CN115414313B - 一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物及其制备方法 - Google Patents
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物及其制备方法。所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：称取紫松果菊、薏苡仁、黄葵、氯化钠，混合并粉碎，过筛，得到混合粉末；向混合粉末中加入水，蒸汽灭菌；接种微球菌种子液，发酵10‑20天，得到发酵物；向发酵物中加入水，超声波提取，过滤得到滤液；将滤液通过高压均质机处理1‑2遍，高速离心，获得上清液，加入防腐剂，即得抗老组合物。志愿者测试证明，添加上述抗老组合物的护肤品可以提升皮肤含水量，皮肤更加水嫩，小细纹得到明显减少，显示了良好的抗老功效。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物及其制备方法。
背景技术
皮肤是人体最大的器官，随着年龄的增长而衰老。有文献报道女性30岁左右开始长皱纹，逐渐出现色斑，随后皮肤变得松弛、粗糙、黯淡、皱纹加深变多等。皮肤的衰老几乎伴随着每个人的下半生，对人们的工作、生活产生消极影响，因此如何延缓衰老是化妆品的研究焦点之一。
人体衰老是一个复杂的过程，其原因有内因和外因两个方面。有学者认为，老化是自由基产生和消除发生障碍的结果。正常情况下，生物体内氧自由基的产生和消除处于相对平衡状态，但某些病理因素或紫外线或蓝光的照射可以增加氧自由基的形成或阻碍人体皮肤中的叶黄素对自由基的捕获。自由基可以进攻、浸润和损伤皮肤细胞结构而产生类脂过氧化物，最终导致了皮肤老化的加速。
皮肤的初级抗氧化系统，包括多种抗氧化酶和非酶类抗氧化物质。抗氧化酶的作用是使活性氧中间产物失活；非酶类抗氧化物质则是清除过剩的自由基，抗氧化物质提供一个电子给含有不配对电子而高度活泼的氧自由基，使之形成具有稳态结构的分子而失去其高度化学活性和攻击性，且自身不会形成有害物质。皮肤的酶类抗氧化剂主要有超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶和醛酮还原酶等。
随着生活水平的提高，人们对皮肤进行保养已成为日常，而皮肤的氧化或过氧化损伤是皮肤衰老和美容的大敌，使皮肤抗氧化系统及天然抗氧化剂更好的发挥作用是皮肤美容的一个重要部分。
发明内容
本发明目的是提供一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，可以有效抵御皮肤过氧化损伤，从而减缓皮肤衰老。
为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案予以实现：
第一方面，本发明实施例提供了一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：紫松果菊1-10份、薏苡仁10-100份、黄葵1-10份、氯化钠0.1-1份，混合并粉碎，过筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的1-2倍，蒸汽灭菌；接种微球菌种子液，发酵10-20天，得到发酵物；
(3)向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的5-10倍，超声波提取，过滤得到滤液；
(4)将滤液通过高压均质机处理1-2遍，高速离心，获得上清液，加入防腐剂，即得抗老组合物。
具体地，作为优选，所述过筛为过40目筛。
具体地，作为优选，所述微球菌为藤黄微球菌，所述微球菌种子液中活菌数为10-100×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的1％-5％。
具体地，作为优选，所述发酵的温度为35-45℃。
具体地，作为优选，所述超声波提取的频率为10-50kHz，提取温度为50-60℃，提取时间为30-60分钟。
具体地，作为优选，所述高压均质压力为800-1200bar，所述高速离心的转速为10000-25000rpm。
具体地，作为优选，所述防腐剂为戊二醇，所述戊二醇的添加量为在抗老组合物中终浓度达到4-5wt％。
在其中一些实施例中，所述的抗老组合物还可以加入羟基频哪酮视黄酸酯，所述羟基频哪酮视黄酸酯的添加量为在抗老组合物中终浓度达到0.01-0.1wt％。
本发明所涉及的紫松果菊为菊科松果菊属植物紫松果菊的花。原产美国中部地区。耐寒性较好，喜光照及肥沃的土壤。具有很好的园林和药用价值。药用价值方面，现有技术记载了其具有免疫增强作用，含有多种活性成分，可刺激人体内白细胞等免疫细胞活力，提高机体自身免疫力。
本发明所涉及的薏苡仁为禾本科植物薏苡干燥成熟种仁。薏苡仁有利水渗湿，健脾止泻，除痹，排脓，解毒散结的作用。薏苡仁含有淀粉、脂肪酸及酯类、多糖、蛋白质，以及酚酸、甾醇、黄酮、内酰胺、三萜、生物碱、腺苷等各种营养物质。主要活性成分为酯类、不饱和脂肪酸、糖类及内酰胺类等。其中淀粉是薏苡仁的主要组成部分，占其质量的59％～72％，薏苡仁营养丰富，蛋白质含量12.2％～16.7％，胚乳中的蛋白质含量约为20％，薏苡仁蛋白富含人体必需的8种氨基酸。薏苡仁中脂肪含量为5.1％～9.4％，高于玉米、高粱等谷物。
本发明所涉及的黄葵为锦葵科秋葵属植物黄葵的种仁。有报道，黄葵籽油可用作化妆品基础油性原料，容易被皮肤吸收，具有滋润肌肤的效果。对成纤维细胞的活性有促进，有活肤作用，结合它的抗氧化性，可用于抗衰化妆品。
第二方面，本发明实施例提供了上述的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物在制备护肤类日用品中的应用。
具体地，所述护肤类日用品包括：膏霜、乳液、精华、爽肤水、面膜、沐浴露、洗面奶。
本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：本发明实施例提供的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物通过微球菌发酵上述重量配比的紫松果菊、薏苡仁、黄葵，利用微生物代谢来充分提高并释放它们的小分子活性成分；另外采用高压均质机处理使微球菌破壁，获得了富含氨基酸、小分子肽、核酸、多糖等营养物质的微球菌溶胞产物，测试发现所得到的抗老组合物具有良好的抗氧化能力。志愿者测试证明，添加了上述抗老组合物的护肤品可以提升皮肤含水量，皮肤更加水嫩，小细纹得到明显减少，显示了良好的抗老功效。
附图说明
图1试验2志愿者使用产品8周前后照片。
具体实施方式
说明书中的实施方式仅用于对本发明进行说明，其并不对本发明的保护范围起到限定作用。本发明的保护范围仅由权利要求限定，在本发明公开的实施方式的基础上所做的任何省略、替换或修改将落入本发明的保护范围。
参选以下本发明的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本发明的内容。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。
如本文所用术语“由…制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。
为了加深对本发明的理解，下面将结合实施例对本发明作进一步详述，该实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
实施例1
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：紫松果菊1份、薏苡仁100份、黄葵10份、氯化钠1份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的2倍，蒸汽灭菌；接种藤黄微球菌种子液，所述微球菌种子液中活菌数为10×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的5％；在35℃温度下发酵20天，得到发酵物；
(3)向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的5倍，50kHz超声波50℃下提取60分钟，1000目滤布过滤得到滤液；
(4)将滤液通过800bar高压均质机处理2遍，10000rpm高速离心，获得上清液，加入戊二醇，即得抗老组合物；所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到5wt％。
实施例2
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：紫松果菊10份、薏苡仁10份、黄葵1份、氯化钠0.1份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的1倍，蒸汽灭菌；接种藤黄微球菌种子液，所述微球菌种子液中活菌数为100×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的1％；在45℃温度下发酵10天，得到发酵物；
(3)向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的10倍，10kHz超声波60℃下提取30分钟，1000目滤布过滤得到滤液；
(4)将滤液通过1200bar高压均质机处理1遍，25000rpm高速离心，获得上清液，加入戊二醇，即得抗老组合物；所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到4wt％。
实施例3
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：紫松果菊5份、薏苡仁50份、黄葵5份、氯化钠0.5份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的1.5倍，蒸汽灭菌；接种藤黄微球菌种子液，所述微球菌种子液中活菌数为50×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的3％；在40℃温度下发酵15天，得到发酵物；
(3)向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的8倍，30kHz超声波55℃下提取45分钟，1000目滤布过滤得到滤液；
(4)将滤液通过1000bar高压均质机处理2遍，15000rpm高速离心，获得上清液，加入戊二醇，即得抗老组合物；所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到4.5wt％。
实施例4
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：紫松果菊5份、薏苡仁50份、黄葵5份、氯化钠0.5份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的1.5倍，蒸汽灭菌；接种藤黄微球菌种子液，所述微球菌种子液中活菌数为50×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的3％；在40℃温度下发酵15天，得到发酵物；
(3)向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的8倍，30kHz超声波55℃下提取45分钟，1000目滤布过滤得到滤液；
(4)将滤液通过1000bar高压均质机处理2遍，15000rpm高速离心，获得上清液，加入戊二醇和羟基频哪酮视黄酸酯，即得抗老组合物；所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到4.5wt％，所述羟基频哪酮视黄酸酯的添加量为抗老组合物中终浓度达到0.01-0.1wt％。
对比例1
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：紫松果菊5份、氯化钠0.5份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的1.5倍，蒸汽灭菌；接种藤黄微球菌种子液，所述微球菌种子液中活菌数为50×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的3％；在40℃温度下发酵15天，得到发酵物；
(3)向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的8倍，30kHz超声波55℃下提取45分钟，1000目滤布过滤得到滤液；
(4)将滤液通过1000bar高压均质机处理2遍，15000rpm高速离心，获得上清液，加入戊二醇，即得抗老组合物；所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到4.5wt％。
对比例2
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：薏苡仁50份、氯化钠0.5份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的1.5倍，蒸汽灭菌；接种藤黄微球菌种子液，所述微球菌种子液中活菌数为50×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的3％；在40℃温度下发酵15天，得到发酵物；
(3)向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的8倍，30kHz超声波55℃下提取45分钟，1000目滤布过滤得到滤液；
(4)将滤液通过1000bar高压均质机处理2遍，15000rpm高速离心，获得上清液，加入戊二醇，即得抗老组合物；所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到4.5wt％。
对比例3
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：黄葵5份、氯化钠0.5份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的1.5倍，蒸汽灭菌；接种藤黄微球菌种子液，所述微球菌种子液中活菌数为50×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的3％；在40℃温度下发酵15天，得到发酵物；
(3)向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的8倍，30kHz超声波55℃下提取45分钟，1000目滤布过滤得到滤液；
(4)将滤液通过1000bar高压均质机处理2遍，15000rpm高速离心，获得上清液，加入戊二醇，即得抗老组合物；所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到4.5wt％。
对比例4
一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
(1)称取以下重量份的原料：紫松果菊5份、薏苡仁50份、黄葵5份、氯化钠0.5份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
(2)向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的12倍，蒸汽灭菌；30kHz超声波55℃下提取45分钟，1000目滤布过滤得到滤液；
(3)将滤液通过1000bar高压均质机处理2遍，15000rpm高速离心，获得上清液，加入戊二醇，即得抗老组合物；所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到4.5wt％。
试验1抗氧化测试
原理：1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(简称DPPH)是一种稳定的长寿命自由基，其乙醇溶液呈深紫色，在517nm附近有强吸收。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使DPPH乙醇溶液光吸收减弱。DPPH乙醇溶液褪色程度与其接受的电子数呈线性关系，由此可评价试验样品清除自由基的能力，即抗氧化活性的大小。
试验按照《T/SHRH 006-2018化妆品-自由基(DPPH)清除实验方法》记载的方法对实施例1-4和对比例1-4所制得的抗老组合物的1％水溶液进行测试，具体测试结果如下表1。阳性对照VE。
表1各测试样品的DPPH自由基清除率
| 序号 | 测试样品 | 清除率/％ |
| 1 | 实施例1的1％水溶液 | 68.12±3.25 |
| 2 | 实施例2的1％水溶液 | 59.34±1.68 |
| 3 | 实施例3的1％水溶液 | 77.05±0.92 |
| 4 | 实施例4的1％水溶液 | 89.10±4.43 |
| 5 | 对比例1的1％水溶液 | 18.41±2.31 |
| 6 | 对比例2的1％水溶液 | 5.39±1.22 |
| 7 | 对比例3的1％水溶液 | 13.21±2.03 |
| 8 | 对比例4的1％水溶液 | 32.86±3.67 |
| 9 | 阳性对照组VE，0.04mg/mL | 54.16±3.08 |
由表1可见，复配了紫松果菊、薏苡仁、黄葵并利用微球菌发酵的实施例1-4所制得的抗老组物具有更佳的清除自由基的能力。
实施例5
一种抗老润肤霜，包括如下质量百分含量的组分：聚二甲基硅氧烷3.5％、聚二甲基硅氧烷PEG-10/15交联聚合物1％、鲸蜡基PEG/PPG-10/1聚二甲基硅氧烷2％、氢化聚癸烯4％、异壬酸异壬酯2％、硬脂氧聚甲硅氧烷/聚二甲硅氧烷共聚物2％、环五聚二甲基硅氧烷3％、丁二醇5％、甘油8％、PCA钠1％、硫酸镁1.2％、羟苯甲酯0.15％、苯氧乙醇0.3％、实施例3所制得的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物1％、水余量。
所述的抗老润肤霜制备工艺如下：将聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷PEG-10/15交联聚合物、鲸蜡基PEG/PPG-10/1聚二甲基硅氧烷、氢化聚癸烯、异壬酸异壬酯、硬脂氧聚甲硅氧烷/聚二甲硅氧烷共聚物、环五聚二甲基硅氧烷投入乳化锅，搅拌均匀，加热到85度，制得油相；将丁二醇、甘油、PCA钠、硫酸镁、羟苯甲酯、水投入水相锅，搅拌均匀，加热到85度，制得水相；在搅拌下将水相缓慢加入油相中，开启均质处理5分钟，保温搅拌30分钟；开启冷却水降温到48度，加入苯氧乙醇、实施例3所制得的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，搅拌均匀，检验合格后出料，即可。
实施例6
一种抗老爽肤水，包括如下质量百分含量的组分：甘油2％、戊二醇3％、辛酰羟肟酸0.03％、透明质酸钠0.02％、甜菜碱3％、卡波姆0.1％、精氨酸0.1％、实施例3所制得的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物1％、水余量。
所述的抗老爽肤水制备工艺如下：将甘油、戊二醇、辛酰羟肟酸、透明质酸钠、甜菜碱、水投入乳化锅，开启均质下投入卡波姆，加热到85度，保温搅拌半个小时；开启冷却水降温到48度，加入实施例3所制得的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，搅拌均匀，检验合格后出料，即可。
试验2志愿者试用测试
在工厂召集33例志愿者，年龄45-55岁的人群，经测试对象知情，同意，使用实施例5所制得的抗老润肤霜、实施例6所制得的抗老爽肤水。具体使用方法为：洁面后取适量的抗老爽肤水，轻轻拍打至吸收，然后取适量的抗老润肤霜于脸部，涂抹均匀。早晚各1次，连续使用8周后进行回访，得知：其中26例志愿者眼角皱纹明显减少，皮肤变得水嫩有光泽，剩余志愿者皱纹没有明显减少，但都反馈皮肤干燥情况得到了改善，变得更加的水嫩。总的来说，联合使用实施例5所制得的抗老润肤霜和实施例6所制得的抗老爽肤水8周后，78.8％的志愿者显示了良好的抗老效果。
以上实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (5)
1.一种含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，其特征在于，所述的抗老组合物通过如下方法制备得到：
（1）称取以下重量份的原料：紫松果菊1-10份、薏苡仁10-100份、黄葵1-10份、氯化钠0.1-1份，混合并粉碎，过40目筛，得到混合粉末；
（2）向混合粉末中加入水，其中所述水的添加重量为混合粉末的1-2倍，蒸汽灭菌；接种微球菌种子液，所述微球菌为藤黄微球菌，所述微球菌种子液中活菌数为10-100×107cfu/mL，所述微球菌种子液的接种量为混合粉末重量的1%-5%；35-45℃条件下发酵10-20天，得到发酵物；
（3）向发酵物中加入水，其中所述水的添加重量为发酵物的5-10倍，超声波提取，所述超声波提取的频率为10-50kHz，提取温度为50-60℃，提取时间为30-60分钟；过滤得到滤液；
（4）将滤液通过800-1200bar高压均质机处理1-2遍，10000-25000rpm高速离心，获得上清液，加入防腐剂，即得抗老组合物。
2.根据权利要求1所述的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，其特征在于，所述防腐剂为戊二醇，所述戊二醇的添加量为抗老组合物中终浓度达到4-5wt%。
3.根据权利要求1所述的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物，其特征在于，所述的抗老组合物还加入羟基频哪酮视黄酸酯，所述羟基频哪酮视黄酸酯的添加量为抗老组合物中终浓度达到0.01-0.1wt%。
4.权利要求1-3任一项所述的含有微球菌溶胞产物的抗老组合物在制备护肤类日用品中的应用。
5.根据权利要求4所述的抗老组合物在制备护肤类日用品中的应用，其特征在于，所述护肤类日用品包括：膏霜、乳液、精华、爽肤水、面膜、沐浴露、洗面奶。
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