CN116530515A - 一种基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒产品 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒产品及其制备方法。所述消毒剂按照重量百分比由15‑25%的柠檬酸、0.01‑0.1%天然萘醌类化合物、一定量的乙醇及一定量的碱金属及碱土金属盐的去离子水组成。使用时,可将该消毒剂喷洒于物品表面或使用稀释后的消毒剂清洗待消毒物品。该消毒产品具有消毒杀菌功效高,且刺激性小、腐蚀性低、无异味、消毒残留物无环境毒性等特点。该消毒剂适用于冷链消毒及蔬菜食品表面消毒。其应用场所包括各级医院、商场、影院、网吧、餐饮、行政、企业、公共交通等公共场所,也可用于居家场所消毒。
Description
技术领域
本发明涉及军民两用的消毒杀菌剂及消毒凝胶研究领域,具体涉及一种基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒产品及其制备方法,尤其涉及一种环境友好型的基于柠檬酸及天然萘醌的消毒液和消毒凝胶及其制备方法。
背景技术
自从人类诞生以来,因细菌传播或病毒感染所导致的流行病就不断困扰着人类。有研究表明,人类冠状病毒在干燥表面上的存活时间可以达到九天(Kampf,G.,Todt,D.,Pfaender,S.& Steinmann,E.Persistence of coronaviruses on inanimate surfacesand their inactivation with biocidal agents.J Hosp Infect 104,246-251,(2020))。因此,在公众场所中使用消毒剂对 SARS-CoV-2进行杀灭,可能有助于防止进一步的病毒传播。
目前广泛应用的化学消毒剂如含氯消毒剂(84消毒液)、过氧乙酸、乙醇、季铵盐消毒剂等,具有一定的氧化性、腐蚀性及致敏性。而在防控疫情的过程中,大面积反复的喷洒消毒剂,也带来了环境安全问题与次生风险,并对人体健康产生威胁。水体是消毒剂的主要的消毒对象之一,氯在饮用水和废水的消毒中起着主要作用。然而,有证据表明,氯在进入环境水体中后,产生多种具有环境毒性的消毒副产物(DBPs),如三氯甲烷、卤乙酸等,对人体有潜在的致癌风险。欧洲过敏和临床免疫学会于2013年指出,在清洁工人中,WRA、WEA和鼻炎的风险增加主要与暴露于清洁喷雾剂、漂白剂、氨水、消毒剂和混合产品有关。一项在2009年至2015年间在美国进行的随访显示,护士职业暴露于清洁产品和消毒剂的情况会使其患哮喘的危险性增加25%至38%(Folletti, I.,Siracusa,A.&Paolocci,G.Update onasthma and cleaning agents.Curr Opin Allergy Clin Immunol 17,90-95,(2017))。
因此,我们迫切需要开发一种毒性低但高效的消毒剂,以适合环境消毒的防护,同时有效控制消毒剂对人体和环境的负面效应,并应对越来越多的多重耐药性细菌。
天然产物是植物、动物及微生物的次生代谢产物,部分天然产物具有显著的抗菌、抗病毒活性。天然产物毒性低、环境危害小。自古以来我国就有使用艾叶驱虫、抗菌的记载。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足,提供一种基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒产品及其制备方法。该消毒产品为具有环境友好、绿色环保、刺激性小、腐蚀性低的消毒剂或消毒凝胶,可用于杀菌、消毒。
本发明的目的可以通过以下方案来实现:
本发明提供了一种基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒产品,所述消毒产品包括如下重量份数的各组分:
柠檬酸 15~25份;
萘醌类化合物 0.01~1份。
作为本发明的一个实施方案,所述萘醌类化合物包括胡桃醌、7-甲基胡桃醌、7-甲基-5-乙酰基胡桃醌、大黄素、紫草素中的一种或多种。
作为本发明的一个实施方案,所述柠檬酸为纯度大于99.5%。
作为本发明的一个实施方案,按重量份数计,所述消毒产品还包括0.1~1份无机盐。
作为本发明的一个实施方案,所述无机盐包括碱金属盐和/或碱土金属盐。无机盐的纯度达到分析纯级别。碱金属及碱土金属盐可以通过潮解效应吸收空气中水分,在日常使用中提升消毒产品的有效作用时间,增强长期抑菌能力更差。
作为本发明的一个实施方案,所述碱金属盐包括氯化钠、硫酸钾、硝酸钾中的一种或几种;碱土金属盐包括氯化镁、硫酸镁、硫酸钙中的一种或几种。
作为本发明的一个实施方案,按重量份数计,所述消毒产品还包括1~5份助溶剂。所述助溶剂包括乙醇、异丙醇、DMSO中的一种。
本发明还提供了一种基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒产品在制备消毒液和消毒凝胶中的应用。
本发明提供了一种消毒液,所述消毒液每百份包括如下重量份数的各组分:
作为本发明的一个实施方案,所述助溶剂包括乙醇、异丙醇、DMSO中的一种。萘醌类化合物是将其溶解在助溶剂后,再与消毒液的其他成分混合,使消毒液中萘醌类化合物的质量分数为0.01~1%。
本发明还提供了一种所述消毒液的制备方法,所述方法包括如步骤:
S1、称取柠檬酸,加入到适量的去离子水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解。
S2、称取无机盐,加入到步骤S1制得的柠檬酸水溶液中,在70~95℃下搅拌25-35分钟,搅拌速度为60~100r/min。
S3、将步骤S2所得溶液冷却至室温,加入萘醌类化合物溶解在助溶剂中形成的混合溶液,使消毒液中萘醌类化合物的质量分数为0.01~1%,搅拌均匀,所得溶液即为消毒液。
本发明提供了一种所述消毒凝胶,所述消毒水每百份包括如下重量份数的各组分:
作为本发明的一个实施方案,所述助溶剂包括乙醇、异丙醇、DMSO中的一种。萘醌类化合物是将其溶解在助溶剂后,再与消毒液的其他成分混合,使消毒液中萘醌类化合物的质量分数为0.01~1%。
作为本发明的一个实施方案,所述增稠剂为羟乙基纤维素加入含有去离子水、醋酸缓冲液、醋酸氯己定的乙醇溶液形成的。羟乙基纤维素、去离子水、醋酸缓冲液、醋酸氯的用量比为10g:18.5ml:1ml:0.5ml。通过增稠成分的加入,使消毒剂成为凝胶状,方便携带和使用。
本发明还提供了一种消毒凝胶的制备方法,所述方法包括如步骤:
A1、称取柠檬酸,加入到适量的去离子水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解;
A2、称取无机盐,加入到步骤A1所得的柠檬酸水溶液中,在70~95℃下搅拌25-35分钟,搅拌速度为60~100r/min;
A3、将步骤A2所得溶液冷却至室温,加入萘醌类化合物溶解在助溶剂中形成的混合溶液,使消毒液中萘醌类化合物的质量分数为0.01~1%,搅拌均匀后加入增稠剂,混合后增稠后制得凝胶,即得消毒凝胶。
本发明的制备方法可以显著提高盐类的溶解度。
本发明所述的制备方法有利于提升柠檬酸及无机盐的协同作用,主要是在A2步骤中,柠檬酸和无机盐可以在加热搅拌的情况下发生络合反应,有助于提升消毒剂中有效杀菌成分的浓度。本发明中各组分用量为最佳用量,柠檬酸用量为其最大溶解度,过量加入柠檬酸会在室温下生成结晶,降低效果;用量过少会降低其浓度,降低杀菌效果。萘醌类化合物用量也为其最大溶解度,加入过多后,会引起消毒剂中的物质析出,会降低消毒剂的稳定性,量过少会降低其浓度,降低杀菌效果。无机盐用量过多会导致消毒剂的稳定性降低,量少则不利于消毒剂杀菌作用的延长。
本发明制备的消毒剂溶液可以喷洒于物体表面、具有消毒杀菌、刺激性小、腐蚀性小、无异味、消毒残留物无环境毒性等特点。
与现有技术相比,本发明具有如下的有益效果:
1)通过柠檬酸这一种天然植物中的成分,具有杀灭病毒和细菌的消毒效果,且含有一定酸性,绿色低毒。
2)通过天然萘醌类化合物的加入,提供了新的抗菌抗病毒靶点,增强消毒剂杀灭细菌和病毒的效率。
3)通过使用毒性低、无污染的柠檬酸、天然萘醌类化合物和无机盐制备一种绿色环保、安全高效的新型消毒剂。
4)通过柠檬酸的打孔作用,使天然萘醌类化合物可以以自由扩散的形式进入细菌胞内,提高了萘醌类化合物的杀菌效率。
5)柠檬酸与萘醌类化合物具有较好的协同效果,且同时具有低毒性的特点,为消毒剂的优选组方。
附图说明
通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述,本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显:
图1为实施例1和对比例1-4制备的消毒液的最小抑菌浓度示意图;
图2为实施例1与对比例5抑菌时间示意图;
图3为实施例1消毒水抑菌效果示意图;
图4为实施例1消毒水杀效果示意图;
图5为实施例1消毒水不同浓度处理后斑马鱼心跳次数变化图;
图6为实施例1消毒水不同浓度处理后斑马鱼摆尾次数变化图;
图7为实施例1消毒水不同浓度处理饲喂小鼠后体重变化图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明,但不以任何形式限制本发明。应当指出的是,对本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干调整和改进。这些都属于本发明的保护范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。
本发明公开了一种基于柠檬酸及天然萘醌的消毒液及其制备方法,本领域技术人员可以借鉴文本内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。
实施例1
本实施例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法,制备步骤如下:
(1)精密称取48g纯度大于99.5%柠檬酸、0.7g分析纯NaCl、2mL浓度为100 uM的胡桃醌乙醇溶液和200mL纯化水,备用;
(2)将柠檬酸和NaCl加入到200mL的纯化水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解;
(3)将步骤(2)所得溶液冷却至室温,加入2mL浓度为100uM的胡桃醌乙醇溶液,搅拌均匀,所得溶液即为基于柠檬酸及天然萘醌的消毒液;
(4)将最终得到的溶液分装于喷雾瓶中,即得。
实施例2
本实施例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒凝胶的制备方法
(1)精密称取40g纯度大于99.5%柠檬酸、0.3g分析纯硫酸钾、2mL浓度为100 uM的大黄素乙醇溶液和200mL纯化水,备用;
(2)将柠檬酸和硫酸钾加入到200mL的纯化水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解;
(3)将步骤(2)所得溶液冷却至室温,加入2mL浓度为100uM的大黄素乙醇溶液,搅拌均匀;
(4)将步骤(3)所得溶液加入质量百分比为3%的增稠剂混合,增稠剂中羟乙基纤维素、去离子水、醋酸缓冲液、醋酸氯的用量比为10g:18.5ml:1ml:0.5ml,增稠后制得凝胶,即得消毒凝胶;
(5)将最终得到的凝胶分装于瓶中,即得。
实施例3
本实施例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法。
(1)精密称取38g纯度大于99.5%柠檬酸、0.28g分析纯NaCl、2mL浓度为100 uM的7-甲基胡桃醌乙醇溶液和198mL纯化水,备用;
(2)将柠檬酸和NaCl加入到198mL的纯化水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解;
(3)将步骤(2)所得溶液冷却至室温,加入2mL浓度为100uM的7-甲基胡桃醌乙醇溶液,搅拌均匀,所得溶液即为基于柠檬酸及天然萘醌的消毒液;
(4)将最终得到的溶液分装于喷雾瓶中,即得。
实施例4
本实施例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法。
(1)精密称取64g纯度大于99.5%柠檬酸、0.28g分析纯NaCl、0.1mL浓度为100 uM的7-甲基-5-乙酰基胡桃醌乙醇溶液和200mL纯化水,备用;
(2)将柠檬酸和NaCl加入到200mL的纯化水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解;
(3)将步骤(2)所得溶液冷却至室温,加入0.1mL浓度为100uM的7-甲基-5-乙酰基胡桃醌乙醇溶液,搅拌均匀,所得溶液即为基于柠檬酸及天然萘醌的消毒液;
(4)将最终得到的溶液分装于喷雾瓶中,即得。
实施例5
本实施例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法。
(1)精密称取38g纯度大于99.5%柠檬酸、0.54g分析纯NaCl、2mL浓度为100 uM的紫草素乙醇溶液和198mL纯化水,备用;
(2)将柠檬酸和NaCl加入到198mL的纯化水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解;
(3)将步骤(2)所得溶液冷却至室温,加入2mL浓度为100uM的紫草素乙醇溶液,搅拌均匀,所得溶液即为基于柠檬酸及天然萘醌的消毒液;
(4)将最终得到的溶液分装于喷雾瓶中,即得。
对比例1
本对比例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法。所述方法与实施例1基本相同,不同之处仅在于:柠檬酸用量为20g,纯化水用量为198mL。
通过与实施例1相同的96孔板法测定消毒剂MIC(最小抑菌浓度),对比例1复合消毒剂的MIC为100倍稀释,相较于原消毒剂消毒效果下降。
对比例2
本对比例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法。所述方法与实施例1基本相同,不同之处仅在于:不含有胡桃醌。
通过与实施例1相同的96孔板法测定消毒剂MIC(最小抑菌浓度),对比例2复合消毒剂的MIC为150倍稀释,相较于原消毒剂消毒效果下降。
对比例3
本对比例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法。所述方法与实施例1基本相同,不同之处仅在于:将胡桃醌替换为1,4-萘醌。
通过与实施例1相同的96孔板法测定消毒剂MIC(最小抑菌浓度),对比例3复合消毒剂的MIC为100倍稀释,相较于原消毒剂消毒效果下降,而且胡桃醌更为经济。
对比例4
本对比例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法。所述方法与实施例1基本相同,不同之处仅在于:将柠檬酸替换为乳酸。
通过与实施例1相同的96孔板法测定消毒剂MIC(最小抑菌浓度),对比例4复合消毒剂的MIC为10倍稀释,相较于原消毒剂消毒效果下降。
如图1所示,对比例1-4相较于实施例1,消毒抑菌效果明显下降。乳酸等有机酸杀菌效果不如柠檬酸好,且其他酸与盐类的络合效果较差。
对比例5
本对比例涉及基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的制备方法。所述方法与实施例1基本相同,不同之处仅在于:未添加无机盐。
通过与实施例1相同的96孔板法测定消毒剂MIC(最小抑菌浓度),对比例5复合消毒剂的MIC为10倍稀释,相较于原消毒剂消毒效果下降,如图2所示,有效抑菌时间明显缩短。
效果验证一:实施例1制备的消毒水抑菌动力学实验。
本实验涉及实施例1中基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的抑菌动力学实验方法和结果。其特征在于在测定过程中,将细菌重悬于LB培养基体系中,消毒剂也使用LB培养基进行稀释,给予细菌足量的生长条件,以此模拟消毒水在富含营养供给的环境下对细菌生长的抑制情况。
根据美国CLSI协会标准,通过改进的微孔板法对复合消毒水的抑菌效果进行了评价,其具体实验步骤如下:
(1)取培养过夜的处于对数生长期的金黄色葡萄球菌悬液,使用酶标仪测定其OD600值,如其OD值在0.5~0.8之间,则认为其正处于对数生长期。
(2)在无菌条件下使用高温灭菌的LB培养基将菌悬液稀释100倍,再使用排枪向96孔板中的每个微孔加入100uL稀释后的菌悬液。
(3)将使用高温灭菌的LB培养基50倍稀释的消毒水以100uL的体积分别加入到十八个个平行的菌悬液微孔中。
(4)将96孔板放置于37℃的恒温培养箱中培养,分别在0h、1h、2h、4h、8h时吸取三个孔中的菌悬液,再使用移液枪将不同浓度梯度对应的微孔内的菌悬液转移到不同的1.5mL的PE管中,并立即将PE管放置于冰中。
(5)使用高速离心机将菌悬液在10000r/min下离心10min,并使用0.85%的NaCl溶液重悬,这一过程重复3次。
(6)使用LIVE\DEAD染剂在黑暗下对细菌进行染色,在室温下孵育15min。
(7)使用流式细胞仪确定菌群,进行细菌计数,根据不同浓度梯度下的活细胞和死细胞数量的表征复合消毒水的抑菌活性。实验结果如图3所示。
从实验结果中可以观察到,随着本发明所述新型消毒水处理时间的增长,金黄色葡萄球菌的去除率就越高。虽然在1小时时去除率不到40%,但在处理两小时后,金黄色葡萄球菌的去除率就超过了90%,且在8小时内抑菌率持续上升,在8h时抑菌效率达到了98.3%。这一结果证明本发明所述新型消毒水具有稳定的持续抑制细菌生长的能力。
效果验证二:实施例1制备的消毒水杀菌动力学实验。
本实验涉及实施例1中基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的杀菌动力学实验方法和结果。其特征在于在测定过程中,将细菌重悬于0.85%的NaCl溶液中,消毒剂也使用0.85%的NaCl溶液进行稀释,不给予细菌生存所需的有机物等能源物质,避免细菌繁殖。在上述条件下,测消毒水在缺乏营养供给的环境下对细菌直接杀灭的效果。
根据美国CLSI协会标准,通过改进的微孔板法对复合消毒水的消毒效果进行了评价,其具体实验步骤如下:
(1)取培养过夜的处于对数生长期的金黄色葡萄球菌悬液,使用酶标仪测定其OD600值,如其OD值在0.5~0.8之间,则认为其正处于对数生长期。
(2)在无菌条件下使用高温灭菌的0.85%NaCl溶液将菌悬液稀释100倍,再使用排枪向96孔板中的每个微孔加入100uL稀释后的菌悬液。
(3)将使用高温灭菌的0.85%NaCl溶液50倍稀释的消毒水以100uL的体积分别加入到十八个个平行的菌悬液微孔中。
(4)将96孔板放置于37℃的恒温培养箱中培养,分别在0h、15min,30min、1h、 2h、4h时吸取三个孔中的菌悬液,再使用移液枪将不同浓度梯度对应的微孔内的菌悬液转移到不同的1.5mL的PE管中,并立即将PE管放置于冰中。
(5)使用高速离心机将菌悬液在10000r/min下离心10min,并使用0.85%的NaCl溶液重悬,这一过程重复3次。
(6)使用LIVE\DEAD染剂在黑暗下对细菌进行染色,在室温下孵育15min。
(7)使用流式细胞仪确定菌群,进行细菌技术,根据不同浓度梯度下的活细胞和死细胞的表征复合消毒水的抑菌活性,实验结果如图4所示。
从实验结果中,我们可以观察到,随着本发明所述新型消毒水处理时间的增长,金黄色葡萄球菌的去除率就越高。在15min时,金黄色葡萄球菌的去除率就达到了近 70%,在240min时,金黄色葡萄球菌的去除率达到了96.7%,且在流式细胞仪检测到的细菌均为细胞膜严重受损细菌,其生存活力和致病性大大降低。这一结果证明本发明所述新型消毒水在短时间内具有较为强大的杀灭细菌的能力。
效果验证三:实施例1制备的消毒水的皮肤刺激性实验。
本实验涉及实施例1基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的皮肤刺激性实验。
本实验参考《消毒剂安全性毒理学评价程序和方法》(GB/T 38496-2020),使用新西兰兔,对基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液进行了安全性评价。
实验具体步骤如下:
(1)取一只成年新西兰兔,在实验开始前24h使用剪刀将新西兰兔背部脊柱两侧的毛去除。
(2)将受试物1mL浸润在面积为2.5cm*2.5cm的2~4层纱布上,敷贴在一侧皮毛表面,然后再用无刺激的塑料膜和胶布进行固定。实验组共设置了20倍稀释消毒水、10倍稀释消毒水、5倍稀释消毒水、20倍稀释84、10倍稀释 84、5倍稀释84六组,并有一组空白对照。
(3)敷贴4h后,用无刺激性溶剂去除残留受试物。
(4)分别于去除受试物1h、24h、48h观察皮肤局部反应,并根据《消毒剂安全性毒理学评价程序和方法》(GB/T 38496-2020)中皮肤刺激性评分表进行评分,具体打分标准如下:
一次完整皮肤刺激性实验的结果如下:
表一:不同受试物一次完整皮肤刺激性实验得分
从实验结果中,我们可以观察到20%的84消毒剂处理后,1H时红斑和水肿的形成都较为明显,特别是红斑较为严重,且持续到了24H,48H后红肿的情况才略有减弱。同浓度的本发明所述新型消毒水则仅出现了勉强可见的红斑和水肿,且在48H 后,皮肤已经完全恢复正常。10%的84消毒剂和5%的84消毒剂处理后的新西兰兔皮肤均出现了不同程度的红斑和水肿,但同浓度的复合消毒剂则未出现红斑和水肿。这一结果证明本发明所述新型消毒水在有效的杀菌浓度下,对家兔的皮肤刺激性非常小,且远低于84消毒剂,证明本发明所述新型消毒水的安全性较高。
效果验证四:实施例1制备的消毒水的生态毒性评价实验。
本实验涉及实施例1基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的生态毒性评价。
该实验采用斑马鱼模型开展的环境毒性评价,具体包括急性毒性实验和行为学实验。具体实验的步骤如下:
一、急性毒性实验
(1)使用OD水稀释复合消毒剂和84消毒剂,使其最终浓度分别为20%、10%、 5%、1%(以使用浓度计算体积比)。
(2)向含不同浓度消毒剂的OD水中分别加入20颗斑马鱼胚胎和20条斑马鱼幼鱼,分别在5min、30min、90min时观察斑马鱼胚胎及幼鱼的存活情况。
斑马鱼急性毒性实验结果如下:
表二:斑马鱼急性毒性实验结果
结果如表2所示,可以看到相同处理浓度下,无论是斑马鱼胚胎还是斑马鱼幼鱼,本发明所述消毒剂的致死率均低于84消毒剂。在实验中所用的实验浓度下,本发明所述消毒剂处理后的胚胎均未出现死亡,而在84消毒剂作用下,20%、10%浓度的胚胎均出现了死亡。且本发明所述消毒剂对斑马鱼幼鱼的半数致死浓度在5%~10%之间,而 84消毒剂对斑马鱼幼鱼的半数致死浓度则小于1%。这一结果证明本发明所述新型消毒水对斑马鱼的急性毒性显著小于84消毒剂。
二、斑马鱼行为学实验
(1)使用OD水稀释复合消毒剂和84消毒剂,使其最终浓度分别为0.5%、0.25%、0.125%、0.6125%,0.30625%(以使用浓度计算体积比)。
(2)向含不同浓度消毒剂的OD水中分别加入20颗斑马鱼胚胎和20条斑马鱼幼鱼,分别在24h时记录胚胎每分钟摆尾次数、在48h时记录幼鱼心脏每分钟跳动次数,以评估斑马鱼的状态是否受消毒水影响,所有数据以拍摄视频的形式记录。(因斑马鱼在0.5%的84消毒水中无法长期生存,故没有设置84的阳性对照组。)
(3)使用ImageJ软件对拍摄视频进行处理,处理后得到斑马鱼胚胎每分钟摆尾和斑马鱼幼鱼心跳数据。
相关实验结果如图5、图6所示:根据实验结果可以看到,可以看出本发明所述新型消毒水处理的实验组斑马鱼与空白对照组的斑马鱼的基本行为无显著性差别,可以认为在实验浓度下对斑马鱼的生长不产生影响,证明本发明所述新型消毒水的生态毒性较低。
效果验证五:实施例1制备的消毒水的体内毒性评价实验。
本实验涉及实施例1基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液的体内毒性。采用消毒水饲喂的方法,测试其在Balb/C小鼠体内的毒性。
我们连续检测了小鼠七天内的体重变化,记录如图7所示。
从实验结果中,我们观察到在有效杀菌浓度下的本发明所述消毒剂的饲喂条件下,小鼠七天内的体重变化和空白对照组小鼠体重变化情况基本相同,证明本发明所述新型消毒水的经口毒性较低,较为安全。
综上所述,本发明所述的基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒液,其制备方法简便且原料易得。活性测定结果表明,上述消毒液具有消毒杀菌功效高,刺激性小、腐蚀性低、无异味、消毒残留物无环境毒性、质量稳定等特点。该消毒剂适用于冷链消毒、蔬菜食品表面消毒及细菌战的防护。其应用场所包括各级医院、商场、影院、网吧、餐饮、行政、企业、公共交通等公共场所,也可用于居家场所消毒。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是,本发明并不局限于上述特定实施方式,本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改,这并不影响本发明的实质内容。
Claims (10)
1.一种基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒产品,其特征在于,所述消毒产品包括如下重量份数的各组分:
柠檬酸 15~25份;
萘醌类化合物 0.01~1份。
2.根据权利要求1所述的消毒产品,其特征在于,所述萘醌类化合物包括胡桃醌、7-甲基胡桃醌、7-甲基-5-乙酰基胡桃醌、大黄素、紫草素中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的消毒产品,其特征在于,按重量份数计,所述消毒产品还包括0.1~1份无机盐。
4.根据权利要求3所述的消毒产品,其特征在于,所述无机盐包括碱金属盐和/或碱土金属盐。
5.根据权利要求4所述的消毒产品,其特征在于,所述碱金属盐包括氯化钠、硫酸钾、硝酸钾中的一种或几种;碱土金属盐包括氯化镁、硫酸镁、硫酸钙中的一种或几种。
6.一种基于柠檬酸及天然萘醌类化合物的消毒产品在制备消毒液和/或消毒凝胶中的应用。
7.一种消毒液,其特征在于,所述消毒液每百份包括如下重量份数的各组分:
8.一种如权利要求7所述的消毒液的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
S1、称取柠檬酸,加入到适量的去离子水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解;
S2、称取无机盐,加入到步骤S1制得的柠檬酸水溶液中,在70~95℃下搅拌25-35分钟,搅拌速度为60~100r/min;
S3、将步骤S2所得溶液冷却至室温,加入萘醌类化合物溶解在助溶剂中形成的混合溶液,使消毒液中萘醌类化合物的质量分数为0.01~1%,搅拌均匀,所得溶液即为消毒液。
9.一种消毒凝胶,其特征在于,所述消毒水每百份包括如下重量份数的各组分:
10.一种如权利要求9所述的消毒凝胶的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
A1、称取柠檬酸,加入到适量的去离子水中,在水浴反应釜中加温至70~95℃,在制备过程中确保柠檬酸全部溶解;
A2、称取无机盐,加入到步骤A1所得的柠檬酸水溶液中,在70~95℃下搅拌25-35分钟,搅拌速度为60~100r/min;
A3、将步骤A2所得溶液冷却至室温,加入萘醌类化合物溶解在助溶剂中形成的混合溶液,使消毒液中萘醌类化合物的质量分数为0.01~1%,搅拌均匀后加入增稠剂,混合后增稠后制得凝胶,即得消毒凝胶。
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