CN116712362A - 一种高稳定、易吸收的党参凝胶面膜及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及护肤品技术领域,特别涉及一种高稳定、易吸收的党参凝胶面膜及其制备方法。本发明采用CBSP‑CP为凝胶基质,与党参提取物组合,制备的凝胶面膜,相比传统型Carbopol 940、改良型Carbopol ETD 2020、聚丙烯酸酯交联聚合物‑6(Zen)等不同类型基质制备的凝胶面膜,具有更好的稳定性,更佳的调理修复效果,更强的紧致肌肤作用。

Description

一种高稳定、易吸收的党参凝胶面膜及其制备方法
技术领域
本发明涉及护肤品技术领域,具体涉及一种高稳定、易吸收的党参凝胶面膜,具有更好的稳定性,更佳的调理修复效果,更强的紧致肌肤作用。
背景技术
衰老是机体逐渐丧失功能走向死亡的一个过程。皮肤作为机体的最大器官,是机体与外界环境的防御屏障,比其他器官更能直观和明显的反映衰老。随着人们生活节奏的加快,女性生活压力不断增加、睡眠不足,使得女性的皮肤状态变得越来越差,过早显示出衰老现象,与此同时大部分女性对皮肤状态的要求却越来越高。免洗睡眠面膜因其具有隔夜免洗特点而受到消费者的喜爱。但目前的免洗睡眠面膜主要倾向于单纯的补水、保湿功能,而对于想要赋予免洗睡眠面膜修复、抗衰的功能时,则免洗睡眠面膜的稳定性差,不利于皮肤吸收,有效成分难以渗透吸收,肌肤调理和修复效果差。
皮肤衰老通常分为内源性和外源性衰老,外源性衰老主要由环境因素导致。紫外线(UV)辐射是引起皮肤衰老的主要环境因素,皮肤长期暴露于UV 辐射之下,会加速老化,主要表现为表面粗糙,含水量和弹性降低,胶原蛋白减少,以及皱纹形成,即所谓的皮肤光老化(也称光老化)。经过一天的曝晒之后对皮肤进行修复能够及时改善UV 辐射引起的皮肤损伤,减缓衰老的发生。
近年来,现代化妆品逐渐暴露出越来越多的安全隐患,国际上对化妆品的环保性、安全性和天然性逐渐重视,并开始以相关的法规进行规范。中草药系列护肤品有确切的美容养颜效果,历史传承,绿色天然,安全可靠;中草药拥有几千年的人体临床应用经验,积累了许多作用独特、效果显著的单品和复方。添加中草药活性成分化妆品是一类具有中国传统特色的化妆品,结合中医思想,在其中添加了中草药提取的活性成分,既可满足人们对肌肤保养美容的需求,又丰富消费者的个性消费选择以及顺应“回归原生态”的时尚潮流。
党参:桔梗科植物党参Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf.、素花党参(西党参)Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nannf.)L.T.Shen或川党参Codonopsistangshen Oliv.的干燥根。党参味甘,性平。有补中益气、止渴、健脾益肺,养血生津。用于脾肺气虚,食少倦怠,咳嗽虚喘,气血不足,面色萎黄,心悸气短,津伤口渴,内热消渴,懒言短气、四肢无力、食欲不佳、气虚、气津两虚、气血双亏以及血虚萎黄等症。现代药理研究表明,党参具有保护胃肠道黏膜、抗溃疡、增强机体免疫力、抗疲劳、促进造血功能及抗肿瘤等多种作用。党参所含化学成分复杂,据文献报道,主要含有苯丙素苷类、香豆素类、党参多糖类、黄酮类和生物碱类等成分。2018年1月11日国家卫计委将党参录入“药食同源”,预示着党参将在更多的领域发挥更大的作用。
透明质酸及透明质酸钠:透明质酸又名玻尿酸,是一种酸性粘多糖。它是肌肤水嫩的重要基础物质,本身也是人体的一种成分,它具有特殊的保水作用,保水份量可高达其本身重量的100倍,是目前发现的自然界中保湿性最好的物质,被称为理想的天然保湿因子。它可以改善皮肤营养代谢,使皮肤柔嫩、光滑、去皱、增加弹性、防止衰老,在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂。与其他营养成分配合使用,可以起到促进营养吸收的理想效果。透明质酸钠是透明质酸的钠盐,更稳定,其分子更小,能够更有效地吸收并渗透皮肤更深层。
维生素C乙基醚:是一种非常有用的维生素C衍生物,是不变色的维生素C衍生物,具亲油亲水两性,适用范围广泛,普遍应用在日用化学中。易通过角质层进入真皮层,在体内被生物酶分解,从而发挥维生素C的生物学功效。它具有促进胶原蛋白增生,修复紫外线对肌肤的伤害,淡化黑色素等功能。同时,竞争性抑制酪氨酸酶,还原黑色素形成的中间产物多巴胺及多巴醌,有淡化色斑的作用。
从中医学角度看,脾胃乃后天之本,脾胃虚弱,则气血生化不足,表现为神疲乏力,少气懒言,面色萎黄,甚至早衰。本发明面膜中的党参补中益气、健脾益肺,养血生津,佐以维生素C乙基醚促进胶原蛋白增生,修复紫外线对肌肤的伤害,淡化黑色素,再加上透明质酸在保湿的同时又具良好的透皮吸收促进作用,能提高活性成分经皮吸收能力,进一步提高党参补血养颜,消除疲劳,延缓皮肤衰老的效果。
凝胶剂(gels)是指原料药物与能形成凝胶的辅料(也称凝胶基质)制成的具凝胶特性的稠厚液体或半固体制剂。根据凝胶基质的不同,凝胶剂又分为水性凝胶和油性凝胶,水性凝胶具有易涂展,舒适感好,无油腻感、易洗除,能吸收组织渗出液,不妨碍皮肤的正常生理作用,具有一定的保水作用,能促进中药提取物的透皮吸收等特点广泛应用于医药、日化等领域,深受患者及消费者青睐。将党参提取物制备成水性凝胶拓展了其应用范围,提高了在起效部位皮肤的药物浓度,能够更好的实现其延缓皮肤衰老的作用。
卡波姆,是水性凝胶剂最常用的基质,具有增稠、悬浮等重要用途,制备工艺简单,流变学性能良好,对皮肤和黏膜无刺激性等优点,广泛应用于乳液、膏霜、凝胶中,是一种非常优秀的凝胶基质材料。尽管应用卡波姆制备凝胶工艺简单、能赋予凝胶良好的流变学性能,但其不足之处在于卡波姆对凝胶环境有着相对较强的敏感性,这表现在离子存在会显著降低其增稠效率;痕量的铁或其他过渡金属即会使凝胶出现不可逆地粘度下降,严重破坏体系的稳定性;另外,高剪切、紫外线照射或持久搅拌也会造成卡波姆凝胶粘度损失,使凝胶粘度降低。卡波姆的敏感性特别是离子敏感性是其应用的主要问题,以卡波姆为基质的凝胶中不能添加酸类成份、矿物离子,需要避免使用某些抑菌剂,或只能以低浓度使用,否则稠度就会急剧降低甚至消失。为了改善卡波姆基质的耐离子性,美国Lubrizol®公司开发了改良型凝胶基质,即卡波姆(Carbopol)ETD 2020,但其对离子的容忍度仍然较低。作为具有优良流变学性能的凝胶基质材料,基质性能的稳定性特别是耐离子性能的不足限制了卡波姆基质的应用。
相关条目的解释:
CBSP:阳离子化白及多糖;
CP:卡波姆;
CBSP-CP:阳离子化白及多糖与卡波姆按一定比例形成的复合物,可用作凝胶剂基质。
CBSP-CP(2:1):阳离子化白及多糖与卡波姆按2:1比例形成的复合物,用作凝胶剂基质。
发明内容
本发明的目的是针对现有免洗睡眠面膜稳定性不佳、在睡眠期间对肌肤渗透效果较差,营养成份透皮吸收率低,肌肤调理和修复效果差的不足,提供一种新型凝胶面膜,该党参免洗凝胶睡眠面膜具有更好的稳定性,增强肌肤对有效成分的吸收产生更佳的调理修复效果,更强的紧致肌肤作用。
本发明目的是通过以下技术手段实现:
多糖是由10个以上单糖通过糖苷键连接而成的聚糖,在自然界分布广泛,是组成高等植物、动物细胞膜及微生物细胞壁的天然大分子物质。有研究发现多种多糖具有优秀的酪氨酸酶抑制活性以及抗氧化活性,有利于抑制皮肤黑色素的生成,起到效果显著的美白作用。多糖对于了解皮肤微生物稳态也具有明显的作用,对于有害菌生长的抑制以及有益菌生长的促进都发挥良好的效果。
白及多糖为中药白及的主要成分,不仅具备其他天然多糖的特点,且自身流变性好,还与皮肤、生物黏膜等组织的粘附性好,同时具有修复皮肤细微伤口的药理活性,是一种理想的天然日化添加剂和功能性成分。我们的预实验研究发现其在较宽的pH 范围内稳定且具有较好的耐离子性。然而,作为一种生物多糖,本身存在溶液透明度不高、溶胀和水合速度较慢、溶胶易分层等固有缺点,且预实验发现,与其他基质复配使用时也易在离心静置后出现分层,限制了其应用。
本发明将白及多糖阳离子化,在此基础上将阳离子化白及多糖与阴离子型聚合物进行组合,利用二者间的静电作用构建一种新型凝胶基质材料,特别是一种稳定、耐离子、耐中药复杂成分、具良好的流变学性能且兼具白及多糖活性的新型凝胶基质。所述凝胶基质由阳离子化白及多糖(CBSP)、以及能与CBSP形成组合物的CP构成,其中CP即卡波姆Carbopol; 按重量比,阳离子化白及多糖、卡波姆的比例为2:1。
具体地,该组合物,其中CP优选Carbopol ETD 2020(简称CP 2020)。即CBSP与Carbopol ETD 2020形成组合物,其比例为CBSP:CP=2:1。
本发明所述凝胶基质制备方法如下:
将0.5%(w/v)CP 2020分散于70℃去离子水中,在400 rpm下搅拌至均匀,静置12 h待形成均匀、无团块的溶胶,称为A相;
将1.0%(w/v)CBSP在室温25℃分散于去离子水中,400 rpm下搅拌至均匀,形成CBSP溶液,称为B相;
于室温25℃下,将B相缓慢滴加至A相,枸橼酸饱和溶液和三乙醇胺调pH至6.5,冷冻干燥,得CBSP-CP组合物基质。
本发明提供了一种高稳定、易吸收的党参凝胶面膜,其组成包括:权利要求1所述的凝胶基质、党参提取物。
本发明所述的党参凝胶面膜,还包括pH调节剂;
本发明所述的党参凝胶面膜,还包括附加剂,其特征在于,附加剂选自保湿剂(透明质酸钠)、防腐剂、透皮吸收促进剂(薄荷醇)、抗氧剂(维生素C乙基醚)、香精的一种或几种。
本发明提供了一种高稳定、易吸收的党参凝胶面膜,各成分的重量配比为:
党参提取物 相当于15-55g药材量
凝胶基质 0.3-3g
透明质酸钠 0.1-2g
维C乙基醚 0.5-2g
甘油 0.1-20ml
1,2丙二醇 0.3 - 4g
PEG-40氢化蓖麻油 0.1-5g
苯氧乙醇 0.1-1.5g
薄荷醇 0.5-2g
D-泛醇 0.1-2g
三乙醇胺 0.01-2g
香精 0.01-2g
蒸馏水 适量。
进一步,所述凝胶面膜中各成分的重量配比为:
党参提取物 相当于20-50g药材量
凝胶基质 0.5-2g
透明质酸钠 0.2-1g
维C乙基醚 0.7-1.5g
甘油 1-15ml
1,2丙二醇 0.5-3g
PEG-40氢化蓖麻油 0.2-2.5g
苯氧乙醇 0.2-1g
薄荷醇 0.8-1.5g
D-泛醇 0.5-1.5g
三乙醇胺 0.05-1g
香精 0.05-1.5g
蒸馏水 适量。
进一步,所述凝胶面膜中各成分的重量配比为:
党参提取物 相当于15-45g药材量
凝胶基质 0.8-1.5g
透明质酸钠 0.4 - 0.8g
维C乙基醚 0.9-1.2g
甘油 2-11ml
1,2丙二醇 0.8-1.5g
PEG-40氢化蓖麻油 0.4-1g
苯氧乙醇 0.4-0.8g
薄荷醇 0.9-1.2g
D-泛醇 0.8-1.2g
三乙醇胺 0.1-0.6g
香精 0.2-1g
蒸馏水 适量。
进一步,所述凝胶面膜中各成分的重量配比为:
党参提取物 相当于45g药材量
凝胶基质 1g
透明质酸钠 0.5 g
维C乙基醚 1g
甘油 10ml
1,2丙二醇 1g
PEG-40氢化蓖麻油 0.5g
苯氧乙醇 0.5g
薄荷醇 1g
D-泛醇 1g
三乙醇胺 0.5g
香精 0.5g
蒸馏水 适量。
得益于活性成分与凝胶剂基质的良好配比,本发明的党参凝胶面膜,其有益效果是:
本发明为采用CBSP-CP为凝胶基质,与党参提取物组合,制备的党参凝胶面膜,既优于一般党参面膜,而且相比传统型Carbopol 940、改良型Carbopol ETD 2020、聚丙烯酸酯交联聚合物-6(Zen)等不同类型基质与党参提取物组合制备的凝胶面膜,具有更好的稳定性,具有更好的稳定性,更佳的调理修复效果,更强的紧致肌肤作用。
稳定性。以CBSP-CP为基质与党参提取物组合制备的党参凝胶面膜在高温(40℃、60℃)及强光(4500Lx)条件下,凝胶面膜的外观性状、粘度及活性指标成分含量均具有更为良好的稳定性。
修复作用。以CBSP-CP为基质与党参提取物组合制备的党参凝胶面膜可提高UVB损伤的HaCaT细胞的增殖活性; 降低UVB损伤HaCaT细胞内LDH含量,提高UVB损伤HaCaT细胞的抗氧化活性(升高GSPH和降低MDA)。以CBSP-CP为基质的党参凝胶面膜相比传统型Carbopol940、改良型Carbopol ETD 2020、 聚丙烯酸酯交联聚合物-6(Zen)等不同类型基质与党参提取物组合制备的凝胶面膜活性更好。
保湿作用。皮肤含水量测定结果显示,与三种市售基质相比,以CBSP-CP为基质的凝胶面膜在各时间点的皮肤含水量(MMV)显著升高,表明本发明CBSP-CP组合物作为凝胶基质与党参提取物组合有助于增强保湿效果。
亮肤作用。以CBSP-CP为基质与党参提取物组合制备的党参凝胶面膜,与三种市售基质相比,可显著降低皮肤表面的黑色素含量,表明以CBSP-CP为基质的党参凝胶面膜具有更好的美白亮肤作用。
抗皱作用。以CBSP-CP为基质与党参提取物组合制备的党参凝胶面膜,与三种市售基质相比,可显著减少皮肤表面的皱纹的深度和面积,表明以CBSP-CP为基质的党参凝胶面膜具有更好的美白亮肤作用。
附图说明
图1为 CBSP-CP及市售基质与党参提取物组合凝胶面膜对衰老小鼠皮肤外观的影响;
图2为 CBSP-CP及市售基质与党参提取物组合凝胶面膜对衰老小鼠皮肤皱纹的影响;
图3为 CBSP-CP及市售基质与党参提取物组合凝胶面膜对衰老小鼠皮肤皱纹深度的影响;
图4为 CBSP-CP及市售基质与党参提取物组合凝胶面膜对衰老小鼠皮肤皱纹面积的影响;
实施方式
白及多糖(Bletillastriata polysaccharide,BSP,陕西西安帕尼尔生物科技有限公司);卡波姆(CP):Carbopol 940(CP940,美国Lubrizol公司)、Carbopol 1342(CP1342,美国Lubrizol公司)、Carbopol ETD 2020(CP 2020,美国Lubrizol公司)、Carbopol Ultrez20(CP U20,美国Lubrizol公司)聚丙烯酸酯交联聚合物-6(Zen,法国Seppic)。
实施例1 阳离子化白及多糖(CBSP)的制备
将BSP溶解于NaOH/尿素溶液中,获得均相体系,再加入NaOH于室温下碱化,升温,向体系中加入NaOH并缓慢滴加醚化剂3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵(CTA),体系中的碱与醚的摩尔比1:1,在恒温水浴中醚化5 h,调pH至中性,醚化反应结束。随后将其置于已活化的截留分子量为8-14 KD的透析袋中,以超纯水为渗透介质进行净化,3h更换一次渗出液;净化后再抽滤、旋蒸,冷冻干燥,粉碎即得阳离子化白及多糖(CBSP)。
实施例2 新型凝胶基质材料CBSP-CP(2:1)的制备
将0.5%(w/v)CP 2020分散于70℃去离子水中,在400 rpm下搅拌至均匀,静置12 h待形成均匀、无团块的溶胶,称为A相;
将1.0%(w/v)CBSP在室温25℃分散于去离子水中,400 rpm下搅拌至均匀,形成CBSP溶液,称为B相;
于室温25℃下,将B相缓慢滴加至A相,枸橼酸饱和溶液和三乙醇胺调pH至6.5,冷冻干燥,得CBSP-CP组合物基质。
实施例3 党参提取物的制备
党参药材在60℃条件下烘干2h,粉碎成粗粉,取过10目筛的党参粗粉, 10倍量蒸馏水煎煮三次,合并三次提取的水煎液,滤过,滤液浓缩至80℃时相对密度为1.30~1.40;取上清液500mL低温避光保存,为党参提取物。
实施例 4 采用不同凝胶基质与党参提取物结合制备的凝胶面膜
分别以市售 CP 940、CP 2020、Zen 以及 CBSP-CP作为基质材料,其它组分及制法相同制备四种不同基质条件下的党参凝胶面膜,考察以 CBSP-CP为基质制备的党参凝胶面膜的制剂性能质量。
处方组成:
组分名称 重量配比
党参提取物 相当于15g药材量
凝胶基质 1g
透明质酸钠 0.5g
维C乙基醚 1g
甘油 10ml
1,2丙二醇 1g
PEG-40氢化蓖麻油 0.5g
苯氧乙醇 0.5g
薄荷醇 1g
D-泛醇 1g
三乙醇胺 0.5g
香精 0.5g
蒸馏水 适量
取适量甘油为润湿剂,分别以CP 940、CP 2020、Zen 和CP-CBSP(实施例2)四种基质和保湿剂透明质酸钠充分溶胀,加入抗氧剂和党参提取物,搅拌至均匀;再加入促渗剂、表面活性剂、防腐剂等充分搅拌,补充去离子水至定量,调节pH,添加适量香精,制备得到不同基质的党参凝胶面膜。
实施例 5 采用不同凝胶基质与党参提取物结合制备的凝胶面膜
分别以市售 CP 940、CP 2020、Zen 以及 CBSP-CP作为基质材料,其它组分及制法相同制备四种不同基质条件下的党参凝胶面膜,考察以 CBSP-CP为基质制备的党参凝胶面膜的制剂性能质量。
处方组成:
组分名称 重量配比
党参提取物 相当于30g药材量
凝胶基质 1g
透明质酸钠 0.5g
维C乙基醚 1g
甘油 10ml
1,2丙二醇 1g
PEG-40氢化蓖麻油 0.5g
苯氧乙醇 0.5g
薄荷醇 1g
D-泛醇 1g
三乙醇胺 0.5g
香精 0.5g
蒸馏水 适量
取适量甘油为润湿剂,分别以CP 940、CP 2020、Zen 和CP-CBSP(实施例2)四种基质和保湿剂透明质酸钠充分溶胀,加入抗氧剂和党参提取物,搅拌至均匀;再加入促渗剂、表面活性剂、防腐剂等充分搅拌,补充去离子水至定量,调节pH,添加适量香精,制备得到不同基质的党参凝胶面膜。
实施例 6采用不同凝胶基质与党参提取物结合制备的凝胶面膜
分别以市售 CP 940、CP 2020、Zen 以及 CBSP-CP作为基质材料,其它组分及制法相同制备四种不同基质条件下的党参凝胶面膜,考察以 CBSP-CP为基质制备的党参凝胶面膜的制剂性能质量。
处方组成:
组分名称 重量配比
党参提取物 相当于45g药材量
凝胶基质 1g
透明质酸钠 0.5g
维C乙基醚 1g
甘油 10ml
1,2丙二醇 1g
PEG-40氢化蓖麻油 0.5g
苯氧乙醇 0.5g
薄荷醇 1g
D-泛醇 1g
三乙醇胺 0.5g
香精 0.5g
蒸馏水 适量
取适量甘油为润湿剂,分别以CP 940、CP 2020、Zen 和CP-CBSP(实施例2)四种基质和保湿剂透明质酸钠充分溶胀,加入抗氧剂和党参提取物,搅拌至均匀;再加入促渗剂、表面活性剂、防腐剂等充分搅拌,补充去离子水至定量,调节pH,添加适量香精,制备得到不同基质的党参凝胶面膜。
实施例7 CBSP-CP及市售基质制备的党参凝胶面膜稳定性研究
将实施例6样品均封装于无色透明西林瓶中,分别置于40℃、60℃及强光照(4500lx)条件下,考察不同基质材料制备的党参凝胶面膜外观性状、粘度及党参炔苷指标成分含量等质量指标的变化,结果见表1-表3,表中“↓”、 “ ↑”代表与0天相比下降或升高的程度。结果显示,以本发明CBSP-CP为基质制备的党参凝胶面膜在高温、强光条件下,凝胶的外观性状、粘度及活性指标成分含量均具有更为良好的稳定性。
表1 不同基质与党参提取物结合制备的凝胶面膜的稳定性(高温40℃)(,n=3)
表2 不同基质与党参提取物结合制备的凝胶面膜的稳定性(高温60℃)(,n=3)
表3 不同基质与党参提取物结合制备的凝胶面膜的稳定性(强光4500lx)(,n=3)
实施例8 稳态粘度的考察
采用DV-Ⅲ型流变仪,模式1,SC4-34 #转子,于室温25 ℃条件下以20s-1的恒定速率剪切120 s,测定凝胶样品的稳态表观粘度,以不同基质制备党参凝胶面膜的稳态粘度结果见表4。以CBSP-CP制备的党参凝胶面膜(实施例6),稳态表观粘度下降幅度最小,表明CBSP-CP与党参提取物共同作用,制备的党参凝胶面膜体系粘度维持的最好。
表4 不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜稳态粘度结果
实施例9 修复作用的考察
(1)提高UVB损伤的HaCaT细胞的增殖活性
实验方法
取对数生长期的HaCaT细胞,以完全培养液将细胞密度调整至1×105个/mL后接种于96孔细胞培养板中,于37 ºC,5 % CO2细胞培养箱中培养待96 孔板中细胞长至70 %左右,随机分为正常组(空白对照组)、UVB照射组(模型组)、由CBSP-CP及市售基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜组,进行预给药24h。预给药时空白对照组和UVB照射组均给予完全培养液。吸弃96孔板中培养液,PBS清洗2次,每孔加入100 μL PBS覆盖,用UVB光疗仪照射模型组、各基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜组,照射剂量为60mJ/cm2,照射完成后,弃去PBS,加入完全培养液,于37 ℃、5% CO2的培养箱中孵育24 h后,CCK8法检测细胞增殖活性,结果见表5。
表5 不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜对UVB照射后细胞活性的影响( ± SD )(n=12)
### P<0.001 vs 空白对照 *** P<0.001 vs 模型 * P<0.05 vs 模型
由表5可知,不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜作用于UVB损伤的HaCaT细胞后,可提高其增殖活性,其中以CBSP-CP为基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜效果最好。
(2) 提高UVB损伤HaCaT细胞的抗氧化活性-谷胱甘肽过氧化物酶
实验方法:取对数生长期HaCaT细胞以完全培养液调整至1×105个/mL的密度种到60 mm培养皿中,于37 ºC,5 % CO2细胞培养箱中培养。待培养皿中细胞长至约60%左右后随机分为正常组(空白对照组)、UVB照射组(模型组)、由CBSP-CP及市售基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜组,进行预给药24h。预给药时空白对照组和模型组均给予完全培养液。吸弃培养皿中培养液,PBS清洗2次,每孔加入100 μL PBS覆盖,用UVB光疗仪照射模型组和各基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜组,照射剂量为60mJ/cm2,照射完成后,弃去PBS,加入完全培养液,于37 ℃、5% CO2的培养箱中孵育24 h后,采用试剂盒进行谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平检测,结果见表6。
GSH-Px酶活力=×标准管浓度(20µmol/L)×稀释倍数÷反应时间÷(取样量×样本蛋白含量)
按GSH-PX测定试剂盒(比色法)说明书操作
表6 不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜对UVB照射后HaCaT细胞中GSH-Px活力的影响( ± SD )(n=3)
##P<0.01 vs 空白对照 * P<0.05 vs 模型 ** P<0.01 vs 模型
由表6可知,不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜作用于UVB损伤的HaCaT细胞后,均可显著提高其GSH-PX活力,其中以CBSP-CP为基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜效果最好。
(3) 提高UVB损伤HaCaT细胞的抗氧化活性-丙二醛
实验方法:取对数生长期HaCaT细胞以完全培养液调整至1×105个/mL的密度种到60 mm培养皿中,于37 ºC,5 % CO2细胞培养箱中培养。待培养皿中细胞长至约60%左右后随机分为正常组(空白对照组)、UVB照射组(模型组)、由CBSP-CP及市售基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜组,进行预给药24h。预给药时空白对照组和模型组均给予完全培养液。吸弃培养皿中培养液,PBS清洗2次,每孔加入100 μL PBS覆盖,用UVB光疗仪照射模型组和和各基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜组,照射剂量为60mJ/cm2,照射完成后,弃去PBS,加入完全培养液,于37 ℃、5% CO2的培养箱中孵育24 h后,采用试剂盒进行丙二醛(MDA)水平检测,结果见表7。
按MDA测定试剂盒(TBA法)说明书操作
表7 不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜对UVB照射后HaCaT细胞中MDA含量的影响(± SD )(n=3)
##P<0.01 vs 空白对照 * P<0.05 vs 模型
由表7可知,不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜作用于UVB损伤的HaCaT细胞后,均可降低其MDA含量,其中以CBSP-CP为基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜效果最好。
实施例10 保湿、亮肤、抗皱作用的考察
建立紫外线(UV)辐射ICR小鼠致皮肤衰老模型,考察不同基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜对小鼠皮肤含水量、黑色素及皱纹生成的影响。
(1)建立光老化动物模型
先用剪刀和电动剃须刀剔除小鼠背部毛发,充分暴露其背部皮肤后,使用自制小鼠固定器固定小鼠后,SS-03AB型光疗仪辐照小鼠造模。每周照射5天,休息2天,共辐照造模3周,总辐射剂量UVB总剂量:9.45 J/cm2,UVA总剂量:94.5 J/cm2。造模结束后,造模成功的小鼠背部皮肤明显增厚,皮肤表面粗糙,皮肤干燥变硬,可见明显皱纹。
(2)实验分组
随机分成6组,分别为:空白对照组,5只,备皮,装置固定,不照射;模型组,5只,备皮,装置固定,照射;复方凝胶组(实施例6中不同基质与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜)组,5只,备皮,装置固定,背部皮肤局部给予对应基质制备的党参凝胶面膜,照射。
(3)党参凝胶面膜对UV照射诱导的光老化小鼠皮肤水分的影响
皮肤水分含量测试仪(Cornemeter CM 825,Courage and Khazaka,德国)的探头是基于电容的原理进行测量。水的介电常数是81,其他物质的介电常数通常小于7,水是皮肤上介电常数最大的物质。当水分含量发生变化时,皮肤的电容值亦发生变化,故可通过测定皮肤电容值,分析皮肤表面的含水量。测得值是一相对值。单位用C.U.(CorneometerUnits)表示。
试验中,测试使用不同党参凝胶面膜后,皮肤水分含量的变化。具体为: 空白对照组不照射,模型组、不同党参凝胶面膜组均进行紫外线照射,照射条件见建立光老化动物模型中。一周照射5天,每周于照射5天结束后即第6天(即6d,12d,18d)测定皮肤含水量。分别使用皮肤水分含量测试仪测定测试区域的皮肤MMV值,每个测试区域测试3次取平均值。皮肤水分含量MMV值变化反映在测试周期内,实验区域水分含量随时间变化规律。其值越大,水分含量越大,反之,水分含量越小。测量结果如表8所示。
表8不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜对UV照射诱导的光老化小鼠皮肤水分的影响( ± SD )(n=5)
### P<0.001 vs 空白对照组 ## P<0.01 vs 空白对照组 ** P<0.01 vs 模型组 *P<0.05 vs 模型组
从表8可以看出,在试验周期内,使用党参凝胶面膜组的测试区的皮肤水分MMV值均高于模型组,且以CBSP-CP与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜对光老化皮肤的含水量增加作用最大,改善光老化皮肤干燥症状。
(4) 党参凝胶面膜对光老化小鼠皮肤黑色素含量的影响
组织活力成像仪(Tissue Viability Imager TiVi 700,WheelsBridge AB,瑞典)基于白光照明器发出的经过偏振光滤光片后的线性偏振光到达要分析的皮肤表面,大部分线性偏振光被皮肤表面直接反射后被探测器的滤光片阻碍,只有部分无规则的经过皮肤下层,经红血细胞吸收过后的偏振光通过了滤光片进入探测器。到达探测器的偏振光中,绿光成分由于血管中红血细胞的吸收作用被减弱,红色成分几乎没有被改变,而红血细胞周围的其他组织对绿光和红光的吸收基本相同。这样就可以得到皮肤深层的血管微循环状态,得到图像中每个点的红血细胞浓度值即TiVi 值。采用TiVi 700拍摄图像,采用TiVi97色素分析软件分析黑色素含量。
试验中,测试使用党参凝胶面膜后,皮肤黑色素含量的变化。具体为: 空白对照组不照射,模型组、不同党参凝胶面膜组均进行紫外线照射,照射条件见建立光老化动物模型中。一周照射5天,每周于照射5天结束后即第6天(即6d, 12d,18d)测定皮肤黑色素含量。测量结果如表9所示。
表9不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜对UV照射诱导的光老化小鼠皮肤黑色素含量的影响( ± SD )(n=5)
### P<0.001 vs 空白对照组 ## P<0.01 vs 空白对照组 ** P<0.01 vs 模型组 *P<0.05 vs 模型组
从表9可以看出,在试验周期内,使用党参凝胶面膜组的测试区的黑色素含量均低于模型组,且以CBSP-CP与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜对降低光老化皮肤的黑色素含量的效果最佳,改善光老化皮肤的色素沉着问题。
(5) 党参凝胶面膜对光老化小鼠皮肤皱纹的影响
在第3周时采用(4)中组织活力成像仪(Tissue Viability Imager TiVi 700,WheelsBridge AB,瑞典)拍摄图像,皱纹分析软件Wrinkle Analyzer TiVi90通过对皱纹轮廓分析计算出皱纹的深度和体积。不同基质与党参提取物结合制备党参凝胶面膜作用于UV辐射致皮肤衰老小鼠的皱纹的深度和体积分别见图2、3、4。测定结果显示使用党参凝胶面膜组的测试区的皱纹深度和体积均低于模型组,且以CBSP-CP与党参提取物结合制备的党参凝胶面膜对皱纹的减轻作用最佳。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

Claims (8)

1.一种凝胶基质,按重量比,由阳离子化白及多糖、卡波姆2:1制成。
2.一种党参凝胶面膜,其组成包括:权利要求1所述的凝胶基质、党参提取物。
3.权利要求2所述的党参凝胶面膜,还包括pH调节剂。
4.权利要求3所述的党参凝胶面膜,还包括附加剂,其特征在于,附加剂选自保湿剂、防腐剂、透皮吸收促进剂、抗氧剂、香精的一种或几种。
5.如权利要求1-4任一项所述党参凝胶面膜,其特征在于,所述凝胶面膜由以下成分组成:
党参提取物 相当于15-55g药材量
凝胶基质 0.3-3g
透明质酸钠 0.1-2g
维C乙基醚 0.5-2g
甘油 0.1-20ml
1,2丙二醇 0.3 - 4g
PEG-40氢化蓖麻油 0.1-5g
苯氧乙醇 0.1-1.5g
薄荷醇 0.5-2g
D-泛醇 0.1-2g
三乙醇胺 0.01-2g
香精 0.01-2g
蒸馏水 适量。
6.如权利要求1-4所述党参凝胶面膜,其特征在于,各成分的重量配比为:
党参提取物 相当于20-50g药材量
凝胶基质 0.5-2g
透明质酸钠 0.2-1g
维C乙基醚 0.7-1.5g
甘油 1-15ml
1,2丙二醇 0.5-3g
PEG-40氢化蓖麻油 0.2-2.5g
苯氧乙醇 0.2-1g
薄荷醇 0.8-1.5g
D-泛醇 0.5-1.5g
三乙醇胺 0.05-1g
香精 0.05-1.5g
蒸馏水 适量。
7.如权利要求1-4所述党参凝胶面膜,其特征在于,各成分的重量配比为:
党参提取物 相当于15-45g药材量
凝胶基质 0.8-1.5g
透明质酸钠 0.4 - 0.8g
维C乙基醚 0.9-1.2g
甘油 2-11ml
1,2丙二醇 0.8-1.5g
PEG-40氢化蓖麻油 0.4-1g
苯氧乙醇 0.4-0.8g
薄荷醇 0.9-1.2g
D-泛醇 0.8-1.2g
三乙醇胺 0.1-0.6g
香精 0.2-1g
蒸馏水 适量。
8.如权利要求1-4所述党参凝胶面膜,其特征在于,各成分的重量配比为:
党参提取物 相当于45g药材量
凝胶基质 1g
透明质酸钠 0.5 g
维C乙基醚 1g
甘油 10ml
1,2丙二醇 1g
PEG-40氢化蓖麻油 0.5g
苯氧乙醇 0.5g
薄荷醇 1g
D-泛醇 1g
三乙醇胺 0.5g
香精 0.5g
蒸馏水 适量。
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