CN116847872A - 通过包含酶如胞壁质酶的选择性饲料添加剂干预减少致病性大肠杆菌的方法 - Google Patents

Abstract

本公开涉及调节动物的胃肠道中存在的大肠杆菌的水平的方法。此类调节包括例如调节宿主动物的微生物群系中LEE和非LEE致病基因的水平。本公开还涉及通过减少动物的肠道微生物群系中的多形拟杆菌群体来调节动物胃肠道中致病性大肠杆菌的毒力的方法。

Description

通过包含酶如胞壁质酶的选择性饲料添加剂干预减少致病性 大肠杆菌的方法

技术领域

本发明涉及减少大肠杆菌(E.coli)发病机理。本发明涉及一种通过减少动物胃肠道中大肠杆菌病原体的群体来改善生产动物的健康的方法。更具体地，本发明涉及减少宿主动物的微生物群系中致病性大肠杆菌菌株的肠上皮细胞清除基因座(locus forenterocyte effacement,LEE)基因和非LEE致病基因的群体的方法。本发明还涉及减少宿主动物的微生物群系中的多形拟杆菌(Bacteroides thetaiotaomicron)的群体。

背景技术

大肠杆菌(Escherichia coli)是一种用途极其广泛的微生物。除了作为正常肠道菌群的成员外，大肠杆菌菌株还会引起膀胱感染、脑膜炎和腹泻。致泻性大肠杆菌包括至少五种类型的大肠杆菌，它们会引起范围从霍乱样腹泻到极度结肠炎的各种症状。每种类型的致腹泻性大肠杆菌都具有特定的毒力因子集合，所述毒力因子包括粘附素、侵袭素和/或毒素，所述所述毒力因子负责导致特定类型的腹泻。

致肠病性大肠杆菌(Enteropathogenic E.coli,EPEC)是全世界婴儿腹泻的主要原因。EPEC疾病的特征为不同严重程度的水样腹泻，以及常伴有体液损失的呕吐和发烧。除了发达国家日托和托儿所中的孤立暴发外，EPEC对发展中国家幼儿(<6个月)构成了主要的地方性健康威胁。

肠出血性大肠杆菌(Enterohemorragic E.coli，EHEC)，也称为产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin producing E.coli,STEC)，会导致比EPEC(肠性结肠炎)更严重的腹泻，并且在约10％的病例中，这种疾病会进展为一种往往致命的肾脏疾病，溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS)。EHEC O157:H7是加拿大和美国最常见的血清型，并且与食物和水中毒相关联(Perna等人，2001,Nature 409:529-533)。EHEC的其他血清型也在世界范围内引起重大问题。EHEC寄生于牛并引起A/E病变，但不会引起成年动物患病，而是替代地将生物体排入环境中。然而，这会导致严重的健康问题，因为感染人类所需的EHEC相对较少。

与其他大肠杆菌腹泻(例如产肠毒素大肠杆菌)不同，EHEC和EPEC引起的腹泻不是由毒素介导的。相反，EPEC和EHEC与肠表面结合(EPEC与小肠表面结合，EHEC与大肠表面结合)并引起特征性组织学病变，称为粘附和消除(attaching and effacing,A/E)病变(Tauschek等人2002,Mol.Microbiol 44；1533-1550.)。A/E病变的标志是细菌附着部位处的肠刷状缘表面溶解和上皮微绒毛丧失(消除)。一旦结合，细菌就会驻留在杯状突起或基座上。在上皮细胞中在这个基座下方是几种细胞骨架组分，包括肌动蛋白和肌动蛋白相关的细胞骨架蛋白。在附着的细菌下方A/E病变和富含肌动蛋白的基座的形成是A/E病原体的组织病理学标志(Nataro等人,1998,Clin Microbiol Rev 11:142-201,和Frankel等人,1998Mol Microbiol 30:911-921)。

EPEC和EHEC属于A/E病原体家族，包括几种引起兔子(REPEC)、猪(PEPEC)和小鼠(鼠柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium))疾病的类EPEC动物病原体。这些病原体包含致病岛(pathogenicity island,PAI)，所述致病岛编码对疾病至关重要的专门分泌系统和分泌的毒力因子。A/E病变形成所需的基因被认为聚集在单个染色体毒力岛中，所述单个染色体毒力岛被称为肠上皮细胞清除基因座(LEE)，所述LEE包括调控元件、III型分泌系统(type III secretion system,TTSS)、分泌的效应蛋白及其同源伴侣(Elliott等人,1998,Mol Microbiol 28:1-4；Perna等人,1998,Infect Immun 66:3810-3817；Zhu等人,2001,Infect Immun 69:2107-2115；Deng等人,2001,Infect Immun 69:6323-6335)。

LEE包含41个基因，使其成为较复杂的PAI之一。LEE TTSS的主要功能是将效应物递送到宿主细胞内，它们在所述宿主细胞破坏宿主细胞功能并介导疾病。已鉴定出五种LEE编码的效应物(Tir、EspG、EspF、Map和EspH)。Tir(用于易位的紧密黏附素受体)易位到宿主细胞中，它在所述宿主细胞中结合宿主细胞骨架和信号传导蛋白并在细菌附着位点处启动肌动蛋白聚合，从而导致在粘附细菌下方形成肌动蛋白基座结构，所述肌动蛋白基座结构经由细菌外膜蛋白紧密黏附素直接与Tir的细胞外环相互作用。CesT作为Tir稳定性和分泌的伴侣蛋白发挥作用。

A/E病原体中还已表征了另外四种LEE编码的TTSS易位效应物：EspH增强肌动蛋白基座的伸长；EspF在拆分肠上皮细胞之间的紧密接合部中发挥作用；EspG与志贺氏菌属微管结合效应物VirA相关；并且Map定位于线粒体，但也在肌动蛋白动力学中发挥作用。Ler(用于LEE编码的调节物)是鉴定出的唯一LEE编码的调节物。

禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic E.coli,APEC)是禽类肠外感染的病原体，是属于ExPEC类的致病型。APEC引起的肠外感染被称为大肠杆菌病并且表征为内脏器官周围的纤维蛋白病变，例如败血症、肠炎、肉芽肿、脐炎、鼻窦炎、气囊炎、关节炎/滑膜炎、腹膜炎、心包炎、肝周炎、蜂窝组织炎和肿头综合征(Kunert等人,2015,World's PoultryScience Journal.71；249-258)。APEC感染还会导致蛋的产量、品质和孵化率下降。必须考虑人畜共患传播的可能性，因为家禽是APEC的主要宿主并且食用未煮熟的家禽可能会感染人类，人类可作为这种病原体的贮库(Markland等人,Zoonoses and Public Health.2015；doi:10.1111/zph.12194)。

这种致病型是肉鸡和蛋鸡肠外感染的病原体，并且这些感染统称为大肠杆菌病。大肠杆菌病在许多国家造成了重大经济损失。它影响家禽业的所有生产周期和所有部门。它导致肉鸡和蛋鸡的高发病率和死亡率。大肠杆菌菌株当从具有大肠杆菌病病变特征的禽类和被这种细菌杀死的禽类中分离出时可被指定为APEC。被指定为APEC的大肠杆菌必须具有一些毒力基因，例如编码粘附素、铁清除系统、保护素和其他毒力性状的毒力基因。仅基于诱发因素的控制方法无法有效预防大肠杆菌病。

细菌多形拟杆菌是在人类和小鼠中均最丰富的拟杆菌门物种之一，拟杆菌门是肠道微生物菌群的三大门之一(Qin J等人,2010,Nature,464,第59-65页)。已经观察到，参与代谢、定殖和毒力的EHEC NIPH-11060424基因的表达响应于与多形拟杆菌(B.thetaiotaomicron)的直接接触以及从多形拟杆菌释放的可溶性因子而受到调节。有人建议与多形拟杆菌的直接接触可以作为生态位特异性信号起作用，所述生态位特异性信号使EHEC准备好与宿主细胞更有效地相互作用，从而增加毒力潜力(Iversen等人,2015,PLoSONE 10(2):e0118140.doi:10.1371/journal.pone.0118140)。

传统上，减少或消除生产动物中的致病性大肠杆菌菌株通常聚焦于借助于例如抗生素的药物来消除动物胃肠道中的细菌。鉴于人们关于微生物群系及其在宿主动物的消化系统中的作用的了解不断增加，需要确定新颖的非抗生素方式来减少生产动物中的致病性大肠杆菌群体。换句话说，需要确定调节微生物群系中致病性大肠杆菌群体的新颖方式，并由此改善宿主动物的健康。

发明内容

本发明涉及一种减少动物的胃肠道(gastrointestinal tract,GIT)中的肠出血性大肠杆菌(EHEC)、致肠病性大肠杆菌(EPEC)和禽致病性大肠杆菌(APEC)的外源性肠上皮细胞清除基因座(LEE)基因和外源性非LEE致病基因的群体的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述外源性LEE基因和非LEE致病基因的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。在一个实施方式中，外源性LEE基因和非LEE致病基因的群体被测量为在所述动物的微生物群系内检测到的LEE基因和非LEE基因的组合拷贝数与在所述微生物群系内检测到的基因的总拷贝数的比率％。在优选的实施方式中，N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQ IDNO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQ IDNO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ IDNO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

本发明还涉及一种用于减少动物的胃肠道(GIT)中多形拟杆菌群体的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述多形拟杆菌的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。在一个实施方式中，多形拟杆菌的群体被测量为在所述动物的微生物群系内检测到的多形拟杆菌的群体与所述微生物群系内的微生物的总群体的比率％。在优选的实施方式中，N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

本发明还涉及一种减少由大肠杆菌感染引起的动物的全身炎症和/或局部炎症的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。在一个实施方式中，所述炎症的减少被测量为在所述动物的微生物群系内检测到的LEE基因和非LEE基因的拷贝数与在所述微生物群系内检测到的基因的总拷贝数的比率％。在优选的实施方式中，N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ IDNO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

在上述发明的一些实施方式中，所述微生物群系是从动物的粪便样品或从动物的GIT内收集的样品收集的。在一些实施方式中，基因拷贝数测量通过RT-PCR计数、全长16SRNA测序或宏基因组DNA测序执行。在一个实施方式中，LEE基因包括：Tir、Map、EspB、EspF、EspG、EspH和EspZ，并且非LEE致病基因包括：EspG2、EspJ、EspM1/2、EspT、EspW、Cif、NleA、NleB、NleC、NleD、NleE、NleF和NleH。在一个实施方式中，本发明的方法适用于生产动物。

附图说明

图1是示出在饲喂具有添加的蛋白酶Ronozyme ProAct的日粮的肉鸡和没有任何添加的蛋白酶Ronozyme ProAct的对照肉鸡组的微生物群系中LEE基因和非LEE基因群体的变化％的图表。

图2是示出在饲喂具有添加的蛋白酶Ronozyme ProAct的日粮的宿主肉鸡和没有任何添加的蛋白酶Ronozyme ProAct的对照肉鸡组的GIT中大肠杆菌相对丰度的变化的图表。

图3是示出在饲喂具有添加的超氧化物歧化酶的日粮的猪和没有任何添加的超氧化物歧化酶的对照猪组的微生物群系中LEE基因和非LEE基因群体的变化％的图表。

图4是示出在饲喂具有添加的超氧化物歧化酶的日粮的宿主猪和没有任何添加的超氧化物歧化酶的对照猪组的GIT中大肠杆菌相对丰度的变化的图表。

图5是示出在饲喂具有添加的溶菌酶Balancius的日粮的宿主火鸡和没有任何添加的Balancius的对照火鸡组的GIT中大肠杆菌相对丰度随时间推移的变化的图表。

具体实施方式

本文所用的术语仅出于描述特定情况的目的，而并不旨在进行限制。如本文所用，除非上下文另有明确指示，否则单数形式“一”、“一个(种)”和“该”旨在也包括复数形式。此外，在详细描述和/或权利要求书中使用的术语“包括”、“包含”、“具有”、“有”、“含有”或其变体的范围内，此类术语旨在以类似于术语“包含”的方式为包含性的。

应当理解的是，诸如“包含”、“包括”、“含有”的术语具有美国专利法中赋予其的含义；即，它们意谓“包括”、“包含”、“含有”等并且旨在是包含性的或开放式的，并且不排除附加的、未列举的要素或方法步骤；并且例如“基本上由......组成”的术语具有美国专利法赋予其的含义；即，它们允许未明确列举的要素，但排除现有技术中发现的或影响本发明的基本或新颖特性的要素。

定义

如本文中例如“A和/或B”的短语中所使用的术语“和/或”旨在包括A和B两者；A或B；A(单独)；和B(单独)。同样，在例如“A、B和/或C”的短语中使用的术语“和/或”旨在涵盖以下实施方式中的每一者：A、B和C；A、B或C；A或B；A或C；B或C；A和B；A和C；B和C；A(单独)；B(单独)；和C(单独)。

在本申请中可互换使用的术语“微生物群系”和“肠道微生物群系”是指驻留在消化道中的微生物，例如细菌、病毒、真菌、霉菌、原生动物等，负责将动物饮食中未消化和未吸收的组分转化为数以千计的生物活性代谢物。这些代谢物继而与动物的局部和全身生理学以及动物的外部环境相互作用。

减少动物的微生物群系中致病性大肠杆菌的群体的方法

在本发明中，展示了一种改善生产动物的健康的方法。本发明的方法的优选实施方式涉及一种通过减少动物的微生物群系中大肠杆菌的群体来改善生产动物的健康的方法。在一个实施方式中，本发明的方法涉及一种通过减少动物的微生物群系中致病性大肠杆菌的群体，与此同时对非致病性大肠杆菌产生较小或不显著的影响来改善生产动物的健康的方法。在优选实施方式中，大肠杆菌群体的选择性调节是通过减少动物的微生物群系中致病性大肠杆菌细菌(例如肠出血性大肠杆菌(EHEC)、致肠病性大肠杆菌(EPEC)和禽致病性大肠杆菌(APEC))的外源性肠上皮细胞清除基因座(LEE)基因和外源性非LEE致病基因的群体实现的。在另一实施方式中，本发明涉及一种通过减少动物的微生物群系中多形拟杆菌的群体来改善生产动物的健康的方法。在具体实施方式中，上述健康益处通过如本文所述向生产动物饲喂选择性饲料添加剂(例如N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶)来激发。

肠出血性大肠杆菌(EHEC)、致肠病性大肠杆菌(EPEC)和禽致病性大肠杆菌(APEC)是致腹泻性人类病原体。被这些致病性大肠杆菌菌株感染的标志是在肠上皮细胞中形成附着和消除(A/E)病变，所述病变的特征为富含肌动蛋白的基座状结构中刷状缘微绒毛的消除以及细菌与肠上皮细胞的紧密附着。致病性大肠杆菌基因组中的肠上皮细胞消除基因座(LEE)编码了III型蛋白分泌系统(T3SS)，所述T3SS将多种效应蛋白易位到宿主细胞中以破坏细胞功能，从而使病原体受益。这些效应物由LEE区域内和外的基因编码。体外细胞培养感染已经表明，细菌与上皮细胞的紧密附着需要LEE效应物，而非LEE效应物主要在调节肠道上皮细胞的炎症和细胞凋亡中发挥作用(Massiel等人，2020,DOI:10.5772/intechopen.91677)。

令人惊讶的是，本申请的发明人已鉴定出了一些选择性营养饲料添加剂，例如本文所述的N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，所述选择性营养饲料添加剂可以显著干扰致病性大肠杆菌(例如EHEC、EPEC和APEC)的生长。本发明中已表明，饲喂适量的上述选择性饲料添加剂可有助于减少宿主动物的微生物群系中LEE基因和非LEE致病基因的群体。换句话说，当通过选择性营养添加剂处理宿主动物时，致病性大肠杆菌细菌的LEE基因(其负责在宿主动物的肠道上皮细胞中形成附着和消除(A/E)病变)在其在所述宿主动物的GIT微生物群系中的群体％方面有所减少。此外，本申请的发明人观察到负责调节肠上皮中的炎症和细胞凋亡的致病性大肠杆菌细菌的非LEE致病基因也在其在宿主动物的GIT微生物群系中的群体％方面有所减少。这导致宿主动物的GIT的全身感染和局部感染减少。

本申请的发明人还观察到，选择性营养饲料添加剂可降低宿主动物的GIT微生物群系中大肠杆菌的群体％。具体地，GIT微生物群系中致病性大肠杆菌细菌的群体％减少，这可能是由于观察到EHEC、EPEC和APEC的LEE编码的效应物和非LEE编码的效应物的丰度降低。

同样令人惊讶的是，本申请的发明人发现，相同的选择性营养饲料添加剂可以显著减少GIT微生物群系中多形拟杆菌的群体％。据报道，肠出血性大肠杆菌(EHEC)的毒力与肠道共生体多形拟杆菌相协调。影响这种共生体可对EHEC有后续影响。已知多形拟杆菌作为生态位特异性信号发挥作用，所述生态位特异性信号使EHEC准备好与宿主细胞更有效地相互作用，从而增加了毒力潜力。因此，从GIT微生物群系中减少或去除多形拟杆菌可以减少EHEC与宿主动物的GIT上皮细胞的相互作用，并由此防止或减轻大肠杆菌(例如EHEC)对宿主动物的致病性。

在动物的生理水平上，本申请中鉴定的选择性营养饲料添加剂有助于治疗动物的腹泻和营养吸收障碍以及其他不良健康结局。这是通过减少宿主动物的微生物群系中致病性大肠杆菌细菌及其协调者(coordinator)多形拟杆菌的群体并由此减轻由此类细菌引起的致病性来实现的。

因此，本发明的优选实施方式涉及一种减少动物的胃肠道(GIT)中的肠出血性大肠杆菌(EHEC)、致肠病性大肠杆菌(EPEC)和禽致病性大肠杆菌(APEC)的外源性肠上皮细胞清除基因座(LEE)基因和外源性非LEE致病基因的群体的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物的步骤：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述外源性LEE基因和非LEE致病基因的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。在优选的实施方式中，N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ IDNO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

在一个实施方式中，外源性LEE基因和非LEE致病基因的群体的减少通过LEE基因和非LEE基因与微生物群系中基因总量的比率％来测量。换句话说，所述减少被测量为微生物群系中致病性大肠杆菌的群体的变化。在另一实施方式中，所述减少通过LEE基因和非LEE基因与大肠杆菌管家基因拷贝数的比率％来测量。换句话说，所述减少被测量为微生物群系的总大肠杆菌群体中致病性大肠杆菌的群体的变化。在一些实施方式中，以LEE基因和非LEE基因的比率％计的群体减少为相较于对照动物低至少5％、至少15％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％。在一个实施方式中，LEE基因包括：Tir、Map、EspB、EspF、EspG、EspH、和EspZ。在另一实施方式中，非LEE致病基因包括：EspG2、EspJ、EspM1/2、EspT、EspW、Cif、NleA、NleB、NleC、NleD、NleE、NleF和NleH。

本发明的另一优选实施方式涉及一种减少动物的胃肠道(GIT)中多形拟杆菌的群体的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述多形拟杆菌的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。在优选的实施方式中，N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:1至SEQID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ IDNO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ IDNO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ IDNO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

在一些实施方式中，以多形拟杆菌与微生物群系中的微生物总数的比率％计的群体减少是相对于对照动物低至少5％、至少15％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、或至少95％。

本发明的另一优选实施方式涉及一种减少由大肠杆菌感染引起的动物的全身炎症和/或局部炎症的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。在优选的实施方式中，N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

在一些实施方式中，以炎症相关的非LEE基因与微生物群系中基因总量的比率％计的群体减少是相对于对照动物低至少5％、至少15％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少55％、或至少60％。在一个实施方式中，炎症相关的非LEE基因包括：NleA、NleB、NleC、NleD、NleE、NleF和NleH。

本发明的另一优选实施方式涉及一种减少动物的胃肠道(GIT)中大肠杆菌的群体的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。在优选的实施方式中，N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQ IDNO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQ IDNO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ IDNO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。在具体实施方式中，所述大肠杆菌是致病性大肠杆菌。在具体实施方式中，所述致病性大肠杆菌包括EPEC、EHEC和APEC。

在一个实施方式中，动物的GIT中的大肠杆菌的群体被测量为所述动物的微生物群系内的大肠杆菌标记基因的拷贝数相对于在所述微生物群系内检测到的细菌标记基因的总拷贝数的％。在一些实施方式中，动物的GIT中的大肠杆菌群体的减少是相对于对照动物低至少5％、至少15％、至少20％或至少30％。

在一个实施方式中，微生物群系是从动物的粪便消化物样品中收集的。在另一实施方式中，微生物群系是从动物GIT内的某一位置收集的。在一个实施方式中，微生物群系是从鸡的GIT收集的。在一些实施方式中，所述位置是鸡的十二指肠、空肠、回肠、盲肠或结直肠。

微生物群系中任何微生物的任何基因的群体或微生物群系的群体的测量可以使用适用于该目的的任何现有或未来方法进行。在一个实施方式中，这种测量是通过宏基因组DNA测序执行的。在另一实施方式中，所述测量是通过RT-PCT计数执行的。在具体实施方式中，细菌管家标记基因rpoB用于RT-PCT计数。在另一实施方式中，测量是通过全长16SRNA测序执行的。

在本发明中已经观察到，通过向生产动物的饲料中添加选择性饲料添加剂产生了上述健康益处。这些添加剂是精密化合物，所述精密化合物选择性地调节宿主动物的微生物群系的组成和功能。这种微生物群系的选择性调节靶向宿主动物的微生物群系中的致病性大肠杆菌及其协调者多形拟杆菌。

在一个实施方式中，此类饲料添加剂是如本文所述的N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶。在优选的实施方式中，饲料添加剂包含另外的饲料酶。饲料酶泛指动物日粮中的外源性酶，所述外源性酶的功能是克服抗营养因子的不利效应并改善日粮组分的消化和动物性能。肠道健康酶是指动物日粮中的外源性酶，所述外源性酶的功能是改善宿主动物的GIT中的微生物群系的健康。在另一优选实施方式中，饲料添加剂包含另外的肠道健康酶。在本发明中已经观察到在产生本申请中所述的健康益处方面特别有效的酶包括但不限于饲料酶和肠道健康酶。饲料酶的示例包括蛋白酶、植酸酶、木聚糖酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶、果胶酶和淀粉酶。在优选实施方式中，肠道健康酶是N-乙酰基-胞壁质酶。N-乙酰基-胞壁质酶(有时也称为溶菌酶、胞壁质酶或N-乙酰胞壁酰胺聚糖水解酶)水解肽聚糖的N-乙酰葡糖胺与N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4-连接。在具体实施方式中，N-乙酰基-胞壁质酶由DSM Nutritional Products LLC以商业名称Balancius制造。在另一优选的实施方式中，蛋白酶由DSM Nutritional Products LLC以商品名Ronozyme ProAct制造。在另一实施方式中，肠道健康酶是超氧化物歧化酶或过氧化氢酶。

N-乙酰基-胞壁质酶：N-乙酰基-胞壁质酶Balancius的特征在于其选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％，例如至少85％、至少90％、至少95％或100％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和/或(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％。被称为N-乙酰基-胞壁质酶Balancius或溶菌酶Balancius或胞壁质酶Balancius或N-乙酰胞壁酰胺聚糖水解酶Balancius的酶可以如WO 2019/121937 A1的实施例2中所述来产生。N-乙酰基-胞壁质酶活性可以如WO 2019/121937 A1的实施例1中所述进行测定。

蛋白酶：蛋白酶Ronozyme ProAct是一种获自或可获自Nocardiopsis sp的丝氨酸蛋白酶。特别地，其特征可在于其来源于拟诺卡氏菌属种属(Nocardiopsis sp.)NRRL18262，和/或来自白色拟诺卡氏菌(Nocardiopsis alba)(分类学基于Berge's Manual ofSystematic Bacteriology，第2版，2000，Springer(preprint:Road Map to Bergey's))。其特征还在于其是一种酸稳定性丝氨酸蛋白酶，获自或可获自达松维尔拟诺卡氏菌(Nocardiopsis dassonvillei)亚种达松维尔DSM 43235(A1918L1)、葱绿拟诺卡氏菌(Nocardiopsis prasina)DSM 15649(NN018335L1)、葱绿拟诺卡氏菌(先前称为白色拟诺卡氏菌)DSM 14010(NN18140L1)、拟诺卡氏菌属种属DSM 16424(NN018704L2)、嗜碱盐拟诺卡氏菌(Nocardiopsis alkaliphila)DSM 44657(NN019340L2)和卢森坦拟诺卡氏菌(Nocardiopsis lucentensis)DSM 44048(NN019002L2)，以及来自其的同源蛋白酶。一般而言，术语丝氨酸蛋白酶是指丝氨酸肽酶及其家族，如在the Handbook of ProteolyticEnzymes,A.J.Barrett,N.D.Rawlings,J.F.Woessner(编辑),Academic Press(1998)中所定义。在1998年版的本手册中，在第1-175章介绍了丝氨酸肽酶及其家族。丝氨酸蛋白酶可定义为催化机制取决于充当攻击肽键的亲核试剂的丝氨酸残基的羟基基团的肽酶。用于根据本发明使用的丝氨酸蛋白酶的示例是SA家族的蛋白酶，例如S2家族(灰链霉菌肽酶(Streptogrisin))，例如S2A亚家族(α-裂解蛋白酶)，如上述手册中所定义。

另外或替代地，蛋白酶Ronozyme ProAct的特征可在于其为：(a)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b)SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；或(e)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％。

蛋白酶活性可以使用任何测定来测量，在所述测定中采用底物，所述底物包含与所讨论的蛋白酶的特异性相关的肽键。蛋白酶底物的示例是酪蛋白和pNA底物，例如Suc-AAPF-pNA(例如可从Sigma S-7388获得)。另一示例是Protazyme AK(天青染色的交联酪蛋白，由Megazyme T-PRAK作为片剂制备)。WO 01/58276的实施例2描述了合适的蛋白酶测定。优选的测定是实施例2D的Protazyme测定(pH和温度应根据所讨论的蛋白酶进行调节，如先前一般描述的)。

术语“蛋白酶”在本文中被定义为水解肽键的酶。它包括属于EC 3.4酶组的任何酶(包括其十三个子类中的每个子类http://en.wikipedia.org/wiki/Category:EC_3.4)。EC编号是指来自NC-IUBMB,Academic Press,San Diego,California的酶命名法1992(EnzymeNomenclature 1992)，分别包括发表在Eur.J.Biochem.1994,223,1-5；Eur.J.Biochem.1995,232,1-6；Eur.J.Biochem.1996,237,1-5；Eur.J.Biochem.1997,250,1-6；和Eur.J.Biochem.1999,264,610-650上的补充1-5。术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人，Protein Engng.4(1991)719-737和Siezen等人Protein Science 6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚类。丝氨酸蛋白酶或丝氨酸肽酶是蛋白酶的亚类，该亚类的特征在于在活性位点中具有丝氨酸，所述丝氨酸与底物形成共价加合物。进一步，枯草杆菌酶(和丝氨酸蛋白酶)的特征在于具有除丝氨酸之外的两个活性位点氨基酸残基，即组氨酸和天冬氨酸残基。枯草杆菌酶可分为6个亚门，即枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。

本文所提及的蛋白酶不仅可以是天然或野生型蛋白酶，还可以是其表现出蛋白酶活性的任何突变体、变体、片段等，以及合成蛋白酶，例如改组蛋白酶和共有蛋白酶。此类经遗传工程改造的蛋白酶可以按照本领域通常已知的方式制备，例如通过定点诱变、通过PCR(使用含有所需突变的PCR片段作为PCR反应中的引物之一)或通过随机诱变。共有蛋白的制备描述于例如EP 0 897 985中。

此类非野生型蛋白酶可以基于源自拟诺卡氏菌属种属NRRL 18262和白色拟诺卡氏菌的蛋白酶，并且与野生型蛋白酶具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或至少95％，但不是100％的氨基酸同一性。为了计算同一性百分比，可以使用本领域已知的任何计算机程序。此类计算机程序的示例是Clustal V算法(Higgins,D.G.,and Sharp,P.M.(1989),Gene(Amsterdam),73,237-244)；以及在GCG版本8程序包中提供的GAP程序(Program Manual for the Wisconsin Package，版本8，Genetics Computer Group,575Science Drive,Madison,Wisconsin,USA 53711)(Needleman,S.B.和Wunsch,C.D.,(1970),Journal of Molecular Biology,48,443-453)。在具体实施方式中，本文提及的蛋白酶可以是酸稳定的且热稳定的。术语“热稳定”是指本文所提及的蛋白酶具有至少50℃、52℃、54℃、56℃、58℃、60℃、62℃、64℃、66℃、68℃或至少70℃的最适温度。

超氧化物歧化酶：本文所提及的超氧化物歧化酶的特征可在于其选自由以下组成的组：a)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77具有至少75％、至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；b)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％、至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；c)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％、至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；d)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％、至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；e)多肽，所述多与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；f)多肽，所述多与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；g)多肽，所述多与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；h)多肽，所述多与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性；i)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性；j)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；k)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个(例如，几个)位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及l)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)或(k)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

SEQ ID NO:77是来自里氏木霉(Trichoderman reesei)的具有超氧化物歧化酶(SOD)活性的成熟多肽，所述成熟多肽包含307个氨基酸残基，其中残基1至20构成信号肽并且残基52至170构成SOD。SEQ ID NO:78是来自杂色曲霉(Aspergillus versicolor)的具有超氧化物歧化酶(SOD)活性的成熟多肽，所述成熟多肽包含206个氨基酸，其中残基1至20构成信号肽并且残基55至136构成SOD。SEQ ID NO:79是来自弯头曲霉(Aspergillusdeflectus)的具有超氧化物歧化酶(SOD)活性的成熟多肽，所述成熟多肽包含154个氨基酸残基，其中残基1至16构成信号肽并且残基12至149构成SOD。SEQ ID NO:80是来自埃及曲霉(Aspergillus egyptiacus)的具有超氧化物歧化酶(SOD)活性的成熟多肽，所述成熟多肽包含188个氨基酸残基，其中残基1至19构成信号肽并且残基47至179构成SOD。SEQ ID NO:81是SEQ ID NO:77的多肽的多核苷酸序列编码序列。

超氧化物歧化酶(SOD，EC 1.15.1.1)是一种交替催化超氧化物(O₂ ^-)自由基歧化(或分解)成普通分子氧(O₂)或过氧化氢(H₂O₂)的酶。超氧化物是氧代谢的副产物，并且如果不加以调节则会导致多种类型的细胞损伤。因此，SOD是几乎所有暴露于氧的活细胞中的重要抗氧化防御。SOD由于其优异的抗氧化性质而被用于制药、化妆品、食物和环保行业。历史上，SOD是从动物或植物来源中分离的，但微生物来源的生物体可易于诱导和大规模培养，SOD天然存在于许多生物体，例如植物、昆虫、鸟类、爬行动物和哺乳动物中。已根据金属辅因子报道了四种类型的SOD：锰SOD(Mn-SOD)、铁SOD(Fe-SOD)、铜/锌SOD(Cu/Zn-SOD)和镍SOD(Ni-SOD)₂。例如，哺乳动物(牛)SOD和细菌(大肠杆菌)Mn-SOD(S5639)可从Sigma商购获得。优选的超氧化物歧化酶是真菌来源的SOD。作为超氧化物歧化酶的替代物，可以使用过氧化氢酶，该过氧化氢酶能够将H₂O₂转化为H₂O和O₂。

为了产生本申请中所描述的健康益处，需要适量的酶。此类适量基于动物的类型和动物的生长阶段，并且可以通过实验来确定。然而，需要最少量的酶(即N-乙酰基-胞壁质酶、蛋白酶、超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶)以获得健康益处。在一个实施方式中，酶为至少25g/吨饲料。在另一实施方式中，酶为至少50g/吨饲料。最适合本发明的最佳浓度范围已经由本申请的发明人确定。在一些实施方式中，酶在25-50g/吨饲料、50-100g/吨饲料、100-200g/吨饲料、200-500g/吨饲料或500-1000g/吨饲料之间。在优选实施方式中，酶在50-220g/吨饲料之间。在另一实施方式中，酶在饲料的1000-100,000IU、5,000-100,000IU、5,000-50,000IU或10,000-50,000IU之间。在一个实施方式中，酶是蛋白酶，其中所述蛋白酶以在10'000单位/kg饲料与30'000单位/kg饲料之间的剂量，例如以以下量(剂量范围)中的一种量施用：10'000单位/kg饲料、11'000单位/kg饲料、12'000单位/kg饲料、13'000单位/kg饲料、14'000单位/kg饲料、15'000单位/kg饲料、16'000单位/kg饲料、17'000单位/kg饲料、18'000单位/kg饲料、19'000单位/kg饲料、20'000单位/kg饲料。一个蛋白酶单位(protease unit,PROT)是在pH 9.0和37℃下每分钟从1mM底物(Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pnA)释放1μmol对硝基苯胺的酶的量。

在一些实施方式中，本发明涉及饲料酶，特别是N-乙酰基-胞壁质酶、蛋白酶、超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶用于以下的用途：a)减少动物的胃肠道(GIT)中的肠出血性大肠杆菌(EHEC)、致肠病性大肠杆菌(EPEC)和禽致病性大肠杆菌(APEC)的外源性肠上皮细胞清除基因座(LEE)基因和外源性非LEE致病基因的群体，其中所述外源性LEE基因和非LEE致病基因的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；b)减少动物的胃肠道(GIT)中的多形拟杆菌的群体，其中所述多形拟杆菌的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；c)减少动物的胃肠道(GIT)中的大肠杆菌的群体，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；和/或d)减少由大肠杆菌感染引起的动物的全身炎症和/或局部炎症，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。在一些实施方式中，所述用途涉及N-乙酰基-胞壁质酶、蛋白酶、超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶用于以下的用途：a)减少动物的胃肠道(GIT)中的肠出血性大肠杆菌(EHEC)、致肠病性大肠杆菌(EPEC)和禽致病性大肠杆菌(APEC)的外源性肠上皮细胞清除基因座(LEE)基因和外源性非LEE致病基因的群体，其中所述外源性LEE基因和非LEE致病基因的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；b)减少动物的胃肠道(GIT)中的多形拟杆菌的群体，其中所述多形拟杆菌的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；c)减少动物的胃肠道(GIT)中的大肠杆菌的群体，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；和/或d)减少由大肠杆菌感染引起的动物的全身炎症和/或局部炎症，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。

动物类型

本发明的方法一般适用于生产动物。在一个实施方式中，本发明的方法适用于家禽。

可以将上述饲料添加剂提供给任何合适的动物。在一些实施方式中，动物是单胃的。通常认为单胃动物具有单腔胃。在其他实施方式中，所述动物是反刍动物。通常认为，反刍动物具有多腔胃。在一些实施方式中，所述动物是处于反刍前阶段的反刍动物。这种处于反刍前阶段的反刍动物的示例包括保育期小牛(nursery calve)。

在一些实施方式中，所述动物是家禽(例如，雏鸡、火鸡)、海鲜(例如虾)、绵羊、奶牛、家牛、水牛、野牛、猪(例如，保育猪、生长猪/育肥猪)、猫、狗、兔子、山羊、豚鼠、驴、骆驼、马、鸽子、雪貂、沙鼠、仓鼠、小鼠、大鼠、禽类、或人类。

在一些实施方式中，所述动物是牲畜。在一些实施方式中，所述动物是伴侣动物。在一些实施方式中，所述动物是家禽。家禽的示例包括鸡、鸭、火鸡、鹅、鹌鹑或康沃尔游戏母鸡(Cornish game hen)。在一种变型中，所述动物是雏鸡。在一些实施方式中，所述家禽是蛋鸡、肉鸡或火鸡。

在其他实施方式中，所述动物是哺乳动物，包括例如奶牛、猪、山羊、绵羊、鹿、野牛、兔子、羊驼、美洲驼、骡子、马、驯鹿、水牛、牦牛、豚鼠、大鼠、小鼠、羊驼、狗或猫。在一种变型中，所述动物是奶牛。在另一种变型中，所述动物是猪。在另一种变型中，所述动物是猪。

饲料添加剂的施用

在一些实施方式中，施用包括向动物提供本文所述的饲料添加剂，使得所述动物可以随意摄取饲料添加剂。在此类实施方式中，动物摄取饲料添加剂的某一部分。

可按任何合适的时间表向动物提供本文所述的饲料添加剂。在一些实施方式中，基于每天、基于每周、基于每月、基于每隔一天、每周至少三天、或每月至少七天向动物施用本文所述的饲料添加剂。

在一些实施方式中，一天内多次向动物施用本文所述的饲料添加剂。例如，在一些实施方式中，每天向动物施用本文所述的饲料添加剂至少1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次、8次、9次或10次。在一些实施方式中，每天向动物施用本文所述的营养组合物、饲料添加剂至多1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次、8次、9次或10次。

在一些实施方式中，一天内多次向动物施用本文所述的饲料添加剂。例如，在一些实施方式中，每周向动物施用本文所述的饲料添加剂至少1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次、8次、9次或10次。在一些实施方式中，每周向动物施用本文所述的营养组合物、饲料添加剂至多1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次、8次、9次或10次。在一些实施方式中，每天、每隔一天、每3天、每4天、每周、每隔一周或每月向动物施用本文所述的饲料添加剂。

在一些实施方式中，在某些日粮阶段期间向动物施用本文所述的饲料添加剂。例如，在0至14日龄之间向一些动物提供育雏日粮。在其他实施方式中，在15至28日龄之间、在15至35日龄之间、或在15至39日龄之间向动物提供生长日粮。在其他实施方式中，在29至35日龄之间、在36至42日龄之间或在40至46日龄之间向动物提供育肥日粮。

在某些实施方式中，在育雏日粮阶段、生长日粮阶段或育成日粮阶段或它们的任何组合期间向动物提供本文所述的饲料添加剂。在某些实施方式中，动物是家禽，并且向家禽提供在0至15日龄之间的育雏日粮、在16至28日龄之间的生长日粮、和在29至35日龄之间的育肥日粮。在其他实施方式中，动物是家禽，并且向家禽提供在0至14日龄之间的育雏日粮、在15至35日龄之间的生长日粮、和在36至42日龄之间的育肥日粮。在其他实施方式中，动物是家禽，并且向家禽提供在0至14日龄之间的育雏日粮、在15至39日龄之间的生长日粮、和在20至46日龄之间的育肥日粮。

在一些实施方式中，在育雏日粮阶段、生长日粮阶段或育成日粮阶段或它们的任何组合期间向家禽提供本文所述的饲料添加剂。

可将本文所述的饲料添加剂饲喂给个体动物或动物群体。例如，在动物是家禽的一种变型中，可将本文所述的饲料添加剂饲喂给个体家禽或家禽群体。

本文所述的饲料添加剂可以任何合适的形式提供给动物，包括例如固体形式、液体形式或它们的组合。在某些实施方式中，本文所述的饲料添加剂是液体，例如糖浆剂或溶液剂。在其他实施方式中，本文所述的饲料添加剂是固体，例如丸剂或粉末剂。在又其他实施方式中，本文所述的饲料添加剂可以以液体组分和固体组分两者，例如以糊状物形式饲喂给动物。通常在混合步骤之前或期间添加固体形式；并且通常在造粒步骤之后添加液体形式。

实施例

实施例1

本研究的实施例1描述了本发明中用于生成和分析数据的方案和方法。

样品收集

根据来自阴性对照和处理组(1只禽类/围栏和21次重复/处理)两者的物种和生长时间表，在不同的日子收集盲肠消化物样品。在进行DNA提取以用于宏基因组学或进行溶剂提取以用于代谢组学分析之前，将盲肠样品在-80℃下冷冻保存。

DNA提取和测序

可以通过任何鸟枪法测序测量方法对基因拷贝进行定量测量。在本申请中，宏基因组DNA是按照制造商的使用说明(Qiagen,Germany)使用MoBio Powersoil提取的。将DNA在Diversigen(TX,USA)在Illumina HiSeq 3000设备上进行测序，每个样品的靶深度为5GB。

分类学读段处理

为了选择合适的过滤和修剪参数，使用FastQC v0.11.5检查来自浅122鸟枪法测序的原始fastq文件。基于质量报告，使用Cutadapt来修剪每个读段的前10个碱基，将每个读段缩短到最大130bp，并丢弃任何小于120bp长的读段。这去除了所有剩余的衔接子片段，并消除了在读段末尾附近的质量下降的区域，如通过来自FastQC的另一份质量报告所证实。

分类学分析

然后可以使用任何比对算法将从仪器读取的序列与至少包含LEE和非LEE基因的基因的参考数据库进行比对。在本申请中，使用MetaPhlan 2.0，分析类型“rel_ab_w_read_stats”以仅使用正向读段从经处理的读段构建每个样品的分类学相对丰度概况。

函数映射

使用BWA-MEM算法，用bwa v0.7.5将经处理的读段映射到专门针对鸡肠道微生物群系定制的内部基因目录。使用Python脚本从BAM文件中提取每个样品的基因计数表，将所述基因计数表用作下游分析的输入。只有映射到正确对中的读段才被认为是对基因的成功命中。内部基因目录已使用公开可得的KEGG直系同源性(KEGG Orthology,KO)数据库进行注释，并且在此讨论的宏基因组分析中的大部分宏基因组分析都是基于来自KEGG(京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes))的函数信息。

实施例2

比较具有添加的Ronozyme ProAct蛋白酶的日粮与对照日粮之间的效应的肉鸡试验

该试验基于完全随机的区组设计。使用雄性Hubbard x Ross鸡，并且试验持续42天。育雏日粮、生长日粮和育成日粮分别含有583g/kg、654g/kg和694g/kg的玉米；300g/kg、204g/kg、85 169g/kg的豆粕；和0g/kg、100g/kg和100g/kg的玉米DDGS。在经处理的日粮中，在DSM Nutritional Products以名称Ronozyme ProAct商购获得的蛋白酶以200g/吨饲料的投配。

在动物试验的第21天从盲肠收集胃肠道(GIT)内容物的样品。使用MoBioPowersoil试剂盒提取每个GIT样品的DNA。然后在Illumina HiSeq 3000上对DNA进行测序以产生代表GIT中的微生物的DNA的100bp随机读段。使用Burrows-Wheeler比对算法将来自测序运行的读段与先前已经使用KEGG注释的基因参考数据库进行比对。

实施例2的研究表明，用Ronozyme ProAct饲喂的鸡具有下调的LEE和非LEE途径。

图1表示饲喂ProAct^TM的肉鸡的微生物群系中espG、espF和Tir的LEE基因以及nleA和nleH的非LEE基因相对于饲喂除ProAct^TM之外相同日粮的肉鸡的变化百分比。它表明Proact^TM有助于减少肉鸡的GIT中致病基因的相对存在。对于LEE基因和非LEE基因两者，经ProAct处理组中这些基因的减少均超过25％。最高的降低，例如nleA基因，大于75％。

通过将如上所述的读段与MetaPhlan2中所包含的分类学数据库进行比对来测量大肠杆菌相对丰度的变化。为此，使用MetaPhlan2来描述源自GIT的微生物群系的分类学内容。MetaPhlan2使用特定于进化枝的分类学标记来鉴定样品中不同生物的相对丰度。下图2示出与饲喂ProAct^TM日粮的肉鸡相比，在饲喂对照日粮的肉鸡中在微生物组成的构成中存在更大的大肠杆菌相对丰度。这表明蛋白酶ProAct^TM有助于降低肉鸡的GIT中的大肠杆菌相对丰度。在对照组中，微生物群系中大肠杆菌的群体％为约4％。在经ProAct^TM处理的组中，大肠杆菌的群体％减少至约1.25％。因此，大肠杆菌的减少大于2倍。

实施例3

比较具有添加的超氧化物歧化酶的日粮与对照日粮的效应的猪试验

该试验使用家猪，并且持续42天。日粮包含谷粒作为基本成分。在经处理的日粮中，以饲料的2000IU投配由DSM Nutritional Products制成的超氧化物歧化酶。

在动物试验的第0天、第14天和第21天从盲肠收集胃肠道(GIT)内容物样品。使用MoBio Powersoil试剂盒提取每个GIT样品的DNA。然后在Illumina HiSeq 3000上对DNA进行测序以产生代表GIT中的微生物的DNA的>200万个100bp随机读段。使用Burrows-Wheeler比对算法将来自测序运行的读段与先前已经使用KEGG注释的基因参考数据库进行比对。

实施例3的研究表明，用饲料酶添加剂(例如超氧化物歧化酶)饲喂的鸡具有下调的LEE和非LEE途径。

图3示出了饲喂超氧化物歧化酶的动物的微生物群系中LEE基因Tir和非LEE基因nleH相对于饲喂相同日粮但不添加超氧化物歧化酶的动物的微生物群系的相对丰度。其显示，在第14天和第42天，与第0天相比在对照组中LEE基因Tir和非LEE基因nleH的相对丰度有所增加，但在经超氧化物歧化酶处理的组中这种丰度保持不变。它表明超氧化物歧化酶有助于降低动物的微生物群系中LEE基因和非LEE基因的丰度。

通过根据分类学数据库KEGG直系同源性比对如上所述的读段来测量大肠杆菌相对丰度的变化。为此，使用MetaPhlan2来描述源自GIT的微生物群系的分类学内容。图4示出与饲喂超氧化物歧化酶的猪相比，在饲喂对照日粮的猪中在微生物组成的构成中存在更大的大肠杆菌相对丰度。这表明添加超氧化物歧化酶可有助于降低大肠杆菌相对丰度。

实施例4

比较具有添加的溶菌酶的日粮与对照日粮的效应的火鸡试验

在本实验中，向家养火鸡饲喂具有和不具有添加的Lysozyme Balancius^TM的商业火鸡饲料。该试验持续63天。在试验的第42天和第63天从回肠和盲肠收集胃肠道(GIT)内容物的样品。使用MoBio Powersoil试剂盒提取每个GIT样品的DNA。然后在Illumina HiSeq3000上对DNA进行测序以产生代表GIT中的微生物的DNA的>200万个100bp随机读段。使用Burrows-Wheeler比对算法将来自测序运行的读段与先前已经使用KEGG(京都基因与基因组百科全书)注释的基因参考数据库进行比对。

实施例4的研究表明，用Lysozyme Balancius^TM饲喂的火鸡朝向其生长期结束时具有下调的LEE和非LEE途径。

Lysozyme Balancius^TM被设计为分解细菌细胞碎片中的肽聚糖(peptidoglycan,PGN)，从而释放营养物质并解锁胃肠道功能性中隐藏的潜力。图5示出了饲喂含有45,000IU的溶菌酶Balancius^TM的日粮的火鸡在不同天数爆发(broken out)的宏基因组中LEE和非LEE基因的相对丰度，而对照情况则饲喂不含所述溶菌酶的日粮。结果表明，在接近试验结束时，继续使用Balancius^TM可减少可检测的LEE和非LEE基因，而对照火鸡的多种LEE和非LEE基因显著增加，表明对照组火鸡在试验结束时更易受病原体感染。

实施例5

在这个实验中，向家养蛋鸡饲喂添加和不添加Ronozyme ProAct蛋白酶的商业家禽饲料。该试验持续42天。在经处理的日粮中，在DSM Nutritional Products以名称Ronozyme ProAct商购获得的蛋白酶以200g/吨饲料投配。

在动物试验的第21天从盲肠收集胃肠道(GIT)内容物的样品。使用MoBioPowersoil试剂盒提取每个GIT样品的DNA。然后在Illumina HiSeq 3000上对DNA进行测序以产生代表GIT中的微生物的DNA的>200万个100bp随机读段。使用如MetaPhlanv3的分类学鉴定程序来鉴定样品中的微生物菌群，而针对基因数据库则使用如像Burrows-Wheeler比对算法的比对算法。测量经酶日粮处理的组和对照组两者中多形拟杆菌的标记基因和大肠杆菌的LEE和非LEE基因的拷贝数。

实施例5的研究显示，当与对照组相比时，用Ronozyme ProAct饲喂的母鸡在经酶日粮处理的组中具有减少的多形拟杆菌标记基因的拷贝数。还观察到，当与对照组相比时，经酶日粮处理的组中大肠杆菌的LEE和非LEE途径均被下调。

序列表

<110> 帝斯曼知识产权资产管理有限公司(DSM IP Assets BV)和诺维信专利公司(Novozymes A/S)

<120> 33928-PCT

<130> 33928

<160> 81

<170> BiSSAP 1.3.6

<210> 1

<211> 208

<212> PRT

<213> 嗜碱枝顶孢菌(Acremonium alcalophilum)

<400> 1

Arg Ile Pro Gly Phe Asp Ile Ser Gly Trp Gln Pro Thr Thr Asp Phe

1 5 10 15

Ala Arg Ala Tyr Ala Asn Gly Asp Arg Phe Val Tyr Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Phe Lys Ser Ser Ala Phe Ser Arg Gln Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Gln Asn Gly Phe Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Gln Pro

50 55 60

Ala Ala Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Arg Tyr Phe Ala Ser Asn Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Ile

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro Asn Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Ser Ala

100 105 110

Met Val Asn Trp Ile Glu Asp Phe Val Thr Thr Tyr His Gly Ile Thr

115 120 125

Ser Arg Trp Pro Val Ile Tyr Thr Thr Thr Asp Trp Trp Thr Gln Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Asn Arg Phe Ala Asn Arg Cys Pro Leu Trp Ile Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Thr Leu Pro Asn Gly Trp Gly Phe Tyr

165 170 175

Thr Phe Trp Gln Tyr Asn Asp Lys Tyr Pro Gln Gly Gly Asp Ser Asn

180 185 190

Trp Phe Asn Gly Asp Ala Ser Arg Leu Arg Ala Leu Ala Asn Gly Asp

195 200 205

<210> 2

<211> 213

<212> PRT

<213> 嗜碱枝顶孢菌(Acremonium alcalophilum)

<400> 2

Ser Pro Ile Arg Arg Arg Ile Pro Gly Phe Asp Ile Ser Gly Trp Gln

1 5 10 15

Pro Thr Thr Asp Phe Ala Arg Ala Tyr Ala Asn Gly Asp Arg Phe Val

20 25 30

Tyr Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Phe Lys Ser Ser Ala Phe Ser

35 40 45

Arg Gln Tyr Thr Gly Ala Thr Gln Asn Gly Phe Ile Arg Gly Ala Tyr

50 55 60

His Phe Ala Gln Pro Ala Ala Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Arg Tyr

65 70 75 80

Phe Ala Ser Asn Gly Gly Gly Trp Ser Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro

85 90 95

Gly Ala Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Asn Gly Ala Thr Cys Tyr Gly

100 105 110

Leu Ser Gln Ser Ala Met Val Asn Trp Ile Glu Asp Phe Val Thr Thr

115 120 125

Tyr His Gly Ile Thr Ser Arg Trp Pro Val Ile Tyr Thr Thr Thr Asp

130 135 140

Trp Trp Thr Gln Cys Thr Gly Asn Ser Asn Arg Phe Ala Asn Arg Cys

145 150 155 160

Pro Leu Trp Ile Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Thr Leu Pro Asn

165 170 175

Gly Trp Gly Phe Tyr Thr Phe Trp Gln Tyr Asn Asp Lys Tyr Pro Gln

180 185 190

Gly Gly Asp Ser Asn Trp Phe Asn Gly Asp Ala Ser Arg Leu Arg Ala

195 200 205

Leu Ala Asn Gly Asp

210

<210> 3

<211> 218

<212> PRT

<213> 烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus)

<400> 3

Leu Pro Ser Gln Pro Glu Ala Arg Ala Thr Thr Val Gln Gly Phe Asp

1 5 10 15

Ile Ser Asn His Gln Lys Ser Val Asn Phe Glu Ala Ala Lys Lys Asp

20 25 30

Gly Ala Gln Phe Val Met Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Lys

35 40 45

Asp Thr Val Phe Asn Ser His Tyr Thr Gly Ala Thr Lys Ala Gly Leu

50 55 60

Leu Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro Asp Lys Ser Thr Gly Ser

65 70 75 80

Thr Gln Ala Lys Phe Phe Leu Lys Asn Gly Gly Gly Trp Ser Asp Asp

85 90 95

Asn Arg Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Tyr Gly

100 105 110

Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser His Ser Gln Met Val Ala Trp Ile His

115 120 125

Asp Phe Val Asn Glu Tyr His His Ala Thr Ser Arg Trp Pro Met Ile

130 135 140

Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Asn Arg Cys Thr Gly Asn Ala Lys Gly

145 150 155 160

Phe Gly Asp Lys Cys Pro Leu Val Leu Ala Ala Tyr Ser Ser Ser Pro

165 170 175

Pro Lys Thr Ile Pro Gly Asp Trp Lys Thr Trp Thr Ile Trp Gln Asn

180 185 190

Ser Asp Lys Tyr Lys His Gly Gly Asp Ser Asp Lys Phe Asn Gly Pro

195 200 205

Met Thr Gln Leu Arg Lys Leu Ala Ser Gly

210 215

<210> 4

<211> 208

<212> PRT

<213> 里氏木霉(Trichoderma reesei)

<400> 4

Thr Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ala Thr Val Asp Phe

1 5 10 15

Ala Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Asp His Tyr Thr Lys

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Gln Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Lys His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Tyr Ala Pro Ser Gly Asp Ser Cys Tyr Gly Leu Ser Ala Ser Ala

100 105 110

Met Val Ser Trp Ile Asn Asp Phe Val Asn Thr Tyr His Ala Ala Thr

115 120 125

Thr Gln Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Gln Leu Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Asn Gly Ser Phe Gly Ser Lys Ser Pro Leu Val Ile Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Ala Leu Pro Asn Gly Trp Ser Val Tyr

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ala Ser Pro Trp Gly Gly Asp Asn Asp

180 185 190

Ile Phe Asn Gly Asn Leu Ala Gln Leu Gln Lys Ile Ala Arg Gly Ser

195 200 205

<210> 5

<211> 215

<212> PRT

<213> 朱红栓菌(Trametes cinnabarina)

<400> 5

Ser Pro Thr Pro Glu Lys Arg Ala Asn Pro Lys Gly Ile Asp Val Ser

1 5 10 15

Ala Tyr Gln Pro Asn Ile Asn Trp Ser Thr Val Lys Ala Asn Gly Ile

20 25 30

Ser Phe Ala Tyr Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asn Pro

35 40 45

Asp Phe Ser Ser Gln Tyr Thr Gly Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg

50 55 60

Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ala Thr Gln

65 70 75 80

Ala Lys Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Thr Ser Asp Gly Ile

85 90 95

Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Glu

100 105 110

Cys Tyr Gly Leu Ser Ala Ser Ala Met Val Ser Trp Ile Lys Asp Phe

115 120 125

Ser Asn Thr Tyr His Ser Ser Thr Gly Val Tyr Pro Val Ile Tyr Thr

130 135 140

Thr Thr Asp Trp Trp Thr Thr Cys Thr Gly Asn Ser Ala Ala Phe Ala

145 150 155 160

Ser Thr Asn Pro Leu Trp Ile Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Ile Gly Thr

165 170 175

Leu Pro Ala Gly Trp Ser Tyr Thr Thr Phe Trp Gln Tyr Ala Asp Ser

180 185 190

Gly Pro Asn Pro Gly Asp Gln Asp Glu Phe Asn Gly Ser Met Ala Gly

195 200 205

Leu Lys Gln Leu Ala Leu Gly

210 215

<210> 6

<211> 207

<212> PRT

<213> Sporormia fimetaria

<400> 6

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Tyr

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Pro Lys Phe Ser Asp His Tyr Ile Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Ala Ala Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Val Ser His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Met

85 90 95

Glu Tyr Gly Ser Thr Ser Ala Cys His Gly Leu Ser Gln Ser Ala Met

100 105 110

Val Thr Trp Ile Thr Ser Phe Val Asn Gln Tyr Asn Ser Leu Thr Gly

115 120 125

Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Gln Thr Cys Thr

130 135 140

Gly Asn Ser Ala Ala Phe Asn Thr Lys Ser Pro Leu Val Leu Ala Arg

145 150 155 160

Tyr Ser Ser Ser Ala Gly Thr Val Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr

165 170 175

Ile Trp Gln Phe Asn Asp Ala Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr

180 185 190

Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly Ser

195 200 205

<210> 7

<211> 201

<212> PRT

<213> 点孔座壳(Poronia punctata)

<400> 7

Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Gly Ala Ala Lys Ser Ser Gly Ala Gln Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Ser Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Leu

50 55 60

Asp Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Lys Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Ser Cys Val Leu Ser Ala Ser Ala Thr Val Ser Trp Ile Lys

100 105 110

Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ser Ser Thr Gly Val Tyr Pro Leu Ile

115 120 125

Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Asn Ser Lys Ala

130 135 140

Phe Ile Asp Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Ala

145 150 155 160

Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Tyr Asn

165 170 175

Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Val Phe Asn Gly Asp Leu

180 185 190

Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly

195 200

<210> 8

<211> 201

<212> PRT

<213> 点孔座壳(Poronia punctata)

<400> 8

Gln Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser Ser Tyr Gln Pro Ser Val Asp Phe

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Gly Tyr Ile Asp Pro Thr Phe Ser Asp His Tyr Val Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Leu Arg Gly Gly Tyr His Tyr Ala His Leu

50 55 60

Asp Ser Thr Ser Gly Ala Thr Gln Ala Gln Tyr Phe Leu Ala Asn Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Val Leu Ser Ala Ala Asp Ala Val Ala Trp Ile Lys

100 105 110

Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Ala Ser Thr Gly Val Tyr Pro Leu Leu

115 120 125

Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ala Ser Cys Thr Gly Asp Ser Ser Ala

130 135 140

Phe Ile Asp Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala His Tyr Ala Asp Ala Ala

145 150 155 160

Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Phe Tyr Ser Phe Trp Gln Tyr Asn

165 170 175

Asp Ala Tyr Pro Tyr Gly Gly Asp Ser Glu Val Trp Asn Gly Asp Met

180 185 190

Asp Gly Leu Leu Arg Leu Ala Ser Gly

195 200

<210> 9

<211> 203

<212> PRT

<213> 腊蚧轮刺孢菌属种属(Lecanicillium sp.)WMM742

<400> 9

Val Asp Ser Ser Ser Glu Val Ser Val Ala Ile Tyr Lys Lys Ala Leu

1 5 10 15

Gly Gln Gly Phe Thr Arg Ala Ile Phe Arg Gly Tyr Gln Glu Ala Cys

20 25 30

Ser Gln Gly Gly Arg Val Asp Pro Thr Phe Val Pro Ser Tyr Lys Asn

35 40 45

Ala Val Ala Ala Gly Tyr Lys Asp Phe Asp Ala Tyr Phe Phe Pro Cys

50 55 60

Thr Gly Lys Thr Asn Lys Cys Lys Pro Tyr Ala Ala Gln Leu Ala Glu

65 70 75 80

Leu Leu Asp Thr Ile Lys Gly Gln Lys Leu Ala Ile Arg Arg Ile Trp

85 90 95

Leu Asp Ile Glu Thr Asp Arg Val Cys Asn Pro Phe Asp Tyr Gly Ala

100 105 110

Gln Gly Asn Leu Ala Glu Ala Lys Lys Leu Val Ala Ala Phe Arg Asp

115 120 125

Ala Lys Leu Asp Trp Gly Ile Tyr Thr Ser Pro Thr Gln Trp Glu Thr

130 135 140

Ile Phe Gly Ala Lys Thr Val Glu Leu Ala Lys Asp Val Pro Leu Trp

145 150 155 160

Phe Ala Lys Phe Asp Asn Val Glu Thr Leu Glu Leu Lys Thr Pro Phe

165 170 175

Gly Gly Trp Thr Lys Ala Asp Ala Lys Gln Tyr Thr Asp Gln Ser Ala

180 185 190

Ser Asn Lys Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ala

195 200

<210> 10

<211> 208

<212> PRT

<213> 腊蚧轮刺孢菌属种属(Lecanicillium sp.)WMM742

<400> 10

Thr Val Gln Gly Phe Asp Val Ser Gly Tyr Gln Pro Thr Val Asn Trp

1 5 10 15

Gly Ala Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Gly Tyr Ile Ser Ser Ser Phe Gly Ser Gln Tyr Pro Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Leu Pro

50 55 60

Asp Arg Ser Ser Gly Ser Ala Gln Ala Asp Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro Tyr Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Gly Ala

100 105 110

Met Val Asn Trp Ile Ser Asp Phe Val Glu His Tyr Lys Ala Arg Thr

115 120 125

Thr Gln Tyr Pro Ile Ile Tyr Thr Thr Thr Asp Trp Trp Lys Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Pro Ala Phe Gly Gln Lys Cys Pro Leu Ser Leu Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Glu Ile Pro Asn Gly Trp Pro Phe Gln

165 170 175

Thr Phe Trp Gln Asn Ser Asp Lys Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Gln

180 185 190

Ile Phe Asn Gly Ala Tyr Ser Gln Leu Gln Lys Ile Ala Arg Gly Gly

195 200 205

<210> 11

<211> 207

<212> PRT

<213> 马爪甲团囊菌(Onygena equina)

<400> 11

Ala Val Pro Gly Ile Asp Val Ser Gly Tyr Gln Gly Asn Val Asn Trp

1 5 10 15

Ala Asn Val Ala Asn Ala Gly Lys Lys Phe Ala Tyr Val Lys Ala Thr

20 25 30

Glu His Thr Asn Tyr Ile Asn Pro Tyr Phe Ala Gln Gln Tyr Asn Gly

35 40 45

Ala Tyr Asn Gln Gly Ile Ile Arg Gly Ala Tyr His Tyr Ala His Pro

50 55 60

Asn Gly Ala Ser Gly Ala Ser Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Lys Thr Leu Pro Gly Ala Val Asp Leu

85 90 95

Glu Tyr Gly Pro Asn Gly Ser Thr Cys Trp Gly Ile Ser Gln Ser Ala

100 105 110

Met Ile Ala Trp Ile Arg Asp Phe Ser Asn Thr Tyr Arg Ala Lys Thr

115 120 125

Gly Arg Pro Pro Val Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Tyr Gly Gly Phe Gly Asn Asp Asn Pro Leu Trp Ile Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ser Ser Thr Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Trp Pro Phe His

165 170 175

Ser Ile Trp Gln Asn Asn Asp Asn Ser Gly Val Gly Gly Asp Gly Asp

180 185 190

Ile Trp Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Gln Arg Phe Ala Lys Gly

195 200 205

<210> 12

<211> 208

<212> PRT

<213> 淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum)

<400> 12

Ala Val Lys Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Pro Asn Val Asp Phe

1 5 10 15

Ala Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Lys Tyr Phe Ile Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Met

85 90 95

Glu Tyr Gln Ser Ser Ser Ser Ala Cys Gly Gly Leu Ser Gln Ser Ala

100 105 110

Met Val Ser Trp Ile Asn Asp Phe Val Asn Thr Tyr His Ala Ala Thr

115 120 125

Gly Val Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Thr Gln Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Ala Ala Phe Gly Ser Lys Cys Pro Leu Val Val Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Thr Leu Pro Ala Gly Trp Gly Phe Tyr

165 170 175

Thr Phe Trp Gln Tyr Ser Asp Ala Ala Pro Trp Gly Gly Asp Ala Asp

180 185 190

Thr Phe Asn Gly Asp Ile Thr Ala Leu Lys Lys Ile Ala Asn Ala Gly

195 200 205

<210> 13

<211> 207

<212> PRT

<213> Trichobolus zukalii

<400> 13

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Pro Ser Val Asn Tyr

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Val Phe Ser Thr His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Ser Gly Ser Ala Gln Ala Asp Phe Phe Phe Lys Asn Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Met

85 90 95

Glu Tyr Gly Ser Thr Ser Ser Cys His Gly Leu Ser Gln Thr Ala Met

100 105 110

Val Asn Trp Ile Ser Asp Phe Val Asn Arg Tyr Lys Thr Leu Ser Gly

115 120 125

Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Gly Tyr Tyr Trp Trp Val Glu Cys Thr

130 135 140

Gly Asn Ser Asn Lys Phe Ala Thr Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg

145 150 155 160

Tyr Ser Ser Ser Val Gly Glu Ile Pro Gly Gly Trp Gly Tyr Gln Thr

165 170 175

Ile Trp Gln Phe Asn Asp Lys Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Ser

180 185 190

Phe Asn Gly Ser Leu Asp Arg Leu Lys Ala Leu Ala Lys Gly Thr

195 200 205

<210> 14

<211> 207

<212> PRT

<213> 橘青霉(Penicillium citrinum)

<400> 14

Leu Ile His Ala Val Asp Ser Ser Ser Glu Val Ser Val Asp Ile Tyr

1 5 10 15

Lys Lys Ala Leu Ser Glu Gly Phe Ser Arg Ala Ile Phe Arg Gly Tyr

20 25 30

Gln Glu Ala Cys Ser Gln Gly Gly Arg Val Asp Pro Thr Phe Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Lys Asn Ala Gln Thr Ala Gly Tyr Lys Asp Phe Asp Ala Tyr

50 55 60

Phe Phe Pro Cys Thr Gly Ser Gly Asn Lys Cys Lys Pro Tyr Asp Val

65 70 75 80

Gln Ile Gly Glu Leu Val Asp Ala Ile Lys Lys Asn Asn Met Ala Ile

85 90 95

Arg Arg Ile Trp Val Asp Phe Glu Lys Asp Lys Thr Cys Asn Pro Phe

100 105 110

Asn Trp Asp Pro Lys Arg Asn Ile Asp Glu Ala Lys Arg Ile Ile Gly

115 120 125

Ala Val Arg Lys Thr Lys Phe Asp Phe Gly Val Tyr Thr Ser Ala Thr

130 135 140

Gln Trp Thr Ser Ile Phe Gly Ser Lys Asp Val Val Leu Ala Asn Asp

145 150 155 160

Val Pro Leu Trp Phe Ala Lys Phe Asp Asn Val Glu Asn Leu Asp Leu

165 170 175

Ala Gln Pro Phe Gly Gly Trp Thr Lys Ala Asp Gly Lys Gln Tyr Thr

180 185 190

Asp Lys Ser Ala Ser Lys Lys Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ala

195 200 205

<210> 15

<211> 207

<212> PRT

<213> 珠芽枝鼻菌(Cladorrhinum bulbillosum)

<400> 15

Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Gln Ala Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Asp Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asp Phe Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Ser Val Ser Gly Lys Ala Thr Cys Phe Gly Leu Ser Ala Ser Ser

100 105 110

Met Val Ala Trp Ile Lys Ser Phe Ser Asp Arg Tyr His Thr Arg Thr

115 120 125

Gly Arg Tyr Pro Met Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Thr Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Asn Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Ala Pro Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Ile Phe Asn Gly Ala Leu Ser Gly Leu Gln Lys Leu Ala Ser Gly

195 200 205

<210> 16

<211> 208

<212> PRT

<213> Umbelopsis westeae

<400> 16

Lys Leu Lys Gly Leu Asp Val Ser Gly Tyr Gln Pro Asn Val Ala Trp

1 5 10 15

Ser Thr Val Lys Ala Asn Gly Ala Ser Phe Ala Tyr Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Asn Tyr Lys Asn Pro Ser Phe Ala Gln Gln Tyr Asn Gly

35 40 45

Ala Tyr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ser Tyr His Phe Ala Gln Pro

50 55 60

Ser Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Pro Asp Gly Lys Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Met

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro His Gly Ser Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Lys Asp Ala

100 105 110

Met Val Lys Trp Ile Lys Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ser Ala Thr

115 120 125

Gly Arg Tyr Pro Val Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Thr Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Ala Ala Phe Gly Ala Thr Asn Pro Leu Trp Ile Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ser Ser Thr Ala Gly Asn Leu Pro Asn Gly Trp Ala Phe Tyr

165 170 175

Ser Phe Trp Gln Asn Ala Asp Ser Gly Ile Phe Pro Gly Asp Gln Asp

180 185 190

Ile Trp Asn Gly Asp Ala Ala Ala Leu Ser Arg Met Ala Lys Gly Ala

195 200 205

<210> 17

<211> 208

<212> PRT

<213> 接合菌种属(Zygomycetes sp.)XZ2655

<400> 17

Thr Leu Pro Gly Leu Asp Val Ser Ser Tyr Gln Gly Asn Val Asn Trp

1 5 10 15

Gly Thr Val Ala Ser Gln Gly Ala Lys Phe Ala Tyr Val Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asn Pro Tyr Phe Ala Ser Gln Tyr Asp Gly

35 40 45

Ser Tyr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Asp Ser Ser Ser Gly Ala Thr Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Lys Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Ile

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro Asn Gly Ala Glu Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Leu Ala

100 105 110

Met Ile Ser Trp Ile Gln Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ser His Thr

115 120 125

Gly Arg Tyr Pro Val Ile Tyr Thr Thr Thr Asp Trp Trp Thr Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Ala Ala Phe Gly Thr Asn Asn Pro Leu Trp Ile Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Leu Pro Ala Gly Trp Gly Tyr Glu

165 170 175

Ser Phe Trp Gln Lys Ala Ser Ser Gly Thr Phe Pro Gly Asp Gln Asp

180 185 190

Ile Trp Asn Gly Asp Ala Ala Gly Leu Ser Arg Phe Ala Thr Gly Lys

195 200 205

<210> 18

<211> 206

<212> PRT

<213> 角毛壳菌(Chaetomium cupreum)

<400> 18

Thr Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser Gly Tyr Gln Pro Asn Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Ala Ala Tyr Ala Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Ser Tyr Ile Ser Pro Ser Phe Ser Ser Gln Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Gly Ala Ser Ser Gly Thr Thr Gln Ala Asp Tyr Phe Ile Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Thr Pro Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Ser Glu Ser Ser Gly Thr Cys Trp Gly Leu Ser Ala Ser Ala Met

100 105 110

Val Ala Trp Ile Lys Asp Phe Ser Asp His Tyr His Ser Arg Met Gly

115 120 125

Val Tyr Pro Leu Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Glu Glu Cys Thr

130 135 140

Gly Asn Ser Asn Ala Phe Val Asp Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala His

145 150 155 160

Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Glu Thr

165 170 175

Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Val

180 185 190

Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Gln Arg Leu Ala Arg Gly

195 200 205

<210> 19

<211> 207

<212> PRT

<213> 深红虫草(Cordyceps cardinalis)

<400> 19

Leu Ile His Ala Val Asp Ser Ser Ser Glu Val Ser Val Asp Val Tyr

1 5 10 15

Lys Lys Ala Leu Ala Glu Gly Phe Thr Arg Ala Ile Phe Arg Gly Tyr

20 25 30

Gln Glu Ala Cys Ser Gln Gly Gly Arg Val Asp Pro Thr Phe Leu Pro

35 40 45

Ser Tyr Lys Asn Ala Gln Lys Ala Gly Tyr Lys Asp Phe Asp Ala Tyr

50 55 60

Phe Phe Pro Cys Thr Gly Ser Gly Asn Lys Cys Lys Pro Tyr Ala Lys

65 70 75 80

Gln Ile Gly Glu Leu Val Asp Ala Ile Glu Gly Asn Gln Leu Ala Ile

85 90 95

Arg Arg Ile Trp Ile Asp Ile Glu Thr Asp Lys Val Cys Asn Ala Phe

100 105 110

Asn Trp Gly Ala Glu Gly Asn Ile Gln Glu Ala Lys Lys Leu Ile Ala

115 120 125

Ala Val Arg Gly Thr Lys Arg Asp Phe Gly Ile Tyr Thr Ser Ala Thr

130 135 140

Gln Trp Glu Asn Ile Phe Gly Ser Arg Thr Val Glu Leu Ala Lys Asp

145 150 155 160

Val Pro Leu Trp Phe Ala Lys Phe Asp Asn Val Glu Thr Leu Glu Leu

165 170 175

Lys Thr Pro Phe Gly Gly Trp Thr Lys Ala Asp Ala Lys Gln Tyr Thr

180 185 190

Asp Lys Ser Ala Ser Lys Lys Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ala

195 200 205

<210> 20

<211> 216

<212> PRT

<213> 青霉菌属种属(Penicillium sp.)'qii'

<400> 20

Ser Thr Ile Gln Pro Arg Ala Ser Gly Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser

1 5 10 15

Ser Tyr Gln Gly Thr Val Asn Phe Ala Gly Ala Tyr Gly Ala Gly Ala

20 25 30

Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Ser

35 40 45

Thr Phe Ser Ser His Tyr Asp Gly Ala Thr Ser Ala Gly Leu Ile Arg

50 55 60

Gly Ala Tyr His Phe Ala His Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ala Thr Gln

65 70 75 80

Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Thr Asn Asp Gly Ile

85 90 95

Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ser Thr

100 105 110

Cys Tyr Gly Leu Ser Ala Ser Ala Met Val Ser Trp Ile Lys Asp Phe

115 120 125

Gly Glu Thr Tyr Asn Ser Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Ser

130 135 140

Thr Ala Asp Trp Trp Ser Thr Cys Thr Gly Asp Ser Thr Ser Phe Ser

145 150 155 160

Ser Asp Tyr Pro Leu Val Leu Ala Gln Tyr Ala Ser Ser Ile Ser Thr

165 170 175

Val Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln Ser Phe Trp Gln Asn Ala Asp Ser

180 185 190

Tyr Ser Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Leu Trp Asn Gly Ser Glu Asp Ser

195 200 205

Leu Lys Thr Phe Ala Lys Gly Ser

210 215

<210> 21

<211> 218

<212> PRT

<213> 曲霉属种属(Aspergillus sp.)nov XZ2609

<400> 21

Leu Pro Thr Lys Leu Ala Ala Arg Tyr Ser Thr Val Gln Gly Phe Asp

1 5 10 15

Val Ser Asn Tyr Gln Pro Asn Val Asp Phe Ser Ala Ala Lys Ser Ala

20 25 30

Gly Ala Glu Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Asp Tyr Lys

35 40 45

Asp Thr Tyr Phe Asn Ser His Tyr Thr Gly Ala Thr Asn Ala Gly Leu

50 55 60

Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro Asp Lys Ser Ser Gly Thr

65 70 75 80

Ala Gln Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Lys Asp

85 90 95

Gly Arg Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Tyr Gly

100 105 110

Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser His Ser Ala Met Val Ser Trp Val Asn

115 120 125

Glu Phe Leu Asn Glu Tyr His Ser Lys Thr Gly Val Tyr Pro Leu Leu

130 135 140

Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Asn Gln Cys Thr Gly Asn Ala His Gly

145 150 155 160

Phe Gly Asn Lys Ser Pro Leu Val Leu Ala Ser Tyr Ser Ser Glu Ser

165 170 175

Pro Arg Thr Val Pro Gly Asp Trp Gln Thr Trp Thr Ile Trp Gln Asn

180 185 190

Ala Asp Lys Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Ile Phe Asn Gly Asp

195 200 205

Leu Thr Gln Leu Lys Lys Ile Val Glu Gly

210 215

<210> 22

<211> 204

<212> PRT

<213> 拟青霉属种属(Paecilomyces sp.)XZ2658

<400> 22

Thr Val Ala Gly Phe Asp Ile Ser Asn Tyr Gln Pro Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Ala Thr Glu Gly Thr Thr

20 25 30

Tyr Ile Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly Ala Thr Asn Ala

35 40 45

Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro Gly Ser Ser Thr

50 55 60

Gly Ala Ala Gln Ala Thr Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser

65 70 75 80

Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Ile Asp Leu Glu Tyr Asn Pro

85 90 95

Ser Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met Val Ser Trp

100 105 110

Ile Ser Asp Phe Val Glu Thr Tyr His Ser Lys Thr Gly Val Tyr Pro

115 120 125

Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Asn Gln Cys Thr Gly Ser Ser

130 135 140

Thr Ala Phe Ala Ser Lys Cys Pro Leu Val Val Ala Arg Tyr Ala Ser

145 150 155 160

Ser Val Gly Thr Leu Pro Ala Gly Trp Gly Tyr Gln Thr Ile Trp Gln

165 170 175

Asn Ser Asp Ser Ser Pro Trp Gly Gly Asp Asn Asp Ile Phe Asn Gly

180 185 190

Ser Leu Asp Gln Leu Lys Arg Ile Ala Asn Ala Ser

195 200

<210> 23

<211> 203

<212> PRT

<213> 拟青霉属种属(Paecilomyces sp.)XZ2658

<400> 23

Ala Val Gln Gly His Asp Val Ser His Trp Gln Gly Asn Ile Asn Trp

1 5 10 15

Gly Ala Val Lys Ala Ala Gly Val Lys Phe Thr Tyr Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Ser Thr Asn Tyr Ile Asp Pro Ser Phe Asn Ala Asn Tyr Val Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Thr Gly Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Gly Asp Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Val Ser His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Arg Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Ala Gly Cys Ser Gly Leu Ser Gln Ser Ala Met Thr Ala Trp Ile

100 105 110

Arg Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ala Arg Thr Gly Arg Phe Pro Val

115 120 125

Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys Thr Gly Asn Ala Ser

130 135 140

Gly Phe Gln Asn Asp His Pro Leu Trp Ile Ala Arg Trp Gly Pro Ser

145 150 155 160

Pro Gly Glu Leu Pro Ala Gly Tyr Gly Phe His Thr Phe Trp Gln Tyr

165 170 175

Ala Asp Lys Gly Pro Leu Pro Gly Asp Gln Asp Asn Phe Asn Gly Asp

180 185 190

Glu Ala Gly Leu Ala Arg Leu Ala Arg Gly Ser

195 200

<210> 24

<211> 208

<212> PRT

<213> Pycnidiophora cf dispera

<400> 24

Ala Val Ser Gly Met Asp Ile Ser His Tyr Gln Gly Thr Asn Tyr Asn

1 5 10 15

Phe Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala

20 25 30

Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Gln Phe Ser Ala Asn Tyr Ile

35 40 45

Gly Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg

50 55 60

Pro Ala Ala Ser Thr Gly Ala Val Gln Ala Ser Tyr Phe Val Ser His

65 70 75 80

Gly Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp

85 90 95

Met Glu Tyr Gly Ser Thr Ser Thr Cys His Gly Leu Ser Val Ser Ala

100 105 110

Met Asn Thr Trp Ile Ala Ser Phe Val Asn Gln Tyr Lys Ser Leu Thr

115 120 125

Gly Ala Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Lys Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asp Ser Thr Ala Trp Asn Thr Lys Cys Pro Leu Val Leu Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr His

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Tyr Ser Asp Ser Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Thr Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly Ser

195 200 205

<210> 25

<211> 210

<212> PRT

<213> 巴西嗜热菌(Thermomucor indicae-seudaticae)

<400> 25

Tyr Gln Thr Gly Leu Asp Val Ser Ala Leu Thr Ser Thr Ser Ser Phe

1 5 10 15

Ser Cys Ala Lys Asn Leu Gly Tyr Asp His Val Ile Ala Arg Cys Tyr

20 25 30

Met Glu Ala Tyr Gly Asn Asn Pro Gly Gly Lys Val Asp Pro Asn Cys

35 40 45

Tyr Ser Asn Tyr Lys Asn Ala Lys Ala Ala Gly Phe Thr Ser Val Asp

50 55 60

Ile Tyr Met Phe Pro Cys Thr Gly Arg Ser Thr Cys Lys Ser Pro Ala

65 70 75 80

Thr Gln Val Gln Glu Ile Val Asp Tyr Val Gly Ala His Lys Met Ile

85 90 95

Val Gly Thr Leu Trp Leu Asp Val Glu Val Asp Ser Ala Ala Asn Asn

100 105 110

Trp Pro Ser Thr Ser Glu Ala Arg Ser Thr Leu Arg Ala Phe Lys Thr

115 120 125

Ala Leu Asp Lys Ser Gly Trp Lys Trp Gly Val Tyr Ser Ser Lys Ser

130 135 140

Gln Trp Thr Arg Ile Thr Gly Ser Ala Ser Trp Val Leu Asp Pro Ser

145 150 155 160

Val Pro Leu Trp Tyr Ser His Tyr Asp Asp Thr Leu Ser Phe Ser Asp

165 170 175

Tyr Pro Ser His Ala Phe Gly Gly Trp Ser Lys Pro Thr Ile Lys Gln

180 185 190

Tyr Thr Gly Asp Ala Ser Phe Cys Ser Ala Ser Trp Asp Lys Asn Tyr

195 200 205

Tyr Gly

210

<210> 26

<211> 207

<212> PRT

<213> 虫草棒束孢(Isaria farinosa)

<400> 26

Leu Thr His Ala Val Asp Ser Ser Ser Glu Val Ser Val Asp Ile Tyr

1 5 10 15

Lys Lys Ala Leu Gly Gln Gly Phe Thr Arg Ala Ile Phe Arg Gly Tyr

20 25 30

Gln Glu Ala Cys Ser Leu Gly Gly Arg Val Asp Pro Thr Phe Val Pro

35 40 45

Ser Tyr Lys Asn Ala Val Ala Ala Gly Tyr Lys Asp Phe Asp Ala Tyr

50 55 60

Phe Phe Pro Cys Thr Gly Thr Thr Asn Lys Cys Lys Pro Tyr Ala Thr

65 70 75 80

Gln Leu Ala Glu Leu Leu Asp Thr Ile Ser Ser Gln Lys Leu Ala Ile

85 90 95

Arg Arg Ile Trp Leu Asp Ile Glu Thr Asp Gln Val Cys Ser Pro Phe

100 105 110

Asp Tyr Gly Ala Gln Gly Asn Ile Ala Glu Ala Lys Lys Leu Val Ala

115 120 125

Ala Phe Arg Ala Ala Lys His Asp Trp Gly Ile Tyr Thr Ser Pro Thr

130 135 140

Gln Trp Glu Thr Ile Phe Gly Ser Lys Thr Phe Val Leu Ala Asn Asp

145 150 155 160

Val Pro Leu Trp Phe Ala Lys Phe Asp Asn Val Glu Thr Leu Asp Leu

165 170 175

Lys Thr Pro Phe Gly Gly Trp Thr Lys Ala Asp Ala Lys Gln Tyr Thr

180 185 190

Asp Gln Ser Ala Ser Lys Lys Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ala

195 200 205

<210> 27

<211> 207

<212> PRT

<213> 腊蚧轮刺孢菌属种属(Lecanicillium sp.)WMM742

<400> 27

Ser Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Gly Ala Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Arg Asp Pro Lys Phe Ser Glu His Tyr Gly Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Gln Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Phe Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Tyr Gly Pro Asn Gly Asn Thr Cys Tyr Gly Leu Gly Pro Ala Ser

100 105 110

Met Arg Ser Trp Ile Ser Asp Phe Val Glu Thr Tyr His Ala Lys Thr

115 120 125

Gly Arg Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Thr Ser Leu Phe Ala Asp Lys Cys Pro Leu Val Val Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Asn Ser Gln Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Trp Gly Phe Tyr

165 170 175

Thr Phe Trp Gln Phe Asn Asp His Tyr Lys His Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Val Phe Asn Gly Ala Tyr Ser Gln Leu Gln Lys Ile Ala Thr Gly

195 200 205

<210> 28

<211> 208

<212> PRT

<213> 柄孢壳属种属(Zopfiella sp.)t180-6

<400> 28

Ala Val Gln Gly Phe Asp Val Ser His Trp Gln Ser Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Ala Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Ser Asn Asn Tyr Ile Asp Pro Lys Phe Asn Thr Tyr Tyr Pro Ala

35 40 45

Ala Thr Ser Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Gly Glu Thr Thr Gly Ala Val Gln Ala Asp Tyr Phe Ile Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Asn Ala Ser Gly Tyr Pro Ala Cys Trp Gly Leu Ser Gln Ser Ala

100 105 110

Met Val Ser Trp Ile Lys Ala Phe Ser Asp Arg Tyr Lys Ala Arg Thr

115 120 125

Gly Val Tyr Pro Met Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Thr Ser Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Asn Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Ser Pro Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Ile Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly Ser

195 200 205

<210> 29

<211> 217

<212> PRT

<213> Malbranchea flava

<400> 29

Gly Pro Lys Glu Phe Glu Ser Arg Ala Ser Gly Val Gln Gly Phe Asp

1 5 10 15

Ile Ser Gly Trp Gln Ser Asn Val Asn Phe Ala Gly Ala Tyr Asn Ser

20 25 30

Gly Ala Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Ser Glu Gly Thr Thr Phe Lys

35 40 45

Asp Arg Gln Phe Ser Asn His Tyr Ile Gly Ala Thr Lys Ala Gly Phe

50 55 60

Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Leu Pro Asp Val Ser Ser Ala Thr

65 70 75 80

Ala Gln Val Asn His Phe Leu Ala Ser Gly Gly Gly Trp Ser Arg Asp

85 90 95

Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Ser Asn Pro Tyr Gly

100 105 110

Ala Gln Cys Tyr Gly Leu Asp Ala Gly Arg Met Val Ala Trp Ile Arg

115 120 125

Glu Phe Val Asp Ala Tyr Lys Arg Ala Thr Gly Arg Tyr Pro Leu Ile

130 135 140

Tyr Thr Ser Pro Ser Trp Trp Gln Thr Cys Thr Gly Asn Ser Asn Ala

145 150 155 160

Phe Ile Asp Lys Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg Trp Ala Ser Ser Pro

165 170 175

Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Phe His Ser Phe Trp Gln Tyr Ala

180 185 190

Asp Ser Tyr Gln Phe Gly Gly Asp Ala Gln Val Phe Asn Gly Asp Glu

195 200 205

Ala Gly Leu Lys Arg Met Ala Leu Gly

210 215

<210> 30

<211> 208

<212> PRT

<213> 多毛垂幕菇(Hypholoma polytrichi)

<400> 30

Leu Val Tyr Gly Val Asp Ser Ser Ser Leu Val Pro Val Ala Thr Tyr

1 5 10 15

Gln Lys Ala Leu Gly Glu Gly Phe Thr Lys Ala Val Ile Arg Gly Tyr

20 25 30

Glu Glu Ala Cys Gly Val Gly Gly Glu Val Asp Pro Asn Phe Val Pro

35 40 45

Ser Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Tyr Thr Asp Ile Asp Met Tyr

50 55 60

Trp Phe Pro Cys Asn Gly Ser Thr His Ser Cys Lys Ser Tyr Ala Ala

65 70 75 80

Gln Leu Ala Ala Ile Ala Ala Ala Phe Ser Ala Asn Ala Met Lys Ile

85 90 95

Gly Thr Ile Trp Ile Asp Ile Glu Lys Asp Ala Ala Ile Cys Asn Asn

100 105 110

Trp Asp Tyr Gly Thr Ala Gly Asn Leu Ala Gln Ala Lys Ala Leu Ile

115 120 125

Ala Ala Ala Lys Ala Ser Gly Phe Asn Phe Gly Ile Tyr Ser Ser Pro

130 135 140

Gly Glu Trp Ser Thr Ile Phe Gly Ser Thr Ser Val Val Val Asp Asn

145 150 155 160

Ser Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Tyr Asn Asn Val Gln Thr Leu Thr

165 170 175

Leu Gly Thr Pro Phe Gly Gly Trp Ser Thr Ala Val Gly His Gln Tyr

180 185 190

Thr Asp Val Ser Ala Ser Gly Leu Phe Asp Leu Asn Val Phe Ala His

195 200 205

<210> 31

<211> 201

<212> PRT

<213> 弯头曲霉(Aspergillus deflectus)

<400> 31

Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asp Tyr

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ala Phe Ser Thr His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Gly Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Thr Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Ala Gly Cys Ser Gly Leu Ser Ala Ser Ala Met Val Ser Trp Ile

100 105 110

Gln Asp Phe Gly Glu Thr Tyr Lys Ala Ser Thr Gly Arg Tyr Pro Met

115 120 125

Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Asn Asn Gly

130 135 140

Gly Phe Gly Asp Tyr Pro Leu Val Leu Ala Arg Trp Ala Ser Ser Pro

145 150 155 160

Gly Glu Leu Pro Asn Gly Trp Ser Val His Ser Phe Trp Gln Asn Ala

165 170 175

Asp Thr Tyr Glu Tyr Gly Gly Asp Ser Glu Ile Trp Asn Gly Ser Gln

180 185 190

Glu Asn Leu Val Lys Phe Ala Ser Gln

195 200

<210> 32

<211> 202

<212> PRT

<213> Ascobolus stictoideus

<400> 32

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Thr Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Asp Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Thr Gly Ala Val Gln Ala Gln Tyr Phe Val Ser Asn Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Leu Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Gln Ala Gly Met Val Ser Trp Ile

100 105 110

Thr Ser Phe Val Asn Lys Tyr Lys Ala Leu Thr Thr Arg Tyr Pro Met

115 120 125

Ile Tyr Thr Thr Asn Ser Trp Trp Asn Thr Cys Thr Gly Asn Ser Gln

130 135 140

Ala Phe Ser Ala Asn Cys Pro Leu Val Ile Ala Arg Tyr Asn Ser Val

145 150 155 160

Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe

165 170 175

Asn Asp Ala Tyr Ser Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Ala

180 185 190

Tyr Ser Gln Leu Val Lys Leu Ala Thr Gly

195 200

<210> 33

<211> 207

<212> PRT

<213> 锥毛壳属种属(Coniochaeta sp)

<400> 33

Thr Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Pro Thr Val Asn Tyr

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Asn Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Thr His Tyr Asn Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Gly Val Thr Thr Gly Ala Ala Glu Ala Asn Phe Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Ser Glu Gly Ser Asn Pro Gln Cys Trp Gly Leu Ser Thr Ser Gly

100 105 110

Met Val Ala Trp Ile Lys Ser Phe Ser Asp Arg Tyr His Thr Val Thr

115 120 125

Gly Arg Tyr Pro Met Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Asn Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Ala Pro Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Ser Tyr Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Ile Phe Asn Gly Asn Leu Ala Ser Leu Gln Lys Leu Ala Thr Gly

195 200 205

<210> 34

<211> 202

<212> PRT

<213> 开裂轮层炭壳菌(Daldinia fissa)

<400> 34

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asp Phe

1 5 10 15

Gly Ala Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Gln Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Ala Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Thr Phe Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met Val Ser Trp Ile

100 105 110

Arg Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Gly Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Leu

115 120 125

Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Gly Ser Ser

130 135 140

Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ser

145 150 155 160

Pro Gly Ala Leu Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe

165 170 175

Asn Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Asp

180 185 190

Leu Thr Gln Leu Lys Lys Leu Ala Ser Gly

195 200

<210> 35

<211> 201

<212> PRT

<213> 座坚壳属种属(Rosellinia sp)

<400> 35

Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Ser Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Ser Tyr Ile Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Ile Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Leu

50 55 60

Gly Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Val Leu Ser Ala Ser Gly Ala Val Ala Trp Ile Lys

100 105 110

Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Ser Lys Thr Gly Val Tyr Pro Leu Leu

115 120 125

Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Asn Ser Asn Ala

130 135 140

Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser Ala

145 150 155 160

Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Tyr Asn

165 170 175

Asp Ala Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Val Phe Asn Gly Asp Met

180 185 190

Ala Gly Leu Leu Arg Leu Ala Lys Gly

195 200

<210> 36

<211> 202

<212> PRT

<213> 粪盘菌属种属(Ascobolus sp.)ZY179

<400> 36

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Trp Gln Ser Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Ser Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Gln Phe Phe Ala Ser Asn Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Gln Ser Gly Met Val Ser Trp Ile

100 105 110

Ser Ser Phe Val Asn Lys Tyr Arg Ser Leu Thr Gly Arg Tyr Pro Met

115 120 125

Ile Tyr Thr Thr Asn Ser Trp Trp Val Thr Cys Thr Gly Asn Ser Lys

130 135 140

Ala Phe Ser Ser Asn Cys Pro Leu Val Ile Ala Arg Tyr Asn Ser Val

145 150 155 160

Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Tyr

165 170 175

Asn Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Ala

180 185 190

Tyr Ser Gln Leu Val Lys Leu Ala Thr Gly

195 200

<210> 37

<211> 206

<212> PRT

<213> Curreya种属XZ2623

<400> 37

Thr Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Gly Thr Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Asn Phe Ser Asn Asn Tyr Val Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Lys Phe Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Asp Gly Gly Ser Gly Ser Thr Gln Ala Gln Phe Phe His Ser His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile

85 90 95

Glu Tyr Gly Pro Thr Ser Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met

100 105 110

Val Thr Trp Ile Thr Asp Phe Val Asn Glu Tyr His Ala Leu Thr Gly

115 120 125

Arg Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Thr Asn Asp Trp Trp Asn Thr Cys Thr

130 135 140

Gly Asn Thr Asn Lys Phe Ser Thr Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg

145 150 155 160

Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Phe Gln Thr

165 170 175

Ile Trp Gln Phe Asn Asp Asn Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr

180 185 190

Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Lys Leu Ala Thr Gly

195 200 205

<210> 38

<211> 202

<212> PRT

<213> 盾壳霉属种属(Coniothyrium sp)

<400> 38

Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ala Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Ala Ala Tyr Ser Gly Gly Leu Arg Phe Val Tyr Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Gln Asp Pro Ala Phe Ser Ser His Tyr Ser Gly

35 40 45

Ala Thr Ser Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Ser Tyr Phe Val Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Asn Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Ala Ser Met Val Ser Trp Ile

100 105 110

Ser Ser Phe Ser Asn Gln Tyr His Ser Leu Thr Gly Arg Trp Pro Val

115 120 125

Ile Tyr Thr Thr Asn Ser Trp Trp Thr Thr Cys Thr Gly Asn Ser Ala

130 135 140

Ala Phe Asn Ala Asn Ser Pro Leu Met Leu Ala Arg Trp Gly Ser Thr

145 150 155 160

Ala Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Tyr

165 170 175

Lys Asp Ser Asn Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Val Phe Asn Gly Asp

180 185 190

Ala Thr Gln Leu Lys Lys Leu Ala Thr Gly

195 200

<210> 39

<211> 202

<212> PRT

<213> 炭团菌属种属(Hypoxylon sp)

<400> 39

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Asn Val Asp Phe

1 5 10 15

Gly Ala Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Gln Asp Pro Ser Phe Ser Thr His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ser Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Gly Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Thr Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Asn Ala Met Val Ala Trp Ile

100 105 110

Arg Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Gly Arg Thr Gly Arg Tyr Pro Leu

115 120 125

Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Gly Cys Ala Gly Gly Ser Ala

130 135 140

Ala Phe Val Gly Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Gly Ser

145 150 155 160

Pro Gly Ala Leu Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe

165 170 175

Asp Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Asp

180 185 190

Leu Thr Gln Leu Lys Lys Leu Ala Ser Gly

195 200

<210> 40

<211> 202

<212> PRT

<213> 炭角菌属种属(Xylariaceae sp.)1653h

<400> 40

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asp Phe

1 5 10 15

Ala Ala Ala Tyr Ser Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Gly Ser Ser Ser Gly Ala Thr Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met Val Ser Trp Ile

100 105 110

Lys Asp Phe Ser Asn Ala Tyr His Ser Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Leu

115 120 125

Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser

130 135 140

Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser

145 150 155 160

Ala Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe

165 170 175

Asn Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Glu

180 185 190

Tyr Ala Ser Leu Gln Lys Leu Ala Thr Gly

195 200

<210> 41

<211> 202

<212> PRT

<213> 炭团菌属种属(Hypoxylon sp)

<400> 41

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asp Phe

1 5 10 15

Ala Ala Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Gly Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Phe Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Asp Cys Ala Gly Leu Ser Thr Ser Ala Met Val Ser Trp Ile

100 105 110

Lys Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Ser Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Leu

115 120 125

Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ser Cys Thr Gly Asp Ser Ser

130 135 140

Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser

145 150 155 160

Ala Gly Thr Pro Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Tyr Thr Ile Trp Gln Phe

165 170 175

Asn Asp Ala Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Thr Phe Asn Gly Asn

180 185 190

Tyr Ala Ser Leu Gln Lys Leu Ala Thr Gly

195 200

<210> 42

<211> 206

<212> PRT

<213> 帚状云南霉(Yunnania penicillata)

<400> 42

Asp Val Asp Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Glu Thr Val Asp Tyr

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Gly Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Asn Tyr Ile Asp Ser Ser Phe Asn Thr His Tyr Ala Gly

35 40 45

Ala Thr Asp Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Gly Glu Thr Thr Gly Ala Glu Gln Ala Asp Tyr Phe Ile Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Asn Trp Ser Asn Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Gly Glu Gly Ser Thr Thr Cys Trp Asp Leu Ser Ala Ala Asp Met

100 105 110

Val Ala Trp Ile Lys Ala Phe Ser Asp Arg Tyr Gln Glu Val Thr Ser

115 120 125

Arg Tyr Pro Leu Leu Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Glu Cys Thr

130 135 140

Gly Asn Ser Asp Ala Phe Val Asp Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg

145 150 155 160

Tyr Ala Ser Ser Pro Gly Glu Ile Pro Gly Gly Trp Pro Ala Gln Thr

165 170 175

Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Ser Phe Gly Gly Asp Ser Asp Ile

180 185 190

Phe Asn Gly Asp Glu Ala Gly Leu Lys Lys Leu Ala Ser Gly

195 200 205

<210> 43

<211> 207

<212> PRT

<213> 白色侧齿霉菌(Engyodontium album)

<400> 43

Arg Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Pro Ser Val Asp Phe

1 5 10 15

Asn Ala Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Lys Phe Ser Gln His Tyr Ile Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Gln Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asp Tyr Phe Leu Lys Asn Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Met

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro Asn Gly Ser Ala Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Ala Ser

100 105 110

Met Arg Asn Trp Ile Asn Asp Phe Val Asn Thr Tyr His Ser Arg Thr

115 120 125

Gly Val Tyr Pro Leu Leu Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Thr Ala Met Phe Ala Asp Lys Cys Pro Leu Val Ile Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Asn Ser Val Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Trp Ser Phe Trp

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Tyr Asn Asp His Tyr Lys His Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Ala Phe Asn Gly Asp Tyr Ser Gln Leu Gln Arg Ile Ala Arg Gly

195 200 205

<210> 44

<211> 208

<212> PRT

<213> 球芽泛普可尼亚菌(Metapochonia bulbillosa)

<400> 44

Thr Val Ala Gly Phe Asp Ile Ser Asn Tyr Gln Pro Thr Val Asp Phe

1 5 10 15

Lys Lys Ala Tyr Ala Asp Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Gln Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Lys Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Ile Asp Leu

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Ala Ser Gly

100 105 110

Met Val Ser Trp Ile Ser Asp Phe Val Glu Thr Tyr His Ser Lys Thr

115 120 125

Gly Val Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Asn Gln Cys

130 135 140

Thr Gly Ser Ser Thr Ala Phe Gly Asn Lys Cys Pro Leu Val Val Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Ala Leu Pro Ala Gly Trp Gly Phe Gln

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Lys Ser Pro Trp Gly Gly Asp Asn Asp

180 185 190

Ile Phe Asn Gly Ser Leu Asp Gln Leu Lys Arg Ile Ala Asn Ala Ser

195 200 205

<210> 45

<211> 215

<212> PRT

<213> 副榛色钩囊菌(Hamigera paravellanea)

<400> 45

Ala Pro Leu Glu Ala Arg Ala Gly Ser Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser

1 5 10 15

His Tyr Gln Ala Lys Val Asp Phe Ala Ala Ala Tyr Arg Ser Gly Ala

20 25 30

Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro

35 40 45

Ala Phe Ser Ser His Tyr Thr Ser Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg

50 55 60

Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln

65 70 75 80

Ala Thr Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile

85 90 95

Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr

100 105 110

Cys Tyr Gly Leu Ser Asp Ala Ala Met Val Ala Trp Ile Gln Asp Phe

115 120 125

Val Asp Thr Tyr His Ala Arg Thr Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr

130 135 140

Thr Ala Asp Trp Trp Asn Thr Cys Thr Gly Asn Ser Ser Lys Phe Ser

145 150 155 160

Gln Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Val Gly Thr

165 170 175

Val Pro Gly Gly Trp Gly Tyr Gln Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser

180 185 190

Tyr Ala Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Ile Phe Asn Gly Asp Glu Thr Gln

195 200 205

Leu Lys Lys Leu Ala Ser Gly

210 215

<210> 46

<211> 217

<212> PRT

<213> 翠绿绿僵菌(Metarhizium iadini)

<400> 46

Ser Pro Val Glu Leu Glu Gln Arg Ala Ala Ser Val Lys Gly Phe Asp

1 5 10 15

Ile Ser Gly Tyr Gln Pro Asn Val Asp Phe Asn Lys Ala Tyr Ala Asp

20 25 30

Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Ile

35 40 45

Asp Lys Thr Phe Ser Lys His Tyr Thr Gly Ala Thr Lys Ala Lys Leu

50 55 60

Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala His Pro Gly Gln Asn Lys Ala Ser

65 70 75 80

Ala Glu Ala Asp Phe Phe Val Gln His Gly Gly Asn Trp Ser Lys Asp

85 90 95

Ala Ile Thr Leu Pro Gly Met Val Asp Leu Glu Ser Glu Lys Gly His

100 105 110

Pro Pro Cys Trp Gly Leu Ser His Ser Ala Met Val Ala Trp Ile Ser

115 120 125

Glu Phe Val Ala Ala Tyr His Lys Lys Thr Thr Arg Tyr Pro Met Leu

130 135 140

Tyr Thr Asn Pro Ser Trp Trp Ser Ala Cys Thr Gly Asn Ser Lys Ala

145 150 155 160

Phe Lys Asp Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ala Ser Ser Pro

165 170 175

Gly Ala Ile Pro Gly Gly Trp Pro Ala Gln Thr Ile Trp Gln Asn Ser

180 185 190

Asp Lys Ser Pro Trp Gly Gly Asp Ser Asp Met Phe Asn Gly Asp Leu

195 200 205

Ala Gln Leu Lys Lys Leu Ala Thr Gly

210 215

<210> 47

<211> 214

<212> PRT

<213> 橙色嗜热子囊菌(Thermoascus aurantiacus)

<400> 47

Glu Leu Asp Lys Arg Ala Arg Gly Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His

1 5 10 15

Tyr Gln Pro Asn Val Asp Phe Lys Gly Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg

20 25 30

Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Ala

35 40 45

Phe Ser Lys His Tyr Ile Gly Ala Thr Glu Ala Gly Leu Ile Arg Gly

50 55 60

Gly Tyr His Phe Ala His Pro Asp Lys Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala

65 70 75 80

Asn Phe Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr

85 90 95

Leu Pro Gly Met Val Asp Leu Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Asp Ala Cys

100 105 110

Tyr Gly Leu Ser Asp Ser Gln Met Val Ser Trp Ile Arg Asp Phe Val

115 120 125

Asn Thr Tyr His Ala His Thr Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Thr

130 135 140

Ala Asp Trp Trp Lys Arg Cys Thr Gly Asp Ser His Ala Phe Ser Thr

145 150 155 160

Thr Cys Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Asn Ser Ser Pro Gly Thr Val

165 170 175

Pro Gly Gly Trp Pro Tyr His Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Lys Tyr

180 185 190

Arg Phe Gly Gly Asp Ser Asp Ile Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu

195 200 205

Lys Arg Leu Ala Lys Gly

210

<210> 48

<211> 208

<212> PRT

<213> 罗斯曼枝穗霉(Clonostachys rossmaniae)

<400> 48

Ala Val Pro Gly Phe Asp Ile Ser Gly Trp Gln Lys Ser Thr Asp Phe

1 5 10 15

Ala Lys Ser Tyr Ala Asn Gly Asp Arg Phe Val Tyr Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Phe Lys Asn Pro Leu Phe Ser Lys Gln Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Arg Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Gln Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ser Gln Ala Arg Phe Phe Val Ala Asn Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Asn Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Val Asp Met

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Lys Thr Ala

100 105 110

Met Val Asn Trp Ile Glu Asp Phe Val Ser Thr Tyr Gln Ala Leu Thr

115 120 125

Gly Arg Trp Pro Val Val Tyr Thr Thr Leu Asp Trp Trp Thr Gln Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Ala Lys Phe Gly Asp Arg Cys Pro Leu Trp Val Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Ala Val Gly Gln Ile Pro Ala Gly Trp Ser Phe His

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Tyr Asn Ala Lys Tyr Pro Glu Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Ile Phe Asn Gly Asp Glu Thr Arg Leu Lys Ala Leu Ala Ser Gly Ala

195 200 205

<210> 49

<211> 203

<212> PRT

<213> 棒状简枝霉(Simplicillium obclavatum)

<400> 49

Ala Pro Lys Gly Ile Asp Val Ser His Trp Gln Gly Ser Ile Asn Trp

1 5 10 15

Gly Ala Val Lys Ala Asn Gly Ile Glu Trp Ala Tyr Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Ser Thr Asn Tyr Lys Asp Pro Asn Phe Asn Ala Asn Tyr Val Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala Arg Pro

50 55 60

Gly Asp Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Asn Tyr Phe Ala Ser Asn Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Val Asp Leu

85 90 95

Glu Ala Gly Cys Ser Gly Leu Ser Gln Ser Ala Met Thr Ala Trp Ile

100 105 110

Lys Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ala Arg Thr Gly Arg Tyr Pro Ala

115 120 125

Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Lys Gln Cys Thr Gly Asn Ala Ser

130 135 140

Gly Phe Gln Asn Asn Asn Pro Leu Trp Ile Ala Arg Trp Ala Ser Ser

145 150 155 160

Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Tyr Ser Tyr His Thr Phe Trp Gln Tyr

165 170 175

Ala Asp His Gly Pro Asn Pro Gly Asp Gln Asp Val Phe Asn Gly Asp

180 185 190

Ser Ala Gly Leu Lys Arg Met Ala Lys Gly Ser

195 200

<210> 50

<211> 216

<212> PRT

<213> Aspergillus inflatus

<400> 50

Ala Pro Leu Glu Ala Arg Ala Asn Thr Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser

1 5 10 15

Ser Phe Gln Pro Asn Val Asp Phe Ala Ala Ala Tyr Lys Ala Gly Ala

20 25 30

Arg Phe Val Met Met Lys Ala Thr Gln Asn Thr Asn Tyr Val Asp Lys

35 40 45

Thr Phe Asn Ala His Tyr Glu Gly Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg

50 55 60

Gly Gly Tyr His Phe Ala Ile Pro Asn Gly Pro Ser Gly Ala Ala Gln

65 70 75 80

Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Asp Asp Gly Lys

85 90 95

Thr Leu Pro Gly Met Ile Asp Leu Glu Tyr Asn Pro Tyr Gly Gln Thr

100 105 110

Cys Tyr Asp Leu Ser Ala Ala Lys Met Val Asp Trp Ile Lys Asp Phe

115 120 125

Ser Asn Thr Tyr His Ala Lys Thr Lys Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr

130 135 140

Thr Ala Asn Trp Trp Lys Glu Cys Thr Gly Asp Ser Lys Glu Phe Ser

145 150 155 160

Gln Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser Ala Gly Thr

165 170 175

Val Pro Gly Gly Trp Pro Ala Tyr Ser Phe Trp Gln Asn Ala Asp Lys

180 185 190

Tyr Lys Phe Gly Gly Asp Ser Asp Ile Trp Asn Gly Ser Glu Asp Asn

195 200 205

Leu Lys Lys Phe Ala Lys Gly Ala

210 215

<210> 51

<211> 207

<212> PRT

<213> Paracremonium inflatum

<400> 51

Lys Val Leu Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ala Thr Val Asp Phe

1 5 10 15

Asn Ala Ala Lys Asp Ala Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Lys Asp Pro Ala Phe Ser Lys His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Gln Pro

50 55 60

Ala Ser Ser Ser Gly Ala Ala Gln Ala Thr Phe Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ser Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Gln Ser Ser

100 105 110

Met Val Gln Trp Ile Ser Asp Phe Ile Asp Thr Tyr His Ser Lys Thr

115 120 125

Gly Arg Tyr Pro Leu Ile Tyr Thr Ser Thr Ser Trp Trp Lys Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Ser Lys Phe Ala Ala Asn Cys Pro Leu Val Val Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Glu Leu Pro Ala Gly Trp Thr Tyr Tyr

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Ile Phe Asn Gly Asp Glu Ser Gln Leu Gln Lys Leu Ala Lys Gly

195 200 205

<210> 52

<211> 208

<212> PRT

<213> 韦斯特壳属种属(Westerdykella sp)

<400> 52

Ala Val Ser Gly Met Asp Ile Ser His Tyr Gln Gly Thr Asn Tyr Asn

1 5 10 15

Phe Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala

20 25 30

Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Pro Gln Phe Ser Ala Asn Tyr Ile

35 40 45

Ala Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg

50 55 60

Pro Ala Asp Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Lys Tyr Phe Val Ser His

65 70 75 80

Gly Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp

85 90 95

Leu Glu Tyr Gly Ser Ser Ser Ala Cys His Gly Leu Ser Val Ser Ala

100 105 110

Met Asn Thr Trp Ile Ala Ser Phe Ile Asn Gln Tyr Arg Ser Leu Thr

115 120 125

Gly Ala Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Lys Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asp Ser Gln Ala Trp Asn Thr Lys Cys Pro Leu Val Leu Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Phe Asn Asp Ser Tyr Lys Tyr Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Thr Phe Asn Gly Asp Leu Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Lys Gly Ser

195 200 205

<210> 53

<211> 207

<212> PRT

<213> 半球盖菇(Stropharia semiglobata)

<400> 53

Leu Thr Tyr Ala Val Asp Ser Ser Thr Leu Val Ser Val Ala Thr Tyr

1 5 10 15

Thr Lys Ala Lys Ser Gln Gly Phe Thr Lys Ala Ile Ile Arg Gly Tyr

20 25 30

Gln Glu Ala Cys Gly Ser Gly Gly Ala Val Asp Pro Asn Phe Val Gln

35 40 45

Thr Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Tyr Thr Asp Ile Asp Met Tyr

50 55 60

Trp Phe Pro Cys Asn Gly Ser Thr His Asn Cys Lys Ser Tyr Ala Thr

65 70 75 80

Gln Ile Ala Ala Ile Ala Ala Thr Phe Ser Ala Asn Ser Met Lys Ile

85 90 95

Gly Arg Ile Trp Ile Asp Ile Glu Lys Asp Ala Ala Val Cys Asn Asn

100 105 110

Trp Asn Tyr Gly Thr Ala Gly Asn Leu Ser Gln Ala Lys Ala Leu Ile

115 120 125

Ser Ala Ile Lys Ala Ser Gly Phe Val Tyr Gly Ile Tyr Ser Ser Pro

130 135 140

Gly Glu Trp Gly Asn Ile Phe Gly Ser Thr Ser Val Val Val Asp Asn

145 150 155 160

Ser Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Trp Asn Asn Val Gln Thr Leu Thr

165 170 175

Met Gly Thr Lys Phe Gly Gly Trp Thr Ser Ala Met Gly His Gln Tyr

180 185 190

Thr Asp Val Ser Ala Ser Gly Gln Phe Asp Leu Ser Val Phe Ala

195 200 205

<210> 54

<211> 208

<212> PRT

<213> Gelasinospora cratophora

<400> 54

Thr Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Tyr Gln Ser Ser Val Asn Phe

1 5 10 15

Ala Gly Ala Tyr Ser Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Ile Asp Ser Ser Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Ser Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Asp Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Asp Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Ala Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Ile Asp Leu

85 90 95

Glu Ser Val Ser Gly Lys Ala Thr Cys Phe Gly Leu Ser Thr Ser Ala

100 105 110

Met Val Ser Trp Ile Lys Ser Phe Ser Asp Arg Tyr Tyr Ala Lys Thr

115 120 125

Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr Asn Tyr Ser Trp Trp Asn Gln Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Ala Ser Phe Ala Ala Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala

145 150 155 160

Arg Trp Ser Ser Thr Val Gly Thr Leu Pro Gly Gly Trp Ser Val Gln

165 170 175

Thr Ile Trp Gln Asn Ala Asp Thr Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp

180 185 190

Val Phe Asn Gly Ser Leu Asp Arg Leu Lys Ala Leu Ala Lys Gly Ser

195 200 205

<210> 55

<211> 207

<212> PRT

<213> 金针菇(Flammulina velutipes)

<400> 55

Arg Leu Asn Gly Ile Asp Val Ser Gly Tyr Gln Pro Asn Val Asn Trp

1 5 10 15

Ala Thr Val Lys Ala Asn Gly Val Ser Phe Ala Tyr Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asn Pro Ser Phe Ser Ser Gln Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Lys Ala Gly Leu Ile Arg Gly Ser Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Ser Ser Ser Thr Gly Ala Ala Gln Ala Arg Tyr Phe Val Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Ser Gly Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp Ile

85 90 95

Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr Cys Tyr Gly Leu Ser Thr Ser Ser

100 105 110

Met Val Asn Trp Ile Ala Asp Phe Ser Asn Thr Tyr His Ser Leu Thr

115 120 125

Gly Arg Tyr Pro Val Ile Tyr Thr Thr Ala Asp Trp Trp Arg Thr Cys

130 135 140

Thr Gly Asn Ser Ala Ser Phe Ala Asn Asn Ser Pro Leu Trp Ile Ala

145 150 155 160

Arg Tyr Ala Ser Thr Ile Gly Thr Leu Pro Ala Gly Trp Ser Tyr Ala

165 170 175

Thr Phe Trp Gln Tyr Ala Asp Ser Gly Ser Asn Pro Gly Asp Gln Asp

180 185 190

Tyr Phe Asn Gly Asp Ala Ala Gly Leu Lys Arg Leu Ala Thr Ser

195 200 205

<210> 56

<211> 207

<212> PRT

<213> 类生光盖伞(Deconica coprophila)

<400> 56

Leu Val His Ala Val Asp Ser Ser Ser Leu Val Ser Thr Ala Thr Phe

1 5 10 15

Ser Lys Ala Lys Ser Glu Gly Phe Thr Lys Ala Val Ile Arg Gly Tyr

20 25 30

Gln Glu Ala Cys Gly Ser Gly Gly Arg Val Asp Pro Asn Phe Val Gln

35 40 45

Thr Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Ile Thr Asn Ile Asp Thr Tyr

50 55 60

Trp Tyr Pro Cys Asn Gly Ser Gly Asn Ser Cys Lys Ser Tyr Ala Lys

65 70 75 80

Gln Ile Ala Gly Ile Ser Ala Thr Phe Asn Ala His Ser Met Lys Ile

85 90 95

Gly Arg Ile Trp Ile Asp Ile Glu Lys Asp Ser Ile Cys Asn Asn Trp

100 105 110

Asn Tyr Gly Thr Ser Gly Asn Arg Asp His Ala Lys Lys Leu Ile Thr

115 120 125

Ala Ile Lys Asn Ser Gly Phe Lys Tyr Gly Ile Tyr Ser Ser Pro Gly

130 135 140

Glu Trp Ser Thr Ile Phe Gly Ser Glu Ser Phe Asp Leu Asp Ser Gly

145 150 155 160

Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Trp Asn Asn Val Gln Thr Leu Thr Leu

165 170 175

Gly Thr His Phe Gly Gly Trp Thr Ser Ala His Gly His Gln Tyr Thr

180 185 190

Asp Lys Ser Ala Ser Gly Gln Phe Asp Leu Asn Val Phe Ser Ser

195 200 205

<210> 57

<211> 208

<212> PRT

<213> 微小根毛霉(Rhizomucor pusillus)

<400> 57

Tyr Glu Thr Gly Val Asp Val Ser Ala Leu Thr Ser Thr Ser Ala Trp

1 5 10 15

Ser Cys Ala Lys Lys Leu Gly Tyr Asp His Ala Ile Val Arg Cys Tyr

20 25 30

Ile Glu Ala Tyr Gly Gly Asn Pro Gly Gly Lys Ile Asp Ser Asn Cys

35 40 45

Phe Gln Asn Tyr Lys Asn Ala Lys Ala Gly Gly Phe Thr Ser Val Asp

50 55 60

Ile Tyr Met Phe Pro Cys Thr Gly Arg Ser Thr Cys Lys Ser Pro Ala

65 70 75 80

Ala Gln Val Lys Glu Val Val Asp Tyr Val Gly Ser Asn Lys Met Thr

85 90 95

Val Gly Arg Leu Trp Leu Asp Val Glu Ile Asp Pro Ser Ala Asn Asn

100 105 110

Trp Pro Ser Ala Ser Ser Ala Arg Ser Thr Leu Lys Ser Phe Lys Ser

115 120 125

Ala Leu Asp Ser Thr Gly Trp Lys Tyr Gly Ile Tyr Ser Ser Ala Ser

130 135 140

Gln Trp Ser Gln Ile Thr Gly Ser Ser Ser Trp Glu Leu Asp Ser Ser

145 150 155 160

Leu Pro Leu Trp Tyr Ala His Tyr Asp Ala Ser Leu Ser Phe Ser Asp

165 170 175

Phe Ser Pro Phe Gly Gly Trp Thr Lys Pro Thr Ile Lys Gln Tyr Ala

180 185 190

Gly Ser Val Ser Phe Cys Ser Ala Gly Trp Asp Lys Asn Tyr Tyr Gly

195 200 205

<210> 58

<211> 207

<212> PRT

<213> 半球盖菇(Stropharia semiglobata)

<400> 58

Leu Val Tyr Gly Val Asp Ser Ser Thr Leu Val Ser Thr Ala Thr Tyr

1 5 10 15

Ser Lys Ala Lys Ser Glu Gly Phe Thr Lys Ala Ile Ile Arg Gly Tyr

20 25 30

Gln Glu Ala Cys Gly Ser Gly Gly Arg Val Asp Pro Asn Phe Val Ala

35 40 45

Thr Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Ile Thr Asp Ile Asp Met Tyr

50 55 60

Trp Phe Pro Cys Asn Gly Ser Gly Asn Ser Cys Lys Ser Tyr Ala Lys

65 70 75 80

Gln Leu Ser Glu Ile Ala Asn Val Phe Ser Ala Asn Ser Met Lys Ile

85 90 95

Gly Thr Ile Trp Ile Asp Phe Glu Lys Asp Ser Gly Cys Asn Asn Trp

100 105 110

Asn Tyr Gly Thr Thr Gly Asn Leu Asn His Ala Lys Ala Leu Ile Ser

115 120 125

Ala Ile Lys Ala Thr Gly Phe Lys Phe Gly Ile Tyr Ser Ser Pro Gly

130 135 140

Glu Trp Gly Thr Leu Phe Gly Ser Thr Gly Val Val Leu Asp Ser Ser

145 150 155 160

Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Trp Asn Asn Val Lys Thr Leu Thr Leu

165 170 175

Gly Thr His Phe Gly Gly Trp Thr Lys Ala Val Gly His Gln Tyr Thr

180 185 190

Asp Val Ser Ala Ser Gly Gln Phe Asp Leu Asn Val Phe Ala Asn

195 200 205

<210> 59

<211> 207

<212> PRT

<213> 半球盖菇(Stropharia semiglobata)

<400> 59

Leu Val Tyr Gly Val Asp Ser Ser Thr Leu Val Ser Thr Ala Thr Tyr

1 5 10 15

Lys Lys Ala Lys Ser Glu Gly Phe Thr Lys Ala Ile Ile Arg Gly Tyr

20 25 30

Gln Glu Ala Cys Gly Ser Gly Gly Arg Val Asp Pro Asn Phe Val Ala

35 40 45

Thr Tyr Lys Asn Ala Arg Ala Ala Gly Ile Thr Asp Ile Asp Met Tyr

50 55 60

Trp Phe Pro Cys Asn Gly Ser Gly Asn Ser Cys Lys Ser Tyr Ala Lys

65 70 75 80

Gln Leu Ser Glu Ile Ala Asn Val Phe Ser Ala Asn Ser Met Lys Ile

85 90 95

Gly Thr Ile Trp Ile Asp Phe Glu Lys Asp Ser Gly Cys Asn Asn Trp

100 105 110

Asn Tyr Gly Thr Thr Gly Asn Leu Asn His Ala Lys Ala Leu Ile Ser

115 120 125

Ala Ile Lys Ala Thr Gly Phe Lys Phe Gly Ile Tyr Ser Ser Pro Gly

130 135 140

Glu Trp Gly Thr Leu Phe Gly Ser Thr Gly Val Val Leu Asp Ser Ser

145 150 155 160

Ala Pro Leu Trp Phe Ala Thr Trp Asn Asn Val Lys Thr Leu Thr Leu

165 170 175

Gly Thr His Phe Gly Gly Trp Thr Thr Ala Ala Gly His Gln Tyr Thr

180 185 190

Asp Val Ser Ser Ser Gly Gln Phe Asp Leu Asn Val Phe Ala Asn

195 200 205

<210> 60

<211> 207

<212> PRT

<213> 弗格斯毁丝霉(Myceliophthora fergusii)

<400> 60

Ala Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser His Trp Gln Ser Ser Val Asp Phe

1 5 10 15

Lys Ala Ala Tyr Asn Ser Gly Ala Arg Phe Val Ile Ile Lys Ala Thr

20 25 30

Glu Gly Thr Ser Phe Ile Asp Pro Lys Phe Ser Ser His Tyr Thr Gly

35 40 45

Ala Thr Asn Ala Gly Phe Ile Arg Gly Ala Tyr His Phe Ala His Pro

50 55 60

Gly Gln Ser Ser Gly Glu Ala Gln Ala Asp Tyr Phe Leu Ala His Gly

65 70 75 80

Gly Gly Trp Thr Pro Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Leu

85 90 95

Glu Ala Tyr Asn Ala Gly Glu Cys Trp Gly Leu Ser Gln Ser Ala Met

100 105 110

Val Ala Trp Ile Lys Ala Phe Ser Asp Arg Tyr His Ala Arg Thr Gly

115 120 125

Val Tyr Pro Met Leu Tyr Thr Asn Leu Ser Trp Trp Lys Thr Cys Thr

130 135 140

Gly Asn Ser Lys Ala Phe Val Asn Thr Asn Pro Leu Val Leu Ala Arg

145 150 155 160

Trp Ala Ser Ser Pro Gly Glu Ile Pro Gly Gly Trp Pro Trp Gln Thr

165 170 175

Ile Trp Gln Asn Ser Asp Ser Tyr Arg Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Ile

180 185 190

Phe Asn Gly Asp Met Asn Gln Leu Arg Arg Leu Ala Thr Ala Ala

195 200 205

<210> 61

<211> 204

<212> PRT

<213> 高山被孢霉(Mortierella alpina)

<400> 61

Ala Leu Pro Lys Gly Ile Asp Val Ser His Trp Gln Gly Asp Val Asn

1 5 10 15

Trp Asn Ser Val Lys Ala Ala Gly Ile Glu Phe Val Tyr Ile Lys Ala

20 25 30

Thr Glu Ser Ile Asn Tyr Ile Asp Ser Lys Phe Asp Ala Asn Tyr Val

35 40 45

Gly Ala Thr Asn Ala Gly Leu Ile Arg Gly Gly Tyr His Phe Ala Arg

50 55 60

Pro Ala Ala Ser Ser Gly Ala Val Gln Ala Asn Tyr Phe Leu Ala Asn

65 70 75 80

Gly Gly Gly Trp Ser Ser Asp Gly Ile Thr Leu Pro Gly Ala Leu Asp

85 90 95

Leu Glu Ala Gly Cys Ser Gly Leu Ser Gln Ala Ala Met Thr Ala Trp

100 105 110

Val Arg Asp Phe Ser Asp Thr Tyr His Ala Arg Thr Gly Arg Tyr Pro

115 120 125

Val Ile Tyr Thr Thr Thr Ser Trp Trp Lys Gln Cys Thr Gly Asn Ala

130 135 140

Ser Gly Phe Gln Asn Asn Asn Pro Leu Trp Ile Ala Arg Trp Ala Ser

145 150 155 160

Ser Ala Gly Glu Leu Pro Ala Gly Tyr Ala Phe His Thr Phe Trp Gln

165 170 175

Tyr Ala Asp Lys Gly Pro Asn Pro Gly Asp Gln Asp Tyr Phe Asn Gly

180 185 190

Asp Ser Ala Gly Leu Arg Arg Phe Ala Lys Gly Ser

195 200

<210> 62

<211> 216

<212> PRT

<213> 深酒色青霉(Penicillium atrovenetum)

<400> 62

Thr Pro Leu Glu Ser Arg Ala Ser Gly Val Gln Gly Phe Asp Ile Ser

1 5 10 15

Ser Tyr Gln Gly Thr Val Asp Phe Ala Gly Ala Tyr Ala Ala Gly Ala

20 25 30

Arg Phe Val Met Ile Lys Ala Thr Glu Gly Thr Thr Tyr Thr Asp Lys

35 40 45

Thr Phe Ser Ser His Tyr Glu Gly Ala Ser Ser Ala Gly Leu Ile Arg

50 55 60

Gly Gly Tyr His Phe Ala His Pro Asp Ser Ser Ser Gly Ala Lys Gln

65 70 75 80

Ala Glu Tyr Phe Leu Ala His Gly Gly Gly Trp Ser Asn Asp Gly Lys

85 90 95

Thr Leu Pro Gly Met Leu Asp Ile Glu Tyr Asn Pro Ser Gly Ala Thr

100 105 110

Cys Tyr Gly Ile Ser Lys Ser Ala Met Val Ala Trp Val Lys Asp Phe

115 120 125

Gly Glu Thr Tyr Lys Gly Lys Thr Gly Arg Tyr Pro Met Ile Tyr Thr

130 135 140

Thr Ala Asp Trp Trp Asn Thr Cys Thr Gly Gly Ser Thr Ala Phe Ser

145 150 155 160

Lys Asp Tyr Pro Leu Val Leu Ala Arg Tyr Ser Ser Ser Val Gly Thr

165 170 175

Ile Pro Gly Gly Trp Pro Tyr Gln Ser Phe Trp Gln Asn Ser Asp Lys

180 185 190

Tyr Thr Tyr Gly Gly Asp Ser Asp Leu Trp Asn Gly Ser Glu Ala Ser

195 200 205

Leu Lys Thr Phe Ala Lys Gly Ala

210 215

<210> 63

<211> 245

<212> PRT

<213> 囊状长毛盘菌(Trichophaea saccata)

<400> 63

Tyr Pro Val Lys Thr Asp Leu His Cys Arg Ser Ser Pro Ser Thr Ser

1 5 10 15

Ala Ser Ile Val Arg Thr Tyr Ser Ser Gly Thr Glu Val Gln Ile Gln

20 25 30

Cys Gln Thr Thr Gly Thr Ser Val Gln Gly Ser Asn Val Trp Asp Lys

35 40 45

Thr Gln His Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly His

50 55 60

Ser Gly Ile Phe Thr Thr Lys Cys Gly Ser Ser Ser Gly Gly Gly Ser

65 70 75 80

Cys Lys Pro Pro Pro Ile Asn Ala Ala Thr Val Ala Leu Ile Lys Glu

85 90 95

Phe Glu Gly Phe Val Pro Lys Pro Ala Pro Asp Pro Ile Gly Leu Pro

100 105 110

Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Lys Thr Lys Gly Cys Lys Glu Val

115 120 125

Pro Tyr Ser Phe Pro Leu Thr Gln Glu Thr Ala Thr Lys Leu Leu Gln

130 135 140

Ser Asp Ile Lys Thr Phe Thr Ser Cys Val Ser Asn Tyr Val Lys Asp

145 150 155 160

Ser Val Lys Leu Asn Asp Asn Gln Tyr Gly Ala Leu Ala Ser Trp Ala

165 170 175

Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Val Gln Thr Ser Ser Leu Ile Lys Arg

180 185 190

Leu Asn Ala Gly Glu Asn Pro Asn Thr Val Ala Ala Gln Glu Leu Pro

195 200 205

Lys Trp Lys Tyr Ala Gly Gly Lys Val Met Pro Gly Leu Val Arg Arg

210 215 220

Arg Asn Ala Glu Val Ala Leu Phe Lys Lys Pro Ser Ser Val Gln Ala

225 230 235 240

His Pro Pro Lys Cys

245

<210> 64

<211> 249

<212> PRT

<213> 嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilum)

<400> 64

Pro Ala Ser Ala Tyr Ala Ile Thr Gly Asp Asn Val Asn Cys Arg Ser

1 5 10 15

Gly Pro Gly Thr Ser Tyr Ala Val Lys Lys Val Tyr Lys Lys Gly Thr

20 25 30

Asp Val Lys Ile Ser Cys Gln Thr Thr Gly Thr Asn Ile Asn Gly Asn

35 40 45

Asn Leu Trp Asp Lys Thr Ser Asp Gly Cys Tyr Val Ser Asp Tyr Tyr

50 55 60

Val Lys Thr Gly Ser Asn Gly Tyr Val Thr Ser Lys Cys Ser Ser Ser

65 70 75 80

Gly Gly Ser Thr Cys Ala Ala Pro Lys Ser Asn Gln Ala Thr Val Asp

85 90 95

Leu Ile Ala Glu Phe Glu Gly Phe Arg Ala Asn Ile Tyr Thr Asp Ala

100 105 110

Ala Gly Tyr Ala Thr Val Gly Tyr Gly His Lys Cys Gln Lys Ala Lys

115 120 125

Cys Ala Glu Val Lys Tyr Lys Ile Pro Leu Ser Lys Ala Asp Gly Lys

130 135 140

Lys Leu Leu Ala Asp Asp Met Arg Ser Phe Glu Val Cys Ile Thr Asn

145 150 155 160

Met Leu Asn Ser Lys Ala Lys Leu Asn Tyr Asn Gln Phe Gly Ala Leu

165 170 175

Val Ser Trp Ser Phe Asn Val Gly Cys Gly Ala Ala Lys Ser Ser Thr

180 185 190

Leu Ile Lys Arg Leu Asn Asn Gly Glu Asn Val Asn Lys Val Leu Ser

195 200 205

Glu Glu Leu Pro Lys Trp Asn Lys Ala Gly Gly Lys Val Leu Gln Gly

210 215 220

Leu Val Arg Arg Arg Ala Ala Glu Val Ala Leu Ala Lys Lys Ser Gly

225 230 235 240

Ser Ser Gln Ala Leu Pro Val Lys Cys

245

<210> 65

<211> 248

<212> PRT

<213> 哈茨木霉(Trichoderma harzianum)

<400> 65

Tyr Pro Ile Thr Gly Asp Val Val Asn Cys Arg Thr Gly Pro Gly Thr

1 5 10 15

Ser Tyr Ala Ile Lys Lys Ser Tyr Lys Lys Asn Gln Asp Ile Ser Ile

20 25 30

Ser Cys Gln Thr Ala Gly Thr Ser Val Asn Gly Asn Ser Ile Trp Asp

35 40 45

Lys Thr Ala Asp Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly

50 55 60

Ser Ser Gly Tyr Val Thr Lys Lys Cys Thr Ala Ser Ser Gly Gly Gly

65 70 75 80

Ser Ser Ser Ser Tyr Cys Lys Thr Ile Asn Ser Ala Gly Val Asp Leu

85 90 95

Ile Ala Lys Trp Glu Gly Phe Val Ala Ser Pro Lys Pro Asp Pro Ile

100 105 110

Gly Leu Pro Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Gln Gln Lys Asn Cys

115 120 125

Arg Glu Val Lys Tyr Lys Phe Pro Leu Thr Lys Thr Thr Ala Lys Glu

130 135 140

Leu Leu Leu Asp Asp Leu Pro Lys Tyr Thr Lys Cys Leu Ala Asp Tyr

145 150 155 160

Leu Asn Asp Lys Pro Lys Leu Asn Ala Asn Gln Trp Ala Ala Leu Thr

165 170 175

Ser Trp Val Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Ala Lys Thr Ser Thr Leu

180 185 190

Val Lys Arg Leu Asn Asn Gly Glu Ala Ala Asn Thr Val Ala Ala Glu

195 200 205

Glu Leu Pro Lys Trp Arg Met Ala Gly Gly Lys Val Leu Pro Gly Leu

210 215 220

Glu Ala Arg Arg Lys Asp Glu Val Lys Leu Phe Lys Thr Ala Ser Ser

225 230 235 240

Lys Gln Ala Tyr Pro Lys Cys Gln

245

<210> 66

<211> 245

<212> PRT

<213> Trichophaea minuta

<400> 66

Tyr Pro Ala Lys Val Asp Leu Arg Cys Arg Ser Ser Pro Ser Thr Ser

1 5 10 15

Ala Ser Val Val Arg Thr Tyr Ser Lys Gly Ser Glu Ile Gln Ile Ser

20 25 30

Cys Gln Thr Thr Gly Thr Ser Val Glu Gly Ser Asn Val Trp Asp Lys

35 40 45

Thr Gln His Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly His

50 55 60

Ser Gly Ile Phe Thr Thr Lys Cys Gly Ser Ser Ser Gly Gly Gly Ser

65 70 75 80

Cys Lys Pro Pro Pro Ile Asn Ala Ala Thr Val Ala Leu Ile Lys Glu

85 90 95

Phe Glu Gly Phe Val Ala Lys Pro Ala Pro Asp Pro Ile Gly Leu Pro

100 105 110

Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Lys Thr Lys Gly Cys Lys Glu Val

115 120 125

Pro Tyr Ser Phe Pro Leu Thr Gln Thr Thr Ala Thr Lys Leu Leu Gln

130 135 140

Ser Asp Ile Lys Thr Phe Thr Ser Cys Val Ser Asn Tyr Val Lys Asp

145 150 155 160

Ser Val Lys Leu Asn Asp Asn Gln Phe Gly Ala Leu Ser Ser Trp Ala

165 170 175

Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Ile Gln Thr Ser Ser Leu Ile Lys Arg

180 185 190

Leu Asn Ala Gly Glu Asn Pro Asn Thr Val Ala Ala Gln Glu Leu Pro

195 200 205

Lys Trp Lys Tyr Ala Gly Gly Lys Val Leu Pro Gly Leu Val Arg Arg

210 215 220

Arg Lys Ala Glu Val Ala Leu Phe Lys Lys Pro Ser Ser Val Gln Ala

225 230 235 240

His Pro Pro Lys Cys

245

<210> 67

<211> 249

<212> PRT

<213> 毛壳菌属种属(Chaetomium sp.)ZY287

<400> 67

Tyr Lys Ile Ser Gly Ser Ser Val Asn Cys Arg Ser Gly Pro Gly Thr

1 5 10 15

Asn Tyr Pro Val Lys Lys Thr Tyr Ala Asn Gly Asp Glu Val Thr Ile

20 25 30

Ser Cys Gln Thr Thr Gly Thr Asn Val Glu Gly Asn Asn Ile Trp Asp

35 40 45

Lys Thr Gln His Gly Cys Tyr Val Ala Asp Lys Tyr Val Lys Thr Gly

50 55 60

Lys Asp Gly Phe Val Thr Lys Lys Cys Gly Ser Ser Gly Gly Gly Gly

65 70 75 80

Gly Gly Lys Thr Cys Lys Ala Pro Lys Ser Asn Ala Ala Thr Val Asp

85 90 95

Leu Ile Ala Ser Phe Glu Gly Phe Arg Ala Asn Ile Tyr Thr Asp Ala

100 105 110

Thr Gly His Pro Thr Val Gly Tyr Gly His Met Cys Thr Lys Ser Arg

115 120 125

Cys Ala Glu Val Lys Tyr Lys Ile Pro Leu Ser Lys Ala Asp Gly Lys

130 135 140

Lys Leu Leu Ala Asp Asp Met Ala Lys Phe Glu Lys Cys Ile Lys Glu

145 150 155 160

Met Leu Asn Ser Lys Ala Lys Leu Asn Leu Asn Gln Tyr Gly Ala Leu

165 170 175

Val Ser Trp Ser Phe Asn Val Gly Cys Gly Ala Ala Lys Gly Ser Gln

180 185 190

Leu Val Ser Arg Leu Asn Lys Gly Glu Asn Pro Asn Thr Val Leu Ser

195 200 205

Asn Glu Leu Pro Lys Trp Val His Gly Asn Gly Lys Val Leu Pro Gly

210 215 220

Leu Val Arg Arg Arg Asn Ala Glu Ile Ala Leu Ala Lys Lys Ser Gly

225 230 235 240

Ser Gly Ala Ala Leu Pro Val Lys Cys

245

<210> 68

<211> 245

<212> PRT

<213> 被孢霉属种属(Mortierella sp.)ZY002

<400> 68

Tyr Pro Ile Thr Gly Ala Asp Ala Leu His Cys Arg Ser Gly Pro Gly

1 5 10 15

Thr Ser Tyr Pro Ile Gln Lys Thr Leu Arg Pro Pro Gln Asp Ile Lys

20 25 30

Ile Gln Cys Gln Glu Pro Gly Thr Val Val Asn Gly Val Ser Leu Trp

35 40 45

Asp Lys Thr Gln Phe Gly Cys Tyr Val Ser Asp Tyr Tyr Val Lys Thr

50 55 60

Gly Thr Gly Asn Tyr Val Ala Pro Arg Cys Asn Ser Gly Gly Ser Ser

65 70 75 80

Ser Ala Cys Thr Gly Leu Asn Asp Ala Gly Ile Asn Leu Ile Lys Glu

85 90 95

Phe Glu Gly Phe Val Pro Arg Pro Ala Pro Asp Pro Ile Gly Leu Pro

100 105 110

Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Gln Thr Lys Gly Cys Gly Glu Val

115 120 125

Lys Tyr Ser Phe Pro Leu Thr Thr Ala Thr Ala Thr Ala Leu Leu Lys

130 135 140

Asp Asp Leu Pro Lys Tyr Thr Ser Cys Leu Ala Lys Ala Leu Asn Gly

145 150 155 160

Lys Pro Lys Leu Asn Lys Asn Gln Trp Ala Ala Leu Ala Ser Trp Thr

165 170 175

Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Met Lys Ser Ser Ser Leu Ile Thr Arg

180 185 190

Leu Asn Ala Gly Gln Asn Pro Asn Thr Val Ala Thr Glu Glu Leu Pro

195 200 205

Lys Trp Lys Leu Ala Gly Gly Lys Val Leu Pro Gly Leu Val Arg Arg

210 215 220

Arg Ala Ala Glu Val Lys Leu Phe Lys Thr Ala Asn Ser Ser Gln Gly

225 230 235 240

Tyr Pro Lys Cys Ala

245

<210> 69

<211> 247

<212> PRT

<213> 绿僵菌属种属(Metarhizium sp.)XZ2431

<400> 69

Tyr Pro Val Ser Ala Asp Ser Leu Asn Cys Arg Ala Glu Pro Asn Thr

1 5 10 15

Ser Ser Ala Ile Lys Thr Thr Tyr Lys Lys Gly Glu Asp Val Lys Ile

20 25 30

Ser Cys Gln Thr Glu Gly Pro Ser Ile Asn Gly Asn Thr Ile Trp Asp

35 40 45

Lys Thr Gln Asp Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly

50 55 60

Ser Ser Gly Tyr Val Thr Gly Lys Cys Gly Gly Ser Ser Pro Pro Ser

65 70 75 80

Gly Ser Gly Phe Cys Lys Thr Val Asn Lys Ala Gly Leu Asp Leu Ile

85 90 95

Thr Lys Trp Glu Gly Phe Val Ser Ser Pro Arg Gly Asp Pro Ile Gly

100 105 110

Leu Pro Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Gln Lys Lys Gly Cys Ala

115 120 125

Glu Val Lys Tyr Lys Phe Pro Leu Thr Lys Ala Thr Ala Leu Gln Leu

130 135 140

Leu Asn Asp Asp Leu Pro Lys Tyr Thr Gly Cys Leu Gly Lys Leu Leu

145 150 155 160

Asn Ser Lys Val Lys Leu Asn Asp Asn Gln Trp Ala Ala Leu Thr Ser

165 170 175

Trp Val Phe Asn Val Gly Cys Gly Asn Ala Gln Ser Ser Ser Leu Val

180 185 190

Arg Arg Leu Asn Asn Gly Glu Asn Pro Asn Thr Val Ala Pro Ser Glu

195 200 205

Leu Pro Lys Trp Lys Met Ala Gly Gly Lys Val Leu Glu Gly Leu Val

210 215 220

Lys Arg Arg Ala Asp Glu Val Arg Leu Phe Lys Val Ser Ser Ser Lys

225 230 235 240

Gly Ala Phe Pro Lys Cys Gln

245

<210> 70

<211> 250

<212> PRT

<213> Geomyces auratus

<400> 70

Ala Phe Pro Ile Thr Gly Ser Thr Val Asn Cys Arg Thr Gly Pro Gly

1 5 10 15

Thr Ser His Gly Val Lys Thr Ser Tyr Lys Lys Gly His Glu Val Thr

20 25 30

Val Ser Cys Gln Thr Gly Gly Thr Ser Val Asn Gly Asn Ser Ile Trp

35 40 45

Asp Lys Thr Ser Asp Gly Cys Tyr Val Ala Asp Tyr Tyr Val Lys Thr

50 55 60

Gly Ser Ser Gly Tyr Val Lys Pro Lys Cys Gly Ser Ser Ser Gly Gly

65 70 75 80

Gly Gly Gly Ser Ser Cys Gly Ala Pro Lys Ser Asn Ala Ala Thr Val

85 90 95

Asn Leu Ile Ala Glu Phe Glu Gly Phe Val Ser His Val Tyr Thr Asp

100 105 110

Ala Thr Gly His Pro Thr Val Gly Tyr Gly His Leu Cys Ser Asn Ser

115 120 125

Lys Cys Ser Gly Ile Gly Tyr Ser Ile Pro Ile Ser Lys Ala Asn Ala

130 135 140

Lys Lys Leu Leu Ala Lys Asp Met Ala Ile Ala Glu Lys Cys Ile Thr

145 150 155 160

Ala Met Ile Asn Lys Ser Arg Thr Leu Asn Leu Asn Gln Tyr Gly Ala

165 170 175

Leu Val Ser Trp Ala Phe Asn Glu Gly Cys Gly Ala Ala Lys Ser Ser

180 185 190

Thr Leu Ile Lys Arg Ile Asn Asn Gly Glu Lys Pro Ser Thr Val Ile

195 200 205

Pro Gln Glu Leu Pro Lys Trp Val Tyr Gly Gly Ser Ser Val Leu Pro

210 215 220

Gly Leu Val Arg Arg Arg Asn Ala Glu Ile Ala Leu Ala Lys Lys Ala

225 230 235 240

Thr Ser Ser Lys Ala Leu Pro Ala His Cys

245 250

<210> 71

<211> 240

<212> PRT

<213> Ilyonectria rufa

<400> 71

Tyr Lys Ile Thr Gly Asp Asn Val Asn Cys Arg Ser Gly Pro Gly Thr

1 5 10 15

Ser Tyr Ser Val Lys Arg Ser Phe Lys Lys Gly Thr Asp Val Thr Leu

20 25 30

Ser Cys Gln Thr Thr Gly Glu Asn Val Leu Gly Thr Ser Ile Trp Asp

35 40 45

Lys Thr Ser Tyr Gly Cys Tyr Val Ser Asp Tyr Tyr Val Lys Thr Gly

50 55 60

Ser Ser Gly Phe Val Val Lys Lys Cys Gly Thr Cys Gly Ala Pro Lys

65 70 75 80

Ser Asn Ala Ala Thr Val Asn Leu Ile Ser Asp Phe Glu Gly Phe Arg

85 90 95

Ala Asn Ile Tyr Lys Asp Ala Ala Gly Tyr Pro Thr Val Gly Tyr Gly

100 105 110

His Leu Cys Ser Asn Ser Arg Cys Thr Asp Val Pro Tyr Ser Ile Pro

115 120 125

Leu Ser Lys Ala Asn Gly Lys Asn Leu Leu Ala Thr Asp Met Thr Lys

130 135 140

Phe Glu Lys Cys Ile Thr Ala Met Val Ser Ser Ser Val Thr Leu Asn

145 150 155 160

Lys Asn Gln Tyr Gly Ala Leu Val Ser Trp Ala Phe Asn Met Gly Cys

165 170 175

Gly Ala Thr Lys Thr Ser Thr Leu Ile Lys Arg Leu Asn Gln Gly Gln

180 185 190

Asn Val Asn Thr Val Leu Ser Thr Glu Leu Pro Lys Trp Val Tyr Ala

195 200 205

Gly Gly Lys Lys Leu Asn Gly Leu Val Arg Arg Arg Asn Ala Glu Ile

210 215 220

Ala Leu Ala Lys Lys Lys Thr Thr Glu Lys Ala Leu Pro Asn Lys Cys

225 230 235 240

<210> 72

<211> 188

<212> PRT

<213> 拟诺卡氏菌属种属(Nocardiopsis sp.)NRRL 18262

<400> 72

Ala Asp Ile Ile Gly Gly Leu Ala Tyr Thr Met Gly Gly Arg Cys Ser

1 5 10 15

Val Gly Phe Ala Ala Thr Asn Ala Ala Gly Gln Pro Gly Phe Val Thr

20 25 30

Ala Gly His Cys Gly Arg Val Gly Thr Gln Val Thr Ile Gly Asn Gly

35 40 45

Arg Gly Val Phe Glu Gln Ser Val Phe Pro Gly Asn Asp Ala Ala Phe

50 55 60

Val Arg Gly Thr Ser Asn Phe Thr Leu Thr Asn Leu Val Ser Arg Tyr

65 70 75 80

Asn Thr Gly Gly Tyr Ala Ala Val Ala Gly His Asn Gln Ala Pro Ile

85 90 95

Gly Ser Ser Val Cys Arg Ser Gly Ser Thr Thr Gly Trp His Cys Gly

100 105 110

Thr Ile Gln Ala Arg Gly Gln Ser Val Ser Tyr Pro Glu Gly Thr Val

115 120 125

Thr Asn Met Thr Arg Thr Thr Val Cys Ala Glu Pro Gly Asp Ser Gly

130 135 140

Gly Ser Tyr Ile Ser Gly Thr Gln Ala Gln Gly Val Thr Ser Gly Gly

145 150 155 160

Ser Gly Asn Cys Arg Thr Gly Gly Thr Thr Phe Tyr Gln Glu Val Thr

165 170 175

Pro Met Val Asn Ser Trp Gly Val Arg Leu Arg Thr

180 185

<210> 73

<211> 17

<212> PRT

<213> 白色拟诺卡氏菌(Nocardiopsis alba)

<400> 73

Ala Asp Ile Ile Gly Gly Leu Ala Tyr Thr Met Gly Gly Arg Cys Ser

1 5 10 15

Val

<210> 74

<211> 314

<212> PRT

<213> 霍内克芽胞杆菌(Bacillus horneckiae)

<400> 74

Glu Val Thr Ala Thr Pro Ser Thr Gln Thr Pro Trp Gly Ile Lys Ser

1 5 10 15

Ile Tyr Asn Asp Gln Ser Ile Thr Lys Thr Thr Gly Gly Ser Gly Ile

20 25 30

Lys Val Ala Val Leu Asp Thr Gly Val His Thr Gly His Ile Asp Leu

35 40 45

Ala Gly Ser Ser Glu Gln Cys Lys Asp Phe Thr Gln Ser Asn Pro Leu

50 55 60

Val Asn Gly Ser Cys Thr Asp Arg Gln Gly His Gly Thr His Val Ala

65 70 75 80

Gly Thr Val Leu Ala His Gly Gly Ser Asp Gly Gln Gly Val Tyr Gly

85 90 95

Val Ala Pro Gln Ala Lys Leu Trp Ala Tyr Lys Val Leu Gly Asp Asn

100 105 110

Gly Ser Gly Tyr Ser Asp Asp Ile Ala Ala Ala Ile Arg His Val Ala

115 120 125

Asp Glu Ala Ser Arg Thr Gly Ser Lys Val Val Ile Asn Met Ser Leu

130 135 140

Gly Ser Ser Gly Lys Asp Ser Leu Ile Ala Ser Ala Val Asp Tyr Ala

145 150 155 160

Tyr Gly Lys Gly Val Leu Ile Val Ala Ala Ala Gly Asn Ser Gly Ser

165 170 175

Gly Ser Asn Thr Ile Gly Tyr Pro Ala Ala Leu Val Asn Ala Val Ala

180 185 190

Val Ala Ala Leu Glu Asn Val Gln Gln Asn Gly Thr Tyr Arg Val Ala

195 200 205

Asn Phe Ser Ser Arg Gly Asn Pro Ala Thr Ala Gly Asp Phe Arg Ile

210 215 220

Gln Glu Arg Asp Val Glu Val Ser Ala Pro Gly Ala Ser Val Glu Ser

225 230 235 240

Thr Trp Tyr Asn Gly Gly Tyr Asn Thr Ile Ser Gly Thr Ser Met Ala

245 250 255

Thr Pro His Val Ala Gly Leu Ala Ala Lys Ile Trp Ser Ser Asn Ser

260 265 270

Ser Leu Ser His Ser Gln Leu Arg Thr Glu Leu Gln Asn Arg Ala Lys

275 280 285

Val Tyr Asp Ile Lys Gly Gly Ile Gly Ala Gly Thr Gly Asp Asp Tyr

290 295 300

Ala Ser Gly Phe Gly Tyr Pro Arg Val Lys

305 310

<210> 75

<211> 311

<212> PRT

<213> 芽孢杆菌属种属(Bacillus sp.)

<400> 75

Ala Val Pro Ser Thr Gln Thr Pro Trp Gly Ile Lys Ser Ile Tyr Asn

1 5 10 15

Asp Gln Ser Ile Thr Lys Thr Thr Gly Gly Ser Gly Ile Lys Val Ala

20 25 30

Val Leu Asp Thr Gly Val Tyr Thr Ser His Leu Asp Leu Ala Gly Ser

35 40 45

Ala Glu Gln Cys Lys Asp Phe Thr Gln Ser Asn Pro Leu Val Asp Gly

50 55 60

Ser Cys Thr Asp Arg Gln Gly His Gly Thr His Val Ala Gly Thr Val

65 70 75 80

Leu Ala His Gly Gly Ser Asn Gly Gln Gly Val Tyr Gly Val Ala Pro

85 90 95

Gln Ala Lys Leu Trp Ala Tyr Lys Val Leu Gly Asp Asn Gly Ser Gly

100 105 110

Tyr Ser Asp Asp Ile Ala Ala Ala Ile Arg His Val Ala Asp Glu Ala

115 120 125

Ser Arg Thr Gly Ser Lys Val Val Ile Asn Met Ser Leu Gly Ser Ser

130 135 140

Ala Lys Asp Ser Leu Ile Ala Ser Ala Val Asp Tyr Ala Tyr Gly Lys

145 150 155 160

Gly Val Leu Ile Val Ala Ala Ala Gly Asn Ser Gly Ser Gly Ser Asn

165 170 175

Thr Ile Gly Phe Pro Gly Gly Leu Val Asn Ala Val Ala Val Ala Ala

180 185 190

Leu Glu Asn Val Gln Gln Asn Gly Thr Tyr Arg Val Ala Asp Phe Ser

195 200 205

Ser Arg Gly Asn Pro Ala Thr Ala Gly Asp Tyr Ile Ile Gln Glu Arg

210 215 220

Asp Ile Glu Val Ser Ala Pro Gly Ala Ser Val Glu Ser Thr Trp Tyr

225 230 235 240

Thr Gly Gly Tyr Asn Thr Ile Ser Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His

245 250 255

Val Ala Gly Leu Ala Ala Lys Ile Trp Ser Ala Asn Thr Ser Leu Ser

260 265 270

His Ser Gln Leu Arg Thr Glu Leu Gln Asn Arg Ala Lys Val Tyr Asp

275 280 285

Ile Lys Gly Gly Ile Gly Ala Gly Thr Gly Asp Asp Tyr Ala Ser Gly

290 295 300

Phe Gly Tyr Pro Arg Val Lys

305 310

<210> 76

<211> 311

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 蛋白工程化变体

<400> 76

Ala Val Pro Ser Thr Gln Thr Pro Trp Gly Ile Lys Ser Ile Tyr Asn

1 5 10 15

Asp Gln Ser Ile Thr Lys Thr Thr Gly Gly Lys Gly Ile Lys Val Ala

20 25 30

Val Leu Asp Thr Gly Val Tyr Thr Ser His Leu Asp Leu Ala Gly Ser

35 40 45

Ala Glu Gln Cys Lys Asp Phe Thr Gln Ser Asn Pro Leu Val Asp Gly

50 55 60

Ser Cys Thr Asp Arg Gln Gly His Gly Thr His Val Ala Gly Thr Val

65 70 75 80

Leu Ala His Gly Gly Ser Asn Gly Gln Gly Val Tyr Gly Val Ala Pro

85 90 95

Gln Ala Lys Leu Trp Ala Tyr Lys Val Leu Gly Asp Lys Gly Glu Gly

100 105 110

Tyr Ser Asp Asp Ile Ala Ala Ala Ile Arg His Val Ala Asp Glu Ala

115 120 125

Ser Arg Thr Gly Ser Lys Val Val Ile Asn Met Ser Leu Gly Ser Ser

130 135 140

Ala Lys Asp Ser Leu Ile Ala Ser Ala Val Asp Tyr Ala Tyr Gly Lys

145 150 155 160

Gly Val Leu Ile Val Ala Ala Ala Gly Asn Glu Gly Pro Lys Pro Asn

165 170 175

Thr Ile Gly Tyr Pro Ala Gly Phe Val Asn Ala Val Ala Val Ala Ala

180 185 190

Leu Glu Asn Val Gln Glu Lys Gly Thr Tyr Arg Val Ala Asp Phe Ser

195 200 205

Ser Arg Gly Asn Pro Ala Thr Ala Gly Asp Tyr Ile Ile Gln Glu Arg

210 215 220

Asp Ile Glu Val Ser Ala Pro Gly Ala Ser Val Glu Ser Thr Trp Tyr

225 230 235 240

Thr Gly Gly Tyr Asn Thr Ile Ser Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His

245 250 255

Val Ala Gly Leu Ala Ala Lys Ile Trp Ser Ala Asn Thr Ser Leu Ser

260 265 270

His Ser Gln Leu Arg Thr Glu Leu Gln Asn Arg Ala Lys Val Tyr Asp

275 280 285

Ile Lys Gly Gly Ile Gly Ala Gly Pro Gly Asp Asp Tyr Ala Ser Gly

290 295 300

Phe Gly Tyr Pro Arg Val Lys

305 310

<210> 77

<211> 307

<212> PRT

<213> 里氏木霉(Trichoderma reesei)

<400> 77

Met Arg Pro Ser Gly Phe Leu Ala Val Leu Ser Thr Ala Leu Val Gly

1 5 10 15

Tyr Ala Ala Ala Lys Asp Ala Pro Val Val Ile Asp Asn Pro Gln Gly

20 25 30

Val Glu Phe Lys Ala Ser Leu Pro Lys Lys Pro Phe Phe Ala Gly Ala

35 40 45

Ala Leu Val Gly Asn Val Lys Gly Ser Val Ser Ala Thr Ala Gly Pro

50 55 60

Ala Gly Lys Gly Val Arg Phe Arg Val Gln Phe Glu Asn Leu Pro Lys

65 70 75 80

Thr Gly Gly Pro Phe Leu Tyr His Ile His Glu Glu Pro Ala Val Asn

85 90 95

Gly Asn Cys Thr Ser Thr Leu Ala His Leu Asp Pro Tyr His Arg Gly

100 105 110

Glu Thr Pro Ala Cys Asn Ala Ser Glu Pro Gln Thr Cys Gln Val Gly

115 120 125

Asp Leu Ser Gly Lys Tyr Gly Lys Ile Thr Ser Asp Pro Phe Val Ala

130 135 140

Glu Tyr Phe Asp Leu Tyr Thr Ser Leu Gln Pro Gly Ser Pro Ala Phe

145 150 155 160

Phe Gly Asn Arg Ser Ile Val Ile His Tyr Ala Asn Lys Thr Arg Leu

165 170 175

Thr Cys Ala Asn Phe Ala Lys Leu Pro Val Pro Ala Ala Thr Thr Val

180 185 190

Pro Ser Thr Thr Gly Ala His His Thr Ala Ile His Gly Pro Leu Ala

195 200 205

Thr Gly Gly Ala Gln His Asn Leu Thr Gly Ser His Asn Thr Thr Gly

210 215 220

His His Asn Phe Thr Ser Pro His Arg Thr Thr Gly Ala Ala Ser Pro

225 230 235 240

Ser Asp Val Tyr Thr Leu Thr Ser Val Val Thr Val Pro Gly Ser Pro

245 250 255

Thr Thr Ser Ser Ser Leu Thr Thr Thr Asp Asp Ala Gly Ser Gly Gly

260 265 270

Ala Ser Ala Thr Ser Ser Val Val Pro Phe Pro Gly Ala Ala Ser Gly

275 280 285

Asn Arg Val Ser Leu Ser Leu Leu Ser Gly Val Val Ala Ala Ile Phe

290 295 300

Phe Ser Leu

305

<210> 78

<211> 206

<212> PRT

<213> 杂色曲霉(spergillus versicolor)

<400> 78

Met Asn Leu Lys Phe Leu Pro Ala Ala Val Leu Gly Leu Leu Ile Ser

1 5 10 15

Thr Thr Ala Ala Gln Asp Asn Asn Ala Asp Thr Thr Asp Thr Asp Thr

20 25 30

Asn Ala Pro Val Ile Thr Asp Asn Glu Pro Leu Ser Phe His His Ala

35 40 45

Ser Leu Leu Lys Lys Glu Asn Thr Thr Val Tyr Gly Ala Ile Thr Ile

50 55 60

Thr Thr Arg Arg Glu Ser Ala Ala Val Gln Val Asp Val Ser Ile Gly

65 70 75 80

Gly Ile Pro Glu Gly Glu Tyr Leu Asn Tyr His Ile His Ala Ala Arg

85 90 95

Val Pro Asp Asp Gly Asn Cys Tyr Leu Thr Gly Ala His Leu Asp Pro

100 105 110

His Gly Arg Gly Gln Glu Pro Pro Cys Thr Ile Thr Ala Pro Gln Thr

115 120 125

Cys Glu Val Gly Asp Leu Ser Gly Lys His Gly Pro Ala Trp Ala Pro

130 135 140

Ala Gly Glu Glu Phe Arg Ala Thr Tyr Ser Asp Phe Phe Leu Ala Asn

145 150 155 160

Thr Pro Gly Asp Asp Ala Tyr Tyr Gly Asp Leu Ser Trp Val Val His

165 170 175

Gly Ser Asn Gly Asp Arg Leu Thr Cys Gly Asn Phe Asp Gly Phe Ser

180 185 190

Gly Gly Gly Phe Gly Asn Trp Gly Gly Gln Lys Ser Lys Ala

195 200 205

<210> 79

<211> 154

<212> PRT

<213> 弯头曲霉(Aspergillus deflectus)

<400> 79

Met Ala Ala Val Phe Ala Ile Ala Asn Ile Thr Gly Ile Val Ser Gly

1 5 10 15

Ile Val Ser Phe Ser Gln Ala Ser Pro Gly Thr Pro Val Ser Val Gly

20 25 30

Gly Val Leu Gln Gly Leu Ala Pro Gly Leu His Gly Phe His Val His

35 40 45

Glu Ser Pro Ile Ser Asn Gly Asp Cys Ala Thr Ala Gly Ser His Phe

50 55 60

Asn Pro Phe His Val Asn His Gly Gly Pro Thr Ala Glu Val Arg His

65 70 75 80

Val Gly Asp Leu Gly Asn Ile Gln Ala Asp Asp Asn Gly Phe Ser Ile

85 90 95

Leu Asn Ile Gln Asp Thr His Ile Gln Leu Ser Gly Glu Gln Asn Ile

100 105 110

Leu Gly Leu Ser Val Val Ile His Ala Asp Pro Asp Asp Leu Gly Leu

115 120 125

Gly Gly Tyr Pro Asp Ser Leu Thr Thr Gly His Ala Gly Ala Arg Val

130 135 140

Ala Cys Ala Asp Ile Val Val Pro Gly Val

145 150

<210> 80

<211> 188

<212> PRT

<213> 埃及曲霉(Aspergillus egyptiacus)

<400> 80

Met Tyr Phe Lys Val Phe Thr Gly Ala Phe Leu Gly Leu Val Leu Ala

1 5 10 15

Val Ser Ala Gln Asp Ser Ser Thr His Ala Pro Val Ile Thr Asn Asn

20 25 30

Met Pro Ile Ser Leu Tyr Arg Ala Thr Leu Leu Gln Lys Asp Asn Thr

35 40 45

Thr Val Tyr Gly Gly Ile Phe Ile Gly Ser Gln Gly Ser Glu Ser Ala

50 55 60

Ser Gln Ile Asp Ile Phe Leu Gly Gly Ile Pro Glu Gly Glu His Leu

65 70 75 80

Asn Tyr His Ile His Gln Tyr Pro Val Pro Glu Asn Gly Asn Cys Tyr

85 90 95

Gln Thr Gly Ala His Leu Asp Pro Tyr Gly Arg Gly Gln Thr Pro Pro

100 105 110

Cys Asp Ile Thr Ala Pro His Thr Cys Glu Val Gly Asp Ile Ser Gly

115 120 125

Lys His Gly Pro Ala Phe Ala Pro Pro Gly Glu Val Phe Ser Ala Ser

130 135 140

Phe Pro Asp Phe Phe Leu Ser Asn Asn Asp Asp Lys Pro Ala Phe Phe

145 150 155 160

Gly Asn Arg Ser Phe Val Val His Gly Ser Gly Gly Glu Arg Leu Thr

165 170 175

Cys Gly Asn Phe Glu Glu Val Asp Ile Ser Asn Asp

180 185

<210> 81

<211> 1049

<212> DNA

<213> 里氏木霉(Trichoderma reesei)

<220>

<221> 基因

<222> 1..1049

<400> 81

atgcggccgt ctgggttcct ggcggtcctt tccaccgccc tcgttggcta tgccgccgcg 60

aaagacgctc ctgttgtcat tgacaatcct caaggcgtcg agttcaaggc cagtctgccc 120

aagaagccct ttttcgccgg cgctgcgctg gtgggcaatg tcaagggatc ggtctctgct 180

acggctggtc ctgctggcaa gggcgtccgg ttcagagtcc agtttgaaaa cttgcccaag 240

acgggcggtc ctttttgtga gtcctcttct tgctctcgac tactttctgt gtttcatctc 300

ttgtctccgg tctcacttca tctttccggt caatggctat gtgtgtgcgc cctcaaagta 360

gctaaccaat gcccgtatgc agtgtaccac atccacgagg agccggccgt caatggcaac 420

tgtacctcaa cactggccca tctggacccg taccatcgcg gcgagacacc tgcctgcaat 480

gcttccgagc cccagacgtg ccaggtcggt gatctgagcg gaaagtacgg caaaatcacg 540

tcggatccct tcgtggccga gtactttgac ctctacacgt ctctccagcc cggcagccca 600

gccttcttcg gcaaccgatc aatcgtgatc cattacgcaa acaagacgcg gctgacgtgc 660

gccaactttg ccaagctgcc ggtgcccgcc gcaacgacgg tccccagcac caccggtgct 720

catcacactg ccattcatgg gcccctggct accggtggcg ctcaacataa cctcaccggc 780

tctcacaaca ccacaggcca ccacaacttc acgagccccc atcgcaccac aggcgctgcc 840

tccccctcag acgtctacac cctcaccagc gtcgtcacgg tccctggcag tcctaccacc 900

tcgtcgagcc tcaccaccac cgacgacgct gggagtggtg gtgccagcgc cacgtcatct 960

gttgttccct ttccgggtgc agcatcggga aacagagtgt ccctttccct gctgagcggt 1020

gttgtagccg ccatcttctt ctccctgtg 1049

Claims (30)

1.一种减少动物的胃肠道(GIT)中的肠出血性大肠杆菌(EHEC)、致肠病性大肠杆菌(EPEC)和禽致病性大肠杆菌(APEC)的外源性肠上皮细胞清除基因座(LEE)基因和外源性非LEE致病基因的群体的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述外源性LEE基因和非LEE致病基因的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；

优选地，其中所述N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；

优选地其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且

优选地其中所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ IDNO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ IDNO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

2.根据权利要求1所述的方法，其中外源性LEE基因和非LEE致病基因的所述群体被测量为在所述动物的所述微生物群系内检测到的所述LEE基因和非LEE基因的组合拷贝数与在所述微生物群系内检测到的基因的总拷贝数的比率％。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述微生物群系是从所述动物的粪便样品或从所述动物的所述GIT内收集的样品收集的。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述基因拷贝数测量通过RT-PCR计数、全长16SRNA测序或宏基因组DNA测序执行。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述动物是生产动物。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述LEE基因包括：Tir、Map、EspB、EspF、EspG、EspH和EspZ。

7.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其中所述非LEE致病基因包括：EspG2、EspJ、EspM1/2、EspT、EspW、Cif、NleA、NleB、NleC、NleD、NleE、NleF和NleH。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述饲料添加剂包含另外的饲料酶和/或另外的肠道健康酶。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述另外的饲料酶包括蛋白酶、植酸酶、木聚糖酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、α-半乳糖苷酶、果胶酶和淀粉酶。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述另外的肠道健康酶包括N-乙酰基-胞壁质酶、超氧化物歧化酶(SOD)和/或过氧化氢酶。

11.根据权利要求8-10中任一项所述的方法，其中所述酶的浓度在50g/吨待给予所述生产动物组的饲料与1000g/吨待给予所述生产动物组的饲料之间。

12.根据权利要求1-14所述的方法，其中所述生产动物是：肉鸡、火鸡、鸭、蛋鸡、仔猪、生长期肉猪、育肥猪和母猪。

13.一种用于减少动物的胃肠道(GIT)中多形拟杆菌群体的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述多形拟杆菌的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；

优选地其中所述N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；

优选地其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且

优选地其中所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ IDNO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ IDNO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述多形拟杆菌的群体被测量为在所述动物的所述微生物群系内检测到的所述多形拟杆菌的群体与所述微生物群系内的微生物的总群体的比率％。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述微生物群系是从所述动物的粪便样品或在所述动物的所述GIT内收集的样品收集的。

16.根据权利要求15所述的方法，其中群体测量通过RT-PCT计数、全长16S RNA测序或宏基因组DNA测序执行。

17.根据权利要求13-16中任一项所述的方法，其中所述动物是生产动物。

18.一种减少动物的胃肠道(GIT)中大肠杆菌的群体的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；

优选地其中所述N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；

优选地其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且

优选地其中所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ IDNO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ IDNO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述大肠杆菌是致病性大肠杆菌。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述致病性大肠杆菌包括EPEC、EHEC和APEC。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述动物的所述GIT中的所述大肠杆菌的群体被测量为所述动物的所述微生物群系内的大肠杆菌标记基因的拷贝数相对于在所述微生物群系内检测到的细菌标记基因的总拷贝数的％。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述微生物群系是从所述动物的粪便样品或在所述动物的所述GIT内收集的样品收集的。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述测量通过RT-PCT计数、全长16S RNA测序或宏基因组DNA测序执行。

24.根据权利要求18-23中任一项所述的方法，其中所述动物是生产动物。

25.一种减少由大肠杆菌感染引起的动物的全身炎症和/或局部炎症的方法，所述方法包括用以下饲料添加剂中的一种或多种饲料添加剂饲喂所述动物：N-乙酰基-胞壁质酶；蛋白酶；超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；

优选地其中所述N-乙酰基-胞壁质酶选自由以下组成的组：(a)多肽，所述多肽与SEQID NO:1至SEQ ID NO:71中的任一者具有至少80％序列同一性；(b)具有SEQ ID NO:1至SEQID NO:71中的任一者的多肽变体，所述多肽变体在1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个位置中包含一个或多个氨基酸取代(优选地保守性取代)、和/或一个或多个氨基酸缺失、和/或一个或多个氨基酸插入或它们的任意组合；(c)多肽，所述多肽包含(a)或(b)的多肽以及在1个氨基酸与10个氨基酸之间的N末端和/或C末端延伸；和(d)(a)或(b)的多肽的片段，所述片段具有胞壁质酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；

优选地其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：(a')多肽，所述多肽与SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者具有至少70％的序列同一性；(b')SEQ ID NO:72至SEQ ID NO:76中的任一者的变体，其中所述变体具有蛋白酶活性并且包含在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个位置中的一个或多个取代、和/或一个或多个缺失、和/或一个或多个插入或它们的任意组合；(c')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及N末端和/或C末端His标签和/或HQ标签；(d')多肽，所述多肽包含(a')或(b')的多肽以及至多10个氨基酸(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸)的N末端和/或C末端延伸；以及(e')(a')或(b')的多肽的片段，所述片段具有蛋白酶活性并具有成熟多肽的长度的至少90％；并且

优选地其中所述超氧化物歧化酶选自由以下组成的组：(a”)多肽，所述多肽与SEQ IDNO:77具有至少75％的序列同一性；(b”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78具有至少75％的序列同一性；(c”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79具有至少75％的序列同一性；(d”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80具有至少75％的序列同一性；(e”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170具有至少85％的序列同一性；(f”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:78的氨基酸残基55至136具有至少85％的序列同一性；(g”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149具有至少85％的序列同一性；(h”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179具有至少85％的序列同一性；(i”)多肽，所述多肽与SEQ ID NO:81的序列具有至少80％的序列同一性；(j”)由多核苷酸编码的多肽，所述多核苷酸在中高严格条件下与SEQ ID NO:81的编码序列或其全长互补序列杂交；(k”)为SEQ ID NO:77、或SEQ ID NO:78、或SEQ ID NO:79、或SEQ ID NO:80、或SEQ ID NO:77的氨基酸残基52至170、或SEQ IDNO:78的氨基酸残基55至136、或SEQ ID NO:79的氨基酸残基12至149、或SEQ ID NO:80的氨基酸残基47至179的多肽的变体，所述变体在一个或多个位置处包含取代、缺失和/或插入并且具有超氧化物歧化酶活性；以及(l”)(a”)、(b”)、(c”)、(d”)、(e”)、(f”)、(g”')、(h”)、(i”)、(j”)或(k”)的多肽的片段，所述片段具有超氧化物歧化酶活性。

26.根据权利要求25所述的方法，其中所述炎症的减少被测量为在所述动物的所述微生物群系内检测到的所述LEE基因和非LEE基因的拷贝数与在所述微生物群系内检测到的基因的总拷贝数的比率％。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述微生物群系是从所述动物的粪便样品或在所述动物的所述GIT内收集的样品收集的。

28.根据权利要求27所述的方法，其中所述测量通过RT-PCT计数、全长16S RNA测序或宏基因组DNA测序执行。

29.根据权利要求25-28中任一项所述的方法，其中所述动物是生产动物。

30.饲料酶，特别是N-乙酰基-胞壁质酶、蛋白酶、超氧化物歧化酶和/或过氧化氢酶用于以下的用途

a)减少动物的胃肠道(GIT)中的肠出血性大肠杆菌(EHEC)、致肠病性大肠杆菌(EPEC)和禽致病性大肠杆菌(APEC)的外源性肠上皮细胞清除基因座(LEE)基因和外源性非LEE致病基因的群体，其中所述外源性LEE基因和非LEE致病基因的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；

b)减少动物的胃肠道(GIT)中的多形拟杆菌的群体，其中所述多形拟杆菌的群体相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；

c)减少动物的胃肠道(GIT)中的大肠杆菌的群体，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％；和/或

d)减少由大肠杆菌感染引起的动物的全身炎症和/或局部炎症，其中所述动物的全身炎症和/或局部炎症相较于除所述饲料添加剂外用相同的日粮饲喂的对照动物减少了至少10％。