CN116584591A - 一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料，包括以下重量份数的组分：40‑52份玉米、35‑48份生物发酵干料和1‑5份蛋鸡专用添加剂；生物发酵干料是底物经枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌发酵制得，底物包括玉米蛋白粉、米糠、豆粕、麦麸、酒精湿糟、椰蓉和甜菜糖蜜；蛋鸡专用添加剂包括大黄素、淫羊藿苷、单月桂酸甘油酯、谷氨酰胺、小檗碱、绿原酸、聚苹果酸钙、五倍子单宁酸、壳聚糖、牛磺酸、百草霜和载锌沸石。还公开上述生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法，该方法为：先制备生物发酵干料，再将玉米、生物发酵干料和蛋鸡专用添加剂混合均匀。本发明能够提升蛋鸡的全身免疫水平和健康状况，增加产蛋量和洁蛋量，改善蛋品质量。
Description
技术领域
本发明属于蛋鸡饲料技术领域，具体涉及一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料及其制备方法。
背景技术
鸡蛋外部特征包括蛋壳质量与清洁度，其直接影响其商品价值和价格，影响养鸡生产者的效益，是养鸡业蛋品质调节的首要问题。蛋形指数、蛋壳厚度与蛋壳强度作为衡量鸡蛋外观品质的经典指标，长期以来备受关注，学者们已在矿物质元素、维生素、微量元素、添加剂等方面开展了大量研究。但是，有关营养对鸡蛋清洁指标的影响，鲜见报道。另一方面，在各个渠道的鸡蛋中，一些大型养鸡场所产的鸡蛋在上市售卖前会采用自动化清洁消毒工艺，洗去鸡蛋上附着的粪便、粘液、血渍和大部分微生物，蛋壳表面十分干净，然而专业清洁耗时耗能，设备成本高，并不适用许多农村散户，且不合理的洁蛋工序还有可能导致蛋壳上覆有的角质保护膜丢失，使鸡蛋内部遭受微生物的严重入侵，蛋壳抗破损力下降。开发创新蛋鸡营养调控技术，从饲料端抓起，减少脏蛋发生，发展洁蛋生产，将成为解决上述问题的关键。此外，近年来蛋鸡产业在取得瞩目成就的同时，养鸡对环境质量构成严重威胁，尤其是废弃物中高含量的含氮类有害物质难以处理。由此看来，探究饲粮营养与蛋鸡污染物减量策略亟不可待。
中国发明专利CN201610141848.5公开一种降低脏蛋率的绿色蛋鸡饲料配方及其制备方法，在玉米、豆粕、棉粕与玉米DDGS为饲料的基础上，加入酵母菌、乳酸菌和芽孢杆菌混合发酵的豆粕作为辅助原料，改善了蛋鸡的肠道健康，使蛋鸡产蛋率明显提高，脏蛋数减少。类似地，中国发明专利CN202011452817.4提供一种蛋禽用抗应激复合预混合饲料及其制备方法与应用，该发明是通过缓解肠道应激损伤，修复肠道屏障功能，提高肠道消化机能，维护肝肠轴健康的方式，实现蛋禽脏蛋数量的减少。但上述两项发明均存在不足，即都错误认为肠道疫病是导致鸡蛋表面出现污垢的唯一根源，未充分意识到洁蛋生产与禽类全身健康相关，故蛋壳保洁效果不甚理想。
因此，提出一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料及其制备方法尤为重要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供了一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料及其制备方法。该蛋鸡低氮生物饲料安全营养，拥有独特的椰香、醇香及酸香风味，饲喂给蛋鸡，可有效护养肝脏、输卵管和肠道等重要器官，提升蛋鸡的全身免疫水平和健康状况，并降低蛋鸡对饲料粗蛋白和氨基酸等含氮类养分的浪费，缓解养殖污染压力；另外，还能延长蛋鸡的产蛋期，增加产蛋量，改善蛋品质量，生产更多的外观干净的鸡蛋，从而显著提升蛋鸡的养殖经济效益。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料，包括以下重量份数的组分：40-52份玉米、35-48份生物发酵干料和1-5份蛋鸡专用添加剂；所述生物发酵干料是底物经枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌发酵制得，所述底物包括玉米蛋白粉、米糠、豆粕、麦麸、酒精湿糟、椰蓉和甜菜糖蜜；所述蛋鸡专用添加剂包括以下重量份数的组分：10-20份大黄素、10-18份淫羊藿苷、7-15份单月桂酸甘油酯、5-10份谷氨酰胺、5-12份小檗碱、5-10份绿原酸、5-10份聚苹果酸钙、5-8份五倍子单宁酸、5-7份壳聚糖、3-7份牛磺酸、1-3份百草霜和1-3份载锌沸石。
优选地，所述玉米蛋白粉、米糠、豆粕、麦麸、酒精湿糟、椰蓉和甜菜糖蜜的重量份数比为10：4：6：2：10：2：1；制备所述生物发酵干料时，先分别制备所述枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌的菌悬液，得到里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液，然后进行发酵，所述里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液的体积比为1：2：1：2；所述酒精湿糟为玉米小曲精糟。
还提供上述生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法，该方法包括以下步骤：
S1、分别将米糠、豆粕和麦麸粉碎；
S2、分别将枯草芽孢杆菌的发酵菌株、产阮假丝酵母的发酵菌株、里氏木霉的发酵菌株及植物乳杆菌的发酵菌株进行活化，然后分别转接到对应的液体培养基中，得到里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液；
S3、称取玉米蛋白粉、酒精湿糟、椰蓉、甜菜糖蜜和S1中粉碎后的米糠、豆粕和麦麸混合均匀，得到底物，在所述底物中添加硫酸铵，再加入自来水，保证36-42％的含水量，然后在高温下灭菌，得到发酵培养基；
S4、在无菌条件下，称取S2中得到的里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌菌悬液和产朊假丝酵母菌悬液，得到发酵复合菌液；
S5、在S3中得到的发酵培养基上接种S4中得到的发酵复合菌液，然后进行发酵，发酵期间每2h翻动1次发酵培养基，得到生物发酵湿料A；在所述生物发酵湿料A中加入S2中得到的植物乳杆菌菌悬液，密封后继续发酵48h，获得生物发酵湿料B；
S6、将S5中得到的生物发酵湿料B的水分降至16％，晾至室温，得到生物发酵干料；称取大黄素、淫羊藿苷、单月桂酸甘油酯、谷氨酰胺、小檗碱、绿原酸、聚苹果酸钙、五倍子单宁酸、壳聚糖、牛磺酸、百草霜和载锌沸石混合均匀，得到蛋鸡专用添加剂；
S7、将玉米、S6中得到的蛋鸡专用添加剂和生物发酵干料混合均匀，制得生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料。
优选地，S1中所述粉碎的粒径均为10目。
优选地，S3中所述硫酸铵的添加量是所述底物质量的3％；所述高温的温度为110℃，灭菌的时间为60min。
优选地，S5中所述发酵复合菌液在所述发酵培养基上的接种量为6％。
优选地，S5中所述发酵培养基上接种发酵复合菌液后进行发酵的温度为32℃，时间为48h。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明的生物发酵干料是选用枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、产阮假丝酵母及里氏木霉四种益生菌发酵底物制得。里氏木霉发酵可以产生纤维素酶和果胶酶，降解非常规饲料中的细胞壁，产阮假丝酵母能够加速利用发酵过程中的还原糖，加速木质纤维素分解，并合成菌体蛋白，枯草芽孢杆菌发酵饲料过程能够产生一些抗生素类物质，而植物乳杆菌能够在厌氧条件下，发酵底物产酸。本发明先进行枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母与里氏木霉的混合有氧发酵，三种益生菌相互促进，可有效分解米糠、麦麸等原料的非淀粉多糖成为易被蛋鸡吸收的还原糖，降解豆粕、酒精湿糟等物的抗营养因子，同时改善甜菜糖蜜和椰蓉的感官品质，避免其氧化酸败，还能生产微生物蛋白、乳酸、抑菌素等各类生物活性物质，通过此阶段发酵，不仅能为后期的厌氧发酵创造有利条件，还可以提升饲料的营养价值，延长地源性资源的储存期；之后进行由植物乳杆菌主导的无氧发酵，能够迅速营造低pH的发酵环境，杀灭有氧发酵产物中的大多数菌种，使乳杆菌成为主要优势菌，避免有氧发酵引起的饲料养分大量丧失，从而保证饲料足够的营养成分。试验证实，本发明采取1：2：1：2的菌液比例，先有氧后无氧的发酵工艺，饲料发酵进程易于控制，实际发酵效果良好，而相较未发酵饲料，生物发酵干料营养更为全面，霉菌毒素含量低下，有害菌数量符合国家卫生安全标准，具有营养安全、储存使用方便等优点。
2、本发明蛋鸡专用添加剂，对机体疾病抵抗力增效明显，具体表现为：选用大黄素、牛磺酸、单月桂酸甘油酯等原料组成蛋鸡专用添加剂，添加剂各组分间无明显拮抗，彼此协同配合，除了可以加强机体自我修复能力，促使机体从疾病中尽快恢复，还能够促进机体各类细胞的增殖更新，护养体内一些重要器官(如肝脏和输卵管)，进而干涉亚健康状态。另外，本发明蛋鸡专用添加剂中小檗碱、绿原酸、淫羊藿苷等原料的最佳配比，还能刺激体内产蛋相关激素的分泌，提高钙等矿物质代谢水平，进一步延伸蛋鸡的产蛋周期，使蛋鸡保持高产，蛋壳强度增加，哈氏单位提高，获得高品质鸡蛋。
3、本发明生产洁蛋的低氮生物饲料，是由生物发酵干料、玉米和蛋鸡专用添加剂组成，其质地松散，散发着一种混有淡淡椰香、醇香及酸香的独特风味，具有良好的诱食效果。其中，生物发酵干料能够快速消除原来饲料中的大部分抗营养因子，降解难消化的木质纤维和霉菌毒素，产生菌体蛋白、酶类、生物活性小肽类、氨基酸、有机酸等有效成分，同时更好地避免了特殊原料中一些养分的大量丧失(如椰蓉中的脂肪)，实现农副资源的饲料化。而本发明中的蛋鸡专用添加剂是采用绿色防治营养学技术手段，科学搭配大黄素、淫羊藿苷、单月桂酸甘油酯、小檗碱、壳聚糖等多种小料而得，可为机体补充额外能量的同时，及时调整体内炎症因子的平衡状态，清除组织中的氧自由基，干涉机体亚健康状态，从而发挥护养肝脏、输卵管、肠道等的良好功效。基于现代营养学与饲料学理论，将少量玉米与蛋鸡专用添加剂和生物发酵干料科学搭配形成的蛋鸡低氮生物饲料，能够节省饲料企业投入品成本，大大提升饲料的整体营养价值与安全性。实践证明，蛋鸡低氮生物饲料的使用，不仅能够延长卵巢生命周期，减缓生产后期蛋鸡产蛋下降速度，明显提高产蛋输出量与蛋品质指标；同时能够强化机体的生理和免疫所需营养，精心养护机体重要组织器官，并直接影响体内免疫和炎症的发生过程，为蛋鸡打造健康且强大的免疫系统，进而明显提高蛋鸡整体健康水平，优化产蛋内部环境，增加粪便持水性，优化粪便结构，使蛋鸡产出的鸡蛋表面清洁，脏蛋率较普通饲料降低2个百分点，提升鸡蛋的商业价值。此外，最重要的是，本发明全面考虑从日粮到排出粪尿污染物全过程，将生物发酵干料、玉米与蛋鸡专用添加剂合理搭配，为蛋鸡提供绿色环保的饲料产品，饲喂给蛋鸡能够明显提高机体对养分转化利用效率，减少养分损失，尤其是排泄物中含氮物质的数量，从源头上有效控制蛋鸡养殖厂周边环境的污染。
下面通过实施例对本发明的技术方案作进一步的详细说明。
具体实施方式
实施例1
本实施例的生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料，包括以下重量份数的组分：52份玉米、48份生物发酵干料和5份蛋鸡专用添加剂；所述生物发酵干料是由底物经枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌发酵制得，所述底物包括玉米蛋白粉、米糠、豆粕、麦麸、酒精湿糟、椰蓉和甜菜糖蜜；所述蛋鸡专用添加剂包括以下重量份的组分：20份大黄素、18份淫羊藿苷、15份单月桂酸甘油酯、10份谷氨酰胺、12份小檗碱、10份绿原酸、10份聚苹果酸钙、8份五倍子单宁酸、7份壳聚糖、7份牛磺酸、3份百草霜、3份载锌沸石所述玉米蛋白粉、米糠、豆粕、麦麸、酒精湿糟、椰蓉和甜菜糖蜜的重量份数比为10：4：6：2：10：2：1；制备所述生物发酵干料时，先分别制备所述枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌的菌悬液，得到里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液，然后进行发酵，所述里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液的体积比为1：2：1：2；所述酒精湿糟为玉米小曲精糟。
上述生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、分别将米糠、豆粕和麦麸均粉碎至10目；
S2、分别将枯草芽孢杆菌的发酵菌株、产阮假丝酵母的发酵菌株、里氏木霉的发酵菌株及植物乳杆菌的发酵菌株进行活化，然后分别转接到对应的液体培养基中，得到里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液；
枯草芽孢杆菌的发酵菌株活化后转接的液体培养基为LB液体培养基，产阮假丝酵母的发酵菌株活化后转接的液体培养基为PDA液体培养基，里氏木霉的发酵菌株活化后转接的液体培养基为自制种子培养基，自制种子培养基的配方为：无水葡萄糖4g，麦芽浸粉10g和去离子水1L，配制好的自制种子培养基在温度为121℃的温度下灭菌20Min；植物乳杆菌的发酵菌株活化后转接的液体培养基为MRS液体培养基；上述四种菌均为市购，且上述四种菌的菌悬液制备均为现有常规制备方法；
S3、称取10份玉米蛋白粉、10份酒精湿糟、2份椰蓉、1份甜菜糖蜜和S1中4份粉碎后的米糠、6份粉碎后的豆粕和2份粉碎后的麦麸混合均匀，得到底物，在所述底物中添加硫酸铵，再加入自来水，保证42％的含水量，在110℃的高温下灭菌60min，得到发酵培养基；所述硫酸铵的添加量是底物质量的3％；
S4、在无菌条件下，按照体积比为1:2:1的比例称取S2中得到的里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液和产朊假丝酵母菌悬液，得到发酵复合菌液；
S5、按6％的接种量在S3中得到的发酵培养基上接种S4中得到的发酵复合菌液，在温度为32℃的条件下发酵48h，发酵期间每2h翻动1次发酵培养基，得到生物发酵湿料A；在所述生物发酵湿料A中加入S2中得到的植物乳杆菌菌悬液，密封后继续发酵48h，获得生物发酵湿料B；所述发酵复合菌液与植物乳杆菌悬液的体积比为2：1；
S6、采用气流干燥法将S5中得到的生物发酵湿料B的水分降至16％，晾至室温，得到生物发酵干料；称取大黄素、淫羊藿苷、单月桂酸甘油酯、谷氨酰胺、小檗碱、绿原酸、聚苹果酸钙、五倍子单宁酸、壳聚糖、牛磺酸、百草霜和载锌沸石混合均匀，得到蛋鸡专用添加剂；
S7、将玉米、S6中得到的蛋鸡专用添加剂和生物发酵干料混合均匀，制得生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料。
本实施例S3中的含水量还可以为36％、37％、38％、39％、40％或41％。
(1)营养价值
称取本实施例S3中的底物装入灭过菌的样品瓶中，并放入温度为4℃冰箱保存，再称取本实施例S6中制得的生物发酵干料为样品，在实验室测定两份样品的各项指标；参考杨正楠(菠萝皮渣发酵饲料特性及对营养的改善2018)，分别测定两份样品中的粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、TCA蛋白、乳酸等，结果如表1所示。
表1底物和生物发酵干料部分营养指标对比
| 项目 | 底物 | 生物发酵干料 |
| 粗蛋白/％ | 9.05 | 28.13 |
| 中性洗涤纤维/％ | 25.48 | 10.62 |
| 酸性洗涤纤维/％ | 19.57 | 7.34 |
| TCA可溶解蛋白/％ | 0.54 | 5.86 |
| 乳酸/％ | 0 | 4.91 |
注：TCA可溶解蛋白，为肽链小于10个氨基酸的多肽及游离氨基酸，是饲料发酵过程中代谢产生的一类主要营养因子，具有抗菌和提高动物体免疫的作用。
(2)抗营养因子
按照ELISA(酶联免疫吸附试验)检测试剂盒(由北京龙科方舟生物工程技术有限公司提供)说明进行抗营养因子(β-伴大豆球蛋白和胰蛋白酶抑制因子)的快速定量检测；参照高鑫(山药块茎抗性淀粉形成的影响因素及理化特性的研究2012)的方法，测定抗性淀粉；采用分光光度法测定植酸含量，结果如表2所示。
表2底物和生物发酵干料抗营养因子变化
(3)毒素
霉菌毒素主要测定黄曲霉毒素B1(AFB1)、呕吐毒素(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEA)含量，采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒进行测定，结果如表3所示。
表3底物和生物发酵干料中霉菌毒素检测结果
| 项目 | AFB1/(ug/kg) | ZEA/(ug/kg) | DON/(ug/kg) |
| 底物 | 16.23 | 44.66 | 628.15 |
| 生物发酵干料 | 4.19 | 17.23 | 520.56 |
(4)卫生指标
参考GB/T 13091-2018,GB/T 18869-2019检测生物发酵干料中的沙门氏菌和大肠杆菌。
表4生物发酵干料的卫生检测
| 项目 | 沙门氏菌 | 大肠杆菌 |
| 检测结果 | _ | _ |
注：“_”表示未检出
上述数据证实，经过本实施例中的生物发酵过程，富含蛋白、小肽、氨基酸、有机酸的玉米蛋白粉等原料的抗营养因子含量大大降低，霉菌毒素ZEA和AFB1明显下降，DON也有所降低，且本实施例中的生物发酵干料营养丰富，且安全可靠。
本实施例中使用的枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉及植物乳杆菌是经过成百上千次实验在多种菌中选出的，如米曲霉、黑曲霉、地衣芽孢杆菌、啤酒酵母等，并不是随意挑选的。
实施例2
本实施例的生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料，包括以下重量份数的组分：40份玉米、35份生物发酵干料和1份蛋鸡专用添加剂，所述生物发酵干料是底物经枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌发酵制得，所述底物包括以下重量份数的组分：10份玉米蛋白粉、4份米糠、6份豆粕、2份麦麸、10份酒精湿糟、2份椰蓉和1份甜菜糖蜜；所述蛋鸡专用添加剂包括以下重量份的组分：10份大黄素、10份淫羊藿苷、7份单月桂酸甘油酯、5份谷氨酰胺、5份小檗碱、5份绿原酸、5份聚苹果酸钙、5份五倍子单宁酸、5份壳聚糖、3份牛磺酸、1份百草霜和1份载锌沸石；制备所述生物发酵干料时，先分别制备所述枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌的菌悬液，得到里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液，然后进行发酵，所述里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液的体积比为1：2：1：2；所述酒精湿糟为玉米小曲精糟；本实施例生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法和实施例1中的制备方法相同。
实施例3
本实施例的生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料，包括以下重量份数的组分：46份玉米、40份生物发酵干料和2份蛋鸡专用添加剂，所述生物发酵干料是底物经枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌发酵制得，所述底物包括以下重量份数的组分：10份玉米蛋白粉、4份米糠、6份豆粕、2份麦麸、10份酒精湿糟、2份椰蓉和1份甜菜糖蜜；所述蛋鸡专用添加剂包括以下重量份的组分：15份大黄素、14份淫羊藿苷、11份单月桂酸甘油酯、7份谷氨酰胺、8份小檗碱、7份绿原酸、7份聚苹果酸钙、6份五倍子单宁酸、6份壳聚糖、5份牛磺酸、2份百草霜和2份载锌沸石；制备所述生物发酵干料时，先分别制备所述枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌的菌悬液，得到里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液，然后进行发酵，所述里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液的体积比为1：2：1：2；所述酒精湿糟为玉米小曲精糟；本实施例生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法和实施例1中的制备方法相同。
对比例1
本对比例的饲料，包括以下质量分数的组分：46份玉米和40份生物发酵干料，所述生物发酵干料是底物经枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌发酵制得，所述底物包括以下重量份数的组分：10份玉米蛋白粉、4份米糠、6份豆粕、2份麦麸、10份酒精湿糟、2份椰蓉和1份甜菜糖蜜；本对比例生物发酵干料的制备方法和实施例3中生物发酵干料的制备方法相同。
对比例2
本对比例的饲料由普通蛋鸡饲料(具体饲料配方及营养水平见表5)和2％蛋鸡专用添加剂配制而成，所述蛋鸡专用添加剂包括以下重量份的组分：15份大黄素、14份淫羊藿苷、11份单月桂酸甘油酯、7份谷氨酰胺、8份小檗碱、7份绿原酸、7份聚苹果酸钙、6份五倍子单宁酸、6份壳聚糖、5份牛磺酸、2份百草霜和2份载锌沸石。
对比例3
本对比例为普通蛋鸡饲料(具体饲料配方及营养水平见表5)。
本试验于2023年2月15日在陕西渭南某规模化蛋鸡示范厂开展。试验开始前，根据产蛋率基本一致的要求，在同一养殖舍内选取540只520日龄的京粉1号蛋鸡，将其随机分为5组，每组6个重复，每重复18只。上述5组分别饲喂实施例2中的低氮生物饲料、实施例3中的低氮生物饲料、对比例1(不添加蛋鸡专用添加剂的饲料)、对比例2(添加蛋鸡专用添加剂的普通蛋鸡饲料)和对比例3(普通蛋鸡饲料)的饲料，普通蛋鸡饲料是参考中国行业标准(NY/T33-2004)蛋鸡营养需求配合而成的玉米—豆粕型基础日粮，配方组成和营养水平见表5。预试期1周，正试期8周，常规饲养管理。试验期间每日观察鸡群的采食和精神状况，以每组每重复为单位，准确记录蛋鸡的基础生产信息如采食量、存栏数、产蛋个数、产蛋总重等；试验结束前开展5天的全收粪法蛋鸡代谢试验，准确记录试验期间的采食数据，收集蛋鸡连续5天的所有排泄物，称重后-20℃冷冻保存；试验结束当天分别收集各组对应的鸡蛋，并翅静脉采血，分离血清，及时带回实验室合理保存。指标检测：鸡蛋品质检测在陕西石羊农业科技股份有限公司中心化验室开展，蛋鸡血清生化指标送出外检；代谢试验在蛋鸡示范厂内进行，对应试验样品的氮含量在实验室检测。本试验数据先用Microsoft Excel软件整理，采用SPSS 21.0软件多重比较，所有数据均以平均值表示。
表5普通蛋鸡饲料的配方及营养水平(干物质基础)
注：1.预混料为每千克日粮提供：Zn 100mg、Mn 100mg、Fe 60mg、Cu 60mg、Se0.1mg、I 0.6mg、VA 10000IU、VD 2000IU、VE 40IU、VK 2.5mg、VB 120.02mg、硫胺素1.5mg、核黄素6.0mg、烟酸20mg、泛酸15mg、吡哆醇2.5mg、生物素0.15mg、叶酸0.6mg。
营养水平中粗蛋白、钙、总磷为实测值，其余均为计算值。
(1)生产性能
表6生产性能
注：同列肩标不同字母表示差异显著。下表同。
由表6知，除料蛋比外，各组的其它生产指标均存在显著差异。与对比例3相比，实施例2和3的生产性能明显得到改善，具体表现在产蛋率、平均采食量和平均蛋重的明显提高，脏蛋率、畸形蛋率和死淘率的下降；而尽管对比例1和2的生产各项指标优于对比例3，但是却与实施例2和3相差甚远。以上说明，给产蛋后期蛋鸡直接饲喂本发明低氮生物饲料，鸡群生产状况良好，产出的鸡蛋外观瑕疵少，脏蛋率少，蛋鸡死淘数量明显下降，蛋鸡养殖经济效益大幅提升。
(2)蛋品质
表7鸡蛋评级结果
| 分组 | 鸡蛋样本总数 | 特级蛋/枚 | 一级蛋/枚 | 二级蛋/枚 | 三级蛋/枚 |
| 对比例1 | 40 | 8 | 12 | 15 | 5 |
| 对比例2 | 40 | 7 | 13 | 14 | 6 |
| 对比例3 | 40 | 5 | 10 | 16 | 9 |
| 实施例2 | 40 | 12 | 18 | 7 | 3 |
| 实施例3 | 40 | 15 | 15 | 8 | 2 |
表8鸡蛋品质
参考NY/T 1758-2009(鲜蛋等级规格)，从蛋壳、气室、蛋白和蛋黄角度，对各组鸡蛋进行外观评级，结果如表7，在所有组中，实施例2和3的特级蛋和一级蛋数量更多，相较之下，对比例1-3的二级蛋和三级蛋比例居多。
由表8知，对比例1-3的蛋壳L值和蛋壳厚度略低于实施例2和3，而各组蛋壳强度、哈氏单位、蛋黄颜色差异显著，对比例1-3均不如实施例2和3，且比较实施例与对比例发现，对比例1-3彼此间的蛋黄颜色差异并不明显。以上说明，往蛋鸡饲料单独或混合添加本发明生物发酵干料或蛋鸡专用添加剂对鸡蛋整体品质的提高均十分有益，而在蛋鸡生产中应用本发明低氮生物饲料，则能够获得最佳的蛋品。
(3)鸡蛋内部有害菌数量
表9鸡蛋有害菌数量(以log10n表示)
注：“_”表示未检出。
蛋品内外部有害菌的数量与鸡蛋的新鲜安全关系密切。由表9知，蛋壳表面的大肠杆菌和沙门氏菌数量都明显高于鸡蛋内容物，相比对比例3，其余各组，无论是蛋壳还是内容物，有害菌的数量低下，而实施例2和3内容物根本检测不到这两种菌。以上说明，使用本发明的低氮生物饲料饲喂产蛋鸡，可以尽可能减少整颗鸡蛋受细菌污染程度。
(4)免疫状况
表10血清免疫指标
| 分组 | IgA/(ug/ml) | IgG/(ug/ml) | IgM/(ug/ml) | ND抗体效价/lb | H5N1抗体效价/lb |
| 对比例1 | 126.13b | 305.75ab | 110.09b | 3.79 | 5.48b |
| 对比例2 | 152.25ab | 321.87ab | 121.81b | 3.96 | 5.33b |
| 对比例3 | 108.46b | 244.10b | 95.75c | 3.83 | 5.29b |
| 实施例2 | 212.00a | 390.46a | 146.39a | 4.24 | 7.52a |
| 实施例3 | 189.33a | 353.60a | 162.77a | 4.03 | 7.17a |
由表10知，各组蛋鸡血清的免疫球蛋白含量和H5N1抗体效价存在明显差异，实施例2和3的IgA、IgG和IgM始终最高，对比例1和2次之，对比例3最低。以上说明，尽管单独饲喂本发明生物发酵干料或蛋鸡专用添加剂，对机体免疫功能的提升具有促进作用，但直接使用发明的低氮生物饲料，才能够发挥强大的增强免疫功效。
(5)氮的利用
表11氮的利用
| 分组 | 对比例1 | 对比例2 | 对比例3 | 实施例2 | 实施例3 |
| 氮表观代谢率/％ | 52.16ab | 50.48ab | 46.05b | 59.48a | 57.15a |
氮表观代谢率(％)＝1-【(风干排泄物氮含量×日风干排泄物总重)/(风干饲料氮含量×日风干饲料总重)】×100，氮表观代谢率的变化，可间接说明动物养分排泄状况，直接反映机体对饲料中氮的利用效率。由表11知，各组蛋鸡在饲料氮利用效率上存在差异，实施例2和3的氮表观代谢率始终最高，对比例1和2次之，对比例3最低。以上说明，单独饲喂本发明生物发酵干料或蛋鸡专用添加剂，可能通过降低排泄出的氮总量来显著改善机体对氮的吸收利用，但直接使用本发明的低氮生物饲料，养殖降氮效果更佳，对环境的危害更小。
综上，本发明应用生物发酵的方法，提出的一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料，安全营养，且拥有独特香味，对减缓生产后期蛋鸡产蛋数量下降，效果十分显著。本发明还能够通过提升蛋鸡全身免疫水平和健康状况，提高鸡蛋质量，降低次品蛋率，尤其是脏蛋数量，进一步避免鸡蛋内部受到深度污染，延长鸡蛋储存期。另外，本发明能够缓解蛋鸡对饲料氮养分的浪费，对加快发展现代高质量养殖业具有重要意义。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制。凡是根据发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变化，均仍属于本发明技术方案的保护范围内。
Claims (7)
1.一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料，其特征在于，包括以下重量份数的组分：40-52份玉米、35-48份生物发酵干料和1-5份蛋鸡专用添加剂；所述生物发酵干料是底物经枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌发酵制得，所述底物包括玉米蛋白粉、米糠、豆粕、麦麸、酒精湿糟、椰蓉和甜菜糖蜜；所述蛋鸡专用添加剂包括以下重量份数的组分：10-20份大黄素、10-18份淫羊藿苷、7-15份单月桂酸甘油酯、5-10份谷氨酰胺、5-12份小檗碱、5-10份绿原酸、5-10份聚苹果酸钙、5-8份五倍子单宁酸、5-7份壳聚糖、3-7份牛磺酸、1-3份百草霜和1-3份载锌沸石。
2.根据权利要求1所述的生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料，其特征在于，所述玉米蛋白粉、米糠、豆粕、麦麸、酒精湿糟、椰蓉和甜菜糖蜜的重量份数比为10：4：6：2：10：2：1；制备所述生物发酵干料时，先分别制备所述枯草芽孢杆菌、产阮假丝酵母、里氏木霉和植物乳杆菌的菌悬液，得到里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液，然后进行发酵，所述里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液的体积比为1：2：1：2；所述酒精湿糟为玉米小曲精糟。
3.一种如权利要求1或2所述的生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
S1、分别将米糠、豆粕和麦麸粉碎；
S2、分别将枯草芽孢杆菌的发酵菌株、产阮假丝酵母的发酵菌株、里氏木霉的发酵菌株及植物乳杆菌的发酵菌株进行活化，然后分别转接到对应的液体培养基中，得到里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌悬液、产朊假丝酵母菌悬液和植物乳杆菌悬液；
S3、称取玉米蛋白粉、酒精湿糟、椰蓉、甜菜糖蜜和S1中粉碎后的米糠、豆粕和麦麸混合均匀，得到底物，在所述底物中添加硫酸铵，再加入自来水，保证36-42％的含水量，然后在高温下灭菌，得到发酵培养基；
S4、在无菌条件下，称取S2中得到的里氏木霉菌悬液、枯草芽孢杆菌菌悬液和产朊假丝酵母菌悬液，得到发酵复合菌液；
S5、在S3中得到的发酵培养基上接种S4中得到的发酵复合菌液，然后进行发酵，发酵期间每2h翻动1次发酵培养基，得到生物发酵湿料A；在所述生物发酵湿料A中加入S2中得到的植物乳杆菌菌悬液，密封后继续发酵48h，获得生物发酵湿料B；
S6、将S5中得到的生物发酵湿料B的水分降至16％，晾至室温，得到生物发酵干料；称取大黄素、淫羊藿苷、单月桂酸甘油酯、谷氨酰胺、小檗碱、绿原酸、聚苹果酸钙、五倍子单宁酸、壳聚糖、牛磺酸、百草霜和载锌沸石混合均匀，得到蛋鸡专用添加剂；
S7、将玉米、S6中得到的蛋鸡专用添加剂和生物发酵干料混合均匀，制得生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料。
4.根据权利要求3所述的一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法，其特征在于，S1中所述粉碎的粒径均为10目。
5.根据权利要求3所述的一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法，其特征在于，S3中所述硫酸铵的添加量是所述底物质量的3％；所述高温的温度为110℃，灭菌的时间为60min。
6.根据权利要求3所述的一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法，其特征在于，S5中所述发酵复合菌液在所述发酵培养基上的接种量为6％。
7.根据权利要求3所述的一种生产洁蛋的蛋鸡低氮生物饲料的制备方法，其特征在于，S5中所述发酵培养基上接种发酵复合菌液后进行发酵的温度为32℃，时间为48h。
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- 2023-06-21 CN CN202310739151.8A patent/CN116584591A/zh active Pending
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| CN117618450B (zh) * | 2023-12-21 | 2024-04-19 | 广东海洋大学 | 一种药物添加剂及其制备方法和在防治东风螺综合病症中的应用 |
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