CN117074696A - 一种非小细胞肺癌标志物及其应用 - Google Patents
一种非小细胞肺癌标志物及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117074696A CN117074696A CN202311094277.0A CN202311094277A CN117074696A CN 117074696 A CN117074696 A CN 117074696A CN 202311094277 A CN202311094277 A CN 202311094277A CN 117074696 A CN117074696 A CN 117074696A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lung cancer
- small cell
- cell lung
- plod
- kit
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 title claims abstract description 122
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 title claims abstract description 122
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 49
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 14
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 14
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 claims description 12
- 238000000576 coating method Methods 0.000 claims description 12
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 12
- 102100035198 Procollagen-lysine,2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2 Human genes 0.000 claims description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 9
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 9
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 claims description 9
- 101000595907 Homo sapiens Procollagen-lysine,2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2 Proteins 0.000 claims description 8
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 8
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims description 7
- 239000012916 chromogenic reagent Substances 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 22
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 abstract description 20
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 abstract description 12
- 239000003550 marker Substances 0.000 abstract description 10
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 abstract description 9
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 27
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 27
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 27
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 22
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 22
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 17
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 17
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 108010036226 antigen CYFRA21.1 Proteins 0.000 description 14
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 14
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 10
- 206010056342 Pulmonary mass Diseases 0.000 description 9
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 9
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 9
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 3
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000013211 curve analysis Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 2
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000011338 personalized therapy Methods 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000007433 Lymphatic Metastasis Diseases 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 101710114875 Procollagen-lysine,2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 201000008395 adenosquamous carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000546 chi-square test Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 230000002962 histologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000011337 individualized treatment Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 101150044508 key gene Proteins 0.000 description 1
- 208000003849 large cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 208000010979 non-small cell squamous lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011369 optimal treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 239000013062 quality control Sample Substances 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57423—Specifically defined cancers of lung
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
- G01N33/57488—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites involving compounds identifable in body fluids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/581—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with enzyme label (including co-enzymes, co-factors, enzyme inhibitors or substrates)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明属于生物医学检测技术领域,本发明公开了一种非小细胞肺癌标志物及试剂盒,所述非小细胞肺癌标志物为抗‑PLOD2自身抗体。本发明还提供了上述非小细胞肺癌标志物在制备用于非小细胞肺癌检测试剂盒中的应用。本发明提供一种操作简单、成本低、准确性高、无创伤的应用于临床的非小细胞肺癌检测的血浆生物标志物。本发明应用ELISA方法进行血浆抗‑PLOD2自身抗体的检测,可以较准确地将非小细胞肺癌患者和正常人,以及良性肺部结节患者鉴别开来,并可以用于非小细胞肺癌的早期检测。在此背景下提供此方便、快捷、有效的检测非小细胞肺癌患者的标志物及该标志物在制备用于非小细胞肺癌检测的试剂盒,可用于临床的非小细胞肺癌的早期筛查与早期诊断。
Description
技术领域
本发明属于生物医学检测技术领域,具体涉及一种非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体及其应用。
背景技术
肺癌是癌症导致死亡的主要类型,其发病率位于所有癌症类型的第二位,死亡率高居首位,占所有癌症导致死亡人数的五分之一(18.0%)。非小细胞肺癌(Non-small CellLung Cancer,NSCLC)是肺癌的主要亚型,占肺癌的85%。肺癌起病隐匿、早期无明显临床症状且病程发展快,通常确诊时已为中晚期从而错过最佳治疗时机,严重影响其治疗效果。低剂量计算机断层扫描技术(Low-dose Computed Tomography,LDCT)作为早期肺癌检测和筛查的工具能够有效降低肺癌死亡率,但由于其假阳性率高,大量肺部结节的良恶性鉴别及临床管理成为新的难题。
相较于影像学检查,血液肿瘤标志物具有易于获取、创伤小和方便检测等优点。在肿瘤发生时,肿瘤相关抗原(Tumor-associated antigen,TAA)表达升高会刺激机体产生肿瘤相关抗原自身抗体(Tumor-associated autoantibodies against TAAs,TAAbs)。TAAbs在血液中出现的较早,具备早期检测、稳定存在和动态监测等优点,是早期肺癌筛查和鉴别良恶性肺结节的良好血液标志物。但目前临床上尚无有效的肺癌早期诊断血液标志物,因而有待于寻找新的具有较好诊断价值的肺癌血液标志物。
当前技术在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断和检测方面存在以下缺陷和问题:
1)假阳性率高:虽然低剂量计算机断层扫描技术(LDCT)在早期肺癌检测和筛查中能有效降低肺癌死亡率,但其假阳性率较高,导致大量肺部结节的良恶性鉴别及临床管理面临新的挑战。
2)缺乏有效的血液标志物:虽然血液肿瘤标志物具有易于获取、创伤小和方便检测等优点,但目前临床上尚无有效的肺癌早期诊断血液标志物。因此,仍需寻找新的具有较好诊断价值的肺癌血液标志物。
3)抗-PLOD2自身抗体研究不足:尽管PLOD2在癌细胞的侵袭和迁移中发挥关键作用,但关于抗-PLOD2自身抗体的研究尚未见报道。这限制了其在肺癌早期诊断和筛查中的应用。
4)缺乏简便、低成本的检测方法:当前技术尚未开发出操作简单、成本低、适用范围广泛的非小细胞肺癌自身抗体检测方法。这限制了这些技术在临床和大规模筛查中的广泛应用。
为了解决这些问题,研究者们需要不断探索新的血液标志物,针对已知和未知抗体开展深入研究,以期找到具有高敏感性和特异性的血浆学自身抗体标志物。此外,还需要开发简便、低成本、适用范围广泛的非小细胞肺癌自身抗体检测方法,以便在临床实践中降低肺癌死亡率,提高生存率。
发明内容
本发明的目的在于克服非小细胞肺癌现有肿瘤标志物不理想的问题,旨在提供抗-PLOD2自身抗体的新用途,在于对非小细胞肺癌进行早期筛查与早期诊断。利用一种特异性高、敏感度强的诊断标志物制备稳定性好、检测方便的用于非小细胞肺癌早期筛查与早期诊断的试剂盒。
本发明具体提供一种非小细胞肺癌血浆标志物,具体涉及一种能区分非小细胞肺癌和正常人以及良性肺部结节患者的抗-PLOD2(Procollagen-lysine,2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2)自身抗体。这是蛋白的氨基酸序列KGFALLN FVVKYSPERQ RSLRPHHDASTFTINIALNN VGEDFQGGGC K FLRYNCSIE SPRKGWSFMH PGRLTHLHEG LPVKNGTRYI AVSFIDP。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
第一方面,本发明提供了一种非小细胞肺癌标记物,所述非小细胞肺癌标志物为抗-PLOD2自身抗体。
第二方面,本发明提供了第一方面所述的抗-PLOD2自身抗体在制备用于非小细胞肺癌血浆学检测的试剂或试剂盒中的应用。
优选的,所述试剂盒是基于酶联免疫吸附试验(ELISA)的检测体系。
优选的,所述试剂或试剂盒含有检测抗-PLOD2自身抗体的PLOD2重组纯化蛋白。
优选的,所述试剂盒还含有ELISA包被缓冲液(20×)、HRP标记的羊抗人IgG二抗、封闭缓冲液(BSA)、抗体稀释液、TMB显色试剂、PBST(吐温20-磷酸盐缓冲液)、终止液。
第三方面,本发明提供了第一方面所述的非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体与传统肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1相比在制备用于非小细胞肺癌评价试剂盒中的应用。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
本发明提供了一种操作简单、成本低、准确性高、无创伤的应用于临床的非小细胞肺癌检测的血浆生物标志物。本发明应用ELISA方法进行血浆抗-PLOD2自身抗体的检测,可以较准确地将非小细胞肺癌患者和正常人,以及良性肺部结节患者鉴别开来,并可以用于非小细胞肺癌的早期筛查与早期检测。在此背景下提供此方便、快捷、有效的检测非小细胞肺癌患者的标志物及该标志物在制备用于非小细胞肺癌检测的试剂盒,可用于临床的非小细胞肺癌早期筛查与早期诊断。
本发明针对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断和检测提供了一种新型血浆生物标志物,即抗-PLOD2自身抗体。本发明具有以下优点和积极效果:
1)提高诊断准确性:通过使用抗-PLOD2自身抗体作为非小细胞肺癌标志物,本发明能够较为准确地将非小细胞肺癌患者、正常人和良性肺部结节患者鉴别开来,从而提高诊断准确性。
2)早期检测:本发明应用ELISA方法进行血浆抗-PLOD2自身抗体的检测,该方法具有较高的敏感性和特异性,可用于非小细胞肺癌的早期检测,有助于及时发现肺癌并进行治疗。
3)无创伤性:本发明利用血浆生物标志物进行非小细胞肺癌检测,相较于影像学检查,血液检测具有无创伤性、易于获取和方便检测的优点。
4)操作简单和低成本:本发明提供了一种在制备用于非小细胞肺癌检测试剂盒中的应用,操作简便,成本较低,有助于实现广泛应用。
5)临床应用:本发明提供的非小细胞肺癌血浆生物标志物可以广泛应用于临床检测,为医生提供更为准确和及时的诊断信息,助力患者获得更好的治疗效果。
本发明具体应用包括以下三方面:
筛查和诊断:利用抗-PLOD2自身抗体进行非小细胞肺癌的筛查和诊断,有助于早期发现肺癌并进行治疗。
病程监测:在治疗过程中,可通过检测血浆抗-PLOD2自身抗体水平来评估病情进展和治疗效果。
高危人群筛查:对高危人群进行定期抗-PLOD2自身抗体水平检测,提高肺癌早期发现的机会。
综上,本发明提供了一种具有操作简单、成本低、准确性高、无创伤性的非小细胞肺癌血浆生物标志物,具有广泛的临床应用前景。
附图说明
图1为抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌与正常对照以及在非小细胞肺癌患者不同临床特征中的表达图,其中图A为抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌与正常对照中的表达图,图B为非小细胞肺癌患者与正常对照的ROC曲线图,图C为抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌患者不同临床特征中的表达图;
图2为非小细胞肺癌患者和正常人血浆中抗-PLOD2自身抗体表达的验证图,其中图A为验证组中非小细胞肺癌患者和正常对照中抗-PLOD2自身抗体的表达图,图B为抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌患者与正常对照样本的ROC曲线图,图C为非小细胞肺癌的亚型肺腺癌和肺鳞癌患者与正常对照中抗-PLOD2自身抗体的表达图;
图3为小提琴图和ROC曲线分析抗-PLOD2自身抗体对非小细胞肺癌不同临床特征与正常对照间的表达水平和诊断效能图,其中图A为非小细胞肺癌不同临床特征的小提琴图,图B~K为抗-PLOD2自身抗体对非小细胞肺癌不同临床特征与正常对照间的表达水平和诊断效能图;
图4为非小细胞肺癌和良性肺部结节患者血浆中抗-PLOD2自身抗体表达的验证图,其中图A为验证组中非小细胞肺癌和良性肺部结节患者中抗-PLOD2自身抗体的表达图,图B为抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌与良性肺部结节患者的ROC曲线图,图C为非小细胞肺癌的亚型肺腺癌和肺鳞癌患者与良性肺部结节患者中抗-PLOD2自身抗体的表达图;
图5为小提琴图和ROC曲线分析抗-PLOD2自身抗体对非小细胞肺癌不同临床特征与良性肺部结节患者间的表达水平和诊断效能图,其中图A为非小细胞肺癌不同临床特征的小提琴图,图B~K为抗-PLOD2自身抗体对非小细胞肺癌不同临床特征与良性肺部结节患者间的表达水平和诊断效能图;
图6为肺部结节直径≤1cm与介于1~3cm患者的ROC曲线分析图,其中图A为肺部结节直径≤1cm患者的ROC曲线图,图B为肺部结节直径介于1~3cm患者的ROC曲线图;
图7为抗-PLOD2自身抗体与临床传统肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1的ROC曲线图,其中图A为含有CEA信息的样本中抗PLOD2自身抗体和CEA的ROC曲线图,图B为含有CYFRA21-1信息的样本中抗PLOD2自身抗体和CEA的ROC曲线图。
具体实施方式
本发明实施例筛选出的候选TAA——PLOD2(前胶原赖氨酸,2-氧戊二酸5-双加氧酶-2,Procollagen-lysine,2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2,PLOD2)是介导胶原交联形成的关键基因,分泌的胶原蛋白能为细胞外基质的组装提供支架,从而导致癌细胞的侵袭和迁移。但有关抗-PLOD2自身抗体的研究尚未见报道。
为了最终实现降低肺癌的死亡率,提高生存率,本领域迫切需要筛选和鉴定更加敏感、特异血浆学自身抗体标志物,并开发操作简单、成本低、适用范围广泛的检测非小细胞肺癌自身抗体的试剂盒。
本发明应用ELISA方法检测非小细胞肺癌患者血浆中抗PLOD2自身抗体水平。
1)初步检测抗-PLOD2自身抗体是否存在于患者血浆内,应用间接ELISA检测方法,对91例非小细胞肺癌患者血浆,91例正常对照血浆进行抗-PLOD2自身抗体水平的检测,其步骤包括:用抗原稀释液将PLOD2蛋白稀释至0.125ug/ml,包被96孔板,血浆样本1:100稀释,与抗原作用后,与辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体反应,最终加入TMB底物液进行显色。在酶标仪(450nm与620nm吸光度)下读取OD值,以反应血浆中抗-PLOD2自身抗体的水平。结果显示,抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌患者及亚型肺腺癌与肺鳞癌患者血浆中的表达水平高于正常对照的血浆,具有统计学意义(P<0.001,图1)。
2)进一步验证抗-PLOD2自身抗体对于非小细胞肺癌患者的早期筛查与早期诊断能力,本发明通过对非小细胞肺癌患者组、良性肺部结节组与正常对照组,进行ROC曲线分析,结果显示,抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌患者中的表达水平显著高于正常对照(P<0.001),非小细胞肺癌对正常对照的ROC曲线下面积为0.746(0.708-0.784)(图2),早期非小细胞肺癌对正常对照的曲线下面积为0.757(0.710-0.803)(图3),灵敏度和特异度分别为76.6%和67.6%;图4显示非小细胞肺癌对良性肺部结节患者的曲线下面积为0.726(0.687-0.766),早期非小细胞肺癌对良性肺部结节患者的曲线下面积为0.737(0.692-0.783),灵敏度和特异度分别为77.2%和70.4%(图5),尤其是针对肺部结节直径1~3cm的患者,曲线下面积为0.805(0.750-0.860),灵敏度和特异度分别为79.5%和77.9%(图6),另外,含有传统肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1样本的AUC(95%CI)分别为0.557(0.494-0.620)和0.587(0.518-0.656),抗PLOD2自身抗体的AUC(95%CI)分别为0.706(0.647-0.764)和0.708(0.644-0.772),具有更好的诊断价值(图7)。
结果表明,本发明提供的抗-PLOD2自身抗体可作为非小细胞肺癌的早期筛查与早期诊断生物标志物,本发明提供了所述抗-PLOD2自身抗体标志物的ELISA检测方法;本发明提供的抗-PLOD2自身抗体可用于非小细胞肺癌的早期筛查与早期诊断。
为了构建一种新型的试剂盒,首先需要确定其应用领域和目标。假设我们要构建一个用于检测非小细胞肺癌的新型试剂盒,基于抗-PLOD2自身抗体。以下是一个构建新型试剂盒的示例:
新型非小细胞肺癌检测试剂盒
1.试剂盒组成:
PLOD2重组纯化蛋白(用于检测抗-PLOD2自身抗体)
ELISA包被缓冲液
HRP标记的羊抗人IgG二抗
封闭缓冲液
抗体稀释液
TMB显色试剂
PBST
终止液
2.操作步骤:
1.使用ELISA包被缓冲液分别包被PLOD2重组纯化蛋白于微孔板上。
2.用PBST清洗微孔板。
3.向每个微孔中加入封闭缓冲液,静置以封闭未被抗原包被的部位。
4.将患者血浆样本稀释后,加入已包被并封闭的微孔中,进行孵育以使抗体与抗原结合。
5.用PBST清洗微孔板,以去除未结合的抗体。
6.向每个微孔中加入HRP标记的羊抗人IgG二抗,孵育以使二抗与特异性结合的抗体结合。
7.再次用PBST清洗微孔板,以去除未结合的二抗。
8.向每个微孔中加入TMB显色试剂,观察显色反应。
9.加入终止液,停止显色反应。
10.使用酶标仪读取各微孔的吸光值,以定量分析抗-PLOD2自身抗体。
通过以上步骤,本发明可以构建一种新型的非小细胞肺癌检测试剂盒。这种试剂盒不仅可以检测抗-PLOD2自身抗体,还可以同时检测其他相关的生物标志物,从而提高诊断的准确性和可靠性。
作为本发明实施例一个优化方案,所述检测非小细胞肺癌的试剂盒方案如下:
新型非小细胞肺癌检测试剂盒
1.试剂盒组成:
PLOD2重组纯化蛋白(用于检测抗-PLOD2自身抗体)
ELISA包被缓冲液
HRP标记的羊抗人IgG二抗
封闭缓冲液
抗体稀释液
TMB显色试剂
PBST
终止液
2.试剂配方:
1)ELISA包被缓冲液:1.5gNa2CO3、2.9g NaHCO3,加蒸馏水至1L;
2)PBS缓冲液(pH7.2):65.4g NaCl,0.5M磷酸盐缓冲液160mL,加蒸馏水至8L;
3)PBST:PBS缓冲液1L,加入0.5mLTween20,混匀;
4)封闭缓冲液:2g BSA(bovine serum albumin),加入100mL 1x PBST,混匀;
5)抗体稀释液:1g BSA,加入100mL 1x PBST,混匀;
6)TMB显色试剂:20mg TMB·2HCl,3.7g Na2HPO4·12H2O、0.92g柠檬酸、800μL0.75%H2O2,加蒸馏水至1L,1:1混匀;
7)终止液:20mL浓硫酸,加入200mL蒸馏水。
这种新型非小细胞肺癌检测试剂盒将更加方便实验操作,并有望实现更高的检测准确性和可靠性。
下面通过具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
1、标本收集
本研究纳入的1145例研究样本,其中包括412例NSCLC患者、321例BPN患者、412例NC。
(1)患者样本及信息收集流程
1)CT检测到肺部可疑结节并以此病因住院的患者,于首天或住院次日未接受任何治疗时采集患者的血液样本(部分肺癌患者收集治疗后血液样本),对其进行编号、分装和基本信息的登记后编入血液样本库中。
2)患者确诊后,通过研究对象的住院号、性别和年龄等信息,在医院患者管理系统中进行查阅和相关临床信息收集,包括NSCLC患者与BPN患者的吸烟史、饮酒史、结节直径、病理诊断、病理类型、传统肿瘤标志物(CEA、CYFRA211等的检测值与截断值)、肺癌患者的TNM分期、淋巴结转移和远端转移、免疫组化信息等信息,并构建患者临床信息库。
(2)NC样本及信息收集流程
收集于河南省某三甲医院体检人群,通过研究对象的体检号、性别和年龄等信息在医院患者管理系统中进行查阅和相关临床信息收集,收集其血液样本,进行编号、分装,并在血样数据信息库中登记后,编入血液样本库中。
(3)研究对象纳入标准和排除标准
NSCLC患者纳入标准包括:1)未接受化疗、放疗、手术和其他干预措施;2)有明确的组织病理学结果,根据原发性肺癌诊疗指南确诊为NSCLC,及病理组织学类型(包括腺癌、鳞癌、腺鳞癌、大细胞癌、肉瘤样癌和混合癌);3)无其他恶性肿瘤史;4)有完整病史;5)无自身免疫性疾病;6)均为新发病例;7)患者年龄>18岁。
BPN患者纳入标准包括:1)有明确的组织病理学活检确诊其良恶性,及病理组织学类型;2)无肺部及其他部位的恶性肿瘤史;3)均为新发病例,未经任何治疗;4)年龄>18岁。
NC纳入标准包括:1)无肺部及其他部位的恶性肿瘤史;2)无自身免疫性疾病;3)年龄>18岁。
排除标准:不符合上述纳入标准的研究对象。
所有血液样本均使用5mL真空采血管(含有EDTA-K2抗凝剂)采集,采集对象在空腹状态下于肘部血管处取3~4mL静脉血,并及时将采血管来回颠倒5~8次使血液与抗凝剂充分混匀。随后置于常温离心机内以3000r/min的速度离心5min,将上层血浆用一次性吸管吸出分装入1.5mL的Eppendorf管中,详细标记样本疾病类型及编号、采样日期、样本来源等信息后,将血浆样本立即置于-80℃超低温冰箱进行保存。使用时将所需样本提前置于4℃冰箱内解冻,避免反复冻融。
2.ELISA法检测抗-PLOD2自身抗体的血浆表达水平
2.1所需试剂:
1)包被液:1.5g Na2CO3、2.9gNaHCO3、加蒸馏水至1L。。
2)PBS缓冲液(pH7.2):65.4g NaCl,0.5M磷酸盐缓冲液160mL,加蒸馏水至8L。
3)PBST:PBS缓冲液1L,加入0.5mLTween20,混匀。
4)封闭液:2g BSA(bovine serum albumin),加入100mL 1x PBST,混匀。
5)血浆稀释液:1g BSA,加入100mL 1x PBST,混匀。
6)二抗稀释液:1g BSA,加入100mL 1x PBST,混匀。
7)TMB底物工作液:20mg TMB·2HCl,3.7g Na2HPO4·12H2O、0.92g柠檬酸、800μL0.75%H2O2,加蒸馏水,1:1混匀。
8)终止液:20mL浓硫酸,加入200mL蒸馏水。
2.2抗-PLOD2自身抗体检测方法
(1)包被抗原蛋白:从生物公司购买的PLOD2重组纯化蛋白,用抗原蛋白包被缓冲液稀释至0.125ug/ml终浓度,包被于96孔板,加样50μl/孔,保鲜膜封闭防止挥发,置于4℃冰箱包被过夜。
(2)封闭:弃去孔中包被液,于96孔酶标板中每孔加入100μl的含有2%BSA的封闭缓冲液,置于37℃恒温水浴锅封闭2h,充分甩出封闭缓冲液。将酶标板置于自动洗板机中,按照所设定的程序(200μl洗涤缓冲液/孔,20s/次,重复3次)洗涤,拍干。
(3)一抗血清孵育:使用含有1%BSA的PBST血清稀释液对待测血清进行稀释,稀释的比例为1:100,于封闭后的96孔酶标板分别加入50μl稀释后的待测血清以及稀释后的阴阳对照血清,空白对照孔只加入血清稀释液,置于37℃水浴锅孵育1h,充分甩出孔中液体,置于洗板机中进行洗涤,洗涤结束后拍干。
(4)二抗孵育:将辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG作为二抗,使用含有1%BSA按照1:5000比例稀释充分混匀后,分别加入96孔酶标板,每孔50μl,置于37℃水浴锅孵育1h,后弃去孔中液体,PBST洗液洗板3次,拍干。
(5)显色:每个反应孔加入50μl混合反应液,避光显色。
(6)终止反应:终止液每孔25ul,然后使用酶标仪测定其吸光度值450nm与620nm处的吸光度值,以空白对照孔调零后测各孔OD值。
2.3抗-PLOD2自身抗体检测结果的质量控制
1)每个板上均匀分布所有疾病类型的样本,且每板均具有质控血浆、阳性血浆、阴性血浆和空白对照孔。
2)质控血浆:将100个正常对照的血样充分等量混合制备成质控血样进行质量控制(Quality control,QC),用于消除各个酶标板之间的误差并代表人群的普遍水平。每次不同的酶标板之间的检测均需同时检测质控样品,以质控血浆OD值的变异系数(Coefficient ofVariation,CV)来判定结果的稳定性,同一天内做的所有酶标板之间的质控样品CV<20%认为数据可用于后续分析。
3)阳性血浆/阴性血浆:预实验时OD值高于或低于所有孔平均值±2标准差的样本,实验时不同酶标板之间的检测均有分布,作用等同于质控,为实验提供双重保障。
4)空白孔:不含血浆的抗体稀释液(1%BSA),用于去除背景值的干扰。
5)特异结合指数(Specific Binding Index,SBI)=(待测样本OD值-空白孔OD值)/(质控样本OD值-空白孔OD值)。
3.统计分析方法
本发明使用IBM SPSS Statistics 23.0和GraphPad Prism 8.0等软件对实验数据进行统计学分析。不同组之间的抗PLOD2自身抗体表达水平的差异通过Mann-Whitney U检验进行分析,阳性率差异通过卡方检验进行分析;抗PLOD2自身抗体的AUC、特异度、灵敏度及95%置信区间(95%CI)等诊断价值指标由ROC曲线进行计算;AUC>0.5,P<0.05时认为结果差异具有统计学意义,选取最大约登指数(Youden’s Index,YI)对应的SBI值作为截断值。
4.检测抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌诊断中的应用
1)抗-PLOD2自身抗体对非小细胞肺癌的诊断能力:
本发明用ELISA检测方法对91例肺癌患者血清,91例正常对照血浆进行抗-PLOD2自身抗体水平的初步检测,对321例非小细胞肺癌患者(包括184例早期非小细胞肺癌患者)、321例良性肺部结节患者与321例正常对照血浆进行抗-PLOD2自身抗体表达水平的验证。结果显示,抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌患者血浆中抗-PLOD2自身抗体表达水平显著高于良性肺部结节患者与正常对照,P<0.001(图1、2、4)。抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌患者与正常对照的AUC及95%可信区间为0.746(0.708-0.784),灵敏度和特异度分别为73.2%和67.6%,准确性为70.4%(图2);抗-PLOD2自身抗体在非小细胞肺癌患者与良性肺部结节患者的AUC及95%可信区间为0.726(0.687-0.766),灵敏度和特异度分别为74.5%和70.4%,准确性为72.4%(图4)。本发明结果提示,抗-PLOD2自身抗体对非小细胞肺癌患者、良性肺部结节患者与正常对照具有较好的区分能力。
2)抗-PLOD2自身抗体对早期非小细胞肺癌的筛查与诊断价值
本发明针对321例非小细胞肺癌中的184例早期非小细胞肺癌患者在321例良性肺部结节与321例正常对照间进行进一步的分析,发现针对早期非小细胞肺癌患者与正常对照的AUC及95%可信区间为0.757(0.710-0.803),灵敏度和特异度分别为76.6%和67.6%,准确性为70.9%(图3);发现针对早期非小细胞肺癌患者与良性肺部结节患者的AUC及95%可信区间为0.737(0.692-0.783),灵敏度和特异度分别为77.2%和70.4%,准确性为72.9%(图5)。另外,针对肺部结节直径1~3cm患者的AUC及95%可信区间为0.805(0.750-0.860),灵敏度和特异度分别为79.5%和77.9%(图6)。
3)抗-PLOD2自身抗体与临床传统肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1的比较
挑选出含有CEA、CYFRA21-1信息的患者,对其进行ROC曲线分析,结果如图7显示,在含有CEA信息的样本中,抗-PLOD2自身抗体的诊断AUC(95%CI)为0.706(0.647-0.764),高于CEA的AUC(95%CI):0.557(0.494-0.620)(Delong检验:P<0.05)。同样在含有CYFRA21-1信息样本中,抗-PLOD2自身抗体的AUC(95%CI)为0.708(0.644-0.772),也高于CYFRA21-1的AUC(95%CI):0.587(0.518-0.656)(Delong检验:P<0.05)。
本发明结果提示,抗-PLOD2自身抗体可以作为早期非小细胞肺癌的筛查与诊断生物标志物,以及其在制备用于非小细胞肺癌血浆学检测的试剂或试剂盒中的应用。
以下是本发明提供的具体的六个应用实施例。
非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体的应用实施例1:用于早期诊断
在早期诊断非小细胞肺癌时,抗-PLOD2自身抗体可作为一种有效的血浆学检测标志物。与传统的CEA和CYFRA21-1相比,抗-PLOD2自身抗体可能具有更高的灵敏度和特异性,从而提高早期诊断率。
非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体的应用实施例2:用于监测疗效
在治疗非小细胞肺癌过程中,通过监测抗-PLOD2自身抗体的水平可以评估疗效。与CEA和CYFRA21-1相比,抗-PLOD2自身抗体可能对疗效的反应更为敏感,有助于及时调整治疗方案。
非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体的应用实施例3:用于预测复发
通过定期检测抗-PLOD2自身抗体的水平,可以预测非小细胞肺癌的复发风险。与CEA和CYFRA21-1相比,抗-PLOD2自身抗体可能在预测复发方面具有更高的准确性,有助于制定个性化的随访计划。
非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体的应用实施例4:用于评估预后
抗-PLOD2自身抗体水平可作为评估非小细胞肺癌患者预后的重要指标。与CEA和CYFRA21-1相比,抗-PLOD2自身抗体可能更能准确反映患者的生存预期和疾病进展。
非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体的应用实施例5:用于指导个体化治疗
基于抗-PLOD2自身抗体的水平,可以为非小细胞肺癌患者制定个体化的治疗方案。与CEA和CYFRA21-1相比,抗-PLOD2自身抗体可能在指导个体化治疗方面具有更高的价值。
非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体的应用实施例6:用于肺癌筛查
在高危人群中,定期检测抗-PLOD2自身抗体的水平可作为一种有效的肺癌筛查手段。与CEA和CYFRA21-1相比,抗-PLOD2自身抗体可能在肺癌筛查中具有更高的敏感性和特异性,从而降低误诊和漏诊率。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,本发明的保护范围不限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,可显而易见地得到的技术方案的简单变化或等效替换均落入本发明的保护范围内。
Claims (6)
1.一种非小细胞肺癌标志物,其特征在于,所述非小细胞肺癌标志物为抗-PLOD2自身抗体。
2.一种如权利要求1所述的非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体在制备用于非小细胞肺癌血浆学检测的应用。
3.根据权利要求2所述检测非小细胞肺癌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒是基于酶联免疫吸附试验的检测体系。
4.根据权利要求3所述检测非小细胞肺癌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有检测抗-PLOD2自身抗体的PLOD2重组纯化蛋白。
5.根据权利要求3所述检测非小细胞肺癌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还含有ELISA包被缓冲液、HRP标记的羊抗人IgG二抗、封闭缓冲液、抗体稀释液、TMB显色试剂、PBST、终止液;具体包括:
1)包被缓冲液:1.5g Na2CO3、2.9g NaHCO3、加蒸馏水至1L;
2)PBS缓冲液(pH7.2):65.4g NaCl,0.5M磷酸盐缓冲液160mL,加蒸馏水至8L;
3)PBST:PBS缓冲液1L,加入0.5mLTween20,混匀;
4)封闭缓冲液:2g BSA(bovine serum albumin),加入100mL 1x PBST,混匀;
5)抗体稀释液:1g BSA,加入100mL 1x PBST,混匀;
6)TMB显色试剂:20mg TMB·2HCl,3.7gNa2HPO4·12H2O、0.92g柠檬酸、800μL 0.75%H2O2,加蒸馏水,1:1混匀;
8)终止液:20mL浓硫酸,加入200mL蒸馏水。
6.一种如权利要求1所述的非小细胞肺癌标志物抗-PLOD2自身抗体在制备用于非小细胞肺癌评价试剂盒中的应用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202311094277.0A CN117074696A (zh) | 2023-08-29 | 2023-08-29 | 一种非小细胞肺癌标志物及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202311094277.0A CN117074696A (zh) | 2023-08-29 | 2023-08-29 | 一种非小细胞肺癌标志物及其应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN117074696A true CN117074696A (zh) | 2023-11-17 |
Family
ID=88709520
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202311094277.0A Pending CN117074696A (zh) | 2023-08-29 | 2023-08-29 | 一种非小细胞肺癌标志物及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN117074696A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN117347643A (zh) * | 2023-12-05 | 2024-01-05 | 成都泰莱生物科技有限公司 | 用于判断肺部结节良恶性的代谢标志物组合及其筛选方法和应用 |
-
2023
- 2023-08-29 CN CN202311094277.0A patent/CN117074696A/zh active Pending
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN117347643A (zh) * | 2023-12-05 | 2024-01-05 | 成都泰莱生物科技有限公司 | 用于判断肺部结节良恶性的代谢标志物组合及其筛选方法和应用 |
CN117347643B (zh) * | 2023-12-05 | 2024-02-06 | 成都泰莱生物科技有限公司 | 用于判断肺部结节良恶性的代谢标志物组合及其筛选方法和应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106885908B (zh) | 血清psmd4蛋白的检测试剂盒及其检测方法与应用 | |
CN105092855B (zh) | 一种用于肝纤维化和肝硬化检测的试剂盒 | |
Jeong et al. | Diagnostic values of urine CYFRA21-1, NMP22, UBC, and FDP for the detection of bladder cancer | |
US20090298097A1 (en) | Methods for the diagnosis of lung cancer | |
JP2017515127A (ja) | 前立腺がんの診断に関連する組成物および方法 | |
US20050277137A1 (en) | Diagnostic multimarker serological profiling | |
CN117074696A (zh) | 一种非小细胞肺癌标志物及其应用 | |
CN109975549B (zh) | 肿瘤来源IgG在胰腺癌诊断或预后中的用途 | |
CN110187109A (zh) | 一种用于贲门腺癌早期筛查的自身抗体联合检测elisa试剂盒 | |
CN108646032A (zh) | Top2a自身抗体作为肺癌诊断标志物的用途 | |
CN113777311B (zh) | 一种用于食管鳞癌辅助诊断的elisa试剂盒 | |
CN111562378A (zh) | 一种elisa检测试剂盒的构建方法、试剂盒及应用 | |
CN109116024B (zh) | 一种肺癌标志物抗-actr3自身抗体及其应用 | |
Leman et al. | Retracted: Analysis of a serum test for prostate cancer that detects a second epitope of EPCA‐2 | |
CN109116023B (zh) | 一种肺癌标志物抗-mmp12自身抗体及其应用 | |
CN113687076B (zh) | 一种可用于肺腺癌早期诊断的联合检测血清标志物及其应用 | |
KR101311717B1 (ko) | 대장암 진단용 단백질 마커 멜라노트랜스페린 및 이에 대한 항체를 포함하는 대장암 진단 키트 | |
CN115078726A (zh) | 一种用于卵巢癌诊断的生物标志物及检测试剂盒 | |
KR101311718B1 (ko) | 대장암 진단용 단백질 마커 rpe-스폰딘 및 이에 대한 항체를 포함하는 대장암 진단 키트 | |
CN114113611B (zh) | 一种用于肝癌诊断的生物标志物及检测试剂盒 | |
KR101861055B1 (ko) | Romo1을 이용한 폐질환의 진단방법 | |
CN113721021B (zh) | Prkcz自身抗体在食管鳞癌辅助诊断中的应用 | |
CN117647645B (zh) | Lbp、atf6、m-csfr联用在制备诊断自身免疫性肝病产品中的应用及试剂盒 | |
US20230400466A1 (en) | Methods and systems for risk stratification and management of bladder cancer | |
KR102131860B1 (ko) | 아르기닌이 메틸화된 ggt1에 특이적으로 결합하는 대장암 진단용 바이오마커 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |