CN116410861A - 口腔材料体外细胞毒性测试装置和方法 - Google Patents
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Abstract
本申请实施例公开了一种口腔材料体外细胞毒性测试装置和方法,装置包括了液压培养基存储组件和模拟牙体三维细胞培养舱,液压培养基存储组件包括存储器和导管,模拟牙体三维细胞培养舱包括培养舱本体、细胞支架和牙本质片,在使用过程中,可以将细胞支架设置于培养舱本体中间部位,而后将牙本质片设置在细胞支架上,以使牙本质片的牙髓面朝向于下腔室,且下方紧贴着细胞支架,通过存储器向下腔室供给培养液,对上述牙髓面和细胞支架进行施压,随后在牙本质片上设置实验材料并开始接触培养,在对牙髓面和细胞支架进行培养一定时间后,检测牙髓面下方紧贴的细胞支架上的细胞存活率,判断材料毒性,更有效的体外评价口腔修复材料的毒性。
Description
技术领域
本申请实施例涉及牙科技术领域,尤其涉及一种口腔材料体外细胞毒性测试装置和方法。
背景技术
近年来随着口腔修复材料的不断发展,针对材料生物相容性的研究也随之成为重点。口腔修复材料尤其是牙体充填修复材料应用于牙齿,因牙本质的阻隔而不直接接触牙髓组织,毒性物质是由牙本质小管渗透至牙髓从而引发刺激和不适。体外细胞毒性试验是评价口腔修复材料生物相容性的主要手段之一,该类试验简便、快捷且可以避免对动物和人体的伤害,实际应用较为普遍。然而传统的体外细胞毒性试验有时不能准确评价口腔修复材料在体内应用时的实际毒性,传统细胞毒试验通常使用平面生长的细胞,然而平面生长的细胞及其生长坏境与体内实际情况相差甚远,与临床的相关性较差。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术或相关技术中存在的技术问题之一。
为此,本发明的第一方面提供了一种口腔材料体外细胞毒性测试装置。
本发明的第二方面提供了一种口腔材料体外细胞毒性测试方法。
有鉴于此,根据本申请实施例的第一方面提出了一种口腔材料体外细胞毒性测试装置,包括:
液压培养基存储组件,所述液压培养基存储组件包括存储器和导管,所述导管的一端连通于所述存储器;
模拟牙体三维细胞培养舱,所述模拟牙体三维细胞培养舱包括培养舱本体、细胞支架和牙本质片,所述细胞支架设置在所述培养舱本体内的中间位置,所述牙本质片设置在所述细胞支架上,所述细胞支架和所述牙本质片将所述培养舱本体分割为上腔室和下腔室,所述导管的另一端连通至所述培养舱本体的下腔室,所述牙本质片的牙髓面朝向于所述下腔室设置,且所述牙本质片下方紧贴着细胞支架。
在一种可行的实施方式中,所述存储器为圆柱形,所述圆柱形的直径大于或等于10cm;
所述存储器里的培养基液面位置与所述培养舱本体中细胞支架处)的高度差为15cm至35cm。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:
升降架,所述升降架的底面与所述培养舱本体的底面共面,所述存储器设置在所述升降架上,所述升降架用于调节所述存储器与所述培养舱本体之间的高度差。
在一种可行的实施方式中,所述培养舱本体由聚碳酸酯制成;
所述培养舱本体为圆柱形,所述培养舱本体的内径大于或等于6mm,所述培养舱本体的高度大于或等于30mm。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:疏水滤膜盖,所述存储器的顶部形成有第一开口,所述疏水滤膜盖用于覆盖在所述第一开口上。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:密封盖,所述培养舱本体的顶部形成有第二开口,所述第二开口导通至上腔室,所述密封盖用于覆盖在所述第二开口处。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:废液收集瓶,所述废液收集瓶连通于上腔室。
在一种可行的实施方式中,所述模拟牙体三维细胞培养舱为多个,每个所述液压培养基存储组件连接有多个所述模拟牙体三维细胞培养舱。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:控制阀,所述控制阀设置在所述导管上。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:
密封圈,所述密封圈套设在所述牙本质片的周侧。
根据本申请实施例的第二方面提出了一种口腔材料体外细胞毒性测试方法,应用于如上述任意技术方案所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,所述口腔材料体外细胞毒性测试方法包括:
将细胞支架设置于培养舱的中间位置;
将牙本质片设置在所述细胞支架上并紧贴细胞支架,以使所述牙本质片的牙髓面朝向于所述下腔室;
通过所述存储器向所述下腔室供给培养液,以对所述牙髓面和细胞支架进行培养,并对所述牙髓面和细胞支架进行施压;
在牙本质片上设置实验材料,开始接触培养;
检测细胞支架上细胞的存活率,判断材料毒性。
在一种可行的实施方式中,所述通过所述存储器向所述下腔室供给培养液,以对所述牙髓面和细胞支架进行培养,并对所述牙髓面和细胞支架进行施压的步骤包括:
调整所述存储器的高度,以调节所述培养液的压力,即调节储存器中培养基液面与培养舱中间位置的高度,以使所述培养液的压力趋近于牙髓内部的压力。
相比现有技术,本发明至少包括以下有益效果:
本申请实施例提供的口腔材料体外细胞毒性测试装置包括了液压培养基存储组件和模拟牙体三维细胞培养舱,液压培养基存储组件包括存储器和导管,模拟牙体三维细胞培养舱包括培养舱本体、细胞支架和牙本质片,在使用过程中,可以将细胞支架设置于培养舱本体中间部位,而后将牙本质片设置在细胞支架上,以使牙本质片的牙髓面朝向于下腔室,且下方紧贴着细胞支架,通过存储器向下腔室供给培养液,对上述牙髓面和细胞支架进行施压,随后在牙本质片上设置实验材料并开始接触培养,在对牙髓面和细胞支架进行培养一定时间后,检测牙髓面下方紧贴的细胞支架上的细胞存活率,判断材料毒性,基于此通过培养液的供给,可以模拟牙髓面的细胞的生长环境和压力环境,能模拟牙齿内实际情况的体外细胞毒性实验装置,利用该装置可在体外模拟牙齿内部的结构功能以及牙髓腔的压力,完成细胞毒性评价。由于该试验装置可高度模拟体内坏境,因此该装置的应用甚至可以代替动物实验。口腔材料体外细胞毒性测试装置作为体外评价口腔修复材料的适宜装置,更有效的体外评价口腔修复材料的毒性。
附图说明
通过阅读下文优选实施方式的详细描述,各种其他的优点和益处对于本领域普通技术人员将变得清楚明了。附图仅用于示出优选实施方式的目的,而并不认为是对本申请的限制。而且在整个附图中,用相同的参考符号表示相同的部件。在附图中:
图1为本申请提供的一种实施例的口腔材料体外细胞毒性测试装置的示意性结构图;
图2为本申请提供的一种实施例的口腔材料体外细胞毒性测试方法的示意性步骤流程图。
其中,图1中附图标记与部件名称之间的对应关系为:
110液压培养基存储组件、120模拟牙体三维细胞培养舱、130疏水滤膜盖、140密封盖、150废液收集瓶、160升降架、170控制阀;
111存储器、112导管、121培养舱本体、122细胞支架、123牙本质片。
具体实施方式
为了更好的理解上述技术方案,下面通过附图以及具体实施例对本申请实施例的技术方案做详细的说明,应当理解本申请实施例以及实施例中的具体特征是对本申请实施例技术方案的详细的说明,而不是对本申请技术方案的限定,在不冲突的情况下,本申请实施例以及实施例中的技术特征可以相互组合。
如图1所示,根据本申请实施例的第一方面提出了一种口腔材料体外细胞毒性测试装置,包括:液压培养基存储组件110,液压培养基存储组件110包括存储器111和导管112,导管112的一端连通于存储器111;模拟牙体三维细胞培养舱120,模拟牙体三维细胞培养舱120包括培养舱本体121、细胞支架122和牙本质片123,细胞支架122设置在培养舱本体121内的中间部位,牙本质片123设置在细胞支架122上,细胞支架122和牙本质片123将上述培养舱本体121分割为上腔室和下腔室,导管112的另一端连通至培养舱本体121的下腔室,牙本质片123的牙髓面朝向于下腔室设置,且所述牙本质片123下方紧贴着细胞支架122。
本申请实施例提供的口腔材料体外细胞毒性测试装置包括了液压培养基存储组件110和模拟牙体三维细胞培养舱120,液压培养基存储组件110包括存储器111和导管112,模拟牙体三维细胞培养舱120包括培养舱本体121、细胞支架122和牙本质片123,在使用过程中,可以将细胞支架122设置于培养舱本体121中间部位,而后将牙本质片123设置在细胞支架122上,以使牙本质片123的牙髓面朝向于下腔室,且下方紧贴着细胞支架122,通过存储器111向下腔室供给培养液,对上述牙髓面和细胞支架122进行施压,随后在牙本质片123上设置实验材料并开始接触培养,在对牙髓面和细胞支架122进行培养一定时间后,检测牙髓面下方紧贴的细胞支架122上的细胞存活率,判断材料毒性,基于此通过培养液的供给,可以模拟牙髓面的细胞的生长环境和压力环境,能模拟牙齿内实际情况的体外细胞毒性实验装置,利用该装置可在体外模拟牙齿内部的结构功能以及牙髓腔的压力,完成细胞毒性评价。由于该试验装置可高度模拟体内坏境,因此该装置的应用甚至可以代替动物实验。口腔材料体外细胞毒性测试装置作为体外评价口腔修复材料的适宜装置,更有效的体外评价口腔修复材料的毒性。
在一种可行的实施方式中,存储器111为圆柱形,圆柱形的直径大于或等于10cm;存储器里的培养基液面位置与培养舱本体中细胞支架处)的高度差为15cm至35cm。
在该技术方案中,进一步提供了存储器111的形状和尺寸,通过存储器111为圆柱形,圆柱形的直径大于或等于10cm;存储器里的培养基液面位置与培养舱本体中细胞支架处)的高度差为15cm至35cm,可以容纳足够的培养液,同时可以使培养液通过导管112均匀地供给到培养舱本体121,能够更好地模拟牙髓在体内的环境。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:升降架160,升降架160的底面与培养舱本体121的底面共面,存储器111设置在升降架160上,升降架160用于调节存储器111与培养舱本体121之间的高度差。
在该技术方案中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还可以包括升降架160,通过升降架160的设置可以调节存储器111的实际高度,进而调节存储器111与培养舱本体121之间的高度差,基于此即可调节培养液的压力,可以更好地牙髓在体内的环境。
在一种可行的实施方式中,培养舱本体121由聚碳酸酯制成;培养舱本体121为圆柱形,培养舱本体121的内径大于或等于6mm,培养舱本体121的高度大于或等于30mm。
在该技术方案中,进一步提高了培养舱本体121的材料和形状,培养舱本体121由聚碳酸酯,可以利用聚碳酸酯无毒无害的性能,避免培养舱本体121污染样品,通过培养舱本体121的内径大于或等于6mm,培养舱本体121的高度大于或等于30mm便于对牙本质片123进行容纳。
如图1所示,在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:疏水滤膜盖130,存储器111的顶部形成有第一开口,疏水滤膜盖130用于覆盖在第一开口上。
在该技术方案中,通过在存储器111的顶部覆盖疏水滤膜盖130,便于培养液在重力的作用下供给到培养舱本体121,同时能够使培养液处于无菌的环境。
如图1所示,在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:密封盖140,培养舱本体121的顶部形成有第二开口,第二开口导通至上腔室,密封盖140用于覆盖在所述第二开口处。
在该技术方案中,培养舱本体121同样采用开口设计,便于牙本质片123向培养舱本体121内的放置,同样便于牙本质片123的材料的涂敷。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:废液收集瓶150,废液收集瓶150连通于上腔室。
在该技术方案中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还可以包括废液收集瓶150,通过废液收集瓶150的设置,便于收集经由牙本质片123渗漏到上腔室的液体。
在一种可行的实施方式中,模拟牙体三维细胞培养舱120为多个,每个液压培养基存储组件110连接有多个模拟牙体三维细胞培养舱120。
在该技术方案中,一个液压培养基存储组件110连接有多个模拟牙体三维细胞培养舱120,基于此可以同步进行多个平行实验,便于对多个不同材料进行同步测试,能够提高选材的效率和可靠性。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:控制阀170,控制阀170设置在导管112上。
在该技术方案中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括控制阀170,通过控制阀170的设置便于控制培养液的供给和停止供给,使得口腔材料体外细胞毒性测试装置使用更加方便。
在一种可行的实施方式中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还包括:密封圈,密封圈套设在牙本质片123的周侧。
在该技术方案中,口腔材料体外细胞毒性测试装置还可以包括密封圈,通过密封圈的设置便于阻隔上腔室和下腔室,能够使毒性实验进行更加准确,减少废液的产生。
在一些示例中,本申请实施例提供的口腔材料体外细胞毒性测试装置包括了液压培养基存储组件110和模拟牙体三维细胞培养舱120。
如图2所示,根据本申请实施例的第二方面提出了一种口腔材料体外细胞毒性测试方法,应用于如上述任意技术方案的口腔材料体外细胞毒性测试装置,口腔材料体外细胞毒性测试方法包括:
步骤101:将细胞支架设置于培养舱的中间位置;
步骤102:将牙本质片设置在所述细胞支架上并紧贴细胞支架,以使所述牙本质片的牙髓面朝向于所述下腔室;
步骤103:通过所述存储器向所述下腔室供给培养液,以对所述牙髓面和细胞支架进行培养,并对所述牙髓面和细胞支架进行施压;
步骤104:在牙本质片上设置实验材料,开始接触培养;
步骤105:检测细胞支架上细胞的存活率,判断材料毒性。
如图1所示,液压培养基存储组件110为直径10cm的圆柱形玻璃储存器,高约20cm,上方带有细胞培养用的疏水滤膜盖130,确保与外部气流相通的情况下无菌,液压培养基存储组件110下部通过硅胶管路作为导管112与模拟牙体三维细胞培养舱120相连,一个液压培养基存储组件110最多可同时连接30个细胞培养舱。模拟牙体三维细胞培养舱120是一个由聚碳酸酯制成的中空圆柱形舱室,其内径约6mm,高约30mm;内部中心可水平放置一牙本质片123,将其分隔成上下两个腔体,上腔室模拟牙齿的“窝洞”,放置试验材料,上腔室的上面有密封盖140,下腔室模拟“牙髓腔”,放置三维细胞培养的细胞支架122,且充满培养基。长满细胞的细胞支架122紧贴牙本质片123的“牙髓面”(即牙本质试片的下表面)放置,位于下腔室。培养舱本体121的下腔室一侧与液压培养基存储组件110相连。上腔室的另一侧与废液收集瓶150相连。液压培养基存储组件110可以用升降架垂直固定于桌面,其中的培养基液面高度与模拟牙体三维细胞培养舱120中间位置约为20cm,所连接的模拟牙体三维细胞培养舱120置于同一桌面,因此在培养舱内牙本质试片的下表面具有20cm液压。该液压恰好可以模拟牙髓内部的压力。
经培养,原代牙髓细胞或其他类似牙髓细胞性质的细胞立体生长于三维细胞培养的细胞支架122上(直径约8mm圆片形),细胞毒性试验时,将其放置于模拟牙体三维细胞培养舱120的下腔室的细胞支架122处(下腔的最上方),上方紧贴放置一片预先切割并处理好的牙本质试片,“牙髓面”朝下,将上腔室和下腔室紧密连接并固定,通过橡胶圈保证密封性,即上下腔室材料或物质交换只能通过牙本质片123存在的牙本质小管进行交换而不能从牙本质片123周围渗透交换。固定好培养舱后,将其与液压培养基存储组件110相连,连接好管路后,向液压培养基存储组件110注入培养基使其充满整个管路和细胞培养舱下腔,调整培养基液面距离培养舱内牙本质片123高度至20cm或所需高度。打开模拟牙体三维细胞培养舱120上腔的密封盖140,将待测的口腔材料直接应用于牙本质试片上表面,操作可完全模拟临床操作,例如,牙科粘接剂可以涂抹一薄层后,依据说明书用气枪轻吹数秒,用齿科光固化灯光照10s至20s。材料施加完毕后,盖上上腔室的密封盖140。位于上腔室的出口可连接至一废液收集瓶150,依据试验原理这里产生的废液极少甚至不产生,因此这个设计只是确保上腔不会积液。(因为上下腔唯一可交换物质的是牙本质试片,然而材料施加后会堵塞牙本质小管,大部分材料都是具备这个功能如齿科粘接剂、树脂、水门汀和脱敏剂,因此这里出现积液可能性较少,空白组和部分封闭性差的材料可能会产生约0.72ml/d的培养基,该数据依据牙本质试片的通透性计算。)液压培养基存储组件110可以同时和多个模拟牙体三维细胞培养舱120相连,通过管理分流装置可以最多连接50个培养舱,满足每组试验有5至10个平行数据,可同时做多组材料的细胞毒性,确保了材料之间的可比性(不同批做的实验结果之间的可比性差,统计数据时难度加大)。该装置连接完成后,可整体放置于细胞培养箱中进行培养,反应时间可为1天或按需求,如需长时间培养,中间每隔2天更换一次液压培养基存储组件110中的培养基即可。后续依据细胞毒性常规试验程序,检测细胞存活率,判断材料毒性。
在一种可行的实施方式中,通过存储器向下腔室供给培养液,以对牙髓面和细胞支架进行培养,并对牙髓面和细胞支架进行施压的步骤包括:
调整存储器的高度,以调节培养液的压力,即调节储存器中培养基液面与培养舱中间位置的高度,以使培养液的压力趋近于牙髓内部的压力。
通过对存储器的高度进行调节,可以调节培养液为牙本质片施加的压力,可以更好地模拟体内环境,提高实验的准确性。
可以理解的是,口腔修复材料专用细胞毒性装置想要模拟实际情况最重要的问题即为模拟牙齿的结构特征和模拟牙髓腔对牙体硬组织所施加的压力。通过本申请实施例提供的口腔材料体外细胞毒性测试装置和方法,通过设计液压培养基存储组件并使其和模拟牙体三维细胞培养舱相连巧妙的解决了模拟牙髓腔压力的难点,另一方面,模拟牙体三维细胞培养舱完全依据人体和牛牙本质试片大小设计,其中可以放置长满牙髓细胞的三维细胞培养的细胞支架,三维培养的牙髓细胞比普通平面细胞更贴近实际情况。因此该套实验装置具备模拟牙齿结构和模拟牙髓腔压力两个主要优势和创新。
牙齿结构功能模拟的重要性包括:1.口腔修复材料如粘接剂、树脂、水门汀、脱敏剂、氟保护漆等均为直接接触牙齿硬组织即牙本质的材料,而传统的细胞毒性试验均为材料或材料的浸提液与细胞直接接触,这与口腔修复材料的作用方式完全不同,并不能反应这一类材料的真实结果。通过本申请实施例提供的口腔材料体外细胞毒性测试装置和方法直接使用牙的牙本质切片,下方有立体生长的牙髓细胞,材料的使用方式也可完全按临床实际进行,这些基本上完全再现了临床上行为。(模拟牙体三维细胞培养舱依据牙齿结构设计,更好的划分了窝洞区和牙髓腔区,上下两个腔室分隔且独立互不干扰,上腔还有密封盖可以方便的施加材料,施加材料后还可密封,保证了无菌且反应不受干扰,与有些文献中用孔板简单改造的不一样。)2.三维细胞的培养:该装置所放置的细胞是三维立体培养的细胞支架,传统的细胞毒试验以及有些文献中使用的均为平面生长的细胞。如氧化锌丁香酚和玻璃离子水门汀在传统的细胞毒性试验中表现出较重的细胞毒性,然而在体内使用中却并不损伤牙髓细胞,其原因可归结为单层细胞培养时,细胞在体外环境下增生,逐渐丧失了原有的性状,导致和体内情况不相符。三维细胞培养技术是介于单层细胞培养与动物实验之间的一种技术,既能最大程度模拟体内环境,又能展现细胞培养的直观性及条件可控性的优势。三维细胞培养可更好地模拟体内正常细胞的生长环境,细胞立体生长且紧密连接在一起,可建立细胞间和细胞与胞外基质间的联系,形成一定的三维结构。3.液压的重要性:牙本质中有牙本质小管,牙本质小管里充满牙本质小管液,小管液成分复杂,其中包含一定比例的血浆蛋白。通常可以用一定比例的血浆或白蛋白模拟。牙髓腔有一定的压力,因此牙本质小管液会在压力的作用下形成流动。(牙本质小管由髓腔发出向牙齿表面方向贯穿牙本质全层,内含来自牙髓组织的神经纤维以及牙本质小管液,在髓腔正压的作用下,小管液自髓腔向外流动。当牙釉质、牙骨质由于各种原因被破坏后,牙本质小管暴露于口腔中,会导致牙本质渗透性增高,细菌等刺激物进入牙本质深处,以及修复体粘接性能降低等情况发生。因此,如何科学有效地封闭牙本质小管,减少牙本质过敏的发生,避免外界刺激对牙髓的影响即降低牙髓细胞毒性成为近年来的研究热点。)口腔修复材料的细胞毒性试验应模拟这个过程,液压的模拟这一步骤很关键,因为毒性物质和成分正是通过牙本质小管液的流动进入到的牙髓。如果没有液压的模拟,那么细胞状态以及牙本质的状态与体内实际情况有较大差距。
第二个重要点是,在模拟牙髓腔液压的压力下,培养基中的血清会部分进入到(压入)实验中牙本质试片的小管内,这同时也模拟了牙本质小管液成分,上文提到小管液可以用一定比例的血清模拟,小管液中一主要成分就是血清白蛋白,许多牙科修复材料都会包含与血清白蛋白作用的成分,如戊二醛和甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA),这些反应会降低他们对牙髓细胞的毒性。因此这个模拟也更好的再现了体内这些材料与牙齿反应的实际情况。
可以理解的是,如没有液压的模拟,就没有小管液及其流动的模拟,会受到液压影响的材料和许多可与小管液成分反应的材料均测试不出真实毒性。
在本发明中,术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述的目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性;术语“多个”则指两个或两个以上,除非另有明确的限定。术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语均应做广义理解,例如,“连接”可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接;“相连”可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连。对于本领域的普通技术人员而言,可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
本发明的描述中,需要理解的是,术语“上”、“下”、“左”、“右”、“前”、“后”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或单元必须具有特定的方向、以特定的方位构造和操作,因此,不能理解为对本发明的限制。
在本说明书的描述中,术语“一个实施例”、“一些实施例”、“具体实施例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或实例。而且,描述的具体特征、结构、材料或特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
以上仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种口腔材料体外细胞毒性测试装置,其特征在于,包括:
液压培养基存储组件,所述液压培养基存储组件包括存储器和导管,所述导管的一端连通于所述存储器;
模拟牙体三维细胞培养舱,所述模拟牙体三维细胞培养舱包括培养舱本体、细胞支架和牙本质片,所述细胞支架设置在所述培养舱本体内的中间位置,所述牙本质片设置在所述细胞支架上,所述细胞支架和所述牙本质片将所述培养舱本体分割为上腔室和下腔室,所述导管的另一端连通至所述培养舱本体的下腔室,所述牙本质片的牙髓面朝向于所述下腔室设置,且所述牙本质片下方紧贴着细胞支架。
2.根据权利要求1所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,其特征在于,
所述存储器为圆柱形,所述圆柱形的直径大于或等于10cm;
所述存储器里的培养基液面位置与所述培养舱本体中细胞支架处)的高度差为15cm至35cm。
3.根据权利要求1所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,其特征在于,还包括:
升降架,所述升降架的底面与所述培养舱本体的底面共面,所述存储器设置在所述升降架上,所述升降架用于调节所述存储器与所述培养舱本体之间的高度差。
4.根据权利要求1所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,其特征在于,
所述培养舱本体由聚碳酸酯制成;
所述培养舱本体为圆柱形,所述培养舱本体的内径大于或等于6mm,所述培养舱本体的高度大于或等于30mm。
5.根据权利要求1所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,其特征在于,还包括:
疏水滤膜盖,所述存储器的顶部形成有第一开口,所述疏水滤膜盖用于覆盖在所述第一开口上;
密封盖,所述培养舱本体的顶部形成有第二开口,所述第二开口导通至上腔室,所述密封盖用于覆盖在所述第二开口处;
废液收集瓶,所述废液收集瓶连通于上腔室。
6.根据权利要求1所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,其特征在于,
所述模拟牙体三维细胞培养舱为多个,每个所述液压培养基存储组件连接有多个所述模拟牙体三维细胞培养舱。
7.根据权利要求6所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,其特征在于,还包括:
控制阀,所述控制阀设置在所述导管上。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,其特征在于,还包括:
密封圈,所述密封圈套设在所述牙本质片的周侧。
9.一种口腔材料体外细胞毒性测试方法,其特征在于,应用于如权利要求1至7中任一项所述的口腔材料体外细胞毒性测试装置,所述口腔材料体外细胞毒性测试方法包括:
将细胞支架设置于培养舱的中间位置;
将牙本质片设置在所述细胞支架上并紧贴细胞支架,以使所述牙本质片的牙髓面朝向于所述下腔室;
通过所述存储器向所述下腔室供给培养液,以对所述牙髓面和细胞支架进行培养,并对所述牙髓面和细胞支架进行施压;
在牙本质片上设置实验材料,开始接触培养;
检测细胞支架上细胞的存活率,判断材料毒性。
10.根据权利要求9所述的口腔材料体外细胞毒性测试方法,其特征在于,所述通过所述存储器向所述下腔室供给培养液,以对所述牙髓面和细胞支架进行培养,并对所述牙髓面和细胞支架进行施压的步骤包括:
调整所述存储器的高度,以调节所述培养液的压力,即调节储存器中培养基液面与培养舱中间位置的高度,以使所述培养液的压力趋近于牙髓内部的压力。
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- 2023-04-13 CN CN202310399794.2A patent/CN116410861A/zh active Pending
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