CN116919869B - 一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法及其应用 - Google Patents
一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法，采用茉莉花、茶提取物、茶多酚进行菌种混合发酵制备得到；其中菌种为日本葡糖杆菌、两歧双歧杆菌的混合菌种。采用本发明的技术方案，茉莉花发酵之后，香味更加温和，醇厚，留香持久自然；茉莉花单独发酵，味道是茉莉花的香型，味道有点油腻，增加茶多酚之后，味道更趋向于茉莉绿茶的味道，更加清新；同时本发明得到的滤液具有比较好的抗炎和抗氧化的作用；茉莉花和茶多酚复合发酵滤液，具有比较好的抗炎(舒缓)、保湿、抗皱作用，同时抗氧化的作用强于单独使用。
Description
技术领域
本发明涉及发酵技术领域，尤其是涉及一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法及其应用。
背景技术
茉莉花茶是我国产量和销量最大的花茶，其香味怡人，常用于与茶叶进行窨制制作。同时茉莉花中含有大量的维生素C，能够抑制黑色素的生成，减少色斑和暗沉，使肌肤透亮白皙；其也具有良好的保湿效果，能够增加肌肤水分含量，改善干燥、粗糙的肌肤；另外茉莉花具有很好的舒缓肌肤的功效，能够缓解肌肤的疲劳感和不适感，使肌肤更加柔嫩。
目前茉莉花的香味研究主要关注在如何发挥更多的香味以及使得调整其整体香味的舒适度。CN102960499A采用新鲜的茉莉花与茶胚进行混合后自然发酵，香味吸收更充分，而且可以降低花茶中的茶碱和茶多酚，对身体更加有益。CN114376021A提供一种茉莉花香味红茶的制备方法，其采用冷藏能够确保茉莉花中生理成分保持较好的活性，而取出后即刻进入沸水能够快速融化表面的冰层，同时破坏果胶层，进而改善提取时间，利用超声提取能够改善蛋白质和纤维素结构，进而使得被包埋的微量元素得以充分释放。
但是目前并没有将发酵和茉莉花进行结合，其原因是发酵是一种整体性的行为，其很难对茉莉花进行特别的专一性处理，其发酵出来的味道往往不理想，存在较多的枯草味等。
针对这一现象，本发明提供一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法及其应用；其香味宜人，同时具备较好的护肤效果。
发明内容
本发明提供一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法，采用茉莉花、茶提取物、茶多酚进行菌种混合发酵制备得到；其中菌种为日本葡糖杆菌、两歧双歧杆菌的混合菌种。
优选地，所述茉莉花在发酵前进行干燥处理。
优选地，所述茉莉花的干燥方式为先进行红外干燥再进行冷冻干燥。
优选地，所述茉莉花的红外干燥条件如下：真空度为-0.08MPa，辐照距离130mm，功率密度1.5W/g，红外波长3-5μm，干燥温度为40℃，干燥时间0.5h。
优选地，所述冷冻干燥的条件为：将茉莉花于温度-40℃、压力18Pa的条件下冷冻干燥1min。
优选地，所述茶提取物选自绿茶提取物或乌龙茶提取物。
优选地，所述茶提取物为乌龙茶提取物。
优选地，所述复合发酵滤液还包括多糖类化合物和多元醇，所述多元醇包括1，2-己二醇和1，2-戊二醇。
优选地，所述日本葡糖杆菌、两歧双歧杆菌的接种量比为2:1。
优选地，所述培养基为：牛肉汁10g，蛋白胨5g，D(+)-葡萄糖5g，淀粉1g，NaCl5g，NaAc 3g，L-半胱氨酸盐酸盐0.5g，蒸馏水1.0L，琼脂15g，自然pH。
本发明另一方面提供所述的一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法其应用于护肤领域。
采用上述技术方案，本发明具有如下有益效果：
采用本发明的技术方案，茉莉花发酵之后，香味更加温和，醇厚，留香持久自然；茉莉花单独发酵，味道是茉莉花的香型，味道有点油腻，增加茶多酚之后，味道更趋向于茉莉绿茶的味道，更加清新；同时本发明得到的滤液具有比较好的抗炎和抗氧化的作用；茉莉花和茶多酚复合发酵滤液，具有比较好的抗炎(舒缓)作用，同时抗氧化的作用强于单独使用。
具体实施方式
下面将对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法，采用茉莉花、茶提取物、茶多酚进行菌种混合发酵制备得到；其中菌种为日本葡糖杆菌、两歧双歧杆菌的混合菌种。
优选地，其具体制备方法如下：
S01选取茉莉花进行处理：挑选半夜12点绽放的茉莉花，将其用流水洗净；放置在红外干燥箱内进行干燥：条件设置如下：真空度为-0.08MPa，辐照距离130mm，功率密度1.5W/g，红外波长3-5μm，干燥温度为40℃，干燥时间0.5h。随后取出立即进行冷冻干燥：将茉莉花于温度-40℃、压力18Pa的条件下冷冻干燥1min；随后研磨粉碎后冷冻保存；
S02选取乌龙茶进行处理：选取市售凤凰水仙乌龙茶，将其进行水提(按照料液比为1:12，在90℃下进行水提1h)，得到水提液后加入等体积的乙醚，静置取水层，随后干燥浓缩，冷冻干燥得乌龙茶提取物；
S03市售茶多酚，购买自阿拉丁。
S04将处理后的茉莉花粉末、乌龙茶提取物和茶多酚按照比例为(1-3):(0.1-1):(0.05-0.1)混合，并与培养基进行混合，灭菌15min；
所述培养基为：牛肉汁10g，蛋白胨5g，D(+)-葡萄糖5g，淀粉1g，NaCl 5g，NaAc 3g，L-半胱氨酸盐酸盐0.5g，蒸馏水1.0L，琼脂15g，自然pH。
S05将菌种接种到培养基中，总体接种量为9％，所述日本葡糖杆菌、两歧双歧杆菌的接种量比为2:1。
S06发酵：在25±2℃下，有氧发酵52h，过滤得复合发酵滤液。
其中，日本葡糖杆菌Gluconobacter japonicus，购买自中国普通微生物保藏管理中心，CGMCC号为1.15609；两歧双歧杆菌Bifidobacterium bifidum购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌株保藏编号：CICC 6169。
本发明另一方面提供所述的一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法其应用于护肤领域。
本发明另一方面提供一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液，其由上述制备方法制备得到。
下面结合具体的实施方式对本发明做进一步的解释说明。
实施例1
本实施例提供一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法，其具体制备方法如下：
S01选取茉莉花进行处理：挑选半夜12点绽放的茉莉花，将其用流水洗净；放置在红外干燥箱内进行干燥：条件设置如下：真空度为-0.08MPa，辐照距离130mm，功率密度1.5W/g，红外波长3-5μm，干燥温度为40℃，干燥时间0.5h。随后取出立即进行冷冻干燥：将茉莉花于温度-40℃、压力18Pa的条件下冷冻干燥1min；随后研磨粉碎后冷冻保存；
S02选取乌龙茶进行处理：选取市售凤凰水仙乌龙茶，将其进行水提(按照料液比为1:12，在90℃下进行水提1h)，得到水提液后加入等体积的乙醚，静置取水层，随后干燥浓缩，冷冻干燥得乌龙茶提取物；
S03市售茶多酚，购买自阿拉丁。
S04将处理后的茉莉花粉末、乌龙茶提取物和茶多酚按照比例为2:0.4:0.06混合，并与培养基进行混合，灭菌15min；茉莉花粉末、乌龙茶提取物和茶多酚混合物和培养基的质量比为1:8；
所述培养基为：牛肉汁10g，蛋白胨5g，D(+)-葡萄糖5g，淀粉1g，NaCl 5g，NaAc 3g，L-半胱氨酸盐酸盐0.5g，蒸馏水1.0L，琼脂15g，自然pH。
S05将菌种接种到培养基中，总体接种量为9％，所述日本葡糖杆菌、两歧双歧杆菌的接种量比为2:1。
S06发酵：在25±2℃下，有氧发酵52h，过滤得复合发酵滤液。
其中，日本葡糖杆菌Gluconobacter japonicus，购买自中国普通微生物保藏管理中心，CGMCC号为1.15609；两歧双歧杆菌Bifidobacterium bifidum购买自中国工业微生物菌种保藏管理中心，菌株保藏编号：CICC 6169。
实施例2：与实施例1的区别在于，茉莉花的处理方式为只经过红外干燥，未经过冷冻干燥。
实施例3：与实施例1的区别在于，茉莉花的处理方式为只经过冷冻干燥，未经过红外干燥。
实施例4：与实施例1的区别在于，茉莉花的处理方式为将红外干燥替换为微波干燥。微波干燥的条件如下：
实施例5：与实施例1的区别在于，茉莉花的处理方式为将先进行冷冻干燥，再进行红外干燥。
实施例6：与实施例1的区别在于，将红外干燥的红外波长更换为远红外波长，1000μm左右。
实施例7：与实施例1的区别在于，菌种为两歧双歧杆菌。
实施例8：与实施例1的区别在于，菌种为日本葡糖杆菌。
实施例9：与实施例1的区别在于，发酵条件：在25±2℃下，有氧发酵54h。
实施例10：与实施例1的区别在于，原料不包含乌龙茶。
实施例11：与实施例1的区别在于，乌龙茶未经过前处理，直接粉碎后进行发酵。
实施例12：与实施例1的区别在于，原料不包含茶多酚。
性能测试
测试1：透明质酸酶抑制实验
检测依据，按照HMC-W1-029透明质酸酶抑制率进行测试。
实施例1-12：用纯水稀释至样品浓度为0.2％；
阳性对照物(甘草酸二钾，纯度≥98％)：用水稀释至阳性对照物浓度为3％；
阴性对照物：纯水。
试验操作步骤：
设计实施例组、阳性对照组、阴性对照组，每个组别设立需设立3个平行，分别在加入不同试剂溶液，摇匀，室温放置30min显色，用紫外分光光度计测定波长为528nm处吸光度值。
计算公式
透明质酸酶抑制率(％)＝(1-(C-D)/(A-B))×100
其中，A为不含样品的反应溶液的吸光度；B为不含样品和酶的反应溶液的吸光度；C为含有样品和酶的反应溶液的吸光度；D为含有样品和不含酶的反应溶液的吸光度。
统计分析软件为SPSS，试验样品、阳性对照物和阴性对照物透明质酸酶抑制率之间的比较采用独立样板t检验。上述统计分析均为双尾检验，显著性水平为α＝0.05，P＞0.05，表示两组之间无显著性差异；P＜0.05，表示两组之间具有显著性差异。
表1试验结果表
| 名称 | 实验结果 | P值 |
| 实施例1 | 72.121±0.138 | ＜0.05 |
| 实施例2 | 56.216±0.361 | ＜0.05 |
| 实施例3 | 52.342±0.382 | ＜0.05 |
| 实施例4 | 59.318±0.492 | ＜0.05 |
| 实施例5 | 54.911±0.191 | ＜0.05 |
| 实施例6 | 55.252±0.274 | ＜0.05 |
| 实施例7 | 32.271±0.487 | ＜0.05 |
| 实施例8 | 43.592±0.384 | ＜0.05 |
| 实施例9 | 69.231±0.281 | ＜0.05 |
| 实施例10 | 42.126±0.271 | ＜0.05 |
| 实施例11 | 67.364±0.310 | ＜0.05 |
| 实施了12 | 43.781±0.111 | ＜0.05 |
| 阴性对照 | -4.635±0.241 | / |
| 阳性对照 | 50.131±1.250 | ＜0.05 |
透明质酸酶抑制率保留三位小数，P＜0.05，表示样品和阳性对照与阴性对照相比有显著性差异。
测试2:弹性蛋白酶抑制率
发酵滤液：用纯水稀释至样品浓度为5％；
阳性对照物(表没食子儿茶素没食子酸酯)：用水稀释至阳性对照物浓度为0.1％；
阴性对照物：纯水。
试验操作步骤：
设计样品组、样品本底组、溶剂组和溶剂本底组，每个组别设立需设立3个平行，在96孔板中分别加入不同试剂溶液，轻轻摇匀，25℃孵育15min后，将其放在酶标仪中，在410nm处测定吸光值。
计算公式：弹性蛋白酶抑制率(％)＝(1-(C-D)/(A-B))×100
其中，A为不含样品的反应溶液的吸光度；B为不含样品和酶的反应溶液的吸光度；C为含有样品和酶的反应溶液的吸光度；D为含有样品和不含酶的反应溶液的吸光度。
统计分析软件为SPSS，试验样品、阳性对照物和阴性对照物弹性蛋白酶抑制率之间的比较采用独立样板t检验。上述统计分析均为双尾检验，显著性水平为α＝0.05，P＞0.05，表示两组之间无显著性差异；P＜0.05，表示两组之间具有显著性差异。
表2试验结果表
| 名称 | 试验结果(％) | P值 |
| 实施例1 | 71.921±0.317 | ＜0.05 |
| 实施例2 | 55.311±0.271 | ＜0.05 |
| 实施例3 | 51.293±0.472 | ＜0.05 |
| 实施例4 | 58.641±0.482 | ＜0.05 |
| 实施例5 | 53.831±0.111 | ＜0.05 |
| 实施例6 | 54.842±0.412 | ＜0.05 |
| 实施例7 | 31.539±0.311 | ＜0.05 |
| 实施例8 | 42.418±0.372 | ＜0.05 |
| 实施例9 | 68.825±0.461 | ＜0.05 |
| 实施例10 | 41.799±0.319 | ＜0.05 |
| 实施例11 | 66.351±0.274 | ＜0.05 |
| 实施例12 | 42.614±0.418 | ＜0.05 |
| 阴性对照 | -8.312±2.471 | / |
| 阳性对照 | 72.121±1.824 | ＜0.05 |
弹性蛋白酶抑制率保留三位小数，P＜0.05，表示样品和阳性对照与阴性对照相比有显著性差异。
测试3：驻留产品留香测试
分别取实施例1-12产品各5g，随后和95g清水混合均匀得混合溶液，备用。另取36片PMMA片，分成12组，每组3片，并做好标记；每组分别取1g混合溶液滴在一篇PMMA板上，每组的另外2片分别滴1g去离子水。随后放置于恒温恒湿[(21±1)℃、(50±10)％RH]环境中48h，由5位评估员对12组PMMA片进行闻香测试。
表3留香测试结果
注:有留香的填写“1”，无留香的填写“0”
测试4：市面上随机选择25-35岁，干敏皮肤的人群，共130人，随机分成13组，前12组分别使用实施例1-12用去离子水稀释到浓度为5％的产品；第13组使用去离子水。每日早上8:00、晚上20:00分别使用两次，连续使用30天，查看使用后的皮肤过敏情况。同时增加问卷调查。
问题一：
你是否喜欢本香味
3分非常喜欢2分喜欢1分一般0分不喜欢
问题二：你是否觉得这个香味比较愉悦
3分非常愉悦2分愉悦1分一般0分不愉悦
分数统计：将每组的分数进行加和，得到总分填入表4中，总分30分，最低0分，最高30分。
表4测试4的结果
茉莉花香含有醇类、酯类、酮类和醛类；这些成分是构成茉莉花香的主要原因之一，但是本申请发明人发现芳香类位置低级醛易挥发且气味较为刺鼻；同时发现选用发酵方法往往会除了上述芳香物质之外，还会包含茉莉花种的蜡、糖、脂肪、淀粉等杂质，从而干扰了香料的正常发香；本发明选用特定的菌种进行发酵的情况下，能够有效解决上述问题；同时对原料进行前处理，其原因是因为茉莉花里含有拟南芥酶，用红外的方式可以更好地发挥他的特点，味道更好闻。但是也发现使用这方法保持时间不长，同时会有点枯草味；但是在配方中加入乌龙茶提取物或者茶多酚可以避免上述缺陷，花香具有鲜灵度，不仅具有较长的留香性，同时也能具有让人愉悦的香味。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (3)
1.一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法，其特征在于，采用茉莉花、茶提取物、茶多酚进行菌种混合发酵制备得到；其中菌种为日本葡糖杆菌、两歧双歧杆菌的混合菌种；
具体步骤如下：
S01 选取茉莉花进行处理：将茉莉花用流水洗净；放置在红外干燥箱内进行干燥：条件设置如下：真空度为-0.08MPa，辐照距离130mm，功率密度1.5W/g，红外波长3-5μm，干燥温度为40℃，干燥时间0.5h；随后取出立即进行冷冻干燥：将茉莉花于温度-40℃、压力18Pa的条件下冷冻干燥1min；随后研磨粉碎后冷冻保存；
S02 选取乌龙茶进行处理：选取市售凤凰水仙乌龙茶，将其进行水提，按照料液比为1:12，在90℃下进行水提1h，得到水提液后加入等体积的乙醚，静置取水层，随后干燥浓缩，冷冻干燥得乌龙茶提取物；
S03 市售茶多酚；
S04 将处理后的茉莉花粉末、乌龙茶提取物和茶多酚按照比例为2:0.4:0.06混合，并与培养基进行混合，灭菌15min；茉莉花粉末、乌龙茶提取物和茶多酚混合物和培养基的质量比为1:8；
S05 将菌种接种到培养基中，总体接种量为9%，所述日本葡糖杆菌、两歧双歧杆菌的接种量比为2:1；
S06 发酵：在25±2℃下，有氧发酵52h，过滤得复合发酵滤液。
2.根据权利要求1所述的一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法，其特征在于，所述复合发酵滤液还包括多糖类化合物和多元醇，所述多元醇包括1，2-己二醇和1，2-戊二醇。
3. 根据权利要求1所述的一种含茉莉花和茶提取物的复合发酵滤液的制备方法，其特征在于，所述培养基为：牛肉汁 10g，蛋白胨 5g， D(+)-葡萄糖 5g，淀粉 1g，NaCl 5g，NaAc3g，L-半胱氨酸盐酸盐 0.5g，蒸馏水 1.0L，琼脂 15g，自然pH。
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