CN116785273A - 全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途 - Google Patents
全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116785273A CN116785273A CN202210251647.6A CN202210251647A CN116785273A CN 116785273 A CN116785273 A CN 116785273A CN 202210251647 A CN202210251647 A CN 202210251647A CN 116785273 A CN116785273 A CN 116785273A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- group
- radiation
- retinoic acid
- brain injury
- trans retinoic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 title claims abstract description 47
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 title claims abstract description 41
- 230000005855 radiation Effects 0.000 title claims abstract description 38
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 title claims abstract description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 2
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims abstract description 12
- 238000013508 migration Methods 0.000 claims abstract description 12
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 claims description 14
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 9
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 claims description 7
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 claims description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 4
- 208000036110 Neuroinflammatory disease Diseases 0.000 claims description 3
- 230000003959 neuroinflammation Effects 0.000 claims description 3
- 208000028389 Nerve injury Diseases 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 230000003210 demyelinating effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 2
- 230000007659 motor function Effects 0.000 claims description 2
- 230000008764 nerve damage Effects 0.000 claims description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 claims description 2
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 claims 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 39
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 19
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 abstract description 19
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 9
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 46
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 43
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 23
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 20
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 20
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 18
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 14
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 14
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 13
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 13
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 12
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 11
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 11
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 11
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 11
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 10
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 10
- 102100039289 Glial fibrillary acidic protein Human genes 0.000 description 10
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 9
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 9
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 9
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 8
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 8
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 7
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 7
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 6
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 6
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 6
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 6
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 230000002314 neuroinflammatory effect Effects 0.000 description 6
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 6
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 6
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 5
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 5
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 4
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 4
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 4
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 4
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 4
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 4
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 4
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 4
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 4
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 3
- 101001128814 Pandinus imperator Pandinin-1 Proteins 0.000 description 3
- QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M Pentobarbital sodium Chemical compound [Na+].CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)[N-]C1=O QGMRQYFBGABWDR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 3
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 3
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 3
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 3
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 101150053137 AIF1 gene Proteins 0.000 description 2
- 208000036762 Acute promyelocytic leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 2
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 2
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 2
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 2
- 208000033826 Promyelocytic Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 102000000591 Tight Junction Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010002321 Tight Junction Proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 210000000274 microglia Anatomy 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- 101800000263 Acidic protein Proteins 0.000 description 1
- 101000697844 Arabidopsis thaliana Thiosulfate sulfurtransferase 16, chloroplastic Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000024806 Brain atrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010048962 Brain oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000003813 Cis-trans-isomerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000175 Cis-trans-isomerases Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 102000053171 Glial Fibrillary Acidic Human genes 0.000 description 1
- 102100025255 Haptoglobin Human genes 0.000 description 1
- 206010019194 Head discomfort Diseases 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- 208000034800 Leukoencephalopathies Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000001738 Nervous System Trauma Diseases 0.000 description 1
- 206010029240 Neuritis Diseases 0.000 description 1
- 206010029333 Neurosis Diseases 0.000 description 1
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 102000007399 Nuclear hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 108091008121 PML-RARA Proteins 0.000 description 1
- 206010034719 Personality change Diseases 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000032140 Sleepiness Diseases 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010041349 Somnolence Diseases 0.000 description 1
- 102000011154 Tight junction protein ZO-1 Human genes 0.000 description 1
- 108050001370 Tight junction protein ZO-1 Proteins 0.000 description 1
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010040002 Tumor Suppressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000001742 Tumor Suppressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000009270 Tumour necrosis factor alpha Human genes 0.000 description 1
- 108050000101 Tumour necrosis factor alpha Proteins 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 210000001056 activated astrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000001642 activated microglia Anatomy 0.000 description 1
- 150000004347 all-trans-retinol derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 1
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000006752 brain edema Diseases 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 201000007455 central nervous system cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025997 central nervous system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001490 effect on brain Effects 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001879 hippocampal ca1 region Anatomy 0.000 description 1
- 230000009808 hippocampal neurogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 1
- 230000006303 immediate early viral mRNA transcription Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000008897 memory decline Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000006724 microglial activation Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 1
- 230000023105 myelination Effects 0.000 description 1
- 208000028412 nervous system injury Diseases 0.000 description 1
- 230000004766 neurogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004693 neuron damage Effects 0.000 description 1
- 208000015238 neurotic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 108020004017 nuclear receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 229960002275 pentobarbital sodium Drugs 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000021595 spermatogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000008925 spontaneous activity Effects 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 108010027843 zonulin Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
- A61K31/203—Retinoic acids ; Salts thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本发明公开了一种全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途。所述全反式维甲酸用于改善放射性脑损伤、减轻放射性脑衰老、以及抑制胶质瘤细胞生长、增殖、侵袭及迁移。所述药物包括有效量的活性成分全反式维甲酸、以及药学上可接受的载体。本发明克服现有了治疗方式及药物存在的不足，通过对ATRA进行动物试验和细胞实验，探索ATRA在RBI中的作用，发现一定剂量的ATRA在改善放射性脑损伤同时可抑制胶质瘤细胞生长，且有效减轻放射性脑衰老及其相关炎症反应。因此，拟扩大ATRA药物新适应症：ATRA可尝试用于放射性脑损伤及放射性衰老等疾病中，特别是胶质瘤放疗患者中。
Description
技术领域
本发明涉及药物用途领域，具体地指一种全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途。
背景技术
放射性脑损伤(radiation-induced brain injury，RBI)是头颈部肿瘤放疗后产生的常见神经系统损伤，近年来，头部放疗已成为原发性和转移性脑部恶性肿瘤的主要治疗方式之一，且通过放疗能明显延长患者生存，甚至可通过预防性颅脑照射预防小细胞肺癌脑转移，然而，随着脑部放疗普及以及患者生存时间延长，各种放疗相关神经毒性开始显现，尤其是脑部放疗后导致的放射性脑损伤，严重影响患者生活质量。RBI根据放疗后发生时间可分为：急性、早迟发反应型及晚迟发反应型。
急性放射性脑损伤是指在辐射暴露后数小时至数周内的急性脑损伤事件，其可导致头部不适、精神神经症状、记忆力下降等，为可逆性反应，贝伐单抗、甘露醇、糖皮质激素等可通过减轻脑水肿进而改善急性脑损伤。早迟发反应型(亚急性)放射性脑损伤一般出现在放疗后1-6个月，表现为嗜睡、易怒等神经精神反应，还包括恶心、呕吐等消化系统反应，甚至记忆力减退等。晚迟发型(慢性)放射性脑损伤即不可逆脑白质病，为放疗6个月后出现的脑损伤，最终导致认知障碍和性格改变，特别是全脑放疗，可导致弥漫性脑萎缩。
目前据统计50-90％接受头部照射后存活的肿瘤患者表现出不同程度的认知功能障碍，包括学习、记忆、逻辑、注意力等，严重者可出现阿尔兹海默样痴呆，目前就放射性脑损伤发病机制尚不明确，放疗可直接损伤神经元或神经胶质细胞，或通过间接改变周围微环境，如上调神经炎症因子白介素(Interleukin，IL)-6、肿瘤坏死因子α(tumour necrosisfactor-alpha，TNF-α)、白介素(Interleukin，IL)-1β等导致RBI，另外，神经发生减少也是导致RBI认知功能障碍的主要原因，因此，避免海马神经发生减少和抑制神经炎症的增加或许可以保护全脑放疗导致的认知功能损伤，但目前由于辐射导致的认知功能障碍相关机制及相关细胞分子基础尚未完全阐明，因此对于头部放疗导致的认知功能损伤的预防和治疗仍需要进一步关注和研究。
全反式维甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)又称视黄酸或维A酸，是一类维生素A衍生物，对胚胎发育、精子发生、视觉和细胞分化都有十分重要的作用。早期研究表明维生素A缺乏的动物易发生肿瘤。维甲酸类化合物最引人注目的作用是预防及治疗一些恶性肿瘤，包括白血病、乳腺癌、皮肤癌、宫颈癌、中枢神经系统肿瘤等，其抗肿瘤作用主要通过经典的核受体信号通路。
一直以来，ATRA一直被当作第一个靶向治疗癌症的例子，最近发现，ATRA诱导的脯氨酰顺反异构酶Pin1(Protein interaction with NMA1，Pin1)消除会降解融合癌基因PML-RARA编码的蛋白，且在急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞、动物模型和病人中都得到了验证。ATRA诱导的Pin1消除也强烈抑制了三阴性乳腺癌细胞的生长，这种作用是通过影响Pin1底物中的癌基因和肿瘤抑制因子表达实现的。
在中枢神经系统疾病中，ATRA可加速损伤信号清除，减轻神经炎症，挽救缺血后的神经元损伤，从而改善缺血性脑损伤，同时ATRA可改善阿尔兹海默病(Alzheimer'sdisease，AD)中神经干细胞的受损及抑制海马区的小胶质细胞激活，减轻AD转基因小鼠淀粉蛋白沉积，改善记忆缺陷。
综上所述，RBI是脑部肿瘤患者放疗后常见并发症，但因其认知功能障碍相关机制及相关细胞分子基础尚不十分明确，缺乏有效的预防和治疗手段及药物，因此，迫切希望能为临床提供有效治疗RBI的药物。
发明内容
针对上述现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途。本发明克服现有了治疗方式及药物存在的不足，提供ATRA作为治疗RBI药物的用途，扩大ATRA药物适应症。
为达到上述目的，本发明通过下述技术方案实现：
本发明提供一种全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途。
优选的是，所述全反式维甲酸用于改善放射性脑损伤、减轻放射性脑衰老、以及抑制胶质瘤细胞生长、增殖、侵袭及迁移。
进一步优选的是，所述全反式维甲酸用于改善放射性脑损伤的具体表现为：减轻神经炎症、修复血脑屏障损伤、改善神经脱髓鞘损伤及有助于髓鞘再生、以及改善放射后认知功能及运动功能。
优选的是，所述药物包括有效量的活性成分全反式维甲酸、以及药学上可接受的载体。
进一步优选的是，所述药物为药学上可接受的任意剂型，包括片剂、胶囊剂、注射剂、颗粒剂、混悬剂和溶液剂中的至少一种。
更进一步优选的是，所述药物的给药方式采用口服给药、静脉注射给药和皮下包埋给药中的至少一种。
本发明通过构建小鼠RBI模型，ATRA采用腹腔注射给药方式，研究ATRA对RBI的作用并探讨其可能机制。实验数据显示，ATRA干预后，小鼠脑组织RT-PCR、WB结果显示，相比于RBI组，其炎症因子表达、星形胶质细胞活化指标神经元纤维酸性蛋白(Glial fibrillaryacidic protein，GFAP)及衰老指标明显降低，血脑屏障紧密连接蛋白明显增加，髓鞘再生相关因子表达量均升高，行为学实验中ATRA干预后小鼠体重、探索次数、活动度明显优于RBI组。在体外实验中，ATRA处理后使辐射后BV2小胶质细胞炎症因子分泌和原代星形胶质细胞活化减少，且在胶质瘤细胞系相关实验中，通过CCK8、划痕、克隆形成等方法检测发现ATRA可明显抑制U87、U251、U118、GL261等胶质瘤细胞系增殖及迁移。这些实验结果证明，ATRA在改善放射性脑损伤同时可抑制胶质瘤细胞增殖和迁移。
本发明与现有技术相比，具有如下优点及有益效果：
通过对ATRA进行动物试验和细胞实验，探索ATRA在RBI中的作用，发现一定剂量的ATRA在改善放射性脑损伤同时可抑制胶质瘤细胞生长，且有效减轻放射性脑衰老及其相关炎症反应。因此，拟扩大ATRA药物新适应症：ATRA可尝试用于放射性脑损伤及放射性衰老等疾病中，特别是胶质瘤放疗患者中。
附图说明
图1为各组小鼠辐射后2月内体重比较图。
图2包括图2A～图2G，其中：图2A分别为为各组小鼠旷场实验中在中心区域停留时间比较图；图2B为各组小鼠旷场实验中不动时间比较图，图2C为各组小鼠旷场实验中穿越次数比较图，图2D为各组小鼠旷场实验中活动总距离比较图，图2E为各组小鼠旷场实验中垂直站立次数比较图，图2F为各组小鼠新物体识别实验中对新物体分辨能力图，图2G为各组小鼠新物体识别实验中对旧物体和新物体偏好百分比图。
图3包括图3A～图3D，其中：图3A为各组炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平比较图；图3B为各组炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平比较图；图3C为ImageJ定量分析各组炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达；图3D为各组GFAP mRNA表达水平比较图。*：p<0.05；**：p<0.01；***：p<0.001；****：p<0.0001；ns：p>0.05。
图4包括图4A～图4C，其中：图4A为免疫荧光检测各组小鼠脑组织切片海马DG区Iba1+小胶质细胞表达水平比较图(200x、400x)；图4B为激活的小胶质细胞所占比例；图4C免疫荧光检测各组小鼠脑组织切片海马CA1区活化的GFAP+星形胶质细胞表达水平比较图(200x、400x)；图4D为激活的星形胶质细胞所占比例。其中，*：p<0.05；**：p<0.01；***：p<0.001；****：p<0.0001；ns：p>0.05。
图5包括图5A～图5B，其中：图5A为各组血脑屏障紧密连接蛋白ZO-1、VE-cadhein表达水平比较图；图5B为ImageJ定量分析各组血脑屏障紧密连接蛋白ZO-1、VE-cadhein表达图。*：p<0.05；**：p<0.01；***：p<0.001；****：p<0.0001；ns：p>0.05。
图6包括图6A～图6C，其中：图6A为各组少突胶质细胞转录因子olig1、olig2mRNA血表达水平比较图；图6B为各组神经髓鞘再生相关因子MMP-9及少突胶质细胞转录因子olig1、olig2蛋白表达水平比较图，图6C为ImageJ定量分析各组髓鞘再生相关蛋白MMP-9、olig1、olig2蛋白表达图。*：p<0.05；**：p<0.01；***：p<0.001；****：p<0.0001；ns：p>0.05。
图7包括图7A～图7B，其中：图7A为各组衰老相关指标P53、P21、P16及DNA损伤指标γ-H2AX蛋白表达水平比较图，图7B为ImageJ定量分析各组衰老相关指标P53、P21、P16及γ-H2AX蛋白表达图。*：p<0.05；**：p<0.01；***：p<0.001；****：p<0.0001；ns：p>0.05。
图8包括图8A～图8E，其中：图8A为BV2小胶质细胞辐射后24h炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平比较图，图8B为BV2小胶质细胞辐射后24h炎症因子IL-6蛋白表达水平比较图，图8C为BV2小胶质细胞辐射后48h炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平比较图，图8D为BV2小胶质细胞辐射后48h炎症因子IL-6、TNF-α蛋白表达水平比较图，图8E为原代星形胶质细胞辐射后24h及48hGFAPmRNA表达水平比较图。*：p<0.05；**：p<0.01；***：p<0.001；****：p<0.0001；ns：p>0.05。
图9包括图9A～图9E，其中：图9A分别为ATRA处理后CCK8实验检测U87、U251、U118、GL261胶质瘤细胞系增殖能力比较图，图9B为划痕实验检测GL261迁移能力比较图，图9C为ImageJ定量分析划痕面积比较图，图9D为克隆形成实验检测GL261生存及增殖能力比较图，图9E为统计克隆形成个数比较图。*：p<0.05；**：p<0.01；***：p<0.001；****：p<0.0001；ns：p>0.05。
具体实施方式
以下结合附图和实验例对本发明作进一步的详细描述。下述实施例中所述试验方法或测试方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均从常规商业途径获得，或以常规方法制备。当然，本发明的保护范围并不限于下述实施例。
为了更方便表述ATRA在本发明中的功能及作用，以下实验中将ATRA简写为RA，同时在说明书附图中统一简写为RA。
1、动物实验：
图1-图6均为体内实验图，其显示了8周龄C57雄性小鼠头部予单次15Gy全脑辐射后，非照射组仅麻醉小鼠，共分为4组：对照组(Ctrl组)、对照+RA组(Ctrl+RA组)、放疗组(RT组)、放疗+RA组(RT+RA组)，RA采取腹腔注射给药方式，每日1次，剂量为450ug/kg，共给药1月，在辐射后2月进行小鼠行为学实验(旷场、新物体识别实验)，待行为学实验结束，1.5％戊巴比妥钠溶液麻醉小鼠后予以PBS溶液心脏灌注，取小鼠脑组织进行后续检测。
实验例1
实验目的1：探究RA对RBI小鼠体重及认知功能的影响。
以下实验通过研究RA对RBI小鼠体重及认知功能的影响，证明RA可明显增加RBI小鼠体重，改善认知功能。
实验步骤如下：
实验动物：本实验使用C57BL/6雄性6-8周小鼠90只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，由华中科技大学同济医学院附属同济医院科研大楼动物中心SPF级负责饲养，每笼最多5只，所有小鼠完成检疫后进入屏障环境，适应环境1周，后开始动物造模。
实验分组：Ctrl组、Ctrl+RA组、RT组、RT+RA组。
RBI小鼠模型构造：
(1)小鼠称量体重并做好记录。
(2)麻醉：用预先配好的1.5％戊巴比妥钠溶液，剂量按60mg/kg腹腔注射。
(3)固定小鼠：小鼠取俯卧位，确保小鼠头部在同一水平线。
(4)照射：6MV光子线，2Gy/min，15Gy，光子线覆盖小鼠眼眦后线至耳后线，照射范围约为1.4cm*40cm。
药物干预及动物处理：将RA溶于10％DMSO，5％Tween-80和85％NS，超声助溶，工作液为黄色均匀悬浊液。RT、RT+RA组小鼠单次15Gy全脑辐射后，第二天开始给药，Ctrl、RT组腹腔注射含10％DMSO，5％Tween-80的生理盐水，Ctrl+RA、RT+RA组腹腔注射含RA的浓度梯度的工作液，每日1次，共给药1月，在头部辐射后2月进行旷场、新物体以及水迷宫实验。
图1显示了全脑辐射后2月内，各组小鼠体重对比显示，辐射后1周内体重逐步下降，至第7天达到最低，后逐渐上升，RT组相比Ctrl组体重明显下降(p<0.0001)，RT+RA组较RT组体重明显升高(p<0.0001)，且与Ctrl组相比体重无差异。
图2(图2A～图2G)显示了在旷场实验中RT较Ctrl组活动总距离、在中央区域停留时间、跨越格数和垂直起立次数均明显降低，不动时间延长(p<0.0001，图A-E)，RT+RA组较RT组活动总距离(p<0.0001，图2D)、在中央区域停留时间(p<0.001，图2A)、跨越格数(p<0.0001，图2C)和垂直起立次数均明显增加(p<0.0001，图2E)，不动时间减少(p<0.001，图2B)。新物体识别实验中，RT组较Ctrl组对新物体的分辨力明显下降(p<0.01，图2F)，对新旧物体偏好无明显差异，RT+RA组较RT组小鼠对新物体分辨力明显增加(p<0.0001，图2F)，且对新物体识别时间百分比接近70％，明显高于旧物体识别时间百分比(p<0.0001，图2G)。结合图1和图2的实验数据，说明说明RA干预后可明显增加RBI小鼠体重，改善自发活动、探索行为，及认知功能。
实验例2
实验目的2：探究RA对RBI小鼠神经炎症因子分泌、星形胶质细胞活化、血脑屏障损伤(BBB损伤)、神经脱髓鞘改变及衰老的影响。
以下实验通过研究RA对RBI小鼠神经炎症因子分泌、星形胶质细胞活化、BBB损伤、神经脱髓鞘改变及衰老的影响，证明RA可明显抑制神经炎症表达和星形胶质细胞激活，修复BBB损伤，减轻神经脱髓鞘改变，有助于髓鞘再生，减轻脑部衰老。
实验步骤如下：
实验动物：本实验使用C57BL/6雄性6-8周小鼠90只，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，由华中科技大学同济医学院附属同济医院科研大楼动物中心SPF级负责饲养，每笼最多5只，所有小鼠完成检疫后进入屏障环境，适应环境1周，后开始动物造模。本实验通过华中科技大学同济医学院附属同济医院实验动物中心伦理委员会审核，并严格按照该委员会标准方案进行。
实验分组：Ctrl组、Ctrl+RA组、RT组、RT+RA组。
RBI小鼠模型构造：
(1)小鼠称量体重并做好记录。
(2)麻醉：用预先配好的1.5％戊巴比妥钠溶液，剂量按60mg/kg腹腔注射。
(3)固定小鼠：小鼠取俯卧位，确保小鼠头部在同一水平线。
(4)照射：6MV光子线，2Gy/min，15Gy，光子线覆盖小鼠眼眦后线至耳后线，照射
范围约为1.4cm*40cm。
(5)对照组仅行麻醉。
(6)注意：冬天时要注意小鼠麻醉后需及时复温，避免体温过低导致小鼠死亡。
药物干预及动物处理：将RA溶于10％DMSO，5％Tween-80和85％NS，超声助溶，工作液为黄色均匀悬浊液。RT、RT+RA组小鼠单次15Gy全脑辐射后，第二天开始给药，Ctrl、RT组腹腔注射含10％DMSO，5％Tween-80的生理盐水，Ctrl+RA、RT+RA组腹腔注射含RA工作液，每日1次，共给药1月，在头部辐射后2月进行旷场、新物体以及水迷宫实验。
图3(图3A～图3D)显示RA处理后对RBI小鼠神经炎症因子分泌及星形胶质细胞活化GFAP的影响，通过RT-PCR及Western blot检测小鼠脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α、mRNA及蛋白水平表达。我们发现RT组较Ctrl组IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA(p<0.05，图3A)及蛋白水平表达(p<0.05，图3B-3C)均明显升高。RT+RA组较RT组上述炎症因子表达均明显降低。同时，RT组较Ctrl组GFAPmRNA表达明显升高，RT+RA组与RT相比GFAP mRNA表达明显下降(p<0.0001，图D)。
图4(图4A～图4D)显示RA处理后对RBI小鼠小胶质细胞及星形胶质细胞活化的影响，通过免疫荧光检测各组小鼠脑组织切片海马DG区Iba1+小胶质细胞表达水平及海马CA1区活化的GFAP+星形胶质细胞表达水平，我们发现RT组较Ctrl组较激活的小胶质细胞和星形胶质细胞明显增多，RT+RA组与RT组相比活化的小胶质细胞和星形胶质细胞数量明显减少(p<0.05，图4A～图4D)。
图5(图5A～图5B)显示RA处理后对RBI小鼠BBB的影响，通过Westernblot检测BBB紧密连接蛋白ZO-1、VE-cadhein蛋白表达，发现RT组较Ctrl组ZO-1、VE-cadhein蛋白表达明显下调，RT+RA组与RT组相比，ZO-1、VE-cadhein蛋白表达明显上升(p<0.05，图5A～图5B)。
图6(图6A～图6C)显示RA处理后对RBI小鼠神经脱髓鞘的影响，通过RT-PCR检测少突胶质细胞转录因子olig1和olig2mRNA表达，Westernblot检测神经髓鞘再生相关因子MMP-9、olig1和olig2蛋白表达，发现RT组较Ctrl组olig1(p<0.0001，图6A)和olig2mRNA明显下降(p<0.01，图6A)，MMP-9、olig1和olig2蛋白表达均明显下调(p<0.01，图6B～图6C)，RT+RA组与RT组相比，MMP-9、olig1和olig2蛋白表达明显上升(p<0.05，图6B～图6C)。
图7(图7A～图7B)显示RA处理后对RBI小鼠脑部衰老的影响，通过Westernblot检测衰老相关蛋白P53、P21、P16及DNA损伤指标γ-H2AX表达，发现RT组较Ctrl组P53、P21、P16及γ-H2AX蛋白表达均明显增加，RT+RA组与RT组相比P53、P21、P16及γ-H2AX蛋白均显著下降(p<0.05，图7A～图7B)。
结合图3-7的实验数据，说明RA处理后可明显抑制神经炎症表达和星形胶质细胞激活，减少激活的小胶质细胞和星形胶质细胞数量，修复BBB损伤，减轻神经脱髓鞘改变，有助于髓鞘再生，减轻脑部衰老。
2、细胞实验：
图8-图9均为体外实验图，图7显示了BV2小胶质细胞系及原代星形胶质细胞单次8Gy照射后，共分为5组：对照组(Ctrl组)、辐射组(RT组)、辐射+RA组(0.01μM)、辐射+RA组(0.1μM)、辐射+RA组(1μM)，用完全培养基DMEM配制成上述浓度梯度含RA培养基，将含RA的DMEM培养基在放疗前2-4h加入BV2小胶质细胞系中；将含RA的DMEM培养基在放疗前12-14h加入原代星形胶质细胞中。图8显示了胶质瘤细胞系经RA处理后，共分为4组：对照组、RA组(0.01μM)、RA组(0.1μM)、RA组(1μM)，用完全培养基DMEM配制成上述含RA浓度梯度培养基，以上含RA培养基均持续作用至实验终点。
实验例1
实验目的1：探究RA对BV2小胶质细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α分泌及原代星形胶质细胞GFAP的影响。
以下实验通过研究RA对BV2小胶质细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α分泌及原代星形胶质细胞GFAP的影响，证明0.01μM、0.1μM、1μM的RA对BV2分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α均有不同程度的抑制作用，高浓度1μM时抑制作用最明显，而对于原代星形胶质细胞，仅有RA浓度为1μM时对活化的原代星形胶质细胞存在抑制作用。
实验步骤如下：
实验细胞：BV2小胶质细胞系来自同济医院肿瘤科细胞库，星形胶质细胞通过乳鼠脑组织提取原代细胞获得，以上所用培养基均为含10％FBS的DMEM完全培养基，37℃，5％CO2恒温培养箱培养。
实验分组：Ctrl组、RT组、RT+RA组(0.01μM、0.1μM、1μM)。
细胞辐照模型构造：辐射前一天将对数生长的BV2小胶质细胞和原代星形胶质细胞经消化重悬后接种到6孔板及6cm皿中，对细胞进行单次8Gy辐射，分别于辐射后24h，48h进行后续指标检测。
药物干预及细胞处理：用含10％FBS的DMEM培养基将浓度为1mM母液逐步稀释为1μM、0.1μM、0.01μM的工作液，6孔板及皿的BV2小胶质细胞在辐射前3-4h更换为含RA的浓度梯度的培养基，原代星形胶质细胞在照射前12h添加含RA的浓度梯度的培养基，分别于辐射后24h，48h终止培养。
图8(图8A～图8E)显示RA对BV2小胶质细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α分泌及原代星形胶质细胞GFAP的影响。通过RT-PCR及Westernblot检测BV2小胶质细胞IL-1β、IL-6、TNF-α、mRNA及蛋白水平表达。我们发现辐照细胞24h及48h后RT组较Ctrl组IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA(p<0.001，图8A，图8C)及IL-6、TNF-α蛋白水平表达(p<0.05，图8B，图8D)均明显升高。浓度梯度为0.01μM、0.1μM、1μM的RA干预后，发现RA呈浓度依赖性地降低IL-1β、IL-6及TNF-αmRNA表达水平(p<0.01，图8A，图8C)及及IL-6、TNF-α蛋白水平表达(p<0.05，图8B，图8D)。原代星形胶质细胞受辐射24h及48h后，RT较Ctrl组GFAPmRNA明显升高(p<0.001，图8E)，仅有RT+RA(1μM)组可明显降低GFAPmRNA表达(p<0.05，图8E)。
实验例2
实验目的2：探究RA对胶质瘤细胞系U87、U251、U118、GL261增殖及迁移能力的影响。以下实验通过研究RA对胶质瘤细胞系U87、U251、U118、GL261增殖及迁移能力的影响，证明0.01μM、0.1μM、1μM的RA对U87、U251、U118、GL261胶质瘤细胞的增殖及迁移能力均有不同程度的抑制作用，高浓度1μM时抑制作用最明显。
实验步骤如下：
实验细胞：胶质瘤细胞系来自同济医院肿瘤科细胞库，所用培养基均为含10％FBS的DMEM完全培养基，37℃，5％CO2恒温培养箱培养。
实验分组：
空白对照组：Ctrl组(0μM)、实验组：RA组(0.01μM、0.1μM、1μM)。
药物干预及细胞处理：用含10％FBS的DMEM培养基将浓度为1mM母液逐步稀释为1μM、0.1μM、0.01μM的工作液，胶质瘤细胞贴壁后更换为含RA的浓度梯度的培养基，待细胞密度接近100％时，将细胞消化重悬后重新种板，开始后续表型相关实验。
图9(图9A～图9E)显示RA对胶质瘤细胞系U87、U251、U118、GL261增殖及迁移能力的影响，通过CCK8、划痕、克隆形成等实验方法检测RA对胶质瘤细胞系U87、U251、U118、GL261增殖及迁移能力的影响，CCK8实验表明24h、48h及72h时，浓度为分别为0.01μM、0.1μM、1μM的RA组细胞活性较0μM的Ctrl组均有明显下降，其中浓度为1μM的RA组下降最明显(p<0.05，图9A)，划痕实验显示24h时，浓度为1μMRA组划痕面积明显下降(图9C)，细胞相对迁移率明显降低(p<0.05，图9D)，48h时，浓度为0.1μM和1μMRA组划痕面积明显下降(图9C)，细胞相对迁移率明显降低(p<0.01，图9D)。克隆形成实验显示浓度为分别为0.01μM(p<0.01，图9D-图9E)、0.1μM(p<0.001，图9D-图9E)、1μM(p<0.0001，图9D-图9E)的RA组克隆形成数较0μM的Ctrl组均有明显下降。
结合图8和图9的实验数据，说明RA处理后可明显抑制BV2小胶质细胞系分泌炎症因子及减少原代星形胶质细胞活化，同时对U87、U251、U118、GL261胶质瘤细胞的增殖及迁移能力均有不同程度的抑制作用。
缩略词：
RBI：放射性脑损伤
RA：全反式维甲酸
IL-6：白介素-6
TNF-α：肿瘤坏死因子α
IL-1β：白介素-1β
AD：阿尔兹海默病
GFAP：神经元纤维酸性蛋白
BBB：血脑屏障
FBS：胎牛血清
DMEM培养基：高糖DMEM培养基
DMSO：二甲基亚砜
Tween-80：吐温-80
以上所述仅为本发明的较佳实验例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修饰、等同替换、改进等等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述全反式维甲酸用于改善放射性脑损伤、减轻放射性脑衰老、以及抑制胶质瘤细胞生长、增殖、侵袭及迁移。
3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述全反式维甲酸用于改善放射性脑损伤的具体表现为：减轻神经炎症、修复血脑屏障损伤、改善神经脱髓鞘损伤及有助于髓鞘再生、以及改善放射后认知功能及运动功能。
4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物包括有效量的权利要求1所述的活性成分全反式维甲酸、以及药学上可接受的载体。
5.根据权利要求1或4所述的用途，其特征在于：所述药物为药学上可接受的任意剂型，包括片剂、胶囊剂、注射剂、颗粒剂、混悬剂和溶液剂中的至少一种。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：所述药物的给药方式采用口服给药、静脉注射给药和皮下包埋给药中的至少一种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210251647.6A CN116785273A (zh) | 2022-03-15 | 2022-03-15 | 全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210251647.6A CN116785273A (zh) | 2022-03-15 | 2022-03-15 | 全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116785273A true CN116785273A (zh) | 2023-09-22 |
Family
ID=88047014
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210251647.6A Pending CN116785273A (zh) | 2022-03-15 | 2022-03-15 | 全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116785273A (zh) |
-
2022
- 2022-03-15 CN CN202210251647.6A patent/CN116785273A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2021032212A1 (zh) | 靶向组织微环境中衰老细胞的抗衰老药物d/a及其应用 | |
| Yi et al. | 1-Trifluoromethoxyphenyl-3-(1-propionylpiperidin-4-yl) urea protects the blood-brain barrier against ischemic injury by upregulating tight junction protein expression, mitigating apoptosis and inflammation in vivo and in vitro model | |
| US20240299316A1 (en) | Method for treating cancer with acylfulvene and radiation | |
| CN112641775A (zh) | 鸦胆子苦醇及其类似物在垂体腺瘤治疗中的应用 | |
| CN109172579B (zh) | 特拉唑嗪在治疗放射性认知功能障碍药物中的应用 | |
| CN116785273A (zh) | 全反式维甲酸在制备治疗放射性脑损伤的药物中的用途 | |
| WO2018064851A1 (zh) | 低剂量西地那非作为抗肿瘤药物的应用 | |
| CN101176731B (zh) | 积雪草酸在抗肺纤维化方面的应用 | |
| CN108295085B (zh) | 原薯蓣皂苷在制备抗耐药性骨肉瘤药物中的应用 | |
| CN116726021A (zh) | 一种drp1抑制剂和铁死亡诱导剂联合用药物及其抗肿瘤的用途 | |
| CN107496525B (zh) | 一种治疗癌性疼痛疾病的中药组合物及其应用 | |
| US20200000740A1 (en) | Zeaxanthin for tumor treatment | |
| WO2022121356A1 (zh) | 组合物及其在提高维生素c抗肿瘤效果中的用途 | |
| RU2516027C2 (ru) | Комбинация противораковых агентов | |
| CN112656785A (zh) | 槲皮素在制备前列腺癌放疗增敏药物中的用途 | |
| CN114469950A (zh) | 白屈菜碱在制备flt3-itd突变的急性髓系白血病治疗药物中的应用 | |
| CN111905102A (zh) | Ezh2抑制剂在治疗胶质瘤中的应用 | |
| CN118416071A (zh) | 达沙替尼联合槲皮素在制备治疗放射性脑损伤的药物中的应用 | |
| US20210161866A1 (en) | Drug for use in combination, and use thereof for preparing drugs for treatment of high-grade brain tumors in response to ineffective standard treatment for postoperative recurrence | |
| CN111407748B (zh) | 酪醇在制备治疗脑胶质瘤的药物中的应用 | |
| RU2822760C1 (ru) | Применение сесквитерпенового лактонного соединения при получении лекарственных средств для облегчения вызванных лучевой терапией повреждений | |
| WO2023216281A1 (zh) | 3-羟基黄酮在制备治疗mll基因重排急性髓系白血病的药物中的应用 | |
| CN114984027A (zh) | 柴胡皂苷a在制备减轻egfr抑制剂毒副作用的药物中的应用 | |
| CN105878253A (zh) | 科罗索酸的医药用途 | |
| CN118662641A (zh) | 一种治疗骨髓增生异常综合征疾病药物组合物及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |