CN116982558A - 一种降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率的组培方法 - Google Patents
一种降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率的组培方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116982558A CN116982558A CN202311119624.0A CN202311119624A CN116982558A CN 116982558 A CN116982558 A CN 116982558A CN 202311119624 A CN202311119624 A CN 202311119624A CN 116982558 A CN116982558 A CN 116982558A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tissue culture
- polyploid
- arundo donax
- reducing
- variation rate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
- 241001494508 Arundo donax Species 0.000 title claims abstract description 26
- 208000020584 Polyploidy Diseases 0.000 title claims abstract description 20
- 238000012136 culture method Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 title claims abstract description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 14
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 claims abstract description 5
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 claims abstract description 5
- CGIDKJRJBMFXKV-UHFFFAOYSA-N 6-n'-benzylpurine-6,6-diamine Chemical compound N1=CN=C2N=CN=C2C1(N)NCC1=CC=CC=C1 CGIDKJRJBMFXKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 4
- JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N indole-3-butyric acid Chemical compound C1=CC=C2C(CCCC(=O)O)=CNC2=C1 JTEDVYBZBROSJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 15
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 5
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000012883 rooting culture medium Substances 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- 239000012879 subculture medium Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001494510 Arundo Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000209504 Poaceae Species 0.000 description 1
- 108091036333 Rapid DNA Proteins 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000000446 fuel Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公布了一种降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率的组培方法，其特征在于在组培的继代培养期间使用专用的培养基并适时将腺嘌呤溶液逐步加入该培养基。上述降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率的组培方法，具有降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率至1‰以下，避免了多倍体芦竹种植户由于芦竹组培苗发生体细胞无性系变异遭受损失。
Description
技术领域
本发明涉及植物的组织培养技术领域，尤其涉及降低多倍体芦竹组培时体细胞无性系变异率的方法。
背景技术
芦竹(Arundo donax)是禾本科芦竹属，多倍体芦竹是利用普通野生芦竹通过人工诱导使染色体数目加倍而得。多倍体芦竹根系发达，除了具有普通芦竹耐旱、耐涝，耐盐碱等特点外，还具有植株高大粗壮、产量高、嫩苗期粗蛋白质含量高等独特的优点，可用于饲料、燃料、造纸等多种行业，是很有前景的经济作物。为了短时间内获得大量一致的无病毒多倍体芦竹种苗，必须通过组培的方式进行扩繁，关于普通芦竹组培扩繁的文献和专利已有多人公开发表，但未见有针对多倍体芦竹组培的相关文献，尤其是未见关于降低多倍体芦竹组培中常见的体细胞无性系变异率的文献，而由于多倍体芦竹体细胞内含有三个以上染色体组，在通过组培扩繁时极易发生体细胞无性系变异（以下简称变异），变异的组培苗无法保持原种的特性，常见的情况是变异植株的地下茎扩展慢且植株矮小，产量极低；而且该变异性状往往在种植后第二年到第三年才表现明显，给种植户带来巨大的经济损失。
发明内容
为了降低多倍体芦竹组培苗的变异率并兼顾扩繁的效率，组培时的继代培养的培养基组分是关键，本发明提供了一种多倍体芦竹组培快繁的继代培养专用培养基及组培方法：所述组培继代培养专用培养基由MS基本培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)4.0mg·L-1+吲哚丁酸(IBA) 1.0mg·L-1+蔗糖 30g·L-1+琼脂 6.0g·L-1组成，适时往上述继代培养专用培养基加入腺嘌呤2.0mg·L-1溶液。
实施方式
多倍体芦竹快速繁殖培养方法包括如下步骤：1)外植体的选择和消毒：在春季和夏初季节选取粗壮的多倍体芦竹带腋芽茎段作为外植体，在流水下冲洗 1小时后，移入超净工作台中，在 70-75％的酒精中浸泡 20s取出后再置于质量浓度为 0.2％的 HgCl2中浸泡 10min，取出，再用无菌水冲洗 5次；2）初代培养：在无菌条件下，切取 2-3cm带腋芽茎段，剥除腋芽的叶鞘，接种在MS+6-BA4 mg·L-1+蔗糖 30g·L-1+琼脂3.5 g·L-1，pH 5.8的初代培养基的培养瓶中，接种后材料置于温度 25±2°C、光照时间 12h/d、光照强度35μmol·m-2·s-1的条件下培养，28-30天后，获得无菌嫩芽；3)继代培养：将经过初代诱导获得的嫩芽从基部剪下，剪除上部茎叶，保留距基部1.5~2.0cm 部分，按 3~5 芽一丛，转移至装有本发明所述的继代培养专用培养基的培养瓶中，接种后材料置于温度 25±2°C、光照时间 15 h/d、光照强度 20 μmol·m-2·s-1的条件下培养，从接种后 24小时开始，将浓度为 2.0mg/L-1的腺嘌呤溶液每隔 48小时加入继代培养专用培养基一次，25-30天后，得到高度为 3-6cm的丛生苗，繁殖系数为 3.0，所得丛生苗粗壮、叶大，生长良好；4）将所得丛生苗分株，转入生根培养基中，光照培养 8天，得到芦竹生根苗，所得生根苗的主根壮、须根多，植株生长良好；其中：所述的生根培养基配方为：1/2MS+NAA0.2mg·L-1+蔗糖 20g·L-1+琼脂 6.0g·L-1+活性炭 1g·L-1，pH5.8；光照培养条件为温度为 25±2°C，光照时间为15h/d，光照强度为 35μmol·m-2·s-1；5）将所得生根苗按常规方法进行炼苗，即得到多倍体芦竹种苗。
本发明的有益之处在于：本发明的专用继代培养基在 MS基本培养基添加常用剂量生长调节物质的基础上，分批次加入了浓度为 2.0mg·L-1的 腺嘌呤溶液，在组培的继代培养阶段为外植体腋芽中的体细胞内 DNA快速合成提供充足的核酸前体物，防止 DNA快速复制过程发生体细胞无性系变异，利用本发明所述的继代培养专用培养基可将多倍体芦竹组培苗的变异率降到 1‰以下。
Claims (1)
1.一种降低多倍体芦竹组培时体细胞无性系变异率的组培方法，其特征在于在组培的继代培养阶段使用MS基本培养基+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)4.0mg·L-1+吲哚丁酸(IBA)1.0mg·L-1+蔗糖 30g·L-1+琼脂 6.0g·L-1作为继代培养基并在该培养基中加入 腺嘌呤2.0mg·L-1溶液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311119624.0A CN116982558A (zh) | 2023-09-01 | 2023-09-01 | 一种降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率的组培方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311119624.0A CN116982558A (zh) | 2023-09-01 | 2023-09-01 | 一种降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率的组培方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116982558A true CN116982558A (zh) | 2023-11-03 |
Family
ID=88526826
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311119624.0A Withdrawn CN116982558A (zh) | 2023-09-01 | 2023-09-01 | 一种降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率的组培方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116982558A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013016198A1 (en) * | 2011-07-22 | 2013-01-31 | Booshoot Llc | Compositions, methods, and systems for micropropagation of plants |
| CN106171982A (zh) * | 2016-07-12 | 2016-12-07 | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 | 芦竹种苗的培育方法 |
| CN109618929A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-16 | 武汉博立达农业科技发展有限公司 | 三倍体芦竹的培育方法 |
| CN110122334A (zh) * | 2019-06-20 | 2019-08-16 | 运城学院 | 一种芦竹快速繁殖专用培养基及其培养方法 |
| WO2023056236A1 (en) * | 2021-09-28 | 2023-04-06 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Seedling germination and growth conditions |
-
2023
- 2023-09-01 CN CN202311119624.0A patent/CN116982558A/zh not_active Withdrawn
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013016198A1 (en) * | 2011-07-22 | 2013-01-31 | Booshoot Llc | Compositions, methods, and systems for micropropagation of plants |
| CN106171982A (zh) * | 2016-07-12 | 2016-12-07 | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 | 芦竹种苗的培育方法 |
| CN109618929A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-04-16 | 武汉博立达农业科技发展有限公司 | 三倍体芦竹的培育方法 |
| CN110122334A (zh) * | 2019-06-20 | 2019-08-16 | 运城学院 | 一种芦竹快速繁殖专用培养基及其培养方法 |
| WO2023056236A1 (en) * | 2021-09-28 | 2023-04-06 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Seedling germination and growth conditions |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 孙振等: "多倍体芦竹体细胞胚发生的微繁技术研究", 农业科技通讯, no. 07, pages 73 - 76 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Smith et al. | Sorghum plant regeneration from aluminum selection media | |
| AU2021104759A4 (en) | A Medium for Tissue Culture of Actinidia Arguta | |
| Mori et al. | Callus formation and plant regeneration in various Lilium species and cultivars | |
| CN110982835A (zh) | 一种减少农杆菌转化过程中大麦、青稞小孢子愈伤污染的方法 | |
| CN108085334B (zh) | 一种改良的农杆菌转化大麦小孢子方法 | |
| CN113796306B (zh) | 一种利用寒地水稻种质资源培育黄淮粳稻品种的育种方法 | |
| CN109536391B (zh) | 一种用于促进蝴蝶兰原球茎生长的真菌及其应用 | |
| CN117178892B (zh) | 一种白颖苔草组织培养的方法 | |
| CN112385544A (zh) | 一种杂交水稻花药培养方法 | |
| CN106258976B (zh) | 一种芥菜型油菜的组织培养快速育苗方法 | |
| CN114698549B (zh) | 一种葡萄砧木茎段快繁的组培培养基和组培方法 | |
| CN109526745B (zh) | 一种以七叶一枝花叶片繁殖种苗的方法 | |
| CN101904302B (zh) | 一种药用植物北五味子体细胞胚发生和植株再生方法 | |
| CN116982558A (zh) | 一种降低多倍体芦竹体细胞无性系变异率的组培方法 | |
| CN111149703B (zh) | 一种简便高效高质量的番木瓜组培苗生根方法 | |
| CN115176704A (zh) | 一种组培杨树品种‘森海2号’的方法 | |
| CN112119914B (zh) | 一种高产、抗病芒果树苗的快速选育方法 | |
| CN115058381A (zh) | 一种小黑杨单倍体细胞系的获得方法 | |
| CN1322136C (zh) | 一种建立早熟禾遗传转化体系的方法及应用 | |
| CN102925454A (zh) | 基因OsBBX22b在降低水稻株高方面的应用 | |
| CN104322369A (zh) | 一种钻天柳茎段组培快繁的方法 | |
| CN102492703B (zh) | 基因OsSRK1在控制水稻叶片长度和宽度中的应用 | |
| CN116790621B (zh) | 水稻OsZF基因在调控种子大小中的应用 | |
| Cassells et al. | Screening for virus resistance in tissue culture adventitious regenerants and their progeny | |
| CN118077582B (zh) | 一种龙牙蕉植株再生的培养基组合及其植株再生方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication | ||
| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication |
Application publication date: 20231103 |