CN116211950B - 一种治疗鼻炎的玉簪花中药组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种治疗鼻炎的玉簪花中药组合物，涉及中药组合物技术领域。本发明的中药组合物包括以下质量份配比的组分：玉簪花提取物3‑5份、诃子提取物2‑3份和茶皂甙0.05‑0.08份；并以该中药组合物为基础制备得到了玉簪花中药喷鼻剂，每100mL该药剂中含有玉簪花提取物3‑5g、诃子提取物2‑3g、茶皂甙0.05‑0.08g、丙二醇10‑20mL、注射用水余量。本发明仅采用玉簪花和诃子两味药材作为主要原料，制备得到的药剂既实现了优异的过敏性鼻炎治疗效果，又有效改善了中药治疗过敏性鼻炎所用药剂药味复杂的现状，为过敏性鼻炎的中药治疗提供了新的思路和研究方向。
Description
技术领域
本发明涉及中药组合物技术领域，特别是涉及一种治疗鼻炎的玉簪花中药组合物。
背景技术
鼻炎为鼻腔粘膜和粘膜下组织的炎症，表现为充血或水肿，主要症状为鼻塞、流涕(清水涕)、鼻痒、咳嗽等症状。过敏性鼻炎又称变应性鼻炎，是一种吸入外界过敏性抗原而引起的鼻腔粘膜的变应性疾病，以鼻痒、打嚏、流清涕为主要症状，并可引起并发症，可能合并中耳炎、鼻窦炎、哮喘等诸多疾病，严重危害人体健康，过敏性鼻炎患者在病程中还易出现身体疲惫、情绪激动、睡眠障碍等情况，严重影响人们的生活、工作。
近年来，过敏性鼻炎的发病率呈现明显的上升趋势，已经成为严重困扰患者的常见病，并且具有治疗效果差、易复发的特点。目前针对过敏性鼻炎的治疗主要采用脱敏、激素药物治疗以及免疫治疗等方法，短期疗效显著，但停药后极易复发，而脱敏药物、激素药物又极易产生副作用，不能长期使用以维持疗效。
中药治疗具有安全、毒副作用小的特点，过敏性鼻炎在中医学中属于“鼻鼽”范畴。“鼻鼽”出自《素问·脉解》，据《证治要诀》记载“清涕者，脑冷肺寒所致”。但目前中医药治疗针对过敏性鼻炎治疗虽然能够减轻症状，但由于中药组分极为复杂且作用机理不明确，治疗效果方面难以实现较好的改善。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗鼻炎的玉簪花中药组合物，以解决上述现有技术存在的问题，实现鼻炎优异的中药治疗效果。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
本发明目的之一：提供一种玉簪花中药组合物，包括以下质量份配比的组分：
玉簪花提取物3-5份、诃子提取物2-3份和茶皂甙0.05-0.08份；
所述玉簪花提取物的提取方法包括以下步骤：
将玉簪花在80-85℃的水(添加量为玉簪花质量的50-80倍)中浸提(时间为30-40min)，过滤，收集第一滤液，将所述第一滤液浓缩、干燥，得到所述玉簪花提取物；
所述诃子提取物的提取方法包括以下步骤：
将诃子加水煎煮，过滤，收集第二滤液，之后利用乙醇调节所述第二滤液醇度为25-28％，过滤，弃去沉淀，得到第三滤液；利用乙醇调节所述第三滤液含醇量为65-72％，过滤，收集沉淀并干燥，得到所述诃子提取物。
本发明目的之二：提供一种玉簪花中药喷鼻剂，每100mL药剂中含有玉簪花提取物3-5g、诃子提取物2-3g、茶皂甙0.05-0.08g、丙二醇10-20mL、注射用水余量；
所述玉簪花提取物的提取方法包括以下步骤：
将玉簪花在80-85℃的水(添加量为玉簪花质量的50-80倍)中浸提(时间为30-40min)，过滤，收集第一滤液，将所述第一滤液浓缩、干燥，得到所述玉簪花提取物；
所述诃子提取物的提取方法包括以下步骤：
将诃子加水煎煮，过滤，收集第二滤液，之后利用乙醇调节所述第二滤液醇度为25-28％，过滤，弃去沉淀，得到第三滤液；利用乙醇调节所述第三滤液含醇量为65-72％，过滤，收集沉淀并干燥，得到所述诃子提取物。
本发明上述干燥方式为冷冻干燥。
作为本发明的进一步优选，所述加水煎煮为文火煎煮，次数为两次：第一次加水量为诃子质量的13-15倍，煎煮时间为1.5-2h，第二次加水量为诃子质量的8-10倍，煎煮时间为1-1.5h。
本发明目的之三：提供上述玉簪花中药组合物或簪花中药喷鼻剂在治疗过敏性鼻炎中的应用。
本发明目的之四：提供上述玉簪花中药喷鼻剂的制备方法，包括以下步骤：
将所述玉簪花提取物、诃子提取物、茶皂甙、丙二醇与注射用水混合，即得所述玉簪花中药喷鼻剂。
茶皂甙是由茶树种子(茶籽、茶叶籽)中提取出来的一类糖苷化合物，是一种性能良好的天然表面活性剂，具有抗菌、抗病毒等功效，目前多用于制造乳化剂、洗洁剂、饲料添加剂等。
本发明对玉簪花和诃子中的有效物质进行提取，并首次在两种药味复配的基础上添加少量的茶皂甙，从而在极少药味的基础上赋予了喷鼻剂优异的治疗效果。
本发明公开了以下技术效果：
本发明仅采用玉簪花和诃子两味药材作为主要原料，制备得到的药剂既实现了优异的过敏性鼻炎治疗效果，又有效改善了中药治疗过敏性鼻炎时，所用药剂药味复杂的现状，为过敏性鼻炎的中药治疗提供了新的思路和研究方向。
本发明制备方法简单、适宜大规模工业化生产，对于推动鼻炎的中药治疗具有重要的积极意义。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明中药组合物(实施例1)对LPS诱导的RAW264.7细胞Nitrite释放量的影响。
图2为本发明中药组合物(实施例1)对LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α分泌的影响。
图3为本发明中药组合物(实施例1)对LPS诱导的RAW264.7细胞IL-6分泌的影响。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明中所述的份数，如无特别说明，均为质量份数。
实施例1制备治疗鼻炎的玉簪花中药喷鼻剂
(1)玉簪花提取物的制备：
将玉簪花粉碎，过200目筛，加入60倍的水中，在85℃条件下浸提45min，过滤，收集滤液，浓缩、干燥，得到玉簪花提取物。
(2)诃子提取物的制备：
将诃子粉碎加水煎煮提取两次，第一次提取加水量为诃子质量的15倍，文火煎煮，时间为2h；第二次提取加水量为诃子质量的10倍，文火煎煮，时间为1.5h；煎煮完成后过滤，收集滤液，向滤液中加入乙醇醇沉，调节醇度为25％，静置，离心，弃去沉淀；继续加无水乙醇至含醇量达70％，静置24h，抽滤，得到沉淀，干燥，得到诃子提取物。
(3)玉簪花中药喷鼻剂的制备：
a.将玉簪花提取物4g、诃子提取物2g和茶皂甙0.06g混合，得到中药组合物；
b.将得到的中药组合物与15mL丙二醇混合，采用注射用水加至100mL，得到玉簪花中药喷鼻剂。
实施例2制备治疗鼻炎的玉簪花中药喷鼻剂
(1)玉簪花提取物的制备：
将玉簪花粉碎，过200目筛，加入50倍的水中，在80℃条件下浸提40min，过滤，收集滤液，浓缩、干燥，得到玉簪花提取物。
(2)诃子提取物的制备：
将诃子粉碎加水煎煮提取两次，第一次提取加水量为诃子质量的13倍，文火煎煮，时间为1.5h；第二次提取加水量为诃子质量的8倍，文火煎煮，时间为1.5h；煎煮完成后过滤，收集滤液，向滤液中加入乙醇醇沉，调节醇度为28％，静置，离心，弃去沉淀；继续加无水乙醇至含醇量达65％，静置24h，抽滤，得到沉淀，干燥，得到诃子提取物。
(3)玉簪花中药喷鼻剂的制备：
a.将玉簪花提取物3g、诃子提取物3g和茶皂甙0.08g混合，得到中药组合物；
b.将得到的中药组合物与20mL丙二醇混合，采用注射用水加至100mL，得到玉簪花中药喷鼻剂。
实施例3制备治疗鼻炎的玉簪花中药喷鼻剂
(1)玉簪花提取物的制备：
将玉簪花粉碎，过200目筛，加入80倍的水中，在85℃条件下浸提30min，过滤，收集滤液，浓缩、干燥，得到玉簪花提取物。
(2)诃子提取物的制备：
将诃子粉碎加水煎煮提取两次，第一次提取加水量为诃子质量的15倍，文火煎煮，时间为1.5h；第二次提取加水量为诃子质量的8倍，文火煎煮，时间为1h；煎煮完成后过滤，收集滤液，向滤液中加入乙醇醇沉，调节醇度为25％，静置，离心，弃去沉淀；继续加无水乙醇至含醇量达72％，静置24h，抽滤，得到沉淀，干燥，得到诃子提取物。
(3)玉簪花中药喷鼻剂的制备：
a.将玉簪花提取物5g、诃子提取物2g和茶皂甙0.05g混合，得到中药组合物；
b.将得到的中药组合物与15mL丙二醇混合，采用注射用水加至100mL，得到玉簪花中药喷鼻剂。
对比例1
与实施例1不同之处在于，不添加茶皂苷。
对比例2
与实施例1不同之处在于，不添加茶皂苷和诃子提取物，仅采用玉簪花提取物单一组分；每100mL药剂中玉簪花提取物的含量为6.06g。
对比例3
与实施例1不同之处在于，不添加茶皂苷和玉簪花提取物，仅采用诃子提取物单一组分；每100mL药剂中诃子提取物的含量为6.06g。
效果验证例1
(1)药物配制
取实施例1制备的中药组合物适量，精密称定，加入一定量的DMSO完全溶解，配制成1mg·mL-1的储备液，过0.22μm的滤膜后备用；
精密称取LPS加入无菌超纯水，配制为1mg·mL-1的溶液，涡旋10分钟使溶解，过0.22μm的滤膜后分装，保存在-80℃备用；
实验前各药液用细胞培养基稀释至所需的浓度。
细胞培养与传代：将冻存的细胞(小鼠RAW264.7巨噬细胞)取出，迅速放置37℃水浴锅中解冻，加入2mL含10％胎牛血清、100U·mL-1青霉素和100μg·mL-1链霉素的DMEM高糖培养基，吹打均匀，重悬细胞，600r·min-1离心4分钟。弃去上清液，加入培养基1mL并轻轻吹打均匀，转移至培养瓶中，另加入4mL培养基，十字交叉法摇匀，置于5％ CO2、37℃条件的培养箱中培养。待细胞80％～90％融合时，弃去培养液，用PBS清洗2次，每次2mL，加入0.25％胰酶，37℃条件下消化3分钟，待细胞变圆，轻敲底部，使细胞松动脱落，加入2mL培养基终止消化，将细胞转移至10mL离心管中，重悬细胞，600r·min-1离心4分钟，弃去上清液，按1:1～1:3传代分装，继续培养，每隔2天传代1次。后续实验均在细胞对数生长期进行。
(2)Griess试剂测定细胞上清液中亚硝酸盐(Nitrite)水平
实验中细胞产生的一氧化氮(NO)在水溶液极易被氧化成亚硝酸根阴离子(NO2–)，NO2–与Griess试剂中的对氨基苯磺酸反应生成对重氮苯磺酸，重氮苯磺酸进一步与Griess试剂中的α–萘胺结合生成N-α–萘胺偶氮苯磺酸(呈红色)，该产物在540nm处有最大吸收峰，且与NO2–具有浓度线性关系，因此本发明采用Griess试剂测定细胞上清液中亚硝酸盐(Nitrite)水平。
按照细胞传代的方法处理和收集状态良好、处于对数生长期的细胞，按照细胞计数方法进行计数，用10％ DMEM培养基配制成2×105个/mL浓度的单细胞悬液，24孔板每孔接种500μL，置37℃，5％ CO2培养箱孵育14h，设置正常对照组(不加药也不加LPS)、模型组(加LPS)和药物治疗组(加不同浓度药物和LPS)。将培养孔中旧培养液弃去，正常对照组和模型组均加入1％ DMEM培养基500μL，药物治疗组加入不同终浓度药物500μL，预培养作用1h后，在模型组和药物治疗组中加入终浓度1μg·mL-1的LPS诱导剂，诱导18h后，收集各组细胞上清液，分别吸取50μL至96孔检测板中，每组3个复孔，按1∶1的比例Griess试剂50μL，37℃避光孵育30min，于540nm处测定OD值。
图1为Griess试剂检测细胞上清液中Nitrite的含量结果。
正常状态下细胞释放的Nitrite含量比较低，在加入LPS作用于RAW264.7细胞18h后的模型组细胞上清液中，Nitrite的含量增加显著，基于本发明中药组合物处理后，相较于模型组，显著降低了LPS诱导的RAW264.7细胞中Nitrite的释放量。
(3)ELISA双抗体夹心法测定细胞炎性因子TNF-α、IL-6含量
将一定量已知的抗体吸附固定于微孔板表面，洗涤一次，加入待测标本，使标本中的抗原与孔板表面抗体发生特异性结合，然后把多余抗原洗去，加入与待测抗原呈特异反应的酶标记第二抗体，使形成“夹心”，加入该酶的底物后用TMB底物显色，微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈正相关，通过测定最大吸收波长处(450nm)OD值，即可计算出待测标本中的抗原含量。本发明测定细胞上清液中TNF-α、IL-6含量使用的ELISA试剂盒由深圳欣博盛公司生产。
采用ELISA法测定细胞上清液中TNF-α、IL-6的含量，结果如图2-3所示。相较于对照组，LPS的诱导均显著性增加了RAW264.7细胞TNF-α、IL-6的分泌释放量；相较于LPS模型组，经本发明制备的中药组合物预处理后可显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞对TNF-α、IL-6的释放量，且具有一定的剂量相关性。表明本发明的中药组合物能抑制LPS诱导的RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-6。
效果验证例2
(1)实验动物：选取健康状况良好、体重100g±5g的大鼠160只，雌雄各半。
(2)卵白蛋白OVA致敏法造模：取上述大鼠140只，于大鼠腹腔注射1mLOVA悬液(含0.9％氯化钠，20mgOVA，30mg氢氧化铝)，之后隔日注射1次，注射8次后实现基础致敏；完成第8次注射后的次日，将10％的OVA生理盐水滴入大鼠两鼻孔，每侧50μL，每天1次，连续10天实现过敏性鼻炎的激发，完成造模。
(3)动物分组：造模完成后，将造模处理后大鼠随机分为7组，分别计为模型组、实验组1、实验组2、实验组3、对照组1、对照组2、对照组3，每组各20只；剩余未经造模处理的20只大鼠作为正常组。
(4)治疗方法：
正常组和模型组：采用生理盐水滴鼻(以移液枪滴加在大鼠两侧鼻孔)，各组给药40μL，1次/日；
实验组1-3：分别对应使用实施例1-3的喷鼻剂(以移液枪滴加在大鼠两侧鼻孔)，各组给药40μL，1次/日；
对照组1-3：分别对应使用对比例1-3的喷鼻剂(以移液枪滴加在大鼠两侧鼻孔)，各组给药40μL，1次/日；
(5)血清IgE含量检测
治疗2周后，将实验大鼠麻醉后进行腹腔动脉取血，分离血清，检测血清IgE含量。结果见表1。
表1
| IgE | |
| 正常组 | 0.381±0.79 |
| 模型组 | 1.164±0.84 |
| 实验组1 | 0.442±0.72 |
| 实验组2 | 0.451±0.82 |
| 实验组3 | 0.448±0.59 |
| 对照组1 | 0.689±0.62 |
| 对照组2 | 0.614±0.71 |
| 对照组3 | 0.712±0.55 |
表1结果表明，本发明中药喷鼻剂能有效降低过敏主要介质IgE。
效果验证例3
(1)实验分组：将年龄在15-66岁的过敏性鼻炎患者(病程为1-3年)随机分为4组，分别为治疗组1、治疗组2、治疗组3以及阳性对照组，每组50人，各组患者的年龄、病程及严重程度方面没有显著差异。
(2)临床治疗
治疗组1-3：分别对应使用本发明实施例1-3的中药喷鼻剂进行治疗；
阳性对照组：采用曲安奈德鼻喷雾剂进行治疗。
治疗组1-3和阳性对照组患者喷鼻3次/天(早中晚各一次)，2喷/每个鼻孔。治疗疗程为2周。
(3)评价标准
参照《变应性鼻炎的诊治原则和推荐方案(2004年，兰州)》进行疗效评价。
治愈：症状完全消失，症状评分为0分；
显效：症状评分减少≥65％；
有效：症状评分减少在26％～65％；
无效：症状评分减少≤25％。
(4)临床效果
各组治疗情况见表2。
表2
| 治愈(人) | 显效(人) | 有效(人) | 无效(人) | 总有效率(％) | |
| 治疗组1 | 38 | 11 | 1 | 0 | 100 |
| 治疗组2 | 37 | 10 | 1 | 1 | 98 |
| 治疗组3 | 35 | 11 | 3 | 1 | 98 |
| 阳性对照组 | 30 | 13 | 5 | 2 | 96 |
表2结果显示，本发明中药喷鼻剂的有效率高，并且治愈率高，治疗过敏性鼻炎的效果显著。治疗期间，各组患者均未出现皮肤过敏等任何不良反应，治疗过程安全有效。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。
Claims (5)
1.一种用于治疗鼻炎的玉簪花中药组合物，其特征在于，由以下质量份配比的组分制成：
玉簪花提取物3-5份、诃子提取物2-3份和茶皂甙0.05-0.08份；
所述玉簪花提取物的提取方法包括以下步骤：
将玉簪花在80-85℃的水中浸提，过滤，收集第一滤液，将所述第一滤液浓缩、干燥，得到所述玉簪花提取物；
所述诃子提取物的提取方法包括以下步骤：
将诃子加水煎煮，过滤，收集第二滤液，之后利用乙醇调节所述第二滤液醇度为25-28%，过滤，弃去沉淀，得到第三滤液；利用乙醇调节所述第三滤液含醇量为65-72％，过滤，收集沉淀并干燥，得到所述诃子提取物。
2.一种用于治疗鼻炎的玉簪花中药喷鼻剂，其特征在于，每100mL药剂中含有玉簪花提取物3-5g、诃子提取物2-3g、茶皂甙0.05-0.08g、丙二醇10-20mL、注射用水余量；
所述玉簪花提取物的提取方法包括以下步骤：
将玉簪花在80-85℃的水中浸提，过滤，收集第一滤液，将所述第一滤液浓缩、干燥，得到所述玉簪花提取物；
所述诃子提取物的提取方法包括以下步骤：
将诃子加水煎煮，过滤，收集第二滤液，之后利用乙醇调节所述第二滤液醇度为25-28%，过滤，弃去沉淀，得到第三滤液；利用乙醇调节所述第三滤液含醇量为65-72％，过滤，收集沉淀并干燥，得到所述诃子提取物。
3.根据权利要求1所述的用于治疗鼻炎的玉簪花中药组合物或权利要求2所述的用于治疗鼻炎的玉簪花中药喷鼻剂，其特征在于，所述加水煎煮为文火煎煮，次数为两次：第一次加水量为诃子质量的13-15倍，煎煮时间为1.5-2h，第二次加水量为诃子质量的8-10倍，煎煮时间为1-1.5h。
4.如权利要求1所述的用于治疗鼻炎的玉簪花中药组合物或权利要求2所述的用于治疗鼻炎的玉簪花中药喷鼻剂在制备治疗过敏性鼻炎药物中的应用。
5.如权利要求2所述的用于治疗鼻炎的玉簪花中药喷鼻剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将所述玉簪花提取物、诃子提取物、茶皂甙、丙二醇与注射用水混合，即得所述用于治疗鼻炎的玉簪花中药喷鼻剂。
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