CN117288963A - 一种hfrep1蛋白用于制备诊断急性心肌梗死、脑梗死的试剂盒的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种HFREP1蛋白用于制备诊断急性心肌梗死、脑梗死的试剂盒的用途。本发明发现，健康受试者和急性心肌梗死、脑梗死患者血清中的HFREP1蛋白含量存在明显差异，急性心肌梗死、脑梗死患者血清中的HFREP1蛋白含量明显高于健康受试者。进一步的诊断效能试验显示，HFREP1蛋白可以有效诊断区分健康受试者和急性心肌梗死或诊断区分健康受试者和脑梗死患者，诊断准确率高，可以用于开发成诊断急性心肌梗死或脑梗死的试剂盒，比现有诊断方法客观性明显提高。
Description
技术领域
本发明属于疾病诊断领域，涉及疾病诊断标志物的发现和应用，具体涉及一种HFREP1蛋白用于制备诊断急性心肌梗死、脑梗死的试剂盒的用途。
背景技术
急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死，是一种临床上较常见的心血管疾病。近年来，急性心肌梗死的发病率呈明显上升趋势。急性心肌梗死发病急骤、病情危重，需要及时的诊断与治疗。
脑梗死(cerebralinfarction，CI)又称缺血性脑卒中，是指局部脑组织因血液循环障碍，缺血、缺氧而发生的软化坏死。脑梗死是脑血管病中最常见者，约占75％，病死率平均10％～15％，致残率极高，且极易复发，复发性中风的死亡率大幅度增加。
为了提高急性心肌梗死、脑梗死诊断的客观性，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种HFREP1蛋白用于制备诊断急性心肌梗死、脑梗死的试剂盒的用途。
本发明上述目的通过如下技术方案实现：
一种HFREP1蛋白用于制备诊断急性心肌梗死、脑梗死的试剂盒的用途。
优选地，所述试剂盒为血清检测试剂盒。
优选地，所述试剂盒中含有HFREP1蛋白的检测试剂。
有益效果：
本发明发现，健康受试者和急性心肌梗死、脑梗死患者血清中的HFREP1蛋白含量存在明显差异，急性心肌梗死、脑梗死患者血清中的HFREP1蛋白含量明显高于健康受试者。进一步的诊断效能试验显示，HFREP1蛋白可以有效诊断区分健康受试者和急性心肌梗死或诊断区分健康受试者和脑梗死患者，诊断准确率高，可以用于开发成诊断急性心肌梗死或脑梗死的试剂盒，比现有诊断方法客观性明显提高。
附图说明
图1为训练集中HFREP1蛋白诊断区分健康受试者vs急性心肌梗死患者的ROC曲线；
图2为验证集中根据HFREP1蛋白预测健康受试者vs急性心肌梗死患者的样本分布图；
图3为训练集中HFREP1蛋白诊断区分健康受试者vs脑梗死患者的ROC曲线；
图4为验证集中根据HFREP1蛋白预测健康受试者vs脑梗死患者的样本分布图。
具体实施方式
下面结合实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。
实施例1：急性心肌梗死的诊断
一、实验样本和试剂
收集31例健康受试者和33例急性心肌梗死患者。健康受试者为体检健康的正常人，急性心肌梗死患者根据2021年急性心肌梗死中医临床诊疗指南诊断标准确诊。
健康受试者与急性心肌梗死患者的年龄、性别和体重指数匹配，无显著性差异。将健康受试者与急性心肌梗死患者随机分为训练集样本(纳入18例健康受试者和18例急性心肌梗死患者)和验证集样本(纳入13例健康受试者和15例急性心肌梗死患者)。
排除标准：
①合并其它急性疾病或未控制的慢性疾病者；②合并有心脑血管、肝、肾脏和造血系统等严重原发性疾病者；③患有精神疾病不能合作者；④妊娠或哺乳期妇女，或准备妊娠者；⑤近1个月内参加其它临床试验者；⑥不愿接受本研究者。
主要实验试剂：
测定HFREP1蛋白的ELISA试剂购买于RayBiotech.,Inc。
二、实验方法
1、血清样本的采集及储存
采集健康受试者和急性心肌梗死患者清晨空腹外周血并将其置于不含抗凝剂的试管内，在室温下自然凝集30-60min，待血液凝固，以2000rpm速度离心10min，小心吸取上层清亮血清液体于无菌冻干管中，标记后放入-80℃冰箱储存备用。
2、ELISA测定血清中HFREP1蛋白的含量
严格按照ELISA试剂测定说明测定各血清样本中HFREP1蛋白的含量。
3、数据处理方法
建立测试集中HFREP1蛋白诊断区分健康受试者VS急性心肌梗死患者的ROC曲线，计算曲线下面积(AUC)及95％可信区间。运用Logistic回归建立回归方程，产生一组新变量logit[P]，经过logit[P]＝Ln[p/(1-p)]转换，得预测概率p，对该新变量进行ROC曲线分析。验证集中，以ROC曲线得到的最佳cut-off值为阈值计算HFREP1对于急性心肌梗死的诊断准确率。
三、实验结果
1、HFREP1蛋白在健康受试者和急性心肌梗死患者血清中含量水平差异
训练集中，HFREP1蛋白在健康受试者VS急性心肌梗死患者血清中的含量水平存在明显差异，急性心肌梗死患者血清中的HFREP1绝对含量显著上调，测定结果如表1所示。
表1
| 组别 | HFREP1含量(ng/mL) |
| 急性心肌梗死 | 623.74±589.93 |
| 健康受试者 | 44.06±21.65 |
2、HFREP1蛋白诊断区分健康受试者和急性心肌梗死患者的ROC曲线
以训练集样本中HFREP1蛋白含量(X)作为自变量，以组别(即健康受试者和急性心肌梗死患者)作为应变量，对HFREP1蛋白在急性心肌梗死患者与健康受试者血清样本中的含量进行逻辑回归，得到逻辑回归方程Ln[p/(1-p)]＝0.065X-5.697。再将各血清样本中HFREP1蛋白的绝对含量代入该逻辑回归方程，即可得到各个血清样本的回归预测概率p，以可能的回归预测概率p作为诊断点，计算灵敏度和特异性，据此绘制ROC曲线(如图1所示)，AUC为0.9691，灵敏度为1，特异性为0.8889。根据ROC曲线的坐标计算维登指数＝特异性+灵敏度-1，维登指数最大值时对应的预测概率p值为能进行诊断区分类健康受试者VS急性心肌梗死患者的最佳cut-off值0.6450。
ROC曲线下面积AUC作为诊断试验真实性评价的固有准确度指标已被普遍认可，AUC为0.5时，即无诊断意义；AUC在0.5～0.7时，表示诊断准确率较低；AUC在0.7～0.9时，表示诊断准确性中等；AUC＞0.9时，表示诊断有较高的准确性。
3、验证HFREP1蛋白诊断急性心肌梗死的准确度
在验证集中，以上述得到的最佳cut-off值为诊断阈值对急性心肌梗死患者VS健康受试者的血清样本进行预测，以预测正确的样本数除以总样本数即为HFREP1蛋白区分急性心肌梗死患者VS健康受试者的准确度。HFREP1蛋白诊断区分急性心肌梗死患者VS健康受试者的准确率为92.86％(26/28)。样本分布图如图2所示。
实施例2：脑梗死的诊断
一、实验样本和试剂
收集31例健康受试者(与实施例1健康受试者无重复)和30例脑梗死患者。
健康受试者为体检健康的正常人，脑梗死患者根据2017中国脑梗死中西医结合诊治指南诊断指标确诊。
健康受试者与脑梗死患者的年龄、性别和体重指数匹配，无显著性差异。将健康受试者与脑梗死患者随机分为训练集样本(纳入18例健康受试者和18例脑梗死患者)和验证集样本(纳入13例健康受试者和12例脑梗死患者)。
排除标准：
①合并其它急性疾病或未控制的慢性疾病者；②合并有心脑血管、肝、肾脏和造血系统等严重原发性疾病者；③患有精神疾病不能合作者；④妊娠或哺乳期妇女，或准备妊娠者；⑤近1个月内参加其它临床试验者；⑥不愿接受本研究者。
主要实验试剂：
测定HFREP1蛋白的ELISA试剂购买于RayBiotech.,Inc。
二、实验方法
1、血清样本的采集及储存
采集健康受试者和脑梗死患者清晨空腹外周血并将其置于不含抗凝剂的试管内，在室温下自然凝集30-60min，待血液凝固，以2000rpm速度离心10min，小心吸取上层清亮血清液体于无菌冻干管中，标记后放入-80℃冰箱储存备用。
2、ELISA测定血清中HFREP1蛋白的含量
严格按照ELISA试剂测定说明测定各血清样本中HFREP1蛋白的含量。
3、数据处理方法
建立测试集中HFREP1蛋白诊断区分健康受试者VS脑梗死患者的ROC曲线，计算曲线下面积(AUC)及95％可信区间。运用Logistic回归建立回归方程，产生一组新变量logit[P]，经过logit[P]＝Ln[p/(1-p)]转换，得预测概率p，对该新变量进行ROC曲线分析。验证集中，以ROC曲线得到的最佳cut-off值为阈值计算HFREP1蛋白对于脑梗死的诊断准确率。
三、实验结果
1、HFREP1蛋白在健康受试者和脑梗死患者血清中含量水平差异
训练集中，HFREP1蛋白在健康受试者VS脑梗死患者血清中的含量水平存在明显差异，脑梗死患者血清中的HFREP1绝对含量显著上调，测定结果如表2所示。
表2
| 组别 | HFREP1含量(ng/mL) |
| 脑梗死 | 470.56±644.34 |
| 健康受试者 | 20.94±15.77 |
2、HFREP1蛋白诊断区分健康受试者和脑梗死患者的ROC曲线
以训练集样本中HFREP1蛋白含量(X)作为自变量，以组别(即健康受试者和脑梗死患者)作为应变量，对HFREP1蛋白在脑梗死患者与健康受试者血清样本中的含量进行逻辑回归，得到逻辑回归方程Ln[p/(1-p)]＝0.113X-6.999。再将各血清样本中HFREP1蛋白的绝对含量代入该逻辑回归方程，即可得到各个血清样本的回归预测概率p，以可能的回归预测概率p作为诊断点，计算灵敏度和特异性，据此绘制ROC曲线(如图3所示)，AUC为0.9969，灵敏度为1，特异性为0.9444。根据ROC曲线的坐标计算维登指数＝特异性+灵敏度-1，维登指数最大值时对应的预测概率p值为能进行诊断区分健康受试者VS脑梗死患者的最佳cut-off值0.7550。
ROC曲线下面积AUC作为诊断试验真实性评价的固有准确度指标已被普遍认可，AUC为0.5时，即无诊断意义；AUC在0.5～0.7时，表示诊断准确率较低；AUC在0.7～0.9时，表示诊断准确性中等；AUC＞0.9时，表示诊断有较高的准确性。
3、验证HFREP1蛋白诊断脑梗死的准确度
在验证集中，以上述得到的最佳cut-off值为诊断阈值对脑梗死患者VS健康受试者的血清样本进行预测，以预测正确的样本数除以总样本数即为HFREP1蛋白区分脑梗死患者VS健康受试者的准确度。HFREP1蛋白诊断区分脑梗死患者VS健康受试者的准确率为100％(25/25)。样本分布图如图4所示。
综上可见，健康受试者和急性心肌梗死、脑梗死患者血清中的HFREP1蛋白含量存在明显差异，急性心肌梗死、脑梗死患者血清中的HFREP1蛋白含量明显高于健康受试者。进一步的诊断效能试验显示，HFREP1蛋白可以有效诊断区分健康受试者和急性心肌梗死或诊断区分健康受试者和脑梗死患者，诊断准确率高，可以用于开发成诊断急性心肌梗死或脑梗死的试剂盒，比现有诊断方法客观性明显提高。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。
Claims (3)
1.一种HFREP1蛋白用于制备诊断急性心肌梗死、脑梗死的试剂盒的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，所述试剂盒为血清检测试剂盒。
3.根据权利要求1所述的用途，所述试剂盒中含有HFREP1蛋白的检测试剂。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117594131A (zh) * | 2024-01-17 | 2024-02-23 | 北京市心肺血管疾病研究所 | 用于鉴别或辅助鉴别急性胸痛类型的装置及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN118777619A (zh) | 2024-10-15 |
| CN117288963B (zh) | 2024-09-13 |
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