CN117074659A - 一种抗体稀释液及其制备方法和应用 - Google Patents
一种抗体稀释液及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗体稀释液及其制备方法和应用。本发明抗体稀释液，以羧甲基纤维素钠、氯化钠、三羟甲基氨基甲烷、吐温‑20和水为成分，对抗体进行稀释后在常温条件下(10～37℃)孵育30～60min，即可实现抗原抗体结合，孵育时间短且配制简单、稳定安全，极大提高了抗原抗体结合率；并且杂带很浅甚至几乎没有，极大提高抗原抗体结合率，减少非特异性结合。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗体稀释液及其制备方法和应用。
背景技术
在众多生物实验当中，免疫实验方法应用极为普遍，包括免疫吸附、免疫荧光、免疫组化、免疫共沉淀等，其核心都是抗原抗体的特异识别和结合。诚然，抗原抗体结合最关键是抗体的特异性，但抗原抗体相互匹配的浓度，反应的温度、时间，所处溶液的电解质含量以及pH值等因素都会影响两者的结合。这些都需要抗体稀释液去调节和平衡。
目前现有的抗体稀释液主要有如下问题：一是抗体稀释液仅使抗体浓度下降，并不能促进抗原抗体识别和结合，往往只能通过延长孵育时间来达到抗原抗体结合的目的；二是不能有效避免非特异性背景的产生；三是抗体稀释液的成分相当复杂，不利于配制，还有生物危害，例如中国专利CN114441746A利用牛血清白蛋白(BSA)以及山羊IgG来保护抗体，增加抗体的稳定性，但是BSA和IgG的加入不仅会带来病毒支原体感染的风险，存在生物安全问题，而且很大程度上提高了制作成本，不适合推广应用；还如中国专利CN109991408A含有聚乙烯吡咯烷酮、腺苷三磷酸镁盐等多种成分，配制困难，不利于实际操作；四是由于抗体本身为蛋白质，结构不稳定，常温或者更高温度条件下存在变性的可能，出现非特异性结合，现有抗体稀释液进行稀释后通常需要在4℃条件下进行孵育，保持其原有活性，例如中国专利CN115201461A公开了一种抗体稀释液的改良方法，将聚乙二醇水凝胶添加到常用的抗体稀释液TBST中，水凝胶独特的记忆性，在抗原抗体结合以后对结合部分进行包绕，从而使其形成稳定的“抗原-抗体复合物”，有效提高抗原抗体结合率，但是其只能在4℃条件下进行孵育。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术的不足，提供一种配制简单，无毒无害，成本低，使用安全、方便的抗体稀释液，能够保护抗体，增加抗体的稳定性，实现常温孵育，并且缩短孵育时间，大大提高抗原抗体结合率，减少非特异性结合。
本发明提供了一种抗体稀释液，所述抗体稀释液包括如下组分：羧甲基纤维素钠、氯化钠、三羟甲基氨基甲烷、吐温-20和水。
优选的，所述抗体稀释液中羧甲基纤维素钠的浓度为0.5～5mol/L；
所述抗体稀释液中氯化钠的浓度为0.1～0.2mol/L；
所述抗体稀释液中三羟甲基氨基甲烷的浓度为0.02～0.03mol/L；
所述抗体稀释液中吐温-20的体积百分含量为0.1％～0.15％。
优选的，所述抗体稀释液中羧甲基纤维素钠的浓度为1～2mol/L；
所述抗体稀释液中氯化钠的浓度为0.15mol/L；
所述抗体稀释液中三羟甲基氨基甲烷的浓度为0.02mol/L；
所述抗体稀释液中吐温-20的体积百分含量为0.1％。
优选的，所述抗体稀释液的pH为7.0～7.2。
本发明还提供了上述技术方案所述的抗体稀释液的制备方法，包括如下步骤：
将所述三羟甲基氨基甲烷、氯化钠和水混合，调节pH至7.0～7.2，得到缓冲溶液；
将所述缓冲溶液、羧甲基纤维素钠和吐温-20混合，得到所述抗体稀释液。
本发明还提供了一种抗体产品，所述抗体产品利用上述技术方案所述的抗体稀释液稀释抗体得到。
本发明还提供了上述技术方案所述的抗体稀释液或抗体产品在制备抗体检测产品的应用。
本发明还提供了上述技术方案所述的抗体稀释液或所述的抗体产品在抗体检测中的应用。
优选的，所述应用包括利用抗体稀释液稀释抗体后孵育待检测物或利用所述抗体产品孵育待检测物；
所述孵育的温度为10～37℃，时间为30～60min。
本发明还提供了一种用于抗体检测的试剂盒，包括上述技术方案所述的抗体稀释液或抗体产品。
有益效果：
本发明提供了一种抗体稀释液，包括羧甲基纤维素钠、氯化钠、三羟甲基氨基甲烷、吐温-20和水，其中氯化钠和三羟甲基氨基甲烷提供了抗原抗体结合所需的电解质环境；甲基纤维素钠溶于水可以形成阴离子型胶体溶液，不仅能有效增加抗原抗体的接触时间，而且能增加抗原抗体的有效接触时间，加快抗原抗体复合物的形成，防止抗原抗体脱离；在前述组分的配合下，吐温-20可以有效防止非特异性背景的产生。本发明调整抗体稀释液的组成，对抗体进行稀释后，在常温条件下(10～37℃)孵育30～60min，即可实现抗原抗体结合，孵育时间短且配制简单、稳定安全，极大提高了抗原抗体结合率；并且杂带很浅甚至几乎没有，极大提高抗原抗体结合率，减少非特异性结合。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为应用例1实验组和对照组免疫组织化学实验染色结果；
图2为应用例2实验组和对照1组WesternBlot检测结果；
图3为应用例2对照2组WesternBlot检测结果
图4为应用例3实验1组WesternBlot检测结果；
图5为应用例3实验2组WesternBlot检测结果；
图6为应用例3实验3组和对照组WesternBlot检测结果；
图7为应用例4对样品A进行Western Blot检测的结果；
图8为应用例4对样品B进行WesternBlot检测的结果。
具体实施方式
本发明提供了一种抗体稀释液，所述抗体稀释液包括如下组分：羧甲基纤维素钠、氯化钠、三羟甲基氨基甲烷、吐温-20和水。
在本发明中，所述抗体稀释液中羧甲基纤维素钠的浓度优选为0.5～5mol/L，进一步优选为0.8～4mol/L，更优选为1～2mol/L，最优选为1.5mol/L。本发明所述羧甲基纤维素钠溶于水可以形成阴离子型胶体溶液，具有亲水性，一方面抗原抗体散在阴离子型胶体溶液中，提高了抗原抗体的稳定性，增加了保护；另一方面该阴离子型胶体分散在溶液中，增加胶体之间包绕的颗粒的接触和结合，能增加抗原抗体的有效接触时间，加快抗原抗体复合物的形成，防止抗原抗体脱离。并且由于抗原抗体大多带负电荷，阴离子胶体溶液不会改变蛋白的电荷，也不会吸附蛋白，增加抗体的稳定性。
在本发明中，所述抗体稀释液中氯化钠的浓度优选为0.1～0.2mol/L，进一步优选为0.15mol/L。本发明氯化钠为抗原抗体结合提供所需的电解质环境。
在本发明中，所述抗体稀释液中三羟甲基氨基甲烷的浓度优选为0.02～0.03mol/L，进一步优选0.02mol/L。本发明三羟甲基氨基甲烷为抗原抗体结合提供所需的电解质环境。
在本发明中，所述抗体稀释液中吐温-20的体积百分含量优选为0.1％～0.15％，进一步优选为0.1％。本发明所述吐温-20是一种表明活性剂，也是非离子型去垢剂，基本不受电解质浓度和pH的影响，可以直接洗脱非特异性结合，可以防止非特异性背景的产生。
在本发明中，所述抗体稀释液的pH优选为7.0～7.2，进一步优选为7.2。
本发明以羧甲基纤维素钠、氯化钠、三羟甲基氨基甲烷、吐温-20和水作为抗体稀释液的组分，在常温下(10～37℃)便能缩短抗体孵育时间，即便有些相对弱的一抗，室温(15～25℃)孵育半小时就能出结果，极大提高抗原抗体结合率；并且本发明提供的抗体稀释液实用性强，能减少非特异性结合，具体的，Western Blot实验中，同样的抗体在其他抗体稀释液中孵育均有杂带的前提下，使用本发明提供的稀释液孵育后杂带很浅甚至几乎没有，配制简单，使用方便，成本低廉，不含对人体有害成分，无生物安全问题且极为稳定。
本发明还提供了上述技术方案所述的抗体稀释液的制备方法，包括如下步骤：
将所述三羟甲基氨基甲烷、氯化钠和水混合，调节pH至7.2，得到缓冲溶液；
将所述缓冲溶液、羧甲基纤维素钠和吐温-20混合，得到所述抗体稀释液。
本发明将所述三羟甲基氨基甲烷、氯化钠和水混合，调节pH为7.0～7.2，得到缓冲溶液。本发明优选使用盐酸调节pH。本发明对所述混合的方式和时间没有严格要求，使上述成分混合均匀即可。
得到所述缓冲溶液后，本发明将所述缓冲溶液、羧甲基纤维素钠和吐温-20混合，得到所述抗体稀释液。
在本发明中，所述将所述缓冲溶液、羧甲基纤维素钠和吐温-20混合优选包括：将所述缓冲溶液和吐温-20混合，得混合物后与羧甲基纤维素钠混合。本发明限定缓冲溶液、羧甲基纤维素钠和吐温-20混合的方式能够使各组分充分混合，省时省力。
本发明还提供了一种抗体产品，利用上述技术方案所述的抗体稀释液稀释抗体得到。本发明在实施例中以IL-33的单克隆抗体、IL-36γ的单克隆抗体或ST2的单克隆抗体为例进行说明，但是不能仅将其理解为本发明的全部保护范围。
本发明还提供了上述技术方案所述的抗体稀释液或抗体产品在制备抗体检测产品中的应用。
在本发明中，所述抗体检测产品优选包括免疫组化实验和/或Western Blot实验中需要使用的抗体检测产品。
本发明还提供了上述技术方案所述的抗体稀释液或所述的抗体产品在抗体检测中的应用。
在本发明中，所述应用优选包括：利用抗体稀释液稀释抗体后孵育待检测物或利用所述抗体产品孵育待检测物。
在本发明中，所述孵育的温度优选为10～37℃，进一步优选为15～35℃，更优选为20～30℃，最优选为25℃；所述孵育的时间优选为30～60min，进一步优选为35～55min，更优选为40～50min，最优选为45min。
本发明还提供了一种用于抗体检测的试剂盒，包括上述技术方案所述的抗体稀释液或抗体产品。
利用本发明提供的抗体稀释液或抗体产品进行抗体检测，可实现常温(10～37℃)孵育，大大提高抗原抗体结合率，缩短孵育时间，还能减少非特异性结合，且无毒无害极为安全。
为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的一种抗体稀释液及其制备方法和应用进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例中未作具体说明的分子生物学实验方法，均按照《分子克隆实验指南》(第四版)(J.萨姆布鲁克、M.R.格林，2017)一书中所列的具体方法进行。其他实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的仪器设备，如无特殊说明，均为实验室常规仪器设备；下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
实施例1
抗体稀释液配制
1.抗体稀释液由羧甲基纤维素钠(CMC)、氯化钠(NaCl)、三羟甲基氨基甲烷(Tris-base)、吐温-20和去离子水组成，其中抗体稀释液中CMC、NaCl、Tris-base和吐温-20的浓度依次为2～4mol/L、0.15mol/L、0.02mol/L、0.1％(V/V)；
2.按照步骤1的目标浓度，称量各组分，将NaCl和Tris-base混合，用去离子水溶解，用盐酸调节溶液pH值至7.2；再加入吐温-20以及羧甲基纤维素钠CMC，充分混匀，得到所述抗体稀释液。
实施例2
同实施例1，唯一区别在于，抗体稀释液中CMC的浓度为1mol/L。
实施例3
同实施例1，唯一区别在于，抗体稀释液中CMC的浓度为5mol/L。
实施例4
同实施例1，唯一区别在于，抗体稀释液中CMC的浓度为0.5mol/L。
对比例1
同实施例1，唯一区别在于，抗体稀释液中CMC的浓度为0.1mol/L。
应用例1
抗体稀释液用于免疫组织化学实验对抗体染色的效果
1)切片：石蜡块包埋扁桃体组织，常规切片，厚度4μm；
2)常规脱蜡：步骤(1)得到的切片65℃烤片2h，依次使用如下试剂脱蜡：二甲苯Ⅰ10min→二甲苯Ⅱ10min→二甲苯Ⅲ10min→无水乙醇5min→95％乙醇2min→85％乙醇2min→75％乙醇2min→蒸馏水2min；
3)抗原修复：
按15ml 100×柠檬酸组织抗原修复液：1485ml蒸馏水的比例配制柠檬酸钠缓冲液，在高压锅中加入适量所述柠檬酸钠缓冲液浸没切片，放入步骤(2)脱蜡后的切片，加热至放气3min以修复抗原，冷却后取出切片，PBS洗3次，每次5min；
4)去内源酶：0.03％H2O2孵育步骤(3)洗涤后的切片15min，以阻断内源过氧化物酶，水洗5min，后PBS洗涤三次，每次5min，之后标记笔圈出组织的位置；
5)封闭：室温(15℃-25℃)，山羊抗人血清封闭步骤4)切片15～30min，PBS洗涤三次，每次2min；
6)孵育一抗：将步骤5)洗涤后的切片随机分为实验组和对照组，分别进行如下处理：
实验组：利用实施例1得到的抗体稀释液稀释小鼠抗人IL-33单克隆抗体(稀释比例为1：1000)，湿盒内常温(15℃-25℃)孵育步骤5)洗涤后的切片1h；
对照组：利用PBST稀释小鼠抗人IL-33单克隆抗体(稀释比例为1：1000)，湿盒内4℃孵育过夜；
实验组和对照组孵育结束后，PBS洗涤三次，每次5min；
7)孵育二抗：步骤6)洗涤后的切片中加HRP标记的鼠兔通用型二抗，置于湿盒内室温(15℃-25℃)孵育30min，PBS洗涤三次，每次5min；
8)对步骤7)洗涤后的切片进行DAB显色，显色时间1～5min不等，自来水充分冲洗；
9)苏木素复染：步骤8)切片放入苏木素水溶液染色2min，自来水冲洗后，盐酸乙醇分化30s。镜检控制，直至细胞核及染色质清晰为止，流水冲洗；
10)梯度酒精脱水：按照如下流程对步骤9)的切片进行脱水：75％乙醇2min→95％乙醇2min→95％乙醇2min→无水乙醇2min→无水乙醇3min；
11)吹风机吹干后，中性树脂封片，于普通光学显微镜下观察染色情况，结果如图1所示，其中左列为实验组，右列为对照组。
根据图1可以看出，相较于PBST(对照组)，本发明的抗体稀释液(实验组)可以显著增加IL-33抗体的免疫组织化学染色效果。
应用例2
抗体稀释液用于Western Blot实验对条带检测的效果
1)制胶：配制12％的分离胶：
上述成分混匀后立刻用移液器贴着玻板灌胶，待胶面达到2/3高度时，停止灌胶。之后配制5％的浓缩胶：
上述成分混匀后立刻用移液器贴着玻板灌胶灌满，将梳子插入其中，室温静置30min。
2)电泳准备：拔出梳子，将配制好的胶和玻板垂直置于电泳槽中，从电泳槽中间加入Tris-甘氨酸电泳缓冲液，至外侧液面达到划线要求位置。
3)上样：小心的将20μg经变性处理的总蛋白加入加样孔中，速度不宜过快，避免气泡产生；
其中总蛋白包括样品A和样品B，样品A和样品B分别进行上样检测；
样品A为利用总蛋白提取试剂盒3101(贝博生物)对人胚胎肾293T细胞进行提取得到的总蛋白；样品B为利用贝博总蛋白提取试剂盒3101(贝博生物)对人骨肉瘤U-2OS细胞进行提取得到的总蛋白。
4)电泳：电压80V，15min，过5％的浓缩胶，后调至电压100V，持续电泳至溴酚蓝到达凝胶底端约1cm处，终止。
5)转膜准备：准备大小与分离胶一致的PVDF膜，先用100％甲醇活化10s，再转移到转移缓冲液中浸泡备用，另准备6张大小5×8cm的滤纸，与海绵一起置于转移缓冲液中浸泡备用。打开玻板，切去堆积胶，组装三明治：海绵(负极)、3张滤纸、分离胶、PVDF膜、3张滤纸、海绵(正极)，用玻璃棒赶走气泡，保证每一层完美贴合。
6)转膜：电流200mA，2h，整个装置置于冰浴中。
7)封闭：将PVDF膜小心取出，全部浸润在Western-blot封闭液中，37℃，1h。
8)一抗孵育和二抗孵育：将步骤7)经Western-blot封闭液浸润的PVDF膜随机分为实验组、对照组1组和对照2组，分别进行如下处理：
实验组：利用实施例1得到的抗体稀释液稀释一抗(PDGF-D Polyclonal Antibody(40-2100)，1:2000，Invitrogen公司)，室温(15℃-25℃)孵育经Western-blot封闭液浸润的PVDF膜45min；TBST室温洗涤3次，10min/次；利用实施例1得到的抗体稀释液稀释二抗(羊抗兔抗体，1:3000，Protech公司)，得到二抗稀释液后，小心将PVDF膜置于其中，室温(15℃-25℃)孵育30min；取出PVDF膜，TBST室温洗涤3次，10min/次；
对照1组：利用WB500D(新赛美通用型抗体稀释液)稀释一抗(PDGF-DPolyclonalAntibody(40-2100)，1:2000，Invitrogen公司)，室温孵育经Western-blot封闭液浸润的PVDF膜45min；TBST室温洗涤3次，10min/次；利用WB500D(新赛美通用型抗体稀释液)稀释二抗(羊抗兔抗体，1:3000，Protech公司)，得到二抗稀释液后，小心将PVDF膜置于其中，室温(15℃-25℃)孵育30min；取出PVDF膜，TBST室温洗涤3次，10min/次；
对照2组：利用碧云天抗体稀释液稀释一抗(PDGF-D Polyclonal Antibody(40-2100)，1:2000，Invitrogen公司)，4℃过夜孵育经Western-blot封闭液浸润的PVDF膜45min；TBST室温洗涤3次，10min/次；利用碧云天抗体稀释液稀释二抗(羊抗兔抗体，1:3000，Protech公司)，得到二抗稀释液后，小心将PVDF膜置于其中，室温(15℃-25℃)孵育30min；取出PVDF膜，TBST室温洗涤3次，10min/次；
9)ECL发光：取出步骤8)实验组和对照1～2组的PVDF膜，分别小心吸干置于保鲜膜上，配制ECL发光液(A液+B液等体积混合，A液为Enhancer Reagent，B液为StabilizedPeroxide Reagent，取自新赛美超敏ECL化学发光试剂盒)，孵育于PVDF膜上，进行曝光处理，结果如图2～3所示，其中图2为实验组和对照1组检测结果，中间条带为Marker，Marker左侧为利用本发明实施例1得到的抗体稀释液的检测结果，右侧为利用商品化的抗体稀释液的检测结果，A为步骤(3)样品A的检测结果，B为步骤(3)样品B的检测结果；
图3为对照2组检测结果，最左侧条带为Marker，Marker右侧4个泳道均为步骤(3)样品A的检测结果。
根据图2～3可以看出，相较于目前商品化的抗体稀释液，本发明实施例1得到的抗体稀释液在同等条件下可以显著促进抗原抗体结合，极大缩短了一抗孵育时间，并且显著减少杂带的产生。
应用例3
抗体稀释液用于Western Blot实验对条带检测的效果
1)制胶：同应用例步骤1)；
2)电泳准备：同应用例步骤2)；
3)上样：小心的将经变性处理的总蛋白加入加样孔中，速度不宜过快，避免气泡产生；
其中总蛋白为样品A，具体为利用总蛋白提取试剂盒3101(贝博生物)对人胚胎肾293T细胞进行提取得到的总蛋白，浓度为2μg/μl，上样量为3μL、5μL和10μL；
4)电泳：同应用例步骤4)；
5)转膜准备：同应用例步骤5)；
6)转膜：同应用例步骤6)；
7)封闭：同应用例步骤8)；
8)一抗孵育和二抗孵育：将步骤7)经Western-blot封闭液浸润的PVDF膜随机分为实验1组、实验2组、实验3组和对照组，分别进行如下处理：
实验1组：利用实施例2得到的抗体稀释液稀释一抗(PDGF-D PolyclonalAntibody(40-2100)，1:2000，Invitrogen公司)，室温(15℃-25℃)孵育经Western-blot封闭液浸润的PVDF膜45min；TBST室温洗涤3次，10min/次；利用实施例1得到的抗体稀释液稀释二抗(羊抗兔抗体，1:3000，Protech公司)，得到二抗稀释液后，小心将PVDF膜置于其中，室温(15℃-25℃)孵育30min；取出PVDF膜，TBST室温洗涤3次，10min/次；
实验2组：同实验1组，唯一区别在于利用实施例3得到的抗体稀释液稀释一抗和二抗；
实验3组：同实验1组，唯一区别在于利用实施例4得到的抗体稀释液稀释一抗和二抗；
对照1组：同实验1组，唯一区别在于利用对比例1得到的抗体稀释液稀释一抗和二抗；
9)ECL发光：取出步骤8)实验1～3组和对照组的PVDF膜，分别小心吸干置于保鲜膜上，配制ECL发光液(A液+B液等体积混合，A液为Enhancer Reagent，B液为StabilizedPeroxide Reagent，取自新赛美超敏ECL化学发光试剂盒)，孵育于PVDF膜上，进行曝光处理，结果如图4～6所示，其中，图4为实验1组检测结果，从左到右依次3为上样量10μL、上样量5μL、上样量3μL和Marker；
图5为实验2组检测结果，从左到右依次3为上样量3μL、上样量5μL、上样量10μL和Marker；
图6为实验3组和对照组检测结果，从左到右依次Marker，实验3组上样量3μL、实验3组上样量5μL、实验3组上样量10μL、对照组上样量3μL、对照组上样量5μL和对照组上样量10μL；
根据图4～6可以看出，相比对比例1，本发明实施例2～4得到的抗体稀释液在同等条件下可以显著促进抗原抗体结合，极大缩短了一抗孵育时间。
应用例4
将实施例1得到的抗体稀释重复使用2次后，置于4℃条件下摄氏度放置10～15d，参照应用例2的方式进行Western Blot检测，结果如图7～8所示，其中图7为对应用例2中样品A的检测结果，中间条带为Marker，左侧为放置15d后的抗体稀释液的检测结果，右侧为放置10d后的抗体稀释液的检测结果；图8为对样品B的检测结果，左侧为放置10d后的抗体稀释液的检测结果，右侧为放置15d后的抗体稀释液的检测结果。
根据图7～8可以看出，本申请提供的抗体稀释液可以重复使用，稳定性好。
根据上述内容可以看出，本发明提供的抗体稀释液在常温下便能缩短抗体孵育时间，杂带很浅甚至几乎没有，极大提高抗原抗体结合率，减少非特异性结合。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。
Claims (10)
1.一种抗体稀释液，其特征在于，所述抗体稀释液包括如下组分：羧甲基纤维素钠、氯化钠、三羟甲基氨基甲烷、吐温-20和水。
2.根据权利要求1所述的抗体稀释液，其特征在于，所述抗体稀释液中羧甲基纤维素钠的浓度为0.5～5mol/L；
所述抗体稀释液中氯化钠的浓度为0.1～0.2mol/L；
所述抗体稀释液中三羟甲基氨基甲烷的浓度为0.02～0.03mol/L；
所述抗体稀释液中吐温-20的体积百分含量为0.1％～0.15％。
3.根据权利要求2所述的抗体稀释液，其特征在于，所述抗体稀释液中羧甲基纤维素钠的浓度为1～2mol/L；
所述抗体稀释液中氯化钠的浓度为0.15mol/L；
所述抗体稀释液中三羟甲基氨基甲烷的浓度为0.02mol/L；
所述抗体稀释液中吐温-20的体积百分含量为0.1％。
4.根据权利要求1～3任一项所述的抗体稀释液，其特征在于，所述抗体稀释液的pH为7.0～7.2。
5.权利要求1～4任一项所述的抗体稀释液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将所述三羟甲基氨基甲烷、氯化钠和水混合，调节pH至7.0～7.2，得到缓冲溶液；
将所述缓冲溶液、羧甲基纤维素钠和吐温-20混合，得到所述抗体稀释液。
6.一种抗体产品，其特征在于，所述抗体产品利用权利要求1～4任一项所述的抗体稀释液或权利要求5所述的制备方法得到的抗体稀释液稀释抗体得到。
7.权利要求1～4任一项所述的抗体稀释液或权利要求5所述的制备方法得到的抗体稀释液或权利要求6所述的抗体产品在制备抗体检测产品的应用。
8.权利要求1～4任一项所述的抗体稀释液或权利要求5所述的制备方法得到的抗体稀释液或权利要求6所述的抗体产品在抗体检测中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用包括利用抗体稀释液稀释抗体后孵育待检测物或利用所述抗体产品孵育待检测物；
所述孵育的温度为10～37℃，时间为30～60min。
10.一种用于抗体检测的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～4任一项所述的抗体稀释液或权利要求5所述的制备方法得到的抗体稀释液或权利要求6所述的抗体产品。
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