CN116211968A - 一种降血糖组合物、其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种降血糖组合物,包括如下重量份的原料:葛根提取物5~21份;壳寡糖1~7份;黄精提取物3~11份;玉米须提取物5~20份;桑叶提取物3~15份;白芸豆提取物3~15份。本发明提供的上述组分在上述配比下具有协同作用,使得最终的组合物具有良好的降血糖的效果。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品技术领域,尤其是涉及一种降血糖组合物、其制备方法和应用。
背景技术
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病,由遗传因素和环境因素而导致的胰岛素绝对或相对不足,以及由靶组织靶细胞对胰岛素敏感性降低引起的以糖代谢紊乱为主的慢性综合性疾病。患者体内长期伴随着高血糖和高血脂。随着全球经济的高速发展,不健康的生活方式也加速了糖尿病的蔓延,根据国际糖尿病联盟预测,到2045年糖尿病患者人数将增加至7亿,成为继心血管疾病和恶性肿瘤后的第三大世界公共卫生问题。糖尿病的并发症而导致死亡的比例仅次于肿瘤,我国已把糖尿病列为重点防治疾病的首位。
传统方法是运用药物调节残存胰岛细胞对血糖的敏感性,促进胰岛素分泌二是通过外源性补充胰岛素来降低血糖。不管哪种方法,都是暂时性控制血糖,并没有使受损的胰岛细胞恢复活力,且存在药物耐受和胰岛素依赖等现象,有时甚至导致患者血糖忽高忽低。中医将糖尿病归属于"消渴病"范畴,其发病与禀赋不足、脏腑柔弱、饮食不节、劳逸过度、等致病因素密切相关。禀赋不足、脏腑柔弱,肝肾阴虚或脾肾阳虚,是消渴病发生的重要内因。应当从滋阴清热为主着手,加以治疗肝郁气滞、脾虚痰瘀为辅助。解决糖尿病胰岛素抵抗问题以及胰岛损伤问题,提高胰岛素受体敏感性,最大可能修复损伤胰岛及早干预,起到治疗糖尿病的效果。因此,亟待开发一种具有降低血糖功能的组合物,来辅助降低血糖和抑制糖尿病并发症的发生。
发明内容
有鉴于此,本发明要解决的技术问题在于提供一种降低血糖功能的组合物,本发明的组合物降血糖效果好。
本发明提供了一种降血糖组合物,包括如下重量份的原料:
优选的,包括如下重量份的原料:
优选的,包括如下重量份的原料:
本发明提供了一种任意一项所述的组合物的制备方法,包括如下步骤:
葛根提取物、壳寡糖、黄精提取物、玉米须提取物、桑叶提取物和白芸豆提取物混合,即得。
本发明提供了上述任意一项所述的组合物在制备降血糖的产品中的应用。
优选的,所述降血糖包括降低空腹血糖的水平、调节糖耐量水平或调节胰岛素抵抗水平。
本发明提供了上述任意一项所述的组合物在改善高血糖人健康状况的产品中的应用。
优选的,所述改善高血糖人健康状况包括升高抗氧化酶活性、降低脂质过氧化产物含量、恢复体重增长、减少摄食量、减少饮水量、抑制肝脏和肾脏病变。
本发明提供了一种降血糖的产品,包括上述技术方案任意一项所述的组合物。
优选的,所述降血糖的产品中组合物的剂量浓度为195~780mg/kg。
与现有技术相比,本发明提供了一种降血糖组合物,包括如下重量份的原料:葛根提取物5~21份;壳寡糖1~7份;黄精提取物3~11份;玉米须提取物5~20份;桑叶提取物3~15份;白芸豆提取物3~15份。本发明提供的上述组分在上述配比具有协同作用,使得最终的组合物具有良好的降血糖的效果。
附图说明
图1为本发明降血糖配方的细胞致死率结果图;
图2为本发明实施例2的降血糖配方和实施例3的葛根提取物:壳寡糖=3:1配方细胞葡萄糖代谢量对比结果图;
图3为葛根提取物:壳寡糖=1:1不同浓度条件下细胞葡萄糖代谢量结果图;
图4为葛根提取物:壳寡糖=2:1不同浓度条件下细胞葡萄糖代谢量结果图;
图5为葛根提取物:壳寡糖=3:1不同浓度条件下细胞葡萄糖代谢量结果图;
图6为不同浓度二甲双胍对细胞葡萄糖代谢率影响图;
图7为不同配比原料在100μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比图;
图8为不同配比原料在50μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比图;
图9为不同配比原料在10μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比图;
图10为不同配比原料在2μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比。
具体实施方式
本发明提供了一种降血糖组合物、其制备方法和应用,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都属于本发明保护的范围。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明提供了一种降血糖组合物,包括如下重量份的原料:
本发明提供的降血糖组合物包括葛根提取物5~21重量份;优选包括葛根提取物5~18重量份;更优选包括5~16重量份;最优选包括6~13重量份。
本发明提供的降血糖组合物包括壳寡糖1~7重量份;更优选包括2~6重量份;最优选包括2~5重量份。
本发明提供的降血糖组合物包括黄精提取物3~11重量份;更优选包括3~9重量份;最优选包括3~6重量份。
本发明提供的降血糖组合物包括玉米须提取物5~20重量份;更优选包括5~18重量份;最优选包括5~13重量份。
本发明提供的降血糖组合物包括桑叶提取物3~15重量份;更优选包括3~12重量份;最优选包括3~9重量份。
本发明提供的降血糖组合物包括白芸豆提取物3~15重量份;最优选包括3~12重量份;最优选包括3~9重量份。
在本发明其中一部分优选实施方式中,包括如下重量份的原料:
在本发明其中一部分优选实施方式中,包括如下重量份的原料:
本发明上述组合物是整体的技术方案,上述组分在上述配比具有协同作用,使得最终的组合物具有良好的降血糖的效果。
本发明提供了一种任意一项所述的组合物的制备方法,包括如下步骤:
葛根提取物、壳寡糖、黄精提取物、玉米须提取物、桑叶提取物和白芸豆提取物混合,即得。
本发明对于具体的混合方法不进行限定,本领域技术人员熟知的即可。
本发明上述葛根提取物、黄精提取物、玉米须提取物、桑叶提取物和白芸豆提取物的来源不进行限定,本领域技术人员市售的即可。
本发明提供了上述任意一项所述的组合物在制备降血糖的产品中的应用。
本发明所述降血糖包括降低空腹血糖的水平、调节糖耐量水平或调节胰岛素抵抗水平。
本发明提供了上述任意一项所述的组合物在改善高血糖人健康状况的产品中的应用。
具体的,所述改善高血糖人健康状况包括升高抗氧化酶活性、降低脂质过氧化产物含量、恢复体重增长、减少摄食量、减少饮水量、抑制肝脏和肾脏病变。
本发明提供了一种降血糖的产品,包括上述技术方案任意一项所述的组合物。
按照本发明,所述降血糖的产品中组合物的剂量浓度为195~780mg/kg。
本发明提供了一种降血糖组合物,包括如下重量份的原料:葛根提取物 5~21份;壳寡糖 1~7份;黄精提取物 3~11份;玉米须提取物 5~20份;桑叶提取物 3~15份;白芸豆提取物 3~15份。本发明提供的上述组分和配比协同作用,使得最终的组合物具有良好的降血糖的效果。
为了进一步说明本发明,以下结合实施例对本发明提供的一种降血糖组合物、其制备方法和应用进行详细描述。
本发明实施例3、对比例1、对比例2和对比例3总量一致,仅仅是配比不同。
实施例1
1.细胞:巨噬细胞
2.试剂:DMEM高糖培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、MTT、二甲基亚砜、二甲双胍(分子量165.6)、葛根提取物(葛根素含量10%,陕西嘉禾)、壳寡糖(型号HS,上海诚一)。
3.耗材:培养皿(15CM)、96孔细胞培养板、针头过滤器(0.22μm)、10ml无菌移液管、离心管(50ml,15ml,1.5ml)、枪头(1ml,200μl,2μl)
4.仪器:无菌操作台、真空泵、培养箱、倒置显微镜、细胞计数仪、酶标仪
4.1.葛根提取物壳寡糖溶液配制
将葛根提取物与壳寡糖按照1:1比例混合得到混合物A,将葛根提取物与壳寡糖按照2:1例混合得到混合物B,将葛根提取物与壳寡糖按照3:1比例混合得到混合物C,称取2g混合物A、B、C分别溶解在40ml双蒸水中,使药品尽量充分溶解,然后无菌过膜,分别稀释至250μg/ml、100μg/ml、50μg/ml、10μg/ml、2μg/ml,放置4度冰箱,备用。阳性对照二甲双胍17μg/ml、1.7μg/ml、0.17μg/ml、0.017μg/ml,放置4度冰箱,备用。
4.2不同配方葛根和壳寡糖在系列浓度梯度条件下的细胞葡萄糖代谢对比
1)葛根提取物:壳寡糖=1:1的试验结果与阳性对照对比
结果如图3所示,图3为葛根提取物:壳寡糖=1:1的试验结果对比图;
在浓度达到50μg/ml时细胞的葡萄糖代谢量达到最大,浓度降低随之葡萄糖代谢量降低。
2)葛根提取物:壳寡糖=2:1的试验结果与阳性对照对比
结果如图4所示,图4为葛根提取物:壳寡糖=2:1的试验结果对比图;
在浓度达到10μg/ml时细胞的葡萄糖代谢量达到最大,浓度降低随之葡萄糖代谢量降低。
3)葛根提取物:壳寡糖=3:1的试验结果与阳性对照对比
结果如图5所示,图5为葛根提取物:壳寡糖=3:1的试验结果对比图;
在浓度达到10μg/ml时细胞的葡萄糖代谢量最高,但是在2μg/ml时也表现出较强的葡萄糖代谢促进率。总体在10μg/ml、2μg/ml时差异不大。
4)不同浓度二甲双胍对细胞葡萄糖代谢率影响
结果如图6所示,图6为不同浓度二甲双胍对细胞葡萄糖代谢率影响图;
二甲双胍浓度在0.17μg/ml时,细胞的葡萄糖代谢量最高。
4.3不同配方葛根提取物和壳寡糖在等浓度条件下与阳性对照的细胞葡萄糖代谢对比
1)不同配比原料在100μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比。结果如图7所示。图7为不同配比原料在100μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比图;
当不同配比原料在稀释至100μg/ml的条件下,葛根提取物与壳寡糖比例为1:1时,对葡萄糖的代谢量最大。
2)不同配比原料在50μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比。结果如图8所示,当不同配比原料在稀释至50μg/ml的条件下,葛根提取物与壳寡糖比例为1:1时,对葡萄糖的代谢量最大。
3)不同配比原料在10μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比。结果如图9所示,其中图9为不同配比原料在10μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比图;
分析:当不同配比原料在稀释至10μg/ml的条件下,葛根提取物与壳寡糖比例为2:1时,对葡萄糖的代谢量最大,且与葛根提取物:寡糖3:1的差异不明显。
4)不同配比原料在2μg/ml条件下,与二甲双胍浓度0.17μg/ml葡萄糖代谢量的对比。结果如图10所示,分析:当不同配比原料在稀释至2μg/ml的条件下,葛根提取物与壳寡糖比例为3:1时,对葡萄糖的代谢量最大。
实施例2
表1.
原料名称 | 添加量/g |
葛根提取物 | 0.6 |
壳寡糖 | 0.2 |
黄精提取物 | 0.3 |
玉米须提取物 | 0.5 |
桑叶提取物 | 0.3 |
白芸豆提取物 | 0.3 |
合计 | 2.2 |
复配降血糖配方(配方见表1)为混合物D,称取2g混合物D溶解在40ml双蒸水中,使药品尽量充分溶解,然后无菌过膜,设置降血糖配方0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml、10000μg/ml,6个浓度梯度进行毒性试验,结果如图1所示。由图1可以看出,实施例2浓度在10000μg/ml时,细胞致死率73.6%,浓度在1000μg/ml时,细胞致死率14.4%,当浓度在低于100μg/ml时,细胞致死率小于2%,考虑到MTT试验的系统误差性,可以认为当降血糖配方浓度低于100μg/ml后对细胞无毒害。
实施例3
当葛根提取物壳寡糖3:1配方浓度达在50μg/ml、10μg/ml、2μg/ml时细胞的葡萄糖代谢量表现明显,因此选定该浓度条件下对比复配降血糖配方与葛根提取物:壳寡糖=3:1配方的细胞降血糖效果。结果如图2所示,复配降血糖配方培养下的细胞葡萄糖代谢量在各个试验浓度条件下都要高于葛根提取物:壳寡糖=3:1配方,说明降血糖配方在促进细胞糖代谢降低血糖方面要优于葛根提取物:壳寡糖=3:1的组合。
实施例4
葛根提取物6份,壳寡糖2份,黄精提取物3份,玉米须提取物5份,桑叶提取物3份,白芸豆提取物3份。
在本实验中,发明人通过腹腔注射四氧嘧啶建立Ⅰ型糖尿病小鼠模型,采用实施例4对其进行3周的观察与治疗,通过观察并记录小鼠的体重、进食量、饮水量等发现实施例4可有效恢复糖尿病小鼠体重增长,减少糖尿病小鼠的摄食量和饮水量。同时探究了实施例4对Ⅰ型糖尿病小鼠的血糖、糖耐量和胰岛素耐量的影响及抗氧化应激作用。结果表明,实施 例4对外源性葡萄糖导致的血糖升高具有拮抗作用,具有良好的降血糖作用和增强机体对胰岛素的敏感性的作用。通过肝肾指数和氧化应激指标的检测,表明实施例4通过增加肝肾组织的抗氧化活性,减少氧化应激损伤,来恢复其生理功能。
对比例1
苦瓜提取物6份,壳寡糖2份,黄精提取物3份,玉米须提取物5份,桑叶提取物3份,白芸豆提取物3份。
对比例2
葛根提取物6份,壳寡糖2份,黄精提取物3份,桑叶提取物3份,白芸豆提取物3份。
对比例3
葛根提取物4份,壳寡糖4份,黄精提取物1份,玉米须提取物5份,桑叶提取物2份,白芸豆提取物2份。
验证例对Ⅰ型糖尿病小鼠的保护作用
糖尿病是由胰岛素作用抵抗或胰岛素分泌不足所引起的碳水化合物、脂肪、蛋白质代谢失调的综合征,并且患者体内长期伴随着高血糖和高血脂。随着全球经济的高速发展,不健康的生活方式也加速了糖尿病的蔓延,根据国际糖尿病联盟预测,到2045年糖尿病患者人数将增加至7亿,成为继心血管疾病和恶性肿瘤后的第三大世界公共卫生问题。早期在新诊断的Ⅰ型糖尿病患者中使用免疫抑制剂如环孢素等尝试阻断自身免疫过程并保存胰岛β细胞功能,但其长期使用会对机体产生不良反应。因此寻求对Ⅰ型糖尿病的有效且毒副作用少的药物成为研究的热点。
1)材料与方法
1.实验材料
1.1实验动物
健康雄性小鼠,6-8周龄,体重20g~25g。
1.2主要试剂及药物
1.2.1实验药物:盐酸二甲双胍片,购买于中美上海施贵宝制药有限公司;实施例4;配制方法:用纯化水配制成所需浓度的混悬液。
1.2.2主要试剂:试剂:四氧嘧啶(货号:A7413-10G),购买于美国sigma公司;牛胰岛素(货号:I8040),购买于北京索莱宝科技有限公司;葡萄糖;超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(货号:A001-3-2);丙二醛(MDA)检测试剂盒(货号:A003-1-2),购买于南京建成生物工程研究所。
1.3主要实验仪器:AS 110.R2型电子分析天平(波兰RADWAG公司);BGMS-1型血糖仪、血糖试纸(长沙三诺生物传感技术股份有限公司);3k15型低温高速离心机(德国sigma公司)。
2)实验方法
1.2Ⅰ型糖尿病模型小鼠的造模、分组与给药
小鼠适应性喂养3d后开始实验。造模前禁食(不禁水)12h,腹腔注射220mg/kg四氧嘧啶(生理盐水现配),以注射等量生理盐水为对照,注射后恢复进食,72h后尾尖取血测定空腹血糖值,血糖值高于11.1mmol/L的小鼠即为造模成功。
将模型小鼠随机分为模型组,阳性对照组(二甲双胍,260mg/kg,相当于人2g/d),实施例4低(195mg/kg,相当于人1.5g/d)、中(390mg/kg,相当于人3g/d)、高(780mg/kg,相当于人6g/d)剂量组,对比例1组(780mg/kg,相当于人6g/d),对比例2(780mg/kg,相当于人6g/d),对比例3(780mg/kg,相当于人6g/d)每组10只。另选10只正常小鼠作为正常组。各组小鼠均每日灌胃给药1次,连续给药3周。
2.2葡萄糖耐量实验(OGTT)
灌胃给药3周后,小鼠禁食不禁水12h,在0h尾尖取血测定血糖值,之后给小鼠灌胃葡萄糖(2g/kg),再于葡萄糖负荷后30min、60min、90min、120min取血,用试纸法测定血糖值,计算血糖曲线下面积(AUC),评价实施例1对Ⅰ型糖尿病模型小鼠糖耐量的影响。
2.3胰岛素耐量试验(ITT)
葡萄糖耐量实验结束后72h后禁食12h,进行胰岛素(0.5U/kg)耐量试验。对小鼠尾尖采血测定血糖作为0min的血糖值,然后每只小鼠腹腔注射胰岛素,并在给予胰岛素溶液30min、60min、90min、120min时测血糖值,计算血糖曲线下面积(AUC),观察各组小鼠在各时间点上的血糖变化情况。
2.4标本的采集及处理
每日观察各组小鼠行为状态,记录饮食量和摄水量,每周测一次小鼠体重和血糖水平。口服葡萄糖耐量实验及胰岛素耐量试验结束后,禁食12h小鼠称重,处死小鼠,低速离心机3500r/min离心15min分离血清备用。生理盐水洗净肝脏组织与肾脏组织,滤纸吸干后称重。
2.5指标测定
1)血清:超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)
2)脏器指数:分离肝脏和肾脏,称重,除以体重值再乘以100倍为脏体指数
2.6统计学方法
3)实验结果
3.1.基础指标
3.1.1实施例4对小鼠体重、饮食和饮水的影响
注:与空白组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与实施例1高剂量组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
注:与空白组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与实施例1高剂量组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
注:与空白组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与实施例4高剂量组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
由表1、2、3可知,造模成功。实施例4可以有效改善糖尿病小鼠“三多一少”的症状,且高剂量组改善效果明显。对比例1、2、3与实施例4高剂量比较,其效果远没有实施例4效果好。
3.1.2实施例3对小鼠血糖、糖耐量以及胰岛素耐量的影响
注:与空白组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与实施例4高剂量组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
由表4可知,造模成功后,3周空腹血糖结果说明,实施例4可以有效降低糖尿病小鼠空腹高血糖水平,且高剂量组改善效果明显。对比例1、2、3与实施例4高剂量比较,其降低空腹血糖的水平的效果远没有实施例4效果好。
注:与空白组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与实施例4高剂量组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
注:与空白组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与实施例4高剂量组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
通过以上实验结果可知,实施例4可以有效调节糖尿病小鼠的糖耐量水平和胰岛素抵抗水平,改善糖尿病小鼠高血糖状态,并且改善效果呈现剂量依赖性。对比例1、2、3也可以调节糖尿病小鼠的糖耐量水平和胰岛素抵抗水平,但是效果显著低于实施例4高剂量组。
3.1.3实施例4对小鼠肝脏以及肾脏的影响
注:与空白组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与实施例3高剂量组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
肝脏和肾脏指数结果说明实施例4可明显抑制糖尿病小鼠的肝脏和肾脏病变,并且对糖尿病小鼠肝脏与肾脏有保护作用,并且改善效果呈现剂量依赖性。对比例1、2、3抑制糖尿病小鼠的肝脏和肾脏病变能力显著低于实施例1高剂量组。
3.2.血液
3.2.1实施例4对糖尿病小鼠血清氧化应激的影响
注:与空白组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与实施例3高剂量组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01
实施例4对糖尿病小鼠有升高抗氧化酶活性的作用,降低脂质过氧化产物含量的作用,并且可以改善糖尿病导致的氧化应激失衡,具有提高机体的抗氧化功能。对比例1、2、3升高抗氧化酶活性的作用显著低于实施例4高剂量组。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
4.一种权利要求1~3任意一项所述的组合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
葛根提取物、壳寡糖、黄精提取物、玉米须提取物、桑叶提取物和白芸豆提取物混合,即得。
5.权利要求1~3任意一项所述的组合物在制备降血糖的产品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述降血糖包括降低空腹血糖的水平、调节糖耐量水平或调节胰岛素抵抗水平。
7.权利要求1~3任意一项所述的组合物在改善高血糖人健康状况的产品中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述改善高血糖人健康状况包括升高抗氧化酶活性、降低脂质过氧化产物含量、恢复体重增长、减少摄食量、减少饮水量、抑制肝脏和肾脏病变。
9.一种降血糖的产品,其特征在于,包括权利要求1~3任意一项所述的组合物。
10.根据权利要求7所述的产品,其特征在于,所述降血糖的产品中组合物的剂量浓度为195~780mg/kg。
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