CN116688100A - 一种促进毛囊再生的组合物及制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种促进毛囊再生的组合物及制备方法和应用，具体涉及医药技术领域。所述组合物包括骨髓间充质干细胞培养上清(MSC‑CM)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、鲑鱼油、葡萄籽提取物、氢化可的松和透明质酸。本发明通过提供的药物组合使用了多种生长因子和天然草药，相较于单一成分的药物，具有更加全面和协同的作用，能够更好地刺激毛囊干细胞的增殖和毛发生长，改善毛囊干细胞周围组织的微环境。同时，该药物组合天然安全，价格便宜、无副作用，适用于广大人群。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种促进毛囊再生的组合物及制备方法和应用。
背景技术
近年来，随着生活节奏的加快，脱发率明显上升，并有逐渐年轻化趋势。因此，随着脱发这一亚健康问题越来越明显，对毛发脱落的预防和治疗的需求提高。
目前市面上的治疗脱发方法主要有药物治疗常用的药物包括米诺地尔、米诺地尔与氯化钠复方、米诺地尔与丝氨酸、米诺地尔与生物素等。这些药物可以促进毛发生长，延长生长期，减少脱发。手术治疗：手术治疗是治疗脱发的一种有效手段。常用的手术包括植发手术、毛发移植手术等，可以将健康的毛囊移植到脱发的部位，恢复毛发生长。特殊治疗：特殊治疗包括光疗、激光治疗、中药治疗等，可以有效促进毛发生长和修复。以上方法是目前最常见的治疗方法，但是缺陷太多。
1.限制性：目前市场上的治疗方法只能缓解脱发症状，而不能完全治愈脱发问题。这些方法往往只能在一定程度上延缓脱发进程，无法完全阻止脱发。
2.副作用：某些治疗方法可能会引起副作用，例如口服药物可能会引起头晕、恶心、性功能障碍等不良反应，激光治疗可能会引起头痛、眼睛疲劳等问题。
3.昂贵：某些治疗方法价格昂贵，例如植发手术需要数万甚至数十万的费用，而且效果也不是百分之百的。
4.时间长：某些治疗方法需要长期坚持才能看到效果，例如口服药物需要服用数月至数年才能看到效果，植发手术需要等待数月至数年才能看到完全的效果。
5.不适用于所有人：某些治疗方法可能不适用于所有人，例如植发手术需要有足够的头发供体，而某些人可能没有足够的头发供体。
发明内容
为此，本发明提供一种促进毛囊再生的组合物及制备方法和应用，以解决上述问题。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
根据本发明第一方面提供的一种促进毛囊再生的组合物，包括：骨髓间充质干细胞培养上清(MSC-CM)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、鲑鱼油、葡萄籽提取物、氢化可的松和透明质酸。
进一步的，所述骨髓间充质干细胞培养上清的制备方法包括骨髓间充质干细胞的获取、培养、融合并传代、传代F3后继续培养至80％-90％时，收集细胞上清，2000r/5min离心，即得骨髓间充质干细胞培养上清。
进一步的，传代F3的骨髓间充质干细胞满足CD105、CD90、CD73、CD44的比例均高于95％；CD19、CD45、CD11b、CD34的比例均低于5％。
进一步的，包括：1-2mL骨髓间充质干细胞培养上清、2-10ng/mL表皮生长因子(EGF)、2-10ng/mL成纤维细胞生长因子、0.1％-2％鲑鱼油、0.1-1μg/mL葡萄籽提取物、1-2μg/毫升的氢化可的松、0.5-2％透明质酸。
根据本发明第二方面提供的一种促进毛囊再生的组合物的制备方法，包括将表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、鲑鱼油、葡萄籽提取物、氢化可的松和透明质酸溶于骨髓间充质干细胞培养上清中，混合均匀即可。
根据本发明第三方面提供的一种促进毛囊再生的组合物在制备治疗包括脱发、秃顶在内的毛发问题的药物中的应用。
进一步的，所述药物为凝胶或注射液。
根据本发明第四方面提供的一种促进毛囊再生的药物凝胶，包括如上所述促进毛囊再生的组合物和药物用凝胶辅料。
各药物的具体作用：
骨髓间充质干细胞培养上清(MSC-CM)：MSC-CM在生发中的作用主要是促进毛囊细胞的增殖和分化，以及调节毛囊周围的微环境。MSC-CM中含有多种生长因子、细胞因子和蛋白质，这些物质可以刺激毛囊细胞的生长和分化，促进头发的生长和修复损伤。同时，MSC-CM还能够改善毛囊周围的微环境，增加毛囊的血液供应和营养供应，提高毛囊的健康状况，MSC-CM中还含有一些天然的抗氧化物质，可以减轻毛囊周围的氧化应激，从而促进头发的生长和健康。
表皮生长因子(EGF)：EGF生长因子是人体内本身存在的一种活性物质，由53个氨基组成，它的作用是抗衰老和促进肌肤修复。它能刺激表皮细胞生长因子，促进受损皮肤的修复与再生，促进创面、伤口加速愈合。抗衰老方面，EGF能刺激皮肤内透明质酸和胶原蛋白等的合成和分泌，修复老化断裂的胶原弹性纤维，皮肤胶原蛋白含量丰富，饱满光泽、有弹性，消除皱纹，恢复青春活力。
成纤维细胞生长因子(FGF)：成纤维细胞生长因子(FGF)是一类多功能的细胞因子，主要作用是促进细胞增殖、分化和迁移，同时也能影响细胞粘附和细胞外基质合成。FGF广泛存在于人体内，包括神经系统、心血管系统、骨骼系统、免疫系统等。FGF的作用机制主要是通过与细胞表面的FGF受体结合，激活细胞内信号通路，从而调节细胞的生长和分化。
鲑鱼油：鲑鱼油是一种天然的营养补充剂，含有丰富的omega-3脂肪酸和维生素D等营养成分，可以促进头发的生长和健康。鲑鱼油中的omega-3脂肪酸可以促进头皮血液循环，增强头发根部的营养供应，从而促进头发的生长。此外，鲑鱼油中的维生素D也可以促进头发的生长和健康，增强头发的弹性和光泽。
葡萄籽提取物：葡萄籽提取物是从葡萄籽中提取的一种人体内不能合成的新型高效天然抗氧化剂物质。它是目前自然界中发现的抗氧化、清除自由基能力最强的物质，其抗氧化活性为维生素E的50倍、维生素C的20倍，它能有效清除人体内多余的自由基，具有超强的延缓衰老和增强免疫力的作用。葡萄籽提取物富含多种天然抗氧化剂，如原花青素、白藜芦醇等，能够中和自由基，减轻毛囊细胞的氧化应激，保护毛囊免受损伤，促进头发生长，5α-还原酶是一种能够将睾酮转化为二氢睾酮的酶，而二氢睾酮是导致男性脱发的主要原因之一。葡萄籽提取物中的原花青素能够抑制5α-还原酶的活性，从而减少二氢睾酮的生成，减缓脱发的进程；促进胶原合成：葡萄籽提取物中的原花青素能够促进胶原的合成，增强毛囊的弹性和韧性，从而减少头发的断裂和脱落。
氢化可的松：氢化可的松是一种类固醇激素，主要作用是抑制炎症反应和免疫反应。在生发中，氢化可的松的作用主要是通过抑制炎症反应和免疫反应，减少毛囊受到的损伤，促进头发生长。具体来说，氢化可的松能够抑制炎症反应和免疫反应，减少毛囊受到的炎症和免疫攻击，从而减缓脱发的进程。同时，氢化可的松还能够促进毛囊细胞的增殖和分化，促进头发生长。此外，氢化可的松还能够调节头皮的油脂分泌，改善头皮环境，促进头发健康生长。
透明质酸HA：透明质酸在生发中的作用主要是保湿和滋润头皮，促进头皮血液循环，增强头发的生长力和弹性。透明质酸具有很强的保湿能力，可以吸收并锁住水分，使头皮保持湿润状态，防止头皮干燥、瘙痒等不适症状。同时，透明质酸还能够促进头皮血液循环，增加头发的营养供应，提高头发的生长速度和质量，使头发更加健康、浓密、有光泽。此外，透明质酸还能够修复和保护头发毛鳞片，增强头发的弹性和韧性，防止头发断裂、分叉等问题。
本发明具有如下优点：
本发明的申请主要是以BMSCs上清与天然草本药物结合，BMSCs上清中含有大量的细胞营养营养因子可以促进毛囊再生，如血管内皮生长因子可以促进血管生成和修复，从而提供毛囊所需的养分和氧气，促进毛囊再生；如干扰素-γ和转化生长因子-β等，可以抑制炎症反应，从而减少毛囊受到的损伤，促进毛囊再生；如胶原蛋白和透明质酸等，可以促进基质的重建和修复，从而改善毛囊周围的环境，促进毛囊再生。
本发明通过提供的药物组合使用了多种生长因子和天然草药，相较于单一成分的药物，具有更加全面和协同的作用，能够更好地刺激毛囊干细胞的增殖和毛发生长，改善毛囊干细胞周围组织的微环境。同时，该药物组合天然安全，价格便宜、无副作用，适用于广大人群。
附图说明
为了更清楚地说明本发明的实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图引伸获得其它的实施附图。
本说明书所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本发明所揭示的技术内容得能涵盖的范围内。
图1为本发明病例1提供的一种治疗前后对比图；
图2为本发明病例2提供的一种治疗前后对比图；
图3为本发明病例3提供的一种治疗前后对比图；
图中：A-治疗前；B治疗后。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
骨髓间充质干细胞培养上清(MSC-CM)的培养：
1.该研究获得了中国人民武装警察部队总医院伦理委员会的批准，并获得了骨髓捐赠者的书面知情同意。骨髓取自供体的髂骨。
2.将细胞以1×105/cm2的密度接种在杜尔贝科改良的Eagle培养基/营养混合物F-12(GIBCO，美国)中，添加10％胎牛血清(GIBCO，美国)，并在含有5％二氧化碳的气氛中孵育。每隔第三天用新鲜培养基替换培养基。细胞用胰蛋白酶(GIBCO，USA)消化，并在达到90％的融合后传代。
3.选取了BMSCs的第3代。采用流式细胞术检测细胞纯度。CD105、CD90、CD73、CD44的比例均高于95％，CD19、CD45、CD11b、CD34的比例均低于5％
4.第3代的BMSCs接种在35mm培养皿上，密度为2×105/cm2生长到80％-90％时，收集细胞上清，2000r/5min离心，-20冻存。
表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子(FGF)购买与百奥莱特生物公司(货号：GH0933、JN0228)、鲑鱼油购买与嘉兴天和诚生物科技有限公司(CAS 6217-54-5)、葡萄籽提取物够买与陕西帕尼尔生物科技有限公司(货号：PB20211217),氢化可的松购买与西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司(CAS No.50-23-7)、透明质酸购买与桐晖药业CAS号：9067-32-7。
实施例1
本实施例提供一种促进毛囊再生的组合物：
取第三代的BMSCs上清液为溶剂2mL，添加4ng/mL表皮生长因子(EGF)、4ng/mL成纤维细胞生长因子(FGF)、0.5％鲑鱼油、0.8微克/mL葡萄籽提取物、1微克/毫升的氢化可的松、1％透明质酸。
将各种原料按照上述比例混合后均匀，即得促进毛囊再生的组合物。
实施例2
本实施例提供一种促进毛囊再生的组合物：
取第三代的BMSCs上清液为溶剂2mL，添加2ng/mL表皮生长因子(EGF)、2ng/mL成纤维细胞生长因子(FGF)、0.2％鲑鱼油、0.1微克/mL葡萄籽提取物、1微克/毫升的氢化可的松、0.5％透明质酸。
将各种原料按照上述比例混合后均匀，即得促进毛囊再生的组合物。
实施例3
本实施例提供一种促进毛囊再生的组合物：
取第三代的BMSCs上清液为溶剂2mL，添加10ng/mL表皮生长因子(EGF)、10ng/mL成纤维细胞生长因子(FGF)、2％鲑鱼油、1微克/mL葡萄籽提取物、2微克/毫升的氢化可的松、2％透明质酸。
将各种原料按照上述比例混合后均匀，即得促进毛囊再生的组合物。
对比例1
本对比例提供一种促进毛囊再生的组合物：
除BMSCs上清液换为生理盐水外，其他的于实施例1完全相同。
对比例2
本对比例提供一种促进毛囊再生的组合物：
除删除表皮生长因子和成纤维细胞生长因子外，其他的于实施例1完全相同。
对比例3
本对比例提供一种促进毛囊再生的组合物：
除删除氢化可的松外，其他的于实施例1完全相同。
实验例1
使用实施例1的组合物和对比例1-3的组合物，对剔除背部毛发的SD大鼠背部进行涂抹，观察毛发再生时间，大鼠背部毛发的生长周期为20-30天，通过实施例1的组合药物明显加快毛发的生长周期，且效果明显高于其他组；如表1所示，以可明显看出生长的毛发为准。
表1
具体病例
病例1
患者，51岁，因“脱发多年”入院，脱发等级：男性稀疏轻度，专科情况：双侧额角上移明显，见少许绒毛生长，头皮可见。核心区、中心区及顶旋区毛发整体稀疏细软，头皮可见。后枕部毛发较稀疏细软，头皮可见。诊断：雄激素性脱发。
使用实施例1的组合物涂抹头顶，如图1所示，治疗三个月后；自述由之前油性发质转变为中性发质，发丝由细软变粗硬有光泽，头皮油脂分泌较之前减少，发量增加。
病例2
患者，45岁，因“脱发多年”入院，脱发等级：男性稀疏轻度，专科情况：双侧额角上移明显，见少许绒毛生长，头皮可见。核心区、中心区及顶旋区毛发整体稀疏细软，头皮可见。后枕部毛发较稀疏细软，头皮可见。诊断：雄激素性脱发。
使用实施例1的组合物涂抹头顶，如图2所示，治疗3个月后拍摄，发量明显增多，发丝增粗。
病例3
患者，50岁，因“脱发多年”入院，脱发等级：男性稀疏中度，专科情况：双侧额角上移明显，见少许绒毛生长，头皮可见。核心区、中心区及顶旋区毛发整体稀疏细软，头皮可见。后枕部毛发较稀疏细软，头皮可见。诊断：雄激素性脱发。
使用实施例1的组合物涂抹头顶，如图3所示，治疗6个月后由大量脱发明显出现掉发减少，无发区域有新生的毛发长出，面积变浓密。
本发明提供的促进毛囊再生的药物组合物中以骨髓间充质干细胞培养上清(MSC-CM)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、鲑鱼油、葡萄籽提取物,氢化可的松、透明质酸共同联合使用。MSC-CM中含有多种生长因子、细胞因子和蛋白质，这些物质可以刺激毛囊细胞的生长和分化，促进头发的生长和修复损伤。同时，MSC-CM还能够改善毛囊周围的微环境，增加毛囊的血液供应和营养供应，提高移植后药物的更适合环境和长期的有效性。EGF的作用是抗衰老和促进肌肤修复。它能刺激表皮细胞生长因子，促进受损毛囊周围的组织修复与再生，刺激头皮内透明质酸和胶原蛋白等的合成和分泌，修复老化断裂的胶原弹性纤维，是毛囊更加富有生命力。FGF主要作用是促进细胞增殖、分化和迁移，同时也能影响细胞粘附和细胞外基质合成，FGF通过与细胞表面的FGF受体结合，激活细胞内信号通路，从而调节细胞的生长和分化，从促进周围毛囊干细胞的增殖。鲑鱼油是一种天然的营养补充剂，含有丰富的omega-3脂肪酸和维生素D等营养成分，可以促进头发的生长和健康。鲑鱼油中的omega-3脂肪酸可以促进头皮血液循环，增强头发根部的营养供应，从而促进头发的生长。葡萄籽提取物富含多种天然抗氧化剂，如原花青素、白藜芦醇等，能够中和自由基，减轻毛囊细胞的氧化应激，保护毛囊免受损伤，促进头发生长，5α-还原酶是一种能够将睾酮转化为二氢睾酮的酶，而二氢睾酮是导致男性脱发的主要原因之一。葡萄籽提取物中的原花青素能够抑制5α-还原酶的活性，从而减少二氢睾酮的生成，减缓脱发的进程；氢化可的松：氢化可的松是一种类固醇激素，主要作用是抑制炎症反应和免疫反应。在生发中，氢化可的松的作用主要是通过抑制炎症反应和免疫反应，减少毛囊受到的损伤，促进头发生长。具体来说，氢化可的松能够抑制炎症反应和免疫反应，减少毛囊受到的炎症和免疫攻击，从而减缓脱发的进程。同时，氢化可的松还能够促进毛囊细胞的增殖和分化，促进头发生长。此外，氢化可的松还能够调节头皮的油脂分泌，改善头皮环境，促进头发健康生长。透明质酸的作用主要是保湿和滋润头皮，促进头皮血液循环，增强头发的生长力和弹性。透明质酸具有很强的保湿能力，可以吸收并锁住水分，使头皮保持湿润状态，防止头皮干燥、瘙痒等不适症状。同时，透明质酸还能够促进头皮血液循环，增加头发的营养供应，提高头发的生长速度和质量，使头发更加健康、浓密、有光泽。此外，透明质酸还能够修复和保护头发毛鳞片，增强头发的弹性和韧性，防止头发断裂、分叉等问题。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (8)
1.一种促进毛囊再生的组合物，其特征在于，包括：骨髓间充质干细胞培养上清(MSC-CM)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、鲑鱼油、葡萄籽提取物、氢化可的松和透明质酸。
2.根据权利要求1所述的一种促进毛囊再生的组合物，其特征在于，所述骨髓间充质干细胞培养上清的制备方法包括骨髓间充质干细胞的获取、培养、融合并传代、传代F3后继续培养至80％-90％时，收集细胞上清，2000r/5min离心，即得骨髓间充质干细胞培养上清。
3.根据权利要求2所述的一种促进毛囊再生的组合物，其特征在于，传代F3的骨髓间充质干细胞满足CD105、CD90、CD73、CD44的比例均高于95％；CD19、CD45、CD11b、CD34的比例均低于5％。
4.根据权利要求1所述的一种促进毛囊再生的组合物，其特征在于，包括：1-2mL骨髓间充质干细胞培养上清、2-10ng/mL表皮生长因子(EGF)、2-10ng/mL成纤维细胞生长因子(FGF)、0.1％-2％鲑鱼油、0.1-1μg/mL葡萄籽提取物、1-2μg/毫升的氢化可的松、0.5-2％透明质酸。
5.一种促进毛囊再生的组合物的制备方法，其特征在于，包括将表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、鲑鱼油、葡萄籽提取物、氢化可的松和透明质酸溶于骨髓间充质干细胞培养上清中，混合均匀即可。
6.一种促进毛囊再生的组合物在制备治疗包括脱发、秃顶在内的毛发问题的药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物为凝胶或注射液。
8.一种促进毛囊再生的药物凝胶，其特征在于，包括权利要求1-5任一所述促进毛囊再生的组合物和药物用凝胶辅料。
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