CN116531280A - 一种具有抗衰老功效的松茸提取物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有抗衰老功效的松茸提取物及其制备方法。本发明采用低共熔溶剂提取松茸，制备得到的松茸提取物具有较高的提取率，能很好地保留松茸中的三萜类物质，具有较高的抗氧化活性，对消炎和延缓衰老有良好功效；采用低共熔溶剂提取能获得生物活性更好的高品质松茸提取物，与传统的水蒸气蒸馏法、有机溶剂提取法相比，保留了更多的易挥发成分以及高沸点的成分，有着更优的抗衰老效果；同时，本发明采用的低共熔溶剂不会产生废物，能耗低，提取步骤简单，同时不使用挥发性有机试剂，绿色环保。本发明提供的方法为松茸的提取提供更多方法途径，为制备品质优良的松茸提取液提供基础，同时也为松茸提取物在抗衰老产品中的应用提供一种思路。

Description

一种具有抗衰老功效的松茸提取物及其制备方法
技术领域
本发明属于化合物提取技术领域。更具体地，涉及一种具有抗衰老功效的松茸提取物及其制备方法。
背景技术
皮肤是人体最大的器官，其最重要的作用就是屏障功能。但随着年龄的增长和不良的生活习惯，人们逐渐面临初老的问题。衰老不可逆！所以要及时抗初老，延缓皱纹、斑点的产生，延缓皮肤弹性减少和水分缺失。皮肤老化是指皮肤功能衰老性损伤，使皮肤对机体的防护能力，调节能力等减退，由此皮肤不能适应内外环境的变化，出现颜色、色泽、形态、质感等外观整体状况的改变。皮肤的老化分为内源性老化和外源性老化。内源性老化是指皮肤随年龄增长的自然老化。表现为皮肤变白，出现细小皱纹、弹性下降、皮肤松弛等。外源性老化的最主要原因是日晒所致的光老化。衰老过程中发生进行性线粒体功能障碍，ROS生成的增加会进一步导致线粒体功能恶化和细胞整体损害。为了减缓皮肤衰老，具有抗衰作用的天然植物提取物也越来越多地应用于皮肤抗衰的化妆品领域当中。
松茸是一种药食同源真菌，含有极为丰富的糖类、氨基酸与多肽、挥发性物质类、维生素及矿物质类、脂类物质等成分，其中松茸多糖、松茸多肽、松茸醇等是松茸的主要活性物质。现有研究表明，松茸三萜具有抑制酪氨酸酶活性的作用，干预黑色素沉积的发生过程，用于护肤能起到养颜美白的效果，是美白抗衰类化妆品的理想原料。因此，富含松茸三萜类的松茸提取物在美白、抗衰老的化妆品领域具有广阔应用前景。
一般而言，如松茸常规的天然产物提取都需要先进行粉碎或磨粉的预处理，增加其与提取作用物的有效接触，提高提取效率。但是，通过粉碎或磨粉的方法处理过后的天然产物，会发生团聚变成发粘的膏状物，在磨粉过筛、粉碎机打碎时难以处理，降低了提取的工作效率。因此，亟需采用新的预处理方法对提取工艺进行改良，并有效提高天然产物和提取作用物的接触效率。
目前，松茸的提取方法一般采用水提法、酶解法、醇提法等，如现有技术公开的一种从松茸中提取松茸多糖的方法，采用盐酸溶液进行水提，而在酸碱条件下容易破坏多糖的分子结构；如现有技术公开的一种姬松茸多糖提取物的制备方法，采用微生酶解法，但酶提取法存在着反应时间长，糖液过滤难度大的问题。但由于松茸提取物中的三萜类物质与大多数天然物质中的单帖类或二萜类不同，由于其分子量和双键的增加，该类物质的沸点和熔点更高，且挥发性降低，多糖与单糖的性质差别与其类似，常规的化学提取工艺难以提取。现有研究采用乙醇提取松茸总三萜(刘俊红,褚佳豪,宫晓庆等.松茸总三萜的提取工艺及其美白功效研究[J].当代化工,2022,51(09):2110-2113.DOI:10.13840/j.cnki.cn21-1457/tq.2022.09.027.)，但采用乙醇提取法存在着提取效率较低，提取时间长、消耗溶剂量过多等问题。此外，使用合成有机试剂不利于环境友好。因此能够用于高效环保地提取富含松茸提取物的方法还较少。
针对上述问题，开发和研究出更多新的提取方法和提取工艺，能具有更好的作用效果，更好地保留更多松茸活性成分，提高松茸提取物的提取效率及活性成分含量，并且降低对环境的污染和试剂损耗。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服上述问题的缺陷和不足，提供一种具有抗衰老功效的松茸提取物及其制备方法。
本发明的目的是提供一种具有抗衰老功效的松茸提取物的制备方法。
本发明另一目的是提供一种具有抗衰老功效的松茸提取物。
本发明又一目的是提供具有抗衰老功效的松茸提取物的应用。
本发明上述目的通过以下技术方案实现：
本发明提供一种具有抗衰老功效的松茸提取物的制备方法，通过低度共熔溶剂提取松茸，制备得到的松茸提取物具有较高的提取率，能很好地保留松茸中的总三萜类和多糖物质，具有较高的抗氧化活性，针对消炎和延缓衰老有良好功效；具体制备方法包含以下步骤：
S1.采用氢键受体、氢键供体制备二元低共熔溶剂，并控制其含水率为15～40％；
或
S1.采用氢键受体、氢键供体和酸催化剂制备三元低共熔溶剂，并控制其含水率为15～40％；
所述氢键受体为甘油、葡萄糖、D-果糖、麦芽糖或脯氨酸；氢键供体为氯化胆碱、甜菜碱或左旋肉碱；酸催化剂为过渡金属盐氯化铝、三氯化铁、丙二酸或对羟基苯磺酸；
S2.将松茸样品进行预处理备用；
S3.按照料液比为1:(1～35)，将步骤S2处理后的松茸与步骤S1制备的低共熔溶剂混合，超声萃取，离心，收集上清液，吸附，洗脱，即得松茸提取物。
本发明通过优化松茸的预处理方式并结合低共熔溶剂制备得到的松茸提取物具有较高的提取率，能很好地保留松茸中的三萜类物质，具有较高的抗氧化活性，对消炎和延缓衰老有良好功效；本发明采用松茸饮片冻干后做超薄切片，能显著降低松茸粉末中的含水率，优化提取效果。进一步研究显示采用二元/三元低共熔溶剂提取能获得生物活性更好的高品质松茸提取物，与传统的水蒸气蒸馏法和有机溶剂提取法相比，保留了更多的易挥发成分以及高沸点的成分，有着更优的抗衰老效果；与有机溶剂提取法比，具有更好的提取效率和更少的提取液用量。同时，本发明采用的二元/三元低共熔溶剂不会产生废物，能耗低，提取步骤简单，绿色环保。本发明的预处理采用超薄切片方法，对提取工艺进行改良，提高了提取效率。本发明为制备品质优良的松茸提取液提供基础，同时也为松茸提取物在抗衰老产品中的应用提供一种思路。
优选地，步骤S1中二元低共熔溶剂中氢键受体为脯氨酸，氢键供体为氯化胆碱、甜菜碱或左旋肉碱；三元低共熔溶剂中氢键受体为脯氨酸，氢键供体为甜菜碱，酸催化剂为对羟基苯磺酸或氯化铝。
优选地，二元低共熔溶剂中氢键受体和氢键供体的摩尔比为1:2～3；三元低共熔溶剂中氢键受体、氢键供体和酸催化剂的摩尔比为1:(1～3):(0.1～0.5)。
更优选地，步骤S1中含水率为30％～40％。
优选地，步骤S2中预处理为进行切片处理，得超薄片状松茸切片，再冷冻，冷冻处理采用液氮冷冻，将一定量的液氮导入装有天然松茸的容器中完成速冻处理。
更优选地，步骤S2中超薄切片的厚度为1～5μm。
更优选地，步骤S3中超声频率为500W～900W，提取温度为40～80℃，超声10～60min。
优选地，步骤S3中吸附采用AB-8大孔吸附树脂进行吸附。
优选地，步骤S3中洗脱采用无水乙醇在40～60℃条件下，以0.5BV/h(BV为流出液体积相当于树脂柱体积的倍数)流量对已吸附饱和的AB-8型大孔树脂进行脱附，回收脱附液。
本发明提供一种具有抗衰老功效的松茸提取物，由上述方法制备得到。
本发明采用的松茸(TMP)是一种药食同源真菌，通过上述方法制备得到的松茸提取物有效成分为三萜类物质，进一步将其制备为松茸提取液，也具有很好地消除自由基作用、消炎、抗衰老作用，能够将其应用于化妆品领域。
本发明还提供松茸提取物在皮肤抗衰老、改善皮肤炎症、修复UV辐射带来的皮肤损伤中的应用。
本发明还提供松松茸提取物在制备皮肤抗衰老、改善皮肤炎症、修复UV辐射带来的皮肤损伤的产品中的应用。
本发明具有以下有益效果：
本发明提供一种具有抗衰老功效的松茸提取物的制备方法，本发明通过优化松茸的预处理方式并结合低共熔溶剂制备得到的松茸提取物具有较高的提取率，能很好地保留松茸中的三萜类物质，具有较高的抗氧化活性，对消炎和延缓衰老有良好功效；本发明采用松茸饮片冻干后做超薄切片，能显著降低松茸粉末中的含水率，优化提取效果。本发明制备的松茸提取物能充分发挥松茸消除自由基及抗衰老的功效，具有在抗衰老的同时改善皮肤炎症的功效；同时，采用的二元/三元低共熔溶剂进行提取，不涉及化学反应，不产生废物，能耗低，绿色、高效、安全；本发明为松茸提取物的提取提供更多方法途径，为制备品质优良、效果好的松茸产品提供基础，同时也为富含三萜类的松茸提取物在抗衰老产品中的应用提供一种思路。
附图说明
图1为不同剂量松茸提取液对小鼠皮肤修复效果(图中a为小鼠背部组织HE染色图片，b为表皮厚度)；
图2为小鼠受损皮肤中IL-6的表达量(图中a为小鼠皮肤组织IL-6免疫组化结果，b为IL-6含量)。
具体实施方式
以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
本发明采用的松茸饮片来源于云南香格里拉，通过新鲜松口蘑的子实体切片干燥成药材而得；实验中使用的无水乙醇均购自于为分析纯级别
实施例1松茸提取物的制备
本实施例制备的三元低共熔溶剂，采用的氢键受体为甜菜碱，氢键供体为脯氨酸，酸催化剂为对羟基苯磺酸，氢键受体：氢键供体：酸催化剂的摩尔比为1:2:0.25。控制含水率为30％。
将松茸饮片用液氮速冻处理后，用超薄切片机切成1～5μm的超薄松茸片。称取30g松茸片，按照料液比为1：35，将超薄松茸片与低共熔溶剂作混合后，采用超声波仪进行萃取，超声功率是600W，提取温度为70℃，超声50min；后离心，并收集上清液，再采用AB-8大孔吸附树脂分离松茸提取物。吸附饱和后，在45℃条件下，用无水乙醇以0.5BV/h(BV为流出液体积相当于树脂柱体积的倍数)流量对已吸附饱和的AB-8型大孔树脂进行脱附，回收脱附液，即得松茸提取物。
实施例2松茸提取物的制备
本实施例制备的三元低共熔溶剂，采用的氢键受体为甜菜碱，氢键供体为脯氨酸，酸催化剂为对羟基苯磺酸，氢键受体：氢键供体：酸催化剂的摩尔比为1:2:0.1。控制含水率为30％。
将松茸饮片用液氮速冻处理后，用超薄切片机切成1～5μm的超薄松茸片。称取30g松茸片，按照料液比为1：35，将超薄松茸片与低共熔溶剂作混合后，采用超声波仪进行萃取，超声功率是600W，提取温度为70℃，超声50min；后离心，并收集上清液，再采用AB-8大孔吸附树脂分离松茸提取物。吸附饱和后，在45℃条件下，用无水乙醇以0.5BV/h(BV为流出液体积相当于树脂柱体积的倍数)流量对已吸附饱和的AB-8型大孔树脂进行脱附，回收脱附液，即得松茸提取物。
实施例3松茸提取物的制备
本实施例制备的三元低共熔溶剂，采用的氢键受体为甜菜碱，氢键供体为脯氨酸，酸催化剂为对羟基苯磺酸，氢键受体：氢键供体：酸催化剂的摩尔比为1:2:0.5。控制含水率为30％。
将松茸饮片用液氮速冻处理后，用超薄切片机切成1～5μm的超薄松茸片。称取30g松茸片，按照料液比为1：35，将超薄松茸片与低共熔溶剂作混合后，采用超声波仪进行萃取，超声功率是600W，提取温度为70℃，超声50min；后离心，并收集上清液，再采用AB-8大孔吸附树脂分离松茸提取物。吸附饱和后，在45℃条件下，用无水乙醇以0.5BV/h(BV为流出液体积相当于树脂柱体积的倍数)流量对已吸附饱和的AB-8型大孔树脂进行脱附，回收脱附液，即得松茸提取物。
实施例4低共熔溶剂的筛选
本实施例对采用的低共熔溶剂进行筛选，采用如下表1中不同的氢键受体和供体以及酸催化剂制备得到的二元/三元低共熔溶剂进行提取，其中采用二元低共熔溶剂提取方法与实施例1不同之处在于不添加酸催化剂，其他方法条件同实施例1，采用三元低共熔溶剂进行提取的提取方法同实施例1。
表1不同低共熔溶剂的配置
将表1中不同的低共熔溶剂提取得到的松茸提取物用紫外分光标定法标定其有效物质含量。具体实验方法为：取提取物1mL于烧杯中，加至25mL容量瓶中定容，用少量无水乙醇溶解，将待测溶液使用紫外分光光度计进行特定波长测试吸光度。查对应的标准曲线，即得所得的三萜类(550nm)含量。计算公式为：
三萜类含量％(g/g)＝吸光值标准曲线对应三萜量×稀释倍数/提取物样品质量×100％。
根据其三萜类含量评价其不同低共熔溶剂的提取效果。
统计结果如表1所示，结果显示在30％的含水量下，料液比为1：35，采用氢键受体为甜菜碱，氢键供体为脯氨酸，其摩尔比是1:2.5的二元低共熔溶剂，提取得到的松茸提取物的三萜类含量提取率较高，能很好地保留松茸中的总三萜类物质含量。而采用其他不同的氢键受体和氢键供体制备的低共熔溶剂提取的松茸提取物的多糖和三萜类的提取率存在明显差异，是由于天然低共熔溶剂(NADES)在植物中提取极性和非极性的天然产物具有不同的溶解性和生物相容性，也可能是由于NADES具有较高的氢键结合能力以及可以发生静电相互作用引起。
此外，本发明研究显示添加酸催化剂制备三元低共熔溶剂DES能进一步提高提取率，这是因为酸催化剂的加入能有效改善偏中性的二元DES在天然产物中的水解能力，提高提取效率。统计结果显示，显示在30％的含水量下，料液比为1：35，采用氢键受体为甜菜碱，氢键供体为脯氨酸，酸催化剂为对羟基苯磺酸，其摩尔比是1:2.5:0.25的低共熔溶剂，提取得到的松茸提取物的三萜类含量提取率最高。
实施例5
松茸提取物的制备方法同实施例1，唯一区别在于采用新鲜松茸直接研磨粉碎处理。
实施例6
松茸提取物的制备方法同实施例1，唯一区别在于采用超声波仪萃取条件不同，超声功率是900W。
实施例7
松茸提取物的制备方法同实施例1，唯一区别在于采用超声波仪萃取条件不同，提取温度为40℃。
实施例8
松茸提取物的制备方法同实施例1，唯一区别在于采用超声波仪萃取条件不同，提取温度为80℃。
实施例9
松茸提取物的制备方法同实施例1，唯一区别在于采用超声波仪萃取条件不同，超声10Min。
实施例10
松茸提取物的制备方法同实施例1，唯一区别在于采用超声波仪萃取条件不同，超声60Min。
实施例11
松茸提取物的制备方法同实施例1，唯一区别在于采用低共熔溶剂的含水率为15％。
实施例12
松茸提取物的制备方法同实施例1，唯一区别在于采用低共熔溶剂的含水率为40％。
对比例1水提法制备松茸提取物
采用与实施例1相同处理的松茸薄片，料液比按照1:10加入蒸馏水，在80℃下，水浴加热提取2h，提取2次，再经过滤、冷冻干燥、粉碎得到的松茸水提物。
对比例2醇提法制备松茸提取物
采用与实施例1相同处理的松茸薄片，料液比按照1:10加入75％的乙醇溶液，在80℃下，水浴加热提取2h，提取2次，再经抽滤、旋蒸得到的松茸醇提物。
将上述实施例1、实施例5～12和对比例1～2制备的松茸提取物，采用紫外分光标定法标定其有效物质含量(总三萜提取率、总多糖提取率、总黄酮提取率)，其中总三萜、总多糖、总黄酮含量％(g/g)＝吸光值标准曲线对应量×稀释倍数/提取物样品质量×100％。结果如下表2所示，显示使用低共熔溶剂DES提取的松茸活性成分总含量显著高于水提法和醇提法。此外，低共熔溶剂DES含水量对提取率也有影响，含水量过低，低共熔溶剂粘度变大对提取效果受到抑制。其他实施对比例通过改变超声功率、时间、萃取温度等提取工艺来进行对比，超声时间不足不能完成提取全过程，超声功率和萃取温度等会影响提取效果。
表2不同处理方法得到的松茸提取物总三萜、总多糖、总黄酮提取率
测试例1松茸提取物对非酶糖基化反应抑制率
向100mLpH＝7.4的0.2mol/L的磷酸盐缓冲液中加入19.82g葡萄糖、0.4024g牛血清白蛋白和0.39g叠氮化钠，混匀后形成反应液。取6支试管，分别向每支试管中依次加入4mL反应液、不同浓度的松茸提取液(松茸提取液由实施例1～3、5～12以及对比例1～2提取得到，再用分析纯级别的无水乙醇将松茸提取物溶解混匀成50％体积分数的松茸乙醇溶液)，使所有试管中溶液总体积均为5mL。并采用荧光分光光度计测定所有试样的初始荧光值，然后将所有试管置于37℃水浴中避光保存7d，再测定各试管中试样的荧光值，继续将所有试管在37℃水浴中避光保存7d后，测定荧光值。测试条件为：激发波长370nm，狭缝5nm；发射波长范围380～500nm，狭缝5nm；光源电压700V。利用所得荧光数据计算其抑制率，计算公式为IR(抑制率)＝1-F(1-5)/F6，(F为不同试管的荧光值)。
表3松茸提取物对非酶糖基化反应的抑制作用
结果如表3所示，从中可以看出，随着松茸提取液含量的增加，松茸提取液对非酶糖基化反应的抑制率逐渐增强。当采用实施例1的松茸提取液的体积分数为20.0％浓度为1mg/ml时，在经过7d培养后其对非酶糖基化反应的抑制率为85.87％，这说明本发明制备的松茸提取液对蛋白质的非酶糖基化有着很好的抑制作用。
测试例2松茸提取物对于自由基的清除作用
测定松茸提取物的DPPH自由基清除能力，取5支试管，分别向每只试管中加入2mL0.1 mmol 1L的DPPH溶液，并将试管避光置于冰水浴中，再依次分别加入不同浓度的松茸提取液(松茸提取液由实施例1～3、5～12以及对比例1～2提取得到，再用分析纯级别的无水乙醇将松茸提取物溶解混匀成50％体积分数的松茸乙醇溶液)和无水乙醇，使各试管中溶液总体积均为4mL。避光反应30min后，以无水乙醇为参比，用紫外可见分光光度计测各试样在517nm处的吸光度。
表4松茸提取物对自由基的清除作用
结果如表4所示，从中可以看出，随着松茸提取液含量的增加，DPPH自由基的清除率也逐渐增加，并且几乎呈线性关系。当松茸提取液的浓度为0.2mg/ml时，其DPPH自由基的清除率为23.34％；当松茸提取液的1mg/ml时，其DPPH自由基的清除率达到92.37％。显示松茸提取液对DPPH自由基具有良好的清除功效，并且其清除效果与松茸提取液的含量呈正相关。表明本发明制备的松茸提取物对于清除自由有着良好的功效，可以有效延缓衰老。
测试例3松茸提取物对于UVA、UVB诱导衰老的保护作用
评价松茸提取物对UVA、UVB诱导昆明小鼠皮肤损伤的保护作用，分别配置不同的药剂组：
(1)松茸提取物低剂量修复组A：称取松茸提取物0.5g(由实施例1中采用氢键受体为甜菜碱，氢键供体为脯氨酸，酸催化剂为对羟基苯磺酸制备的三元低共熔溶剂提取得到的松茸提取物)，加入到9.5g乙醇水溶液(包含如下按质量百分比计的组分：蒸馏水70.0％，无水乙醇30％)中，混匀，配制成5％w/w松茸提取物的药剂；
(2)松茸提取物中剂量修复组B：称取松茸提取物0.75g(由实施例1中采用氢键受体为甜菜碱，氢键供体为脯氨酸，酸催化剂为对羟基苯磺酸制备的三元低共熔溶剂提取得到的松茸提取物)，加入到9.25g乙醇水溶液(包含如下按质量百分比计的组分：蒸馏水70.0％，无水乙醇30％)中，混匀，配制成7.5％w/w松茸提取物的药剂；
(3)松茸提取物高剂量修复组C：称取松茸提取物1g(由实施例1中采用氢键受体为甜菜碱，氢键供体为脯氨酸，酸催化剂为对羟基苯磺酸制备的三元低共熔溶剂提取得到的松茸提取物)，加入到9g乙醇水溶液(包含如下按质量百分比计的组分：蒸馏水70.0％，无水乙醇30％)中，混匀，配制成10％w/w松茸提取物的药剂；备用。
采用SPF级KM小鼠，雌性6～8周龄(购自红萝卜-卡洛特生物，18-22g)50只，10只一组，分成正常组、UVA、UVB混合照射组、松茸提取物高剂量修复组、松茸提取物中剂量修复组和松茸提取物低剂量修复组，共5组。每组小鼠背部皮肤脱毛，用舒婷脱毛膏除去绒毛，正常组每日只使用30％乙醇水溶液涂抹背部皮肤，除了正常组外，其余各组每日进行UVA、UVB照射，建立UVB诱导皮肤损伤模型。第一周紫外光的起始强度为最小红斑剂量(MED)，照射剂量100mj/cm2，光源约高10cm，持续到第4周，为4个最小红斑剂量(MED)，5次/周，在剩下的几个周期内400mj/cm2/次。整个辐射剂量约13J/cm2，整个实验周期为8周；UVB照射后10min内，按分组随即于背部涂抹2ml/1次/天，松茸提取物涂抹剂量浓度分别为10％w/w、7.5％w/w、5％w/w，正常对照组和模型组涂抹30％乙醇水溶液。观察皮肤的皱纹、干燥、红斑情况。再通过皮肤组织学观察松茸提取物对小鼠皮肤的影响。
结果如图1所示，可以看出，与正常组的健康背部皮肤相比，经过UV照射的模型组会使表皮增厚。而在局部使用松茸提取物治疗的小鼠中，UV辐射引起的这些变化具有明显改善。从实验结果可以比较容易的看出，使用了低剂量松茸提取物就能够有效的修复UV辐射带来的皮肤损伤，从而达到抗衰老的目的。可见，本发明提供的松茸提取物能够减轻UVA、UVB诱导的小鼠背部皮肤、皱纹及表皮增厚等现象，对UVB辐射诱导的小鼠皮肤损伤具有保护的作用。
进一步通过免疫组化测定UV辐射的小鼠皮肤中的IL-6表达情况，这是评价氧化应激和炎症的重要指标，用光密度法计算实验皮肤中IL-6表达量。
结果如图2所示，显示UV辐射通过提高空白组的IL-6表达量，显著增加了ROS的产生，并且抑制了内源性抗氧化酶的活性。而松茸提取物通过降低IL-6，降低ROS水平，明显改善了皮肤干燥和红斑的变化，对UVB诱导的小鼠皮肤损伤具有保护作用。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种具有抗衰老功效的松茸提取物的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
S1.采用氢键受体、氢键供体制备二元低共熔溶剂，并控制其含水率为15～40％；
或
S1.采用氢键受体、氢键供体和酸催化剂制备三元低共熔溶剂，并控制其含水率为15～40％；
所述氢键受体为甘油、葡萄糖、D-果糖、麦芽糖或脯氨酸；氢键供体为氯化胆碱、甜菜碱或左旋肉碱；酸催化剂为过渡金属盐氯化铝、三氯化铁、丙二酸或对羟基苯磺酸；
S2.将松茸样品进行预处理备用；
S3.按照料液比为1:(1～35)，将步骤S2处理后的松茸与步骤S1制备的低共熔溶剂混合，超声萃取，离心，收集上清液，吸附，洗脱，即得松茸提取物。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S1中二元低共熔溶剂中氢键受体为脯氨酸，氢键供体为氯化胆碱、甜菜碱或左旋肉碱；三元低共熔溶剂中氢键受体为脯氨酸，氢键供体为甜菜碱，酸催化剂为对羟基苯磺酸或氯化铝。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，二元低共熔溶剂中氢键受体和氢键供体的摩尔比为1:2～3；三元低共熔溶剂中氢键受体、氢键供体和酸催化剂的摩尔比为1:(1～3):(0.1～0.5)。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S1中含水率为30～40％。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S2中预处理为进行切片处理，得超薄片状松茸切片，再冷冻，超薄切片的厚度为1～5μm。
6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S3中为：超声频率500W～900W，提取温度为40～80℃，超声10～60min。
7.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S3中吸附为采用AB-8大孔吸附树脂进行吸附；所述洗脱为采用无水乙醇在40～60℃条件下，以0.5BV/h流量对已吸附饱和的AB-8型大孔树脂进行脱附，并回收脱附液。
8.一种具有抗衰老功效的松茸提取物，其特征在于，由权利要求1～7任一项所述方法制备得到。
9.权利要求8所述松茸提取物在皮肤抗衰老、改善皮肤炎症、修复UV辐射带来的皮肤损伤中的应用。
10.权利要求9所述松茸提取物在制备皮肤抗衰老、改善皮肤炎症、修复UV辐射带来的皮肤损伤的产品中的应用。
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