CN116947954A - 一种合子草皂苷k及其制备方法和用途 - Google Patents
一种合子草皂苷k及其制备方法和用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116947954A CN116947954A CN202310698120.2A CN202310698120A CN116947954A CN 116947954 A CN116947954 A CN 116947954A CN 202310698120 A CN202310698120 A CN 202310698120A CN 116947954 A CN116947954 A CN 116947954A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- beta
- group
- methyl
- alpha
- glc
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 9
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 title description 4
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 title description 4
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 title description 4
- 241000827798 Hemerocallis citrina Species 0.000 title description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 52
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 40
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 31
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 claims abstract description 25
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 20
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims abstract description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 17
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical group OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 7
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 claims description 6
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 6
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 claims description 3
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 3
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims description 3
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 3
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 3
- 229940077274 Alpha glucosidase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003888 alpha glucosidase inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 229940126904 hypoglycaemic agent Drugs 0.000 claims 1
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 abstract description 22
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 abstract description 22
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 11
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 abstract description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 abstract description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000012827 research and development Methods 0.000 abstract description 2
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 abstract 1
- 150000002611 lead compounds Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 31
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 20
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 11
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 8
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- OORMXZNMRWBSTK-LGFJJATJSA-N dammarane Chemical compound C1CCC(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C OORMXZNMRWBSTK-LGFJJATJSA-N 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 5
- XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N (2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4R,5S,6R)-5-[[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4-dihydroxy-6-methyl-5-[[(1S,4R,5S,6S)-4,5,6-trihydroxy-3-(hydroxymethyl)-1-cyclohex-2-enyl]amino]-2-oxanyl]oxy]-3,4-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-2-oxanyl]oxy]-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4-triol Chemical compound O([C@H]1O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1O)N[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)C(CO)=C1)O)C)[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O XUFXOAAUWZOOIT-SXARVLRPSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960002632 acarbose Drugs 0.000 description 4
- XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N acarviostatin I01 Natural products OC1C(O)C(NC2C(C(O)C(O)C(CO)=C2)O)C(C)OC1OC(C(C1O)O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(O)C(O)C1O XUFXOAAUWZOOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 4
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000219104 Cucurbitaceae Species 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 239000006049 herbal material Substances 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- 241000756137 Hemerocallis Species 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 2
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 2
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 2
- 229930182493 triterpene saponin Natural products 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241000481592 Actinostemma Species 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 125000002353 D-glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015817 Infant Nutrition disease Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CCNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- -1 Rha sugars Chemical class 0.000 description 1
- 208000004078 Snake Bites Diseases 0.000 description 1
- FHKPLLOSJHHKNU-INIZCTEOSA-N [(3S)-3-[8-(1-ethyl-5-methylpyrazol-4-yl)-9-methylpurin-6-yl]oxypyrrolidin-1-yl]-(oxan-4-yl)methanone Chemical compound C(C)N1N=CC(=C1C)C=1N(C2=NC=NC(=C2N=1)O[C@@H]1CN(CC1)C(=O)C1CCOCC1)C FHKPLLOSJHHKNU-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229930185474 acteoside Natural products 0.000 description 1
- FBSKJMQYURKNSU-ZLSOWSIRSA-N acteoside Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC(=O)\C=C\C=2C=C(O)C(O)=CC=2)[C@@H](CO)O[C@@H](OCCC=2C=C(O)C(O)=CC=2)[C@@H]1O FBSKJMQYURKNSU-ZLSOWSIRSA-N 0.000 description 1
- FBSKJMQYURKNSU-UKQWSTALSA-N acteoside I Natural products C[C@@H]1O[C@H](O[C@@H]2[C@@H](O)[C@H](OCCc3ccc(O)c(O)c3)O[C@H](CO)[C@H]2OC(=O)C=Cc4ccc(O)c(O)c4)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O FBSKJMQYURKNSU-UKQWSTALSA-N 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930182494 ginsenoside Natural products 0.000 description 1
- 229940089161 ginsenoside Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000002114 high-resolution electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000000110 microvilli Anatomy 0.000 description 1
- 230000027939 micturition Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- SYXUBXTYGFJFEH-UHFFFAOYSA-N oat triterpenoid saponin Chemical compound CNC1=CC=CC=C1C(=O)OC1C(C=O)(C)CC2C3(C(O3)CC3C4(CCC5C(C)(CO)C(OC6C(C(O)C(OC7C(C(O)C(O)C(CO)O7)O)CO6)OC6C(C(O)C(O)C(CO)O6)O)CCC53C)C)C4(C)CC(O)C2(C)C1 SYXUBXTYGFJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K trisodium;6-oxido-4-sulfo-5-[(4-sulfonatonaphthalen-1-yl)diazenyl]naphthalene-2-sulfonate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].C1=CC=C2C(N=NC3=C4C(=CC(=CC4=CC=C3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=CC=C(S([O-])(=O)=O)C2=C1 SWGJCIMEBVHMTA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- QFRYQWYZSQDFOS-UHFFFAOYSA-N verbascoside Natural products CC1OC(COC2C(O)C(COC3OC(C(O)C(O)C3O)C(=O)O)OC(Oc4cc(O)cc5OC(=CC(=O)c45)c6ccc(O)c(O)c6)C2O)C(O)C(O)C1O QFRYQWYZSQDFOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J17/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, having an oxygen-containing hetero ring not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
- C07J17/005—Glycosides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/256—Polyterpene radicals
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了一种式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐：其中，R1选自羟基，R2选自氢、羟基，R3选自O‑β‑DGlc基、O‑β‑DGlc‑(2‑1)‑α‑L‑Rha基、甲基，R4选自甲基、O‑β‑DGlc基、O‑β‑DGlc‑(2‑1)‑α‑L‑Rha基，R5选自羟甲基、氢、CH2O‑β‑DGlc基，R6选自甲基、羟甲基，R7选自甲基、羟甲基,R8选自羟基、O‑β‑DGlc‑(2‑1)‑α‑L‑Rha基。本发明的有益效果在于，本发明的获得了具有α‑葡萄糖苷酶抑制活性的未见文献报道的一种新的化合物，并确定了该化合物的结构，该化合物具有良好的α‑葡萄糖苷酶抑制活性，可以制成适合于临床使用的降血糖药物，也可作为先导化合物，对其构效关系进行进一步研究，合成一系列的降血糖药物和药物组合，更可以作为合子草药材及其制剂质量控制的指标成分，突破目前合子草研究开发的瓶颈。
Description
技术领域
本发明属于药物技术领域，具体涉及一种合子草皂苷K及其制备方法和用途。
背景技术
合子草(Actinostemma lobatumMaxim)，葫芦科(Cucurbitaceae)合子草属一年生草本植物，始载于《本草拾遗》。其生长在路旁，山地草丛中或水边，经过历代医学研究，合子草主要是以全草及种子入药，具有清热解毒，利尿消肿，清热祛湿的功效，临床上以主治肾炎水肿、腹水肿胀、毒蛇咬伤及疳积初起等病症为主。
20世纪80年代初，日本学者藤丙稔大等人以葫芦科植物为研究对象，进行活性成分筛选过程中，从多种植物的全草和种子中共分离出19种皂苷单体化合物，主要为四环三萜类的皂苷类化合物，其中包括6种达玛烷型和2种巴卡烷型的合子草皂苷(actinostemmosides)，其结构与人参皂苷类似。
对于《合子草的化学成分研究》_刘芹中的合子草皂苷中的合子草皂苷A-G,然而现有文献均未指出其在制备降血糖药物的应用，并且也没有现有文献公开其对α-葡萄糖苷酶抑制活性的应用，并且也没有现有文献公开合子草皂苷K的化合物结构和制备降血糖药物以及对α-葡萄糖苷酶抑制活性方面的应用。
发明内容
针对问题，一方面，本发明提供了式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐：
其中，R1选自羟基，R2选自氢、羟基，R3选自O-β-DGlc基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基、甲基，R4选自甲基、O-β-DGlc基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基，R5选自羟甲基、氢、CH2O-β-DGlc基，R6选自甲基、羟甲基，R7选自甲基、羟甲基,R8选自羟基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基。
式Ⅰ所示化合物参见表1所示，包括合子草皂苷A-D,G-H,J。
进一步地，所述化合物如式Ⅱ所示：
其中，R2选自氢、羟基，R3选自O-β-DGlc基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基，R7选自羟甲基、甲基。
进一步地，所述化合物如式Ⅲ所示：
本发明的另一方面提供一种组合物，包括上述两项或两项以上所述的化合物或其药学上可以接受的盐。
本发明的另一方面提供一种提取物，包括上述两项或两项以上所述的化合物或其药学上可以接受的盐。
本发明的另一方面还提供了一种化合物或其药学上可以接受的盐的制备方法：
S1:取合子草干燥全草4.2Kg用70％乙醇溶液浸渍2d，用10倍量的70％乙醇溶液浸提2次，每次12h，合并两次提取液，再用旋转蒸发仪减压浓缩，得到醇提物固体浸膏。将浸膏在适量纯化水中溶解，用乙酸乙酯萃取3次(乙酸乙酯与水的体积比为1:1)，将萃取后剩下的水溶性部分合并，再用旋转蒸发仪减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取浸膏300g和水层浸膏785g。
S2:取水层浸膏，加入适量的甲醇溶液溶解。称取ODS(120-50目)约200g放于蒸发皿中，将蒸发皿置于水浴锅上加热，边加热边向ODS中加入样品溶液，拌样。称取ODS(120-50目)(约水部位样品重量的3倍量)干法装柱(8.5*65cm),加入一定量甲醇试剂冲柱并多次冲柱除去气泡。将拌样ODS加入层析柱中，分三次上样，用甲醇-水梯度体系依此进行洗脱。梯度体系为甲醇:水＝20:80、60:40、100％甲醇。将洗脱出来的馏分减压浓缩并用薄层色谱展开，合并具有相似班点及相同比移值的洗脱样品，将洗脱样品通过超高效液相-质谱联用色谱仪(UPLC-MS)分析检测，合并具有相同吸收峰的洗脱样品，得到的馏分分别为Fr.1、Fr.2和Fr.3。
S3:Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱分离，二氯甲烷:甲醇＝1:1洗脱，薄层色谱(TLC)点板合样为4个部分，分别为Fr.2.1,Fr.2.2,Fr.2.3和Fr.2.4；Fr.2.2经半制备HPLC梯度洗脱(C18，乙腈-水，26:74-56:44，30min，10mL/min)得到3个部分，分别为Fr.2.2.1，Fr.2.2.2和Fr.2.2.3；Fr.2.2.2经半制备HPLC分离(C18，乙腈-水，28:72，10mL/min)得到6个部分，分别为Fr.2.2.2.1，Fr.2.2.2.2，Fr.2.2.2.3，Fr.2.2.2.4，Fr.2.2.2.5和Fr.2.2.2.6；Fr.2.2.2.4经半制备HPLC分离(C18，乙腈-水，19:81，10mL/min)得到3个部分，分别为Fr.2.2.2.4.1，Fr.2.2.2.4.2和Fr.2.2.2.4.3；Fr.2.2.2.4.1经半制备HPLC分离纯化(C18，乙腈-水，18:82，10mL/min)，过滤，重结晶，得到合子草皂苷K(tR＝48.2min，41.2mg)。
本发明的另一方面提供式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，优选的是，所述降血糖的药物为α-葡萄糖苷酶抑制剂，
其中，R1选自羟基，R2选自氢、羟基，R3选自O-β-DGlc基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基、甲基，R4选自甲基、O-β-DGlc基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基，R5选自羟甲基、氢、CH2O-β-DGlc基，R6选自甲基、羟甲基，R7选自甲基、羟甲基,R8选自羟基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基。
进一步地，式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其中R1选自羟基，R2选自氢，R3选自O-β-DGlc基，R4选自甲基，R5选自羟甲基，R6选自甲基，R7选自甲基,R8选自羟基。
进一步地，式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其中R1选自羟基，R2选自羟基，R3选自O-β-DGlc基，R4选自甲基，R5选自羟甲基，R6选自甲基，R7选自甲基,R8选自羟基。
进一步地，式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其中R1选自羟基，R2选自氢，R3选自O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基，R4选自甲基，R5选自羟甲基，R6选自甲基，R7选自羟甲基,R8选自羟基。
本发明的有益效果在于，本发明的获得了具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的一个新化合物，为未见文献报道的一种新的化合物，并确定了该化合物的结构，该化合物具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性，可以制成适合于临床使用的降血糖药物，也可作为先到化合物，对其构效关系进行进一步研究，合成一系列的降血糖药物和药物组合，更可以作为合子草药材及其制剂质量控制的指标成分，实现合子草药材及其制剂质量的稳定和可控，突破目前合子草研究开发的瓶颈。
具体实施方式
以下实施例进一步说明本发明的内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。
实施例9：水萃取浸膏。
取合子草干燥全草4.2Kg用70％乙醇溶液浸渍2d，用10倍量的70％乙醇溶液浸提2次，每次12h，合并两次提取液，再用旋转蒸发仪减压浓缩，得到醇提物固体浸膏。将浸膏在适量纯化水中溶解，用乙酸乙酯萃取3次(乙酸乙酯与水的体积比为1:1)，将萃取后剩下的水溶性部分合并，再用旋转蒸发仪减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取浸膏300g和水层浸膏785g。
取水层浸膏。
实施例1：合子草皂苷K
取水层浸膏，加入适量的甲醇溶液溶解。称取ODS(120-50目)约200g放于蒸发皿中，将蒸发皿置于水浴锅上加热，边加热边向ODS中加入样品溶液，拌样。称取ODS(120-50目)(约水部位样品重量的3倍量)干法装柱(8.5*65cm),加入一定量甲醇试剂冲柱并多次冲柱除去气泡。将拌样ODS加入层析柱中，分三次上样，用甲醇-水梯度体系依此进行洗脱。梯度体系为甲醇:水＝20:80、60:40、100％甲醇。将洗脱出来的馏分减压浓缩并用薄层色谱展开，合并具有相似班点及相同比移值的洗脱样品，将洗脱样品通过超高效液相-质谱联用色谱仪(UPLC-MS)分析检测，合并具有相同吸收峰的洗脱样品，得到的馏分分别为Fr.1、Fr.2和Fr.3。
Fr.2经SephadexLH-20凝胶柱色谱分离，二氯甲烷:甲醇＝1:1洗脱，薄层色谱(TLC)点板合样为4个部分，分别为Fr.2.1,Fr.2.2,Fr.2.3和Fr.2.4；Fr.2.2经半制备HPLC梯度洗脱(C18，乙腈-水，26:74-56:44，30min，10mL/min)得到3个部分，分别为Fr.2.2.1，Fr.2.2.2和Fr.2.2.3；Fr.2.2.2经半制备HPLC分离(C18，乙腈-水，28:72，10mL/min)得到6个部分，分别为Fr.2.2.2.1，Fr.2.2.2.2，Fr.2.2.2.3，Fr.2.2.2.4，Fr.2.2.2.5和Fr.2.2.2.6；Fr.2.2.2.4经半制备HPLC分离(C18，乙腈-水，19:81，10mL/min)得到3个部分，分别为Fr.2.2.2.4.1，Fr.2.2.2.4.2和Fr.2.2.2.4.3；Fr.2.2.2.4.1经半制备HPLC分离纯化(C18，乙腈-水，18:82，10mL/min)，过滤，重结晶，得到合子草皂苷K(tR＝48.2min，41.2mg)。化合物结构测定：
白色粉末状固体。10％H2SO4-CH3CH2OH溶液呈现紫红色，L-B反应呈现阳性，Molish反应呈现阳性，根据以上反应结果推测其可能是三萜皂苷类化合物。10％H2SO4-CH3CH2OH溶液水解结果检出Glc和Rha两种糖。HR-ESI-MS给出：m/z801.5008[M+H]+准分子离子峰(C42H73O14 +，计算值为801.5000)，结合NMR数据可推测其分子式为C42H72O14。
化合物的1H-NMR(400MHz,C5D5N)谱给出以下信号:δ1.05(3H,s),1.09(3H,s),1.14(3H,s),1.23(3H,s),1.51(3H,s),1.86(3H,s),5.43(1H,t,J＝6.8Hz),5.06(1H,d,J＝7.6Hz),4.34(1H,d,J＝5.1Hz)。
化合物的13C-NMR(100MHz,C5D5N)谱给出以下信号:δ127.6(C-24),98.5,82.2,78.7,77.7(C-3),77.4(C-6),75.4,72.5,71.6,66.9(C-26),62.6,61.81(C-19),60.7,52.0,50.1,49.5,48.9,47.2,47.0,44.1,42.8,40.6,39.5,37.4,36.2,29.8,27.9(C-28),27.9,25.6,22.8,22.7,21.7(C-19),21.6,17.1(C-18),16.710(C-29),13.1(C-21)。其中的30个碳为达玛烷母核的碳信号，12个碳为母核所连的2个糖上的碳信号，6个碳信号为达玛烷型母核上的甲基碳的碳信号。
通过氢核磁共振谱数据分析，发现与文献中报道的actinostemmosideI数据可进行比较，发现其24位碳位移向低场移近2ppm，并且其化合物27位(甲基末端)向低场移近7ppm，化合物的26位向高场移近7ppm，化合物的3位向高场移近11ppm，除此之外，其他的数据基本一致，因此，可以推测化合物的24、25位的双键构型与ActinostemmosideI的双键构型不同，结果为顺式双键。
1H的异核多碳相关谱中，发现在葡萄糖的端基质子信号中的δ5.06(1H，d，J＝7.6Hz，GlcH-1)和其达玛烷型母核结构上的20位信号δ82.18(C-20)有远程相关的关系，证明在达玛烷型母核的C-20位上连接着Glc。
确定糖的绝对构型可通过气相色谱分析。将此化合物分别进行酸水解、衍生化，并且将其气相色谱与标准糖衍生物进行比较，研究证明其中的糖为D-葡萄糖，再将其化学位移值与端基氢的偶合常数进行结合比较，可鉴定结构为β-D-葡萄糖。
综上所述，将化合物的结构可鉴定为合子草皂苷K，为未见文献报道的一种新的化合物。
对比例1：以阿卡波糖作为阳性对照。
试验例:
α-葡萄糖苷酶抑制活性实验
α-葡萄糖苷酶广泛存在于动物，植物及微生物体内，在人体内集中分布于小肠刷状缘膜上皮细胞上，是水解碳水化合物的关键酶。它可从非还原末端水解低聚糖和多聚糖的α-1,4-葡萄糖苷键，从而释放出葡萄糖，葡萄糖再经小肠吸收进入血液，导致血糖升高。故抑制α-葡萄糖苷酶的活性可减缓人体对葡萄糖的吸收，抑制高血糖。
本实验选用对硝基酚-α-D-葡萄糖苷(PNPG)作为反应底物筛选分离得到的具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物。PNPG在α-葡萄糖苷酶存在的情况下会水解成葡萄糖和对硝基苯酚，而对硝基苯酚在405nm波长处具有最大吸光度值，当反应体系中有抑制α-葡萄糖苷酶活性的物质存在时，则PNPG水解产生的对硝基苯酚就会减少，使得吸光度值相应的减小。
表2主要实验材料与试剂
溶液配制：
(1)0.1M盐酸溶液：取9mL浓盐酸加水至1L即得；
(2)0.1MPBS缓冲溶液：精密称取3.5510g无水Na2HPO4和3.9019g无水NaH2PO4分别置于两个烧杯中，分别加入250mL蒸馏水，分别得到0.1MNa2HPO4溶液和0.1MNaH2PO4溶液，再将二者按体积比(61：39)混合后，使用0.1M盐酸溶液调节PH＝7即得0.1MPBS缓冲溶液，备用；
(3)底物PNPG溶液：精密称取7.5mgPNPG固体粉末置于10mL容量瓶中加0.1MPBS缓冲溶液定容得到浓度为2.5mMPNPG溶液，现配现用；
(4)α-葡萄糖苷酶溶液：取冻干酶粉(酶活力为69.6U/mg)，先用0.1MPBS缓冲溶液配成10U/mLα-葡萄糖苷酶储备液，再使用缓冲溶液稀释成0.5U/mLα-葡萄糖苷酶溶液，现配现用。
(5)终止液：精密称取2.1201g无水Na2CO3固体置于100mL容量瓶中，加蒸馏水定容即得0.2MNa2CO3溶液；
(6)实施例1溶液：精密称取1.0mgactinostemmosideK化合物，溶于1mLDMSO中，摇匀，即得母液，备用；
(7)实施例2-9溶液：参照实施例1溶液得到母液备用；
(8)对照例1溶液：精密称取1.0mg阿卡波糖固体，溶于1mL DMSO中，摇匀，即得母液，备用；实验方法：
本实验共设置4个组，在96孔细胞培养板中进行反应，按表3数据先准确移取PBS缓冲溶液、α-葡萄糖苷酶溶液、样品溶剂(DMSO)和不同浓度的阳性对照品溶液(或样品溶液、实施例2-8溶液、对照例1-2溶液)，混匀，37℃恒温孵育10min，再加入底物(PNPG溶液)，充分混匀后，37℃恒温孵育20min，最后，再加入终止液终止反应。利用酶标仪在405nm波长下测定吸光度值。按照α-葡萄糖苷酶抑制率公式进行计算，并使用Microsoft Excel 2016对得到的数据进行处理，计算IC50值。
表4反应物添加量(μL)
需要说明的是，表4中的样品溶液包括实施例1-9，阳性对照品溶液包括对照例1-3.
α-葡萄糖苷酶抑制率计算公式：
抑制率(％)＝[(Ak-Akb)-(As-Asb)]/(Ak-Akb)*100％
Ak：空白组吸光度；Akb：空白背景组吸光度；As：实验组(对照组)吸光度；Asb：实验背景组吸光度。
试验1：取实施例1的合子草皂苷K母液，先使用DMSO稀释1000倍后，再采用二倍稀释法稀释得到六各浓度，分别为0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1μg/mL。按照上述实验方法计算出每个浓度对应的抑制率，并计算出试验1半数抑制浓度IC50为1.15μg/mL。
试验2：与试验1不同的是，取合子草皂苷A母液。
试验3：与试验1不同的是，取合子草皂苷B母液。
试验4：与试验1不同的是，取合子草皂苷C母液。
试验5：与试验1不同的是，取合子草皂苷D母液。
试验6：与试验1不同的是，取合子草皂苷G母液。
试验7：与试验1不同的是，取合子草皂苷H母液。
试验8：与试验1不同的是，取合子草皂苷J母液。
试验9：与试验1不同的是，取实施例9的水萃取浸膏母液。
试验10：取对照例1的阳性对照品阿卡波糖母液，先使用DMSO稀释1000倍后，再采用二倍稀释法稀释得到六各浓度，分别为0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1μg/mL。按照上述实验方法计算出每个浓度对应的抑制率，并计算出阳性对照半数抑制浓度IC50为0.17μg/mL。
表5化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制率及IC50
如表5所示，实施例1-9均对α-葡萄糖苷酶有抑制作用，实施例1的α-葡萄糖苷酶的抑制率最高，本发明实施例1、实施例2、实施例6的合子草皂苷的α-葡萄糖苷酶的抑制率高于其他实施例，说明R2，R3，R7取代基与母环的构效关系影响α-葡萄糖苷酶的抑制率，虽然对照1的阿卡波糖的α-葡萄糖苷酶的抑制率和本发明效果差别不大，但本发明提供了一种新的化合物并给出其在降血糖方面的应用。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对其作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐：
其中，R1选自羟基，R2选自氢、羟基，R3选自O-β-D Glc基、O-β-D Glc-(2-1)-α-L-Rha基、甲基，R4选自甲基、O-β-D Glc基、O-β-D Glc-(2-1)-α-L-Rha基，R5选自羟甲基、氢、CH2O-β-DGlc基，R6选自甲基、羟甲基，R7选自甲基、羟甲基,R8选自羟基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可以接受的盐，其特征在于，所述化合物如式Ⅱ所示：
其中，R2选自氢、羟基，R3选自O-β-D Glc基、O-β-D Glc-(2-1)-α-L-Rha基，R7选自羟甲基、甲基。
3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可以接受的盐，所述化合物如式Ⅲ所示：
4.一种组合物，包括权利要求1-3中两种或两种以上化合物或其药学上可以接受的盐。
5.一种提取物，包括权利要求1-4两项或两项以上所述的化合物或其药学上可以接受的盐。
6.一种提取物，其特征在于，所述提取物的制备方法包括：
取合子草干燥全草4.2Kg用70％乙醇溶液浸渍2d，用10倍量的70％乙醇溶液浸提2次，每次12h，合并两次提取液，再用旋转蒸发仪减压浓缩，得到醇提物固体浸膏。将浸膏在适量纯化水中溶解、分散，用乙酸乙酯萃取3次(乙酸乙酯与水的体积比为1:1)，将萃取后剩下的水溶性部分合并，再用旋转蒸发仪减压浓缩，得到乙酸乙酯萃取浸膏300g和水层浸膏785g。
7.式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，
其中，R1选自羟基，R2选自氢、羟基，R3选自O-β-D Glc基、O-β-D Glc-(2-1)-α-L-Rha基、甲基，R4选自甲基、O-β-D Glc基、O-β-D Glc-(2-1)-α-L-Rha基，R5选自羟甲基、氢、CH2O-β-DGlc基，R6选自甲基、羟甲基，R7选自甲基、羟甲基,R8选自羟基、O-β-DGlc-(2-1)-α-L-Rha基，优选的是，所述降血糖的药物为α-葡萄糖苷酶抑制剂。
8.根据权利要求7所述的式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其特征在于，其中R1选自羟基，R2选自氢，R3选自O-β-D Glc基，R4选自甲基，R5选自羟甲基，R6选自甲基，R7选自甲基,R8选自羟基。
9.根据权利要求7所述的式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其特征在于，其中R1选自羟基，R2选自羟基，R3选自O-β-D Glc基，R4选自甲基，R5选自羟甲基，R6选自甲基，R7选自甲基,R8选自羟基。
10.根据权利要求7所述的式Ⅰ所示化合物或其药学上可以接受的盐在制备降血糖的药物中的应用，其特征在于，其中R1选自羟基，R2选自氢，R3选自O-β-D Glc-(2-1)-α-L-Rha基，R4选自甲基，R5选自羟甲基，R6选自甲基，R7选自羟甲基,R8选自羟基。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310698120.2A CN116947954A (zh) | 2023-06-13 | 2023-06-13 | 一种合子草皂苷k及其制备方法和用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310698120.2A CN116947954A (zh) | 2023-06-13 | 2023-06-13 | 一种合子草皂苷k及其制备方法和用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116947954A true CN116947954A (zh) | 2023-10-27 |
Family
ID=88441752
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310698120.2A Pending CN116947954A (zh) | 2023-06-13 | 2023-06-13 | 一种合子草皂苷k及其制备方法和用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116947954A (zh) |
-
2023
- 2023-06-13 CN CN202310698120.2A patent/CN116947954A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20020009756A (ko) | 효소적 방법에 의한 진세노사이드 컴파운드 케이의 제조방법 | |
| CN101768202A (zh) | 知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法及其医药新用途 | |
| CN109045051B (zh) | 一种e环开裂的乌苏烷型三萜皂苷类化合物的用途 | |
| Rastrelli et al. | Studies on the constituents of Amaranthus caudatus (Kiwicha) seeds. Isolation and characterization of seven new triterpene saponins | |
| CN106727598B (zh) | 阔叶丰花草三萜化合物的制备方法及其在制备糖苷酶抑制剂药物中的应用 | |
| CN102093453B (zh) | 20(R)-25-羟基-达玛烷型-3β,12β,20-三醇的制备方法 | |
| Pollo et al. | A new polyacetylene glucoside from Vernonia scorpioides and its potential antihyperglycemic effect | |
| CN102796159A (zh) | 一类达玛烷糖苷及其制备方法与应用 | |
| CN106892958B (zh) | 一种环外双键乌苏烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN112028959A (zh) | 无柄灵芝中具有抗糖尿病活性的三萜化合物的制备方法及应用 | |
| CN116947954A (zh) | 一种合子草皂苷k及其制备方法和用途 | |
| CN116768958A (zh) | 一种合子草皂苷l及其制备方法和用途 | |
| CN106749492A (zh) | 一种甾体皂苷类化合物及其制备方法和应用 | |
| He et al. | Microbial transformation of methyl protodioscin by Cunninghamella elegans | |
| CN106892957A (zh) | 一种齐墩果烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN112176018B (zh) | 基于炙甘草制备甘草次酸及其衍生物的方法和用途 | |
| CN114569594B (zh) | 金山五味子素L在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用 | |
| CN106892956B (zh) | 一种乌苏烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN114644677B (zh) | 一种从救必应中分离的新化合物及其分离方法 | |
| CN108586563B (zh) | 一种e环开裂的乌苏烷型三萜皂苷类化合物及其制备方法 | |
| CN115385978B (zh) | 一种青葙子化合物及其制备方法和应用 | |
| CN107118245B (zh) | 一种黄烷醇类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN110669094B (zh) | 罗汉果新苷及其制备方法 | |
| CN112521439B (zh) | 桦褐孔菌醇F及其在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂药物的应用 | |
| CN110950921B (zh) | 一种三萜皂苷类化合物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |