CN116963745A - 抗体的新型组合及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明总体上涉及抗体组合及其用途。

Description

抗体的新型组合及其用途
本发明总体上涉及以下的组合：第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。本发明还涉及一种组合，该组合包括：第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；以及第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合，其中第二抗体分子可以以低于耐受治疗剂量的剂量使用。
使用治疗性抗体的免疫疗法已经提高了患有血液癌和实体癌患者的存活率。临床上成功的抗体通过直接靶向肿瘤细胞[1-4]，或通过靶向并活化在肿瘤微环境中寻找并杀伤癌细胞的免疫细胞(所谓的“免疫检查点抗体”)来发挥抗肿瘤活性[5-13]。虽然这两种类型的抗体都具有很强的癌症治疗潜力，但很大一部分患者在治疗过程中未能做出反应或产生抗性[14-17]。
人们早已经知道FcγR在控制肿瘤靶向抗体的治疗活性中发挥着关键作用。然而，FcγR控制免疫调节抗体(例如靶向免疫抑制检查点CTLA-4和PD-1/PD-L1的免疫调节抗体)的功效和抗性的作用是不太可预测的。靶向CTLA-4、PD-1和PD-L1的抗体是基于其阻断效应T细胞中的抑制信号传导的能力而开发的，即“松开免疫系统的刹车”以根除癌细胞，而癌细胞本身通常不表达CTLA-4、PD-1/PD-L1或FcγR。
因此，令人惊讶的是，发明人最近报道了FcγR在CTLA-4特异性抗体伊匹木单抗(ipilimumab)的治疗活性基础上的作用[18]。尽管黑素瘤肿瘤对CTLA-4呈阴性，但是表达活化FcγRIIIA的高亲和力单核苷酸多态性(SNP)的黑素瘤患者对伊匹木单抗疗法的反应显示出存活率提高。相反，针对PD-1的抗体的独立研究表明，FcγR在其抗肿瘤活性中起到不利作用，所提出的活化和抑制性FcγR的基本机制和作用相互矛盾[19,20]。因此，FcγR阻断对抗CTLA-4和抗PD-1/PD-L1抗体治疗效果的影响是不可预测的。
在此背景下，发明人评估了使用FcγR特异性抗体的FcγR阻断对体内抗CTLA-4和PD-1抗体的治疗活性的影响。令人惊讶的是，已经发现在组合使用抗CTLA-4和抗PD1/PD-L1抗体时，使用针对沉默的Fc:FcγR接合而工程改造的抗体进行FcγR阻断增强抗CTLA-4和抗PD1/PD-L1抗体的治疗活性。这对于用抗CTLA-4和抗PD1/PD-L1抗体治疗具有抗性的患者的治疗具有意义。此外，发明人还发现，使用针对沉默的Fc:FcγR接合而工程改造的抗体进行FcγR阻断出乎意料地允许使用较低治疗剂量的抗CTLA-4抗体，从而降低不希望的副作用和毒性的可能性。
如上文所讨论的，本发明总体上涉及一种包括第一抗体分子、第二抗体分子和第三抗体分子的组合。下面讨论与此相关的本发明的第一至第七方面：
在第一方面，本发明提供了一种组合，该组合包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其中癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
在第二方面，本发明提供了以下抗体分子的用途：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于制造用于治疗患者的癌症的药物，其中该癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
在第三方面，本发明提供了一种用于治疗患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
其中癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
在第四方面，本发明提供了一种第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于与以下组合使用：
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其中癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
在第五方面，本发明提供了一种第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于治疗患者的癌症；其特征在于第一抗体分子降低和/或防止该癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子治疗的抗性。
在第六方面，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合
在第七方面，本发明提供了一种试剂盒，该试剂盒包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。
本文所述的第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少。在本领域中，Fc受体作为膜蛋白是已知的，其存在于免疫效应细胞例如巨噬细胞的细胞表面。该名称来源于它们对抗体Fc区的结合特异性，这是抗体与受体结合的通常方式。然而，在抗体与一种或多种Fc受体特异性结合的情况下，某些抗体也可以经由抗体的CDR序列与Fc受体结合。
Fc受体的亚群是Fcγ受体(Fc-gamma受体，FcgammaR)，其对IgG抗体有特异性。存在两种类型的Fcγ受体：活化Fcγ受体(也表示活化的Fcγ受体)和抑制性Fcγ受体。活化和抑制受体分别通过免疫受体酪氨酸基活化基序(ITAM)或免疫受体酪氨酸基抑制基序(ITIM)传递信号。在人类中，FcγRIIb(CD32b)是抑制性的Fcγ受体，而FcγRI(CD64)、FcγRIIa(CD32a)、FcγRIIc(CD32c)、FcγRIIIa(CD16a)和FcγRIV是活化的Fcγ受体。FcγγRIIIb是中性粒细胞上表达的GPI连接受体，缺乏ITAM基序，但通过其交联脂筏和与其他受体结合的能力也被认为是活化的。在小鼠中，活化受体是FcγRI、FcγRIII和FcγRIV。
众所周知，抗体通过与Fcγ受体相互作用来调节免疫细胞活性。具体地，抗体免疫复合物如何调节免疫细胞的活化取决于其活化和抑制Fcγ受体的相对接合。不同的抗体同种型以不同的亲和力结合以活化和抑制Fcγ受体，导致不同的A:I比率(活化：抑制比率)(Nimmerjahn等人；Science.2005年12月2日；310(5753):1510-2)。
通过与抑制性Fcγ受体结合，抗体可以抑制、阻断和/或下调效应细胞的功能。
通过与活化的Fcγ受体结合，抗体可活化效应细胞功能，从而触发如抗体依赖的细胞毒性(ADCC)、抗体依赖的细胞吞噬作用(ADCP)、细胞因子释放和/或抗体依赖的内吞作用以及在嗜中性粒细胞情况下的网状结构(即，网状结构、嗜中性粒细胞细胞外陷阱的活化和释放)的机制。与活化的Fcγ受体结合的抗体也可导致某些活化标记物的增加，如CD40、MHCII、CD38、CD80和/或CD86。
特异性结合FcγRIIb的根据本发明的第一抗体分子经由抗体的Fab区，即经由结合抗原的抗体上的抗原结合区，与此Fcγ受体结合或相互作用，该抗原结合区由重链和轻链中的每一者的一个恒定结构域和一个可变结构域组成。特别地，它与免疫效应细胞上存在的FcγRIIb结合，并且特别是与免疫效应细胞表面上存在的FcγRIIb结合。如果该抗体将具有通常或普通的Fc区，则该抗体也可以已经通过Fc区与Fc受体之间的正常相互作用与活化的Fcγ受体结合。然而，根据本发明，特异性结合FcγRIIb的抗体分子完全缺乏Fc区或与Fcγ受体的结合减少，这意味着经由Fab区与FcγRIIb特异性结合或与其相互作用的抗体分子与Fcγ受体的结合较差或根本不能与其结合或与其相互作用。这似乎具有至少两个治疗上重要的后果：
1)缺乏Fc介导的与活化FcγR的结合，留下可用于与(其他)治疗性抗癌抗体(例如如本文定义的第二抗体分子和/或第三抗体分子)的Fc结合的更大数量的活化Fcγ受体。这是重要的，因为已知越来越多的活化性FcγR(相对于抑制性FcγR；Nimmerjahn等人；Science.2005年12月2日；310(5753):1510-2)的聚集增加效应细胞介导的靶细胞缺失——作为检查点抑制剂、免疫激动剂和其他免疫调节抗体(诸如抗IL-2R)的活性的基础的一种机制。
2)缺乏或减少Fc介导的与抑制性FcγR的结合示出了在表达FcγR的免疫效应细胞中减少抑制性信号传导。因此，缺乏或减少Fc介导的与FcγRIIB靶向抗体的FcγR的结合可能通过至少两种机制改善治疗功效，所述至少两种机制涉及响应于第二种免疫调节抗癌抗体的免疫效应细胞中的改善的活化性FcγR和减少的抑制性Fcγ信号传导两者。
在本发明的上述第一至第七方面的情况下，这是有利的，因为其允许特异性结合CTLA-4(和/或PD-1/PD-L1，在一些实施例中)的抗体均将其靶分子结合在免疫效应细胞上，这上调了对癌细胞的免疫应答，并且还允许这些抗体与活化FcγR特异性结合，进一步上调了免疫应答。这种效果可以令人惊讶地恢复特异性结合CTLA-4/PD-1/PD-L1的抗体对此类疗法具有抗性的患者的治疗效果。
“缺乏Fc区”包括不具有Fc区的任何抗体或其抗体片段，因此其阻止Fc介导的抗体或抗体片段与Fcγ受体的结合。此类抗体保留经由Fab区与FcγRIIb的特异性结合。缺乏Fc区并且与本发明的该实施例相容的抗体片段的实例包括但不限于：Fab、Fab'、F(ab)2、Fv、scFv、dsFv、VH、VL或其PEGYLATED版本。
“降低与Fcγ受体的结合”(也称为“亲和力降低的结合”)包括抗体分子具有降低的Fc介导的与Fcγ受体的结合，或者换句话说，与FcγRIIb特异性结合的抗体分子的Fc区与活化的Fcγ受体结合的亲和力低于正常人类IgG1的Fc区。结合的减少可以使用如表面等离子共振的技术来评估。在本文中,“正常IgG1”是指常规产生的具有未突变Fc区的IgG1，其产生不会改变其糖基化。作为这种“正常IgG1”的参照，可以使用在CHO细胞中产生的未经任何修饰的利妥昔单抗(Tipton等人，《血液(Blood)》,2015125:1901-1909；例如，在EP 0 605 442中描述了利妥昔单抗。与人类IgG1相比，人类IgG2和人类IgG4是与Fcγ受体结合的亲和力降低的抗体同种型的实例。因此，基于人类IgG2和IgG4的抗体在该术语的意义上具有“降低的与Fcγ受体的结合”。
“结合减少”可以是指与正常人IgG1的Fc区与相同受体的结合相比，对于所有Fc受体，特异性结合FcγRIIb的抗体分子的Fc区与活化Fcγ受体的结合减少了至少10倍。在一些实施例中，其减少了至少20倍。在一些实施例中，其减少了至少30倍。在一些实施例中，其减少了至少40倍。在一些实施例中，其减少了至少50倍。在一些实施例中，其减少了至少60倍。在一些实施例中，其减少了至少70倍。
在一些实施例中，特异性结合FcγRIIb的抗体分子可以是llama抗体，并且特别是llama hcIgG。与所有哺乳动物一样，骆驼科动物产生由两条重链和两条轻链构成的常规抗体，所述两条重链和两条轻链以Y形(IgG1)用二硫键结合在一起。然而，它们还产生免疫球蛋白G的两个独特亚类IgG2和IgG3，也被称为重链IgG(hcIgG)。这些抗体仅由两条重链构成，所述两条重链缺乏CH1区但仍在其N末端带有称为VHH的抗原结合结构域。常规的Ig需要来自重链和轻链两者的可变区的缔合，以允许抗原-抗体相互作用的高多样性。尽管分离的重链和轻链仍显示出这种能力，但是当与成对的重链和轻链相比较时，其表现出非常低的亲和力4。hcIgG的独特特征是其单体抗原结合区以特异性、亲和力和特别地多样性结合抗原的能力，其与不需要与另一区配对的常规抗体相当。
在一些实施例中，结合减少意味着抗体关于与FcγRI的结合的亲和力减少了20倍。
为了获得IgG抗体(诸如IgG1或IgG2抗体)与Fc受体的结合减少，通过去糖基化来修饰IgG抗体的Fc区是可能的。此类去糖基化，例如IgG1抗体的去糖基化，可以例如通过抗体链中位置297(N297X)的天冬酰胺的氨基酸取代来实现。该取代可以用谷氨酰胺(N297Q)、或用丙氨酸(N297A)、或用甘氨酸(N297G)、或用天冬酰胺(N297D)、或用丝氨酸(N297S)进行。在一些优选的实施例中，该取代用谷氨酰胺(N297Q)进行。
Fc区可通过进一步取代进行修饰，例如，如由Jacobsen FW等人，JBC 2017,292,1865-1875(参见例如表1)描述。此类另外的取代包括L242C、V259C、A287C、R292C、V302C、L306C、V323C、I332C和/或K334C。此类修饰还包括IgG1中的以下取代组合：
L242C、N297G、K334C，
A287C、N297G、L306C，
R292C、N297G、V302C，
N297G、V323C、I332C，和
V259C、N297G、L306C。
替代地，可以酶促裂解Fc区中的碳水化合物和/或用于产生抗体的细胞可以在削弱碳水化合物添加的培养基中生长和/或被工程改造为缺乏添加糖的能力的细胞可以用于抗体产生，或通过在不糖基化或功能上不糖基化抗体的宿主细胞中产生抗体，例如包含大肠杆菌的原核生物，如上文所解释的。
对Fcγ受体的亲和力的减少可以进一步通过工程改造抗体Fc区中的氨基酸来实现(此类修饰先前已经通过Xencor公司、Macrogenics公司和Genentech公司进行描述)，或通过在不糖基化或功能上不糖基化抗体的宿主细胞中产生抗体，例如包含大肠杆菌的原核生物。
除了通过Fc区与Fcγ受体的结合减少之外，在一些实施例中，优选的是特异性结合FcγRIIb的抗体分子在与靶标结合时不引起FcγRIIb的磷酸化。FcγRIIb的ITIM的磷酸化是阻断免疫细胞中的活性的抑制性事件。
Fcγ受体表达性免疫效应细胞在本文中主要是指先天效应细胞，并且具体地包含巨噬细胞、中性粒细胞、单核细胞、自然杀伤(NK)细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和血小板。细胞毒性T细胞和记忆T细胞通常不表达FcγR，但在特定情况下可能会表达。在一些实施例中，免疫效应细胞是先天免疫效应细胞。在一些实施例中，免疫效应细胞是巨噬细胞。
在一些实施例中，与FcγRIIb特异性结合的抗体分子是人类抗体。
在一些实施例中，与FcγRIIb特异性结合的抗体分子是人类源抗体，即如本文所述进行了修饰的原始人类抗体。
在一些实施例中，与FcγRIIb特异性结合的抗体分子是人源化抗体，即进行了修饰以增加其与人类抗体类似性的原始非人类抗体。人源化抗体可以是例如鼠类抗体或美洲驼抗体。
如上所述，第一抗体可以是单克隆抗体或单克隆来源的抗体分子。
在一些实施例中，特异性结合FcγRIIb的抗体分子包含以下恒定区(CH和CL)：
IgG1-CH[SEQ ID NO:1]
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
IgG1-CL[SEQ ID NO:2]
QPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTT PSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS
这些恒定区(SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2)是人来源的。Fc区经过进一步修饰，以减少经由其Fc区与Fcγ受体的结合。如本文所述，在一些实施例中优选的是SEQ ID NO:1已通过N297Q取代而去糖基化，并且IgG1-CH则具有以下CH序列[SEQ ID NO:195]，其中以粗体标记了297Q残基：
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
在一些实施例和/或实例中，使用鼠抗体分子。这些鼠抗体分子也可以用于替代抗体。然后，这些鼠抗体分子可以包括以下恒定区(CH和CL)：
CH[SEQ ID NO：196]
AKTTAPSVYPLAPVCGDTTGSSVTLGCLVKGYFPEPVTLTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVTSSTWPSQSITCNVAHPASSTKVDKKIEPRGPTIKPCPPCKCPAPNLLGGPSVFIFPPKIKDVLMISLSPIVTCVVVDVSEDDPDVQISWFVNNVEVHTAQTQTHREDYASTLRVVSALPIQHQDWMSGKEFKCKVNNKDLPAPIERTISKPKGSVRAPQVYVLPPPEEEMTKKQVTLTCMVTDFMPEDIYVEWTNNGKTELNYKNTEPVLDSDGSYFMYSKLRVEKKNWVERNSYSCSVVHEGLHNHHTTKSFSRTPGK
CL[SEQ ID NO：197]
QPKSSPSVTLFPPSSEELETNKATLVCTITDFYPGVVTVDWKVDGTPVTQGMETTQPSKQSNNKYMASSYLTLTARAWERHSSYSCQVTHEGHTVEKSLSRADCS
因此，这些恒定区(SEQ ID NO：196和SEQ ID NO：197)是鼠来源的。SEQ ID NO：196包含N297A突变(在上述序列中以粗体标记了297A残基)。鼠序列中的N297A突变对应于人序列中的N297Q突变。
在一些实施例中，特异性结合FcγRIIb的抗体分子包含以下克隆的一种或多种序列：
抗体克隆：1A01
1A01-VH[SEQ ID NO：3]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMNWIRQTPGKGLEWVSLIGWDGGSTYYADSVKGRFTISRDNSENTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARAYSGYELDYWGQGTLVTVSS
1A01-VL[SEQ ID NO：27]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGNNAVNWYQQLPGTAPKLLIYDNNNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNASIFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：DYYMN[SEQ ID NO：51]
CDRH2：LIGWDGGSTYYADSVKG[SEQ ID NO：52]
CDRH3：AYSGYELDY[SEQ ID NO：53]
CDRL1：SGSSSNIGNNAVN[SEQ ID NO：54]
CDRL2：DNNNRPS[SEQ ID NO：55]
CDRL3：AAWDDSLNASI[SEQ ID NO：56]
抗体克隆：1B07
1B07-VH[SEQ ID NO：4]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAFTRYDGSNKYYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARENIDAFDVWGQGTLVTVSS
1B07-VL[SEQ ID NO：28]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGNNAVNWYQQLPGTAPKLLIYDNQQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCEAWDDRLFGPVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：57]
CDRH2：FTRYDGSNKYYADSVRG[SEQ ID NO：58]
CDRH3：ENIDAFDV[SEQ ID NO：59]
CDRL1：SGSSSNIGNNAVN[SEQ ID NO：60]
CDRL2：DNQQRPS[SEQ ID NO：61]
CDRL3：WDDRLFGPV[SEQ ID NO：62]
抗体克隆：1C04
1C04-VH[SEQ ID NO：5]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSSISDSGAGRYYADSVEGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARTHDSGELLDAFDIWGQGTLVTVSS
1C04-VL[SEQ ID NO：29]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNHVLWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGWVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYAMS[SEQ ID NO：63]
CDRH2：SISDSGAGRYYADSVEG[SEQ ID NO：64]
CDRH3：THDSGELLDAFDI[SEQ ID NO：65]
CDRL1：SGSSSNIGSNHVL[SEQ ID NO：66]
CDRL2：GNSNRPS[SEQ ID NO：67]
CDRL3：AAWDDSLNGWV[SEQ ID NO：68]
抗体克隆：1E05
1E05-VH[SEQ ID NO：6]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTYAMNWVRQVPGKGLEWVAVISYDGSNKNYVDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARNFDNSGYAIPDAFDIWGQGTLVTVSS
1E05-VL[SEQ ID NO：30]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYDNNSRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLGGPVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：TYAMN[SEQ ID NO：69]
CDRH2：VISYDGSNKNYVDSVKG[SEQ ID NO：70]
CDRH3：NFDNSGYAIPDAFDI[SEQ ID NO：71]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：72]
CDRL2：DNNSRPS[SEQ ID NO：73]
CDRL3：AAWDDSLGGPV[SEQ ID NO：74]
抗体克隆：2A09
2A09-VH[SEQ ID NO：7]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNAWMSWVRQAPGKGLEWVAYISRDADITHYPASVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCTTGFDYAGDDAFDIWGQGTLVTVS S
2A09-VL[SEQ ID NO：31]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNAVNWYQQLPGTAPKLLIYGNSDRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGRWVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：NAWMS[SEQ ID NO：75]
CDRH2：YISRDADITHYPASVKG[SEQ ID NO：76]
CDRH3：GFDYAGDDAFDI[SEQ ID NO：77]
CDRL1：SGSSSNIGSNAVN[SEQ ID NO：78]
CDRL2：GNSDRPS[SEQ ID NO：79]
CDRL3：AAWDDSLNGRWV[SEQ ID NO：80]
抗体克隆：2B08
2B08-VH[SEQ ID NO：8]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWVRQAPGKGLEWVALIGHDGNNKYYLDSLEGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARATDSGYDLLYWGQGTLVTVSS
2B08-VL[SEQ ID NO：32]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGNNAVNWYQQLPGTAPKLLIYYDDLLPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCTTWDDSLSGVVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：DYYMS[SEQ ID NO：81]
CDRH2：LIGHDGNNKYYLDSLEG[SEQ ID NO：82]
CDRH3：ATDSGYDLLY[SEQ ID NO：83]
CDRL1：SGSSSNIGNNAVN[SEQ ID NO：84]
CDRL2：YDDLLPS[SEQ ID NO：85]
CDRL3：TTWDDSLSGVV[SEQ ID NO：86]
抗体克隆：2E8-VH
2E8-VH[SEQ ID NO：9]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDYYMSWIRQAPGKGLEWVSAIGFSDDNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAGGDGSGWSFWGQGTLVTVSS
2E8-VL[SEQ ID NO：33]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGNNAVNWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCATWDDSLRGWVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：DYYMS[SEQ ID NO：87]
CDRH2：AIGFSDDNTYYADSVKG[SEQ ID NO：88]
CDRH3：GDGSGWSF[SEQ ID NO：89]
CDRL1：SGSSSNIGNNAVN[SEQ ID NO：90]
CDRL2：DNNKRPS[SEQ ID NO：91]
CDRL3：ATWDDSLRGWV[SEQ ID NO：92]
抗体克隆：5C04
5C04-VH[SEQ ID NO：10]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREWRDAFDIWGQGTLVTVSS
5C04-VL[SEQ ID NO：34]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYSDNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSGSWVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：NYGMH[SEQ ID NO：93]
CDRH2：VISYDGSNKYYADSVKG[SEQ ID NO：94]
CDRH3：WRDAFDI[SEQ ID NO：95]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：96]
CDRL2：SDNQRPS[SEQ ID NO：97]
CDRL3：AAWDDSLSGSWV[SEQ ID NO：98]
抗体克隆：5C05
5C05-VH[SEQ ID NO：11]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARENFDAFDVWGQGTLVTVSS
5C05-VL[SEQ ID NO：35]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYSNSQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGQVVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：TYGMH[SEQ ID NO：99]
CDRH2：VISYDGSNKYYADSVKG[SEQ ID NO：100]
CDRH3：ENFDAFDV[SEQ ID NO：101]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：102]
CDRL2：SNSQRPS[SEQ ID NO：103]
CDRL3：AAWDDSLNGQVV[SEQ ID NO：104]
抗体克隆：5D07
5D07-VH[SEQ ID NO：12]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIAYDGSKKDYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREYRDAFDIWGQGTLVTVSS
5D07-VL[SEQ ID NO：36]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTTASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSVSGWMFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：TYGMH[SEQ ID NO：105]
CDRH2：VIAYDGSKKDYADSVKG[SEQ ID NO：106]
CDRH3：EYRDAFDI[SEQ ID NO：107]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：108]
CDRL2：GNSNRPS[SEQ ID NO：109]
CDRL3：AAWDDSVSGWM[SEQ ID NO：110]
抗体克隆：5E12
5E12-VH[SEQ ID NO：13]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGINKDYADSMKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERKDAFDIWGQGTLVTVSS
5E12-VL[SEQ ID NO：37]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCATWDDSLNGLVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：111]
CDRH2：VISYDGINKDYADSMKG[SEQ ID NO：112]
CDRH3：ERKDAFDI[SEQ ID NO：113]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：114]
CDRL2：SNNQRPS[SEQ ID NO：115]
CDRL3：ATWDDSLNGLV[SEQ ID NO：116]
抗体克隆：5G08
5G08-VH[SEQ ID NO：14]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFNNYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNRYYADSVKGRFTMSRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDRWNGMDVWGQGTLVTVSS
5G08-VL[SEQ ID NO：38]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYANNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGPWVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：NYGMH[SEQ ID NO：117]
CDRH2：VISYDGSNRYYADSVKG[SEQ ID NO：118]
CDRH3：DRWNGMDV[SEQ ID NO：119]
CDRL1：SGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：120]
CDRL2：ANNQRPS[SEQ ID NO：121]
CDRL3：AAWDDSLNGPWV[SEQ ID NO：122]
抗体克隆：5H06
5H06-VH[SEQ ID NO：15]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSDTAYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDHSVIGAFDIWGQGTLVTVSS
5H06-VL[SEQ ID NO：39]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCSSYAGSNNVVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：123]
CDRH2：VISYDGSDTAYADSVKG[SEQ ID NO：124]
CDRH3：DHSVIGAFDI[SEQ ID NO：125]
CDRL1：SGSSSNIGSNTVN[SEQ ID NO：126]
CDRL2：DNNKRPS[SEQ ID NO：127]
CDRL3：SSYAGSNNVV[SEQ ID NO：128]
抗体克隆：6A09
6A09-VH[SEQ ID NO：16]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVTSYDGNTKYYANSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREDCGGDCFDYWGQGTLVTVSS
6A09-VL[SEQ ID NO：40]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNEGVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：129]
CDRH2：VTSYDGNTKYYANSVKG[SEQ ID NO：130]
CDRH3：EDCGGDCFDY[SEQ ID NO：131]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：132]
CDRL2：GNSNRPS[SEQ ID NO：133]
CDRL3：AAWDDSLNEGV[SEQ ID NO：134]
抗体克隆：6B01
6B01-VH[SEQ ID NO：17]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDQLGEAFDIWGQGTLVTVSS
6B01-VL[SEQ ID NO：41]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCATWDDSLSGPVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：NYGMH[SEQ ID NO：135]
CDRH2：VISYDGSNKYYADSVKG[SEQ ID NO：136]
CDRH3：DQLGEAFDI[SEQ ID NO：137]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：138]
CDRL2：DNNKRPS[SEQ ID NO：139]
CDRL3：ATWDDSLSGPV[SEQ ID NO：140]
抗体克隆：6C11
6C11-VH[SEQ ID NO：18]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFDDYGMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGSSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAGGDIDYFDYWGQGTLVTVSS
6C11-VL[SEQ ID NO：42]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNFGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYENNKRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGPVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：DYGMS[SEQ ID NO：141]
CDRH2：AISGSGSSTYYADSVKG[SEQ ID NO：142]
CDRH3：GDIDYFDY[SEQ ID NO：143]
CDRL1：TGSSSNFGAGYDVH[SEQ ID NO：144]
CDRL2：ENNKRPS[SEQ ID NO：145]
CDRL3：AAWDDSLNGPV[SEQ ID NO：146]
抗体克隆：6C12
6C12-VH[SEQ ID NO：19]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERRDAFDIWGQGTLVTVSS
6C12-VL[SEQ ID NO：43]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYSDNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCATWDSDTPVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：147]
CDRH2：VISYDGSNKYYADSVKG[SEQ ID NO：148]
CDRH3：ERRDAFDI[SEQ ID NO：149]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：150]
CDRL2：SDNQRPS[SEQ ID NO：151]
CDRL3：ATWDSDTPV[SEQ ID NO：152]
抗体克隆：6D01
6D01-VH[SEQ ID NO：20]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAMYYCARDHSAAGYFDYWGQGTLVTVSS
6D01-VL[SEQ ID NO：44]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYQQLPGTAPKLLIYGNSIRPSGGPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCASWDDSLSSPVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：153]
CDRH2：VISYDGSNKYYADSVKG[SEQ ID NO：154]
CDRH3：DHSAAGYFDY[SEQ ID NO：155]
CDRL1：SGSSSNIGSNTVN[SEQ ID NO：156]
CDRL2：GNSIRPS[SEQ ID NO：157]
CDRL3：ASWDDSLSSPV[SEQ ID NO：158]
抗体克隆：6G03
6G03-VH[SEQ ID NO：21]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFGSYGMHWVRQAPGKGLEWVSGISWDSAIIDYAGSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKDEAAAGAFDIWGQGTLVTVSS
6G03-VL[SEQ ID NO：45]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNTDRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSGPVVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：159]
CDRH2：GISWDSAIIDYAGSVKG[SEQ ID NO：160]
CDRH3：DEAAAGAFDI[SEQ ID NO：161]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：162]
CDRL2：GNTDRPS[SEQ ID NO：163]
CDRL3：AAWDDSLSGPVV[SEQ ID NO：164]
抗体克隆：6G08
6G08-VH[SEQ ID NO：22]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTLSSYGISWVRQAPGKGLEWVSGISGSGGNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCASSVGAYANDAFDIWGQGTLVTVSS
6G08-VL[SEQ ID NO：46]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYGDTNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLNGPVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGIS[SEQ ID NO：165]
CDRH2：GISGSGGNTYYADSVKG[SEQ ID NO：166]
CDRH3：SVGAYANDAFDI[SEQ ID NO：167]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：168]
CDRL2：GDTNRPS[SEQ ID NO：169]
CDRL3：AAWDDSLNGPV[SEQ ID NO：170]
抗体克隆：6G11
6G11-VH[SEQ ID NO：23]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWMAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARELYDAFDIWGQGTLVTVSS
6G11-VL[SEQ ID NO：47]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGAGYDVHWYQQLPGTAPKLLIYADDHRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCASWDDSQRAVIFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：171]
CDRH2：VISYDGSNKYYADSVKG[SEQ ID NO：172]
CDRH3：ELYDAFDI[SEQ ID NO：173]
CDRL1：TGSSSNIGAGYDVH[SEQ ID NO：174]
CDRL2：ADDHRPS[SEQ ID NO：175]
CDRL3：ASWDDSQRAVI[SEQ ID NO：176]
抗体克隆：6H08
6H08-VH[SEQ ID NO：24]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFNNYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISKDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREYKDAFDIWGQGTLVTVSS
6H08-VL[SEQ ID NO：48]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCTGSSSNIGSNTVNWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCQAWGTGIRVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：NYGMH[SEQ ID NO：177]
CDRH2：VISYDGSNKYYAD SVKG[SEQ ID NO：178]
CDRH3：EYKDAFDI[SEQ ID NO：179]
CDRL1：TGSSSNIGSNTVN[SEQ ID NO：180]
CDRL2：DNNKRPS[SEQ ID NO：181]
CDRL3：QAWGTGIRV[SEQ ID NO：182]
抗体克隆：7C07
7C07-VH[SEQ ID NO：25]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSQNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREFGYIILDYWGQGTLVTVSS
7C07-VL[SEQ ID NO：49]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYQQLPGTAPKLLIYRDYERPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCMAWDDSLSGVVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：SYGMH[SEQ ID NO：183]
CDRH2：VISYDGSNKYYADSVKG[SEQ ID NO：184]
CDRH3：EFGYIILDY[SEQ ID NO：185]
CDRL1：SGSSSNIGSNTVN[SEQ ID NO：186]
CDRL2：RDYERPS[SEQ ID NO：187]
CDRL3：MAWDDSLSGVV[SEQ ID NO：188]
抗体克隆：4B02
4B02-VH[SEQ ID NO：26]
EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNHGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGTNKYYADSVRGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARETWDAFDVWGQGTLVTVSS
4B02-VL[SEQ ID NO：50]
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNNANWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCQAWDSSTVVFGGGTKLTVLG
CDR区
CDRH1：NHGMH[SEQ ID NO：189]
CDRH2：VISYDGTNKYYADSVRG[SEQ ID NO：190]
CDRH3：ETWDAFDV[SEQ ID NO：191]
CDRL1：SGSSSNIGSNNAN[SEQ ID NO：192]
CDRL2：DNNKRPS[SEQ ID NO：193]
CDRL3：QAWDSSTVV[SEQ ID NO：194]
因此，在一些实施例中，第一抗体分子可以包括包含以下CDR的可变重链(VH)：
(i)SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:53；或
(ii)SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59；或
(iii)SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65；或
(iv)SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70和SEQ ID NO:71；或
(v)SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77；或
(vi)SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；或
(vii)SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；或
(viii)SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94和SEQ ID NO:95；或
(ix)SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100和SEQ ID NO:101；或
(x)SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107；或
(xi)SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112和SEQ ID NO:113；或
(xii)SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119；或
(xiii)SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124和SEQ ID NO:125；或
(xiv)SEQ ID NO:129和SEQ ID NO:130和SEQ ID NO:131；或
(xv)SEQ ID NO:135和SEQ ID NO:136和SEQ ID NO:137；或
(xvi)SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:142和SEQ ID NO:143；或
(xvii)SEQ ID NO:147和SEQ ID NO:148和SEQ ID NO:149；或
(xviii)SEQ ID NO:153和SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155；或
(xix)SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160和SEQ ID NO:161；或
(xx)SEQ ID NO:165和SEQ ID NO:166和SEQ ID NO:167；或
(xxi)SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:172和SEQ ID NO:173；或
(xxii)SEQ ID NO:177和SEQ ID NO:178和SEQ ID NO:179；或
(xxiii)SEQ ID NO:183和SEQ ID NO:184和SEQ ID NO:185；或
(xxiv)SEQ ID NO:189和SEQ ID NO:190和SEQ ID NO:191。
在一些另外或替代的实施例中，第一抗体分子包括包含以下CDR的可变轻链(VL)：
(i)SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；或
(ii)SEQ ID NO:60和SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62；或
(iii)SEQ ID NO:66和SEQ ID NO:67和SEQ ID NO:68；或
(iv)SEQ ID NO:72和SEQ ID NO:73和SEQ ID NO:74；或
(v)SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80；或
(vi)SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:86；或
(vii)SEQ ID NO:90和SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92；或
(viii)SEQ ID NO:96和SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98；或
(ix)SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:103和SEQ ID NO:104；或
(x)SEQ ID NO:108和SEQ ID NO:109和SEQ ID NO:110；或
(xi)SEQ ID NO:114和SEQ ID NO:115和SEQ ID NO:116；或
(xii)SEQ ID NO:120和SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122；或
(xiii)SEQ ID NO:126和SEQ ID NO:127和SEQ ID NO:128；或
(xiv)SEQ ID NO:132和SEQ ID NO:133和SEQ ID NO:134；或
(xv)SEQ ID NO:138和SEQ ID NO:139和SEQ ID NO:140；或
(xvi)SEQ ID NO:144和SEQ ID NO:145和SEQ ID NO:146；或
(xvii)SEQ ID NO:150和SEQ ID NO:151和SEQ ID NO:152；或
(xviii)SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157和SEQ ID NO:158；或
(xix)SEQ ID NO:162和SEQ ID NO:163和SEQ ID NO:164；或
(xx)SEQ ID NO:168和SEQ ID NO:169和SEQ ID NO:170；或
(xxi)SEQ ID NO:174和SEQ ID NO:175和SEQ ID NO:176；或
(xxii)SEQ ID NO:180和SEQ ID NO:181和SEQ ID NO:182；或
(xxiii)SEQ ID NO:186和SEQ ID NO:187和SEQ ID NO:188；或
(xxiv)SEQ ID NO:192和SEQ ID NO:193和SEQ ID NO:194。
在一些另外或替代的实施例中，第一抗体分子包含选自由以下项组成的组的可变重链(VH)氨基酸序列：SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5；SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7；SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9；SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11；SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13；SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:15；SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17；SEQ ID NO:18；SEQ IDNO:19；SEQ ID NO:20；SEQ ID NO:21；SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23；SEQ ID NO:24；SEQ IDNO:25；和SEQ ID NO:26。
在一些另外或替代的实施例中，第一抗体分子包含选自由以下项组成的组的可变轻链(VL)氨基酸序列：SEQ ID NO:27；SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29；SEQ ID NO:30；SEQ IDNO:31；SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33；SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35；SEQ ID NO:36；SEQ IDNO:37；SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39；SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41；SEQ ID NO:42；SEQ IDNO:43；SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45；SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47；SEQ ID NO:48；SEQ IDNO:49；和SEQ ID NO:50。
在一些另外或替代的实施例中，第一抗体分子包含以下CDR氨基酸序列：
(i)SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；或
(ii)SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59和SEQ ID NO:60和SEQ IDNO:61和SEQ ID NO:62；或
(iii)SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65和SEQ ID NO:66和SEQ IDNO:67和SEQ ID NO:68；或
(iv)SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70和SEQ ID NO:71和SEQ ID NO:72和SEQ IDNO:73和SEQ ID NO:74；或
(v)SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77和SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80；或
(vi)SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83和SEQ ID NO:84和SEQ IDNO:85和SEQ ID NO:86；或
(vii)SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89和SEQ ID NO:90和SEQ IDNO:91和SEQ ID NO:92；或
(viii)SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94和SEQ ID NO:95和SEQ ID NO:96和SEQ IDNO:97和SEQ ID NO:98；或
(ix)SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100和SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:102和SEQ IDNO:103和SEQ ID NO:104；或
(x)SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107和SEQ ID NO:108和SEQ IDNO:109和SEQ ID NO:110；或
(xi)SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112和SEQ ID NO:113和SEQ ID NO:114和SEQID NO:115和SEQ ID NO:116；或
(xii)SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:120和SEQID NO:121和SEQ ID NO:122；或
(xiii)SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124和SEQ ID NO:125和SEQ ID NO:126和SEQID NO:127和SEQ ID NO:128；或
(xiv)SEQ ID NO:129和SEQ ID NO:130和SEQ ID NO:131和SEQ ID NO:132和SEQID NO:133和SEQ ID NO:134；或
(xv)SEQ ID NO:135和SEQ ID NO:136和SEQ ID NO:137和SEQ ID NO:138和SEQID NO:139和SEQ ID NO:140；或
(xvi)SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:142和SEQ ID NO:143和SEQ ID NO:144和SEQID NO:145和SEQ ID NO:146；或
(xvii)SEQ ID NO:147和SEQ ID NO:148和SEQ ID NO:149和SEQ ID NO:150和SEQID NO:151和SEQ ID NO:152；或
(xviii)SEQ ID NO:153和SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155和SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157和SEQ ID NO:158；或
(xix)SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160和SEQ ID NO:161和SEQ ID NO:162和SEQID NO:163和SEQ ID NO:164；或
(xx)SEQ ID NO:165和SEQ ID NO:166和SEQ ID NO:167和SEQ ID NO:168和SEQID NO:169和SEQ ID NO:170；或
(xxi)SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:172和SEQ ID NO:173和SEQ ID NO:174和SEQID NO:175和SEQ ID NO:176；或
(xxii)SEQ ID NO:177和SEQ ID NO:178和SEQ ID NO:179和SEQ ID NO:180和SEQID NO:181和SEQ ID NO:182；或
(xxiii)SEQ ID NO:183和SEQ ID NO:184和SEQ ID NO:185和SEQ ID NO:186和SEQ ID NO:187和SEQ ID NO:188；或
(xxiv)SEQ ID NO:189和SEQ ID NO:190和SEQ ID NO:191和SEQ ID NO:192和SEQID NO:193和SEQ ID NO:194。
在一些另外或替代的实施例中，第一抗体分子包含以下氨基酸序列：
(i)SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:27；或
(ii)SEQ IS NO:4和SEQ ID NO:28；或
(iii)SEQ IS NO:5和SEQ ID NO:29；或
(iv)SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:30；或
(v)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:31；或
(vi)SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:32；或
(vii)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:33；或
(viii)SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:34；或
(ix)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:35；或
(x)SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:36；或
(xi)SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:37；或
(xii)SEQ ID NO:14和SEQ ID NO:38；或
(xiii)SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:39；或
(xiv)SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:40；或
(xv)SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:41；或
(xvi)SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:42；或
(xvii)SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:43；或
(xviii)SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:44；或
(xix)SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:45；或
(xx)SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:46；或
(xxi)SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:47；或
(xxii)SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:48；或
(xxiii)SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:49；或
(xxiv)SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:50。
在一些实施例(有时是优选的实施例)中，特异性结合FcγRIIb的抗体分子包含以下CDR区：SEQ ID NO:171(CDRH1)、SEQ ID NO:172(CDRH2)、SEQ ID NO:173(CDRH3)、SEQ IDNO:174(CDRL1)、SEQ ID NO:175(CDRL2)和SEQ ID NO:176(CDRL3)，即克隆6G11的CDR区。
在一些实施例(有时是优选的实施例)中，特异性结合FcγRIIb的抗体分子包含以下恒定区：SEQ ID NO:1(CH)和SEQ ID NO:2(CL)以及以下可变区：SEQ ID NO:23(VL)和SEQID NO:47(VH)，即克隆6G11的恒定区和可变区，该抗体分子已被进一步修饰以经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少。在一些实施例(有时是优选的实施例)中，特异性结合FcγRIIb的抗体分子包含以下恒定区SEQ ID NO:195(CH)和SEQ ID NO:2(CL)以及以下可变区：SEQ IDNO:23(VL)和SEQ ID NO:47(VH)，即包括N297Q突变的克隆6G11的恒定区和可变区。
如本文第一至第七方面所定义，第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合。如本文定义的第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。在一些实施例中，与PD-1特异性结合的抗体分子还经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。在一些实施例中，与PD-L1特异性结合的抗体分子还经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。
第二抗体分子可以与程序性死亡配体1(PD-L1)(也称为CD274或B7同源物1(B7-H1))特异性结合。
在一些实施例中，与PD-L1特异性结合的抗体分子选自以下抗PD-L1抗体的非限制性实例中的一种或多种：
●阿特朱单抗(Atezolizumab)(目前已批准使用)；
●德瓦鲁单抗(Durvalumab)(目前已批准使用)；
●阿维单抗(Avelumab)(目前已批准使用)；
●CS1001(目前处于临床开发阶段)；
●KN035(恩沃利单抗(Envafolimab))——一种皮下注射制剂的PD-L1抗体，目前正在美国、中国和日本进行临床评估；
●CK-301(目前由Checkpoint Therapeutics公司进行临床开发)
在一个优选的实施例中，与PD-L1特异性结合的抗体是阿特朱单抗、德瓦鲁单抗或阿维单抗。在一些实施例中，与PD-L1特异性结合的抗体是这些抗体中的两种或更多种的组合。
在替代或另外的实施例中，第二抗体分子可以与程序性细胞死亡蛋白1(PD1)(也称为CD 279)特异性结合。
在一些实施例中，与PD-1特异性结合的抗体分子选自以下抗PD-1抗体的非限制性实例中的一种或多种：
●派姆单抗(Pembrolizumab)(目前已批准使用)；
●纳武单抗(Nivolumab)(目前已批准使用)；
●西米普利单抗(Cemiplimab)(目前已批准使用)；
●卡瑞利珠单抗(Camrelizumab)(目前已批准使用)；
●斯巴达珠单抗(Spartalizumab)(目前处于临床开发阶段)；
●多塔利单抗(Dostarlimab)(目前处于临床开发阶段)；
●替雷利珠单抗(Tislelizumab)(目前处于临床开发阶段)；
●JTX-4014(目前处于临床开发阶段)；
●信迪利单抗(Sintilimab)(IBI308)(目前处于临床开发阶段)；
●特瑞普利单抗(Toripalimab)(JS 001)(目前处于临床开发阶段)；
●AMP-224(目前处于临床开发阶段)；
●AMP-514(MEDI0680)(目前处于临床开发阶段)。
在一个优选的实施例中，与PD-1特异性结合的抗体是派姆单抗、纳武单抗、西米普利单抗或卡瑞利珠单抗。在一些实施例中，与PD-1特异性结合的抗体是这些抗体中的两种或更多种的组合。在一个优选的实施例中，与PD-1特异性结合的抗体是派姆单抗。
第三抗体分子与CTLA-4特异性结合。代表细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4的CTLA-4或CTLA4也称为CD152。它是一种充当下调免疫应答的免疫检查点的蛋白质受体。CTLA4在调节性T细胞中组成型表达，但仅在活化后的常规T细胞中上调——这种现象在癌症中尤其值得注意。在一些实施例中，第三抗体分子是伊匹木单抗(诸如来自Bristol-Myers Squibb的)。在一些实施例中，第三抗体分子是曲美木单抗(以前表示为替西木单抗(ticilimumab)和CP-675,206)，该曲美木单抗是针对CTLA-4的全人单克隆抗体，之前由Pfizer开发，而现在由MedImmune进行临床开发。在一个优选的实施例中，与CTLA-4特异性结合的抗体是伊匹木单抗。
检查点抑制性受体CTLA-4和PD-1/PD-L1的功能是限制T细胞活化和增殖，因此对于控制免疫稳态和预防针对自身的反应非常重要。与此同时，肿瘤可以通过释放可溶性因子或通过同源相互作用来规避免疫攻击，从而上调和/或接合这些抑制性免疫受体，限制T细胞的活化和增殖。例如，肿瘤对干扰素-γ暴露的响应可能会上调PD-L1，PD-L1在连接PD-1分子(在效应T细胞上)后会减少效应T细胞的活化、增殖，并最终降低效应T细胞介导的抗肿瘤免疫。其他因子(例如细胞因子或趋化因子)的肿瘤释放可以促进例如肿瘤相关巨噬细胞、髓源性抑制细胞或T调节细胞的成熟，伴随免疫抑制受体的上调，当将CTLA-4或PD-1连接到效应T细胞上时，限制T细胞增殖和活化，减少T细胞介导的抗肿瘤免疫。因此，针对CTLA-4、PD-1和PD-L1的抗体可以增加抗肿瘤活性的一种机制是通过阻断CTLA-4和/或PD-1与其天然配体的相互作用，以及效应T细胞(可以是CD8+或CD4+)中的相关抑制性信号传导。
相反，FcγR不同地调节针对CTLA-4、PD-1和PD-L1的抗体的治疗活性。虽然抗CTLA-4抗体的治疗活性通过其与FcγR[18,21]的接合而增强，但抗PD-1抗体的活性却因FcγR接合而受到阻碍[19,20]，并且公开于专利申请WO 2021/009358。已经描述了FcγR对抗PD-L1抗体治疗活性的肿瘤微环境背景依赖性增强[19][22]。
虽然控制特别是在抗PD-1和抗PD-L1抗体中的FcγR调节的机制尚未完全表征，但现有数据表明，FcγR接合对其靶标在免疫抑制细胞上充分高表达而不是在免疫效应细胞上高表达的抗体有益，以触发FcγR介导的靶细胞耗竭。例如，与效应T细胞相比，CTLA-4高表达，并且在瘤内Tregs上表达更高。因此，在FcγR人源化的小鼠中，例如人IgG1同种型的FcγR接合的抗CTLA-4抗体有效地耗尽Treg而不是CD8+效应细胞[18]。与FcγR在抗CTLA-4抗体治疗活性中的积极作用进一步一致，携带FcγRIIIa高亲和力SNP的黑素瘤患者在用人FcγR接合IgG1抗CTLA-4抗体伊匹木单抗治疗时，与表达低亲和力SNP的患者相比，显示存活率提高。
相反，PD-1在效应CD8+T细胞(包括人瘤内CD8+T细胞)上高度表达[19](参见，例如，公开的专利申请WO 2021/009358)，并且与(免疫抑制性)Treg细胞相比，PD-1在效应细胞上的表达可能更高[19]。无论是通过表达CD8+T细胞的抗体包被的PD-1的FcγR依赖性耗竭机制[19]，还是通过抗PD-1抗体从CD8+T细胞FcγR依赖性转移到肿瘤相关巨噬细胞的机制[20]，FcγR已经显示在体内降低抗PD-1抗体的功效。通过对临床相关的纳武单抗和派姆单抗抗PD-1抗体、表达人FcγR的巨噬细胞和以与人瘤内环境相关的水平表达PD-1的人T细胞的体外机制研究提供了与人临床环境的相关性([20]和公开的专利申请WO 2021/009358)。
第二抗体分子还可以经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。第三抗体分子经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。
如上文所讨论的，Fcγ受体存在于免疫效应细胞上。至少一种Fcγ受体可以存在于与第一抗体分子结合的FcγRIIb相同的免疫效应细胞上和/或其可以是存在于另一免疫效应细胞上的Fcγ受体。
免疫效应细胞可以包括但不限于以下细胞：巨噬细胞、中性粒细胞、单核细胞、自然杀伤(NK)细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、血小板、细胞毒性T细胞和记忆T细胞。在一些优选的实施例中，免疫效应细胞是巨噬细胞。
在一些实施例中，第二抗体分子和/或第三抗体分子选自由人抗体分子、人源化抗体分子和人来源的抗体分子组成的组。
在一些另外或替代的实施例中，第二抗体分子和/或第三抗体分子是单克隆抗体分子或单克隆来源的抗体分子。
在一些另外或替代的实施例中，第二抗体分子和/或第三抗体分子选自由以下项组成的组：全长抗体、嵌合抗体、单链抗体及其保留经由其Fc区与Fcγ受体结合的能力的抗原结合片段。
在一些另外或替代的实施例中，第二抗体分子和/或第三抗体分子是人IgG抗体、人源化IgG抗体分子或人来源的IgG抗体分子。
在一些优选的实施例中，由第三抗体分子(以及在一些实施例中，第二抗体分子)的Fc区特异性结合的Fcγ受体可以是如本文所述的活化Fcγ受体。这允许活化效应细胞功能，从而触发诸如抗体依赖的细胞毒性(ADCC)、抗体依赖的细胞吞噬作用(ADCP)、细胞因子释放和/或抗体依赖的内吞作用以及在嗜中性粒细胞情况下的网状结构(即，网状结构、嗜中性粒细胞细胞外陷阱的活化和释放)的机制。与活化的Fcγ受体结合的抗体也可导致某些活化标记物的增加，如CD40、MHCII、CD38、CD80和/或CD86。
在一些实施例中，第二抗体分子和/或第三抗体分子被工程改造以改善与活化Fcγ受体的结合。例如，为了能够与活化Fcγ受体结合，在一些实施例中，第二抗体分子和/或第三抗体的Fc区可以在位置297处被糖基化。该位置的碳水化合物残基有助于与Fcγ受体结合。在一些实施例中，优选的是这些残基是含有GlnNAc、甘露糖、具有末端半乳糖残基和唾液酸的双触角碳水化合物。它应含有Fc分子的CH2部分。在一个优选的实施例中，第二抗体分子特异性结合PD-L1，并且被工程改造以改善与活化Fcγ受体的结合。
在其他实施例中，第二抗体可以被工程改造以减少与FcγR的结合，例如，抗PD-1抗体替雷利珠单抗(Beigene；IgG4 S228P、E233P、F234V、L235A、D265A、R409K)和/或抗PD-L1抗体阿特朱单抗(Roche/Genentech；IgG1 N297A)。
本文所述的第一抗体分子、第二抗体分子和第三抗体分子的组合可以用于治疗患者的癌症。
包含本文公开的第一抗体分子、第二抗体分子和第三抗体分子的药物组合物和试剂盒也适用于治疗患者的癌症，并且以下实施例也将被理解为适用于本文公开的药物组合物和试剂盒的此类用途。
本文使用的术语“患者”(或“受试者”)是指已经被诊断患有癌症或已经被鉴定为可能患有癌症和/或表现出癌症症状的动物，包括人。包括了该癌症是FcγRIIb阴性癌症或被认为可能是FcγRIIb阴性癌症的癌症。还包括了该癌症是FcγRIIb阳性癌症或被认为可能是FcγRIIb阳性癌症的癌症。
包括了患者可以是哺乳动物或非哺乳动物。优选地，患者是人或哺乳动物，诸如马、或牛、或绵羊、或猪、或骆驼、或狗、或猫。最优选地，哺乳动物患者是人。
“表现”包括受试者表现出癌症症状和/或癌症诊断标记，和/或癌症症状和/或癌症诊断标记可以被测量、和/或评估、和/或量化。
对于医学领域的技术人员来说，什么是癌症症状和癌症诊断标记以及如何测量和/或评估和/或量化癌症症状的严重性是否降低或增加，或者癌症诊断标记是否降低或增加是显而易见的；以及如何将这些癌症症状和/或癌症诊断标记用于形成癌症的预后。
癌症治疗通常作为疗程来施用，也就是说，在一段时间内施用治疗剂。治疗过程的时间长短将取决于许多因素，这些因素可能包括所施用的治疗剂的类型、所治疗的癌症的类型、所治疗的癌症的严重程度以及患者的年龄和健康状况，以及其他原因。
在一些实施例中，癌症是FcγRIIb阳性B细胞癌症。“FcγRIIb阳性癌症”包括表达FcγRIIB的任何癌症，尽管其表达水平不同。FcγRIIB表达在慢性淋巴细胞白血病和套细胞淋巴瘤中最明显，在弥漫性大B细胞淋巴瘤中中等，在滤泡性淋巴瘤中最不明显。然而，在一些情况下，患有通常表达低水平的FcyRIIB的癌症(例如滤泡性淋巴瘤)的受试者可能具有非常高水平的FcγRIIB表达。FcγRIIB在不同类型的B细胞癌(特别是上述那些)中的表达水平与抗体分子利妥昔单抗的内化速率相关。因此，FcγRIIB的表达和抗体分子的相关内化被认为是B细胞癌共有的共同机制(Lim等人，2011,Blood,118(9):2530-40)。抗体分子的FcγRIIB依赖性引发可以被本文公开的针对FcγRIIB的抗体阻断。
因此，本文公开的抗体的组合可以用于治疗B细胞癌，并且特别是复发性套细胞淋巴瘤和/或难治性套细胞淋巴瘤，和/或复发性滤泡性淋巴瘤和/或难治性滤泡性淋巴瘤，和/或复发性弥漫性大B细胞淋巴瘤和/或难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤。
在可能更优选的一些其他实施例中，癌症是FcγRIIb阴性癌症。“FcγRIIb阴性癌症”包括不存在任何FcγRIIb受体的任何癌症。这可以在多种方法中使用抗FcγRIIB特异性抗体进行检验，包括免疫组织化学和流式细胞术，如Tutt等人，J Immunol,2015,195(11)5503-5516中所述。
在一些优选的实施例中，癌症选自由癌、肉瘤和淋巴瘤组成的组。
在一些实施例中，癌症是选自由腺癌、鳞状细胞癌、腺鳞癌、间变性或未分化癌、大细胞癌和小细胞癌组成的组的癌。
在一些实施例中，癌症是选自由骨肉瘤、软骨肉瘤、脂肪肉瘤和平滑肌肉瘤组成的组的肉瘤。
FcγRIIb阴性癌症可以选自由以下项组成的组：黑色素瘤、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、转移性激素难治性前列腺癌、结直肠癌、肺癌、小细胞肺癌、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌、尿路上皮癌、膀胱癌、肾癌、间皮瘤、梅克尔细胞癌、头颈癌和胰腺癌。
在另外或替代的实施例中，本文所述的癌症旨在包括用与CTLA-4和/或PD-1和/或PD-L1特异性结合的所指定的抗体进行治疗的任何癌症。“指定”是指所述抗体已被批准用于治疗所述癌症，或已用于针对这些癌症的临床试验，或已被建议可能可用于治疗这些癌症(例如来自体内动物模型或体外研究)。
上述癌症中的每一种都是已知的，并且症状和癌症诊断标记被充分描述，用于治疗那些癌症的治疗剂也是如此。因此，用于治疗上述癌症类型的症状、癌症诊断标记和治疗剂是医学领域技术人员已知的。
大量癌症的诊断、预后和进展的临床定义依赖于称为分期的某些分类。这些分期系统用于整理许多不同的癌症诊断标记和癌症症状，以提供癌症的诊断和/或预后和/或进展的概述。肿瘤学领域的技术人员将知道如何使用分期系统评估癌症的诊断、和/或预后、和/或进展，以及应当使用哪些癌症诊断标记和癌症症状来进行评估。
“癌症分期”包括Rai分期，其包括0期、I期、II期、III期和IV期，和/或Binet分期，其包括A期、B期和C期，和/或Ann Arbour分期，其包括I期、II期、III期和IV期。
已知地，癌症可导致细胞形态的异常。这些异常通常在某些癌症中重复发生，这是指检查这些形态学变化(也称为组织学检查)可用于癌症的诊断或预后。用于可视化样品以检查细胞形态的技术以及制备用于可视化的样品的技术在本领域中是已知的；例如，光学显微镜或共焦显微镜。
“组织学检查”包括存在小的成熟淋巴细胞、和/或存在具有窄的细胞质边缘的小的成熟淋巴细胞、存在具有缺乏可辨别的核仁的致密核的小的成熟淋巴细胞、和/或存在具有窄的细胞质边缘和缺乏可辨别的核仁的致密核的小的成熟淋巴细胞、和/或存在非典型细胞、和/或裂解细胞、和/或前淋巴细胞。
众所周知，癌症是细胞DNA突变的结果，其可导致细胞避免细胞死亡或不可控地增殖。因此，检查这些突变(也称为细胞遗传学检查)可以是评估癌症的诊断和/或预后的有用工具。其实例是染色体位置13q14.1的缺失，这是慢性淋巴细胞白血病的特征。用于检查细胞中的突变的技术是本领域已知的；例如，荧光原位杂交(FISH)。
“细胞遗传学检查”，包括对细胞中DNA的检查，尤其是对染色体的检查。细胞遗传学检查可用于鉴定可能与难治性癌症和/或复发性癌症的存在相关的DNA变化。此类可以包括：13号染色体长臂的缺失、和/或13q14.1染色体位置的缺失、和/或12号染色体的三体性、和/或12号染色体长臂的缺失、和/或11号染色体长臂的缺失、和/或11q的缺失、和/或6号染色体长臂的缺失、和/或6q的缺失、和/或17号染色体短臂的缺失、和/或17p的缺失、和/或t(11:14)易位，和/或(q13:q32)易位、和/或抗原基因受体重排、和/或BCL2重排，和/或BCL6重排、和/或t(14:18)易位、和/或t(11:14)易位，和/或(q13:q32)易位、和/或(3:v)易位、和/或(8:14)易位、和/或(8:v)易位、和/或t(11:14)和(q13:q32)易位。
已知的地，患有癌症的患者表现出某些身体症状，这通常是癌症对身体造成负担的结果。那些症状经常在同一癌症中复发，因此可以是疾病的诊断、和/或预后、和/或进展的特征。医学领域的技术人员将理解哪些身体症状与哪些癌症相关，以及如何评估那些身体系统可以与疾病的诊断、和/或预后、和/或进展相关。“身体症状”包括肝肿大和/或脾肿大。
本文所述的组合、用途、方法、药物组合物和试剂盒可用于治疗对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性的癌症。
“对治疗具有抗性”是指，与先前的反应性水平或预期的反应性水平或治疗其他类型的癌症时观察到的反应性水平相比，患者对用PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗的反应性水平降低。这包括患者先前已经用所述抗体分子治疗过的情况(即，它们已经获得抗性)，并且还包括患者从未用所述抗体分子治疗过的情况(即，它们具有固有抗性)。
对治疗具有抗性可以通过多种方式来测量，例如，通过监测患者以确保癌症以预期的方式消退，并识别对治疗完全没有反应的患者。例如，可以使用如本领域已知的和本文所述的免疫评分测试来测量对治疗的抗性。
“对治疗具有抗性”还包括尚未表明使用与PD-1和/或PD-L1和/或CTLA-4特异性结合的抗体进行治疗的癌症类型，例如，如果先前已发现这些抗体(或抗体组合)不会发挥可测量的治疗效果。
还包括可具有较低肿瘤突变负荷(TMB)的癌症。“肿瘤突变负荷”是指癌细胞内基因突变的数量。此类测量可以通过本领域已知的实验室测试来确定。已知具有高TMB的细胞更有可能被识别为异常并受到免疫系统的攻击，并且高TMB已被鉴定为PD-1/PD-L1阻断的应答生物标记物(Goodman等人，2017,Mol Cancer Ther.,16(11):2598-2608)。因此，具有低TMB的癌症可以用本发明的组合成功地靶向，这可以增强如上所述的此类免疫阻断抗体的效果。迄今为止，多种生物标记物已与免疫检查点抑制剂(“CPI”)应答相关，这些生物标记物可大致分为以下几类：i)引发T细胞应答的抗原来源；ii)驱动抗性的免疫逃避机制；以及iii)免疫浸润标记物。调节对免疫检查点阻断和基于抗体的癌症免疫疗法的应答以及相反地缺乏应答和抗性的其他因子已经被描述并且正在不断被确定。例如，最近的一项系统性泛肿瘤分析包含了超过1000名CPI治疗患者的八种肿瘤类型的collat全外显子组和转录组数据，利用标准化的生物信息学工作流程和临床结果标准来验证已确定的CPI敏化的多变量预测因子Clonal-TMB是CPI应答的最强预测因子，其次是TMB和CXCL9表达[23]。发现分析确定了先前功能证据支持的CPI应答的另外两个决定因素：9q34.3(TRAF2)缺失和CCND1扩增，这两个因素均在超过1600名接受CPI治疗的患者中得到独立验证。此外，对克隆性新抗原反应性CD8-TIL进行scRNA测序，结合CPI响应肿瘤的批量RNAseq分析，确定CCR5和CXCL13是CPI敏化的T细胞内在介质。
本领域技术人员将理解，正在不断鉴定出应答可能性以及相反缺乏应答和抗性的新标记物，并且可以涉及例如引发T细胞应答的抗原来源、驱动抗性的免疫逃避机制以及免疫浸润标记物，例如如最近在中描述和讨论的[23]。
应当理解，在一些实施例中，对治疗有抗性的癌症可以是复发性和/或难治性癌症。
复发性癌症是先前已经治疗过的癌症，并且作为该治疗的结果，受试者完全或部分康复(即，称受试者处于缓解中)，但是在停止治疗后，癌症复发或恶化。换句话说，复发性癌症是在其有效且受试者完全或部分恢复的一段时间后变得对治疗产生抗性的癌症。
难治性癌症是已经治疗过但对该治疗没有反应的癌症，和/或已经治疗过但在治疗期间有进展的癌症。换句话说，难治性癌症是对治疗有抗性的癌症。
应当理解，由于固有的抗性，癌症可能是难治性癌症。“内在抗性”包括癌症和/或受试者和/或靶细胞从第一次施用时起，或在完全施用之前，对特定治疗有抗性的意思。
应当理解，由于获得抗性，癌症可能是复发性癌症，或者是复发性癌症和难治性癌症。通过“获得抗性”，包括了癌症和/或受试者和/或靶细胞在第一次施用特定治疗之前对特定治疗没有抗性，但至少在第一次施用特定治疗之后(例如：在第二次施用治疗之后；第三次施用治疗之后；第四次施用治疗之后；第五次施用治疗之后；第六次施用治疗之后；第七次施用治疗之后；第八次施用治疗之后；第九次施用治疗之后；第十次施用治疗之后；第十一次施用治疗之后；第十二次施用治疗之后)或期间变得具有抗性。
医学领域的技术人员可以容易地诊断出复发性癌症和/或难治性癌症。
本发明可特别用于治疗通常不能很好地被免疫系统靶向的癌症(其在本领域中也被称为“冷肿瘤”)。此类冷肿瘤可以分为以下几种类型：
-免疫沙漠型肿瘤(Immune deserted tumour)，即由于缺乏肿瘤浸润性T细胞，所以肿瘤中完全缺乏免疫应答。
-免疫排斥型肿瘤(Immune excluded tumour)，即产生响应T细胞，但无法穿透肿瘤以对其产生应答，T细胞可能存在于肿瘤外周。
-免疫浸润较差的肿瘤，即免疫细胞(T细胞)渗透到肿瘤微环境的水平降低或消除。
用于鉴定和/或分类此类肿瘤的方法对于本领域技术人员来说是已知的。例如，免疫组织化学可以用于检测肿瘤中是否存在CD8+T细胞，并且使用此类方法(尽管具有不同的截止值和试剂)来生成“免疫评分”。
可能属于这些“冷肿瘤”亚型的癌症包括但不限于以下癌症：黑素瘤、胰腺癌、前列腺癌、结直肠癌、肝细胞癌、肺癌、膀胱癌、肾癌、胃癌、宫颈癌、梅克尔细胞癌或卵巢癌。
因此，本发明可特别用于通过同时阻断FcγRIIb和增强免疫效应细胞活化(这又增强了第二抗体分子和/或第三抗体分子的治疗效果)来对抗患有这些类型肿瘤的患者对抗CTLA-4、抗PD1和/或抗PD-L1疗法的抗性。
在一些实施例中，对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子治疗具有抗性的患者先前已经用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子进行治疗，任选地其中该患者在所述治疗后变得具有抗性。
在该实施例中，包括这样的情况：患者之前已经用与PD-1特异性结合的第一抗体治疗过，并且本发明的第二抗体分子是与PD-1特异性结合的第二抗体(即本发明的第二抗体分子不同于先前用于治疗患者的抗PD-1抗体)。在一些替代的实施例中，先前用于治疗患者的与PD-1特异性结合的抗体与本发明的特异性结合PD-1的第二抗体分子相同。
在该实施例中，还包括这样的情况：患者之前已经用与PD-L1特异性结合的第一抗体治疗过，并且本发明的第二抗体分子是与PD-L1特异性结合的第二抗体(即本发明的第二抗体分子不同于先前用于治疗患者的抗PD-L1抗体)。在一些替代的实施例中，先前用于治疗患者的与PD-L1特异性结合的抗体与本发明的特异性结合PD-L1的第二抗体分子相同。
在该实施例中，还包括这样的情况：患者之前已经用与CTLA-4特异性结合的第一抗体治疗过，并且本发明的第三抗体分子是与CTLA-4特异性结合的第三抗体(即本发明的第三抗体分子不同于先前用于治疗患者的抗CTLA-4抗体)。在一些替代的实施例中，先前用于治疗患者的与CTLA-4特异性结合的抗体与本发明的与CTLA-4特异性结合的第三抗体分子相同。
如上文所讨论的，在一些替代的实施例中，患者先前未曾用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子治疗。在该实施例中，患者可能对所述治疗具有固有抗性。
在一些实施例中，可以使用免疫评分测试来鉴定可以受益于使用本文定义的第一、第二和第三抗体分子的组合进行治疗的患者，该免疫评分测试确定肿瘤对于某些靶抗原(在这种情况下是CTLA-4和/或PD-1和/或PD-L1)是阳性还是阴性。这种确定可以通过对所讨论的抗原进行组织学染色来进行，并且如果表达该抗原的细胞百分比(通过全部或部分染色)高于预定的截止值，则将样品描述为阳性。这种评分被称为肿瘤比例评分(TPS)。TPS可用于预测患者是否会对针对该抗原的单克隆抗体疗法产生反应。
例如，在靶向PD-1或PD-L1的抗体分子的情况下，已经确定如果TPS被确定为50％或更高(对于表现出在任何强度下的膜染色的活肿瘤细胞)，则样品被确定为PD-L1阳性。例如，参见FDA批准的测试：https://www.accessdata.fda.gov/cdrh_docs/pdf15/ P150013B.pdf
因此，为了确定哪些患者可以受益于使用本文定义的第一、第二和第三抗体分子的组合的治疗，可能有利的是使用上述测试来鉴定被确定为PD-L1阴性的患者，即针对PD-L1具有1％至小于50％的活肿瘤细胞染色的患者。该患者组不太可能对单独使用抗PD-1或抗PD-L1抗体(或与靶向CTLA-4的抗体组合)的疗法有反应，但由于上述原因更有可能对本文所述的组合疗法有反应。因此，在一些实施例中，使用已确定的诊断测试或IHC方法将本文定义的患者定义为PD-L1阴性。此类测试可以包括免疫评分测试(如本领域已知的并且如在本文中讨论的)以检测和评估对特定标记物(诸如PD-L1)呈阳性的免疫细胞和/或肿瘤细胞的百分比。技术人员将理解，可以进行类似的测试来确定患者的CTLA-4状态。此外，使用类似的方法，可以分析肿瘤的T细胞和另外的肿瘤浸润淋巴细胞状态，表明肿瘤是“热”T细胞发炎还是“冷”免疫排斥或免疫沙漠表型——表明特定患者是否可能对抗PD-1/L1和/或抗CTLA-4免疫检查点阻断具有抗性，但对本文公开的组合治疗有反应。
在一些另外或替代的实施例中，可以通过免疫组织化学分析来鉴定可以受益于使用本文定义的第一、第二和第三抗体分子的组合进行治疗的患者，以确定浸润肿瘤的免疫细胞的数量是否减少。“减少”是指肿瘤中浸润的免疫细胞(例如T细胞)的数量低于观察到免疫浸润的正常肿瘤的预期数量。
在患者以前从未接受过对PD-1、PD-L1或CTLA-4具有特异性的抗体治疗的情况下，使用此类测试将特别有利。在这种情况下，上述标准测试会将许多患者归类为对这些治疗没有反应，在这种情况下可能不会使用它们。本发明可以将这些治疗的潜在用途扩大到以前被认为没有反应的患者群体。
在一些实施例中，将特异性结合FcγRIIb的第一抗体分子和第二抗体分子和/或第三抗体分子同时施用于患者，这意味着它们或者在一个时间点一起施用或者彼此在时间上非常接近地分开施用。
在一些实施例中，在施用第二抗体分子之前向患者施用特异性结合FcγRIIb的抗体分子。在一些实施例中，在施用第三抗体分子之前向患者施用特异性结合FcγRIIb的抗体分子。
这种依次施用可以通过瞬时分离抗体来实现。替代地，或与第一种选择组合，依次施用还可以通过以下来实现：空间分离抗体分子，通过以某种方式(诸如瘤内)施用特异性结合FcγRIIb的抗体分子，使得其先于第二和/或第三抗体分子到达癌症，然后以某种方式(诸如全身性)施用第二和/或第三抗体分子，使得其在特异性结合FcγRIIb的抗体分子之后到达癌症。
在一些实施例中，在施用特异性结合FcγRIIb的抗体分子之前向患者施用第二抗体分子。在一些实施例中，在施用特异性结合FcγRIIb的抗体分子之前向患者施用第三抗体分子。
医学领域的技术人员将知道，药物可以用不同的添加剂进行修饰，例如以改变药物被身体吸收的速率；并且可以以不同的形式进行修饰，例如以允许特定的身体施用途径。
因此，包括了如本文所述的抗体和组合物可以与赋形剂和/或药学上可接受的载体和/或药学上可接受的稀释剂和/或佐剂组合。
还包括了本发明的组合和/或组合物和/或抗体和/或药物可以适合于肠胃外施用，本发明的组合和/或组合物和/或抗体和/或药物包含：水性和/或非水性无菌注射溶液，其可以含有抗氧化剂、和/或缓冲剂、和/或抑菌剂、和/或使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质；和/或水性和/或非水性无菌悬浮液，其可以包括悬浮剂和/或增稠剂。本发明的组合和/或组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物可以存在于单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿瓶和小瓶，并且可以储存在仅需要紧接着在使用之前添加无菌液体载体(例如，注射用水)的冷冻干燥(即冻干)条件下。
可以由前述种类的无菌粉末和/或颗粒和/或片剂制备临时注射溶液和悬浮液。
对于人类患者的肠胃外施用而言，以单次或分剂量施用的特异性结合FcγRIIb的抗体分子和/或第二抗体分子和/或第三抗体分子的每日剂量水平通常为1mg/kg患者体重至20mg/kg，或在一些情况下甚至高达100mg/kg。在一些实施例中，抗体分子的剂量是10mg/kg、3mg/kg或1mg/kg。在特殊情况下，例如与延长施用相结合的情况下，可以使用较低剂量。在任何情况下，医生将确定最适合于任何个体患者的实际剂量，并且所述实际剂量将随着特定患者的年龄、体重和响应而变化。上述剂量是一般情况的示例。当然，可以存在其中需要更高或更低剂量范围的单独的情况，并且这在本发明的范围内。
通常，本发明的组合物和/或药物将含有浓度介于约2mg/ml与150mg/ml之间或介于约2mg/ml与200mg/ml之间的特异性结合FcγRIIb的抗体分子和/或第二抗体/第三抗体。在一个优选的实施例中，本发明的药物和/或组合物将含有浓度为10mg/ml的特异性结合FcγRIIb的抗体分子和/或第二抗体分子/第三抗体分子。
通常，在人类中，本发明的组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物的口服或肠胃外施用是优选的途径，也是最方便的。对于兽医用途，根据正常的兽医实践将本发明的组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物作为适当可接受的调配物施用，并且兽医将确定最适合于特定动物的给药方案和施用途径。因此，本发明提供了药物制剂，其包含有效治疗各种病况(如上所述和下文进一步描述)的量的本发明的抗体和/或药剂。优选地，该组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物适合于通过选自包含以下项的组的途径进行递送：静脉内(IV)；皮下(SC)、肌内(IM)或瘤内。在一些优选的实施例中，该施用是静脉内的。
在一些实施例中，第一抗体分子和/或第二抗体和/或第三抗体分子可以通过使用质粒或病毒来施用。此类质粒然后包含编码第一抗体分子和/或第二抗体和/或第三抗体分子的核苷酸序列。在一些实施例中，编码第一抗体分子和/或第二抗体和/或第三抗体分子的部分或完整序列的核苷酸序列整合到细胞或病毒基因组中或病毒的病毒组中；然后，此类细胞或病毒充当第一抗体分子和/或第二抗体和/或第三抗体分子的递送媒剂(或编码第一抗体分子和/或第二抗体和/或第三抗体分子的核苷酸序列的递送媒剂)。例如，在一些实施例中，此类病毒可以呈治疗性溶瘤病毒的形式，该治疗性溶瘤病毒包含编码本文所述的抗体分子中的至少一种抗体分子的核苷酸序列。在一些实施例中，此类溶瘤病毒包含编码全长人IgG抗体的核苷酸序列。溶瘤病毒是医学和病毒学领域的技术人员已知的。
本发明还包括包含多肽结合部分的药学上可接受的酸或碱加成盐的组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物。用于制备可用于本发明的前述碱化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸是那些形成无毒的酸加成盐的酸，即含有药学上可接受的阴离子的盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘化物、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、乙酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、酒石酸氢盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、蔗糖盐、苯甲酸盐、甲烷磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐[即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3萘甲酸酯)]盐等。药学上可接受的碱加成盐也可用于产生根据本发明的药剂的药学上可接受的盐形式。可用作试剂来制备本质上呈酸性的本发明药剂的药学上可接受的碱盐的化学碱是与此类化合物形成无毒碱盐的那些。此类无毒的碱盐包括但不限于衍生自此类药学上可接受的阳离子的那些，诸如碱金属阳离子(例如钾和钠)和碱土金属阳离子(例如钙和镁)、铵或水溶性胺加成盐，诸如N-甲基葡糖胺-(葡甲胺)，以及低级烷醇铵和药学上可接受的有机胺的其他碱盐等。本发明的药剂和/或多肽结合部分可被冻干用于储存并在使用前在合适的载体中重构。可以使用任何合适的冻干方法(例如喷雾干燥、滤饼干燥)和/或重构技术。本领域技术人员将理解，冻干和重建可导致不同程度的抗体活性损失(例如，对于常规免疫球蛋白，IgM抗体往往比IgG抗体具有更大的活性损失),并且可能必须上调使用水平以进行补偿。在一个实施例中，冻干的(冷冻干燥的)多肽结合部分在再水合时损失不超过其活性的约20％、或不超过约25％、或不超过约30％、或不超过约35％、或不超过约40％、或不超过约45％、或不超过约50％(冻干前)。
本发明还总体涉及包含第一抗体和第二抗体的组合，其在本文中在本发明的第八至第十四方面中进行了描述：
在进一步的第八方面，本发明提供了第一抗体分子用于治疗患者的癌症的用途，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；其特征在于第一抗体分子降低和/或防止癌症对用与CTLA-4特异性结合的第二抗体分子治疗的抗性。在该方面的一个具体实施例中，与CTLA-4特异性结合的抗体分子的剂量低于治疗剂量。
在第九方面，本发明还提供了一种组合，该组合包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；以及
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其中该组合包括低于耐受治疗剂量的第二抗体分子的剂量。
在第十方面，本发明提供以下抗体分子的用途：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；以及
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于制造用于治疗患者的癌症的药物，其中该组合包括低于耐受治疗剂量的第二抗体分子的剂量。
在第十一方面，本发明提供了一种用于治疗个体的癌症的方法，该方法包括向患者施用：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
其中所施用的第二抗体分子的剂量低于耐受治疗剂量。
在第十二方面，本发明提供了一种第一抗体，该第一抗体经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于与以下组合使用：
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其中所使用的第二抗体分子的剂量低于耐受治疗剂量。
在第十三方面，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合，
其中第二抗体分子以低于耐受治疗剂量的剂量存在。
在第十四方面，本发明提供了一种试剂盒，该试剂盒包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合，
其中第二抗体分子以低于耐受治疗剂量的剂量存在。
如上文所讨论的，根据上述方面的第二抗体的剂量低于或可以低于耐受治疗剂量。
因此，应当理解，本发明的第八至第十四方面基于发明人的令人惊讶的发现，即在第一抗体分子和第二抗体分子组合后，与以(相同或)更高剂量单独使用第二抗体时相比，第二抗体分子可以以更低的、更好耐受的剂量使用，同时具有保留或更大的治疗功效。
“耐受治疗剂量”是指被认为具有治疗活性(即在本文定义的患者或受试者中产生期望的治疗效果)但被认为是耐受的(即不产生不可接受水平的毒性或对患者产生副作用)的任何剂量。技术人员将理解，所选择的剂量通常是实现治疗效果和不引起对患者不可接受的毒性之间的折衷。
“治疗活性”包括在患者或受试者体内产生期望的治疗效果的剂量。在与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合的第二抗体分子的情况下，此类治疗效果可以是患者体内肿瘤体积的减小。
“治疗效果”包括可直接或间接归因于使用考虑中的疗法的所有效果。这可以是可测量的治疗效果，诸如减小的肿瘤体积或减小的肿瘤大小(其可以通过例如CT扫描确定)。在其他情况下，这可能是更主观的效果，诸如患者报告的症状严重程度的降低。癌症患者响应于治疗性抗体的施用的治疗效果的测量是本领域众所周知的。此外，一名患者或一组患者在限定的一段时间内的存活水平是治疗效果的替代读出。
在一些情况下，低于耐受治疗剂量的剂量低于建议的耐受治疗剂量。技术人员知道，对于经批准的抗体疗法，建议某些剂量(通常以mg/kg表示)用于某些患者组或用于患有特定类型癌症的患者。通常，建议的治疗剂量在经批准的抗体治疗剂的标签或处方信息中有所描述。另外，如何使用本领域众所周知的技术确定推荐的耐受治疗剂量对于技术人员来说是显而易见的。
在一些其他情况下，低于耐受治疗剂量的剂量低于计算的治疗剂量。“计算的治疗剂量”包括针对特定患者计算的抗体剂量，即基于癌症类型、癌症阶段、其体重、身体质量指数(BMI)和其他因素。
在一些其他情况下，低于耐受治疗剂量的剂量低于最大(或最大批准的)耐受治疗剂量。最大耐受治疗剂量是指不会引起不可接受的副作用的最高剂量。
在一些其他情况下，低于耐受治疗剂量的剂量低于最小治疗剂量(另外已知为最小有效剂量)。最小治疗剂量是指被认为在患者中产生可测量治疗效果的最低剂量，如上文所定义。
在一些其它情况下，低于耐受治疗剂量的剂量低于建议的耐受治疗剂量。在一些实施例中，这可以包括药物标签中包括的适应症的建议剂量。
技术人员将理解，上文定义的耐受治疗剂量的实际剂量值将根据与CTLA-4特异性结合的抗体的身份以及使用该组合或适合于使用该组合的患者而有所不同。
应当理解，推荐剂量是由监管机构诸如FDA或EMEA批准的剂量。该剂量通常是在审查疗效和耐受性数据两者后确定的，这些数据通常来自后期安慰剂对照盲法和随机临床试验，其中可能包括不同的剂量水平。在癌症中，批准的剂量将具有治疗益处并显示出可接受的毒性。通过开发(从早期到后期临床试验)，有时发现较高的抗体剂量更有效，但也与不可接受的毒性相关。
对于本领域技术人员如何为任何特定抗体定义特定耐受治疗剂量是显而易见的，通常在临床试验期间使用剂量递增研究。例如，药物标签中列出了与CTLA-4特异性结合的示例抗体伊匹木单抗的耐受治疗剂量(参见伊匹木单抗的FDA标签：
https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/label/2018/ 125377s094lbl.pdf).
如其中所讨论的，伊匹木单抗的耐受治疗剂量可能如下：
●对于不可切除或转移性黑素瘤：每3周静脉内施用3mg/kg，持续90分钟，共4剂。
●对于辅助性黑素瘤：每3周静脉内施用10mg/kg，持续90分钟，4剂，随后每12周10mg/kg，持续长达3年，或直至有记录的疾病复发或不可接受的毒性。
●对于晚期肾细胞癌：静脉内施用纳武单抗3mg/kg，持续30分钟，随后是在同一天静脉内施用伊匹木单抗1mg/kg，持续30分钟，每3周一次，最多4剂，然后每2周静脉内施用240mg纳武单抗或每4周静脉内施用纳武单抗480mg，持续30分钟。
因此，在一些实施例中，伊匹木单抗的耐受治疗剂量可以是1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg。
尚未被批准的抗体的耐受治疗剂量可以基于已经被批准或已经过大量临床试验的类似抗体的耐受治疗剂量。
通过提供前述方面中描述的第一抗体和第二抗体的组合，其中第二抗体以低于耐受治疗剂量的剂量使用，发明人已经设计了一种与分开使用高得多剂量的靶向CTLA-4的相同抗体时获得相似或相当的治疗效果的方法。
从耐受性的角度来看，使用高剂量的靶向CTLA-4的抗体通常是不可取的。CTLA-4由活化的T细胞表达，并向T细胞传递抑制性信号，从而下调T细胞应答。使用与CTLA-4特异性结合的治疗性抗体阻断CTLA-4可防止这种抑制性信号，从而活化更多能够靶向癌症的T细胞。然而，这种机制是不加区别的，并且可以活化更多靶向肿瘤细胞上未发现的自身特异性抗原的T细胞，即它可以启动自身免疫应答。因此，通过减少产生治疗效果所需的抗CTLA-4抗体的剂量，可以减少与耐受性相关的问题。
使用较低剂量并实现相同的治疗效果可以使用与第一抗体分子的组合实现，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少。第一抗体分子阻断与抑制性FcγRIIb的结合，这反过来又可以活化可以靶向癌细胞的效应免疫细胞，例如CD8效应T细胞。
这是令人惊讶的，因为尤其是在对抗CTLA-4治疗具有抗性或已经发展出抗性或可能发展出抗性的患者中，预计减少抗CTLA-4抗体的剂量不会导致与使用高得多剂量的相同抗体相当的治疗效果。
因此，使用较低剂量的与CTLA-4特异性结合的抗体分子是有利的，因为通过使用较低剂量，患者出现与耐受性(即耐受性得到改善)、毒性和令人不快的副作用相关的问题的机会减少。它还提高了治疗的成本效益，因为施用所需的抗体更少。
在一些实施例中，持续使用较低剂量的靶向CTLA-4的抗体可以降低受试者变得具有抗性的风险。不受理论的束缚，发明人认为，例如，如果在低(较低)抗CTLA-4剂量下更好地实现瘤内Treg耗竭并且出现在治疗上更有效的作用机制，则效应T细胞中的抑制性信号传导的低水平阻断与增强的Treg耗竭(使用本文所述的第一抗体分子和第二抗体分子的组合)相结合可以减少和/或预防抗性。
因此，本发明使得延长对CTLA-4具有特异性的抗体的治疗窗成为可能。“治疗窗口”是指可以有效治疗疾病而不产生毒性作用或耐受性问题的药物剂量范围。因此，本发明使得可以使用较低剂量的抗CTLA-4抗体并获得相同或相似的治疗效果，同时降低由于较低剂量而产生不良反应的可能性。
在一些实施例中，第二抗体分子的剂量可以表示为本文定义的耐受治疗剂量的百分比。在一些实施例中，第二抗体的剂量比第二抗体分子的耐受治疗剂量低至少30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％。在一些优选的实施例中，第二抗体的剂量比第二抗体的耐受治疗剂量低至少50％。在一些其他优选的实施例中，第二抗体的剂量比第二抗体的耐受治疗剂量低至少70％。
在一些优选的实施例中，第二抗体的剂量比第二抗体的耐受治疗剂量低至少80％(即80％或更低)。
如上文所讨论的，在一些实施例中，以低于耐受治疗剂量的剂量使用第二抗体分子的结果是，在较低剂量下使用的第一抗体分子和第二抗体分子的治疗效果与在不存在所述第一抗体分子的情况下在第二抗体分子的最大耐受治疗剂量下的第二抗体分子的治疗效果相当。如上文关于治疗效果的含义所讨论的，本领域技术人员可以容易地测量该效果。
还如上文所讨论的，在一些实施例中，以低于耐受治疗剂量的剂量使用第二抗体分子可以改善受试者中第二抗体分子的耐受性。
如本文所用，术语“耐受性”是指受试者可耐受治疗剂不良作用的程度。对于“不良作用”,包括由治疗剂直接或间接引起的任何不是所需治疗效果的效果，或由治疗剂直接或间接引起的任何其它有益效果。
在与CTLA-4特异性结合的第二抗体的情况下，这些副作用可能包括以下一种或多种：输注相关反应(IRR)、疲劳、腹泻、小肠结肠炎、恶心、呕吐、瘙痒、皮疹、结肠炎、咳嗽、头痛、意外体重减轻、食欲下降、失眠、发热、肝炎、皮炎、免疫介导的神经病变和免疫介导的内分泌疾病。
●耐受性问题可能有不同的等级，即对于出现耐受性问题的患者，严重性不同。在一些情况下，它们会导致患者不适，而在其他情况下，它们可能会导致严重的问题，可能会妨碍治疗性抗体分子的持续治疗。在严重的情况下，毒性可能表现为：
●肠道问题(结肠炎)可能导致肠道撕裂或穿孔(穿孔)；
●肝脏问题(肝炎)可能导致肝功能衰竭；
●可能导致严重皮肤反应的皮肤问题；
●可能导致瘫痪的神经问题；
●激素腺问题(尤其是垂体、肾上腺和甲状腺)；
●肺部问题(肺炎)；
●肾脏问题，包括肾炎和肾衰竭；
●脑部炎症(脑炎)；
●在最严重的情况下，耐受性问题甚至可能导致患者死亡。
应当理解，最严重类型的耐受性问题并不是急性的，而是需要时间(数天至数周)来显现(与免疫系统需要长达两周的时间来产生某些T细胞介导的免疫应答一致)，并且包括胃肠道穿孔。
如本文所述可以改善的耐受性问题是与向受试者静脉内施用治疗性抗体分子有关可能发生的不良事件。
在一些实施例中，使用低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量减少受试者中与使用第二抗体分子相关的副作用和/或减少毒性。
“副作用”包括上文讨论的与治疗剂引起的耐受性相关的任何“副作用”。已知减少治疗抗体的剂量会减少相关的副作用，但也已知这会降低治疗效果(对于伊匹木单抗，参见Wolchok等人，2010,Lancet Oncol.,11(2):155-164)。
“毒性”是指治疗物质对生物体造成损害的程度。技术人员将理解，毒性和耐受性是相互关联的并且都取决于施用的剂量。
在本文讨论的治疗性抗体的情况下，当大量治疗性抗体在体内积聚时，可能会发生毒性。因此，施用较低剂量的抗体治疗剂以最小化与毒性相关的任何问题是有利的。
在一些其他实施例中，使用低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量可以减少受试者中与使用第二抗体分子相关的任何脱靶效应和/或自身免疫反应。
如本文所述，第二抗体分子与CTLA-4特异性结合并经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。CTLA-4在调节性T细胞中组成型表达，但仅在活化后的常规T细胞中上调——这种现象在癌症中尤其值得注意。在一些实施例中，第二抗体分子是伊匹木单抗(诸如来自Bristol-Myers Squibb的)。在一些实施例中，第二抗体分子是曲美木单抗(以前表示为替西木单抗(ticilimumab)和CP-675,206)，该曲美木单抗是针对CTLA-4的全人单克隆抗体，之前由Pfizer开发，且现在由MedImmune进行临床开发。
因此，在一些实施例中，第二抗体分子是伊匹木单抗。技术人员将理解，伊匹木单抗的标准耐受治疗剂量可以由批准的药物标签来确定。在一些实施例中，当第二抗体分子是伊匹木单抗时，耐受治疗剂量是10mg/kg。因此，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于10mg/kg的任何剂量。在这种情况下，治疗可以是辅助疗法，即用于治疗已经用一种或多种主要治疗例如外科手术治疗的癌症。
在一些实施例中，当第二抗体分子是伊匹木单抗时，耐受治疗剂量是3mg/kg。因此，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于3mg/kg的任何剂量。例如，在一些优选的实施例中，第二抗体的剂量可以是约2mg/kg或可以低于2mg/kg，例如在1.5mg/kg至2.5mg/kg的范围内。在一些实施例中，第二抗体的剂量是2mg/kg。在一些实施例中，当第二抗体是伊匹木单抗时，第二抗体的剂量是1mg/kg。
在一些实施例中，当第二抗体分子是伊匹木单抗时，第二抗体分子的耐受治疗剂量是1mg/kg。因此，在本实施例中，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于1mg/kg的任何剂量。在该实施例中，伊匹木单抗被批准与另一种治疗性抗体(例如，纳武单抗)组合使用。
因此，在一些实施例中，关于第八至第十四方面描述的用途或方法也不涉及施用特异性结合PD-1或PD-L1的抗体分子和/或药物组合物或试剂盒也不包含特异性结合PD-1或PD-L1的抗体分子。在这些实施例中，伊匹木单抗的耐受治疗剂量通常为3mg/kg或更高。
在第二抗体分子是伊匹木单抗的实施例中，可以根据批准标签中提供的剂量时间表施用第二抗体分子，或者替代地，使用本文考虑的较低剂量的不同剂量时间表是可能的。
在一些另外或替代的实施例中，第二抗体分子是曲美木单抗。
在一些实施例中，当第二抗体分子是曲美木单抗时，耐受治疗剂量是750mg。因此，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于750mg的任何剂量。在一些其他实施例中，耐受治疗剂量是300mg。因此，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于300mg的任何剂量。在一些其他实施例中，耐受治疗剂量是75mg。因此，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于75mg的任何剂量。
在一些实施例中，当第二抗体分子是曲美木单抗时，耐受治疗剂量是10mg/kg。因此，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于10mg/kg的任何剂量。
在一些实施例中，当第二抗体分子是曲美木单抗时，耐受治疗剂量是3mg/kg。因此，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于3mg/kg的任何剂量。例如，在一些优选的实施例中，第二抗体的剂量可以是约2mg/kg或可以低于2mg/kg，例如在1.5mg/kg至2.5mg/kg的范围内。在一些实施例中，第二抗体的剂量是2mg/kg。在一些实施例中，当第二抗体是曲美木单抗时，第二抗体的剂量是1mg/kg。
在一些实施例中，当第二抗体分子是曲美木单抗时，第二抗体分子的耐受治疗剂量是1mg/kg。因此，在本实施例中，低于耐受治疗剂量的第二抗体的剂量是低于1mg/kg的任何剂量。
在第二抗体分子是曲美木单抗的实施例中，可以根据批准的标签或批准的临床试验时间表中提供的剂量时间表施用第二抗体分子，或者替代地，使用本文考虑的较低剂量的不同的剂量时间表是可能的。
技术人员将理解，第二抗体分子可以是本文讨论的对CTLA-4具有特异性的抗体中任何一者的组合，例如，与CTLA-4特异性结合的第二抗体分子可以是伊匹木单抗和曲美木单抗的组合。
还应当理解，除了具体讨论的那些以外，本发明还考虑了对CTLA-4具有特异性的其他抗体。
如上文所讨论的，第二抗体分子可以降低和/或防止癌症对用与CTLA-4特异性结合的第二抗体分子治疗的抗性。
在一些实施例中，第八至第十四实施例中描述的本发明用于治疗患有对治疗具有抗性的癌症的受试者。在一些实施例中，癌症可以是复发性或难治性癌症。在一些实施例中，癌症可能对用靶向免疫检查点阻断的抗体(例如，对CTLA-4具有特异性的抗体)的治疗具有抗性。
“抗性(resistant)”、“抗性(resistance)”或“对治疗具有抗性”是指与之前的反应性水平或预期的反应性水平相比，患者对用与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有降低的反应性水平。这包括患者先前已经用所述抗体分子治疗过的情况(即，它们已经获得抗性)，并且还包括患者从未用所述抗体分子治疗过的情况(即，它们具有固有抗性)。在一些另外或替代的实施例中，患者对与PD-1和/或PD-L1特异性结合的抗体分子可能具有降低的反应性水平。
对治疗具有抗性可以通过多种方式来测量，例如，通过监测患者以确保癌症以预期的方式消退，并识别对治疗完全没有反应的患者。
“对治疗具有抗性”还包括尚未表明使用与CTLA-4特异性结合的抗体进行治疗的癌症类型，例如，如果先前已发现这些抗体(或抗体组合)不会发挥可测量的治疗效果。
还包括可具有较低肿瘤突变负荷(TMB)的癌症。“肿瘤突变负荷”是指癌细胞内基因突变的数量。此类测量可以通过本领域已知的实验室测试来确定。已知具有高TMB的细胞更有可能被识别为异常并受到免疫系统的攻击，并且高TMB已被鉴定为PD-1/PD-L1阻断的应答生物标记物(Goodman等人，2017,Mol Cancer Ther.,16(11):2598-2608)。因此，具有低TMB的癌症可以用本发明的组合成功地靶向，这可以增强如上所述的此类免疫阻断抗体的效果。
应当理解，在一些实施例中，对治疗有抗性的癌症可以是复发性和/或难治性癌症。
复发性癌症是先前已经治疗过的癌症，并且作为该治疗的结果，受试者完全或部分康复(即，称受试者处于缓解中)，但是在停止治疗后，癌症复发或恶化。换句话说，复发性癌症是在其有效且受试者完全或部分恢复的一段时间后变得对治疗产生抗性的癌症。
难治性癌症是已经治疗过但对该治疗没有反应的癌症，和/或已经治疗过但在治疗期间有进展的癌症。换句话说，难治性癌症是对治疗有抗性的癌症。
应当理解，由于固有的抗性，癌症可能是难治性癌症。“内在抗性”包括癌症和/或受试者和/或靶细胞从第一次施用时起，或在完全施用之前，对特定治疗有抗性的意思。
应当理解，由于获得抗性，癌症可能是复发性癌症，或者是复发性癌症和难治性癌症。通过“获得抗性”，包括了癌症和/或受试者和/或靶细胞在第一次施用特定治疗之前对特定治疗没有抗性，但至少在第一次施用特定治疗之后(例如：在第二次施用治疗之后；第三次施用治疗之后；第四次施用治疗之后；第五次施用治疗之后；第六次施用治疗之后；第七次施用治疗之后；第八次施用治疗之后；第九次施用治疗之后；第十次施用治疗之后；第十一次施用治疗之后；第十二次施用治疗之后)或期间变得具有抗性。
医学领域的技术人员可以容易地诊断出复发性癌症和/或难治性癌症。
在一些实施例中，对用与CTLA-4特异性结合的抗体分子治疗具有抗性的患者先前已经用与CTLA-4特异性结合的抗体分子进行治疗，任选地其中该患者在所述治疗后变得具有抗性。
在该实施例中，还包括这样的情况：患者之前已经用与CTLA-4特异性结合的第一抗体治疗过，并且本发明的第二抗体分子是与CTLA-4特异性结合的第二抗体(即本发明的第二抗体分子不同于先前用于治疗患者的抗CTLA-4抗体)。在一些替代的实施例中，先前用于治疗患者的与CTLA-4特异性结合的抗体与本发明的特异性结合CTLA-4的第二抗体分子相同。
如上所述，在一些替代的实施例中，患者之前没有接受过与CTLA-4特异性结合的抗体分子治疗。在该实施例中，患者可能对所述治疗具有固有抗性。
在一些实施例中，癌症是FcγRIIb阳性B细胞癌症。“FcγRIIb阳性癌症”包括表达FcγRIIB的任何癌症，尽管其表达水平不同。FcγRIIB表达在慢性淋巴细胞白血病和套细胞淋巴瘤中最明显，在弥漫性大B细胞淋巴瘤中中等，在滤泡性淋巴瘤中最不明显。然而，在一些情况下，患有通常表达低水平的FcγRIIB的癌症(例如滤泡性淋巴瘤)的受试者可能具有非常高水平的FcγRIIB表达。FcγRIIB在不同类型的B细胞癌(特别是上述那些)中的表达水平与抗体分子利妥昔单抗的内化速率相关。因此，FcγRIIB的表达和抗体分子的相关内化被认为是B细胞癌共有的共同机制(Lim等人，2011)。抗体分子的FcγRIIB依赖性引发可以被本文公开的针对FcγRIIB的抗体阻断。
因此，本文公开的组合可以用于治疗B细胞癌，并且特别是复发性套细胞淋巴瘤和/或难治性套细胞淋巴瘤，和/或复发性滤泡性淋巴瘤和/或难治性滤泡性淋巴瘤，和/或复发性弥漫性大B细胞淋巴瘤和/或难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤。
在一些其他更优选的实施例中，癌症是FcγRIIb阴性癌症。“FcγRIIb阴性癌症”包括不存在任何FcγRIIb受体的任何癌症。这可以在多种方法中使用抗FcγRIIB特异性抗体进行检验，包括免疫组织化学和流式细胞术，如Tutt等人，J Immunol,2015,195(11)5503-5516中所述。
在一些优选的实施例中，癌症选自由癌、肉瘤和淋巴瘤组成的组。
在一些实施例中，癌症是选自由腺癌、鳞状细胞癌、腺鳞癌、间变性或未分化癌、大细胞癌和小细胞癌组成的组的癌。
在一些实施例中，癌症是选自由骨肉瘤、软骨肉瘤、脂肪肉瘤和平滑肌肉瘤组成的组的肉瘤。
FcγRIIb阴性癌症可以选自由以下项组成的组：黑素瘤、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、转移性激素难治性前列腺癌、结直肠癌、肺癌、小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌、尿路上皮癌、膀胱癌、肾癌、间皮瘤、梅克尔细胞癌、头颈癌和胰腺癌。
上述癌症中的每一种都是已知的，并且症状和癌症诊断标记被充分描述，用于治疗那些癌症的治疗剂也是如此。因此，用于治疗上述癌症类型的症状、癌症诊断标记物和治疗剂对于医学技术人员来说是已知的，如上面关于本发明的第一至第七方面所讨论的。
在一些实施例中，将特异性结合FcγRIIb的第一抗体分子和特异性结合CTLA-4的第二抗体分子同时施用于患者，这意味着它们或者在一个时间点一起施用或者彼此在时间上非常接近地分开施用。
在一些实施例中，在施用特异性结合CTLA-4的第二抗体分子之前向患者施用特异性结合FcγRIIb的抗体分子。
这种依次施用可以通过瞬时分离抗体来实现。替代地，或与第一种选择组合，依次施用还可以通过以下来实现：空间分离抗体分子，通过以某种方式(诸如瘤内)施用特异性结合FcγRIIb的抗体分子，使得其先于第二抗体分子到达癌症，然后以某种方式(诸如全身性)施用第二抗体分子，使得其在特异性结合FcγRIIb的抗体分子之后到达癌症。
在一些实施例中，在施用特异性结合FcγRIIb的抗体分子之前，例如使用上述空间或时间模式向患者施用特异性结合CTLA-4的第二抗体分子。
医学领域的技术人员将知道，药物可以用不同的添加剂进行修饰，例如以改变药物被身体吸收的速率；并且可以以不同的形式进行修饰，例如以允许特定的身体施用途径。
因此，包括了如本文所述的抗体和组合物可以与赋形剂和/或药学上可接受的载体和/或药学上可接受的稀释剂和/或佐剂组合。
还包括了本发明的组合和/或组合物和/或抗体和/或药物可以适合于肠胃外施用，本发明的组合和/或组合物和/或抗体和/或药物包含：水性和/或非水性无菌注射溶液，其可以含有抗氧化剂、和/或缓冲剂、和/或抑菌剂、和/或使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质；和/或水性和/或非水性无菌悬浮液，其可以包括悬浮剂和/或增稠剂。本发明的组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物可以存在于单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿瓶和小瓶，并且可以储存在仅需要紧接着在使用之前添加无菌液体载体(例如，注射用水)的冷冻干燥(即冻干)条件下。
可以由前述种类的无菌粉末和/或颗粒和/或片剂制备临时注射溶液和悬浮液。
对于人类患者的肠胃外施用而言，除非另外定义，否则以单次或分剂量施用的本文定义的特异性结合FcγRIIb的抗体分子和/或第二抗体分子和/或第三抗体分子的每日剂量水平通常为1mg/kg患者体重至20mg/kg，或在一些情况下甚至高达100mg/kg。在一些优选的实施例中，特异性结合FcγRIIb的抗体分子的剂量将为10mg/kg。在一些情况下，例如与延长施用相结合的情况下，可以使用较低剂量。在任何情况下，医生将确定最适合于任何个体患者的实际剂量，并且所述实际剂量将随着特定患者的年龄、体重和响应而变化。上述剂量是一般情况的示例。当然，可以存在其中需要更高或更低剂量范围的单独的情况，并且这在本发明的范围内。
通常，本发明的组合物和/或药物将含有浓度介于约2mg/ml与150mg/ml之间或介于约2mg/ml与200mg/ml之间的特异性结合FcγRIIb的抗体分子。在一个优选的实施例中，本发明的药物和/或组合物将含有浓度为10mg/ml的特异性结合FcγRIIb的抗体分子。
通常，在人类中，本发明的组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物的口服或肠胃外施用是优选的途径，也是最方便的。对于兽医用途，根据正常的兽医实践将本发明的组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物作为适当可接受的调配物施用，并且兽医将确定最适合于特定动物的给药方案和施用途径。因此，本发明提供了药物制剂，其包含有效治疗各种病况(如上所述和下文进一步描述)的量的本发明的抗体和/或药剂。优选地，该组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物适合于通过选自包含以下项的组的途径进行递送：静脉内(IV)；皮下(SC)、肌内(IM)或瘤内。在一些优选的实施例中，施用是静脉内的。
在一些实施例中，第一抗体分子或第二抗体或两者可以通过使用质粒或病毒来施用。此类质粒然后包含编码第一抗体分子或第二抗体或两者的核苷酸序列。在一些实施例中，编码第一抗体分子或第二抗体或两者的部分或完整序列的核苷酸序列整合到细胞或病毒基因组中或病毒的病毒组中；然后，此类细胞或病毒充当第一抗体分子或第二抗体或两者的递送媒剂(或编码第一抗体分子或第二抗体或两者的核苷酸序列的递送媒剂)。例如，在一些实施例中，此类病毒可以呈治疗性溶瘤病毒的形式，该治疗性溶瘤病毒包含编码本文所述的抗体分子中的至少一种抗体分子的核苷酸序列。在一些实施例中，此类溶瘤病毒包含编码全长人IgG抗体的核苷酸序列。溶瘤病毒是医学和病毒学领域的技术人员已知的。
本发明还包括包含本发明的多肽结合部分的药学上可接受的酸或碱加成盐的组合物和/或抗体和/或药剂和/或药物。用于制备可用于本发明的前述碱化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸是那些形成无毒的酸加成盐的酸，即含有药学上可接受的阴离子的盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘化物、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、乙酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、酒石酸氢盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、蔗糖盐、苯甲酸盐、甲烷磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐[即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3萘甲酸酯)]盐等。药学上可接受的碱加成盐也可用于产生根据本发明的药剂的药学上可接受的盐形式。可用作试剂来制备本质上呈酸性的本发明药剂的药学上可接受的碱盐的化学碱是与此类化合物形成无毒碱盐的那些。此类无毒的碱盐包括但不限于衍生自此类药学上可接受的阳离子的那些，诸如碱金属阳离子(例如钾和钠)和碱土金属阳离子(例如钙和镁)、铵或水溶性胺加成盐，诸如N-甲基葡糖胺-(葡甲胺)，以及低级烷醇铵和药学上可接受的有机胺的其他碱盐等。本发明的药剂和/或多肽结合部分可被冻干用于储存并在使用前在合适的载体中重构。可以使用任何合适的冻干方法(例如喷雾干燥、滤饼干燥)和/或重构技术。本领域技术人员将理解，冻干和重建可导致不同程度的抗体活性损失(例如，对于常规免疫球蛋白，IgM抗体往往比IgG抗体具有更大的活性损失),并且可能必须上调使用水平以进行补偿。在一个实施例中，冻干的(冷冻干燥的)多肽结合部分在再水合时损失不超过其活性的约20％、或不超过约25％、或不超过约30％、或不超过约35％、或不超过约40％、或不超过约45％、或不超过约50％(冻干前)。
如本文关于第八至第十四方面定义的第一抗体可以是如本文关于前述方面定义的相同抗体。涉及第一抗体的身份和抗体序列的所有实施例和实例同样适用于第八至第十四方面中描述的本发明。
如本文关于第八至第十四方面定义的第二抗体可以是如本文关于前述第一至第七方面定义的第三抗体分子相同的抗体。涉及与CTLA-4特异性结合的第三抗体的身份的所有实施例和实例同样适用于第八至第十四方面中描述的本发明，只要其涉及这些方面的第二抗体分子。
本文提及的抗体分子(即第一抗体分子、第二抗体分子和第三抗体分子)对于免疫学和分子生物学领域的技术人员来说是众所周知的。通常，抗体包含两条重(H)链和两条轻(L)链。在本文中，我们有时将这种完整的抗体分子称为全尺寸或全长抗体。抗体的重链包含一个可变结构域(VH)和三个恒定结构域(CH1、CH2和CH3)，并且抗体的分子轻链包含一个可变结构域(VL)和一个恒定结构域(CL)。可变结构域(有时统称为FV区)与抗体的靶标或抗原结合。每个可变结构域包含三个环，称为互补决定区(CDR)，其负责靶标结合。恒定结构域不直接参与抗体与抗原的结合，但表现出各种效应子功能。根据其重链恒定结构域的氨基酸序列，抗体或免疫球蛋白可以分为不同的类别。免疫球蛋白主要分为五类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且在人类中，这些中的一些进一步分为亚类(同种型)，例如IgG1、IgG2、IgG3和IgG4；IgA1和IgA2。
抗体的另一部分是Fc区(也称为片段可结晶结构域)，其包含抗体重链中的每一个的两个恒定结构域。如上所述，Fc区负责抗体和Fc受体之间的相互作用。
如本文所用，术语抗体分子涵盖全长或全尺寸抗体以及全长抗体的功能片段和此类抗体分子的衍生物。
全尺寸抗体的功能片段与对应的全尺寸抗体具有相同的抗原结合特性并且包括与对应的全尺寸抗体相同的可变结域(即VH和VL序列)和/或相同的CDR序列。功能片段具有与对应的全尺寸抗体相同的抗原结合特性，意味着其与全尺寸抗体靶标上的相同表位结合。此类功能片段可以对应于全尺寸抗体的Fv部分。替代地，此类片段可以是Fab，也表示为F(ab)，其是不含Fc部分的单价抗原结合片段，或F(ab’)2，其是含有通过二硫键连接在一起的两个抗原结合Fab部分的二价抗原结合片段，或F(ab’)，即F(ab’)2的单价变体。此类片段也可以是单链可变片段(scFv)。
功能片段不总是含有对应的全尺寸抗体的所有六个CDR。应当理解，含有三个或更少的CDR区(在一些情况下，甚至仅单个CDR或其部分)的分子能够保留衍生出CDR的抗体的抗原结合活性。例如，在Gao等人，1994,J.Biol.Chem.,269:32389-93中描述了整个VL链(包括所有三个CDR)对其底物具有高亲和力。
例如由Vaughan和Sollazzo 2001,Combinatorial Chemistry&High ThroughputScreening,4:417-430描述了含有两个CDR区的分子。在第418页(右栏-3我们的设计策略)描述了一种仅包括散布在构架区内的H1和H2 CDR高变区的微抗体。该微抗体被描述为能够结合到靶标上。Pessi等人，1993,Nature,362:367-9和Bianchi等人，1994,J.Mol.Biol.,236:649-59由Vaughan和Sollazzo引用，并且更详细地描述H1和H2微抗体及其特性。在Qiu等人，2007,Nature Biotechnology,25:921-9中证明了由两个连接的CDR组成的分子能够与抗原结合。Quiocho 1993,Nature,362:293-4提供了“微抗体”技术的概述。Ladner 2007,《自然生物技术》,25:875-7评论了含有两个CDR的分子能够保留抗原结合活性。
含有单一CDR区的抗体分子描述于例如Laune等人，1997,JBC,272:30937-44，其中证明了衍生自CDR的一系列六肽显示抗原结合活性，并且注意到完整、单一CDR的合成肽显示出强结合活性。Monnet等人，1999,JBC,274:3789-96中显示了一系列12-mer肽和相关的构架区具有抗原结合活性，并且评论了单独的CDR3样肽能够与抗原结合。在Heap等人，2005,J.Gen.Virol.,86:1791-1800中报道了“微抗体”(含有单一CDR的分子)能够与抗原结合，并且显示了来自抗HIV抗体的环肽具有抗原结合活性和功能。在Nicaise等人，2004,Protein Science,13:1882-91中显示了单一CDR可赋予其溶菌酶抗原的抗原结合活性和亲和力。
因此，具有五个、四个、三个或更少个CDR的抗体分子能够保留其衍生的全长抗体的抗原结合特性。
抗体分子也可以是全长抗体的衍生物或此类抗体的片段。当使用衍生物时，其应当具有与对应的全长抗体相同的抗原结合特征，即其与靶标上与全长抗体相同的表位结合。
因此，如本文所用，术语“抗体分子”包括所有类型的抗体分子及其功能片段和衍生物，包括：单克隆抗体、多克隆抗体、合成抗体、重组产生的抗体、多特异性抗体、双特异性抗体、人抗体、人来源抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单链抗体、单链Fvs(scFv)、Fab片段、F(ab')2片段、F(ab')片段、二硫键连接的Fvs(sdFv)、抗体重链、抗体轻链、抗体重链的同型二聚体、抗体轻链的同型二聚体、抗体重链的异源二聚体、抗体轻链的异源二聚体、此类同源和异源二聚体的抗原结合功能片段。
此外，除非另有说明，否则本文使用的术语“抗体分子”包括所有类别的抗体分子和功能片段，包括：IgG、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgD和IgE。
在一些实施例中，抗体为人IgG1。技术人员将理解，小鼠IgG2a和人IgG1与活化性Fcγ受体接合，并且共享通过例如ADCP和ADCC活化携带活化性Fcγ受体的免疫细胞来活化靶细胞缺失的能力。因此，在小鼠IgG2a是针对在小鼠中缺失的优选同种型的实施例中，人IgG1是此类实施例中针对在人中缺失的优选同种型。
如上所述，本发明涵盖不同类型和形式的抗体分子，并且是免疫学领域技术人员已知的。已知地，用于治疗目的的抗体通常用修饰抗体分子特性的另外的组分修饰。
因此，包括本发明的抗体分子或根据本发明使用的抗体分子(例如，单克隆抗体分子、和/或多克隆抗体分子、和/或双特异性抗体分子)包含可检测部分和/或细胞毒性部分。
“可检测部分”包括由以下部分组成的组的一个或多个：酶；放射性原子；荧光部分；化学发光部分；生物发光部分。可检测部分允许抗体分子在体外、和/或体内、和/或离体显现。
“细胞毒性部分”包括放射性部分和/或酶，其中酶是胱天蛋白酶和/或毒素，其中毒素是细菌毒素或毒液；其中细胞毒性部分能够诱导细胞裂解。
进一步包括可以是分离形式和/或纯化形式的抗体分子，且/或可以是聚乙二醇化的抗体分子。聚乙二醇化是一种方法，通过该方法，聚乙二醇聚合物被添加到如抗体分子或衍生物的分子中以修饰其行为，例如通过增加其流体动力学大小来延长其半衰期，从而防止肾清除。
如上所述，抗体的CDR与抗体靶标结合。本文描述的每个CDR的氨基酸分配符合根据以下的定义：Kabat EA等人1991,"Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest"第五版，NIH出版号：91-3242，第xv-xvii页。
如技术人员将了解的，还存在用于将氨基酸分配给每个CDR的其他方法。例如，国际免疫遗传学信息系统(International ImMunoGeneTics information system，IMGT(R))(http://www.imgt.org/以及Lefranc和Lefranc"The Immunoglobulin FactsBook"，由学术出版社出版，2001年)。
在进一步的实施例中，本发明的抗体分子或根据本发明使用的抗体分子是能够与本文提供的特异性抗体竞争的抗体分子，例如，用于与特异性靶标结合的包括在例如SEQID NO:1-194中列出的氨基酸序列中的任何序列的抗体分子。
“能够竞争”是指竞争性抗体能够至少部分地抑制或以其他方式干扰本文定义的抗体分子与特异性靶标的结合。
例如，此类竞争性抗体分子可能能够将本文所述抗体分子的结合抑制至少约10％；例如至少约20％、或至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％、至少约95％、约100％和/或将本文所述的抗体防止或降低与特异性靶标结合的能力抑制至少约10％；例如至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％、至少约95％、或约100％。
竞争性结合可以通过本领域技术人员众所周知的方法来确定，诸如酶联免疫吸附测定(ELISA)。
ELISA测定可用于评估表位修饰或封闭抗体。适合用于鉴定竞争性抗体的另外的方法公开于Antibodies:A Laboratory Manual,Harlow&Lane，其通过引用并入本文(例如，参见第567页至第569页、第574页至第576页、第583页和第590页至第612页，1988,CSHL,NY,ISBN 0-87969-314-2)。
众所周知，抗体与限定的靶分子或抗原特异性结合或相互作用。也就是说，抗体优先地和选择性地与其靶标而不是非靶标的分子结合。
评估蛋白质结合的方法是生物化学和免疫学领域的技术人员已知的。本领域技术人员将理解，那些方法可用于评估抗体与靶标的结合和/或抗体的Fc区与Fc受体的结合；以及那些相互作用的相对强度、或特异性、或抑制、或预防、或减少。可以用于评估蛋白质结合的方法的实例是，例如，免疫测定、BIAcore、蛋白质印迹、放射免疫测定(RIA)和酶联免疫吸附测定(ELISA)(参见《基础免疫学第二版(Fundamental Immunology Second Edition)》,雷文出版(Raven Press),纽约,第332至336页(1989)关于抗体特异性的讨论)。
因此，“与...特异性结合的抗体分子”包括与靶标特异性结合的抗体分子，但不结合非靶标，或比靶标更弱地结合非靶标(诸如具有较低的亲和力)。
我们还包括这样的含义，即抗与靶标特异性结合的抗体比与非靶标的特异性结合强至少2倍、或至少5倍、或至少10倍、或至少20倍、或至少50倍、或至少100倍、或至少200倍、或至少500倍、或至少约1000倍。
另外，包括以下含义：如果抗体以至少约10-1Kd、或至少约10-2Kd、或至少约10-3Kd、或至少约10-4Kd、或至少约10-5Kd、或至少约10-6Kd、或至少约10-7Kd、或至少约10-8Kd、或至少约10-9Kd、或至少约10-10Kd、或至少约10-11Kd、或至少约10-12Kd、或至少约10-13Kd、或至少约10-14Kd、或至少约10-15Kd的Kd与靶标结合，则该抗体与靶标特异性结合。
参考以下附图和实例，现在将描述体现本发明某些方面的优选的非限制性实例：
附图说明
图1：Fc：FcγR结合功能型的抗FcγRIIB(AT-130-2mIgG2a和mIgG1)，而非Fc：FcγR结合受损的抗FcγRIIB(AT-130-2mIgG1 NA)增强抗PD-1抗体治疗功效和体内存活率。单独用200μg抗PD-1(克隆29F.1A12；Bioxcell)抗体或与200μg指定抗FcγRIIB抗体变体或同种型对照(WR17)组合治疗MC38荷瘤小鼠3次(皮下接种100μl PBS中的5x105个肿瘤细胞后第8天、第12天和第15天)。对于第一次治疗，在抗PD1抗体之前6小时施用AT130-2。对于随后的治疗，同时给予两种抗体。所有注射均为200μl PBS中的腹腔内注射。当MC38的肿瘤面积达到225mm2时，认为肿瘤是终末期。图表显示动物的肿瘤生长和存活率。(**P＜0.01；对数秩检验)。实验在8-14周龄的雌性小鼠中进行。
图2：Fc：FcγR结合功能型的抗FcγRIIB(AT-130-2mIgG2a和mIgG1)，而非Fc：FcγR结合受损的抗FcγRIIB(AT-130-2mIgG1 NA)增强抗PD-1抗体治疗功效和体内存活率。单独用200μg抗PD-1(克隆29F.1A12；Bioxcell)抗体或与200μg指定抗FcγRIIB抗体变体或同种型对照(WR17)组合治疗CT26荷瘤小鼠3次(皮下接种100μl PBS中的5x105个肿瘤细胞后第8天、第12天和第15天)。对于第一次治疗，在抗PD1抗体之前6小时施用AT130-2。对于随后的治疗，同时给予两种抗体。所有注射均为200μl PBS中的腹腔内注射。当CT26的肿瘤面积达到400mm2时，认为肿瘤是终末期。图表显示动物的肿瘤生长和存活率。(**P＜0.01；对数秩检验)。实验在8-14周龄的雌性小鼠中进行。
图3：使用α-CTLA-4和BI-1607替代物AT130-2mIgG1 N297A组合治疗导致在MC38肿瘤模型中的存活率提高。将1x106个MC38细胞皮下(s.c.)注射到C57BL/6小鼠中并使其建立。一旦肿瘤直径达到6mm，就对小鼠进行治疗。用200μg抗FcγRIIB抗体(克隆AT130-2)(作为mIgG2a)或400μgmIgG1 N297A和/或200μg抗CTLA-4抗体(克隆9H10)治疗小鼠。随后，在首次给药后3天和7天后用单一或组合mAb治疗小鼠。所有抗体均在200μl PBS中腹腔内(i.p.)给予。每周测量肿瘤3次，每个治疗组中个体小鼠的肿瘤大小表示为肿瘤体积(宽度2x长度x0.52)。每组N＝X。该图是X个不同实验的总结。
图4：使用抗CTLA-4和FcγRIIB阻断的组合疗法。将5x105个CT26细胞皮下注射到雌性BALB/c小鼠中。当肿瘤宽度x长度约为100mm2时，将小鼠随机分为治疗组。在第0天、第2天、第4天和第11天进行治疗。仅9H10(仓鼠抗小鼠CTLA4)小鼠每天接受腹腔内注射200μlPBS中的200μg抗体。第0天，组合小鼠接受腹腔内注射200μl PBS中的100μg AT130-2N297A(抗小鼠CD32)，6小时后，它们接受腹腔内注射200μl PBS中的200μg9H10。在第2天、第4天和第11天，组合小鼠在单次200μl腹腔内注射中接受两种抗体(200μg9H10和100μg AT130-2NA)。测量肿瘤的宽度和长度，当肿瘤长度×宽度超过400mm2时宰杀小鼠。图A)代表治疗时间表。第1组：无Ab；第2组：抗mCD32(AT130-2NA；100μg)；第3组：抗CTLA-4(9H10；200μg)；第4组：AT130-2后6小时组合(PC61)。允许肿瘤建立并在100mm2时进行治疗。第12天给予额外剂量。图B)显示了各个肿瘤的生长。图C)代表平均肿瘤面积+/-SD或SEM。图D)代表动物的存活率。图E)2个独立实验(n＝10/组)的组合显示了存活率，并证明9H10和AT130-2NA(NA组合)的组合在延长存活率方面明显比单独使用9H10更有效(p＝0.0179)。
图5：给小鼠接种MC38肿瘤细胞，并在肿瘤达到约7x7mm大小后注射抗体。3次抗体注射后24h，治疗开始后第7-8天，处死小鼠并收获肿瘤。通过FACS分析肿瘤单细胞悬浮液的免疫细胞含量。图5A-5C显示肿瘤中不同细胞群的百分比，以及图5D显示CD8+/Treg比率。使用抗CTLA4和BI-1607替代物(AT130-2mIgG1N297A)组合治疗导致CD4+/CD25+细胞数量减少以及CD8/Treg比率提高。
图6：10-12天后，从小鼠体内取出脾脏，制备单细胞悬浮液，然后腹腔内注射到SCID小鼠(10-15x106/小鼠)中。1h后，用10mg/kg的Yervoy、抗CD25(巴利昔单抗)、Yervoy+BI-1607替代物(AT130-2mIgG1 N297A)或同种型对照mAb对SCID小鼠进行腹腔内治疗。抗体注射后24小时，从小鼠收集腹腔内注射液并使用FACS分析液体中的细胞。图6A显示了定义为CD45+CD3+CD4+CD25+CD127低/阴性的经染色的Treg占人CD45+细胞总数的百分比。图6B显示效应T细胞(CD8+)占人CD45+细胞总数的百分比。图6C显示CD8+/Treg比率。当Yervoy与BI-1607替代物(AT130-2mIgG1 N297A)组合使用时，与单独使用Yervoy相比，Treg的百分比降低，CD8+的百分比增加，并且CD8+/Treg比率提高。每组n＝4-5。
图7：在用野生型或NA突变型mAb阻断抗IL2RmAb+/-FcγRIIB的情况下评估Treg缺失。WT AT130-2似乎在缺失方面没有给出任何改善；而NA变体却可以给出改善。通过腹腔内注射向雌性Balb/c小鼠给予100μg AT130-2NA或mIgG1 WT AT130-2。6小时后腹腔内注射给予100μg PC61。4天后由FAC确定脾脏中的Tregs(FoxP3+)。宰杀小鼠并从脾脏获得单细胞悬浮液，在细胞内FoxP3染色之前用针对CD4、CD8和B220的抗体对其进行染色，然后在FACscanto上对其进行分析。确定每个组织的白细胞计数。Treg被定义为CD8-CD4+FoxP3+，并且使用白细胞计数计算Treg的数量。与野生型mIgG1 AT130-2相比，接受N297A抗体与PC61的组合4天的小鼠脾脏中的Treg数量显著减少(未配对T检验，P＝0.044)。
图8：使用α-CTLA-4和BI-1607替代物AT130-2mIgG1 N297A组合治疗，导致在较低剂量的抗CTLA-4下提高了功效并保留了存活率。将1x106个MC38细胞皮下注射到C57BL/6小鼠中并使其建立。一旦肿瘤直径达到6mm，就对小鼠进行治疗。单独使用2mg/kg或0.4mg/kg的抗CTLA-4(克隆9H10)或与20mg/kg的抗FcγRIIB抗体(克隆AT130-2)(作为mIgG1 N297A)、10mg/kg的抗CTLA-4、20mg/kg的AT130-2)(作为mIgG1 N297A)组合、或使用同种型对照治疗小鼠。随后，在首次给药后3天和7天后用单一或组合mAb治疗小鼠。所有抗体均在200μl PBS中腹腔内注射给予。8A每周测量肿瘤3次，每个治疗组中个体小鼠的肿瘤大小表示为肿瘤体积(宽度2x长度x0.52)。每组N＝10。8B不同组小鼠的存活率(未显示所有组)。
图9：在CTLA-4/PD-1组合治疗中添加BI-1607替代物AT130-2mIgG1 N297A，导致治疗抗性B16模型中的治疗功效提高。将1x106个B16细胞皮下注射到C57BL/6小鼠中。肿瘤接种后4天对小鼠进行治疗。单独使用10mg/kg抗PD-1+2或0.4mg/kg的抗CTLA-4(克隆9H10)或与20mg/kg的抗FcγRIIB抗体(克隆AT130-2)(作为mIgG1 N297A)组合治疗小鼠。此外，使用10mg/kg的抗PD-1、10mg/kg的抗PD-1+20mg/kg的AT130-2-N297A或使用同种型对照治疗对照组。随后，在首次给药后3天和7天后用单一或组合mAb治疗小鼠。所有抗体均在200μl PBS中腹腔内注射给予。每周测量肿瘤3次，每个治疗组中个体小鼠的肿瘤大小表示为肿瘤体积(宽度2x长度x0.52)。每组N＝4-10。
图10：在CTLA-4/PD-1组合治疗中添加BI-1607替代物AT130-2mIgG1 N297A，导致治疗抗性B16模型中的存活率提高。将1x106个B16细胞皮下注射到C57BL/6小鼠中。肿瘤接种后4天对小鼠进行治疗。单独使用10mg/kg抗PD-1+2或0.4mg/kg的抗CTLA-4(克隆9H10)或与20mg/kg的抗FcγRIIB抗体(克隆AT130-2)(作为mIgG1 N297A)组合治疗小鼠。此外，使用10mg/kg的抗PD-1、10mg/kg的抗PD-1+20mg/kg的AT130-2-N297A或使用同种型对照治疗对照组。随后，在首次给药后3天和7天后用单一或组合mAb治疗小鼠。所有抗体均在200μl PBS中腹腔内注射给予。每周测量肿瘤3次，直到肿瘤达到预定的伦理终点大小。每组N＝4-10。
实例
背景技术
mFcγRIIB阻断替代物mAb的产生
发明人之前已经产生了能够有效阻断抑制性FcγRIIB的人抗体。产生了源自hFcγRIIB特异性抗体6G11的两种抗体变体，一种是具有能够熟练结合活化FcγR和抑制性FcγR的野生型Fc结构域的hIgG1，另一种是与所有FcγR的Fc结合严重受损的hIgG1N297A[24]。
为了评估阻断FcγR以增强实体癌中的免疫调节抗体(例如抗PD-1和抗CTLA-4)的活性的治疗潜力，发明人先前产生了适合于在具有免疫活性的同基因小鼠肿瘤模型中进行研究的替代小鼠FcγRIIB阻断抗体。
通过将小鼠FcγRIIB特异性抗体AT-130的Fv序列分别与小鼠IgG2a(Fc：FcγR功能型(proficient))和小鼠IgG1N297A(Fc：FcγR缺陷型(deficient))恒定结构域融合，构建了与针对FcγRIIB的人类先导化合物(lead)临床候选抗体相匹配的Fc：FcγR功能型和Fc：FcγR缺陷型阻断抗体。另外产生了抗FcγR mIgG1同种型抗体，该抗体仅与活化FcγR(mFcγRIII)和抑制性mFcγRII中的一种结合，因此显示“中间”Fc：FcγR结合能力。所有产生的抗体都显示出与小鼠FcγRIIB的高特异性、高亲和力、Fv介导的结合，如重组蛋白ELISA、体外细胞结合和阻断测定中所评估的[25]。
材料和方法
细胞
从ATCC获得MC38和CT26鼠结肠癌细胞系和B16鼠黑素瘤细胞系。将细胞维持在含有2mM L-谷氨酰胺并补充有10％胎牛血清(FCS)的RPMI 1640培养基中。在收获细胞用于移植之前，确保细胞处于对数生长期。
使用Ficoll Paque PLUS分离人PBMC(Halmstad医院)，并且在洗涤后将细胞以75x106细胞/ml重悬于无菌PBS中。
检验和对照物质
抗鼠CTLA-4克隆9H10和抗鼠PD-1克隆29F.1A12购自Bioxcell和Yervoy(伊匹木单抗)以及巴利昔单抗购自Apoteket。从杂交瘤中纯化AT130-2(抗FcγRIIB)抗体。AT130-2的同种型变体和同种型对照抗体在HEK293细胞中瞬时表达。
在基于发光的ELISA或FACS分析中证明了纯化的研究批次的特异性。通过LAL-变形细胞检验确定，发现抗体的内毒素水平＜0.1IU/mL。
小鼠模型
皮下MC38肿瘤模型
六至八周龄(17g至20g)雌性C57/BL6小鼠(n＝10)(在Taconic，Denmark饲养)。将100μL PBS中的一百万(1x106)个MC38肿瘤细胞皮下注射到侧腹。当肿瘤直径达到6x6mm至8x8mm(通过卡尺测量)时开始治疗(第1天)。根据以下治疗时间表开始治疗(第1天)。
皮下CT26肿瘤模型
六至八周龄(17g至20g)雌性Balb/c小鼠(n＝10)(由来自Charles River的原始饲养员在南安普顿大学(Southampton University)饲养)。将100μL PBS中的5x105个CT26肿瘤细胞皮下注射到侧腹。当肿瘤直径达到直径为x mm(通过卡尺测量)时开始治疗(第1天)。
皮下B16肿瘤模型
从Taconic获得六至八周龄(17至20g)雌性C57/BL6小鼠(n＝10)。将100μL PBS中的一百万(1x106)个B16肿瘤细胞皮下注射到侧腹。根据以下治疗时间表，在肿瘤细胞接种(第1天)后4天开始治疗。
NOG-PBMC-SCID小鼠模型
对NOG小鼠进行静脉内注射(i.v.)15-20x106个PBMC细胞。注射两周后，分离脾脏并制成单细胞悬浮液。将细胞以50x106个细胞/ml重悬于无菌PBS中。对SCID小鼠腹腔内(i.p.)注射200μl的悬浮液，相当于10x106个细胞/小鼠(包含50％-60％人T细胞)。一小时后，使用10mg/kg的Yervoy、巴利昔单抗、BI-1607替代物(AT130-2mIgG1N297A)或同种型对照mAb治疗小鼠(根据下面的第二个治疗时间表)。24小时后收集小鼠的腹腔内液。通过FACS使用以下标记物对人T细胞亚群进行鉴定和定量：CD45、CD3、CD4、CD8、CD25、CD127(均来自BD Biosciences)。
治疗时间表
MC38模型——抗CTLA-4施用(实例1，图3)
MC38模型——肿瘤免疫浸润研究(实例2、图5)
NOG-PBMC-SCID小鼠模型(实例2，图6)
MC38模型——抗CTLA-4剂量滴定(实例3，图8)
B16模型——抗CTLA-4和/或抗PD-1与抗FcγRIIb组合(实例4，图9和图10)
动物监测
每周用卡尺测量肿瘤大小两次，并计算肿瘤面积(宽度x长度)或肿瘤体积(宽度2x长度x0.52)。
当肿瘤达到伦理终点或出现以下任何情况时，通过CO2或颈部脱位对动物实施安乐死：
■驼背
■毛皮脏乱
■活动能力下降。
肿瘤免疫浸润分析
将肿瘤切成小块并在37℃下用DNA酶和Liberase的混合物进行酶消化。此外，通过细胞滤网过滤肿瘤溶液以获得单细胞溶液。.染色前用IVIG封闭细胞溶液。通过FACS使用以下标记物对免疫细胞进行鉴定和定量：CD45、CD3、CD4、CD8、CD25(均来自BD Biosciences)。
统计分析
使用对数秩(Mantel-Cox)检验(GraphPad Prism)计算抗体介导的小鼠存活率的统计分析。*＝p＜0.05，**＝p＜0.01***＝p＜0.001被认为具有统计显著性。
实例1——FcγRIIB阻断mAb体内差异调节抗PD-1和抗CTLA-4抗肿瘤活性
发明人之前还评估了Fc：FcγR功能型和Fc：FcγR受损的抗FcγRIIB在移植有同基因MC38的免疫活性C57BL/6小鼠或移植有同基因CT26肿瘤的Balb/C小鼠中增强抗PD-1治疗活性的能力。已知这两种肿瘤模型均被包括CD8+T细胞、Treg和巨噬细胞在内的免疫细胞浸润，并对抗PD-1抗体疗法部分反应(MC38)或不反应(CT26)，反映了在人类癌症中观察到的部分反应性并为提高功效留下了空间。引人注目的是，在反应性MC38模型中，与FcγR功能型抗FcγRIIB组合治疗显著增强了经抗PD-1治疗的动物的抗肿瘤活性和存活率(图1A-F)，并诱导了抗PD-1抗性CT26肿瘤模型中的抗肿瘤活性和存活率(图2)。相反，使用Fc：FcγR受损的抗FcγRIIB和抗PD-1组合治疗未能增强或甚至削弱了抗PD-1治疗活性。
相反，与抗PD-1的发现形成鲜明对比的是，发明人现在已经确定，与FcγR受损的但不与FcγR功能型抗FcγRIIB组合疗法增强了抗CTLA-4功效，如通过MC38荷瘤动物中肿瘤生长减少并延长存活率所证明的(图3)。先前在CT26荷瘤Balb/c小鼠中观察到FcγR受损的抗FcγRIIB具有类似的抗CTLA-4增强作用(图4)。
总的来说，这些发现证明了抗FcγRIIB抗体的不同变体对于增强针对CTLA-4和PD-1的免疫检查点阻断抗体的体内治疗活性是必要的且有用的。
实例2——FcγR沉默的抗FcγRIIB增强抗CTLA-4抗肿瘤活性与体内Treg耗竭相关
发明人继续通过评估肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的抗体调节来评估FcγR沉默的抗FcγRIIB增强抗CTLA-4抗肿瘤活性的细胞机制。先前的研究已经确定，抗CTLA-4抗体疗法依赖于抗体Fc与活化Fcγ受体[21]的相互作用，并且针对Fcγ受体结合优化的抗体恒定结构域的改善疗法与增强的Treg耗竭相关，并与相关的瘤内CD8+：Treg比率的较高比例相关[18]。
此外，早期的研究已经确定，抗体包被的靶细胞的耗竭是通过抗体Fc与活化和抑制性(FcγRIIB)FcgR结合的竞争来协调调节的，这些FcgR分别促进和抵消耗竭。
与这些观察结果一致，单独使用抗CTLA-4治疗减少了瘤内Treg的数量并改善了CD8+：Treg比率(图5)。虽然单独使用FcγR沉默的抗FcγRIIB治疗不会影响CD8+T细胞或Treg数量，但抗CTLA-4与FcγR沉默的抗FcγRIIB组合治疗进一步减少了瘤内Treg数量并改善了CD8+：Treg比率(图5)。
进一步支持涉及FcγR沉默的抗FcγRIIB增强Treg耗竭的体内作用机制，用FcγR受损的抗人FcγRIIB(6G11N297Q)和抗人CTLA-4(伊匹木单抗)组合治疗PBMC人源化小鼠，与单独使用伊匹木单抗相比，导致更强的人Treg耗竭，并导致人CD8+T细胞：Treg比率改善(图6)。
重要的是，该模型的特点是Treg和CD8+T效应细胞上均表达人瘤内相关CTLA-4(图6)。最后，如前文所示，FcγR沉默的抗FcγRIIB增强了野生型C57BL/6小鼠中Treg细胞的抗IL-2抗体耗竭(图7)，与FcγRIIB基因缺失后观察到的情况非常相似[26]。
总的来说，这些数据表明FcγR沉默的抗FcγRIIB通过选择性阻断抑制性FcγRIIB来增强抗CTLA-4抗体的抗肿瘤活性，改善活化FcγR依赖性抗CTLA-4Treg耗竭，并导致CD8+：Treg比率改善。因此，发明人试图利用这一发现来确定这是否改善了CTLA-4的治疗窗口。
实例3——FcγRIIB阻断改善体内抗CTLA-4治疗窗口
除了PD-1和PD-L1之外，CTLA-4仍然是少数经临床验证的免疫检查点阻断的靶标之一，而伊匹木单抗是唯一批准用于癌症免疫疗法的抗CTLA-4抗体。尽管抗CTLA-4抗体能够在包括黑素瘤在内的晚期癌症患者中诱导持久应答，并且看似可以治愈，但其耐受性问题(可能是严重的并具有自身免疫性质)限制了其广泛使用，并导致包含较低、亚最大有效剂量的疗法的开发。新出现的数据表明，抗CTLA-4抗体可以作用于效应T细胞和Treg细胞两者，以发挥抗肿瘤活性。具体来说，阻断中央区室CD4+和CD8+效应T细胞中的CTLA-4：B7家族相互作用以及免疫抑制性信号传导被认为有助于产生抗CTLA-4诱导的适应性抗肿瘤免疫，但也可能有助于诱导非肿瘤、自身免疫应答和自身免疫表现[27，28]。在肿瘤中，抗CTLA-4抗体已显示赋予高度免疫抑制性Treg细胞的Fcγ受体依赖性耗竭，与(瘤内)效应T细胞和外周Treg细胞相比，Treg细胞过度表达CTLA-4[18]。
因此，增强较低的、更好耐受的抗CTLA-4剂量的Fcγ受体依赖性Treg耗竭，可能是实现强大而安全的抗CTLA-4抗体免疫疗法的一个有吸引力的策略。
众所周知，伊匹木单抗的治疗活性和毒性是相关的且依赖于剂量[29]。因此，根据癌症类型和单药或与抗PD-1的组合使用，批准的伊匹木单抗剂量范围为1mg/kg至10mg/kg。
为了探究FcγR受损的抗人FcγRIIB对可安全施用的有效伊匹木单抗剂量可能产生的免疫增强作用，发明人使用单独的2mg/kg或0.4mg/kg的抗CTLA-4抗体剂量或与10mg/kg的FcγR受损的抗人FcγRIIB的完全治疗剂量组合治疗MC38荷瘤小鼠，并且将抗肿瘤作用记录为受损的肿瘤生长和存活率。使用对照IgG或10mg/kg最大有效剂量的抗CTLA-4治疗作为阴性对照和阳性对照。引人注目的是，当与FcγR受损的抗人FcγRIIB(BI-1607替代物)组合使用时，低五倍剂量的伊匹木单抗(mg)与10mg/kg的最大有效伊匹木单抗剂量同等有效，两者均通过肿瘤生长抑制和赋予的存活率进行评估(图8A和图8B)。与对照抗体治疗相比，使用FcγR受损的抗人FcγRIIB单一疗法对肿瘤生长或存活率没有影响。
这些发现证明了FcγR受损的抗人FcγRIIB确实可以改善体内抗CTLA-4的治疗窗口。
实例4——FcγRIIB阻断克服体内抗CTLA-4和抗PD-1两者对免疫检查点阻断的抗 性
虽然ICB对患者整体存活率的贡献不容小觑，但许多患者在疗法过程期间未能产生反应或获得抗性。关于什么决定了对ICB的反应性或抗性，仍有许多有待了解，但人们普遍认为，免疫发炎肿瘤的患者比免疫浸润较差的肿瘤的患者更有可能做出反应。患有免疫排斥型或“冷”肿瘤的患者不太可能对ICB产生反应。无论机制如何，对抗CTLA-4和抗PD-1/PD-L1两者均具有抗性的患者预后特别严重。
根据这些观察结果，对ICB的抗性构成了一个重大的未满足的医疗需求，而有助于克服抗性的药物具有巨大的治疗前景。虽然上述研究清楚地证明需要不同类型的抗FcγRIIB抗体来增强抗CTLA-4和抗PD-1本身，但我们评估了FcγR受损的抗FcγRIIB对抗CTLA-4和抗PD-1的组合的潜在抗肿瘤免疫增强作用。为此，向C57BL/6小鼠移植同基因B16肿瘤细胞——一种已知免疫浸润不良并对抗CTLA-4和抗PD-1ICB两者均具有抗性的“冷肿瘤”型模型。与该模型的高度抗性性质一致，无论是单独使用完全治疗剂量的抗PD-1(10mg/kg)治疗，还是使用临床相关剂量的2mg/kg抗CTLA-4和10mg/kg抗PD-1组合治疗，在这种情况下均没有提供生存优势(图9和图10)。在这种高度抗性的肿瘤微环境模型中，只有10mg/kg的最大有效的CTLA-4剂量与10mg/kg抗PD-1的组合才显示出抗肿瘤活性。
引人注目的是，与FcγR受损的抗FcγRIIB组合治疗将2mg/kg抗CTLA-4和10mg/kg抗PD-1的无效剂量转化为克服抗性并在30％的动物中诱导治愈的高效剂量(图9和图10A)，并且高(10mg/kg+10mg/kg)抗CTLA-4/抗PD-1给药方案的存活率大约翻倍(图9和图10B)。
虽然小鼠肿瘤模型中的小鼠替代抗体的剂量不能直接外推至癌症受试者中批准的人类抗体，但我们在B16/C57BL6小鼠肿瘤模型中的总和(sum)数据证明了以下内容。首先，与独立研究人员的独立报告一致(诸如Jiao等人，Int.J.Mol.Sci.，(2020)21，773：doi：10.3390/ijms21030773)，B16模型对完全治疗、最大有效剂量的抗CTLA-4或抗PD-1具有抗性，并且对人类治疗相关的(亚最大有效的)抗CTLA-4剂量(例如，2mg/kg)和抗PD-1(完全治疗剂量)的组合剂量具有抗性。其次，使用低剂量(2mg/kg)抗CTLA-4和FcγR受损的抗FcγRIIB组合治疗与单独使用最大有效剂量(10mg/kg)的抗CTLA-4相比同样有效。这证明FcγR受损的抗FcγRIIB改善了抗CTLA-4的治疗窗口，并表明与(毒性的)抗CTLA-4单药治疗相比，FcγR受损的抗FcγRIIB能够将耐受良好的抗CTLA-4剂量从亚最大治疗活性当量转变为完全治疗活性当量。第三，也是最重要的，这些数据证明，使用FcγR受损的抗FcγRIIB和抗CTLA-4/抗PD-1组合治疗克服了“冷肿瘤”对免疫检查点阻断的抗性。
参考文献
1.Cheson，B.D.and J.P.Leonard，Monoclonal antibody therapy for B-cellnon-Hodgkin′s lymphoma.N Engl J Med，2008.359(6)：p.613-26.
2.Gradishar，W.J.，HER2 therapy--an abundance of riches.N Engl J Med，2012.366(2)：p.176-8.
3.Jonker，D.J.，et al.，Cetuximab for the treatment of colorectalcancer.N Engl J Med，2007.357(20)：p.2040-8.
4.Lokhorst，H.M.，et al.，Targeting CD38 with Daratumumab Monotherapy inMultiple Myeloma.N Engl J Med，2015.373(13)：p.1207-19.
5.Hodi，F.S.，et al.，Improved survival with ipilimumab in patients withmetastatic melanoma.N Engl J Med，2010.363(8)：p.711-23.
6.Larkin,J.,F.S.Hodi,and J.D.Wolchok,Combined Nivolumab andIpilimumab or Monotherapy in Untreated Melanoma.N Engl J Med,2015.373(13):p.1270-1.7.Brahmer,J.R.,et al.,Safety and activity of anti-PD-L1 antibody inpatients with advanced cancer.N Engl J Med,2012.366(26):p.2455-65.
8.Topalian,S.L.,et al.,Safety,activity,and immune correlates of anti-PD-1 antibody in cancer.N Engl J Med,2012.366(26):p.2443-54.
9.Ribas,A.,et al.,Pembrolizumab versus investigator-choicechemotherapy for ipilimumab-refractory melanoma(KEYNOTE-002):a randomised,controlled,phase 2 trial.Lancet Oncol,2015.16(8):p.908-18.
10.Robert,C.,et al.,Ipilimumab plus dacarbazine for previouslyuntreated metastatic melanoma.N Engl J Med,2011.364(26):p.2517-26.
11.Robert,C.,et al.,Anti-programmed-death-receptor-1 treatment withpembrolizumab in ipilimumab-refractory advanced melanoma:a randomised dose-comparison cohort of a phase 1 trial.Lancet,2014.384(9948):p.1109-17.
12.Robert,C.,et al.,Nivolumab in previously untreated melanomawithout BRAF mutation.N Engl J Med,2015.372(4):p.320-30.
13.Weber,J.S.,et al.,Nivolumab versus chemotherapy in patients withadvanced melanoma who progressed after anti-CTLA-4 treatment(CheckMate 037):arandomised,controlled,open-label,phase 3 trial.Lancet Oncol,2015.16(4):p.375-84.
14.Sharma,P.,et al.,Primary,Adaptive,and Acquired Resistance toCancer Immunotherapy.Cell,2017.168(4):p.707-723.
15.Goede,V.,et al.,Obinutuzumab plus chlorambucil in patients withCLL and coexisting conditions.N Engl J Med,2014.370(12):p.1101-10.
16.Baselga,J.,et al.,Pertuzumab plus trastuzumab plus docetaxel formetastatic breast cancer.N Engl J Med,2012.366(2):p.109-19.
17.Gopal,A.K.,et al.,PI3Kdelta inhibition by idelalisib in patientswith relapsed indolent lymphoma.N Engl J Med,2014.370(11):p.1008-18.
18.Arce Vargas,F.,et al.,Fc Effector Function Contributes to theActivity of Human Anti-CTLA-4 Antibodies.Cancer Cell,2018.33(4):p.649-663 e4.
19.Dahan,R.,et al.,FcgammaRs Modulate the Anti-tumor Activity ofAntibodies Targeting the PD-1/PD-L1 Axis.Cancer Cell,2015.28(3):p.285-95.
20.Arlauckas,S.P.,et al.,In vivo imaging reveals a tumor-associatedmacrophage-mediated resistance pathway in anti-PD-1 therapy.Sci Transl Med,2017.9(389).
21.Simpson,T.R.,et al.,Fc-dependent depletion of tumor-infiltratingregulatory T cells co-defines the efficacy of anti-CTLA-4therapy againstmelanoma.J Exp Med,2013.210(9):p.1695-710.
22.Sow,H.S.,et al.,FcgammaR interaction is not required for effectiveanti-PD-L1immunotherapy but can add additional benefit depending on the tumormodel.Int J Cancer,2019.144(2):p.345-354.
23.Litchfield,K.,et al.,Meta-analysis of tumor-and T cell-intrinsicmechanisms of sensitization to checkpoint inhibition.Cell,2021.184(3):p.596-614e14.
24.Roghanian,A.,et al.,Antagonistic human FcgammaRIIB(CD32B)antibodies have anti-tumor activity and overcome resistance to antibodytherapy in vivo.Cancer Cell,2015.27(4):p.473-88.
25.Tutt,A.L.,et al.,Development and Characterization of MonoclonalAntibodies Specific for Mouse and Human Fcgamma Receptors.J Immunol,2015.195(11):p.5503-16.
26.Arce Vargas,F.,et al.,Fc-Optimized Anti-CD25 Depletes Tumor-Infiltrating Regulatory T Cells and Synergizes with PD-1Blockade to EradicateEstablished Tumors.Immunity,2017.46(4):p.577-586.
27.Tivol,E.A.,et al.,Loss of CTLA-4leads to massivelymphoproliferation and fatal multiorgan tissue destruction,revealing acritical negative regulatory role of CTLA-4.Immunity,1995.3(5):p.541-7.
28.Waterhouse,P.,et al.,Lymphoproliferative disorders with earlylethality in mice deficient in Ctla-4.Science,1995.270(5238):p.985-8.
29.Bertrand,A.,et al.,Immune related adverse events associated withanti-CTLA-4antibodies:systematic review and meta-analysis.BMC Med,2015.13:p.211.本发明的实施例还在以下编号的段落中描述：
1.一种组合，该组合包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其中癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
2.以下抗体分子的用途：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，并且所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于制造用于治疗患者的癌症的药物，其中所述癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
3.一种用于治疗患者的癌症的方法，该方法包括向该患者施用：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
其中该癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
4.一种第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于与以下组合使用：
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其中该癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
5.一种第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于治疗患者的癌症；
其特征在于该第一抗体分子降低和/或防止癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子治疗的抗性。
6.一种药物组合物，其包括
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，该第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。
7.一种试剂盒，该试剂盒包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，所述第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。
8.根据段落1至7中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子缺乏Fc区。
9.根据段落1至7中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，并且具有去糖基化的Fc区。
10.根据段落1至9中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子选自由人抗体分子、人源化抗体分子和人来源的抗体分子组成的组。
11.根据段落1至10中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子是单克隆抗体分子或单克隆来源的抗体分子。
12.根据段落1至11中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子选自由以下项组成的组：全长抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段、(Fab')2片段、Fab'片段、(Fab')2片段、Fv片段和scFv片段。
13.根据段落1至12中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子是具有去糖基化Fc区的人IgG抗体分子或具有去糖基化Fc区的人来源的IgG抗体分子。
14.根据段落13所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该IgG抗体分子是IgG1抗体分子或IgG2抗体分子。
15.根据段落14所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该IgG抗体分子是去糖基化人IgG1或去糖基化人源化鼠抗体或去糖基化人源化llama hcIgG抗体或去糖基化嵌合化鼠IgG。
16.根据段落15所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体已通过位置297处的氨基酸取代而去糖基化。
17.根据段落16所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体已通过N297Q取代而去糖基化。
18.根据段落1至17中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包括包含以下CDR的可变重链(VH)：
(i)SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:53；或
(ii)SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59；或
(iii)SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65；或
(iv)SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70和SEQ ID NO:71；或
(v)SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77；或
(vi)SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；或
(vii)SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；或
(viii)SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94和SEQ ID NO:95；或
(ix)SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100和SEQ ID NO:101；或
(x)SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107；或
(xi)SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112和SEQ ID NO:113；或
(xii)SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119；或
(xiii)SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124和SEQ ID NO:125；或
(xiv)SEQ ID NO:129和SEQ ID NO:130和SEQ ID NO:131；或
(xv)SEQ ID NO:135和SEQ ID NO:136和SEQ ID NO:137；或
(xvi)SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:142和SEQ ID NO:143；或
(xvii)SEQ ID NO:147和SEQ ID NO:148和SEQ ID NO:149；或
(xviii)SEQ ID NO:153和SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155；或
(xix)SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160和SEQ ID NO:161；或
(xx)SEQ ID NO:165和SEQ ID NO:166和SEQ ID NO:167；或
(xxi)SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:172和SEQ ID NO:173；或
(xxii)SEQ ID NO:177和SEQ ID NO:178和SEQ ID NO:179；或
(xxiii)SEQ ID NO:183和SEQ ID NO:184和SEQ ID NO:185；或
(xxiv)SEQ ID NO:189和SEQ ID NO:190和SEQ ID NO:191。
19.根据段落1至18中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包括包含以下CDR的可变轻链(VL)：
(i)SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；或
(ii)SEQ ID NO:60和SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62；或
(iii)SEQ ID NO:66和SEQ ID NO:67和SEQ ID NO:68；或
(iv)SEQ ID NO:72和SEQ ID NO:73和SEQ ID NO:74；或
(v)SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80；或
(vi)SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:86；或
(vii)SEQ ID NO:90和SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92；或
(viii)SEQ ID NO:96和SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98；或
(ix)SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:103和SEQ ID NO:104；或
(x)SEQ ID NO:108和SEQ ID NO:109和SEQ ID NO:110；或
(xi)SEQ ID NO:114和SEQ ID NO:115和SEQ ID NO:116；或
(xii)SEQ ID NO:120和SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122；或
(xiii)SEQ ID NO:126和SEQ ID NO:127和SEQ ID NO:128；或
(xiv)SEQ ID NO:132和SEQ ID NO:133和SEQ ID NO:134；或
(xv)SEQ ID NO:138和SEQ ID NO:139和SEQ ID NO:140；或
(xvi)SEQ ID NO:144和SEQ ID NO:145和SEQ ID NO:146；或
(xvii)SEQ ID NO:150和SEQ ID NO:151和SEQ ID NO:152；或
(xviii)SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157和SEQ ID NO:158；或
(xix)SEQ ID NO:162和SEQ ID NO:163和SEQ ID NO:164；或
(xx)SEQ ID NO:168和SEQ ID NO:169和SEQ ID NO:170；或
(xxi)SEQ ID NO:174和SEQ ID NO:175和SEQ ID NO:176；或
(xxii)SEQ ID NO:180和SEQ ID NO:181和SEQ ID NO:182；或
(xxiii)SEQ ID NO:186和SEQ ID NO:187和SEQ ID NO:188；或
(xxiv)SEQ ID NO:192和SEQ ID NO:193和SEQ ID NO:194。
20.根据段落1至19中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包含选自由以下项组成的组的可变重链(VH)氨基酸序列：SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5；SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7；SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9；SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11；SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13；SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:15；SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17；SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:19；SEQ ID NO:20；SEQ ID NO:21；SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23；SEQ ID NO:24；SEQ IDNO:25；和SEQ ID NO:26。
21.根据段落1至20中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包含选自由以下项组成的组的可变轻链(VL)氨基酸序列：SEQ ID NO:27；SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29；SEQ ID NO:30；SEQ ID NO:31；SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33；SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35；SEQ ID NO:36；SEQ IDNO:37；SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39；SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41；SEQ ID NO:42；SEQ IDNO:43；SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45；SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47；SEQ ID NO:48；SEQ IDNO:49；和SEQ ID NO:50。
22.根据段落1至21中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包含以下CDR氨基酸序列：
(i)SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；或
(ii)SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59和SEQ ID NO:60和SEQ IDNO:61和SEQ ID NO:62；或
(iii)SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65和SEQ ID NO:66和SEQ IDNO:67和SEQ ID NO:68；或
(iv)SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70和SEQ ID NO:71和SEQ ID NO:72和SEQ IDNO:73和SEQ ID NO:74；或
(v)SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77和SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80；或
(vi)SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83和SEQ ID NO:84和SEQ IDNO:85和SEQ ID NO:86；或
(vii)SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89和SEQ ID NO:90和SEQ IDNO:91和SEQ ID NO:92；或
(viii)SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94和SEQ ID NO:95和SEQ ID NO:96
和SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98；或(ix)SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100和SEQID NO:101和SEQ ID NO:
102和SEQ ID NO:103和SEQ ID NO:104；或(x)SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107和SEQ ID NO:
108和SEQ ID NO:109和SEQ ID NO:110；或(xi)SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112和SEQ ID NO:113和SEQ ID NO:
114和SEQ ID NO:115和SEQ ID NO:116；或(xii)SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:
120和SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122；或(xiii)SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124和SEQ ID NO:125和SEQ ID NO:
126和SEQ ID NO:127和SEQ ID NO:128；或(xiv)SEQ ID NO:129和SEQ ID NO:130和SEQ ID NO:131和SEQ ID NO:
132和SEQ ID NO:133和SEQ ID NO:134；或(xv)SEQ ID NO:135和SEQ ID NO:136和SEQ ID NO:137和SEQ ID NO:
138和SEQ ID NO:139和SEQ ID NO:140；或(xvi)SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:142和SEQ ID NO:143和SEQ ID NO:
144和SEQ ID NO:145和SEQ ID NO:146；或(xvii)SEQ ID NO:147和SEQ ID NO:148和SEQ ID NO:149和SEQ ID NO:
150和SEQ ID NO:151和SEQ ID NO:152；或(xviii)SEQ ID NO:153和SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155和SEQ ID NO:
156和SEQ ID NO:157和SEQ ID NO:158；或(xix)SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160和SEQ ID NO:161和SEQ ID NO:
162和SEQ ID NO:163和SEQ ID NO:164；或(xx)SEQ ID NO:165和SEQ ID NO:166和SEQ ID NO:167和SEQ ID NO:
168和SEQ ID NO:169和SEQ ID NO:170；或(xxi)SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:172和SEQ ID NO:173和SEQ ID NO:
174和SEQ ID NO:175和SEQ ID NO:176；或(xxii)SEQ ID NO:177和SEQ ID NO:178和SEQ ID NO:179和SEQ ID NO:
180和SEQ ID NO:181和SEQ ID NO:182；或(xxiii)SEQ ID NO:183和SEQ ID NO:184和SEQ ID NO:185和SEQ ID NO:
186和SEQ ID NO:187和SEQ ID NO:188；或
(xxiv)SEQ ID NO:189和SEQ ID NO:190和SEQ ID NO:191和SEQ ID NO:192和SEQID NO:193和SEQ ID NO:194。
23.根据段落1至22中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包含以下氨基酸序列：
(i)SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:27；或
(ii)SEQ IS NO:4和SEQ ID NO:28；或
(iii)SEQ IS NO:5和SEQ ID NO:29；或
(iv)SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:30；或
(v)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:31；或
(vi)SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:32；或
(vii)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:33；或
(viii)SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:34；或
(ix)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:35；或
(x)SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:36；或
(xi)SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:37；或
(xii)SEQ ID NO:14和SEQ ID NO:38；或
(xiii)SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:39；或
(xiv)SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:40；或
(xv)SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:41；或
(xvi)SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:42；或
(xvii)SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:43；或
(xviii)SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:44；或
(xix)SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:45；或
(xx)SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:46；或
(xxi)SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:47；或
(xxii)SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:48；或
(xxiii)SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:49；或
(xxiv)SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:50。
24.根据段落1至17中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子是能够与根据段落18至23中任一项所述的抗体分子竞争结合FcγRIIb的抗体分子。
25.根据段落1至5和8至24中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该癌症是FcγRIIb阳性B细胞癌症。
26.根据段落1至5和8至24中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该癌症是FcγRIIb阴性癌症。
27.根据段落26所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该FcγRIIb阴性癌症是实体癌。
28.根据段落27所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该实体癌选自包含以下项的组：癌、肉瘤和淋巴瘤。
29.根据段落27或28所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该实体癌选自包含以下项的组：黑素瘤、前列腺癌、结直肠癌、肝细胞癌、肺癌、膀胱癌、肾癌、胃癌、宫颈癌、梅克尔细胞癌或卵巢癌；且/或其中该实体癌是免疫沙漠型肿瘤或免疫排斥型肿瘤或免疫浸润不良的肿瘤。
30.根据段落1至4和8至29中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性的癌症是复发性和/或难治性癌症。
31.根据段落1至5和8至30中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中患者先前已经用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子进行治疗，任选地其中该患者在所述治疗后变得具有抗性。
32.根据段落1至5和8至30中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中患者先前未曾用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子进行治疗，任选地其中该患者对所述治疗具有固有的抗性。
33.根据段落1至32中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子和/或第三抗体分子选自由人抗体分子、人源化抗体分子和人来源的抗体分子组成的组。
34.根据段落1至33中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子和/或第三抗体分子是单克隆抗体分子或单克隆来源的抗体分子。
35.根据段落1至34中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子和/或第三抗体分子选自由以下项组成的组：全长抗体、嵌合抗体、单链抗体及其保留经由其Fc区与Fcγ受体结合的能力的抗原结合片段。
36.根据段落1至35中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子和/或第三抗体分子是人IgG抗体、人源化IgG抗体分子或人来源的IgG抗体分子。
37.根据段落1至36中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子和/或第三抗体分子经由其Fc区与至少一种活化Fcγ受体结合。
38.根据段落1至36中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子和/或第三抗体分子已经被工程改造用于改善与活化Fcγ受体的结合。
39.第一抗体分子用于治疗患者的癌症的用途，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
其特征在于所述第一抗体分子降低和/或防止所述癌症对用与CTLA-4特异性结合的第二抗体分子治疗的抗性。
40.根据段落39所述的用途，其中该第二抗体分子以低于耐受治疗剂量的剂量施用。
41.一种组合，该组合包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；以及
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，
其特征在于该组合包括低于耐受治疗剂量的所述第二抗体分子的剂量。
42.以下抗体分子的用途：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；以及
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于制造用于治疗患者的癌症的药物，
其特征在于该组合包括低于耐受治疗剂量的所述第二抗体分子的剂量。
43.一种用于治疗个体的癌症的方法，该方法包括向该患者施用：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
其特征在于所施用的第二抗体分子的剂量低于耐受治疗剂量。
44.一种第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于与以下组合使用：
-第二抗体分子，该第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其特征在于所使用的第二抗体分子的剂量低于耐受治疗剂量。
45.一种药物组合物，其包括
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合，
其特征在于该第二抗体分子以低于耐受治疗剂量的剂量存在。
46.一种试剂盒，该试剂盒包括：
-第一抗体分子，该第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及该第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合，
其特征在于该第二抗体分子以低于耐受治疗剂量的剂量存在。
47.根据段落40至46中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量低于最大耐受治疗剂量。
48.根据段落40至47中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量比耐受治疗剂量低至少50％。
49.根据段落40至48中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量比耐受治疗剂量低至少70％。
50.根据段落40至49中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量比耐受治疗剂量低至少80％。
51.根据段落40至50中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量低于最低有效治疗剂量。
52.根据段落40至51中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中在较低剂量下使用的第一抗体分子和第二抗体分子的治疗效果与在不存在所述第一抗体分子的情况下在第二抗体分子的最大耐受治疗剂量下的第二抗体分子的治疗效果相当。
53.根据段落40至52中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中在较低剂量下使用第二抗体分子改善了第二抗体分子的耐受性。
54.根据段落40至53中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中在较低剂量下使用第二抗体分子减少副作用并且/或者降低受试者中与使用第二抗体分子相关的毒性。
55.根据段落39至54中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子是伊匹木单抗和/或曲美木单抗。
56.根据段落39至56中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量低于10mg/kg。
57.根据段落39至56中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量为3mg/kg或低于3mg/kg。
58.根据段落39至57中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量为2mg/kg或低于2mg/kg。
59.根据段落39至58中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第二抗体分子的剂量为1mg/kg或低于1mg/kg。
60.根据段落39至59中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该用途或方法也不涉及施用特异性结合PD-1或PD-L1的抗体分子；且/或该药物组合物或试剂盒也不包含特异性结合PD-1或PD-L1的抗体分子。
61.根据段落39至60中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子缺乏Fc区。
62.根据段落39至60所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，并且具有去糖基化的Fc区。
63.根据段落39至62中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子选自由人抗体分子、人源化抗体分子和人来源的抗体分子组成的组。
64.根据段落39至63中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子是单克隆抗体分子或单克隆来源的抗体分子。
65.根据段落39至64中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子选自由以下项组成的组：全长抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段、(Fab')2片段、Fab'片段、(Fab')2片段、Fv片段和scFv片段。
66.根据段落39至65中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子是具有去糖基化Fc区的人IgG抗体分子或具有去糖基化Fc区的人来源的IgG抗体分子。
67.根据段落66所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、供使用的药物组合物或供使用的试剂盒，其中该IgG抗体分子是IgG1抗体分子或IgG2抗体分子。
68.根据段落67所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该IgG抗体分子是去糖基化人IgG1或去糖基化人源化鼠抗体或去糖基化人源化llama hcIgG抗体或去糖基化嵌合化鼠IgG。
69.根据段落68所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子已通过位置297处的氨基酸取代而去糖基化。
70.根据段落69所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子已通过N297Q取代而去糖基化。
71.根据段落39至70中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包括包含以下CDR的可变重链(VH)：
(i)SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:53；或
(ii)SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59；或
(iii)SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65；或
(iv)SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70和SEQ ID NO:71；或
(v)SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77；或
(vi)SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；或
(vii)SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；或
(viii)SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94和SEQ ID NO:95；或
(ix)SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100和SEQ ID NO:101；或
(x)SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107；或
(xi)SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112和SEQ ID NO:113；或
(xii)SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119；或
(xiii)SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124和SEQ ID NO:125；或
(xiv)SEQ ID NO:129和SEQ ID NO:130和SEQ ID NO:131；或
(xv)SEQ ID NO:135和SEQ ID NO:136和SEQ ID NO:137；或
(xvi)SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:142和SEQ ID NO:143；或
(xvii)SEQ ID NO:147和SEQ ID NO:148和SEQ ID NO:149；或
(xviii)SEQ ID NO:153和SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155；或
(xix)SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160和SEQ ID NO:161；或
(xx)SEQ ID NO:165和SEQ ID NO:166和SEQ ID NO:167；或
(xxi)SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:172和SEQ ID NO:173；或
(xxii)SEQ ID NO:177和SEQ ID NO:178和SEQ ID NO:179；或
(xxiii)SEQ ID NO:183和SEQ ID NO:184和SEQ ID NO:185；或
(xxiv)SEQ ID NO:189和SEQ ID NO:190和SEQ ID NO:191。
72.根据段落39至71中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包括包含以下CDR的可变轻链(VL)：
(i)SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；或
(ii)SEQ ID NO:60和SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62；或
(iii)SEQ ID NO:66和SEQ ID NO:67和SEQ ID NO:68；或
(iv)SEQ ID NO:72和SEQ ID NO:73和SEQ ID NO:74；或
(v)SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80；或
(vi)SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:86；或
(vii)SEQ ID NO:90和SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92；或
(viii)SEQ ID NO:96和SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98；或
(ix)SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:103和SEQ ID NO:104；或
(x)SEQ ID NO:108和SEQ ID NO:109和SEQ ID NO:110；或
(xi)SEQ ID NO:114和SEQ ID NO:115和SEQ ID NO:116；或
(xii)SEQ ID NO:120和SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122；或
(xiii)SEQ ID NO:126和SEQ ID NO:127和SEQ ID NO:128；或
(xiv)SEQ ID NO:132和SEQ ID NO:133和SEQ ID NO:134；或
(xv)SEQ ID NO:138和SEQ ID NO:139和SEQ ID NO:140；或
(xvi)SEQ ID NO:144和SEQ ID NO:145和SEQ ID NO:146；或
(xvii)SEQ ID NO:150和SEQ ID NO:151和SEQ ID NO:152；或
(xviii)SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157和SEQ ID NO:158；或
(xix)SEQ ID NO:162和SEQ ID NO:163和SEQ ID NO:164；或
(xx)SEQ ID NO:168和SEQ ID NO:169和SEQ ID NO:170；或
(xxi)SEQ ID NO:174和SEQ ID NO:175和SEQ ID NO:176；或
(xxii)SEQ ID NO:180和SEQ ID NO:181和SEQ ID NO:182；或
(xxiii)SEQ ID NO:186和SEQ ID NO:187和SEQ ID NO:188；或
(xxiv)SEQ ID NO:192和SEQ ID NO:193和SEQ ID NO:194。
73.根据段落39至72中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包含选自由以下项组成的组的可变重链(VH)氨基酸序列：SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5；SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7；SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9；SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11；SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13；SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:15；SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17；SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:19；SEQ ID NO:20；SEQ ID NO:21；SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23；SEQ ID NO:24；SEQ IDNO:25；和SEQ ID NO:26。
74.根据权利要求39至73中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包含选自由以下项组成的组的可变轻链(VL)氨基酸序列：SEQ ID NO:27；SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29；SEQ ID NO:30；SEQID NO:31；SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33；SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35；SEQ ID NO:36；SEQID NO:37；SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39；SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41；SEQ ID NO:42；SEQID NO:43；SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45；SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47；SEQ ID NO:48；SEQID NO:49；和SEQ ID NO:50。
75.根据段落39至74中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包含以下CDR氨基酸序列：
(i)SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；或
(ii)SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59和SEQ ID NO:60和SEQ IDNO:61和SEQ ID NO:62；或
(iii)SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65和SEQ ID NO:66和SEQ IDNO:67和SEQ ID NO:68；或
(iv)SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70和SEQ ID NO:71和SEQ ID NO:72和SEQ IDNO:73和SEQ ID NO:74；或
(v)SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77和SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80；或
(vi)SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83和SEQ ID NO:84和SEQ IDNO:85和SEQ ID NO:86；或
(vii)SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89和SEQ ID NO:90和SEQ IDNO:91和SEQ ID NO:92；或
(viii)SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94和SEQ ID NO:95和SEQ ID NO:96和SEQ IDNO:97和SEQ ID NO:98；或
(ix)SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100和SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:102和SEQ IDNO:103和SEQ ID NO:104；或
(x)SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107和SEQ ID NO:108和SEQ IDNO:109和SEQ ID NO:110；或
(xi)SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112和SEQ ID NO:113和SEQ ID NO:114和SEQID NO:115和SEQ ID NO:116；或
(xii)SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:120和SEQID NO:121和SEQ ID NO:122；或
(xiii)SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124和SEQ ID NO:125和SEQ ID NO:126和SEQID NO:127和SEQ ID NO:128；或
(xiv)SEQ ID NO:129和SEQ ID NO:130和SEQ ID NO:131和SEQ ID NO:132和SEQID NO:133和SEQ ID NO:134；或
(xv)SEQ ID NO:135和SEQ ID NO:136和SEQ ID NO:137和SEQ ID NO:138和SEQID NO:139和SEQ ID NO:140；或
(xvi)SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:142和SEQ ID NO:143和SEQ ID NO:144和SEQID NO:145和SEQ ID NO:146；或
(xvii)SEQ ID NO:147和SEQ ID NO:148和SEQ ID NO:149和SEQ ID NO:150和SEQID NO:151和SEQ ID NO:152；或
(xviii)SEQ ID NO:153和SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155和SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157和SEQ ID NO:158；或
(xix)SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160和SEQ ID NO:161和SEQ ID NO:162和SEQID NO:163和SEQ ID NO:164；或
(xx)SEQ ID NO:165和SEQ ID NO:166和SEQ ID NO:167和SEQ ID NO:168和SEQID NO:169和SEQ ID NO:170；或
(xxi)SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:172和SEQ ID NO:173和SEQ ID NO:174和SEQID NO:175和SEQ ID NO:176；或
(xxii)SEQ ID NO:177和SEQ ID NO:178和SEQ ID NO:179和SEQ ID NO:180和SEQID NO:181和SEQ ID NO:182；或
(xxiii)SEQ ID NO:183和SEQ ID NO:184和SEQ ID NO:185和SEQ ID NO:186和SEQ ID NO:187和SEQ ID NO:188；或
(xxiv)SEQ ID NO:189和SEQ ID NO:190和SEQ ID NO:191和SEQ ID NO:192和SEQID NO:193和SEQ ID NO:194。
76.根据段落39至75中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子包含以下氨基酸序列：
(i)SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:27；或
(ii)SEQ IS NO:4和SEQ ID NO:28；或
(iii)SEQ IS NO:5和SEQ ID NO:29；或
(iv)SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:30；或
(v)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:31；或
(vi)SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:32；或
(vii)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:33；或
(viii)SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:34；或
(ix)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:35；或
(x)SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:36；或
(xi)SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:37；或
(xii)SEQ ID NO:14和SEQ ID NO:38；或
(xiii)SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:39；或
(xiv)SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:40；或
(xv)SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:41；或
(xvi)SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:42；或
(xvii)SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:43；或
(xviii)SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:44；或
(xix)SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:45；或
(xx)SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:46；或
(xxi)SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:47；或
(xxii)SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:48；或
(xxiii)SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:49；或
(xxiv)SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:50。
77.根据段落39至70中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中该第一抗体分子是能够与根据段落71至76中任一项所述的抗体分子竞争结合FcγRIIb的抗体分子。
78.根据段落39至44或47至77中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该癌症是FcγRIIb阳性B细胞癌症。
79.根据段落39至44或47至77中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该癌症是FcγRIIb阴性癌症。
80.根据段落79所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该FcγRIIb阴性癌症是实体癌。
81.根据段落80所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该实体癌选自包含以下项的组：癌、肉瘤和淋巴瘤。
82.根据段落80或81所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中该实体癌选自包含以下项的组：黑素瘤、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、膀胱癌、肾癌、间皮瘤、梅克尔细胞癌、胃癌、宫颈癌、卵巢癌和头颈癌。
83.一种供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，它们基本上如本文参考所附编号的段落、权利要求书、说明书、实例和附图中所要求保护的。
序列表
<110> 生物发明国际公司(BioInvent International AB)
南安普顿大学(University of Southampton)
<120> 抗体的新型组合及其用途
<130> BIOBX/P76166EP
<160> 197
<170> BiSSAP 1.2
<210> 1
<211> 330
<212> PRT
<213> 智人
<220>
<223> IgG重链恒定区(CH)
<400> 1
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 2
<211> 105
<212> PRT
<213> 智人
<220>
<223> IgG轻链恒定区(CL)
<400> 2
Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu
1 5 10 15
Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe
20 25 30
Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val
35 40 45
Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys
50 55 60
Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser
65 70 75 80
His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu
85 90 95
Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser
100 105
<210> 3
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1A01-VH：重链可变区(VH)
<400> 3
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Asn Trp Ile Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Leu Ile Gly Trp Asp Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Glu Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Tyr Ser Gly Tyr Glu Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 4
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1B07：重链可变区(VH)
<400> 4
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Phe Thr Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Asn Ile Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 5
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1C04：重链可变区(VH)
<400> 5
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Asp Ser Gly Ala Gly Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Thr His Asp Ser Gly Glu Leu Leu Asp Ala Phe Asp Ile Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 6
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1E05：重链可变区(VH)
<400> 6
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Asn Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asn Phe Asp Asn Ser Gly Tyr Ala Ile Pro Asp Ala Phe Asp
100 105 110
Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 7
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2A09：重链可变区(VH)
<400> 7
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Ala
20 25 30
Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Tyr Ile Ser Arg Asp Ala Asp Ile Thr His Tyr Pro Ala Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Thr Gly Phe Asp Tyr Ala Gly Asp Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 8
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2B08：重链可变区(VH)
<400> 8
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Leu Ile Gly His Asp Gly Asn Asn Lys Tyr Tyr Leu Asp Ser Leu
50 55 60
Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Thr Asp Ser Gly Tyr Asp Leu Leu Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 9
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2E08：重链可变区(VH)
<400> 9
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Gly Phe Ser Asp Asp Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Gly Gly Asp Gly Ser Gly Trp Ser Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 10
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C04：重链可变区(VH)
<400> 10
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Trp Arg Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 11
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C05：重链可变区(VH)
<400> 11
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Asn Phe Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 12
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5D07：重链可变区(VH)
<400> 12
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ala Tyr Asp Gly Ser Lys Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Tyr Arg Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 13
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5E12：重链可变区(VH)
<400> 13
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ile Asn Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Met
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Lys Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 14
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5G08：重链可变区(VH)
<400> 14
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Met Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Arg Trp Asn Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 15
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5H06：重链可变区(VH)
<400> 15
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Thr Ala Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp His Ser Val Ile Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 16
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6A09：重链可变区(VH)
<400> 16
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Thr Ser Tyr Asp Gly Asn Thr Lys Tyr Tyr Ala Asn Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Asp Cys Gly Gly Asp Cys Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 17
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6B01：重链可变区(VH)
<400> 17
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Gln Leu Gly Glu Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 18
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C11：重链可变区(VH)
<400> 18
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ser Gly Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Gly Gly Asp Ile Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 19
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C12：重链可变区(VH)
<400> 19
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Arg Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 20
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6D01：重链可变区(VH)
<400> 20
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp His Ser Ala Ala Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 21
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G03：重链可变区(VH)
<400> 21
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asp Ser Ala Ile Ile Asp Tyr Ala Gly Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Glu Ala Ala Ala Gly Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 22
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G08：重链可变区(VH)
<400> 22
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Ser Val Gly Ala Tyr Ala Asn Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 23
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G11：重链可变区(VH)
<400> 23
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Leu Tyr Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 24
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6H08：重链可变区(VH)
<400> 24
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asn Asn Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Tyr Lys Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 25
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆7C07：重链可变区(VH)
<400> 25
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Gln Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Phe Gly Tyr Ile Ile Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 26
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆4B02：重链可变区(VH)
<400> 26
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn His
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Thr Trp Asp Ala Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 27
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1A01：轻链可变区(VL)
<400> 27
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn
20 25 30
Ala Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
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Asn Ala Ser Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 28
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1B07：轻链可变区(VL)
<400> 28
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
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20 25 30
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35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Gln Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
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100 105 110
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<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1C04：轻链可变区(VL)
<400> 29
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
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100 105 110
<210> 30
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1E05：轻链可变区(VL)
<400> 30
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
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20 25 30
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100 105 110
<210> 31
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2A09：轻链可变区(VL)
<400> 31
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Ala Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Asn Ser Asp Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
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Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
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85 90 95
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100 105 110
<210> 32
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2B08：轻链可变区(VL)
<400> 32
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
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100 105 110
<210> 33
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2E08：轻链可变区(VL)
<400> 33
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
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20 25 30
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100 105 110
<210> 34
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C04：轻链可变区(VL)
<400> 34
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
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20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
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Leu Ser Gly Ser Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
Gly
<210> 35
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C05：轻链可变区(VL)
<400> 35
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Ser Asn Ser Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser
85 90 95
Leu Asn Gly Gln Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
Gly
<210> 36
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5D07：轻链可变区(VL)
<400> 36
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Thr Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser
85 90 95
Val Ser Gly Trp Met Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 37
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5E12：轻链可变区(VL)
<400> 37
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Ser
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Leu Asn Gly Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 38
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5G08：轻链可变区(VL)
<400> 38
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Ala Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser
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Leu Asn Gly Pro Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
Gly
<210> 39
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5H06：轻链可变区(VL)
<400> 39
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Asn
85 90 95
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100 105 110
<210> 40
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6A09：轻链可变区(VL)
<400> 40
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
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50 55 60
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65 70 75 80
Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser
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100 105 110
<210> 41
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6B01：轻链可变区(VL)
<400> 41
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
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20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
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Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Ser
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100 105 110
<210> 42
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C11：轻链可变区(VL)
<400> 42
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Phe Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
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Leu Ile Tyr Glu Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
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Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser
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Leu Asn Gly Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 43
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C12：轻链可变区(VL)
<400> 43
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
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Thr Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 44
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6D01：轻链可变区(VL)
<400> 44
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
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Ser Ser Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 45
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G03：轻链可变区(VL)
<400> 45
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
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Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
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Leu Ile Tyr Gly Asn Thr Asp Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
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Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser
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100 105 110
Gly
<210> 46
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G08：轻链可变区(VL)
<400> 46
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
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100 105 110
<210> 47
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G11：轻链可变区(VL)
<400> 47
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
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Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ser Trp Asp Asp Ser
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Gln Arg Ala Val Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 48
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6H08：轻链可变区(VL)
<400> 48
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
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50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
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Arg Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105
<210> 49
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆7C07：轻链可变区(VL)
<400> 49
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
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50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Met Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Ser Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 50
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆4B02：轻链可变区(VL)
<400> 50
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn
20 25 30
Asn Ala Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
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65 70 75 80
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100 105
<210> 51
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1A01：CDRH1
<400> 51
Asp Tyr Tyr Met Asn
1 5
<210> 52
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1A01：CDRH2
<400> 52
Leu Ile Gly Trp Asp Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 53
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1A01：CDRH3
<400> 53
Ala Tyr Ser Gly Tyr Glu Leu Asp Tyr
1 5
<210> 54
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1A01：CDRL1
<400> 54
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1 5 10
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1A01：CDRL2
<400> 55
Asp Asn Asn Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 56
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1A01：CDRL3
<400> 56
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Ala Ser Ile
1 5 10
<210> 57
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1B07：CDRH1
<400> 57
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 58
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1B07：CDRH2
<400> 58
Phe Thr Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 59
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1B07：CDRH3
<400> 59
Glu Asn Ile Asp Ala Phe Asp Val
1 5
<210> 60
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1B07：CDRL1
<400> 60
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Ala Val Asn
1 5 10
<210> 61
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1B07：CDRL2
<400> 61
Asp Asn Gln Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 62
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1B07：CDRL3
<400> 62
Trp Asp Asp Arg Leu Phe Gly Pro Val
1 5
<210> 63
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1C04：CDRH1
<400> 63
Ser Tyr Ala Met Ser
1 5
<210> 64
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1C04：CDRH2
<400> 64
Ser Ile Ser Asp Ser Gly Ala Gly Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Glu
1 5 10 15
Gly
<210> 65
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1C04：CDRH3
<400> 65
Thr His Asp Ser Gly Glu Leu Leu Asp Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 66
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1C04：CDRL1
<400> 66
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn His Val Leu
1 5 10
<210> 67
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1C04：CDRL2
<400> 67
Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 68
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1C04：CDRL3
<400> 68
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Trp Val
1 5 10
<210> 69
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1E05：CDRH1
<400> 69
Thr Tyr Ala Met Asn
1 5
<210> 70
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1E05：CDRH2
<400> 70
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Asn Tyr Val Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 71
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1E05：CDRH3
<400> 71
Asn Phe Asp Asn Ser Gly Tyr Ala Ile Pro Asp Ala Phe Asp Ile
1 5 10 15
<210> 72
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1E05：CDRL1
<400> 72
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 73
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1E05：CDRL2
<400> 73
Asp Asn Asn Ser Arg Pro Ser
1 5
<210> 74
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆1E05：CDRL3
<400> 74
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Gly Gly Pro Val
1 5 10
<210> 75
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2A09：CDRH1
<400> 75
Asn Ala Trp Met Ser
1 5
<210> 76
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2A09：CDRH2
<400> 76
Tyr Ile Ser Arg Asp Ala Asp Ile Thr His Tyr Pro Ala Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 77
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2A09：CDRH3
<400> 77
Gly Phe Asp Tyr Ala Gly Asp Asp Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 78
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2A09：CDRL1
<400> 78
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Ala Val Asn
1 5 10
<210> 79
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2A09：CDRL2
<400> 79
Gly Asn Ser Asp Arg Pro Ser
1 5
<210> 80
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2A09：CDRL3
<400> 80
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Arg Trp Val
1 5 10
<210> 81
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2B08：CDRH1
<400> 81
Asp Tyr Tyr Met Ser
1 5
<210> 82
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2B08：CDRH2
<400> 82
Leu Ile Gly His Asp Gly Asn Asn Lys Tyr Tyr Leu Asp Ser Leu Glu
1 5 10 15
Gly
<210> 83
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2B08：CDRH3
<400> 83
Ala Thr Asp Ser Gly Tyr Asp Leu Leu Tyr
1 5 10
<210> 84
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2B08：CDRL1
<400> 84
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Ala Val Asn
1 5 10
<210> 85
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2B08：CDRL2
<400> 85
Tyr Asp Asp Leu Leu Pro Ser
1 5
<210> 86
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2B08：CDRL3
<400> 86
Thr Thr Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Val Val
1 5 10
<210> 87
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2E08：CDRH1
<400> 87
Asp Tyr Tyr Met Ser
1 5
<210> 88
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2E08：CDRH2
<400> 88
Ala Ile Gly Phe Ser Asp Asp Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 89
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2E08：CDRH3
<400> 89
Gly Asp Gly Ser Gly Trp Ser Phe
1 5
<210> 90
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2E08：CDRL1
<400> 90
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Ala Val Asn
1 5 10
<210> 91
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2E08：CDRL2
<400> 91
Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 92
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆2E08：CDRL3
<400> 92
Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu Arg Gly Trp Val
1 5 10
<210> 93
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C04：CDRH1
<400> 93
Asn Tyr Gly Met His
1 5
<210> 94
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C04：CDRH2
<400> 94
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 95
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C04：CDRH2
<400> 95
Trp Arg Asp Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 96
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C04：CDRL1
<400> 96
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 97
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C04：CDRL2
<400> 97
Ser Asp Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 98
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C04：CDRL3
<400> 98
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Ser Trp Val
1 5 10
<210> 99
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C05：CDRH1
<400> 99
Thr Tyr Gly Met His
1 5
<210> 100
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C05：CDRH2
<400> 100
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 101
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C05：CDRH3
<400> 101
Glu Asn Phe Asp Ala Phe Asp Val
1 5
<210> 102
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C05：CDRL1
<400> 102
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 103
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C05：CDRL2
<400> 103
Ser Asn Ser Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 104
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5C05：CDRL3
<400> 104
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Gln Val Val
1 5 10
<210> 105
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5D07：CDRH1
<400> 105
Thr Tyr Gly Met His
1 5
<210> 106
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5D07：CDRH2
<400> 106
Val Ile Ala Tyr Asp Gly Ser Lys Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 107
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5D07：CDRH3
<400> 107
Glu Tyr Arg Asp Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 108
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5D07：CDRL1
<400> 108
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 109
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5D07：CDRL2
<400> 109
Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 110
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5D07：CDRL3
<400> 110
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Val Ser Gly Trp Met
1 5 10
<210> 111
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5E12：CDRH1
<400> 111
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 112
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5E12：CDRH2
<400> 112
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ile Asn Lys Asp Tyr Ala Asp Ser Met Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 113
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5E12：CDRH3
<400> 113
Glu Arg Lys Asp Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 114
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5E12：CDRL1
<400> 114
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 115
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5E12：CDRL2
<400> 115
Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 116
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5E12：CDRL3
<400> 116
Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Leu Val
1 5 10
<210> 117
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5G08：CDRH1
<400> 117
Asn Tyr Gly Met His
1 5
<210> 118
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5G08：CDRH2
<400> 118
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Arg Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 119
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5G08：CDRH3
<400> 119
Asp Arg Trp Asn Gly Met Asp Val
1 5
<210> 120
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5G08：CDRL1
<400> 120
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 121
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5G08：CDRL2
<400> 121
Ala Asn Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 122
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5G08：CDRL3
<400> 122
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Pro Trp Val
1 5 10
<210> 123
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5H06：CDRH1
<400> 123
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 124
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5H06：CDRH2
<400> 124
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asp Thr Ala Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 125
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5H06：CDRH3
<400> 125
Asp His Ser Val Ile Gly Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 126
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5H06：CDRL1
<400> 126
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Asn
1 5 10
<210> 127
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5H06：CDRL2
<400> 127
Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 128
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆5H06：CDRL3
<400> 128
Ser Ser Tyr Ala Gly Ser Asn Asn Val Val
1 5 10
<210> 129
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6A09：CDRH1
<400> 129
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 130
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6A09：CDRH2
<400> 130
Val Thr Ser Tyr Asp Gly Asn Thr Lys Tyr Tyr Ala Asn Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 131
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6A09：CDRH3
<400> 131
Glu Asp Cys Gly Gly Asp Cys Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 132
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6A09：CDRL1
<400> 132
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 133
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6A09：CDRL2
<400> 133
Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 134
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6A09：CDRL3
<400> 134
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Glu Gly Val
1 5 10
<210> 135
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6B01：CDRH1
<400> 135
Asn Tyr Gly Met His
1 5
<210> 136
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6B01：CDRH2
<400> 136
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 137
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6B01：CDRH3
<400> 137
Asp Gln Leu Gly Glu Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 138
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6B01：CDRL1
<400> 138
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 139
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6B01：CDRL2
<400> 139
Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 140
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6B01：CDRL3
<400> 140
Ala Thr Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Pro Val
1 5 10
<210> 141
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C11：CDRH1
<400> 141
Asp Tyr Gly Met Ser
1 5
<210> 142
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C11：CDRH2
<400> 142
Ala Ile Ser Gly Ser Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 143
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C11：CDRH3
<400> 143
Gly Asp Ile Asp Tyr Phe Asp Tyr
1 5
<210> 144
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C11：CDRL1
<400> 144
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Phe Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 145
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C11：CDRL3
<400> 145
Glu Asn Asn Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 146
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C11：CDRL3
<400> 146
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Pro Val
1 5 10
<210> 147
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C12：CDRH1
<400> 147
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 148
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C12：CDRH2
<400> 148
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 149
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C12：CDRH3
<400> 149
Glu Arg Arg Asp Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 150
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C12：CDRL1
<400> 150
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 151
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C12：CDRL2
<400> 151
Ser Asp Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 152
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6C12：CDRL3
<400> 152
Ala Thr Trp Asp Ser Asp Thr Pro Val
1 5
<210> 153
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6D01：CDRH1
<400> 153
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 154
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6D01：CDRH2
<400> 154
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 155
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6D01：CDRH3
<400> 155
Asp His Ser Ala Ala Gly Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 156
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6D01：CDRL1
<400> 156
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Asn
1 5 10
<210> 157
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6D01：CDRL2
<400> 157
Gly Asn Ser Ile Arg Pro Ser
1 5
<210> 158
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6D01：CDRL3
<400> 158
Ala Ser Trp Asp Asp Ser Leu Ser Ser Pro Val
1 5 10
<210> 159
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G03：CDRH1
<400> 159
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 160
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G03：CDRH2
<400> 160
Gly Ile Ser Trp Asp Ser Ala Ile Ile Asp Tyr Ala Gly Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 161
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G03：CDRH3
<400> 161
Asp Glu Ala Ala Ala Gly Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 162
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G03：CDRL1
<400> 162
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 163
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G03：CDRL2
<400> 163
Gly Asn Thr Asp Arg Pro Ser
1 5
<210> 164
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G03：CDRL3
<400> 164
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Pro Val Val
1 5 10
<210> 165
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G08：CDRH1
<400> 165
Ser Tyr Gly Ile Ser
1 5
<210> 166
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G08：CDRH2
<400> 166
Gly Ile Ser Gly Ser Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 167
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G08：CDRH3
<400> 167
Ser Val Gly Ala Tyr Ala Asn Asp Ala Phe Asp Ile
1 5 10
<210> 168
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G08：CDRL1
<400> 168
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 169
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G08：CDRL2
<400> 169
Gly Asp Thr Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 170
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G08：CDRL3
<400> 170
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Pro Val
1 5 10
<210> 171
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G11：CDRH1
<400> 171
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 172
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G11：CDRH2
<400> 172
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 173
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G11：CDRH3
<400> 173
Glu Leu Tyr Asp Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 174
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G11：CDRL1
<400> 174
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 175
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G11：CDRL2
<400> 175
Ala Asp Asp His Arg Pro Ser
1 5
<210> 176
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6G11：CDRL3
<400> 176
Ala Ser Trp Asp Asp Ser Gln Arg Ala Val Ile
1 5 10
<210> 177
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6H08：CDRH1
<400> 177
Asn Tyr Gly Met His
1 5
<210> 178
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6H08：CDRH2
<400> 178
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 179
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6H08：CDRH3
<400> 179
Glu Tyr Lys Asp Ala Phe Asp Ile
1 5
<210> 180
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6H08：CDRL1
<400> 180
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Asn
1 5 10
<210> 181
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6H08：CDRL2
<400> 181
Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 182
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆6H08：CDRL3
<400> 182
Gln Ala Trp Gly Thr Gly Ile Arg Val
1 5
<210> 183
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆7C07：CDRH1
<400> 183
Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 184
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆7C07：CDRH2
<400> 184
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 185
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆7C07：CDRH3
<400> 185
Glu Phe Gly Tyr Ile Ile Leu Asp Tyr
1 5
<210> 186
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆7C07：CDRL1
<400> 186
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr Val Asn
1 5 10
<210> 187
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆7C07：CDRL2
<400> 187
Arg Asp Tyr Glu Arg Pro Ser
1 5
<210> 188
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆7C07：CDRL1
<400> 188
Met Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Val Val
1 5 10
<210> 189
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆4B02：CDRH1
<400> 189
Asn His Gly Met His
1 5
<210> 190
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆4B02：CDRH2
<400> 190
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Thr Asn Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 191
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆4B02：CDRH3
<400> 191
Glu Thr Trp Asp Ala Phe Asp Val
1 5
<210> 192
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆4B02：CDRL1
<400> 192
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Asn Ala Asn
1 5 10
<210> 193
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆4B02：CDRL2
<400> 193
Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 194
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体克隆4B02：CDRL3
<400> 194
Gln Ala Trp Asp Ser Ser Thr Val Val
1 5
<210> 195
<211> 330
<212> PRT
<213> 智人
<220>
<223> IgG重链恒定区(CH)
<400> 195
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Gln Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 196
<211> 330
<212> PRT
<213> 小家鼠
<400> 196
Ala Lys Thr Thr Ala Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Val Cys Gly
1 5 10 15
Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Leu Thr Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu
50 55 60
Ser Ser Ser Val Thr Val Thr Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Ser Ile
65 70 75 80
Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys
85 90 95
Ile Glu Pro Arg Gly Pro Thr Ile Lys Pro Cys Pro Pro Cys Lys Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Ser Pro Ile Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gln Ile Ser Trp
145 150 155 160
Phe Val Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gln Thr His Arg
165 170 175
Glu Asp Tyr Ala Ser Thr Leu Arg Val Val Ser Ala Leu Pro Ile Gln
180 185 190
His Gln Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe Lys Cys Lys Val Asn Asn
195 200 205
Lys Asp Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly
210 215 220
Ser Val Arg Ala Pro Gln Val Tyr Val Leu Pro Pro Pro Glu Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Lys Gln Val Thr Leu Thr Cys Met Val Thr Asp Phe Met
245 250 255
Pro Glu Asp Ile Tyr Val Glu Trp Thr Asn Asn Gly Lys Thr Glu Leu
260 265 270
Asn Tyr Lys Asn Thr Glu Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe
275 280 285
Met Tyr Ser Lys Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn
290 295 300
Ser Tyr Ser Cys Ser Val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr
305 310 315 320
Thr Lys Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
325 330
<210> 197
<211> 105
<212> PRT
<213> 小家鼠
<400> 197
Gln Pro Lys Ser Ser Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu
1 5 10 15
Glu Leu Glu Thr Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Thr Ile Thr Asp Phe
20 25 30
Tyr Pro Gly Val Val Thr Val Asp Trp Lys Val Asp Gly Thr Pro Val
35 40 45
Thr Gln Gly Met Glu Thr Thr Gln Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys
50 55 60
Tyr Met Ala Ser Ser Tyr Leu Thr Leu Thr Ala Arg Ala Trp Glu Arg
65 70 75 80
His Ser Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly His Thr Val Glu
85 90 95
Lys Ser Leu Ser Arg Ala Asp Cys Ser
100 105

Claims (39)

1.一种组合，所述组合包括：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，所述第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其中所述癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
2.以下抗体分子的用途：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，并且所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，所述第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于制造用于治疗患者的癌症的药物，其中所述癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
3.一种用于治疗患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，所述第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
其中所述癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
4.一种第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于与以下组合使用：
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，所述第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其中所述癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性。
5.一种第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于治疗患者的癌症；
其特征在于所述第一抗体分子降低和/或防止所述癌症对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子治疗的抗性。
6.一种药物组合物，其包括
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，所述第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。
7.一种试剂盒，所述试剂盒包括：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与PD-1或PD-L1特异性结合；以及
-第三抗体分子，所述第三抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子缺乏Fc区或具有去糖基化的Fc区。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子选自由人抗体分子、人源化抗体分子和人来源的抗体分子组成的组。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子包括包含以下CDR的可变重链(VH)：
(i)SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:53；或
(ii)SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59；或
(iii)SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65；或
(iv)SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70和SEQ ID NO:71；或
(v)SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77；或
(vi)SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83；或
(vii)SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89；或
(viii)SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94和SEQ ID NO:95；或
(ix)SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100和SEQ ID NO:101；或
(x)SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107；或
(xi)SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112和SEQ ID NO:113；或
(xii)SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119；或
(xiii)SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124和SEQ ID NO:125；或
(xiv)SEQ ID NO:129和SEQ ID NO:130和SEQ ID NO:131；或
(xv)SEQ ID NO:135和SEQ ID NO:136和SEQ ID NO:137；或
(xvi)SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:142和SEQ ID NO:143；或
(xvii)SEQ ID NO:147和SEQ ID NO:148和SEQ ID NO:149；或
(xviii)SEQ ID NO:153和SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155；或
(xix)SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160和SEQ ID NO:161；或
(xx)SEQ ID NO:165和SEQ ID NO:166和SEQ ID NO:167；或
(xxi)SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:172和SEQ ID NO:173；或
(xxii)SEQ ID NO:177和SEQ ID NO:178和SEQ ID NO:179；或
(xxiii)SEQ ID NO:183和SEQ ID NO:184和SEQ ID NO:185；或
(xxiv)SEQ ID NO:189和SEQ ID NO:190和SEQ ID NO:191。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子包括包含以下CDR的可变轻链(VL)：
(i)SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；或
(ii)SEQ ID NO:60和SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62；或
(iii)SEQ ID NO:66和SEQ ID NO:67和SEQ ID NO:68；或
(iv)SEQ ID NO:72和SEQ ID NO:73和SEQ ID NO:74；或
(v)SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80；或
(vi)SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:86；或
(vii)SEQ ID NO:90和SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92；或
(viii)SEQ ID NO:96和SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98；或
(ix)SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:103和SEQ ID NO:104；或
(x)SEQ ID NO:108和SEQ ID NO:109和SEQ ID NO:110；或
(xi)SEQ ID NO:114和SEQ ID NO:115和SEQ ID NO:116；或
(xii)SEQ ID NO:120和SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122；或
(xiii)SEQ ID NO:126和SEQ ID NO:127和SEQ ID NO:128；或
(xiv)SEQ ID NO:132和SEQ ID NO:133和SEQ ID NO:134；或
(xv)SEQ ID NO:138和SEQ ID NO:139和SEQ ID NO:140；或
(xvi)SEQ ID NO:144和SEQ ID NO:145和SEQ ID NO:146；或
(xvii)SEQ ID NO:150和SEQ ID NO:151和SEQ ID NO:152；或
(xviii)SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157和SEQ ID NO:158；或
(xix)SEQ ID NO:162和SEQ ID NO:163和SEQ ID NO:164；或
(xx)SEQ ID NO:168和SEQ ID NO:169和SEQ ID NO:170；或
(xxi)SEQ ID NO:174和SEQ ID NO:175和SEQ ID NO:176；或
(xxii)SEQ ID NO:180和SEQ ID NO:181和SEQ ID NO:182；或
(xxiii)SEQ ID NO:186和SEQ ID NO:187和SEQ ID NO:188；或
(xxiv)SEQ ID NO:192和SEQ ID NO:193和SEQ ID NO:194。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子包含选自由以下项组成的组的可变重链(VH)氨基酸序列：SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:5；SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7；SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9；SEQ ID NO:10；SEQ ID NO:11；SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13；SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:15；SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17；SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:19；SEQ ID NO:20；SEQ ID NO:21；SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23；SEQ ID NO:24；SEQ IDNO:25；和SEQ ID NO:26。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子包含选自由以下项组成的组的可变轻链(VL)氨基酸序列：SEQ ID NO:27；SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29；SEQ ID NO:30；SEQ IDNO:31；SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33；SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:35；SEQ ID NO:36；SEQ IDNO:37；SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39；SEQ ID NO:40；SEQ ID NO:41；SEQ ID NO:42；SEQ IDNO:43；SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:45；SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47；SEQ ID NO:48；SEQ IDNO:49；和SEQ ID NO:50。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子包含以下CDR氨基酸序列：
(i)SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52和SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54和SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56；或
(ii)SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59和SEQ ID NO:60和SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62；或
(iii)SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65和SEQ ID NO:66和SEQ ID NO:67和SEQ ID NO:68；或
(iv)SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70和SEQ ID NO:71和SEQ ID NO:72和SEQ ID NO:73和SEQ ID NO:74；或
(v)SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76和SEQ ID NO:77和SEQ ID NO:78和SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80；或
(vi)SEQ ID NO:81和SEQ ID NO:82和SEQ ID NO:83和SEQ ID NO:84和SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:86；或
(vii)SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88和SEQ ID NO:89和SEQ ID NO:90和SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92；或
(viii)SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94和SEQ ID NO:95和SEQ ID NO:96和SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98；或
(ix)SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100和SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:102和SEQ ID NO:103和SEQ ID NO:104；或
(x)SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106和SEQ ID NO:107和SEQ ID NO:
108和SEQ ID NO:109和SEQ ID NO:110；或
(xi)SEQ ID NO:111和SEQ ID NO:112和SEQ ID NO:113和SEQ ID NO:
114和SEQ ID NO:115和SEQ ID NO:116；或
(xii)SEQ ID NO:117和SEQ ID NO:118和SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:
120和SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122；或
(xiii)SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124和SEQ ID NO:125和SEQ ID NO:
126和SEQ ID NO:127和SEQ ID NO:128；或
(xiv)SEQ ID NO:129和SEQ ID NO:130和SEQ ID NO:131和SEQ ID NO:
132和SEQ ID NO:133和SEQ ID NO:134；或
(xv)SEQ ID NO:135和SEQ ID NO:136和SEQ ID NO:137和SEQ ID NO:
138和SEQ ID NO:139和SEQ ID NO:140；或
(xvi)SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:142和SEQ ID NO:143和SEQ ID NO:
144和SEQ ID NO:145和SEQ ID NO:146；或
(xvii)SEQ ID NO:147和SEQ ID NO:148和SEQ ID NO:149和SEQ ID NO:
150和SEQ ID NO:151和SEQ ID NO:152；或
(xviii)SEQ ID NO:153和SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155和SEQ ID NO:
156和SEQ ID NO:157和SEQ ID NO:158；或
(xix)SEQ ID NO:159和SEQ ID NO:160和SEQ ID NO:161和SEQ ID NO:
162和SEQ ID NO:163和SEQ ID NO:164；或
(xx)SEQ ID NO:165和SEQ ID NO:166和SEQ ID NO:167和SEQ ID NO:
168和SEQ ID NO:169和SEQ ID NO:170；或
(xxi)SEQ ID NO:171和SEQ ID NO:172和SEQ ID NO:173和SEQ ID NO:
174和SEQ ID NO:175和SEQ ID NO:176；或
(xxii)SEQ ID NO:177和SEQ ID NO:178和SEQ ID NO:179和SEQ ID NO:
180和SEQ ID NO:181和SEQ ID NO:182；或
(xxiii)SEQ ID NO:183和SEQ ID NO:184和SEQ ID NO:185和SEQ ID NO:
186和SEQ ID NO:187和SEQ ID NO:188；或
(xxiv)SEQ ID NO:189和SEQ ID NO:190和SEQ ID NO:191和SEQ ID NO:
192和SEQ ID NO:193和SEQ ID NO:194。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子包含以下氨基酸序列：
(i)SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:27；或
(ii)SEQ IS NO:4和SEQ ID NO:28；或
(iii)SEQ IS NO:5和SEQ ID NO:29；或
(iv)SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:30；或
(v)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:31；或
(vi)SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:32；或
(vii)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:33；或
(viii)SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:34；或
(ix)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:35；或
(x)SEQ ID NO:12和SEQ ID NO:36；或
(xi)SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:37；或
(xii)SEQ ID NO:14和SEQ ID NO:38；或
(xiii)SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:39；或
(xiv)SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:40；或
(xv)SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:41；或
(xvi)SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:42；或
(xvii)SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:43；或
(xviii)SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:44；或
(xix)SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:45；或
(xx)SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:46；或
(xxi)SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:47；或
(xxii)SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:48；或
(xxiii)SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:49；或
(xxiv)SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:50。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中所述癌症是FcγRIIb阳性B细胞癌症或者是FcγRIIb阴性癌症。
17.根据权利要求16所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中所述FcγRIIb阴性癌症是实体癌；例如选自包含以下项的组的实体癌：癌、肉瘤和淋巴瘤；例如选自包含以下项的组的实体癌：黑素瘤、前列腺癌、结直肠癌、肝细胞癌、肺癌、膀胱癌、肾癌、胃癌、宫颈癌、梅克尔细胞癌或卵巢癌；且/或其中所述实体癌是免疫沙漠型肿瘤或免疫排斥型肿瘤或免疫浸润不良的肿瘤。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中对用与PD-1或PD-L1特异性结合的抗体分子和/或与CTLA-4特异性结合的抗体分子的治疗具有抗性的所述癌症是复发性和/或难治性癌症。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第二抗体分子和/或所述第三抗体分子选自由人抗体分子、人源化抗体分子和人来源的抗体分子组成的组。
20.第一抗体分子用于治疗患者的癌症的用途，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
其特征在于所述第一抗体分子降低和/或防止所述癌症对用与CTLA-4特异性结合的第二抗体分子治疗的抗性。
21.根据权利要求20所述的用途，其中所述第二抗体分子以低于耐受治疗剂量的剂量施用。
22.一种组合，所述组合包括：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；以及
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，
其特征在于所述组合包括低于耐受治疗剂量的所述第二抗体分子的剂量。
23.以下抗体分子的用途：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；以及
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于制造用于治疗患者的癌症的药物，
其特征在于所述组合包括低于耐受治疗剂量的所述第二抗体分子的剂量。
24.一种用于治疗个体的癌症的方法，所述方法包括向患者施用：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，并且所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
其特征在于所施用的所述第二抗体分子的剂量低于耐受治疗剂量。
25.一种第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，用于与以下组合使用：
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合；
用于治疗患者的癌症，其特征在于所使用的所述第二抗体分子的剂量低于耐受治疗剂量。
26.一种药物组合物，其包括
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合，
其特征在于所述第二抗体分子以低于耐受治疗剂量的剂量存在。
27.一种试剂盒，该试剂盒包括：
-第一抗体分子，所述第一抗体分子经由其Fab区与FcγRIIb特异性结合，以及所述第一抗体分子缺乏Fc区或经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少；
-第二抗体分子，所述第二抗体分子与CTLA-4特异性结合以及经由其Fc区与至少一种Fcγ受体结合，
其特征在于所述第二抗体分子以低于耐受治疗剂量的剂量存在。
28.根据权利要求22至27中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第二抗体分子的所述剂量低于最大耐受治疗剂量；例如比所述耐受治疗剂量低至少50％。
29.根据权利要求22至28中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第二抗体分子的所述剂量低于最低有效治疗剂量。
30.根据权利要求22至29中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中在较低剂量下使用的所述第一抗体分子和所述第二抗体分子的治疗效果与在不存在所述第一抗体分子的情况下在所述第二抗体分子的最大耐受治疗剂量下的所述第二抗体分子的治疗效果相当。
31.根据权利要求22至30中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中在较低剂量下使用所述第二抗体分子改善了所述第二抗体分子的耐受性。
32.根据权利要求22至31中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中在较低剂量下使用所述第二抗体分子减少副作用并且/或者降低受试者中与使用所述第二抗体分子相关的毒性。
33.根据权利要求22至32中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第二抗体分子是伊匹木单抗和/或曲美木单抗。
34.根据权利要求22至33中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第二抗体分子的剂量低于10mg/kg。
35.根据权利要求22至34中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子缺乏Fc区。
36.根据权利要求22至35所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子经由其Fc区与Fcγ受体的结合减少，并且具有去糖基化的Fc区。
37.根据权利要求22至36中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子选自由人抗体分子、人源化抗体分子和人来源的抗体分子组成的组。
38.根据权利要求22至37中任一项所述的供使用的组合、用途、方法、供使用的第一抗体分子、药物组合物或试剂盒，其中所述第一抗体分子如权利要求10至15中任一项所定义。
39.根据权利要求22至38中任一项所述的供使用的组合、用途、方法或供使用的第一抗体分子，其中所述癌症如权利要求16至17中任一项所定义。
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