CN116763799A - 人参皂苷ck在制备抑制卵巢癌细胞增殖的产品中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了人参皂苷CK在制备抑制卵巢癌细胞增殖的产品中的用途。本发明采用人参皂苷CK对卵巢癌细胞株和原代细胞进行毒性实验，检测人参皂苷CK的抗卵巢癌效果，结果显示人参皂苷CK可抑制敏感和耐药卵巢癌细胞增殖。因此，人参皂苷CK可发挥抗卵巢癌作用，可用于卵巢癌发生及转移等过程的治疗。本发明所使用人参皂苷CK纯度达到98％以上，药效学结果表明，人参皂苷CK的抗肿瘤效果明显优于原人参二醇类皂苷人参皂苷Rb1、Rb2和Rc。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域，特别涉及人参皂苷CK在制备抑制卵巢癌细胞增殖的产品中的用途。
背景技术
卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤，我国卵巢癌发病率逐年递增，且患者的年龄呈年轻化趋势，其死亡率在妇科肿瘤中居于首位，成为女性健康的最主要杀手之一。值得关注的是，卵巢癌发病隐匿，多数患者早期无明显症状，确诊时已处于疾病晚期，治疗起来相当困难，死亡率很高，此外，即使经过初治，仍有70％卵巢癌患者经历复发。尽管手术技术提高、手术设备更新、化疗药物换代，可卵巢癌的致死率仍然居高不下。可见，手术和化疗的传统治疗方法在提高该病5年生存率上遭遇瓶颈。
人参皂苷单体是人参、西洋参、三七等中药材主要的活性成分，不同来源的人参皂苷由于其单体皂苷的种类和比例的不同，其发挥的药理作用不尽相同，生物活性与皂苷类的结构直接相关。人参皂苷CK是天然的二醇型人参皂苷单体在人肠道内的代谢产物，是人参在体内发挥药理活性的实体。虽然目前文献有报道人参皂苷单体具有抗肿瘤作用，但是现有的单一的一种单体并没有表现出特别显著的抗肿瘤效果，特别是对于耐药型卵巢癌细胞的抑制效果，如单体Rg1、Rg2、Rg3、Rd、Re、Rf、Rb1、Rb3、Rc、R1、F1、Rh1、Fc。
因此，需要寻找一种具有上述功能的人参皂苷单体来解决现有技术中存在的问题。
发明内容
本发明的一个方面，是针对现有技术中缺乏具有抗肿瘤效果，特别是对于耐药型卵巢癌细胞的抑制效果的人参皂苷单体的问题，提供了一种人参皂苷CK在制备抑制卵巢癌细胞增殖的产品中的用途。
本发明提供的技术方案为：
人参皂苷CK在制备抑制卵巢癌细胞增殖的产品中的用途。
在本发明中，人参皂苷CK的化学式如式1所示：
人参皂苷CK来源为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥根。是二醇型人参皂苷在人体肠道内的主要代谢产物和最终吸收形式。
作为优选，上述人参皂苷CK是其可药用盐的形式。
作为优选，上述人参皂苷CK是其水合物的形式。
在本发明中，上述人参皂苷可以利用现有技术中的方法进行制备，例如，酶转化法或微生物发酵法对二醇型人参皂苷进行转化制得。或通过商业化购买。
作为优选，上述卵巢癌细胞为敏感型卵巢癌细胞或耐药型卵巢癌细胞。例如，A2780细胞、SKOV3细胞。
更优选地，所述耐药型卵巢癌细胞为原发耐药型卵巢癌细胞。
更优选地，上述卵巢癌细胞为原代细胞。
本发明的另一个方面，是提供了人参皂苷CK在制备治疗卵巢癌的药物中的用途。
本发明的另一个方面，是提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含人参皂苷CK和药学上可接受的载体；
所述人参皂苷CK的质量百分比大于90％。
作为优选，在上述药物组合物中，所述人参皂苷CK是唯一活性成分。
作为优选，上述药物组合物还包括其他抗卵巢癌细胞的药物。
更优选地，所述其他抗卵巢癌细胞的药物为选自紫杉醇、顺铂、卡铂、奥沙利铂或卡培他滨中的一种或几种。
在本发明中，上述药学上可接受的载体包括氧化剂、螯合剂、表面活性剂、填充剂、崩解剂、润湿剂、肠溶材料、矫味剂或色素。
在本发明中，上述药物组合物可以使用任意合适的剂型或给药方式，例如，口服剂、注射剂、喷雾剂和腹腔或经皮给药剂。
本发明的有益效果为：
本发明采用人参皂苷CK对卵巢癌细胞株和原代细胞进行毒性实验，检测人参皂苷CK的抗卵巢癌效果，结果显示人参皂苷CK可抑制敏感和耐药卵巢癌细胞增殖。因此，人参皂苷CK可发挥抗卵巢癌作用，可用于卵巢癌发生及转移等过程的治疗。本发明所使用人参皂苷CK纯度达到98％以上，药效学结果表明，人参皂苷CK的抗肿瘤效果明显优于原人参二醇类皂苷人参皂苷Rb1、Rb2和Rc。
附图说明
图1为本发明实施例中人参皂苷CK对白种人细胞株SKOV3和A2780的毒性实验结果图；
图2为本发明实施例中人参皂苷CK对敏感型和原发耐药型原代卵巢癌细胞的毒性实验结果图。
具体实施方式
本发明公开了一种人参皂苷CK在制备抑制卵巢癌细胞增殖的产品中的用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。需要特别指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明，并且相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围的基础上对本文所述内容进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
在本发明中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。除非另有其它明确表示，否则在整个说明书和权利要求书中，术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分，而并未排除其它元件或其它组成部分。术语“如”、“例如”等旨在指示例性实施方案，而不意图限制本公开的范围。
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例1：人参皂苷CK对卵巢癌细胞系增殖抑制作用
人参皂苷CK用DMSO或乙醇溶解配成母液，用相应细胞培养基稀释成不同浓度待用，其中DMEM培养基用于A2780细胞的培养、McCoy’s 5A用于SKOV3细胞的培养，且稀释后培养基中DMSO或乙醇含量小于0.1％。
本发明所使用的卵巢癌细胞具体为A2780细胞和SKOV3细胞，均采购于广州赛库生物技术有限公司，并进行STR细胞遗传质量鉴定。
将卵巢癌细胞消化调整细胞浓度为5×104个/mL，接种于96孔板中，每孔100μL，空白对照孔只加培养液。置于培养箱中，待细胞完全贴壁，次日分别加入100μL含不同浓度的人参皂苷CK的培养基，每孔总体积为100μL。每组做5个平行孔，培养48小时后每孔加入CCK8，继续培养2-4小时，酶标仪检测各孔吸光度(OD值)，按下列公式计算细胞存活率。细胞存活率＝实验组OD值/对照组OD值×100％。该实验在不同日重复3次。
根据药物敏感性实验检测结果如图1所示，CK在低浓度范围内对敏感型卵巢癌细胞A2780和SKOV3有较好的增殖抑制作用。
实施例2：人参皂苷CK对卵巢癌原代细胞增殖抑制作用
人参皂苷CK用DMSO溶解配成母液，用相应细胞培养基稀释成不同浓度待用，且稀释后培养基中DMSO含量小于0.1％。用含D-葡萄糖、碳酸氢钠、丙酮酸钠、HEPES、L-谷氨酰胺、1％青链霉素混合液和5-10％胎牛血清的RPMI1640培养基用于卵巢癌原代细胞的培养。
收集卵巢癌病人腹水，根据临床治疗效果分为敏感型和原发耐药型标本，对应为卵巢癌敏感型原代细胞和卵巢癌原发耐药型原代细胞，离心收集腹水中的癌细胞，裂红液去除红细胞，将卵巢癌原代细胞调整细胞浓度为1×105个/mL，接种于96孔板中，每孔100μL，空白对照孔只加培养液。置于培养箱中，待细胞完全贴壁，3-5天后分别加入100μL含不同浓度的人参皂苷CK的培养基，每孔总体积为100μL。每组做5个平行孔，培养48小时后每孔加入CCK8，继续培养2-4小时，酶标仪检测各孔吸光度(OD值)，按下列公式计算细胞存活率。细胞存活率＝实验组OD值/对照组OD值×100％。该实验在不同日重复3次。
根据药物敏感性实验检测结果如图2所示，CK在低浓度范围内对敏感型卵巢癌原代细胞和原发耐药型卵巢癌原代细胞均有较好的增殖抑制作用。在敏感型卵巢癌原代细胞中，CK的IC50范围为1.09-15.98ug/mL，对照组一线卵巢癌临床用药紫杉醇的IC50范围为0.87-5.18ug/mL，对照组一线卵巢癌临床用药卡铂的IC50范围为5.89-31.00ug/mL。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.人参皂苷CK在制备抑制卵巢癌细胞增殖的产品中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述人参皂苷CK是其可药用盐的形式。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述人参皂苷CK是其水合物的形式。
4.根据权利要求1～3任意一项中所述的用途，其特征在于，所述卵巢癌细胞为敏感型卵巢癌细胞或耐药型卵巢癌细胞；
所述耐药型卵巢癌细胞优选为原发耐药型卵巢癌细胞株。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述卵巢癌细胞为原代细胞。
6.人参皂苷CK在制备治疗卵巢癌的药物中的用途。
7.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含人参皂苷CK和药学上可接受的载体；
所述人参皂苷CK的质量百分比大于90％。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括其他抗卵巢癌细胞的药物。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，所述其他抗卵巢癌细胞的药物为选自紫杉醇、顺铂、卡铂、奥沙利铂或卡培他滨中的一种或几种。
10.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述人参皂苷CK是唯一活性成分。
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