CN117064936A - 一种药物组合物及在抑菌药物制备中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种药物组合物及在抑菌药物制备中的应用,该抑菌药物按照重量份计,药物组合物包括丹参或赤芍中的一种或两种,还包括桑叶,荷叶,山楂叶中的一种或多种。本发明所述的一种药物组合物及在抑菌药物制备中的应用,该药物组合物对常见肠道致病菌的抑菌作用研究,在制备肠道菌群失调的抑菌药物方面提供参考,为肠道菌群失调的治疗提供了潜在的治疗途径。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,尤其是涉及一种药物组合物及在抑菌药物制备中的应用。
背景技术
三叶片是一种由桑叶、荷叶、山楂叶、丹参、赤芍五味药组成的中药复方。其中桑叶为君药、荷叶和山楂叶共为臣药,丹参和赤芍为佐药,具有清热养阴、生津止渴、化痰降浊、活血化瘀的功效,目前正处于II期临床试验阶段,临床上主要用于糖尿病前期合并高脂血症的治疗。三叶片的主要化学成分是生物碱类、黄酮类及酚酸类化合物。
发明内容
有鉴于此,本发明旨在提出组方合理、疗效确切、治疗治疗肠道菌群失调或消化道症状的一种药物。
为达到上述目的,本发明的技术方案是这样实现的:
一种药物组合物及在抑菌药物制备中的应用,该抑菌药物按照重量份计,药物组合物包括丹参和赤芍,还包括桑叶,荷叶,山楂叶中的一种或多种;药物组合物包括:桑叶2~30份,荷叶2~30份,山楂叶2~30份,丹参2~30份,赤芍2~30份。
该抑菌药物按照重量份计,药物组合物包括:桑叶12份,荷叶12份,山楂叶12份,丹参15份,赤芍15份。
该抑菌药物按照重量份计,药物组合物包括丹参和赤芍。
该抑菌药物由一种或多种药用赋形剂混合制成片剂、颗粒剂、胶囊、丸剂、口服液、分散片、口崩片、滴丸中的任一种。
应用于肠道菌群失调的药物的制备。
应用于肠道菌群失调导致的腹泻、胃肠功能紊乱以及消化不良药物的制备。
药物组合物具有抑制金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli)、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)的表现。
药物组合物在抑菌药物中的有效成分至少为12.5mg/mL,有效成分为该药物组合物的提取物。
相对于现有技术,本发明所述的一种药物组合物及在抑菌药物制备中的应用具有以下有益效果:
体外抑菌结果显示,200、100、50mg/mL的三叶片对上述细菌均有显著的抑制作用,25、12.5mg/mL的三叶片对S.aureus有较为明显的抑菌作用。该药物能够抑制常见的肠道致病菌,且随着给药浓度的增加抑菌效果逐渐增强。
附图说明
构成本发明的一部分的附图用来提供对本发明的进一步理解,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明,并不构成对本发明的不当限定。在附图中:
图1为实施例1中各组小鼠肠道菌群的Alpha多样性分析及beta多样性分析(A为各组小鼠肠道菌群的Alpha多样性分析,B为各组小鼠肠道菌群的beta多样性分析);
图2为实施例1中各组小鼠肠道菌群种水平物种丰度聚类热图;
图3为实施例1中各组小鼠肠道菌群中S.aureus和E.coli相对丰度柱状图(A为各组小鼠肠道菌群中S.aureus的相对丰度柱状图,B为各组小鼠肠道菌群的E.coli相对丰度柱状图)。
具体实施方式
需要说明的是,在不冲突的情况下,本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
下面将参考附图并结合实施例来详细说明本发明。
实施例1
三叶片下调高脂小鼠模型肠道中S.aureus和E.coli的丰度
5-6周龄SPF级雄性C57BL/6N小鼠,适应性喂养1周后,按体重随机分为5组,分别为普通饮食组(Con)、高脂饮食组(HFD)、三叶片低剂量组(SYTL)、三叶片高剂量组(SYTH),每组10只。实验前(0周),组间体重、随机血糖无显著性差异。
实验开始后,Con组给予普通饲料,其他组给予高脂饲料喂养,小鼠自由摄食、水。同时,SYTL组每日给予三叶片2g生药/kg(相当于0.2g干膏粉/kg,使用纯净水溶解),SYTH组每日给予三叶片4g生药/kg(相当于0.4g干膏粉/kg,临床给药剂量的0.8倍)灌胃,给药体积为10mL/kg。Con组和HFD组小鼠给予等容积的纯净水。
给药20周后,于无菌条件下收集每只小鼠的新鲜粪便进行16S rRNA测序。
菌群多样性分析结果(图1A)显示,与con组相比,HFD组的chao1和observed-species指数有下降趋势,SYTL组和SYTH组两种指数对比HFD组均有升高,表明高脂饮食后小鼠肠道菌群丰富度下调,三叶片给药后有助于小鼠肠道菌群物种丰富度和多样性上调,进而改善小鼠肠道菌群。通过PCoA分析观察小鼠肠道菌群结构变化,图1B显示,Con组和HFD组肠道菌群有较大差异,经三叶片处理后,SYTL组和SYTH组微生物群落逐渐趋向Con组,表明三叶片能够改善小鼠肠道菌群的结构。
种水平物种丰度分析(图2)表明,三叶片能够降低菌群中S.aureus、E.coli等致病菌的丰度,对小鼠菌群结构有正向调节作用。同时图2和图3也显示,同Con组相比,HFD组S.aureus丰度增加,E.coli丰度降低。而给药不同剂量的三叶片后,小鼠肠道菌群中这两种菌株丰度均有所下调。该结果提示三叶片对HFD小鼠肠道菌群中的S.aureus和E.coli有一定程度的抑制作用。
实施例2体外抑菌实验挖掘三叶片发挥抑菌活性的主要成分
2.1不同浓度三叶片的抑菌活性
三叶片富含黄酮类成分,可以破坏细胞壁和细胞膜的完整性,对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有一定的抑制作用。为了挖掘三叶片中发挥抑菌作用的主要成分,首先通过牛津杯法检测了不同浓度三叶片的抑菌活性,结果见表1。
表1不同浓度三叶片对S.aureus和E.coli的抑菌活性
注:“-”表示无抑菌作用。
根据评价指标:抑菌圈直径>20mm为极度敏感,>15~20mm为高度敏感,10~15mm为中度敏感,<10mm为耐药。从表1可知,三叶片对S.aureus有较明显的抑制作用,对E.coli的抑制作用较弱。在S.aureus抑菌实验中,200、100mg/mL表现为高度敏感,50、25、12.5mg/mL表现为中度敏感,其余浓度表现为无抑菌活性。在E.coli抑菌实验中,200mg/mL表现为中度敏感,100、50mg/mL三叶片具有耐药作用,其余浓度表现为无抑菌活性。两组实验中,抑菌作用随三叶片浓度的增加而增加。为进一步挖掘三叶片抑菌作用主要成分,后续均以浓度200mg/mL进行实验。
2.2相同浓度不同药材组成的抑菌活性
由“2.1”结果可知三叶片对S.aureus和E.coli有明显的抑菌活性,为了进一步探究三叶片中发挥抑菌作用的主要成分,考察了不同药材组成对两种菌株的抑菌效果,结果见表2。
表2 200mg/mL的不同药材组成对S.aureus和E.coli的抑菌活性
注:“-”表示无抑菌作用。
从表2可知,相同质量浓度下,当药物组成中含有丹参、赤芍两味药时,其抑菌活性明显增加。丹参+赤芍药物组合对两种菌株的抑菌活性远高于其他组。提示三叶片中发挥抑菌作用的主要成分来源于丹参、赤芍。
2.3三叶片中不同药材的抑菌活性
根据“2.2”实验结果可知,丹参、赤芍两味药对两种菌株抑菌效果较好。为进一步明确三叶片中各药材的抑菌效果,考察了相同浓度不同药材的抑菌活性。结果见表3。
表3 200mg/mL的各单味药对S.aureus和E.coli的抑菌活性
注:“-”表示无抑菌作用。
由表3可知,丹参、赤芍两味药的抑菌活性均优于三叶片。结合表2,发现单味药丹参对S.aureus的抑菌效果与丹参+赤芍药物组合抑菌效果相当,单味药赤芍对E.coli的抑菌效果弱于丹参+赤芍药物组合,因此丹参、赤芍在抑制S.aureus和E.coli具有协同作用。
实施例3体外实验研究三叶片对K.pneumoniae的抑菌作用
3.1三叶片中不同药材对K.pneumoniae的抑菌活性
进一步验证丹参赤芍药物组合的协同作用,以K.pneumoniae为研究对象,研究三叶片中丹参、赤芍及丹参+赤芍药物组合的抑菌作用。结果见表4、表5。
表4三叶片分别与桑荷、山楂叶、丹参、赤芍单味药对比
表5三叶片中有效成分两两结合药效对比
通过表4和表5能够看出丹参+赤芍药物组合抑制K.pneumonia效果优于三叶片或丹参、赤芍单味药给药效果,且优于三叶片其它成分两两组合的效果。证明丹参赤芍在抑制K.pneumonia能够起到协同作用。
实施例4体外实验研究三叶片对S.aureus的抑菌作用
将三叶片与其单味药桑荷、山楂叶、丹参、赤芍对S.aureus的抑菌效果进行比较,此外还对比了三叶片与桑叶荷叶+山楂叶、桑叶荷叶+丹参、桑叶荷叶+赤芍、山楂叶+赤芍、山楂叶+丹参、丹参+赤芍两两组合的抑菌效果,探究三叶片中药物组合抑制S.aureus的协同作用。
表6三叶片与桑叶荷叶、山楂叶、丹参、赤芍单味药对比
表7三叶片中有效成分两两结合药效对比
通过表6和表7能够看出丹参+赤芍组合的抑制金黄色葡萄球菌效果优于三叶片,与丹参、赤芍单个给药效果相当,优于三叶片其它成分两两组合的效果。丹参赤芍在抑制金黄色葡萄球菌能够起到协同作用。
实施例5体外实验研究三叶片对E.coli的抑菌作用
将三叶片与其单味药桑荷、山楂叶、丹参、赤芍对E.coli的抑菌效果进行比较,此外还对比了三叶片与桑叶荷叶+山楂叶、桑叶荷叶+丹参、桑叶荷叶+赤芍、山楂叶+赤芍、山楂叶+丹参、丹参+赤芍两两组合的抑菌效果,探究三叶片中药物组合抑制E.coli的协同作用。
表8三叶片与桑叶荷叶、山楂叶、丹参、赤芍单味药对比
表9三叶片中有效成分两两结合药效对比
通过表8和表9能够看出丹参+赤芍组合抑制大肠杆菌的效果优于三叶片或丹参、赤芍单个给药效果,且优于三叶片其它成分两两组合的效果。丹参+赤芍在抑制大肠杆菌能够起到协同作用。
Claims (7)
1.一种药物组合物,其特征在于:该抑菌药物按照重量份计,药物组合物包括丹参或赤芍中的一种或两种,还包括桑叶,荷叶,山楂叶中的一种或多种;药物组合物包括:桑叶2~30份,荷叶2~30份,山楂叶2~30份,丹参2~30份,赤芍2~30份。
2.根据权利要求1所述的一种药物组合物,其特征在于:该抑菌药物按照重量份计,药物组合物包括丹参和赤芍。
3.根据权利要求1或权利要求2任一项所述的一种药物组合物,其特征在于:药物组合物由一种或多种药用赋形剂混合制成片剂、颗粒剂、胶囊、丸剂、口服液、分散片、口崩片、滴丸中的任一种。
4.根据权利要求1或权利要求2任一项所述的一种药物组合物应用于肠道菌群失调的药物的制备。
5.根据权利要求1或权利要求2任一项所述的一种药物组合物应用于肠道菌群失调导致的腹泻、胃肠功能紊乱以及消化不良药物的制备。
6.根据权利要求5所述的一种药物组合物及在抑菌药物制备中的应用,其特征在于:药物组合物具有抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌的表现。
7.根据权利要求1所述的一种药物组合物,其特征在于:药物组合物在抑菌药物中的有效成分至少为12.5mg/mL,有效成分为该药物组合物的提取物。
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