CN117089588A - 一种红枣低聚糖冻干粉及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种红枣低聚糖冻干粉及其制备方法与应用。所述红枣低聚糖冻干粉的成分组成如下：相对分子质量为600～1500的低聚糖的质量含量不低于20％；总糖的质量含量不低于60％；包括低聚糖在内的总多糖的质量含量不低于35％；发酵冻干粉可调节肠道菌群并发挥免疫强化作用。所述红枣低聚糖冻干粉的制备方法包括如下步骤：向红枣干粉的水分散液中加入果酒酵母菌剂进行发酵，发酵结束后经固液分离得到发酵固渣和第一次发酵清液；将发酵固渣充分分散在水中并加入多糖水解酶进行酶解；在酶解后的浆液中加入果酒酵母菌剂再次进行发酵，经固液分离得到第二次发酵清液；将两次发酵清液合并，经超滤和减压浓缩得到浓缩液，浓缩液经真空冷冻干燥即得。

Description

一种红枣低聚糖冻干粉及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种红枣低聚糖冻干粉及其制备方法与应用，属于功能食品技术领域。
背景技术
红枣是中国传统“药食同源”的典型代表。传统中医确证红枣具有补脾益气、养心安神等功效，现代医学和药理学研究也证实，红枣具有抗炎、抗衰老、抗氧化、提升免疫力等多种药理作用。红枣中的多糖类成分被认为是红枣的重要生物活性物质，特别是其中的低聚糖。低聚糖是由2～10个单糖结合而成的小分子糖，易被肠道微生物利用，产生短链脂肪酸等有益代谢产物，进一步可发挥免疫调节等多种重要作用。红枣的总糖含量非常高，一般可达到55～80％，但多为还原性糖，而其中的多糖含量较少(一般在10％以下)，低聚糖含量更低至5％以下。制备富含红枣低聚糖，而还原性糖含量较低的红枣低聚糖制品，是强化红枣生物医学效果，满足更多人群需要，提升红枣加工品质量和技术含量的重要途径。
目前红枣低聚糖的制备主要采用水提、酶解和分离过程。通常通过水提的方法提取大枣中的低聚糖，并通过酶解等方式提高提取率。例如中国专利申请CN108719867A报道了一种富含低聚糖的大枣制品及其制备方法，采用水提法提取的大枣中的低聚糖，通过加入超强固体酸超声、果胶酶解的方法提高提取率；中国专利申请CN108013398A公开了加入果胶酶水解的提取方法。其中水提取过程温度通常较高，一般在50℃以上，大部分的水提温度达到了70℃～90℃，提取时间通常在1h～3h，有些报道的提取时间达到5h以上。较长时间的热水提取及酶解，使得一些活性成分损失。
由于红枣中的还原糖含量较高，且还原性糖更容易溶解在水中，水提的过程中这些还原糖也被提取如水中。因而，后续还需通过醇沉、膜分离、色谱分离等方式，分离和除去还原糖。例如，中国专利申请CN106367448A公开了水提醇沉的方法提取分离大枣中的低聚糖；中国专利申请CN101278724公开了一种水提后用超滤和纳滤分级分离，或者超滤后使用色谱分离得到低聚糖的工艺；中国专利申请CN108719867A中采用醇沉、超滤和纳滤分级膜分离的方式分离低聚糖；中国专利申请CN101337995公开了采用热水浸提后，通过超滤以及凝胶色谱分离得到低聚糖的方法。而大枣中含有的低聚糖以三糖～五糖为主，分子量(大分部在500～1200之间)等性质与还原性糖接近，这就导致膜分离、凝胶色谱分离等分离方法的选择性不高，造成低聚糖不可避免的损失。总体上，现有技术的工艺路线长，低聚糖的收率低，且低聚糖的纯度仍然不高。因此需要提供一种具有高低聚糖收率的红枣干粉的制备方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种调节肠道菌群并发挥免疫强化作用的红枣低聚糖冻干粉，通过特定的发酵和酶解工艺条件制备得到，易被肠道微生物吸收和利用，可调节肠道微生物，增加肠道微生物的短链脂肪酸代谢，从而进一步发挥免疫强化作用。
本发明所提供的红枣低聚糖冻干粉，主要成分为红枣低聚糖和水溶性多糖；
具体成分组成如下：
相对分子质量为600～1500的低聚糖的质量含量不低于20％；总糖的质量含量不低于60％；包含所述低聚糖在内的总多糖的质量含量不低于35％。
所述红枣低聚糖冻干粉，其制备方法包括如下步骤：
S1、向红枣干粉的水分散液中加入果酒酵母菌剂进行发酵，发酵结束后经固液分离得到发酵固渣和第一次发酵清液；
S2、向所述发酵固渣的水分散液中加入多糖水解酶进行酶解；
S3、向所述酶解后的浆液中加入所述果酒酵母菌剂再次进行发酵，经固液分离得到第二次发酵清液；
S4、将所述第一次发酵清液和所述第二次发酵清液合并，依次经超滤和减压浓缩得到浓缩液，所述浓缩液经真空冷冻干燥得到所述红枣低聚糖冻干粉。
其中，所述红枣干粉的粒度小于70目，通过干燥、去核、切片、低温粉碎得到；
优选地，步骤S1中，所述水分散液中枣粉(以干质量计)与水的质量之比为1:4～10，优选为1:5～8，将所述红枣干粉加入水中后保持温度30～40℃下搅拌0.5～1h；
所述果酒酵母菌剂的接种量为所述红枣干粉中总糖含量的2～10％，优选为4～9％；
所述发酵的条件如下：
温度为20～40℃，时间为3～8h，优选4～8h，更优选6h，发酵的终点时发酵液pH控制为3.0～3.5。
优选地，步骤S1中，所述发酵过程中，按照每分钟通气量与发酵罐内料液体积比为0.3～0.6min-1的通气量通入空气。
优选地，步骤S2中，所述水分散液中，所述发酵固渣与水的质量比为1:4～8；
所述多糖水解酶为果胶酶和/或纤维素酶；
所述酶解的体系中，所述多糖水解酶的质量浓度为20～100mg/L；
所述酶解的条件如下：
温度为30～40℃，时间为30～60min。
优选地，步骤S3中，所述果酒酵母菌剂的接种量为所述发酵固渣中总糖量的3～10％，优选为6～10％；
所述发酵的时间为2～6h，优选4～5h，更优选4h，按照每分钟通气量与发酵罐内料液体积比为0.1～0.3min-1的通气量通入空气。
优选地，步骤S4中，所述超滤采用的超滤膜的截流分子量为20000～60000，用以除去其中的蛋白质等大分子和小颗粒；
所述浓缩液中总溶质含量为15％～30％，减压浓缩的温度不高于45℃；
所述红枣低聚糖冻干粉的含水量不高于5％。
本发明红枣低聚糖冻干粉在制备下述1)-3)中任一种产品中的应用也属于本发明的保护范围：
1)改善肠道菌群的产品；
2)强化免疫的产品；
3)强化肿瘤免疫治疗效果的产品。
本发明利用发酵和酶解结合制备红枣低聚糖冻干粉的方法，以提高低聚糖的提取率、收率以及产品纯度，同时降低红枣制品中还原糖的含量。本发明发酵冻干粉可调节肠道菌群并发挥免疫强化作用。
附图说明
图1为本发明红枣发酵冻干粉的制备工艺流程。
图2为本发明实施例1制备的红枣发酵冻干粉中低聚糖的分子量分布。
图3为本发明实施例5中小鼠肠道微生物的变化。
图4为本发明实施例5中小鼠肠道内容物中短链脂肪酸的含量。
图5为本发明实施例6中小鼠接种流感疫苗后的特异性抗体IgG水平。
图6为本发明实施例7中免疫抑制模型小鼠的外周血和脾脏免疫细胞比例。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、采用新疆灰枣为原料制备发酵冻干粉
制备流程如图1所示。
上述红枣800g(按干物质计算)脱核，去皮，切片后，在低温超细粉碎机中粉碎得到100目以下的枣粉495g。测定枣粉的主要成分含量如表1所示。
上述495g枣粉加入5L发酵罐中，加入纯水3.1L，在温度30℃下搅拌1h。而后加入安琪果酒酵母菌剂32g(1kg总糖：80g菌剂)，在温度30℃下发酵6h。发酵过程中按照每分钟通气量与发酵罐内料液体积比(vvm)0.4min-1的通气量通入空气，发酵终点pH为3.2。
发酵浆液采用离心分离菌剂和固渣，收集发酵清液(2.8L)。分离得到的固渣(其中干物质量为122g，总糖质量为63g)中加入0.8L水和果胶酶40mg(果胶酶的浓度为50mg/L)，在40℃下搅拌酶解60min。酶解浆液中再加入6g安琪果酒酵母菌剂(1kg总糖：95g菌剂)，而后在30℃下发酵4h，通气量vvm为0.2min-1，发酵浆液过滤除去菌体和不溶物，得到发酵清夜0.8L。
两次发酵清液合并后，经截流分子量为30000的超滤膜超滤，截留液在旋转蒸发器中，于真空度60kPa/温度40℃下蒸发浓缩，浓缩液溶质总含量为22％。浓缩液冷却至室温并进一步预冷到0℃，在真空冷冻干燥机中冷冻干燥，真空度80kPa，冷阱温度-30℃，冻干至水含量低于5％，得冻干粉(FP-2)163g(按干物质计)。
测定冻干粉组成如表1所示(表中低聚糖即指分子量600～1500的低聚糖，总多糖即指包含低聚糖在内的总多糖，下同)，冻干粉及其主要活性组分的收率如表2所示。表中总收率指得到的冻干粉与所投入的原料的枣粉干物质总质量之比；表中各组分的收率得到的冻干粉中该组分的质量与所投入的原料的枣粉所含该组分的质量之比。从表1数据可以看出，在本发明提出的工艺条件下，得到了发酵冻干粉中相对分子质量为600～1500的低聚糖的含量(本发明中“含量”如不特殊说明，均指质量分数)不低于20％；总糖含量不低于60％；总多糖(相对分子质量为600～1500的低聚糖)含量不低于35％。
作为对比，将第一次发酵的发酵清液按照上面的方式超滤/浓缩和冻干后，得冻干粉(FP-1)134g，测定冻干粉组成如表1所示。可见如果不采取本发明的第一次发酵固渣酶解并进行二次发酵的技术方案，低聚糖含量不能达到本发明的要求，且总冻干粉及多糖、低聚糖收率显著降低。
作为另一个对比，在第一次发酵前先进行酶解，酶解后进行发酵。在495g枣粉中加入纯水3.1L，而后加入果胶酶155mg(果胶酶的浓度为50mg/L)，在40℃下搅拌酶解60min。而后将上述物料整体转入5L发酵罐，按照前述第1次发酵的工艺进行发酵6h，而后过滤除去菌体和不溶物，得到发酵清夜2.9L，发酵经截流分子量为30000的超滤膜超滤，截留液在旋转蒸发器中，于真空度60kPa/温度40℃下蒸发浓缩至溶质总含量为22％。浓缩液冷却至室温并进一步预冷到0℃，在真空冷冻干燥机中冷冻干燥，真空度80kPa，冷阱温度-30℃，冻干至水含量低于5％，得冻干粉(FP-3)142g(按干物质计)，冻干粉组成如表1所示，各组分的收率如表2所示。可见低聚糖和总多糖含量不能达到本发明的要求，且总冻干粉及多糖、低聚糖收率显著降低。
从表1和表2的数据对比可以看出，通过酶解和二次发酵，可以提高冻干粉收率和低聚糖收率(见表2)。
表1新疆灰枣干粉及冻干粉的主要成分(质量分数，％)
表2冻干粉及其主要活性组分的收率(质量分数，％)
*发酵和酶解过程产生新的低聚糖，因此低聚糖收率>100％。
本实施例制备的冻干粉中低聚糖的分子量分布如图2中Peak1所示，可以看出，Peak1组分的平均分子量为962，其中分子量在600～1500之内的低聚糖质量占比超过92％。
实施例2、采用不同发酵时间制备发酵冻干粉
原料及红枣微粉的制备同实施例1，除发酵时间外其他工艺条件同实施例1。其中第1次发酵的时间分别选择4h、6h和10h，第2次发酵时间分别选择2h、4h。得到冻干粉的组成以及收率如表3和表4所示。
从表3和表4的数据可以看出，过长的发酵时间会导致多糖和低聚糖的收率降低，而过短的发酵时间会保留较多的还原性糖，同时低聚糖的含量也偏低。
表3新疆灰枣发酵冻干粉的主要成分(质量分数，％)
表4新疆灰枣冻干粉及其主要活性组分的收率(质量分数，％)
*发酵和酶解过程产生新的低聚糖，因此低聚糖收率>100％
实施例3、采用不同发酵菌剂量制备发酵冻干粉
原料及红枣微粉的制备同实施例1，除两次发酵菌剂的接种量以及下文特殊说明的条件外，外其他工艺条件同实施例1。
取实施例1中的枣粉200g，第1次发酵的菌剂的加入量为所含总糖量2％、8％和12％，发酵后固渣量依次为46g、48g和41g(以干物质量计)。上述固渣均加入0.32L水和16mg果胶酶(果胶酶的浓度均为50mg/L)进行酶解，而后按照第1次发酵固渣所含总糖量的9.5％加入菌剂，并按实施例1中的条件进行第2次发酵，得到冻干粉的组成以及收率如表5和6所示。
取实施例1中的枣粉200g，按实施例1中第1次发酵工艺和酶解工艺条件进行发酵和酶解，而后按照第1次发酵固渣所含总糖量的2％和15％加入菌剂进行发酵，得到的冻干粉的组成以及收率列于表5和表6。
由表5和表6中数据可见，减小菌剂用量，将使还原糖含量增加，低聚糖的含量和收率减小。而过高的菌剂用量则会降解多糖和低聚糖，使多糖和低聚糖含量降低使总糖、多糖和低聚糖的收率均降低。
表5新疆灰枣发酵冻干粉的主要成分(质量分数，％)
表6新疆灰枣冻干粉及其主要活性组分的收率(质量分数，％)
*发酵和酶解过程产生新的低聚糖，因此低聚糖收率>100％
实施例4、采用金丝小枣为原料制备发酵冻干粉
上述红枣800g(按干物质计算)脱核，去皮，切片后，在低温超细粉碎机中粉碎得到70目以下的枣粉462g。测定枣粉的主要成分含量如表5所示。
上述462g枣粉加入5L发酵罐中，加入纯水3.0L，在温度30℃下搅拌1h。而后加入安琪果酒酵母菌剂20g(1kg总糖:60g菌剂)，在温度30℃下发酵8h，发酵终点pH为3.2。发酵浆液采用离心分离菌剂和固体，收集发酵清液(2.6L)。分离得到的固体(其中干物质量为102g)中加入0.7L水和果胶酶30g(果胶酶的浓度为43mg/L)，在40℃下酶解60min。酶解浆液中再加入5g菌剂(1kg总糖:80g菌剂)，而后在30℃下发酵4h，发酵浆液过滤除去菌体和不溶物，得到发酵清夜0.8L。两次发酵清液合并后，经截流分子量为30000的超滤膜超滤，截留液在旋转蒸发器中，于真空度60kPa/温度40℃下蒸发体浓缩至溶质总含量为24％。浓缩液冷却至室温并进一步预冷到0℃，在真空冷冻干燥机中冷冻干燥，真空度80kPa，冷阱温度-30℃，冻干至水含量低于4％，得冻干粉174g(按干物质计)。测定冻干粉组成及主要活性物质的收率如表7和表8所示。
从表7数据可以看出，在本发明提出的工艺条件下，得到了发酵冻干粉中相对分子质量为600～1500的低聚糖的含量不低于20％；总糖含量不低于60％；总多糖(包括相对分子质量为600～1500的低聚糖)的含量不低于35％。
表7金丝小枣干粉及冻干粉的主要成分(质量分数，％)
表8金丝小枣冻干粉及其主要活性组分的收率(质量分数，％)
*发酵和酶解过程产生新的低聚糖，因此低聚糖收率>100％
实施例5、采用本发明的红枣发酵冻干粉改善肠道菌群，强化免疫的效果
采用C57BL/6J雄性小鼠(6-7周，北京维通利华实验动物技术有限公司)。
实验设对照组(CTR)、枣粉对照组(P，饲食红枣粉后注射疫苗)以及发酵冻干粉组(FP-1，FP-2，饲食本发明发酵冻干粉)，每组8只小鼠(n＝8)。枣粉对照组饲食的红枣粉为实施例1中经第1步骤粉碎得到枣粉(组成见表1)。发酵冻干粉为实施例1中制备得到两种冻干粉(FP-1，FP-2组成见表1)。枣粉对照组和发酵冻干粉组均每天分别服用枣粉和冻干粉，剂量均为800mg/kg体重，持续时间1周。第8天收集小鼠的粪便进行16S rRNA测序。收集小鼠盲肠及结肠内容物，分析其中短链脂肪酸(SCFAs)含量。16S rRNA测序及生物信息学分析：采用QIAamp粪便核酸提取试剂盒(Qiagen，德国)提取DNA，而后按照标准方法进行粪便DNA进行测序。使用FASTP工具去除低质量DNA序列，使用UPARSE对高质量序列按照97％相似性进行OTU聚类。肠道菌群α多样性(香农指数)变化，门水平上微生物的变化，以及两种显著变化的有益菌：普雷沃氏菌(Prevolella)和双歧杆菌(Bifidobacteria)相对丰度的变化见图3。
短链脂肪酸含量测定：0.1g小鼠盲肠及结肠内容物加入0.4mL去离子水和0.1mL体积分数为50％的H2SO4涡旋混合，而后离心得道上清液，上清液用等体积乙醚萃取。萃取后取上层有机相，以气相色谱测定短链脂肪酸含量，结果见图4。
由图3和图4可以看出，食用本发明制备的红枣冻干粉，肠道微生物的多样性指标和短链脂肪酸含量，均显著高于对照和枣粉对照组(P<0.05)，而且通过二次发酵得到的冻干粉FP-2，提升短链脂肪酸含量的作用更显著。
实施例6、采用本发明的发酵冻干粉强化免疫，提升流感疫苗的抗体反应
采用C57BL/6J雄性小鼠(6-7周，北京维通利华实验动物技术有限公司)。
实验设疫苗对照组(TIV，仅注射疫苗)、枣粉对照组(TIV+P，饲食红枣粉后注射疫苗)以及发酵冻干粉组(TIV+FP-2饲食本发明发酵冻干粉后注射疫苗)，每组8只小鼠(n＝8)。枣粉对照组饲食的红枣粉为实施例1中经第1步骤粉碎得到枣粉(组成见表1)。发酵冻干粉为实施例1中制备得到冻干粉(FP-2，组成见表1)。
枣粉对照组和发酵冻干粉组在注射疫苗前1周每天分别服用枣粉和冻干粉，剂量均为600mg/kg体重。在第8天，对除空白对照组外其他三组小鼠，均肌内注射流感疫苗(三价流感病毒裂解疫苗，北京科兴生物制品有限公司)0.1mL。对照组注射同样体积的生理盐水。在注射疫苗后第7天、14天、28天、35天以及42天通过眶后窦穿刺取血(30μL)，采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中流感病毒特异性抗体IgG1，采用小鼠抗流感病毒特异性IgG抗体ELISA试剂盒(武汉艾迪抗生物科技有限公司)，检测450nm的吸光度，结果如图5所示。
由图5可以看出，采用本发明的红枣发酵冻干粉，可显著提高疫苗的特异抗体IgG1的峰值水平以及高浓度抗体的持续时间。
实施例7、采用本发明的发酵冻干粉提高免疫抑制小鼠的免疫水平
采用环磷酰胺诱导小鼠免疫抑制模型，腹腔注射环磷酰胺，剂量为80mg/kg体重，持续3天。
实验设正常对照组(不注射环磷酰胺，注射等体积的生理盐水)，免疫抑制组(模型对照组)，枣粉对照组以及发酵冻干粉组。每组均为6只小鼠。枣粉对照组饲食的红枣粉为实施例3中经第1步骤粉碎得到枣粉(组成见表5)。发酵冻干粉为实施例3中制备得到冻干粉(组成见表6)。
枣粉对照组和发酵冻干粉组在注射环磷酰胺后第1天开始每天分别服用枣粉和冻干粉一次，剂量均为800mg/kg体重，连续服用14天。正常对照组、模型对照组灌胃等体积的无菌蒸馏水。灌胃结束后将小鼠禁食12h，记录其体重。使用眼眶动脉取血法每只小鼠取1mL外周血，使用动物血液体液分析仪对外周血进行血常规检测。使用流式细胞法检测血液中白细胞以及CD4+T细胞与CD8+T细胞在白细胞(CD45+细胞)中的比例，使用FlowJo10.6.2进行流式数据分析。随后用颈椎脱臼法处死小鼠，取出小鼠粪便，对小鼠解剖取出盲肠内容物、脾脏。按照实施例4中方法测定盲肠内容物短链脂肪酸含量(结果见表7)。脾脏组织用剪刀取下0.1～0.2g后转移进70μm细胞滤网获得单细胞悬液，加入3倍体积的红细胞裂解液在冰浴上裂解，裂解结束后离心得到单细胞并用PBS清洗两遍，而后采用流式细胞法检测脾脏中CD45+细胞、CD4+T细胞与CD8+T细胞比例，结果见图6。
由表7和图6可以看出，免疫抑制小鼠的丁酸盐的代谢水平降低，免疫细胞数量显著降低。使用本发明的红枣冻干粉后，丁酸盐的代谢水平得到恢复，外周血和脾脏中白细胞数量均得到恢复，CD8+T细胞和CD4+T细胞的比例提高，且效果显著优于红枣粉。
表7小鼠盲肠内容物短链脂肪酸含量
正常对照组 模型对照组 枣粉对照组 发酵冻干粉组
总短链脂肪mg/g 3.1±0.4 2.5±0.6 3.6±0.5 5.1±0.5
丁酸mg/g 1.4±0.3 0.9±0.3 1.7±0.3 2.8±0.4

Claims (9)

1.一种红枣低聚糖冻干粉，其成分组成如下：
相对分子质量为600～1500的低聚糖的质量含量不低于20％；总糖的质量含量不低于60％；包括所述低聚糖在内的总多糖的质量含量不低于35％；
所述红枣低聚糖冻干粉的制备方法包括如下步骤：
S1、向红枣干粉的水分散液中加入果酒酵母菌剂进行发酵，发酵结束后经固液分离得到发酵固渣和第一次发酵清液；
S2、向所述发酵固渣的水分散液中加入多糖水解酶进行酶解；
S3、向所述酶解后的浆液中加入所述果酒酵母菌剂再次进行发酵，经固液分离得到第二次发酵清液；
S4、将所述第一次发酵清液和所述第二次发酵清液合并，依次经超滤和减压浓缩得到浓缩液，所述浓缩液经真空冷冻干燥得到所述红枣低聚糖冻干粉。
2.权利要求1所述红枣低聚糖冻干粉的制备方法，包括如下步骤：
S1、向红枣干粉的水分散液中加入果酒酵母菌剂进行发酵，发酵结束后经固液分离得到发酵固渣和第一次发酵清液；
S2、向所述发酵固渣的水分散液中加入多糖水解酶进行酶解；
S3、向所述酶解后的浆液中加入所述果酒酵母菌剂再次进行发酵，经固液分离得到第二次发酵清液；
S4、将所述第一次发酵清液和所述第二次发酵清液合并，依次经超滤和减压浓缩得到浓缩液，所述浓缩液经真空冷冻干燥得到所述红枣低聚糖冻干粉。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述红枣干粉的粒度小于70目；
步骤S1中，所述水分散液中以干质量计的枣粉与水的质量之比为1：4～10；
所述果酒酵母菌剂的接种量为所述红枣干粉中总糖含量的2～10％；
所述发酵的条件如下：
温度为20～40℃，时间为3～10h，发酵的终点时发酵液pH控制为3.0～3.5。
4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于：步骤S1中，所述发酵过程中，按照每分钟通气量与发酵罐内料液体积比为0.3～0.6min-1的通气量通入空气。
5.根据权利要求2-4中任一项所述的制备方法，其特征在于：步骤S2中，所述水分散液中，所述发酵固渣与水的质量比为1：4～8；
所述多糖水解酶为果胶酶和/或纤维素酶；
所述酶解的体系中，所述多糖水解酶的质量浓度为20～100mg/L；
所述酶解的条件如下：
温度为30～40℃，时间为30～60min。
6.根据权利要求2-5中任一项所述的制备方法，其特征在于：步骤S3中，所述果酒酵母菌剂的接种量为所述发酵固渣中总糖量的3～10％；
所述发酵的时间为2～6h，按照每分钟通气量与发酵罐内料液体积比为0.1～0.3min-1的通气量通入空气。
7.根据权利要求2-5中任一项所述的制备方法，其特征在于：步骤S4中，所述超滤采用的超滤膜的截流分子量为20000～60000；
所述浓缩液中总溶质含量为15％～30％；
所述红枣低聚糖冻干粉的含水量不高于5％。
8.权利要求1所述红枣低聚糖冻干粉在制备下述1)-3)中任一种产品中的应用：
1)改善肠道菌群的产品；
2)强化免疫的产品；
3)强化肿瘤免疫治疗效果的产品。
9.一种具有如下1)-3)中任一功能的产品，包括权利要求1所述红枣低聚糖冻干粉：
1)改善肠道菌群；
2)强化免疫；
3)强化肿瘤免疫治疗效果。
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