CN117285580A - 一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷a的方法 - Google Patents
一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷a的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117285580A CN117285580A CN202310825232.XA CN202310825232A CN117285580A CN 117285580 A CN117285580 A CN 117285580A CN 202310825232 A CN202310825232 A CN 202310825232A CN 117285580 A CN117285580 A CN 117285580A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rebaudioside
- extraction
- percolate
- chunlai
- gao
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 title claims abstract description 100
- 239000001512 FEMA 4601 Substances 0.000 title claims abstract description 89
- HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N Rebaudioside A Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@]1(C)[C@@H]2[C@](C)([C@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@H]5[C@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N 0.000 title claims abstract description 89
- HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N entered according to Sigma 01432 Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC(C1OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 89
- 235000019203 rebaudioside A Nutrition 0.000 title claims abstract description 89
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 title claims abstract description 48
- 235000006092 Stevia rebaudiana Nutrition 0.000 title claims abstract description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 39
- 238000005325 percolation Methods 0.000 claims abstract description 63
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 59
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 59
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 22
- GIPHUOWOTCAJSR-UHFFFAOYSA-N Rebaudioside A. Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC(C1O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O GIPHUOWOTCAJSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 96
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 67
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 44
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 37
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 36
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 32
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 32
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 29
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 24
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 24
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 19
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 17
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 16
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 13
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 13
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 10
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 8
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 8
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 7
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 6
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 2
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YKYONYBAUNKHLG-UHFFFAOYSA-N n-Propyl acetate Natural products CCCOC(C)=O YKYONYBAUNKHLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 claims description 2
- 238000012805 post-processing Methods 0.000 claims description 2
- 229940090181 propyl acetate Drugs 0.000 claims description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 abstract description 3
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 abstract description 3
- 239000010865 sewage Substances 0.000 abstract description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 abstract description 2
- 239000002893 slag Substances 0.000 abstract description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 26
- 235000019202 steviosides Nutrition 0.000 description 21
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 18
- UEDUENGHJMELGK-HYDKPPNVSA-N Stevioside Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UEDUENGHJMELGK-HYDKPPNVSA-N 0.000 description 16
- 229940013618 stevioside Drugs 0.000 description 16
- OHHNJQXIOPOJSC-UHFFFAOYSA-N stevioside Natural products CC1(CCCC2(C)C3(C)CCC4(CC3(CCC12C)CC4=C)OC5OC(CO)C(O)C(O)C5OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C(=O)OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O OHHNJQXIOPOJSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 13
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 12
- 241000544066 Stevia Species 0.000 description 11
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 11
- 239000013557 residual solvent Substances 0.000 description 11
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 10
- 238000000622 liquid--liquid extraction Methods 0.000 description 9
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 9
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 9
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 8
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 8
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 7
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 7
- 239000004383 Steviol glycoside Substances 0.000 description 5
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 5
- 235000019411 steviol glycoside Nutrition 0.000 description 5
- 229930182488 steviol glycoside Natural products 0.000 description 5
- 150000008144 steviol glycosides Chemical class 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- RPYRMTHVSUWHSV-CUZJHZIBSA-N rebaudioside D Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O RPYRMTHVSUWHSV-CUZJHZIBSA-N 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 3
- 229930002348 tetracyclic diterpenoid Natural products 0.000 description 3
- -1 tetracyclic diterpenoid compound Chemical class 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QFVOYBUQQBFCRH-UHFFFAOYSA-N Steviol Natural products C1CC2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C)C1C(C)(C(O)=O)CCC2 QFVOYBUQQBFCRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- GSGVXNMGMKBGQU-PHESRWQRSA-N rebaudioside M Chemical compound C[C@@]12CCC[C@](C)([C@H]1CC[C@@]13CC(=C)[C@@](C1)(CC[C@@H]23)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)[C@H]1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O)C(=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)[C@H]1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GSGVXNMGMKBGQU-PHESRWQRSA-N 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- QFVOYBUQQBFCRH-VQSWZGCSSA-N steviol Chemical compound C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)CC1)C[C@H]2[C@@]2(C)[C@H]1[C@](C)(C(O)=O)CCC2 QFVOYBUQQBFCRH-VQSWZGCSSA-N 0.000 description 2
- 229940032084 steviol Drugs 0.000 description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 2
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 1
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000007598 dipping method Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000021472 generally recognized as safe Nutrition 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 235000013615 non-nutritive sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 229930188195 rebaudioside Natural products 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/256—Polyterpene radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
Abstract
本发明涉及一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A的方法。所述方法包括如下步骤：采用渗漉法对甜菊叶进行提取，收集渗漉液；将所述渗漉液经过后处理，得到所述高纯莱鲍迪苷A。本发明的方法渗透与扩散同时进行，能显著提高提取速度与提取效果；以干基为基准，莱鲍迪苷A的质量百分比可达10～12％，提取率高于95％，同时甜菊叶渣内残留的提取溶剂可以得到充分的回收；本发明大幅降低了生产水耗，减少污水及絮凝渣的排放。
Description
技术领域
本发明涉及天然物质提取技术领域，特别涉及一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A的方法。
背景技术
甜菊糖苷是一种从菊科草本植物甜叶菊中提取的四环双萜化合物，它的甜度可达蔗糖的250～450倍，而热量只有蔗糖的1/300，口感非常接近于蔗糖，是天然、健康、低卡的甜味剂。甜菊糖苷还具有结构稳定、耐热、防腐等性能，添加到食品中可抑制细菌生长，可延长产品的保质期。甜菊糖苷在体内的代谢途径研究发现，甜菊糖苷对高血压、高血糖、肥胖及龋齿等都具有很好的疗效。欧洲已批准甜菊糖作为食品添加剂使用，美国食品药物管理局也已经将高品质甜菊糖定为GRAS(Generally Recognized As Safe，广泛地被认为安全)，我国也已将甜菊糖苷作为甜味剂列入食品添加剂中。
甜菊糖苷的主要甜味物质含有甜菊苷(Steviolside)、莱鲍迪苷A(RebaudiosideA)、莱鲍迪苷D(Rebaudioside D)和莱鲍迪苷M(Rebaudioside M)，其中主要成分为莱鲍迪苷A(RA)和甜菊苷(STV)，约占甜菊糖苷的90wt％。莱鲍迪苷A在甜味特征上更接近蔗糖，是一种较为理想的甜味剂，也是当前甜菊糖苷工业生产中最为重要和产量最大的甜味剂。
甜菊糖苷中莱鲍迪苷A(RA苷)的含量越高，甜味就越纯正，也就更受消费者青睐。因此，要想改善现有甜菊苷产品风味，就必须提高甜菊苷产品中莱鲍迪苷A的含量。这不仅与原料有关，而且与加工工艺技术有关。目前莱鲍迪苷A提纯和精制工艺手段包括色谱法、分子印迹法、膜分离法和重结晶法。这些技术的缺点主要有采用高温高压操作、操作复杂、生产周期较长、产品中RA纯度低、成本高等。因此，亟需开发一种操作简单、流程短、成本低、产品纯度高的莱鲍迪苷分离纯化新技术。
发明内容
为了解决现有技术中存在的甜菊糖苷提取方法能耗过大、口感纯度不足的缺陷，本发明提供了一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A的方法。本发明的方法能耗较低、质量稳定、成本低、操作简便，适合工业化生产。采用本发明的方法制备得到高纯莱鲍迪苷A，高纯是指纯度在95％以上。
在第一方面，本发明提供了一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A的方法，包括如下步骤：
采用渗漉法对甜菊叶进行提取，收集渗漉液；将所述渗漉液经过后处理，得到所述高纯莱鲍迪苷A。
在一些实施方式中，所述后处理包括：步骤S1，去除所述渗漉液中的短链醇，得到浓缩水溶液；步骤S2，对所述浓缩水溶液进行萃取，收集水相，得到提取液；步骤S3，将所述提取液进行洗脱，得到洗脱液；步骤S4，将所述洗脱液进行第一干燥后洗涤、结晶、再进行第二干燥，得到所述高纯莱鲍迪苷A。
在一些实施方式中，渗漉法操作过程中可以连续补加提取溶剂，为了提高提取溶剂的利用效率，还可以对提取溶剂进行回收处理。具体的处理方式包括：用去离子水自上而下流经渗漉柱，控制流速为0.5～1.5倍甜菊叶粉堆积体积(BV)/小时，收集出口处含提取溶剂与水的混合液体，经蒸馏处理回收溶剂在本发明中，甜菊叶粉经渗漉提取后得到的提取液中，莱鲍迪苷A的含量较高，以干基为基准，莱鲍迪苷A的质量百分比可达10～12％，提取率高于95％，同时甜菊叶渣内残留的提取溶剂可以得到充分的回收。
在一些实施方式中，所述渗漉法包括：将甜菊叶粉末装填入渗漉柱，向所述渗漉柱中加入提取溶剂浸泡，然后利用所述提取溶剂进行渗漉提取，收集渗漉液。
在一些实施方式中，所述浸泡的温度为20～50℃，例如可以为20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃、38℃、40℃、42℃、44℃、46℃、48℃、50℃。
在一些实施方式中，所述浸泡的时间为30～120分钟，例如可以为30分钟、35分钟、40分钟、45分钟、50分钟、55分钟、60分钟、70分钟、75分钟、80分钟、90分钟、100分钟、110分钟或120分钟。
在一些实施方式中，所述提取溶剂为体积分数为30％～95％的甲醇水溶液或乙醇水溶液，体积分数可以为30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％。
在一些实施方式中，所述提取溶剂的加入量为甜菊叶粉末堆积体积(BV)的0.7～1.2倍，例如为0.7倍、0.8倍、0.9倍、1.0倍、1.1倍或1.2倍。
在一些实施方式中，所述渗漉提取的过程中补加提取溶剂，直至所述渗漉液的体积为甜菊叶粉末堆积体积的3～5倍。
在一些实施方式中，所述渗漉提取的过程中补加提取溶剂的流速为0.5～4BV/h，例如流速为0.5BV/h、0.6BV/h、0.7BV/h、0.8BV/h、0.9BV/h、1.0BV/h、1.1BV/h、1.2BV/h、1.3BV/h、1.4BV/h、1.5BV/h、2BV/h、2.5BV/h、3BV/h、3.5BV/h或4BV/h。
在一些实施方式中，步骤S1中，采用真空浓缩的方式去除所述渗漉液中的短链醇，优选地，浓缩至所述渗漉液体积的15～25％，例如为15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％。
在一些实施方式中，步骤S2中，萃取采用有机溶剂，优选地，所述有机溶剂为与水不相同的弱极性有机溶剂，更优选地，所述有机溶剂选自乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯等中的一种或多种。
在一些实施方式中，所述有机溶剂与所述浓缩水溶液中的水层的体积比为1:(1～5)，体积比可以为1:1、1:2、1:3、1:4或1:5。
在一些实施方式中，为了去除弱极性杂质，可以进行多次萃取，优选萃取3～5次。
在一些实施方式中，所述步骤S3包括：将所述提取液通过大孔吸附树脂，依次用水、第一醇溶液进行洗脱，收集洗脱液。
在一些实施方式中，所述大孔吸附树脂选自HPD-750、AB-8、ADS-7、LX-60或LX-T28中的一种或多种。
在一些实施方式中，所述水的用量为2～3BV，例如2BV、2.1BV、2.2BV、2.3BV、2.4BV、2.5BV、2.6BV、2.7BV、2.8BV、2.9BV或3BV；优选地，所述第一醇溶液为体积分数为25～45％的乙醇溶液(例如体积分数为25％、28％、31％、34％、37％、40％、43％、45％)；更优选地，所述第一醇溶液的用量为7～15BV，例如为7BV、8BV、9BV、10BV、11BV、12BV、13BV、14BV或15BV。
在一些实施方式中，所述步骤S4包括：将所述洗脱液进行第一干燥后洗涤、结晶，热溶后趁热过滤得第一莱鲍迪苷A；回收滤液，加入纯度为98％的莱鲍迪苷A诱导结晶，离心甩滤洗涤，与趁热过滤得到的莱鲍迪苷A产品混合，得到所述高纯莱鲍迪苷A；或
将所述洗脱液进行第一干燥后洗涤、结晶，热溶后趁热过滤得第一莱鲍迪苷A；
回收滤液，降温至4℃静置8～16h结晶，离心甩滤洗涤，与趁热过滤得到的莱鲍迪苷A产品混合，得到所述高纯莱鲍迪苷A。所述第一干燥可以采用真空干燥。
在一些实施方式中，所述洗涤采用第二醇溶液，优选地，所述第二醇溶液为体积分数90～99％的甲醇溶液或乙醇溶液。
在一些实施方式中，结晶过程中的固液比为1:(3～9)，固液比可以为1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8或1:9。
在另一方面，本发明提供了一种高纯莱鲍迪苷A，所述高纯莱鲍迪苷A按照上述第一方面所述的方法制备得到。
在一些实施方式中，所述高纯莱鲍迪苷A的纯度为95％以上。
相较于传统的热水浸渍法，本发明采用常温渗漉法从甜叶菊中提取甜菊糖，渗透与扩散同时进行，能显著提高提取速度与提取效果；以干基为基准，莱鲍迪苷A的质量百分比可达10～12％，提取率高于95％，同时甜菊叶渣内残留的提取溶剂可以得到充分的回收，常温渗漉法能耗更低；和传统的水提取工艺相比，该工艺大幅降低了生产水耗，减少污水及絮凝渣的排放，为一种高效的生产工艺。本发明的工艺可使用乙醇、乙酸乙酯和水三种溶剂完成，毒性低。本发明在渗漉液浓缩后采用3～5次液液萃取，除去弱极性杂质，可减少该类杂质进入大孔吸附树脂，延长树脂使用周期，并提高甜菊糖苷的纯度。本发明在萃取滤液时无需加热，在室温下充分混合即可完成；后续的大孔树脂吸附、重结晶或干燥均无需加热或极少加热，可显著减少能源消耗，降低生产成本。按照本发明所述方法制备得到的甜菊糖苷中的莱鲍迪苷A含量达95％，甜菊糖苷总苷含量＞98％，回收率>50％，品质优良。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步的详细说明。此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于构成对本发明的任何限制。
除特别说明外，本发明提取高纯莱鲍迪苷A是在20～35℃下进行。
甜菊糖分析条件：
实施例1
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：甜菊叶粉碎后过100目筛(干基中莱鲍迪苷A的质量百分比为12.13wt％)，称取50g甜菊叶粉装填入渗漉柱(Φ4.0cm×20cm)，装填均匀后其堆积体积约为150mL，向渗漉柱中加入150mL体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，在25℃下浸泡60分钟使其充分溶胀。保温状态下，开启渗漉柱出口阀，进行渗漉操作，收集渗漉液的同时连续补加体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，控制流速在2.8mL/min(168mL/h，约为1.12BV/h)，直至收集到的渗漉液体积为501.2mL(相当于3.34BV)；渗漉提取液经分析，固形物含量(固形物含量是指将溶液干燥至恒重时的质量与干燥前溶液体积的比，下同)为59.17mg/mL，其中，以干基(干基是指溶液干燥后得到的固体的质量，即溶液中的全部溶质的质量总和，下同)计，莱鲍迪苷A的质量百分比为20.2％，莱鲍迪苷A的提取率为98.77％。
(2)浓缩：将收集到的渗漉液置于水浴60℃、真空-0.08MPa条件下进行浓缩，回收乙醇，得约100mL渗漉液的浓缩水溶液；
(3)萃取：量取乙酸乙酯25mL，对前述水溶液进行液液萃取，萃取5次，取水层，得到除去弱极性杂质的渗漉液；
(4)树脂吸附：加水，将前述除去弱极性杂质的渗漉液的固形物含量调节至15mg/mL，通过80g的大孔吸附树脂HPD-750(吸附柱的径高比＝1:10)，调整上样流速为1BV/h，吸附完成后用2BV的纯化水冲洗，再用体积百分浓度35％的乙醇水溶液洗脱，收集10个BV乙醇溶液的洗脱液；
(5)洗涤结晶：将前述乙醇水溶液洗脱液真空干燥，得到4.99g粗糖，取体积百分浓度95％的乙醇水溶液15mL，70℃加热，在100rpm搅拌下充分混合，至瓶璧出现白色固体后趁热过滤，洗涤，得白色固体1.81g，回收剩余溶剂，降温至4℃，静置10个小时出现结晶，将其过滤并洗涤干燥后，合并两次固体共2.53g，经HPLC分析得产品中莱鲍迪苷A的纯度为95.28％，莱鲍迪苷A的回收率为39.75％。
实施例2
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：甜菊叶粉碎后过100目筛(干基中莱鲍迪苷A的质量百分比为12.21％)，称取45g甜菊叶粉装填入渗漉柱(Φ4.0cm×20cm)，装填均匀后其堆积体积约为150mL，向渗漉柱中加入120mL体积百分浓度为75％的甲醇水溶液，在25℃下浸泡60分钟使其充分溶胀。保温状态下，开启渗漉柱出口阀，进行渗漉操作，收集渗漉液的同时连续补加体积百分浓度为75％的甲醇水溶液，控制流速在2.8mL/min(168mL/h，约为1.12BV/h)，直至收集到的渗漉液体积为496.9mL(相当于3.34BV)；渗漉提取液经分析，固形物含量为54.76mg/mL，其中，以干基计，莱鲍迪苷A的质量百分比为19.72％，莱鲍迪苷A的提取率为97.74％。
(2)浓缩：将收集到的渗漉液置于水浴60℃、真空-0.08MPa条件下进行浓缩，回收乙醇，得100mL渗漉液的浓缩水溶液；
(3)萃取：量取乙酸乙酯25mL，对前述水溶液进行液液萃取，萃取4次，取水层，得到除弱极性杂质的渗漉液。
(4)树脂吸附：加水，将前述除低极性杂质的渗漉液的固形物含量调节至15mg/mL，通过80g的大孔吸附树脂AB-8(吸附柱的径高比＝1:10)，调整上样流速为1BV/h，吸附完成后用2BV的纯化水冲洗，再用体积百分浓度35％的乙醇水溶液洗脱，收集10个BV乙醇溶液的洗脱液；
(5)洗涤结晶：将前述乙醇水溶液洗脱液真空干燥，得到4.79g粗糖，取体积百分浓度95％的乙醇水溶液14.5mL，70℃加热，在100rpm搅拌下充分混合，至瓶璧出现白色固体后趁热过滤，洗涤，得白色固体1.88g，回收剩余溶剂，降温至4℃，静置8个小时出现结晶，将其过滤并洗涤干燥后，合并两次固体共2.44g，经HPLC分析，产品中莱鲍迪苷A的纯度为96.03％，莱鲍迪苷A的回收率为42.65％。
实施例3
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：甜菊叶粉碎后过100目筛(干基中莱鲍迪苷A的质量百分比为11.86wt％)，称取466g甜菊叶粉装填入渗漉柱(Φ8.0cm×80cm)，装填均匀后其堆积体积约为1420mL，向渗漉柱中加入1000mL体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，在25℃下浸泡60分钟使其充分溶胀。保温状态下，开启渗漉柱出口阀，进行渗漉操作，收集渗漉液的同时连续补加体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，控制流速在20mL/min(1200mL/h，约为0.85BV/h)，直至收集到的渗漉液体积为4295mL(相当于3.02BV)；渗漉提取液经分析，固形物含量为59.28mg/mL，其中，以干基计，莱鲍迪苷A的质量百分比为20.98％，莱鲍迪苷A的提取率为96.65％。
(2)浓缩：将收集到的渗漉液置于水浴60℃、真空-0.08MPa条件下进行浓缩，回收乙醇，得1000mL渗漉液的水溶液；
(3)萃取：量取乙酸乙酯250mL，对前述水溶液进行液液萃取，萃取5次，取水层，得到除去弱极性杂质的渗漉液。
(4)树脂吸附：加水，将前述除去弱极性杂质的渗漉液的固形物含量调节至15mg/mL，通过800g的大孔吸附树脂LX-60(吸附柱的径高比＝1:10)，调整上样流速为1BV/h，吸附完成后用2BV的纯化水冲洗，再用体积百分浓度35％的乙醇水溶液洗脱，收集10个BV乙醇溶液的洗脱液；
(5)洗涤结晶：将前述乙醇水溶液洗脱液真空干燥，得到48.99g粗糖，取体积百分浓度95％的乙醇水溶液147mL，70℃加热，在100rpm搅拌下充分混合，至瓶璧出现白色固体后趁热过滤，洗涤，得白色固体19.12g，回收剩余溶剂，降温至4℃，静置10个小时出现结晶，将其过滤并洗涤干燥后，合并两次固体共23.58g，经HPLC分析，产品中莱鲍迪苷A的纯度为95.03％，莱鲍迪苷A的回收率为40.54％。
实施例4
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：甜菊叶粉碎后过100目筛(干基中莱鲍迪苷A的质量百分比为11.91％)，称取50g甜菊叶粉装填入渗漉柱(Φ4.0cm×20cm)，装填均匀后其堆积体积约为142mL，向渗漉柱中加入115mL体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，在25℃下浸泡60分钟使其充分溶胀。保温状态下，开启渗漉柱出口阀，进行渗漉操作，收集渗漉液的同时连续补加体积百分浓度为75％的甲醇水溶液，控制流速在2.75mL/min(165mL/h，约为1.16BV/h)，直至收集到的渗漉液体积为489.4mL(相当于3.45BV)；渗漉提取液经分析，固形物含量为57.51mg/mL，其中，以干基计，莱鲍迪苷A的质量百分比为20.72％，莱鲍迪苷A的提取率为97.93％。
(2)浓缩：将收集到的渗漉液置于水浴60℃、真空-0.08MPa条件下进行浓缩，回收乙醇，得100mL渗漉液的水溶液；
(3)萃取：量取乙酸乙酯25mL，对前述水溶液进行液液萃取，萃取5次，取水层，得到除去弱极性杂质的渗漉液。
(4)树脂吸附：加水，将前述除去弱极性杂质的渗漉液的固形物含量调节至15mg/mL，通过80g的大孔吸附树脂ADS-7(吸附柱的径高比＝1:10)，调整上样流速为1BV/h，吸附完成后用2BV的纯化水冲洗，再用体积百分浓度35％的乙醇水溶液洗脱，收集10个BV乙醇溶液的洗脱液；
(5)洗涤结晶：将前述乙醇水溶液洗脱液真空干燥，得到4.91g粗糖，取体积百分浓度95％的乙醇水溶液14.75mL，70℃加热，在100rpm搅拌下充分混合，至瓶璧出现白色固体后趁热过滤，洗涤，得白色固体2.01g，回收剩余溶剂，降温至4℃，静置8个小时出现结晶，将其过滤并洗涤干燥后，合并两次固体共2.54g，经HPLC分析，产品中莱鲍迪苷A的纯度为96.43％，莱鲍迪苷A的回收率为41.13％。
实施例5
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：甜菊叶粉碎后过100目筛(干基中莱鲍迪苷A的质量百分比为12.32％)，称取486g甜菊叶粉装填入渗漉柱(Φ8.0cm×80cm)，装填均匀后其堆积体积约为1480mL，向渗漉柱中加入1000mL体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，在25℃下浸泡60分钟使其充分溶胀。保温状态下，开启渗漉柱出口阀，进行渗漉操作，收集渗漉液的同时连续补加体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，控制流速在21mL/min(1260mL/h，约为0.85BV/h)，直至收集到的渗漉液体积为4500mL(相当于3.04BV)；渗漉提取液经分析，固形物含量为59.06mg/mL，其中，以干基计，莱鲍迪苷A的质量百分比为21.71％，莱鲍迪苷A的提取率为96.36％。
(2)浓缩：将收集到的渗漉液置于水浴60℃、真空-0.08MPa条件下进行浓缩，回收乙醇，得900mL渗漉液的水溶液；
(3)萃取：量取乙酸乙酯220mL，对前述水溶液进行液液萃取，萃取5次，取水层，得到除去弱极性杂质的渗漉液。
(4)树脂吸附：加水，将前述除去弱极性杂质的渗漉液的固形物含量调节至15mg/mL，通过800g的大孔吸附树脂LX-T28(吸附柱的径高比＝1:10)，调整上样流速为1BV/h，吸附完成后用2BV的纯化水冲洗，再用体积百分浓度35％的乙醇水溶液洗脱，收集10个BV乙醇溶液的洗脱液；
(5)洗涤结晶：将前述乙醇水溶液洗脱液真空干燥，得到51.18g粗糖，取体积百分浓度95％的乙醇水溶液154mL，70℃加热，在100rpm搅拌下充分混合，至瓶璧出现白色固体后趁热过滤，洗涤，得白色固体21.35g，回收剩余溶剂，降温至4℃，静置10个小时出现结晶，将其过滤并洗涤干燥后，合并两次固体共29.01g，经HPLC分析，产品中莱鲍迪苷A的纯度为95.29wt％，莱鲍迪苷A的回收率为46.17％。
实施例6
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：甜菊叶粉碎后过100目筛(干基中莱鲍迪苷A的质量百分比为11.97％)，称取1000g甜菊叶粉装填入渗漉柱(Φ8.0cm×80cm)，装填均匀后其堆积体积约为2550mL，向渗漉柱中加入1800mL体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，在25℃下浸泡60分钟使其充分溶胀。保温状态下，开启渗漉柱出口阀，进行渗漉操作，收集渗漉液的同时连续补加体积百分浓度为75％的乙醇水溶液，控制流速在40mL/min(2400mL/h，约为0.94BV/h)，直至收集到的渗漉液体积为8500mL(相当于3.33BV)；渗漉提取液经分析，固形物含量为62.92mg/mL，其中，以干基计，莱鲍迪苷A的质量百分比为21.53％，莱鲍迪苷A的提取率为96.20％。
(2)浓缩：将收集到的渗漉液置于水浴60℃、真空-0.08MPa条件下进行浓缩，回收乙醇，得2000mL渗漉液的水溶液；
(3)萃取：量取乙酸乙酯500mL，对前述水溶液进行液液萃取，萃取5次，取水层，得到除去弱极性杂质的渗漉液。
(4)树脂吸附：加水，将前述除去弱极性杂质的渗漉液的固形物含量调节至15mg/mL，通过1500g的大孔吸附树脂HPD-750(吸附柱的径高比＝1:10)，调整上样流速为1BV/h，吸附完成后用2BV的纯化水冲洗，再用体积百分浓度35％的乙醇水溶液洗脱，收集10个BV乙醇溶液的洗脱液；
(5)洗涤结晶：将前述乙醇水溶液洗脱液真空干燥，得到110.92g粗糖，取体积百分浓度95％的乙醇水溶液333mL，70℃加热，在100rpm搅拌下充分混合，至瓶璧出现白色固体后趁热过滤，洗涤，得白色固体42.54g，回收剩余溶剂，降温至4℃，静置10个小时出现结晶，将其过滤并洗涤干燥后，合并两次固体共54.37g，经HPLC分析，产品中莱鲍迪苷A的纯度为95.39％，莱鲍迪苷A的回收率为43.33％。
实施例7-18
制备方法与实施例1相同，不同之处在于，按照表1调整条件参数。
对比例1
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：甜菊叶粉碎后过100目筛(干基中莱鲍迪苷A的质量百分比为12％)，称取31.9g甜菊叶粉装填入渗漉柱(Φ4.0cm×20cm)，装填均匀后其堆积体积约为130mL，向渗漉柱中加入120mL纯化水，在25℃下浸泡60分钟使其充分溶胀。保温状态下，开启渗漉柱出口阀，进行渗漉操作，收集渗漉液的同时连续补加纯水，控制流速在2.1mL/min(126mL/h，约为0.97BV/h)，直至收集到的渗漉液体积为679.5mL(相当于5.22BV)；渗漉提取液经分析，固形物含量为27.51mg/mL，其中，以干基计，莱鲍迪苷A的质量百分比为19.60％，莱鲍迪苷A的提取率为93.38％。
(2)浓缩：将收集到的渗漉液置于水浴60℃、真空-0.08MPa条件下进行浓缩，回收乙醇，得约65mL渗漉液的水溶液；
(3)萃取：量取乙酸乙酯16.5mL，对前述水溶液进行液液萃取，萃取3次，取水层，得到除去弱极性杂质的渗漉液。
(4)树脂吸附：加水，将前述除去弱极性杂质的渗漉液的固形物含量调节至15mg/mL，通过70g的大孔吸附树脂HPD-750(吸附柱的径高比＝1:10)，调整上样流速为1BV/h，吸附完成后用2BV的纯化水冲洗，再用体积百分浓度35％的乙醇水溶液洗脱，收集10个BV乙醇溶液的洗脱液；
(5)洗涤结晶：将前述乙醇水溶液洗脱液真空干燥，得到3.94g粗糖，取体积百分浓度95％的乙醇水溶液12mL，70℃加热，在100rpm搅拌下充分混合，至瓶璧出现白色固体后趁热过滤，洗涤，得白色固体2.01g，回收剩余溶剂，降温至4℃，静置10个小时出现少量结晶，将其过滤并洗涤干燥后，合并两次固体共2.13g，得产品中莱鲍迪苷A的纯度为43.28％，莱鲍迪苷A的回收率为29.65％。
对比例2
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：取甜菊叶细粉2kg，加纯化水16kg在25℃快速搅拌10min，充分离心甩滤，得粗滤液1，滤渣1加纯化水12kg，在25℃快速搅拌5min，充分离心甩滤，得粗滤液2，滤渣2加纯化水12kg，在25℃快速搅拌5min，充分离心甩滤，得粗滤液3，合并粗滤液1、2、3，得到粗滤液；经错流过滤，得精滤液。
(2)纯化：取精滤液SP-3大孔树脂柱(径高比＝22cm∶120cm)，依次用3BV纯化水、5～15BV 5～60％甲醇液梯度洗涤，用体积浓度的75％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液至无莱鲍迪苷A。
(3)富集：向乙醇洗脱液中加质量0.1％的活性炭，搅拌15min，脱炭后错流过滤，滤液回收50～70％乙醇再利用，放置结晶12～18h，待结晶完全，过滤，即得类白色粉末，收率为2.81％，纯度为65.27％。
对比例3：
从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A，包括以下步骤：
(1)提取：甜菊叶粉碎后过100目筛(干基中莱鲍迪苷A的质量百分比为12％)，称取50g甜菊叶粉装填入渗漉柱(Φ4.0cm×20cm)，装填均匀后其堆积体积约为150mL，向渗漉柱中加入150mL乙醇，在25℃下浸泡60分钟使其充分溶胀。保温状态下，开启渗漉柱出口阀，进行渗漉操作，收集渗漉液的同时连续补加纯乙醇，控制流速在2.8mL/min(168mL/h，约为1.12BV/h)，直至收集到的渗漉液体积为501.2mL(相当于3.34BV)；渗漉提取液经分析，固形物含量为22.67mg/mL，其中，以干基计，莱鲍迪苷A的质量百分比为25.10％，莱鲍迪苷A的提取率仅60.12％。
(2)浓缩：将收集到的渗漉液置于水浴60℃、真空-0.08MPa条件下进行浓缩，回收乙醇，得约100mL渗漉液的水溶液；
(3)萃取：量取乙酸乙酯25mL，对前述水溶液进行液液萃取，萃取5次，取水层，得到除去弱极性杂质的渗漉液；
(4)树脂吸附：加水，将前述浓缩液的固形物含量调节至15mg/mL，通过80g的大孔吸附树脂HPD-750(吸附柱的径高比＝1:10)，调整上样流速为1BV/h，吸附完成后用2BV的纯化水冲洗，再用体积百分浓度35％的乙醇水溶液洗脱，收集10个BV乙醇溶液的洗脱液；
(5)洗涤结晶：将前述乙醇水溶液洗脱液真空干燥，得到1.7g粗糖，取体积百分浓度95％的乙醇水溶液6mL，70℃加热，在100rpm搅拌下充分混合，瓶璧出现固体颜色呈棕灰色，洗涤，得棕灰色固体0.8g；回收剩余溶剂，降温至4℃，静置10个小时，未出现结晶，得产品中莱鲍迪苷A的纯度为56.28％，莱鲍迪苷A的回收率仅15％。
对比例4
相对对比例2仅改变提取温度条件，升温至50℃。
表1
/>
/>
从表1中可以看出，本申请采用常温渗漉法从甜叶菊中提取甜菊糖，能耗更低，与传统的水提取工艺(对比例2和对比例4)相比，本申请的方法更加高效，大幅降低了生产水耗，减少污水及絮凝渣的排放。
从表1中还可以看出，萃取溶剂的极性，洗脱剂的浓度也会对RA的纯度和回收率产生影响。
本发明的技术方案不限于上述具体实施例的限制，凡是根据本发明的技术方案做出的技术变形，均落入本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷A的方法，包括如下步骤：
采用渗漉法对甜菊叶进行提取，收集渗漉液；将所述渗漉液经过后处理，得到所述高纯莱鲍迪苷A。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述后处理包括如下步骤：
步骤S1，去除所述渗漉液中的短链醇，得到浓缩水溶液；
步骤S2，对所述浓缩水溶液进行萃取，收集水相，得到提取液；
步骤S3，将所述提取液进行洗脱，得到洗脱液；
步骤S4，将所述洗脱液进行第一干燥后洗涤、结晶、再进行第二干燥，得到所述高纯莱鲍迪苷A。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述渗漉法包括：
将甜菊叶粉末装填入渗漉柱，向所述渗漉柱中加入提取溶剂浸泡，然后利用所述提取溶剂进行渗漉提取，收集渗漉液；
优选地，所述浸泡的温度为20～50℃；
优选地，所述浸泡的时间为30～120分钟。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述提取溶剂为体积分数为30％～95％的甲醇水溶液或乙醇水溶液；
优选地，所述提取溶剂的加入量为甜菊叶粉末堆积体积的0.7～1.2倍；
优选地，所述渗漉提取的过程中补加提取溶剂，直至所述渗漉液的体积为甜菊叶粉末堆积体积的3～5倍；
优选地，所述渗漉提取的过程中补加提取溶剂的流速为0.5～4BV/h。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S1中，采用真空浓缩的方式去除所述渗漉液中的短链醇，优选地，浓缩至所述渗漉液体积的15～25％。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S2中，萃取采用有机溶剂，优选地，所述有机溶剂为与水不相同的弱极性有机溶剂，更优选地，所述有机溶剂选自乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯中的一种或多种；和/或
所述有机溶剂与所述浓缩水溶液中的水层的体积比为1:(1～5)。
7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤S3包括：
将所述提取液通过大孔吸附树脂，依次用水、第一醇溶液进行洗脱，收集洗脱液；
优选地，所述大孔吸附树脂选自HPD-750、AB-8、ADS-7、LX-60或LX-T28中的一种或多种；
优选地，所述水的用量为2～3BV；
优选地，所述第一醇溶液为体积分数为25～45％的乙醇溶液；
更优选地，所述第一醇溶液的用量为7～15BV。
8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤S4包括：
将所述洗脱液进行第一干燥后洗涤、结晶，热溶后趁热过滤得第一莱鲍迪苷A；
回收滤液，加入纯度为98％的莱鲍迪苷A诱导结晶，离心甩滤洗涤，与趁热过滤得到的莱鲍迪苷A产品混合，得到所述高纯莱鲍迪苷A；或
将所述洗脱液进行第一干燥后洗涤、结晶，热溶后趁热过滤得第一莱鲍迪苷A；
回收滤液，降温至4℃静置8～16h结晶，离心甩滤洗涤，与趁热过滤得到的莱鲍迪苷A产品混合，得到所述高纯莱鲍迪苷A。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述洗涤采用第二醇溶液，优选地，所述第二醇溶液为体积分数90～99％的甲醇溶液或乙醇溶液；
优选地，结晶过程中的固液比为1:(3～9)。
10.一种高纯莱鲍迪苷A，其特征在于，所述高纯莱鲍迪苷A按照权利要求1至9中任一项所述的方法制备得到；
优选地，所述高纯莱鲍迪苷A的纯度为95％以上。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310825232.XA CN117285580A (zh) | 2023-07-06 | 2023-07-06 | 一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷a的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310825232.XA CN117285580A (zh) | 2023-07-06 | 2023-07-06 | 一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷a的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117285580A true CN117285580A (zh) | 2023-12-26 |
Family
ID=89252470
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310825232.XA Pending CN117285580A (zh) | 2023-07-06 | 2023-07-06 | 一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷a的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117285580A (zh) |
-
2023
- 2023-07-06 CN CN202310825232.XA patent/CN117285580A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2124633B1 (en) | Method of producing purified rebaudioside a compositions using solvent/antisolvent crystallization | |
| CN101662955B (zh) | 使用溶剂/抗溶剂结晶法制备提纯的莱苞迪甙a组合物的方法 | |
| CN101200480A (zh) | 莱鲍迪甙a及其提取方法 | |
| CN101407535B (zh) | 一种高纯度罗汉果甜甙v的制备方法 | |
| EP2672839B1 (en) | Method of making an enhanced natural sweetener | |
| EP2594574B1 (en) | Method for purifying rebaudioside C | |
| JP6768970B2 (ja) | ルブソシドの調製方法 | |
| CN107118243B (zh) | 一种甜菊糖的工业制备方法 | |
| CN110917240B (zh) | 一种从青钱柳中分离多种有效成分的连续化方法 | |
| CN102485736A (zh) | 一种常温下从甜菊糖中提取高纯度莱鲍迪苷a的方法 | |
| CN117285580A (zh) | 一种从甜菊叶中分离制备高纯莱鲍迪苷a的方法 | |
| CN113429444B (zh) | 一种从甜叶菊母液糖中分离纯化甜茶苷的方法 | |
| CN112047986B (zh) | 一种甜菊糖苷的制备方法 | |
| CN110105411B (zh) | 一种银锻苷的制备方法 | |
| CN113461746A (zh) | 高纯度甜菊糖苷ra的精制方法 | |
| CN112110962A (zh) | 一种从含有甜菊糖苷的来源中分离和纯化斯替维苷的方法 | |
| CN110615819B (zh) | 一种快速提取甜茶苷的方法 | |
| CN117683069A (zh) | 从甜叶菊母液中获得莱鲍迪苷f和莱鲍迪苷u的制备方法 | |
| CN116410250A (zh) | 一种高纯度绿色化甜菊糖苷a的生产工艺 | |
| CN117586326A (zh) | 一种利用甜叶菊母液糖制备莱鲍迪苷b的工艺方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |