

中间体1的制备

将2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸苯甲酯(1.084g，4.667mmol)、3-异丁酰氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(1.3g，5.6mmol)、氰基硼氢化钠(1.5g，23.33mmol)和乙酸(267μL，4.67mmol)在甲醇(50mL)中的混合物在50℃处搅拌过夜。收集混合物，对100mg 2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸苯甲酯进行另一反应，并倾注到10％ K₂CO₃水溶液上。将所得混合物用DCM萃取。将有机层倾析，用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，40g；流动相：0％NH₄OH、0％ MeOH、100％ DCM至0.3％ NH₄OH、3％ MeOH、97％ DCM的梯度)纯化。收集纯级分并蒸发至干。将所得残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，40g；流动相：40％ EtOAc、60％庚烷至60％ EtOAc、40％庚烷的梯度)二次纯化。收集纯级分并蒸发至干，得到1.58g中间体1(70％产率)。

中间体2的制备

/>

将中间体1(500mg；1.127mmol)和TFA(1.5mL)在DCM(5mL)中的混合物在室温处搅拌过夜。将反应混合物用ACN稀释并蒸发至干(两次)。将残余物溶解于DCM中，并用15％NH₄OH水溶液碱化。将有机层再次用15％ NH₄OH水溶液洗涤，然后用水洗涤，经过滤并蒸发至干，得到330mg中间体2(85％)，其无需任何进一步纯化即可直接用于下一步骤。

中间体3的制备

在室温处，将乙酸(55μL；0.96mmol)添加到中间体2(330mg；0.96mmol)和氧杂环丁烷-3-甲醛(132μL；1.92mmol)在THF(12mL)的溶液中。将混合物在室温处搅拌过夜，然后逐份添加NaBH(OAc)₃(611mg；2.88mmol)。将混合物在室温处搅拌3小时。将反应混合物在10％K₂CO₃水溶液与EtOAc之间分配。分离各层，并将水层用DCM萃取一次。将有机层混合，经MgSO₄干燥并蒸发至干。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g+24g；流动相：0.5％ NH₄OH、5％ MeOH、95％DCM至1％ NH₄OH、10％ MeOH、90％ DCM的梯度)纯化。收集纯级分并蒸发至干，得到264mg中间体3(66％产率)。

中间体4的制备

将中间体3(264mg；0.638mmol)和Pd/C(10％)(68mg；0.0638mmol)在乙醇(10mL)中的混合物在3巴H₂下氢化2小时。通过过滤来除去Pd/C(10％)，并将溶剂蒸发至干，得到173mg中间体4(97％产率)。

实施例A2

中间体5的制备

在圆底烧瓶中，将2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸苯甲酯(500mg；2.03mmol)、3-异丁酰氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(553.7mg；2.43mmol)、氰基硼氢化钠(382.7mg；6.09mmol)和乙酸(0.116mL；2.03mmol)在MeOH中稀释。然后，将反应混合物在50℃处加热过夜并冷却至室温。小心地添加饱和NaHCO₃溶液，直至pH>9。将所得混合物用DCM萃取。将有机层倾析，用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，40g；流动相：0％ NH₄OH、0％ MeOH、100％DCM至0.3％ NH₄OH、3％ MeOH、97％ DCM的梯度)纯化。收集纯级分并蒸发至干，得到700mg中间体5(75％产率)。

中间体6的制备

在圆底烧瓶中，在0℃处，将TFA(2.34mL，30.59mmol)添加到中间体5(700mg，1.53mmol)的DCM溶液(33.7mL)中。然后，将反应物升温至室温并将反应混合物在室温处搅拌过夜。将残余物溶解于4mL水中。然后，将溶液用1M NaOH溶液(12mL)碱化直至pH＝8-9。在室温处搅拌10min后，将所得混合物用二氯甲烷(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×50mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干，得到482mg中间体6，其无需任何进一步处理即可直接用于下一步骤。

中间体7的制备

在室温处，将乙酸(119μL；2.07mmol)添加到中间体6(482mg；1.34mmol)和氧杂环丁烷-3-甲醛(188μL；2.72mmol)在THF(20mL)的溶液中。将混合物在室温处搅拌4h，然后逐份添加NaBH(OAc)₃(870mg；4.1mmol)。将混合物在室温处搅拌2小时。将反应混合物倾注到冰水中，用10％ K₂CO₃水溶液碱化并添加EtOAc。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干，得到438mg中间体残余物。将残余物(438mg)通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm 24g，流动相：97％ DCM、3％ MeOH(+10％ NH₄OH)至90％ DCM、10％MeOH(+10％ NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到127mg中间体7(22％产率)。

中间体8的制备

将中间体7(63mg；0.147mmol)、Pd(OH)₂(21mg；0.174mmol)在MeOH(3mL)和THF(0.5mL)中的混合物在大气压下氢化过夜。通过垫过滤除去催化剂，用MeOH洗涤，并蒸发滤液，得到35mg中间体8(81％产率)。

实施例A3

中间体9的制备

向在0℃处冷却的5-氟-2-甲氧基苯甲酸(8.00g，47.0mmol)和N-乙基丙-2-胺(8.19g，94.0mmol)在无水DCM(150mL)的混合物中缓慢地分批添加HATU(21.5g，56.5mmol)和DIEA(9.10g，70.4mmol)。将所得混合物缓慢升温至室温并搅拌8h。将有机层用水(20mL×3)洗涤并经无水Na₂SO₄干燥。过滤后，将溶剂在减压下除去，并且将粗产物通过FCC(EtOAc/PE＝0％至20％的EtOAc)纯化，得到呈白色固体的中间体9(12.0g，96％产率)。

通过与上文针对制备中间体9所述类似的方法来合成以下中间体。

中间体11的制备(方法A)

向冷却至-78℃的中间体9(12.0g，50.1mmol)在无水DCM(100mL)的溶液中缓慢添加BBr₃(14.4mL，152mmol)，并且将所得混合物缓慢升温至室温并搅拌8h。将混合物再次冷却至-78℃，并滴加MeOH(5mL)以淬灭反应物。将所得混合物缓慢升温至室温，并通过添加饱和NaHCO₃溶液两将pH值调节至约8。将水层用DCM(50mL×3)萃取，并且将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(EtOAc/PE＝0％至20％EtOAc)纯化，得到呈白色固体的中间体11(9.0g，78％产率)。

中间体11的替代制备(方法B)

将5-氟水杨酸(30.0g，192.2mmol)在亚硫酰氯(200mL)中的溶液在80℃处搅拌5小时。然后，将所得混合物减压浓缩，得到酰氯。在0℃处，向N-乙基丙-2-胺(33.5g，384.3mmol)和三乙胺(58.3g，576.5mmol)在二氯甲烷(200mL)的搅拌溶液中滴加酰氯在二氯甲烷(100mL)中的溶液。在室温处搅拌过夜后，将所得混合物减压浓缩。将粗产物溶解在甲醇(300mL)中。然后，添加氢氧化钠(20g)在水(100mL)中的溶液。在室温处搅拌1小时后，将所得混合物用水(100mL)稀释并减压浓缩以除去过量甲醇，调节至pH值4并用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将合并的有机层减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法用(EA/PE，16.3:83.7)洗脱来纯化，得到29.4g(66％产率)呈灰白色固体的中间体11。

通过与上文针对中间体11(方法A)所述类似的方法来合成以下中间体。

通过与上文针对中间体11(方法B)所述类似的方法来合成以下中间体。

实施例A4

中间体13的制备

向在0℃处冷却的3,5,6-三氯-1,2,4-三嗪(10.0g，54.2mmol)和TEA(15.2mL，109mmol)在DCM(100mL)的溶液中添加2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸叔丁酯(9.21g，43.4mmol)，并将混合物升温至室温并搅拌1h。将混合物用水(20mL)稀释并用DCM(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过硅胶FCC(流动相A：PE；流动相B：EtOAc，洗脱液为0-25％流动相B)纯化，得到呈黄色固体的中间体13(12.0g，58％产率)。

中间体14的制备

将中间体13(12.0g，33.3mmol)、中间体11(7.5g，33.3mmol)和DBU(6.1g，40.1mmol)在THF(120mL)中的混合物在25℃处搅拌8h。将混合物用水(30mL)稀释并用DCM(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过硅胶FCC(流动相A：PE；流动相B：EtOAc，洗脱液为0-25％流动相B)纯化，得到呈绿色固体的中间体14(14.0g，73％产率)。

通过与上文针对中间体14所述类似的方法来合成以下中间体。

中间体16的制备

/>

方法A：

在N₂气氛下，向中间体14(20g，36.4mmol)、NaBH₄(2.48g，65.7mmol)和TMEDA(8.54g，73.5mmol)在THF(500mL)的混合物中添加Pd(dppf)Cl₂×DCM(1.70g，2.08mmol)。添加后，将反应混合物在25℃处搅拌14h。将反应混合物过滤，并浓缩滤液，将残余物通过硅胶FCC(用EtOAc洗脱)纯化，得到呈棕色固体的中间体16(15g，74％产率)。

方法B：

向中间体14(22.0g，40.1mmol)、TEA(15mL)在MeOH(100mL)的溶液中添加Pd/C(湿的，5.0g，10％)。将所得混合物在H₂气氛(30psi)下在25℃处搅拌8小时。将反应混合物通过celite过滤，并将滤液浓缩真空，得到中间体16(25.0g，粗产物)，其无需进一步纯化即可直接用于下一步骤。

通过与上文针对中间体16所述类似的方法来合成以下中间体。

中间体18的制备

向中间体16(300mg，0.583mmol)在DCM(5mL)的溶液中添加TFA(0.5mL，6.4mmol)，并将所得混合物在室温处搅拌3h。然后，将10％ NaOH溶液(5mL)缓慢添加到混合物中以将pH值调节至约12，并将所得混合物用DCM(10mL×3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，得到呈白色固体的中间体18(220mg，90％产率)

通过与上文针对中间体18所述类似的方法来合成以下中间体。

实施例A5

中间体20的制备：

在0℃处，向顺式-3-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-环丁烷甲酸(10.0g，46.5mmol)在DMF(100mL)的溶液中添加HOBt(8.15g，60.3mmol)、EDCI(11.6g，60.5mmol)和DIEA(30.0mL，182mmol，0.782g/mL)。然后，在0℃处添加N,O-二甲基羟胺盐酸盐(5.90g，60.5mmol)。将混合物在室温处搅拌16小时。将混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释。将混合物用1M HCl(150mL)、饱和NaHCO₃(100mL×2)和盐水(300mL×3)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到呈白色固体的中间体20(11.0g，粗产物)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。

中间体21的制备：

在0℃处在N₂气氛下，向中间体20(11.0g，6.97mmol)在THF(100mL)的溶液中滴加异丙基氯化镁(64.0mL，128mmol，2M于THF中)。将混合物在N₂气氛下在室温处搅拌12小时。将混合物用饱和NH₄Cl(100mL)淬灭。将混合物通过垫过滤，并将滤液减压浓缩。将混合物用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物通过硅胶快速柱色谱法(洗脱液：石油醚:乙酸乙酯1:0至5:1)纯化，得到呈白色固体的中间体21(6.30g)。

实施例A6

中间体22的制备：

在N₂下，在室温处，向中间体18(1g，2.41mmol)、中间体21(873mg，3.62mmol)、乙酸(276μL，4.83mmol)在MeOH(50mL)的混合物中添加NaBH₃CN(455mg，7.24mmol)。然后，将反应物在50℃处加热过夜。将反应混合物冷却至室温，倾注到冰水中，用饱和NaHCO₃溶液碱化并添加DCM。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将粗产物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm 40g，流动相：0％ NH₄OH、100％ DCM、0％ MeOH至0.1％NH₄OH、95％ DCM、5％ MeOH的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到1.37g(89％产率)中间体22。

实施例A7

中间体23的制备：

在0℃处，向3,3-二甲氧基环丁烷甲酸(12.0g，75mmol)在DCM(145mL)的溶液中添加T₃P(100mL，168mmol，50％于EtOAc中)和DIEA(64mL，372mmol)。然后在0℃处添加N,O-二甲基羟胺盐酸盐(8.8g，89.5mmol)。将混合物在室温处搅拌16小时。将混合物倾注到饱和NaHCO₃溶液上并添加EtOAc。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体23(16.0g，粗产物)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。

中间体24的制备：

对15.7g中间体23进行两次反应，并将相应的反应介质混合用于后处理和纯化。在0℃处在N₂气氛下，向中间体23(15.7g，77.7mmol)在THF(420mL)的溶液中滴加异丙基氯化镁(178.5mL，232mmol，2M于THF中)。将反应混合物在N₂气氛下在室温处搅拌12小时，并然后倾注到冰水和10％ NH₄Cl水溶液上。将获得的混合物与从第二次反应获得的混合物合并，并将合并的混合物用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物通过硅胶快速柱色谱法(流动相：庚烷:EtOAc 9:1)纯化。收集纯级分并蒸发至干，得到呈无色油状物的22g(76％产率)中间体24。

实施例A8

中间体25的制备

将中间体18(10g，24.13mmol)、中间体24(4.94g，26.54mmol)和乙酸(1.5mL，26.54mmol)在MeOH(80mL)中的混合物在室温处搅拌20min。然后，添加NaBH₃CN(1.82g，28.95mmol)并将混合物在50℃处搅拌过夜。将反应溶液倾注到冰水中，并用DCM萃取。将有机层用水和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法(流动相A：PE；流动相B：EtOAc，洗脱液为0-100％ EtOAc)纯化，得到9.21g(64％产率)呈淡黄色固体的中间体25。

中间体26

以及中间体27

的制备

将中间体25(9.2g)经由手性SFC(固定相：C+HIRALPAK AD-H5μm 250*21.2mm，流动相：83％ CO₂，EtOH/ACN 80/20v/v(+0.3％iPrNH₂)的17％混合物)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到4.07g(44％产率)中间体26和4.06g(44％产率)中间体27以及273mg中间体25的残余级分。

用于中间体27的方法A：

向中间体35(2.24g，3.618mmol)在甲醇(45mL)的溶液中添加钯/活性炭(10％钯)(635mg，0.597mmol)。然后，将混合物在氢气下在室温处搅拌5小时。将混合物用甲醇稀释，通过垫过滤，并将滤液减压蒸发。将残余物用乙酸乙酯溶解，用氢氧化钠溶液(1M于水中)和盐水洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，减压蒸发，得到1.4g(62％产率)呈黄色固体的中间体27。

用于中间体27的方法B：

将中间体35(1.44g；2.33mmol)和TMEDA(0.54mL；3.63mmol)在无水THF(55mL)中的混合物通过N₂鼓泡脱气。然后，添加Pd(dppf)Cl₂.DCM(216mg；0.26mmol)和硼氢化钠(144mg；3.81mmol)。将反应混合物在密封的玻璃器皿中在50℃处搅拌过夜。将溶液冷却，倾注到冷却的水中。添加EtOAc并将混合物通过过滤。将产物用EtOAc萃取，并将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将粗残余物(1.7g)通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 40μm 40g，流动相：100％ DCM、0％ MeOH(+10％ NH4OH)至95％ DCM、5％ MeOH(+10％NH4OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到中间体27的2种级分(680mg，50％产率，通过LCMS测定的纯度为96％和360mg；26％产率，通过LCMS测定的纯度为91％)。

中间体28的制备：

将中间体26(2g，3.42mmol)和TFA(2.9mL；37.9mmol)在DCM(29mL)中的溶液在室温处搅拌过夜。然后添加ACN并将溶液蒸发至干。然后将残余物溶解于EtOAc和冰水中，用NH₄OH碱化。分离各层，并将水层用EtOAc萃取。将合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发，得到1.80g(98％产率)中间体28。

中间体29的制备：

将含中间体27(1.87g，3.20mmol)的TFA(2.7mL)和DCM(27mL)在室温处搅拌过夜。将溶液蒸发至干。然后将残余物溶解于DCM和冰水中，用30％ NH₄OH水溶液碱化。将水层用DCM萃取。将合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发，得到1.35g(78％产率)呈浅黄色固体的中间体29。

中间体29的替代制备：

向中间体27(1.40g，2.25mmol)在丙酮(30mL)和水(14mL)的溶液中添加对甲苯磺酸(1.94g，11.276mmol)。将反应溶液在65℃处搅拌5小时。将所得混合物用水和乙酸乙酯淬灭。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。滤出固体。将残余物减压浓缩，得到1.01g(78％)呈黄色固体的中间体29。

中间体29a的制备：

根据中间体28从中间体25开始来制备中间体29a。

实施例A9

中间体30的制备：

向2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸苯甲酯(15g，60.9mmol)在甲醇(300mL)的搅拌溶液中添加中间体24(13.61g，73.08mmol)和乙酸(4.02g，66.99mmol)。在室温处搅拌0.5小时后，添加氰基硼氢化钠(7.65g，121.8mmol)。在50℃处搅拌过夜后，将反应混合物用碳酸钾溶液(10％于水中)淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥。滤出固体。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(流动相A：PE；流动相B：EtOAc，洗脱液为0-50％ EtOAc)纯化，得到17.8g(69％产率)呈淡黄色油状物的中间体30。

中间体31：

以及中间体32：

的制备

通过SFC使用以下条件来纯化170g中间体30：柱：CHIRALPAK IG，5*25cm，10μm；流动相A：CO₂，流动相B：EtOH:ACN:DCM＝1:1:1；流速：150mL/min；梯度：40％ B；220nm；保留时间1＝4.45min；保留时间2＝5.88min；进样体积：3.8ml；运行次数：237，得到两种级分。级分A：67.0g(通过LCMS测定的纯度>99％，39％产率，保留时间2：5.88min)呈淡黄色油状物的中间体31。级分B：65g(99％纯度，38％产率，保留时间1：4.45min)呈淡黄色油状物的中间体32。

中间体33的制备

/>

向中间体31(15g，36.01mmol)在甲醇(300mL)的溶液中添加钯/活性炭(10％钯)(8g，7.517mmol)。然后将混合物在氢气(2atm.-3atm.)下在室温处搅拌5小时。将混合物用甲醇稀释并通过垫过滤。将滤液减压蒸发，得到9.5g呈黄色油状物的所需产物，其无需任何进一步修饰即可直接用于下一步骤。

中间体34的制备

在氮气下在0℃处，向3,5,6-三氯-1,2,4-三嗪(9.4g，50.99mmol)在二氯甲烷(100mL)的溶液中添加中间体33(12.0g，42.49mmol)和三乙胺(12mL，84.98mmol)在二氯甲烷(150mL)中的混合物。在氮气下在室温处搅拌3小时后，将混合物用水淬灭并用二氯甲烷萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥。滤出固体。将滤液减压浓缩，得到17.3g(83％产率，通过LCMS测定的纯度为88％)呈黄色固体的中间体34。

中间体35的制备：

将中间体34(1.6g；3.72mmol)、中间体11(1g；4.44mmol)和DBU(2.7mL；18.45mmol)在THF(150mL)中的溶液在室温处搅拌72小时。将溶液倾注到冷水中，并将产物用EtOAc萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将粗产物(3g)通过硅胶色谱法(固定相：不规则裸二氧化硅80g，流动相：63％庚烷、2％ MeOH(+10％ NH₄OH)、35％EtOAc)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到1.48g(64％产率)中间体35。

中间体35的替代制备：

向中间体34(3.00g，6.971mmol)和中间体11(1.88g，8.365mmol)在四氢呋喃(60mL)的溶液中添加四甲基胍(1.37g，11.85mmol)。将反应溶液在室温处搅拌2天。将所得混合物用冷水淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用氢氧化钠(0.5M/L)、水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥。滤出固体。将滤液减压浓缩。将残余物通过快速色谱柱(乙酸乙酯/己烷2:1)纯化，得到呈黄色固体的2.60g(59％产率)中间体35。

中间体82的制备：

向中间体34(10.0g，23.27mmol)和中间体81(5.89g，27.887mmol)在THF(250mL)的混合物中添加四甲基胍(7.3mL，58.09mmol)。在室温处搅拌48小时后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，并经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过快速硅胶柱色谱法(流动相A：PE；流动相B：EtOAc，洗脱液为0-93％ EtOAc)纯化，得到7.5g(49％产率)呈黄色固体的中间体82。

中间体83的制备

向中间体82(7.0g，11.57mmol)在四氢呋喃(140mL)的混合物中添加1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(472mg，0.58mmol)、硼氢化钠(744mg，19.67mmol)和N,N,N',N'-四甲基乙二胺(2.9mL，19.67mmol)。在N₂气氛下在室温处搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，并经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过快速硅胶柱色谱法(MeOH/DCM，0％MeOH至9％MeOH)纯化，得到4.8g(54％产率，基于LC/MS的纯度为85.1％)呈棕色固体的中间体83。

中间体84的制备：

向中间体83(4.8g，8.32mmol)在丙酮(100mL)和水(50mL)的混合物中添加对甲苯磺酸(7.17g，41.62mmol)。在65℃处搅拌过夜后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，并用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到3.1g(45％产率，基于LC/MS的纯度为62.8％)呈棕色固体的中间体84。

实施例A10

中间体36的制备：

向1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-甲酸(30.0g，29.82mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(42.9g，223.64mmol)和N,O-二甲基羟胺(21.8g，223.64mmol)在DCM(500mL)的搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(61.7mL，372.73mmol)和4-二甲基氨基吡啶(3.6g，149.09mmol)。在室温处搅拌过夜后，将反应溶液用DCM(500mL)稀释并用水、10％柠檬酸水溶液、水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到24.0g呈淡黄色油状物的中间体36。

中间体37的制备：

在0℃处，向中间体36(26.5g，108.5mmol)在四氢呋喃(250mL)的搅拌溶液中添加异丙基氯化镁(271mL，542.0mmol，2M于THF中)。在室温处搅拌过夜后，将反应混合物在0℃处用盐水(300mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EA，8:2)纯化，得到19.5g呈淡黄色油状物的中间体37(87％纯度，68％产率)。

中间体39的制备：

在0℃处，向2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸叔丁酯(25.5g，120.12mmol)在四氢呋喃(250mL)和碳酸钾(36.52g，264.262mmol)的水溶液(250mL)的搅拌混合物中添加氯甲酸苄酯(20.3mL，144.143mmol)。在室温处搅拌过夜后，将反应混合物用乙酸乙酯(3×300mL)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EA，6:4)纯化，得到39.10g呈淡黄色油状物的中间体39(99％纯度，93％产率)。

中间体40的制备：

向中间体39(55.5g，160.2mmol)在DCM(550mL)的溶液中添加TFA(110mL)。在室温处搅拌2小时后，浓缩反应溶液。将残余物溶解于水(300mL)中。将所得水性溶液用饱和NaHCO₃溶液碱化至pH＝8，并用DCM/MeOH(10:1，4×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2×300mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到45.3g(74％产率)呈TFA盐形式并呈淡棕色固体的中间体40。

中间体41的制备：

向中间体40(5.00g，13.88mmol)在甲醇(50mL)的搅拌溶液中添加中间体37(3.79g，16.65mmol)。在室温处搅拌0.5小时后，添加氰基硼氢化钠(4.36g，69.38mmol)。将所得混合物在50℃处搅拌过夜。添加另外的中间体37(1.58g，6.94mmol)和氰基硼氢化钠(2.62g，41.63mmol)。在50℃处搅拌6小时后，添加另外的氰基硼氢化钠(1.31g，20.814mmol)。在50℃处搅拌过夜后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3×300mL)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法用(PE/EA，7:3)洗脱来纯化，得到4.5g(67％产率)呈淡黄色油状物的中间体41。

中间体42的制备：

向中间体41(3.60g，7.87mmol)在乙醇(40mL)的搅拌溶液中添加钯/活性炭10％Pd(800mg)。在氢气流(2atm-3atm)下在室温处搅拌2小时后，将反应混合物通过垫过滤，将其用乙醇和DCM洗涤。将滤液减压浓缩，得到2.5g呈灰色油状物的中间体42。

中间体43的制备：

向3,4,6-三氯哒嗪(700mg，2.164mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)的搅拌溶液中添加中间体42(397mg，2.164mmol)和三乙胺(0.9mL，6.492mmol)。在一定温度处搅拌3h后，将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥并滤出。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法用(PE:EA＝55:45)洗脱来纯化，得到900mg(84％产率)呈白色固体的中间体43。

中间体44的制备：

向中间体43(800mg，1.701mmol)在N,N-二甲基乙酰胺(15mL)的搅拌溶液中添加中间体11(383mg，1.70mmol)和碳酸铯(1.66g，5.10mmol)。在130℃处搅拌3h后，将反应混合物冷却至室温，用水(100mL)淬灭并用EA(3×80mL)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法用(PE:EA＝55:45)洗脱来纯化，得到800mg(70％产率)呈白色固体的中间体44。

中间体45的制备：

向中间体44(750mg，1.138mmol)在乙酸乙酯(15mL)的搅拌溶液中添加钯/活性炭10％ Pd(800mg)。在氢气流(2atm-3atm)下在室温处搅拌过夜后，将反应混合物通过垫过滤，将其用乙酸乙酯和乙醇洗涤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法用(DCM:MeOH＝6:4)洗脱来纯化，得到303mg呈灰白色固体的中间体45(42％产率)。

中间体50的制备：

将中间体18(740mg，1.78mmol)、中间体37(487mg，2.1mmol)、NaBH₃CN(337mg，5.4mmol)和乙酸(102μL，1.78mmol)在MeOH(15mL)中的混合物在50℃处搅拌过夜。将反应混合物与对220mg中间体18进行的另一反应混合。将所得反应混合物倾注到冰水中，用饱和NaHCO₃溶液碱化并添加DCM。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm 24g MERCK，流动相：99％ DCM、1％ MeOH(+10％NH₄OH)至95％ DCM、5％ MeOH(+10％ NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到1.04g(93％产率)中间体50。

中间体51：

和中间体52的制备：

将中间体50(1.04g)通过手性SFC(固定相：CHIRALPAK IC 5μm 250*30mm，流动相：50％ CO₂，50％ EtOH(0.3％iPrNH₂))纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到411mg(37％产率)中间体51和427mg(38％产率)中间体52。

中间体50的替代制备：

在N₂流下，将中间体18(854mg；1.13mmol)和中间体37(385mg；1.7mmol)的THF溶液(15mL)在室温处搅拌24h。然后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(718mg；3.39mmol)。将混合物在室温处搅拌24h。将溶液倾注到冷水中，用3N NaOH溶液碱化，并添加EtOAc。将有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm12g，流动相：99％ DCM、1％ MeOH(+10％NH₄OH)至95％ DCM、5％ MeOH(+10％ NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到200mg(28％产率)中间体50。

实施例A12

中间体53的制备

将三氯氧化磷(9.42g，61.4mmol)滴加到由4-氯哒嗪-3-醇(2.00g，38.3mmol)和ACN(20mL)组成的0℃(冰/水)溶液中。然后，将反应混合物加热并在80℃处搅拌3小时，然后冷却至室温。将反应混合物缓慢倾注到水(50mL)中，并用饱和碳酸氢钠溶液调节至pH＝8。将混合物用DCM(50mL×3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(硅胶，流动相A：PE；流动相B：EtOAc，用0-25％ EtOAc洗脱)纯化，得到呈黄色固体的中间体53(2.00g，88％产率)。

中间体54的制备：

将搅拌棒、中间体53(500mg，3.36mmol)、2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸叔丁酯(712mg，3.35mmol)、三乙胺(1.02g，10.1mmol)和无水DCM(10mL)添加到40mL玻璃瓶中，然后将所得混合物在25℃处搅拌8h。将混合物稀释到DCM(20mL)中并用水(10mL×3)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(硅胶，流动相A：PE；流动相B：EtOAc，用0-100％ EtOAc洗脱)纯化，得到呈黄色固体的中间体54(500mg，42％产率)。

中间体55的制备

将搅拌棒、中间体11(346mg，1.54mmol)、中间体54(500mg，1.54mmol)、碳酸铯(1.51g，4.63mmol)和干燥的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)添加到50mL圆底烧瓶中，然后将所得混合物加热并在130℃处搅拌8h。将混合物冷却至室温并减压浓缩，得到残余物。将残余物悬浮于二氯甲烷(20mL)中并用水(10mL×3)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(硅胶，流动相A：EtOAc；流动相B：MeOH，用0-10％MeOH洗脱)纯化，得到呈黄色固体的中间体55(700mg，80％产率)。

中间体56的制备：

将搅拌棒、中间体55(700mg，1.36mmol)、三氟乙酸(4mL)和无水二氯甲烷(2mL)添加到25mL圆底烧瓶中，然后将混合物在25℃处搅拌40min。将混合物减压浓缩，得到残余物。将残余物稀释到二氯甲烷(20mL)中，并用氢氧化钠溶液(3M，8mL)将pH调节至pH＝12。将水层用二氯甲烷(10mL×2)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色油状物的中间体56(600mg，粗产物)。

中间体57的制备：

将HATU(99.5g，262mmol)分批添加到由1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-甲酸(50.0g，218mmol)、N,O-二甲基羟胺盐酸盐(23.4g，240mmol)、Et₃N(90.9mL，654mmol)和二氯甲烷(500mL)组成的0℃(冰/水)混合物中。将反应混合物在室温处搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩至干。将残余物用水(1500mL)稀释并用二氯甲烷(500mL×3)萃取。将合并的有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(硅胶，流动相A：PE；流动相B：EtOAc，用0-50％ EtOAc洗脱)纯化，得到呈黄色油状物的中间体57(54g，产率：82％)。

中间体58的制备：

将中间体57(54.0g，198mmol)和THF(500mL)添加到1L三颈圆底烧瓶中。在0℃(冰/水)处在N₂下，将i-PrMgCl(198mL，397mmol，2M于THF中)滴加到混合物中。将混合物搅拌升温至室温10小时，然后倾注到水(2000mL)中，并用EtOAc(1000mL×3)萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过硅胶快速柱色谱法(硅胶，流动相A：PE；流动相B：EtOAc，用0-35％EtOAc洗脱)纯化，得到呈黄色油状物的中间体58(19.2g，34％产率)。

中间体59的制备：

将搅拌棒、中间体58(278mg，1.09mmol)、中间体56(300mg，0.726mmol)、氯化锌(200mg，1.47mmol)和无水甲醇(6mL)添加到40mL玻璃瓶中，然后将混合物加热并在45℃处搅拌4h。然后，将氰基三氢硼酸钠(91.2mg，1.45mmol)添加到混合物中。将所得混合物在45℃处再搅拌40h。将混合物稀释到二氯甲烷(40mL)中，并用水(10mL×3)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(硅胶，流动相A：EtOAc；流动相B：MeOH，用0-10％MeOH洗脱)纯化，得到呈黄色固体的中间体59(150mg，29％产率)。

实施例A12

中间体60的制备：

将中间体18(120mg，0.29mmol)、中间体58(150mg，0.585mmol)和ZnCl₂(80mg，0.59mmol)添加到25mL圆底烧瓶中，并将所得混合物溶解于MeOH(5mL)中。将混合物加热并在80℃处搅拌4小时。将氰基硼氢化钠(37mg，0.59mmol)添加到混合物中。然后，将混合物在80℃处搅拌16小时。然后，将另外的中间体58(150mg，0.585mmol)、ZnCl₂(80mg，0.59mmol)和NaBH₃CN(37mg，0.59mmol)添加到上述溶液中。然后，将混合物在80℃处搅拌6小时。将反应混合物减压浓缩至干，得到粗产物，将该粗产物通过制备型HPLC使用Boston GreenODS150mm×30mm×5μm柱(洗脱液：25％至55％(v/v)CH₃CN和H₂O与0.04％NH₃H₂O+10mMNH₄HCO₃)来纯化，得到纯中间体60，将该中间体悬浮于水(10mL)中。使用干冰/丙酮将混合物冷冻，并然后冻干至干，得到呈白色固体的中间体60(60mg)。

中间体60a

和中间体60b的制备：

将中间体60(375mg，0.57mmol)通过超临界流体色谱法纯化(分离条件：DAICELCHIRALPAK IG(250mm×30mm×10μm)；流动相：A：超临界CO₂，B：0.1％NH₃H₂O IPA，A:B＝45:55，在80mL/min处；柱温：38；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60；蒸发器温度：20；调整器温度：25；波长：220nm)。收集纯级分，并且真空除去挥发物。将所得产物冻干至干，以完全除去溶剂残余物。获得呈白色固体的所需产物中间体60a(15mg，4％产率)和中间体60b(19mg，5％产率)。

中间体61的制备：

在0℃处，将EDCI(34.0g，177mmol)添加到由(R)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸(25.0g，116mmol)、HOBT(24.0g，178mmol)、DIPEA(102.5mL，586.9mmol)和DMF(250mL)组成的溶液中。将反应混合物搅拌5min。向反应混合物中添加N,O-二甲基羟胺(12.5g，128mmol)。将反应混合物在室温处搅拌10h，然后冷却至室温。将混合物倾注到水(1000mL)中，并用乙酸乙酯(400mL×3)萃取。将有机相用5％柠檬酸水溶液(400mL×3)、饱和NaHCO₃(400mL×2)、盐水(400mL×2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到呈无色油状物的粗中间体61(26g，82％产率)。

中间体62的制备：

将i-PrMgCl(101mL，202mmol，2M于THF中)滴加到中间体61(26.0g，101mmol)和THF(250mL)的0℃(冰/水)溶液中。将反应混合物在室温处搅拌10小时。将混合物用饱和NH₄Cl溶液(500mL)淬灭并用乙酸乙酯(500mL×3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，得到产物，将该产物通过FCC(硅胶，流动相A：PE；流动相B：EtOAc，用0-50％EtOAc洗脱)纯化，得到呈黄色油状物的中间体62(15.0g，56％产率)。

中间体63：

和中间体64的制备：

/>

向中间体18(300mg，0.724mmol)和中间体62(524mg，2.17mmol)在15mL MeOH的溶液中添加ZnCl₂(395mg，2.90mmol)。添加后，将反应混合物在75℃处搅拌3小时，然后将NaBH₃CN(182mg，2.90mmol)添加到反应物中，并将混合物在相同温度处搅拌4小时。添加另外的中间体62(300mg)，并将混合物在75℃处搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并且将残余物通过制备型HPLC(柱Welch Xtimate C18150×25mm×5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：30mL/min，梯度条件为61％ B至81％ B)纯化。收集纯级分，并减压蒸发溶剂。将水层冻干，得到呈白色固体的中间体63(75.0mg，16％产率)和呈白色固体的中间体64(88mg，18％产率)。

中间体65的制备：

在10℃处，将(S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-甲酸(15.0g，69.7mmol)、EDCI(20.039g，104.53mmol)、HOBT(14.125g，104.53mmol)和DIEA(45.034g，348.44mmol)添加到DMF(100mL)中。5min后，将N,O-二甲基羟胺盐酸盐(7.477g，76.66mmol)添加到混合物中。将混合物在40℃处搅拌10h，然后倾注到水(400mL)中，并用乙酸乙酯(300mL×3)萃取。将有机相用5％柠檬酸水溶液(3×300mL)、饱和NaHCO₃(2×300mL)、盐水(2×300mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色油状物的中间体65(12.41g，74％)。

中间体66的制备：

将中间体65(12.4g，48.0mmol)和THF(20mL)添加到250mL圆底烧瓶中。在0℃(冰/水)处在N₂下，将异丙基氯化镁(49mL，98mmol，2M于THF中)滴加到混合物中。将混合物升温搅拌至室温10h。将混合物用饱和NH₄Cl水溶液(100mL)淬灭并用EtOAc(200mL×3)萃取。将合并的有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(硅胶，流动相A：PE；流动相B：EtOAc，用0-35％ EtOAc洗脱)纯化，得到呈淡黄色油状物的中间体66(7.6g，65％)。

中间体67：

和中间体68的制备：

向中间体18(300mg，0.724mmol)和中间体66(524mg，2.17mmol)在15mL MeOH的溶液中添加ZnCl₂(395mg，2.90mmol)。在添加之后，将反应混合物在75℃处搅拌3小时。然后，将NaBH₃CN(182mg，2.90mmol)添加到反应混合物中，并将混合物在相同温度处搅拌4小时。添加另外的中间体67(300mg)，并将混合物在75℃处搅拌16小时。将反应混合物冷却至25℃，并真空浓缩。将残余物通过制备型HPLC(柱Welch Xtimate C18 150×25mm×5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：30mL/min，梯度条件为61％ B至81％ B)纯化。收集纯级分，并减压蒸发溶剂。将水层冻干，得到呈白色固体的中间体67(100mg，21％产率)和呈白色固体的中间体68(105mg，22％产率)。

中间体70的制备：

在室温处，向2-[(4-氯-5-嘧啶基)氧基]-N-乙基-5-氟-N-(1-甲基乙基)-苯甲酰胺(4.5g，13.322mmol)和中间体42(4.31g，13.322mmol)在乙腈(100mL)的混合物中添加碳酸钠(5.65g，53.29mmol)。在90℃处搅拌2小时后，将所得混合物冷却至室温并通过垫过滤。将滤液减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法用(DCM/MeOH，96.7:3.3)洗脱来纯化，得到6.7g(78％产率)中间体70。

中间体71：

和中间体72的制备

将中间体70(6.7g)经由手性SFC(固定相：CHIRACEL OJ-H 5μm 250*30mm，流动相：94％ CO₂、6％ MeOH(0.3％iPrNH₂))纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到3.18g(47％产率)中间体71和3.16g(47％产率)中间体72。

中间体73的制备：

将EDCI(3.12g，13.7mmol)添加到1-(叔丁氧基羰基)-3-氟氮杂环丁烷-3-甲酸(2.00g，9.12mmol)、DIEA(6.5mL，36.7mmol)、N,O-二甲基羟胺盐酸盐(1.78g，18.2mmol)和HOBT(1.85g，13.7mmol)在乙腈(20mL)的溶液中，并将反应混合物在N₂下在25℃处搅拌2h。将混合物用水(50mL)淬灭并用EtOAc(100mL×3)萃取。将EtOAc层经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发，得到残余物，将该残余物通过FCC(硅胶，PE:EA＝100:0至60:40)纯化，得到呈淡黄色油状物的中间体73(1.5g，63％产率)。

中间体74的制备：

在N₂下在5℃处，将i-PrMgCl(2M在THF中)(10mL，20mmol)滴加到中间体73(3.00g，11.4mmol)在THF(30mL)的溶液中。将溶液在5℃处搅拌30min，使其缓慢升至20℃并搅拌12h。将反应混合物倾注到冰水和饱和NH₄Cl水溶液的混合物中，并用EtOAc(200mL×2)萃取。将有机层倾析，经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发至干。将所得粗产物通过FCC(硅胶，PE:EA＝100:0至70:30)纯化，得到呈无色油状物的中间体74(1.6g，51％产率)。

中间体75的制备：

在Ar气氛下，在30℃处，向双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(1.00g，8.92mmol)、4-溴哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.71g，17.8mmol)、2,2'-联吡啶(696mg，4.46mmol)、Ni(acac)₂(916mg，3.57mmol)、MgCl₂(2.55g，26.8mmol)、Zn(4.00g，61.2mmol)、MS(10.0g)和DIEA(4.5mL，27.2mmol)在THF/DMF(100mL/30mL)的溶液中添加Boc₂O(7.79g，35.7mmol)。在添加之后，将反应混合物在30℃处搅拌60小时。将反应混合物倾注到150mL水中，并用EtOAc(150mL×2)萃取。将合并的萃取物用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将所得残余物通过柱色谱法(硅胶，洗脱液来自PE/EtOAc＝100:0至85:15)纯化，得到呈无色油状物的中间体75(580mg，基于LCMS的纯度为60％，14％产率)。

中间体76的制备：

向中间体75(580mg，60％纯度，1.25mmol)、中间体18(568mg，1.37mmol)和AcOH(449mg，7.47mmol)在50mL MeOH的溶液中添加NaBH₃CN(470mg，7.47mmol)。在添加之后，将反应混合物在60℃处搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩，并将残余物用100mL水稀释，并用EtOAc(100mL×2)萃取。将合并的萃取物真空浓缩，并将所得残余物通过制备型HPLC(柱Phenomenex Gemini NX-C18(75*30mm*3μm)，流动相A：水(0.2％ FA)，流动相B：乙腈，流速：30mL/min，梯度条件为25％B至55％B)纯化。收集纯级分并冻干，得到呈白色固体的中间体76(310mg，37％产率)。

中间体76的制备：

LiC

通过用热风枪加热将LiCl(565.2mg，13.333mmol)在高真空下干燥，并然后使其冷却至室温。然后，添加Mg屑(324mg，13.333mmol)和THF(11.1mL，1M，11.1mmol)。将反应混合物冷却至0℃并然后添加溴环丁烷(1.5g，11.1mmol)。将反应混合物在室温处搅拌2小时。此时形成灰色溶液。环丁基溴化镁的THF溶液。将LiCl或中间体76(约1M)直接用于以下反应中。

中间体77的制备：

在烧瓶中，将中间体57(1.01g，3.704mmol)溶解于无水THF(10mL)中。将溶液在冰浴中冷却，并在该温度处用新鲜制备的中间体76溶液(11.1mL，约1M，11.1mmol)逐滴处理。将反应混合物搅拌过夜，并使其冷却至室温。然后添加饱和氯化铵溶液，并将水相用乙酸乙酯萃取三次。将有机相用硫酸镁干燥并过滤后，蒸发有机相。将粗产物(953mg)用快速CC(硅胶，15％ EA/正庚烷)纯化，得到833mg(28％产率)呈无色油状物的中间体77。

中间体78：

中间体79：

和中间体80的制备：

向中间体18(90.0mg，0.217mmol)、2滴乙酸和中间体77(145.1mg，0.543mmol)在甲醇(4mL)的溶液中添加氰基硼氢化钠(54.6mg，0.869mmol)。在60℃处搅拌过夜后，在真空下除去溶剂。然后，将反应物用饱和碳酸钠溶液淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水、盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥。滤出固体。将滤液减压浓缩。获得呈无色油状物的粗产物(200mg)，并通过制备型CC(12g硅胶，洗脱液来自2.5％至5％ MeOH/DCM)纯化，得到呈白色固体的中间体78(106mg，73％产率)。经由制备型SFC(固定相：Chiralpak Daicel IG 20×250mm，流动相：CO，EtOH+0.4iPrNH₂)进行对映体分离，得到224mg中间体79和261mg含有5％中间体79的中间体80。

中间体85的制备：

向4-氯-3-碘吡啶(2.00g，8.35mmol)在DMF(30mL)的混合物中添加2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸叔丁酯(1.95g，9.19mmol)和Cs₂CO₃(8.2g，25.2mmol)。将所得混合物在110℃处搅拌过夜。将反应物冷却至室温，并通过水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(100％石油醚至石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到呈白色固体的中间体85(1.7g，纯度100％，产率49％)。

中间体86的制备：

向中间体11(2.72g，12.1mmol)在N-甲基-2-吡咯烷酮(20mL)的混合物中添加中间体85(1.70g，4.09mmol)和Cs₂CO₃(4.00g，12.3mmol)。将混合物用氩气置换。然后在氩气保护下添加CuCl(255mg，2.58mmol)和2,2,6,6-四甲基-3,5-庚烷二酮(0.4mL，1.91mmol)。将所得混合物在氩气气氛下在140℃处搅拌过夜。将混合物冷却至室温，并通过水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(100％ DCM至DCM:MeOH＝10:1)纯化，得到呈棕色固体的中间体86(780mg，纯度89.93％，产率33％)。

中间体87的制备：

在室温处，向中间体86(200mg，0.390mmol)在DCM(2mL)的混合物中添加TFA(0.5mL)。将混合物在室温处搅拌0.5h。将反应混合物减压蒸发。将残余物用2M NaOH(5mL)稀释，用DCM(10mL×3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色固体的中间体87(160mg，99％产率)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。

中间体88的制备：

向中间体87(160mg，0.388mmol)在MeOH(4mL)的混合物中添加中间体21(187mg，0.775mmol)和AcOH(47mg，0.783mmol)。将混合物在70℃处搅拌1小时。然后将混合物冷却至室温并将NaBH₃CN(48mg，0.764mmol)添加到混合物中。将所得混合物在70℃处再搅拌1h。将反应混合物冷却至室温并蒸发以除去溶剂。将残余物用饱和NaHCO₃水溶液(10mL)稀释，用二氯甲烷(10mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将该粗产物通过FCC(100％石油醚至100％乙酸乙酯；TLC:乙酸乙酯，Rf＝0.1)纯化，得到呈黄色固体的中间体88(100mg，纯度99％，产率40％)。

中间体89的制备：

向中间体19(800mg，1.475mmol)在MeOH(10mL)的溶液中添加中间体37(838mg，3.686mmol)。将混合物在室温处搅拌1h。在0℃处，向混合物中添加NaBHCN(556mg，8.848mmol)。将混合物在室温处搅拌过夜。将混合物用碳酸氢钠溶液淬灭，用EA萃取，用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压蒸发。将残余物通过快速色谱法(硅胶，洗脱液来自100％ DCM至10％ MeOH/DCM)纯化，得到300mg呈黄色油状物的中间体89。

B.化合物的制备

化合物1的制备：

将2-[(4-氯-5-嘧啶基)氧基]-N-乙基-5-氟-N-(1-甲基乙基)-苯甲酰胺(174mg；0.516mmol)、中间体4(173mg；0.62mmol)和碳酸钠(218mg；2.064mmol)在ACN(20mL)中的混合物回流(90℃)2小时。将反应混合物冷却至室温，倾注到冰水上，并用DCM萃取。将有机层倾析，用水洗涤，经过滤并蒸发至干。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：0％ NH₄OH、0％ MeOH、100％ DCM至1％ NH₄OH、10％ MeOH、90％ DCM的梯度)纯化。收集纯级分并蒸发至干，得到150mg化合物1(50％产率)。

化合物2的制备

将2-[(4-氯-5-嘧啶基)氧基]-N-乙基-5-氟-N-(1-甲基乙基)-苯甲酰胺(33.5mg；0.099mmol)、中间体8(35mg；0.119mmol)和碳酸钠(42mg；0.398mmol)在ACN(3.7mL)中的混合物回流(90℃)2h。进行与用于分离化合物1类似的后处理和纯化，并得到化合物2。

化合物3：

和化合物4的制备：

将化合物2(361mg)经由手性SFC(固定相：CHIRALPAK AD-H5μm 250*30mm，流动相：88％ CO₂、12％ EtOH(0.3％iPrNH₂))纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到156mg级分A，将该级分用Et₂O吸收并蒸发至干，得到150mg化合物3；以及156mg级分B，将该级分用Et₂O吸收并蒸发至干，得到化合物4。

中间体4的替代制备：

对(1.3g；2.48mmol)化合物76进行两次反应。

在N₂流下，将NaBH(OAc)₃(1.56g；7.43mmol)滴加到中间体76(2.6g；5mmol)、氧杂环丁烷-3-甲醛(0.37mL；5.35mmol)在THF(100mL)的溶液中。然后，将反应混合物在室温处搅拌2h。将两个反应(对1.3g化合物76进行)与对700mg化合物76进行的另一反应混合，并将所得混合物倾注到冰水中，用10％ K₂CO₃水溶液碱化并添加EtOAc。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干，得到3.93g粗化合物4，将其与另外的392mg粗化合物4混合。将所得粗产物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm 80g MERCK，流动相：97％DCM、3％ MeOH(+10％ NH4OH)至90％ DCM、10％ MeOH(+10％NH4OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到2.5g化合物4(白色产物)和1.2g不纯的(通过LC/MC评估纯度为71.6％)化合物4。

对于化合物1和2所报道的类似反应方案可以用于从合适的起始材料开始制备下表中所列的化合物。

/>

化合物22的制备：

在0℃处，将TFA(3.2mL；42.2mmol)添加到中间体22(1.35g；2.11mmol)的DCM溶液(32mL)。然后，将反应物升温至室温并在室温处搅拌15h。

将反应混合物浓缩，并将残余物溶解于40mL水中。将溶液用1MNaOH溶液碱化直至pH＝8-9。在室温处搅拌10min后，将所得混合物用DCM萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干，得到0.84g(74％)化合物22。

化合物32的制备：

将中间体45(100mg；0.16mmol)和TFA(0.25mL；3.27mmol)在DCM(2.5mL)中的溶液在室温处搅拌过夜。通过蒸发除去TFA。将残余物用水溶解，用NH₄OH水溶液碱化。将有机层用DCM萃取，经MgSO₄干燥并蒸发至干，得到84mg化合物32(定量)。

化合物33的制备：

在0℃处，将TFA(0.49mL；6.4mmol)添加到中间体50(200mg；0.32mmol)在DCM(7mL)的溶液中。将反应混合物在室温处搅拌过夜。将残余物蒸发至干。将残余物(420mg)通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm 12g，流动相：90％ DCM、10％ MeOH(+10％NH₄OH)至85％ DCM、15％ MeOH(+10％ NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到144mg(85％产率)化合物33。

化合物34的制备：

在0℃处，将TFA(0.42mL；5.5mmol)添加到中间体51(173mg；0.28mmol)在DCM(6mL)的溶液中。将反应混合物在室温处搅拌过夜。蒸发溶剂。将残余物溶解于水中。然后，将溶液用1M NaOH溶液碱化直至pH＝9-10。在室温处搅拌10min后，将所得混合物用二氯甲烷(3×)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤并经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干，得到150mg(定量)化合物34。

化合物35的制备：

根据化合物34从中间体52开始来制备化合物35。

化合物36的制备：

将搅拌棒、中间体59(130mg，0.199mmol)、三氟乙酸(2mL)和无水二氯甲烷(1mL)添加到25mL圆底烧瓶中，然后将所得混合物在25℃处搅拌1h。将混合物减压浓缩，得到呈无色油状物的化合物36(130.0mg，粗产物)，其不经进一步纯化即可直接用于下一步骤。

化合物37的制备：

将中间体60(40mg，0.061mmol)、1,4-二噁烷(0.5mL)和HCl/1,4-二噁烷(0.2mL，4M)添加到10mL圆底烧瓶中。将反应混合物在室温处搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩至干，得到标题化合物，将其溶解在H₂O(10mL)中。将所得溶液用固体NaHCO₃碱化至pH＝8，并用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。将合并的有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干。将残余物悬浮于水(10mL)中。使用干冰/丙酮将混合物冷冻，并然后冻干，得到呈白色固体的中间体37(30mg，粗产物)，其无需进一步纯化即可用于下一步骤。

化合物78的制备：

将HCl/二噁烷(200μL，0.400mmol，2M)添加到由中间体60a(15mg，0.023mmol)的二噁烷溶液(1mL)组成的溶液中。将反应混合物在室温处搅拌2小时。沉淀出白色固体。用注射器除去溶剂，并将白色固体减压浓缩至干，得到标题化合物，将其悬浮于水(10mL)中，并使用干冰/乙醇冷冻，并然后冻干至干，得到呈白色固体的化合物78(6.47mg，47％产率)。

化合物79的制备：

将HCl/二噁烷(200μL，0.400mmol)添加到由中间体60b(19mg，0.029mmol)和二噁烷(1mL)组成的溶液中。将反应混合物在室温处搅拌2h。沉淀出白色固体。用注射器除去溶剂，并将白色固体减压浓缩至干，得到标题化合物，将其悬浮于水(10mL)中，并使用干冰/乙醇冷冻，并然后冻干至干，得到呈白色固体的化合物79(7.32mg，42％产率)。

化合物45的制备：

将HCl/二噁烷(150μL，0.300mmol，2M)添加到由中间体63(20mg，0.031mmol)和二噁烷(1mL)组成的溶液中。将反应混合物在室温处搅拌4小时。沉淀出白色固体。用注射器除去溶剂(二噁烷)，并将白色固体减压浓缩至干，得到标题化合物，将其悬浮于水(10mL)中。使用干冰/乙醇将混合物冷冻，并然后冻干至干，得到呈白色固体的化合物45(3.17mg，17％产率)。

化合物46的制备

将HCl/二噁烷(150μL，0.300mmol，2M)添加到由中间体64(19mg，0.030mmol)和二噁烷(1mL)组成的溶液中。将反应混合物在室温处搅拌4小时。沉淀出白色固体。用注射器除去溶剂(二噁烷)，并将白色固体减压浓缩至干，得到标题化合物，将其悬浮于水(10mL)中。使用干冰/乙醇将混合物冷冻，并然后冻干至干，得到呈白色固体的化合物46(8.01mg，46％产率)。

化合物49的制备：

在0℃处，将HCl/1,4-二噁烷(0.3mL)添加到由中间体67(25mg，0.039mmol)和1,4-二噁烷(1mL)组成的混合物中。将所得混合物在室温处搅拌1h。将反应混合物减压浓缩至干，得到粗产物，将其通过制备型HPLC使用YMC-Triart制备型C18 250×50mm×10μm柱(洗脱液：45％至75％(v/v)CH₃CN与0.04％ NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)纯化，得到纯产物。将产物悬浮于水(10mL)中。使用干冰/乙醇将混合物冷冻，并然后冻干至干，得到呈白色固体的化合物49(3.88mg，基于LC/MS的纯度为89％，16％产率)。

制备化合物49的替代程序：

将搅拌棒、中间体67(70.0mg，0.109mmol)和盐酸/二噁烷(2mL，8.0mmol，4M于二噁烷中)添加到10mL圆底烧瓶中，然后将混合物在25℃处搅拌1h。将混合物减压浓缩，得到70mg呈白色固体的粗化合物49(HCl盐)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。

化合物50的制备：

向中间体68(40.0mg，0.063mmol)在1mL二噁烷的溶液中添加HCl/二噁烷(3mL)。在添加之后，将反应混合物在10℃处搅拌45分钟。将反应混合物真空浓缩，并且将残余物通过制备型HPLC(柱Boston Prime C18150×30mm×5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mMNH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件为45％ B至75％)纯化。收集纯级分，并减压蒸发溶剂。将水层冻干，得到呈白色固体的化合物50(12mg，34％产率)。

化合物76的制备：

在圆底烧瓶中，在0℃处，将TFA(12.7mL；166mmol)添加到中间体71(5.18g；8.29mmol)的DCM溶液(175mL)中。然后，将反应物升温至室温并将反应混合物在室温处搅拌过夜。将残余物溶解于20mL水中。然后，将溶液用1M NaOH溶液(70mL)碱化直至pH＝8-9。在室温处搅拌10min后，将所得混合物用二氯甲烷(5×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×150mL)洗涤，并经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干，得到4g(92％产率)化合物76。

按照与针对制备化合物76所报道的类似的反应方案从相应的起始材料开始制备下表中列出的化合物。

化合物80的制备：

向中间体76(380mg，0.561mmol)在3mL DCM的溶液中添加TFA(6mL)。在添加之后，将反应混合物在27℃处搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，得到化合物80(350mg，粗产物，TFA盐)，其不经任何纯化即可用于下一步骤。

化合物112的制备：

在小瓶中，将中间体80(208mg，0.312mmol)溶解于DCM(3.00mL，46.9mmol)中并冷却至0℃。将混合物用TFA(0.478mL，6.25mmol)处理，然后除去冷却浴。搅拌过夜后，添加饱和碳酸钠溶液以及DCM。将水相用1N NaOH水溶液进一步碱化至pH 13。将水相用DCM萃取多次，并然后用乙酸乙酯萃取多次。将收集的有机溶剂用MgSO₄干燥，过滤，然后除去溶剂，得到呈白色固体的化合物112(150mg，85％产率)。

化合物113的制备：

在小瓶中，将中间体79(224mg，0.336mmol)溶解于DCM(3.23mL，50.5mmol)中并冷却至0℃。将混合物用TFA(0.515mL，6.73mmol)稀释。移除冷却浴。搅拌过夜后，添加饱和碳酸钠溶液以及DCM。将水相用1N NaOH水溶液进一步碱化至pH 13。将水相用DCM和乙酸乙酯萃取多次。将收集的有机溶剂用MgSO4干燥，过滤，然后除去溶剂，得到粗化合物113(239mg)。使用35mg粗化合物113，并且经由制备型HPLC(固定相：RP XBridge制备型C18OBD-10μm，30×150mm，流动相：0.25％ NH₄HCO₃水溶液，CH₃CN)纯化，得到呈白色固体的16mg化合物113。

化合物54：

化合物55：

和化合物56的制备

在密封管中，将NaBH₃CN(45.8mg，0.729mmol)添加到中间体29(157mg，0.291mmol)、(S)-3-甲氧基吡咯烷(88.4mg，0.874mmol)和乙酸(16.7μL，0.291mmol)在甲醇(4mL)的混合物中。将反应混合物在60℃处搅拌18h。添加饱和NaHCO₃水溶液和EtOAc。分离各层。将水层用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法(不规则SiOH 40μm，12g，液体载荷(DCM)，流动相梯度：DCM/(MeOH/NH₃水溶液：9/1)：99/1至90/10)纯化。将含有产物的级分蒸发，得到164mg化合物54，将该化合物通过反相(固定相：YMC-actus Triart C18 10μm 30*150mm，流动相：梯度：(0.2％ NH₄HCO₃水溶液，pH＝9.5)/(MeCN/MeOH:1/1)：40/60至10/90)纯化。将含有产物的级分蒸发，溶解在MeCN中，用水稀释并冷冻干燥，得到81mg(45％产率)呈白色蓬松固体的化合物55和22mg(12％产率)呈白色蓬松固体的化合物56。

化合物57：

化合物58的制备：

将NaBH₃CN(47mg；0.75mmol)添加到中间体29(200mg；0.37mmol)、(顺式)-六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯(0.13mL；1.12mmol)和AcOH(21μL；0.37mmol)在THF(10mL)的混合物中，并将反应混合物在60℃处搅拌18h。将反应混合物冷却至室温，倾注到10％ K₂CO₃水溶液和EtOAc上。将有机层倾析，分离，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将粗产物(340mg)通过硅胶色谱法(固定相：不规则裸二氧化硅12g，流动相：99％ DCM、1％ MeOH(+10％ NH₄OH)至90％ DCM、10％ MeOH(+10％ NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到中间级分(220mg)，将其通过反相(固定相：YMC-actus Triart C18 15μm35*220mm，流动相：40％(0.2％ NH₄HCO₃水溶液pH＝9.5)/MeCN/MeOH至40/30/30至20/40/40的梯度)纯化，得到135mg化合物57，将其用乙腈/水20/80冷冻干燥，得到120mg(55％产率)呈白色粉末的化合物57，并得到40mg化合物58，将其用乙腈/水20/80冷冻干燥，得到38mg(16％产率)呈白色粉末的化合物58。

按照与针对制备化合物54、55和56所报道的相同的程序从相应的起始材料开始制备下表中列出的化合物。

/>

化合物131：

和化合物132的制备：

向中间体29(120mg，0.22mmol)在甲醇(2mL)的溶液中添加顺式-N,N-二甲基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(41mg，0.27mmol)。在室温处搅拌20分钟后，将氰基硼氢化钠(28mg，0.47mmol)添加到混合物中。在50℃处搅拌过夜后，将所得混合物用饱和碳酸氢钠溶液淬灭并用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用水和盐水并且经无水硫酸钠干燥。滤出固体。将滤液减压浓缩，并且将所得残余物通过制备型HPLC使用以下条件(柱：XSelect CSH制备型C18 OBD柱，5μm，19*150mm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：在7min内30％ B至60％ B；220nm；保留时间1：6.35min；保留时间2：6.90min)纯化。混合纯级分并冻干，得到46.5mg(30.6％产率，保留时间1：6.35min)呈白色固体的化合物131和3mg(1.9％产率，保留时间2：6.90min)呈白色固体的化合物132。

化合物120：

和化合物121的制备：

向中间体84(2.5g，2.99mmol，62.8％纯度)在MeOH(50mL)的溶液中添加顺式-六氢-1H-呋喃并[3,4-c]吡咯盐酸盐(1.07g，7.15mmol)。在室温处搅拌30分钟之后，将NaBH₃CN(599mg，9.53mmol)添加到反应混合物中。将所得反应混合物在50℃处搅拌过夜，并且用饱和碳酸氢钠溶液淬灭并用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到800mg呈黄色固体的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18，30mm×150mm，5μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃+0.1％NH₃.H₂O)，流动相B：ACN；流速：60mL/min；梯度：在7min内40％ B至60％ B；254nm；RT1：6.95min；RT2：8.27min)纯化。将含有产物的级分混合。浓缩溶剂并将两种化合物冷冻干燥，得到102.6mg呈白色固体的化合物120和23.1mg呈白色固体的化合物121。

转化

化合物23：

化合物24：

和化合物25的制备：

在室温处，将NaBH(OAc)₃(144mg；0.68mmol)添加到化合物22(240mg；0.445mmol)和四氢-4H-吡喃-4-酮(48μL；0.53mmol)在二氯乙烷(6mL)的溶液中。将混合物在室温处搅拌过夜。将溶液冷却并倾注到冷水中，用K₂CO₃粉末碱化，并将产物用DCM萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干，得到380mg化合物23。

经由手性SFC(固定相：Chiralpak IG 5μm 250*20mm，流动相：50％CO₂、50％ EtOH(0.3％iPrNH₂))分离对映体(380mg化合物23)。将含有产物的级分混合，浓缩并用乙腈/水(20/80)的混合物冷冻干燥，得到90mf(32％产率)呈白色粉末的化合物24和98mg(35％产率)呈白色粉末的化合物25。

通过使用针对化合物23所报道的类似反应方案从相应的起始材料开始制备下面列出的化合物。

/>

化合物38的制备：

在室温处，将乙酸(16μL；0.28mmol)添加到化合物32(88mg；0.17mmol)和氧杂环丁烷-3-甲醛(24μL；0.35mmol)在THF(3mL)的溶液中。将混合物在室温处搅拌4h。然后，分批添加NaBH(OAc)₃(107mg；0.51mmol)。将混合物在室温处搅拌2小时，并然后倾注到冰水中，用10％ K₂CO₃水溶液碱化。添加EtOAc。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将所得残余物(98mg)通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 40μm 4g，流动相：100％DCM至80％ DCM、20％ MeOH(+10％ NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到60mg化合物38，将其经由反相(固定相：YMC-actus Triart C18 10μm 30*150mm，流动相：40％ NH₄HCO₃ 0.2％、60％ MeOH至20％NH₄HCO₃ 0.2％、80％ MeOH的梯度)进一步纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到26mg化合物38，将其用乙腈/水(20/80)冷冻干燥，得到24mg(25％产率)呈白色粉末的化合物38。

化合物39的制备：

在室温处，将乙酸(24μL；0.42mmol)添加到化合物33(144mg；0.27mmol)和氧杂环丁烷-3-甲醛(38μL；0.55mmol)在THF(4mL)的溶液中。将混合物在室温处搅拌过夜，然后逐份添加NaBH(OAc)₃(177mg；0.83mmol)。将混合物在室温处搅拌24小时。将混合物倾注到冰水中。将水层用K₂CO₃粉末碱化，并将混合物用EtOAc(×2)萃取。将有机层合并，经MgSO₄干燥并蒸发至干。将残余物(137mg)通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm 12g，流动相：97％ DCM、3％ MeOH(+10％ NH₄OH)至90％ DCM、10％ MeOH(+10％ NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到90mg中间不纯级分，将其通过反相(固定相：YMC-actusTriart C18 10μm 30*150mm，流动相：65％NH₄HCO₃ 0.2％、35％ ACN至25％ NH₄HCO₃0.2％、75％ ACN的梯度)进一步纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，并将所得残余物(44mg)用乙腈/水(20/80)冷冻干燥，得到42mg(26％产率)化合物39。

化合物40的制备：

将NaBH(OAc)₃(91mg；0.43mmol)滴加到中间体34(150mg；0.28mmol)和氧杂环丁烷-3-甲醛(21μL；0.3mmol)在THF(6mL)的溶液中。将反应混合物在室温处搅拌1.5h。将反应混合物倾注到冰水中，用10％ K₂CO₃溶液碱化并添加EtOAc。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并蒸发至干。将残余物(143mg)通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm 12g，流动相：97％ DCM、3％ MeOH(+10％ NH₄OH)至85％ DCM、15％ MeOH(+10％NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合，浓缩，并将所得残余物(54mg)用乙腈/水(20/80)冷冻干燥，得到50mg(29％产率)化合物40。

化合物41的制备：

将NaBH(OAc)₃(82mg；0.39mmol)滴加到中间体35(135mg；0.25mmol)和氧杂环丁烷-3-甲醛(19μL；0.27mmol)在THF(5mL)的溶液中。将反应混合物在室温处搅拌1.5h。将反应混合物倾注到冰水中，用10％ K₂CO₃溶液碱化并添加EtOAc。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将残余物(130mg)通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm-40μm 12g，流动相：95％ DCM、5％ MeOH(+10％ NH₄OH)至92％ DCM、8％ MeOH(+10％NH₄OH)的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到84mg级分，将其用Et₂O吸收并蒸发至干，得到70mg(45％产率)化合物41。

化合物42的制备：

将搅拌棒、化合物37(130mg，0.195mmol)、氧杂环丁烷-3-甲醛(16.8mg，0.195mmol)、三乙胺(98.7mg，0.975mmol)和无水二氯甲烷(4mL)添加到8mL玻璃瓶中，然后将混合物在25℃处搅拌1h。然后，将氰基三氢硼酸钠(36.7mg，0.584mmol)添加到混合物中。将所得混合物在25℃处再搅拌1h。将混合物稀释到二氯甲烷(40mL)中，并用水(20mL×3)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将其通过制备型HPLC(柱：Phenomenex Gemini-NX 150*30mm*5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mMwNH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：30mL/min，梯度条件为43％ B至71％ B)纯化。收集纯级分，并真空蒸发溶剂，得到残余物。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干至干，得到呈白色粉末的化合物42(24.34mg，19％产率)。

化合物43：

和化合物44的制备：

将NaBH(OAc)₃(120mg，0.566mmol)分批添加到由化合物37(100mg，粗产物)、氧杂环丁烷-3-甲醛(30.0mg，0.348mmol)、Et₃N(100μL，0.719mmol)和二氯甲烷(5mL)组成的0℃(冰/水)溶液中。将所得混合物在室温处搅拌1.5小时。将反应混合物减压浓缩，得到粗产物，将其通过制备型HPLC使用Welch Xtimate C18 150*25mm*5μm(洗脱液：38％至68％(v/v)CH₃CN和H₂O与0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)纯化，得到纯产物，将其悬浮于水(10mL)中。使用干冰/丙酮将混合物冷冻，并然后冻干至干，得到白色固体(80mg)，将其通过SFC(DAICELCHIRALPAK AD-H(250mm*30mm,5μm)，等度洗脱：i-PrOH(含有0.1％的25％NH₃水溶液):超临界CO₂，30％:70％至30％:70％(v/v))进一步纯化。收集纯级分，并减压除去挥发物。将产物悬浮于水(10mL)中。使用干冰/丙酮将混合物冷冻，并然后冻干至干，得到呈白色固体的化合物43(37.00mg，41％产率)和呈淡黄色固体的化合物44(33.96mg，38％产率)。

按照与针对制备化合物39或42所报道的类似的反应方案从相应的起始材料开始制备下表中列出的化合物。

/>

化合物47的制备：

向化合物45(70.0mg，0.130mmol)和氧杂环丁烷-3-甲醛(50mg，0.581mmol)在DCM(5mL)的溶液中添加TEA(80.0mg，0.791mmol)。将混合物在室温处搅拌10min。然后添加NaBH₃CN(100mg，1.59mmol)。将反应混合物在室温处搅拌1小时并然后浓缩，得到残余物。将残余物通过制备型HPLC(柱：YMC-Triart制备型C18250×50mm×10μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件：45％ B至75％ B)纯化，得到呈白色固体的化合物47(20.0mg，24％产率)。

化合物48的制备：

向化合物46(75.0mg，粗产物)、氧杂环丁烷-3-甲醛(35.9mg，0.417mmol)和TEA(70.3mg，0.695mmol)在5mL DCM的溶液中添加NaBH₃CN。在添加之后，将反应混合物在10℃处搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩，并且将残余物通过制备型HPLC(柱Boston PrimeC18150×30mm×5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件为45％ B至75％)纯化。收集纯级分并冻干，得到呈白色粉末的化合物48(7.0mg)。

化合物51的制备：

将搅拌棒、化合物49盐酸盐(70.0mg，0.121mmol)、氧杂环丁烷-3-甲醛(15.7mg，0.182mmol)、氰基硼氢化钠(15.3mg，0.243mmol)、三乙胺(61.5mg，0.608mmol)和无水二氯甲烷(2mL)添加到10mL圆底烧瓶中，然后将所得混合物在25℃处搅拌1h。将混合物减压浓缩，得到粗产物，将其通过制备型HPLC(柱：Boston Prime C18 150*30mm*5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O 10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件为40％ B至70％)纯化。收集纯级分，并真空蒸发溶剂，得到残余物。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干至干，得到呈白色粉末的化合物51(14.3mg，19％产率)。

化合物52的制备：

向化合物50(50.0mg，0.093mmol)、氧杂环丁烷-2-甲醛(23.9mg，0.278mmol)和TEA(18.8mg，0.185mmol)在5mL DCM的溶液中添加NaBH₃CN(29.1mg，0.463mmol)。在添加之后，将反应混合物在10℃处搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，并且将残余物通过制备型HPLC(柱Boston Prime C18 150×30mm×5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件为45％ B至75％ B)纯化。收集纯级分并冻干，得到呈白色固体的化合物52(8.38mg，1 15％产率)。

化合物53的制备：

将搅拌棒、化合物36(130mg，0.195mmol)、氧杂环丁烷-3-甲醛(16.8mg，0.195mmol)、三乙胺(98.7mg，0.975mmol)和无水二氯甲烷(4mL)添加到8mL玻璃瓶中，并将混合物在25℃处搅拌1h。然后，将氰基硼氢化钠(36.7mg，0.584mmol)添加到混合物中，将其在25℃处再搅拌1h。将混合物稀释到二氯甲烷(40mL)中并用水(20mL×3)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将其通过制备型HPLC(柱：PhenomenexGemini-NX 150*30mm*5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：30mL/min，梯度条件为43％ B至71％)纯化。收集纯级分，并真空蒸发溶剂，得到残余物，将其在乙腈(2mL)和水(10mL)之间分配。将溶液冻干至干，得到呈白色粉末的化合物53(24.3mg，19.产率)。

化合物71的制备：

在室温处，将三乙酰氧基硼氢化钠(50mg；0.24mmol)添加到化合物35(60mg；0.11mmol)和二氢-3(2H)-呋喃酮(18μL；0.23mmol)在二氯乙烷(8mL)的溶液中。将混合物在室温处搅拌2.5h。将溶液倾注到冷水中，用K₂CO₃粉末碱化，并将产物用DCM萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干。将粗产物(79mg)经由反相(固定相：YMC-actus Triart C1810μm 30*150mm，流动相：65％ NH₄HCO₃ 0.2％、35％ ACN至35％ NH₄HCO₃ 0.2％、65％ ACN的梯度)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到48mg中间级分，将其用乙腈/水(20/80)冷冻干燥，得到40mg(59％产率)呈白色粉末和两种非对映体的混合物的化合物71。

根据化合物71从相应的中间体开始制备下表中列出的化合物。

化合物81的制备：

向化合物80(350mg，TFA盐，0.506mmol)、氧杂环丁烷-2-甲醛(200mg，2.32mmol)和TEA(500mg，4.94mmol)在50mL DCM的溶液中添加NaBH₃CN(200mg，3.18mmol)。在添加之后，将反应混合物在28℃处搅拌3小时。将反应混合物过滤，并将滤液真空浓缩，并且将残余物通过制备型HPLC(柱Boston Prime C18 150*30mm*5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mMNH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件为50％B至80％B)纯化。收集纯级分并冻干，得到呈白色固体的化合物81(170mg，45％产率)。

化合物82：

/>

和化合物83的制备：

将170mg化合物81通过超临界流体色谱法(分离条件：DAICEL CHIRALPAK AS-H(250mm*30mm，5μm；流动相：A：超临界CO₂，B：0.1％NH₃H₂O-ETOH，A:B＝55:45，在80mL/min处))分离，得到不纯的化合物82(60mg，基于LCMS的纯度为91.5％)和不纯的化合物83(60mg，基于LCMS的纯度为94.5％)，两者均为白色固体。将化合物82(60mg，基于LCMS的纯度为91.5％)通过制备型HPLC(柱Boston Prime C18 150*30mm*5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：30mL/min，梯度条件为50％B至80％B)进一步纯化，得到呈白色固体的化合物82(40.0mg，27％产率)。将化合物83(60mg，基于LCMS的纯度为94.5％)通过制备型HPLC(柱Boston Prime C18 150*30mm*5μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：30mL/min，梯度条件为50％B至80％B)进一步纯化，得到呈白色固体的化合物83。

按照与针对制备化合物81、82或83所报道的类似的反应方案从相应的起始材料开始制备下表中列出的化合物。本领域技术人员将认识到，在一些情况下，可能需要额外的脱保护步骤以得到最终化合物。

/>

化合物114的制备：

在烧瓶中，将化合物113(59mg，0.104mmol)溶解于甲醇(1.27mL，31.3mmol)中并用氧杂环丁烷-3-甲醛(35.9mg，0.417mmol)、氰基硼氢化钠(32.8mg，0.521mmol)和2滴AcOH处理。将混合物在60℃处搅拌过夜。蒸发溶剂，并然后将饱和碳酸钠溶液与DCM一起添加。然后，将水相用1N NaOH水溶液进一步碱化直至pH 13。将水相用DCM和乙酸乙酯萃取多次。用硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂，得到纯化的粗物质。经由制备型HPLC(固定相：RP XBridge制备型C18 OBD-10μm，30×150mm，流动相：0.25％ NH₄HCO₃水溶液，CH₃CN)进行纯化，得到42mg(63％产率)呈白色固体的化合物114。

化合物115的制备：

在烧瓶中，将化合物112(50mg，0.0884mmol)溶解于MeOH(1.07mL，26.5mmol)中并用37％甲醛水溶液(0.132mL，1.77mmol)、2滴HOAc处理，并然后用氰基硼氢化钠(27.8mg，0.442mmol)处理。将混合物在60℃处加热2小时。蒸发溶剂。然后，添加饱和碳酸钠溶液以及DCM。将水相用1N NaOH水溶液碱化至pH 13。将水相用DCM和乙酸乙酯萃取多次。用硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂，得到粗产物(60mg)。经由制备型HPLC(固定相：RP XBridge制备型C18OBD-10μm，30×150mm，流动相：0.25％ NH₄HCO₃水溶液，CH₃CN)进行纯化，得到呈白色固体的化合物115。

按照与针对制备化合物114和115所报道的类似反应方案来制备以下列出的化合物。

化合物116的制备：

在烧瓶中，将化合物112(45mg，0.0795mmol)溶解于无水DMF(1.23mL，15.9mmol)中并用DIPEA(0.0411mL，0.239mmol)和溴甲氧基乙烷(12.2mg，0.0875mmol)处理。将反应物在80℃处搅拌3h。添加饱和碳酸钠溶液以及DCM。然后，将水相用1N NaOH水溶液碱化至pH 13。将水相用DCM和乙酸乙酯萃取多次。用硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂，得到粗产物。经由制备型HPLC(固定相：RP XBridge制备型C18 OBD-10μm，30×150mm，流动相：0.25％ NH₄HCO₃水溶液，CH₃CN)进行纯化，得到19mg(产率38％)呈白色固体的化合物116。

化合物119的制备：

向化合物37(200mg，0.36mmol)在ACN(5mL)的溶液中添加2-溴-N,2-二甲基丙酰胺(98mg，0.54mmol)和K₂CO₃(250mg，1.81mmol)。在70℃处搅拌过夜后，将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，并经Na₂SO₄干燥，过滤并减压蒸发。将残余物通过制备型TLC(MeOH/DCM，1:10)纯化。将得到的粗产物(200mg；白色固体)通过制备型HPLC(柱：XBridge Shield RP18 OBD柱，19*250mm，10μm；流动相A：水(10mmol/L NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：25mL/min；梯度：在7min内55％ B至65％ B；254/220nm；Rt：5.93min)纯化。将含有产物的级分混合并浓缩，得到40.4mg(16％产率)呈白色固体的化合物119。

化合物133的制备：

/>

在室温处，向中间体88(100mg，0.157mmol)在DCM(3mL)的混合物中添加TFA(1mL)。将混合物在室温处搅拌0.5h。将反应混合物减压蒸发。将残余物用2M NaOH(5mL)稀释，用DCM(5mL×5)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干，得到呈黄色固体的化合物133(84mg，99.6％产率)。

化合物134的制备：

向化合物133(84mg，0.156mmol)在MeOH(2mL)的混合物中添加甲醛(257mg，3.17mmol，37％于水中)和乙酸(20mg，0.333mmol)。将混合物在室温处搅拌30分钟。然后将NaBH₃CN(20mg，0.318mmol)添加到混合物中，并将所得混合物在室温处搅拌1h。将反应混合物蒸发以除去溶剂。将残余物用2M NaOH(5mL)稀释，用DCM(10mL×3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将其通过制备型HPLC(柱：Welch XtimateC18 150*30mm*5μm，流动相A：水(0.05％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：30mL/min，梯度条件为55％ B至85％)纯化，得到两种级分。收集纯的所需级分，并通过蒸发除去挥发性溶剂。将含水残余物冻干，得到呈白色粉末的化合物134(40mg，99.52％纯度，产率45％)。收集不纯的所需级分并通过蒸发除去挥发性溶剂。将含水残余物冻干，得到呈白色粉末的化合物134(12mg，产率14％，通过NMR测定的纯度为约95％)。

化合物135：

和化合物136的制备

将化合物134(40mg，0.071mmol)通过SFC(柱：DAICEL CHIRALCEL OD-H(250mm*30mm，5μm)，流动相：A：超临界CO₂，B：0.1％NH₃H₂O IPA；等度：A:B＝75:25；流速：80mL/min)纯化，得到两种级分。收集第一峰的纯级分，并减压蒸发挥发性溶剂。将残余物用H₂O(3mL)和CH₃CN(1mL)处理。将混合物冻干，得到呈白色粉末的化合物135(11mg，98.17％纯度，产率27％)。收集第二峰的纯级分，并减压蒸发挥发性溶剂。将残余物用H₂O(3mL)和CH₃CN(1mL)处理。将混合物冻干，得到呈白色粉末的化合物136(10mg，96.28纯度，产率24％)。

化合物137的制备：

向化合物76(200mg，粗产物)和3-(二甲基氨基)丙酸盐酸盐(49.0mg，0.32mmol)在DCM(10mL)的溶液中添加HATU(121mg，0.32mmol)和DIEA(0.21mL，1.26mmol)。将混合物在室温处搅拌16小时。将20mL DCM和20mL H₂O添加到混合物溶液中。将混合物用DCM(30mL×2)萃取，将合并的萃取物用盐水(30mL)洗涤，并经Na₂SO₄干燥，将混合物过滤，并真空浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(柱：YMC-Triart制备型C18 250*50mm*10μm，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件为45％ B至75％)纯化。收集纯级分，并冻干溶剂，得到呈淡黄色固体的标题化合物137(20mg，96.7％纯度，12％产率)。

化合物138的制备：

/>

在0℃处，向中间体89(150mg，0.23mmol)在二氯甲烷(5.0mL)的溶液中添加三氟乙酸(1.7mL)。将所得混合物在室温处搅拌3小时。将所得混合物减压浓缩，得到150mg呈无色油状物的化合物138(97.5％纯度，呈三氟乙酸盐形式)。

化合物139的制备：

在0℃处，向化合物138(150mg，0.241mmol，纯度86.63％)、乙醇酸(22mg，0.289mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.12mL，0.722mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)的混合物中分批添加HATU(110mg，0.289mmol)，并在室温处搅拌2小时。将反应混合物通过添加水(5mL)淬灭并用乙酸乙酯(4×5mL)萃取。将合并的有机层用水(3×20mL)、盐水(20mL)洗涤并且经无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩并将残余物通过反相快速色谱法使用以下条件纯化：柱：SunFire C18 OBD制备型柱，19mm×250mm；流动相A：水(0.1％NH₄HCO₃)，流动相B：ACN；流速：20mL/min；梯度：在11min内15％ B至40％ B；254/220nm；Rt：9.12min)纯化，得到46.9mg呈白色固体的化合物139。

LCMS(液相色谱/质谱)

一般程序

高效液相色谱(HPLC)测量使用LC泵、二极管阵列(DAD)或UV检测器和如相应方法中所规定的柱来进行。如果需要，包括另外的检测器(参见下表方法)。

将来自柱的流送入配置有大气压离子源的质谱仪(MS)。设置调整参数(例如，扫描范围、驻留时间……)以便获得允许识别化合物的标称单同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识范围内。用适当的软件进行数据采集。

通过实验保留时间(R_t)和离子来描述化合物。如果在数据表中没有不同地规定，则所报告的分子离子对应于[M+H]⁺(质子化分子)和/或[M-H]-(去质子化分子)。在化合物不可直接电离的情况下，指定加合物的类型(即[M+NH₄]⁺、[M+HCOO]^-等)。对于具有多同位素模式(Br、Cl)的分子，所报告的值是针对最低同位素质量获得的值。所有结果都是在具有通常与所用方法相关的实验不确定性的情况下获得的。

在下文中，“SQD”是指单四极检测器，“RT”是指室温，“BEH”是指桥接乙基硅氧烷/二氧化硅混合物，“HSS”是指高强度二氧化硅，“DAD”是指二极管阵列检测器。

表1a：LCMS方法代码(流速以mL/min表示；柱温(T)以℃计；运行时间以分钟表示)。 “TFA”意指三氟乙酸

/>

表1b：LCMS和熔点数据。Co.No.是指化合物编号；R_t是指保留时间，以min计。

/>

SFC-方法

SFC方法的一般程序

SFC测量使用分析超临界流体色谱(SFC)系统进行，该系统由用于递送二氧化碳(CO₂)和改性剂的二元泵、自动进样器、柱箱、配备有静置时高达400巴的高压流通池的二极管阵列检测器组成。如果配置有质谱仪(MS)，则将来自柱的流送入MS。设置调整参数(例如，扫描范围、驻留时间……)以便获得允许识别化合物的标称单同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识范围内。用适当的软件进行数据采集。

表2a.分析SFC方法(流速以mL/min表示；柱温(T)以℃计；运行时间以分钟表示，背压(BPR)，“DEA”意指二乙胺。

/>

表2b.SFC数据。

/>

旋光度(OR)

旋光度用旋光计341Perkin Elmer测量。偏振光以1分米的路径长度和每100毫升0.2克至0.4克的样品浓度通过样品。称量小瓶中的2mg至4mg产物，然后用1ml至1.2ml光谱溶剂(例如DMF)溶解。在20℃的温度处用该溶液填充该单元并将其放入旋光计中。以0.004°的精度读取OR。

浓度的计算：重量(克)×100/体积(ml)

[α]_d ²⁰：(读数旋转×100)/(1.000dm×浓度)。

^d为钠D线(589纳米)。

表3.OR数据：波长：589nm(如有不同请注明)；溶剂：DMF(如有不同请注明)；温度： 20℃；‘conc’意指浓度(g/100mL)；‘OR’意指旋光度。

Co.No.	OR(°)	浓度
			3	-15.14	0.284
4	+8.3	0.265
			7	-10.38	0.26
8	+12.6	0.262
			24	+15.72	0.318
25	-16.59	0.416
			27	+14.22	0.228
29	-18.04	0.316
			30	-16.67	0.228
40	-12.5	0.26
			41	+13.67	0.256
55	+12.75	0.251
			56	-4.43	0.271
62	+10.4	0.25

NMR

一些NMR实验是使用配备有z梯度的Bruker 5mm BBFO探头的Bruker Avance 500光谱仪，并且对于质子在500MHz处操作，且对于碳在125MHz处操作进行的。化学位移(d)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

NMR实验是使用Bruker Avance III 400光谱仪，使用内部氘锁并配备带有z梯度的反向双共振(¹H、¹³C、SEI)探头并且对于质子在400MHz处操作且对于碳在100MHz处操作来进行的。化学位移(d)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

一些NMR实验是在环境温度(298.6K)处使用Bruker Avance III 400光谱仪，使用内部氘锁并配备带有z梯度的BBO 400MHz S1 5mm探头并且对于质子在400MHz处操作并且对于碳在100MHz处操作来进行的。化学位移(d)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

一些NMR实验是在环境温度(298.6K)处使用Varian 400-MR光谱仪，使用内部氘锁并配备带有z梯度的Varian 400 4NUC PFG探头并且对于质子在400MHz处操作并且对于碳在100MHz处操作来进行的。化学位移(d)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

一些NMR实验是在环境温度(298.6K)处使用Varian 400-VNMRS光谱仪，使用内部氘锁并配备带有z梯度的Varian 400ASW PFG探头并且对于质子在400MHz处操作并且对于碳在100MHz处操作来进行的。化学位移(d)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

化合物4

主要旋转异构体(75％)

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 8.30(s,1H),7.69-7.81(m,1H),7.15-7.38(m,2H),6.88-7.02(m,1H),4.55(dd,J＝7.7,5.9Hz,2H),4.20(t,J＝5.5Hz,2H),3.73-3.84(m,1H),3.37-3.70(m,5H),3.12-3.27(m,3H),3.05(br d,J＝6.2Hz,1H),2.92-3.02(m,3H),2.86(dt,J＝14.1,7.1Hz,1H),2.73(br t,J＝7.2Hz,1H),2.60(br dd,J＝8.7,6.4Hz,1H),2.54(br d,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.36(m,1H),2.12(br d,J＝9.4Hz,1H),1.95(br t,J＝7.0Hz,2H),1.45-1.59(m,1H),1.21(br d,J＝3.4Hz,2H),0.98-1.15(m,7H),0.72-0.80(m,6H)

次要旋转异构体(25％)

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 8.28(s,1H),7.69-7.81(m,1H),7.15-7.38(m,2H),6.88-7.02(m,1H),4.55(dd,J＝7.7,5.9Hz,2H),4.41(dt,J＝13.8,6.8Hz,1H),4.20(t,J＝5.5Hz,2H),3.37-3.70(m,5H),3.12-3.27(m,3H),3.05(br d,J＝6.2Hz,1H),2.92-3.02(m,3H),2.86(dt,J＝14.1,7.1Hz,1H),2.73(br t,J＝7.2Hz,1H),2.60(br dd,J＝8.7,6.4Hz,1H),2.54(br d,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.36(m,1H),2.12(br d,J＝9.4Hz,1H),1.95(br t,J＝7.0Hz,2H),1.45-1.59(m,1H),1.21(br d,J＝3.4Hz,2H),0.98-1.15(m,7H),0.72-0.80(m,6H)

化合物38

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 8.4(d,J＝5.7Hz,1H),7.2-7.4(m,3H),6.5(br d,J＝5.7Hz,1H),4.6(dd,J＝7.7,5.8Hz,2H),4.2(td,J＝6.0,2.2Hz,2H),3.3-3.8(m,7H),3.0-3.1(m,5H),2.9(dt,J＝14.3,6.9Hz,1H),2.7-2.8(m,1H),2.5-2.6(m,3H),2.3-2.4(m,1H),2.2(dd,J＝9.5,1.9Hz,1H),2.0(br t,J＝6.8Hz,2H),1.5-1.6(m,1H),1.0(br d,J＝6.3Hz,4H),0.9-1.0(m,4H),0.8(dd,J＝12.9,6.9Hz,6H),0.6(br s,2H)

化合物41

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 8.48(s,1H),7.22-7.52(m,3H),4.56(br t,J＝6.8Hz,2H),4.17-4.30(m,2H),3.87-4.13(m,2H),3.49-3.72(m,3H),3.30-3.41(m,1H),2.97-3.20(m,6H),2.88(dt,J＝14.3,6.9Hz,1H),2.77(br d,J＝1.3Hz,1H),2.55-2.69(m,2H),2.30-2.37(m,1H),2.17(br d,J＝7.6Hz,1H),1.96-2.10(m,2H),1.51-1.66(m,1H),0.92-1.15(m,8H),0.65-0.84(m,9H)

化合物42

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.43-8.36(m,1H),7.23-7.16(m,1H),7.13-7.06(m,1H),7.05-6.98(m,1H),6.33-6.28(m,1H),4.83-4.76(m,2H),4.44-4.34(m,2H),4.01-3.89(m,1H),3.75-3.56(m,4H),3.55-3.47(m,1H),3.27-3.05(m,6H),2.82-2.72(m,2H),2.66(d,J＝7.2Hz,2H),2.14-2.06(m,2H),1.93-1.72(m,4H),1.50-0.98(m,12H),0.93-0.84(m,6H),0.71(d,J＝6.4Hz,2H)。

化合物43

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.50(s,1H),7.26-7.19(m,1H),7.18-7.09(m,1H),7.08-6.97(m,1H),4.89-4.73(m,2H),4.49-4.34(m,2H),4.33-4.01(m,2H),4.00-3.83(m,1H),3.81-3.60(m,2H),3.59-3.38(m,1H),3.31-3.03(m,6H),2.86-2.61(m,4H),2.21-2.07(m,2H),1.96-1.71(m,5H),1.56-1.33(m,5H),1.15-1.05(m,6H),0.93-0.84(m,6H),0.82-0.72(m,2H)

化合物44

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.53-8.44(m,1H),7.27-7.18(m,1H),7.18-7.09(m,1H),7.08-6.97(m,1H),4.81(t,J＝6.8Hz,2H),4.51-4.35(m,2H),4.30-3.84(m,3H),3.79-3.55(m,2H),3.54-3.41(m,1H),3.38-3.06(m,6H),3.01-2.62(m,4H),2.21-2.11(m,2H),2.11-1.64(m,5H),1.64-1.29(m,5H),1.14-1.03(m,6H),0.95-0.85(m,6H),0.82-0.70(m,2H)。

化合物45

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.87-8.69(m,1H),7.67-7.42(m,1H),7.39-7.18(m,2H),4.66-4.15(m,6H),4.12-3.76(m,2H),3.74-3.53(m,4H),3.52-3.31(m,3H),3.26-3.15(m,1H),3.08-2.94(m,1H),2.79-2.23(m,3H),2.21-2.09(m,1H),2.00-1.85(m,1H),1.31-0.86(m,15H)

化合物46

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.95-8.76(m,1H),7.74-7.41(m,1H),7.39-7.22(m,2H),4.69-4.09(m,6H),4.06-3.78(m,2H),3.76-3.50(m,4H),3.50-3.32(m,3H),3.26-3.10(m,2H),2.80-2.27(m,3H),2.25-2.09(m,1H),1.93-1.73(m,1H),1.33-0.96(m,15H)。

化合物47

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δppm 8.50(s,1H),7.19-7.25(m,1H),7.13(s,1H),6.98-7.07(m,1H),4.78(t,J＝6.8Hz,2H),4.37-4.45(m,2H),3.95-4.25(m,2H),3.82-3.93(m,1H),3.73(s,1H),3.44-3.68(m,2H),3.20(d,J＝9.2Hz,6H),2.62-2.82(m,4H),2.27(d,J＝6.4Hz,2H),2.06-2.19(m,3H),2.03(s,1H),1.89(s,1H),1.67-1.81(m,2H),1.01-1.22(m,7H),0.72-0.91(m,8H)。

化合物48

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.50(br.s,1H),7.18-7.25(m,1H),7.08-7.17(m,1H),6.94-7.07(m,1H),4.69-4.87(m,2H),4.37-4.49(m,2H),3.97-4.34(m,2H),3.40-3.92(m,4H),3.03-3.32(m,6H),2.52-2.85(m,4H),2.19-2.45(m,3H),2.03-2.17(m,3H),1.83-1.95(m,1H),1.70-1.79(m,1H),1.48-1.58(m,1H),1.00-1.33(m,7H),0.68-0.96(m,8H)。

化合物49

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.48(s,1H),7.52-7.40(m,1H),7.39-7.31(m,2H),4.30-3.86(m,2H),3.67-3.59(m,2H),3.27-2.97(m,9H),2.94-2.75(m,2H),2.24-1.82(m,5H),1.77-1.62(m,2H),1.11-0.57(m,16H)

化合物50

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 8.48(s,1H),7.40-7.48(m,1H),7.29-7.39(m,2H),3.47-4.31(m,9H),3.24-3.45(m,3H),2.92-3.12(m,3H),1.93-2.22(m,4H),1.50-1.92(m,3H),0.91-1.14(m,7H),0.88(d,J＝6.80Hz,3H),0.83(d,J＝6.40Hz,3H),0.61-0.79(m,2H)。

化合物51

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.50(s,1H),7.26-7.23(m,1H),7.17-7.10(m,1H),7.07-6.99(m,1H),4.84-4.75(m,2H),4.46-4.38(m,2H),4.34-4.26(m,0.2H),4.22-3.99(m,2H),3.92-3.82(m,0.8H),3.80-3.71(m,1H),3.68-3.60(m,1H),3.56-3.45(m,1H),3.30-3.14(m,5H),3.13-3.04(m,1H),2.82-2.63(m,4H),2.34-2.23(m,2H),2.16-2.10(m,2H),2.06-2.02(m,1H),1.97-1.85(m,1H),1.80-1.67(m,3H),1.12-1.02(m,6H),0.91-0.72(m,9H)。

化合物52

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 8.50(s,1H),7.19-7.25(m,1H),7.08-7.18(m,1H),6.96-7.08(m,1H),4.71-4.89(m,2H),4.38-4.48(m,2H),3.44-4.34(m,6H),3.01-3.32(m,6H),2.50-2.89(m,3H),2.19-2.47(m,3H),2.04-2.18(m,3H),1.83-1.95(m,1H),1.70-1.77(m,1H),1.62-1.70(m,1H),1.50-1.60(m,1H),1.01-1.27(m,7H),0.72-0.92(m,8H)。

化合物78

¹H NMR CD₃OD(Varian-400MHz):9.00-8.78(m,1H),7.69-7.44(m,1H),7.41-7.19(m,2H),4.56 -4.13(m,6H),4.05-3.78(m,2H),3.58(s,1H),3.49-3.32(m,5H),3.13-2.97(m,2H),2.72-2.51(m,1H),2.49-2.31(m,1H),2.23-1.91(m,4H),1.89-1.65(m,2H),1.29-0.93(m,15H)。

化合物79

¹H NMR CD₃OD(Varian-400MHz):8.97-8.81(m,1H),7.72-7.43(m,1H),7.40-7.15(m,2H),4.61-4.15(m,6H),4.08-3.70(m,2H),3.58(s,1H),3.50-3.34(m,5H),3.14-2.94(m,2H),2.73-2.52(m,1H),2.50-2.30(m,1H),2.22-1.89(m,4H),1.89-1.64(m,2H),1.29-1.02(m,15H)

化合物82：

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):8.55-8.41(m,1H),7.25-7.18(m,1H),7.17-7.07(m,1H),7.06-6.95(m,1H),4.78(t,J＝6.8Hz,2H),4.39(t,J＝6.0Hz,2H),4.31-3.95(m,2H),3.93-3.81(m,1H),3.78-3.42(m,3H),3.39-2.99(m,5H),2.85-2.57(m,4H),2.49-2.34(m,1H),2.21-2.00(m,3H),1.91-1.70(m,13H),1.49-1.38(m,1H),1.35-1.22(m,1H),1.18-0.69(m,8H)。

化合物83：

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):8.54-8.39(m,1H),7.25-7.19(m,1H),7.13(s,1H),7.06-6.97(m,1H),4.78(t,J＝6.8Hz,2H),4.39(t,J＝6.2Hz,2H),4.32-3.95(m,2H),3.93-3.00(m,8H),2.87-2.57(m,4H),2.40(s,1H),2.24-1.98(m,3H),1.91-1.68(m,14H),1.50-1.38(m,1H),1.36-1.22(m,1H),1.18-0.67(m,8H)。

药理学部分

1)Menin/MLL均相时间分辨荧光(HTRF)测定

向未经处理的白色384孔微量滴定板中添加40nL 200X测试化合物的DMSO溶液和4μL 2X铽螯合物标记的menin(见下文制备)的测定缓冲溶液(40mM Tris·HCl，pH 7.5、50mMNaCl、1mM DTT(二硫苏糖醇)和0.05％ Pluronic F-127)。将测试化合物和铽螯合物标记的menin在环境温度处温育30min后，添加含4μL 2X FITC-MBM1肽(FITC-β-丙氨酸-SARWRFPARPGT-NH₂)(“FITC”是指异硫氰酸荧光素)的测定缓冲液，将微量滴定板以1000rpm离心1min，并将测定混合物在环境温度处温育15min。通过在环境温度处使用EnVision微板读数器(激发波长337nm/铽发射波长490nm/FITC发射波长520nm)测量铽/FITC供体/受体荧光团对的均质时间分辨荧光(HTRF)来确定测定混合物中存在的menin·FITC-MBM1复合物的相对量。荧光共振能量转移的程度(HTRF值)表示为FITC和铽荧光团的荧光发射强度的比率(F^em 520nm/F^em 490nm)。结合测定中试剂的最终浓度为测定缓冲液中的200pM铽螯合物标记的menin、75nM FITC-MBM1肽和0.5％ DMSO。使用11点、四倍连续稀释方案进行测试化合物的剂量反应滴定，通常以10μM开始。

通过首先根据等式1计算每种化合物浓度的抑制％来确定化合物效力：

抑制％＝((HC-LC)-(HTRF^化合物-LC))/(HC-LC))*100 (等式1)

其中LC和HC是在存在或不存在饱和浓度的与FITC-MBM1竞争结合menin的化合物的情况下测定的HTRF值，并且HTRF^化合物是在测试化合物的存在下测得的HTRF值。HC和LCHTRF值代表每个板至少10个平行测定的平均值。对于每种测试化合物，将抑制％值与测试化合物浓度的对数作图，并通过将这些数据拟合到等式2得出IC₅₀值：

抑制％＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((logIC₅₀-log[化合物])*h)) (等式2)

其中底部和顶部分别是剂量-反应曲线的下渐近线和上渐近线，IC₅₀是产生50％信号抑制的化合物浓度，并且h是希尔系数(Hill coefficient)。

铽穴状化合物标记的Menin的制备：如下用铽穴状化合物标记Menin(含2.3mg/mLa.a 1-610-6xhis标签的20mM Hepes(2-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]乙磺酸)、80mM NaCl、5mM DTT(二硫苏糖醇)，pH 7.5)。200μg Menin是更换为1x Hepes缓冲液的缓冲液。将6.67μM Menin与8倍摩尔过量的NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)-穴状化合物在室温处温育40分钟。通过在具有洗脱缓冲液(0.1M Hepes，pH 7+0.1％ BSA(牛血清白蛋白))的NAP5柱上运行反应，将一半标记的蛋白质从游离标记中纯化出来。另一半用0.1M磷酸盐缓冲盐水(PBS)(pH7)洗脱。每份收集400μl洗脱液，等分并在-80℃处冷冻。铽标记的Menin蛋白的最终浓度分别在Hepes缓冲液中为115μg/mL并且在PBS缓冲液中为85μg/mL。

MENIN蛋白序列(SEQ ID NO:1)：

MGLKAAQKTLFPLRSIDDVVRLFAAELGREEPDLVLLSLVLGFVEHFLAVNRVIPTNVPELTFQPSPAPDPPGGLTYFPVADLSIIAALYARFTAQIRGAVDLSLYPREGGVSSRELVKKVSDVIWNSLSRSYFKDRAHIQSLFSFITGTKLDSSGVAFAVVGACQALGLRDVHLALSEDHAWVVFGPNGEQTAEVTWHGKGNEDRRGQTVNAGVAERSWLYLKGSYMRCDRKMEVAFMVCAINPSIDLHTDSLELLQLQQKLLWLLYDLGHLERYPMALGNLADLEELEPTPGRPDPLTLYHKGIASAKTYYRDEHIYPYMYLAGYHCRNRNVREALQAWADTATVIQDYNYCREDEEIYKEFFEVANDVIPNLLKEAASLLEAGEERPGEQSQGTQSQGSALQDPECFAHLLRFYDGICKWEEGSPTPVLHVGWATFLVQSLGRFEGQVRQKVRIVSREAEAAEAEEPWGEEAREGRRRGPRRESKPEEPPPPKKPALDKGLGTGQGAVSGPPRKPPGTVAGTARGPEGGSTAQVPAPAASPPPEGPVLTFQSEKMKGMKELLVATKINSSAIKLQLTAQSQVQMKKQKVSTPSDYTLSFLKRQRKGLHHHHHH

2a)增殖测定

在人白血病细胞系中评估menin/MLL蛋白/蛋白相互作用抑制剂测试化合物的抗增殖作用。细胞系MOLM14具有MLL易位并分别表达MLL融合蛋白MLL-AF9以及来自第二等位基因的野生型蛋白。还测试了携带NPM1c基因突变的OCI-AML3细胞。MLL重排的细胞系(例如MOLM14)和NPM1c突变细胞系表现出干细胞样HOXA/MEIS1基因表达特征。KO-52用作含有两个MLL(KMT2A)野生型等位基因的对照细胞系，以排除显示一般细胞毒性作用的化合物。

MOLM14细胞在补充有10％热灭活胎牛血清(HyClone)、2mM L-谷氨酰胺(SigmaAldrich)和50μg/ml庆大霉素(Gibco)的RPMI-1640(Sigma Aldrich)中培养。KO-52和OCI-AML3细胞系在补充有20％热灭活胎牛血清(HyClone)、2mM L-谷氨酰胺(Sigma Aldrich)和50μg/ml庆大霉素(Gibco)的α-MEM(Sigma Aldrich)中增殖。在培养期间将细胞保持在300,000-2,500,000个细胞/ml，并且传代次数不超过20次。

为了评估抗增殖作用，将200个MOLM14细胞、200个OCI-AML3细胞或300个KO-52细胞接种在96孔圆底超低附着板(Costar，目录号7007)中的200μl培养基/孔中。基于生长曲线选择细胞接种数量以确保整个实验过程中的线性生长。添加不同浓度的测试化合物并将DMSO含量归一化至0.3％。将细胞在37℃和5％ CO₂处温育8天。通过活细胞成像(IncuCyteZOOM，Essenbio，4x物镜)在第8天获取图像来实时测量球状体样生长。使用集成分析工具确定作为球状体尺寸量度的汇合度(％)。

为了确定测试化合物随时间的影响，计算每个孔中的汇合度作为球状体尺寸的量度。最高剂量的参考化合物的汇合度用作LC的基线(低对照)，并且经DMSO处理的细胞的汇合度用作0％细胞毒性(高对照，HC)。

绝对IC₅₀值计算为汇合度的百分比变化，如下所示：

LC＝低对照：用例如1μM细胞毒性剂星形孢菌素处理的细胞，或例如用高浓度的另选的参考化合物处理的细胞

HC＝高对照：平均汇合度(％)(经DMSO处理的细胞)

效应％＝100-(100*(样品-LC)/(HC-LC))

GraphPad Prism(7.00版)用于计算IC₅₀。剂量反应方程用于以可变斜率绘制效果％与Log10化合物浓度的关系图，并且将最大值固定为100％并将最小值固定为0％。

2b)MEIS1 mRNA表达测定

通过Quantigene Singleplex测定(Thermo Fisher Scientific)检测化合物处理后的MEIS1 mRNA表达。该技术允许使用与确定的目标靶序列杂交的探针直接定量mRNA靶标，并且使用多模式板读数器Envision(PerkinElmer)检测信号。MOLM14细胞系用于该实验。在递增浓度的化合物的存在下，将细胞以3,750个细胞/孔接种在96孔板中。与化合物温育48小时后，将细胞在裂解缓冲液中裂解并在55℃处温育45分钟。将细胞裂解物与作为标准化对照的人MEIS1特异性捕获探针或人RPL28(核糖体蛋白L28)特异性探针以及阻断探针混合。然后将细胞裂解物转移到定制测定杂交板(Thermo Fisher Scientific)中，并在55℃处温育18小时至22小时。随后，洗涤板以除去未结合的物质，随后依次添加前置放大器、放大器和标记探针。使用多模式板读取器Envision测量信号(＝基因计数)。使用适当的软件通过剂量反应模拟计算IC₅₀。对于所有非宿主基因，针对背景和相对表达进行校正的应答相等计数。对于每个样品，将每个测试基因信号(减去背景)除以归一化基因信号(RPL28：减去背景)。通过将经处理样品的归一化值除以经DMSO处理样品的归一化值来计算倍数变化。每个靶基因的倍数变化用于计算IC₅₀。

表3.生物学数据-HTRF测定、增殖测定和MEIS1 mRNA表达测定

/>

<110> 詹森药业有限公司（Janssen Pharmaceutica NV）

强生（中国）投资有限公司（Johnson & Johnson (China) Investment Ltd.）

<120> 取代的螺环衍生物

<130> P2022TC2024

<150> PCT/CN2021/092256

<151> 2021-05-08

<160> 1

<170> PatentIn 3.5版本

<210> 1

<211> 616

<212> PRT

<213> 人工序列

<400> 1

Met Gly Leu Lys Ala Ala Gln Lys Thr Leu Phe Pro Leu Arg Ser Ile

1 5 10 15

Asp Asp Val Val Arg Leu Phe Ala Ala Glu Leu Gly Arg Glu Glu Pro

20 25 30

Asp Leu Val Leu Leu Ser Leu Val Leu Gly Phe Val Glu His Phe Leu

35 40 45

Ala Val Asn Arg Val Ile Pro Thr Asn Val Pro Glu Leu Thr Phe Gln

50 55 60

Pro Ser Pro Ala Pro Asp Pro Pro Gly Gly Leu Thr Tyr Phe Pro Val

65 70 75 80

Ala Asp Leu Ser Ile Ile Ala Ala Leu Tyr Ala Arg Phe Thr Ala Gln

85 90 95

Ile Arg Gly Ala Val Asp Leu Ser Leu Tyr Pro Arg Glu Gly Gly Val

100 105 110

Ser Ser Arg Glu Leu Val Lys Lys Val Ser Asp Val Ile Trp Asn Ser

115 120 125

Leu Ser Arg Ser Tyr Phe Lys Asp Arg Ala His Ile Gln Ser Leu Phe

130 135 140

Ser Phe Ile Thr Gly Thr Lys Leu Asp Ser Ser Gly Val Ala Phe Ala

145 150 155 160

Val Val Gly Ala Cys Gln Ala Leu Gly Leu Arg Asp Val His Leu Ala

165 170 175

Leu Ser Glu Asp His Ala Trp Val Val Phe Gly Pro Asn Gly Glu Gln

180 185 190

Thr Ala Glu Val Thr Trp His Gly Lys Gly Asn Glu Asp Arg Arg Gly

195 200 205

Gln Thr Val Asn Ala Gly Val Ala Glu Arg Ser Trp Leu Tyr Leu Lys

210 215 220

Gly Ser Tyr Met Arg Cys Asp Arg Lys Met Glu Val Ala Phe Met Val

225 230 235 240

Cys Ala Ile Asn Pro Ser Ile Asp Leu His Thr Asp Ser Leu Glu Leu

245 250 255

Leu Gln Leu Gln Gln Lys Leu Leu Trp Leu Leu Tyr Asp Leu Gly His

260 265 270

Leu Glu Arg Tyr Pro Met Ala Leu Gly Asn Leu Ala Asp Leu Glu Glu

275 280 285

Leu Glu Pro Thr Pro Gly Arg Pro Asp Pro Leu Thr Leu Tyr His Lys

290 295 300

Gly Ile Ala Ser Ala Lys Thr Tyr Tyr Arg Asp Glu His Ile Tyr Pro

305 310 315 320

Tyr Met Tyr Leu Ala Gly Tyr His Cys Arg Asn Arg Asn Val Arg Glu

325 330 335

Ala Leu Gln Ala Trp Ala Asp Thr Ala Thr Val Ile Gln Asp Tyr Asn

340 345 350

Tyr Cys Arg Glu Asp Glu Glu Ile Tyr Lys Glu Phe Phe Glu Val Ala

355 360 365

Asn Asp Val Ile Pro Asn Leu Leu Lys Glu Ala Ala Ser Leu Leu Glu

370 375 380

Ala Gly Glu Glu Arg Pro Gly Glu Gln Ser Gln Gly Thr Gln Ser Gln

385 390 395 400

Gly Ser Ala Leu Gln Asp Pro Glu Cys Phe Ala His Leu Leu Arg Phe

405 410 415

Tyr Asp Gly Ile Cys Lys Trp Glu Glu Gly Ser Pro Thr Pro Val Leu

420 425 430

His Val Gly Trp Ala Thr Phe Leu Val Gln Ser Leu Gly Arg Phe Glu

435 440 445

Gly Gln Val Arg Gln Lys Val Arg Ile Val Ser Arg Glu Ala Glu Ala

450 455 460

Ala Glu Ala Glu Glu Pro Trp Gly Glu Glu Ala Arg Glu Gly Arg Arg

465 470 475 480

Arg Gly Pro Arg Arg Glu Ser Lys Pro Glu Glu Pro Pro Pro Pro Lys

485 490 495

Lys Pro Ala Leu Asp Lys Gly Leu Gly Thr Gly Gln Gly Ala Val Ser

500 505 510

Gly Pro Pro Arg Lys Pro Pro Gly Thr Val Ala Gly Thr Ala Arg Gly

515 520 525

Pro Glu Gly Gly Ser Thr Ala Gln Val Pro Ala Pro Ala Ala Ser Pro

530 535 540

Pro Pro Glu Gly Pro Val Leu Thr Phe Gln Ser Glu Lys Met Lys Gly

545 550 555 560

Met Lys Glu Leu Leu Val Ala Thr Lys Ile Asn Ser Ser Ala Ile Lys

565 570 575

Leu Gln Leu Thr Ala Gln Ser Gln Val Gln Met Lys Lys Gln Lys Val

580 585 590

Ser Thr Pro Ser Asp Tyr Thr Leu Ser Phe Leu Lys Arg Gln Arg Lys

595 600 605

Gly Leu His His His His His His

610 615

Claims

1.一种式(I)的化合物

或其互变异构体或立体异构形式，其中

R^1a表示-C(＝O)-NR^xaR^xb；或

R^xa和R^xb各自独立地选自由以下项组成的组：氢；C_3-6环烷基；

C_1-4烷基；被1、2或3个卤代基原子取代的C_1-4烷基；以及被一个-OH、-OC_1-4烷基或NR^11cR^11d取代的C_1-4烷基；

R^1b表示F或Cl；

Y¹表示-CR^5aR^5b-、-O-、-S-或-NR^5c-；

U¹和U²各自独立地表示N或CH；

n1、n2、n3和n4各自独立地选自1和2；

X¹表示CH，并且X²表示N；

R⁴表示C_1-5烷基；

或者R^xc和R^xd连同它们所连接的N原子合在一起形成含有一个N原子和任选的一个选自O、S和N的另外的杂原子的4元至7元单环完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；其中所述杂环基任选地被一个、两个或三个选自由以下项组成的组的取代基取代：卤代基、-OH、-O-C_1-4烷基和氰基；

R⁶选自由以下项组成的组：

Het³；-C(＝O)-NH-R⁸；

任选地被一个或两个各自独立地选自由以下项组成的组的取代基取代的C_1-6烷基：Het³、Het⁴、Het^6a、Het^6b、Cy¹、-CN、-OH、-O-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基、-C(＝O)-NH-C_1-4烷基-C_3-6环烷基、-

C(＝O)-OH、-NR^11aR^11b和-NH-S(＝O)₂-C_1-4烷基；和

R^9a和R^9b各自独立地选自由以下项组成的组：氢；

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中

R^1a表示-C(＝O)-NR^xaR^xb；

R^xa和R^xb各自独立地选自由以下项组成的组：

R^1b表示F；

Y¹表示-O-；

R²表示氢；

R⁴表示C_1-5烷基；

R³选自由Het¹和Cy²组成的组；

R⁶选自由以下项组成的组：Het³；

Het³和Het⁵各自独立地表示含有一个、两个或三个各自独立地选自O、S和N的杂原子的单环C-连接的4元至7元完全饱和杂环基，其中所述S原子能够被取代以形成S(＝O)或S(＝O)₂；其中所述杂环基在一个碳原子上任选地被-OH或氧代基取代；

R^9a和R^9b各自独立地选自由以下项组成的组：氢；

C_1-4烷基；C_3-6环烷基；Het⁵；-C_1-4烷基-R¹⁶；以及

被一个、两个或三个-O-C_1-4烷基取代基取代的C_1-4烷基；

R^10a、R^10b、R^11a和R^11b表示C_1-4烷基；

R¹⁶表示Het⁵。

3.根据权利要求1所述的化合物，其中

R^1a表示-C(＝O)-NR^xaR^xb；

R^xa和R^xb表示C_1-4烷基；

R^1b表示F；

Y¹表示-O-；

R²表示氢；

R⁴表示异丙基；

R³选自由Het¹和Cy²组成的组；

R⁶表示被一个Het³取代的C_1-6烷基；

R^10a和R^10b表示C_1-4烷基。

4.根据权利要求1所述的化合物，其中R³表示Het¹。

5.根据权利要求1所述的化合物，其中n1为1，n2为2，n3为1，并且n4为1。

6.根据权利要求1所述的化合物，其中U¹表示N。

7.根据权利要求1所述的化合物，其中

R³表示Het¹；

8.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至7中任一项所述的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。

9.一种用于制备根据权利要求8所述的药物组合物的方法，所述方法包括将药学上可接受的载体与治疗有效量的根据权利要求1至7中任一项所述的化合物混合。

10.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物或根据权利要求8所述的药物组合物，其用作药物。

11.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物或根据权利要求8所述的药物组合物，其在预防或治疗癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病中使用。

12.根据权利要求11所述用于使用的化合物或药物组合物，其中癌症选自白血病、骨髓瘤或实体瘤癌症，诸如前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑素瘤和成胶质细胞瘤。

13.根据权利要求12所述用于使用的化合物或药物组合物，其中所述白血病选自急性白血病、慢性白血病、骨髓性白血病、髓细胞性白血病、成淋巴细胞性白血病、淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病(AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性成淋巴细胞性白血病(CLL)、T细胞幼淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL扩增白血病、MLL阳性白血病和表现出HOX/MEIS1基因表达特征的白血病。

14.一种治疗或预防选自癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至7中任一项所述的化合物或根据权利要求8所述的药物组合物。

15.根据权利要求13所述的方法，其中所述病症是癌症。